Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Условия повышения эффективности оздоровления семенного картофеля

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Донец, Николай Васильевич

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ ОСВОБОМЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ„ОТ ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ МЕТОДОМ МЬТУРЫ АПИКАЛЬНОМ МЕРИСТЕМЫ

1.1. Состав питательной среды

1.2. Температура

1.3. Размер эксплантанта

1.4. Свет

1.5. Сортовые особенности

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Условия повышения эффективности оздоровления семенного картофеля"

Основная задача стоящая перед агропромышленным комплексом -надежное снабжение страны продовольствием и сельскохозяйственным сырьем. Выполнение этой задачи обеспечивается дальнейшей специализацией сельскохозяйственного производства, повышением уровня мелиорации и механизации, внедрением в производство интенсивных сортов сельскохозяйственных культур. Важнейшишфакторами, ускоряющими научно-технический прогресс в сельскохозяйственном производстве, являются также научно обоснованная система семеноводства и защита растений.

Указывая на большое значение правильной системы семеноводства, Л.И.Брежнев подчеркцул: " . хорошо, по - современное организованное семеноводство может повысить урожайность по меньшей мере на 20 процентов. А это дополнительные десятки миллионов тонн зерна и другой сельскохозяйственной продукции" (Брежнев, 1976 а).

В результате проведения мероприятий по защите растений от вредных организмов в нашей стране ежегодно сохраняется сельскохозяйственной продукции на 7 миллиардов рублей (Фадеев, Новожилов, 1979).

Благодаря дальнейшему улучшению семеноводства и защиты растений можно реализовать огромные резервы в повышении производительности многих отраслей сельского хозяйства, в том числе и картофелеводства, как одной из важнейших его отраслей.

Наша партия наряду с зерновой проблемой всегда уделяла большое внимание увеличению производства и других продуктов земледелия.Среди них картофель занимает особое место. В народе его исстари называют вторым хлебом. Картофель - это ценная продо воль ст ве иная, техническая и кормовая культура" - отметил Генеральный секретарь ЦК КПСС товарищ Л.И.Брежнев (Брежнев, 1976,6).

ХХУ1 съезд КПСС поставил задачу - добиться дальнейшего увеличения производства, расширения ассортимента и повышения качества картофеля, а также улучшить его сохранность и резко сократить потери.

Выполнение этой задачи должно осуществляться за счет дальнейшей интенсификации отрасли.

Как свидетельствует опыт, накопленный в нашей стране, переход на безвирусное семеноводство картофеля обеспечит реализацию больших потенциальных возможностей повышения урожайности, улучшения качества и снежвнии потерь товарного картофеля. Так, в опытах, проведенных сотрудниками НИИ картофельного хозяйства МСХ РСФСР установлено, что элита, полученная на безвирусной основе, превышала по урожайности на 26,3% аналогичный материал, полученный на основе визуального отбора (Трофимец, 1981). В опытах было также доказано, что посадочный материал, полученный на безвирусной основе, обладает высокими потенциальными возможностями. Так, при внесении повышенных доз удобрений и поддержании влажности, близкой к оптимальной, урожай клубней от безвирусной элиты составил 647 ц/га.

В условиях Украины установлено, что растения картофеля, освобожденные от вирусной инфекции, характеризуются более интенсивным фотосинтезом и повышенным уровнем поглощения элементов минерального питания. Эти и другие преимущества обеспечили увеличение урожайности безвирусной элиты в 1,4-1,7 раза по сравнению с урожайностью сорта до оздоровления (Витенко и др., 1977). Подобные результаты получены и другими отечественными и зарубежными учеными (Кучумов, Анисимов, 1974, Трофимец и др. 1978, б).

Актуальность темы. В процессе выращивания картофеля, в силу вегетативного размножения и широкой распространенности патогенов, происходит накопление от репродукции к репродукции вирусных, грибных и бактериальных болезней. Это обусловливает снижение урожайности и ухудшение качества клубней.

Безусловно, наиболее перспективным путем борьбы с потерями картофеля является возделывание сортов, обладающих комплексной устойчивостыо к вредителям и болезням. В настоящее время производство ощущает острую потребность в таких сортах. Снизить ущерб, причиняемый вреднши патогенами, помогает семеноводство - самостоятельная отрасль, преследующая цель получения и массового размножения здоровых семенных клубней с сохранением их сортовой чистоты.

Высококачественный семенной картофель можно получить только при условии правильного проведения комплекса мероприятий по борьбе с возбудителями болезней. Один из наиболее важных этапов в решении этой задачи - получение исходного без вирусного материала для выращивания элиты картофеля. Качество семенного картофеля во многом определяется уровнем совершенства методов получения оздоровленного материала.

В настоящее время наибольшее распространение получил метод культуры апикальной меристемы, отличающийся надежностью и экономичностью (Трофимец, 1980; Хромова, 1979). Благодаря использованию этого метода удалось освободить от вирусов большое количество сортов как в нашей стране (Кучумов, Князев, 1980), так и во многих зарубежных странах: Англии (Kassanis, Varma, 1967 )» Франции (Morel, Martin, 1955; Nozeran, 1977); Нвдерлаццах (Тринченко, 1971, Quak, 1977), Японии (Anonim, 1962), Канаде (Mellor, Stace

-Smith, 1969), ГДР (Pett, 1974) , ФРГ (Huth, Bode, 1970), Польше (Gabriel et al., 1972), Финляндии (Tapio, 1972), Австралии (Thomson, 1958), Чехословакии (sip, 1971), Италии (Gregorini, Lorenzi, 1974).

Важно также, что в процессе культивирования меристем, наряду с освобождением от вирусов происходит освобождение от грибной и бактериальной инфекции, в том числе от черной ножки и кольцевой гнили (Червонюк, Шнейдер, Трофимец, 1980).

Однако, несмотря на ряд существенных усовершенствований, этот метод остается все еще довольно трудоёмким. Процесс получения меристем требует большого напряжения сил и может быть выполнен только высококвалифицированными специалистами. К тому же получение безвирусных растений по ряду сортов - процесс довольно длительный и не всегда удачный.

Широкое внедрение в практику семеноводства материала, оздоровленного методом культуры ткани, обусловливает необходимость дальнейшего повышения эффективности способов его получения, а также изучения влияния оздоровления на устойчивость исходного материала к наиболее опасным патогенам.

В связи с этим актуальность наших исследований определяется:

I.Острой потребностью семеноводства страны в оздоровленном семенном материале;

2.Широким использованием в процессе оздоровления методов культуры растений, тканей, органов и необходимостью повышения их эффективности;

3.Недостатком сведений о влиянии оздоровления с применением культуры ткани на устойчивость исходного материала к вирусным, грибным и бактериальным болезням.

Цели и задачи исследовнний. Исследования выполнены в соответствии с заданиями тематического плана НИИКХ:

02.03.01. Изучить эффективность питательных сред, различающихся по составу и концентрации регуляторов роста (кинетин, ИУК, ИМК, НУК и др.), при оздоровлении картофеля методом верхушечной меристемы;

0.51 Л7.03.НЗ. Изучить патогенез и биологические основы взаимоотношения между возбудителями вирусных, грибных и бактериальных болезней, № гос. регистрации 81 096 119.

При выполнении работы мы преследовали две основные цели:

X.Поиск условий, обеспечивающих получение оздоровленных растений картофеля при минимальных затратах времени, труда и средств;

Г!. Изучение влияния s - вируса на устойчивость картофеля к вирусным, грибным и бактериальным болезням.

В ходе исследований решали следующие задачи:

-определить условия, способствующие улучшению роста и развития регенерантов из апикальных меристем картофеля; определить условия, способствующие повышению коэффициента размножения пробирочных растений при черенковании;

- провести сравнительное изучение устойчивости зараженного s -вирусом и оздоровленного картофеля к вирусным, грибным и бактериальным болезням.

Научная новизна в том, что: а) установлено, что лазерная обработка ростков картофеля способствует улучшению роста и развития апикальных меристем на искусственных питательных средах; б)изучено влияние основных компонентов питательных сред на способность апикальной меристемы регенерировать растения и на основании этих исследований разработана и внедрена питательная среда, обеспечивающая высокий выход растений - регенерантов за короткий срок; в) определена оптимальная интенсивность света для пробирочных растений и регенерантов; г) проведено сравнительное изучение устойчивости зараженного s - вирусом и оздоровленного картофеля к вирусным, грибным и бактериальным болезням и, на основании этих исследований, определена экономическая эффективность оздоровления от S -вируса. Практическая ценность работы. Рекомендованы и внедрены в первичное семеноводство в трех научно-исследовательских институтах прописи питательных сред для культуры апикальных меристем и ускоренного размножения пробирочных растений методом черенкования.

Рекомендовано предварительное облучение ростков когерентным монохроматическим светом с длиной волны 630 нм или 488 нм с целью улучшения роста и развития эксплантантов.

Установлено, что оптимальная интенсивность освещения эксплантантов и пробирочных растений белым светом люминесцентных ламп составляет 8 тыс. лк.

Рекомендовано введение в питательную среду активированного угля в дозе 10 г/л с целью увеличения регенерационной способности изолированных меристем и коэффициента размножения пробирочных растений картофеля.

Определен размер эксплантанта, обеспечивающий эффективное освобождение картофеля от вируса скручивания листьев и на основании этого указано на отсутствие необходимости диагностировать на наличие этого патогена растения - регенеранты, освобожденные от s или М - вирусов.

Доказано, что освобождение картофеля от S -вируса не снижает устойчивость растений к вирусам X, М, У, вирусу скручивания листьев и фитофторозу, а также клубней к ризоктониозу, обыкновенной парше, сухой и мокрой гнили и заметно повышает устойчивость клубней к серебристой парше. Рекомендовано выращивать картофель на основе материала, освобожденного от S -вируса т.к. это обусловливает увеличение товарного урожая и высокую экономическую эффективность .

В процессе выполнения работы оздоровлено методом культуры апикальной меристемы четыре сорта: Бирюза, Кристалл, Волжанин, Эрис-тон и три перспективных гибрида картофеля. Материал размножен и передан в первичное семеноводство НШКХ, НИИСХ ЦРНЗ и ЗХ "Большевик" ВИР.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА I

ФАКГОШ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ ОСВОБОЖДЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ ОТ ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ АПИКАЛЬНОЙ

МЕРИСТЕМЫ

В наше время культура растительных тканей и органов в искусственных условиях не только нашла применение в теоретических исследованиях, но и получила широкое практическое применение. В литературе часто появляются сообщения об использовании культуры растительных тканей и органов для сохранения, международного обмена и интенсивного размножения ценных образцов растений, для получения межвидовых и межродовых генеративных и соматических гибридов, гаплоидных и гомозиготных линий, для увеличения генетической вариабельности и проведения селекции на клеточном уровне (Бутенко, 1969; Бутен-ко, 1975; Верменко, 1980; Лейке и др., 1980; Трофимец и др., 1978а).

Вместе с тем самые большие практические успехи достигнуты при использовании культуры апикальной меристемы с целью получения растений, свободных от патогенов (Трофимец и др., 1978 a; Emilsson, 1970; Kassanis, 1957; Morel, Martin, 1955; Quak, 1977; Roca et al., 1979).

При изучении литературы по культуре ткани вообще и по освобождению растений картофеля от вирусных болезней методом культуры апикальной меристемы, в частности, не трудно заметить, что успех в работе в значительной степени зависит от ряда факторов, среди которых первостепенное значение имеют состав питательной среды, температура, размер эксплантанта и интенсивность освещения.

I.I. Состав питательной среды.

Первые попытки культивирования растительных клеток и тканей предприняты в начале нашего века Г.Хаберландтом (цит. по Бутенко, 1964).

Однако исследователь потерпел неудачу из-за несоответствия используемой питательной среды требованиям культуры.

Первые успехи в этом направлении были получены 30 лет спустя Ф.Уайтом и Р.Готре при культивировании изолированных корней томатов и других растений (wbite, 1934) » а также камбиальных тканей ( Gontheret, 1932) на искусственных питательных средах, в основе которых был раствор Кнопа. Однако, такие среды были слишком примитивными и цультура изолированных корней картофеля не выдерживала более двух пассажей (white, 1934). В 1948 г. Ж.Морель (Morel, 1948) сообщил, что ему удалось культивировать апикальную меристему картофеля на специально составленной питательной среде.

Широкое использование метода культуры апикальной меристемы началось после того, как Ж.Морель и С.Мартин, основываясь на исследованиях Ф.Холмса (Holmes, 1946), а также П.Лимассета и П.Корнуэта (Limasset, Cornuet, 1949) показавших, что симптомы болезни ослабляются и концентрация вируса снижается по мере приближения к конусу нарастания, предположили, что точка роста может быть свободной от вирусов. Для проверки этого предположения они высадили на питательную среду меристемные верхушки георгин и получили проростки длиной 1-2 см. Так как на этой среде проростки не укоренялись, их привили на здоровые растения. Проверка показала, что привитые растения свободны от вирусов (Morel, Martin, 1952).

Оригинальную работу по освобождению картофеля от X - вируса провел Д.Норис (Norris, 1953).Сочетая обработку стерильных растений малахитовым зеленым с последующим культивированием 0,5 см верхушек на среде Ф.Уайта, ему удалось получить одно растение, свободное от Х-вируса методом культуры верхушечной меристемы. Это была первая удачная попытка освобождения картофеля от Х-вируса, а также первая работа, посвященная сочетанию химиотерапии и нультуры ткани. Забегая несколько вперед, отметим, что некоторые авторы получили отрицательные результаты при попытке освободить растения картофеля от вирусов, сочетая химиотерапию с культурой апикальной меристемы (Manzer et al.,I959; Tomson, 1956). В то же время многие авторы подтвердили повышение эффективности оздоровления растений от болезней в случае сочетания химиотерапии и культуры тканей (Я£ук и др., 1975; Anand, Ganguli, 1964; Kassanis, Tinsley, 1958; Kutsky, Rawlins , 1950; Quak, 1961).

Основное препятствие в работе по сочетанию химиотерапии с культурой ткани в том, что еще не найден высокоэффективный антивирусный препарат, способный блокировать размножение вируса, не повреждая растения (Мэтьюз, 1973). Изученные вещества или нарушали жизнедеятельность растений или проявляли низкое антивирусное действие (Бобырь, 1976). Вместе с тем, некоторые ингибиторы вирусов в сочетании с культурой верхушечных меристем, способствуют освобождению растений от вирусных болезней. Однако это влияние еще недостаточно эффективно и не вполне выяснено (Гольдин и др., 1969; Трофимец и др., 1978 а).

Специальные исследования, проведенные Л.Н.Трофинец с сотрудниками (1978а) показали, что многие компоненты, входящие в состав питательных сред, являются ингибиторами вирусов. Можно допустить, что при освобождении от вирусов методами культуры ткани исследователи непроизвольно подвергают материал химиотералевтическому воздействию.

В 1954 г. Д.Норис (Norris, 1954)сообщил о новом успехе в освобождении от Х-вируса методом культуры апикальной меристемы. Культивируя 40 апикальных меристем величиной 200 мк на среде Ф.Уайта, содержащей I мг/л НУК, он поучил проростки, при укоренении которых на среде, содержащей 2,4-Д сформировалось 29 растений. Тщательная диагностика выявила среди них одно растение, свободное от вирусов.

Уже в то время исследователи пришли к выводу, что основной причиной неудач при освобождении растений от вирусов методом культуры апикальной меристемы является несовершенство состава питательной среды (Manzer, 1959).

Большая заслуга в совершенствовании состава питательной среды принадлежит Р.Хеллеру (Heller, 1953). Предложенный им набор микроэлементов положен в основу большинства питательных сред для культуры растительных тканей. Подчеркивая значение микроэлементов для культуры тканей, Р.Хеллер отметил, что исключение микроэлементов из питательной среды уменьшает интенсивность роста ткани на 40% в первом пассаже и приводит к полной гибели на протяжении двух последующих.

Для повышения приживаемости и скорости роста апикальных меристем различные авторы добавляли в питательную среду аминокислоты, витамины, ячменный солод, кокосовое молоко, дрожжевой экстракт и т.д. (Aadycco,i968; Morel, Martin, 1953). Безусловно, обогащение питательной среды витаминами и аминокислотами было целесообразным, так как большинство растительных тканей хотя и синтезируют витамины и аминокислоты, но этот синтез идет в субоптимальных количествах (Czosnowski, 1952). Однако ряд веществ неопределенного состава,как ячменный солод, кокосовое молоко и дрожжевой экстракт, хотя и оказывали определенное положительное действие на рост ткани в искусственных условиях, но в силу непостоянства состава, действия и активности вконец запутывали картину взаимодействия питательной среды и культивируемой ткани. По этой причине исследователи вскоре перестали включать эти вещества в состав питательных сред.

В своей практической работе Ж.Морель случайно заметил, что повышение концентрации ионов калия в питательной среде увеличивает автономность и интенсивность роста эксплантантов (Morel, 1957)• Отмеченный эффект был особенно заметным в случае сочетания повышенных концентраций в питательной среде ионов калия и аммония (Morel, 1964; Morel, Muller, 1964).

Результаты этих работ подтвердили также другие исследователи (Brawn, Wood, 1962; Goodwin, 1966; Houten et al., 1968).

Дальнейшую оптимизацию состава минеральной основы питательной среды осуществили Мурасиге и Скуг (Muraschige, Scoog, 1962). По мнению большинства отечественных (Крылова, Казачкова, 1976; Розен-берг, 1975; Трофимец, 1975; Трофимец и др., 1978 а, Хромова, 1979) и зарубежных (Лейке и др., 1980, Pennazio et al., 1979; Tapio , 1972 ) исследователей, минеральная основа в прописи этих авторов наиболее полно удовлетворяет потребность апикальных меристем картофеля в элементах питания.

Оптимизация минеральной части питательной среды подготовила почву для следующего шага по пути совершенствования условий выращивания. Ж.Морель установил (Морель, 1967; Morel, Mulier, 1964 ), что гибберелловая кислота значительно улучшает процесс формирования растений из апикальных меристем, причем это действие проявлялось только' на фоне высокого содержания ионов калия и аммония в питательной среде (Morel, I964-).

Это нашло подтверждение в работах других авторов, которые не только отметили положительное влияние гиббереллина на процесс регенерации растений из апикальных меристем (Oshima, Livengston, 1963; Temaszewski, Kubik, 1968 ) , но и показали, что он, воздействуя на деление и рост клеток (Clowes, 1961) способствует увеличению стеблевой части эксплантантов за счет растяжения периферической меристемы (Bald, I960; Houten et al., 1968).

Большая работа по оптимизации состава питательной среды проведена в Советском Союзе. Коллектив лаборатории культуры тканей Института физиологии АН СССР оказал неоценимое содействие распространению метода культуры тканей в нашей стране. В стенах Института прошли подготовку Н.В.Агоева, Л.Г.Брегетова, И.П.Дук, Г.Н.Винклер, Н.И.Щел-кунова и многие другие специалисты, внесшие большой вклад в развитие метода культуры тканей.

Монография руководителя этой лаборатории Р.Г.Бутенко "Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза" (Бутенко, 1964) стала учебником и настольной книгой каждого специалиста по культуре тканей. Благодаря непосредственному участию Р.Г.Бутенко начата работа по оптимизации состава питательной среды в НИИКХ (Винклер и др., 1971; Диба и др. 1972; Диба и др. 1973).

При этом установлено, что обогащение питательной среды феруловой, нафтилуксусной и гибберелловой кислотой, а также кинетином способствует получению безвирусных растений из апикальных меристем. В дальнейшем эта работа была продолжена в отделе оздоровления и вирусологии НИИКХ под руководством Л.Н.Трофимца. В итоге многолетней работы подобрана модификация питательной среды Мурасиге и Скуга, получившая название "вариант 4". Кроме минеральных солей, витаминов, сахарозы и агара в состав этой питательной среды входят: кинетин 0,4 мг/л, иццолилуксусная кислота - 1,0 мг/л и феруловая кислота -0,02 мг/л (Трофимец, 1974; Трофимец, 1975; Хромова, 1977). При культивировании апикальных меристем на питательной среде такого состава регенерация растений начинается с образования каллусной ткани вокруг меристемы с последующим появлением проростка. Рост проростка прекращается после достижения им высоты 3-5 мм. После удаления каллуса и пересадки проростка на свежую питательную среду рост возобновляется (Трофимец, 1974). С использованием этой модификации питательной среды только в НИИКХ освобождено от вирусов свыше 150 сортов (Трофимец, 1977; Трофимец, 1981).

Представляет интерес обзор работ по освобождению картофеля от вирусных болезней с использованием культуры каллуса. Я. Свободова ( Svobodova, 1964) сообщила, что метод культуры каллуса был более эффективен по сравнению с методом культуры апикальной меристемы при культивировании изолятов картофеля размером 0,5 мм с целью освобождения от вирусов. Эти результаты подтвердила Л.Г.Брегетова с сотруд

•никами (1971) и показала, что в процессе культивирования каллуса устанавливается градиент концентрации вирусов в ткани: чем моложе ткань, тем ниже концентрация вирусов, вплоть до полного освобождения.

Тщательные исследования по освобождению картофеля от вирусов при культивировании первичного каллуса провели И.М.Суриков и Г.М.Цило-сани (1980).

По мнению некоторых авторов, освобождение каллусной ткани от вирусов обусловлено тем обстоятельством, что растительные ткани представляют собой мозаику безвирусных и пораженных вирусами клеток (Murakshi, Carlson, 1976) . В процессе культивирования безвирусные клетки размножаются и растут гораздо интенсивнее пораженных (Pojner et al., 1976; Sampath et а1.,1966)и оттесняют последние на периферию (Брегетова и др. 1971; Sampath et al., 1966). Вследствие того, что в каллусной ткани отсутствуют плазмодесмы (Брегетова, 1971) а скорость перемещения вируса от клетки к клетке слишком мала (Manzer, 1959), образующиеся ткани постепенно освобождаются от вирусов.

Несмотря на отмеченные рядом авторов преимущества культуры каллуса в сравнении с культурой апикальной меристемы (Брегетова, 1971; Суриков, Цилосани, 1980; Svobodova, 1964 ) этот метод, насколько нам известно, в настоящее время практически не используется в семеноводстве картофеля для получения безвирусного материала. По-видимому, это обусловлено тем, что регенеранты, полученные из каллуса, вследствие генетических и хромосомных нарушений (Бутенко, 1975; Кунах, 1979; Шамина, 1970; Bennici et al., 1971; Butcher et al., 1975» Melchers, 1965: Muraschige , Nakano, 1966 ) часто отличаются от исходных растений по биохимическим,морфологическим и другим признакам (Бутенко, 1969; Щуравлев и др., 1975; Рыбалко, 1978; Рабалко, Харута, 1977; Цилосани, 1980). В то время как специальные исследования (Рыбалко, Харута, 1977; Трофимец, 1978; Denton et al.,1977) и большой практический опыт (Лейке и др., 1980; Остапенко, 1978, Трофимец, 1981; Трофимец и др., 1978 a; Quak, 1977) убеждают в том, частота мутаций при культивировании апикальной меристемы на средах, не допускающих каллусогенеза, не отличается от таковой при традиционном выращивании картофеля. Поэтому в последние годы многие авторы при оздоровлении растений от вирусов культивируют апикальные меристемы на средах, предотвращающих каллусогенез (Остапенко, 1978; Розенберг, 1975; Рыбалко, 1978; Gregorini et al., 1974). При этом ускоряется процесс формирования (Остапенко, 1978) и увеличивается выход растений-регенерантов (Розенберг,1975; Gregorini et al.,I974).

Что касается концентрации ионов водорода в питательной среде для культуры апикальных меристем картофеля, то исследования А.Хильдер-браццта с сотрудниками (Hildebrandt et al.,1954), 0.Стоне (Stone,1963)£ также Ф.Меллора и Р.Стей-Смита (Mell or, Stace-Smith, 1969) показали, что оптицум рН находится в диапазоне от 5,5 до 5,7. Более поздние исследования подтвердили этот вывод (Бутенко, 1964; Трофимец, 1975; Трофимец и др., 1976; Quak, 1977).

I.2.Температура

Уже первые работы по культуре апикальных меристем картофеля показали, что оптимум температуры находится между 19 и 25°С (Диба, 1973, Цучумов, Анисимов, 1974; Mellor, Stace-Smith, 1969-f Stone, 1963). В дальнейшем эти результаты нашли подтверждение в исследо -ваниях ученых разных стран (Верменко, 1980; Трофимец и др., 1976; Nozeran, 1977; Pennazio et al.,I979; Anonim, 1962 ) . При этом отмечается, что оптимальная температура при культивировании растительных тканей в темноте на несколько градусов ниже, чем на свету (Capite, 1955; Quak, 1977).

Особо хочется остановиться на использовании повышенных и пониженных температур для увеличения эффективности освобождения растений картофеля от вирусных болезней.

Наблюдения за размножением вирусов при повышенной температуре (Kassanis, 194-9) позволили предположить, что предварительное прогревание растений картофеля может увеличить выход безвирусных растений при 1сультивировании апикальных меристем.

А.Томсон (Thomson, 1956,1958) выращивал верхушки стебля и почки на среде Уайта 1-2 недели. Затем он подвергал пробирки с растениями тепловой обработке при температуре 30-38°С в течение 110 дней. Верхушки полученных побегов длиной 5-10 см после пересадки на новую питательную среду давали растения, освобожденные от вирусов A,Y,S. Получить этим методом растения, свободные от Х-вируса, не удалось. Недавно эту методику значительно модифицировал Г.В.Кленяев (1981) путем создания специальной камеры для термотерапии в стерильных условиях.

Однако на практике получил распространение способ предварительной термообработки вегетирующих растений в специальных камерах, обеспечивающих температуру в зоне размещения листьев на уровне 33-37°С, а температуру почвы 30-32°С (Миглавс, 1971; Нгуен Ха Туй, 1971; Quak, 1961; Stace-Smith, Mellor, 1968). При использовании этой методики удалось освободиться не только от всех известных вирусов, но и от вироида веретеноводности клубней картофеля (stace--Smith, Mellor, 1970).

После того как В.Хас и О.Боде (Huth, Bode, 1970) предложили подвергать термотерапии прорастающие клубни, этот прием получил большое распространение при получении оздоровленного материала картофеля методом культуры верхушечной меристемы (Щук, Горбатенко, 1971; Коновалов, 1973; Трофимец и др., 1978 а). Благодаря улучшению ряда элементов этой методики Д.П.Остапенко (1978) удалось в 1,5-2 раза увеличить выход ростков, пригодных для вычленения меристем.

О.С.Капица и О.Н.Андреева (1964), а также С.Н.Московец с сотрудниками (1973) отметили повышение эффективности освобождения растений от вирусных болезней методом культуры апикальной меристемы в случае предварительной обработки прорастающих клубней пониженными температурами (5-15°С) в течение 40 дней. Однако сочетание холодо-терапии и культуры апикальной меристемы применяется очень редко,так как ее эффективность значительно ниже, чем при сочетании обработки повышенными температурами с культурой апикальных меристем (Шалобай, Жук, 1975; Pennazio, et al.,1977).

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Донец, Николай Васильевич

ВЫВОДЫ

Результаты проведенных исследований позволяют следать следующие выводы по работе.

1. Повышение концентрации кинетина в питательной среде для культуры апикальных меристш картофеля до 0,5 мг/л, при условии исключения из нее ауксинов значительно повышает скорость роста из олированных эксплантантов.

2. Введение в питательную среду аденина положительно сказывается на регенерационной способности эксплантантов, что, по-видимому, обусловлено его стимулирующим, индуцирующим и химиопро-текторным действием.

3. Гибберелловая кислота в концентрации 1,0-2,0 мг/л значительно повышает успех культивирования апикальных меристем на питательной среде благодаря положительному влиянию на стеблевой и листовой органогенез.

4. Введение в питательную среду активированного угля в дозе 10 г/л существенно повышает выход сформировавшихся растений из меристем и коэффициент размножения при черенковании пробирочных растении, что особенно заметно в случае использования агара низкой степени очистки.

5. Регенерационная способность эксплантантов, а также рост и развитие растений из черенков в большой мере зависит от интенсивности света. В случае использования белого света люминесцентных ламп оптимальная интенсивность света для культуры апикальных меристем и пробирочных растений составляет 8 тыс.лк.

6. Оптимальный размер эксплантанта, обеспечивающий максимальный выход растений, освобожденных от вируса скручивания листьев картофеля, составляет 0,10-0,25 мм.

7. Предварительное облучение ростков картофеля когерентным монохроматическим светом с длиной волны 630 нм или 488 нм стимулирует регенерационную способность выделенных из них эксплан-тантов и увеличивает выход растений.

8. При испытании рекомендованной питательной среды установлено : а) регенерация растений из меристем идет за счет развития стеблевой и листовой ткани без нарушения тканевой организации, что сводит к минимуму риск получения нарушений наследственности. Укоренение достигается после пересадки регенерантов на среду, содержащую ауксины; б) скорость регенерации и выход сформировавшихся растений существенно выше в сравнении с широкоиспользуемой питательной средой, содержащей ауксины.

9. Освобождение картофеля от s- вируса: а) не снижает устойчивость растении к вирусам X,М,У и вирусу скручивания листьев; а) не снижает устойчивость растений к фитофторозу, а также клубней к мокрой и сухой гнили, обыкновенной парше и ризоктонио-зу, и заметно повышает устойчивость клубней к серебристой парше; в) обеспечивает статистически достоверное увеличение товарного урожая, в среднем за годы исследований на 4,3-12,1% в первый сезон и на 12,2-15,6$ во второй сезон выращивания на инфекционном фоне.

10. Выращивание картофеля на основе материала, освобожденного от S - вируса методом культуры апикальной меристемы экономически выгодно и обеспечивает получение условного чистого дохода в размере 332,17-345,17 руб/га. Окупаемость дополнительных затрат при этом составляет 18,9-19,7 руб/руб.

ПРЩЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. При оздоровлении и ускоренном размножении картофеля рекомендуется: а) для улучшения роста и развития эксплантантов использовать предварительное облучение ростков картофеля когерентным монохроматическим светом с длиной волны 630 нм или 488 нм; б) использование для культивирования апикальных меристем предложенную модификацию питательной среды, обеспечивающую получение оздоровленных растений через 1-2 месяца и высокий выход растений-регенерантов (53-97% от числа высаженных меристем); в) добавлять в питательную среду активированный уголь в дозе 10 г/л с целью увеличения выхода растений-регенерантов и коэффициента размножения; г) освещение пробирочных растений и эксплантантов светом с интенсивностью 8 тыс.лк.

2. Использовать в качестве исходного материала для семеноводства картофеля растения сортов Кристалл, Бирюза, Волжанин, Эристон, освобожденные от вирусной инфекции в процессе выполнения данной работы.

Считаю своим приятным долгом выразить сердечную признательность и благодарность доктору сельскохозяйственных наук Л.Н.Трофимец за постоянную помощь и поддержку на всех этапах выполнения работы.

Приношу также свою искреннюю благодарность администрации, членам Ученого Совета и всем сотрудникам Научно-исследовательского института картофельного хозяйства без большой помощи которых работу нельзя было бы выполнить.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Донец, Николай Васильевич, Москва

1. Материалы ХХУ1 съезда КПСС. М.,"Политиздат",1981, 223 с.2.-Брежнев Л.И. Отчетный доклад. В кн.: Материалы ХХУ съезда КПСС. М., "Политиздат", 1976: 3-89.

2. Брежнев Л.И. Хороший вклад в общее дело Правда, 1976 от 15 сентября: I

3. Аадуссо В. Культура верхушечной меристемы картофеля. Тезисы докладов У1 научной конференции Прибалтийских республик по защите растений. Тарту, 1968« 1; 4-5.

4. Амбросов А.Л. Вирусные болезни картофеля и меры борьбы с ними. Минск "Ураджай", 1975, 208 с.

5. Амбросов А.Л., Гребенщикова С.И. О значении сорняков в распространении вирусов картофеля (предварительное сообщение) Доклады ТСХА, 1964, 107: 255-258.

6. Амбросов А.Л.,Соколова Л.А. Взаимоотношения вирусов картофеляи растений при смешанных инфекциях. Тр. У1 Всесоюзного совещания по иммунитету с/х растений к болезням и вредителям. Тезисы докладов, Одесса, 1975:204.

7. Амбросов А.Л., Соколова Л.А. Против вирусных болезней картофеля.-Защита растений, 1976, 12 : 22-23.

8. Амброеов А.Л., Шуцкая О.В. Особенности метаболизма растений картофеля при вирусном патогенезе Доклады А.Н.БССР, 1979, 23,4 : 368-371.

9. Ю.Амбросов А.Л., Соколова Л.А. Научно-методические основы защиты сельскохозяйственных растений от вирусных болезней в Белорусской ССР. В кн. "Вирусные болезни сельскохозяйственных культур". М., "Колос", 1980 : 23-30.

10. Андреева В.А., Омельченко С.И. Активность пероксидазы листьев D. stramonium , зараженных ХВК и экспонированных на хлорам-фениколе. В кн." Вирусы и вирусные болезни растений Дальнего Востока". Тр. БПИДВНЦ Ан СССР, Владивосток, 1977, 48(151): 16-19.

11. Андрианова К.С. Оздоровление картофеля от вирусных заболеваний -Селекция и семеноводство, 1974, 5 : 49-52.

12. Бобырь А.Д. Химиопрофилактика и терапия вирусных болезней растений. "Наукова думка." К., 1976; 255 с.

13. Н.Бреге^това Л.Г., Крылов А.В., Астахова А.А. Оздоровление растений от вирусов каллусным способом В сб." Вирусные болезни с/х растений Дальнего Востока" АН СССР, ДВНЦ, Биологопочвен-ный институт, 1971: 28-49.

14. Бубенцов С. Болезни картофеля."Кайнар", Алма-Ата, 1967, 94с.

15. Бутенко Р.Г.Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений "Наука". М., 1964, 272 с.

16. Бутенко Р.Г. Теоретическое и прикладное значение культуры клеток, тканей и органов высших растений. В кн: "Рост, развитие и устойчивость растений", Иркутск, 1969 : 5-12.

17. Бутенко Р.Г. Экспериментальный морфогенез и дифференциация в культуре клеток растений. -"35-е Тимирязевское чтение". М."Наука", 1975, 51с.

18. Бутенко Р.Г. Рост и дифференциация в культуре клеток и тканей,-В кн."Рост растений и природные регуляторы. М.,"Наука", 1977 : 6-21.

19. Верменко Ю.Я. Культура тканей для международного обмена генетическими ресурсами картофеля. С/х за рубежом, 1980, 5:24-25.

20. Винклер Г.Н., Бутенко Р.Г. Применение черенкования при выращивании безвирусных растений картофеля методом культуры меристемы. Физиология растений., 1970, 17,4 : 851-853.

21. Винклер Г., Лайнгер Б. Питательные среды для культуры тканей картофеля. Картофель и овощи, 1971, 12 : 31-33.

22. Винклер Г.Н., Бутенко Р.Г., Лайнгер Б.Б. Применение метода культуры изолированных тканей для освобождения картофеля от вирусной инфекции. Тезисы докладов, на УI Всесоюзном совещании по вирусным болезням растений (3-7 мая I97Ir), М, 1971, 2 : 15.

23. Витенко В.А., Остапенко Д.П., Трофимец Л.Н. Качество картофеля, оздоровленного методом культуры меристемы. Картофель и овощи, 1977, 8:11-12.

24. Воловик А.С., Комков Д.Я. Влияние вирусной инфекции на оценку устойчивости картофеля к ризоктониозу. Картофель и овощи,1976, I : 39-40.

25. Гайнулина Р.Г., Герасимова З.П. Вирусные болезни картофеля в Киргизии. В кн. "Вирусы и вирусные болезни растений". К7Наукова думка", 1974 : 175-179.

26. Гамбург К.З., Гаманец Л.В. Влияние аденина на образование крахмала в культурах растительных тканей. Доклады АН.СССР,1977, 237, 1:242-244.

27. Герасенкова Е.Д. О методике заражения растений насекомыми переносчиками вирусов, вироидов и микоплазм. - В кн."Вирусные болезни с-х растений и меры борьбы с ними. Тезисы докладов Всесоюзного совещания. Ленинград, 1978: 96-98.

28. Гиббс А., Харрисон Б. Основы вирусологии растений. "Мир" М.,1978, 429 с.

29. Гольдин М^И., Елисеева З.Н., Никитина М.А. Вирусные заболевания картофеля и томатов в Казахстане. Алма-Ата "Наука" Казахской ССР, 1969, 144 с.

30. Гордейчук О.Г. Штаммы вирусов s и М картофеля и их диагностика. Автореферат диссерт. на соискание учен.степ. кб.н.- Владивосток, 1972, 28с.

31. Гордейчук О.Г. s -вирус картофеля на юге Дальнего Востока -В кн. "Вирусные болезни растений Дальнего Востока". Тр. Биолого-почвенного института, 1976, 25 (128) : 150-157.

32. Гребенщикова С.И. Способы передачи и естественные источники X и S -вирусов картофеля. Автореф. диссерт. на соискание учен, степени к.б.н. Л., 1970, 21 с.

33. Гребенщикова С.И., Иванюк В.Г., Кремнева A.M. Изменение устойчивости картофеля к грибным болезням под влиянием вирусов.- В кн. "7 Всесоюзное совещание по иммунитету с/х растений к болезням и вредителям. Тезисы докладов, Новосибирск, 1981 : 263-264.

34. Диба Али Наср. Разработка условий ускоренного получения безвирусных растлений картофеля из изолированных меристем. Автореф.диссерт. на соискание учен.степени к.б.н., М, 1973, 19 с.

35. Диба А, Айрапетян Э., Винклер Г., Бутенко Р. Освещение и морфогенез изолированных меристем. Картофель и овощи, 1972, 3 ? 44.

36. Диба А.Н., Винклер Г.Н., Бутенко Р.Г. Влияние некоторых стимуляторов на выход здорового посадочного материала картофеля, полученного методом культуры меристемы. Физиология растений, 1973, 20, б : I291-1294.

37. Дегтярева А.А. Влияние резонансной фотостимуляции на урожай картофеля в условиях предгорной зоны Восточного Казахстана. -Сб. научн.тр. Восточно-Казахстанской Гос. с/х опытн.станции., 1980, 7 : 48-53,

38. Джалилов Ф.С.-У. Влияние вирусной инфекции на устойчивость картофеля к фитофторозу Автореф. диссертации на соискание уч. степ, к.б.н.,М, 1983, 26 с.

39. Дорожкин Н.А., Гребенщикова С.И. Результаты применения серологического метода при получении безвирусного картофеля. Современные методы получения безвирусного картофеля. Тезисы докладов к Всесоюзному семинару - совещанию., М, 1975 : 36-37.

40. Дорожкин Н.А., Кремнева A.M., Гребенщикова С.И. Влияние вирусов на развитие Phythophthora infestans (Mont) de Bayy в клубнях картофеля. Весц1 АкадэмП навук БССР, серыя сельскагас-падарчых навук, 1979, 4:65-67.

41. Дорожкин Н.А., Гребенщикова С.И., Генералова И.В. Влияние X, S, М вирусов картофеля на заражение его черной ножкой (Рес-totacterium phytophthorum ) - Весц1 АкадэмП навук,1978, 2 : 76-78.

42. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта.М. "Колос", 1973, 336 с.

43. Дьяконов К.П. Итоги и перспективы изучения переносчиков фитопа-тогенных вирусов на Дальнем Востоке. В кн."Вирусные болезни с/х культур" ВАСХНИЛ, М, 1980 : 43-49.

44. Егорова Л.И., Седов И.М. Сравнительная оценка методов диагностики вирусов в растениях, выращенных из верхушечной меристемы. В кн." Современные методы получения безвирусного картофеля", М., ВАСХНИЛ, 1975 : 78-79.

45. Ершова В.В., Кирюхин В.П., Трофимец JI.H. Роль безвирусного се-' менного материала в повышении продуктивности картофеля.

46. В кн."Биологические основы повышения урожайности с/х культур. М, 1976 : 59-64.

47. Жук И.П. Культура ткани и оздоровление растений от вирусных болезней. В кн. "Новые методы создания и использования исходного материала для селекции растений". Киев, 1979:193-199.

48. Жук И.П., Горбатенко Н.И. Получение картофеля, свободного от вирусной инфекции, методом культуры меристем,- 6 Всесоюзное совещание по вирусным болезням растений (3-7 мая 1971г). Тезисы докладов, М, 1971, 2 : 36-37.

49. Журавлев 10.Н. Фитовирусы в целом растении и в модельных системах. М./'Наука", 1979 , 247 с.

50. Зыкин А.Г. Вирусные болезни картофеля. "Колос" Ленинградское отделение, 1976, 152 с.

51. Камераз А.Я., Щербакова Н.М. Вирус s и результаты его определения серологическим методом в листьях картофеля. Вестник с/х науки, 1957, 12 : 93-100.

52. Капица О.С., Андреева О.Н. Способ освобождения картофеля от

53. У вируса. - Тезисы выступлений на 5 совещании по вирусным болезням. М.,ВАСХНШ1, АНУССР, 1964:49.

54. Караваева Н.П. Влияние предпосадочного светоимпульсного облучения клубней на продуктивность картофеля. Труды Комифил. АН. СССР, 1980, 47:119-128.

55. Караваева Н.П. Влияние светоимпульсного облучения клубней на продуктивность картофеля. Тезисы докл. б-й Всесоюзной конференции по фотоэнерг. раст. Львов, 1980:112-113.

56. Каримова Ш. Сорные растения носители вирусов. - Картофель и овощи, 1971, 8:40.

57. Катаева 0. Вирус s и продуктивность картофеля Картофель и овощи, 1973, 10 : 36-37.

58. Кирюхин В.П. Физиология. В кн. "Картофель". М., "Колос",1970: 27-40.

59. Кленяев Г.В. Усовершенствование методики оздоровления картофеля от вирусов. Актуальные вопросы селекции и семеноводства полевых культур. М., 1981 : III—113.

60. Коновалов С.Е. Перспективный метод выращивания безвирусного картофеля. Картофель и овощи, 1973, 2 : 36-37.

61. Комков Д.Я. Влияние вирусной инфекции на развитие основных возбудителей грибных и бактериальных болезней картофеля. Автореф.дисс. на соискан. уч.степени к.с/х.н. М., 1976, 25 с.

62. Комков Д.Я., Воловик А.С. Влияние мозаичных вирусов на развитие сухой гнили картофеля. Картофель и овощи, 1978, I : 40-41.

63. Конарев В.Г. Цитохимия и гистохимия растений, М.; "Высшая школа", 1966, 319 с.

64. Кретович В.Л. Биохимия растений. М."Высшая школа", 1980, 445 с.

65. Крылов А.В., Горовой П.Г. Растения-индикаторы вирусов картофеля (вопросы систематики), Владивосток, 1968, 50 с.

66. Крылова Н.В., Казачкова Л.А. Оздоровление картофеля от вирусных болезней. "Картофель на Дальнем Востоке". Труды Биолого-почвенного института ДВНЦ АН СССР, Владивосток, 1976, 32(135): 155-159.

67. Кулаева О.Н. Цитокинины, их структура и функции. М.,"Наука", 1973, 264 с.

68. Кулаева О.Н. 0 механизме действия цитокининов. В кн. "Рост растений и природные регуляторы". М."Наука", 1977 : 216-234.

69. Кунах В.А. Цитогенетическая изменчивость клеточных популяций в культуре изолированных тканей растений. В кн. "Тканевыеи клеточные культуры в селекции растений", М, 1979 : 38-51.

70. Кунах В.А., Зосимович В.П. Влияние кинетина на уровень и типы аббераций в культуре тканей Haplopappus gracillis. Генетика, 1977, 13 : 1355-1365.

71. Кунах В.А., Сидоренко П.Г., Зосимович В.П. Влияние кинетина на репродукцию клеток различной плоидности. В кн."Успехи полиплоидии". К. ,"Наукова думка", 1977 : 203-215.

72. Куневич Р.В. Семеноводство картофеля в ПНР Картофелеводство, 1979, 4 : 143-148.

73. Кучумов А.П., Анисимов Б.В. Методы производства семенного картофеля на безвирусной основе. М., 1974, 84 с.

74. Кучумов А.П., Князев В.А. Культура тканей и клеток в селекции и семеноводстве картофеля. М, 1980, 52 с.

75. Лайнгер Б.Б. Персиковая тля переносчик вируса S картофеля. -Картофель и овощи, 1974, 4 : 36.

76. Лейке Г, Левее Р. Эртель К, Петерсдорф М. Использование культуры тканей и органов в селекции растений и производстве посадочного материала. М. "Колос", 1980, 77 с.

77. Литвер Н., Трофимец Л, Черепанова Р, Шмыгля В. Безвирусное семеноводство картофеля реальная перспектива. - Картофель и овощи, 1966, 12 : 12-14.

78. Миглавс У.Я. Зараженность картофеля вирусными болезнями в Латвийской ССР и некоторые вопросы его оздоровления. -Материалы 7-го Прибалтийского совещания по защите растений. Елгава, 1970, I : 82-84.

79. Ми/.главс У.Я. Результаты применения апикальных меристем для оздоровления картофеля от вирусных болезней. В кн. "6-е Всесоюзное совещание по вирусным болезням растений. Тезисы докладов, М, 1971, 2 : 59.

80. Михглавс У.Я. Опыт оздоровления картофеля сортов Лаймдота и Ранний желтый от вирусов X, М и S В кн. "Современные методы получения безвирусного картофеля". Тезисы докладов к Всесоюзному семинару - совещанию", М, 1975 : 18-19.

81. Ми/главе У.Я. Влияние вирусной инфекции на урожай картофеля сортов "Лаймдота"и "Ранний желтый". Труды ЛСХА, 1976, 100:11-17

82. Мичене М.Я. Развитие фитофторы на картофеле, зараженном вирусами-В кн."Болезни с/х и лесных растений и меры борьбы с ними" Елгава, 1970, 1:85-86.

83. Морель Ж. Борьба с вирусными болезнями растений с помощью культивирования тканей. Сельскохозяйственная биология. 1967, 11,4 : 622-628.

84. Москвец С.Н., Горбатенко Н.И., Жук И.П. Использование метода культуры апикальных меристем в сочетании с пониженными температурами для оздоровления картофеля от мозаичных вирусов.-Сельскохозяйственная биология, 1973, 8, 2 : 271 275.

85. Мотылева З.С. Распространение и вредоносность вирусов X, s и К на районированных в Амурской области сортах картофеля. -Труды Благовещенского СХИ, 1970, 4,5 : 109.

86. Мошков Б.С. Выращивание растений при искусственном освещении. Л., 1966, 286 с.

87. Муромцев Г.С., Коренева В.М., Герасимова Н.М. Гиббереллины и рост растений. В кн. "Рост растений и природные регуляторы: М. "Наука", 1977 : 193-216.

88. Мэтыоз Р. Вирусы растений. М. "Мир", 1973, 600 с.

89. Остапенко Д.П. Метод культуры меристемы в элитном семеноводстве картофеля на безвирусной основе в УССР. Автореф. диссерт. на соискан. учен, степени к.с/х.н, Самохваловичи, 1978,23с.

90. Павлов М.А., Нечипоренко Н.С. Влияние вирусной инфекции на некоторые физиолого-биохимические показатели и урожай картофельного растения. Тр. Ижевского СХИ, 1969; 17.

91. Погорилько Н.А., Шелудько ГО.М. Растения накопители s- вируса картофеля при массовом производстве диагностических антисывороток- В кн."Вирусные болезни растений Дальнего Востока". Тр.Биол.-почвен. института, 1976, 25 (128):227-232.

92. Попкова К.В., Шнейдер 10.И., Воловик А.С., Шмыгля В.А.Болезни картофеля М. "Колос". 1980, 304 с.

93. Попов Ю.Г. Культура in vitro меристематических верхушек стебля как метод оздоровления и размножения растений. Научные доклады высш.школы.Биол.н., 1976, 6 :13-24.

94. Рассел Г.Э. Селекция растений на устойчивость к вредителям и болезням. М., "Колос", 1982, 421 с.

95. Рейтер С. Оценка селекционного материала на устойчивость к вирусным болезням, Научно-технический бюлл. Сиб. НИИ растениеводства и селекции, Новосибирск, 1978, 7 ? 15-19.

96. Ю2.Рейфман В.Г., Крылов А.В., Костин В.Д. Распространение X и Sвирусов на Дальнем Востоке. Докл. Моск. с/х акад. им. К.А. Тимирязева, 1964, 107 : 211^219.

97. ЮЗ.Рейфман В.Г., Романова С.А. Применение слабопатогенного штамма X вируса картофеля в опытах по защитной вакцинации. -Тр. ЕЛИ ДВНЦ. АН СССР, 1977, 46/149 : 146-154.

98. Ю4.Рейфман В.Г., Мартынова Р.В., Пантюхина В.А., Руцкова В.Р.,Ка-зачкова Л.А. Энзиматическая активность в листьях растений под влиянием вирусов и терапевтическое действие рибонуклеа-зы. Сельскохозяйственная биология, 1978, 14, 2 : 217-219.

99. Розенберг В. Опыт получения свободных от вирусов растений картофеля сорта Йыгева колане методом верхушечной меристемы.-В кн. "Современные методы получения безвирусного картофеля". М, 1975: 15-16.

100. Розенберг В.Р.Факторы,влияющие на эффективность оздоровления картофеля от мозаичных вирусов методом верхушечной меристемы. Автореф. диссерт. на соиск. учен.степ, к.с/х.н., Самохваловичи, 1980, 21 с.

101. Рыбалко А.Е. Изучение условий массовой регенерации безвирусных растений в культуре меристемы. В кн. "Вирусные болезни с/х растений и меры борьбы с ними". М., 1978: 10—II.

102. Ю8.Садовникова В.И., Латыева Г.К. Вирусные болезни картофеля сорта Приекульский ранний, Защита растений от вредителей и болезней, 1964, 12 : 12-14.

103. Степанова З.П. Методы ускоренного размножения оздоровленныхсортов картофеля В кн. "Селекция и семеноводство картофеля". Науч.тр. НИИКХ, М, 1974 : 124-128.

104. ПО.Стройков Ю.М. Особенности проявления полевой фитофтороустойчиво-сти картофеля в процессе развития и хранения. Автореф. диссертац. на соиск. учен. степ, к.с/х.н., М. 1974, 17с.

105. Ш.Суриков И.М., Цилосани Г.М. Массовое получение регенерантовкартофеля из первичного каллуса ij vitro. Физиология и биохимия культурных растений, 1980, 12, 6 : 653-658.

106. П2.Счасленок Е.М. Термотерапия против вирусов. Картофель и овощи, 1981, 6:8.

107. ПЗ.Тринченко И. 0 методе меристемной культуры при оздоровлении картофеля от вирусов X и S Картофель и овощи, 1971, 10: 47-48.

108. Трофимец Л.Н. Некоторые особенности инфекционного процесса при заражении картофеля вирусами М, Б, Y. Тр.НИИКХ, М,1971, 8 : 244-251.

109. Трофимец Л.Н. Современные методы получения безвирусного семенного картофеля и защиты его от вирусных болезней. В кн.яКультура картофеля в различных почвенно-климатических зо-"нах" Научн. труды НИИКХ, 1974, 20:131-140.

110. Трофимец Л.Н. Получение безвирусного картофеля для элитного семеноводства. В кн. Современные методы получения безвирусного картофеля. Тезисы докладов к Всесоюзному семинару-совещанию. М, 1975 : 10-11.

111. Трофимец Л.Н. Методы культуры тканей в семеноводстве картофеля.-В кн. "Защита картофеля от вирусных болезней в семеноводстве". Научн. труды НИИКХ, 1977, 30:3-18.

112. Трофимец Л.Н. Методические и организационные основы оздоровления и защиты семенного картофеля от вирусных болезней.- В кн. "Вирусные болезни с/х растений и меры борьбы с ними". Тезисы докладов на Всесоюзном совещании. М., 1978: 5-8.

113. Трофимец Л.Н. Методы оздоровления и защиты картофеля от вирусных болезней. В кн. "Защита овощных, бахчевых культур и картофеля от вредителей, болезней и сорняков" М., "Колос", 1978 : 91-103.

114. Трофимец Л.Н.Методические и организационные основы оздоровления и защиты семенного картофеля от вирусных болезней. В кн. "Вирусные болезни с/х культур", М."Колос", 1980: 3-10.

115. Трофимец Л.Н. Биологические основы и методы защиты семенного картофеля от вирусных болезней. Автореф. диссзрт. на соискание учен, степени д.с/х. н^ Ленинград, 1981, 49 с.

116. Трофимец Л.Н., Князев В.А., Хромова Л.М., Егорова Л.И. Оздоровление картофеля от вирусных болезней методом верхушечной меристемы. Сельскохозяйственная биология., 1975, 10, 5 : 760-765.

117. Трофимец Л.Н.,Князев В.А., Хромова Л.И., Остапенко Д.П. Методические указания по оздоровлению и ускоренному размножению картофеля. М, 1976, 30 с.

118. Трофимец Л.Н., Хижняк П.А., Кучумов А.П. Методы лечения картофеля зараженного вирусными болезнями. М., 1978, 62с.

119. Трофимец Л.Н., Анисимов Б.В., Летун Б.П. Достижения в селекции и семеноводстве картофеля. М,"Знание", 1978 , 64с.

120. Трофимец Л.Н.,Волкова Т.В., Миренкова Н.Н. Метод культуры тканей в картофелеводстве. В кн.-"Тканевые и клеточные культуры в селекции растений". М. ,"Колос", 1979: 123-128.

121. Трускинов Э.В. Оздоровление картофеля от вирусных болезней методом культуры меристемных тканей.-С.-х.биология, 1976, II, 2:250-255.

122. Тянь-По, Тань-Бин-И и Линь-Чуань-Гуан. Изучение интерференции вируса X и вируса мозаики табака в отношении вируса У картофеля при местном поражении. Вэйтэньу СЮЭБА0 (КНР), 1966, 12, 1:86-90.

123. Удовицкий А.С. Защита картофеля Химия и жизнь, 1981, 1:56-59.

124. Фадеев 10.Н., Новожилов К.В. Проблемы защиты растений. -Вестник сельскохозяйственной науки, 1979, 12 : 13-15.

125. Фомина К.И., Торчинская В.М., Лебедева Е.Г. Влияние s и м вирусов на урожайность и качество клубней картофеля. Картофель на Дальнем Востоке. Тр.Биолого-почвенного ин-та ДВНЦ АН СССР, 1976, 32 (135) : 128-134.

126. ХаманУ. Рунге М. Метод повышающий чувствительность серодиагностики мозаичных вирусов картофеля. Тр.Биол. - почвен.ин-та, Владивосток, 1977, 48 : 548-552.

127. Харламова М.Н. Приемы и методы выращивания здорового семенного картофеля сорта Гатчинский в условиях Северо-Запада РСФСР. Автореф. диссерт. на соискание учен.степ, к.с/х.н, Ленинград - Пушкин, 1982, 16 с.

128. Храмцова М.М., Зезюкин А.И. Влияние вирусной инфекции на устойчивость картофеля к фитофторозу. В кн. Иммунитет с/х растений к болезням и вредителям". М, 1975: 329-332.

129. Хромова Л.М.Культивирование верхушечных меристем картофеля для оздоровления сортов от вирусных болезней,- В кн. "Тканевые и клеточные культуры в селекции растений" М "Колос",1979: 128-137.

130. Хромова Л.М., Трофимец Л.Н., Князев В.А. Влияние регуляторов роста на морфогенез в культуре апикальной меристемы.-Научн. тр. НИИКХ, 1977, 30:19-25.

131. Цилосани Г.М. Исследование генотипических и фенотипических характеристик регенерантов картофеля, полученных из первичного каллуса in tiitb методами морфологии, биохимии и вирусологии. Автореф.диссерт. на соиск. учен. степ, к.б.н. Л.,1980, 23 с.

132. Чесноков П.Г. Болезни вырождения картофеля в СССР, М, 1961,320с.

133. Шамина З.Б. Генетика и цитология культуры ткани растений -регенерантов. В кн. "Культура изолированных органов, тканей и клеток растений!! Труды 1-й Всесоюзной конференции.

134. М."Наука", 1970 : 129-136.

135. Шмыгля В.А. Современные методы получения безвирусного семенного картофеля. М, ВНИИТЭИСХ, 1971, 73 с.

136. Шмыгля В.А., Герасимова К.Ф., Русинова Е.Я. Некоторые данные о серологических различиях М и S -вирусов в сортах картофеля в географически отдаленных пунктах В кн. "Штаммы вирусов растений", Владивосток, 1977 : 175-179.

137. Шуцкая О.В., Барышев М.А., Иоселевич Е.И. Нарушение метаболизма минеральных веществ у растений картофеля при поражении А-вирусом. Сб. научн. тр. Защита растений, 1978, 5 2:32-38.

138. Щелкунова С.Е. Изучение условий, способствующих регенерации растений малины из меристематических верхушек. Автореф. диссерт на соискание учен, степени к.б.н., 1973, 31 с.

139. Щелкунова С.Е., Попов Ю.Г. Получение свободных от вируса растений малины путем культуры изолированных апексов Физиология растений, 1970, 17,3 : 618.

140. Эсау К. Анатомия растений. М "Мир", 1969, 564 с.

141. Эзау К. Анатомия семенных растений. М "Мир", 1980, 558 с.

142. Якобенчук В.Ф., Кузько В.Г., Вильчинский И.С. О лазерной стимуляции клубней картофеля во Львовской области. Тезисы докладов 6-й Всесогозн. конферен. по фотоэнерг.растений, Львов, 1980 : II3-II4.

143. Яшина И.М., Кирсанова Э.В. Получение наследственных изменений у картофеля при воздействии гамма-лучами. Генетика., 1966, I: 53-58.

144. Амбросау А.Л., Шчуцкая О.В. Угощу в1руснай 1нфекцы1 на 1птэнс1у-насць фотас1нтэзу и дыхання у росл1н Бульбы Весц1 Акадэ-мН навук БССР, серыя б1ялаг1чных навук, 1973, 6:55-58.

145. Амбросов А.Л., Шуцкая О.В., Прохорчик Р.А. Механизмы нарушения функций фотосинтетического аппарата у растений картофеля, пораженных вирусами. Весц1 АкадэмП навук БССР, серыя б1яло-г1чных навук, 1975, 5:63-68.

146. Васев В.А., Стайков Г.Д. Някои изменения във фитосинтетичния апарат на болни от вирус s картофени растения. В кн. "Научни трудове", 1968, 17 : 249-257.

147. Верменко Ю.Я., Кучко А.А. Застосування культуры ап1кально1 ме-ристеми в поэднан1 з опром1нениям бульб картопл1 гамма-проме-нями для оздоровления II в1д моза1чних в1рус1в. Картопляр-ство, Ки1в, "Урожай", 1980, 11:35-37.

148. Йотов JI. Две нови за България вирусни болести по картофите. Рас-теневъдни науки, 1966 3 (7): 143-147.

149. Карачанова В., Иванова A. Chenopodium murale иодходящо ин-дикаторно растение за картофените вируси X, s,M, аукуба и лю-церново-мозаичен вирус при условията на България. -Растение-въдни науки, 1977, 14, 7 : III-II6.

150. Московец С.М., Грама Д.П., Жеребоук Л.К. В1руси I в1русн1 хвороби картопл1. Ки1в, Наукова думка, 1973, 166 с.

151. Рыбалко А.Е., Харута Л.Г. Про удосконалення метод1в оздрровлення картопл1 в1д в1рус1в В1сник с1льскогосподарско1 науки,1977, 8 : I08-II0.

152. Accatino P. Papa Corahila libre de vitus mediante ciltivo de meristemas. Agricultura Technic a, 1966, 26,1:34-39.

153. Anand S.R., Ganguli В. Bud culture a new method of producing virus - free plants. - The Indian Potato Journal, 1964, 6, 2: 103-104.

154. Bagnall R.H., Bradiey R.H. ,E. Hoto on a virus latent in potato plants. Am. Potato J.,1955, 32(7): 252-253.

155. Bald E.G. Cell divisions in living, shoot apices. Phytomorpho-logy, I960, 10j 377-396.

156. Bennici A., Buiatti N.D., Amato F., Pagliai M. Nuclear behavior in Haplopappus gracilis callus grown in vitro on different culture media. Collg. Int. CNRS, 1971, 193; 245-250.

157. Beemster A., Rozendaal A., Potato viruses, Properies and Symptoms. "Viruses of potato and seed - potato Production.", Wageningen, 1972: II5-I43.

158. Berces S., Keller E.R., Winiger P.A. Erfahrungen mit qualitatsbeein flussenden Ma/3nahmen in der Saatkartoffelproduction-- Mitteilungen fttr die schweizerische Landwirtschaft, 1972, 20, 5: 98-108.

159. Bode 0*» Weidemann H.Z. Untersuchungen zur Blattlausubertrag-barkeit von Kartoffel M und S virus. - Potato Res., 1971, 14, 2 i II9-I29.

160. Bokx J.A. Detection of virus S "Eersteling" isolate, in glasshouse grown potato plants with secondary virus infection.- Mededelingen van de Rijksfaculteit dandbouwwetensckappen te Gent, Belgique, 1967, 32(3-4): 915-921.

161. Bokx J.A. Viruses of potato and seed potato production. Wa-geningen. Centre for Agricultural Publishing and Documentation, 1972; 233p.

162. Bokx a.a. Spread of potato virus.- Potato Res.,1972,15,I{67-70.

163. Bokx J.A.,de, Watterrous H.A. The translokation of potato virus S, isolate "Eesteling" in potato plants. Neth. J. Plant pathol., 1967, 73(3): 65-68.

164. Bokx J.A., Piron P.G.M. Effect of temperature on symptom expression and relativa conzentration of potato virus S and

165. M in Cv.eersteling. Meded. Рас. landbouwwetensch. Rijksun-iv Gent., 1977» 42, 2: 1203-1205.

166. Bokx J.A.,de, Piron P.G.M., Detectability of potato virus S in fild grown plants. - Med. Fac. dandbouww. Rijksuniv Gent., I97S, 43,2» I02I-I026.

167. Bruyn Ouboter M.P.de. A new potato virus. Proc. Conf. Potato virus Dis Wageningen - Lisse.,1951-1952:83-84.

168. Braun A.C., Wood H.N. On the activation of certain essential biosynthetie aystems in cells on vinca rosea L. Proc.Nat. Acad.Sci., 1962, 481 1776-1782.

169. Butcher D.N., Soglke A.K., Tommerup J.C. Factors influencing changes in ploidy and nuclear D.N.A. leves in cells fromnormal, crown gall and habituated cultures of Helianthus annuus L. - Protoplasma, 1975, 86: 295-508.

170. Capite Z.de. Action of light and temperatur on growth of plant tissul cultures in vitro. Amer. J. Bot. 1955,42:369-373.

171. Chrzanowska M., Pietkiewicz E., Zagorska H. Wykrywalnosc wiru-sow M S w roslinach 6. odmian ziemniaka porazonych komple-ksem M + S. Zeszyty problemowe postepow nauk rolniczych, 1976, 174t 91-99.

172. Clowes F.A.d. Apical meristems.- Botanical monographs, 2. Oxford: Blackwell, 1961, 2I7p.

173. Jones E.D., Mulln J.M. The effect of potato virus X on susceptibility of potato tubers to Fusarium roseum "Avenaceum". -Am.Potato J. 1974, 51, 7: 209-215.

174. Denton I.E., Westcott R.J. Ford LLoyd B.V. Phenotypic variation of Solanum tuberosum L. cv. Dr. Meintash regenerated directly from shoot-tip culture. - Potato Res., 1977, 20 (2)s I3I-I36.

175. Dwurazna M. Rozwoj chorob gzzybowych w hodowli ziemniakow pod Krakowem. In: Roczniki nauk rolniczych, Warszawa, 1957, 78: 145-158.

176. Ford K.E., Ross A.F. The interaction of potato viruses X and У in tobacco leaf tessue differing in age. Phytopathology, 1962, 52: 226-232.

177. Fridborg G., Pedersen M. Landstom dars Erik, Eriksson Tage.

178. The effect of activated charcoal on tissue cultures adsorption of metabolited inhibiting morphogenesis. Physiol, plant, 1978, 43, 2s 104-106.1.3*Furska E. Z badan nad S zerzeniem sie wirusow ziemniaka

179. X, S, M przy zroznicowanych uprawack pielegnacyjnych w wa-runkach polowych. Zeszyty problemowe postepow nauk rolni-czych, 1976, 174; 79-80.

180. Gabriel W., Budnik J., Kaczmarck U. Choroby wirusowe ziemniaka przeglad literatury. Biuletyn Instytutu ziemniake, 1972, 10: IO3-II7.

181. Gabriel W., Wistocka M., Cislik M. Einfeluss des S virus anf infektion der Kartoffel mit Blattrollvirus unter feldbegin-gungen. - Abstracts of Conference Papers EAPR. Wageningen- Netherlands, 1975: 200-201.

182. Goutheret R.J. Sur la culture d'extremited de racines. Сотр. rend. Soc. biol., 1932, 109: 1236-1238.1.9*Gregorini G., Zorenzi R. Meristem tip culture of potato plants as a method of improving productivity. - Potato Res., 1974-, 17, 1:24—33*

183. Hakkaart P.A., Quak P. Effect of heaf treatment of young plants on freeing Chrysanthemum from virus B. by means of meristem culture. Netherlands J. of Plant Pathology, 1964, 70, 5: 154-157.

184. Heller R. Recherches sur la nutrition minerals des tissus ve-getaux cultives in vitro. These, Paris et Ann. Sci. natur.- Bot. biol. et veget, 1953, 14, I; 223.

185. Hildebrandt A.C., Riker A.J., V/aterton J.Z. Virus infectivity host tissue growth on synthetic medium at differont temperatures and aciditions. Phytopathology, 1954, 44:492.

186. Hollings M. Disease control through viressfree stock. Ann. Rev. Phytopathology, 1965, 3: 367-396.

187. Hollings M., Stone O.M. Heat treatment meristem tip culture and the production of virus-tested cornation and chrysanthemum - Glasshouse Crops. Res. Inst. Annual Report., 1967: 106-107.

188. Holmes F.O. Elimination of spotted wilt from a stock of dalia. Phytopathology, 1948, 38: 314.

189. Horner M., MoComb G.A., MoComb A.G., Street H.B. Etylene production and plantled formation by Nicotinia anthers cultured in the presence and absence of charcoal. G. Exp. Bot., 1977, 28, 107: 1365-1372.

190. Houten E.G., Quak P., Meer P. Heat treat-^ment and meristemculture for the prodiction of virus free plant material.- Worlg. Rew. Pest, control, 1968, 7, 2:115-120.

191. Hunnius W. Zum verhalten des S virus in der Kartoffelpflan-ze bei mischinfectionen heiten. - Pflanzenpathologie und Pf lanzens chutz, 1969, 76, 9/Ю: 513-528.

192. Hunnius W. Zum verhalten des M virus in der Kartoffel. - Z. fur Pflanzenkrankheiten und Pf lanz ens chut z, 1972, 79, 7t 385-399.

193. Hunnius W. Viresbekampfung im Kartoffelbau. Z.Pflanzenkrankh. und Pf1anzens chutz, 1977, 84, 10: 615-637.

194. Huth W.von, Bode 0. Befreiung v'611ig infizierter Kartoffelso-rten von Infectionen des Kartoffel S virus durch meristem-kultur. Nachrichtenblatt - Dtsch. Pf lanzenschutzdienstes, 1970, 22(3): 37-39.

195. Kassanis B. Potato tubers freed from leaf- roll virus by heat.- Nature, 1949, 164: 881.

196. Kassanis B. The use of tissue cultures to produce virus -free clones from infected potato varieties. Annal .of applied Biology, 1957, 45, 3: 422-427.

197. Kassanis В., Finsley T.W. The free ing of tobacco tissue cultures from potato Y by 2 thiouracil. - Proc.3 -rd. Conf. pot. virus, dis., Iisse - Wageningen, 1958: I53-I55.

198. Kassanis В., Varma A. The production of virus free Clons of some British potato varieties. - Ann. appl. Biol., London, 1967, 59(3): 447-450.

199. Klinkwski M. Pflanzliche viro^ogie. Berlin, 1958, 434p.

200. Kohlenbach H.W., Vernicke W. Investigationes on the inhibitory-effect of agar and the function of active carbon in anther culture. Z.Pflazenphysiol, 1978, 86,5:463-472.

201. Kowalska A. Reaktion of Red Kidney beam to potato virus S -Potato Res., 1977, 20, I: 85-88.

202. Kristensen H.R. Kartoffel virus S. Uges. Landm, 1956, 101 (24):323-326.

203. Kutsky R.J., Rawlins Т.Е. Inhibition of virus multiplication by naphtalene ace ticacid in tobacco tissue cultures, as revaeled by a spectrophotometry method. J.Bacteriol, 1950, 60: 763-766.

204. Limasset P., Comuet P. Recherche die virus de la mosaique du tabac (marmor tabac. Holmes) dans les merestems des plantes infectes. C.R. Acad. Sci, 1949, 228, 25; I97I-I973.

205. Manzer F. Potato meristem culture and virus X. Amer. Potato J.,1959, 36, 6: I9I-I95.225«Manzer F.E., Merriam D.C., Mecrum C. Recent develepments in Potato Seed improvement in Maine. Research in the life sciences, 1969, 17(1): 9-II.

206. Manzer F.E., Merriam D.C., Nepler P.R. Effects of potato virus Sand; two strain of potato virus X on yields of Russen* Bur-bank, Kennebec and Katahdin cultivars in Maine. Am.potato J., 1978., 55, II: 601-609.

207. Manzer F.E., Merriam D.C., Nepler P.R. Effects of potato virus S and mild potato virus X on early and late harvest yields of the Kennebec Cultivar in Maine. Am. potato J., 1979, 9* 435-440.

208. Matthews R.E.F. Thiouracil in tobacco mosaic virus. Biochim. Biophis. Acta., 1956, 19: 559.

209. Maury Y., Quemener J.,Spire D. Experience de dissimination du ' virus S de la pomme de terre. Etnode de virologie. Paris, 1965s I7I-I75.

210. Melchers G. Einige genetische Gesichtspunkte zu sogennten Ge-webekulturen. Ber. Dt. Bot. Gesellsch., 1965, 78»11:21-29.

211. Mellor F.C., Stace-Smith R. Develepment of excides potato buds in nutrient culture. Canad. J. Bot., 1969, 47, Ю: 1617- 1621.

212. Mierzwa Z., Mielcarek J., Ricaj T. Zastesowanie lateksu prod-ukcdikrajwej do ucrulania surowic diagnostycznych do wykry-wania wirusow ziemniaka X, Y, S, M. Biul. Inst. Ziemn. Bonin, 1976, 16: 67-77.

213. Morel G. Resberches sur la culture associce de parasites obli-gatoires et tissue vegetaux. Ann. Epipbyt., 1948, 14, 5: 125-234.

214. Morel G. Diskussionbemerkung. J. Nathl. Cancer. Inst., 1957, 19: 680-681.

215. Morel G. La culture in vitro du merusteme apical. Rev. Cytol. Biol. Veg., 1964, 37: 307-214.

216. Morel G., Martin C. Guerison de dahlia atteints d'une maladie a virus. C.R. held., Slanc., Acad. Sci. Paris, 1952, 235: 1324-1325.

217. Morel G., Martin C. Guerison de pommes de te.rre atteintes de maladies a virus, C.R. Acad.agri. Prance., 1955, 41, 10: 472-475.

218. Morel G., Martin C., Muller J.F, La guerison des pommes de terre atteintes de meladies. virus. Ann. Physiol, veg., 1968, 10, 2: II3-I39.

219. Muraschige Т., Nakano R. Tissue culture as a potential tool in obtaining polyploid plants. J. Hered., 1966, 57: II5-II8.

220. Norris D. Reconstitution of virus X saturated potato varieties with malachite green. - Nature, 1953, 172, 4-3835: 816.

221. Norris D. Develepment of virus frei stock of Green Mountoin potato by treatment wuth malachite green. Austral. J. Agric. Res., 1954-, 5» 658.

222. Pietrak J., Chrzanowska M., Jankowska H. Wystepowanie wiruse M, wirusa S i komplecksu tych wirusow W admianach ziemniako w warunkach polavych. Biuletyn instirtutu Ziemniaka, 1975, 15: 53-60.

223. Pietkiewicz J. Influence of viruses X and Y on the reaction of potatoes to Phytophtora infestans de By. Ziemniak, 1971: 99-Ю8.

224. Pietkiewicz J. Effect of viruses on the Reaction of potato to Phytophtora infestans. I Characteristic of the reaction to Ph. infestans infected with potato viruses X, Y, S, M and leafroll. Phytopathol. Z. , 1974, 81, 4: 364-372.

225. Pietkiewicz J. Effect viruses on the reaction of potato Phytophtora infestans. 2 Mechanism of changes in reaction to Ph. infestans in virus infected plants . - Phytopathol. Z.1975, 82, I: 49-55.

226. Pietkiewicz J. Interakcja wirusow M i S w trzech odmianach ziemniaka. Leszyty probl. post, nauk rolmiczych Warzawa,1976, 181, III-II8.

227. Pennazio S., Appiano A., Vecchiati M., D!Agrostino G. Thiamine requirement of potato meristem tip cultured in vitro.- Physiol. Veget., 1976, 14,1: 121-131.

228. Permazio S., Gianihazzi S., Carre M., Veechiati M. Low temperature treatments combined with culture of meristem tips disec-ted from virus infected plants. - Rivista di Patologia Vegetale, 1977, 4, 13: 43-47.

229. Pemiazio S.et al. Eliminazione del virus X della patata median-te termoterapia abbianta alia coltura di apici vegetativi.-- Riv. Ortoflorefruttic. ital,, 1979, 63, 2: IO3-II3.264.

230. Quak F. Meristem culture and virus free plants. - Appl. and Fundam. Aspects Plant Cell, Tissue, and Organ Cult., Berlin e. a, 1977,: 528-615

231. Richardson D.E., Doling D.A. Potato blight and liafroll virus.- Nature, 1957J 866-867

232. Richter J., Angustir W., Kleinhempel H. Nachweis des Kartoffel S-virus mit Hilfe des ELISA.- Festes (Kurze Milt). Arch. Phytopathol. und Pflanfcenschutz, 1977, 13, 4: 289^292.

233. Roca W.M., Bryan J.E., Roca M.R. Tissue culture for the international transfer of potato genetic resources. Am. potato J.,1979, 56 (I), I: I-IO.

234. Roguski K. Gjospodarczy acpekt wirusa S w nowich odmianach ziemniaka. Zeszyty prob. post. Nauk ralni - ch. War-wa, 1978, 214: 155-162.

235. Ross, A.F. Local lesion formation and virus production follo= wing simultaneous inoculation with potato viruses X and Y.-Phytopathology, 1950, 40, I; 24c.

236. Ross A.F. Systemic acquired resistance induced by localised virus infections in plants virology, 1961, 14: 340-358.273*Rozendaal A. Niluwe virus problem biy de aardappel. Meded nauk, 1954, 8: 94-98.

237. Rozendaal A., Brust I.H. The significatnce of potato virus Sт"» /-?in seed potato culture. In: Рготг 2 Conf. Potato Virus Dis. Lisse. - Wageningen, 1954, 1955: 120-133

238. Schober В., Weidemann H.L. Der Einflub von Infectionen mit

239. Kartoffelvirus S (PVS) auf die Anfallig keit der Kartoffe-knollen gegenttber Phytophthora infestans (Mont) de Bary.- Nachrichtenbl. Dtsch. Pflanzens. cuhtzdienst (BED), 1982, 34, I» 8-10.

240. Scholz M. Die Bedeutung des S virus fur den Kartoffelbauund Probleme der S virusaaierung. Nachr. Bl. dt. Pflschut-zdienst (Braunschweig), 1962, 8: 174-179»

241. Scholz M. Das resistenaz verhalten einiger Kartoffelsortengegentiber dem S virus und die Moglichkeit der S - virus-sanierunin der Kartoffelczhaltungszucht. - Zuchter, 1964, 13, 34, 5: 219-226.

242. Scholz M. Faktoren die den serologischen S virusnachweis bei Freiland - und Gewachshauspflanzen beeinflussen. - Phytopa-thologische. Zeitschrift, 1963, 32,2: 166-187.

243. Slogteren D.H.M. Serological relatioship of chrysanthemum virus В to carnation latent virus and potato virus M and S.-- Nature, 1962, 195, 4843: 835-836.

244. Smith K.M. On the composite nature of certain potato virus diseases of the mosaic group as revealed by the use of plant indicators and selective methods of transmission.- Proc. Roy. Soc., London, 1931, 109» 251-266.

245. Stасе-Smith R., Mellor F.C. Eradication of Potato Spindle tuber virus by thermotherapy and Axillary Bud culture. Phytopathology, 1970, 60, 12: 1857-1858.

246. Stасе-Smith R., Mellor F.C. Eradication of potato virus X and S by thermotherapy and axillary Bud Culture.- Phytopathology, St. Paul, 1968, 58(2): 199-203.

247. Stone O.M. Factors affecting the growth of carnation plantsfrom shoot apices.- Ann. Appl. Biol., 1963, 52, 2: 199-209.th

248. Svobodova J. Freeing potato plants from virus. Astr. I Int. Congr. Bot., 1954,: 485-486.

249. Thomson A. Heat treatment and tissue culture as a means of freeing potatoes from virus Y. Nature, 1956, 177(4511): 709»

250. Thomson A. Studies of the effect of malachite green on potato viruses X and Y. -Austr. J. of agricultural research, 1956, 7, 5: 428-434.

251. Thomson A.D. Interference between plant viruses. Nature, I958, 181, 4622: 1547-1548.

252. Vaughan E.K., Slogteren D.H.M., San. Potato virus S in Oregon.- Am Potato J. 1956, 33(7):, 218-219.

253. Wang P.J., Huang L.G. Benefical effects of activated charcoal on plant tissue and organ cultures. In vitro., 1976,^2, 3: 260-262.

254. Wetter C., Brandes G. Untersuchungen uberdas Kartoffel S virus.» Phyt op ath. Z., 1956, 26,:8I-92.

255. White P.R. Potentially unlimited growth of excised tomato root, tip in a liquid medium. Plant Physiol, 1934, 9; 585-600.

256. Wihers L.A. Treese preservation of somatic embryos and clonal plantlets of сarrot(Daucus carota L.).-Plant, Physiol.,1979, 63, 3: 460-467.

257. Wright N.S. Combined effects of potato viruses X and S of yield of Netted Gem and White Rose Potatoes.-Am Potato J., 1970, 47(12): 475-478.

258. Wright N.S. The effect of separate infections by potato viruses X and S on Netted Gem potato. Am. potato J.,1977» 54, 4: 147-149.