Сравнительное исследование экскреции белка почкой

Кутина, Анна Вячеславовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Сравнительное исследование экскреции белка почкой
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Сравнительное исследование экскреции белка почкой"

На правах рукописи

КУТИНА Анна Вячеславовна

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСКРЕЦИИ БЕЛКА ПОЧКОЙ

03.00.13 - Физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2009

, г*' \

17 &

003477173

Работа выполнена в лаборатории физиологии почки и водно-солевого обмена Учреждения Российской академии наук Института эволюционной физиологии и

Официальные оппоненты доктор медицинских наук, профессор Николай Павлович Ерофеев доктор медицинских наук, профессор Алексей Владимирович Смирнов

Ведущее учреждение

Учреждение Российской академии наук Институт цитологии и генетики СО РАН

Защита диссертации состоится 13 октября 2009 г. в Ц часов

ьЦ заседании диссертационного совета Д 002.127.01 по защите диссертаций на

соискание ученой степени кандидата медицинских наук

в Учреждении Российской академии наук Институте эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН по адресу: Санкт-Петербург, пр. Тореза, 44, конференц-зал.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке ИЭФБ РАН (Санкт-Петербург, пр. Тореза, 44).

Автореферат разослан_сентября 2009 г.

биохимии им. И.М. Сеченова РАН

Научный руководитель

академик РАН Юрий Викторович Наточин

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Одно из основных положений физиологии почки заключается в том, что в клубочках происходит ультрафильтрация плазмы крови, благодаря чему конечная моча представляет собой безбелковую жидкость (Smith, 1951; Наточин, 1993; Шейман, 2001). Проницаемость гломерулярного фильтра для белков очень мала (Deen, 2004; Haraldsson, Sörensson, 2004), а возможности их реабсорбции в проксимальном канальце велики (Christensen, Gburek, 2004), поэтому почка здорового человека и животных практически не выделяет белок - суточная экскреция у человека не превышает 150 мг (Rennke, Denker, 2007). Появление белка в моче, в частности, альбумина относится к числу важных диагностических признаков патологии почек и сердечно-сосудистой системы (Титов, Тарасов, 1988; Bakris, 2001; Аракелянтс и др., 2003; Хирманов, 2004; Наточин, Мухин, 2007). Тем не менее, ряд фактов говорит о возможности протеинурии при некоторых физиологических состояниях, таких как интенсивная физическая нагрузка, ортостаз, лихорадка, эмоциональный стресс (Poortmans et al., 1989; Храйчик и др., 2001). Есть отдельные наблюдения, свидетельствующие об увеличении экскреции некоторых белков почкой при изменении скорости мочеотделения (Guarnieri et al., 1979; Viberti et al., 1982; Houser, 1986; Jespersen et al., 1986; Jung et al., 1988; Wiegmann et al., 1989). Факторы регуляции уровня экскреции белка почкой не описаны. Остается открытым вопрос о пределах вариабельности и механизмах влияния процессов, лежащих в основе мочеобразования, на уровень экскреции белка в норме. Выяснение условий развития физиологической протеинурии представляет безусловный интерес как для нормальной физиологии, так и для практической медицины.

Цель исследования: выявление факторов, оказывающих влияние на уровень экскреции белка почкой в норме.

Задачи исследования:

1. Сравнительное исследование экскреции белка почкой при осмотическом, водном диурезе и салурезе.

2. Сопоставление экскреции белка у человека и некоторых видов животных (крыса, травяная лягушка).

3. Исследование влияния ренин-ангиотензиновой системы на экскрецию белка при полиурии.

4. Сравнительное исследование влияния гормонов нейрогипофиза (аргинин-вазотоцин (AVT), аргинин-вазопрессин (AVP) и их аналоги) на экскрецию белка почкой крысы.

5. Исследование влияния оксида азота (NO) на выведение белка почкой крысы.

Научная новизна. Впервые показано, что у крыс полиурия различного генеза приводит к значимому повышению экскреции общего белка, в том числе альбумина. Аналогичные изменения экскреции белка выявлены при водном диурезе у здоровых обследованных и при глюкозурии у пациентов с сахарным диабетом I типа без нефропатии.

Впервые показано, что у крыс ряд аналогов гормонов нейрогипофиза (1-дезамино-8-аргинин-вазотоцин (1d-AVT), 1-дезамино-8-гомоаргинин-вазотоцин (1d-hAVT), 1-дезамино-4-треонин-8-аргинин-вазотоцин (1d-4Thr-AVT)) в дозах 0.5-1.0мкг/кг обратимо увеличивает экскрецию белка почкой, этот эффект в значительной степени снимается введением антагонистов \Л-рецепторов.

Впервые показано, что метиловые эфиры Л/ш-нитро-1_-аргинина и Л/ш-нитро-D-аргинина (L-NAME и D-NAME) при парентеральном введении вызывают развитие массивной протеинурии (альбуминурии) у крыс за счёт увеличения проницаемости гломерулярного фильтра для белков. На этой экспериментальной модели впервые

показано влияние гиперволемии и лигандов вазопрессиновых р'ёцепторов на экскрецию белка почкой крыс.

Научно-практическая значимость работы. Полученные данные указывают на необходимость учёта уровня диуреза и тщательной оценки состояния почки для дифференциальной диагностики физиологической протеинурии и повышенной экскреции белков, свидетельствующей о патологии почек.

Результаты диссертации используются в курсах лекций «Физиология почки и водно-солевого обмена», читаемых на медицинском факультете Санкт-Петербургского государственного университета.

Положения, выносимые на защиту.

1. Водная нагрузка у крыс и человека, осмотический диурез у пациентов с сахарным диабетом I типа, полиурия у крыс, вызванная введением осмотических диуретиков, фуросемида и 1d-AVT, приводят к повышению экскреции белка почкой. Угнетение активности ангиотензин-превращающего фермента " не препятствует развитию данной формы физиологической протеинурии у крыс.

2. Ряд аналогов гормонов нейрогипофиза (1d-AVT, 1d-hAVT, 1d-4Thr-AVT) увеличивают экскрецию общего белка, в том числе альбумина, и этот эффект в значительной степени снимается введением антагонистов Vi-рецепторов.

3. Парентеральное введение L-NAME и D-NAME вызывает развитие массивной протеинурии у крыс, вероятно, за счёт увеличения проницаемости гломерулярного фильтра. Водная нагрузка, введение лигандов вазопрессиновых рецепторов и угнетение синтеза N0 усиливают NAME-зависимую протеинурию.

академика Л.А. Орбели. Структурные и функциональные основы эволюции функций, физиология экстремальных состояний» (Санкт-Петербург, 2008 г.), VI Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем», посвященной 50-летию открытия A.M. Уголевым мембранного пищеварения (Санкт-Петербург, 2008 г.), Международной конференции «Ehrlich II conference, 2nd World Conference on Magic Bullets», посвященной 100-летию вручения Нобелевской премии П. Эрлиху (Нюрнберг, Германия, 2008 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 2 статьи в реферируемых журналах и тезисы 5 докладов.

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 172 страницах и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, 4 глав результатов исследования, обсуждения результатов, выводов, списка литературы, включающего 40 отечественных и 214 иностранных источников. Диссертация иллюстрирована 27 таблицами и 46 рисунками.

Материалы и методы исследования Объектами исследования служили здоровые добровольцы, пациенты с сахарным диабетом I типа, крысы (Rattus norvegicus var. albino) и травяные лягушки (Rana temporaria). Основная часть экспериментов выполнена на самках крыс линии Вистар в возрасте 4-6 месяцев, весом 150-220 г. Пробы мочи собирали при произвольных мочеиспусканиях, забор крови проводили под эфирным наркозом из общей сонной артерии. Часть экспериментов выполнена в марте-апреле на самцах травяных лягушек весом 25-35 г. Пробы мочи собирали из мочевого пузыря однократно через 1 ч после перевязки клоаки, кровь забирали из полости сердца у обездвиженных лягушек. Опыты выполнены в соответствии с международными стандартами по работе с экспериментальными животными.

Обследованы 15 практически здоровых добровольцев 16-27 лет, у которых

утром собирали ночную пробу мочи, а затем все пробы в течение 2.5 часов после пероральной водной нагрузки (20 мл/кг). Совместно с к.м.н. Ж.В. Шуцкой обследованы больные сахарным диабетом I типа без диабетической нефропатии (21 пациент 11-19 лет), наблюдающиеся в городском диабетологическом центре для детей и подростков №44. У них собирали ночные пробы мочи, утром натощак брали пробу крови из локтевой вены. Все обследованные дали информированное согласие на проведение исследований.

В работе использованы: AVP, AVT, L-NAME, D-NAME, аргинин, глицерин, лизин, оксадиазоло-хиноксалин (ODQ), пептидные антагонисты вазопрессиновых и окситоциновых рецепторов (Sigma-Aldrich, Inc., США), полиэтиленгликоль-400 (PEG) (Shuchardt, Германия), фуросемид (Aventis Pharma Ltd., Индия), 1d-AVT (ЗАО «Синтез пептидов», Россия), ОРС-31260 (Otsuka Pharmaceutical Со, Ltd., Япония), эналаприлат (KRKA, Словения), новые синтетические аналоги AVT - 1d-hAVT, 1 d-4Thr-AVT, 1-дезамино-4-треонин-8-0-аргинин-вазотоцин (1 d-4Thr-DAVT), 1-дезамино-7-глицин-8-аргинин-вазотоцин (1d-7Gly-AVT), 1-дезамино-7-гпицин-8-0-аргинин-вазотоцин (1 d-7Gly-DAVT), 1 -дезамино-8-0-аргинин-деглицин-вазотоцин (1d-deGly-DAVT) (химический факультет СПбГУ, Россия).

В пробах мочи и сыворотки крови осмоляльность определяли на микроосмометре Micro-Osmometer Model 3300 (Advanced Instruments, США) криоскопическим методом, концентрацию ионов натрия, калия - на пламенном фотометре Corning 410 (Ciba Corning, Великобритания), креатинина - кинетическим методом по реакции Яффе, общего белка мочи - пирогаллоловым методом, альбумина мочи у человека - иммунотурбидиметрически, общего белка сыворотки крови - при помощи биуретового реактива, а альбумина сыворотки крови -бромкрезоловым зелёным на автоматическом биохимическом анализаторе EOS Bravo W (Hospitex, Италия) с использованием реактивов, стандартных и контрольных

сывороток фирмы Randox (Великобритания). Альбумин мочи у крыс определяли иммуноферментным методом с использованием наборов фирмы Bethyl Laboratories (США) на автоматическом ридере Elx800 (BIO-TEK Instruments, США). Совместно с к.б.н. В.В. Захаровым проводили электрофорез белков мочи в денатурирующих условиях по стандартной методике (Laemmli, 1970) в 8% или 12%-ном полиакриламидном геле. Гели окрашивали коллоидным раствором Кумасси G250. Наличие глюкозы в моче и микроальбуминурии у пациентов с сахарным диабетом выявляли с помощью тест-полосок, уровень гликированного гемоглобина (НЬА1с) определяли на анализаторе DCA 2000™ (Siemens, США).

Статистическую обработку проводили с использованием программ Microsoft Excell 2003 и Statistica 6.0. Данные в тексте представлены в виде M ± а, на графиках - M ± 95% доверительный интервал. Использовали однофакторный дисперсионный анализ, критерии для множественного сравнения групп, корреляционный анализ.

Результаты исследования

Экскреция белка почкой при разных типах диуреза у крыс. Осмотический диурез у крыс вызывали пероральным введением 50% глицерина (6.4 мл/кг) или в/в инфузией 40% PEG (7.5 мл/кг); водный диурез - введением воды (50 мл/кг) через зонд в желудок; салурез - в/м введением фуросемида (10 мг/кг) или 1d-AVT (0.5 мкг/кг). После введения водной нагрузки увеличение диуреза было обусловлено экскрецией осмотически свободной воды, при инфузии PEG - экскрецией осмотически активных веществ, а при введении фуросемида и 1d-AVT - экскрецией ионов натрия с осмотически связанной с ними водой (рис. 1). Несмотря на различные механизмы развития полиурии, во всех изученных вариантах увеличения мочеобразования параллельно с усилением диуреза происходило повышение выведения общего белка, наблюдалась прямая зависимость между объёмом выделяемой мочи и экскрецией белков почкой в пределах каждой из групп (рис. 2А).

По оси ординат - диурез (V), клиренс осмотически активных веществ (С05ш), натрия (Сца) и осмотически свободной воды (СН2о, мкл/мин на 100 г массы тела). ВН - водная нагрузка.

ВН Фуросемид 1d-AVT PEG Контроль

Рис. 1. Диурез клиренсы осмотически свободной воды, осмотически активных веществ и ионов натрия при разных типах диуреза.

40 60 80 100 120 V, мкл/мин

I--О—I

-1

10 20 30 V, мкл/мин

Рис. 2 Зависимость между выведением белка почхой и скоростью мочеобразования.

По оси абсцисс - диурез (V, мкл/мин на 100 г массы тела), по оси ординат - экскреция белка с мочой (UprV, мкг/мин на 100 г массы тела). 1 - водная нагрузка, 2 - 1d-AVT, 3 - фуросемид, 4 - PEG, 5 - глицерин, 6 - контроль.

При разных типах диуреза экскреция белка достигала примерно одних и тех же максимальных значений, несмотря на существенные различия в объёмах

выделяющейся мочи. Близкие средние значения за 2 ч эксперимента, как мочеотделения, так и выведения белка, наблюдались с одной стороны при осмотическом диурезе и ld-AVT-зависимом салурезе, а с другой стороны - при водном диурезе и фуросемид-зависимом салурезе (рис. 2Б). Полученные данные указывают на то, что скорость выведения белка зависит не от величины диуреза как таковой, а от интенсивности действия фактора, приводящего к полиурии. Электрофоретическое исследование белков мочи при разных типах диуреза показало, что при всех вариантах увеличения мочеобразования у крыс выделялись низкомолекулярные белки (14-31 кДа) и альбумин (67 кДа), существенных межгрупповых отличий в спектре экскретируемых белков выявлено не было (рис. 3). По данным иммуноферментного анализа экскреция альбумина при полиурии возрастала в 2-8 раз - наиболее выраженный рост выведения альбумина отмечался при салурезе, вызванном введением 1d~AVT, минимальный - при действии фуросемида.

66.2 кДа 45 кДа 31 кДа

о"» 21.5 кДа ** 14.4 кДа

Рис. 3. Электрофорез белков мочи крыс при разных типах диуреза. 1 - водная нагрузка, 2 - фуросемид, 3 - глицерин, 4 - PEG, 5 -контроль, 6 - 1d-AVT, 7 - маркеры молекулярной массы.

Увеличение выделения белков при разных типах диуреза могло определяться возрастанием фильтрации белков в почечных клубочках. Выявлена достаточно тесная корреляционная связь между экскрецией белка и скоростью клубочковой фильтрации при действии 1d-AVT (рис. 4Б) и связь слабой силы - при действии фуросемида и водной нагрузки (рис. 4А).

Рис 4. Зависимость экскреции белка от скорости клубочковой фильтрации при водном диурезе и салурезе.

По оси абсцисс - экскреция белка почкой (1)Рг\/, мг/мин на 100 г массы тела), по оси ординат - клиренс креатинина (ССг, мл/мин на 100 г массы тела). 1 - 1с1-АУТ, 2 - водная нагрузка, 3 - фуросемид.

Поскольку экскреция белка, фильтруемого в клубочках, зависит от степени его реабсорбции, было рассчитано отношение скорости экскреции белка к скорости клубочковой фильтрации, то есть величина, характеризующая количество выделившегося с мочой белка на единицу объёма фильтрата. При всех типах диуреза экскреция белка на мл кпубочкового фильтрата росла. Найдена тесная корреляция между увеличением отношения выведения белков к экскреции креатинина и ростом мочеотделения (г = 0.97, р < 0.05). Таким образом, в основе

повышенной экскреции белка при полиурии может лежать изменение гемодинамических условий в клубочке, что приводит к усилению проникновения макромолекул через гломерулярный фильтр и затруднению их реабсорбции из-за ускорения тока жидкости в проксимальном канальце.

Влияние водной нагрузки на экскрецию белков почкой человека. В контрольном периоде у всех обследуемых выведение белка находилось в пределах нормальных значений - скорость экскреции общего белка составила 69 ± 18 мкг/мин, а альбумина 3.7 ± 2.7 мкг/мин. После питья воды в объёме 20 мл/кг у них возросло мочеотделение - диурез увеличился в 13.3 раза, достигнув максимума через 2 ч. Наряду с ростом диуреза происходило значимое повышение экскреции белков с мочой (рис.5), выведение общего белка повысилось в 8.3 раза, а альбумина - в 2.8 раза. Обращает на себя внимание то, что, несмотря на рост выведения альбумина, практически у всех обследованных скорость его экскреции осталась в пределах нормальных значений - до 20 мкг/мин (American Diabetes Association, 2002). По сравнению с исходным периодом изменилось соотношение экскретируемых белков в моче, доля альбуминов снизилась с 4.4% до 1.5%.

В отличие от проб, собранных в контрольном периоде обследования, практически во всех пробах после водной нагрузки резко возросло отношение белок/креатинин, превысив границу нормы (0.2 мг/мг). При этом величина отношения белок/креатинин нарастала с повышением диуреза (рис. 6). Считается, что соотношение бепок/креатинин адекватно отражает суточную экскрецию бепка и является методом оценки потери белка по произвольной пробе мочи (Ginsberg et al., 1983). Но протеинурия, наблюдаемая после водной нагрузки, была кратковременной, она прошла после нормализации диуреза, и повышенное отношение белок/креатинин в моче у обследованных не свидетельствовало о существенном повышении суточной потери белка.

иА1Ьч

мкг/мин

20 т —альбумин —о— общий белок

водная нагрузка

иР,ч

мг/мин Т 1-2

-■ 0.8

-- 0.4

мг/мг 2.0

1.5

1.0

0.5

г=0.91 р<0.001

о °

О -I-,-,-1-,-,-,-1- 0.0

-30 О 30 60 90 120 150 180

мин

Рис. 5. Экскреция общего белка и альбумина почкой человека при водном диурезе.

По оси абсцисс - время (мин), по оси ординат: слева - экскреция альбумина (илаУ, мкг/мин на 1.73 м2 площади поверхности тела), справа - экскреция общего белка (иРг\/, мг/мин на 1.73 м2 площади поверхности тела).

0.0

15 20 мл/мин

Рис. 6. Зависимость между диурезом и отношением белок/креатинин от после водной нагрузки у здоровых обследованных.

По оси абсцисс - диурез (V, мл/мин на 1.73 м2 площади поверхности тела), по оси ординат - отношение содержания белка (мг) к креатинину (мг) в пробах мочи. Пунктир - граница нормы.

Выведение белка при полиурии у пациентов с сахарным диабетом I типа. В основе полиурии при сахарном диабете лежит снижение реабсорбции веществ в проксимальном сегменте нефрона, вызванное увеличением содержания глюкозы в канальцевой жидкости. Таким образом, глюкозурия при сахарном диабете является естественной моделью осмотического диуреза у человека. У обследуемых собирали ночные пробы мочи, что позволяло избежать влияния приёмов пищи и воды на уровень диуреза и экскреции различных веществ. Предварительно пациенты с сахарным диабетом по уровню НЬА1с были разделены на 2 группы: с компенсированным (НЬА1с<7%) и декомпенсированным (НЬА1с>7.5%) сахарным

диабетом. Пациенты в группах не различались по уровню скорости клубочковой фильтрации (р > 0.05). После сбора мочи и определения в ней глюкозы среди пациентов с декомпенсированным сахарным диабетом была выделена группа детей с глюкозурией. У детей с ночной глюкозурией наблюдался осмотический диурез, у них выявлена более высокая скорость мочеобразования (в 4 раза по сравнению с контролем), экскреция осмотически активных веществ и реабсорбция осмотически свободной воды. Именно в этой группе пациентов была обнаружена повышенная экскреция белка с мочой - 105±88мг/6ч (в контроле - 22 ±10, при компенсированном сахарном диабете — 38 ± 18, при декомпенсированном сахарном диабете без глюкозурии - 44 ± 17 мг/бч, р < 0.05). Уровень экскреции белка коррелировал с величиной осмотического диуреза (г = 0.85, р < 0.05).

Экскреция белка почкой лягушек. Сбор мочи у лягушек осуществляли в конце периода гибернации после их помещения в воду комнатной температуры. Экскреция общего белка с мочой у лягушки составила 0.81 ±0.54мг/ч на 100 г массы тела. Мочеотделение у амфибий, находящихся в водной среде, аналогично водному диурезу у млекопитающих, поэтому мы сопоставили значения экскреции веществ у лягушек и крыс после водной нагрузки. Мочеотделение, экскреция воды и осмотически активных веществ (при расчёте на 100 г массы тела) у лягушек оказались сопоставимыми с аналогичными показателями у крыс после водной нагрузки, а экскреция белка была выше в 2.9 раза. По данным электрофореза у лягушек с мочой в основном выделялись белки с молекулярной массой около 70 кДа, низкомолекулярные белки практически отсутствовали (рис. 7). Полученные данные свидетельствуют о том, что как у крыс, так и у лягушек гломерулярный фильтр практически не пропускает белки с молекулярной массой выше 70 кДа. Меньшее выведение низкомолекулярных белков у лягушки может быть следствием

их низкой концентрации в плазме крови или интенсивной реабсорбции в проксимальном канальце.

w 66.2 кДа

1 2 3

1 - моча крысы,

2 - моча лягушки,

' 45 кДа

„j 31 кДа 3 - маркеры молекулярной массы.

Ш 21.5 кДа i 14.4 кДа

Рис. 7. Электрофорез белков мочи крыс и лягушек.

Влияние блокады ренин-ангиотензиновой системы на экскрецию белка при разных типах диуреза. В клинической нефрологии устранение внутриклубочковой гипертензии с применением ингибиторов ангиотензин-превращающего фермента служит основным приёмом снижения протеинурии при нефропротективной терапии (Brenner et al., 1996; Мухин и др., 2008). Для анализа возможных механизмов увеличения экскреции белков почкой при качественно различных формах повышения мочеобразования были проведены эксперименты на здоровых крысах, у которых временное фармакологическое угнетение активности ангиотензин-превращающего фермента было использовано для предотвращения повышения внутригломерулярного давления. Для устранения возможного действия ангиотензина II крысам вводили 1.0 или 2.0мг/кг эналаприлата в/бр за 30 мин до водной нагрузки, инъекции 1d-AVT или фуросемида. Введение эналаприлата не снизило величину протеинурии (рис. 8А) при всех типах диуреза и не уменьшило альбуминурию при водном диурезе и ld-AVT-зависимом салурезе у крыс (рис. 8Б). Полученные данные показывают, что фармакологическое угнетение синтеза ангиотензина II в структурах почки не сказывается на скорости потери белков при

исследованных формах протеинурии, что свидетельствует о существовании многокомпонентной системы стабилизации давления в гломерулярном аппарате. А

Фуросемид 1с1-А\/Т

Контроль Фуросемид 1с)-А\ЛГ

Контроль

Рис. 8. Влияние энапаприлата на экскрецию общего белка (А) и альбумина (Б) почкой при водном диурезе и салурезе.

По оси ординат - экскреция общего белка или альбумина с мочой за 2 ч эксперимента (ир,\/24, и№\/24 мкг на 100 г массы тела). 1 - без эналаприлата, 2 -эналаприлат (1 мг/кг, в/бр). * - значимость различий (р < 0.05) с группой контроля. ВН - водная нагрузка.

Экскреция белка почкой крыс при действии аналогов гормонов нейрогипофиза и антагонистов вазопрессиновых рецепторов. Поскольку наиболее выраженный рост экскреции белка наблюдался при 1с1-А\/Т-зависимом салурезе, было изучено влияние на выведение белка ряда новых аналогов А\/Т с заменами аминокислотных остатков в 4, 7, 8 и 9-м положениях молекулы А\/Т и различным соотношением антидиуретических и натрийуретических свойств. Увеличение диуреза при в/м введении 0.5-1.0 мкг/кг АУТ и его аналогов (1с1-А\/Т, 1с1-ЬА\/Т и 1с)-4ТЬг-А\/Т), обладающих натрийуретическим действием, сопровождалось ростом экскреции белков почкой, причём количество выделяемого белка напрямую зависело от диуретического эффекта применяемого препарата (рис. 9).

о 1.0 мкг/кг пептида □ 0.5 мкг/кг пептида Д 0.01 мкг/кг пептида + ВН о 0.001 мкг/кг пептида + ВН

1-АУТ, 2-1с1-АУТ,

3 - 1с1-с1еС1у-ОАУГ,

4 - 1с1-7в1у-ОАУТ,

5 - ^-ГЛУТ, 6 - 1с1-4ТЬг-0АУТ,

7 - 1а-7&у-АУТ, 8 -1 сМТЬг-АУТ, 9 - контроль, 10 - водная нагрузка (ВН).

Рис. 9. Зависимость между диурезом и экскрецией белка при действии АУТ и его аналогов.

По оси абсцисс - объём мочи за 2 ч (V24, мл на 100 г массы тела), по оси ординат -суммарная экскреция белка с мочой за 2 ч эксперимента (иРгУгч, мкг на 100 г массы тела).

Предварительное (за 5 мин) введение \Л- или У^-антагониста в значительной

степени устраняло повышение экскреции белка при инъекции 1с1-АУТ (рис. 10), в то

время как Уг-антагонист и антагонист окситоциновых рецепторов не препятствовали

действию аналога.

■10 _ 1 -У,-антагонист,

-Д- 1

2 - У|„-антагонист,

3 - 0.9% №С1.

Сплошная стрелка - введение

У-антагонистов (10 мкг/кг, вЛи),

пунктирная -1с)-АУТ (0.5 мкг/кг, в/м). -30 0 30 60 90 120 150 180 210 240

мин

Рис. 10. Влияние У-антагонистов на экскрецию белка почкой при действии 1 е)-АУТ. По оси абсцисс - время (мин), по оси ординат - экскреция белка с мочой (С^У, мг/мин).

Для оценки антидиуретической активности аналогов АУТ их вводили в дозах 0.01-0.001 мкг/кг' одновременно с пероральной водной нагрузкой (50 мл/кг). Все изученные аналоги в данном диапазоне доз не влияли на выведение ионов. Препараты со слабой антидиуретической активностью (1с)-с1еС1у-ОА\Л", 1с1-7С1у-ОА\/Т, 1с1-7С1у-АУТ) не препятствовали развитию водного диуреза и повышению экскреции белка с мочой после водной нагрузки. Аналоги с выраженной антидиуретической активностью (1с1-ЬА\Я, 1сМТ1чг-А\/Т и 1с1-4ТЬг-ОА\/Т) значительно снижали диурез и замедляли выведение избытка воды из организма, при этом экскреция белков почкой понижалась до значений, наблюдающихся в контрольной группе. Отмечена прямая зависимость между антидиуретической активностью аналогов А\ЛГ и их способностью препятствовать повышению экскреции белка почкой в ответ на водную нагрузку (рис. 9).

Пероральное введение непептидного антагониста Х/г-рецепторов - ОРС-31260 (15мг/кг) - привело к развитию у крыс водного диуреза - повысилось мочеотделение, упала осмоляльность мочи, реабсорбция осмотически свободной воды сменилась ее экскрецией. Но уровень экскреции белка при действии Уг-антагониста значимо не отличался от контрольного уровня (р > 0.05). Таким образом, водный диурез при действии \/2-антагониста в отличие от увеличения мочеобразования после водной нагрузки не сопровождался значимым повышением экскреции белка у крыс.

Влияние N0 на экскрецию белка почкой крыс. Введение крысам ингибитора ЫО-синтазы 1_-№ШЕ (50 мг/кг) привело к двухкратному увеличению мочеотделения, небольшому росту экскреции натрия с мочой и развитию массивной протеинурии -выведение белка увеличилось с 0.13 ± 0.04 до 1.67 ± 0.73 мг/2ч/100 г массы тепа. По данным иммуноферментного анализа практически весь экскретируемый белок был представлен альбумином. Высокая протеинурия наблюдалась в течение первых 2 ч

после инъекции L-NAME, а затем начинала снижаться. Через день после введения L-NAME экскреция общего белка с мочой ещё в 2 раза (альбумина - в 3 раза) превышала контрольные значения, на 7 день показатели выведения белка вернулись к исходному уровню. Для оценки вклада угнетения синтеза N0 в развитие данной протеинурии эффект L-NAME сопоставили с действием 1) D-NAME, оптическим изомером L-NAME, не являющимся ингибитором NO-синтазы, и 2) ODQ, ингибитором растворимой гуанилатцикпазы, препятствующим внутриклеточному действию NO. ODQ (2 мг/кг, в/бр) не оказал влияния на экскрецию общего белка и альбумина, в то время как D-NAME (50 мг/кг, в/бр) привёл к двухкратному росту экскреции белка (до 0.28 ± 0.17 мг/2ч/100 г массы тела) и резкому повышению выведения альбумина по сравнению с контролем (186 ± 69 и 5 ± 4 мкг/2ч/100 г массы тела, соответственно, р < 0.05). По данным электрофореза при действии L-NAME резко возросло выведение белков с молекулярной массой 65-70 кДа, в частности альбумина, а также в моче появились белки с молекулярной массой 150кДа (рис. 11). Более крупные белки плазмы крови в моче выявлены не были (рис. 11). Подобная протеинурия описана при увеличении проницаемости гломерулярного фильтра после введения поликатионов (Hunsicker et al., 1981; Bridges et al., 1991).

250 кДа в- 4M 1 _ проба мочи, L-NAME (50 мг/кг, в/бр)

160 кДа ШШДу 2 - проба мочи, L-NAME (50 мг/кг, в/бр) 4

105 кДа ilfMflT

75 кда ¡яЯЯтШк 1d-AVT (0.5 мкг/кг, в/м)

50 кДа

3 - проба сыворотки крови, контроль. Слева - маркеры молекулярной массы.

1 2 3

Рис. 11. Электрофорез в 8% полиакриламидном геле белков контрольной сыворотки крови и мочи после введения крысам !_-ЫАМЕ и М-А\/Т.

В. совокупности эти данные указывают на то, что NAME обладают специфическим действием на проницаемость гпомерупярного фильтра для белков, не связанным с блокадой NO-синтазы. Угнетение образования N0 не является провоцирующим фактором развития NAME-зависимой протеинурии, но влияет на её интенсивность - при введении в равных дозах L-NAME в большей степени менял экскрецию белка почкой, чем D-NAME. При интактном гломерулярном фильтре . угнетение действия N0 не влияет на экскрецию белка почкой.

Выраженность L-NAME-зависимой протеинурии и альбуминурии у крыс весьма существенно менялась на фоне роста диуреза и при действии лигандов .вазопрессиновых рецепторов (AVP, 1d-AVT). Водная нагрузка способствовала повышению уровня протеинурии в 2 раза, инъекция 1d-AVT (0.5 мкг/кг) - в 8 раз, а AVP (0.5 мкг/кг) - в 5 раз. В то же время рост мочеотделения при действии фуросемида не изменил протеинурию. На фоне действия 1 d-AVT и водной нагрузки в моче появились белки с молекулярной массой до 250 кДа (рис.11). D-NAME-зависимая протеинурия также существенно возросла при введении 1 d-AVT -экскреция альбумина увеличилась на порядок. Вероятно, изменение уровня NAME-зависимой протеинурии при действии водной нагрузки и 1 d-AVT связано с повышением внутриклубочкового давления, что и способствует проникновению большего количества белков через гломерупярный фильтр.

Полученные данные свидетельствуют о том, что резкие изменения мочеотделения и действие ряда биологически активных веществ могут приводить к развитию протеинурии у здорового человека и животных. Это указывает на необходимость различать функциональное повышение экскреции белка и протеинурию как признак развивающейся патологии почек.

Выводы

1. Экскреция белков, в том числе альбумина, почкой крыс возрастает при

полиурии на фоне водной нагрузки, введения высоких доз осмотических диуретиков, фуросемида и 1d-AVT.

2. Полиурия при водной нагрузке у здорового человека и осмотическом диурезе у пациентов с сахарным диабетом I типа сопровождается ростом выведения белка.

3. Электрофоретическое исследование проб мочи травяной лягушки (Rana temporaria) и крысы при полиурии (Rattus norvegicus var. albino) свидетельствует об экскреции белков с молекулярной массой не более 70 кДа.

4. Экскреция белков, в том числе альбумина, почкой крыс возрастает при салурезе после инъекции аналогов гормонов нейрогипофиза (1d-AVT, 1d-hAVT, 1d-4Thr-AVT). Этот эффект устраняется при блокаде V-i-рецепторов пептидными антагонистами.

5. Парентеральное введение L-NAME и D-NAME вызывает массивную протеинурию (альбуминурию) у крыс, вероятно, увеличивая проницаемость гломерулярного фильтра. Оптический изомер (L-NAME), ингибирующий NO-синтазу, в большей степени изменяет экскрецию белка. Угнетение действия N0 введением ODQ не сказывается на экскреции белков почкой крысы.

6. Водная нагрузка, AVP или 1d-AVT усиливают NAME-зависимую протеинурию и приводят к появлению в моче белков с молекулярной массой до 250 кДа.

7. Предварительное введение эналаприлата, ингибитора ангиотензин-превращающего фермента, не устраняет физиологическую протеинурию у крыс при действии водной нагрузки, высоких доз фуросемида и 1d-AVT.

8. Сравнительное исследование экскреции белка почкой при разных типах диуреза у животных (Rattus norvegicus var. albino, Rana temporaria) и человека свидетельствует, что полиурия сопровождается физиологической протеинурией, которая, вероятно, зависит от участия Vi-рецепторов, изменения продукции N0, но не ангиотензина II.

..... Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Кутина A.B.. Захаров В.В., Наточин Ю.В. Экскреция белка почкой крыс при разных типах диуреза // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 2008. - Т. 146. - № 12. - С. 613-616.

2. Кутина A.B.. Наточин Ю.В. Аналоги вазотоцина усиливают экскрецию белков почкой крыс // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. - 2008. - Т. 94. - № 11. -С. 1325-1334.

3. Kutina А.У.. Natochin Ju.V. Extremely High Natriuretic Effect of 1-Desamino-8-homoarginine Vasotocin in Rats // Abstract Book of Ehrlich II conference, 2nd World Conference on Magic Bullets. - Nürnberg (Germany), 2008. - P. A-171.

4. Кутина A.B. Влияние 1-дезамино-аргинин-вазотоцина на экскрецию белка почкой крысы // Тезисы VI Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем», посвященной 50-летию открытия A.M. Уголевым мембранного пищеварения. - СПб., 2008. - С. 110-111.

5. Кутина A.B. Влияние осмотического диуреза на реабсорбцию белка в проксимальном канальце почки крысы // Тезисы 11-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина». - СПб., 2008. - С. 190-191.

6. Кутина A.B. Сравнительное исследование экскреции белка почкой крыс и лягушек // Тезисы Всероссийской конференции «Научное наследие академика Л.А. Орбели. Структурные и функциональные основы эволюции функций, физиология экстремальных состояний». - СПб., 2008. С. 90-91.

. 7. Васильев П.В., Кутина A.B. Влияние водной нагрузки на выведение белка почкой у человека // Тезисы 12-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина». -СПб., 2009. - С. 66-67.

л«'

Тиражирование и брошюровка выполнены в учреждении «Университетские телекоммуникации» 197101, Санкт-Петербург, Саблинская ул., 14 Тел. (812) 233 4669 объем 1 п.л. Тираж 100 экз.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Кутина, Анна Вячеславовна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Гломерулярная фильтрация белка.

1.2. Реабсорбция профильтровавшегося белка.

1.3. Канальцевая секреция белка.

1.4. Транспорт белка в почке у представителей разных классов позвоночных.

1.5. Экскреция белка почкой при изменении диуреза.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Объекты исследования и серии экспериментов.

2.2. Лабораторные методы исследования.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Экскреция белка почкой при разных типах диуреза.

3.1.1. Выведение белка почкой крыс.

3.1.2. Выведение белка почкой человека.

3.1.3. Выведение белка почкой лягушки.

3.2. Влияние блокады ренин-ангиотензиновой системы на экскрецию белка при разных типах диуреза.

3.3. Экскреция белка почкой крыс при действии аналогов гормонов нейрогипофиза.

3.4. Влияние оксида азота (N0) на экскрецию белка почкой крыс.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Сравнительное исследование экскреции белка почкой"

Актуальность проблемы. Одно из основных положений физиологии почки заключается в том, что в клубочках происходит ультрафильтрация плазмы крови, благодаря чему конечная моча представляет собой безбелковую жидкость (Smith, 1951; Наточин, 1993; Шейман, 2001). Проницаемость гломерулярного фильтра для белков очень мала (Deen, 2004; Haraldsson, Sörensson, 2004), а возможности их реабсорбции в проксимальном канальце велики (Christensen, Gburek, 2004), поэтому почка здорового человека и животных практически не выделяет белок - суточная экскреция у человека не превышает .150 мг (Rennke, Denker, 2007). Появление белка в моче, в частности, альбумина относится к числу важных диагностических признаков патологии почек и сердечно-сосудистой системы (Титов, Тарасов, 1988; Bakris, 2001; Аракелянтс и др., 2003; Хирманов, 2004; Наточин, Мухин, 2007). Тем не менее, ряд фактов говорит о возможности протеинурии при некоторых физиологических состояниях, таких как интенсивная физическая нагрузка, ортостаз, лихорадка, эмоциональный стресс (Poortmans et al., 1989; Храйчик и др., 2001). Есть отдельные наблюдения, свидетельствующие об увеличении экскреции некоторых белков почкой при изменении скорости мочеотделения (Guarnieri et al., 1979; Viberti et al., 1982; Houser, 1986; Jespersen et al., 1986; Jung et al., 1988; Wiegmann et al., 1989). Факторы регуляции уровня экскреции белка почкой не описаны. Остается открытым вопрос о пределах вариабельности и механизмах влияния процессов, лежащих в основе мочеобразования, на уровень экскреции белка в норме. Выяснение условий развития физиологической протеинурии представляет безусловный интерес как для нормальной физиологии, так и для практической медицины.

Цель исследования: выявление факторов, оказывающих влияние на уровень экскреции белка почкой в норме. Задачи исследования:

1. Сравнительное исследование экскреции белка почкой при осмотическом, водном диурезе и салурезе.

2. Сопоставление экскреции белка у человека и некоторых видов животных (крыса, травяная лягушка).

3. Исследование влияния ренин-ангиотензиновой системы на экскрецию белка при полиурии.

5. Исследование влияния оксида азота (NO) на выведение белка почкой крысы.

Впервые показано, что у крыс ряд аналогов гормонов нейрогипофиза (1-дезамино-8-аргинин-вазотоцин (1d-AVT), 1-дезамино-8-гомоаргинин-вазотоцин (1d-hAVT), 1-дезамино-4-треонин-8-аргинин-вазотоцин (1d-4Thr-AVT)) в дозах 0.5-1.0 мкг/кг обратимо увеличивает экскрецию белка почкой, этот эффект в значительной степени снимается введением антагонистов Vi-рецепторов.

Впервые показано, что метиловые эфиры Л/ш-нитро-1-аргинина и Л/ш-нитро-й-аргинина (L-NAME и D-NAME) при парентеральном введении вызывают, развитие массивной протеинурии (альбуминурии) у, крыс, за счёт увеличения проницаемости гломерулярного фильтра для* белков. На этой экспериментальной модели впервые показано влияние гиперволемии и лигандов вазопрессиновых рецепторов на экскрецию белка почкой крыс.

Научно-практическаязначимость работы. Полученные данные указывают на,необходимость учёта уровня диуреза и тщательной оценки состояния почки для дифференциальной диагностики физиологической протеинурии и повышенной экскреции белков, свидетельствующей о патологии почек.

Результаты диссертации используются в курсах лекций «Физиология почки и водно-солевого обмена», читаемых на,медицинском факультете Санкт-Петербургского государственного университета.

Положения, выносимые на защиту.

1. Водная нагрузка у крыс и человека, осмотический диурез у пациентов с сахарным диабетом I типа, полиурия у> крыс, вызванная введением осмотических диуретиков, фуросемида и 1d-AVT, приводят к повышению экскреции белка почкой. Угнетение активности ангиотензин-превращающего фермента не препятствует развитию данной формы физиологической протеинурии у крыс.

3. Парентеральное введение L-NAME и D-NAME вызывает развитие массивной протеинурии у крыс, вероятно, за счёт увеличения проницаемости гломерулярного фильтра. Водная нагрузка, введение лигандов вазопрессиновых рецепторов и угнетение синтеза NO усиливают NAME-зависимую протеинурию.

Апробация работы. Результаты исследования доложены и обсуждены на 11-й и 12-й Всероссийских медико-биологических конференциях молодых исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина» (Санкт-Петербург, 2008 г. и 2009 г.), Всероссийской конференции «Научное наследие академика Л.А. Орбели. Структурные и функциональные основы» эволюции функций, физиология экстремальных состояний» (Санкт-Петербург, 2008 г.), VI Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем», посвященной 50-летию открытия A.M. Уголевым мембранного пищеварения (Санкт-Петербург, 2008 г.), Международной конференции «Ehrlich II conference, 2nd World Conference on Magic Bullets», посвященной 100-летию вручения Нобелевской премии П. Эрлиху (Нюрнберг, Германия, 2008 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 2 статьи в реферируемых журналах и тезисы 5 докладов.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Кутина, Анна Вячеславовна

140 ВЫВОДЫ

1. Экскреция белков, в том числе альбумина, почкой крыс возрастает при полиурии на фоне водной нагрузки, введения высоких доз осмотических диуретиков, фуросемида или 1d-AVT.

2. Полиурия при водной нагрузке у здорового человека и осмотическом диурезе у пациентов с сахарным диабетом I типа сопровождается< ростом выведения белка.

4. Экскреция белков, в том числе альбумина, почкой крыс возрастает при салурезе после инъекции аналогов гормонов нейрогипофиза (1d-AVT, 1d-hAVT, 1d-4Thr-AVT). Этот эффект устраняется при блокаде \Л-рецепторов пептидными антагонистами.

8. Сравнительное исследование экскреции белка почкой при разных типах диуреза у животных (Rattus norvegicus var. albino, Rana temporaria) и человека свидетельствует, что полиурия сопровождается физиологической протеинурией, которая, вероятно, зависит от участия \Агрецепторов, изменения продукции N0, но не ангиотензина II.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Кутина, Анна Вячеславовна, Санкт-Петербург

1. Аракелянтс A.A., Жукова Н.В., Рязанов A.C., Юренев А.П. Микроальбуминурия: клиническое и прогностическое значение при артериальной гипертензии // Тер. арх. 2003. - Т. 75. - № 12. - С. 81-83.

2. Боголепова А.Е., Наточин Ю.В. Физиологический анализ функций почки при различных типах диуреза // Нефрология. 2005. - Т. 9. - № 2. - С. 9-15.

3. Боголепова А.Е., Шахматова Е.И. Исследование роли простагландина Е2 в регуляции мочеобразования при салурезе, водном и осмотическом диурезах у крыс // Росс, физиол. ж. им. И.М. Сеченова. 2004. - Т. 90. - № 11. -С. 1411-1416.

4. Вандер А. Физиология почек, пер. с англ. СПб.: Питер, 2000. - 256 с.

5. Винниченко Л.Н. Сравнительная ультраструктура нефрона. Атлас. -Л.: Наука, 1980.- 136 с.

6. Гао Цзе, Наточин Ю.В. Эволюционные преимущества участия вазопрессина вместо вазотоцина в регуляции водно-солевого обмена у млекопитающих//Ж. эвол. биохим. физиол. 2004. - Т. 40. - № 2. - С. 168-172.

7. Гланц С. Медико-биологическая статистика, пер. с англ. М.: Практика, 1999. - 459 с.

8. Дедов И.И., Шестакова М.В. Диабетическая нефропатия. М.: Универсум Паблишинг, 2000. - 240 с.

9. Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет. Руководство для врачей. М.: Универсум Паблишинг, 2003.-455 с.

10. Долгов В.В., Щетникович К.А., Ованесов E.H., Овчинников И.М. Ещё раз об определении общего белка в моче // Клин. лаб. диагн. 2006. - № 8. - С. 14-19.

11. Иванова Л.Н. Вазопрессин: клеточные и молекулярные аспекты его антидиуретического действия // Вест. Росс. акад. мед. наук. 1999. - № 3 - С. 40-45.

12. Иванова Л.Н., Курдубан Л.К., Перехвальская Т.В. О действии-вазопрессина на сосудистую систему мозгового вещества почки // Физиол. ж. СССР им. И.М. Сеченова. 1966. - Т. 52. - № 3. - С. 302-307.

13. Канашкина Т.А., Шахматова Е.И., Наточин Ю.В. Влияние 1-дезамино-1монокарб-аргинин-вазотоцина на выделение ионов натрия и воды почками крыс // Бюлл. экспер. биол. мед. 2007. - Т. 143. - № 5. - С. 494-496.

14. Каюков И.Г., Смирнов A.B., Добронравов В.А. Рентгеноконтрастная нефропатия // Нефрология. 2007. - Т. 11. - № 3. - С. 93-102.

15. Лот К. Основы физиологии почки. М.: Научный мир, 2005. - 292 с.

16. Мухин H.A., Тареева И.Е., Шилов Е.М. Диагностика и лечение болезней почек. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 384 с.s

17. Наточин Ю.В. Механизмы мочеобразования. В кн.: Нефрология: руководство для врачей / Под ред. И.Е. Тареевой. М.: Медицина, 2000. - С. 2448.

18. Наточин Ю.В. Физиология почки. В кн.: Физиология водно-солевого обмена и почки. СПб.: Наука, 1993. - С. 202-416.

19. Наточин Ю.В. Физиология почки: формулы и расчеты. Л.: Наука, 1974.-60 с.

20. Наточин Ю.В., Канашкина Т.А., Мордвинцев Д.Ю., Шахматова Е.И. Рецепторы вазопрессина: структура и стимуляция 1-дезамино-аргинин-вазотоцином у крыс// Росс, физиол. ж. им. И.М. Сеченова. 2007. - Т. 93. - № 6. - С. 625-634.

21. Наточин Ю.В., Канашкина Т.А., Шахматова Е.И., Беспалова Ж.Д., Мордвинцев Д.Ю., Поляк Я.Л. Влияние аналогов вазотоцина на выведение ионов Na+, К\ Мд2+ почкой крыс // Эксп. клин, фармакол. 2008. - Т. 71. - № 2. -С. 32-35.

22. Наточин Ю.В., Мухин H.A. Введение в нефрологию. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.-152 с.

23. Наточин Ю.В., Шахматова Е.И. Диуретическое действие полиэтиленгликолей // Бюлл. экспер. биол. мед. -1970. Т. 69. - № 4. - С. 79-81.

24. Ованесов E.H., Овчинников И.М. Сравнительные характеристики сульфосалицилового и пирогаллолового методов определения общего белка в моче // Клин. лаб. диагн. 2006. - № 9. - С. 56.

25. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М.: МедиаСфера, 2002. - 312 с.

26. Ройтберг Г. Е., Струтынский A.B. Лабораторная и инструмента ль на я диагностика заболеваний внутренних органов. Руководство для врачей и студентов. М.: БИНОМ, 1999. - 622 с.

27. Ружанская A.B., Миленина O.E., Кравцов Э.Г., Далин М.В., Габриэлян Н.И. Методические подходы к определению Tamm-Horsfall протеина // Бюлл. экспер. биол. мед. 2005. - Т. 140. - № 9. - С. 316-319.

28. Рябов С.И., Козлов В.В , Кожевников А.Д., Ракитянская И.А., Смирнов A.B. Нефротический синдром (клинико-морфологические, иммунологические и биохимические аспекты) // Тер. арх. 1988. - Т. 60. - № 6. - С. 24-28.

29. Серов В.В. Функциональная морфология почек. В кн.: Нефрология: руководство для врачей / Под ред. И.Е. Тареевой. М.: Медицина, 2000. - С. 1223.

30. Тареева И.Е., Полянцева Л.Р. Протеинурия и нефротический синдром В кн.: Нефрология. Руководство для врачей / Под ред. И.Е. Тареевой. М.: Медицина, 2000. - С. 145-163.

31. Терентьев П.В. Лягушка. М.: Сов. наука, 1950. - 346 с.

32. Титов В.Н., Тарасов A.B. Микроальбуминурия: патофизиология, диагностическое значение и методы исследования // Тер. арх. 1988. - Т. 60. -№6. - С. 134-140.

33. Филлипс П.А., Джонстон С.И. Гормоны и почки. В кн.: Руководство по нефрологии, пер. с англ. / Под ред. Д.А. Витворт, Д.Р. Лоренса. М.: Медицина, 2000. - С. 45-58.

34. Хирманов В Н. Факторы риска: микроальбуминурия // Тер. арх. 2004. -Т. 76.-№10.-С. 78-84.

35. Храйчик Д.Е., Седор Д.Е., Ганц М.Б. Секреты нефрологии, пер. с англ. М., СПб.: Бином, Невский Диалект, 2001. - 303 с.

36. Шейман Д.А. Патофизиология почки, пер. с англ. / Под ред. Ю.В. Наточина. М., СПб.: Бином, Невский диалект, 2001. - 206 с.

37. Шуцкая Ж.В., Кузнецова А.А., Шахматова Е.И., Наточин Ю.В. Роль почек в регуляции осмоляльности и концентрации катионов в сыворотке крови при гипергликемии //Физиол. человека. 2008. - Т. 34. - № 5. - С. 156-167.

38. Эмануэль В.Л. Лабораторные технологии оценки мочевого синдрома // Нефрология. 2007. - Т. 11. - № 1. - С. 17-27.

39. Ala-Houhala I., Vapaatalo Н., Pasternack A. Intravenously administered frusemide increases glomerular permeability // Clin. Sci. (Lond). 1987. - V. 73. - N. 4. - P. 365-370.

40. Alt J.M., Deerberg F., Hackbarth H.J., Stolte H. The study of urinary protein excretion in male rats as compared with human proteinuria // Contrib. Nephrol. -1980.-V. 19.-P. 79-87.

41. American Diabetes Association. Diabetic nephropathy // Diabetes Care. -2002. V. 25. - Suppl. 1. - P. S85-S89.

42. Ammar A., Roseau S., Butlen D. Pharmacological characterization of V1a vasopressin receptors in the rat cortical collecting duct // Am. J. Physiol. 1992. - V. 262. - N. 4. - Pt. 2. - P. F546-F553.

43. Andersen L., Keiding N. Size distribution of neurosecretory granules in the supraoptic nucleus and the neurohypophysis of water-loaded, normal and water-deprived rats //Acta Anat. (Basel). 1988. - V. 132. - N. 2. - P. 89-95.

44. Andreasen F., Hansen U., Husted S.E., Mogensen C.E. The influence of intravenous furosemide on the renal excretion pattern of protein and protein degradation products //Acta Pharmacol. Toxicol. (Copenh). 1984. - V. 54. - N. 5. -P. 389-393.

45. Aperia A., Broberger O., Ericsson N.O., Feychting H. Renal function in man during transition from hydropenia to water diuresis with superimposed mannitol load //Acta Physiol. Scand. 1969. - V. 77. - N. 4. - P. 429-438.

46. Arima S. Role of angiotemsin II and endogenous vasodilators in the control of glomerular hemodynamics // Clin. Exp. Nephrol. 2003. - V. 7. - N. 3. - P. 172178.

47. Arisz L., Andres G.A., Brentjens J.R. The morphological basis of the glomerular permeability to proteins // Ric. Clin. Lab. 1977. - V. 7. - N. 4. - P. 312327.

48. Asanuma K., Mundel P. The role of podocytes in glomerular pathobiology // Clin. Exp. Nephrol. 2003. - V. 7. - N. 4. - P. 255-259.

49. Atherton J.C., Hai M.A., Thomas S. Effects of water diuresis and osmotic (mannitol) diuresis on urinary solute excretion by the conscious rat // J. Physiol. -1968. V. 197. - N. 2. - P. 395-410.r

50. Babal P., Pechanova O., Bernatova I. Long-term administration of D-NAME induces hemodynamic and structural changes in the cardiovascular system // Physiol. Res. .- 2000. -V. 49. N. 1. - P. 47-54.

51. Bachmann S., Dawnay A.B., Bouby N., Bankir L. Tamm-Horsfall protein excretion during chronic alterations in urinary concentration and protein intake in the rat// Ren. Physiol. Biochem. 1991. -V. 14. - N. 6. - P. 236-245.

52. Baines R.J., Brunskill N.J. The molecular interactions between filtered proteins and proximal tubular cells in proteinuria // Nephron. Exp. Nephrol. 2008. -V. 110.-N. 2.-P. e67-e71.

53. Bak M., Shalmi M., Petersen J.S., Poulsen L.B., Christensen S. Effects of angiotensin-converting enzyme inhibition on renal adaptations to acute furosemide administration in conscious rats II J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. - V. 266. - N. 1. -P. 33-40.

54. Bakris G.L. Microalbuminuria: what is it? Why is it important? What should be done about it? // J. Clin. Hypertens. (Greenwich). 2001. - V. 3. - N. 2. - P. 99102.

55. Bankir L. Antidiuretic action of vasopressin: quantitative aspects and interaction between V1a and V2 receptor-mediated effects II Cardiovasc. Res. 2001. -V. 51.-N. 3.-P. 372-390.

56. Bardoux P., Bruneval P., Heudes D., Bouby N., Bankir L. Diabetes-induced albuminuria: role of antidiuretic hormone as revealed by chronic V2 receptor antagonism in rats // Nephrol. Dial. Transplant. 2003. - V. 18. - N. 9. - P. 1755-1763.

57. Batuman V., Guan S. Receptor-mediated endocytosis of immunoglobulin light chains by renal proximal-tubule cells // Am. J. Physiol. 1997. - V. 272. - N. 4. -Pt. 2.-P. F521-F530.

58. Baylis C., Mitruka B., Deng A. Chronic blockade of nitric oxide synthesis in the rat produces systemic hypertension and glomerular damage // J. Clin. Invest. -1992. -V. 90.-N. 1. P. 278-281.

59. Baylis C., Qiu C. Importance of nitric oxide in the control of renal hemodynamics // Kidney Int. 1996. -V. 49. - N. 6. - P. 1727-1731.

60. Bazzi C., Petrini C., Rizza V., Arrigo G., D'Amico G. A modern approach to selectivity of proteinuria and tubulointerstitial damage in nephrotic syndrome // Kidney Int. 2000. - V. 58. - N. 4. - P. 1732-1741.

61. Bentzel C.J., Tourville D.R., Parsa B., Tomasi T.B. Jr. Bidirectional transport of horseradish peroxidase in proximal tubule of Necturus kidney // J. Cell. Biol. -1971.- V. 48. N. 1.-P. 197-202.

62. Bernard A., Amor A.O., Viau C., Lauwerys R. The renal uptake of proteins: a nonselective process in conscious rats // Kidney Int. 1988. - V. 34. - N. 2. - P. 175185.

63. Blantz R.C., Gabbai F.B., Peterson O., Wilson C.B., Kihara I., Kawachi H„ Shimizu F., Yamamoto T. Water and protein permeability is regulated by the glomerular epithelial slit diaphragm // J. Am. Soc. Nephrol. -1994. V. 4. - N. 12. - P. 1957-1964.

64. Blouch K., Deen W.M., Fauvel J.P., Bialek J., Derby G., Myers B.D. Molecular configuration and glomerular size selectivity in healthy and nephrotic humans // Am. J. Physiol. 1997. - V. 273. - N. 3. - Pt. 2. - P. F430-F437.

65. Bolignano D:, Coppolino G., Criseo M., Campo S:, Romeo A., Buemi M. Aquaretic agents: what's beyond the treatment of hyponatremia? // Curr. Pharm. Des. 2007. - V. 13. - N. 8. - P. 865-871.

66. Bouby N., Ahloulay M., Nsegbe E., Dechaux M., Schmitt F., Bankir L. Vasopressin increases glomerular filtration rate in conscious rats through its antidiuretic action //J: Am. Soc. Nephrol. 1996. -V. 7. - N. 6. - P. 842-851.

67. Brenner B.M., Lawler E.V., Mackenzie H.S. The hyperfiltration theory: a paradigm shift in nephrology// Kidney Int. 1996. -V. 49. - N. 6. - P. 1774-1777.

68. Bridges C.R. Jr., Rennke H.G., Deen W.M., Troy J.L., Brenner B.M. Reversible hexadimethrine-induced alterations in glomerular structure and permeability // J. Am. Soc. Nephrol. -1991. V. 1. - N. 9. - P. 1095-1108.

69. Brown D., Nielsen S. Cell biology of vasopressin action. In: Brenner and Rector's The Kidney, 8th ed. Philadelphia: Saunders, Elsevier, 2008. - Vol. 1. - P. 280-307.

70. Brunskill N.J. Molecular interactions between albumin and proximal tubular cells // Exp. Nephrol. 1998. -V. 6. - N. 6. - P. 491-495.

71. Capasso G., Mollica F., Saviano C., De Santo N.G. Tubule effects of glomerular hyperfiltration: an integrated view // Semin. Nephrol. 1995. - V. 15. - N. 5.-P. 419-425.

72. Carone F.A., Peterson D.R., Oparil S., Pullman T.N. Renal tubular transport and catabolism of proteins and peptides // Kidney Int. 1979. - V. 16. - N. 3. - P. 271-278.

73. Cavallone D., Malagolini N., Serafini-Cessi F. Mechanism of release of urinary Tamm-Horsfall glycoprotein from the kidney GPI-anchored counterpart // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - V. 280. - N. 1. - P. 110-114.

74. Cavarape A., Bauer J., Bartoli E., Endlich K., Parekh N. Effects of angiotensin II, arginine vasopressin and tromboxane A2 in renal vascular bed: role of rho-kinase // Nephrol. Dial. Transplant. 2003. - V. 18. - N. 9. - P. 1764-1769.

75. Chan Y.L., Straus W. Influence of the tubular flow rates on the endocytic uptake and the excretion of horseradish peroxidase by rat kidney // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980. - V. 93. - N. 1. - P. 271-277.

76. Christensen E.I., Birn H. Megalin and cubilin: multifunctional endocytic receptors // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2002. - V. 3. - N. 4. - P. 256-266.

77. Christensen E.I., Birn H. Megalin and cubilin: synergistic endocytic receptors in renal proximal tubule // Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2001. - V. 280. -N. 4. - P. F562-F573.

78. Christensen E.I., Birn H. Renal handling of albumin in normal rat // Kidney Int. 2000. - V. 57. - N. 3. - P. 1207-1209.

79. Christensen E.I., Gburek J. Protein reabsorption in renal proximal tubule-function and dysfunction in kidney pathophysiology // Pediatr. Nephrol. 2004. - V. 19. - N. 7. - P. 714-721.

80. Christensen E.I., Rennke H.G., Carone F.A. Renal tubular uptake of protein: effect of molecular charge // Am. J. Physiol. 1983. - V. 244. - N. 4. - P. F436-F441.

81. Christensen S., Petersen J.S. Effects of furosemide on renal haemodynamics and proximal tubular sodium reabsorption in conscious rats // Br. J. Pharmacol. 1988. - V. 95. - N. 2. - P. 353-360.

82. Christensen S., Petersen J.S., Steiness E., Andreasen F. Dose dependence of proximal and distal tubular effects of furosemide in conscious rats // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1987. -V. 241. - N. 3. - P. 987-993.

83. Cojocel C., Franzen-Sieveking M., Beckmann G., Baumann K. Inhibition of renal accumulation of lysozyme (basic low molecular weight protein) by basic proteins and other basic substances // Pflugers Arch. 1981. - V. 390. - N. 3. - P. 211-215.

84. Cojocel C., Franzen-Sieveking M., Berndt W., Baumann K. Dependence of renal protein reabsorption on glomerular filtration rate and infusion time // Pflugers Arch. 1984. - V. 402. - N. 1. - P. 34-38.

85. Cojocel C., Maita K., Baumann K., Hook J.B. Renal processing of low molecular weight proteins // Pflugers Arch. 1984. - V. 401. - N. 4. - P. 333-339.

86. Comper W.D., Osicka T.M., Russo L.M. Renal filtration, transport, and metabolism of albumin and albuminuria. In: Seldin and Giebisch's The Kidney. Physiology and pathophysiology. Amsterdam: Elsevier, 2008. - Vol. 1. - P. 18512112.

87. Conklin D.J., Smith M.P., Olson K.R. Pharmacological characterization of arginine vasotocin vascular smooth muscle receptors in the trout (Oncorhynchus mykiss) in vitro // Gen. Comp. Endocrinol. 1999. - V. 114. - N. 1. - P. 36-46.

88. D'Amico G., Bazzi C. Pathophysiology of proteinuria // Kidney Int. 2003. -V. 63. - N. 3. - P. 809-825.

89. Davies R.O., Gomez H.J., Irvin J.D., Walker J.F. An overview of the clinical pharmacology of enalapril // Br. J. Clin. Pharmacol. 1984. - V. 18. - Suppl. 2. - P. 215S-229S.

90. Decker B., Reale E. The glomerular filtration barrier of the kidney in seven vertebrates classes. Comparative morphological and histochemical observations // Eur. J. Basic. Appl. Histochem. -1991. V. 35. - N. 1. - P. 15-36.

91. Deen W.M. What determines glomerular capillary permeability? // J. Clin. Invest.-2004.-V. 114. N. 10.-P. 1412-1414.

92. Deen W.M., Lazzara M.J., Myers B.D. Structural determinants of glomerular permeability //Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2001. - V. 281. - N. 4. - P. F579-F596.

93. Deen W.M., Satvat B. Determinants of the glomerular filtration of proteins // Am. J. Physiol. -1981,-V. 241.-N. 2.-P. F162-F170.

94. Dimmitt S.B., Lindquist T.L., Mamotte C.D., Burke V., Beilin L.J. Urine albumin excretion in healthy subjects // J. Hum. Hypertens. 1993. - V. 7. - N. 3. - P. 239-243.

95. Dufawa J., Kokot M., Kokot F. Wplyw furosemidu, propranololu i nifedypiny na wydalanie bialka Tamma-Horsfalla z moczem u chorych na nadcisnienie tetnicze // Pol. Arch. Med. Wewn. 1992. - T. 88. - N. 4. - S. 212-218.

96. Edwards A., Daniels B.S., Deen W.M. Ultrastructural model for size selectivity in glomerular filtration // Am. J. Physiol. 1999. - V. 276. - N. 6. - Pt. 2. - P. F892-F902.

97. Edwards R.M., Trizna W., Kinter L.B. Renal microvascular effects of vasopressin and vasopressin antagonists // Am. J. Physiol. 1989. - V. 256. - N. 2. -Pt. 2. - P. F274-F278.

98. Elger B., Ruhs H., Hentschel H. Glomerular permselectivity to serum proteins in rainbow trout (Salmo gairdneri) // Am. J. Physiol. 1988. - V. 255. - N. 3. Pt. 2. - P. R418-R423.

99. Ellison D.H., Wilcox C.S. Diuretics. In: Brenner and Rector's The Kidney, 8th ed. Philadelphia: Saunders, Elsevier, 2008. - Vol. 2. - P. 1646-1678.

100. Farquhar M.G. The glomerular basement membrane: not gone, just forgotten // J. Clin. Invest. 2006. - V. 116. - N. 8. - P. 2090-2093.

101. Ferreira C., Povoa R., Kasinski N., Murad N., Mosa O., Ferreira Filho C., Ferreira M. Enalapril e protecao do miocardio ao estresse pelo frio // Arq. Bras. Cardiol. -1992. V. 58. - N. 6. - P. 457-460.

102. First M.R., Patel V.B., Pesce A.J., Bramlage R.J., Pollak V.E. Albumin excretion by the kidney: the effects of osmotic diuresis // Nephron. 1978. - V. 20. -N. 3.-P. 171-175.

103. Fitzgibbon W.R., Webster S.K., Imamura A., Ploth D.W., Hutchison F.N. Effect of dietary protein and enalapril on proximal tubular delivery and absorption of albumin in nephrotic rats //Am. J. Physiol. 1996. - V. 270. - N. 6. - Pt. 2. - P. F986-F996.

104. Fujihara C.K., Sena C.R., Malheiros D.M., Mattar A.L., Zatz R. Short-term nitric oxide inhibition induces progressive nephropathy after regression of initial renal injury//Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2006. - V. 290. - N. 3. - P. F632-F640.

105. Fujisawa G., Ishikawa S., Tsuboi Y., Okada K., Saito T. Therapeutic efficacy of non-peptide ADH antagonist OPC-31260 in SIADH rats // Kidney Int. -1993.-V. 44.-N. 1.-P. 19-23.

106. Gekle M. Renal tubule albumin transport//Annu. Rev. Physiol. 2005. - V. 67. - P. 573-594.

107. Ginsberg J.M., Chang B.S., Matarese R.A., Garella S. Use of single voided urine samples to estimate quantitative proteinuria // N. Engl. J. Med. 1983. - V. 309. -N. 25. - P. 1543-1546.

108. Goldsmith S.R., Francis G.S., Cowley A.W. Jr. Arginine vasopressin and the renal response to water loading in congestive heart failure // Am. J. Cardiol. -1986. V. 58. - N. 3. - P. 295-299.

109. Goldspink D.F., Kelly F.J. Protein turnover and growth in the whole body, liver and kidney of the rat from the foetus to senility // Biochem. J. 1984. - V. 217. -N. 2. - P. 507-516.

110. Good J.M., Brady A.J., Noormohamed F.H., Oakley C.M., Cleland« J.G. Effect of intense angiotensin II suppression on the diuretic response to furosemide during chronic ACE inhibition // Circulation. -1994. V. 90. - N. 1. - P. 220-224.

111. Gross M.L., Hanke W., Koch A., Ziebart H„ Amann K„ Ritz E. Intraperitoneal protein injection in the axolotl: the amphibian kidney as a novel model to study tubulointerstitial activation // Kidney Int. 2002. - V. 62. - N. 1. - P. 51-59.

112. Guarnieri G., lanche M., Lin S. Renal enzyme and protein excretion after induction of a diuresis // Br. Med. J. -1979. -V. 2. N. 6181. - P. 50-51.

113. Guidi E., Giglioni A., Cozzi M.G., Minetti E.E. Which urinary proteins are decreased after angiotensin converting-enzyme inhibition? // Ren. Fail. 1998. - V. 20. - N. 2. - P. 243-248.

114. Gunduz F., Kuru O., Senturk U.K. Effect of nitric oxide on exercise-induced proteinuria in rats // J. Appl. Physiol. 2003. - V. 95. - N. 5. - P. 1867-1872.

115. Haraldsson B., Sorensson J. Why do we not all have proteinuria? An update of our current understanding of the glomerular barrier // News Physiol. Sci. -2004. -V. 19. P. 7-10.

116. Harry G.J., Sills R., Schlosser M.J., Maier W.E. Neurodegeneration and glia response in rat hippocampus following nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) // Neurotox. Res. -2001. -V. 3. N. 3. - P. 307-319.

117. Houser M.T. The effect of hydropenia and oral water loading on renal lysozyme handling and N-acetyl-beta-D-glucosaminidase excretion in man // Ann. Clin. Biochem. 1986. - V: 23. - Pt. 4. - P. 453-457.

118. Hoyer J.R., Seiler M.W. Pathophysiology of Tamm-Horsfall protein // Kidney Int. 1979. -V. 16. - N. 3. - P. 279-289.

119. Hunsicker L.G., Shearer T.P., Shaffer S.J. Acute reversible proteinuria induced by infusion of the polycation hexadimethrine // Kidney Int. 1981. - V. 20. -N. 1. - P. 7-17.

120. Ichimura K., Kurihara H., Sakai T. Actin filament organization of foot processes in vertebrate glomerular podocytes // Cell Tissue Res. 2007. - V. 329. -N. 3. - P. 541-557.

121. Imbert-Teboul M., Champigneulle A., Siga E. Segmental distribution of V1a-and V2-receptor mediated effects along the nephron. In: Vasopressin / Ed. by P. Gross, D. Richter, G.L. Robertson. Paris: John Libbey Eurotext, 1993. - P. 275-287.

122. Imhof P.R., Hushak J., Schumann G., Dukor P., Wagner J., Keller H.M. Excretion of urinary casts after the administration of diuretics // Br. Med. J. 1972. -V. 2. - N. 5807. - P. 199-202.

123. Isbil-Buyukcoskun N., Gulec G. Effects of intracerebroventricularly injected glucagon-like peptide-1 on cardiovascular parameters; role of central cholinergic system and vasopressin // Regul. Pept. 2004. - V. 118. - N. 1-2. - P. 33-38.

124. Iwasaki Y., Gaskill M.B., Robertson G.L. Adaptive resetting of the volume control of vasopressin secretion during sustained hypovolemia // Am. J. Physiol. -1995. -V. 268. N. 2. - Pt. 2. - P. R349-R357.

125. Jackson E.K. Vasopressin and other agents affecting the renal conservation of water. In: The pharmacological basis of therapeutics / Ed. by J.G. Hardman, A.G. Gilman, L.E. Limbird. NY: McGraw Hill, 1995. - P. 715-731.

126. Jakobsen J.A., Nossen J.O., Jorgensen N.P., Berg K.J. Renal tubular effects of diuretics and X-ray contrast media. A comparative study of equimolar doses in healthy volunteers // Invest. Radiol. -1993. V. 28. - N. 4. - P. 319-324.

127. Jochem J. Involvement of arginine vasopressin in endogenous central histamine-induced reversal of critical haemorrhagic hypotension in rats // Inflamm. Res. 2004. - V. 53. - N. 7. - P. 269-276.

128. Jung K., Pergande M., Porstmann B., Porstmann T. Diuresis-dependent excretions of low-molecular mass proteins in urine: beta-2-microglobulin, lysozyme, and ribonuclease // Scand. J. Clin. Lab. Invest. -1988. V. 48. - N. 1. - P. 33-37.

129. Kakigi A., Takeda T., Sawada S., Taguchi D. Antidiuretic hormone and osmolality in isosorbide therapy and glycerol test // ORL J. Otorhinolaryngol. Relat. Spec. 2006. - V. 68. - N. 5. - P. 279-282.

130. Kamoi K., Sato F., Arai O., Ishibashi M., Yamaji T. Effects of plasma volume and osmolality on secretion of atrial natriuretic peptide and vasopressin in man. //Acta Endocrinol. (Copenh). 1988. -V. 118. - N. 1. - P. 51-58.

131. Kawachi H., Miyauchi N., Suzuki K., Han G.D., Orikasa M., Shimizu F. Role of podocyte slit diaphragm as a filtration barrier // Nephrology (Carlton). 2006.- V. 11. N. 4. - P. 274-281.

132. Kerjaschki D., Farquhar M.G. The pathogenic antigen of Heymann nephritis is a membrane glycoprotein of the renal proximal tubule brush border // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982. -V. 79. - N. 18. - P. 5557-5561.

133. Kone B.C., Baylis C. Biosynthesis and homeostatic roles of nitric oxide in the normal kidney//Am. J. Physiol. 1997. -V. 272. - N. 5. - Pt. 2. - P. F561-F578.

134. Koväcs L., Lichardus B. Vasopressin: Disturbed secretion and its effects. -Dordrecht: Klüwer Acad. Publ., 1989.

135. KumarS., Muchmore A. Tamm-Horsfall protein-uromodulin (1950-1990) // Kidney Int. 1990. -V. 37. - N. 6. - P. 1395-1401.

136. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. -1970. V. 227. - N. 5259. - P. 680-685.

137. Lazzara M.J., Deen W.M. Model of albumin reabsorption in the proximal tubule //Am. J. Physiol. Renal. Physiol: 2007. - V. 292. - N. 1. - P. F430-F439.

138. Leyssac P.P., Holstein-Rathlou N.H., Skott O. Renal blood flow, early distal sodium, and plasma renin concentrations during osmotic diuresis // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2000. - V. 279. - N. 4. - P. R1268-R1276.

139. Lorimer D.W., Hakanson N.E., Pion P.D., Merideth, R.E. The effect of intravenous mannitol or oral glycerol on intraocular pressure in dogs // Cornell. Vet. -1989. V. 79. - N. 3. - P. 249-258.

140. Lund U., Rippe A., Venturoli D., Tenstad O., Grubb A., Rippe B. Glomerular filtration rate dependence of sieving of albumin and some neutral proteins in rat kidneys //Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2003. - V. 284. - N. 6. - P. F1226-F1234.

141. MaackT., Johnson V., Kau S.T., Figueiredo J., Sigulem D. Renal filtration, transport, and metabolism of low-molecular-weight proteins: a review // Kidney Int. -1979. V. 16. - N. 3. - P. 251-270.

142. Maack T., Kinter W.B. Transport of protein by flounder kidney tubules during long-term incubation //Am. J. Physiol. -1969. -V. 216. N. 5. - P. 1034-1043.

143. Manning M., Sawyer W.H. Discovery, development, and some uses of vasopressin and oxytocin antagonists // J. Lab. Clin. Med. 1989. - V. 114. - N. 6. -P. 617-632:

144. Mattar A.L., Machado F.G., Fujihara C.K., Malheiros D.M., Zatz R. Persistent hypertension and progressive renal injury induced by salt overload after short term nitric oxide inhibition. // Clinics (Sao Paulo). 2007. - V. 62. - N. 6. - P. 749-756.

145. Mayinger B., Hensen J. Nonpeptide vasopressin antagonists: a new group of hormone blockers entering the scene // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 1999. -V. 107. - N. 3. - P. 157-165.

146. Mazanti I., Hermann K.L., Nielsen A.H., Poulsen K. Ultrafiltration of renin in the mouse kidney studied by inhibition of tubular protein reabsorption with lysine // Clin. Sci. (Lond). 1988. -V. 75. - N. 3. - P. 331-336.

147. McLean E., Ash R. The time-course of appearance and net accumulation of horseradish peroxidase (HRP) presented orally to rainbow trout Salmo gairdneri (Richardson) // Comp. Biochem. Physiol. A. 1987. - V. 88. - N. 3. - P. 507-510.

148. Milton A., Hellfritzsch M., Christensen E.I. Basolateral binding and uptake of 125-l-insulin in proximal tubular cells after peritubular extraction in the avian kidney // Diabetes Res. 1988. -V. 7. - N. 4. - P. 189-195.

149. Miyai T., Ogata M. Changes in the concentrations of urinary proteins after physical exercise //Acta Med. Okayama. 1990. -V. 44. - N. 5. - P. 263-266.

150. Mogensen C.E. Introduction: nature of microalbuminuria, proteinuria, and progressive renal disease // J. Diabetes Complications. 1995. - V. 9. - N. 1. - P. 2-6.

151. Mogensen C.E., Soiling K. Studies on renal tubular protein reabsorption: partial and near complete inhibition by certain amino acids // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1977. - V. 37. - N. 6. - P. 477-486.

152. Mogensen C.E., Vittinghus E., Soiling K. Increased urinary excretion of albumin, light chains, and beta-2-microglobulin after intravenous arginine administration in normal man // Lancet. 1975. - V. 2. - N. 7935. - P. 581-583.

153. Narita I., Border W.A., Ketteler M., Ruoslahti E., Noble N.A. L-arginine may mediate the therapeutic effects of low protein diets // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1995. V. 92. - N. 10. - P. 4552-4556.

154. Newman D.J., Pugia M.J., Lott J.A., Wallace J.F., Hiar A.M. Urinary protein and albumin excretion corrected by creatinine and specific gravity // Clin. Chim. Acta. 2000. - V. 294. - N. 1 -2. - P. 139-155.

155. Ogata S., Sharyo S., Hinman D.J., Manabe S. Renal effects of 26-week administration of olmesartan medoxomil/hydrochlorothiazide in rats // J. Toxicol. Sci. -2004.-V. 29.-N. 1.-P. 37-46.

156. Ohlson M., Sorensson J., Lindstrom K., Blom A.M., Fries E., Haraldsson B. Effects of filtration rate on the glomerular barrier and clearance of four differently shaped molecules //Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2001. - V. 281. - N. 1. - P. F103-F113.

157. Okusa M.D., Ellison D.H. Physiology and pathophysiology of diuretic action. In: Seldin and Giebisch's The Kidney. Physiology, and pathophysiology. -Amsterdam: Elsevier, 2008. Vol. 1. - P. 1051-1094.

158. Oliver J.D. 3rd, Anderson S., Troy J.L., Brenner B.M., Deen W.H. Determination of glomerular size-selectivity in the normal rat with Ficoll // J Am. Soc. Nephrol. 1992 - V. 3. - N. 2. - P. 214-228.

159. Olivetti G., Kithier K., Giacomelli F., Wiener J. Glomerular permeability to endogenous proteins in the rat: effects of acute hypertension // Lab. Invest. 1981 -V. 44.-N. 2.-P. 127-137.

160. O'Reilly D.S., Parry E.S., Whicher J.T. The effects of arginine, dextran and Haemaccel infusions on urinary albumin, beta-2-microglobulin-and N-acetyl-beta-D-glucosaminidase // Clin. Chim. Acta. 1986. - V. 155. - N. 3. - P. 319-327.

161. Orsonneau J.L., Douet P., Massoubre C., Lustenberger P., Bernard S. An improved pyrogallol red-molybdate method for determining total urinary protein // Clin. Chem. 1989. - V. 35. - N. 11. - P. 2233-2236.

162. Ortiz M.C., Atucha N.M., Lahera V., Vargas F., Quesada T., Garcia-Estan J. Importance of nitric oxide and prostaglandins in-the control of rat renal papillary blood flow // Hypertension. 1996. - V. 27. - N. 3. Pt. 1. - P. 377-381.

163. Ottosen P.D. Reversible peritubular binding of a cationic protein (lysozyme) to flounder kidney tubules // Cell Tissue Res. 1978. - V. 194. - N. 2. - P. 207-218.

164. Ottosen P.D., Madsen K.M., Bode F., Baumann K., Maunsbach A.B. Inhibition of protein reabsorption in the renal proximal tubule by basic amino acids // Ren. Physiol. 1985. - V. 8. - N. 2. - P. 90-99.

165. Ottosen P.D., Maunsbach A.B. Transport of peroxidase in flounder kidney tubules studied by electron microscope histochemistry // Kidney Int. 1973. - V. 3. -N. 5.-P. 315-326.

166. Palm C., Pistrosch F., Herbrig K., Gross P. Vasopressin antagonists as aquaretic agents for the treatment of hyponatremia // Am. J. Med. 2006. - V. 119. -N. 7. -Suppl. 1. - P. S87-S92.

167. Park C.H., Maack T. Albumin absorption and catabolism by isolated perfused proximal convoluted tubules of the rabbit // J. Clin. Invest. 1984. -V. 73. -N. 3. - P. 767-777.

168. Park F., Mattson D.L., Skelton M.M., Cowley A.W. Jr. Localization of the vasopressin V1a and V2 receptors within the renal cortical and medullary circulation // Am. J. Physiol. 1997. - V. 273. - N. 1. - Pt. 2. - P. R243-R251.

169. Pasternack A., Pettersson E., Klockars M. Effect of furosemide on the urinary excretion of some plasma proteins // Nephron. 1978. - V. 22. - N. 4-6. - P. 551-557.

170. Pechanova O., Bernatova I., Babal P. Structural alterations in the heart after long-term L-NAME and D-NAME treatment // Gen. Physiol. Biophys. 1999. - V. 18.-Suppl. 1.-P. 6-9.

171. Peek W.D., McMillan D.B. Ultrastructure of the tubular nephron of the garter snake Thamnophis sirtalis. // Am. J. Anat. 1979. - V. 154. - N. 1. - P. 103127.

172. Phillips E.M., Butler T., Baylis P.H. Osmoregulation of vasopressin and thirst: comparison of 20% mannitol with 5% saline as osmotic stimulants in healthy man // Clin. Endocrinol. (Oxf). 1994. - V. 41. - N. 2. - P. 207-212.

173. Pillay V.K., Gandhi V.C., Sharma B.K., Smith E.C., Dunea G. Effect of hydration and furosemide given intravenously on proteinuria // Arch. Intern. Med. -1972.-V. 130.-N. 1,-P. 90-92.

174. Pollock C.A., Poronnik P. Albumin transport and processing by the proximal tubule: physiology and pathophysiology // Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. -2007. V. 16. - N. 4. - P. 359-364.

175. Poortmans J., Dewancker A., Dorchy H. Urinary excretion of total protein, albumin and beta-2-microglobulin during exercise in adolescent diabetics // Biomedicine. -1976. V. 25. - N. 8. - P. 273-274.

176. Poortmans J.R., Haralambie G. Biochemical changes in a 100 km run: proteins in serum and urine // Eur. J. Appl. Physiol. Occup. Physiol. 1979. - V. 40. -N. 4. - P. 245-254.

177. Poortmans J.R., Rampaer L., Wolfs J.C. Renal protein excretion after exercise in man // Eur. J. Appl. Physiol. Occup. Physiol. 1989. - V. 58. - N. 5. - P. 476-480.

178. Price C.P., Newall R.G., Boyd J.C. Use of protein: creatinine ratio measurements on random urine samples for prediction of significant proteinuria: a systematic review// Clin. Chem. 2005. - V. 51. - N. 9. - P. 1577-1586.

179. Qiu C., Muchant D., Beierwaltes W.H., Racusen L., Baylis C. Evolution of chronic nitric oxide inhibition hypertension: relationship to renal function II Hypertension. -1998. -V. 31. N. 1. - P. 21-26.

180. Reale E., Luciano L., Kuhn K., Stolte H., Brod J. Glomerular basement membrane and mesangial matrix: a comparative study in different vertebrates // Ren. Physiol. 1981. -V. 4. - N. 2-3. - P. 85-89.

181. Reckelhoff J.F., Zhang H., Srivastava K. Gender differences in development of hypertension in spontaneously hypertensive rats: role of the renin-angiotensin system // Hypertension. 2000. - V. 35. - N. 1. - Pt. 2. - P. 480-483.

182. Rees D.D., Palmer R.M., Schulz R., Hodson H.F., Moncada S. Characterization of three inhibitors of endothelial nitric oxide synthase in vitro and in vivo // Br. J. Pharmacol. 1990. - V. 101. - N. 3. - P. 746-752.

183. Remuzzi A., Puntorieri S., Mazzoleni A., Remuzzi G. Sex related differences in glomerular ultrafiltration and proteinuria in Munich-Wistar rats // Kidney Int. 1988. - V. 34. - N. 4. - P. 481 -486.

184. Rennke H.G., Denker B.M. Renal Pathophysiology: the essentials. -Baltimore Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2007. - 375 p.

185. Roald A. B., Tenstad 0., Aukland K. The effect of AVP-V receptor stimulation on local GFR in the rat kidney // Acta Physiol. Scand. 2004. - V. 182. -N. 2. - P. 197-204.

186. Roald A.B., Tenstad O., Aukland K. The effect of AVP-V2 receptor stimulation on local GFR in the rat kidney //Acta Physiol. Scand. 2000. - V. 168. -N. 2. - P. 351-359.

187. Rodewald R., Karnovsky M.J. Porous substructure of the glomerular slit diaphragm in the rat and mouse // J. Cell. Biol. -1974. V. 60. - N. 2. - P. 423-433.

188. Rosenblum W.I., Wei E.P., Kontos H.A. Dilation of rat brain arterioles by hypercapnia in vivo can occur even after blockade of guanylate cyclase by ODQ // Eur. J. Pharmacol. 2002. - V. 448. - N. 2-3. - P. 201-206.

189. Ruggenenti P., Remuzzi G. Time to abandon microalbuminuria? // Kidney Int. 2006. - V. 70. - N. 7. - P. 1214-1222.

190. Saemann M.D., Weichhart T., Horl W.H., Zlabinger G.J. Tamm-Horsfall protein: a multilayered defence molecule against urinary tract infection // Eur. J. Clin. Invest. 2005. -V. 35. - N. 4. - P. 227-235.

191. Schaffner A., Rodewald R. Glomerular permeability in the bullfrog Rana catesbeiana // J. Cell. Biol. 1978. - V. 79. - N. 2. - Pt. 1. - P. 314-328.

192. Scott W.N., Maude D.L., Shehadeh I., Solomon A.K. Inulin and albumin absorption from the proximal tubule in Necturus kidney // Science. 1964. - V. 146. -N. 3651.-P. 1588-1590.

193. Serafini-Cessi F., Malagolini N., Cavallone D. Tamm-Horsfall glycoprotein: biology and clinical relevance // Am. J. Kidney Dis. 2003. - V. 42. - N. 4. - P. 658676.

194. Shore A.C., Markandu N.D., Sagnella G.A., Singer D.R., Forsling M.L., Buckley M.G., Sugden A.L., MacGregor G.A. Endocrine and renal response to water loading and water,restriction in normal man // Clin. Sci. (Lond). 1988. - V. 75. - N. 2. -P. 171-177.

195. Smith H.W. The Kidney: Structure and function in health and disease. -NY: Oxford University Press, 1951. 1050 p.

196. Sorensson J., Ohlson M., Haraldsson B. A quantitative analysis of the glomerular charge barrier in the rat // Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2001. - V. 280.- N. 4. P. F646-F656.

197. Straus W. Altered reabsorption of protein by the renal cortex in rats treated with hypertonic saline or mannitol // J. Histochem. Cytochem. 1975. - V. 23. - N. 10.- P. 707-721.

198. Strieker E.M., Hoffmann M.L. Inhibition* of vasopressin secretion when dehydrated rats drink water // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol: 2005. -V. 289. - N. 5. - P. R1238-R1243.

199. Sumpio B.E., Maack T. Kinetics, competition, and selectivity of tubular absorption of proteins // Am. J. Physiol. 1982. - V: 243. - N. 4. - P. F379-F392.

200. Takahashi-lwanaga H. Comparative anatomy of the podocyte: A scanning electron microscopic study // Microsc. Res. Tech. 2002. - V. 57. - N. 4. - P. 196-202.

201. Tencer J., Frick I.M., Oquist B.W., Aim P., Rippe B. Size-selectivity of the glomerular barrier to high molecular weight proteins: upper size limitations of shunt pathways // Kidney Int. 1998. - V. 53. - N. 3. - P. 709-715.

202. Tenstad O., Williamson H:E. Effect of furosemide on local and zonal glomerular filtration rate in the rat kidney // Acta Physiol. Scand. 1995. - V. 155. - N. 1.-P. 99-107.

203. Thelle.K., Christensen E.I., Vorum H., Orskov H., Birn H. Characterization of proteinuria and tubular protein uptake in a new model of oral L-lysine administration in rats // Kidney Int. 2006. - V. 69. - N. 8. - P. 1333-1340.

204. Thongboonkerd V., Klein J.B., Pierce W.M., Jevans A.W., Arthur J.M. Sodium loading changes urinary protein excretion: a proteomic analysis // Am. J. Physiol. 2003. - V. 284. - N. 6. - P. F1155-F1163.

205. Tucker B.J., Rasch R., Blantz R.C. Glomerular filtration and tubular reabsorption of albumin in preproteinuric and proteinuric diabetic rats II J. Clin. Invest. 1993. - V. 92. - N. 2. - P. 686-694.

206. Venkatachalam M.A., Rennke H.G. The structural and molecular basis of glomerular filtration // Circ. Res. 1978. - V. 43. - N. 3. - P. 337-347.

207. Venturoli D., Rippe B. Ficoll and dextran vs. globular proteins as probes for testing glomerular permselectivity: effects of molecular size, shape, charge, and deformability // Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2005. - V. 288. - N. 4. - P. F605-F613.

208. Verroust P.J., Birn H., Nielsen R., Kozyraki R., Christensen E.I. The tandem endocytic receptors megalin and cubilin are important proteins in renal pathology // Kidney Int. 2002. - V. 62. - N. 3. - P. 745-756.

209. Viberti G.C., Mogensen C.E., Keen H„ Jacobsen F.K., Jarrett R.J., Christensen C.K. Urinary excretion of albumin in normal man: the effect of water loading//Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1982. - V. 42. - N. 2. - P. 147-157.

210. Vize P.D., Seufert D.W., Carroll T.J., Wallingford J.B. Model systems for the study of kidney development: use of the pronephros in the analysis of organ induction and patterning // Dev. Biol. 1997. - V. 188. - N. 2. - P. 189-204.

211. Waldherr R., Ritz E. Edmund Randerath (1899-1961): experimental proof for the glomerular origin of proteinuria // Kidney Int. 1999. - V. 56. - N. 4. - P. 15911596.

212. Watanabe N., Kamei S., Ohkubo A., Yamanaka M., Ohsawa S., Makino K., Tokuda K. Urinary protein as measured with a pyrogallol red-molybdate complex, manually and in a Hitachi 726 automated analyzer // Clin. Chem. 1986. - V. 32. - N. 8. - P. 1551-1554.

213. Weichhart T., Zlabinger G.J., Saemann M.D. The multiple functions of Tamm-Horsfall protein in human health and disease: a mystery clears up // Wien. Klin. Wochenschr. 2005. - V. 117. - N. 9-10. - P. 316-322.

214. Wibell L., Karlsson A. Urinary excretion of beta-2-microglobulin after the induction of a diuresis. A study in healthy subjects // Nephron. 1976. - V. 17. - N. 5. - P. 343-352.

215. Wiegmann T.B., Chonko A.M., Herron K., MacDougall M.L., Moore W.V. The effect of water loading on albumin excretion in type I diabetes mellitus // J. Diabet. Complications. 1989. -V. 3. - N. 4. - P. 187-190.

216. Wong L.L., Verbalis J.G. Vasopressin V2 receptor antagonists // Cardiovasc. Res. 2001. - V. 51. - N. 3. - P. 391-402.

217. Woods L.L., DeYoung D.R., Smith B.E. Regulation of renal hemodynamics after protein feeding: effects of loop diuretics //Am. J. Physiol. 1991. - V. 261. - N. 5. Pt. 2. - P. F815-F823.

218. Yalcin M., Savci V. Cardiovascular effects of centrally injected melittin in hemorrhaged hypotensive rats: the investigation of peripheral mechanisms // Neuropeptides. 2007. - V. 41. - N. 6. - P. 465-475.

219. Ylitalo P., Pasternack A., Kallio S., Vanttinen T., Metsa-Ketela T. Increased urinary protein excretion after intravenous injection of furosemide in man //Acta Med. Scand. 1980. - V. 208. - N. 4. - P. 279-283.

220. Youson J.H. Absorption and transport of ferritin and exogenous horseradish peroxidase in the opisthonephric kidney of the sea lamprey II. The tubular nephron // Cell Tissue Res. -1975. V. 157. - N. 4. - P. 503-516.

221. Youson J.H. Absorption and transport of ferritin and exogenous horseradish peroxidase in the opisthonephric kidney of the sea lamprey. I. The renal corpuscle // Can. J. Zool. 1975. -V. 53. - N. 5. - P. 571-581.

222. Zhou X., Vize P.D. Proximo-distal specialization of epithelial transport processes within the Xenopus pronephric kidney tubules // Dev. Biol. 2004. - V. 271.-N. 2.-P. 322-338.

Информация о работе

Кутина, Анна Вячеславовна
кандидата медицинских наук
Санкт-Петербург, 2009
ВАК 03.00.13

Диссертация

Сравнительное исследование экскреции белка почкой - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы