Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Стимуляция роста и овогенеза у американских раков рода Procambarus при культивировании

ВАК РФ 03.00.18, Гидробиология

Автореферат диссертации по теме "Стимуляция роста и овогенеза у американских раков рода Procambarus при культивировании"



На правах рукописи

Полосьянц Тамара Юрьевна

Стимуляция роста и овогенеза у американских раков рода РяосАМВАяи5 при культивировании

Специальность 03.00.18. - Гидробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва, 2002

Работа выполнена в Московской государственной технологической академии (МГТА)

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Симаков Ю.Г.

доктор биологических наук, Киселев А.Ю.

Кандидат биологических наук, Воронин В,М.

Ведущая организация - Межведомственная ихтиологическая комиссия (МИК)

Защита состоится "М" ¿¿УОИ^ 2002г., в часов на заседании диссертационного совета К 212.122.03 при Московской государственной технологической академии по адресу: 1131*9, г.Москва ул. Болотниковская дом 15

С можно ознакомиться в

библией- : Московской государственной

технологической ак \ ^мии (МГТА).

Автореферат разослан __; ь^Й^Р 2002г.

Ученый секретарь диссертационного сг^г

кандидат биологии?- '« ". уг. Николаева И.Ф.

Общая характеристика работы Актуальность проблемы

Культивирование ракообразных наиболее молодое направление в биотехнике выращивания водных животных. За последнее время появился ряд оригинальных технологий выращивания раков в искусственных установках. Однако основные усилия в разрабатываемых технологиях направлены на техническое обеспечение процесса культивирования раков.

Другое направление - интенсификация прироста биомассы культивируемых объектов, а также стимуляция их размножения, требует еще своего решения. Именно в этом и заключается актуальность данной работы, что проведенные в ней исследования относятся ко второму направлению - управлению ростом и созреванием гонад у десятиногих раков.

В настоящее время из 450 известных видов речных раков культивируют представителей примерно десяти видов. Биологические свойства немногочисленных хозяйственно ценных раков различны. Это в свою очередь определяет технологические особенности, отраслевую специфику и проблемы, с которыми сталкивается производство продукции разных видов речных раков.

На первых этапах развития, культивирование высших пресноводных раков базировались на астацинах. Но, последние 20 лет большая часть продукции стала состоять из интродуцированного северо-американского рака - красного болотного (РгосатЬагиз с!эгки $Шат. СатЬаПпае).

В странах Западной Европы уже в средние века появился спрос на речных раков как на деликатесные продукты. В XIX веке продукты из раков приобрели более широкую популярность, чем ранее, В конце XIX века центром добычи раков стала Россия, которая до 1950-ых годов удерживала первенство в добыче речных раков. Основными видами добываемых раков были широкопалый (ДзГасиз авШсиз) и длиннопалый (РоМаз(асиз эр.). Однако в 1960 -80-ые годы ог.нпнь|ым поставщиком раков на европейский рынок

стала Турция, котсю^ ^.^кй'гй^й^гч^ды по<тавпяла на рынки 6-8 тыс. тонн продукца^сДо з шасы раков в Турции

I им. К. А "Гимирпзава__

I инз. ияЛЗМ^

сильно пострадали от эпизоотии рачьей чумы, так же как и в нашей стране.

После этого европейский рынок стал заполняться переработанными продуктами из США, где после 1950-ых гг. значительное развитие получило производство (добыча и культивирование) лрокамбарусов (РгосатЬагиз яр.). Основной объект американского производства - РгосатЬагиэ с1агкц, обладает высокой скоростью роста.

Помимо этого, наличие значительных площадей для субтропической экстенсивной аквакультуры и хорошее ее технологическое обеспечение позволили США увеличить ежегодные объемы Мирового производства красного рака на порядок. В среднегодовой ра ко продукции (48,825 тонн/год) за период 1986-1989гг камбарины составили 95,6%, (из них болотный или красный рак занимал 80%), оставшиеся 4,4% продукции давали все остальные виды культивируемых речных раков (Александрова, 1997,1999).

Аква культура астацин сталкивается с двумя очень существенными неблагоприятными факторами - с загрязнением рыбохозяйственных водоемов и с вспышками эпизоотических заболеваний, таких как «рачья чума».

После 1970-ых гг. в связи с мероприятиями по восстановлению европейских запасов раков и интродукции в водоемы Пиренейского п-ова американских раков: - Р. Оагки, а в водоемы всей Западной Европы - Р. выяснилось, что эти раки - носители

возбудителя афаномикоза или «рачьей чумы».

Американские раки устойчивы к указанному заболеванию, а аборигенные виды чаще всего гибнут от него. Вспышки «рачьей чумы» привели к тому, что и в России произошло резкое снижение природных запасов раков. В настоящее время наша страна утратила роль поставщика раков в Западную Европу.

В представленной работе проводятся исследования по интенсификации культивирования прокамбарусов, которые в ближайшее время получат более широкое распространение в России и будут основными видами, культивируемыми в индустриальных условиях.

В данной работе нами в качестве основных объектов использовались два представителя: РгосатЬагиз с!агкн и

РгосатЬагив сиЬепяз. Оба вида культивируются в лабораторных условиях и могут с успехом использоваться в экспериментах по интенсификации репродуктивной функции различными физическими факторами.

Помимо этого, разрабатывались методы интенсификации роста раков при культивировании за счет использования в качестве корма энхитрей, методы культивирования которых уже достаточно отработаны (Микулин, 1994).

Цель и задачи работы

Цель настоящей работы - интенсификация репродуктивной функции и роста культивируемых северо-американских раков при использовании постоянного магнитного поля и комплексного кормления (комбикорма и энхитреи) с последующей гистологической и гистохимической оценкой действующих факторов на основные органы, ответственные за размножение и пищеварение.

Для выполнения указанной цели решается ряд задач, а именно:

1. Изучается действие постоянного магнитного поля на прирост красного болотного и кубинского раков.

2. Проводится гистологический и гистохимический анализ гонад у контрольных особей и раков, подвергнутых действию постоянного магнитного поля с напряженностью 88 мТл.

3. Оценивается действие комбикормов для рыб на прирост культивируемых видов раков.

4. Изучается совместное действие комплексного кормления комбикормами и живым кормом (энхитреи) на рост культивируемых объектов.

5. Изыскиваются методы культивирования энхитрей, оптимально влияющих на прирост северо-американских раков.

6. Проводится гистологический и гистохимический анализ гепатопанкреаса выращиваемых раков для определения на тканевом уровне полноценности комплексного кормления комбикормом и живым кормом.

Научная новизна данной работы заключается в том, что впервые исследуется репродуктивная функция прокамбарусов (на примере овогенеза и сперматогенеза) в норме и при действии постоянного магнитного поля в зависимости от воздействующего на раков полюса магнита.

Проведен морфологический и гистохимический анализ овогенеза у болотного и кубинского раков, как в норме, так и при воздействии постоянного магнитного поля, применяемого для интенсификации процессов овогенеза и роста.

Впервые изучена динамика прироста двух культивируемых видов прокамбарусов при комплексном кормлении раков рыбными комбикормами и живым кормом - энхитреями.

Проведены исследования по гистологическому строению «печени» или гепатопанкреаса после выращивания раков на различных видах кормов и показано отсутствие отклонений в пищеварительной железе, как при кормлении комбикормами, так и при комплексном кормлении с живым кормом. Изучена динамика прироста раков при различном кормлении.

Работа имеет важное практическое значение для интенсификации роста раков в культуре и стимуляции процессов овогенеза. Использование постоянного магнитного поля позволяет сократить репродуктивный цикл у болотного и кубинского раков. Южный полюс магнита действует как стимулятор роста.

Помимо этого, при культивировании американских раков для кормления предлагается комплексное кормление, включающее как комбикорма для рыб, так и живой корм - энхитрей, культивирование которых хорошо отработано и не требует больших экономических затрат. Комплексное кормление приводит к ускорению роста культивируемых видов раков и не вызывает у них отклонений в пищеварительной железе, что подтверждается гистологическим и гистохимическим анализом.

Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедре "Биоэкопогии и ихтиологии" МГТА.

Апробация работы

Материалы диссертации докладывались и обсуждались: на Мевдународной конференции МГТА «Инновационные технологии в пищевой промышленности третьего тысячелетия», Москва, 2001.; на научно-практической конференции "Проблемы и перспективы развития аквакультуры в России". Краснодар, 2001; на семинарах и коллоквиумах кафедры "Биоэкологии и ихтиологии" МГТА, Москва, 2000-2002 гг.

Публикации:

Результаты диссертации изложены в шести опубликованных научных работах.

Объем и структура диссертации

Диссертация имеет общий объем 123 страницы машинописного текста, включая 1 таблицу и 18 рисунков (графики и микрофотографи и).

Работа включает следующие разделы: введение, пять глав, заключение и основные выводы. Список использованной литературы включает в себя 158 работ, из которых 58 - на иностранных языках.

Содержание работы

Глава 1. Систематика, особенности роста и гаметогенеза речных раков (обзор литературы)

Дается систематика и ареалы распространения речных раков, а так же особенности культивирования северо-американеких раков. Рассматривается в сравнительном аспекте овогенез у ракообразных. В главе дана сравнительная оценка камбарин и астацин, как объектов культивирования и показываются положительные и отрицательные стороны биологических особенностей американских речных раков по сравнению с Европейскими аборигенными видами. Заканчивается данная глава

обзором возможных путей интенсификации роста ракообразных при современных методах культивирования.

Глава 2. Биологические основы культивирования речных раков

В данной главе даны основы биотехники культивирования речных раков. Показываются методы организации крупномасштабных хозяйств по культивированию раков и методы инкубирования икры для получения посадочного материала.

Во второй части главы приводятся конструкции, разработанные как отечественными, так и иностранными специалистами, позволяющие культивировать речных раков в различных водных системах. Отдельно выделен раздел по биотехнике инкубирования икры речных раков в аппарате Босса и Уайта и в его модификациях, предложенных нашими астакологами.

В результате проведенных исследований удалось подтвердить, что икра снятая с плеопод способна к выживанию в аппаратах для культивирования, что позволяет получать полноценное потомство.

Глава 3. Материал и методы исследований

Исследование проведено на двух видах американских раков РгосатЬагиз с1агкИ и РгосатЬагиз сиЬепз!$ относящихся к семейству камбарид (СатЬа^ае, Отряд десятиногих раков (Оесаройа)).

Основная задача исследований сводилась к стимуляции роста и овогенеза при культивировании указанных раков, поэтому, для экспериментов были взяты молодые особи в возрасте 2-х месяцев, которые росли до 5-ти месячного возраста.

Культивирование осуществлялось в лабораторных условиях: температура воды в аквариумах • 24°С, содержание растворенного кислорода в воде - 8,0 мг/л, световой режим - Т/С 10:14, общая продолжительность опытов для каждой группы - 3 месяца.

Для исследований воздействия южного и северного полюсов

магнитного поля на рост и овогенез раков, аквариумы сдвигались попарно, между которыми помещалась дискообразная пластина постоянного магнита с напряженностью поля 88 мТл с таким условием, что к одному из аквариумов был обращен южный полюс, к другому - северный (рис 3.1).

Раки помещались в аквариумы (объем каждого - 20 литров) по 10 штук, опыты проведены в 3-х кратной повторности, варианты исследований представлены в таблице 3.1.

Таблица 3.1

Объекты исследований и распределение экспериментального

материала

Объект исследований Вид эксперимента Количество раков и препаратов

Procambarus Воздействие 30 раков,

clarkii постоянного 60 гистологич-х

магнитного поля на препаратов,

овогенез и рост 180 гистохимич-х

раков препаратов

Динамика роста 30 раков

раков при 50 гистолог-х препаратов,

кормлении 60 гистохимич-х

комбикормами и препаратов

состояние печени

Динамика роста 30 раков,

раков при кормя. 45 гистолог-х препаратов,

энхитреями, 30 гистохимич-х

выращен, на пище с препаратов

каротиноидами и со

спирулиной,

состояние печени

РгосатЬагиэ Воздействие 30 раков,

сиЬепэе ПОСТОЯННОГО 50 гистологич-х

магнитного поля на препаратов, 140

овогенез и рост гистохимич-х препаратов

раков

Динамика роста 30 раков,

раков при 50 гистолог-х препаратов,

кормлении 50 гистохимич-х

комбикормами и препаратов

состояние печени

Динамика роста 30 раков,

раков при 45 гистолог-х препаратов,

кормлении 40 гистохимич-х

энхитреями, препаратов

выращенными на

пище с

каротиноидамии и

со спирулиной,

состояние печени

Контроль -30 раков, 60 гистологических и 180 гистохимических препаратов.

Определение напряженности магнитного поля постоянных магнитов, проводилось с помощью измерителя магнитной индукции РШ 1-10 на кафедре "Магнетизма" физфака МГУ. Напряженность составила: у магнита - 88 мТл; у противоположной стенки аквариума -10 мТл.

В процессе опытов, через каждые 20 дней и в конце опыта, производили фиксацию гонад и гепатопанкреаса раков в жидкости Буэна (Ромейс. 1954) и в этиловом спирте для гистохимических исследований (Пирс, 1962).

Полученные на микротоме срезы окрашивали гематоксилин-эозином - для морфологических исследований, а так же метил-грюн-пирамином по Браше - для выявления РНК и ДНК и для выявления мест локализации полисахаридов и гликопротеидов применяли ШИК-реакцию. Кальций выявляли ализариновым красным Э (Пирс, 1962; Лилли, 1969; Милованова и др., 1996).

Для количественной оценки воздействия магнитного поля, проводили морфометрию овоцитов 1-го порядка у различных экспериментальных групп раков.

Помимо этого, определялись ядерно-плазменные отношения (ЯПО) в овоцитах при различных факторах воздействия (магнитное поле, комплексное кормление).

Статистическая обработка полученного материала на определение достоверности разности средних проводилась по критерию Стьюдента и с использованием компьютерной программы 31а1дгар1г

Для фотографирования срезов гонад раков и гепатопанкреаса использовалась цифровая камера N¡0011 800 с

микрофотонасадкой.

Глава 4. Результаты исследований

Динамика роста и гаметогенез у РгосатЬагиз с1агкИ и РгосатЬагиз сиЬеп^ при воздействии постоянного магнитного поля.

При воздействии постоянного магнитного поля отмечается стимуляция роста раков у южного полюса и ингибирование роста у северного. Наибольшая стимуляция роста отмечается у красного болотного рака. У голубого рака также отмечена стимуляция роста, но она значительно отстает от роста у красного рака. Динамика роста красного и голубого раков соответственно представлены на рисунках 4.1 и 4.2.

Динамика роста красных раков при действии магнитного поля

Шдг ольла 1 «саг -15 дней)

Рис. 4.1. Динамика роста красных раков при действии магнитного поля

Динамика роста голубых раков при действии магнитного поля

— РОНУ южного мпюсэ

-"-Контроль

-Росту смерног о полоса

ЫЭГНКТЭ

2 3 15 0 Шаг опмта (дни: 1 шаг - 15 дн*й)

Рис. 4,2. Динамика роста голубых раков при действии магнитного

поля

Сравнительный анализ воздействия магнитного поля на рост красного и голубого раков показывает, что отставание роста у голубого рака, видимо, связано с температурными условиями (наибольший прирост наблюдается: у красного рака - при 24°С; у голубого - при 27°С).

Одновременно с исследованием роста раков, ставились эксперименты по влиянию магнитного поля на овогенез. Гистологические срезы яичника красного рака при действии южного полюса магнита и в контроле, представлены на рисунке 4.3.

а) б)

Рис.4.3. Овоциты красного рака при воздействии постоянного магнитного поля: начало вителлогенеза (окраска гематоксилин-эозином, ув. 10 х 15) а) При действии южного магнитного полюса, б) Контроль

Показано, что у красного рака овоциты при действии магнитного поля растут быстрее чем в контроле, а, к концу опыта, в них начинают откладываться желточные гранулы, в то время как в контроле начало вителлогенеза не наблюдается.

При действии северного полюса магнита наблюдается ингибирование роста овоцитов по сравнению с контролем. В этом случае ни в опыте, ни в контроле, овоциты не содержат желточных гранул.

У голубого рака, также происходит стимуляция роста овоцитов при действии южного полюса магнита, однако до стадии вителлогенеза процесс не доходит и можно только отметить различный объем овоцитов в контроле и опыте. Гистологическая картина^овоцитов у кубинского (голубого) рака представлены на рисунке 4.4.

Рис.4.4. Овоциты при действии южного полюса магнита и в контроле (окраска гематоксилин-эозин, ув. 10 х 15) а) При действии южного полюса; б) Контроль

Измерение объема овоцитов показывает разницу их роста у раков находящихся соответственно у северного и южного полюсов магнита. Как у красного, так и у голубого рака, рост овоцитов у северного и южного полюсов магнита отличается примерно на 20%.

Более точную характеристику цитоплазматического роста овоцитов у различных полюсов магнита дает изучение ядерно-плазменных отношений (ЯПО) у красных и голубых раков.

Активный спад ЯПО наблюдается у красного рака, что

указывает на ускоренный рост овоцитов, особенно у южного полюса магнита. ЯПО у голубого рака характеризуются большей разницей между параметрами полученными у южного и северного полюсов.

Следовательно, картина роста у красного и голубого раков, в принципе, сходна межчу собой и различия в ЯПО можно отнести, скорее всего, к воздействию температуры. У северного полюса магнита наблюдается ингибирование роста овоцитов у каждого из изученных видов.

Исследование сперматогенеза у красного и голубого раков под влиянием магнитного поля показывает, что постоянное магнитное поле не вызывает морфологических отклонений в семенниках рака. В ацинусах семенников красного и голубого раков, видны сперматоциты, сперматиды и даже зрелые сперматозоиды. По всей видимости, магнитное поле не влияет на ускорение сперматогенеза и разницу в скорости созревания мужских половых клеток можно отнести к температурному фактору.

Воздействие различных типов кормления на рост и гистологическое строение печени (гепатопанкреаса) у РгосатЬагиь с1агкН и РгосатЬагиэ сиЬелз/в.

Кормление раков осуществляли тремя способами:

1. Сухими гранулированными кормами для рыб;

2. Комбикормами для рыб и энхитреями без каротиноидов;

3. Сухими кормами и энхитреями, выращенными с добавкой каратиноидов.

Удалось установить, что наибольший темп роста у раков, при третьем способе кормления. Прирост раков при кормлении первыми 2-мя способами, отстает от 3-го варианта кормления.

Динамика роста красного и голубого раков при различных способах кормления представлены на рис. 4.5, 4.6.

Рис. 4.5, Рост красных раков при различных формах кормления

РостштуЗьи р!Г01 при рппичны* 4ормп трииш

Ш*г шита 1 па! -15 жй)

Рис. 4.6. Рост голубых раков при различных формах кормления

Полученные результаты показывают, что комплексное кормление и кормление только комбикормом действует однотипно для красного и голубого раков. Разницу в полученных показателях, можно как и прежде, объяснить температурным фактором и, возможно, видовыми различиями.

Гистологическое строение гепатопанкреаса у голубого и красного раков сходно. Гистологическое строение "печени" красного рака, представлены на рисунке 4.7.

Рис.4.7. Гистологическое строение печени красного болотного рака при кормлении комбикормом и комплексном кормлении с добавкой

энхитрей (окраска гематотоксилин-эозином, ув. 10 х 15) а) При кормлении комбикормом; б) При комплексном кормлении с энхитреями содержащими каратиноиды

"Печень" на срезах представляет собой мелкие трубочки, выстланные эпителием, способным к секреции пищеварительного сока богатого протеолитическими ферментами. При выделении секрета в эпителии видны пузырьки и вакуоли, в которых содержатся пищеварительные ферменты.

Анализ препаратов показывает, что применение комплексного кормления раков (добавка энхитрей с высоким содержанием каротиноидов) вызывает в эпителии печеночных трубочек повышенную вакуолизацию. Это указывает на усиление метаболизма и активизацию обмена веществ при добавлении живого корма в виде олигохет.

Одновременно с ускоренным ростом красных болотных раков под влиянием комплексного кормления, ускоряется развитие овоцитов и начинает откладываться углеводный желток, который особенно хорошо выявляется с помощью ШИК-реакции.

Интенсивное начало вителлогенеза отмечается в овоцитах раков, получающих энхитрей с биологическими добавками (рис, 4.8., 4.9.)

Рис.4.8. Ускорение роста овоцитов и появление в их цитоплазме зерен углеводного

желтка при кормление энхитреями с биологическими добавками (ШИК-реакция, ув. 10 х 15)

Рис.4.9. Овоциты красного рака при кормление энхитреями без биологических добавок (ШИК-реакция, ув. 10x15)

Таким образом, комплексное кормление с использованием энхитрей способствует росту раков и ускоренному созреванию овоцитов при овогенезе, при этом, резко сокращается период протоплазматического роста.

Глава 5. Обсуждение результатов

Глава посвящена обсуждению результатов, которые могут быть сделаны на основании проведенного исследования.

В данной работе рассматриваются методы интенсификации роста и размножения именно тех речных раков, которых следует культивировать в установках с замкнутым водоснабжением, а не выпускать в природные водоемы, так как американские раки являются носителями афаномикоза. В качестве основного объекта культивирования нами предложено использовать высокопродуктивный вид - РгосатЬагиз с!агкИ, стимуляцию роста и размножения которого мы исследовали.

В настоящее время значительно сокращается наличие водоемов, пригодных для жизни речных раков (Мартынова, Полосьянц, 2001). Одновременно с этим появляется ряд технологических разработок отечественных и зарубежных астакологов, позволяющих разводить и выращивать как астацин из родов А$(аси$ и Pontastзcus. так и новых видов, завезенных из

американского континента из рода РгосатЬвгив.

Большинство исследователей понимает, что перспективы развития производства астацин ограничиваются экологическими и экономическими факторами. К экологическим факторам следует отнести неудовлетворительное состояние водосборных территорий и сокращение пригодных для жизни раков водоемов.

В России положение может быть усугублено, в случае допущения вселения в естественные водоемы североамериканских видов раков - Pacifastacus 1епш5си1и$ и РгосатЬагиэ с1агкН - носителей возбудителя афаномикоза. В нашей стране отмечается недостаточная связь между научно-исследовательскими работами и производством, что тормозит создание рентабельных и адаптированных к местным условиям технологий культивирования раков.

Для сохранения аборигенных видов раков у нас должна быть запрещена интродукция в естественные водоемы экзотических видов раков - потенциальных носителей опасных заболеваний. Однако для промышленного культивирования в широких масштабах американские виды раков во многих случаях подходят даже больше, чем астацины.

В данном случае проведенная работа показывает, насколько перспективен для культивирования в промышленных установках красный болотный рак (РгосатЬагиз с1агкп). Вполне понятно, что для сохранения биоценозов указанный рак не может быть выпущен в естественные водоемы. Однако по сравнению с астацинами, которых часто пытаются культивировать в промышленном масштабе, преимущества красного рака неоспоримы. Он не настолько требователен к качеству воды как широкопалый или длиннопалый рак, обладает повышенной жизнестойкостью, ускоренным ростом и репродуктивный цикл у него в три раза короче, чем у наших аборигенных видов.

В данной работе не ставилась задача исследовать продуктивность различных видов американских раков при искусственном выращивании. Однако, были поставлены не менее важные задачи, решение которых напрямую связаны с повышением продуктивности и интенсификацией размножения речных раков в искусственных условиях. Мы считаем, что задача была выполнена, так как найдены способы ускорения роста и овогенеза у двух видов

американских раков, РгосатЬагиз с!агки и Р.сиЬеп&з -претендентов на культивирование в промышленных установках. В результате выполнения работы было показано, что более экономично культивировать красного болотного рака, так как он крупнее и требуется меньше энергии на подогрев воды.

Красный рак оказался более восприимчив к постоянному магнитному полю, что позволило при действии южного полюса магнита ускорить его рост и сократить период овогенеза, за счет сокращения сроков протоплазматического роста овоцитов.

При проведении работы удалось показать, что красный и голубой американские раки ускоряют свой рост не только при влиянии южного полюса магнита, но и при комплексном кормлении, которое заключается в том, что к комбикорму прибавляется живой корм - энхитреи, несущие биологически активные добавки.

Сравнительный анализ биологических свойств двух рассмотренных видов американских раков, позволяет рекомендовать для культивирования в промышленных установках РгосатЬагиэ с1агки.

Что касается Р.сиЬепз}з, то он может служить лабораторной культурой, на которой можно в дальнейшем отрабатывать новые приемы стимуляции размножения и ускорения роста, изучать эмбриологию и генетику культивируемых раков, которые близки по своим биологическим показателям к показателям красного болотного рака.

Основные выводы

1. В результате экспериментов установлено, что появляется возможность стимулировать рост и процесс овогенеза у американских раков РюсатЬагиз с1агкП и Р.сиЬепзя, путем использования постоянного магнитного поля и комплексного кормления комбикормами с олигохетами,

2. Под влиянием южного полюса магнита при напряженности поля 88 мТл ускоряется рост тела раков и сокращается период протоплазматического роста овоцитов. У красного болотного рака (РюсатЬагиз с!агки) овоциты быстрее растут и вступают раньше в период вителлогенеза. Северный полюс постоянного

магнита, наоборот, действует ингибирующим образом на указанные показатели у каждого вида раков.

3. На гистологических препаратах удалось установить, что сперматогенез у прокамбарусов в разных ацинусах или дольках идет асинхронно, однако внутри каждого ацинуса развитие клона клеток синхронизировано. Действие постоянного магнитного поля не вызывает нарушения овогенеза и не ведет к отклонениям на гистологическом и гистохимическом уровне у каждого из исследованных видов.

4. Использование в качестве дополнительного живого корма олигохет способствует ускорению роста тела и овогенеза у двух исследованных видов раков. Кормление олигохетами с повышенным содержанием белка и каротиноидов значительно стимулирует рост раков.

5. Гистологические и гистохимические исследования пищеварительной железы раков (печени) позволяет придти к выводу, что у РгосатЬашэ с!агкИ и Р. сиЬепз1з нет видовых различий в механизмах секреции пищеварительных ферментов. Интенсивность секреции пищеварительного сока на различные виды корма у них меняется в зависимости от содержания белка и каротиноидов, чем больше последних компонентов, тем выше секреторная активность эпителия печеночных трубочек и тем выше содержание полисахаридов в пищеварительной железе.

6. Сравнительный анализ биологических особенностей двух видов американских раков и способности их реагирования на магнитное поле и разные виды кормления показывает, что красный болотный рак (РгосэтЬагиз с1агкИ) может быть перспективным, как объект для промышленного культивирования, В то же время кубинский рак (РгосатЬагиэ сиЬепз/э) больше подходит для лабораторной культуры и разработки научно-исследовательских проблем, связанных с культивированием речных раков.

По результатам исследований опубликованы следующие

работы:

1. Александрова E.H., Мамонтов Ю.П., Полосьянц Т.Ю. Промысел и культивирование речных раков в России И Обзорная информация ВНИЭРХ. Сер. Воспроизводство и пастбищное выращивание гидробионтов. Вып.1 М.-2001.-С.47.

2. Воропаев Н.В., Полосьянц Т.Ю., Новосельцев Г.Е., Панкратова О.В.. Международный симпозиум по разведению и выращиванию раков. // Рыбн. хоз-во. -М„ 1990, вып.10. - С.2-9

3. Мартынова А.П., Полосьянц Т.Ю. Влияние промышленных стоков на состояние природных популяций речных раков // Материалы VII научно-практической конференции "Инновационные технологии в пищевой промышленности третьего тысячелетия". М.: МГТА, 2001. вып. 6. С 36-37.

4. Полосьянц Т.Ю. Распространение речных раков в водоемах Европейской части России // Материалы VII научно-практической конференции "Инновационные технологии в пищевой промышленности третьего тысячелетия". М.: МГТА, 2001. вып. 6. С 25-26.

5. Полосьянц Т.Ю. Перспективы товарного выращивания раков в России И Рыбное хозяйство. ВНИЭРХ, Сер. Пресноводная аквакультура. Вып.2 М.-2001.- С. 63-65.

6. Симаков Ю.Г., Полосьянц Т.Ю. Пути интенсификации роста речных раков при современных методах культивирования // Проблемы и перспективы развития аквакультуры в России. Материалы докладов научно - практической конференции. Краснодар, 2001. -с. 104- 105.

МГТА. Заказ 5216. Тираж 100 экз.

(

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Полосьянц, Тамара Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМАТИКИ, РОСТА И ГАМЕТОГЕНЕЗА РЕЧНЫХ РАКОВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Систематика и ареалы распространения речных раков. .2. Особенности биологии и культивирования северо-американских раков.

1.3. Овогенез у раков.

1.4. Сравнительная оценка камбарин и астацин, как объектов культивирования.

1.5. Пути интенсификации роста раков при современных методах культивирования.

ГЛАВА 2. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЕЧНЫХ РАКОВ.

2.1. Биотехника культивирования пресноводных раков.

2.2. Конструкции, позволяющие культивировать раков в разных водных системах аквакультуры.

2.3. Биотехника инкубирования икры речных раков.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4.1. Динамика роста РкосАмвАкиз сьшкп при воздействии постоянного магнитного поля.

4.2. Цитологические изменения в овоцитах красного болотного рака при воздействии постоянного магнитного поля.

4.3. Гистохимический анализ овоцитов Рюсамвашб сьаш/при действии постоянного магнитного поля.

4.4. Динамика ростаРкосамвакш сивктт при воздейс твии постоянного магнитного поля

4.5. Цитологические изменения в овоцитах голубого рака при воздействии постоянного магнитного поля.

4.6. Гистохимический анализ овоцитов ряосамвакиз сивеийк при действии постоянного магнитного поля.

4.7. Сперматогенез у красного и голубого рака при действии постоянного магнитного поля

4.8. Воздействие различных типов кормления на рост ракаРкосамвашъ сьаккп.

4.9. Гистологическое строение печени красного болотного рака при различных способах кормления.

4.10. Воздействие различных кормов на рост рака Ркосамвм и,$ сшемк при искусственном выращивании и сравнение их с ростом р. clarkii.

4.11. Гистологическое строение печени голубого рака при использовании в качестве кормов энхитрей.

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5.1. Об использовании американских речных раков в условиях России.

5.2. Основные пути культивирования речных раков в Росссии.

5.3. Стимуляция роста и размножения красного и голубого раков постоянным магнитным полем.

5.4. Ядерно-плазменные отношения в овоцитах .американских раков при действии постоянного магнитного поля.

5.5. Влияние комплексного кормления на рост Procambarus clarkii и Р. cubensis.

5.6. Гистологические и гистохимические изменения в печени раков при использовании комбикормов и энхитрей.

5.7. Сравнительный анализ стимуляции роста и овогенезау Procambarus clarkii и Р. cubensis, как объектов культивирования.

5.8. Сравнительный анализ воздействия различных кормов на пищеварительную железу и овогенез у красного и голубого раков.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Стимуляция роста и овогенеза у американских раков рода Procambarus при культивировании"

Культивирование ракообразных в России наиболее молодое направление в биотехнике выращивания водных животных. За последнее время появился ряд оригинальных технологий выращивания раков в искусственных установках. Однако основные усилия в разрабатываемых технологиях направлены на техническое обеспечение процесса культивирования раков.

Другое направление - интенсификация прироста биомассы культивируемых объектов, а также стимуляция их размножения, требует еще своего решения. Именно в этом и заключается актуальность данной работы - что проведенные в ней исследования относятся ко второму направлению - управлению ростом и созреванием гонад у десятиногих раков.

В настоящее время из 450 известных видов речных раков культивируют представителей примерно десяти видов. Биологические свойства немногочисленных хозяйственно ценных раков различны. Это в свою очередь определяет технологические особенности, отраслевую специфику и проблемы, с которыми сталкивается производство продукции разных видов речных раков.

На первых этапах развития, культивирование высших пресноводных раков базировались на астацинах. Но, последние 20 лет большая часть продукции стала состоять из интродуцированных северо-американских раков - красного болотного (РгосатЪагт с1агкп зиЫат. СатЬаппае) и сигнального (РаЫ/аз(астае 1етшси1ш зиЫат. Astacidaë).

В странах Западной Европы уже в средние века появился спрос на речных раков как на деликатесные продукты. В XIX веке продукты из раков приобрели более широкую популярность, чем ранее. В конце XIX века центром добычи раков стала Россия, которая до 1950-ых годов удерживала первенство в добыче речных раков. Основными видами добываемых раков были широкопалый (Astacus а$1аси5) и длиннопалый (РоШаз1аст л/7.). Однако в 1960 -80-ые годы основным поставщиком раков на европейский рынок стала Турция, которая в некоторые годы поставляла на рынки 6-8 тыс. тонн продукции. Но после 1986 года запасы раков в Турции сильно пострадали от эпизоотии рачьей чумы, так же как и в нашей стране.

После этого европейский рынок стал заполняться переработанными продуктами из США, где после 1950-ых гг. значительное развитие получило производство (добыча и культивирование) прокамбарусов (РгосатЪагт яр.). Основной объект американского производства -РгосатЪагт с.1агкп, обладает высокой скоростью роста.

Помимо этого, наличие значительных площадей для субтропической экстенсивной аквакультуры и хорошее ее технологическое обеспечение позволили США увеличить ежегодные объемы Мирового производства красного рака на порядок. В среднегодовой ракопродукции (48,825 тонн/год) за период 1986-1989гг камбарины составили 95,6%, (из них болотный или красный рак занимал 80%), оставшиеся 4,4% продукции давали все остальные виды культивируемых речных раков (Александрова, 1997, 1999).

Аквакультура астацин сталкнулась с двумя очень существенными неблагоприятными факторами - с загрязнением рыбохозяйственных водоемов и с вспышками эпизоотических заболеваний, таких как «рачья чума».

После 1970-х г. в связи с мероприятиями по восстановлению европейских запасов раков и интродукции в водоемы Пиренейского п-ова американских раков: - Р. С1агкИ, а в водоемы всей Западной Европы - Р. ЬеттсШт, выяснилось, что эти раки - носители возбудителя афаномикоза или «рачьей чумы». Американские раки устойчивы к указанному заболеванию, а аборигенные виды чаще всего гибнут от него. Вспышки «рачьей чумы» привели к тому, что и в России произошло резкое снижение природных запасов раков. В настоящее время наша страна утратила роль поставщика раков в Западную Европу.

В представленной работе проводятся исследования по интенсификации культивирования прокамборусов, которые в ближайшее время получат более широкое распространение в России и будут основными видами, культивируемыми в аквахозяйствах.

В данной работе нами в качестве основных объектов использовались два представителя: РгосатЬагш с1агки и РгосатЪагт сиЬешк. Оба вида культивируются в лабораторных условиях и могут с успехом использоваться в экспериментах по интенсификации репродуктивной функции различными физическими факторами.

Помимо этого разрабатывались методы интенсификации роста раков при культивировании за счет использования в качестве корма энхитрей, методы культивирования которых уже достаточно отработаны (Микулин, 1994).

Цель настоящей работы - интенсификация репродуктивной функции и роста, культивируемых северо-американских раков путем использования постоянного магнитного поля и комплексного кормления (комбикорма и энхитреи) с последующей гистологической и гистохимической оценкой действующих факторов на основные органы, ответственные за размножение и пищеварение.

Для выполнения указанной цели решается ряд задач, а именно:

1. Изучается действие постоянного магнитного поля на прирост красного болотного и кубинского раков.

2. Проводится гистологический и гистохимический анализ овогенеза и сперматогенеза у контрольных особей и раков, подвергнутых действию постоянного магнитного поля с напряженностью 88 мТл.

3. Оценивается действие комбикормов для рыб на прирост культивируемых видов раков.

4. Изучается совместное действие комплексного кормления комбикормами и живым кормом (энхитреи) на рост культивируемых объектов

5. Используются различные методы внесения каротиноидов при культивировании энхитрей оптимально влияющих на прирост северо-американских раков.

6. Проводится гистологический и гистохимический анализ гепатопанкреаса выращиваемых раков для определения на тканевом уровне полноценности комплексного кормления комбикормом и живым кормом.

Научная новизна данной работы заключается в том, что впервые исследуется репродуктивная функция прокамбарусов (на примере овогенеза и сперматогенеза) в норме и при действии постоянного магнитного поля в зависимости от воздействующего на раков полюса магнита.

Проведен морфологический анализ овогенеза и рассмотрены некоторые гистохимические показатели у болотного и кубинского раков, как в норме, так и при воздействии постоянного магнитного поля, применяемого для интенсификации процессов овогенеза.

Впервые изучена динамика прироста двух культивируемых видов прокамбарусов при комплексном кормлении раков рыбными комбикормами и живым кормом - энхитреями.

Проведены исследования по гистологическому строению «печени» или гепатопанкреаса после выращивания раков на различных видах кормов и показано отсутствие отклонений в пищеварительной железе, как при кормлении комбикормами, так и при комплексном кормлении с живым кормом. Изучена динамика прироста раков при различном кормлении.

Работа имеет важное практическое значение для интенсификации роста раков в аквакультуре и стимуляции процессов овогенеза. Использование постоянного магнитного поля позволяет сократить репродуктивный цикл у болотного и кубинского раков, без уменьшения массы тела.

Помимо этого, при культивировании американских раков предлагается комплексное кормление, включающее как комбикорма для рыб, так и живой корм - энхитрей, культивация которых хорошо отработана и не требует больших экономических затрат. Комплексное кормление приводит к ускорению роста культивируемых видов раков и не вызывает у них отклонений в пищеварительной железе, что подтверждается гистологическим и гистохимическим анализом.

Заключение Диссертация по теме "Гидробиология", Полосьянц, Тамара Юрьевна

Глава 6. Заключение

В настоящее время значительно сокращается наличие водоемов, пригодных для жизни речных раков (Мартынова, Полосьянц, 2001). Одновременно с этим появляется ряд технологических разработок отечественных и зарубежных астакологов, позволяющих разводить и выращивать как астацин из родов Astacus и Pontastacus, так и новых видов, завезенных из американского континента из рода Procambarus.

Большинство исследователей понимает, что перспективы развития производства астацин ограничиваются экологическими и экономическими факторами. К таким факторам следует отнести неудовлетворительное состояние водосборных территорий и сокращение пригодных для жизни раков биотопов из-за разрушения реликтовых озерных биоценозов и загрязнения рек; а также ухудшение санитарно-ветеринарной обстановки в естественных водоемах.

В России положение может быть усугублено, в случае допущения вселения в естественные водоемы северо-американских видов раков -Pacifastacus leniusculus и Procambarus clarkii - носителей возбудителя афаномикоза. В нашей стране отмечается недостаточная связь между научно-исследовательскими работами и производством, что тормозит создание рентабельных и адаптированных к местным условиям технологий культивирования раков.

Для сохранения аборигенных видов раков у нас должна быть запрещена интродукция в естественные водоемы экзотических видов раков - потенциальных носителей опасных заболеваний. Даже в Америке он наносит ущерб водным экосистемам и особенно местным видам рыб (Zames et all., 2001). Однако для промышленного культивирования в

широких масштабах американские виды раков во многих случаях подходят даже больше чем астацины.

В данном случае проведенная работа показывает, насколько перспективен для культивирования в промышленных установках красный болотный или флоридский рак (.РгосатЬагш с1агки). Вполне понятно, что для сохранения биоценозов указанный рак не может быть выпущен в естественные водоемы. Однако по сравнению с астацинами, которых часто пытаются культивировать в промышленном масштабе, преимущества красного рака неоспоримы. Он не настолько требователен к качеству воды как широкопалый или длиннопалый рак, обладает повышенной жизнестойкостью, ускоренным ростом и репродуктивный цикл у него в три раза короче, чем у наших аборигенных видов.

В данной работе не ставилась задача исследовать продуктивность различных видов американских раков при искусственном выращивании. Однако, были поставлены не менее важные задачи, решение которых напрямую связаны с повышением продуктивности и интенсификацией размножения речных раков в искусственных условиях. Мы считаем, что задача была выполнена, так как найдены способы ускорения роста и овогенеза у двух видов американских раков, РгосатЬагш с1агки и Р.сиЪепш - претендентов на культивирование в промышленных установках. В результате выполнения работы было показано, что более экономично культивировать красного болотного рака, так как он крупнее и требуется меньше энергии на подогрев воды.

Красный рак оказался более восприимчив к постоянному магнитному полю, что позволило при действии южного полюса магнита ускорить его рост и сократить период овогенеза, за счет сокращения сроков протоплазматического роста овоцитов.

При проведении работы удалось показать, что красный и голубой американские раки ускоряют свой рост не только при влиянии южного

полюса магнита, но и при комплексном кормлении, которое заключается в том, что к комбикорму прибавляется живой корм - энхитреи, несущие биологически активные добавки.

Сравнительный анализ биологических свойств двух рассмотренных видов американских раков, позволяет рекомендовать для культивирования в промышленных установках РгосатЪагт с1агки.

Что касается Р.сиЪепш, то он может служить лабораторной культурой, на которой можно в дальнейшем отрабатывать новые приемы стимуляции размножения и ускорения роста, изучать эмбриологию и генетику культивируемых раков, которые близки по своим биологическим показателям к показателям красного болотного рака.

Глава 7. Основные выводы

1. В результате хронических экспериментов установлено, что появляется возможность стимулировать рост и процесс овогенеза у американских раков РгосатЪагт с1агки и Р.сиЪепш, путем использования постоянного магнитного поля, и комплексного кормления комбикормами и олигохетами.

2. Под влиянием южного полюса магнита при напряженности поля 88 мТл ускоряется рост тела раков и сокращается период протоплазматического роста овоцитов. У красного болотного рака (РгосатЪагт с1агки) овоциты быстрее растут и вступают раньше чем в контроле в период вителлогенеза. Северный полюс постоянного магнита, наоборот, действует ингибирующим образом на указанные показатели у каждого вида раков.

3. На гистологических препаратах удалось установить, что сперматогенез у прокамбарусов в разных ацинусах или дольках идет асинхронно, однако внутри каждого ацинуса развитие клона клеток синхронизировано. Действие постоянного магнитного поля не вызывает нарушения сперматогенеза и не ведет к отклонениям на гистологическом и гистохимическом уровне у каждого из исследованных видов.

4. Использование в качестве дополнительного живого корма олигохет способствует ускорению роста тела и овогенеза у двух исследованных видов раков. Кормление олигохетами с повышенным содержанием белка и каротиноидов, значительно стимулирует рост раков.

5. Гистологические и гистохимические исследования пищеварительной железы раков (печени) позволяет придти к выводу, что у РгосатЪагт с1агки и Р.сиЬепЕк нет видовых различий в механизмах секреции пищеварительных ферментов. Интенсивность секреции пищеварительного сока на различные виды корма у них меняется в зависимости от содержания белка и каротиноидов, чем больше последних компонентов, тем выше секреторная активность эпителия печеночных трубочек и тем выше содержание полисахаридов в пищеварительной железе.

6. Сравнительный анализ биологических особенностей двух видов американских раков и способности их реагирования на магнитное поле и разные виды кормления показывает, что красный болотный рак (РгосатЪагт с1агки) может быть перспективным, как объект для промышленного культивирования. В то же время, кубинский рак (РгосатЪагт сиЬетгя) больше подходит для лабораторной культуры и разработки научно-исследовательских проблем, связанных с культивированием речных раков.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Полосьянц, Тамара Юрьевна, Москва

1. Айзенштадт Т.Е. Цитология оогенеза. М.: Наука, 1984,- 247 с.

2. Айзенштадт Т.Е., Бродский В.Я., Иванова С.Н. Цитологические исследования овогенеза // Цитология, 1964, т.б.-С. 77-81.

3. Александрова E.H. Промышленное культивирование речных раков // Рыбоводство и рыболовство. -1994.-№4.-С. 27-29.

4. Александрова E.H. Перспективные направления восстановления и развития рачного хозяйства Центральной России. М.-1997. С. 1-24 // (Рыбн. хоз-во. Сер. Аквакультура: Информационный пакет / ВНИЭРХ-вып.1).

5. Александрова E.H., Веселовзоров С.И., Аверьянова Е.В. Способ получения и выращивания личинок речных раков,- Пат. Ки 2099943 А О 1 К 61/00,- 27.12.1997,- Бюл. № 36 (72).

6. Александрова E.H. Рекомендации по товарному выращиванию раков в фермерских хозяйствах // Рыболовство и рыбоводство.-1997.-№3-4,-С.29-31.

7. Александрова E.H. Методика выращивания раков в пастбищном хозяйстве (лесная зона Центральной России) // Материалы докладов на втором международном симпозиуме «Ресурсосберегающие технологии в аквакультуре»,- Россия, Адлер, 1999.-С.123.

8. Александрова E.H. Раководство и условия для его развития в России // Рыбоводство и рыболовство. 1999.- № 4.-С.21-22.

9. Барнс Р., Кейлоу П., Олив П., Голдинг Д. Беспозвоночные. Новый обобщенный подход. М.: Мир 1992.-583 с.

10. Борисов P.P. К вопросу о состоянии популяций речных раков в водоемах Центральной России. // Рыбн. хоз-во. -М., 2000. С.29-31.

11. Бродьский С.Я. Фауна Украни. Випц раки. Речные раки,- Киев: Наукова думка, 1981 .-Т.26. Вып.З. 21с.

12. Вершинина Т.А. Беспозвоночные в аквариуме. М.: Аквариум. 2001. -110с.

13. Воронин В.Н. Современное состояние изученности болезней и паразитов речных раков: Сб. научн. тр. / ГосНИОРХ. 1989. Вып. 300 -С. 137-148.

14. Воропаев Н.В., Полосьянц Т.Ю. и др. Международный симпозиум по разведению и выращиванию раков. // Рыбн. хоз-во. -М., 1990. вып. 10. -С.2-9

15. Гессе P. Тело животного, как самостоятельный организм. С-П.: А.Ф.Девриен. 1913. 714 с.

16. Гончаров А.Ю., Сокольский А.Ф. Зависимость выклева и выхода личинок речного рака (Astakus leptodaktylus eschort) от температуры воды. // 8 Научн. конф. по экол. физиол. и биохимии рыб: Тез. докл., Петрозаводск, 1992, Т.1.- С.72-73.

17. Гралмане JI.K,, Кайре Л.Д. Инфекционные заболевания раков в озерах и реках Латвийской ССР // В сб.: Лимнология. Материалы 14-ой конф. по изучению внутренних водоемов Прибалтики. 2. 2. Рига, 1968. -С. 2426.

18. Данилова Л.В. Полиморфизм сперматозоидов и атипичный сперматогенез // Сперматогенез и его регуляция. М.:Наука, 1993. С. 98 - 136.

19. Догель В.А. Чума раков (исторический обзор). // Сб. научн. тр. ГосНИОРХ. Вып. 300.-1989,- С.124-136.

20. Догель В.А. Зоология беспозвоночных. М.: Высшая школа. 1975. -559 с.

21. Дорошенко Ю. В. Установка для инкубации икры и выращивания молоди раков A.c. 8И 15770046 AI А01К 61/00,02.03. 1988.

22. Дорошенко Ю. В. Устройство для получения личинок ракообразных. -A.c. 8Ц 1514294 AI, А01К61/00- 1989.

23. Калмыков Е.В., Гончаров А.Ю., Ушивцев В.Б., Мальдов Д.Г., Кулинич A.B. Устройство для разведения молоди раков. Полезная модель КН 1405-16.01.1996, Бюл.№1.

24. Иванов Г.Ю. Универсальная установка для разведения гидробионтов (варианты).- Пет. Ки 2145477 С1 7 А01 К 61/00,20.02.2000, Бюл. №5.

25. Иванов П.П. Руководство по общей и сравнительной эмбриологии. Л.: Учпедгиз, 1945,- 350 с.ЗГИванова-Казас О.М. Практикум по эмбриологии. Л.: ЛГУ. 1986. 230 с.

26. Киселев А.Ю., Новосельцев Г.Е., Филатов В.И., Илясов А.Ю., Слепнев В.А., Богданова JI.H. Технология выращивания молоди раков до массы 1 г в установках с замкнутым водоснабжением. // Всерос. НИИ пруд, рыб. хоз. М.: 1995. С 12

27. Калмыков Е.В., Ушивцев В.Б., Сокольский А.Ф. Инструкция по искусственному разведению длиннопалых раков в дельте р. Волги,-Астрахань КаспНИРХ. 1997 Г.-С.-28.

28. Калмыков Е.В. Изучение терморезистентности длиннопалых раков. -Конф. молодых ученых и специалистов // КаспНИИРХ.: Тез. докл., Астрахань, 1998.-С.52-53.

29. Калмыков Е.В. Выращивание раков до товарных размеров в водоемах Астраханской области. // Состояние и перспективы культивирования некоторых видов раков, 1997, Вып.1,- С.21-22.

30. Костомарова A.A.,Князева Е.Ф. Транскрипция и трансляция в сперматогенезе // Современные проблемы сперматогенеза. М.: Наука, 1982.-С.160-183.

31. Культивирование раков за рубежом. // Инф. пакет, сер.Аквакультура: 1995, ВНИЭРХ Вып. 1 .-С.26

32. Косов В.В. О культивировании речных раков в прудовом хозяйстве. Аквакультура. Ресурсосбережение в товарном рыбоводстве.// Интегрированное рыбоводство, Минск, 1999.-С.83-90.

33. Коханов Б.Т., Отрогов В.П., Маркин В.Т. Устройство для получения личинок ракообразных. А. с. СССР, № 904628 А01К 61/00,- 4.01.1980.

34. Коханов Б.Т., Маркин В.Т., Строгов В.П. Установка для получения и подращивания личинок рыб и ракообразных. A.C. СССР, № 1600656-А1 А01 К 61/00-23.10. 1988.

35. Клейменов А.Н., Яковлев C.B., Козлов В.К. Способ разведения раков: Пат. 2115309 Россия, МПКб А01К61/00 № 96116956/13.

36. Лаврентьева Г.М., Воронин В.Н. Диагностика и профилактика инфекционных заболеваний раков в условиях Северо-запада России // Методич. указ. С-Пб.: ГосНИОРХ, 1994,- 10 с.

37. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. -М.: Мир, 1969. 645 с.

38. Лиферов В.И. Инструкция по искусственному получению личинок длиннопалых раков заводским методом в устройствах // КрасНИРХ. -Краснодар: Краев. Изд-во.-1976.-С.З-17.

39. Лихарева Е.И. Возможности восстановления запасов речных раков в водоемах Ленинградской области. 1. Элементы биологии речных раков: Сб. научн. тр. // ГосНИОРХ.-1989.-Вып. 300. -с. 11-23.

40. Мажилис A.A. Эмбриональное развитие широкопалого рака. // В кн. Биология речных раков водоемов Литвы. Вильнюс, 1979,- С.28-40.

41. Мажилис A.A., Шяштокас И.А. Чума раков в естественном водоеме: В сб.: Лимнология. Материалы 14-ой конф. по изучению внутр. водоемов Прибалтики. 2. 2. Рига, 1968,- с. 63-65.

42. Мацкявичене Г.Ю., Тамкявичене Е.А., Мицкенене Л.М. Некоторые эколого-физиологические условия обитания речных раков в аквакультуре.: Сб. науч. тр. // ГОСНИОРХ, 1995(1996), Вып. 314. -С. 321-324.

43. Методические указания по культивированию посадочного материала раков в заводских условиях и увеличению ракопродуктивности естественных водоемов путем вселения молоди раков. // Всерос. НИИ иригац. рыб-ва,- М.,1994. -С.68.

44. Микулин А.Е. Живые корма,- М.: Дельфин, 1994,- 104 с.

45. Милованова З.П., Лысенко Л.В. Приготовление гистологических срезов // Микроскопическая техника. М.: Медицина, 1996. С. 26 - 36.

46. Мицкевич О.И. Широкопалый рак // Рыбоводство и рыболовство.-1994.-№1 .-С.31-32.

47. Мицкевич О.И. О необходимости диапаузы в жизненном цикле Astacus Astacus L., выращенном в культуре. Сб. науч. тр. // ГосНИИОРХ, 1995(1996), Вып. №314.-С. 314-320.

48. Мотавкин П.А., Хотимченко Ю.С.,Деридович И. И. Регуляция размножения и биотехнология получения половых клеток у двустворчатых моллюсков. М.: Наука, 1990. 217 с.

49. Москул Г.А. Состояние запасов длиннопалого рака в водоемах Краснодарского Края // Материалы докладов на втором международном симпозиуме «Ресурсосберегающие технологии в аквакультуре»" Россия, Краснодар, 1996,- с. 122.

50. Мясищев Б.В. Акклиматизация и опыт заводского разведения американского сигнального рака: В сб. Аквакультура: Проблемы и достижения. // (Рыбн. хоз-во. Сер, Аквакультура: Информац. пакет / ВНИЭРХ. -1995,- Вып.2,- стр.24-33).

51. Нефедов В.Н. Отечественный опыт культивирования раков // (Рыбн. Хозяйствово. Сер. Аквакультура: Информ. мат. / ВНИЭРХ,-1991. -Вып. 1). -80 с.

52. Нефедов В.Н., Мазанов Н.Н., Лабода В.Ф., Наумова Г.В. К вопросу о получении жизнестойких личинок длиннопалого рака в экспериментальных условиях // Тр. Волгоградск. отд. ГосНИОРХ -1975-Т. 9,- С.276-281.

53. Нефедов В.Н., Наумова Г.В. Опыт получения жизнестойкой молоди длиннопалого рака и выращивания ее в прудах // Рыбн. хоз-во 1978,-№5.-с. 28-32.

54. Николаев С.Г., Рубцов M.B. Аналитический обзор: Современное состояние естественных популяций речных раков. Фонды ВНИИР, 1989.-80 с.

55. Пермниов Л.Г. Состояние популяций раков в некоторых водоемах Псковской области: Сб. научн. тр. // ГосНИОРХ.-1989.-Вып. 300,- С. 39-4. Сб. научн. тр. // ГосНИОРХ.-1989.-Вып.ЗОО,- С. 24-38.

56. Пирс Э. Гистохимия. М.: ИЛ.-1962. 962 с.

57. Плеханов Г.В. Основные закономерности низкочастотной электромагнитной биологии. Томск: Из-во Томского ун-та, 1990.-134 с.

58. Плохинский H.A. Алгоритмы биометрии. М.: МГУ, 1967,- 80 с.

59. Полосьянц Т.Ю. Распространение речных раков в водоемах Европейской части России // Материалы VII научно-практической конференции "Инновационные технологии в пищевой промышленности третьего тысячелетия". М.: МГТА, 2001. вып. 6. С 25-26.

60. Полосьянц Т.Ю. Перспективы товарного выращивания раков в России // Рыбное хозяйство. ВНИЭРХ, Сер. Пресноводная аквакультура. Вып.2 М.-2001.-С. 63-65.

61. Пономарев O.A., Фесенко Е.Е. Свойства жидкой воды в электрических и магнитных полях // Биофизика 2000 - 45, №3 С.389-398.

62. Равен X. Оогенез. М.: Мир 1964.-306 с.

63. Ромейс Б Микроскопическая техника. И.: ИЛ-1954. 718 с.

64. Рузен-Ранге Э. Сперматогенез у животных. М.: Мир 1980.-255 с.

65. Сассон А. Биотехнология: свершения и надежды. М.: Мир 1987. 411 с.

66. Сидоренко. Механизм влияния слабых электромагнитных полей на живой организм // Биофизика, 2001, т.46, вып 3,- С. 500 504.

67. Симаков Ю.Г., Полосьянц Т.Ю. Пути интенсификации роста речных раков при современных методах культивирования // Проблемы иперспективы развития аквакультуры в России. Материалы докладов научно практической конференции. Краснодар, 2001. - с. 104 - 105.

68. Старобогатов Я.И. Высшие раки // Определитель пресноводных беспозвоночных России и сопредельных территорий. Санкт-Петербург, 1995-Т.2. С. 174-187.

69. Супрунович A.B. Аквакультура беспозвоночных." Киев, Наукова Думка, 1988.-155 с.

70. Сыпко И.И. Кубинский голубой рак// Рыб. Хоз-во, 1993, №2 С. 44.

71. Темурьянц H.A., Владимирский Б.М.,Тишкин О.Г. Сверхчастотные электромагнитные сигналы в биологическом мире. Киев. Наук. Думка, -1992.-188 с.

72. Терентьев A.J1. Особенности акклиматизации сигнального рака (.Pacifastacinae leniusculus subfam.) в водоемах Литовской ССР // Биология речных раков водоемов Литвы. Вильнюс. 1989.-С. 136-142.

73. Толчинский Г.И., Лапкин A.B., Воронин В.М. Устройство для инкубации икры водных организмов. -A.c. № 372979.-1973 г.

74. Уитон Ф. Техническое обеспечение аквакультуры,- Москва, Агро-промиздат, 1985,- 528 с.

75. Узденский А.Б., Кутько О.Ю. Реакции изолированных механорецепторных нейронов речного рака на слабые сверхчастотные магнитные поля // Биофизика. -1998.-43, №5 С.797-802.

76. Хадорн Э., Венер Р. Общая зоология. М.: Мир 1989.-523 с.

77. Харрис Г. Ядро и цитоплазма. М.: Мир, 1973.-190 с.

78. Холодов Ю.А. Мозг в электромагнитных полях. М.: Наука 1982. 120 с.

79. Федорова З.В. Культивирование раков за рубежом,- М., 1991,- С. 1-18. -(Рыбн. хоз-во. Сер. Аквакультура: Обзорная информация ВНИЭРХ; Вып.1).

80. Цукерзис Я.М. Устройство для инкубации икры раков. A.c. № 233352,1968.

81. Цукерзис Я. Биология широкопалого рака Astacus astacus. Вильнюс, изд. «Минтис», 1970.-204 с.

82. Цукерзис Я.М. Использование перспективных видов речных раков водоемов Северо-запада СССР для развитая раководства: Сб. научн. тр. /ГосНИОРХ.-1989.-Вып.ЗОО- с. 5-10.

83. Цукерзис Я. М. Речные раки,- Вильнюс: Мокслас, 1989.-140 с.

84. Цукерзис Я.М., Шяштокас И.А., Терентьев A.JI. Способ искусственного разведения молоди речных раков A.c. № 506356, заявл. 03.09.1974.

85. Черкашина Н.Я. Устройство для разведения раков. A.c. 8и 1364256 AI А01/Кб1/00.-заяв. 1986.-Бюл.№1.-07.22. 1988.

86. Черкашина Н.Я. Способ культивирования речных раков. A.c. 1699392 AOl/K'6 l/OO.-Заявл. 1989.-Бюл.№47.-23.12. 1991.

87. Черкашина Н.Я,, Карнаушенко И.В. Способ размножения раков. A.C. 789080 А ol к 61/00- Заявл. 1979,- Бюл. № 47, 1980.

88. Черкашина Н.Я,, Коханов Б.Т. Выращивание длиннопалого рака в условиях биотехнического комплекса // Рыбное хоз-во.-1980.- №7,-С.49-50.

89. Черкашина Н.Я,, Щуховцов. Гранулированный корм для раков / Тезисы докл. Области. Научн. Конференции по итогам работы АзНИИРХа в X пятилетке. 31 марта-2 апреля 1981,-Ростов-на-Дону, 1981.-С. 171-172.

90. Шевцова Э.Е. Культивирование раков в некоторых зарубежных странах // Состояние и перспективы культивирования некоторых видов раков, вып. 1., 1997, -С.27-33.

91. Шяштокас И. А. Заболевание широкопалых и длиннопалых раков в водоемах Литовской ССР: В сб.: Гидробиологические и ихтиологические исследования внутрен. водоемов Прибалтики. Вильнюс, 1968.

92. Шяштокас И.А., Цукерзис Я.М. Влияние химических препаратов на широкопалых и длиннопалых раков // Тр. АН Лит. ССР-Сер. В.- 1972. №-(60). -С. 119-123.

93. Anastascio P.M. Margues J.С. Crayfisch (Proc. Clarkii) condition throughout the year in the lower Mondego river walley, Portugal // Crustaceane.-1998, 71.-№ 6 P. 593 - 602.

94. Anderson M., Jolibois K., George W. Bioaccumulation of lead nitrate in red swamp craufich (P. Clarkii) // J. Hazardous Mater 1997. - 54 P. 15-29.

95. Arendse M. C. Magnetic field detection is distinct from light detection in the invertebrates Tenebrio and Talitrus, Nature, -1978 274, 358-362.

96. Arendse M.C., Burendreqt A. Magnetic orientation in Orcheslia, Physiol, Entomol., 1981- 6, 333 -342.

97. Arendse M.C., Kruyswijk C.J. Orientation of Talitrus saltalor to magnetic fields, Ncth. J. Sea Res., -1981 15, 23 -32.

98. Barnwell F. H. Daily and tidal patterns of activity in individual fiddler crabs (genus Uca) from the Woods Hole region, Biol. Bull., -1966) 130, 117.

99. Blanchard J.P., Blackman C.F. On the Nature of Electromagnetik Field Interations with Biological Systems // Ed Frey/Austin. R.G. Landes Co,1994. -P.43.

100. Bollinger J., Bundy K., Anderson M., Millet L., Preslfii J., George W. Bioaccumulation of chromium in red swamp crayfich (P. Clarkii) // J. Hazardous Mater 1997- 54 C.l-13.

101. Bravo M., Duarte M., Monies C. Enviromental facrous controlling the life history of P. clarkii in a temporary march of the Donana National Park (SW Spain): Pap. Congr. Int. Assos. Theor. And Appl. // Limmol 1994 - 25 Pr.4 - C.2450-2453.

102. Corotto F.S., Bonenberger D.M., Bounkeo J.M., Dukas C.C. Antennule ablation sex discrimination, and mating behavior in the crayfich P. Clarkii // J. Crustas. Biol.- 1999 19 C.708-712.

103. Cooper R. Development of sensory processes during limb regeneration in adult crayfich//J. Exp. Biol. 1998.-201, N11. -c. 1745-1752.

104. Cronin T.W., Forward R.B. Jr., (1979). Tidal vertical migration: An endogenous rhythm in estuarine crab larvae // Science, 205, 1020-1022.

105. Diener R. A., 1975. Cooperative Gulf of Mexico estuarine inventory and study-Texas: area description, NOAA Technical Report NMFS CIRC-393, Seattle.

106. Daniels W., Dabrato L.,Gravers K. Ovarion development of femall red swamp crayfich P. Clarkii as influenced by temperature and photoperiod // J. Crustas. Biol. 1994, 14 C.530-537.

107. DaSila E.J., Olembo R.,Burgess A. Impact of Science on Society. Paris, Unesco 1978, 28, № 2. 182 p.

108. Enright J. T., 1978. Migration and homing of marine invertebrates: A potpourri strategies // In: Animal Migration, Navigation, and Homing K. Schmidt-Koenig and W.T. Keeton, eds.). Springer-Verlag, Berlin, 1966. -pp. 440-446.

109. FautrezJ., Fautrez Firlefijn N. A propos de la chromatine et dans de nucleoles la visicule germinative de oocyte de quelques crustaces// Biol Jaarb, 1951,-18, 27 - P. 241 - 248.

110. Fry B. Natural stable carbon isotope tag trace Texas, USA, shrimp (Penaeus aztecus) migrations, U. S. // Natl. Mar. Fish. Serv. Fish. Bull., 1981 -79, 337-346.

111. Goree W.S., Fuller M. Magnetometers using RF-driven Squids and their applications in rock magnetism and paleomagnetism // Rev. Geophys. Space Phys., -1976 -14, 591-608.

112. Gould J.L., Kirschvink J.L., Deffeyes K.S. Bees have magnetic remanence. Science, -1978 201, 1026-1028.

113. Gracly J. R., The distribution of sediment properties and shrimp catch on two shrimping grounds on the continental shelf of the Gulf of Mexico // Proc. Gulf Caribb. Fish. Inst., 23rd Annu. 1971,- Sess. pp. 139-148.

114. Henshaw P. C., Jr., Merrill R. T. Magnetic and chemical changes in marine sediments, Rev. Geophys. Space Phys., -1980 18, 483-504.

115. Herrnkind W. (1969). Queuing behavior of spiny lobsters // Science, 164, 1425-1427.

116. HughesD.A. (1968). Factors controlling emergence of pink shrimp (Penaeus dwrarum) from the substrate //Biol. Bull., 134, 48-59.

117. Hughes D.A. (1972). On the endogenous control of tide-associated displacements of pink shrimp Penaeus dwrarum// Biol. Bull., 142, 271-280.

118. Huner J. Louisiana craufich farms expect a good slasom // Fich Farm Int. 1996-23 pp. 44-45.

119. Huner J. Farming freschwater crayfich in Finland // Fich Farm. Int. -1995 -22, 34-35.

120. Jones D.S., MacFadden B.J. Induced magnetization in the monarch butterfly, Danaus plexippus (Insecta, Lepidoptera) // J. Exp. Biol., 1982 96, 1-9.

121. James C., Childs M. What role do exotic crayfich play in southwest aguatic systems? // Proc. Aiz. Nev. Acad. Sci - 2001 - 36 C.29.

122. Kirschvink J.L. Paleomagnetic evidence for fossil biogenic magnetite in western Crete, Earth Planet. Sci. Lett., 1982. 59, 388-392.

123. Kirschvink J.L. Biogenic ferrimagnetism: A new biomagnetism // In: Bio-magnetism: An Interdisciplinary Approach (S. Williamson, ed.), Plenum Press, New York, 1983,- pp. 501-532.

124. Kirschvink J. L., Gould J. L. Biogenic magnetite as a basis for magnetic field detection in animals // BioSystems, -1987 13, 181-201.

125. Klima E. F., 1963. Mark-recapture experiments with brown and white shrimp in the northern Gulf of Mexico // Proc. Gulf Caribb. Fish. Inst, -1980 -16th Sess., pp. 52-64.

126. Lee P.H., Weis J.S. Effects of magnetic fields on regeneration in fiddler crabs //Biol. Bull., -1980- 159, 681-691.

127. Levengood W. C., Shinkle M. P. Solar flare effects on living organisms confined in magnetic fields // Nature, -1962- 195, 967-970.

128. Lohmann K.J. Magnetic remanence in the western Atlantic spiny lobster Panulirus argus // J. Exp. Biol., 1984 113, 29-41.

129. Lowenstam H.A. Impact of life on chemical and physical processes. In: The Sea, Vol. 5 (E.D. Goldberg, ed.),Wiley, New York-1980.-pp. 715-796.

130. Lowenstam H.A. Minerals formed by organisms // Science, -1981,- 211, 1126-1131.

131. Saroyini R., Nagabhushanam R., Fingerman M. // Involvement of nitrik oxide in the regulation of ovarian maturation in the red swamp crayfich, Procambarus Clarkii // Amer. Zool. 1996. - 36, N5. - C.31.

132. Maheswarudu G., Sharma H., Reddy P., Fingerman M. // Isolation of organic compounds from the litoral oligochaete, Pontodrilus bermuration in the red swamp crayfich, Procambarus clarkii. // Amer. Zool. 1995. - 35, N5, - c.25.

133. Maranhao P. Margues J. C. Madeira V.M. Zinc and cadmium concentrations in hte soft tissues of the red swamp crayfisch Pr.clarkii (Gigard, 1852) after exposure to zinc and cadmium // Environ. Toxical. And chem.- 1999,- 18, № 8. H. 1769-1771.

134. Morgan M.D. (1980). Grazing and predation of the grass shrimp Palaemonetes pugio // Limnol. Oceanogr., 25, 896-902.

135. Nakatsuji T., Nisyimura T.,Sonobe H. Fluctuation of the lewel of molt-inhibiting hormone in the sinus glend during one molt cycle of the Pr. Clarkii //Zool. Sci.- 1999.-16, Suppl.-P. 8.

136. Nagvi S.M., Nagvi N.H., Dtvalraju J. Coppes bio accumulation and depuration by red swamp craufich P.ckarkii // Bull. Environ. Contam and Toxicol 1998-61, C. 65-71.

137. Nagabhushanam R., Sarojini R., Finderman M. In vivo assessment of opiond agonists and antagonists on ovarian maturation in the red swamp crayfich, Procambarus clarkii // Amer. Zool. 1995. - 35, N5, c.26 - 30.

138. Perez J.R., Celada J.D., Carral J.M., Saez- Royuella M., Sierra A. Metods basicos de cria de astacidos en Europa. 1997, vol 12, № 1/3 p. 87 - 96.

139. Ozeki M., Osada S. Upside-down orientation in the crayfish with ferrite statoliths during magnetic field stimulation, Annot. Zool. Jpn., -1977- 50, 220-230.

140. Powell M., Watts S. Oxygen consumption in juvenili mudbugs: Abstr. AnnuMeet// Amer. Soc. Zool, Chicago, 1995 35. 5 p.126.

141. Rodrdiguezsosa P.A.,Calderon R.G., Islas S., Arechiga H. Localization and release of 5 hydroxytreptamine in the crayfich eyestalk // J. Exp. Biol.-1997.-200, № 23, P. 3967 - 3077.

142. Sarajini R, Nagabhushanam R, Fingerman M. Involvetment of nitric oxide in the regulation of ovarian maturaction in the red swamp crayfich Pr. Clarkii // Amer. Zool. 1996,-36, № 5- P. 31.

143. Stich H. Das Vorkommen von Kohlenhidraten im Ruhekern und wahrend der Mitose // Cyromosoma, -1951. 4,. S 429-457.

144. Taneyeva A.I. Changes in the physiological processes of aquatic organisms under the influence of a constant magnetic field // Hydrobiol. J., 1978. 14(5), 48-54.

145. Taneyeva A. I., Dolgdpol'skaya M.A. The biological effect of a constant magnetic field on Anemia salina // Hydrobiol. J., -1974. 10(4), -47-52.

146. Trent L., 1966. Size of brown shrimp and time of emigration from the Galveston Bay system, Texas, Proc. Gulf Caribb // Fish. Inst.,-1977- 19th Sess., pp. 7-16.

147. Vasil'yev A. S., Bednarskiy A.D., Vasil'yeva L.A., ChuburV.P. The reproduction and development of Daphnia magna in a magnetic field // Hydrobiol. J.,-1974- 10(2), 54-57.

148. Zames de vos C., Childs M.R. What role do exotic crayfich pley in sout hwest a guatic systems? Annal Meeting of the Arizona Nevada Academy of Scienses, Las Vegas // Proc. Aiz. -Nev. Acad Sci.-2001 - 36. P.29.