Физиолого-биохимическая характеристика речных раков при выращивании в искусственных условиях

Корягина, Наталья Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Физиолого-биохимическая характеристика речных раков при выращивании в искусственных условиях
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Физиолого-биохимическая характеристика речных раков при выращивании в искусственных условиях"

На правах рукописи

КОРЯГИНА Наталья Юрьевна

«ФИЗИОЛОГО - БИОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЕЧНЫХ РАКОВ ПРИ ВЫРАЩИВАНИИ В ИСКУССТВЕННЫХ УСЛОВИЯХ»

03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 1 ОПТ 2010

Москва-2010

004611247

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии животных Российского государственного аграрного университета - МСХА имени К.А.Тимирязева и в лаборатории разведения речных раков ГНУ ВНИИР

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Иванов Алексей Алексеевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Маннапов Альфир Габдуллович

доктор сельскохозяйственных наук, Жигин Алексей Васильевич

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Российский государственный

аграрный заочный университет

Защита диссертации состоится "08" ноября 2010 года в 14. 30 часов на заседании диссертационного совета Д 220.043.09 при Российском государственном аграрном университете МСХА имени К.А. Тимирязева по адресу: 127550, Москва, Тимирязевская ул., д.49, ученый совет РГАУ -МСХА имени К.А. Тимирязева, тел. (факс): (495)976-24-92.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ им. Железнова ФГОУ ВПО РГАУ - МСХА имени К.А. Тимирязева.

Автореферат разослан «(10» ^ 2010 г. и размещен в сети

Интернет на сайте университета www.timacad.ru

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук л А.А. Ксенофонтова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы Речные раки относятся к царству животных, типу членистоногих (Arthropoda), подтипу жабродышащих (Branchiata), классу ракообразных (Grustacea), подклассу высшие раки (Malocostraca) ,надотряду эвкариды (Eucarida), отряду десятиногие ракообразные(£еса/>офЛ инфраотряду Astacidea.

Являясь ценным объектом промысла благодаря высоким качествам и питательности мяса, речной рак пользуется большим спросом, как на внутреннем, так и на внешнем рынке России. Выращивание речного рака в рыболовецких хозяйствах позволяет повысить на 10-20 % их продуктивность. По оценкам экспертов, мировой объем производства раков составляет от 120 до 150 тыс. тонн. Основными поставщиками товарных раков являются США, Турция (7 тыс. тонн в год), Испания (3,5 тыс. т), Китай (1 тыс. т). В то же время Финляндия и Россия из основных экспортеров речных раков превратились в импортеров. В Российской Федерации промысел раков поставлен не на должный уровень, нет хорошо налаженного промысла раков, добыча происходит стихийно.

Чтобы повысить запасы речного рака в естественных водоемах, необходимо проведение биотехнических мероприятий в реках и водохранилищах и искусственное разведение в прудах. Технология искусственного разведения речных раков сдерживается недостаточным уровнем изученности биологии и адаптивных возможностей этих гидробионтов. Для ракообразных определены следующие стресс - факторы: колебания температуры, недостаток кислорода, плотность посадки и другие (Newsom J. Е.; Davis К. В., 1994; Mannonen A. et al, 1998; Ковалёва Е.С., КовалёвВ.Б.,2004; Борисов P.P. и др., 2005; May H.Y., Mercier A.J., 2006; Москалюк Т.А.,2009). Эти факторы, прежде всего, вызывают изменения внутренней среды организма животных. Однако механизм воздействия этих факторов на организм речных раков остается неизученным. Пределы референтных значений констант гомеостаза раков не определены, не известны особенности метаболизма раков разных видов, не установлены показатели, позволяющие контролировать их физиологическое состояние, в целом не разработано понятие «физиологическая норма».

Согласно исследованиям отечественных авторов (Алякринская И.О., 1972; Житенева Л.Д. и др, 1989; Черкашина Н.Я., 1989; Александрова E.H. и др., 2004; 2005) объективным методом контроля физиологического состояния гидробионтов является общий и дифференциальный подсчет клеток гемолимфы. Биохимические показатели дополняют общую характеристику физиологического состояния речных раков (Huiqun С. et al, 2004).

Цель работы - изучить влияние факторов среды на физиологическое состояние речных раков.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Выделить наиболее информативные физиолого-биохимические показатели, отражающие физиологическое состояние речных раков.

2. Дать оценку изменению состава гемолимфы в процессе онтогенеза.

3. Определить минеральный состав разных тканей у речных раков.

4. Изучить видовые особенности гомеостаза широкопалого, длиннопалого и сухопалого речного рака в искусственных условиях.

5. Изучить влияние факторов искусственной среды обитания на основной обмен и состав гемолимфы речных раков разных видов.

6. Оценить состояние гомеостаза раков под влиянием транспортировки и уплотненных посадок в искусственных водоемах.

Научная новизна. Впервые в искусственных условиях содержания определены референтные значения ряда физиолого-биохимических показателей речных раков трех видов - перспективных объектов искусственного разведения.

Практическая значимость. Установленные оптимальные параметры среды и показатели гомеостаза речных раков могут быть использованы при их разведении в искусственных условиях, а также при разработке технологии искусственного воспроизводства, доместикации и селекции. Материалы диссертации представляют интерес для учебного процесса при подготовке специалистов в области аквакультуры и зоотехнии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Референтные значения констант гомеостаза речных раков.

2. Физиолого-биохимические изменения речных раков под влиянием абиотических и биотических факторов.

3. Онтогенетические изменения констант гомеостаза речных раков.

4. Видовые различия физиолого-биохимических свойств гемолимфы широкопалого, длиннопалого и сухопалого речных раков.

5. Апробация результатов исследований. Материалы диссертационной работы доложены на расширенном заседании кафедры физиологии животных РГАУ МСХА им. К.А. Тимирязева в 2010 году, заседаниях ученого совета ВНИИР 2006-2010 гг., на Международной научно-практической конференции «Стратегия развития аквакультуры в условиях XXI века» 23-27 августа 2004 г. в Минске, Международной научно-практической конференции «Рациональное использование пресноводных экосистем -перспективное направление реализации национального проекта «Развитие АПК»» 2007 г., на Международной научно-практической конференции РУП

"Институт рыбного хозяйства» 2008 г в Минске, на 1-й Всероссийской научно-практической конференции в г. Волгограде в 2008 г.; на 2-й Всероссийской научно-практической конференции в г.Волгограде, 2010. Материалы диссертации включены в рекомендации «Технология культивирования речных раков в неспускных водоемах по пастбищному типу».

Публикации материалов работы. По материалам диссертации опубликовано 13 печатных научных работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 151 страницах компьютерного набора, содержит 52 таблица, 12 рисунков, 15 фотографий. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждений, заключения, выводов, предложений производству, результатов производственных испытаний, списка литературы, включающего 177 источника, в том числе 70 на иностранных языках и приложения.

Благодарности. Автор выражает благодарность д.с./х.н Серветнику Г.Е., директору ГНУ ВНИИР за помощь в организации и проведении экспериментов; к.б.н. Александровой E.H., заведующей лаборатории разведения речных раков ВНИИР за методологическую помощь и научное консультивирование по проблемным вопросам; к.б.н Новоженину Н. П., замдиректора по науке ГНУ ВНИИР, за консультирование по вопросам работы; д.б.н. Масловой Неониле Ивановне, зав.лаборатории воспроизводства и селекции рыб к.б.н Ревякину А. О., зав. лаборатории фармакомоделирования ГУНЦБМТ РАМН за методическую помощь в проведении биохимических анализов; к.в.н. Прониной Г.И., зав. сектором иммунологии ВНИИР, за помощь в проведении экспериментов.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальная часть работы выполнена в период с 2006г. по 2010г. на базе ГНУ ВНИИР (пос. Воровского, Московская область) в рамках программы «Зоотехния» темы 06.01.02 и в условиях лаборатории кафедры физиологии и биохимия животных РГАУ - МСХА им. К. А.Тимирязева.

Схема эксперимента представлена на рисунке 1.

В качестве объектов исследования использовались представители рода Astacus Fabricius - типичного широкопалого рака Astacus astacus и два вида понтичных раков (род Pontastacus) - типичного длиннопалого рака Pontastacus leptodactylus и сухопалого рака Pontastacus (Фомичев Н.И., 1986; СтаробогатовЯ.И.,1995), отличающихся рядом биологических характеристик,

из водоемов бассейна р. Великой Псковской области и теплых озер Электрогорска Московской области.

Факторы влияния

Темпера тура воды и воздуха Газовый режим среды обитания Минеральный состав воды Загрязненность воды (по нитратам и нитритам) Плотность посадки

Речные раки:

Широкопалый

Astacus Шасш

Сухопалый

РоШшШсш БаНта

Длиннопалый

Изучаем! »1е показатели

Линейно-весовые параметры

Химический состав тела

Состав и свойства гемолимфы

Основной обмен

Рисунок 1 - Схема эксперимента 6

Физиология речных раков в онтогенезе изучалась на животных обоего пола: личинках (7-10 стадии), годовиках и взрослых особях (3- 4 года).

Раки содержались в аэрируемых аквариумах объемом 54 л, 80 и 180л, с оборотной водоочисткой. В качестве корма ракам в аквариумах давали хиронамиду (мотыля). Освещение - естественное и искусственное.

Условным контролем служили раки, с нормальной плотностью посадки, температурой воды + 18 - + 20 °С и содержанием кислорода в воде 8,8 -10,0 мг/л.

Параметры среды определялись общепринятыми гидрохимическими методами и во всех экспериментальных группах.

Для определения влияния температурного фактора формировались группы раков, содержащихся в течение месяца в воде с определенной температурой (от +8 до +24°С). Дополнительно были сформированы группы раков, которых оставляли вне воды на 2-4 часа при температуре воздуха +10 и +20°С.

Для определения влияния низкого уровня кислорода в воде речных раков помещали в аквариумы с разной температурой без аэрации на 2 и 25часов. Интенсивность кислородного обмена определяли методом «замкнутых сосудов» в модификации Винберга Г.Г (Строганов Н.С., 1962) в 3-х и 110-ти литровых (заполненных на 30 см) сосудах, а содержание кислорода в воде - по Winkler (1988).

Влияние минерального состава воды проводилось на группах речных раков при пониженном (56-66мг/л) и повышенном (136-164мг/л) содержании кальция в воде.

Воздействие азотсодержащих соединений на речных раков оценивалось при содержании в воде нитратов 4мг/л и нитритов 25мг/л.

В качестве биотического фактора рассматривалась плотность посадки широкопалых и длиннопалых раков: нормальная - 10 экз/м2 и высокая - 28 экз/м2.

Рост, развитие и физиологическое состояние раков оценивалось по линейно-весовому приросту, морфометрическому индексу, гематологическим (скорости агглютинации, pH гемолимфы, общему числу гемоцитов, гемоцитарной формуле, буферной емкости) и биохимическим показателям.

Отбор гемолимфы проводился in vivo по рекомендациям Soderhall К., Johansson V.W., Smith V.J (1988), Черкашиной Н.Я.(1989), из вентрального синуса речных раков при сохранении их жизни и здоровья, с соблюдением правил асептики и антисептики.

pH гемолимфы и среды определяли с помощью тест полосок (лакмусового индикатора) и на рН-метре. Время свертываемости гемолимфы определяли по Моравицу (Тодоров И., 1966). Общий и дифференциальный подсчет гемоцитов проводился сразу же после отбора гемолимфы in vitro в камере Горяева. Гемоцитарная формула оценивалась по дифференциальному

подсчету 4-х типов клеток (Рис.2): 1 -агранулоцит, диаметром 10 микрон (ГЦ 1), 2-полугранулоцит (ГЦ 11), 3- гранулоцит (ГЦ 111), 4-прозрачная клетка. Буферные свойства гемолимфы изучали путем потенциометрического титрования

(Алякринская И.О., 1972).

Биохимические показатели гемолимфы определяли с помощью приборов: Chem Well Awarenes Technology и Reflotron (Курилова С.А. и др., 1984; Muller G., 1993; Thomas L., 1995; Жуковский ЮГ. и др., 1997; Дубовская Л.В., 1998; Хейль В. и др., 2001; Танюхина О.Н. и др., 2005).

Минеральные вещества в биологических средах определялись методом атомной абсорбции (Георгиевский В.И., Полякова Е.П., 1977).

Для оценки состояния иммунитета речных раков использовались цитохимические показатели фагоцитарной активности. Содержание неферментного катионного белка в цитоплазме фагоцитов гемолимфы речных раков определяли методом Шубича с бромфеноловым синим, индекс активности фагоцитов (ИАФ) с помощью HCT - теста: спонтанного и индуцированного 0,1% зимозаном (Пронина Г.И., 2008; Пронина Г.И., КорягинаН.Ю., 2009).

Статистическую обработку полученных результатов (малая выборка: от 4 до 10 особей в каждой группе) проводили методом вариационной статистики с использованием программы «Microsoft Excel 2000». Использовался критерий t по Стьюденту, достоверными считались различия показателей при Р <0,05.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Физиологические особенности речных раков

3.1.1 Изменение состава гемолимфы в процессе онтогенеза

Личинка раков от выхода из икры до года проходит ряд преобразований. Не дифференцированные гемоциты у икры и личинок 1-3 стадии к 10 стадии имеют полную дифференцировку (Рис.3). В процессе онтогенеза

Рисунок 2 - Мазок гемолимфы речного рака Pontastacus Leptodactilus

наблюдалась тенденция к повышению в 1,4 раза общего числа гемоцитов у половозрелых 3-4-х годовалых особей по сравнению с личинкой, рост доли содержания гранулоцитов: у взрослых 32.1%, у годовиков - 19,4 (Р < 0,05).

Рисунок 3 - Гемоциты рака: а) икры; б) личинки2-3 стадии; в)10стадия

Прозрачных клеток на личиночных стадиях было значительно больше (14.3%), чем у других возрастных групп (1,4 - 3,4%).

Перед гибелью у речных раков наблюдалось повышение ОЧГ в 2,6 раза, рост числа гранулированных клеток с 18,5 до 26,7% при снижении количества полугранулированных гемоцитов с 33 до 22% и снижении буферной емкости гемолимфы (табл.1).

Таблица 1 - Буферная емкость гемолимфы речных раков /Ыасги гкйсг« в активном состоянии и перед гибелью__

Показатели Контроль Раки перед гибелью Р

Значение рН гемолимфы 62 м >0,05

5,5-6,5 6,5-7,0

Буферная емкость 11,5 10,5 >0,05

гемолимфы, с1А/с!рН 9,6-15,3 9,2-14,0

3.1.2 Гематологические показатели разноразмерных речных раков

При исследовании гемолимфы широкопалого и длиннопалого речных раков обоих полов разных размеров, прослеживалась прямая корреляция между размерными показателями и общим числом гемоцитов (г = +0,78), а также весовыми показателями и ОЧГ (г = + 0,80).

3.1.3 Зависимость физиологических показателей от половой принадлежности

В ходе физиологических исследований было установлено: рН гемолимфы самок (5,5-5,9) смещена в кислую сторону по сравнению с самцами (6,5). Интенсивность потребления кислорода самцами в 1,8 раз выше, чем самок. Однако, с повышением температуры воды самки быстрее отвечают усилением кислородного обмена на 60%. При оптимальных условиях содержания ОЧГ в гемолимфе самцов выше, чем самок. Буферные

порции кислоты, капель

шсамцыР/ (ер1 всамкиР/ 1ер( □ самцыАзУА$1 о самк^^

Рисунок 4 - Сравнительная оценка буферных свойств гемолимфы самцов и самок длиннопалого и широкопалого речных раков

свойства гемолимфы самок, особенно

широкопалого рака, выше, чем самцов (рис.4). При проведении биохимических исследований гемолимфы самцов и самок половозрелых широкопалого и

длиннопалого речных раков установлено, что содержание глюкозы в гемолимфе самцов (2,16 ммоль/л) достоверно (< 0,05) находилось на

гораздо более высоком уровне, чем у самок (0,50 ммоль/л). У самцов имелась тенденция к более высокому содержанию лактата в гемолимфе (62,7 мг/дл против 48,4 мг/дл), а у самок - триглицеридов (24,5 мг/дл, у самцов 9,4 мг/дл) и активности АЛТ (54,2 и/Ь , у самцов - 42,7).

Прослеживается достоверная прямая корреляция между содержанием в гемолимфе альбуминов и полугранулоцитов как самцов (г=+0,64), так и самок (г = +0,75); у самцов - полугранулоцитов с общим белком (г = +0,79) и активностью АЛТ: +0,71; у самок - активностью щелочной фосфатазы и количеством гранулоцитов (г = +0,95).

3.1.4 Видовые особенности речных раков

Гемоциты разных видов раков различаются внешне (рис. 5).

- 4 л * '»Й!»!"»

1,1 * *

• «9 '

и - I ;

а б в

Рисунок 5 - Фото: гемоциты речного рака, окрашенные по методу

Паппенгейма: а - сухопалого, б - широкопалого, е- длиннопалого

Сравнительная характеристика физиологических показателей трех видов раков указала на существенные межвидовые различия.

Для сухоплого рака характерна высокая скорость агглютинации гемолимфы (среднее 3,0сек), высокое общее число гемоцитов (1232), сравнительно низкое содержание полугранулированных клеток в гемолимфе (17,3%).

У Роийдагасгм /ер^ой/асгу/мх рН гемолимфы сдвинута в щелочную сторону (6,5 против 5,9), выше общее число гемоцитов (911шт/мкл), содержание альбумина (10,3 г/дл) и меди (322,0 мкг/дл), повышенная фагоцитарная активность по сравнению с широкопалым.

При понижении температуры воды у речных раков по-разному изменялось содержание прозрачных клеток в гемолимфе: у длиннопалых увеличивалось, а у широкопалых - понижалось.

У широкопалого речного рака рН гемолимфы ниже, чем у РоЫавХаст 1ерЮс1ас1у1и8. При этом у этого вида зафиксирован более высокий уровень глюкозы в гемолимфе (2,63 ммоль/л) и пониженная активность ЩФ (< 20,0 и/Ь). Гемолимфа Лйасги аШсг« обладает лучшими буферными свойствами (табл.2) по сравнению с понтичными (РоМазгасш) речными раками.

Таблица 2 - Показатели буферной емкости и активной реакции гемолимфы разнополых широкопалых и длиннопалых раков в оптимальных условиях содержания__

Показатели Роуйа51асиз 1ер^ас1у1из Л^асг« а$1асш р *

в $ $ 2

рН, ед 6,8±0,12 6,8±0,35 6,2± 0,41 5.5± 0,24 <0,05

6.5-7.0 6.5-7.0 5,5-6,5 5,0- 6,5

Буферная 9,8± 0.65 12,2± 3,11 12,3± 2,04 17,0± 9,90 >0,05

емкость 7.6-12,0 10,0-14,4 9,6-15,3 10,0-24,0

(кислотная)

Примечание-Р*- достоверность отличий самок разных видов

При определении фагоцитарной активности установлено, что катионный белок присутствовал в агранулоцитах, полугранулоцитах и даже иногда в небольшом количестве в прозрачных клетках речных раков.

3.1.5 Химический анализ тела рака

Химический состав разных органов раков неодинаков. Жабры содержат наименьшее количество сухого вещества (самцов-13,3%, самок-9,1%в СВ) по сравнению с другими органами и тканями. Причем у самок данный показатель значительно меньше, чем у самцов. Больше всего сухого вещества находится в панцире (самцов - 41,82, самок - 28,1 мг%в СВ). Медь в основном откладывается в гемолимфе (самцов - 26,98, самок - 112,95 мг% в СВ) и внутренних органах (самцов - 28,80 , самок - 34,46 мг% в СВ), что

особенно проявляется у самок. Марганец больше всего откладывается во внутренних органах (самцов - 4,60, самок - 12,22 мг%в СВ), а у самок и в мышцах (12,02мг%в СВ). Максимальный уровень железа зафиксирован в гемолимфе (самцов - 38,55, самок - 46,71мг% в СВ), а также во внутренних органах (самцов -14,38, самок - 16,84 мг%). Цинк равномерно распределен по всем органам и тканям.

3.2 Влияние абиотических факторов на интерьерные показатели

3.2.1 Температура окружающей среды

Понижение температуры воды или воздуха приводило к понижению потребления раками кислорода в 1,7 раза, смещению рН гемолимфы на 7% в кислую сторону, повышению ОЧГ: у широкопалых на 36%, длиннопалых -примерно в 2 раза. Снижалась доля фагоцитирующих полугранулоцитов на 33-44%. При этом возрастало содержание прозрачных клеток на 4 -5%.

Повышение температуры воды или воздуха (при транспортировке в обсушенном виде) в условиях нормальной посадки приводило к понижению потребления кислорода широкопалыми речными раками на 24-27%, длиннопалыми - на 15%. При высокой плотности посадки интенсивность потребления кислорода раками обоих видов возрастала на 6 -12%, а скорость обмена увеличивалась в несколько раз. рН гемолимфы сдвигалась в кислую сторону. Доля гранулоцитов повышалась в среднем на 10%, а прозрачных клеток - в 1,2 раза не зависимо от вида и пола. Изменения температуры

среды обитания

вызывали повышение скорости агглютинации гемолимфы в среднем на 20%.

При транспортировке в обсушенном виде раков Роп1а$1асш

\eptodactylus, установлено, что

охлаждение воздуха в емкости, где

содержались раки,

вызывало замедление агглютинации в 1,7 раза. При этом (рис. 6), в гемолимфе повышалось количество

агранулоциты пУгранулоциты гранупоциты прозрачные клеш типы гемоцитов

контроль раки из воды при+20градС опыт обсушен.раки при+20град(: опыт обсуш раки при +] ОградС

Рисунок 6 - Изменение гемоцитарной формулы длиннопалого рака в зависимости от условий окружающей среды

агранулоцитов на 10% при снижении доли полугранулоцитов в 1,5 раза. При транспортировке раков этого вида при повышенных температурах воздуха рН гемолимфы сдвигалось на 10% в кислую сторону и наблюдалось сокращение количества агранулоцитов на 12% и полугранулоцитов на 23%, при одновременном повышении доли гранулированных на 22% и прозрачных клеток в 17 раз.

При сухой транспортировке раков в гемолимфе животных прослеживается тенденция к повышению общего числа гемоцитов на 30-45%.

ш контроль AstAst ■ избыток Ca в воде Ast Ast о кедост Ca в воде Ast Ast

Рисунок 7 - Изменение потребления кислорода и гемоформулы длиннопалого рака при длительном содержании в воде с недостатком С>2

Рисунок 8 - Изменение буферных свойств гемолимфы широкопалого рака в зависимости от содержания в воде ионов кальция

|контроль

| опьгг через 25часов опыт через 25часов

опыт через 2часа опыт через 2часа

3.2.2 Влияние концентрации кислорода в водной среде на физиологию раков

При содержании раков, особенно длительном, в воде с пониженным содержанием кислорода снижалось его потребление в среднем на 70%. В этих условиях доля полугранулированных гемоцитов гемолимфы у широкопалых и длиннопалых раков сокращалась в 1,4 - 1,7 раза (рис.7). На

1 4 7 10 13 16 1922 25 28 31 34 37 40 4348 49 порций кислоты

потр скор-ть готр интен.потр 45 -^ггт-т^гт^т--- 5,000

5 И #1 ВТ' Яг °'500

0 ¡«ДушИ^ВдаДДЩ 0,ооо

агран п/гр гр прозр

уровне тенденции увеличивалось количество прозрачных гемоцитов как у широкопалых, так и у длиннопалых раков на 30-70%.

При одновременном снижении в жизненной среде уровня кислорода и температуры у широкопалых раков падала интенсивность потребления кислорода, повышалось на 19% общее число гемоцитов. Доля

полугранулоцитов в гемолимфе этих раков повышалась на 27% при снижении количества гранулоцитов на 13%.

3.2.3 Влияние минерального состава воды на физиологию рака

Понижение до 56 мг/л концентрации кальция в воде, провоцировало синхронную линьку у длиннопалого речного рака, понижение ОЧГ в гемолимфе почти в 2 раза. У широкопалого рака в воде с низкой концентрацией кальция изменялась направленность морфогенеза, в частности снижалось значение морфометрического индекса (длина клешни в отношении к длине карапакса). Прослеживалась тенденция к увеличению процентного содержания агранулоцитов на 10% и доли прозрачных клеток, снижению в 1,2 -1,4 раза количества гранулоцитов у обоих видов раков.

Повышение содержания кальция в воде до 122-164 мг/л сопровождалось ростом на 3-5% морфометрического индекса. Буферная емкость гемолимфы широкопалых раков снижалась, а у длиннопалых повышалась (рис.8). Зафиксирован более низкий уровень альбуминов (3,1 г/дл) по сравнению с контролем (9 г/дл). В этих условиях снижалось содержание железа в гемолимфе до 25,3 мкг/дл, на треть замедлялась агглютинация гемолимфы.

Однако как при низкой концентрации кальция в воде, так и при ее повышенных значениях у всех речных раков прослеживается тенденция усиления фагоцитарной активности по НСТ-тесту. Например, у А$1асич (^¡асш при повышенном уровне кальция в воде НСТ при индуцировании зимозаном составил 2,52±0,063 против 2,22±0,085 контрольной группы (Р < 0,05).

3.2.4 Загрязнение водоемов азотсодержащими соединениями

Накопление в водной среде соединений азота отрицательно воздействовало на речных раков. В опытной группе наблюдалась гибель 60% особей, в то время как в контроле ни один рак не погиб.

У раков, находящихся в воде с повышенным содержанием нитритов, рН гемолимфы смещался в щелочную сторону (с 7,0 до 7,9). Достоверно по сравнению с контрольной группой снижалась доля гранулоцитов на 21,5% при параллельном росте количества агранулоцитов с 25,8 до 39,8% и прозрачных клеток с 7,0 до 14,0%.

3.3 Влияние плотности посадки на физиологические показатели речных раков

Плотная посадка угнетала основной обмен раков. Если при нормальной посадке потребление кислорода составляло 3,99 г Ог/экз*час (0,078 мл

02/г*час), то при плотной посадке только 0,50 гОг/экз*час или 0,013 мл Ог/г*час.

При плотной посадке раков активная реакция гемолимфы сдвигалась в кислую сторону у широкопалого с 6,3 до 5,4 у длиннопалого с 7,0 до 6,3. УЛя(асш азклсиз и РоШа51асш \eptodactylus наблюдалось понижение общего числа гемоцитов и доли полугранулоцитов. Содержание прозрачных клеток с повышением плотности посадки раков возрастало с 4,5 до 8,3% у широкопалого и с 5,0 до 8,2 % у длиннопалого рака.

При плотной посадке у аз(асиз наблюдалось повышение

фагоцитарной активности. В частности, имело место увеличение СЦК на 6%, лизосомального катионного белка на 11% и показателей спонтанного и индуцированного НСТ - теста на 14 %.

3.4 Референтные значения констант внутренней среды речных раков при оптимальных условиях среды

При щадящих условиях искусственной среды, то есть плотности посадки не более 10 экз/м2, температуре воды +17 - +2 ГС, содержании кислорода в воде от 8,2 до 10,6 мг/л. определены значения констант гомеостаза, которые можно принимать за физиологическую норму речных раков. Выявлены видовые особенности референтных диапазонов констант гемолимфы раков.

Для широкопалого рака характерны значения рН в пределах от 5 до 6. Для самцов референтные значения рН составили 5,4 - 6,1, для самок - 5,1 -5,9. Буферная емкость гемолимфы широкопалого рака изменяется в пределах в пределах 9,6 - 15,3 у самцов и 10,0 - 24,0 у самок. Биохимический профиль гемолимфы этого вида характеризуют следующие цифры. Содержание глюкозы 2,16 - 3,46 ммоль/л, АЛТ -38,2 - 123,Ш/Ь, содержание лактата 62,0314,4 мг/дл, активность амилазы 1,4 - 7,8 ед/л, содержание магния 7,2 - 7,9 мг/дл, цинка 64,7 - 77,3 мкг/дл.

У длиннопалого рака выше, чем у широкопалого показатель ОЧГ (в пределах 787 - 1126 шт/мкл), выше процентное содержание агранулоцитов (у самцов -32,3 - 37,3, у самок - 31,0 - 38,9%), меньше доля прозрачных гемоцитов (у самцов - 3,4 - 9,0, у самок - 0 до 3,5%).

У сухопалого рака выше скорость агглютинации в пределах 2,7 - 3,3 сек и общее число гемоцитов (1146 - 1318 шт/мкл), низкое содержание полугранулоцитов (13,4 - 21,2%), по сравнению с длиннопалым и широкопалым речными раками.

выводы

1. Уровень адаптированности раков по отношению к абиотическим и биотическим факторам отражают следующие показатели гемолимфы: время агглютинации, активная реакция среды, общее число гемоцитов, гемоцитарная формула, буферная емкость.

2. Существуют межвидовые различия у раков РоМ^асш 8а1епиз, Роп1аз1аси$ \eptodactylus, А$1асш аэШсш по составу и свойствам гемолимфы. Так, у сухопалого речного рака выявлены наиболее высокая скорость агглютинации (среднее 3,0 с), высокое ОЧГ (среднее 1232), низкое содержание полугранулированных гемоцитов (17,3%). У длиннопалого рака выше содержание альбумина и меди в гемолимфе. У этого же вида обнаружена повышенная фагоцитарная активность клеточных элементов гемолимфы по сравнению с широкопалым раком. Гемолимфа широкопалого рака обладает высокими буферными свойствами, высоким содержанием глюкозы (2,63 ммоль/л), самым низким значением рН (5,5-5,9) и активности щелочной фосфатазы (20и/Ь при 37°С).

3. Минеральные элементы неравномерно распределяются по органам речных раков. Наиболее высока концентрация сухого вещества в панцире, минимальна - в жабрах. Больше всего меди, марганца, железа откладывается во внутренних органах. Гемолимфа речных раков богата медью (у самцов в сухом веществе 26,98 мг%, у самок - 112,95 мг%) и железом (38,55 и 46,71 мг % соответственно).

4. На протяжении онтогенеза речных раков наблюдались закономерные изменения в составе гемолимфы: повышалось ОЧГ, возрастало количество гранулоцитов. Доля прозрачных клеток уменьшалась с 14,3% у личинок до 3,4% у взрослых особей. Перед гибелью раков повышается ОЧГ, понижаются количество полугранулоцитов и буферная емкость гемолимфы.

5. Раки чувствительны к температуре среды и реагируют:

- на снижение температуры воды или воздуха понижением потребления кислорода (30-40%), сдвигом в кислую сторону активной реакции гемолимфы, повышением ОЧГ (в 1.5 раза), снижением количества полугранулированных гемоцитов (на 33-44%) и прозрачных, ростом числа гранулированных клеток;

- на повышение температуры среды обитания при нормальной посадке снижением потребления кислорода (в среднем на 22%), ростом доли гранулоцитов (30-40%), а при плотной посадке повышением потребления кислорода на 6-12%;

- на любые изменения температуры среды повышением скорости агглютинации гемолимфы.

6. Снижение уровня кислорода в воде приводит к понижению его потребления раками на 70%, к повышению доли гранулоцитов на 11% в гемолимфе и прозрачных клеток на 50%. При этом, рН гемолимфы сдвигается в щелочную сторону. При одновременном понижении концентрации кислорода и температуры воды у речных раков в гемолимфе повышается ОЧГ, удельный вес полугранулоцитов и прозрачных клеток на фоне снижения доли гранулоцитов.

7. Концентрация кальция в воде выступает существенным абиотическим фактором. При изменениях концентрации кальция в воде рН гемолифы раков сдвигается в щелочную сторону, замедляется агглютинация гемолимфы, снижается ОЧГ, содержание агранулоцитов, альбуминов и железа. Изменение концентрации кальция в воде:

- снижение до 56 мг/л провоцирует линьку у длиннопалого речного рака и приводит к снижению морфометрического индекса у широкопалого рака.

- повышение сопровождается ростом морфометрического индекса, а следовательно и продуктивности, на 3-5%.

8. Накопление в водной среде соединений азота отрицательно воздействует на речных раков, может приводить к их гибели. При этом у раков рН гемолимфы смещается в щелочную сторону (с 7,0 до 7,9), понижается содержание гранулоцитов на 21,5% при параллельном росте количества агранулоцитов и прозрачных клеток.

9. Высокие плотности посадки (20-30 экз/м2) раков приводят к понижению потребления кислорода в среднем на 15%, сдвигу рН гемолимфы в кислую сторону, снижению в ней общего числа гемоцитов в среднем на 40% и полугранулоцитов в 1,7раза, увеличению доли прозрачных клеток.

10. Транспортировка раков оказывает влияние на клеточный состав и физико-химические свойства гемолимфы раков. В гемолимфе раков прослеживается тенденция к повышению общего числа гемоцитов на 30-45%. При транспортировке раков:

- с охлаждением в 1,7 раза замедляется агглютинация гемолимфы, повышается количество агранулоцитов (на 10%) при снижении доли полугранулоцитов (с 39,6 до 26,7%).

- с повышением температуры сдвигается в кислую сторону рН гемолимфы, понижается количество агранулоцитов на 12% и полугранулоцитов на 23% при одновременном повышении доли гранулированных и прозрачных клеток.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. При искусственном разведении речных раков следует учитывать их видовую и половую принадлежность, и считать для длиннопалого речного

рака оптимальной температуру 18-23°С, для широкопалого - 16-22°С содержание кислорода 8,8 - 10 мг/л, нитритов до 0,02 мг/л, нитратов до 20 мг/л, кальция для широкопалых раков 60 -124 мг/л, для понтичных раков - 70 - 124 мг/л.

2. При выращивании длиннопалого рака в бассейнах с целью ускорения и синхронизации линьки рекомендуется использовать воду с пониженным (на уровне 56 мг/л) содержанием кальция.

ВНЕДРЕНИЕ

Результаты диссертационной работы внедрены в производственном процессе ООО «Флора» Среднеахтубинского района Волгоградской области; включены в рекомендации «Технологии культивирования речных раков в неспускных водоемах по пастбищному типу», а также использованы в «Методике тестирования речных раков на выживаемость, продуктивность, реакцию на стресс», в учебном процессе при подготовке магистров по программе «Физиолого-биохимический контроль здоровья животных и качества продукции» в учебном процессе ФГОУ ВПОМГАВМиБ им. К.И. Скрябина.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Александрова E.H. Микологическое исследование поражений внешних покровов речных раков.-// Александрова E.H., Пронина Г.И., Корягина Н.Ю. / ГНУ ВНИИ ирригационного рыбоводства, посёлок им. Воровского, Ногинский район, Московская область, Россия. Материалы международной научно-практической конференции «Стратегия развития аквакультуры в условиях XXI века» 23-27 августа 2004 г., Минск. ОДО «Тонпик»-2004.-С.266-268.

2. Александрова E.H. О числе гемоцитов и некоторых других свойствах гемолимфы речных раков (Decapoda, Astacinae).-// Александрова E.H., Пронина Г.И., Корягина Н.Ю./.- Аквакультура и интегрированные технологии: проблемы и возможности - М.: Россельхозакадемия, 2005, С.362-372.

3. Александрова E.H. Культивирование речных раков в неспускных водоемах по пастбищному типу.-// Александрова E.H., Белякова В.И., Борисов P.P., Комарова Е.А., Корягина Н.Ю.. Пронина Г.И. /.- Аквакультура и интегрированные технологии: проблемы и возможности - М.: Россельхозакадемия, 2005, С.86-96.

4. Александрова E.H. Технология культивирования речных раков в неспускных водоемах по пастбищному типу. -// Александрова E.H., Белякова

В.И., Борисов P.P., Комарова Е.А., Корягина Н.Ю.. Пронина Г.И., Суханов В.В. /.- Россельхозакадемия, ГНУ ВНИИР, 2005,23с.

5. Пронина Г.И. Повышение иммунофизиологического статуса ракообразных - основа эффективности раководства.- // Пронина Г.И., Корягина Н.Ю./.- Рациональное использование пресноводных экосистем -перспективное направление реализации национального проекта «Развитие АПК»//Международная научно-практическая конференция.- М., 2007, 418421.,

6. Александрова E.H. О типах гемоцитов российских речных раков (Decapoda, Astacinae). / Александрова Е. Н., Пронина Г. И., Корягина Н. Ю. И Вопросы рыбного хозяйства Беларуснн : сборник научных трудов / РУП "Институт рыбного хозяйства", РУП "Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству", Белорусский государственный университет. - Минск, 2008. - Вып. 24. -. 237-240.

7. Пронина Г.И. Некоторые видовые особенности состава форменных элементов крови гндробионтов / Г. И. Пронина, Корягина Н. ЮЛ Вопросы рыбного хозяйства Беларуси: сборник научных трудов / РУП "Институт рыбного хозяйства", РУП "Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси но животноводству", Белорусский государственный университет. - Минск, 2008. - Вып. 24. - . 465-470.

8. Пронина Г.И. Биохимические показатели гемолимфы речных раков как отражение их обмена веществ.-// Пронина Г.И, Корягина Н.Ю.. Ревякин А.О. /.- Физиология адаптации: Материалы 1-й Всероссийской научно-практической конференции, г. Волгоград, 7-10 октября 2008 г.-С. 97-99.

9. Пронина Г.И. Некоторые видовые особенности физиологической и иммунной системы речных раков.-// Пронина Г.И, Корягина Н.Ю. /.Физиология адаптации: Материалы 1-й Всероссийской научно-практической конференции, г. Волгоград, 7-10 октября 2008.- С. 99-103.

10. Пронина Г.И. Влияние жесткости среды на состояние клеточного иммунитета речных раков.-// Пронина Г.И., Корягина Н.Ю./- Экология. Природные ресурсы. Рациональное природопользование. Охрана окружающей среды. Бюллетень Московского общества испытателей природы,-т.114,вып.З.Приложение 1Ласть 2.МГУ-М.-2009.

11. Пронина Г.И. Сравнительная оценка речных раков разных видов по биохимическим и гематологическим показателям.-// Пронина Г.И., Корягина Н.Ю.. Ревякин А.О./.- Известия ОГАУ, Оренбург, 2009, №4 - С. 186-189

12. Пронина Г.И., Корягина Н.Ю., Смолин В.В. Опыт выращивания речных раков в Волгоградской области.//Зоотехния.- 2010.-№ 6.-С.25-27.

13. Пронина Г.И., Корягина Н.Ю., Меньшиков И.Ю. О некоторых адаптационных особенностях речных раков.// Физиология адаптации: Материалы 2-й Всероссийской научно-практической конференции / Науч. ред. А.Б. Мулик. - Волгоград: Волгоградское научное издательство, 2010. -С.138-141.

Примечание: жирным шрифтом выделены статьи, опубликованные в литературных источниках по списку ВАК

ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

АЛТ - аланинаминотрансфераза мг %- миллиграммов в 100 г

ACT - аспартатаминотрансфераза рН - активная реакция среды

ГЦ - гемоциты ОЧГ - общее число гемоцитов

ИАФ -индекс активности фагоцитов ^2 - кислород

Са2+ - ионы кальция СВ - сухое вещество

L - длина тела СЦК - средний цитохимический

ДЬ - прирост коэффициент

ЩФ - щелочная фосфатаза

Отпечатано с готового оригинал-макета

Формат 60х84'/|б. Усл. печ. л. 1,16. Тираж 100 экз. Заказ 480.

Издательство РГАУ - МСХА имени К.А. Тимирязева 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Корягина, Наталья Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

III РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Физиологические особенности речных раков.

3.1.1 Изменение состава гемолимфы в процессе онтогенеза.

3.1.2 Гематологические показатели разноразмерных речных раков.

3.1.3 Зависимость физиологических показателей от половой принадлежности.

3.1.4 Видовые особенности речных раков.

3.1.5 Химический анализ тела рака.

3.2 Влияние абиотических факторов на интерьерные показатели

3.2.1 Температура окружающей среды.

3.2.2 Влияние концентрации кислорода в водной среде на физиологию раков.

3.2.3 Влияние минеральнсш составзводы на физиологию рака.

3.2.4 Загрязнение водоемов азотсодержащими соединениями.

3.3 Влияние плотности посадки на физиологические показатели речных раков.

3.4 Референтные значения констант внутренней среды речных раков при оптимальных условиях среды.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Корягина, Наталья Юрьевна

V ВЫВОДЫ

1. Уровень адаптнрованности раков по отношению к абиотическим и биотическим факторам отражают следующие показатели гемолимфы: время агглютинации, активная реакция среды, общее число гемоцитов, гемоцитарная формула, буферная емкость.

2. Существуют межвидовые различия у раков РоШа81асиз БЫетм, РоЫа81аси8 \eptodactylus, Ль^асия с^аст по составу и свойствам гемолимфы. Так, у сухопалого речного рака выявлены наиболее высокая скорость агглютинации (среднее 3,0 с), высокое ОЧГ (среднее 1232), низкое содержание полугранулированных гемоцитов (17,3%). У длиннопалого рака выше содержание альбумина и меди в гемолимфе. У этого же вида обнаружена повышенная фагоцитарная активность клеточных элементов гемолимфы по сравнению с широкопалым раком. Гемолимфа широкопалого рака обладает высокими буферными свойствами, высоким содержанием глюкозы (2,63 ммоль/л), самым низким значением рН (5,5-5,9) и активности щелочной фосфатазы (20и/Ь при 37°С).

5. Раки чувствительны к температуре среды и реагируют:

- на любые изменения температуры среды повышением скорости агглютинации гемолимфы;

6. Снижение уровня кислорода в воде приводит к понижению его потребления раками на 70%, к повышению доли гранулоцитов на 11% в гемолимфе и прозрачных клеток на 50%. При этом, рН гемолимфы сдвигается в щелочную сторону. При одновременном понижении' концентрации кислорода и температуры воды у речных раков в гемолимфе повышается ОЧГ, удельный вес полугранулоцитов и прозрачных клеток на фоне снижения доли гранулоцитов.

- повышение сопровождается ростом морфометрического индекса, а следовательно и продуктивности, на 3-5%.

9. Высокие плотности посадки (20-30 экз/м ) раков приводят к понижению потребления кислорода в среднем на 15%, сдвигу рН гемолимфы в кислую сторону, снижению в ней общего числа гемоцитов в среднем на 40% и полугранулоцитов в 1,7раза, увеличению доли прозрачных клеток.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. При искусственном разведении речных раков следует учитывать их видовую и половую принадлежность, и считать для длиннопалого речного рака оптимальной температуру с18 до 23°С, для широкопалого - 16-22°С содержание кислорода 8,8 — 10 мг/л, нитритов до 0,02 мг/л, нитратов до 20мг/л, кальция для широкопалых 60 -124 мг/л, для поэтичных раков — 70 -124 мг/л.

2. При выращивании длиннопалого рака в бассейнах с целью ускорения и синхронизации их линьки рекомендуется исцдльзовать воду с пониженным (на уровне 56 мг/л) содержанием кальция.

ВНЕДРЕНИЕ

Результаты диссертационной работы внедрены в производственном процессе ООО «Флора» Среднеахтубинского района Волгоградской области (Приложение Л); включены в рекомендации «Технологии культивирования речных раков в неспускных водоемах по пастбищному типу», а также использованы в «Методике тестирования речных раков на выживаемость, продуктивность, реакцию на стресс»; в учебном процессе при подготовке студентов по курсу рыбоводства на кафедре «Пчеловодства, рыбоводства, болезней пчел и рыб» в учебном процессу фГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина (Приложение М).

Нашими исследованиями подтверждена оксифильность речных раков. Оптимальным уровнем содержания кислорода в воде искусственных бассейнов можно считать 8-11 мг/л. Рекомендуемый уровень кальция в воде 60-120 мг/л. Раки обладают высокой чувствительностью к продуктам азотистого обмена. Поэтому уровень нитритов в воде не должен превышать 0,02 мг/л, а нитратов 20 мг/л. Наиболее комфортна и экономически обоснована плотность посадки раков в искусственных бассейнах - 10жз/м2 IV ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В диссертационной работе были рассмотрены показатели внутреннего гомеостаза и их зависимость от стадии развития, размерности, пола, вида, а также влияние абиотических и биотических факторов на физиологические показатели речных раков. В ходе исследований было установлено, что:

- в процессе онтогенеза в гемолимфе речных раков наблюдались изменения. Повышалось общее число гемоцитов, наблюдался рост процентного содержания гранулоцитов. Прозрачных клеток на личиночных стадиях было значительно больше, чем у других возрастных групп. Перед гибелью у речных раков также наблюдалось повышение ОЧГ, рост числа гранулированных клеток при снижении количества полугранулированных гемоцитов и снижении буферной емкости гемолимфы.

- прослеживалась прямая корреляция между размерно-весовыми показателями широкопалого и длиннопалого речных раков обоих полов и общим числом гемоцитов.

- имеются различия физиологических показателей речных раков в зависимости от половой принадлежности. Активная реакция гемолимфы самок более кислая по сравнению с самцами, что особенно характерно для широкопалого рака. Скорость обменных процессов самцов выше, чем у самок в Зраза, а интенсивность потребления кислорода в 1,8раз. Однако, с повышением температуры воды самки быстрее отвечают усилением кислородного обмена (скорость обмена возрастает на 60%, а интенсивность потребления кислорода в 6 раз), снижением общего числа гемоцитов в гемолимфе (с 652,5 до 642,5 ед/л). У самцов при таких условиях ОЧГ возрастает на 15%. Более значительное повышение температуры приводит к снижению ОЧГ у раков обоих полов (у самцов на 34%, самок на 56% относительно исходных). При оптимальных условиях содержания ОЧГ в гехмолимфе самцов выше, чем самок. В гемоцитарной формуле самок при +16°С преобладает содержание гранулоцитов. Имеется тенденция у длиннопалого рака к повышенному содержанию прозрачных клеток в гемолимфе самцов на 3,1% относительно самок (Р<0,05). Буферные свойства гемолимфы самок выше, чем самцов (рис.4).Самки широкопалого рака обладают более высокими буферными свойствами гемолимфы, хотя активная реакция их гемолимфы имеет сдвиг в кислую сторону, что является достоверным показателем по отношению к самкам длиннопалого рака (Р< 0,05), но их буферная емкость выше, чем самок длиннопалых. Содержание глюкозы в гемолимфе самцов находится на гораздо более высоком уровне, чем у самок.

- сравнительная характеристика физиологических показателей трех видов раков указала на существенные различия.

Для сухоплого рака характерно наиболее быстрая агглютинация гемолимфы, высокое общее число гемоцитов, достоверно невысокое (17,3%) содержание полугранулированных клеток в гемолимфе относительно других рассматриваемых видов.

У широкопалого достоверно больше глюкозы в гемолимфе, по сравнению с другими видами, а рН и активность щелочной фосфатазы более низкие. Гемолимфа широкопалого рака обладает лучшими буферными свойствами по сравнению с понтичными {Poníastacas) речными раками.

У Pontastacus leptodactylas выше общее число гемоцитов, содержание альбумина и меди, незначительно фагоцитарная активность, определяемая по среднему цитохимическому коэффициенту, чем у широкопалого. При понижении температуры воды у речных раков по-разному изменялось содержание прозрачных клеток в гемолимфе: у длиннопалых, как более теплолюбивых - увеличивалось, а у широкопалых - понижалось.

- Процентное содержание разных типов гемоцитов положительно или отрицательно коррелирует с биохимическими показателями гемолимфы: содержанием альбуминов и глюкозы, активностью AJIT и др. Альбумины гемолимфы Astacus astacus обоих полов составляют около 27% от общего белка и откладываются в большей степени в полугранулоцитах. Выявлена прямая корреляция между содержанием альбуминов в гемолимфе и процентным содержанием полугранулоцитов. Общий белок большей частью содержится в полугранулоцитах самцов (прямая корреляция) и агранулоцитах самок. Установлена у самцов достоверная прямая корреляция в отношении аланинаминотрансферазы (далее AJ1T) по отношению к полугранулоцитам, обратная - к агранулоцитам. У самцов отмечается достоверная обратная корреляция агранулоцитов с содержанием глюкозы. У самок Astacus astacus наблюдается достоверная корреляция активности щелочной фосфатазы (далее ЩФ): прямая с процентным содержанием гранулоцитов; обратная с содержанием агранулоцитов и полугранулоцитов (у самцов не прослеживается корреляция).

- катионный белок присутствовал в агранулоцитах, полугранулоцитах и даже иногда в небольшом количестве в прозрачных клетках. Следовательно, эти клетки гемолимфы обладают фагоцитарной активностью.

- прослеживается следующая динамика отложения минеральных веществ в органах и тканях речных раков Ро^а81аси$ ¡ер^ЛаМукм. Жабры содержат наименьшее количество сухого вещества по сравнению с другими органами и тканями. Причем у самок данный показатель значительно меньше, чем у самцов. Больше всего сухого вещества находится в панцире. Медь в основном откладывается в гемолимфе и внутренних органах, что особенно проявляется у самок. Марганец больше всего откладывается во внутренних органах, а у самок и в мышцах. Максимальный процент железа прослеживается в гемолимфе, а также во внутренних органах. Цинк равномерно распределен по всем органам и тканям.

Далее было рассмотрено влияние температурного фактора, уровня кислорода, минерального состава воды, её загрязненности азотсодержащими соединениями, а также плотности посадки на речных раков.

1. Понижение от оптимального значения температуры воды или воздуха (при транспортировке в обсушенном виде) приводило к понижению потребления раками кислорода в 1,7 раза. Активная реакция их гемолимфы смещалась на 7% в кислую сторону. Прослеживалась тенденция к повышению ОЧГ: у широкопалых на 36%, длиннопалых - примерно в 2раза, кроме группы с нормальной посадкой тШаси.? а$1аси8, общее число гемоцитов которых уменьшалось на 17%. Уменьшалась доля полугранулоцитов на 33-44%, являющихся фагоцитами, при повышении доли гранулированных клеток в 1,1 - 1,5 раз. Понижается процентное содержание прозрачных клеток на 4 -5%. Снижение прозрачных клеток в 1,5 раза наблюдалось и при снижении температуры в условиях со сниженным содержанием кислорода в воде.

2. Повышение температуры воды или воздуха (при транспортировке в обсушенном виде) в условиях нормальной посадки приводило к понижению потребления кислорода широкопалыми речными раками на 24 - 27%, длиннопалыми - на 15%. При плотной посадке: интенсивность потребления кислорода обоих видов возростала на б -12%, а скорость обмена у Astacus astacus увеличивалась в 4,5 раза, а у Pontastacus leptodactylus - в 1,4 раза. Имеется тенденция при повышении температуры воды к росту процентного содержания гранулоцитов (например у самцов широкопалого с 38,5 до 57,0%, у самок - с 28,6 до 32,7%, у самцов сухопалого - с 32,6 до 42,7%) в гемолимфе раков, не зависимо от вида и пола.

3. Повышение или понижение температуры воды от оптимального показателя в условиях нормальной посадки приводят к ускорению агглютинации («свертывания») гемолимфы у широкопалых при нормальной посадке на 20%, плотной - на 30%, у длиннопалых соответственно на 20 и 13%.

4. При содержании раков, особенно длительном, в воде с пониженным содержанием кислорода замедляется его потребление на 70%, прослеживается тенденция к снижению полугранулоцитов в гемолимфе в 1,4-1,7 раза, за счет увеличения гранулированных на 11% и прозрачных клеток на 50% в среднем. Активная реакция гемолимфы (рН) при этом, независимо от длительности пребывания в данных условиях, сдвигается в щелочную сторону на 6-8%.

5. Снижение уровня кислорода, независимо от длительности, и изменение (повышенная, пониженная) температуры воды при нормальной посадке понижают потребление кислорода речными раками. При одновременном понижении содержания кислорода и температуры в воде повышается ОЧГ в гемолимфе на 19%, процент полугранулоцитов на 27%, количество прозрачных клеток, вероятно за счет снижения процента гранулированных.

6. При транспортировке речных раков в обсушенном виде прослеживается тенденция к повышению общего числа гемоцитов (ОЧГ) при повышенных (20°С) или пониженных (10°С) температурах. Температура окружающего воздуха при такой транспортировке оказывает влияние на физиологические показатели речных раков: при +10°С свертываемость (агглютинация) гемолимфы раков замедляется, повышается количество агранулоцитов при снижении полугранулоцитов; при +20°С снижается процентное содержание агранулоцитов и полугранулоцитов, за счет увеличения гранулированных клеток, роста процентного содержания прозрачных клеток.

7. Изменение минерального состава воды, в частности снижение содержания кальция, привело к линьке длиннопалых раков (РоЫа$1аст \eptodactylus) и к увеличению веса, параметров. Повышенное содержание кальция в воде приводило к повышению морфометрического индекса « длина клешни в отношении к длине карапакса» (Ьклеш/Ькар), характеризующего продуктивность, повышению буферной емкости гемолифы, снижение относительного количества прозрачных клеток. Понижение уровня кальция в среде ведет к снижению морфометрического индекса, повышению количества прозрачных клеток в гемолимфе раков не зависимо от их вида, понижением буферных свойств гемолимфы. При изменениях концентрации ионов кальция в воде в ту или иную сторону от оптимального значения активная реакция гемолимфы достоверно смещалась в щелочную сторону, агглютинация замедлялась, наблюдалось понижение общего числа гемоцитов, рост процентного содержания агранулоцитов, снижение уровня альбуминов и железа в гемолимфе, прослеживается тенденция усиления фагоцитарной активности. У широкопалого наблюдается повышение процентного содержания полугранулоцитов, в то время как у длиннопалого речного рака - снижение. Содержание кальция в воде не сказывалось на содержании его в гемолимфе раков.

8. Повышенное содержание в водной среде соединений азота (в течение месяца) оказывает отрицательное воздействие на речных раков, приводящее их к гибели. Наблюдается достоверное смещение активной реакции гемолимфы в щелочную сторону и снижение процентного содержания гранулоцитов, при росте количества агранулоцитов и прозрачных клеток.

9. Плотность посадки влияет на физиологические показатели речных раков. Потребление кислорода широкопалым раком при низких и оптимальных температурах в условиях нормальной посадки выше, чем при плотной. С повышением температуры воды потребление кислорода раками при плотной посадке выше, чем при нормальной. Плотная посадка приводит к сдвигу рН гемолимфы в кислую сторону, снижению общего числа гемоцитов и увеличению процента прозрачных клеток в гемолимфе речных раков. При плотной посадке широкопалого речного рака достоверно уменьшается процентное содержание полугранулоцитов в гемолимфе, возможно, являющихся фагоцитами и усиленное расходование которых может быть результатом увеличения активности и разрушения. Свидетельством данного предположения служит тенденция к увеличению СЦК лизосомального белка и показателей спонтанного и индуцированного НСТ-теста при плотной посадке.

10. Установлены оптимальные физиологические показатели речных раков и условия их содержания.

11. Изменения физиологических показатели речных раков в зависимости от факторов среды и фазы онтогенеза представлены в таблице

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Корягина, Наталья Юрьевна, Москва

1. Абакумов В.А. Руководство по методам гидробиологического анализа поверхностных вод и донных отложений- Л. Гидрометеоиздат.-1983.-С240.

2. Авцын А.П., Жаворонков A.A., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология-М.: Медицина, 1991.-46 с.

3. Александрова E.H., Пронина Г. П., Корягина Н.Ю. Микологическое исследование поражений внешних покровов речных раков. Материалы международной научно-практической конференции. Минск- 2004.-С. 266— 269.

4. Александрова E.H., Белякова В.И., Борисов P.P., Комарова Е.А., Корягина Н.Ю., Пронина Т.П. Культивирование речных раков в неспускных водоемах по пастбищному типу. М., Россельхозакадемия, Сб.науч.трудов т .3, 2005г, С.86-95

5. Алексеев В.Р. Влияние диапаузы на уровень дыхательной активности у раков: Сб. научн. тр.- ГосНИОРХ.- Вып. 300,- 1989.- С. 80-90.

6. Алякринская И.О. О буферных свойствах гемолимфы некоторых моллюсков.- М., Зоологический журнал, Т.1Л,вып 2.-1972- С. 189-196.

7. Бауер О.Н., Мусселиус В.А., Николаева В.М., Стрелков Ю.А. Ихтиопатология. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1977, 431 с.

8. Богерук А.К., Маслова Н.И. Рыбоводно-биологическая оценка продуктивных качеств племенных рыб (На примере карпа).- М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2002.- С. 111-112.

9. Борисов P.P., Тертицкая А.Г. Явление каннибализма у десятиногих ракообразных при содержании в искусственных условиях.- Проблемы аквакультуры. М.- Межведомственный сборник научных и научно-методических трудов.- 2005.- С. 267-271.

10. Бродский С .Я. Речные раки (Crustacea, Astacidae) Советского Союза. — М.: Изв. ГосНИОРХ, 1974, С 103.

11. Будников К. Н., Третьяков Ф. Ф. Речные раки и их промысел. М., Пищепромиздат, 1952, - 95 с.

12. БЭС «Биология» М.: Изд-во «Большая Российская энциклопедия», 1998- 863 с.

13. Варенко К.С., Загубиженко Н.И., Гайдаш Ю.К. Роль зообентоса в миграции микроэлементов в Запорожском водохранилище, Гидробиологический журнал, том 27, 1991, № 11991, С. 78-83.

14. Воробьев В.И. Биогеохимия и рыбоводство. Саратов: МП Литера, 1993. - С.224

15. Воробьев Д.В. Зависимость биогенной миграции микроэлементов в организме белого амура от различных количеств Са+2 в воде // Международн. науч. конф.: Экология биосистем, Астрахань, т. 2, 2007. С. 174-175.

16. Ведемейер Г.А., Мейер Ф.П., Смит JI. Стресс и болезни рыб: Пер. с англ.- М.: Легкая и пищевая пром-сть, 1981.-128с.

17. Винберг Г.Г. Интенсивность обмена и пищевые потребности рыб. -Минск, 1956.-252 с.

18. Виноградов Г.А., Даль Е.С., Комов В.Т. Исследование основных функций жабр рака при воздействии солей аммония и закислении среды. -М.,В кн.: Реакция гидробионтов на загрязнение,- 1983.- 43с.

19. Воробьев В.И. Биогеохимия и рыбоводство. Саратов: МП Литера, 1993. - С.224

20. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. 2-е изд., доп.- Ростов-на-Дону: Ростовский ун-т, 1979.- 128 с.

21. Гилберт С. Биология развития: В 3-х т. Т. 3: Пер. с англ. М.: Мир, 1995. - 352с.

22. Грищенко Л.И., Акбаев М.Ш., Васильков Т.В., Болезни рыб и основы рыбоводства: Учебник. М.: Колос, 1999.- с 455.

23. Громова О. А. Школа по витаминам и микроэлементам. М., 2004. -59 с.

24. Головина H.A., Тромбицкий И.Д. Гематология прудовых рыб -Кишинев: «Штиинца», 1989- 156 с.

25. Дроздов В.Н., Носкова К.К., Петраков A.B. Эффективность всасывания железа при раздельном и одновременном приеме с кальцием. -М.:Фармакология и фармация,-ЦНИИ гастроэнтерологии, М, 2008,- С.24-28

26. Дубовская Л.В. Выбор метода и обоснование методического подхода к выявлению активности холинэстераз цельной крови человека с использованием реактива БАС-С1 . М.: Медицинская консультация, № 3. 1998. С. 35-39.

27. Евтушенко Н.Ю., Данилко О.В., Особенности накопления тяжелых металлов в тканях рыб Кременчугского водохранилища. М.:Гидробиологический журнал, 1996.- Т.32.- N 4.- С. 58-66.

28. Житенева Л.Д., Полтавцева Т.Г., Рудницкая O.A. Атлас нормальных и патологически измененных клеток крови рыб-Ростов-на-Дону. Ростов: Ростовское книжное издательство, 1989-109 с.

29. Жуковский Ю.Г., Кузнецова Л.П., Сочилина Е.Е., Алебян Г.П. О ферментативном гидролизе дитиохолинового эфира пробковой кислоты под действием различных холинэстераз.- С.- П.: Журнал эволюционной биохимии и физиологии. Т. 33. -1997.-С. 308-312.

30. Загускин С.Л., Загускина Л.Д., Загускина С.С. Внутриклеточная регуляция потребления кислорода в нейроне рецептора растяжения речного рака. М.: Цитология. - 2007. - 49, № 10. - С. 832—838

31. Зенин A.A., Белоусова Н.В. 1988. Гидрохимический словарь. Л.: Гидрометеоиздат. - 239с.

32. Иванов Д.И., Аршаница Н.М., Перевозников М.А. Токсикозы рыб с основами патологии: Справочная книга/ ред ФГНУ Гос НИОРХ, 2006.-179с.

33. Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб (сравнительная морфология и классификация форменных элементов крови рыб).- М.: Легкая промышленность, 1982.-е. 184.

34. Кляшторин Л.В. и Яржомбек A.A. Методика определения интенсивности дыхания рыб- М., изд. ВНИРО, в кн. «Методика морфо-физиологических и биохимических исследований рыб»- 1972.- 90 с.

35. Ковалёва Е., Ковалёв В., "Почему болеют рыбы?"- С П., Аквариум, №5, 2004.-5с.

36. Комаровский Ф.Я., Полищук Л.Р. Ртуть и другие тяжелые металлы в водной среде: миграции, накопление, токсичность для гидробионтов (Обзор)-М.: Гидробиологический журнал, том 17, 1981, № 5.- С.71.

37. Кон P.M., Рот К.С. Ранняя диагностика болезней обмена веществ. -М.: пер. с англ., изд. «Высшая школа», 1986.- 443с.

38. Кондратенко Н. Грузите раков бочками. Реальный Бизнес № 8(59) 2007.- С. 86.

39. Константинов A.C. Общая гидробиология.- М., изд. «Высшая школа», 1967,- 431 с.

40. Коржу ев П. А. Физиолого-биохимическая характеристика крови производителей осетровых рыб. М.: Осетровое хозяйство в водоемах СССР. 1963. С. 69-73.

41. Кирчук Г.Е. Особенности накопления ионов тяжелых металлов пресноводными моллюсками.- М.: изд. «Высшая школа», 2001.- 25с.

42. Кузнецов Н.Я. Основы физиологии насекомых. M.-JL, Изд. АНСССР, том 1, 1948.- 380 с.

43. Кулеш Т.А. Гигиеническое регламентирование загрязнения атмосферного воздуха в производстве спиртов методом оксосинтеза с учетом трансформации выбросов. М. - Дисс. канд. мед. наук. - 1985. - С.209.

44. Курилова С.А., Богданова A.B., Назарова Т.И., Аваева С.М. Биоорганическая химия. М.: Изд.АНСССР.-Т. 10, 1984.- С. 1147-1152.

45. Линник Г. Н. Формы миграции тяжелых металлов и их действие на гидробионтов. Рига:// Экспериментальная водная токсикология. - Вып. 11,1986. - С. 144-154.

46. Линник Г.Н., Набиванец Ю.Б. Формы миграции в поверхностных водах.-Л.: Гидрометеоиздат, 1986. 158 с.

47. Лихарева Е.И. Возможности восстановления запасов речных раков в водоемах ленинградской области.- Л.:Сб. научн. тр./ГосНИОРХ, Вып.300,-1989- Стр.11-23.

48. Лозан Р. Азотносо держащие соединения и их превращения в экосистемах. Кишенев:// Вода и здоровье.-2009. - Режим доступа: http://www.necso.ru/pages-2.html

49. Маркушин A.B. Сырьевые запасы раков Северо-западных районов РСФСР и возможности их увеличения. JL: рукопись, Фонды ГосНИОРХ, № 2830.- 1969.-35с.

50. Макрушин A.B. Биологический анализ качества вод.- JL: ЗИН АН СССР, 1974.-60с.

51. Максимов В.Н., Булгаков Н.Г., Левич А.П Количественные методы экологического контроля: диагностка, нормирование, прогноз.- М.,: Экология и устойчивое развитие города.- 2000.- С. 79-83.

52. Мальдов Д.Г., Кулинич A.B., Никоноров С.И. Проблемы науки и перспективы искусственного разведения раков.- М.: Мединор; В сб. «Проблемы охраны, рационального использования и воспроизводства речных раков»- 1997.- С.37-55.

53. Маслова Н.И., Петрушин А.Б. Доместикация обыкновенного сома -перспективного объекта прудового рыбоводства // Аквакультура и интегрированные технологии: проблемы и возможности.- М., Изд. Россельхозакадемии, 2005.-т 2. 174-186.

54. Мацкявичене Г.И. Некоторые особенности обмена веществ у широкопалого рака,- Лит.: Сб.Научн.тр./ Ин-т Зоол.и паразитол.АН ЛитССР. 1979.-С.85-120 .

55. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск: Наука. 1983.- 264 с.

56. Маянский А.Н., Маянский H.A., Заславская М.И., Позднеев Н.М., Плескова С.Н. Апоптоз нейтрофилов. С.-П.:Иммунология. -1999. - С. 11-20.

57. Москалюк Т.А. Абиотические факторы среды и организмы. Адаптации организмов к абиотическим факторам: свету, температуре и влаге.- 2009. -Режим доступа: http://www.botsad.ru/ppapers24.htm.

58. Мошаров А. Влияние температуры среды на рН.- С.-П. Аквариумистика, -2004.- 29с

59. Мур Д., Рамамурти С. Тяжелые хметаллы в природных водах. — М.: Мир,- 1987. 288 с.

60. Мусил Я., Новакова О., Кунц К. Современная биохимия в схемах.- М.: Мир, 1981.-216 с.

61. Нефедов В.Н. Отечественный опыт культивирования раков.- М., ВНИ и, ПКИЭИ и АСУ, вып.1, 1991,- 81с.

62. Новиков Ю.В., Ласточкиной К.О., Болдиной З.Н. Методы исследования качества воды водоемов. М.: Медицина,, -1990.-400с.

63. Никаноров A.M. Гидрохимия. — Л.: Гидрометеоиздат, // учеб. Пособие под ред. Никанорова A.M.//.- 1989.- 123с.

64. Орлов Д. С. Микроэлементы в почвах и живых организмах. Тамбов: Соровский образовательный журнал. -№ 1.- 1998.- С. 61-68.

65. Пронина Г.И. Использование цитохимических методов для определения фагоцитарной активности клеток крови или гемолимфы разныхвидов гидробиоитов для оценки состояния их здоровья,- Оренбург, Вестник ОГАУ, 2008. - С.241-243.

66. Пронина Г.И., Корягина Н.Ю. Влияние жесткости среды на состояние клеточного иммунитета речных раков. Бюллетень московского общества испытателей природы. Отдел биологический, Т. 114, вып. 3, приложение 1, 4.2. - М., 2009. - С. 283-284.

67. Проссер JL и Браун Ф. Сравнительная физиология животных.- М.: Изд-во «Мир», 1967,-766 с.

68. Радучич О. Азбука здоровья // Здоров'я Укра'ши № 5. - 2007. - С. 57-58.

69. Робинсон Дж. Р. Основы регуляции кислотно-щелочного равновесия.-М.:Изд Наука, 1969.- 69с.

70. Романова, Наталья Николаевна. Оценка стресс-реактивности рыб-объектов аквакультуры и ее коррекция писцином: диссертация кандидата биологических наук.- М.:, 2005. 134 с.

71. Румянцев В. Д. Речные раки Волго-Каспия. М.: «Пищевая промышленность». - 1974. - 84 с.

72. Серпунин Г.Г. Гематологические показатели адаптаций рыб.-Калининград: Дисс.доктора биол. наук. 2002.- 482с.

73. Серпунин Г.Г., Шныптева O.A. Гематологические показатели леща Вислинского залива Балтийского моря.- Калининград: Межд. Конференц. Калининградский государственный технический университет,- 2004. С. 195 -197.

74. Скурлатов Ю. И. Введение в экологическую химию водной среды / Ю. И. Скурлатов Г. Г. Дука Е. В. Штамм // Ecological Chemistry: Latest Advances: The Third Int. Conf., 20-21 May 2005 : book of proc. Chi§inäu. 2005.- С. 78-85.

75. Смирнов O.K. Раннее определение продуктивности животных. М.: Колос, 1974.-112с

76. Смирнов A.M., Конопелько П.Я, Постников В.С и др. Клиническая диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных-Д.: Колос. Ленингр. отд-ие, 1981.- С. 405.

77. Смирнов В.А., Махлина М.Д.,. Митрохина Ю.А, Куприянова Г.Л, Микулина А.Е., Смирнова В.А. Особенности содержания обитателей аквариума. Секреты аквариумного рыбоводства. Москва, «Нива России» 1993.- 39с.

78. Соловых А., Овчинников А., Хренова О.П. Репродуктивные и откормочные качества подсвинков крупной белой породы, дюрок и их помесей. М.: Свиноводство.- №3.- 2005.- С. 25-27.

79. Старобогатов Я.И. Высшие раки. Санкт-Петербург: В кн. «Определитель пресноводных беспозвоночных России и сопредельных территорий».- т. 2,- 1995.-С. 174-187; 540-548.

80. Строганов Н.С. Экологическая физиология рыб.- М.: Изд. МГУ, 1962.-с. 201.

81. Сугоняева Л.А. Изыскание возможностей повышения ракопродуктивности водоемов перспективных областей Северо Запада РСФСР.- Фонды ГосНИОРХ. -1973.- С.29-38.

82. Сущеня Л. М. Интенсивность дыхания ракообразных.- Киев, АН УССР, Ин-т Биологии Южных морей,- 1972. С. 195.

83. Тамкявичене Е.А. Некоторые количественные закономерности питания широко-палого рака. Литв.:Сб. Hayчн.тр./Ин-т Зоол. и Паразитол.АН ЛитССР, 1979. С.67-76.

84. ТодоровИ. Клинические лабораторные исследования в педиатрии -София: Гос.изд. «Медицина и физкультура»,/Йордан Тодоров; пер. под ред. Г.Г. Газенко//.-6-е рус. изд.- 1968.- С. 480-482,921-922.

85. Трофимова Н.Ф., Основные физиологические свойства организма человека., КГОУ "Бийский лицей Алтайского края", 2007,- 67с.

86. Удрис Г.А., Нейланд Я.А. Биологическая роль цинка. Рига, 1981.-180с.

87. Флоркэн Биохимическая эволюция.- М.: Изд-во иностранная литература, 1947.-С. 1-176.

88. Фомичев Н. И. Речной рак: методы исследования. JI. - 1986.- 96 с.

89. Хейль В., Коберштейн Р., Цавта Б. Референтные пределы у взрослых и детей. Преаналитические предосторожности. М.: Мир: 2001. -176с.

90. Хмелева H.H., Кулеш В.Ф., Алехнович A.B., Гигиняк Ю.Г. Экология пресноводных креветок.- Минск, «Беларуская Навука», 1997. 253 с.

91. Черкашина Н.Я. О размножении раков (Astacidae) юго-восточного побережья Каспия // Гидробиол. журн.- Т.VI,- №4,- 1970.-С. 104-106.

92. Черкашина Н.Я., Коломейцева E.H., Карпенко В.Н. К качеству самок и самцов длиннопалого кубанского рака Astacus leptodactylus cubanicus Bir. et Win.: Сб. научн. тр. /ГосНИОРХ.- Вып. 300.- 1989.- С. 49-55.

93. Черкашина Н.Я. Динамика популяций раков родов Pontastacus и Caspiastacus (Crustacea, Decapoda, Astacidae) и пути их увеличения. М.: ФГУП «Иацрыбресурс», 2002. -257 с.

94. Чечеткин A.B., Головацкий И.Д., Калиман П.А., Воронянский В.И. Биохимия животных. М., Высш. Школа: Учебник для студ. зооинженер. и ветеринарн. ф-тов с/х вузов / 1982.-511 с.

95. Хомченко И.Г., Трифонов A.B., Разуваев Б.Н. О воде и других электролитах. М.: "Новая волна".- Современный аквариум и химия".- 2002.-С.24.

96. Цукерзис Я.М. Биология широкопалого рака (Astacus astacus).-Вильнюс, изд. «Минтис», 1970.-204 с.

97. Цукерзис Я. М. Речные раки.- Вильнюс: Мокслас, 1989.- 140 с.

98. Шполянская Н.А. Плодовитость кубанского длиннопалого рака в водоемах Ростовской области.- С.-П.Гидробиологический журнал- Т.11,№3.-1975.-С.65-69.

99. Astaldi G., Verga L. Acta haematol.-vol. 17, -1957.-P. 129-136;

100. Bambang Y., Charmantier G., Thuet P., Trilles J.-P. Effect of cadmium on survival and osmoregulation of various developmental stages of the shrimp Penaeus japonicus (Crustacea: Decapoda) / France, Mar. Biol. 1995. -123, № 3. - P. 443-450.

101. Bauchau A. G. Crustaceans. In: Invertebrate blood cells.N. A. Ratcliffe, A. F. Rowley (eds). New York: Acad. Press. 3, -1981. P.386—420.

102. Bemads J, Gaw I. Б1айсая system ten-legged crustaceanss: opened or closed?: Тез. 47 Annual Meeting of the Arizona-Nevada Academy of Sciences, Flagstaff. Ariz., Apr. 12, 2003. / Proc.Ariz.-Nev. Acad. Sci. 2003. - 38C 5-6.

103. Bennett К. M., Walker R. L. Influence of influence by acid on kislotno-alkaline balance, electrolytic the status and activity branchiate Na, K-ATfazy at crayfish of Procambarus clarkia. -Vancouver, Dec. 26-30,1992.-Amer. Zool.32, № 5 -1992.-P. 47A.

104. Bellavite P. The superoxide-forming enzymatic system of phagocytes. Free Radical Biology and Medicine. 4: 1988.- P.225 261.

105. Bryan N.S., Bian K., Murad F. Discovery of the nitric oxide signaling pathway and targets for drug Chen Nansheng, Sun Haibao -Haivang yu huzhao =Oceanol. et limnol. sin. .—I960 .—23 ,№ 3 .—P. 334—342.

106. Campbell J. D. Lifestyle, minerals and health // Med. Hypotheses., Vol. 57, №5.-2001.-P. 521-531.

107. Chei S., Chen J. Inffuence of nitrites on level in a haemolymph of electrolits, respiratory fiber and free amino acids of the maintenance of water in shrimp Penaeus japonicus. - Taiwan: Aquat. Toxicol. - 44, № 1-2.-1999.- P 129139.

108. Chen Nansheng, Sun Haibao Successes in research chemoreceptiono at crustaceans.-Haivang yu huzhao =Oceanol. et limnol. sin. 23, № 3,- 1992 .- P. 334—342.

109. Chisholm J. R.S., Smith V.J. Variability of antibacterial activity hemocytes crab Carcinus maenas depending on temperature. Mar. Biol. Assoc.J UK 74 , № 4 .-1994 .- P. 979-982.

110. Coleman J.E. Structure and mechanism of alkaline phosphatase // Annu Rev Biophys Biomol Struct, 21.-1992, P. 441-524.

111. Gargioni R., Barracco M. A. Hemocytes of the palaemonide Macrobrachium rosenbergii and M. acanthurus, and of the penaeid Penaeus paulensis. J. Morphol. 236: 1998.-P.209—221.

112. Goldfish Электронный ресурс. Вода в аквариуме./Домашний аквариум/М.,-2010.-Режим доступа: http://Aquariumhome.narod.ru/d.html

113. Hall М., Van Н. М.-С., Soderhall К. Identification the main things lipoprotein in a cancer haemolymph, as the fibers included in an immune cognizance and curling. Biochem. and Biophys. Res. Commun. 216, № 3. 1995.-P.939-946.

114. Hess B. Ensyme in blutplasma. Stutgart, 1962.-P. 184-189.

115. Hongda LU. Classification and morphological observations of hemocytes in

116. Eriocheir sinensis by light and electron microscopies // Acte Hydrobiologia sinica, -v. 26. No 5, -2002- P.494-500.

117. Huang H., Li Y., Song X., Wang Y., Yang C.- Influence of the stress caused by ammoniac nitrogen on immune functions Eriocheir sinensis.- Haiyang yu huzhao = Oceanol. et limnol. sin. 37, № 3. 2006. - P. 198—205.

118. Huiqun Chen, Shan Jin, Guoliang Wang, Juexiao Xie. Hemocytes and biochemical structure of blood at Portunus trituberculatus/ // Fish. Sei. 23, № 6. 2004. P. 1-4.

119. Jackson B.P., Lasier P.J., Miller W.P., Winger P.W. Effects of calcium, magnesium and sodium on alleviating cadmium toxicity to Hyalella azteca. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology 64-2000.-P.279-286.

120. Jensen F.B. Absorption, elimination and effects of nitrites and nitrates at a fresh-water river cancer (Astacus astacus) - Aquat. Toxicol. Denmark, Inst, of Biology, Odense Univ., - 34, N 2. -1996. - C.95 - 104.

121. Jackson C. J., Burford M.A., Crustac J.- Influence of temperature and salinity on growth and survival rate of larvae of shrimp Penaeus semisulcatus/. Biol. — 23, № 4. 2003. - P. 819—826.

122. Kaplow L. Blood. vol. 10, № 10, - 1957. - P.1023 - 1029.

123. Kiramoto T., Nakamura M. The effect of cooling on palpitation at Japanese lobster in vitro: Pap. 63rd Annu. Meet. Zool. Soc. Jap., Sendai, Oct. 7- 9, 1992 11 Zool Sei. 9, № 6. - 1992. - P.1217.

124. Lanz K, Tsutsumi V., Arechida H. Morphological and biochemical characterization of Procambarus clarki blood cells.Develop. CoTp. Immunol. 17: -1993. -C. 389—397.

125. Li Hui Yu, Hong Sung Yun. The effect of temperature and salinity on survival and growth of Crangon uritai (Decapoda: Crangonidae) larvae reared in the laboratory.- Mar. Ecol. 28, № 2. - 2007. - P. 288—295.

126. Luquet Gilles, Marin Frédéric. Bio mineralisation: Diversity and Unity.-Paris, C. r. Palevol / Acad, sci., Paris- 3, № 6-7. 2004. - P. 515—534.

127. Manjula P.L., Rahman, K., Abraham, T.J. Haemocyte classification and differential counts in the Indian spiny lobster, Panulirus homarus(linneaus). J. of Aquacult. in the Tropics.12 (2), 113-121, 1997.

128. Mariappan P., Balasundaram C.,Schmitz B. Decapod crustacean chelipeds: an overview / J. Biosci Springer India, in co-publication with Indian Academy of Sciences,-Journal of Biosciences.-Vol. 25, No. 3 -2000.-P.303-313

129. Mandai P.K., Mandai A., Ahearn G. A. 65Zn2+ transport by lobster hepatopancreatic lysosomal membrane vesicles Homarus americanus // J. Exp. Zooi. A. 305, № 3. - 2006. - P. 203—214.

130. May H.Y., Mercier A.J. Responses of crayfish to a reflective environment depend on dominance status. Can. J. Zool. - 84, № 8. - 2006. - P. 1104—1111.

131. Martin G. G., Graves B. L. Fine structure and classification of shrimp hemocytes. J. Morphol. 185 1985. - P. 339—348.

132. Mazlum Y. Effects of temperature on the survival and growth of two cambarid crayfish juveniles Cambaridae Crustaceana. - 80, № 8. - 2007. -P. 947954.

133. Mazlum Y., Fatih C. M., Eversole A.G. Parity of length and weight of a body and length and width of a claw at river cancer Procambarus acutus acutus in conditions cultivation. J. Appl. Ichthyol. - 23, № 5. - 2007. - C. 616—620.

134. Muller G. Klinisch-chemische Diagnostik. Gustav Fischer Verlag, Jena Stuttgart: 1993. P.233.

135. Namara J.C, Ribeiro M.R. The calcium dependence of pigment translocation in freshwater shrimp red ovarian chromatophores. Brazil: Biol. Bull. - 198, № 3. - 2000.-C 357-366.

136. Nakamura M., Kuramoto T. The effect of cooling on palpitation at Japanese lobster in vivo. -Sendai: Pap. 63rd Annu. Meet. Zool. Soc. Jap., Oct. 7- 9, 1992 Zool. Sci- 9, № 6. 1992. - P. 1216.

137. Newsom J.E.; Davis K.B. Osmotic responses of haemolymph in red swamp crayfish (Procambarus clarkii) and white river crayfish (P. zonangulus) to changes in temperature and salinity // Aquaculture. V. 126.-1994. P. 373-381.

138. Nystrom O. The effects of crayfish on interactions in freshwater benthic communities.-Dcpartament of Ecology, Limnology, Lund Univcrciry, Sweden, Lund, 1999. 180p.

139. Roditi, H.A., N.S. Fisher, and S.A. Sanudo-Wilhelmy. Field testing a metal bioaccumulation model for zebra mussels. // Environmental Science and Technology 34-2000.-P 2817-2825.

140. Rosas Carlos. Lopez Nalda, Mercado Pedro, Martinez Evenor Influence salinity acclimations on oxygen consumption young fishesa white shrimp Litopenaeus vannamei. J. Crastac. Biol. - 21. № 4. - 2001- P.912—922.

141. Selye H. The physiology of exposure to stress Montreal, 1950. - 64p.

142. Shay eh C., Jiannchu C. Changes in due course allocation of nitrogen at shrimp Penaeus japonicus after effect from nitrite. Aquat. Toxicol. - 51, № 4. -2001. - P.443-454.

143. Soderhall K., Johansson M.W. and Smith V.J. Freshwater crayfish:'Biology, management and exploitation / edited by D.M Holdich and R.S. Lowery.-Croom Helm, London Sydney, Timber Press Portland, Oregon.-1988.-498p.

144. Soderhall K., Johansson V.W and Smith V.J. Internal defence mechanisms // In Freshwater crayfish: biology, management and exploatation / ed. Holdich D. M. and Lowery R.S., 1988. - P. 213-238.

145. Streissl F., Hodl W. Growth, morphometry, the size of maturing, sexual -dimorphism and an index of fatness of a crayfish Austropotcimobius torrentium SchranL Hydrobiologia K3. - 477, № 1. - 2002 - P. 201-208.

146. Terwilliger N.B., Dumler K. Gemocyaninevs ontogenesis by Decapoda crustaceanss: effect from temperature and aliment. J. Exp. Biol. - 204, № 5. -2001.-P. 1013-1020

147. Tierney A.J., Godleski S., Massanari J.R. The comparative analysis atomistic behaviour at four kinds of river cancers. / J. Crustac. Biol.20.№ 1. -2000- C.66.

148. Thomas L. Alkalische Phosphatase. //In: Thomas L (Editor) Labor und Diagnose, Marburg: Die Medizinische Verlagsgesellschaft, Stud.-Edit, der 4: 1995.- P.50.

149. Trouilhé M.C., Souty G.C., Grandjean F., Parinet B. Physical and chemical water requirements of the white-clawed crayfish (Austropotamobius pallipes) in western France / Aquat. Conserv.: Mar. and Freshwater Ecosyst. 17, № 5. -2007.- P. 520 538.

150. Vazquez L., Perez A., Millan D. Morphology of hemocytes from the freshwater prawn Macrobrachium rosenbergii. J. Morphol. 234, № 2. - 1997. - P. 147- -153.

151. Wang Hong-Wei, Meng Gui-Li, Liu Jin, Qi Xiao-Qiang, Zhang Yi Culture of cells hepatopancreas and haemocytes Penaeus japonicus at various values pH / Chin. J. Zool. 40, № 1. 2005. - P. 88-91.

152. Wang Jun-Xia, Wang Wei-Na, Wang An-li. Wang Ya-Bin. Influence Cu2 + on culture haemocytes fresh-water shrimp Macrobrachium nipponense. -Dongwuxue zazhi = Chin. J. Zool. - 38, № 3. - 2003. - P. 22- 25.

153. Ward Richard J.S., Crohan Catherine R., White Keith N Influence of aqueous aluminium on the immune system of the freshwater crayfish Pacifasticus leniusculus. Aquat. Toxicol. 3H. - 77, № 2. - 2006. - P.222-228.

154. Wei W., Jiamin W., Hua W.- The physiological mechanism of the early maturing induced by salinity juvenile Eriocheir sinensis /Zhongguo shuichan kexue = J. Fish. Sci. China. 14, № 2. - 2007. - P. 275—250.

155. Whiteley N. M. Seasonal regulation acid alkaline balance of a haemolymph of fresh-water cancer Austropotamobius lipes.// Physiol.Soc. Jt Meet, with Physiol. Jap.and Physiol. Soc.Korea, Cambridge, 18-20 July, Physiol.-1992.-P. 446.

156. Winkler L.W. Die Bestimmung des im Wasser geloesten Sauerstoffes. // Chem. Ber. v. 21, -1888. P.2843-2855.

157. Yang Zhi-Biao, Zhao Yun-Long, Zhou Zhong-Liang, Li Na, Yang Jian .Influence of copper being in water on activity of enzymes at Eriocheir sinensis lipes. // Haiyang yu huzhao, Oceanol. et limnol.sin.- 37, № 2.- 2006.- P. 118-124.

158. Yavuzcan Y.H., Atar H.H. Haemocyte Classification and Differential Counts in the Freshwater Crab, Potamon fluviatilis//Turk J Vet Anim Sci 26. -2002. P. 403-406.

159. Zhang Shuo, Dong Shuanglin, Mag Fang. The effect of temperature and body weight on carbon of shrimp Penaeus chinensis / Yingyong shengtai xuebao = Chin. J. Appl. Ecol. — 30. 11. № 4.-2003 - P. 615-617.

160. Zoo.City-Portal.ru3neKTpoHHbiii ресурс. Кислород, углекислый газ, сероводород, азот в воде. Зачем они нужны. /Аквариумы. Вода в аквариуме.-Москва,- 2010.- Режим доступа: http://Aquariumhome.narod.ru/d.html1. Фото а1. Фото б1. Фото в

161. Фото Б1. Клетки гемолимфы самца речного рака Pontastacus 1ер^с1ас1у1и8 в камере Горяева: а в первые секунды после отбора гемолимфы; б - через 510 мин после отбора гемолимфы; в - через 20-30мин после отборагемолимфы.

162. Фото В1 мазок гемолимфы речного рака (Ропгаягаст Ьер^асШия), окрашенный по Паппенгейму. 1-агранулоцит (диаметр 10 микрон)(ГЦ 1), 2-полугранулоцит (ГЦ 11), 3- гранулоцит ( ГЦ 111), 4- прозрачная клетка.1. Фото Г1 гемоциты икры

163. Фото ГЗ гемоциты личинка 7-1 Остадии Фото Г 4 - гемоциты годовика( 1+)

164. Фото Г Изменение структуры гемоцитов в зависимости от стадии развитияличинки1. Фото Д11. Фото Д2 Фото ДЗ

165. Рисунок Д гемоциты , окрашенные по методу Паппенгейма: Фото Д1-сухопалого речного рака РоЫаьЬасш БаИпт; Фото Д2- широкопалого речного рака Лягает аяГасш; Фото ДЗ- длиннополого речного рака1. РогйазШсш 1щЯ<х1ас1$1т

166. Фото Е1 Содержание катионного белкав гемоцитах речного рака

Информация о работе

Корягина, Наталья Юрьевна
кандидата биологических наук
Москва, 2010
ВАК 03.03.01

Диссертация

Физиолого-биохимическая характеристика речных раков при выращивании в искусственных условиях - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы