Участие серотониновых 5-НТ1А рецепторов в регуляции различных видов генетически детерминированного защитного поведения

Науменко, Владимир Сергеевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Участие серотониновых 5-НТ1А рецепторов в регуляции различных видов генетически детерминированного защитного поведения
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Участие серотониновых 5-НТ1А рецепторов в регуляции различных видов генетически детерминированного защитного поведения"

На правах рукописи

НАУМЕНКО Владимир Сергеевич

УЧАСТИЕ СЕРОТОНИНОВЫХ 5-НТ1А РЕЦЕПТРОВ В РЕГУЛЯЦИИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННОГО ЗАЩИТНОГО ПОВЕДЕНИЯ

03.00.13 ФИЗИОЛОГИЯ Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Новосибирск 2006

Работа выполнена в Лаборатории нейрогеномики поведения Института цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск

Научный руководитель: д.м.н., проф. Попова Н.К.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор Дыгало H.H. Институт цитологии и генетики СО РАН г. Новосибирск

доктор биологических наук, Идова Г.В.

Институт физиологии СО РАМН г. Новосибирск

Ведущее учреждение — Московский Государственный Университет им. М.В. Ломоносова

Защита состоится __ 2006 г. на заседании

диссертационного совета Д 001.014.01 при Институте физиологии СО РАМН (630017, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 4)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института физиологии СО РАМН

Автореферат разослан_2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Елисеева А.Г.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

Понимание механизмов нормального и патологического поведения человека представляет собой одну из актуальных проблем современной нейробиологии и медицины. Тревожность и депрессия являются самыми распространенными среди психических расстройств человека и значительно снижают качество жизни (The European Health Report, 2005), а агрессивность лежит в основе асоциального и криминального поведения (World Report of Violence and Health, 2002). Механизмы и патогенез этих психоэмоциональных и поведенческих отклонений недостаточно изучены.

. Важную роль в исследовании этой проблемы могут сыграть экспериментальные модели на животных, так как считается, что элементы поведения животных могут частично моделировать соответствующие психопатологии человека. Кроме того, известно, что тревожность, агрессивность и депрессия тесно связаны с некоторыми видами защитного поведения животных (Dixon, 1998).

Защитное поведение представляет собой комплекс эволюционно закрепленных врожденных реакций на неодушевленные и одушевленные угрожающие стимулы внешней среды (Попова, 1997; Popova, 1999). Первые включают такие стимулы как резкий звук, свет, запах, экстремальные перепады температуры. Зимняя спячка некоторых видов животных и сопровождающая ее глубокая гипотермия являются эволюционно закрепленным, адаптивным видом защитного поведения, проявляющимся в ответ на резкое падение температуры (Попова, 1997; Popova, 1999). Вторые сигнализируют о приближении хищника или особи того же вида, конкурирующей за самку, территорию или пищу, и могут вызывать альтернативные виды защитного поведения - агрессию и реакцию замирания (каталепсию). Среди различных форм агрессивного поведения (Моуег, 1968; Maxson, 2000) наибольший интерес вызывают агрессия нападения, или межеамцовая агрессия (offensive aggression), и агрессия, вызванная страхом, или защитно-оборонительная агрессия (defensive aggression; Maxson, 2000). Каталепсия, представ ля кмцая собой состояние длительной обездвиженности с пластическим тонусом мускулатуры, привлекает внимание исследователей еще и потому, что наблюдается у человека при некоторых тяжелых формах нервных и психических патологий (Sanberg et al., 1988; Singerman, Raheja, 1994) или как негативный эффект лечения нейролептиками (Fricchione, 1985).

Все виды защитного поведения находятся под контролем генетических факторов, что убедительно доказывают эксперименты по селекции: 1) на повышенную или сниженную агрессивность мышей (Lagerspetz, Lagerspetz, 1971; Ciaranello et al., 1974), крыс (Беляев, Бородин, 1982; Plyusnina, Oskina, 1997) и серебристо-черных лисиц (Трут, 1969); 2) на повышенную предрасположенность крыс к реакции замирания - каталепсии (Барыкина и др., 1983).

Одним из основных факторов, посредством которых осуществляется физиологический контроль генетически детерминированного защитного позедения, является важнейший медиатор мозга - серотонин (5-НТ). Имеется множество литературных данных, свидетельствующих о существенной роли 5-НТ в регуляции разнообразных физиологических процессов и многих форм поведения (Попова и др., 1978; Jacobs, Fomal, 1995; Lucki, 1998). Поразительная полифункциональность серотонина обусловлена прежде всего наличием многочисленных рецепторов, опосредующих воздействие этого медиатора на нейроны (Saudou and Hen, 1994;

Попова, Куликов, 2003). К настоящему времени с помощью молекулярно-биологических методов выявлено 14 различных серотониновых рецепторов, экспрессирующихся в мозге млекопитающих. Эти рецепторы были классифицированы в 7 типов, принадлежащих к двум суперсемействам (Saudou, Hen, 1994; Barnes, Sharp, 1999).

Среди такого огромного разнообразия рецепторов 5-HTia подтип играет ключевую роль в ауторегуляции активности серотониновых нейронов и секреции нейротрансмиттера и, следовательно, вовлечен в регуляцию всех форм поведения и психических процессов, контролируемых серотонином (Barnes, Sharp, 1999). Более того, имеются многочисленные доказательства участия 5-HTia рецепторов в механизме депрессивных психозов (Maes, Meltzer, 1995) и действия большинства известных антидепрессантов (Borsini, 1994; Blier, de Monti gny, 1994) и анксиолитиков (De Vry et al., 1991; Handley, 1995).

Имеется множество данных о вовлечении 5-HTia рецепторов в терморегуляцию (Hjorth, 1985; Goodwin et al., 1987), регуляцию сна (Попова и др., 1985; Августинович, 1987), агрессивного поведения (Olivier et al., 1995; de Boer et al., 1998; Pruus et al-, 2000) и каталепсии (Kulikov et al., 1993; Neal-Beliveau et al., 1993).

Однако большинство существующих работ проведены с помощью фармакологических методов и позволяют делать выводы только о вовлечении 5-HTia рецепторов в регуляцию вышеперечисленных типов защитного поведения. Имеется очень мало данных о роли этих рецепторов в генетическом контроле разных видов защитного поведения и ничего не известно об экспрессии гена 5-HTia рецептора при различных генетически детерминированных видах защитного поведения. Кроме того, до сих пор не установлено, существует ли прямая зависимость между плотностью, функциональной активностью рецепторов и экспрессией кодирующего их гена.

Цель настоящего исследования: используя уникальные генетические модели межеамцовой агрессии, агрессии по отношению к человеку, каталепсии и зимней спячки, выяснить, какова роль 5-HTia рецепторов в регуляции этих форм поведения и существует ли связь функциональной активности и плотности рецепторов 1А подтипа с интенсивностью экспрессии кодирующего их гена

Научная новизна работы В настоящей работе впервые:

• Разработан и верифицирован новый метод количественного определения уровня мРНК 5-HTia рецептора в мозге. Модифицирован метод определения примесей геномной ДНК в образцах общей РНК и создан метод количественного определения примесей геномной ДНК в образцах кДНК.

• Показано, что функциональная активность 5-HTia рецепторов в мозге крыс-пасюков при селекции на повышенную агрессию по отношению к человеку (defensive aggression) снижается на фоне понижения уровня мРНК 5-HT]a рецептора в среднем мозге.

• Выявлено падение чувствительности 5-HTia рецепторов в мозге высокоагрессивных мышей (offensive aggression) с генетическим нокаутом МАО А (линия Tg8) при повышенном уровне мРНК 5-HTiA рецептора во фронтальной коре и миндалевидном комплексе.

рецепторов: генетически детерминированная каталепсия связана с повышением чувствительности 5-HTia рецепторов на фоне снижения уровня мРНК.

• Определена последовательность нуклеотидов фрагмента гена, кодирующего 5-НТ,А рецептор в мозге зимоспящих сусликов, и показана его гомология с генами, кодирующими 5-HTia рецептор в мозге крысы, мыши и человека.

• Показано участие 5-HTia рецепторов в механизмах зимней спячки сусликов. Обнаружено, что погружение в зимнюю спячку связано с повышением уровня мРНК 5-HTia рецептора в гиппокампе, в то время как состояние зимней спячки характеризуется относительно высоким уровнем мРНК 5-HTia рецептора в среднем мозге. Пробуждение сопровождается повышением уровня мРНК 5-HTia рецептора в гиппокампе и снижением в среднем мозге.

• Показано, что регуляция состояния 5-HTiA рецепторной системы в мозге животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения может осуществляться как на посттранскрипционном уровне, так и на уровне транскрипции.

Теоретическая и научно-практическая ценность работы Полученные в настоящей работе данные расширяют представления о механизмах, лежащих в основе развития различных видов генетически детерминированного защитного поведения, таких как агрессивность, каталепсия, зимняя спячка и сопряженная с ней гипотермия. Выявленные особенности регуляции экспрессии гена 5-HTia рецептора на моделях животных с генетической предрасположенностью к тому или иному виду оборонительных реакций могут быть полезны дтя разработки фармакологических агентов, направленных на модуляцию агрессивности, тревожности, депрессии и нарушений сна у человека.

Разработан более простой, чем существовавшие, метод количественного определения экспрессии генов, в том числе не содержащих интронов. Модифицирован метод определения загрязнения образцов общей РНК геномной ДНК и создан метод оценки примесей геномной ДНК в образцах кДНК, позволяющий оценивать влияние загрязнения на количественное определение экспрессии гена.

Положения, выносимые на защиту

1. Серотониновые 5-HTia рецепторы мозга вовлечены в регуляцию защитного поведения: агрессивного поведения (offensive и defensive aggression), каталепсии и зимней спячки.

2. Селекция крыс на повышенную агрессивность, вызванную страхом (defensive aggression), приводит к снижению функциональной активности 5-НТ|А рецепторов на фоне снижения в среднем мозге уровня мРНК 5-ИТ|А рецептора.

3. Генетически детерминированная агрессия нападения (offensive aggression) у мышей связана со снижением чувствительности 5-HTia рецепторов при повышении уровня мРНК 5-HTia рецептора во фронтальной коре и миндалевидном комплексе.

4. Реакция замирания, являющаяся противоположным агрессивному поведению видом защитной реакции, характеризуется противоположными изменениями функциональной активности 5-11Т]Д рецепторов: генетически детерминированная каталепсия у мышей связана с повышением чувствительности 5-НТ1л рецепторов на фоне снижения уровня мРНК 5-HTia рецептора.

5. В различные фазы годового цикла происходят существенные изменения состояния 5-HTja рецепторной системы в различных структурах мозга зимоспящих сусликов. Погружение в зимнюю спячку и пробуждение связано с повышением уровня мРНК 5-HTia рецептора в гиппокампе. Состояние зимней спячки связано с относительно высоким уровнем мРНК 5-НТм рецептора в среднем мозге, в то время как пробуждение связано со снижением уровня мРНК рецептора в этой структуре.

6. Регуляция состояния 5-HTia рецепторной системы в мозге животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения может осуществляться как на посттранскрипционном уровне, так и на уровне транскрипции.

Апробация результатов

Полученные данные были представлены и обсуждены на отчетной сессии Института цитологии и генетики в 2006 году, на XLI международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2003), на 8-й мультидисциплннароной международной конференции по биологической психиатрии «Стресс и поведение» (Санкт-Петербург, 2004), на XIX съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004), на XLII международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2004), на XLIII международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2005), на международной конференции «Нсйрохимия: фундаментальные и прикладные аспекты (Москва, 2005), на V Сибирском физиологическом съезде (Томск, 2005), на международной летней школе по нейрогснетике поведения (Москва, 2005).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 15 работ, из них 6 статей в рецензируемых отечественных (3) и международных (3) журналах.

Структура и объем работы Диссертация включает введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты, обсуждение, выводы и список цитируемой литературы (229 наименований). Работа изложена на 137 страницах, содержит 19 рисунков и 4 таблицы.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Животные. Эксперимены проводились на взрослых мышах линий СЗН/Не, Tg8, AKR/J, CBA/LacJ и ASOIcg; крысах-пасюках, зимоспящих сусликах. Мыши линии Tg8, полученные от Isabelle Seif (Institut Curie, Франция), характеризуются нокаутом по гену, кодирующему моноаминоксндазу А. Мыши линии ASC были получены в результате селекции в Институте цитологии и генетики СО РАН (более 12 поколений) на повышенную предрасположенность к каталепсии из популяции бэккроссов между мышами некаталептической (AKR) и каталептической (СВА) линий. Крысы-пасюки, исследованные в данной работе, подвергались селекции на высокую агрессивность по отношению к человеку и ее отсутствие в течение 59 поколений в Институте цитологии и генетики СО РАН. Животные содержались в группах по 5-6 особей и перед эксперементами изолировались на двое суток для снятия влияния зоосоциальцых эффектов. Длиннохвостые суслики (Citellus undulatus) были получены из Института биофизики РАН, г. Пущино.

Определение функциональной активности 5-HTia рецепторов. Для

выявления функциональной активности (чувствительности) 5-HT¡,\ рецепторов определяли выраженность гипотермической реакции на введение селективного для рецепторов этого подтипа агониста - 8-ОН-ДПАТ (8-гидрокси-2-(ди-н-пропиламино)-тетралин, Research Biocheraicals Inc. USA; Overstreet et al., 1996). Препарат растворяли в физиологическом растворе и вводили в дозах 0.5, 1.0 или 2.0 мг/кг внутрибрюшинно. Температуру тела определяли ректальным датчиком для мышей или крыс (Phymep, Paris) с помощью микрокомпьютер-термометра (Hanna Instrument, Singapore) до введения и через 20 мин (для мышей) и 30 мин (для крыс) после введения препарата. Одновременно, при определении функциональной активности 5-HTia рецепторов крыс-пасюков, с помощью цифрового фотоаппарата регистрировали специфическое для активации 5-НТ1А рецепторов сокращение нижней губы (Lower Lip Retraction, LLR; Berensen, Broekkamp, 1991). Степень сокращения нижней губы оценивалась независимо тремя экспериментаторами по разработанной нами пятибалльной системе.

Определение последовательности нуклеотидов фрагмента гена 5-HTiA рецептора проводили при помощи секвекирования по Сэнгеру. Полученная последовательность использовалась для разработки лраймеров, специфичных для гена 5-HTia рецептора сусликов. Секвенирование по Сэнгеру использовалось также для идентификации ПЦР-продукта, нарабатываемого при амплификации кДНК с праймерами для 5-HTia рецепторов мыши.

Рестрикционнын анализ с использованием эндонуклеазы рестрикции Dra III проводили для идентификации ПЦР-продукта, нарабатываемого при амплификации кДНК с праймерами для 5-HTia рецепторов.

Экспрессию гена 5-HTia рецептора оценивали при помощи количественного метода ОТ-ПЦР с использованием геномной ДНК или специально наработанного ампликона в качестве внешнего экзогенного стандарта и мРНК бета-актина или глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназы (Г-З-ФД) в качестве внутреннего эндогенного стандарта (Kulikov, Naumenko et al., 2005; Науменко, Куликов, 2006).

Статистическая обработка данных. Все численные данные были обработаны при помощи программы STATISTICA. При сравнении экспрессии гена 5-HTia рецептора в структурах мозга животных двух линий данные были обработаны с использованием критерия Стьюдента, а при сравнении экспрессии в структурах мозга животных более двух линий был использован однофакторный дисперсионный анализ ANO VA,

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Несмотря на чрезвычайно важную роль гена 5-HTia рецептора в регуляции поведения, психических и других процессов в ЦНС, для изучения его экспрессии все еще в основном используют качественную или полуколичественную ОТ-ПЦР. Более того, не разработан надежный и верифицированный метод количественного учета загрязнения образцов кДНК геномной ДНК, что также ограничивает широкое использование количественной ОТ-ПЦР для определения числа копий мРНК рецептора в мозге. При разработке метода нами были решены две основные проблемы, возникающие при использован ирг любого варианта количественной ОТ-ПЦР, а именно - выбор адекватных стандартов и необходимость контролировать загрязнение образцов РНК геномной ДНК.

В качестве внешнего экзогенного стандарта для контроля ПЦР была использована геномная ДНК известной концентрации. Очевидно, что продукт

амплификации геномной ДНК имеет тот же размер, что и амплифицированный по матрице кДНК, поэтому амплификацию стандарта проводили в отдельной пробирке, в качестве внешнего стандарта. Преимущество такого стандарта заключается в полной идентичности ПЦР-продуктов внешнего стандарта и исследуемого продукта, что позволяет избежать ошибки сравнения их интенсивности флуоресценции (Kulikov et al., 2005; Науменко, Куликов, 2006).

Другая проблема, решенная в ходе нашего исследования, связана с количественной оценкой мешающего влияния геномной ДНК в образцах кДНК. Были предложены два подхода. Первый является модификацией ранее применявшегося метода и заключается в количественной оценке геномной ДНК в образцах общей РНК при амплификации последней с праймерами для бета-актина. Второй подход заключается в определении примесей геномной ДНК непосредственно в образцах кДНК с использованием праймеров, позволяющих различить продукты ПЦР, полученные по матрице геномной ДНК и кДНК. Было показано, что оба эги метода дают один и тот же результат. (Науменко, Куликов, 2006).

Разработанный метод количественного определения экспрессии генов позволил впервые исследовать уровень мРНК 5-HTia рецептора в структурах мозга животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения -агрессивным поведением (offensive и defensive), реакцией замирания (каталепсией) и зимней спячкой.

Функциональная активность 5-НТ]д рецепторов и экспрессия их гена у высокоагрессивных и неагрессивных животных.

Исследование крыс-пасюков, селекционированных на повышенную агрессивную реакцию на человека и ее отсутствие, выявило связь генетически детерминированного агрессивного поведения с 5-HTia рецепторной системой мозга.

Установлены существенные различия в чувствительности 5НТ|д рецепторов между крысами с генетически детерминированной низкой и высокой агрессивностью. Температура тела неагрессивных крыс через 30 мин после введения агониста 5-НТ1л рецепторов - 8-ОН-ДПАТ снизилась более, чем на два градуса и оставалась пониженной в течение 60 мин. В то же время введение той же дозы 8-ОН-ДПАТ высокоагрессивным крысам существенного понижения температуры не вызвало (р>0.05; Рис. 2).

-О Неагрессивные крысы -*- Агрессивные крысы

Рис 2. Гипотермическая реакция крыс-пасюков,

селекционированных на высокую агрессивность по отношению к человеку и ее отсутствие, в ответ на введение селективного

агониста 5-НТи рецепторов - 8-ОН-ДПАТ (1 мг/кг, в/бр). *- р<0.05 по сравнению с неагрессивными крысами. 10 животных в каждой группе.

Сходные различия выявлены в другом тесте на функциональное состояние 5НТ)д серотониновых рецепторов - 1ХЫ. У крыс, селекционированных на высокую агрессивность, реакция, вызванная 8-ОН-ДПАТ, значительно ниже. Средний балл 1ХЯ у высокоагрессивных крыс был равен 1.5±0.60, у неагрессивных животных средний балл 1ХЯ составил 4.010.67 (р<0.001; Рис. 3).

Рис. 3. Вызванная введением 8-

ОН-ДПАТреакция сокращения нижней губы (Lower Lip Retraction) у крыс-пасюков, селекционированных на

высокую агрессивность по отношению к человеку и ее отсутствие.

*** — р<0.001 по сравнению с неагрессивными крысами.

О <J

и «

Неагрессивные крысы Агрессивные крысы

Таким образом, по этим двум разным тестам (гипотермической реакции и ЬЬК.) выявлена одна и та же закономерность - реакция на активацию серотониновых 5НТ1Л рецепторов существенно выше у неагрессивных животных.

При определении экспрессии гена, кодирующего 5-НТ]а рецептор, также были обнаружены значительные различия. Было показано, что уровень мРНК 5-НТ|А рецептора в среднем мрзге крыс, селекционированных на высокую агрессивность, значительно ниже, чем у неагрессивных животных (р<0.01). В остальных четырех исследованных структурах мозга - фронтальной коре, гиппокампе, гипоталамусе и миндалевидном комплексе -различий в уровне мРНК 5-НТ]д рецептора между агрессивными и неагрессивными животными выявлено не было (Рис. 4).

Неагрессивные крысы | Агрессивные крысы

Рис. 4. Уровень мРНК 5-ИТи рецептора в структурах мозга крыс-пасюков, селекционированных на высокую агрессивность по отношению к человеку и ее отсутствие. Число копий кДНК рецептора отнесено на 100 копий кДНК бета-актина.

** — р<0.01 по сравнению с неагрессивными крысами. Число животных в каждой группе — 9.

Таким образом, показано, что генетически детерминированная защитно-оборонительная агрессия связана со сниженным уровнем мРНК 5-НТ*а рецептора в среднем мозге и функциональной активностью рецепторов, что совпадает с данными о сниженной плотности 5-HTia рецепторов в мозге агрессивных крыс по сравнению с неагрессивными (Popova et al.,1998). Эти данные дают основание заключить, что 5-НТ,А рецепторы играют важную роль в подавлении агрессивного поведения, что соотносится с данными об антиагрессивном эффекте агонистов 5-HTia рецепторов.

Другая исследованная модель - мыши с нокаутом МАО А (линия Tg8) -характеризуется повышенной межсамцовой агрессией. Эту разновидность активного защитного поведения относят к агрессии нападения (offensive aggression; Maxson, 2000).

При определении функциональной активности как у мышей линии Tg8, так и у мышей контрольной линии СЗН было обнаружено снижение температуры тела в ответ на введение 8-ОН-ДПАТ, однако у мышей, лишенных МАО А, оно было выражено слабее. В то время как у контрольных мышей температура тела через 20 мин после введения 8-ОН-ДПАТ в дозе 2.0 мг/кг упала более чем на 2°С, существенных изменений температуры тела мышей, лишенных МАО А, отмечено не было (Рис. 5А, Б).

Рис. 5. Гипотермическая реакция у мышей с генетическим нокаутом по гену МАО А (линия Тф) и мышей контрольной линии СЗН в ответ на введение 8-ОН-ДПАТ.

А — агонист 5-НТм рецепторов введен в дозе 1.0 мг/к;. Б — агонист введен в дозе 2.0 мг/кг.

*-р<0.05, ** ~р<0.01 по сравнению с мышами линии СЗН. 10 животных в каждой группе.

При исследовании экспрессии гена 5-НТ]д рецептора в трех из пяти исследованных структур — в среднем мозге, гиппокампе и гипоталамусе -существенных изменений выявлено не было. Однако уровень мРНК 5-НТ1А рецептора во фронтальной коре и миндалевидном комплексе у мышей с генетическим нокаутом МАО А был существенно повышен (Рис. 6). Особенно значительные различия были отмечены в миндалевидном комплексе, где уровень мРНК 5-НТ1Д рецептора у мышей линии Tg8 (13.9±2) вдвое превышал уровень мРНК этого рецептора у контрольной линии СЗН (7.3±0.9; р<0.01). Экспрессия гена 5-НТ1А рецептора во фронтальной коре мышей линии Tg8 составила 12.5+1.4, в то время как у мышей линии СЗН — 8.9±0.9 (р<0.05).

Рис. 6. Уровень мРНК 5-ИТи рецептора в структурах мозга мышей с генетическим нокаутом по гену МАО А (линия Tg8) и мышей контрольной линии СЗН. Число копий кДНКрецептора отнесено на '100 копий кДНКГ-З-ФД. * — р<0.05 по сравнению с мышами линии СЗН. ** — р<0.01 по сравнению с мышами линии СЗН. 9 животных в каждой группе.

Таким образом, генетический нокаут МАО А ведет к региональным изменениям в уровне мРНК S-HTia рецептора в структурах мозга мышей. Важно отметить, что повышение или отсутствие изменений в уровне мРНК 5-HTia рецептора в структурах мозга не совпадает со сниженной чувствительностью этого типа рецепторов, отмеченной по выраженности температурной реакции на введение агониста 5-HTjA рецепторов. В регуляцию температуры тела вовлечены и, соответственно, ответственны за вызываемую введением агонистов 5-IITia рецепторов гипотермию преимущественно гипоталамус и средний мозг. В этих областях мозга изменений в уровне мРНК 5-HTia рецептора не обнаружено (Evrard et al., 2002; Науменко и др., 2005). Следовательно, генетический нокаут МАО А, вероятно, приводит к изменению состояния 5-HTia рецепторов как на транскрипционном, так и на посттранскрипционном уровнях.

Сравнение двух моделей, характеризующихся различными типами агрессивного поведения (defensive и offensive aggression), позволило выявить, что десенситизация 5-НТ|д рецепторов у агрессивных животных по сравнению с неагрессивными происходит вне зависимости от вида агрессии. Однако характер изменения экспрессии гена рецептора для моделей защитно-оборонительной агрессии и агрессии нападения представляет собой прямо противоположную картину. Экспрессия гена 5-HTia рецептора повышается в структурах мозга агрессивных мышей, но снижается у агрессивных крыс. Таким образом, нельзя исключить, что характер изменения экспрессии гена 5-HTja рецептора и является

фактором, определяющим вид агрессивного поведения (offensive или defensive aggression). Однако можно предположить, что в регуляции экспрессии гена 5-HTia рецептора между крысами и мышами имеются некоторые различия, что, возможно, указывает на вовлечение в регуляцию транскрипции ТАТА-боксов, присутствующих в промоторе гена рецептора крыс (Starring et al., 1999).

Функциональная активность 5-HTia рецепторов и экспрессия их гена у мышей,

селекционированных на высокую предрасположенность к каталепсии.

Еще одна исследованная линия мышей (ASC) характеризуется противоположным типом защитного поведения, а именно, реакцией замирания (каталепсией). Снижение температуры тела в ответ на введение селективного агониста 5-HTia рецепторов - 8-ОН-ДПАТ было обнаружено как у мышей родительских линий (AKR и СВА), так и у гибридов 12 поколения (линия ASC). Существенные различия были отмечены через 20 мин после введения 8-ОН-ДПАТ в дозе 0.5 и 1 мг/кг (F2.27=10.13, р<0.001 для 0.5 мг/кг; F2,27=8.69, р<0.001 для 1 мг/кг). В то время как у мышей каталептической родительской линии СВА температура тела через 20 мин после введения 8-ОН-ДПАТ (0.5 мг/кг) упала более чем на 1.5°С, у мышей некаталептической родительской линии AKR температура тела существенно не изменялась (t=1.12; р>0.05). У гибридов 12 поколения (линия ASC) температура тела снизилась на 2°С. При введении агониста 5-HTia рецепторов в дозе 1 мг/кг температура тела мышей линии ASC упала на 2.5°С, а у мышей родительской линии СВА — на 2°С. Существенных изменений температуры тела мышей родительской линии AKR отмечено не было (t=2,07, р>0.05; Рис. 7). Примечательно, что данные, полученные при введении 8-ОН-ДПАТ в разных дозах (0.5 мг/кг и 1.0 мг/кг), совпадают.

Рис. 7. Гипотермическая реакция мышей, селекционированных на повышенную предрасположенность к каталепсии (линия ASC) из популяции бэккроссов между мышами некаталептической (AKR) и каталептической (СВА) линий, в ответ на введение 8-ОН-ДПАТ.

** — р<0.01, *** — р<0.001 по сравнению с мышами линии AKR. 10 животных в каждой группе.

При определении экспрессии гена, кодирующего 5-HTia рецептор, были выявлены существенные различия в уровне мРНК исследуемого рецептора только между мышами родительских линий. Обнаружено, что экспрессия гена.

кодирующего 5-HTia рецептор, снижена в среднем мозге мышей линии СВА по сравнению с экспрессией гена в той же структуре мозга мышей линии AKR (р<0.05). Количество копий мРНК 5-HTiA рецептора, отнесенное на 100 копий мРНК Г-З-ФД, оказалось равным 17.7±1.0 для мышей линии СВА и 23.6±1.8 для мышей линии AKR. Экспрессия гена, кодирующего 5-HTia рецептор, в среднем мозге мышей линии ASC составила 20.7±1.0 и не отличалась существенно ни от одной из родительских линий. Во фронтальной коре и гиппокампе различий в экспрессии гена, кодирующего 5-HTiA рецептор, между исследуемыми линиями не обнаружено (Рис. 8).

Рис. 8. Уровень мРНК 5-HTia рецептора в структурах мозга мышей, селекционированных на повышенную предрасположенность к каталепсии (линия ASC) из популяции бэккроссов между мышами некаталептической (AKR) и каталептической (СБА) линий. Число копий кДНКрецептора отнесено на 100 копий кДНКГ-З-ФД.

* — р<0.05 по сравнению с мышами линии AKR. 9 животных в каждой группе.

Данные результаты свидетельствуют о том, что изменение уровня мРНК 5-НТ,А рецептора не играет ключевой роли в механизмах генетически детерминированной каталепсии. Однако снижение уровня мРНК 5-HTia рецептора у мышей линии СВА по сравнению с мышами некаталептической линии AKR подтверждает существенную роль 5-HTia рецепторов в регуляции каталепсии. Следовательно, изменение состояния этих рецепторов при генетически детерминированной высокой предрасположенности к каталепсии происходит главным образом на посттранскрипционном уровне.

Примечательно, что реакция замирания, являющаяся противоположным агрессивному поведению видом защитной реакции, характеризуется противоположными изменениями функциональной активности 5-НТ]А рецепторов. Действительно, как защитно-оборонительая агрессивная реакция, так и агрессия нападения связаны с десенситизацией 5-HTia рецепторов, в то время как повышенная предрасположенность к каталепсии, напротив - с их сенситизацией. Кроме того, экспрессия гена 5-HTia рецептора в мозге мытей-катлептиков (линия СВА) снижена по сравнению с мышами некаталептической линии AKR, в то время

CD asc AKR

Ш СВА

как у агрессивных мышей линии Tg8 происходит повышение экспрессии. Важно отметить, что экспрессия гена, так же как и функциональная активность рецептора, изменяется в моделях, характеризующихся повышенной агрессией нападения, прямо противоположным образом, совпадая, однако, с характером изменения экспрессии гена в модели защитно-оборонительного агрессивного поведения, хотя последнее обстоятельство может быть связано с вовлечением в регуляцию экспрессии ТАТА-боксов.

Экспрессия гена 5-HTia рецептора в структурах мозга сусликов, находящихся в разных периодах цикла сон-бодрствование.

Для исследования участия 5-HTia рецепторов в зимней спячке прежде всего необходимо исследовать особенности регуляции и динамику изменения экспрессии гена рецептора в мозге зимоспящих животных, находящихся в различных периодах цикла сон-бодрствовзние. Общеизвестно, что для измерения экспрессии любого гена методом ОТ-ПЦР необходимо знать последовательность нуклеотидов хотя бы небольшого фрагмента исследуемого гена, достаточного для разработки пары праймеров. Однако последовательность гена 5-HTia рецептора сусликов до сих пор не была опредлена, поэтому первым этапом нашего исследования было секвенирование фрагмента гена, кодирующего 5-HTia рецептор в мозге зимоспящих сусликов.

Полученная последовательность нуклеотидов соответствует фрагменту 5-HTia рецептора, включающему пятый трансмембранный домен (79 п.н.) и третью внутриклеточную петлю (385 н.). Поскольку суслики являются зимоспящими животными, в отличие от человека, мышей и крыс, 5-HTia рецептор у них играет, очевидно, более значимую адаптивную роль, что, вероятно, может отражаться на первичной структуре ДНК. Наиболее функционально значимые изменения последовательности нуклеотидов, очевидно, затрагивают именно третью внутриклеточную петлю, которая осуществляет связывание рецептора с G-белком. В то же время, последовательность нуклеотидов, кодирующая пятый трансмембранный домен, который играет сходную роль в реализации функции 5-HTia рецептора как у зимоспящих, так и у не зимоспящих животных, является достаточно консервативной. Поэтому сравнение именно этого участка полученной последовательности с соответствующими фрагментами генов 5-HTia рецептора других видов животных наилучшим образом отражает филогенетические связи между ними.

Так, сравнение полученной последовательности нуклеотидов с имеющимися в базе данных (EMBL Nucleotide database) последовательностями гена 5-HTia рецептора других видов позволило выявить значительный процент гомологии между ними. Так, например, при сравнении участка полученной последовательности нуклеотидов, соответствующего пятому трансмембранному домену 5-НТ]А рецептора, было выявлено 93.6% гомологии с таким же участком нуклеотидной последовательности мыши и крысы, в то время как гомология с фрагментом гена 5-НТ]А рецептора человека составила 88.5%. Кроме того, при сравнении вышеуказанного фрагмента полученной последовательности нуклеотидов с аналогичными участками последовательностей, кодирующих другие серотониновые рецепторы (5-НТщ, 5-НТ;, 5-НТш), было обнаружено порядка 70% гомологии. Таким образом, можно заключить, что полученная последовательность нуклеотидов с большой долей вероятности принадлежит именно гену 5-HTia рецептора суслика.

На основании полученной последовательности была разработана пара праймеров, специфичных к фрагменту 5-НТ]а гена сусликов.

При исследовании экспрессии гена 5-НТ1А рецептора в мозге сусликов были выявлены значительные структуроспецифичные изменения, происходящие в различные периоды цикла сон-бодрствование. Так, например, во фронтальной коре на протяжении всего цикла уровень мРНК 5-НТ1А рецептора существенно не изменяется, в то время как в гиппокампе и среднем мозге в уровне мРНК 5-НТ|А рецептора происходят значительные изменения во время впадения в спячку или пробуждения (Рис. 9).

Гиппекамп Фронтальная коря

8 5 |л

Средний мозг

II"

Рис. 9. находящихся

о *

¿V

Уровнь мРНК 5-НТ1Л рецептора в структурах мозга сусликов, в разных периодах цикла сон-бодрствование. Число копий кДНК рецептора отнесено на 100 копий кДНК бета-актина.

* - р<0.05 по сравнению с состоянием зимней спячки; # — р<0.05 по сравнению с состоянием активного бодрствования. Число животных в каждой группе -10.

Важно отметить, что в гиппокампе происходит существенное повышение интенсивности уровня мРНК рецептора как в период впадения в спячку, тах и в период пробуждения. Уровень мРНК 5-НТ|а рецептора в период активного бодрствования составил 3.7+0.33, тогда как в период впадения в спячку он

значительно повышается и составляет уже 10.2±2.63, что отличается как от предыдущего сезона (р<0.05), так и от последующего - зимней спячки (р<0.05), когда экспрессии падает до 2±0.38. Весной, при пробуждении ото сна, происходит увеличение экспрессии гена 5-HTia рецептора в гиппокампе до 8.1±2.03, что достоверно отличается от предыдущего сезона. В среднем же мозге наблюдается прямо противоположная картина. В периоды впадения в спячку и пробуждения происходит снижение экспрессии гена рецептора.

В период впадения в спячку снижение уровня мРНК гена 5-НТ|А рецептора в среднем мозге происходит с 6.1±1.2 (в период активного бодрствования) до З.б±0.6, однако это снижение статистически не значимо. В то же время в период пробуждения от сна происходит более интенсивное снижение (до 2.6±0.47) экспрессии гена рецептора как по сравнению с зимней спячкой (5.7±1.06; р<0.05), так и по сравнению с периодом активного бодрствования (р<0.05).

Примечательно, что уровень мРНК 5-HTia рецептора во всех структурах мозга в период зимней спячки остается относительно высоким, что несомненно доказывает существенную роль данного рецептора в регуляции зимней спячки и сопровождающей ее гипотермии.

При впадении в спячку и пробуждении регуляция состояния 5-НТ1А рецепторов гиппокампа происходит, вероятно, на транскрипционном уровне. Необходимо отметить, что температура тела животных, находящихся на стадии подготовки к зимней спячке, составляла 37°С, то есть гипотермическая реакция еще не начала развиваться. Следовательно, именно повышение уровня мРНК 5-HTia рецептора в гиппокампе в период подготовки к впадению в спячку и, как следствие, повышение количества рецепторов, опосредует гипотермию и связанную с ней спячку. Таким образом, можно заключить, что увеличение экспрессии гена 5-HTia рецептора в гиппокампе в период впадения в спячку и ее восстановление при пробуждении является необходимым условием для, соответственно, впадения в спячку и пробуждения. Это заключение полностью совпадает с представлениями о гиппокампе как о пейсмейкере зимней спячки, сформировавшимися на основе электрофизиологических исследований. Гиппокамп оказался единственной структурой мозга, сохранявшей значительную импульсную активность в состоянии глубокой спячки (Штарк, 1970; South et al., 1972).

ВЫВОДЫ

1. Разработан и верифицирован новый метод количественного определения уровня мРНК 5-HTia рецептора в мозге. Модифицирован метод определения примесей геномной ДНК в образцах общей РНК и создан метод количественного определения примесей геномной ДНК в образцах кДНК.

2. Генетически детерминированная высокая предрасположенность к разным видам защитного-оборонительного поведения и к природной адаптации (зимней спячке) связана с изменением состояния 5-HTia рецепторной системы мозга мозга.

3. Функциональная активность 5-HTiA рецепторов в мозге крыс-пасюков при селекции на повышенную агрессию, вызванную страхом (defensive aggression), снижается на фоне понижения уровня мРНК 5-HTia рецептора в среднем мозге. Во фронтальной коре, гиппокампе, гипоталамусе и миндалевидном комплексе изменений уровня мРНК 5-HTiA рецептора при селекции на повышенную агрессию по отношению к человеку не выявлено.

4. Повышение уровня межсамцовой агрессии (offensive aggression) у мышей с генетическим нокаутом МАО А (линия Tg8) сопровождается снижением чувствительности 5-HTia рецепторов в мозге и повышением уровня мРНК 5-НТ,а рецептора во фронтальной коре и миндалевидном комплексе по сравнению с мышами контрольной линии СЗН. Изменений уровня мРНК 5-НТ,а рецептора в гипоталамусе, гиппокампе и среднем мозге не зафиксировано.

5. Обнаружена связь между повышенной предрасположенностью к каталепсии и повышением функциональной активности 5-HTia рецепторов в мозге мышей линий СВА и ASC по сравнению с мышами некаталептической линии AK.R. Повышенная предрасположенность х каталепсии у мышей линии СВА сопряжена со снижением уровня мРНК 5-HTia рецептора в среднем мозге по сравнению с мышами некаталептической линии AKR. Во фронтальной коре и гиппокампе существенных изменений уровня мРНК 5-HTia рецептора не обнаружено.

6. Определена последовательность нуклеотидов фрагмента гена, кодирующего 5-HTia рецептор в мозге зимоспящих сусликов, и показана его гомология с генами, кодирующими 5-HTia рецептор крысы, мыши и человека.

7. Показано изменение уровня мРНК 5-HTja рецептора сусликов в различные фазы цикла сон-бодрствование. Обнаружено, что погружение в зимнюю спячку связано с повышением уровня мРНК 5-HTia рецептора в гиппокампе, в то время как состояние зимней спячки характеризуется относительно высоким уровнем мРНК 5-HTia рецептора в среднем мозге. Пробуждение сопровождается повышением уровня мРНК 5-HTia рецептора в гиппокампе и снижением в среднем мозге.

8. Показано, что регуляция состояния 5-HTia рецепторной системы в мозге животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения может осуществляться как на посттранскрипционном уровне, так и на уровне транскрипции.

СПИСОК РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Kulikov A.V., Naumenko V.S., Voronova I.P., Tikhonova M.A., Popova N.K. Quantitative RT-PCR assay of 5-HTIA and 5-HT2A serotonin receptor mRNAs using genomic DNA as an external standard // J. Neurosci. Methods, 2005. V. 141(1). P.97-101.

2. Popova N.K., Naumenko V.S., Plyusnina I.Z., Kulikov A.V. Reduction in 5-HT(lA) receptor density, 5-HT(lA) mRNA expression, and functional correlates for 5-HT(1A) receptors in genetically defined aggressive rats // J. Neurosci. Res., 2005. V.80(2). P.286-92.

3. Kulikov A.V., Osipova D.V., Naumenko V.S., Popova N.K. Association between Tph2 gene polymorphism, brain tryptophan hydroxylase activity and aggressiveness in mouse strain // Genes, Brain and Behavior, 2005. V.4(8). P.482-485.

4. Науменко B.C., Иванова E.A., Куликов A.B., Попова H.K. Влияние генетического нокаута моноаминоксидазы А на экспрессию 5-HTiA рецепторов //Доклады Академии Наук, 2005. Т.402(2). С.282-285.

5. Куликов A.B., Осипова Д.В., Науменко B.C., Попова Н.К. Полиморфизм С1473Г в гене триптофангидроксилазы и выраженность агрессивного поведения мышей // Доклады Академии Наук, 2005. Т.403(4). С.571-573.

6. Науменко B.C.,. Куликов A.B. Количественное определение экспрессии гена 5-HTia серотонинового рецептора в головном мозге // Молекулярная биология, 2006. Т.40. С.37-44.

7. Науменко B.C., Иванова Е.А., Куликов A.B., Попова Н.К. Серотониновые 5-НТ1А рецепторы мышей с генетическим нокаутом МАО А: функциональная активность и экспрессия мРНК // Российский физиологический журнал имени И.М. Сеченова, 2004. Т.90(8). С.264-265.

8. Науменко B.C. Серотониновые 5-HTia рецепторы крыс-пасюков, селекционированных на высокую агрессивность и ее отсутствие // Материалы XLI международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс", Новосибирск, 2003. ч. «Биология». С.185.

9. Naumenko V.S., Plyusnina I.F., Popova N.K. Serotonin 5-HTia receptors in rats selectively bred for high and low aggressiveness // Psychopharmacology and Biological Narcology, 2-3/2004. St-Petersburg. P.720-721.

10. Науменко B.C. Количественный ОТ-ПЦР метод, его применение для определения экспрессии мРНК S-HTiA и 5-НТ2А рецепторов // Материалы XLII международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс", Новосибирск, 2004. С.26.

11. Науменко B.C. Количественное определение экспрессии генов, не содержащих интронов, на примере 5-HTia серотониновых рецепторов // Материалы XLIII международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс", Новосибирск, 2005. С.100.

12. Осипова Д.В., Науменко B.C. Связь С1473С-полиморфизма в гепе триптофангидроксилазы-2 с агрессивным поведением самцов мышей // Материалы XLIII международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс", Новосибирск, 2005. С.101.

13. Попова Н.К., Науменко B.C., Плюснина И.Ф. Агрессивность и серотониновые 5-HTia рецепторы - экспрессия, плотность и функциональные корреляты // «Нейрохимия: фундаментальные и прикладные аспекты». Тезисы докладов и стендовых сообщений, Москва, 2005. С.32.

14. Науменко B.C., Иванова Е.А., Куликов A.B., Попова Н.К. Влияние генетического нокаута МАО А на функциональную активность и уровень мРНК серотониновых 5-HTia рецепторов // Бюллетень Сибирской медицины.

■ Т.4. Приложение 1. Тезисы докладов V Сибирского физиологического съезда, Томск, 2005., С. 74.

15. Кузнецова Е.Г., Амстиславская Т.Г., Науменко B.C., Попова Н.К. Влияние - пренатального стресса на половое возбуждение самцов мышей и экспрессию

мРНК 5HTia рецепторов // Бюллетень Сибирской медицины. Т.4. Приложение 1. Тезисы докладов V Сибирского физиологического съезда, Томск, 2005., С. 88.

Подписано к печати 27.04.06.

Формат бумаги 60x90. 1/16. Печ. л. 1. Уч. изд. л. 0,7

Тираж 100 экз. Заказ № 46.

Ротапринт Института цитологии и генетики СО РАН 630090, Новосибирск, пр. ак. Лаврентьева, 10.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Науменко, Владимир Сергеевич

Введение.

Глава 1. Обзор литературы. Современные представления о серотониновых рецепторах мозга и их участии в регуляции генетически детерминированного защитного поведения.

1.1. Семейство серотониновых рецепторов.

1.1.1. 5-НТ] рецепторы.

1.1.2. 5-НТ2 рецепторы.

1.1.3. 5-НТ3 рецепторы.

1.1.4. 5-НТ4 рецепторы.

1.1.5. и 5-Ь1б рецепторы.

1.1.6. 5-НТ7 рецепторы.

1.2. Генетический контроль 5-НТ1А рецептора.

1.2.1. Структура гена и кодируемого им рецептора.

1.2.2. Методы исследования гена и рецептора.

1.2.2.1 Методы измерения уровня мРНК.

1.2.2.2 Методы контроля влияния геномной ДНК на амплификацию.

1.2.2.3. ОТ-ПЦР 5-НТ1Арецепторов.

1.2.2.4. Методы исследования 5-НТ]Арецепторов.

1.3. 5-НТ]Л рецепторы в регуляции защитного поведения.

1.3.1. Защитное поведение.

1.3.2. Межсамцовая агрессия.

1.3.3. Агрессия, направленная на человека.

1.3.4. Реакция замирания (каталепсия).

1.3.5. Зимняя спячка.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Животные.

2.2. Определение функциональной активности

5-НТ1А рецепторов.

2.3. Определение экспрессии гена, кодирующего

5-НТы рецептор.

2.3.1. Реактивы.

2.3.2. Праймеры.

2.3.3. Стандарты.

2.3.4. Выделение общей РНК.

2.3.5. Проверка общей РНК на присутствие геномной ДНК.

2.3.6. Обратная транскрипция.

2.3.7. Полимеразная цепная реакция.

2.3.8. Проверка кДНК на присутствие геномной ДНК.

2.3.9. Рестрикционный анализ.

2.3.10. Электрофорез.

2.4. Определение нуклеотидной последовательности методом Сэнгера.

2.4.1. Очистка ДНК при помощи гель-фильтрации на колонках.

2.4.2. Очистка продуктов ПЦР и реакции Сэнгера переосаждением изопропанолом.

2.5. Статистическая обработка данных.

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Количественный метод определения экспрессии гена, кодирующего 5-НТ1А рецептор.

3.1.1. Верификация праймеров, специфичных для гена

5-НТ1Д рецептора.

3.1.2. Содержание геномной ДНК в образцах общей РНК и в образцах кДНК.

3.1.3. Доказательства адекватности разработанного метода.

3.2. Функциональная активность 5-НТ]А рецепторов и экспрессия их гена у высокоагрессивных и неагрессивных животных.

3.2.1. Крысы-пасюки, селекционированные на высокую агрессивность по отношению к человеку (defensive aggression) и ее отсутствие.

3.2.2. Мыши с генетическим нокаутом моноаминоксидазы A: offensive aggression.

3.3. Функциональная активность 5-HTjA рецепторов и экспрессия их гена у мышей, селекционированных на высокую предрасположенность к каталепсии.

3.4. Экспрессия гена 5-НТ1А рецептора в структурах мозга сусликов, находящихся в разных периодах цикла сон-бодрствование.

Глава 4. Обсуждение.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Участие серотониновых 5-НТ1А рецепторов в регуляции различных видов генетически детерминированного защитного поведения"

Актуальность проблемы. Понимание механизмов нормального и патологического поведения человека представляет собой одну из актуальных проблем современной нейробиологии и медицины. Тревожность и депрессия являются самыми распространенными среди психических расстройств человека и значительно снижают качество жизни (The European Health Report, 2005), а агрессивность лежит в основе асоциального и криминального поведения (World Report of Violence and Health, 2002). Механизмы и патогенез этих психоэмоциональных и поведенческих отклонений недостаточно изучены.

Важную роль в исследовании этой проблемы могут сыграть экспериментальные модели на животных, так как считается, что элементы поведения животных могут частично моделировать соответствующие психопатологии человека. Кроме того, известно, что тревожность, агрессивность и депрессия тесно связаны с некоторыми видами защитного поведения животных (Dixon, 1998).

Защитное поведение представляет собой комплекс эволюционно закрепленных врожденных реакций на неодушевленные и одушевленные угрожающие стимулы внешней среды (Попова, 1997; Popova, 1999). Первые включают такие стимулы как резкий звук, свет, запах, экстремальные перепады температуры. Зимняя спячка некоторых видов животных и сопровождающая ее глубокая гипотермия являются эволюционно закрепленным, адаптивным видом защитного поведения, проявляющимся в ответ на резкое падение температуры (Попова, 1997; Popova, 1999). Вторые сигнализируют о приближении хищника или особи того же вида, конкурирующей за самку, территорию или пищу и могут вызывать альтернативные виды защитного поведения - агрессию и реакцию замирания (каталепсию). Среди различных форм агрессивного поведения (Moyer, 1968; Maxson,2000) наибольший интерес вызывают агрессия нападения, или межсамцовая агрессия (offensive aggression), и агрессия, вызванная страхом, или защитно-оборонительная агрессия (defensive aggression; Maxson, 2000). Каталепсия, представляющая собой состояние длительной обездвиженности с пластическим тонусом мускулатуры, привлекает внимание исследователей еще и потому, что наблюдается у человека при некоторых тяжелых формах нервных и психических патологий (Sanberg et al., 1988; Singerman, Raheja, 1994) или как негативный эффект лечения нейролептиками (Fricchione, 1985).

Одним из основных факторов, посредством которых осуществляется физиологический контроль генетически детерминированного защитного поведения, является важнейший медиатор мозга - серотонин (5-НТ). Имеется множество литературных данных, свидетельствующих о существенной роли 5-НТ в регуляции разнообразных физиологических процессов и многих форм поведения (Попова и др., 1978; Jacobs, Fornal, 1995; Lucki, 1998). Поразительная полифункциональность серотонина обусловлена прежде всего наличием многочисленных рецепторов, опосредующих воздействие этого медиатора на нейроны (Saudou and Hen, 1994; Попова, Куликов, 2003). К настоящему времени с помощью молекулярно-биологических методов выявлено 14 различных серотониновых рецепторов, экспрессирующихся в мозге млекопитающих.

Эти рецепторы были классифицированы в 7 типов, принадлежащих к двум суперсемействам (Saudou, Hen, 1994; Barnes, Sharp, 1999).

Среди такого огромного разнообразия рецепторов 5-HTiA подтип играет ключевую роль в ауторегуляции активности серотониновых нейронов и секреции нейротрансмиттера и, следовательно, вовлечен в регуляцию всех форм поведения и психических процессов, контролируемых серотонином (Barnes, Sharp, 1999). Более того, имеются многочисленные доказательства участия 5-HTiA рецепторов в механизме депрессивных психозов (Maes, Meltzer, 1995) и действия большинства известных антидепрессантов (Borsini, 1994; Blier, de Montigny, 1994) и анксиолитиков (De Vry et al., 1991; Handley, 1995).

Имеется множество данных о вовлечении 5-НТ)А рецепторов в терморегуляцию (Hjorth, 1985; Goodwin et al., 1987), регуляцию сна (Попова и др., 1985; Августинович, 1987), агрессивного поведения (Olivier et al., 1995; de Boer et al., 1998; Pruus et al., 2000) и каталепсии (Kulikov et al., 1993; Neal-Beliveau et al., 1993).

Однако большинство существующих работ проведены с помощью фармакологических методов и позволяют делать выводы только о вовлечении 5-HTiA рецепторов в регуляцию вышеперечисленных типов защитного поведения. Имеется очень мало данных о роли этих рецепторов в генетическом контроле разных видов защитного поведения и ничего не известно об экспрессии гена 5-HTiA рецептора при различных генетически детерминированных видах защитного поведения. Кроме того, до сих пор не установлено, существует ли прямая зависимость между плотностью, функциональной активностью рецепторов и экспрессией кодирующего их гена.

Цель настоящего исследования: используя уникальные генетические модели межсамцовой агрессии, агрессии по отношению к человеку, каталепсии и зимней спячки, выяснить, какова роль 5-НТ]А рецепторов в 7 регуляции этих форм поведения и существует ли связь функциональной активности и плотности рецепторов 1А подтипа с интенсивностью экспрессии кодирующего их гена.

Научная новизна работы

В настоящей работе впервые:

• Разработан и верифицирован новый метод количественного определения уровня мРНК 5-HTiA рецептора в мозге. Модифицирован метод определения примесей геномной ДНК в образцах общей РНК и создан метод количественного определения примесей геномной ДНК в образцах к ДНК.

• Показано, что функциональная активность 5-HTiA рецепторов в мозге крыс-пасюков при селекции на повышенную агрессию по отношению к человеку (defensive aggression) снижается на фоне понижения уровня мРНК 5-HTia рецептора в среднем мозге.

• Показано, что реакция замирания, являющаяся противоположным агрессивному поведению видом защитной реакции, характеризуется противоположными изменениями функциональной активности 5-НТ]А рецепторов: генетически детерминированная каталепсия связана с повышением чувствительности 5-HTjA рецепторов на фоне снижения уровня мРНК.

• Определена последовательность нуклеотидов фрагмента гена, кодирующего 5-НТи рецептор в мозге зимоспящих сусликов, и показана его гомология с генами, кодирующими 5-НТ1А рецептор в мозге крысы, мыши и человека.

• Показано участие 5-НТ1А рецепторов в механизмах зимней спячки сусликов. Обнаружено, что погружение в зимнюю спячку связано с повышением уровня мРНК 5-НТ]а рецептора в гиппокампе, в то время как состояние зимней спячки характеризуется относительно высоким уровнем мРНК 5-НТ1а рецептора в среднем мозге. Пробуждение сопровождается повышением уровня мРНК 5-НТ]а рецептора в гиппокампе и снижением в среднем мозге.

• Показано, что регуляция состояния 5-НТ]А рецепторной системы в мозге животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения может осуществляться как на посттранскрипционном уровне, так и на уровне транскрипции.

Теоретическая и научно-практическая ценность работы.

Полученные в настоящей работе данные расширяют представления о механизмах, лежащих в основе развития различных видов генетически детерминированного защитного поведения, таких как агрессивность, каталепсия, зимняя спячка и сопряженная с ней гипотермия. Выявленные особенности регуляции экспрессии гена 5-НТ1А рецептора на моделях животных с генетической предрасположенностью к тому или иному виду оборонительных реакций могут быть полезны для разработки фармакологических агентов, направленных на модуляцию агрессивности, тревожности, депрессии и нарушений сна у человека.

Положения, выносимые на защиту

1. Серотониновые 5-HTiA рецепторы мозга вовлечены в регуляцию защитного поведения: агрессивного поведения (offensive и defensive aggression), каталепсии и зимней спячки.

2. Селекция крыс на повышенную агрессивность, вызванную страхом (defensive aggression), приводит к снижению функциональной активности 5-НТ)А рецепторов на фоне снижения в среднем мозге уровня мРНК 5-HTia рецептора.

3. Генетически детерминированная агрессия нападения (offensive aggression) у мышей связана со снижением чувствительности 5-НТ]Д рецепторов при повышении уровня мРНК 5-HTiA рецептора во фронтальной коре и миндалевидном комплексе.

4. Реакция замирания, являющаяся противоположным агрессивному поведению видом защитной реакции, характеризуется противоположными изменениями функциональной активности 5-НТ|А рецепторов: генетически детерминированная каталепсия у мышей связана с повышением чувствительности 5-НТ]А рецепторов на фоне снижения уровня мРНК 5-HTiA рецептора.

5. В различные фазы годового цикла происходят существенные изменения состояния 5-HTiA рецепторной системы в различных структурах мозга зимоспящих сусликов. Погружение в зимнюю спячку и пробуждение связано с повышением уровня мРНК 5-НТ1Л рецептора в гиппокампе. Состояние зимней спячки связано с относительно высоким уровнем мРНК 5-НТ)А рецептора в среднем мозге, в то время как пробуждение связано со снижением уровня мРНК рецептора в этой структуре.

6. Регуляция состояния 5-HTiA рецепторной системы в мозге животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения может осуществляться как на посттранскрипционном уровне, так и на уровне транскрипции.

Апробация результатов. Полученные данные были представлены и обсуждены на отчетной сессии Института цитологии и генетики в 2006 году, на Х1Л международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2003), на 8-й мультидисциплинароной международной конференции по биологической психиатрии «Стресс и поведение» (Санкт-Петербург, 2004), на XIX съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004), на ХЫ1 международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2004), на ХЫН международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2005), на международной конференции «Нейрохимия: фундаментальные и прикладные аспекты (Москва, 2005), на V Сибирском физиологическом съезде (Томск, 2005), на международной летней школе по нейрогенетике поведения (Москва, 2005).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, из них 6 статей в рецензируемых отечественных (3) и международных (3) журналах.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Науменко, Владимир Сергеевич

Выводы

1. Разработан и верифицирован новый метод количественного определения уровня мРНК 5-HTiA рецептора в мозге. Модифицирован метод определения примесей геномной ДНК в образцах общей РНК и создан метод количественного определения примесей геномной ДНК в образцах кДНК.

2. Генетически детерминированная высокая предрасположенность к разным видам защитного-оборонительного поведения и к природной адаптации (зимней спячке) связана с изменением состояния 5-НТ)А рецепторной системы мозга мозга.

3. Функциональная активность 5-HTiA рецепторов в мозге крыс-пасюков при селекции на повышенную агрессию, вызванную страхом (defensive aggression), снижается на фоне понижения уровня мРНК 5-HTiA рецептора в среднем мозге. Во фронтальной коре, гиппокампе, гипоталамусе и миндалевидном комплексе изменений уровня мРНК 5-HTiA рецептора при селекции на повышенную агрессию по отношению к человеку не выявлено.

4. Повышение уровня межсамцовой агрессии (offensive aggression) у мышей с генетическим нокаутом МАО А (линия Tg8) сопровождается снижением чувствительности 5-HTjA рецепторов в мозге и повышением уровня мРНК 5-HTiA рецептора во фронтальной коре и миндалевидном комплексе по сравнению с мышами контрольной линии СЗН. Изменений уровня мРНК 5-НТ]А рецептора в гипоталамусе, гиппокампе и среднем мозге не зафиксировано.

5. Обнаружена связь между повышенной предрасположенностью к каталепсии и повышением функциональной активности 5-НТ|А рецепторов в мозге мышей линий СВА и ASC по сравнению с мышами некаталептической линии АКЛ. Повышенная предрасположенность к каталепсии у мышей линии СВА сопряжена со снижением уровня мРНК 5-НТ1А рецептора в среднем мозге по сравнению с мышами некаталептической линии АКЛ. Во фронтальной коре и гиппокампе существенных изменений уровня мРНК 5-НТ1А рецептора не обнаружено.

6. Определена последовательность нуклеотидов фрагмента гена, кодирующего 5-НТ)А рецептор в мозге зимоспящих сусликов, и показана его гомология с генами, кодирующими 5-НТ1А рецептор крысы, мыши и человека.

7. Показано изменение уровня мРНК 5-НТ]а рецептора сусликов в различные фазы цикла сон-бодрствование. Обнаружено, что погружение в зимнюю спячку связано с повышением уровня мРНК 5-НТ1А рецептора в гиппокампе, в то время как состояние зимней спячки характеризуется относительно высоким уровнем мРНК 5-НТ1А рецептора в среднем мозге. Пробуждение сопровождается повышением уровня мРНК 5-НТ1А рецептора в гиппокампе и снижением в среднем мозге.

8. Показано, что регуляция состояния 5-НТ]А рецепторной системы в мозге животных с различными генетически детерминированными видами защитного поведения может осуществляться как на посттранскрипционном уровне, так и на уровне транскрипции.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Науменко, Владимир Сергеевич, Новосибирск

1. Августинович (Пак) Д.Ф. Серотониновые рецепторы первого и второго типов при некоторых физиологических состояниях животных//Автореферат канд. дисс., Новосибирск, 1987. С. 17.

2. Амстиславская Т.Г., Кучерявый С.А., Иванова Е.А., Попова Н.К. Влияние агонистов 5-НТ1А серотониновых рецепторов на половую мотивацию самцов мышей // Генетика, 1999. Т. 127(2). С.224-226.

3. Базовкина, Д.В., Куликов A.B., Кондаурова Е.М., Попова Н.К. Селекция на предрасположенность к каталепсии усиливает депрессивноподобное поведение у мышей // Генетика, 2005. Т.41(9). С.1222-1228.

4. Барыкина H.H., Чепкасов И.Л., Алехина Т.А., Колпаков В.Г. Селекция крыс Вистар на предрасположенность к каталепсии // Генетика, 1983. Т.19. С.2014-2021.

5. Беляев Д.К., Бородин П.М. Влияние стресса на наследственную изменчивость и его роль в эволюции // Эволюционная генетика, Л.: ЛГУ, 1982. С35-59.

6. Дьюсбери Д. Поведение животных. Сравнительные аспекты. М.: Мир, 1981. С.125-255.

7. Кудрявцева H.H., Попова Н.К. Содержание серотонина в различных отделах головного мозга во время зимней спячки и пробуждения // БЭМБ., 1973(4). С.44-47.

8. Кудрявцева H.H., Ситников А.П. Влияние эмоциональности, исследовательской активности и болевой чувствительности напроявление агонистического поведения у мышей // Журн. Высш. Нервн. Деят., 1986. Т.36. С.686-691.

9. Куликов A.B., Базовкина Д.В. Муазан М-П., Мормед П. Картирование гена предрасположенности к каталепсии у мышей с помощью микросателитных маркеров // Доклады Академии Наук, 2003. Т.393(1). С.134-137.

10. Куликов A.B., Базовкина Д.В. Проверка гипотез о сцеплении в гибридологическом анализе альтернативных поведенческих признаков с неполной пенетрантностью // Генетика, 2003. Т.39(8). С.1066-1072.

11. Куликов A.B., Козлачкова Е.Ю., Попова Н.К. Генетический контроль каталепсии у мышей. Генетика, 1989. Т.25. С.1402-1408.

12. Куликов A.B., Максютова A.B., Иванова Е.А., Хворостов И.Б., Попова Н.К. Влияние тиреоидэктомии на экспрессию мРНК серотониновых 5-НТ2д рецепторов во фронтальной коре мозга крыс // Доклады Академии Наук, 2002а. Т.383. С.417-419.

13. Куликов A.B., Попова Н.К. Формы агрессивного поведения и их генетическая детерминация // Успехи Совр. Генетики / Дубинин Н.П. (ред.), М.: Наука, 1991. Вып.17. С.131-151.

14. Куликов A.B., Тихонова М.А., Воронова И.П., Попова Н.К. Использование ОТ-ПЦР для полуколичественного определения экспрессии мРНК серотониновых 5-НТ2а рецепторов в головном мозге // Нейрохимия, 2004. Т.21. С.76-79.

15. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генной инженерии. М.: Мир, 1984. С.479.

16. Науменко B.C., Иванова Е.А., Куликов A.B., Попова Н.К. Влияние генетического нокаута моноаминоксидазы А на экспрессию 5-HTiA рецепторов//Доклады Академии Наук, 2005. Т.402(2). С.282-285.

17. Науменко B.C., Куликов A.B. Количественное определение экспрессии гена 5-HTiA серотонинового рецептра в головном мозге // Молекулярная Биология, 2006. Т.40. С.37-44.

18. Никулина Э.М., Бородин П.М., Попова Н.К. Изменение некоторых форм агрессивного поведения и содержания моноаминов в мозге в процессе селекции на приручение диких крыс // Журн. Высш. Нервн. Деят., 1985а. Т.35. С.703-709.

19. Никулина Э.М., Трапезов О.В., Попова Н.К. Содержание моноаминов в головном мозге норок, различающихся по реакции на человека//Журн. Высш. Нервн. Деят., 19856. Т.35. С.1142-1145.

20. Попова Н.К. Роль серотонина мозга в экспрессии генетически детерминированного защитно-оборонительного поведения // Генетика, 2004. Т.40. С.770-778.

21. Попова Н.К. Серотонин мозга в генетически детерминированном защитном поведении // Журн. Высш. Нервн, Деят., 1997. Т.47. С.93-97.

22. Попова Н.К. Угнетающее действие 5-окситриптофани на терморегуляции при пробуждении от зимней спячки // Доклады Академии Наук СССР, 1973. Т.210(2). С.496-498.

23. Попова Н.К., Барыкина H.H., Плюснина И.З., Алехина Т.А., Колпаков Д.Г. Экспрессия реакции испуга у крыс генетически предрасположенных к разным видам защитного поведения // Росс. Физиол. Журнал, 1999. Т.85(1). С.99-104.

24. Попова Н.К., Войтенко H.H. Обмен серотонина во время зимней спячки // Доклады Академии Наук СССР, 1974. Т.218(6). С. 14881490.

25. Попова Н.К., Куликов A.B. Многообразие серотонинергических рецепторов как основа полифункциональности серотонина // Успехи Совр. Нейрохимии / Дамбинова С.А., Аратюнян A.B. (ред.), С.-П.: С.-П.У, 2003. С.56-73

26. Попова Н.К., Науменко Е.В., Колпаков В.Г. Серотонин и поведение. Новосибирск: Наука, 1978. С. 12.

27. Скринская Ю.А., Попова Н.К., Никулина Э.М., Куликов A.B. Участие дофаминергической системы стриатума в регуляции каталепсии мышей и крыс различных генотипов // Журн. Высш. Нервн. Деят., 1997. Т.47(6). С. 1032-1039.

28. Трут JI.H. Генетика и феногенетика доместикационного поведения // Вопросы общей генетики, М.: Наука, 1981. С.323-332.

29. Трут JI.H. Некоторые новые данные по селекции серебристо-черных лисиц (Vulpes Fulvus Desm.) по свойствам их оборонительного поведения // Генетика поведения, Л.: Наука, 1969. С. 107-119.

30. Трут JI.H. Очерки по генетики поведения. Новосибирск: Наука, 1978. С.166.

31. Хайнд Р. Поведение животных. М.: Мир, 1975. С.360.

32. Штарк М.Б. Мозг зимнеспящих. Новосибирск, 1970. С.240.

33. Abdouh М., Starring J.M., Riad М., Paquettei Y., Albert P.R., Drobetskyi E., Kouassi E. Transcriptional mechanisms for induction of 5-HTiA receptor mRNA and protein in activated В and T lymphocytes // J. Biol. Chem., 2001. V.276(6). P.4382-4388.

34. Aghajanian G.K. Electrophysiology of serotonin receptor subtypes and signal transduction pathways. In: Psychopharmacology: The Fourth Generation of Progress (Bloom F.R. and Kupfer D.J., eds.) // N.Y.: Raven Press, 1995. P.1451-1459.

35. Aghajanian G.K., Haigler H.J., Bloom F.E. Lysergic acid diethylamide and serotonin: direct actions on serotonin-containing neurons in rat brain //Life Sci., 1972. V.ll. P.615-622.

36. Albert P.R., Sajedi N., Lemonde S., Ghahremani M.H. Constitutive Gi2-dependent activation of adenylyl cyclase type II by the 5-HTiA receptor // J. Biol. Chem., 1999. V.274(50). P.35469-35474.

37. Albert P.R., Zhou Q.Y., Van Tol H.H., Bunzow J.R., Civelli O. Cloning, functional expression, and mRNA tissue distribution of the rat 5-hydroxytryptamineiA receptor gene // J. Biol. Chem., 1990. V.265. P.5825-5832.

38. Allen A., Singh A., Zhuang Z.-P., Kung M.-P., Kung H.F., Lucki I. The 5-HTiA receptor antagonist p-MPPI blocks responses mediated bypostsynaptic and presynaptic 5-HTiA receptors // Pharm. Biochem. Behavior, 1997. V.57(l-2). P.301-307.

39. Amir S., Brown Z.W., Amit Z., Ornstein K. Body pinches induced long lasting cataleptic-like immobility in mice: Behavioral characterization and the effects of naloxone //Life Sci., 1981. V.10. P.l 189-1194.

40. Baez M., Kursar J.D., Helton L.A., Wainscott D.B., Nelson D.L.G. Molecular biology of serotonin receptors // Obea. Res., 1995. V.3(4). P.441-447.

41. Barnes N.M., Sharp T. A review of central 5-HT receptors and their function//Neuropharmacol., 1999. V.38. P.1083-1152.

42. Bauman W.A., Hashim A., Sershen H. Cerebral cortical concentrations of bioamines and their metabolites during arousal and after feeding in the little brown bat (Myotis lucifugus) // Brain Res., 1989. V.500(l-2). P. 156160.

43. Berensen H.H., Broekkamp C., van Delft A. Depletion of brain serotonin affects differently behavior induced by 5-HTiA, 5-HTiC, 5-HT2 receptor activation in rats // Behav. Neural. Biol., 1991. V.55. P.214-226.

44. Bijl D. The serotonin syndrome // The Netherlands J. Med., 2004. V.62(9). P.309-313.

45. Bill D.J., Knight M., Forster E.A., Fletsher A. Direct evidence for an important species difference in the mechanism of 8-OH-DPAT-induce hypothermia//Br. J. Pharmacol., 1991. V. 103. P. 1857-1864.

46. Blanchard D.C., Blanchard R.J. Ethoexperimental approaches to the biology of emotion // Ann. Rev. Psychol., 1988. V.39. P.43-68.

47. Blier P., de Montigny C. Current advances and trends in the treatment of depression//Trends Pharmacol. Sci., 1994. V.15. P.220-226.

48. Borsini F. Balance between cortical 5-HTiA and 5-HT2 receptor function: hypothesis for a faster antidepressant action // Pharmacol. Res., 1994. V.30. P.l-11.

49. Boutrel B., Monaca C., Hen R., Hamon M., Adrien J. Involvement of 5-HT1A Receptors in Homeostatic and Stress-Induced Adaptive Regulations of Paradoxical Sleep: Studies in 5-HTjA Knock-Out Mice // J. Neurosci., 2002. V.22(ll). P.4686-4692.

50. Braconnier A., Jeanneau A. Anxiety, aggression, agitation and depression: psychopathologic aspects // Encephale, 1997. V.3. P.43-47.

51. Brewster J., Leon M. Facilitation of maternal transport by Norway rat pups // J. Com. Physiol. Psychol., 1980. V.94. P.80-88.

52. Broekkamp, C.L., Oosterloo, S.K., Berendsen, H.H., van Delft, A.M. Effect of metergoline, fenfluramine and 8-OH-DPAT on catalepsy induced by haloperidol or morphine // Naunyn-Schmiedebergerg's Arch. Pharmacol., 1988. V.338. P.191-195.

53. Brunner H.G., Nelen M., Breakefield X.O., Popers H.H., Van Oost B.A. Abnormal behavior associated with a point mutation in the structural gene for monoamine oxidase A. // Science, 1993. V.262. P.578-80.

54. Burns C.M., Chu H., Rueter S.M., Hutchinson L.K., Canton H., SandersBush E., Emeson R.B. Regulation of serotonin-2C receptor G-coupling by RNA editing//Nature, 1997. V.387. P.303-309.

55. Bustin S. Absolute quantification of mRNA using real-time reverse transcription polymerase chain reaction assays // J. Mol. Endocrinol., 2000. V.25. P.169-193.

56. Charest A., Wainer B.H., Albert P.R. Cloning and differentiation-induced expression of a murine serotonin 1A receptor in a septal cell line // J. Neurosci., 1993. V.13. P.5164-5171.

57. Chidlow G., Le Corre S., Osborne N.N. Localization of 5-hydroxytryptamineiA and 5-hydroxytryptamine7 receptors in rabbit ocular and brain tissues // Neurosci., 1998. V.87. P.675-689.

58. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction // Anal. Biochem. 1987. V.162. P.156-159.

59. Ciaranello R.D., Lipsky A., Axelrod J. Association between fighting behavior and catecholamine biosynthetic enzyme activity in two inbred mouse sublines //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1974. V.71. P.3006-3008.

60. Comet M.A., Sevoz-Couche C., Hanoun N., Hamon M., Laguzzi R. 5-HT-mediated inhibition of cardiovagal baroreceptor reflex responseduring defense reaction in the rat // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol., 2004. V.287(4). P.1641-1649.

61. Connor J.L. Genetic mechanisms controlling the domestication of a wild house mouse population (Mus musculus) // J. Comp. Physiol. Psychol., 1975. V.89. P.l 18-130.

62. Consolo S., Arnaboldi S., Giorgi S., Russi G., Ladinsky H. 5-HT4 receptor stimulation facilitates acetylcholine release in rat frontal cortex // Neuroreport, 1994. V.5(10). P.1230-1232.

63. Cowen D.S., Molinoff P.B., Manning D.R. 5-HydroxytryptaminelA receptor-mediated increases in receptor expression and activation of Nuclear Factor-kB in transfected Chinese hamster ovary cells // Mol. Phfarm., 1997. V.52. P.221-226.

64. Davies P.A, Pistis M., Hanna M.C., Peters J.A., Lambert J.J., Hales T.G., Kirkness E.F. The 5-HT3B subunit is a major determinant of serotonin-receptor function //Nature, 1999. V.397. P.359-363.

65. Day M., Olson P., Platzer J., Striessnig J., Surmeier J. Stimulation of 5-HT2 receptors in prefrontal pyramidal neurons inhibits Cav1.2 L- typej 1

66. De Vry J. 5-HTiA receptor agonists: recent developments and controversial issues//Phsychopharm., 1995. V. 121. P. 1-26.

67. Del Tredici A.L., Schiffer H.H., Burstein E.S., Lameh J., Mohell N., Hacksell U., Brann M.R., Weiner D.M. Pharmacology of polymorphic variants of the human 5-HTja receptor // Biochem. Pharm., 2004. V.67(3). P.479-90.

68. Dixon A.K. Ethological strategies for defense in animals and humans: their role in some psychiatric disorders // Br. J. Med. Psychol., 1998. V.71. P.417-445.

69. Dumuis A., Bouhelal R., Sebben M., Cory R, Bockaert J. A nonclassical 5-hydroxitriptamine receptor positively coupled with adenyate cyclase in the central nervous system // Mol. Pharm., 1988. V.34. P.880-887.

70. Edwards D.H., Kravitz E.A. Serotonin, social status and aggression // Current Opinion in Neurobiol., 1997. V.7(6). P.812-819.

71. Emirbekov E.Z., Abdullaev R.A., Ibragimov I.I. Content of biogenic amines in brain under artificial and natural cooling of animals // Ukr. Biokhim. Zh., 1980. V.52(4). P.418-22.

72. Evrard A., Malagie I., Laporte A.M., Boni C., Hanoun N., Trillat A.C., Seif I., De Maeyer E., Gardier A., Hamon M., Adrien J. Altered regulation of the 5-HT system in the brain of MAO-A knock-out mice // Eur. J. Neurosci. 2002. V.15(5) P.841-851.

73. Fargin A., Raymond J.R., Lohse M.J., Kobilka B.K., Caron M.G., Lefkowitz R.J. The genomic clone G-21 which resembles a beta-adrenergic receptor sequence encodes the 5-HT.A receptor // Nature, 1988. V.335. P.358-360.

74. Fargin A., Raymond J.R., Regan J.W., Cotecchia S., Lefkowitz R.J., Caron M.G. Effector coupling mechanisms of the cloned 5-HTiA receptor //J. Biol. Chem., 1989. V.264(25). P.14848-14852.

75. Foley K.P., Leonard M.W., Engel J.D. Quantitation of RNA using the polymerase chain reaction // Trends Genet., 1993. V.9. P.380-385.

76. Fornal C.A., Litto W.J., Metzler C.W., Marrosu F., Tada K., Jacobs B.L. Single-unit responses of serotonergic dorsal raphe neurons to 5-HTiA agonist drug administration in behaving cats // J. Pharm. Exp. Therapeutics, 1994. V.270(3). P.1345-1358.

77. Fricchione G.L. Neuroleptic catatonia and its relationship to psychogenic catatonia //Biol. Psychiatr., 1985. V.20. P.304-313.

78. Fuller R.W. Role of serotonin in therapy of depression and related disorders //J. Clin. Psychiatry, 1991. V.52(5). P.52-57.

79. Garcia-Osta A., Frechilla D., Del Rio J. Effect of p-chloroamphetamine on 5-HTjA and 5-HT7 serotonin receptor expression in rat brain // J. Neurochem., 2000. V.74. P. 1790-1797.

80. Gerhardt C.C., van Heerikhuizen H. Functional characteristics of heterologously expressed 5-HT receptors // Eur. J. Pharmacol., 1997. V.334. P. 1-23.

81. Geyer M., Puerto A., Menkes D., Segal D., Mandell A. Behavioral studies following lesions of the mesolimbic and mesostriatal serotoninergic pathways // Brain Res., 1976. V.106. P.257-270.

82. Goodwin G.M., De Souza R.J., Green A.R., Heal D.J. The pharmacology of the behavioral and hypothermic responses of rats to 8-OH-DPAT // Psychopharmacol., 1987. V.91. P.500-505.

83. Haleem D.J., Shireen E., Haleem M.A. Somatodendritic and postsynaptic serotonin-1A receptors in the attenuation of haloperidol-induced catalepsy // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry, 2004. V.28(8). P. 13231329.

84. Hammer R.P. Hori K.M., Blanchard R.J. Blanchard D.C. Domestication alters 5-HTia receptor binding in rat brain // Pharm. Biochem. Behav., 1991. V.42. P.25-28.

85. Handley S.L. 5-Hydroxytryptamine pathways in anxiety and its treatment //Pharmacol. Ther., 1995. V.66. P.103-148.

86. Hassanain M., Bhatt S., Siegel A. Differential modulation of feline defensive rage behavior in the medial hypothalamus by 5-HT)A and 5-HT2 receptors // Brain Res., 2003. V.981(l-2). P.201-209.

87. Heisler L., Chu H., Brennan T., Danao J., Bajwa P., Passons L., Tecott L. Elevated anxiety and antidepressant-like responses in serotonin 5-HT|A receptor mutant mice // Proc. Natl. Acad. Sci., 1998. V.95. P. 1073410739.

88. Hicks P.B., The effect of serotonergic agents on haloperidol-induced catalepsy//Life Sci., 1990. V.47. P.1609-1615.

89. Hjorth S. Hypothermia in the rat induced by the potent serotonergic agent 8-OH-DPAT // J. Neural Transm., 1985. V.61. P.131-135.

90. Hjorth S., Sharp T. Effect of the 5-HT1A receptor agonist 8-OH-DPAT on the release of 5-HT in dorsal and median raphe-innervated rat brain regions as measured by in vivo microdialysis // Life Sci., 1991. V.48(18). P. 1779-1786.

91. Hjorth S., Sharp T. Mixed agonist/antagonist properties of NAN-190 at 5-HTja receptors: behavioural and in vivo brain microdialysis studies // Life Sci., 1990. V.46(13). P.955-963.

92. Hodge G.K., Butcher L.L. 5-Hydroxytryptamine correlates of isolation-induced aggression in mice // Eur. J. Pharmacol., 1974. V.28. P.326-337.

93. Humphrey P.P., Hartig P., Hoyer D. A proposed new nomenclature for 5-HT receptors // Trends Pharmacol. Sci., 1993. V.14. P.233-236.

94. Humphrey P.P.A., Barnard E.A., International union of pharmacology: XIX. The IUPHAR receptor code: a proposal for an alphanumeric classification system // Pharm. Reviews, 1998. V.50(2). P.271-277.

95. Jacobs B.L., Azmitia E.C. Structure and function of the brain serotonin system // Physiol. Rev., 1992. V.72. P. 165-229.

96. Jacobs B.L., Fornal C.A. Serotonin and behavior. A general hypothesis. In: Psychopharmacology: The fourth generation of progress (Bloom FE., Kupfer DJ., eds) // N.Y.: Raven Press, 1995. P.461-469.

97. Jiang X., Song L., Ni Y., Roe B. (2003) Mus musculus clone rp23-28a7 map 7 strain C57BL/6J. EMBL/GenBank/DDBJ/AC090122.26.

98. Jordan S., Chen R., Koprivica V., Hamilton R., Whitehead R.E., Tottori K., Kikuchi T. In vitro profile of the antidepressant candidate OPC-14523 at rat and human 5-HTiA receptors // Eur. J. Pharmacol., 2005. V.517(3). P.165-73.

99. Jouvet M. Biogenic amines and the states of sleep // Science, 1969. V. 163. P.32-41.

100. Jouvet M. Neurophysiology of the states of sleep // Physiol. Revs., 1967. V.17. P.l 17-177.

101. Kanes S.J., Hitzemann B.A., Hitzemann R.J. On the relationship between D2 receptor density and neuroleptic-induced catalepsy among eight inbred strains of mice // J. Pharm. Exp. Ther., 1993. V.267. P.538-547.

102. Kawanishi Y., Harada S., Tachikawa H., Okubo T., Shiraishi H. Novel mutations in the promoter and coding region of the human 5-HTiA receptor gene and association analysis in schizophrenia // Am. J. Med. Genet., 1998. V.81(5). P.434-439.

103. Klemm W.R. Drug effects on active immobility responses: What they tell us about neurotransmitter systems and motor functions // Progress in Neurobiology, 1989. V.32. P.403-422.

104. Korte S.M., Meijer O.C., de Kloet E.R., Buwalda B., Keijser J., Sluyter F., van Oortmerssen G., Bohus B. Enhanced 5-HTiA receptor expression in forebrain regions of aggressive house mice // Brain Res., 1996. V.736(l-2). P.338-343.

105. Kostowski W., Valzelli L. Biochemical and behavioral effects of lesions of the raphe nuclei in aggressive mice // Pharmacol. Biochem. Behav., 1974. V.2. P. 277-280.

106. Kulikov A.V., Kozlachkova E.Y., Maslova G.B., Popova N.K. Inheritance of predisposition to catalepsy in mice // Behav. Genetics, 1993. V.23(4). P.379-384.

107. Kulikov A.V., Naumenko V.S., Voronova I.P., Tikhonova M.A., Popova N.K. Quantitative RT-PCR assay of 5-HTiA and 5-HT2A serotonin receptor mRNAs using genomic DNA as an external standard // J. Neurosci. Methods. 2005. V.141(l). P.92-101.

108. Kung H.F., Kung M.-P., Clarke W., Maayani S., Zhuang Z.P. A potential 5-HT1A receptor antagonist: p-MPPI // Life Sci. 1994a. V.55(19). P. 14591462.

109. Kung M.-P., Zhuang Z.P., Frederick D., Kung H.F. In vivo binding of 1231. 4-(2'-methoxyphenyl)-1 -[2'-(N-2"-pyridinyl)-p-iodobenzamido-]ethyl-piperazine, p-MPPI, to 5-HT1A receptors in rat brain // Synapse, 1994b. V.18(4). P.359-366.

110. Lagerspetz K.M.J., Lagerspetz K.Y.H. Changes in the aggressiveness of mice resulting from selective breeding, learning and social isolation // Scand. J. Psychol., 1971. V.12. P.241-248.

111. Lai M.K., Tsang S.W., Francis P.T., Esiri M.M., Keene J., Hope T., Chen C.P. Reduced serotonin 5-HTiA receptor binding in the temporal cortexcorrelates with aggressive behavior in Alzheimer disease // Brain Res., 2003. V.974(l-2). P.82-87.

112. Lejeune F., Rivet J.-M., Gobert A., Canton A., Millan M. WAY 100,135 and (-)-tertatolol act as antagonists at both 5-HTia autoreceptors and postsynaptic 5-HTia receptors in vivo // European J. Pharm., 1993. V.240. P.307-310.

113. Lembo P.M.C., Ghahremani M.H., Morris S.J., Albert P.R. A conserved threonine residue in the second intracellular loop of the 5-Hydroxytryptamine 1A receptor directs signaling specificity // Mol. Pharm., 1997. V.52. P.164-171.

114. Lemonde S., Du L., Bakish D., Hrdina P., Albert P.R. Association of the C(-1019)G 5-HTia functional promoter polymorphism with antidepressant response // Int. J. Neuropsychopharm., 2004. V.7(4). P.501-506.

115. Liu J., Jordan L.M. Stimulation of the parapyramidal region of the neonatal rat brain stem produces locomotor-like activity involving spinal 5-HT7 and 5-HT2A receptors // J. Neurophysiol., 2005. V.94(2). P. 13921404.

116. Lucas J.J., Hen R. New players in the 5-HT receptor field: genes and knockout // Trends in Pharmacol. Sci., 1995. V.16. P.246-252.

117. Lucki I. The spectrum of behaviors influenced by serotonin // Biol. Psychiatry, 1998. V.44. P. 151-162.

118. Maes M., Meltzer H.Y. The serotonin hypothesis of major depression. In: // Psychopharmacology: The Fourth Generation of Progress (Bloom E.E. and Kupfer N.N., ds.) // N.Y.: Raven Press, 1995. P.933-944.

119. Maj J., Chojnacka-Wojcik E., Tatarczynska E., Klodzinska A. Central action of ipsapirone, a new anxiolytic drug, on serotoninergic, noradrenergic and dopaminergic functions // J. Neural. Transm., 1987. V.70. P.l-17.

120. Mancilla-Diaz J.M., Escartin-Perez R.E., Lopes-Alonso V.E., FloranGarduno B.F., Romano-Camacho J.B. Role of 5-HT1A and 5-HT1B receptors in the hypophagic effect of 5-HT on the structure of feeding behavior //Med. Sci. Monit., 2005. V.ll(3). P.74-79.

121. Manuel-Apolinar L., Meneses A. 8-OH-DPAT facilitated memory consolidation and increased hippocampal and cortical cAMP production // Behav. Brain Res., 2004. V.148(l-2). P.179-84.

122. Marinissen M.J., Gutkind J.S. G-protein-coupled receptors and signaling networks: emerging paradigms // Trends Pharm. Sci., 2001. V.22(7). P.368-376.

123. Matthews J., Chung M., Matyas J. Persistent DNA contamination in competitive RT-PCR using cRNA internal standards: Identity, quantity and control // BioTechniques, 2002. V.32. P. 1412-1417.

124. Maxson A.C. Aggression: concepts and methods relevant to genetic analyses in mice and humans. In: Neurobehavioral genetics. Methods and applications (Jones B.C., Mormede P. eds.) // CRC Press LLC, N.W., Boca Raton, Florida, 2000. V. 396. P. 293.

125. McKenzie-Quirk S.D., Girasa K.A., Allan A.M., Miczek K.A. 5-HT(3) receptors, alcohol and aggressive behavior in mice // Behav. Pharmacol., 2005. V.16(3). P. 163-9.

126. Mendoza D.L., Bravo H.A., Swanson H.H. Antiaggressive and anxiolytic effects of gepirone in mice, and their attenuation by WAY 100635 // Pharmacol. Buiochem. Behav., 1999. V.63. P.499-509.

127. Moisan M.-P., Courvoisier H., Bihoreau M-T., Gauguier D., Hendley E.D., Lathrop M., James M.R. Mormede P. A major quantitative trait locus influences hyperactivity in the WKHA rat // Nat. Genet. 1996. V.14. P.471-473.

128. Monsma F.J., Shen Y., Ward R.P., Hamblin M.W., Sibley D.R. Cloning and expression of novel serotonin receptor with high affinity for tricyclic psychotropic drugs // Mol. Pharm., 1993. V.43. P.320-327.

129. Moyer K.B. Kinds of aggression and their physiological basis // Commun. Behav. Biol., 1968. V.2, Part A. P.65-87.

130. Navarro J.F., Ibanez M., Luna G. Behavioral profile of SB 269970, a selective 5-HT(7) serotonin receptor antagonist, in social encounters between male mice // Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol., 2004. V.26(7). P.515-8.

131. Neal-Beliveau B.S., Joyce J.N., Lucki I. Serotonergic involvement in haloperidol-induced catalepsy // J. Pharmacol. Exp. Ther., 1993. V.265. P.207-217.

132. Nishiguchi N., Shirakawa O., Ono H., Nishimura A., Nushida H., Ueno Y., Maeda K. Lack of an association between 5-HTja receptor gene structural polymorphisms and suicide victims // Am. J. Med. Genet., 2002. V. 114(4). P.423-425.

133. Ohtani M., Shindo S., Yoshioka N., Polymorphism of the tryptophan hydroxilase gene and serotonin 1A receptor gene in suicide victims among Japanese // Tohoku. J. Exp. Med., 2004. V.202. P.123-133.

134. Olivier B., Mos J., van Oorschot R., Hen R. Serotonin receptors and animal model of aggressive behavior // Pharmacopsychiat., 1995. V.28. P.80-90.

135. Ou X.-M., Jafar-Nejad H., Storring J.M., Meng J.-H., Lemonde S., Albert P.R. Novel dual repressor elements for neuronal cell-specific transcription of the rat 5-HT1A receptor gene // J. Biol. Chem., 2000. V.275(ll). P.8161-9168.

136. Ou X.-M., Storring J.M., Kushwaha N., Albert P.R. Heterodimerization of mineralocorticoid and glucocorticoid receptor at a novel negative response element of the 5-HTia receptor gene // J. Biol. Chem., 2001. V.276(17). P.14299-14307.

137. Overstreet D.H. Rezvani A.H., Knapp D.J., Crews F.T., Janowsky D.S. Further selection of rat lines differing in 5-HT-1A receptor sensitivity: behavioral and functional correlates. // Psychiat. Genetics, 1996. V.6(3). P.107-117.

138. Overstreet D.H., Commissaris R.C., de la Garza R., File S.E., Knapp D.J., Seiden L.S. Involvement of 5-HTia receptors in animal tests of anxiety and depression: evidence from genetic models // Stress, 2003. V.6(2). P.101-110.

139. Papoucheva E., Dumuis A., Sebben M., Richter D.W., Ponimaskin E.G. The 5-hydroxytryptamine(lA) receptor is stably palmitoylated, and acylation is critical for communication of receptor with Gj protein // J. Biol. Chem., 2004. V.279(5). P.3280-3291.

140. Parks C.L., Robinson R., Sibille E., Shenk T., Toth M. Increased anxiety of mice lacking the serotonin 1A receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998. V.95. P. 10734-10739.

141. Patel S., Roberts J., Moorman J., Reavill C. Localization of serotonin-4 receptors in the striatonigral pathway in rat brain // Neurosci., 1995. V.69(4). P.l 159-1167.

142. Pauwels P.J. 5-HT receptors and their ligands. In: Tocris Reviews (Barker N., ed.) // UK.: Tocris Cookson, Britol, 2003.

143. Pauwels P.J. Diverse signaling by 5-hydroxytryptamine (5-HT) receptors // Biochem. Pharm., 2000. V.60. P. 1743-1750.

144. Peroutka S.J., Snyder S.H. Multiple serotonin receptors: differential binding of H.5-hidroxitriptamine, [ HJlisergic acid diethylamide and [3H]spiroperidol // Mol. Pharm., 1979. V.16. P.687-699.

145. Pinto W., Battaglia G. Comparative recovery kinetics of 5-HT1A IB and 2A receptor subtype in rat cortex after receptor inactivation: evidence for differences in receptor production and degradation // Mol. Pharm., 1994. V.46. P.l 111-1119.

146. Plassat J.-L., Boschert U., Amlaiky N., Hen R. The mouse 5-HT5 receptors revealed a remarkable heterogeneity within the 5-HTiD family // EMBO J., 1992. V.l 1. P.4779-4786.

147. Plyusnina I., Oskina I. Behavioral and adrenocortical responses to open-field test in rats selected for reduced aggressiveness towards humans // Physiol. Behav., 1997. V.61(3). P.381-385.

148. Popova N, Kulikov A. On the role of brain serotonin in expression of genetic predisposition to catalepsy in animal models // Am. J. Med. Genetics, 1995. V.60(3). P.214-220.

149. Popova N., Gilinsky M., Amstislavskaya T., Morosova E., Seif T., De Maeyer E. Regional serotonin metabolism in the brain of transgenic micelacking monoamine oxidase A // J. Neurosci. Res., 2001. V.66. P.423-427.

150. Popova N.K. Brain serotonin in genetically defined defensive behaviour. In: Complex Brain Functions: Conceptual Advances in Russian Neuroscience (Millar R., Ivanitsky A.M., Balaban P.M., eds.) // Harwood Press, 1999. P.307-329.

151. Popova N.K. Thermoregulation effect of serotonin in hibernation. In: Living in the cold. Physiological and biochemical adaptations (Heller H.G., Musacchia X.J., Wang L.C.H., eds.) // Elsevier Sci. Publ. Co. Inc., NY. 1986. V.588. P. 193-200.

152. Popova N.K., Amstislavskaya T.G. Involvement of the 5-HT1A and 5-HT.B serotonergic receptor subtypes in sexual arousal in male mice // Psychoneuroendocrinology, 2002. V.27. P.609-618.

153. Popova N.K., Avgustinovich D.F., Kolpakov V.G., Plyusnina I.Z.•j

154. Specific H.8-OH-DPAT binding in brain regions of rats genetically predisposed to various defense behavior strategies // Pharm. Biochem. Behav., 1998. V.59(4). P.793-797.

155. Popova N.K., Ivanova E.A. 5-HTiA receptor antagonist p-MPPI attenuates acute ethanol effects in mice and rats // Neurosci. Letter, 2002. V.322. P. 1-4.

156. Popova N.K., Konusova A.V. Brain and peripheral effects of serotonin on thermoregulation//Biogenic Amines, 1985. V.3(2). P.125-134.

157. Popova N.K., Kudryavtseva N.N. Inhibitory effect of serotonin on arousal from hibernation // Biogenic Amines, 1985. V.2(3). P.203-210.

158. Popova N.K., Kulikov A.V., Nikulina E.M., Kozlachkova E.Y., Maslova G.B. Serotonin metabolism and serotonergic receptors in Norway rats selected for low aggressiveness to man // Aggressive Behavior, 1991a. V.17. P.207-213.

159. Popova N.K., Maslova L.N., Naumenko E.V. Serotonin and the regulation of the pituitary-adrenal system after deafferentation of the hypothalamus // Brain Res., 1972. V.47. P.61-67.

160. Popova N.K., Nikulina E.M., Kulikov A.V. Genetic analysis of different kinds of aggressive behavior// Behav. Genet., 1993a. V.23. P.491-497.

161. Popova N.K., Voitenko N.N., Kulikov A.V., Avgustinovich D.F. Evidence for the involvement of central serotonin in mechanism of domestication of silver foxes // Pharm. Biochem. Behav. 19916. V.40(4). P.751-756.

162. Popova N.K., Voronova I.P., Kulikov A.V. Involvement of brain tryptophan hydroxylase in the mechanism of hibernation // Pharm. Biochem. Behav., 19936. V.46. P.9-13.

163. Proudnikov D., Yuferov V., LaForge S., Ho A., Kreek M-J. Quantification of multiple mRNA levels in rat brain regions using realtime optical PCR// Mol. Brain Res., 2003. V.l 12. P. 182-185.

164. Pruus K., Skrebuhhova-Malmros T., Rudissaar R. Matto V., Allikmets L. 5-HTiA receptor agonists buspirone and gepirone attenuate apomorphine-induced aggressive behavior in adult male Wistar rats // J. Physiol. Pharm., 2000. V.51(4). P.833-846.

165. Rakel R.E. Long term buspirone therapy for chronic anxiety: a multicenter international study to determine safety // Southern Med. J., 1990. V.83. P.194-198.

166. Ramboz S., Oosting R., Amara D.A., Kung H.F., Blier P., Mendelsohn M., Mann J.J., Brunner D., Hen R. Serotonin receptor 1A knockout: Ananimal model of anxiety-related disorder // Proc. Natl. Acad. Sei. USA., 1998. V.95. P. 14476-14481.

167. Raymond J.R. Protein kinase C induces phosphorylation and desensitization of the human 5-HT.A receptor // J. Biol. Chem., 1991. V.266(22). P.14747-14753.

168. Raymond J.R., Mukhin Y.V., Gettys T.W., Garnovskaya M.N. The recombinant 5-HTiA receptor: G protein coupling and signaling pathways //British J. Pharm., 1999. V.127. P. 1751-1764.

169. Ricci L.A., Grimes J.M., Melloni R.H. Jr. Serotonin type 3 receptors modulate the aggression-stimulating effects of adolescent cocaine exposure in Syrian hamsters (Mesocricetus auratus) // Behav. Neurosci.,2004. V. 118(5). P. 1097-110

170. Ricci L.A., Knyshevski I., Melloni R.H. Jr. Serotonin type 3 receptors stimulate offensive aggression in Syrian hamsters // Behav. Brain. Res.,2005. V.156(l). P. 19-29.

171. Robinson D.S., Alms D.R., Shrotriya R.C., Messina M., Wickramaratne P. Serotonergic anxiolytics and treatment of depression // Psychopathol., 1989. V.22(l). P.27-36.

172. Saavedra J., Brownstein M., Palkovits M. Serotonin distribution in the limbic system of the rat // Brain Res., 1974. V.79. P.437-441.

173. Sabath D.E., Broonl H.K. Glyceraldegyde-3-phosphate dehydrogenase mRNA is a major interleukin 2-induced transcript in a cloned T-helper lymphocyte // Gene, 1990. V.91. P.185-191.

174. Sanberg P.R., Bunsey M.D., Giordano M., Norman A.B. The catalepsy test: Its ups and downs // Behav. Neurosci., 1988. V.102. P.748-759.

175. Sanders-Bush E., Canton H. Serotonin receptors. Signal transduction pathways. In: Psychopharmacology: The Fourth Generation of Progress (Bloom F.E., Kupfer D.J., eds.) //N.Y.: Raven Press, 1995. P.431-441.

176. Sarter M., Bruno J.P. Animal models in biological psychiatry. In: Biological Psychiatry (D'haenen H., den Boer J.A., Willner P., eds.) // John Wiley & Sons Ltd., 2002. P. 1 -8.

177. Saudou F., Hen R. 5-Hydroxytryptamine receptor subtypes: Molecular and functional diversity // Adv. In Pharmacol., 1994. V.30, P.327-380.

178. Seretti A., Artioli P., Lorenzi C., Pirovano A., Tubazio V., Zanardi R. The C(-1019)G polymorphism of the 5-HT.A gene promoter and antidepressant response in mood disorders: preliminary findings // Int. J. Neuropsychopharm., 2004. V.7(4). P.453-460.

179. Singerman B. Raheja R, Malignant catatonia a continuing reality // Ann. Clin. Psychiatry, 1994. V.6. P.259-266.

180. Sperry T.S., Thompson C.K., Wingfield J.C. Effects of acute treatment with 8-OH-DPAT and fluoxetine on aggressive behaviour in male song sparrows (Melospiza melodia morphna) // J. Neuroendocrinol., 2003. V.15(2). P. 150-160.

181. Starring J.M., Charest A., Cheng P., Albert P.R. TATA-driven transcriptional initiation and regulation of the rat serotonin 5-HTiA receptor gene // J. Neurochem., 1999. V.72. P.2238-2247.

182. Suzuki Y., Sawamura K., Someya T. The effects of a 5-hydroxytryptamine 1A receptor gene polymorphism on the clinical response to fluvoxamine in depressed patients // Pharmacogenomics J., 2004, V.4(4). P.283-286.

183. The European health report: public health action for healthier children and populations. 2005, World Health Organization. Copenhagen. P. 139.

184. Wadenberg M.-L., Cortizo L., Ahlenius S. Evidence for specific interactions between 5-HT1A and dopamine D2 receptor mechanisms in the mediation of extrapyramidal motor function in the rat // Pharm. Biochem. Behavior, 1994. V.47(3). P.509-513.

185. Walther D., Bader M. A unique central tryptophan hydroxylase isoform // Bioche. Pharmacol., 2003. V.66. P. 1673-1680.

186. Wirtshafter D., Montana W., Asin K.E. Behavioral and biochemical studies of the substrates of midbrain raphe lesion induced hyperactivity // Pysiol. Behav., 1986. V.38(6). P.751-759.

187. Wissink S., Meijer O., Pearce D., van der Burg B., van der Saag P.T. Regulation of the rat serotonin-1A receptor gene by corticosteroids // J. Biol. Chem., 2000. V. 275(2). P. 1321-1326.

188. World Report on Violence and Health. 2002, World Health Organization. Geneva, Switzerland. P.340.

189. Wu S., Comings D.E. A common C-1018G polymorphism in the human 5-HTia receptor gene // Psychiatr Genet., 1999. V.9(2). P. 105-106.

190. Xie D.W., Deng Z.L., Ishigaki T., Nakamura Y., Suzuki Y., Miyasato K., Ohara K., Ohara K. The gene encoding the 5-HTiA receptor is intact in mood disorders //Neuropsychopharmacology., 1995. V.12(3). P.263-268.

191. Zamorano P.L., Mahesh V.B., Brann D.W. Quantitative RT-PCR for neuroendocrine studies//Neuroendocrinology, 1996. V.63. P.397-407.

192. Zifa E., Fillion G. 5-Hydroxytryptamine receptors // Pharmacol. Rev., 1992. V.44. P. 401-458.

Информация о работе

Науменко, Владимир Сергеевич
кандидата биологических наук
Новосибирск, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Участие серотониновых 5-НТ1А рецепторов в регуляции различных видов генетически детерминированного защитного поведения - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Участие серотониновых 5-НТ1А рецепторов в регуляции различных видов генетически детерминированного защитного поведения - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы