Свободнорадикальные процессы в крови и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме

Попова, Татьяна Петровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Свободнорадикальные процессы в крови и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Свободнорадикальные процессы в крови и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме"

На правах рукописи

Попова Татьяна Петровна

СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В КРОВИ И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ МЕТАБОЛИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ

03.00.04 - биохимия

003480329

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ростов-на-Дону 2009

Работа выполнена на кафедре биохимии и микробиологии Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южный федеральный университет».

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Внуков Валерий Валентинович Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Франциянц Елена Михайловна доктор медицинских наук, профессор Терентьев Владимир Петрович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Нижегородская

государственная медицинская академия» (г. Нижний Новгород).

Защита диссертации состоится 10 ноября 2009 г. в 13.00 на заседании диссертационного совета Д.212.208.07 по биологическим наукам в Южном федеральном университете (344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Большая Садовая, 105, ауд^^

С диссертацией можно ознакомится в научной библиотеке ЮФУ по адресу: 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Пушкинская, 148.

Автореферат разослан « 3 »009 г. Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологических наук Т.С. Колмакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Метаболический синдром (МС) представляет собой комплекс взаимосвязанных нарушений углеводного и жирового обменов, а также механизмов регуляции артериального давления (АД) и функции эндотелия, в основе развития которых лежит снижение чувствительности тканей к инсулину — инсулинорезистентность (ИР). Клиническая значимость нарушений и заболеваний, объединённых рамками метаболического синдрома, заключается в том, что их сочетание в значительной степени ускоряет развитие и прогрессирование атеросклеротических сосудистых заболеваний, которые занимают первое место среди причин смертности населения большинства развитых стран (Парфенова, 1998; Диденко, 1999; Казека, 2002).

Резистентность к потреблению глюкозы, стимулированной инсулином -общий феномен, который играет основную роль в патогенезе многих болезней человека, в том числе, МС. Возникновение ИР и следующей за ней компенсаторной гиперинсулинемии (ГИ) зачастую ассоциируются с такими факторами риска ишемической болезни сердца (ИБС), как ожирение, гипергликемия, артериальная гипертензия, дислипопротеинемия (Bartnik et at., 2004). В развитии ИР имеют значение как фактор генетической предрасположенности (нарушение рецепторных и пострецепторных механизмов передачи сигнала инсулина), так и определенные особенности образа жизни: избыточное питание, снижение физической активности, курение (Coleman, Stevens et al., 2005).

поможет разработать патогенетически верную терапию, направленную на профилактику системных нарушений в различных органах и тканях.

Цель работы. Исследование свободнорадикальных процессов в крови и структурно-функционального состояния мембран эритроцитов больных при метаболическом синдроме. Задачи исследования.

1) Исследовать уровень свободнорадикальных процессов по параметрам НгОг-люминол индуцированной хемилюминесценции и интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по содержанию их молекулярных продуктов - диеновых коньюгатов (ДК), малонового диальдегида (МДА) и шиффовых оснований (ШО) в крови больных с МС.

2) Определить активность ферментативных (супероксиддисмутаза (СОД), каталаза и церулоплазмин) и уровень неферментативных (мочевина, мочевая кислота и а-токоферол) антиоксидантов в крови обследуемых пациентов с МС.

3) Исследовать стабильность и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов клинической группы.

4) Определить уровень эндогенной интоксикации по содержанию молекул средней массы (МСМ) в плазме крови и развитие гипоксии по содержанию ксантина и молочной кислоты в крови обследуемых больных.

5) Исследовать уровень СРП, сбалансированность в системе прооксиданты - антиоксиданты в крови, стабильность и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов, развитие эндогенной интоксикации при проведении больным метаболическим синдромом дието - и фармакотерапии.

Научная новизна работы. В работе впервые проведены комплексные исследования свободнорадикальных процессов, генерации активных интермедиатов кислорода и интенсивности перекисного окисления липидов при МС.

Впервые оценена роль ферментативных (СОД, каталаза и церулоплазмин) и неферментативных (мочевина, мочевая кислота и витамин Е) эндогенных антиоксидантов плазмы крови, являющихся основными компонентами адаптивно-компенсаторных механизмов, в регуляции свободнорадикальных процессов при МС и его коррекции дието- и фармакотерапией,.

В работе впервые исследованы физико-химические параметры, отражающие структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов больных с МС, показатели дестабилизации и проницаемости, в основе которых лежат нарушения микровязкости липидного бислоя, мембранных белков, полярности липидного матрикса.

Впервые отмечено, что при МС у больных развивается эндогенная интоксикация и наблюдаются признаки гипоксического синдрома.

В комплексном лечении МС использование сбалансированной по содержанию жиров и углеводов диеты, сопряженной с физическими упражнениями и лекарственными средствами, повышающими чувствительность тканей к инсулину (глюкофаж) и содержащими соЗ-ПНЖК (омакор), приводит к ингибированию СРО в крови, восстановлению прооксидантно-антиоксидантного равновесия, стабилизации структурно-функционального состояния мембран эритроцитов, а также снижению эндогенной интоксикации.

Теоретическая и практическая значимость работы. В общетеоретическом плане выполненная работа позволяет расширить существующие представления о патогенезе метаболического синдрома, сформировать целостное представление о роли свободнорадикального окисления, ферментативных и неферментативных антиоксидантов в развитии заболевания.

Одним из важнейших компонентов в развитии МС является активация свободнорадикального окисления, процессов ПОЛ, структурно-функциональная дестабилизация мембран эритроцитов, повышение активности антиоксидантной системы, эндогенная интоксикация и гипоксия. Угнетение процессов свободнорадикального окисления, нормализация активности ферментативных и количества неферментативных антиоксидантов, стабилизация структурно-функционального состояния и, как следствие, изменение проницаемости мембран эритроцитов, снижение уровня эндогенной интоксикации являются результатом купирования МС при применении сбалансированной по содержанию жиров и углеводов диеты, сопряженной с физическими упражнениями, лекарственных средств, снижающих ИР (глюкофаж) и содержащих соЗ-ПНЖК (омакор).

Наиболее информативные биохимические и биофизические показатели развития патологического процесса, характеризующиеся простотой и оперативностью определения (содержание малонового диальдегида, активность ферментативных (супероксиддисмутаза, каталаза и церулоплазмин) антиоксидантов, содержание ксантина, лактата и молекул средней массы), могут быть использованы для прогноза развития

заболевания и оценки тяжести патологического процесса, а также эффективности проводимого лечения.

Полученные данные можно использовать в клинике как для диагностики состояния больных при метаболическом синдроме, так и для оценки эффективности проводимой терапии и подборе лекарственных средств.

Основные положения, выносимые на защиту. Развитие метаболического синдрома сопровождается усилением в крови пациентов свободнорадикальных процессов и повышения продуктов перекисного окисления липидов.

В крови больных метаболическим синдромом наблюдается повышение активности ключевых ферментов антирадикальной защиты (супероксиддисмутазы, каталазы, церулоплазмина) и уровня важнейших эндогенных неферментативных антиоксидантов (мочевины и мочевой кислоты).

У обследованной группы больных выявлены нарушения физико-химических характеристик мембран эритроцитов, сопровождаемые изменением структуры, дестабилизацией и увеличением их проницаемости.

Важными особенностями метаболического синдрома является развитие у больных эндогенной интоксикации и признаков гипоксического синдрома.

Включение в терапию метаболического синдрома диеты, сбалансированной по содержанию жиров и углеводов, в сочетании с физическими упражнениями, препаратов, обеспечивающих снижение инсулинорезистентности (глюкофаж) и содержащих со-ЗПНЖК (омакор) повышает эффективность лечения за счет выраженного антирадикального, антиоксидантного и мембранотропного действия и приводит к купированию синдрома эндогенной интоксикации.

Апробация диссертационной работы. Материалы диссертации доложены на третьей всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» (Новосибирск, 2007), XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008), научно-практическом симпозиуме с международным участием «Свободнорадикальная медицина и антиоксидантная терапия» (Волгоград, 2008), IV Всероссийском диабетологическом конгрессе (Москва, 2008), II Международной научной конференции (Ростов-на-Дону, 2008), II съезде физиологов СНГ (Кишинев, 2008), 69 научно-практической конференции студентов и молодых ученых Саратовского медицинского университета «Молодые ученые - здравоохранению региона» (Саратов, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ, в том числе в изданиях, рекомендованных ВАК РФ - 1 статья.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 197 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, характеристики обследуемых больных и методов исследования, результатов исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, списка литературы и приложения. Работа содержит 24 таблицы и иллюстрирована 10 рисунками. Список использованной литературы включает 338 наименований, в том числе 180 зарубежных источников.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

На базе Ростовского эндокринологического центра городской больницы №4 и клинико-диагностической лаборатории ГУЗ РОКБ было обследовано 50 пациентов с МС обоего пола в возрасте от 20 до 58 лет. В качестве контроля использовали данные по обследованию 20 доноров соответствующего пола и возраста, без вредных привычек. Критерии включения пациентов в исследования были: избыточная масса тела (ИМТ > 29 кг/м2), абдоминальный тип ожирения (ОТ/ОБ > 0,85), в 86% случаев висцеральное ожирение (ОТ > 90 см), наличие инсулинорезистентности, отсутствие сахарного диабета и других эндокринных нарушений, согласие на участие в исследовании, отсутствие противопоказаний для проведения планируемой терапии.

Пациенты с МС были рандомизированы в группы, не отличающиеся по полу и возрасту, в зависимости от выраженности метаболических нарушений. Группа, имеющая значительные изменения со стороны углеводного обмена (17 пациентов), получала глюкофаж (1000 мг/сут). В группу пациентов с МС, которые принимали омакор (1 капс/сут), вошли 17 пациентов, имеющие по результатам предварительного обследования нарушения со стороны липидного спектра крови. Еще одна группа состояла из 16 пациентов, которым была разработана индивидуальная немедикаментозная терапия, включающая рациональное гипокалорийное питание и дозированные аэробные физические нагрузки.

Получение биологического материала. Для получения плазмы крови использовали кровь, собранную утром натощак путем пункции локтевой вены. В качестве антикоагулянта использовали гепарин производство «Биохеми» (Австрия), 5000 МЕ/мл, из расчета 0,1 мл гепарина на 7-8 мл крови.

Метод определения активности процессов СРО. Уровень свободнорадикальных процессов оценивали по интенсивности хемилюминесценции в системе Н202 - люминол (Шестаков и др., 1979).

Методы определения активности процессов ПОЛ. Интенсивность перекисного окисления липидов определяли по содержанию его молекулярных продуктов - диеновых коньюгатов (Стальная, 1977), малонового диальдегида (Стальная и др., 1977) и шиффовых оснований (Bidlack et al. 1973). Содержание общих липидов определяли с помощью стандартного клинического набора реактивов производства «ЭКОлаб» (Россия).

Методы определения структурно-функционального состояния мембран эритроцитов. Для оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов определяли микровязкость липидной фазы, зон белок-липидных контактов и другие параметры с использованием метода, основанном на свойстве флуоресценции зонда пирен (Владимиров, Добрецов, 1980).

Содержание общего белка определяли методом Лоури в модификации Schacterle (1973). Исследовали содержание внеэритроцитарного гемоглобина (ВЭГ) (Меньшиков, 1987), а также суммарную пероксидазную активность (Покровский, 1969, в модификации Лукаша А.И. и др., 1996).

Методы определения активности антиоксидантной защиты. О состоянии антиоксидантной защиты судили по активности ферментативных антиоксидантов: супероксиддисмутазы (Сирота, 1999) (в плазме крови -супероксидустраняющая активность, Гуляева и др., 1988), каталазы (Королюк и др., 1988), церулоплазмина (ЦП) (Камышников, 2000); по содержанию неферментативных антиоксидантов: мочевой кислоты (с помощью стандартного клинического набора фирмы «Эко-сервис», Россия), мочевины (с помощью стандартного набора фирмы «Эко-Сервис» «Клини-Тест-Мочевина200», Россия) и а-токоферола (Архипова, 1988).

Метод определения эндогенной интоксикации. Определяли показатели эндогенной интоксикации по содержанию молекул средней массы по пяти фракциям (1=21 Онм, 238нм, 245нм,254нм, 280нм) (Камышников, 2000).

Методы определения уровня гипоксии. Для оценки уровня гипоксии исследовали содержание молочной кислоты (Меньшиков, 1987), пировиноградной кислоты (ПВК) (Бабаскин, 1981) и ксантина (Williams (1950) в модификации Погореловой и соавт. (1983).

Полученные в эксперименте результаты подвергали статистической обработке (Владимирский, 1983; Лакин, 1980). Рассчитывали среднее арифметическое значение ряда Мер и среднеквадратичное отклонение ш. Сравнение величин, в случае нормального распределения, проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Различия между группами считали

статистическими значимыми при р <0,05, при 0,05< р<0,1 говорили о тенденции к изменению, при р> 0,1 различия полагали недостоверными.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Свободно-радикальные процессы и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов у пациентов с МС

В эксперименте в исследуемой группе пациентов с МС относительно доноров в начале лечения наблюдали усиление СРО (по повышению параметров Н202-люминол индуцированной ХЛ): спонтанной светосуммы (на 34%), высоты быстрой вспышки (на 25%), высоты и светосуммы медленной вспышки (на 31% и 54%, соответственно), скорости окисления липидов (на 35%) (рис. 1).

Активация ПОЛ полиненасыщенных жирных кислот липидов в плазме крови и эритроцитах пациентов с МС выражалась в увеличении концентрации первичных, вторичных и конечных продуктов пероксидации. В сравнении с группой доноров, в плазме крови больных с МС содержание ДК было выше на 35%, МДА и ШО - на 28% и 22%, соответственно. В эритроцитах прослеживалась аналогичная динамика. Содержание ДК превышало контрольный уровень на 39%, МДА - на 34%, ШО - на 30%, соответственно (рис. 1).

в % к донорам

Сп- Свет 1-1 Н Бт 1д а £С202-лЮ51пнол индуцированная ХЛ _ ХГлазма _

Гемолизах .

Рис. 1. Интенсивность СРО по показателям Н202-люминол индуцированной ХЛ и процессов ПОЛ в крови пациентов с метаболическим синдромом.

Обозначение: Ь - высота быстрой вспышки, Н - высота медленной вспышки, Бт - светосумма медленной вспышки, tga - скорость окисления липидов.

Примечание: на рис. 1-9 достоверность изменений обозначена следующим образом: * - р< 0,05; ** - р< 0,01; *** - р<0,001

Усиление процессов ПОЛ в клетках может приводить к дестабилизации мембраны с последующей деструкцией клеток. Обнаруженная в наших

исследованиях интенсификация свободнорадикального ПОЛ в крови пациентов с МС приводила к изменению структурной организации мембран эритроцитов, к их дестабилизации и нарушению барьерных функций. Подтверждением этого являлось повышение содержания ВЭГ и интенсивности СПА в плазме крови (по сравнению с данными доноров) на 74% и 89%, соответственно (рис. 2), что свидетельствует об ухудшении реологических свойств крови и о повышенном гемолизе эритроцитов.

Наличие выраженных изменений структурно-функционального состояния мембран эритроцитов у пациентов с МС оценивали по нарушению микровязкости липидного бислоя и вязкостно-эластических свойств эритроцитов. Анализ спектра флуоресцентного зонда пирена позволил сделать вывод об изменении структуры эритроцитарной мембраны обследованных нами лиц с МС.

В сравнении с группой доноров, у больных с МС была повышена микровязкость липидного бислоя (Рэ/Тм 334) на 25%, текучесть зон белок-липидных контактов (Рэ/Рм282) - на 12%, степень погружения белков в липидный бислой (То-Р^о) - на 38%, гидрофобность внутренних областей мембраны ^372^393 334) снизилась на 7% (рис. 2). Коэффициент полярности зоны белок - липидных контактов (Рз72/Рз9з 282) относительно доноров остался без достоверных изменений. Обнаруженные структурные изменения мембран эритроцитов могут быть обусловлены некомпенсированной активацией ПОЛ. Кроме того, в литературе имеются указания на то, что изменения физико-химического состава плазматических мембран, снижение их текучести может наблюдаться вследствие нарушения транспорта неэтерефицированных жирных кислот (НЭЖК) (Титов, 2002, 2006; Новгородцева с соавт., 2008).

Рис. 2. Показатели структурно-функционального состояния мембран эритроцитов, уровни ВЭГ и СПА в плазме крови пациентов с метаболическим синдромом.

При нормальных условиях в организме сохраняется динамическое равновесие между интенсивностью СРП и активностью ферментативной и неферментативной антиоксидантных систем, что является одним из основных показателей гомеостаза. По сравнению с группой доноров, активность супероксидустраняющей активности (СУА) в плазме пациентов с МС достоверно увеличилась (на 98%), активность каталазы увеличивалась при этом на 28%. Наряду с этим, наблюдали достоверное повышение оксидазной активности ЦП (по сравнению со значениями доноров) на 45%. В гемолизате эритроцитов наблюдали аналогичные изменения. Активность данного фермента в группе пациентов с МС была достоверно повышена, по сравнению со значениями доноров, на 60%, активность каталазы - на 42% (рис. 3).

В исследуемой группе больных МС, по сравнению с группой доноров, наблюдали достоверное повышение в плазме крови содержания мочевой кислоты (на 27%) и мочевины (на 59%) (рис. 3). По-видимому, по мере прогрессирования метаболических нарушений при МС происходит увеличение «емкости» антиоксидантной системы крови за счет низкомолекулярных продуктов. Концентрация витамина Е, напротив, была снижена у пациентов с МС в плазме крови (на 41%), что, возможно, связано с усилением процесса детоксикации липидных перекисей а-токоферолом и, в связи с этим, снижением его резервного пула в организме (рис. 3).

Таким образом, активацию АОС в плазме крови больных с МС можно рассматривать как состояние ее «напряжения», которое, вероятно, вызвано усилением процессов СРО.

в к донорам

Рис. 3. Активность антиоксидантной системы в крови пациентов с метаболическим синдромом.

В начале обследования на фоне усиления СРО и процессов ПОЛ обнаружено повышение МСМ в плазме крови пациентов с МС (рис. 4). В наибольшей степени это касается метаболитов, регистрируемых при А,=246 нм (45%) и 280 нм (39%). Также наблюдалось повышение пула МСМ (при Х=254, Л,=210 и А,=238 нм). С одной стороны, это может свидетельствовать о повышении уровня гидролитических процессов, следствием которых является увеличение содержания в плазме крови продуктов деструкции биополимеров и, в первую очередь, белков, что лежит в основе развития эндогенной интоксикации (Добротина и др., 2004). С другой стороны, при указанных длинах волн регистрируются такие метаболиты, как мочевина и мочевая кислота, которые могут оказывать выраженное антиоксидантное действие. Поэтому можно предположить, что при развитии данной патологии увеличение содержания отдельных фракций МСМ может являться компенсаторной реакцией организма в ответ на усиление СРП.

Рис. 4. Содержание МСМ, ксантина, ПВК и лактата в крови пациентов с метаболическим синдромом.

При МС в условиях ИР под влиянием повышенной концентрации инсулина в крови происходит повышение выработки эндотелием вазоконстрикторных биологически активных веществ (эндотелина, тромбоксана А2) и снижение секреции таких мощных вазодилататоров, как простациклин и оксид азота. Нарушение функций сосудов сопровождается изменением транспорта кислорода и степени напряжения кислорода в тканях (ОауЫагёе е1 а1., 1988). Нарушение эндотелийзависимой вазодилатации, сопряженное с ухудшением вязкостно-эластических свойств крови, плохо деформируемой мембраной эритроцитов, приводит к развитию застойных явлений в микроциркуляторном русле, нарушению оксигенации тканей и, как следствие, тканевой гипоксии (ЮкисЫ, 1994). В нашем исследовании у

больных с МС до лечения было зарегистрировано повышение концентрации в цельной крови и эритроцитах лактата (на 67%), ПВК (на 43%) и ксантина (на 34%) (рис. 4), что свидетельствует о развитии гипоксии у пациентов с МС в начале заболевания, когда равновесие гипоксантин - ксантин сдвигается в сторону последнего. Параллельно с этим, по-видимому, метаболизм в клетках частично перестраивается с аэробного на анаэробный гликолиз, идущий с накоплением молочной кислоты.

Свободно-радикальные процессы и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при лечении пациентов с МС

В процессе терапии пациентов с МС во всех обследуемых группах наблюдали снижение интенсивности СРО по уменьшению параметров Н2Ог-люминол индуцированной ХЛ.

В группе, находящейся на рациональном питании и физических нагрузках, во все сроки обследования (3 и 6 мес.) не наблюдали достоверных изменений со стороны исследуемых параметров ХЛ в плазме крови как по отношению к показателям фоновых значений, так и по показателям в группе доноров, за исключением достоверного снижения высоты медленной вспышки (Н) через 6 месяцев (на 31%) относительно фоновых значений и повышения высоты быстрой вспышки (Ь) относительно группы доноров через 3 и 6 месяцев терапии (на 22% и 18%, соответственно), что свидетельствует об эффективности проведения диетотерапии (рис.5).

Рис. 5. Интенсивность СРО по показателям Н202-люминол индуцированной ХЛ в плазме крови пациентов с метаболическим синдромом при терапии.

В группе пациентов, которые наряду с традиционной терапией применяли глюкофаж, регистрировали снижение всех параметров Н2Ог люминол индуцированной ХЛ относительно исходных значений: через 3 месяца - в среднем на 31%, через 6 месяцев - на 29% (рис.5). Данные показатели статистически не отличались от значений, полученных в группе доноров, что свидетельствует об эффективности проводимой терапии.

В группе пациентов, которые наряду с традиционной терапией получали омакор, также наблюдали снижение в плазме крови всех параметров Н202-люминол индуцированной ХЛ через 3 месяца лечения в среднем на 23%, по сравнению с фоновыми значениями. Относительно значений доноров в данной группе пациентов с МС после лечения достоверно были повышены спонтанное свечение и высота медленной вспышки (на 22% и на 19%, соответственно) (рис.5).

На фоне снижения уровня СРП отмечали уменьшение интенсивности процессов ПОЛ. В группе пациентов с МС, находящейся на диетотерапии, наблюдали снижение МДА в плазме крови через 3 и 6 месяцев (на 23%) относительно фонового уровня, что соответствовало значениям доноров (рис.6). Достоверного изменения содержания остальных продуктов ПОЛ относительно значений доноров и исходного уровня в плазме крови данной группы не регистрировали.

В группе пациентов с МС, находящейся на терапии глюкофажем, через 3 и 6 месяцев лечения наблюдали уменьшение концентрации ДК в плазме крови относительно фоновых значений (в среднем на 34%), МДА и ШО через 6 месяцев терапии (на 21% и 29%, соответственно). Относительно значений доноров регистрировали достоверное увеличение ШО в плазме крови через три месяца терапии (на 11%), содержание остальных продуктов ПОЛ через три и шесть месяцев терапии достоверно не отличались от значений доноров, что свидетельствовало об эффективности проводимой терапии (рис.6).

В группе пациентов с МС, находящейся на терапии омакором, также наблюдали снижение в плазме крови относительно исходного уровня через три 3 месяца терапии ДК и МДА (в среднем на 19%), которые приближались к значениям этих показателей у доноров (рис.6). Содержание ШО в плазме крови данной группы в начале обследования соответствовало значениям доноров и достоверно не менялось в процессе лечения.

В эритроцитах пациентов с МС, получающих рациональное питание и дозированные физические нагрузки, регистрировали достоверное снижение МДА и через 3, и через 6 месяцев лечения (на 22%) (рис.6). Содержание остальных продуктов ПОЛ в данной группе после лечения достоверно не отличалось от таковых у доноров.

В группе, находящейся на терапии глюкофажем, наблюдали уменьшение продуктов ПОЛ в эритроцитах относительно исходного уровня через 3 и 6 месяцев (в среднем на 20% и 28%, соответственно), что статистически не отличалось от величин, определенных у доноров (рис.6).

63 Диета Ш P/mokocJD аж [Щ] Ома ко р

в % к фоновым значениям

3 мес. б мес. 3 мес. 6 мес. 3 мес. 6 мес. 3 мес- б мес. 3 мес. 6 мес. 3 ¡чес. 6 лес.

-5 -1 о

-15 -20

-25

-ЗО

ЛЛАА

Плазма

ДК ЛЛАА шо _Эритроциты__

-35 -АО

Рис. 6. Содержание продуктов ПОЛ в крови пациентов с метаболическим синдромом при терапии.

У пациентов с МС, находящихся на терапии омакором, как и в предыдущей группе, также отмечали (в сравнении с исходным фоном) достоверное снижение первичных и вторичных продуктов ПОЛ в эритроцитах через 3 месяца лечения: ДК - на 26% и МДА - на 25% (рис.6). Относительно значений доноров через 3 месяца терапии наблюдали достоверно повышенные концентрации в эритроцитах МДА и ШО (на 18% и 17%, соответственно), что свидетельствует о положительной эффективности проводимой терапии.

Снижение уровня СРП и процессов ПОЛ по мере проведения дието- и фармакотерапии нашло свое отражение и в стабилизации мембран эритроцитов пациентов с МС. Обнаружено снижение содержания ВЭГ в плазме крови относительно фоновых значений через 3 и 6 месяцев в группах, в которых проводилась диетотерапия и лечение глюкофажем (в среднем на 26% и 32%, соответственно) (рис. 7). В большей мере наблюдали снижение содержания ВЭГ в группе пациентов, находящихся на терапии глюкофажем. Через 6 месяцев - на 38%, при этом полученные результаты соответствовали значениям доноров.

В группе пациентов, находящейся на терапии омакором, относительно фонового уровня через 3 месяца регистрировали снижение ВЭГ в плазме крови (на 3 0%), однако этот показатель остался выше относительно значений доноров на 35% (рис. 7).

Активность СПА в плазме крови во всех группах пациентов МС по мере проведения терапии также снижалась относительно фоновых значений через 3 и 6 месяцев, в среднем на 27% и 34%, соответственно, что превышало значения доноров в среднем на 39% и 25% через 3 и 6 месяцев, соответственно (рис. 7).

Нормализация физико-химических свойств мембран эритроцитов и их стабилизация по мере проведения терапии подтверждается исследованиями структурных параметров мембран эритроцитов с использованием флуоресцентного зонда пирен.

Наиболее выраженные изменения относительно исходных значений наблюдались у пациентов, находящихся на терапии глюкофажем. В данной группе отмечали достоверное увеличение текучести липидного бислоя (Бэ/Рм 334), по сравнению с фоновыми значениями, через 3 и 6 месяцев терапии (на 36% и 38%, соответственно), что соответствовало значениям, полученным у доноров (рис.7). В группе проведения диетотерапии также наблюдали достоверное повышение данного параметра относительно исходного фона через 3 и 6 месяцев (на 27% и 22%, соответственно), статистически не отличавшееся от контроля. В группе пациентов МС, находящейся на терапии омакором, достоверных изменений текучести липидного бислоя относительно фоновых значений и значений доноров не наблюдали.

Повышение текучести аннулярных липидов (Рэ/Рм 282) отмечали при использовании в лечении пациентов с МС как глюкофажа, так и физической нагрузки с диетотерапией (относительно фоновых значений - в среднем на 23% в обеих группах) (рис.7). Данный параметр в группе пациентов, принимавших омакор, относительно фоновых значений и значений доноров через 3 месяца обследования достоверно не менялся.

Степень погружения белков в липидный бислой эритроцитов (Ро-Р,/Ро) при лечении МС как медикаментозными, так и немедикаментозными средствами (диетотерапией) достоверно снизилась относительно исходных значений через 3 месяца - в среднем на 20%, через 6 месяцев - на 29%, статистически не отличаясь от значений доноров.

Помимо этого, в процессе лечения регистрировали достоверное повышение гидрофобности внутренних областей мембраны ^372^393 334) относительно исходного уровня во всех трех группах пациентов с МС (в среднем на 27%) (рис.7), что статистически соответствовало значениям доноров.

Через 3 месяца приема омакора наблюдали достоверное повышение параметра, характеризующего полярность белок-липидных контактов ^372^393 282), в мембранах эритроцитов относительно исходных значений на 16%, что статистически не отличалось от контроля (рис.7). В остальных

группах относительно фоновых значений и значений доноров достоверных изменений по данному показателю не выявлено.

Рис.7. Структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов и уровни ВЭГ и СПА в плазме крови пациентов с метаболическим синдромом через 3 и 6 месяцев терапии.

Таким образом, в исследуемых группах пациентов с МС, находящихся на лечении, происходит стабилизация структурно-функционального состояния мембран эритроцитов с уменьшением их микровязкости, в большей степени в группах, принимавших глюкофаж и находящихся на диетотерапии. В группе пациентов, принимавших омакор, также, хотя и в меньшей степени, происходит нормализация структурных параметров эритроцитарной мембраны.

Рис. 8. Изменение активности антиоксидантной системы в крови пациентов с метаболическим синдромом через 3 и 6 месяцев терапии.

На фоне снижения СРО и стабилизации мембран эритроцитов отмечали уменьшение активности антирадикальных ферментов во всех группах при проведении пациентам различного вида терапии (рис. 8).

Относительно исходного уровня активность ферментов у больных с МС, находящихся на лечении глюкофажем, снижалась следующим образом: СОД в эритроцитах - на 38%, в плазме СУА - на 34%, каталаза - на 40% и ЦП - на 31%. Из всех изученных нами антиоксидантных ферментов в группе проведения диетотерапии наблюдалось уменьшение только активности ЦП через 3 и 6 месяцев лечения на 15% и 22%, соответственно. В эритроцитах данной группы наблюдали снижение активности каталазы через 6 месяцев на 15%. При лечении пациентов с МС омакором (через 3 мес.) значительное снижение относительно исходного уровня установлено в отношении СОД (47%), СУА (31%) и каталазы в плазме крови (24%).

На фоне выше перечисленных изменений после проведения диетотерапии, лечения глюкофажем и омакором, через 3 и 6 месяцев отмечали снижение содержания МСМ, по отношению к исходному уровню. Диетотерапия в сочетании с физическими нагрузками приводила к снижению содержания МСМ относительно исходного уровня при А,=210нм на 7% (р<0,05), при А.=246нм - на 32% (рис. 9). При лечении глюкофажем МСМ при 1=210 снижались на 9% (р<0,01), при Х=246 - на 42%.

Рис. 9. Содержание МСМ в плазме крови пациентов с метаболическим синдромом через 3 и 6 месяцев терапии.

В группе терапии омакором через 3 месяца пул МСМ при А.=210 уменьшался на 12%, МСМ при 1= 280 - на 34%. Данный факт

свидетельствует о снижении процессов, в результате которых идет накопление низкомолекулярных соединений, в том числе и эндотоксинов.

Таким образом, экспериментальные и клинические данные, полученные в ходе настоящего исследования, свидетельствуют о том, что одним из важнейших компонентов в развитии МС является активация свободнорадикального окисления, которая параллельно с усилением процессов ПОЛ ведет к дестабилизации структурно-функционального состояния мембран эритроцитов, усилению активности антиоксидантной системы, развитию эндогенной интоксикации и гипоксии, что может являться причиной таких грозных осложнений этого симптомокомплекса, как сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ), атеросклероз, сахарный диабет 2-го типа и т.д. Поэтому актуальным является поиск эффективных методов корригирующей терапии МС.

На основании вышеизложенного, еще одной задачей нашего исследования было проведение сравнительного анализа эффективности воздействия на организм диеты, сбалансированной по содержанию жиров и углеводов, в сочетании с дозированными физическими упражнениями и применения препаратов: глюкофажа, повышающего чувствительность инсулинозависимых тканей организма к инсулину, и омакора, содержащего шЗ-ПНЖК. В результате исследования было выявлено, что угнетение процессов свободнорадикального окисления, нормализация активности ферментативных и количества неферментативных антиоксидантов, стабилизация структурно-функционального состояния и, как следствие, изменение проницаемости мембран эритроцитов, снижение уровня эндогенной интоксикации являются результатом купирования метаболического синдрома при применении больным дието- и фармакотерапии.

Вероятно, эффективность применения глюкофажа и диеты в сочетании с комплексом физических упражнений имеет ряд общих механизмов, связанных с энергетическим обменом в мышцах. Основная биологическая роль инсулина - энергетическое обеспечение длительной и интенсивной физической нагрузки (Титов, 2005). Количество глюкозы, которое можно при действии инсулина депонировать в форме гликогена, определено, в первую очередь, числом миоцитов, т.е., массой мышечной ткани. Усиление поглощения клетками глюкозы и ее окислительное фосфорилирование требуют кислорода для улучшения оксигенации миоцитов.

Ухудшение реологических свойств крови, застойные явления периферического кровообращения, тканевая гипоксия, наличие эндогенной интоксикации.

Рис.10. Роль окислительного стресса в развитии осложнений при МС.

Обозначение: эЖ)С - эндотелиальная синтаза оксида азота, ВН4-тетрагидробиоптерин, NO" -оксид азота, ROS - реактивные кислородные радикалы; 0{, OONO", LOO', LO', ОН' - кислородосодержащие радикалы, ЛНП -ненасыщенные липопротеиды, СОД - супероксиддисмутаза.

При гипергликемии и гиперинсулинемии миоциты усиливают депонирование глюкозы в форме гликогена, при этом, когда происходит избыточное накопление гликогена в миоцитах, инсулинозависимые транспортеры глюкозы (Глют-4), перемещаясь с мембраны в цитозоль клетки, формируют физиологическую резистентность к инсулину в мышечной ткани. Чувствительность миоцитов к инсулину восстанавливается, как только начинают сокращаться миоциты, происходит активация гликогенолиза и возвращение на мембрану Глют-4 (EJ. Herniksen, 2002). Таким образом, одним из путей преодоления физиологической резистентности к инсулину является усиление функции миоцитов.

Чем больше масса мышечной ткани, чем длительнее и интенсивнее сокращаются миоциты, тем реже наступает функциональная резистентность к инсулину, ниже гипергликемия после еды и меньше глюкозы депонируется в адипоцитах. Повышение скорости утилизации глюкозы в кишечнике в результате действия метформина приводит к снижению ее содержания в крови, тем самым, способствуя снижению ГИ. Одновременно с этим проявляется ингибирующее действие этого препарата на глюконеогенез и гликогенолиз. Уменьшение концентрации инсулина в крови способствует также активации в крови гормончувствительной липазы под влиянием катехоламинов посредством цАМФ-зависимого фосфорилирования, тем самым, усиливая липолиз и угнетая липогенез. В крови восстанавливается нормогликемия, происходит нормализация инсулиновых эффектов: активация фосфатидил-инозитол-3-киназы (Р1-3-К) в эндотелиальных клетках и микрососудах, что приводит к экспрессии гена эндотелиальной ЫО-синтазы и высвобождению N0 эндотелиальными клетками и, как следствие, инсулин-обусловленой вазодилатации (Агсаго е! а1., 2002). При этом улучшается кровообращение, снижается окислительная напряженность организма, что приводит к снижению тканевой гипоксии и интенсивности СРО.

В настоящее время дислипидемию рассматривают как одну из причин смертности от ССЗ. Поэтому наличие у пациентов с МС нарушений углеводного и липидного обмена помещает данную категорию пациентов в группу с высоким и очень высоким риском развития осложнений со стороны сердечно-сосудистой системы (Ройтберг, 2007). Мембранопротективный эффект шЗ-ПНЖК связывают не только с встраиванием их в структуру мембраны, но и с улучшением эндотелиальной функции и уменьшением экспрессии адгезивных молекул (Кш-ЕйеЛоп е! а1., 2003). соЗ-докозагексаеновая кислота, в отличие от насыщенных жирных кислот, защищает эндотелиальные клетки от воздействия провоспалительных цитокинов и подавляет экспрессию молекул адгезии (МагсЫоШ, Вага е1 а!., 2003). В литературе имеются данные, что прием шЗ-ПНЖК в дозе 2,4 г в сутки сопровождался достоверным снижением маркеров активации эндотелия: растворимой межклеточной молекулы з1САМ-1 и тканевого активатора плазминогена 1РА у больных с гиперлипидемией. Кроме того, диета, обогащенная соЗ-ПНЖК, достаточно быстро (в течение 19 дней) приводит к восстановлению содержания их как в плазме крови, так и в мембранах эритроцитов (ЕпётеБ, ОЬогЬаш е! а\., 2000).

Следует отметить, что для поступления в организм нужного количества шЗ-ПНЖК необходим регулярный прием нескольких капсул, содержащих

рыбий жир, при этом увеличивается общее потребление как ненасыщенных, так и насыщенных ЖК. В условиях недостатка естественных антиоксидантов избыток ПНЖК может приводить к усилению процесса переокисления, образованию свободных радикалов, что повышает угрозу атерогенеза и канцерогенеза (Reis, Boucher, Pasternak, 2005). Восполняя недостатки препаратов, содержащих рыбий жир, в состав омакора помимо 1г концентрата соЗ-ПНЖК входит 4 мг витамина Е. Помимо этого, юЗ-ПНЖК являются предшественниками преимущественно эйкозанойдов и других веществ с противовоспалительными свойствами.

Таким образом, все проанализированные нами способы лечения оказывали нормализующее действие на активность свободнорадикального окисления, приводили к восстановлению баланса в системе про- и антиоксиданты, способствовали улучшению физико-химических свойств эритроцитарных мембран. В конечном итоге, происходило обратное развитие системных нарушений, характерных для МС: нормализация веса тела, повышение чувствительности тканей к инсулину, снижение артериального давления.

Проводя сравнительный анализ эффективности различных подходов к коррекции системных нарушений с МС, мы столкнулись с проблемой -равнозначен ли вклад каждого из изучаемых параметров в поддержание здоровья, есть ли необходимость в изучении такого большого количества параметров и если нет, то как выбрать оптимальное их количество. На сегодняшний день эталон лечения МС выглядит как 5-этажная пирамида, основание которой составляет изменение образа жизни (борьба с гиподинамией, гипокалорийная диета и т.д.); на нем базируется медикаментозная коррекция основных компонентов МС: инсулинорезистентности и гиперинсулинемии, артериальной гипертензии, ожирения и нарушения липидного обмена.

На основании полученных результатов исследования в группах терапии глюкофажем достигнуто наибольшее число достоверно положительных изменений, при этом терапия омакором также приводит к положительным изменениям значительного количества параметров и уступает глюкофажу по терапевтическому эффекту только за счет непродолжительного времени лечебного воздействия на организм пациентов с МС (3 мес.). Возможно, наиболее полный терапевтический эффект можно получить при сочетании корригирующего воздействия на организм пациентов с МС с выраженными нарушениями углеводного и липидного обменов как препарата, снижающего резистентность тканей к инсулину, так и препарата, содержащего со-ЗПНЖК,

одновременно с проведением диетотерапии и комплекса физических упражнений.

Выводы

1. При метаболическом синдроме повышается активность свободнорадикального окисления, что приводит к накоплению продуктов ПОЛ в крови больных.

2. При метаболическом синдроме активность ферментов антиоксидантной защиты - СОД в эритроцитах (СУА в плазме крови), каталазы и церулоплазмина в гемолизате и плазме крови пациентов, а также содержание неферментативных антиоксидантов — мочевины и мочевой кислоты в плазме крови больных повышены.

3. Дестабилизация мембран эритроцитов при метаболическом синдроме проявляется повышением микровязкости, увеличением проницаемости и повышением содержания внеэритроцитарного гемоглобина в плазме крови.

4. Важным звеном развития метаболического синдрома является эндогенная интоксикация, которая сопровождается накоплением молекул средней массы в плазме крови и начальных признаков гипоксии, о чем свидетельствует повышение уровня лактата и ксантина в эритроцитах и цельной крови больных.

5. Включение диеты, глюкофажа и омакора в комплексное лечение пациентов с метаболическим синдромом приводит к восстановлению прооксидантно - антиоксидантного равновесия, ингибированию свободнорадикального окисления в крови, нивелированию эндогенной интоксикации, а также способствует стабилизации структурно-функционального состояния мембран эритроцитов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации в издании, рекомендованном ВАК РФ

1. Крайнова H.H. Свободнорадикальные процессы и их регуляция, структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме / Крайнова H.H., Попова Т.П., Сафроненко В.А., Волкова Н.И., Внуков В.В. //Известия Высших учебных заведений СевероКавказский регион. Естественные науки. - Ростов н/Д. - 2008. - №6. - С.74-77. - 3 п.л., - личный вклад 80%.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Попова Т.П. Активность свободнорадикального окисления и структурное состояние мембран эритроцитов у пациентов с метаболическим синдромом / Крайнова H.H., Внуков В.В. // В мат. III всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов». Медико-фармацевтический журнал «Сибирский консилиум». - Новосибирск. - 2007. - №7(62). - С.130. -0,05 п.л., - личный вклад 80%.

2. Волкова Н.И. Сравнительный анализ эффективности различных видов терапии в лечении метаболического синдрома / Волкова Н.И., Сафроненко

B.А., Крайнова H.H., Попова Т.П. // В мат. XV российского национального конгресса «Человек и лекарство», Москва, 2008. С.70-71. 0,05 п.л., - личный вклад 50%.

3. Попова Т.П. Свободнорадикальные процессы и их регуляция при метаболическом синдроме и его коррекция / Сафроненко В.А., Крайнова H.H., Волкова Н.И. // В мат. научно-практического симпозиума с международным участием «Свободнорадикальная медицина и антиоксидантная терапия». Приложение 1 к журналу «Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН и Администрации Волгоградской области», Волгоград, 2008. С.23.0,05 п.л., - личный вклад 80%.

4. Сафроненко В.А. К вопросу о первичной и вторичной профилактике сахарного диабета 2 типа / Сафроненко В.А., Волкова Н.И., Крайнова H.H., Попова Т.П. // В.мат. IV всероссийского диабетологического конгресса. Москва, 2008. С.71. 0,05 п.л., - личный вклад 50%.

5. Попова Т.П. Структурное состояние мембран эритроцитов с метаболическим синдромом / Сафроненко В.А., Крайнова H.H., Волкова Н.И. // В.мат. IV-ro всероссийского диабетологического конгресса. Москва, 2008.

C.359. 0,05 п.л., - личный вклад 80%.

6. Попова Т.П. Интенсивность перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы при лечении метаболического синдрома / Крайнова H.H., Внуков В.В. // В мат. И-й международной научной конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологии и медицины». Ростов-на-Дону, 2008. С. 107-108.0,05 п.л., - личный вклад 80%.

7. Попова Т.П. Структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при лечении метаболического синдрома / Крайнова H.H., Внуков В.В. // В мат. 11-го съезда физиологов СНГ «Научные труды», Кишинев, 2008. С. 154155. 0,05 п.л., - личный вклад 80%.

8. Попова Т.П. Активность процессов ПОЛ и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов у пациентов с инсулинорезистентностью /

Сафроненко В.А., Крайнова В.А., Внуков В.В., Волкова Н.И. // В мат. 69 научно-практической конференции студентов и молодых ученых саратовского государственного медицинского университета: «Молодые ученые - здравоохранению региона», Саратов, 2008. С.193. 0,05 пл., -личный вклад 80%.

Список использованных сокращений

АГ артериальная гипертензия

АОС антиоксидантная система

АФК активные формы кислорода

ВЭГ внеэритроцитарный гемоглобин

ГИ гиперинсулинемия

ДК диеновые коньюгаты

жк жирные кислоты

ИР инсулинорезистентность

МДА малоновый диальдегид

МС метаболический синдром

МСМ молекулы средней массы

нэжк неэтерефицированные жирные кислоты

пвк пировиноградная кислота

пнжк полиненасыщенные жирные кислоты

пол перекисное окисление липидов

СОД супероксиддисмутаза

СПА суммарная пероксидазная активность

СРО свободнорадикальное окисление

ссз сердечно-сосудистые заболевания

СУА супероксидустраняющая активность

ХЛ хемилюминесценция

ЦП церулоплазмин

шо шиффовы основания

Сдано в набор 01.10.09 г. Подписано в печать 01.10.09 г. Заказ № 235. Тираж 100 экз. Формат 60*84 1/ 16. Печ. лист. 1,0. Усл. печ. л. 1,0. Копировально-множительный отдел НИЧ Южного федерального университета 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Большая Садовая, 105/42, тел (863) 263-82-91.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Попова, Татьяна Петровна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Метаболический синдром.

1.1.1. Определение, распространенность, критерии диагностики.

1.1.2. Этиология метаболического синдрома.

1.1.3. Углеводный обмен при метаболическом синдроме.

1.1.4. Липидный обмен при метаболическом синдроме.

1.1.5. Инсулинорезистентность и мембраны клеток.

1.2. Свободнорадикальные процессы и их регуляция.

1.2.1. Активные формы кислорода.

1.2.2. Перекисное окисление липидов.

1.2.2.1. Образование молекулярных продуктов.

1.2.3. Регуляция свободнорадикальных процессов.

1.2.3.1. Ферментативные антиоксиданты.

1.2.3.2. Соединения, содержащие енольные группы.

1.2.3.3. Хелаторы ионов металлов переменной валентности.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика обследуемых больных.

2.2. Получение биологического материала.

2.2.1. Получение плазмы крови.

2.2.2. Получение гемолизата.

2.2.3. Получение суспензии эритроцитов.

2.3. Биохимические и биофизические методы исследования.

2.3.1. Оценка толерантности к глюкозе.

2.3.2. Показатели липидного обмена.

2.3.3. Хемилюминесцентный анализ в системе Н2Ог - люминол.

2.3.4. Определения общего и внеэритроцитарного гемоглобина.

2.3.5. Получение хлороформного экстракта липидов.

2.3.6. Определение общих липидов.

2.3.7. Определение диеновых коньюгатов.

2.3.8. Определение малонового диальдегида.

2.3.9. Определение шиффовых оснований.

2.3.10. Определение суммарной пероксидазной активности.

2.3.11. Определение молекул средней массы.

2.3.12. Определение относительной микровязкости липидного бислоя и микровязкости зон белок-липидных контактов мембран.

2.3.13. Определение белка методом Lowry в модификации Schacterle (1973).

2.3.14. Определение активности супероксиддисмутазы.

2.3.15. Определение активности каталазы.

2.3.16. Определение оксидазной активности церулоплазмина.

2.3.17. Определение содержания мочевины.

2.3.18. Определение содержания мочевой кислоты.

2.3.19. Определение содержания а-токоферола.

2.3.20. Определение молочной кислоты.

2.3.21. Определение ксантина.

2.3.22. Определение содержания пировиноградной кислоты.

2.4. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Свободнорадикальные процессы и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов у пациентов с метаболическим синдромом.

3.1.1. Активность свободнорадикального окисления в крови больных с метаболическим синдромом.

3.1.2. Уровни ВЭГ, СПА и структурное состояние мембран эритроцитов упациентов с МС.

3.2. Активность антиоксидантной системы организма в крови больных с метаболическим синдромом.

3.2.1. Активность ферментативных антиоксидантов в крови больных с метаболическим синдромом.

3.3.2. Содержание неферментативных антиоксидантов в крови больных с метаболическим синдромом.

3.4. Содержание МСМ в плазме крови больных с МС.

3.5. Содержание ксантина, молочной кислоты и пировиноградной кислоты в крови пациентов с метаболическим синдромом.

Глава 4. Свободнорадикальные процессы и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при лечении метаболического синдрома.

4.1. Основные принципы терапии, использованной при коррекции метаболических нарушений у больных с МС.

4.2. Характеристика изменений, происходящих в организме больных с МС на фоне физической нагрузки и рационального питания.

4.2.1. Интенсивность СРО и процессов ПОЛ в крови больных с МС на фоне диетотерапии и физической нагрузки.

4.2.2. Уровни ВЭГ, СПА и структурное состояние мембран эритроцитов и у пациентов с МС на фоне физической нагрузки и рационального питания.

4.2.3. Активность антиоксидантной системы организма в крови больных с МС на фоне физической нагрузки и рационального питания.

4.2.4. Содержание МСМ в плазме крови больных с МС в процессе проведения диетотерапии и физической нагрузки.

4.3. Характеристика изменений, происходящих в организме пациентов с МС на фоне терапии препаратом, направленном на снижение чувствительности тканей к инсулину (метформин).

4.3.1. Интенсивность СРО и процессов ПОЛ в крови больных с МС на фоне терапии метформином.

4.3.2. Уровни ВЭГ, СПА и структурное состояние мембран эритроцитов, пациентов с МС на фоне лечения метформином.

4.3.3. Активность антиоксидантной системы организма в крови больных с МС при коррекции метформином.

4.3.4. Содержание МСМ в плазме крови больных с МС в процессе коррекции метформином.

4.4. Характеристика изменений, происходящих в организме больных с МС, на фоне терапии препаратом, содержащим со-З-ПНЖК (омакор).

4.4.1. Интенсивность СРО и процессов ПОЛ в крови больных с МС на фоне терапии омакором.

4.4.2. Уровни ВЭГ, СПА и структурное состояние мембран эритроцитов и у пациентов на фоне терапии омакором.

4.4.3. Активность антиоксидантной системы организма в крови больных с МС при коррекции омакором.

4.4.4. Содержание МСМ в плазме крови больных с МС в процессе коррекции омакором.

Глава 5. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Свободнорадикальные процессы в крови и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме"

Метаболический синдром (МС) представляет собой комплекс взаимосвязанных нарушений углеводного и жирового обменов, а также механизмов регуляции артериального давления (АД) и функции эндотелия, в основе развития которых лежит снижение чувствительности тканей к инсулину - инсулинорезистентность (ИР) (Парфенова, 1998; Диденко, 1999; Казека, 2002). Проблема МС все чаще привлекает внимание клиницистов различных специальностей. Это обусловлено, прежде всего, высокой распространенностью, многокомпонентностью данного синдрома и большим риском развития сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), сопряженных с атеросклерозом и сахарным диабетом 2 типа (СД2), а так же высокой смертностью от этих заболеваний, главным образом от сердечно-сосудистых осложнений, таких как инфаркт миокарда и нарушения мозгового кровообращения (Bartnik, Ryden, Ferrari, 2004).

В последние годы большой научный и практический интерес вызывают вопросы патогенеза синдрома ИР: Резистентность к потреблению глюкозы, стимулированной инсулином, общий феномен, который играет центральную роль в патогенезе многих болезней человека, в том числе МС. Возникновение ИР и следующей за ней компенсаторной гиперинсулинемии (ГИ) зачастую ассоциируется с такими факторами риска ишемической болезни сердца (ИБС) как ожирение, гипергликемия, артериальная гипертензия, дислипопротеинемия. В развитии ИР имеют значение как фактор генетической предрасположенности (нарушение рецепторных и пострецепторных механизмов передачи сигнала инсулина), так и определенные особенности образа жизни: избыточное питание, снижение физической активности (Coleman, Stevens et al., 2005). Известно, что ИР может развиваться на уровне различных тканей-мишеней: скелетной мускулатуры, печени, жировой ткани. Ожирение в сочетании с гиподинамией сопровождается снижением транслокацией транспортеров глюкозы (GLUT-4) в мышечных клетках. По данным Reaven G. (1996) у 25% лиц, ведущих малоподвижный образ жизни, можно обнаружить ИР. Разработка и внедрение эффективных мер борьбы с ожирением встречают серьезные трудности, отчасти связанные с непониманием масштабов и значения этой проблемы. В специальном прессрелизе ВОЗ в 1997 году ожирение рекомендовано рассматривать в качестве одной из наиболее часто игнорируемых проблем современного здравоохранения, негативные последствия которой для здоровья населения сопоставимы с влиянием курения (Проскурничий, 2004).

Несмотря на очевидные успехи последних десятилетий в области изучения патогенеза МС, сложные механизмы, вызывающие ИР, остаются до конца неизученными. К настоящему времени накоплен обширный клинико — биохимический материал о ведущей роли свободнорадикальных процессов (СРП) в патогенезе сахарного диабета 2 типа, артериальной гипертензии, атеросклероза - синдромообразующих заболеваний МС. Согласно современным представлениям, основная роль в развитии сосудистых осложнений диабета принадлежит неферментативному аутоокислительному гликозилированию и окислительному стрессу (Фадеева, Балаболкин, 2001). Однако, данных о свободнорадикальном окислении (СРО) и состоянии клеточных мембран у пациентов с ИР без нарушения углеводного обмена, в доступной литературе нет. Понимание механизмов регуляции СРО может дать новые подходы к профилактике и лечению такого распространенного заболевания как МС. Таким образом, несмотря на успехи, достигнутые в последние годы в изучении патогенетических основ ИР, существует очевидная незавершенность наших знаний в этой области. Необходимо дальнейшее изучение биохимических и патологических механизмов, связанных с развитием ИР, поскольку только такой подход поможет разработать патогенетически верную терапию, направленную на профилактику системных нарушений в различных органах и тканях при данном симптомокомплексе.

Целью работы явилось исследование свободнорадикальных процессов в крови и структурно-функционального состояния мембран эритроцитов пациентов при метаболическом синдроме.

Для достижения поставленной цели были сформулированы и решены следующие задачи.

1. Исследовать уровень свободнорадикальных процессов по параметрам НгОг-люминол индуцированной хемилюминесценции и интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по содержанию их молекулярных продуктов — диеновых коньюгатов (ДК), малонового диальдегида (МДА) и шиффовых оснований (ШО) в крови больных с МС.

2. Определить активность ферментативных (супероксиддисмутаза (СОД), каталаза и церулоплазмин) и уровень неферментативных (мочевина, мочевая кислота и а-токоферол) антиоксидантов в крови обследуемых пациентов с МС.

3. Исследовать стабильность и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов клинической группы.

4. Определить уровень эндогенной интоксикации по содержанию молекул средней массы (МСМ) в плазме крови и развитие гипоксии по содержанию ксантина и молочной кислоты в крови обследуемых больных.

5. Исследовать уровень СРП, сбалансированность в системе прооксиданты - антиоксиданты в крови, стабильность и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов, развитие эндогенной интоксикации при проведении больным метаболическим синдромом дието - и фармакотерапии.

Научная новизна.

В работе впервые проведены комплексные исследования свободнорадикальных процессов, генерации активных интермедиатов кислорода и интенсивности перекисного окисления липидов при МС.

Теоретическая и практическая значимость работы.

В общетеоретическом плане выполненная работа позволяет расширить существующие представления о патогенезе метаболического синдрома, сформировать целостное представление о роли свободнорадикального окисления, ферментативных и неферментативных антиоксидантов в развитии заболевания.

Основные положения, выносимые на защиту.

Развитие метаболического синдрома сопровождается усилением в крови пациентов свободнорадикальных процессов и повышением продуктов перекисного окисления липидов.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Попова, Татьяна Петровна

выводы

5. Включение диеты, глюкофажа и омакора в комплексное* лечение пациентов с метаболическим синдромом приводит к восстановлению прооксидантно - антиоксидантного равновесия, ингибированию свободнорадикального окисления в крови, нивелированию эндогенной интоксикации, а также способствует стабилизации структурно-функционального состояния мембран эритроцитов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Попова, Татьяна Петровна, Ростов-на-Дону

1. Абрамова Ж.И. Человек и противоокислительные вещества. /Оксенгендлер Г.И. Ленинград: Наука, 1985. - 450с.

2. Александров, О.В. Метаболический синдром. /Алехина P.M., Григорьев С.П. и др. //Рос. Мед. Журн.-2006.-№6.-С.50-55

3. Алишева Е.К. Методы диагностики инсулинорезистентности. / Красильникова Е.И., Шляхто Е.В. // Артериальная гипертензия.- 2002.-№1.-С.29-34.

4. Ананян А.А. Биохимические показатели холодового стресса и адаптации иадаптогенная роль мочевины и аргинина: Дис.канд.биол.наук. Ростовна-Дону, 1982.- 182с.

5. Архипова Г. В. Мембранные липиды как переносчики информации. / Бурлакова Е. Б., Голощапов А. Н. и др. // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: - Наука, - 1982. - С.74 - 84.

6. Архипова О.Г. Методы исследований в профпатологии. // М., 1988, - с. 156-158.

7. Афанасьев Ю.И. Витамин Е: значение и роль в организме. / Боронихина Т.В. //Успехи соврем. Биологии. 1987. - Т.104, вып. 3. - С.400-411

8. Бабаскин М.П. Способ определения пировиноградной кислоты в крови //Авторское свидетельство №877436, СССР. 1981. - Бюлл. 40

9. Балаболкин М.И. Диабетология. М.: Медицина, 2000. - 672с.

10. Балаболкин М.И. Роль ИР в патогенезе сахарного диабета 2-го типа //Тер.арх. -2003. №1. С.72-77.

11. Балаболкин М.И. Эндокринология // М.:Универсум паблишинг, 1998. — 582с.

12. Барабой В.А. Биологические функции, метаболизм и механизмы действия селена // Успехи соврем, биологии. 2004.- Т. 124, вып. 2. - С.157-168.

13. Барабой В.А. Перекисное окисление и стресс. / Брехман И.И., Голотин В.Г., Кудряшов Ю.Б. С. - Пб.: Наука, 1992. - 142с.

14. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов // Успехи соврем, биол. -1991.-Т. 111. №6. с. 923 - 931.

15. Бейли Н. Статистические методы в биологии. Изд-во иностр. Литературы. М., 1962.

16. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. -М.: Медицина, 1989. 368с.

17. Бобырева Л. Е. Свободнорадикальное окисление, антиоксиданты и диабетические ангиопатии // Проблемы эндокринологии. 1996. - Т. 42, № 6. - С. 14-20.

18. Бойцов С.А. Связь основных параметров метаболического сердечнососудистого синдрома со степенью нарушения углеводного обмена и выраженностью абдоминального ожирения у мужчин. / Голощапов А.В. //Артериальная гипертензия. — 2003. Т. 9. - №2.

19. Болдырев А.А. Роль активных форм кислорода в жизнедеятельности нейрона//Успехи физиологических наук. 2003. - Т.34.- №3.- С. 21-34.

20. Бондарь Т.Н. Восстановление органических гидроперекисей глутатионпероксидазой и глутатион-8-трансферазой: влияние структуры субстрата. / Ланкин В.З., Антоновский В.Л. //Докл. АН СССР. 1989. -Т.304. - №1. -С.217-220.

21. Бурлакова Е. Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты. / Храпова Н.Г. // Успехи химии. 1985. — Т. 54. — С. 1540' - 1558.

22. Бурлакова Е.Б. Кинетические особенности токоферолов как антиоксидантов. /Крашаков С.А., Храпова Н.Г. — Черноголовка, 1992. -56с.

23. Бутрова С.А. Синдром инсулинорезистентности при абдоминальном ожирении // Лечащий врач. — 1999. №7. С. 32 - 36.

24. Бутрова С.А. Метаболический синдром: патогенез, клиника, диагностика, подходы к лечению // Русский медицинский журнал. 2001. - Т. 9. №2. -С. 56-60

25. Васильев В.Б. Дисмутирование супероксидных радикалов церулоплазмином — детали механизма. /Качурин A.M., Сорока Н.В. // Биохимия. 1988.-Т. 53. № 12.-С. 2051-2058.

26. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах. Итоги науки и техники. /Азизова О. А., Деев И.А., Козлов А.В., Осипов А.И., Рещупкин Д.И. -М.: ВИНИТИ, 1991.- Т.29. С.248.

27. Владимиров Ю.А. Хемилюминесценция клеток животных. / Шерстнев М.П. //Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1989. - Т.24. — С. 152184.

28. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. /Арчаков А.И. М.: Наука. 1972. - 320с.

29. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живих системах. /Азизова О.А., Деев А.И. М., 1991; Барабой В.А. //Успехи современной биологии. -1991. - Т. 3. вып.6. - С. 923-931.

30. Владимиров Ю.А. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. /Добрецова Г.В. М.: Наука. 1980. - 320 с.

31. Владимирский Б.М. Математические методы в биологии. Ростов-на-Дону. - Изд-во РГУ, 1983.- с.294.

32. Владимиров Ю. А. Флюоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. М.: Наука. - 1987. - 257с.

33. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах. /Азизова О.А., Деев А.И. и др. Биофизика (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР).-М.- 1991.- 29.-252 с.

34. Владимиров Ю.А. Свободноые радикалы в биологических системах //Сорос, образоват. журн. 2000.-№12.-С.13-19.

35. Внуков В.В. Содержание гемоглобина, трансферинов и общего железа в сыворотке крови при гипероксии и защитном действии мочевины. /Кричевская А.А., Лукаш А.И. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1979. - О 6. - с.528-530.

36. Внуков В.В. Механизмы развития гипоксии у больных желчнокаменной болезнью: материалы Четвертой Российской конференции «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция». /Жиронкина Е.А. Москва, 2005. — С.23.

37. Внуков В.В. Железосодержащие белки и протеолитическая активность в сыворотке крови при гипероксии и защитном действии мочевины: Дис. .канд. биол. наук. Харьков, 1979. 90с.

38. Волчегорский И.А. Средние молекулы как неспецифические регуляторы активности фагоцитов. /Власов А.В., Лившин Г.Е. и др. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 1995.- №2.- С. 159-162

39. Габриэлян Н.И. Средние молекулы и уровень эндогенной интоксикации у реанимационных больных. Анестезиология и реанимация. /Дмитриев Н.А., Севостьянова О.А. и др. 1985.- №1.- С.36-38

40. Гаврилов В.Б. Оценка интоксикации организма по нарушению баланса между накоплением и связыванием токсинов в плазме крови. /Бидула М.М., Фурманчук Д.А., Конев С.В., Алейникова О.В. // Клин. лаб. диаг. — 1999. №2.-С. 13-17.

41. Газимагомедова М.М. Структурно-функциональные изменения мембран эритроцитов при остром отравлении метафосом и их коррекция перфтораном//Автореферат дисс. к.б.н., Махачкала, 1999. 21 с.

42. Газин И.К. Информативность маркеров в оценке тяжести эндотоксикоза при гнойно-некротических поражениях нижних конечностей у больных диабетом//Клин.лаб.диагн.-2008.-№12.-С. 17-20).

43. Галенок В.А. Гипоксия и углеводный обмен. /Диккер В.Е. — Новосибирск: Наука, 1985.-194с.

44. Гинзбург М.М. Ожирение и метаболический синдром. Влияние на состояние здоровья, профилактика и лечение. /Козупица Г.С., Крюков Н.Н. — Самара: изд-во «Парус», 2000. 159с.

45. Гинзбург М.М. Ожирение и метаболический синдром. Влияние на состояние здоровья, профилактика и лечение. Самара: Парус, 2000. — 160с.

46. Гинсбург М.М. Значение распределения жира при ожирении. /Козупица Г.С. // Пробл. эндокринологии. 1996. - Т. 42. - №6. - С. 30 - 34.

47. Губский Ю.И. Влияние витамина Е на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном. /Левицкий Е.Л., Примак Р.Г. и др. // Биополимеры и клетка. 1993. - №3. - С. 27-34.

48. Дедов И.И. Патогенетические аспекты ожирения. /Мельниченко Г.А., Романцова Т.И. / Ожирение и метаболизм.-2004.- №1.- С. 3-9.

49. Диагностика и лечение метаболического синдрома. / Российские рекомендации, М., 2007г.; Приложение 2 к журналу «Кардиоваскулярная терапия и профилактика» 6(6).

50. Диденко В. А. Метаболический синдром X: история вопроса и этиопатогенез // Лабораторная медицина. 1999. - №2. - С. 49 - 56.

51. Добротина Н.А. Эндоинтоксикация организма человека. Методологические и методические аспекты. /Копытова Т.В.— Нижний Новгород, 2004. 63с.

52. Добротина Н.А. Полифункциональность церулоплазмина обоснование применения. / Рутницкий А.Ю., Гладышева М.В. и др. //Успехи соврем. Биологии. 1999. - Т.119.№4. - С.375-379.

53. Дорош Ж.В. Углеводный обмен. В кн.: Метаболический синдром / под ред. чл.-корр. РАМН Г.Е. Ройтберга.-М.: МЕД-пресс-информ, 2007.-c.45-58

54. Дрёмина Е.С. Использование кинетики Ре2+-индуцированной хемилюминесценции в трис-буферной суспензии липосом дляисследования антиоксидантной активности плазмы крови. /Шаров B.C., Владимиров Ю.А. // Биофизика. 1993. - Т.38, вып. 6. — С. 1047-1052.

55. Дубинина Е.Е. Характеристика внеклеточной супероксиддисмутазы // Вопр. мед. химии. — 1995. Т. 41, вып. 6.- С.8-12.

56. Дубинина Е.Е. Выделение и свойства супероксиддисмутазы плазмы крови человека. /Туркин В.В., Бабенко Г.А., Исаков В.А. // Биохимия. -1992.-Т. 57, вып. 12.-С. 1892-1901.

57. Дубровская Г.В. Роль липопротеидов очень низкой плотности в генезе диабетических микроангиопатий. /Мальжев В.А. // Современные проблемы экспериментальной и клинической эндокринологии. — Киев, 1987.-С. 128-138.

58. Душкин М.И. Биологическая роль окисленных производных холестерина в клетках млекопитающих //Успехи соврем. Биологии. — 1991. — Т. 111. вып. 6. С.845-857.

59. Евгина С.А. Перекисное окисление липопротеинов крови человека, индуцированное гипохлорит-анионом. /Панасенко О.Н., Сегреенко В.И., Владимиров Ю.А. // Биол. мембраны.-1992.-Т.9, № 9.- С. 946-953.

60. Егоров С.Ю. Тушение синглетного кислорода карнозином и анзерином в водных растворах. /Курелла Е.Г., Болдырев А.А., Красновский А.К. // Биоорг. химия. 1992. - № 1. - С. 142-144.

61. Ефимов А.С. Перекисное окисление липидов в эритроцитах больных сахарным диабетом с диабетическими ангиопатиями. /Науменко В.Г. // Пробл. эндокринол. 1985. - № 1. - С.6-9.

62. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии //Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. — М.: Наука, 1982. С. 3 - 37.

63. ЖуравлевА.И. Спонтанная биохемилюминесценция животных тканей // Биохименисценция. -М.: Наука, 1983. С. 3-30.

64. Задионченко B.C. Артериальная гипертония при метаболическом синдроме: патогенез, основы терапии. /Адашева Т.В., Демичева О.Ю. и др. // Consilium medicum. 2004. - Т.6. - №9.

65. Зимин Ю.В. Происхождение, диагностическая концепция и клиническое ^ значение синдрома ИР или метаболического синдрома X //Кардиология. — 1998. №6. -С.71-81.

66. Казека Г.Р. Метаболический синдром. «Врачебный практикум». — Новосибирск. 2002г. - 50с.

67. Калмыкова В:И. Витамины-антиоксиданты в патогенезе и терапии атеросклероза и ишемической болезни сердца //Биоантиокислители в регуляции,метаболизма в норме и патологии. М., 1982. — С. 181-194.

68. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностикею Мню: Беларусь, 2000. — Т. 1-2. — 453с.

69. Кармен Н.Б. Перфторуглеродные соединения в экспериментальной и клинической медицине. /Милютина Н.П., Маевский Е.И., Орлов А.А. // Сборник материалов Российской научной конференции, С-Пб, 2004, С.50.

70. Кармен Н.Б. Влияние плеторического введения перфторана на параметры структурно функционального состояния мембран эритроцитов. /Милютина Н.П., Орлов А.А., Асирян Э.И., Мариничева И.Г., Маевский Е.И.— 2004 - Т.5. - С.128-129.

71. Каро К. Механика кровообращения. /Педли Т., Шротер Р. и др. М.: Мир, 1981 -624с.

72. Катюхин JI.H. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования // Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. — 1995. Т. 81. - № 6. - С. 122-129.

73. Кения М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе. /Лукаш А.И., Гуськов Е.П. // Успехи соврем. Биологии. — 1993. — Т. 113, вып. 4.-С. 456-470.

74. Колб В.Г. Справочник по клинической химии. /Камышников B.C. -Минск: Беларусь, 1982. 366с.

75. Колесниченко Л.С. //Успехи соврем, биологии. /Кулинский В.И. Глутатионтрансферазы 1989. - Т. 107, вып.2. - С. 179-194.

76. Колчинская Л.И. Изучение взаимодействия Na+, К+ АТФ-азы эритроцитов с субаином, влияние ацетилфосфата. /Лишко В.К., Малышева М.К. //Био-химия. - 1976. - © 3. - с. 933-938.

77. Кондратова Н.В. Генетические аспекты метаболического синдрома. В кн.: Метаболический синдром / под ред. чл.-корр. РАМН Г.Е. Ройтберга.-М.: МЕД-пресс-информ, 2007.-е.39-44

78. Кондратова Н.В. Медикаментозное лечение метаболического синдрома и его отдельных компонентов В кн.: Метаболический синдром. /Дорош Ж.В. / под ред. чл.-корр. РАМН Г.Е. Ройтберга.-М.: МЕД-пресс-информ, 2007.-с.181-192

79. Конев С.В. Структурное состояние белков и биологических мембран как регулятор свободнорадикальных реакций. /Ниссенбаум Г.Д, Волотовский И.Д. //Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. -М.: Наука, 1982. С. 37-50.

80. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы. /Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. // Лабораторное дело. 1988,- №1. - С. 16-19.

81. Кричевская А.А. Содержание гемоглобина, трансферрина и общего железа в сыворотке крови при гипероксии и защитном действиимочевины. /Лукаш А.И., Внуков В.В. // Бюлл. экспер. биол. и мед. — 1979. -Т. 87. №6.-С. 528-531.

82. Кулинский В.И. Биологическая роль глутатиона. /Колесниченко Л.С. //Успехи соврем, биол. — 1990. Т. 110, вып.1. — С. 20-33.

83. Кулинский В.И. Обмен глутатиона. /Колесниченко Л.С. // Успехи биол. химии. 1990.-Т. 31.-С. 157-179.

84. Лакин Г.Ф. Биометрия: Изд-во Высшая школа, 1980. С.270-271.

85. Ланкин В.З. Атеросклероз как пример свободнорадикальной патологии: механизмы нарушения ферментативной регуляции процессов свободнорадикального перекисного окисления липидов в биомембранах при атерогенезе // Биоантиоксидант. — Тюмень, 1997. С. 51-53.

86. Ларкий Э.Г. Методы определения и метаболизм металлобелковых комплексов // Итоги науки и техники. Сер. Биологическая химия. — 1990. -Т. 41. вып.5. С.123-125.

87. Ларский Э.Г. Методы определения и метаболизм металлобелковых комплексов. Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. Биохимия. 1990,-т.41.- 198 с.

88. Лукаш А.И. Хемилюминесцентный анализ микрообъемов плазмы крови. /Внуков В.В., Прокофьев В.Н., Ходакова А.А. // Современные проблемы биологии. — Ростов-на-Дону, 1994: — С.75.

89. Лукаш А.И. Маталлосодержащие соединения плазмы крови, при гипербарической оксигенации. /Внуков В.В:, Ананян А.А. Ростов-на-Дону, 1996.-108с.

90. Лукаш А.И. Железосодержащие белки в плазме и сыворотке крови больных при гипербарооксигенотерапии. /Менджерицкая Л.Г., Внуков

91. B.В., Ананян А.А., Кесельман B.JI. // Анестезиология и реаниматология. — 1991 №2. -С27-29.

92. Лямин П.А. Липидный обмен В кн.: Метаболический синдром / под ред. чл.-корр. РАМН Г.Е. Ройтберга.-М.: МЕД-пресс-информ, 2007.-С.59-78

93. Мансуров Х.Х. //Клиническая медицина. /Мироджов Г.К., Мансурова Ф.Х. и др. 2005.-№7.-С.48-51.

94. Матюшин Е.М. Активные формы кислорода: цитотоксическое действие и методические подходы к лабораторному исследованию при поражениях печени. /Логинов А.С. // Клин. Лаб. диагностика. 1996. №4. - С. 51-54.

95. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. /Маянский Д.Н.— Новосибирск: Наука, 1989. 344с.

96. Медведев И.Н. //Клиническая медицина. /Громнацкий Н.И. 2006.- №3.1. C.49-52.

97. Мельниченко Г.А. Ожирение в практике эндокринолога // Рос. мед. журн. 2001. - 9(2): 25 - 29.

98. Меньшиков В.В. // Лабораторные исследования в клинике. /Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.; Под редак-цией В.В. Меныиикова.Справочник. М., Медицина. 1987.-368с.

99. Меныцикова Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов. /Зенков Н.К. //Успехи4 соврем. Биологии. — 1993. Т. 113. - вып.4. - С.442-455.

100. Меныцикова Е.Б. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты и антиоксиданты. /Зенков Н.К., Шергин С.М. Новосибирск, 1994.-С.25-54; 151-159

101. Догов В.В. Турбидиметрия в лабораторной практике. /Шевченко О.П., Шарышев А.А., Бондарь В.А. -М.: Реафарм, 2007.- С. 108

102. Метаболический синдром. Отчет Нацонального института сердца, легких, и крови Американской ассоциации сердца// Клиническая фармакология и терапия. 2004.- №13.- С.66-68.

103. Милютина Н.П. Свободнорадикальное окисление и механизмы адаптации к измененным условиям газовой среды обитания. /Ананян А.А. // Извести вузов. Северо — Кавказский регион. Естественные науки. Спецвыпуск. 2005. - С.45-47.

104. Милютина Н.П. Свободнорадикальное окисление и механизмы адаптации к измененным условиям газовой среды обитания. /Ананян А.А. //Известия вузов. Северо-Кавказский регион. Естественные науки. Спецвыпуск. 2005 - С.45 - 47.

105. ИЗ. Милютина Н.П. Перекисное окисление липидов и активность антиоксидантных ферментов крови, структурно-функциональные свойства эритроцитов при атеросклерозе, ИБС и инфаркте миокарда. /Ананян А.А., Лушпаева О.А. и др. (1995) Ростов н/Д - Логос.

106. Муравьев Р.А. Пероксидазосомы эозинофильных лейкоцитов. /Фомина В.А., Роговин В.В. // Известия А.Н. Серия биология. 1992. № 6. -С. 835843

107. Павлова Н.Ф. Тирозинсодержащие пептиды в оценке уровня эндогенной интоксикации при раке яичника. /Барсуков А.Н.//Клин. Лаб. Диагн., №10 2008.- С.20, 33).

108. Никитин Ю. П. Распространенность метаболического синдрома X в неорганизованной городской популяции (эпидемиологическое исследование). /Казека Г. Р., Симонова Г. И. // Кардиология 2001; 9: 37 -40.

109. Нилова Т.В. Оксидазная активность церулоплазмина и состояние гемокоагуляции у больных хроническим панкреатитом. /Кондашова З.Д. // Эксперим. и клинич. гастроэнтерология.- 2003. № 4. С. 51-53.

110. Новгородцева Т.П. Состав неэтерифицированных жирных кислот у больных с метаболическим синдромом. /Иванов Е.М., Антонюк М.В., Караман Ю.К., Жукова Н.В., Юренко А.В. //Клин. Лаб. Диагн.- 2008,-№10.-С.38-40).

111. Оганов Р.Г. Профилактика сердечно — сосудистых заболеваний: возможности практического здравоохранения // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. — 2002. №1.-с.5-9.

112. Одыванова JI.P. Окись азота (N0) в нервной системе. /Сосунов А.А., Гатчев Я., Цервосс-Наварро Д. // Успехи соврем. Биологии. 1997. — Т. 117, вып. 3.-С.374-389.

113. Осипов А.Н. Активированные формы кислорода и их роль в организме. /Азизова О.А., Владимиров Ю.А. //Успехи биол. Химии. — 1990. Т.31.- С. 180-208.

114. Парфенова Н.С. Метаболический синдром // Российский кардиологический журнал. 1998. - №2. — С. 42 - 48.) .

115. Перова Н.В. Метаболический синдром: патогенетические взаимосвязи и направленная коррекция. /Метельская В.А., Оганов Р.Г. // Кардиология. 2000. №3. - С. 7-10.

116. Перова Н.В. Методы раннего выявления и коррекции метаболического синдрома. /Метельская В.А., Мамедов М.Н., Оганов Р.Г. //Профилактика заболеваний и укрепления здоровья. — 2001. — 4(1): 18-31.

117. Петрова Т.В. О взаимосвязи избыточной массы тела, артериальной гипертонии, гиперинсулинемии и нарушения толерантности к глюкозе. /Стрюк Р.И., Бобровницкий И.П., Орлова Т.А., Длусская И.Г., Нагорнев С.Н. // Кардиология. 2001. - №2. - С. 30 - 31.

118. Подзолкова В.И. Метаболический синдром: современные возможности лечения. /Гладышева Е.А., Панферов А.С. // Обзоры клинической кардиологии. 2006. - № 8.- С.16-23.

119. Покровский А.А. Биохимические методы исследования в клинике / под ред. Покровского А.А. —М,: Медицина, 1969. — 652с.

120. Проскуряков С .Я. Биология азота. /Конопляников А.Г., Иваников А.И., Скворцов В.Г. // Успехи соврем. Биологии. 1999. - Т. 119, вып. 4. - С. 380-389.

121. Проскурничий Е.А. Метаболический синдром. /Шевченко А.О.- М.: -Реафарм, 2004. - 141с.

122. Пучкова JI.B. Механизм, обеспечивающий гомеостаз меди у эукариотов, и его связь с транспортом железа. Успехи современной биологии. /Платонова Н.А. -2003.-т.123.-№1.- С.41-58.

123. Ройдберг Г.Е. Метаболический синдром. М.: МЕД - пресс-информ, 2007.-224с.

124. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Издание 2-е. Изд-во Высшая школа. 1967. - с.312.

125. Сазонтова Т.Г. Адаптация организма к изменению уровня кислорода — к гипоксии и гипероксии: роль активных форм кислорода и редокс-сигнализации // Вопросы гипербарической медицины. М.: Втар-М. — 2006.№1.- С. 4-19.

126. Сарычева Т.Г. Морфофункционаная характеристика эритрона в норме. /Козинец Г.И. // Клин. лаб. диагностика. 2001. - № 5. - с.З.

127. Симоненков А.П. Общность клинических проявлений синдрома серотониновой недостаточности и интоксикационного синдрома. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. /Федоров В.Д. -1997.- т. 123.- №6.- С. 604-613

128. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использования его для измерения активности супероксиддисмутазы // Вопр. Мед. Химии. 1999. №3. - С. 14-15.

129. Стальная И.Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных кислот. //Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. - С. 63-64.

130. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты. /Горишвили Т.Г. //Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 66-68. № 7.Р 203-209

131. Сунцов Ю.И. Эпидемиология нарушенной толерантности к глюкозе. /Кудрякова С.В. // Пробл. Эндокринол. 1999. - С.48-52.

132. Сухарев А.Е. Лактоферрин, его свойства и значение в патологии // Патол. Физиология и эксперим. Терапия. — 1992. № 3.- С.55-58.

133. Творогова М.Г. Справочник заведующего КДЛ.- 2007.- №4.- С.20-26.

134. Титов В.Н. Фундаментальная медицина: функциональная роль инсулина как фактора обеспечения энергией, биологической функции локомоции //Клин. лаб. диагн., №2, 2005, с.3-8

135. Ткачук В.А Клиническая биохимия. // М.: Гэотармед. - 2002.- 306с.

136. Туликова З.А. Влияние средних молекул, выделенных из сыворотки крови обожженных пациентов, на состояния процессов перекисного окисления липидов в тканях животных. /Осипович В.К. Вопросы мед. химии.- 1990.-т. 36.-№3.- С.502-506

137. Ушакова Т.И. Эпидемиоолгия метаболического синдрома. В кн.: Метаболический синдром / под ред. чл.-корр. РАМН Г.Е. Ройтберга.-М.: МЕД-пресс-информ, 2007.-С.19-30

138. Фадеева Н.И. Применение никотинамида и других антиоксидантных препаратов в комплексной терапии сахарного диабета 2 типа. /Балаболкин М.И. //Сахарный диабет.- 2001.№1. С. 21

139. Чазова И.Е. Метаболический синдром. /Мычка В.Б. // Media Medica. — 2004. -№2.-С. 163.

140. Чаленко В.В; Возможные причины повышения концентрации молекул средней массы при патологии. Патология, физиология и экспериментальная терапия.-1991.-№4.-G.13-14

141. Чернух A.M. Микроциркуляция. /Александров П.Н., Алексеев О.В. -М.: Медицина, 1984.-432с.

142. Шевченко Ю.Л. Гипоксия: адаптация, патогенез, клиника. //Санкт-Петербург. 2000. - 383с.

143. Шестакова М.В. Дисфункция эндотелия — причина или следствие-, метаболического синдрома? // РМЖ. 2001. - Т. 9. - №2.- С. 56-81.

144. Юдакова О.В. Интенсивность ПОЛ и. АО А, уровень молекул средней массы как показателя- эндогенной интоксикации* при распространенном перитоните. /Григорьев-Е.В.// Клин. лаб. диаг. 2004: №10. - С. 20-22.

145. Янковский О.Ю. Токсичность кислорода и биологические системы: Пб.: Игра, 2000.- 294с.

146. Aisenman E. Modulation of N-methyl-D-aspartate receptors by hydroxyl radicals in rat cortical neurons in vitro // Neurosci. Lett. 1995. № 189. C. 5759.

147. Akaschi M. Irradiation increases manganese superoxide dismutase mRNA levels in human fibroblasts possible mechanisms for its accumulation. /Hachiya M., Paquette R.L. et al. // J. Biol. Chem. - 1995. - Vol.270. -P.15864-15869.

148. Albu J.B. Systemic resistance to the antilipolytic effect of insulin in black and white women with visceral obesity. /Curi M., Shur M., Murphy L., Matthews D.E., Pi-Sunyer F.X. // Am. J. Physiol. 1999. - 277 (3 Pt 1): E551 - 560.

149. Amos A The rising global burden of diabetes and its complications: estimates and projections to the year 2010. /McCarty D, Zimmet P. Diabetic Med. 1997; 14 (Suppl. 5): SI S85.

150. Atanasiu R.L. Direct evidence of caeruloplasmin antioxidant properties. /Stea D., Mateescu M.A. et al. // Mol. Cell Biochem. 1998. - V. 189. - P.127-135.

151. Bailey C.J. Metformin. /Turner R.C. //N. Engl. J. Med.- 1996.-334:574-579

152. Balla G. Ferritin a cytoprotective antioxidant stratagem of endothelium. /Jacob H.S., Balla J. et al. // J. Biol. Chem. - 1992. - Vol. 267. - P. 1814818153.

153. Bartnik M. The prevalence of abnormal glucose regulation in patients with coronary artery disease across Europe. /Syden L, Ferrari R., et al. Eur Heart J. -2004; 25: 1880-1890.

154. Bast A. Oxidants and antioxidants: State of the art. /Haenen G. R. M. M., Doelman C.J.A. //Am. J. Med. 1991. -Vol. 91, Suppl. 3. - P. 1135-1139.

155. Bast A. Oxidants and antioxidants: State of the art. /Haenen G.R.M.M., Doelman C.J.A. //Am. J. Med. 1991. - Vol. 91, Suppl. 3C. - P. 2S-13S.

156. Bellary S.S. Effect of lipopolysaccharide, leukocytes, and monoclonal anti-lipid A antibodies on erythrocyte membrane elastance. /Arden W.W., Schwartz R.W. et. al. // Shock. 1995. - Vol. 3. - №2. - P. 132 - 136.

157. Beyer R.E. The analysis of the role of coenzyme Q in free radical production and antioxidation //Free Radical Biol. And Med. 1990. - Vol. 70. - P.390-403.

158. Beyer R.E. Theparticipation of coenzyme Q in free radical production and antioxidation // Free Radic. Biol. Med. 1990. - Vol. 8. - P. 545-565.

159. Bidlack W.R. Fluorescent products of phospholipids during lipid peroxidation. /Tappel A.L. // Lipids. 1973. - V.68. №4. - P.203 - 209.

160. Blakinty R. Effects of oxygen free Radicals on Ca2+ binding to cardiac troponin. /Harding J.J. // Biochem. J.- 1992.-Vol.288.-P.301-307

161. Bligh E.J. Rapid methods of total lipid extraction and purification. /Dyer W.J. // Can. J. Biochem. Physiol. 1959. - V. 37. № 8. - P. 911-917.

162. Boden G. Free acids in obesity and type 2 diabetes: defining their role in the development of insulin resistance and ?-cell dysfunction. /Shulman Gl. Eur J Clin Invest 2002, 32 (Suppl 3): 14-23.

163. Bonadonna RC. Obesity and insulin resistance in humans: a dose response study. /Groop L., Kreamer N. et. al. // Metabolism. - 1990. - Vol. 39. - №5. -P.452 - 459.

164. Borch-Johnsen K. The new classification of diabetes mellitus and IGT: a critical approach. Exp Clin Endocrinol Diabetes 2001; 109 Suppl 2: S86-93.

165. Bruhwyler J. Nitric oxide: A new messenger in the brain. /Chleide E., Liegeois J.F., Carrer F. // Neurosci. Behav. Rev. 1993. - V. 17. - P. 373 -385.

166. Caro J.F. Obesity. McGraw-Hill Yearbook of Science and Technology. — 2000.

167. Caro J.F. Insulin resistance in obese and nonobese men. J. Clin. Endocrinol Metab. -1991; 7391 -95

168. Cefalu W.T. Insulin Resistance. In: Leahy J.L., Clark N.G., Ceflau Т., Eds. Medical Management of Diabetes Mellitus/ New York: Marcel Dekker, Ins., 2000.-P. 57-76.

169. Chichton R.R. Iron metabolism new perspectives in view. /Ward R.J. // Biochemistry.- 1992.-Vol. 31.-P. 11255-11264.

170. Chu F.- F. Expression, characterization, and tissue distribution of a new cellular selenium-dependent glutathione peroxidase, GSHPx-GI. /Doroshow J.H., Esworthy R.S. // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268. - P.2571-2576.

171. Coleman R.L. A cardiovascular risk calculator for type 2 diabetes. /Stevens R.J., Matthews D.R., Holman R.R. Diabetes 54 suppl.l:Al72,2005.

172. Coniff R.F. Long-term efficacy and safety of acarbose in the treatment of obese subjects with non-insulin-dependent diabetes mellitus. /Shapiro J.A., Seaton T.B. //Arch. Intern. Med.-1994. 154:2442-2448.

173. Cross A.R. Enzymic mechanisms of superoxide production // Biochim. Biophys. Acta.Jons O.T.G. 1991. - Vol. 1057. - P. 281-298.

174. Curzio M. Interaction between neutrophils and 4-hydroxyalkenals and consequences on neutrophil motility // Free Radic. Res. Commun. 1988. - V. 5.-P. 55 - 56.

175. Das U.N. Metabolic syndrome X: an inflammatory condition? // Curr. Hypertens. Rep. 2004. - Vol. 6. - P. 66-73.

176. Datta Roy A. Control of erythrocyte membrane microviscosity by insulin. /Ray T.R., Sinha A.K. // Biochim. Biophys. Acta. - 1985. - Vol. 44. - №1. - p. 187-190.

177. DeFronzo R.A. Insulin resistance, a multifaceted syndrome responsible for NIDDM, obesity, hypertension, dislipidemia and atherosclerotic cardiovascular disease. /Ferrannini E., // Diabetes Care. 1991. - 14(№3). - P. 173 - 194.

178. Del-Rio L.A. A new cellular function for peroxisomes related to oxygen free radicals? /Sandalino L.M. Palma J.M. // Experientia (Basel). 1990. - Vol. 46. -P. 989-992.

179. Desilva D., Stoichiometry of Fe(II) oxidation during ceruloplasmin-catalyzed loading of ferritin. /Aust S.D. //Arch. Biochem. End Biophys. 1992. - Vol. 298.-P. 259-264.

180. Despres J.P. Inflammation and cardiovascular disease: is abdominal obesity the missing link? // Int. J. Obes. 2003. - 27(Suppl): 22 - 24.

181. Despres J.P. Hyperinsulinemia as an independent risk factor for ischemic heart disease. /Lamarche M., Mauriege P. et al. // N. Engl. J. Ved. 1996. - V. 334.-P. 952-957.

182. Devasagayam T.P. Protection of plasmid pBR322 DNA by flavonoids against single-stranded breaks induced by singlet molecular oxygen. /Subramanian M., Singh В. B. et al. // J. Photochem. Photobiol. B. 1995. - Vol. 30. - P. 97-103.

183. Dhaunsi G.S. Peroxisomal participation in the cellular response to the oxidative stress of endotoxin. /Singh I., Hanevold C.D. // Mol. Cell. Biochem. -1993.-Vol. 126;-P. 999-1008.

184. Diaber A. Measurement of NAD(P)H oxidase-derived superoxide with the luminal analogue L-012. /August M., Baldus S. et al. // Free Radic. Biol. Med. -2004.-V. 36.-P. 101-111.

185. Diamond F. The Endocrine Function of Adipose Tissue//Growth, genetics and hormones.- 2002.- Vol.18.- Issue 2.

186. Dinneen S. Carbohydrate metabolism in non-insulin-dependen diabetes mellitus. /Gerich J., Rizza R. // N. Engl. J. Med. 1992. - V.32. - P.707-713.

187. Dunn C.J. A review of its pharmacological properties and therapeutic use in non-insulin-dependent diabetes mellitus. /Peters D.H. Metformin. // Drugs.-1995.-49:721-749

188. Eaton J.W. Catalases and peroxidases and glutathione and hydrogen peroxide: Mysteries of the bestiary // J. Lab. Clin. Med. 1991. - Vol. 118. - P.3-4.

189. Edlung A. A non-glycosylated extracellular superoxide dismutase variant. /Edlung Т., Hjalmarsson K., et al. // Biochem. J. 1992. - Vol. 288. - P.451-456.

190. Ehrenwald E. Intact human ceruloplasmin oxidatively modifies low density lipoprotein. /Chisolm G.M., Fox P. // J. Clin. Invest. 1994. - Vol. 93. - P. 1493-1501.

191. Eisenberg W.C. Cytogenetic effects of singlet oxygen. /Taylor K., Guerrero R.R. // J. Photochem. Photobiol. 1992. - Vol. 16. - P. 381-384.

192. Emma Barinas-Mitchell. Man.' Cushman et al. Serum level of C-reactive protein are associated with obesity, weight gain, and hormone replacement therapy in healthy postmenopausal women // Am J Epidemiol. 2001. -Vol.153 (11).- P.1094-1101.

193. Esterbauer H. Cytotoxicity and denotoxicity of lipid-oxidation products // Am. J. Clin. Nutr. 1993. - V. 57, Suppl. - P. 779-786.

194. Fagan J.M. Characterization of a proteolytic system in red blood cells which degrades oxidatively-damaged proteins. /Waxman L. //Intracellular Proteolysis

195. Mechanisms and Regulations. Tokyo: Japan Sci. Soc. Press, 1991. - P.502-503.

196. Ferrannini E. Insulin: in search of a syndrome. /Balkau B. //Diabet. Med. — 2002. -19(9): 724-729.

197. Ferri C. Early activation of vascular endothelium in nonobese, nondiabetic essential hypertensive patients with multiple metabolic abnormalities. /Desideri G., Baldoncini R. et al. // Diabetes. 1998. - V. 47. - P. 660-667.

198. Fonseca V.A. Plasma homocysteine concentrations are regulated by acute hyperinsulinemia in nondiabetic but not type-2 diabetic subjects. /Mudaliar S., Schmidt B. et.al. // Metabolism. 1998. - 47:686 - 689.

199. Ford E.S. Prevalence of the metabolic syndrome among US adults: findings from the Third National Health and Nutrition Examination Survey. /Giles W.H., Dietz W.H. JAMA 2002; 287 (3): 356-359.

200. Fridovich.I. Superoxide dismutases //J. Biol. Chem. Vol.264. - P. 77617764.

201. George C. De la deformabilite erytrocytaire a oxygenation tissulaire. /Thao Chan M., Weill D. et al. // Med. Actuelle. 1983. - Vol. 10. - № 3. - P. 100103.

202. Granberry M.C. The insulin resistance syndrome. /Fonseca V.A. // Southern Medical Journal. 1999. - Vol. 92. - №1. - P. 2 - 14.

203. Granberry M. Insulin resistance syndrome: options for treatment // South. Med. J. Fonseca V.- 1999. №Jan; 92(1). - P.2 - 15.

204. Greenberg A.S. Identifying the links between obesity, insulin resistance and b-cell function: potential role of adipocyte-derived cytokines in the pathogenesis of type 2 diabetes. /McDaniel M.L. // Eur. J. Clin. Invest. 2002. - 32(Suppl. 3): 24-34.

205. Griffin S.V. The inhibition of myeloperoxidase by ceruloplasmin can be reversed by anti- myeloperoxidase antibodies. /Chapman P.T., Lianos E.A., Lockwood C.M. // Kidney Int. 1999. - Vol. 55. - P. 917-925.

206. Grundy S.M. Atherogenic deslipidemia, and the metabolic syndrome. /Small LDL, //Circulation. 1997. - 95:1-4.

207. Gutteridge J.M.C. Antioxidant activity of ceruloplasmin //Handbook of Methods for Oxegen Radical Research. Boca Raton: CRC Press, 1986. - P. 303-307.

208. Haffner S Mortality from coronary heart disease in subject with type 2 diabetes and nondiabetic subject with and without prior myocardial infarction. /Lehto S, Ronnemaa T, Pyorala K, Laakso M. N Engl J Med 1998; 339: 229 -34.

209. Haffner S.M. Prospective an alyses of the insulin resistance syndrome (Syndrome X) /Valdez R.A., Hazuda H.P. et al. // Diabetes.-1992.-V. 41.-P. 715 -722.

210. Haffher S.M. Is leptin concentration associated with the insulin resistance syndrome in nondiabetic men? /Mykkanen L., Rainwater D.L. et. al. // Obes. Res.-1999.-7: 164-169.

211. Halliwell B. The measurement of free radical reactions in humans: Some thoughts for future experimentation. /Grootveld M. //FEBS Lett. 1987. - Vol. 213.-P. 9-14.

212. Halliwell B. Caeruloplasmin and the superoxide radical. /Gutteridge J.M.C. //Lancet. 1982. - Vol. 2. - P. 556-559.

213. Hanefeld M. Therapeutic potentials of acarbose as firstline drug in NIDDM insufficiently treated with diet alone. /Fischer S., Schulze J., Spengler M. et al. //Diabetes Care. 1991. - 14:732-737.

214. Hanson R.L. Evaluation of simple indices of insulin sensitivity and insulin secretion for use in epidemiologic studies. /Pratley R.E., Bogardus C. et al. //Am. J. Epidemiol. 2000. - 151:190 - 198.

215. Harris WS "Dietary fish oil and blood lipids" // Current Opinion in Lipidology. 1996. - V. 7. - P. 3-7.

216. Hassan H.M. Biosynthesis and regulation of superoxide dismutases //Free Radical Biol, and Med. 1988. - Vol. 5. -P. 377-385.

217. Hemmens B. Enzymology of nitric oxide synthase. /Mayer B. // Methods in Molecular Biology. 1996. - V. 100. - P. 1 - 32.

218. Herniksen E.J. Reduction of canine myocardial infarct size CI-959, an inhibitor of inflammatory cell activation. // J. Appl. Physiol.- 2002.-Vol.93.-P.788-796

219. Hevel J.M. Macrophage nitric oxide synthase: Relationship between enzyme-bound tetrahydrobiopterin and synthase activity. /Marietta M.A. // Biochemistry.- 1992. V. 31. - P. 7160 - 7165.

220. Hicks M. Identification of products from oxidation of uric acid induced by hydroxyl radicals. /Wong L.S., Dey R.O. // Free Radic. Res. Commun. 1993. -V. 18.-P. 337-351.

221. Higgins M Hazards of obesity: the Framingham experience. /Kannel W, Garrison R et al. ActaMedSkan 1987; 723: 235 365.

222. Hotamisgilil G.S. Increased adipose tissue expression of tumor necrosis in human obesity and insulin resistance. /Arner P. Саго J.F. et al. // J.Clin. Invest.- 1995.-Vol. 95.-P. 1409-2415.

223. Hsueh W.A. Cardiovascular risk continuum: Implications of insulin resistance and diabetes. /Law R.E. //Am. J. Med. 1998. - 105:4 - 14.

224. Hudgins L.C. Oxygen radicals attenuate the contractility of skinned muscle fibres from the pig myocardium. // Proc. Soc. Exp. Biol.- 2000.-Vol.225.-P.178-183

225. Hanefeld M. Das metabolische Syndrome. Deutsch. /Leonhardt W. //Ges. Wes.-1980.-V. 36.-P. 545 551.

226. Jeppesen J. Relation between insulin resistance, hyperinsulinemia, postheparin plasma lipoprotein lipase activity, and postprandial lipemia. /Hollenbeck C.B., Zhou M.Y., et al. //Arterioscl. Thromb. Vascul. Biol. 1995.- 15:320-324.

227. Johnson L.J. The antioxidants vitamin C, vitamin E, selenium, and carotenoids. /Meacham S.I., Kruskall L. J. // J. Agromedicine. - 2003. - Vol. 9. -P. 65-82.

228. Johnson F. Superoxide dismutases and their impact human health. /Giulivi C. // Mol. Aspects Med. 2005. - V. 26. - P. 340-352.

229. Joseph N.A. Adipocytokines and insulin resistens. /Greenberg A.S. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. - 89(2):447 - 460.

230. Kannel WB Diabetes and glucose intolerance as risk factors for cardiovascular disease: The Framingham Study. /McGee DL. Diabetes Care 1979; 2: 120-6.

231. Kanofsky J.R. Quenching of singlet oxygen by human plasma // Photochem. Photobiol. 1990. - Vol. 51. - P. 299-303.

232. Kaplan N.M. The deadly quartet: upper-body obesity, glucose intolerance, hypertriglyceridemia and hypertension. //Arch.Intern. Med.-1989.-V. 149.-P.1514- 1520.

233. Kasting J.F. Earth?s early atmosphere //Science. 1993. - Vol. 259. - P. 920 -926.

234. Kelley D.E. Fatty liver in type 2 diabetes mellitus: relation to regional adiposity, fatty acids, and insulin resistance /McKolanis T.M., Hegazi R.A.F. et al. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003. V. 28. - P. 906-916.

235. KikuchiY. Variation in red blood cell deformability and possible consequences for oxygen transport to tissue. /Da Q.W., Fujino T. // Microvasc. Res. 1994. - V. 47. - № 2. - P. 222-231.

236. Kim S.H. Impact of degree of obesity on surrogate estimates of insulin resistance /Abbasi F., Reaven G.M. // Diabet. Care. 2004. - Vol. 27. - P. 1998-2002.

237. Kirkman H.N. Mechanisms of protection of catalase by NADPH. Kinetics and stoichiometry. /Rolfo M., Ferraris A.M., Gaetani G.F. // J. Biol. Chem. -1999.-V. 274.-P. 1390-1391.

238. Kissner R. Peroxynitrous acid where ir the hydroxyl radical. /Nauser Т., Kurz C., Koppenol W.H. // IUBMB Life. - 2003. - V. 55. - P. 567 - 572.

239. Knoweles R. G. Nitric oxide synthases in mammals. /Moncada S. // Biochem. J. 1994. V. 298. - P. 249 - 258.

240. Kobayaschi T. Ultrastructural localization of superoxide dismutase in human skin. /Saito N, Takemori N. et al. // Acta Derm. Venerol. 1993. - Vol.73. -P.41-45.

241. Kokkaliari M. Serum catalase as the protective agent against inactivation of al-proteinase inhibitor by hydrogen peroxide: Comparison between normal and rheumatoid sera. /Farribe O., Berry M., Baum H. // Biochem. Int. -1992. — Vol.28.-P.219-227.

242. Koo C. Uptake of canine b-very low density lipoproteins by mouse peritoneal macrophages is mediated by a low density lipoprotein receptor. /Wernette-Hammond V.e., Innerarity T.L. //J. Biol. Chem. 1986. - 261:11. - P. 194-201.

243. Kris-Etherton R "Omega-3 Fatty Acids and Cardiovascular Disease. New Recomendations From the American Heart Association" // Ateroscler Nhromb Vase Biol. 2003. - V. 23. - P. 150-152.

244. Kukreja R.C. PHG synthase and lipoxygenase generate superoxide in the presence of NADPH. /Kontos Y.F., Hess M.Z., Ellis E.F. //Circ. Res. 1986. -Vol. 59.-P. 612-619.

245. Lamarche B. The small, dense LDL phenotype and the risk of coronary heart disease: Epidemiology, pathophysiology, and therapeutic aspects. /Lemieux I., Despres J.P. //Diabetes Metab. 1999. - 25: 199 - 211.

246. Leff J.A. Serum antioxidants as predictors of adult respiratory distress syndrome in patients with sepsis. /Parsons P.E., Dey C.E. et al. // Lancet. -1993. Vol. 341. - P. 777-780.

247. Libby P. Inflammation and atherosclerosis. /Ridker PM., Maseri A. Circulation 2002, 105: 1135-1143.

248. Lin К. Т. Peroxynitrite-induced apoptosis in HL-60 cell. /Xue J.Y., Nomen M. // J. Biol. Chem. 1995. - V. 270. - P. 1648 - 1649.

249. Linderkamp O. Impaired deformability of erythrocytes and neutrophils in children with newly diagnosed insulin dependent diabetes mellitus. /Ruef P., Zilow E.P. et. al. // Diabetologia. - 1999. - Vol. 42. - №7. - P. - 865 - 869.

250. Lindstrom J. The effect of acarbose on dietary nutrient intake and metabolic control in NIDDM patients. (Abstr.). /Tuomilehto J., Spengler M. //Diabetol. -1996. -39(Suppl. 1): 739.

251. Lissner I. Fasting insulin in relation to subsequent blood pressure changes and hypertension in women. /Bengtsson C., Lapidus L., Kristjansson K., Wedel H. Hypertension 1992; 20: 797 801.

252. Lock R. Characteristics of the granulocyte chemiluminescence reaction following an interaction between human neutrophils and Salmonella typhimurium bacteria. /Dahlgren C. // Acta Pathol., Microbiol. Immunol. Scand. 1988. - V. 96. - P. 299-306.

253. Luscher T.F. The endothelium and cardiovascular disease a complex relation // N. Engl. J. Med. - 1994. - Vol. 330. - P. 1081-83.

254. Maples K.R. Free radical metabolite of uric acid. /Mason R.P. //J. Biol. Chem. -1988.-Vol. 263.-P. 1709-1712.

255. Marchiolli R. "Early Protecttion Against Sudden Death by n-3 Polyunsaturated fatty acids after myocardial infarction" /Barzi F et al. Circulation, 2003. P. 35-96.

256. Marclund S.L. Superoxide dismutase in extracellular fluids. /Holme E., Heller L. // Clin. Chim. Acta. 1982. - Vol. 126. - P. 41-51.1.192

257. Marklund S.L. Extracellular-superoxide dismutase, distribution in the body and therapeutic implications. /Karlsson K. // Antioxidants in Therapy and Preventive Medicine. N.Y.: Plenum Press, 1990. - P. 1-4.

258. Matsuzawa Y. Molecular mechanism of metabolic syndrome X: contribution of adipocyte-derived bioactive substances. /Funahashi Т., Nacamura T. // Ann. N-Y. Acad. Sci. 1999. - 892:146 - 154.

259. Miura T. Antioxidant activity of metallothionein compared with reduced glutatihione. /Muraoka S., Ogiso T. // Life Sci. 1997. - Vol. 60. - P. 301-309.

260. Moncada S. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology. /Palmer R.M.J., Higgs E.A. //Pharmacol: Rev. 1991. - V.43.-P.109 -142.

261. Montagnani M. Insulin action in vascular endothelium: potential mechanisms linking insulin resistance with hypertension. /Quon M.J. // Diabetes Obes. Metab.- 2000.-V. 2.-P. 285-292.

262. Muller S. Impaired glucose tolerance is associated with increased serum concentrations of interleukin 6 and coregulated acute-phase proteins but not TNF-a or its receptors. /Martin S., Koenig W. et. al. // Diabetol. 2002. -45(6):805 - 812.

263. Nakache M. Reationship between deformability of red blood cells and oxygen transfer: a modelized investigation. /Caprani A., Dimicoli J.L. et al. // Clin. Hemoheol. 1983. - Vol. 3. - № 2. - P. 177-189.

264. National Institutes Health (NIH). Clinical Guidelines on the Identification, Evaluation and Treatment of Overweight and Obesity in Adults: The Evidence Report. Washington, DC: Government Printing Office, 1998.

265. Okuda M. Expression of glutaredoxin in human coronary arteries: Its potential role in antioxidant protection against atherosclerosis. /Inoue N:, Azumi H. et al. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2001.-Vol.21.- P. 14831487.

266. Packer L. Oxidative stress, antioxidants, aging and diseases //Oxidative stress and Aging /Eds Cutler R., Packer L., Bertram J., Mori A. 1995. P.l 14.

267. Pereira В. Hormonal regulation of superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase activities in rat macrophages. /Rosa L.F.B.P.C., Safi D.A. et al. // Biochem. Pharmacol. 1995. - Vol. 50. - P. 2093-2098.

268. Pinkney J. H. Endothelial dysfunction: cause of the insulin resistance syndrome. /Stehouwer C.D., Coppack S.W., Yudkin J.S. // Diabetes. 1997. -V. 46 (Suppl. 2).-P. 9-13.

269. Porter M.H. Effects of TNF-a on glucose metabolism and lipolysis in adipose tissue and isolated fat-cell preparations. /Cuthins A., Fine J.B. et. al. // J. Clin. Med. -2002. -139:140-146.

270. Pradhan AD. C-reactive protein, interleukin-6, and risk of developing type 2 diabetes mellitus. /Manson JE, Rifai N, et al. // JAMA.-2001.-Vol.286.- p.327-334.

271. Prodczacy J.J. Reduction of iodonitrotetrazolium violet by syperoxide radicals Wei.R. //Biochem. Biophys. Res. Comm. 1988. - Vol. 150. -P. 1294-1301.

272. Purnell J, The central role of dietary fat, not carbohydrate, in the insulin resistance syndrome. /Brunzell J Curr Opin Lipidol. 1997; 8(1): 17-22.

273. Radi R. Inhibition of xanthine oxidase by uric acid and its influence on superoxide radical production. /Tan S., Prodanov E. et al. //Biochim. et biophys. acta.-1992.-Vol. 1122.-P. 178-182.

274. Rashba-Step J. ESC studies on the production of reactive oxygen intermediates by rat liver microsomes in the presence of NADPH or NADH. /Turro N.L., Cederbaum A.I. // Arch. Biochem. Biophys. 1993. - Vol. 300. -P. 401-408.

275. Reaven G.M. Role of insulin resistance in human disease.// Diabetes.-1988.-V. 23.-P.1595- 1607.

276. Reaven G.M. Insulin resistance and risk factors for coronary heart disease. /Laws A. // Balliere's Clin.Endocrinol.Metab. 1993 -Vol.7. - P. 1063 - 1078.

277. Reaven G. Diet and Syndrom X // Curr. Atheroscler. Rep. 2000. Nov; 2(6): P.503 - 507.

278. Reilly MP. The metabolic syndrome: more than the sum of its parts? /Rader DJ. // Circulation.- 2003.- Vol.108.- p. 1546-1551.

279. Reis GJ. «Fish oil therapy: indication, results and problems in clinical practice». /Boucher T.M., Pasternak R.C. .^Cardiopulmonary Rehab, 2005, 9, 465-469.

280. Reiter R. J. Melatonin, free radicals and cancer initiation. /Tan D.-X., Poeggeler B. et al. // Advances in Pineal Research. Vol. 7. - London: John Libbey & Co Ltd., 1994.- P.211-228.

281. Resnick L.M. Ionic basis of hypertension, insulin resistance, vascular disease and related disorders.// Am. J. Hypertens.-1993.-V.6.-P. S123 S134.

282. Sandstrom P. A. Lipid hydroperoxides induce apoptosis in T cell displaying a HIV associated glutathione peroxidase deficiency. /Tebbey P.W., Cleave S.V., Buttke T.M. // J. Biol. Chem. - 1994. - V.269. - P. 798 - 801.

283. Sato M. Recent studies on metallothionein: protection against toxicity of heavy metals and oxygen free radicals. /Kondoh M. // Tohoku J. Exp. Med. -2002.-Vol. 196.-P. 9-22.

284. Semsei I. In vitro studies on the OH* end 02 free radical scavenger properties of idebenone in chemical systems. /Nagy K., Zs-Nagy I. //Arch. Gerontol. And Geriatr. 1990. - Vol. 11. - P. 187-197.

285. Sevanian A. Serum urate as anantioxidant for ascorbic acid. /Davies K.J.A., Hochstein P. //Amer. J. Klin. Nutr. 1991. - Vol. 54. - P. SI 129 - SI 134.

286. Shappel S.B. Macl (CDllb-CD18) mediates adherence dependent hydrogen peroxide production by human and canine neutrophils. /Toman C., Anderson D. S. et al. // J/ immunol. 1990. - Vol. 144. - P. 2702-2711.

287. Sheu W.H. Coronary artery disease risk predicted by insulin resistance, plasma lipids, and hypertension in people without diabetes. /Jeng C.Y., Young M.S., Le W. J., Chen Y.T. //Am. J. Med. Sci. 2000. - 319 : 84 - 88.

288. Sies H. Oxidative stress From basic research to clinical application // Amer. J. Med/ -1991.-Vol. 91, Suppl. 3C.-P. S31 -S38.

289. Skarfors E.T. Risk factors for the development of hypertension: a 10-year longitudinal study in middle-aged men. /Litbell H.O., Selinus I. J. Hypertens 1991;9:217-23.

290. Spitsin S.V. Comparison of uric acid and ascorbic acid in protection against EAE. /Scott G.S., Mikheeva T. et al. // Free Radic. Boil. Med. 2002. -V. 33. -P. 1363-1371.

291. Stamler J. Epidemic obesity in the United States. Arch InternMed 1998; 150: 1040-4.

292. Stantman E. R. Protein oxidation and adding // Sciance. 1992. - V. 257. - P. 1220-1224.

293. Steinberg D. Beyond cholesterol: modification of low-density lipoprotein that increase its atherogenicity. Review. /Parthasaratry S., Carew Т.Е. et al. //N. Engl. Med. 1989. - 320 : 915-922.

294. Stralin P. Effects of oxidative stress on the expression of extracellular superoxide dismutase, CuZn-superoxide dismutase and Mn- superoxide dismutase in human dermal fibroblasts. /Marklung S.L. // Biochem. J. 1994. Vol/298.-P. 347-352.

295. Sundqvist T. Bovine aortic endothelial cells release hydrogen peroxide // J. Cell. Physiol.-1991.-Vol. 148.-P. 152-156.

296. Thomas J.P. Enzymatic reduction of phospholipids and cholesterol hydroperoxides in artificial bilayers and lipoproteins. /Geiger P.G., Maiorino M. et al. // Biochim. Biophys. Acta. 1990. - Vol. 1045. - P.252-260.

297. Thomas M.J. Urate causes the human polymoorphonuclear leukocyte to secrete superoxide // Free Radic. Biol. Med. 1992. - Vol. 12. - P. 89-91.

298. Torrielli M.V. Free radicals in inflammatory disease. /Diansani M.U. // Free Radicals in Molecular Biology, Aging, and Disease. N.Y., 1984. - P.355-379.

299. Traber M.G. Vitamin E kibetics in smokers and nonsmokers. /Winklhofer-Roob B.M., Roob J.M. et al. // Free Radic. Biol. Med.- 2001. -Vol. 31. -P.1368-1374.

300. Tripathy D. Insulin secretion and insulin sensitivity in relation to glucose tolerance: lessons from the Botnia study. /Carlsson M., Almgren P., Isomaa B. Diabetes 2000; 49 (6): 975-980.

301. WHO. Obesity: Preventing and Managing the Global Epidemic: report of a WHO Consultation on Obesity, Geneva. WHO. 1997.

302. Wendel A. Enzymes acting against reactive oxygen //Enzymes Tools and Targets. - Basel: Karger, 1988. - P. 161-167.

303. Wendel A. Enzymes acting against reactive oxygen // Enzymes — Tools and Targets. Basel: Karger, 1988. - P. 161 - 167.

304. Willett W.C. Weight, weight change, and coronary beart disease in women. Risk within the normal weight range. /Manson JE et al. J Am Med Assoc 1995; 273:461 -5.

305. Winocour P.H. Lipoprotein abnormalities in insulin-dependet diabetes mellitus. /Dunington P.N., Ishola M. et al. //Lanset. 1986. - 1:1176-1178.

306. Wu W. Eosinophil peroxidase nitrates protein tyrosyl residues. Implications for oxidative damage by nitrating intermediates in eosinophilis inflammatory disorders. /Chen Y., Hansen S.L. // J. Diol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P. 2593-2594.

307. Yim M.B. Enzyme function of copper, zinc superoxide dismutase as a free radical generator. /Chock P.B., Stadtman E.R. // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268.-P. 4099-4105.

308. Yusuf S. Effects of an angiotensin-converting-enzyme inhibitor, ramipril, on cardiovascular events in high-risk patients. /Sleight P., Dagenais G. et al. //N. Engl. J. Med. -2000. -Vol. 342. -P. 145-153.

309. Zamara E. 4-Hydroxynonenal as a selective pro-fibrogenic stimulus for activated human hepatic stellate cells. /Novo E., Marra F. // J. Hepatol. 2004. -V. 40.-P. 60-68.

310. Zanma A. Conjugates of superoxide dismutase with the Fc fragment of immunoglobulin G // J. biochem. 1991. - Vol. 110. - P. 868-872.

311. Zhou J. Primary studies on heroin abuse and injury induced by oxidation and lipoperoxidation. /Si P., Ruan Z. et al. // Chin. Med. J. 2001. - Vol. 114. - P. 297-302.

312. Zinmam B. Circulating tumor necrosis factor-a concentrations in a native Canadian population with high rates of type 2 diabetes mellitus. /Hanley A.J.G., Harris S.B. et. al. // J. Clin. E. 1999.

Информация о работе

Попова, Татьяна Петровна
кандидата биологических наук
Ростов-на-Дону, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Свободнорадикальные процессы в крови и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Свободнорадикальные процессы в крови и структурно-функциональное состояние мембран эритроцитов при метаболическом синдроме - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы