Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Ультраструктура нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы с синдромом гипогликемии

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бородатая, Елена Васильевна

Введение.

I. Обзор литературы.7

1.1. Характеристика и маркеры нейроэндокринных клеток.

1.2. Нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы.

1.2.1. Нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы с синдромом гипогликемии (инсулиномы).

1.2.2. Нефункционирующие опухоли.

1.3. Множественная эндокринная неоплазия 1 типа (МЭН-1).

1.4. Морфометрические исследования клеток инсулином.

1.5. Ультраструктура эндокринных клеток внеопухолевой ткани ПЖ.

II. Материал и методы исследования.33

2.1. Краткая характеристика больных.

2.2. Электронно-микроскопический метод исследования.

2.3. Морфометрия В-клеток поджелудочной железы.

2.4. Иммуногистохимический метод исследования.

2.5. Список сокращений.

III. Субмикроскопическая организация эндокринных клеток внеопухолевой и опухолевой ткани поджелудочной железы.42

3.1. Особенности ультраструктуры эндокринных клеток внеопухолевой ткани поджелудочной железы.

3.2. Ультраструктура эндокринных клеток типичных инсулином.

3.3.Ультраструктура эндокринных клеток полигормональных инсулином и инсулином при синдроме МЭН-1.

3.4. Морфометрический анализ инсулинсекреторных возможностей опухолевой ткани и В-клеток инсулином.

IV. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Ультраструктура нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы с синдромом гипогликемии"

Актуальность проблемы В настоящее время установлено, что причиной некоторых патологических эндокринных синдромов являются неопластические изменения клеток поджелудочной железы. Островково-клеточные опухоли ПЖ с синдромом гиперинсулинемии (инсулиномы) встречаются чаще других панкреатических нейроэндокринных новообразований (глюкагоном, соматостатином, ВИП-ом и др.) [23, 152, 168]. Причиной гиперинсулинизма при этом является большое количество инсулинсодержащих клеток в опухоли и «неконтролируемый» выброс гормона в кровеносное русло [51].

Большинство нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы (НЭО ПЖ) являются полигормональными [34,51], поэтому их верификация возможна только с учетом всего комплекса клинико-лабораторных данных и морфологических особенностей опухолей на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях. По различным источникам от 50 до 89% НЭО ПЖ продуцируют более 1 гормона £14,34,61,120,136,147,154]. Более 50% инсулином являются полигормональными и способны синтезировать не только инсулин и проинсулин, но и глюкагон, гастрин, соматостатин, ВИП, панкреатический полипептид (РР) и др. гормоны в разных сочетаниях. Следует отметить, что у больных с полигормональными инсулиномами манифестирующим клиническим симптомом чаще всего остается гипогликемия [34,166].

Морфологические исследования на светооптическом уровне без применения иммуногистохимических методик не дают никакой информации относительно функциональной активности опухоли. Требуются количественные критерии секреторной активности опухоли, по которым можно будет судить о большинстве функциональных параметров неоплазмы. Из существующих методов наиболее информативными и взаимодополняющими являются иммуногистохимия и электронная микроскопия. Необходимо подчеркнуть, что с помощью электронной микроскопии в клетке выявляются даже единичные гранулы, что лежит выше чувствительности иммуногистохимического метода [47].

Современная трактовка результатов электронно-микроскопических исследований инсулином остается дискуссионной, так как эти опухоли сильно различаются по структуре и функциональной активности. Даже в пределах одного и того же образца наблюдается неоднородное распределение типов клеток и отмечается их различная секреторная активность. В некоторых инсулиномах цитоплазма клеток переполнена секреторными гранулами, а в других их мало, или они полностью отсутствуют. По-видимому, без учета всех качественных и количественных различий в опухолевых клетках невозможно судить о степени функциональной активности всей опухоли [34,44,50].

По классификации Creutzfeldt W. [60] на ультраструктурном уровне могут быть верифицированы опухоли только 1-го (с типичными) и 2-го (как с типичными, так и с атипичными гранулами) типов, что соответствует опухолям группы А по классификации Berger М. [90] с высоким содержанием инсулина и умеренно повышенным проинсулина. Поэтому необходима верификация типичных и атипичных секреторных гранул с использованием количественных критериев, получаемых с помощью морф о метрического анализа. Применение количественных и качественных характеристик секреторных гранул, сопоставление с клиническими и иммуноморфологическими данными позволяет определить тип опухоли и охарактеризовать степень ее функциональной активности в отношении синтеза и секреции гормона. Внедрение такого научного подхода в клиническую практику имеет большое практическое значение. Комплексное использование клинических, гистологических, иммуногистохимических и ультраструктурных данных позволяет в сложных случаях поставить точный диагноз.

Кроме того, недостаточно изучена роль внеопухолевой ткани поджелудочной железы в персистировании или рецидиве эндокринного синдрома. Все это определило цель и задачи настоящего исследования.

Ни в отечественной, ни в зарубежной литературе мы не встретили работ, в которых на большом клиническом материале было бы проведено изучение ультраструктуры клеток инсулином с количественными показателями р-гранул, полученных с помощью морфометрического анализа.

Цель исследования Изучить особенности ультраструктуры гормонпродуцирующих клеток инсулином и получить количественные показатели секреторных гранул для оценки степени функциональной активности опухолевых клеток и опухоли в целом.

В соответствии с поставленной целью предстояло решить следующие задачи:

1) Изучить и дать качественную оценку ультраструктуры клеток нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы с синдромом гипогликемии (инсулином).

2) Изучить ультраструктуру В-клеток внеопухолевой ткани поджелудочной железы у этих больных.

3) Провести морфометрический анализ размеров, количества и плотности распределения в цитоплазме секреторных гранул гормонпродуцирующих клеток инсулином.

4) На основании полученных количественных характеристик гранулярного аппарата изученных опухолей разработать интегральные коэффициенты для оценки степени функциональной активности инсулинсекретирующих клеток и опухоли в целом.

Научная новизна

• Впервые дана комплексная оценка ультраструктуры опухолевых клеток нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы (НЭО ПЖ) с синдромом гипогликемии (инсулином) на основании результатов электронно-микроскопических, ИГХ исследований и морфометрического анализа секреторных (3-гранул.

• В целях оптимизации количественной оценки активности синтетических секреторных процессов в опухолевых клетках впервые был разработан суммарный коэффициент секреторной активности клетки, включающий в себя размеры, количество и плотность распределения в цитоплазме секреторных (3-гранул.

• Разработан интегральный показатель, позволяющий судить о секреторной активности всей опухоли - коэффициент, учитывающий параметры гранулярного аппарата инсулинсекретирующих клеток, их содержание в опухоли и размер новообразования.

Научно-практическая ценность

1) Проведенная работа являлась частью комплексной научной темы МОНИКИ: «Клиническая морфология, закономерности морфогенеза и критерии прогноза диспластических и опухолевых процессов эндокринных желез».

2) Полученные структурно-функциональные характеристики нейроэндокринных опухолей поджелудочной железы и внеопухолевой ткани у больных с синдромом гипогликемии могут быть использованы в качестве дополнительных дифференциально-диагностических критериев.

3) Коэффициенты секреторной активности В-клетки и всей опухоли, а также количество секреторного материала в грануле позволяют оценить степень функциональной активности клетки и неоплазмы в целом.

Апробация работы: материалы диссертации доложены и обсуждены на IV Российском симпозиуме по хирургической эндокринологии (Уфа, 1995 г.); III Всероссийском съезде эндокринологов (Москва, 1996 г.); VII Российском симпозиуме по хирургической эндокринологии (Липецк, 1998 г.); V съезде онкологов РФ (Казань, 2000 г.), межотделенческой конференции МОНИКИ (октябрь, 2001 г.).

По теме диссертации опубликовано 17 научных работ.

Структура диссертации Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста, состоит из введения, четырех глав и выводов, иллюстрирована 2 таблицами, 43 рисунками. Библиография включает 48 отечественных и 118 зарубежных источников.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Бородатая, Елена Васильевна

выводы

1) В нейроэндокринных опухолях с инсулярной активностью выявлен клеточный полиморфизм В-клеток - светлые и темные. По ультраструктурным критериям темные клетки обладают более выраженной синтезирующей активностью, что коррелирует с высоким уровнем инсулина у больных, имеющих опухоль, состоящую преимущественно из этих типов клеток.

2) В нейроэндокринных опухолях ПЖ, обладающих клинически выраженной инсулярной активностью, выявлен полиморфизм инсулинсодержащих гранул в В-клетках: от зрелых до незрелых. От их относительного содержания зависит гормональная активность опухоли.

3) Коэффициент секреторной активности, учитывающий размер гранул, их наполненность и количество, позволяет судить об уровне секреторной активности опухолевой В-клетки.

4) Коэффициент секреторной активности, складывающийся из показателей функциональной активности клеток, их количества в опухоли, дает возможность оценить функциональную активность опухоли в целом. Данный показатель имеет положительную корреляционную зависимость с уровнем инсулина в сыворотке крови обследованных больных.

5) Полигормональные нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы с синдромом гипогликемии состоят из А-, В-, D-клеток. Однако в этих опухолях превалируют В-клетки с повышенной секреторной активностью, что и является причиной развития синдрома гиперинсулинемии.

6) Дифференциальная диагностика нейроэндокринных опухолей ПЖ должна осуществляться с учетом не только размеров опухоли, процентного содержания гормонпродуцирующих клеток и их типов, но и с обязательной количественной оценкой особенностей ультраструктуры секреторных Р-гранул.

112

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бородатая, Елена Васильевна, Москва

1. Антонов А.В. Островково-клеточные опухоли поджелудочной железы // Клиническая эндокринология: Руководство для врачей. М., 1991. - С.262-277.

2. Арямкина О.Л., Дорошенко Т.М., Петренко JI.B. О диагностической ценности триады Уиппла // Клинич. медицина. 1997. - №3. - С.61-63.

3. Внутренние болезни: В 10 кн.: Кн. 7: Пер. с англ. / Под ред. Е. Браунвальда -М.: Медицина, 1996. 720 с.

4. Георгиев Ч., Дамянов Д. Современные взгляды на эндокринные новообразования поджелудочной железы // Хирургия. 1985. - №8. - С. 135-141.

5. Гервазиев В.Б., Егорова И.А. Хирургическое лечение инсулином // Хирургия. -1983.-№11.-С.62-65.

6. Гистологическая классификация опухолей эндокринной системы / ВОЗ. -Женева. 1983.

7. Гитель Е.П., Фадеев В.В. Диагностика и лечение гастроэнтеропанкреатических эндокринных опухолей // Пробл. эндокринологии. 1996. -№6. - С.34-40.

8. Гормонально-активные опухоли поджелудочной железы / Шалимов А.А., Шалимов С.А., Саенко В.Ф. и др. // Сов. медицина. 1986. - №8. - С.40-44.

9. Гофман В.А., Авдеева Г.Б., Борденко Е Я. К диагностике инсулином // Пробл. эндокринологии. 1977. - №5. - С.45-48.

10. Диагностика и выбор метода лечения инсулином / Шалимов А.А., Шалимов С.А., Подпрятова С.Е. и др. //Хирургия. 1983. -№11. - С.62-66.

11. Егоров А.В., Кузин Н.М. Топическая диагностика инсулином // Хирургия. -1996. -№3. -С.71-74.

12. Егоров А.В., Кузин Н.М., Лакреева М.Г. Випомы поджелудочной железы // Хирургия. 1999. - №4. - С.68-72.

13. Елецкий Ю.К., Яглов В.В. Эволюция структурной организации эндокринной части поджелудочной железы позвоночных. М.: Наука, 1978.

14. Иммуногистохимическая диагностика опухолей поджелудочной железы // Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека / Под ред. Петрова С. Б. Казань, 2000. - С. 196-221.

15. Инкреторные гранулоцитомы (апудомы): (Вопросы гистологии, гистогенеза,морфологической диагностики) / Под ред. Головина Д.И. и Хмельницкого О.К -Л.: Медицина, 1983. 125 с.

16. Инсулинпродуцирующие аденомы / Рабкина А.Е., Вейнберг Э.Г., Зайратьянц

17. B.Б. и др. // Арх. патологии. 1967. - т.6. - С.38-44.

18. Казанцева И.А., Гуревич JI.E., Полякова Г.А. Функциональная морфология в диагностике инсулином // Хирургия эндокринных желез: Материалы 4-го (YI) Рос. симпоз. по хирург, эндокринологии СПб., 1995. - С.57-60.

19. Калашников С.А., Клочков Н.Д. К дифференциальной диагностике ульцерогенных опухолей, инсулином и карциноидов // Арх. патологии. 1977. -№1. - С.42-48.

20. Калинин А.П., Радбиль О.С., Нурманбетов Д.Н. Гормонально-активные опухоли поджелудочной железы // Пробл. эндокринологии. 1986. - №2 - С.40-46.

21. Калинин А.В. Новое в диагностике и лечении нейроэндокринных неоплазм желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1997. - №5. - С.72-77.

22. К вопросу о механизме гипогликемий при инсулиноме / Пигарева М.И., Старосельцева Л.К., Казеев К.Н. и др. //Пробл. эндокринологии. 1977. -№2.1. C.11-15.

23. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в клинике: М.; Элиста: АПП "Джангар", 2001. -216с.

24. Локализация В-клеток в ацинусах обычное явление или признак компенсаторного процесса при инсулинзависимом сахарном диабете / Севергина Э.С., Дюжева Т.Г., Разгулина Л.Е. и др. // Арх. патологии. - 1992. -№12. - С. 18-23.

25. Марков И.Н. Диагностика инсулином поджелудочной железы // Хирургия. -1978. -№11. С.6-10.

26. Мозговая М.Е., Романцова Т.Н. Инсулома как причина гипогликемического синдрома // Терапевт, архив 1992. - №4. - С. 106-107.

27. Морозов Ю.А. Диагностика инсулином поджелудочной железы // Хирургия. -1978. №9. - С.23-28.

28. Неврологические нарушения при инсулиномах / Пономарева Е.Н., Казеев К.Н., Куратев Л.В. и др. // Клин, медицина. 1990. - №7. - С.83-86.

29. Неймарк М.И., Калинин А.П. Анестезия и интенсивная терапия в эндокринной хирургии. Барнаул,1995. - 174с.

30. Нейроэндокринные опухоли (апудомы) поджелудочной железы / Калинин А.В., Смолянников А.А., Хазанов А.И, Петрухин С.В. // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1993. - №1. - С.30-32.

31. Нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы / Казанцева И.А., Гуревич Л.Е., Калинин А.П. и др. // Арх. патологии. 1999. -№6. - С.32-38.

32. Николаев О. В., ВейнбергЭ.Г. Инсулома. -М.: Медицина, 1968. -200с.

33. Особенности хирургического лечения инсулином / Шалимов С.А., Радзихов-ский А.П., Кожара С.П. и др. // Вестн. хирургии. 1988. - №3. - С.83-84.

34. Патологоанатомическая диагностика опухолей человека: Руководство / Под ред. Н. А. Краевского, А. В. Смольянникова, Д. С. Саркисова. М., Медицина, 1993. -Т. 2. - С.114 -136.

35. Райхлин Н.Т. Электронная микроскопия в диагностике опухолей человека // Вопр. онкологии. 1983. -№10. - С.80-101.

36. Райхлин Н.Т., Кветной Н.М., Осадчук М.А. APUD-система (общепатологические и онкологические аспекты). Обнинск. - 1993. - Т.1 - 127с. - Т.2 - 108с.

37. Ревской А.Ю., Калашников С.А., Архипов В.Ф. Морфологическая диагностика инсулиномы// Арх. патологии. 1995. - №5. - С.42-46.

38. Случай успешного лечения злокачественной инсулинпродуцирующей опухоли поджедудочной железы / Реутова Е.В., Орел Н.Ф., Бесова Н.С. и др. // Терапев. арх. 1999. -№10. - С.44-45.

39. Современные методы изучения функциональной морфологии эндокринных клеток / Южаков В.В., Райхлин Н.Т., Кветной И.М. и др. (Обнинск, Москва) //Арх. патологии. 1996. -№2. - С.21-28.

40. Топическая диагностика инсулином / Кузин Н.М., Лотов А.Н., Гите ль Е.П. и др.

41. Хирургия. 1996. - №3. - С.50-52.

42. Трофимов В.М., Калинин А.П. Некоторые аспекты диагностики и лечения органического гиперинсулинизма// Клинич. медицина. 1991. - №3. - С. 102-106.

43. ТрэкН.С. Эволюция механизмов секреции инсулина. В кн.: Эволюционная эндокринология поджелудочной железы. JI.: Наука, 1977. - С. 192-203.

44. Уголев A.M., Радбиль О.С. Гормоны пищеварительной системы: физиология, патология, теория функциональных блоков. М.: Наука, 1995. - 283 с.

45. Уранова Е. В., Лебкова Н. П. Ультраструктура В-клеточных опухолей поджелудочной железы (инсулином инсулярных карциноидов) // Арх. патологии. - 1977. - №8. - С.54 -60.

46. Хмельницкий O.K., Никонов А.А. Возможности и ограничения гистологической диагностики АПУДом // Архив патологии. 1986. - №2. - С.67-73.

47. Хмельницкий O.K., Ступина А.С. Функциональная морфология эндокринной системы при атеросклерозе и старении. Л.: Медицина, 1989. - 248 с.

48. Электронно-микроскопическое исследование карциноидов легкого / Райхлин Н.Т., Смирнова Е.А., Полоцкий Б.Е. и др. // Архив патологии. 1999. - №5. -С.69-79.

49. Яглов В.В. Эволюционная эндокринология поджелудочной железы. Л., 1977. - С. 82-89.

50. Яглов В.В. Актуальные проблемы биологии диффузной эндокринной системы // Арх. анатомии, гистологии, эмбриологии. 1989. - вып. 1. - С. 14-29.

51. Akagi Т., Fujii Y. Histology, ultrastructure and tissue culture of human insulinomas // Cancer. 1981. - v.47 - p.417 - 424.

52. Alexrod L., Levit L.L. Hypoglicemia// Jolin's diabetes mellitus. (In ed. Kanh R.C., Cordon C., Weir M.D.), Philadelphia, Baltimore, Hongkohg, London, Munich, Sidney, Tokio, 1994. p. 976-999.

53. Amphicrine cells, dysplasias and neoplasias / Chejfec G., Capella C., Solcia E. et al. //Cancer. 1985. - v.56. -p.2683-2690.

54. Amyloid in polypeptide hormone producing tumors / Westermark P., Grimelius L.,

55. Polak J. et al. // Tumors Lab. Invest. 1977. - y.№2. - p.212-215.

56. Assessment of immunoassays for insulin in diagnostic tests for insulinoma / Shimizu Т., Sazakuma F., Ishikawa O. et al. // Diabetes. Res. Clin. Pract. 1994. - v.26. - №6. -p. 149-154.

57. Balle A.E. Molecular mechanisms of neoplasia in multiple endocrine neoplasia type 1 related and sporadic tumors of the pancreatic islet // End. Metabolism Clin. North Amer. - 1994. - v.23.-№l. - p.109-115.

58. Bani D., Bani Sacchi Т., Biliotti G. Nesidioblastosis and intermediate cells in the pancreas of patients with hyperinsulinemic hypoglycemia // Virch. Arch. B. (Cell Pathol.). 1985. - v.48. - p. 19-32.

59. Bani Sacchi Т., Bani D., Billioti G. The endocrine pancreas in patients with insulinomas. An immunocytochemical and ultrastructural study of the nontumoral tissue with morphometrical evalution // Int. J. Pancreatology. 1989. - v.5. - p. 11-28.

60. Bani Sacchi Т., Bani D., Billioti G. Immunocytochemical and ultrastructural abnormalities of islet tissue in patients with VIP-producing tumors of the pancreas // Pancreas. 1992. - v.7. - p.601-610.

61. Beta-islet cell tumors of the pancreas: results of a study of 1067 cases / Stefanini P., Carboni M., Patrassi N. et al. // Surgery. 1974. - v.75. - p.597-605.

62. Bishop A.E., Power R.F., Polak J.M. Markers for neuroendocrine differentiation // Pathol. Res. Pract. 1986. - v. 183. - p. 119-128.

63. Bloodworth J.M.B., M.D. Williams & Wilkins. Endocrine Phatology: (General and Surgical). Baltimore; London,1982. - p.586-613.

64. Boden G. Glucagonoma and insulinomas // Gastroenterol. Clin. N. Amer. 1989. -v. 18. -p.831-845.

65. Bordi C. Endocrine pancreas // Histochemistry in pathologic diagnosis. New York: Marcel Dokker, 1986. -p.457-479.

66. Bordi C. Endocrine tumor of the pancreas: the pathalogisf s approach // Acta Biomed. de "L'Ateneo Parmeuse". 1993. - v.64 - p. 195-204.

67. L. Bouwens. Citokeratins and cell differentiation in the pancreas // J. Pathology. -v.184. p.23 4-23 9.

68. Calcitonin producing insulinoma. An immimohistochemical and electron microscopic study / Ooi A., Nakanishi I., Kameya T. et al. // Acta Pathol. Jpn. - 1986. -v36(12). - p. 1897-1903.

69. Chemical and biological aspects of insulin and proinsulin / Steiner F.F., Terris S., Chan S.J., Rubinstein A.N. // In: Insulin. 1976. - p.53-107.

70. Chromogranin A in pancreatic islet: cellular and subcellular distribution / Ehrhart ML, Grube D., Bader M.F. et al. // Histochem. Cytochem. 1986. - v.34. - p. 1673-1682.

71. Chromogranin А, В and С in Human adrenal medulla and endocrine tissues / Hagn C., Schmid K.W., Fisher-Colbrie R. et al. // Lab. Invest. 1986. - v.5. - p.405-411.

72. Chromosome 11 allele loss in sporadic insulinoma / Patel P., O Rahilly S., Buckle V. et al. // Clin. Pathol. 1990. - v.43. -p.377-378.

73. Clinical characteristics, treatment and survival in patients with pancreatic tumors causing hormonal syndromes / Grama D., Eriksson В., Martensson H. et al. // World J. Surg. 1992.-v.16. -p.632-639.

74. Co-localization of islet amyloid polipeptide and insulin in the B-cell secretory granules of the human pancreatic islets / Lukinius A., Wilander E., Westermark G.T. et al. // Diabetologia. 1989. - v.32. - p.240-244.

75. Creutzfeldt W. Endocrine tumors of the pancreas. // Volk B.W., Wellman K.F. (Eds.): The diabetic pancreas. London: Bailere Tandall, 1977. -p.551-590.

76. Creutzfeldt W. Endocrine tumors of the pancreas: clinical, chemical and morphological findings // Monogr. Pathol. 1980. - v.21. - p.208-230.

77. Cryer P.E. Glucose counterregulation: the physiological mexanisms that prevent of correct hypoglycemia. In.: Frier B.M., Fisher B.M. eds Hypoglycemia and diabetes: clinical and physiological aspects. London: Edward Arnold, 1993. - p.34-55.

78. Cubilla A.L., Hajdi S.J. Islet cell carcinoma of the pancreas //Arch. Pathol. v.99. -1975. - p.204-207.

79. Davis M.K., Shamoon H. Deficient counterregulatory hormone responses during hypoglycemia in a patient with insulinoma. // J. Clin. End. Metab. 1991. - v.72. -p.788-792.

80. Direct identification of prohormone conversion site in insulin secreting cell / Orci L., Ravazolla M., Amherdt M. et al. // Cell. - 1985. - v.42. - p.671-684.

81. Distribution patterns of proinsulin and insulin in human insulinomas: an Immuno-histochemical analisis in 76 tumors / Roth J., Kloppel G., Madsen O. et al. // Yirch. Arch. В (Cell Pathol.). 1992. - v.63. - p.51-61.

82. Dockray G.J. Regulatory peptides. // Sci. Progr. 1988. - v.72. -p.21-35.

83. Dustin P., Tondeur M., Li Bert J. Metabolic and storage diseases. // Johannessen J.V.,ed. Electron microscopy in human medicine. New York: Mcgraw - Hill, 1978. -p. 149-245.

84. Electron microscope localization of insulin-like immunoreactivity of conventionally processed human insulinomas / Berger G., Berger F., Dutrieux N. et al. // Virchows Arch А. 1988. - v.412. - p.443-450.

85. Electron-microscopical immunocytochemical study of a pancreatic islet amyloid polipeptidoma / Likinius A., Wilander E., Stridsberg M. et al. // Endocr. Pathol. -1991. v.2. -p.169-175.

86. Endocrine tumors of the pancreas / Gilbey S.G., Turner R.C., Wynik D. at al // JolnTs diabetes mellitus.(In ed.: Kahn C.R., Gordon C., Weir M.D.), Philadelphia, Baltimore, Hong Kong, London, Munich, Sydney, Tokio, 1994. p. 1000-1021.

87. Eriksson В., Arnberg H., Oberg K. Chromogranins new sensitive markers for neuroendocrine tumors // Acta Oncol. - 1989. - v.28. - p.325-329.

88. Eriksson В., Oberg K. An update of the medical treament of malignant endocrine pancreatic tumors // Acta Oncol. 1993. - v.32. - №2. - p.203-208.

89. Friesen S.R. Tumors of the endocrine pancreas //N. Engl. J. Med. 1982. - v.306. -p.580-590.

90. Functional and morphologic characterization of human insulinomas / Berger M., Bordi C., Cupper H.-J. et al. // Diabetes. 1983. - v32. - p.921-931.

91. Galiber A.K., Reading С., Charbeneaw I.W. // Radiology. 1988. - v. 166. -p.405-408.

92. Ghadially F.N. Ultrastructural pathology of the cell and matrix. London: Butter-worth, 1988.

93. Glenner G.G. Amyloid deposits and amyloidosis. The fibrilloses. // N Engl. J. Med. -1980. -v.302. p. 1283-1292; 1333-1343.

94. Glover D.J., Glick J.H. Oncologic Emergenciens and special complications. // Medical Oncology. Macmilllan Co. New York, 1985. p. 1261-1326.

95. Grube D. The endocrine cells of the digestive system. Amines, peptides and modes of action//Anat. Embiyol. 1986. - v. 175. - №2. - p.151-162.

96. Glycemic thesholds for activation of glucise counterregulatory systems are higher than the threshold for symptoms / Schwartz N.S., Clutter W. E., Shah S.D., Cryer P.E. // J. Clin. Invest. 1987. - v.79. - p.777-781.

97. Halban P.A. Structural domains and molecular lifestylesof insulin and its precursors in pancreatic beta cell // Diabetologia. 1991. - v.34. - p.767-778.

98. Hassan M.O., Gogate P.A. Malignent mixed exocrine-endocrine tumor of the pancreas with unusual intracytoplasmic inclusions // Ultrastr. Path. 1993. - v. 17 - p.483-493.

99. Heitz Ph.U. Multiple hormone producing pancreatic endocrine tumors // Acta endocr. 1978. - Suppl. 215. - p.56-57.

100. Heitz Ph.U. Pancreatic endocrine tumors. In: Kloppel G., Heitz Ph.U.(Eds.): Pancreatic Pathology. Churehil Livingstone, Edinburgh, Scotland, 1984. p.206-232.

101. Hierarchy of glicemic threshods for counterregulatory hormone secretion, symptoms and cerebral dysfunction / Mitrakou A., Ryan C., Yeneman T. et al. // Am. J. Physiol. 1991. - v.260. - p.67-74.

102. Hoist J.J. Hormonal regulation of digestive secretion // Molecular and cellular, fuses of digestion. Ed. P. Desnuelle. Amsterdam: Elservier, 1986. - p.79-112.

103. Immunohistochemical detection of chromogranin and neuron-specific enolase in pancreatic endocrine neoplasms / Lloyd R.V., Mervak Т., Schmidt K. et al. // Am.J. Surg. Pathol. 1984. -v.8. -p.607-614.

104. Immunohistochemical stady of 100 pancreatic tumors in 28 patients with multiple endocrine neoplasia type I / Le Bodic M.-F., Heymann. M.- F., Lacomte M. et al. // Amer. J. Surg. Path. 1986. -v.20(ll). - p. 1378-1384.

105. Immunogold staining procedure for the localization of regulatory peptides / Varndell I.M., Tapia F.G., Probert L. et al. // Peptides. 1982. - v.3. - p.259-272.

106. Immunological studies on the occurence and properties of chromogranin A and В and secretogranin II in endocrine tumors / Weiler R., Fischer-Colbrie R., Schmidt K.W. et al. // Am. J. Surg. Pathol. 1988. - v. 12(11). - p.877-884.

107. Insulin and C-peptide co-localization in the B-granules of normal human pancreas and insulinomas / Kalina M., Grimelius L., Gedermark B. et al. // Virch. Arch. A Path.Anat. 1989. - v.416. - p. 19-23

108. Insulin surrogates in insulinoma / O'Brien Т., O'Brien P.C., Service F.J. et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1993. - v.77. - p.448-451.

109. Insulinoma / Haider P.J., Hafeezunnisa P., Pair R., Samsi A.B. // J. Postgrad. Med. -1992. v.38. - №4 - p.202-204.

110. Insulinoma. An Immunocytochemical and morphological analisis of 95 cases / Liu T-H., Tseng H.-C, Zhu J. et al. // Cancer. 1985. - v.56. - p. 1420-1429.

111. Insulinoma : diagnostic elements. 13 cases / Hazard J., Simon D., Perlemutor L. et al. //Press. Med. 1985. - v. 14. -№ 34. - p. 1775-1778.

112. Insulinoma experience from 1950 to 1995 / Boukhman M.P., Karm J.H., Shaver J. et al. // West J. Med. - 1998. - v. 169. - p.98-104.

113. Insulinoma pitfalls in preoperative localization / Owens L.V., Huth S.F., Cance W.G. et al // Eur. J. Surg. Oncol. 1995. - v.21, №3. - p.326-328.

114. Insulinomas associated with multiple endocrine neoplasia type I: the need for a different surgical approach / Demeure M., Klonoff D., Karam J. et al. // Surgery. -1991. -v.110. p.998-1004.

115. Intestinal development in insulinoma containing psammoma bodies / Warner T.F.C.S., Baron J.J., Mallin S.R., Golding J.L. // Arch. Pathol. Lab. Med. 1980.v. 104. p.432-437.

116. Islet cell carcinoma of the pancreas. A study of 98 patients / Verikatesh S., Ordonez N.G., Ajani J. et al. // Cancer. 1990. - v.65. - p.354-357.

117. Islet cell tumor: insulinoma / Kuzoda A., Morioko Y., Kasahara K., Tenmoki S. // Nippon. Geka Gakkai Zasshi. 1984. - v. 85, №9. - p. 1035-1038.

118. Kloppel G., Heitz Ph.U. Classification of Normal and Neoplastic Neuroendocrine Cells //Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. - v.733. - №15. - p. 18-23.

119. Kloppel G., Heitz Ph.U. Pancreatic endocrine Tumors // Path. Res. and Pract. -1988. v. 183. - №2. - p. 155-168.

120. Kloppel G., Veld P.I. Neural and endocrine markers as diagnostic tools in pancreatic and gastrointestinal endocrine tumors // Acta Histochem. 1990. - Suppl. - Band XXXVIII. - v.5. - p.93-98.

121. Koji Hino et al. A case report of non-functioning islet cell tumor // J. of Clin. Elec. Microscopy. 1992. - v.25. - №5-6. - p.650-651.

122. Lacy P.E. Beta-cell secretion from the standpoint of pathobiologist // Diabetes. -1970. v.19. - p.895-905.

123. Laycock J.F., Peter H. Wise. Essential Endocrinology. Third Edition . Oxford university press, 1996. -p.275-281.

124. Localization and peptide content of endocrine pancreatic tumors / Martenson H., Bottcher G., Mercadier M. et al. //Ann. Surg. 1990. - v.212.-№5. - p.607-614.

125. Loss of heterozygosity on chromosomes 1 and 11 in carcinoma of the pancreas / Ding S.F., Habib N.A., Dethanty J.D.A.et al. // Br. J. Cancer. 1992. - v.65. - p.809-812.

126. Management of nonfunctioning islet cell tumors of the pancreas / Dial P.F., Braasch J.W., Ross P.L. et al. // Surg. Clin. North. Am. 1985. - v.65. - p.291-299.

127. Markers for neural and endocrine cells in pathology / Heitz PH. U., Roth J., Zuber Chr. et al. // In M. Gratzl, L. Langley, Eds.: Markers for Neural and Endocrine Cells, Verlag Chemia. Weinheim, 1991. p.203-216.

128. McCall Al. Effects of glucose deprivation on glucose metabolism in the central nervous system // In.: Frier B.M., Fisher B.M., eds. hypoglycemia and diabetes: clinical and physiological aspects. London: Edward Arnold, 1993. p.56-71.

129. Morphologic study of three cases of insulinoma / Yamashita Y., Yosniko Y., Yokoto T. et all. // Cancer .- 1985. v.55 - p.841-847.

130. Multiple endocrine neoplasia type 1 gene maps to chromosome 11 and is lost in insulinoma/ Larsson C., ScogseidВ., Oberg R. et al. //Nature. 1988. - v.32. - p.85-87.

131. Multiple endocrine neoplasia type-1 (MEN-1) revisited / Padberg В., Schroder S., Capella C. et al. // Virch. Arch. 1995. - v.426. - p.541-548.

132. Nesidioblastosis and endocrine hyperplasia of the pancreas: a secondary phenomenon / Goudswaard W.B., Houthoff H.S., Koudstaal S. et al. // Hum.4Pathol. 1986. v. 17. -p.46-53.

133. Nesidiodysplasia and nesidioblastosis of infancy. Structural and functional correlations with the syndrome of hyperinsulinemic hypoglycemia. / Gould V.E., Memoli V.A., Dardi L.E. et al. // Pediatr. Pathol. .- 1983. v. 1. - p.7-31.

134. Neuroendocrine pancreatic tumors: clinical presentation, biochemical and histopathological findings in 84 patients / Eriksson В., Arnberg H., Lindgren P.G. et al. //J. Int. Med. 1990. - v.228. - p. 103-113.

135. Neuron-specific enolese is produced by neuronendocrine tumors / Tapia F. J., Baibosa A.J.A., Marangos P.J. et al. // Lancet (April). 1981. - v. 11. - p.808-811.

136. Neuropeptides and their Receptors / Hakanson R., Bottcher G., Ekblad E. et al.// Eds. T.W. Schwartz et al. Copenhagen, 1990. - p.211-232.

137. Nonfunctioning islet tumors / Kent R.B., Van Heerden J.A., Weiland L.H. et al. // Ann. Surg. 1981. - v.193. - p.185-190.

138. Nonfunctioning malignent neuroendocrine tumors of the pancreas / Eckhauser F.E., Cheung P.S., Vinik A.L. et al. // Surgery. 1986. - v. 100. - №6. - p.978-987.

139. Nonfunctioning pancreatic endocrine tumors. An immunohistochemical and electron microscopic analisis of 26 cases / Liu T.-H., Zhu J., Cui Q. et al. // Path. Res. Pract. 1992. - v.188. - p.191-198.

140. Oberg К. Biological aspects of neuro endocrine gastroenteropancreatic tumours .//Digestion. -1996. -v. 57 (suppl. 1).- p.42-44.

141. Oberg K. The ultimate biochemical diagnosis gastroenteropancreatic tumours.//Digestion.-1996.-v.57 (suppl. 1).- p.45-47.

142. Pancreatic endocrine tumors: Immunocytochemical analisis of 125 tumors / Heitz Ph.U., Kasper M., Polak M., Kloppel G // Hum. Pathol. 1982. - v. 13. - p.263-271.

143. P53 independent expression of the cyclin-dependent kinase inhibitor p21 in pancreatic carcinoma / Di Giuseppe J., Redston M., Yeo Ch. J. et al. // Am. J. Pathol.- 1995. v.147. - №4. - p.884-888.

144. Pancreatic islet cell tumors / Broughan T.A., Leslie J.D., Soto J.M., et al. // Surgery.- 1986. v.99. - №6. - p.671-678.

145. Pancreatic polypeptide in insulinomas, gastrinomas, VIP-omas and glucagonomas / Polak J.M., Bloom S.R., Adrian Т.Е. et al. // Lancet. 1976. -№1. - p.328-336.

146. Pancreatic somatostatinoma. Clinical features and phisiological implications / Larsson L-I., Hirsch M.A., Hoist J.J. et al. // Lancet. 1977. - v. 1. - p.666-668.

147. Pancreatic tumors in multiple endocrine neoplasia type 1: Clinical presentation and surgical treatment / Grama D., Skogseid В., Wilander E. et al. // World J. Surg. -1992. -№16. -p.611-619.

148. Reversibility of unawareness of hypoglycemia in patients with insulinomas / Mitrakou A., Fanelli C., Veneman T. et al. // N. Engl. J. Med. 1993. - v.329. -p.834-839.

149. Revised classification of neuroendocrine tumors of the lung, pancreas and gut / Capella C., Heitz Ph.U., Hofler H. et al. //Virch. Arch. 1995. - v.425. - p.547-560.

150. Service F.J. Hypoglycemic Disorders // The New Eng. J. of Medicine. 1995. -v.332. -№17.-p. 1144-1152.

151. Soga J., Yakuwa Y., Osaka M. Insulinoma / hypoglycemic syndrome: a statistical evaluation of 1085 reported cases of a Japanese series // J. Exp. Clin. Cancer Res.-1998. v. 17(4). -p.379-388.

152. Solcia E., Capela C., Kloppel G. Tumors of the Pancreas. Atlas of Tumor Pathology. Third Series, Fasc. 20. Bethesda: Marylend, 1997.

153. Solcia E., Kloppel G., Sobin L.H. Histological Typing of Endocrine Tumours //1. Springer. 2000.

154. Steiner D.F., James D.E. Cellular and molecular biology of the beta cell // Diabetologia. 1992. - v.35(suppl 2). -p.41-48.

155. Surgery for benign insulinoma: An international review / Rothmund M., Angelini L., Brunt M. et al. // World J. Surg. 1990. -№14. - p.393-399.

156. Surgical management of insulinoma associated with multiple endocrine neoplasia type I / O'Riordain D.S., O'Brien Т., van-Heerden J.A. et al. // World J. Surg. -1994. v. 18,№4. - p.488-493 (discussion 493-494).

157. Synaptophysin expression in neuroendocrine neoplasms as determined by immunocytochemistry / Gould V.E., Weidenmann В., Lee I. et al. // Am. J. Pathol. -1987. v. 126. -p.243-257.

158. Synaptophysin: a marker protein for neuroendocrine cells and neoplasms / Weidenmann В., Franke W.W., Kuhn C. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci.(USA).1986. -v.83. -p.3500-3504.

159. Tandler В., Riva A. Altered serous granules in acinar cells of human parotid gland // Ultrastruct Pathol. 1990. - vol. 14. - p. 11-19.

160. Teitelman G. On the origion of pancreatic endocrine cells, proliferation and neoplastic transfomation//Tumor Biol. 1993. -v.14. - p.167-173.

161. The phospholipase С 3 gene located on the MEN-1 region shows loss of expression in endocrine tumours / Weber G., Friedman Т., Giimond S. et al. // Hum. Mol. Genet. 1994. - v.3. - pl775-1781.

162. The role of morphometry in predicting prognosis in pancreatic islet cell tumors / Kenny B.D., Sloan J.M., Hamilton P.W. et al. // Cancer. 1989. - v.64. - p.460-465.

163. Trump В., Jones R. Diagnostic Electron microscopy//New York. 1981. - v.3 -p.466-485.

164. Ultrastructural studies of the ontogeny of fetal human and porcine endocrine pancreas, with special reference to colocalization of the four major islet hormones /126

165. В заключении автор пользуется возможностью поблагодарить всех сотрудников и коллег, которые непосредственно способствовали выполнению данной работы.

166. Автор выражает глубокую благодарность руководителю патологоанатомического отделения профессору Казанцевой Ирине Александровне за оказанное внимание, доверие и помощь в ходе выполнения работы.

167. Автор сердечно благодарен своему руководителю профессору Игорю Александровичу Морозову, высокая компетентность, творческий потенциал и опыт которого, а также доброжелательность и требовательность помогли реализовать основные идеи работы.

168. Автор признателен своему научному консультанту чл.-корр. РАМН профессору Ариану Павловичу Калинину за содействие и помощь.

169. Автор выражает признательность всем коллегам и сотрудникам МОНИКИ, которые способствовали тому, чтобы данная работа состоялась: к.б.н., ведущему науч. сотр. Ларисе Евсеевне Гуревич за помощь в осуществлении иммуношстохимических исследований.

170. Автор признателен руководству и сотрудникам МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского за доверие и поддержку.