Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сравнительное биохимическое исследование кардиопротекторной активности средств метаболической коррекции при экспериментальном гипертиреозе

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Сравнительное биохимическое исследование кардиопротекторной активности средств метаболической коррекции при экспериментальном гипертиреозе"

На правахрукописи

Артамонова Александра Анатольевна

СРАВНИТЕЛЬНОЕ БИОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КАРДИОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ СРЕДСТВ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГИПЕРТИРЕОЗЕ

03.00.04. - Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Рязань - 2005

работа выполнена в 1 осударственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Макарова Валентина Григорьевна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Дубинина Инесса Ивановна кандидат медицинских наук, доцент Романов Борис Константинович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита состоится « »_2005 г. в_часов на заседании

Диссертационного совета Д 208.084.01 ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию» (390026, г. Рязань, ул. Шевченко, д. 34).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию» (390026, РФ, г. Рязань, ул. Высоковольтная, д. 9).

Автореферат разослан « »_2005г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета

кандидат биологических наук, доцент Е.А. Рязанова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы: Патология щитовидной железы является одной из самых актуальных современных медико-социальных проблем. Тиреоидные гормоны, оказывая влияние на широкий спектр метаболических процессов, в условиях гиперфункции щитовидной железы, вызывают полисистемные нарушения, среди которых важнейшее место занимает сердечная патология. Выявлено, что у больных гипертиреозом изменения в сердечной мышце обусловлены нарушением метаболической активности кардиомиоцитов (Г. А. Котова, 1992). Сердце - орган, чувствительный к действию гормонов щитовидной железы, и изменения в его работе могут быть обнаружены даже при небольших отклонениях плазменных концентраций тиреоидных гормонов от нормы (Е. Моркин, 1990; Т. Asahi et al, 2001; G.J. Kahaly, 2002). Комплекс метаболических расстройств, возникающих в связи с изменением уровня йодтиронинов, приводит к нарушению морфологического и функционального состояния миокарда (Л.С. Славина, 1979).

Одним из путей регуляции клеточного метаболизма является влияние гормонов на лизосомы. Лизосомальные ферменты участвуют в развитии метаболических нарушений при повреждении миокарда, и их активность в некоторой степени может отражать степень выраженности пагологических процессов. Изменение мембран лизосом, перераспределение форм внутри популяции лизо-сом являются одними из основных эффектов гормонов на лизосомальную систему (А.В. Дмитриев, Е.А. Строев, 1996). Ранее было обнаружено повышение активности лизосомальных ферментов при гипертиреозе в печени экперимен-тальных животных (A.S. Al-Jurf et al., 1982), повышение неседиментируемой активности катепсина Д в кардиомиоцитах, клетках скелетных мышц и печени (R.S. Decker, К. Wildenthal, 1981).

О степени повреждения сердечной мышцы также можно судить по изменению активности кардиоспсцифичсского фермента креатинкиназы MB сыворотки крови (F. Arrigo et al., 1991) и частоты сердечных сокращений. Тахикар-

дия — симптом, постоянно регистрируемый при введении гормонов щитовидной железы в эксперименте (Л.С. Славина, 1979).

В настоящее время является актуальной проблема доказательства орга-носпецифичности воздействия и сравнительного анализа эффективности лекарственных препаратов, стимулирующих метаболические процессы, способных оказать кардиопротекторное действие при гипертиреозе. Многочисленные исследования посвящены применению -блокаторов при данной патологии (I. Klein, 1988; К. Asayama et al., 1990; GJ. Kahaly, 2002).

Тем не менее, учитывая механизм действия и наличие серьезных побочных эффектов у данной группы лекарственных средств, необходимы новые подходы к лечению кардиальных нарушений при гиперфункции щитовидной железы. Метаболические препараты не оказывают влияния на основные гемо-динамические показатели, осуществляя свои эффекты на уровне клетки. Действие средств метаболической коррекции на сердце и другие органы-мишени гормонов щитовидной железы при гипертиреозе остается малоизученным, их использование в качестве кардиопротекторов при гипертиреозе ограниченно. Представляется актуальным изучение сравнительной эффективности средств, стимулирующих метаболические процессы, путем проведения биохимического исследования препаратов с различными механизмами цитопротекторного действия при экспериментальном гипертиреозе.

Цель исследования Изучить значение ферментной системы лизосом в механизмах цитопро-текторного действия ряда средств метаболической коррекции при экспериментальном гипертиреозе с учетом оргапоспецифичности воздействия и контроля функционального состояния миокарда.

Задачи исследования 1. Исследовать активность лизосомальных ферментов (катепсина Д, ДНКа-зы и ß-галактозидазы) в миокарде, печени и скелетных мышцах при экспериментальном гипертиреозе.

2. Выявить влияние карнигина, магнерота, мексидола, милдроната, тримета-зидина на активность лизосомальных ферментов в миокарде, печени, скелетных мышцах при указанной выше патологии.

3. Оценить состояние миокарда крыс по показателю активности креатинки-назы МБ сыворотки крови и частоте сердечных сокращений при экспериментальном гипертиреозе и на фоне назначения средств метаболической коррекции.

4. Изучить влияние исследуемых препаратов на уровень тироксина, трийод-тиронина и тиреотропина в сывортке крови.

5. Сравнить карнитин, магнерот, мексидол, милдронат, триметазидин по эффективности, органотропнюсти и в зависимости от схемы назначения.

Научная новизна

Впервые в сравнительном аспекте изучено влияние средств метаболической коррекции с разными механизмами цитопрогекторного действия на организм подопытных животных с экспериментальным гипертиреозом Показано дестабилизирующее влияние тироксина на лизосомальные мембраны в миокарде, печени и скелетных мышцах. Выявлены возможности эффективной коррекц-ции метаболических нарушений, вызванных избытком тиреоидных гормонов, препаратами: карнитин, магнерот, мексидол, милдронат, триметазидин; проведено их сравнительное исследование по биохимическим параметрам. Доказана целесообразность фармакологической коррекции кардиальных нарушений в условиях экспериментального гипертиреоза при помощи исследуемых препаратов. Впервые показано, что по выбранным критериям эффективности при экспериментальном гипертиреозе щученные препараты обладают сравнимым по выраженности кардиопрогекторным эффектом за исключением триметазидина и мексидола, которые проявляют наиболее выраженное мембранопротекторное действие в отношении мембран лизосом миокарда. Впервые установлено снижение уровня трийодтиронина на фоне введения магнерота, мексидола, милд-роната и триметазидина.

практическая значимость

Полученные результаты позволяют уточнить роль лизосомального аппарата в развитии патологических процессов и в повреждении органов-мишеней тиреоидных гормонов при гипертиреозе. По результатам исследования средства метаболической коррекции нормализуют состояние лизосомальных мембран в миокарде, печени и скелетных мышцах и уровень кардиоспецифичного фермента креатинкиназы MB, при этом существенно не влияя на частоту сердечных сокращений, что позволяет дополнить и уточнить сведения о механизмах действия изученных препаратов. Сравнительный анализ эффективности средств метаболической коррекции по выбранным биохимическим критериям позволяет обоснованно выполнять замену препаратов и индивидуализировать их назначение. Полученные данные могут учигываться при коррекции метаболических нарушений, вызванных гипертиреозом.

Апробация работы

Результаты проведенных исследований были представлены на 9-ой Международной Путинской школе-конференции молодых ученых «Биология -наука XXI века» (Пушино. 2005); XII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005). Апробация работы проведена на межкафедральном заседании кафедр биологической и биоорганической химии с курсом клинической лабораторной диагностики, фармакологии с курсом фармакотерапии ФПДО, фармакогнозии с курсом ботаники, факультетской терапии с курсами эндокринологии и функциональной диагностики, терапии ФПДО с курсом семейной медицины, внутренних болезней, ангиологии, сосудистой и оперативной хирургии ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию».

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Структура и объем работы

Диссертация (134 страницы текста) состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 206 источников (71 на русском и 135 на иностранных языках). Диссертация проиллюстрирована 18 таблицами и 20 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на 104 половозрелых белых нелинейных крысах-самках, синхронизированных по фазам менструального цикла, массой 150170г., содержащихся в стандартных условиях вивария. Экспериментальный ги-пертиреоз вызывали внутрибрюшинным введением L-тироксина (Берлин Хеми) в дозе 50 мкг/кг 1 раз в сутки в течение 10 дней (Е-А Строев и др., 1998). Животным опытных серий вводили следующие препараты: L-карнитин в дозе 25 мг/кг (Т.В. Кременецкая, 1996); магнерот в дозе 5 мг/кг; мексидол в дозе 50 мг/кг (Л.В. Кожура, 2003); милдронат в дозе 50 мг/кг (В.В. Орлов, 1999); триме-тавидин в дозе 5 мг/кг (E.Fartini, 1994). Контрольным группам вводили: внут-рибрюшинно 0,02 M раствор NaOH; внутрибрюшинно 0,02 М раствор NaOH и дистиллированную воду внутрь.

В соответствии с целью и задачами исследования схема экспериментов предусматривала формирование 13 серий животных: 2 серии контроля; 1 серия экспериментального гипертиреоза (или контроля патологии); 5 серий с назначением препаратов метаболической коррекции курсом в 10 дней и 5 серий с введением указанных препаратов курсом в 20 дней.

Исследуемые препараты назначали в течение 10 дней наряду с тироксином и в течение 20 дней (10 из которых до введения тироксина и 10 одновременно с тироксином). Карнитин вводили в желудок через зонд в виде 10% раствора. Магнерот вводили желудок через зонд в виде 12,5% водного раствора. Мексидол (5% раствор) вводили внутрибрюшинно. Милдронат (10% раствор)

«водили внутримышечно. Триметазидин вводили внутрь в виде 0,6% водного раствора.

В опыт брали по 8 животных. Забой проводили под эфирным наркозом. Кровь забирали из брюшной аорты в месте ее бифуркации. Сыворотку крови для радиоиммуннологического определения гормонов и исследования активности креатинкиназы MB получали после J 0-мшгутного центрифугирования крови при 3000 об/мин.

Для определения активности лизосомальных ферментов сердце, отмытое в физиологическом растворе, а также печень и скелетную мышцу (взятую из области бедра) измельчали и гомогенизировали на холоду в гомогенизаторе Hcidolph DIAX 900 (Германия) при 24000 об/мин в течение 60 сек в 0,25М растворе сахарозы, содержащем 1мМ ЭДТА (А.А. Покровский, В.А. Тутельян, 1976). Отношение массы органа к объему среды выделения составляло 1 : 10. Для отделения в полученном гомогенате ядер и не разрушенных при гомогенизации клеток его центрифугировали в течение 10 минут при 1000 g и температуре 4°С. Для отделения митохондриальной фракции, содержащей и лизосомы, супернатант 1 подвергали дополнительному центрифугированию в течение 30 минут при 20000 g. После отделения супернатанта 2 осадок ресуспендировали в равном по объему исходной среде выделения 0,25М растворе сахарозы, содержащем 0,1% тритон Х100 (седиментируемая активность). В супернатанте 2 определяли неседиментируемую активность лизосомальных ферментов (М.Ю. Кочуков, 1998) Общую активность ферментов рассчитывали как сумму седи-ментируемой и неседиментируемой активности лизосомальных ферментов. Коэффициент лабильности лизосомальных мембран рассчитывали для каждого фермента как отношение неседиментируемой активности фермента к общей.

Активность катепсина Д определяли методом Anson в модификации (A.J. Barret, J.T. Jingle, 1972). В качестве субстрата использовали денатурированный гемоглобин. Активность фермента выражали в нмоль тирозина / мг белка в минуту. Для определения активности ДНК-азы и Р-галактозидазы использовали метод, предложенный Покровским А.А. с соавторами (А.А. Покровский, А.И.

Арчаков, О.Н. Любимова, 1965). Активность ДНКазы оценивали по степени гидролиза ДНК и выражали в нмоль 5 АМФ / мг белка в минуту. Для определения активности Р-галактозидазы в качестве субстрата использовали п-нитрофенилгалактопиранозид. Активность фермента выражали в нмоль нитрофенола / мг белка в минуту. Белок определяли микробиуретовым методом (Г.А. Кочегов, 1980).

Креатинкиназу фракции MB сыворотки крови определяли спсктрофото-метрически на биохимическом анализаторе Humalyzer с использованием жидкого реагента на креатинкиназу MB фирмы Human (Германия) при 340 нм. Активность фермента выражали в U / L.

Электрокардиографию проводили под легким эфирным наркозом в день забоя с использованием аппаратно-программного комплекса «Варикард». Кар-диоинтервалы регистрировали в 1 отведении. Обработку данных проводили с использованием программы ISCIM, адаптированной для животных (Институт внедрения новых медицинских технологий «Рамена», г. Рязань). При обработке результатов использовали геометрическую модель, построенную на основе сплайновой интраноляции кластеров данных в пределах области определения, и нормальный закон распределения при экстраполяции данных за пределами области определения.

Сывороточный уровень гормонов исследовался в день забоя. Содержание тироксина, трийодтиронина и тиреотропного гормона измеряли радиоиммуно-

Т I b

логическим методом с использованием стандартных тест-систем на основе J (производство «Immunotech» Чехия) с дальнейшей обработкой полученных результатов на анализаторе «Иммунотест» (Москва) в ЦНИЛ РязГМУ.

Для статистической обработки полученных данных использовался следующий формат: медиана (нижний квартиль; верхний квартиль). Для проверки статистических гипотез о степени различия двух несвязанных выборок с отличным от нормального распределением использовался непараметрический критерий Манна-Уитни.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Влияние гормонов щитовидной железы на состояние лизосомального аппарата клеток миокарда, печени и скелетных мышц, уровень креатин-киназы MB сыворотки крови и частоту сердечных сокращений.

Рядом исследователей выявлено, что тиреоидные гормоны обладают дестабилизирующим действием на мембраны лизосом (Б.С. Касавина, 1983; К. Komosinska-Vassev, 2003). Изменение проницаемости мембран лизосом, активности лизосомалъных ферментов, представляет собой один из механизмов гормональной регуляции функций лизосомальной системы в частности и внутриклеточного метаболизма в целом.

В экспериментах на животных с гипертиреозом обнаружилось достоверное повышение неседиментируемой активности катепсина Д в печени на 42%, в скелетных мышцах на 102% и в миокарде на 233%, ДНКазы - на 126%, 326,4% и 509%, р-галактозидазы - на 53,8%, 92% и 230,4% соответственно, при сравнении с контролем. Седиментируемая активность катепсина Д возрастала в скелетных мышцах на 145,2%, в миокарде на 183%; р-галактозидазы - на 260% и 51,4%. Седиментируемая активность ДНКазы в скелетных мышцах увеличилась на 57,7% (табл.1)

При исследовании состояния лизосомальных мембран у контрольных животных коэффициент лабильности для катепсина Д составил в печени 0,58 (0,56; 0,60), в миокарде 0,76 (0,71; 0,78), в скелетных мышцах 0,50 (0,47; 0,52); для ДНКазы - 0,32 (0,29; 0,34), 0,27 (0,25; 0,29) и 0,36 (0,31; 0,38); для р-галактозидазы - 0,53 (0,49; 0,55), 0,76 (0,70; 0,78) и 0,989 (0,985; 0,992), соответственно. При определении коэффициента лабильности у животных с экспериментальным гипертиреозом обнаружилось его достоверное повышение в миокарде и печени (р<0,01), что свидетельствует о дестабилизации лизосомальных мембран. В скелетных мышцах при оценке активности катепсина Д и Р-галактозидазы достоверных изменений коэффициента лабильности по отношению к контролю не выявлено. В частности, коэффициент лабильности для катепсина Д в печени составил 0,62 (0,61; 0,64) в миокарде 0,81 (0,79; 0,85) в ске-

летных мышцах 0,42 (0,39; 0,45); для ДНКазы - 0,51 (0,48; 0,54), 0,61 (0,57; 0,65) и 0,69 (0,66; 0,73); для (3-галактозидазы - 0,75 (0,72; 0,78), 0,88 (0,85; 0,91) и 0,980 (0,976; 0,982), соответственно. Полученные результаты свидетельствуют о нарушении целостности лизосомальных мембран и выходе гидролаз из ли-зосом в клетках миокарда и печени. В скелетных мышцах увеличение коэффициента лабильности выявлено только для ДНКазы.

Таблица 1

Активность катепсина Д, ДНКазы и Р-галактозидазы в печени, скелетных мышцах и миокарде эутиреоидных и гипертиреоидных крыс

Контроль

Печень Сердце Мышцы

НСА Катенсин Д СА 2,02 (1,94; 2,09) 1,45(1,26; 1,68) 1,01 (0,69; 1,34) 0,31(0,15; 0.49) 0,88 (0,78; 0,96) 0,85 (0,80; 1,12)

СА ДНКаза СА 0,38 (0,27; 0,49) 0,80 (0,66; 0,85) 0,53 (0,46; 0,53) 1,40(1,29; 1,42) 0,41 (0,29; 0,61) 0,71 (0,52; 0,94)

НСА (З-галакгозидаза СА 1,04(0,71; 1,09) 0,91(0,81; 1,43) 0,23 (0,15; 0,31) 0,07(0,06; 0,09) 0,85 (0,73; 0,95) 0,010(0,008, 0,013)

Печень Сердце Мышцы

НСА КатепсинД СА 2,87 (2,50,2,98) * 1,74 (1,27,2,17) 3,37 (2,59; 4,65) * 0.76 (0,59,0,99) * 1,78 (1,56; 1,82) * 2,41 (1,78; 3,13)*

НСА ДНКаза СА 0,86 (0,78; 0,93) * 0,83 (0,74; 1,01) 2,26 (1,92; 2,61)* 1,42 (1,30; 1,53) 2,50 (2,37; 2,89) * 1,12(1,12; 1,37)*

НСА Ргалактозидаза СА 1,60(1,37; 1,8)* 0,62 (0,36, 0,86) 0,76 (0,73; 0,83)* 0,106(0,081,0,123)* 1,63 (1,31; 2,00)* 0,036(0,019,0,054)*

НСА - неседиментируемая активность, СА - седиментируемая активность. * - статистическая значимость в сравнении с контролем - р<0,01. Вопрос о механизме действия гиреоидных гормонов на мембраны лизо-сом окончательно не установлен. Вместе с тем можно предположить, что в развитии лабилизации мембран лизосом не исключается активация процессов пе-рекисного окисления липидов. Показано, что мышечная ткань при гипертиреозе подвергается повреждающему воздействию свободных радикалов (Т.И. Родио-

нова, 2003; К. Asayama, 1990). при анализе литературных данных было обна--ружено наличие взаимосвязи между процессами перекисного окисления липи-дов и изменением активности лизосомальных ферментов. Например, выявлено, что повышение активности свободной фракции ферментов лизосом, вызванное оксидантным стрессом, усиливает продукцию активных форм кислорода (М. Zhao et al., 2003). Brunk et al. (1995) предполагают, что повреждение мембран лизосом перекисью водорода может быть вызвано индуцированием внутрили-зосомальных окислительных реакций, катализируемых ионами железа.

Для анализа причин и механизмов дестабилизации мембран лизосом также представляют интерес данные о химическом составе лизосомальных мембран. Ранее было показано, что их проницаемость значительно повышается при таких состояниях, как голодание, недостаточность белка. Лизосомальный аппарат претерпевает выраженную активацию при метаболических ситуациях, связанных с преобладанием катаболических реакций (А.А. Покровский, 1976).

После курсового введения L-тироксина интактным животным уровень этого гормона в крови достоверно возрос в 4 раза, уровень трийодтиронина увеличился в 1,45 раза, при этом наблюдалось снижение содержания тиреотро-пина в 3,6 раза (р<0,01), что указывает на развитие гипертиреоза (табл. 2).

Активность креатинкиназы MB сыворотки крови у гипертиреоидных животных увеличилась на 136,5% по отношению к контролю (табл. 3). Подобное изменение свидетельствует о развитии выраженных деструктивных изменений в кардиомиоцитах.

При экспериментальном гипертиреозе наблюдалось увеличение частоты сердечных сокращений на 17% по отношению к контрольным животным (р<0,01), что свидетельствует об изменении функционального состояния миокарда, в частности, о развитии тахикардии. Повышение основного обмена при гипертиреозе предъявляет усиленные требования к сердечной мышце, но увеличение минутного объема происходит в основном за счет возрастания частоты сердечных сокращений (Л.С. Славина, 1979).

Таблица 2

Изменение уровня тироксина, трийодтиронина и ТТГ в сыворотке крови после курсового введения Ь-тироксина и на фоне применения средств

метаболической коррекции

Условия эксперимента Т3 т4 ТТГ

Контроль п-8 0,96 (0,84; 1,12) 43,53 (38,07, 50,54) 0,53 (0,28; 0,78)

Ь-тироксин 10 дней п-8 1,39 (1.23, 1,62) 176,26(162,79,192,08) 0,14(0,11,0,21)

Ь-тироксин 10 дней + карнитин 10 дней п-8 1,04 (0,82, 1,23) 199,23(180,16,225,73) 0,12 (0,11; 0,15)

Ь-тароксин 10 дней + карнитин 20 дней п-8 0,89 (0,73; 1,06) 199,28(181,66,213,75) 0,10(0,07; 0,11)

Ь-тироксин 10 дней+магнерот 10 дней п~Н 0,46 (0,37, 0,87) ** 145,68 (89,98,200,74) 0,23 (0,07; 0,38)

Ь-тироксин 10 дней + магнерот 20 дней п=8 1,05(1,02; 1,25) 208,14(196,40;219,38) 0,14 (0,09; 0,19)

Ь-тироксин 10 дней +■ мексидол 10 дней п-8 0,55 (0,47, 0,65)** 189,26(173,63;204,65) 0,11(0,10,0,12)

Ь-1ирок1.ик 10 дней + мексидол 20 дней п=8 0,66 (0,54; 0,73)** 179,07(163,01 ;224,53) 0,09 (0,06; 0,11)

Ь-тироксин 10 дней+милдронат 10 дней п=8 1,19 (1,02; 1,31) 144,27(122,40;167,93) 0,22 (0,13; 0,38)

Ь-тироксин 1Одней+милдронат 20 дней п^8 0,92 (0,79, 1,04)** 193,48(182,72;206,01) 0,14(0,09; 0,18)

Ь-тироксин10 дней +триметазидин 10 дней п-8 0,46 (0,36; 0,83) ** 177,49(155,34;192,79) 0,37 (0,17; 0,49)

Ь-тироксин 10 дней ттриметазидин 20 дней п=8 0,40 (0,29,0,47) ** 173,30(339,0; 183,96) 0,52 (0,42; 0,59) **

Статистическая значимость отмечена в сравнении с контролем патологии:

*-р<0,01; **-р<0,05.

2. Эффекты средств метаболической коррекции с различными механизмами цитопротекторного действия при экспериментальном гипертиреозе

Назначение средств метаболической коррекции с различными механизмами цитопротекторного действия - карнитина, магнерота, мексидола, милдро-нага, триметазидина вызывало нормализацию биохимических показателей в крови и исследуемых тканях.

Карнитин - препарат, обладающий анаболическим и мембраностабилизи-рующим действием, участвует в транспорте жирных кислот, способных разобщать дыхание и окислительное фосфорилирование, является средством, повышающим энергетический потенциал миокарда (B.Georges, 2000). Применение карнитина при сердечной патологии изучено достаточно широко. Установлено кардиопротекторное действие карнитина при экспериментальном инфаркте миокарда на примере изменения активности кардиоспецифической креатинки-назы сыворотки крови (C.I. Pantos et al., 2000), при некротизирующей дистрофии миокарда (ТВ. Кременецкая, 1996). S. Galland и соавторы (2002) выявили, что гормоны щитовидной железы повышают окисление длинноцепочечных жирных кислот путем активации карнитинзависимого транспорта жирных кислот через мембрану митохондрий. Эффективность применения карнитина при гипертиреозе была обнаружена S. Benvenga с соавторами (2001), P. Degrace с соавторами (2004).

После применения карнитина у животных с экспериментальным гиперти-реозом неседиментируемая активность всех трех лизосомальных гидролаз в скелетных мышцах и миокарде достоверно понизилась до значений, близких к контрольным. После 10-дневного назначения карнитина для катепсина Д наблюдалось снижение коэффициента лабильности при сравнении с серией экспериментального гипертиреоза в печени на 0,03, в миокарде на 0,09 (р<0,05); для ДНКазы обнаружилось снижение коэффициента лабильности на 0,14 в миокарде и на 0,27 в скелетных мышцах; для Р-галактозидазы на 0,40 в печени и на 0,13 в миокарде (р<0,01). После применения карнитина в течение 20 дней коэффициент лабильности для катепсина Д снизился на 0,08 в печени и на 0,22

в миокарде (р<0,05); для ДНКазы на 0,16 в миокарде и на 0,06 в скелетных мышцах; для рг-пшактозидазнв печени коэффициент лабильности понизился на 0,57, а в миокарде на 0,18 (р<0,01). Таким образом, более выраженное снижение коэффициента лабильности на фоне 20-дневного применения карнитина наблюдалось в печени и миокарде для катепсина Д и р-галактозидазы.

Уровень тиреоидных гормонов на фоне применения карнитина не нормализовался (табл. 2). Активность креатинкиназы MB снизилась до контрольных значений после обоих курсов применения карнитина (табл. 3). Назначение карнитина курсами по 10 и 20 дней не повлияло на частоту сердечных сокращений.

Таблица 3

Уровень креатинкиназы MB сыворотки крови после курсового введения

L-тироксина и на фоне применения средств метаболической коррекции

Условия эксперимента и/ь

Конгрольп=8 4368 (3960,5; 4603,5)

Ь-тироксия 10 дней л=8 10317(6899; 10381)*

Ь-тироксин 10 дней + карнитин 10 дней 4766 (3554,5; 5141)**

Ь-тироксин 10 дней +■ катяапин 20 дней п=8 2769 (2398,5; 3245,5) **

Ь-тироксин 10 дней + магнерот 10 дней п=8 4078 (3462; 4388) **

Ь-тироксин 10 дней + магнерот 20 дней 3379(2392; 5038)**

Ь-тироксин 10 дней + мексидол 10 дней п=8 3125 (2989,5; 3378)**

Ь-тироксин 10 дней + мексидол 20 дней п=8 3351(2977,5,3667,5)**

Ь-тироксин 10 дней + милдронат 10 дней п=8 4032 (3022; 4564) **

Ь-тироксин 10 дней + милдронат 20 дней п^8 5167 (5070; 5498)**

Ь-тироксин 10 дней + триметазидин 10 дней п-8 2540 (1990,2647,5) **

Ь-тироксин 10дней + триметазидин 20 дней п=8 2231 (2048,5; 2629) **

Статистическая значимость отмечена в сравнении с контролем: *— р<0,05; Статистическая значимость отмечена в сравнении с контролем патологии: **-р<0,01.

Одним из механизмов, объясняющим мембраностаоилизирующее действие карнитина, по-видимому, является способность данного препарата транспортировать жирные кислоты к месту их окисления. Жирные кислоты при их избыточном накоплении могут дестабилизировать лизосомальные мембраны. Представляет интерес обнаружение выраженного лабилизирующего мембраны лизосом кардиомиоцитов действия свободных жирных кислот. Покачано, что - стеарат и линолеат нарушают стабильность мембран лизосом уже в концентра-иди 5*10-6 М (А.А. Покровский, В.А. Тутельян, 1976).

В состав препарата метаболической коррекции магнерота входит магний и оротовая кислота. Известно, что магний необходим для обеспечения многих энергетических процессов (В.В. Городецкий, О.Б. Талибов, 2003). Обнаружено, что он препятствует разобщающему эффекту гормонов щитовидной железы на дыхание и окислительное фосфорилирование. Согласно данным литературы при гипертиреозе наблюдается недостаток ионов магния в различных средах организма (в. Simsek, 1997). Оротовая кислота способствует максимальному проявлению действия магния, т.к. она способствует фиксации магния на АТФ в клетке и проявлению его эффектов. Необходимо отметить, что оротовая кислота обладает и самостоятельной фармакологической активностью, участвуя в синтезе пиримидиновых оснований, улучшая процессы регенерации, стимулируя синтез сократительных белков миокарда (О.Б. Степура и др., 1999).

После назначения магнерота при экспериментальном гипертиреозе наблюдались сходные изменения активности лизосомальных гидролаз. При оценке коэффициента лабильности после 10-дневного применения магнерота обнаружилось его снижение для катепсина Д в печени на 0,35 и в миокарде на 0,20 (р<0,01); для ДНКазы в печени на 0,38 (р<0,01) и в скелетных мышцах на 0,55 (р<0,01); для р-галактозидазы в печени наблюдалось снижение данного показателя на 0,60, в миокарде на 0,36 (р<0,01), а в скелетных мышцах на 0,22. После 20-дневного назначения магнерота коэффициент лабильности для катепсина Д в печени понизился на 0,16, в миокарде на 0,13 (р<0,01); для р-галактозидазы на

0,55 в печени, на 0,35 в миокарде и на 0,13 в скелетных мышцах (р<0,01). Для ДНКазы в печени обнаружилось снижение данного показателя на 0,41 (р<0,01).

Механизм мембраностабилизирующего действия магния и оротовой кислоты остается не до конца изученным. Тем не менее можно предположить, что нормализация состояния мембран лизосом является следствием восполнения недостатка магния, который обнаруживается в условиях гипертиреоза (Т. Б1за-бЫ, 1996).

На фоне 10-дневного применения магнерота содержание грийодтиронина снизилось до значений, близких к контрольным (габл. 2) Активность креатин-киназы МВ снизилась до нижней границы контрольных значений как при 10, так и при 20-дневном применении препарата, что указывает на улучшение функционального состояния сердечной мышцы (табл 3). Назначение магнерота в течение 20 дней у животных с эксперименгальным гипертиреозом вызвало снижение частоты сердечных сокращении (р<0,05) Возможно, этот эффект связан с антагонизмом магния в отношении ионов кальция (О.Б. Степура и др, 1999).

Мексидол — препарат метаболической коррекции, ингибитор свободно-радикальных процессов, перекисного окисления липидов. Механизм действия мексидола определяют прежде всего его антиоксидантные свойства, способность стабилизировать биомембраны клеток, активировать энергосинтезирую-щие функции митохондрий Мембранотропные свойства мексидола подтверждались исследованиями связывающей способности мембран эндоплазматиче-ского ретикулума печени и мозга крыс, в которых было выявлено, что вещество в значительных количествах определяется в мембранах на протяжении 72 часов (Т.А. Воронина, 2004).

Мексидол обнаружил высокую эффективность по стабилизации лизосо-мальных мембран, т.к. его применение в сравнении с другими препаратами вызвало наибольшее снижение показателей, характеризующих проницаемость мембран во всех исследуемых органах Курсовое применение мексидола в течение 10 дней у животных с экспериментальным гипергиреозом вызвало досто-

верное снижение активности всех изучаемых ферментов преимущественно за счет неседиментируемой фракции. После 10-дневного применения мексидола коэффициент лабильности для катепсина Д в печени понизился на 0,30, в миокарде на 0,33 (р<0,01); для ДНКазы снизился на 0,42 в печени, на 0,38 в миокарде и на 0,58 в скелетных мышцах (р<0,01); для Р-галактозидазы наблюдалось уменьшение данного показателя в печени на 0,62, в миокарде на 0,22 (р<0,01). На фоне назначения препарата в течение 20 дней коэффициент лабильности для катепсина Д в печени понизился на 0,40 (р<0,01), в миокарде на 0,04 (р<0,05); для ДНКазы обнаружилось его уменьшение на 0,42 в печени, на 0,40 в миокарде и на 0,25 в скелетных мышцах (р<0,01); для р-галактозидазы коэффициент лабильности понизился к контролю патологии на 0,64 в печени (р<0,01). на 0,08 в миокарде (р<0,05) и на 0,17 в скелетных мышцах (р<0,01).

Эффективность мексидола существенно не зависела от длительности применения и проявлялась полностью уже при 10-дневном курсе во всех исследуемых тканях. Известно, что данный препарат отличается высокой биодоступ-нослъю. Ранее было выявлено, что как при однократном, так и при курсовом применении, концентрация мексидола в крови нарастает довольно быстро, и фармакокинетические профили препарата при однократном и хроническом введении достоверно не отличаются (Т А Воронина, 2004)

Применение мексидола вызвало снижение уровня креатинкипазы фракции МВ в сыворотке крови до контрольных значений как при 10-дневном, так и при 20-дневном курсе (табл. 3). После назначения препарата в течение 10 дней наблюдалось достоверное снижение частоты сердечных сокращений по отношению к конгролю патологии. Данный эффект может быть обусловлен изменением гормонального статуса, в частности, снижением уровня трийодгиронина в крови, на фоне применения мексидола. Известно, что трийодтиронин имеет наибольшее биологическое значение, и действие тиреоидных гормонов более чем на 90-92% осуществляется за счет него (М.И. Балаболкин, 1998).

Милдронат является антагонистом карнитина, т.к. ингибирует гамма-бутиробетаингидроксилазу, которая катализирует превращение гамма-

бутиробетаина в карнитин (У. йауаБЫ, 1995). Было также обнаружено, что милдронат снижает транспорт карнитина внутрь клеток скелетных мышц (В.вео^еБ, 2000). Учитывая антагонистическое действие карнитина и милдро-ната, представлялось интересным выяснить, возможно ли их положительное влияние на органы-мишени гормонов щитовидной железы при экспериментальном гипертиреозе. Р. Degrace с соавторами (2004), исследуя антиоксидант-ную активность Ь-карнитина и милдроната, получили результаты, свидетельствующие о способности обоих препаратов снижать перекисное окисление липи-дов, причем даже при совместном их применении. Это дает основания предполагать, что положительный эффект милдроната на мембраны лизосом вызван механизмом действия, не связанным напрямую с влиянием на жирные кислоты. Известно, что милдронат обладает несколькими механизмами действия, например, можно отметить мембранотропный эффект, не связанный с ингибировани-ем синтеза карнитина. Милдронат предупреждает нарушение транспорта АТФ и активирует гликолиз при ишемии миокарда (Ж.В. Шутенко, 1995).

Применение милдроната при экспериментальном гипертиреозе в течение 10 и 20 дней вызвало достоверное снижение неседиментируемой активности и нормализацию коэффициента лабильности для всех трех лизосомальных ферментов при сравнении с контролем патологии. После 10-дпевного введения милдроната коэффициент лабильности для катепсина Д понизился на 0,06 в печени (р<0,05) и на 0,16 в миокарде (р<0,01); для ДНКазы на 0,04 (р<0,05) и на 0,19 (р<0,01), ДЖ Р'-тШйШадаШ на 0,36 и на 0,07 (р<0,05), соответственно. На фоне применения милдроната в течение 20 дней наблюдалось уменьшение коэффициент лабильности для катепсина Д на 0,07 (р<0,05) в печени и на 0,31 в миокарде (р<0,01); для ДНКазы на 0,46 в миокарде и на 0,20 в скелетных мышцах. Для Р'-ИИШВШЩШЫ в печени данный показатель понизился на 0,32, а в миокарде на 0,22 (р<0,01). Таким образом, более выраженное снижение коэффициента лабильности после 20-дневного применения милдроната наблюдалось в печени (для катепсина Д и ДНКазы), в миокарде (для катепсина Д, ДНКазы и рквщвшшвддам) и в скелетных мышцах (для ДНКазы).

На фоне 20-дневного применения милдроната уровень трийодтиронина достоверно снизился по отношению к контролю патологии (табл. 2). Назначение милдроната вызвало снижение уровня креатинкиназы MB в сыворотке крови до контрольных значений (табл. 3) и показало отсутствие эффекта на частоту сердечных сокращений как при 10-дневном, так и при 20-дневном курсе. Соответственно, милдронат является средством метаболической коррекции, не затрагивающим функциональную регуляцию сердечной деятельности.

Препарат из группы цитопротективных средств триметазидин обладает механизмом действия, в основе которого лежит ингибирование окисления жирных кислот и стимуляция окисления глюкозы (L.H. Opie, M.N. Sack, 2002). Три-метазидин улучшает обмен мембранных фосфолипидов во время ишемии, снижает пассивную проницаемость мембран, а также повышает их устойчивость к гипоксическим и механическим повреждениям. Под действием препарата уменьшается высвобождение миокардиальных ферментов, таких, как креа-тинкиназа и лактатдегидрогеназа (P.F. Kantor, 2000). Необходимо отметить, что назначение триметазидина в течение 10 и 20 дней способствовало снижению активности креатинкиназы MB в сыворотке крови (табл. 3).

Применение триметлзидшш при эксперимекгздьном гипертиреозе вызвало выраженное снижение неседиментируемой активности катепсина Д, ДНКазы и -галактозидазы и коэффициента лабильности для этих ферментов во всех исследуемых органах по отношению к контролю патологии. На фоне 10-дневного введения триметазидина коэффициент лабильности для катепсина Д понизился на 0,30 в печени и на 0,30 в миокарде (р<0,01); для Р-галактозидазы на 0,61 в печени и на 0,66 в миокарде и на 0,18 в скелетных мышцах (р<0,01); для ДНКазы обнаружилось снижение данного показателя на 0,37 в печени, на 0,43 в миокарде и на 0,37 в скелетных мышцах (р<0,01). После 20-дневного применения триметазидина коэффициент лабильности для катепсина Д уменьшился на 0,25 в печени и на 0,41 в миокарде (р<0,01); для Р-галактозидазы на 0,60 в печени, на 0,71 в миокарде и на 0,18 в скелетных мышцах (р<0,01). При этом для ДНКазы обнаружилось снижение данного показателя на 0,39 в печени,

на 0,45 в миокарде и на 0,38 в скелетных мышцах (рЛ0,01). Таким образом, более выраженная эффективность 20-дневного применения триметазидина по показателю снижения коэффициента лабильности наблюдалась в миокарде для катепсина Д и 3-галактозидазы.

На фоне 20-дневного введения триметазидина выявлено повышение уровня ТТГ в сыворотке крови по отношению к контролю патологии. Также обнаружено снижение содержания трийодтиронина до значений контроля как при 10, так и при 20-дневном назначении препарата (табл. 2).

Отмечено достоверное снижение частоты сердечных сокращений под влиянием триметазидина при назначении его в течение 20 дней, что, возможно, обусловлено изменениехМ гормонального статуса на фоне введения препарата.

3. Сравнительная характеристика эффективности и средств метаболической коррекции по биохимическим критериям

Выявлено, что изучаемые средства метаболической коррекции сравнимы по критерию снижения уровня креатинкиназы МВ сыворотки крови, что подтверждает тропность к сердечной мышце у всех препаратов. Препараты сходны по отсутствию наряженного влияния на ритм сердца.

При этом необходимо отметить, что препараты оказали влияние на уровень тиреоидных гормонов и тиреотропина. Применение милдроната, мексидо-ла, магнерота, тримегазидина вызывало достоверное снижение уровня трийод-тиронина в сыворотке крови. На фоне введения триметазидина в течение 20 дней выявлено повышение уровня тиреотропного гормона.

Все изученные средства оказывали стабилизирующее действие на мембраны лизосом, проявляя органоспецифичность воздействия и в некоторых случаях зависимость эффекта от схемы назначения. Для детализации сравнительного анализа мембраностабилизирующего эффекта препаратов проведена оценка изменения коэффициента лабильности.

При сравнительной оценке коэффициента лабильности для катепсина Д в печени обнаружено, что наиболее выраженный эффект вызвало применение

мексидола и триметазидина в течение 10 и 20 дней, и магнерота в течение 10 дней. Наименьшую эффективность показало назначение карнитина и милдро-ната. Для Р-галактозидазы в печени все препараты, кроме милдронага, проявляли сравнимый эффект. Выявлена зависимость эффективности карнитина от длительности его применения. Для ДНКазы в печени применение мексидола, триметазидина и магнерота в течение 10 и 20 дней, а также карнитина в течение 20 дней вызвало выраженное снижение коэффициента лабильности. Выявлена зависимость эффективности карнитина от длительности его применения.

Полученные результаты свидетельствуют о наличии высокой мембрано-стабилизирующей активности у мексидола, триметазидина и магнерота при действии на печень.

В скелетных мышцах для ДНКазы наиболее выраженное снижение коэффициента лабильности вызвало введение триметазидина и магнерота в течение 10 и 20 дней, мексидола в течение 10 дней. При этом назначение милдрона-та курсом в 10 дней показало отсутствие эффекта. Для р-галактозидазы в скелетных мышцах выраженное снижение коэффициента лабильности вызвало назначение триметазидина в течение 10 и 20 дней, мексидола в течение 20 дней.

В миокарде для катепсина Д наиболее выраженное снижение коэффициента лабильности вызвало применение триметазидина в течение 10 и 20 дней и мексидола в течение 10 дней. Для ДНКазы в сердце наибольший эффект вызвало применение мексидола и триметазидина в течение 10 и 20 дней. Введение магнерота обнаружило отсутствие эффективности по показателю коэффициента лабильности. На фоне применении милдроната выявлена выраженная зависимость эффективности от схемы назначения. В миокарде для Р-галактозидазы наибольший эффект вызвало назначение триметазидина в течение 10 и 20 дней. Остальные препараты показали менее значительное снижение коэффициента лабильности.

Таким образом, триметазидин и мексидол проявили наиболее выраженное стабилизирующее действие на мембраны лизосом кардиомиоцитов при сравнении с другими изучаемыми препаратами.

Изменения коэффициента лабильности в миокарде для катепсина Д, ДНКазы и р-галактозидазы огражены на рисунках 1, 2 и 3, соответственно.

Рис. 1. Изменение коэффициента лабильности в миокарде для катепсина Д на фоне применения средств метаболической коррекции в % по отношению к контролю патологии

Статистическая значимость отмечена: * - р > 0,05; ** - р > 0,01.

Рис. 2. Изменение коэффициента лабильности в миокарде для ДНКазы на фоне применения средств метаболической коррекции в % по отношению к контролю патологии

Статистическая значимость отмечена: *-р>0,05; **-р>0,01.

Рис. 3. Изменение коэффициента лабильности в миокарде для (З-галактозидазы на фоне применения средств метаболической коррекции в % по отношению к контролю патологии

Статистическая значимость отмечена: * - р > 0,05; ** - р > 0,01.

Выводы

1. При экспериментальном гипертиреозе наблюдается увеличение неседи-ментируемой активности лизосомальных ферментов, повышение коэффициента лабильности для катепсина Д, ДНКазы и -галактозидазы в миокарде и печени и для ДНКазы в миокарде, печени и скелетных мышцах, что связано с дестабилизацией лизосомальных мембран в исследуемых тканях.

2. Использование препаратов метаболической коррекции - карнитина, маг-нерота, мексидола, миддроната, триметазидина при экспериментальном гипертиреозе способствует стабилизации лизосомальных мембран в исследуемых тканях.

3. Экспериментальный гипертиреоз сопровождается повышением уровня креатинкиназы МВ в сыворотке крови и увеличением частоты сердечных сокращений, что указывает на развитие патологических изхменений в сердечной мышце.

4. Применение препаратов метаболической коррекции - карнитина, магнеро-та, мексидола, милдроната, триметазидина на фоне экспериментального гипертиреоза вызьшает нормализацию уровня креатинкиназы МБ в сыворотке крови и не оказывает существенного влияния на частоту сердечных сокращений.

5. Назначение магнерота, мексидола, милдроната, триметазидина при экспериментальном гипертиреозе вызываег снижение уровня трийодтиронина в сыворотке крови. На фоне введения триметазидина в течение 20 дней повышается уровень тиреотропного гормона. Применение карнитина не влияет- на уровень тиреоидных гормонов.

6. Мексидол проявляет наиболее выраженное мембранопротекторное действие. Высокая мембраностабилизирующая активность при действии на миокард обнаруживается у триметазидина и мексидола; при действии на печень - у мексидола, триметазидина и магнерота Милдронат проявляет более выраженный кардиопротекторный эффект при 20-дневном применении в сравнении с 10-дневным курсом.

Практические рекомендации

Позитивное влияние средств метаболической коррекции (карнигина, маг-нерота, мексидола, милдроната, триметазидина), выявленное в результате проведенных исследований, следует учитывать при использовании этих препаратов для коррекции кардиальных нарушений в условиях гиперфункции щитовидной железы.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Влияние карнитина на активность лизосомальных гидролаз при экспериментальном гипертиреозе // Рос. медико-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. -2004. - № 3-4. - С.51-56. - (Совм. с: В.Г. Макарова).

2. Влияние магнерота на активность лизосомальных гидролаз при экспериментальном гипертиреозе // Материалы науч. конф., посвящ. 60-летию победы в Великой Отечественной войне. - Рязань, 2005. - С. 113-115. - (Соавт.: Л.В. Никифорова).

3. Влияние мексидола на активность лизосомальных гидролаз при экспериментальном гипертиреозе // Актуальные вопросы патологии: Сб., посвящ. дню лечебного факультета. - Рязань, 2005. - С.5-7. - (Совм. с: В.Г. Макарова, Л.В. Никифорова).

4. Влияние мексидола на протеолиз в эксперименте // Человек и лекарство: Тез. докл. XII Рос. нац. контр. - М., 2005. - С.772. - (Совм. с: В.Г. Макарова, Е.Н. Якушева).

5. Влияние триметазидина на активность лизосомальных гидролаз при экспериментальном гипертиреозе // Материалы науч. конф., посвящ. 60-летию победы в Великой Отечественной войне. - Рязань, 2005. - С. 115-117. - (Совм. с: В.Г. Макарова).

6. Изучение активности креатинфосфокиназы крови при экспериментальном гипертиреозе и его фармакологической коррекции // Актуальные вопросы патологии: Сб., посвящ. дню лечебного факультета. — Рязань, 2005. - С. 7-10. - (Совм.

с: В.Г. Макарова).

7. Кардиопротективное действие средств метаболической коррекции при экспериментальном гипертиреозе // Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения: Сб. науч. тр. - Рязань, 2005. - Ч.2. - С. 284-285. - (Совм. с: В.Г. Макарова).

8. Оценка функционального состояния миокарда в эксперименте // Влияние природных факторов на социоэкосистемы: Сб. науч. тр. - Рязань, 2005. - Вып.З. -С.141-142.

9. Применение милдроната при экспериментальном гипертиреозе // Биология -наука XXI века: Тез. докл. 9-ой Междунар. Путинской школы-конф. молодых ученых. - Пущино, 2005. - С. 67. - (Соавт.: В.Г. Макарова).

Александра Анатольевна Артамонова

СРАВНИТЕЛЬНОЕ БИОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КАРДИОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ СРЕДСТВ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГИПЕРТЕРИОЗЕ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Бумага офсетная Гарнитура Times Печать ризографическая. Усл печ л 1,5 Тираж 100 экз Заказ № 151

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И П Павлова Федерального агентства но здравоохранению и социальному развитию» 390026, г Рязань, ул Высоковольтная, д 9

Отпечатано в редакционно издательском отделе ГОУ ВПО «РязГМУ Росздрава» 390026, г Рязань, ул Т Шевченко, 34

f f . ' *

I I - S

Un''/ 1012

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Артамонова, Александра Анатольевна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы 1.1 Метаболические нарушения при гипертиреозе

1.1.1. Механизм действия и метаболические эффекты тиреоидных гормонов.

1.1.2. Повреждающее действие тиреоидных гормонов на миокард и другие органы мишени.

1.1.3. Активность лизосомальных ферментов при гипертиреозе.

1.2. Механизмы действия некоторых средств метаболической коррекции

1.2.1 Влияние карнитина как средства метаболической коррекции.

1.2.2. Влияние магнерота как средства метаболической коррекции.

1.2.3. Влияние мексидола как средства метаболической коррекции.

1.2.4. Влияние милдроната как средства метаболической коррекции.

1.2.5. Влияние триметазидина как средства метаболической коррекции.

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Объект экспериментальных наблюдений.

2.2. Модели патологических состояний и схемы введения препаратов.

2.3. Методы определения активности ферментов

2.3.1. Взятие и подготовка материала.

2.3.2. Определения активности лизосомальных ферментов.

2.3.3. Метод определения кардиоспецифической креатинкиназы.

2.4. Метод регистрации ЭКГ.

2.5. Определение гормонов.

2.6. Статистическая обработка.

2.7. Использованные реактивы и препараты.

Глава 3. Результаты исследования

3.1. Биохимические показатели

3.1.1. Уровень активности лизосомальных ферментов, креатинкиназы МВ, тиреоидных гормонов и ТТГ у контрольных животных.

3.1.2. Изменение активности лизосомальных ферментов, креатинкиназы МВ, тиреоидных гормонов и ТТГ у животных после курсового введения Ь-тироксина.

3.1.3. Активность лизосомальных ферментов, креатинкиназы МВ, уровень тиреоидных гормонов и ТТГ у животных с экспериментальным гипертиреозом после курсового применения карнитина в течение 10 и 20 дней.

3.1.4. Активность лизосомальных ферментов, креатинкиназы МВ, уровень тиреоидных гормонов и ТТГ у животных с экспериментальным гипертиреозом после курсового применения магнерота в течение 10 и 20 дней.

3.1.5. Активность лизосомальных ферментов, креатинкиназы МВ, уровень тиреоидных гормонов и ТТГ у животных с экспериментальным гипертиреозом после курсового применения мексидола в течение 10 и 20 дней.

3.1.6.Активность лизосомальных ферментов, креатинкиназы МВ, уровень тиреоидных гормонов и ТТГ у животных с экспериментальным гипертиреозом после курсового применения милдроната в течение 10 и 20 дней.

3.1.7. Активность лизосомальных ферментов, креатинокиназы МВ, уровень тиреоидных гормонов и ТТГ у животных с экспериментальным гипертиреозом после курсового применения триметазидина в течение 10 и 20 дней.

3.2. Сравнительная характеристика эффективности средств метаболической коррекции по биохимическим критериям.

3.3. Оценка функционального состояния миокарда в эксперименте.

3.3.1. Функциональное состояние миокарда у интактных животных.

3.3.2. Функциональное состояние миокарда у животных с экспериментальным гипертиреозом.

3.3.3. Функциональное состояние миокарда у животных с экспериментальным гипертиреозом после лечения карнитином в течение 10 и 20 дней.

3.3.4. Функциональное состояние миокарда у животных с экспериментальным гипертиреозом после лечения магнеротом в течение 10 и 20 дней.

3.3.5. Функциональное состояние миокарда у животных с экспериментальным гипертиреозом после лечения мексидолом в течение 10 и 20 дней.

3.3.6. Функциональное состояние миокарда у животных с экспериментальным гипертиреозом после лечения милдронатом в течение 10 и 20 дней.

3.3.7. Функциональное состояние миокарда у животных с экспериментальным гипертиреозом после лечения триметазидином в течение 10 и 20 дней.

Глава 4. Обсуждение результатов.

Выводы.

Указатель литературы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Сравнительное биохимическое исследование кардиопротекторной активности средств метаболической коррекции при экспериментальном гипертиреозе"

Актуальность темы. Патология щитовидной железы является одной из самых актуальных современных медико-социальных проблем. Тиреоид-ные гормоны, оказывая влияние на широкий спектр метаболических процессов, в условиях гиперфункции щитовидной железы, вызывают полисистемные нарушения, среди которых важнейшее место занимает сердечная патология. Выявлено, что у больных гипертиреозом изменения в сердечной мышце обусловлены нарушением метаболической активности кардиомиоцитов (Г.А. Котова, 1992). Сердце - орган, чувствительный к действию гормонов щитовидной железы, и изменения в его работе могут быть обнаружены даже при * небольших отклонениях плазменных концентраций тиреоидных гормонов от нормы (Е. Моркин, 1990; Т. Asahi et al., 2001; G.J. Kahaly, 2002). Комплекс метаболических расстройств, возникающих в связи с изменением уровня йодтиронинов, приводит к нарушению морфологического и функционального состояния миокарда (JI.C. Славина, 1979).

Одним из путей регуляции клеточного метаболизма является влияние гормонов на лизосомы. Лизосомальные ферменты участвуют в развитии метаболических нарушений при повреждении миокарда, и их активность в некоторой степени может отражать степень выраженности патологических процессов. Изменение мембран лизосом, перераспределение форм внутри популяции лизосом являются одними из основных эффектов гормонов на ли-зосомальную систему (А.В. Дмитриев, Е.А. Строев, 1996). Ранее было обнаружено повышение активности лизосомальных ферментов при гипертиреозе в печени экпериментальных животных (A.S. Al-Jurf et al., 1982), повышение неседиментируемой активности катепсина Д в кардиомиоцитах, клетках скелетных мышц и печени (R.S. Decker, К. Wildenthal, 1981).

В настоящее время является актуальной проблема доказательства орга-носпецифичности воздействия и сравнительного анализа эффективности лекарственных препаратов, стимулирующих метаболические процессы, способных оказать кардиопротекторное действие при гипертиреозе. Многочисленные исследования посвящены применению ß-блокаторов при данной патологии (I. Klein, 1988; К. Asayama et al., 1990; G.J. Kahaly, 2002).

Тем не менее, учитывая механизм действия и наличие серьезных побочных эффектов у данной группы лекарственных средств, необходимы новые подходы к лечению кардиальных нарушений при гиперфункции щитовидной железы. Метаболические препараты не оказывают влияния на основные гемодинамические показатели, осуществляя свои эффекты на уровне клетки. Действие средств метаболической коррекции на сердце и другие органы-мишени гормонов щитовидной железы при гипертиреозе остается малоизученным, их использование в качестве кардиопротекторов при гипертиреозе ограниченно. Представляется актуальным изучение сравнительной эффективности средств, стимулирующих метаболические процессы, путем проведения биохимического исследования препаратов с различными механизмами цитопротекторного действия при экспериментальном гипертиреозе.

Цель исследования

Изучить значение ферментной системы лизосом в механизмах цитопротекторного действия ряда средств метаболической коррекции при экспериментальном гипертиреозе с учетом органоспецифичности воздействия и контроля функционального состояния миокарда.

Задачи исследования

1. Исследовать активность лизосомальных ферментов (катепсина Д, ДНКазы и ß-галактозидазы) в миокарде, печени и скелетных мышцах при экспериментальном гипертиреозе.

2. Выявить влияние карнитина, магнерота, мексидола, милдроната, три-метазидина на активность лизосомальных ферментов в миокарде, печени, скелетной мышце при указанной выше патологии.

3. Оценить состояние миокарда крыс по показателю активности креатин-киназы MB сыворотки крови и частоте сердечных сокращений при экспериментальном гипертиреозе и на фоне назначения средств метаболической коррекции.

4. Изучить влияние исследуемых препаратов на уровень тироксина, трий-одтиронина и тиреотропина в сыворотке крови.

5. Сравнить карнитин, магнерот, мексидол, милдронат, триметазидин по эффективности, органотропности и в зависимости от схемы назначения.

Научная новизна

Впервые в сравнительном аспекте изучено влияние средств метаболической коррекции с разными механизмами цитопротекторного действия на организм подопытных животных с экспериментальным гипертиреозом. Показано дестабилизирующее влияние тироксина на лизосомальные мембраны в миокарде, печени и скелетных мышцах. Впервые выявлены возможности эффективной коррекции метаболических нарушений, вызванных избытком тиреоидных гормонов, препаратами: карнитин, магнерот, мексидол, милдронат, триметазидин; проведено их сравнительное исследование по биохимическим параметрам. Доказана целесообразность фармакологической коррекции кардиальных нарушений в условиях экспериментального гипертиреоза при помощи исследуемых препаратов. Впервые показано, что по выбранным критериям эффективности при экспериментальном гипертиреозе изученные препараты обладают сравнимым по выраженности кардиопротекторным эффектом за исключением триметазидина и мексидола, которые проявляют наиболее выраженное мембранопротекторное действие в отношении мембран ли-зосом миокарда. Впервые установлено снижение уровня трийодтиронина на фоне введения магнерота, мексидола, милдроната и триметазидина.

Практическая значимость

Полученные результаты позволяют уточнить роль лизосомального аппарата в развитии патологических процессов и в повреждении органов-мишеней тиреоидных гормонов при гипертиреозе. Сравнительный анализ эффективности средств метаболической коррекции по выбранным биохимическим критериям позволяет обоснованно выполнять замену препаратов и индивидуализировать их назначение. Полученные данные могут учитываться при коррекции метаболических нарушений, вызванных гипертиреозом.

Апробация работы

Результаты проведенных исследований были представлены на 9-ой Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2005); ХП Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005). Апробация работы проведена на межкафедральном заседании кафедр биологической и биоорганической химии с курсом клинической лабораторной диагностики, фармакологии с курсом фармакотерапии ФПДО, фармакогнозии с курсом ботаники, факультетской терапии с курсами эндокринологии и функциональной диагностики, терапии ФПДО с курсом семейной медицины, внутренних болезней, ангиологии, сосудистой и оперативной хирургии ФПДО ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию».

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Структура и объем работы

Диссертация (134 страницы текста) состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 206 источников (71 на русском и 135 на иностранных языках). Диссертация проиллюстрирована 18 таблицами и 20 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Артамонова, Александра Анатольевна

Практические рекомендации

Позитивное влияние средств метаболической коррекции (карнитина, магнерота, мексидола, милдроната, триметазидина), выявленное в результате проведенных исследований, следует учитывать при использовании этих препаратов для коррекции кардиальных нарушений в условиях гиперфункции щитовидной железы.

112

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Артамонова, Александра Анатольевна, Рязань

1. Активность кислых гидролаз и проницаемость мембран лизосом кардиомиоцитов при экспериментальных состояниях / В.Ф. Коровкин, Э.А. Полякова, Н.С. Стволинская и др. // Вопр. мед. химии. - 1987. - №5. -С.33-38.

2. Анализ вариабельности сердечного ритма при использовании различных электрокардиографических систем: (Методические рекомендации) / P.M. Баевский, Г.Г. Иванов, Л.В. Чирейкин и др. // Вестн. аритмологии. 2001.- №24. С. 65-87.

3. Антиишемические эффекты производных 3-гидроксипиридина при цереброваскулярной патологии / В.Е. Погорелый, A.B. Альт, М.Д. Гаевый и др. // Эксперим. и клинич. фармаколлогия. 1999. - №5. — С. 15-17.

4. Антиоксидантная активность милдроната и L-карнитина при лечении больных с цереброваскулярной болезнью / З.А. Суслина, Т.Н. Федорова, М.Ю. Максимова, Е.К. Ким // Эксперим. и клинич. фармакология. 2003. -№3. -Р.32-35.

5. Антиоксидантные свойства 3-оксипиридиновых аналогов: мексидола, эмоксипина, проксипина / Г.И. Клебанов, О.Б. Любицкий, О.В. Васильева и др. // Вопр. мед. химии. 2001. - №3. - С.288-300.

6. Балаболкин М.И. Эндокринология / М.И. Балаболкин. М., 1998. - 581с.

7. Баранов В.Г. Руководство по клинической эндокринологии / В.Г. Баранов.- Л.: Медицина, 1977. 662с.

8. Васильев A.B. Лизосомальные гидролазы различных органов крыс в процессе клеточного питания / A.B. Васильев, Н.С. Брегвадзе, В.А. Тутельян // Вопр. мед. химии. 1990. - №4. - С.45-47.

9. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров //Вестн. Рос. АМН. 1998. - №7. - С.43-51.

10. Влияние мексидола и его структурных компонентов на уровень углеводов и перекисное окисление липидов при остром стрессе / Т.А. Девяткина,

11. P.B. Луценко, E.M. Важничая, Л.Д. Смирнов //Вопр. мед. химии. 1999. -№3. — С.246-249.

12. П.Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения Мексидол. Основные эффекты, механизм действия, применение / Т.А. Воронина. -М., 2004.-21с.

13. Гольбер Л.М. Тиреотоксическое сердце / Л.М. Гольбер, В.И. Кандор. -М.: Медицина, 1972. 345с.

14. Городецкий В.В. Препараты магния в медицинской практике. (Малая энциклопедия магния) / В.В. Городецкий, О.Б. Талибов. М.: ИД Медпрактика-М., 2003. - 44с.

15. Данис Ю.К. Витамин Е и малоновый диальдегид в сыворотке крови у больных тиреотоксикозом / Ю.К. Данис, Д.Ю. Марчюлените, Э.Ю. Даните //Пробл. эндокринологии. 1990. - №5. - С.21-23.

16. Девяткина Т.А. Фармакологическая активность мексидола при стрессовом повреждении печени / Т.А. Девяткина, Р.В. Луценко, Е.М. Важничая // Эксперим. иклинич. фармакология. 2003. - №3. - С.56-58.

17. Девяткина Т.А. Эффект мексидола на развитие экспериментального пероксидного артериосклероза / Т.А. Девяткина, Е.Г. Коваленко, Л.Д. Смирнов // Эксперт!, и клинич. фармакология. 1993. - №1. — С.33-35.

18. Действие изомеров тироксина на процессы свободнорадикального окисления в субклеточных фракциях коры головного мозга крыс / О.В. Галкина, В.М. Прокопенко, Ф.М. Путилина и др. // Пробл. эндокринологии. 2000. - №4. - С.32-34.

19. Дмитриев A.B. Гормональная регуляция лизосом / A.B. Дмитриев, Е.А. Строев // Гормональная регуляция метаболизма в норме и при патологии. -Рязань, 1996.-С.3-7.

20. Иваненко Ю.П. Гормоны в регуляции сократительной способности мышц / Ю.П. Иваненко // Гормональная регуляция метаболизма в норме и патологии. Рязань, 1996. - С. 48-52.

21. Исследование антиоксидантных свойств цитопротекторного препарата триметазидина in vitro и in vivo / В.З. Ланкин, A.K. Тахидзе, Е.А. Жарова, Ю.Н. Беленков // Кардиология. 2000. - №4. - С.48-61.

22. Исследования сочетанного применения мексидола с антиаритмическими препаратами / A.A. Котляров, Л.Д. Смирнов, Л.Э. Смирнова и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. 2002. - №5. - С.31-34.

23. Касавина B.C. Влияние экспериментального гипертиреоза на функциональное состояние лизосомальных мембран и структурную организацию роговицы кролика / Б.С. Касавина, Т.В. Ухина, В.А. Миронов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1983. - №6. - С. 17-20.

24. Кочетов В.А. Практическое руководство по энзимологии / Г.А. Кочетов. -М.: Высш. шк., 1971. -234с.

25. Кочуков М.Ю. Протеиназы лизосом и гормональная функция щитовиднойжелезы: Автореф. дис.канд. мед. наук /М.Ю. Кочуков. Рязань, 1998. —22с.

26. Кременецкая Т.В. Воздействие карнитина и инсулина на активность лизосомальных ферментов при некротизирующей дистрофии миокарда / Т.В. Кременецкая // Вопросы клиники, диагностики и коррекции физического состояния организма. Рязань, 1996. - С. 44-49.

27. Левина Л.И. Сердце при эндокринных заболеваниях / Л.И. Левина. Л.: Медицина, 1989. - 264с.

28. Лемешко В.В. Изменения содержания цитохромов С и А б митохондриях печени крыс при гипертиреозе / В.В. Лемешко, П.А. Калиман // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1980. - №2. - С. 174-176.

29. Лукьянова Л.Д. Антигипоксические эффекты различных производных 3-гидроксипиридина на изолированные сердца крыс / Л.Д. Лукьянова, P.E. Атабаева, С.Ю. Шепелева //Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1993. -№4. -С.366-368.

30. Лукьянова Л.Д. Биоэнергетические механизмы антигипоксического действия мексидола, сукцинат-содержащего производного 3гидроксипиридина / JI.Д. Лукьянова, P.E. Атабаева, С.И. Шепелева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - №3. - С.259-260.

31. Макарова В.Г. Активность лизосомальных ферментов при ИБС / В.Г. Макарова, Е.А. Строев, A.B. Бороздин // ИБС и артериальные гипертензии: Сб. науч. тр. Рязань, 1992. - С.75-79.

32. Макарова В.Г. Действие карнитина и ретаболила на активность ферментов креатинкиназной системы сердца крыс / В.Г. Макарова, Е.А. Строев // Кардиология. 1985. - №8. - С.96-97.

33. Марзоев А.И. Перекисное окисление липидов крови кроликов с различным тиреоидным состоянием / А.И. Марзоев, Г.И. Клебанов, М.П. Шерстнев, А.И. Андрющенко //Вопр. мед. химии. 1985. - №2. - С.14-17.

34. Меерсон Ф.З. Адаптация, дезадаптация и недостаточность сердца / Ф.З. Меерсон. М.: Медицина, 1977. - 344с.

35. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Ф.З. Меерсон. М.: Медицина, 1984. - 272с.

36. Меньшикова Е.Б. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков, С.М. Шергин. -Новосибирск, 1994. -203с.

37. Милдронат: механизмы действия: перспективы коррекции патологических состояний / Ж.В. Шутенко, Д.В. Мейрена, Т.И. Каган и др. // Хим.-фармац. журн. 1995. - №5. - С. 13-17.

38. Миронова О.П. Сравнительная характеристика метаболических эффектов амтизола и триметазидина при острой гипоксии / A.B. Смирнов, И.В. Зарубина, Б.И. Криворучко // Эксперим. и клинич. фармакология. 1998. -№5. - С.65-68.

39. Моркин Е. Влияние гормонов на работу сердца // Физиология и патофизиология сердца / Под ред. Н. Сперелакиса. М., 1990.- Т.2.-С. 275-291.

40. Мышкин К.И. Обмен кислорода у больных с заболеваниями щитовидной железы / К.И. Мышкин, М.А. Раскин // Пробл. эндокринологии. 1984. -№2. - С.22-25.

41. О поражении миокарда при гипер- и гипотиреозе / Г.А. Котова, Г.Я. Лившиц и др. // Пробл. эндокринологии. 1992. - №1. - С.24-27.

42. Обеспеченность организма больных диффузным токсическим зобом à-токоферолом / P.C. Тишенина, Т.А. Филоненко, C.B. Лобикова, Д.С. Валиулина //Биооксиданты. М., 1992. - С.39-40.

43. Опи Л.Х. Обмен веществ и энергии в миокарде // Физиология и патофизиология сердца / Под ред. Н. Сперелакиса. М., 1990. - Т.2. - С.7-63.

44. Перекисное окисление липидов в ткани щитовидной железы у больных диффузным токсическим зобом / Е.С. Ром-Богуславская, Т.Н. Овсянникова, Е.А. Дягилева и др. // Укр. биохим. журн. 1997. - №4. — С.111-114.

45. Перекисное окисление липидов митохондрий печени крыс при старении организма и гипертиреозе / В.В. Лемешко, Ю.В. Никитченко // Биохимия. №5. - С.752-759.

46. Поиск новых методов лечения аритмий сердца: экспериментальное исследование эффективности денситонеров мембран / В.М. Мороз, Т.Н. Липницкий, В.А. Козловский // Рос. кардиол. журн. 2003. - №2. - С.72-76.

47. Покровский A.A. Лизосомы / A.A. Покровский, В.А. Тутельян. М.: Наука, 1976. - 382с.

48. Покровский A.A. Методы разделения и ферментной идентификации субклеточных фракций / A.A. Покровский, А.И. Арчаков, О.Н. Любимова // Современные методы в биохимии. М., 1968. - С.5-59.

49. Результаты применения магниевой соли оротовой кислоты "Магнерот" при лечении больных с идиопатическим пролапсом митрального клапана /

50. О.Б. Степура, О.О. Мельник, А.Б. Шехтер и др. // Рос. мед. вести. 1999. -№2. - С.74-76.

51. Родионова Т.И. Изменение перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности плазмы у больных с тяжелой формой диффузного токсического зоба / Т.И. Родионова, М.А. Костенко // Пробл. эндокринологии. 2003. - №5. - С.42-45.

52. Ром-Бугославская Е.С. Характеристика метаболизма катехоламинов при тиреотоксикозе / Е.С. Ром-Бугославская, Ж.И. Кхарак // Пробл. эндокринологии. 1981. - №5. - С.6-12.

53. Рунов Г.П. Q-инфаркт миокарда у больной с тиреотоксикозом / Г.П. Рунов, H.H. Боровков, Ю.В. Фурменкова // Пробл. эндокринологии. -2003. -№6. -С.51-51.

54. Рязанова Е.А. Влияние гормонов щитовидной железы на активность катепсина Д и кальпаинов нормального и поврежденного миокарда: Автореф. дис. канд. биол. наук / Е.А. Рязанова. Смоленск, 1990.- 24 с.

55. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, O.A. Азизова, А.И. Деев и др. // Итоги науки и техники. Биофизика. М., 1991. - Т.29. -251с.

56. Сеппет Э.К. Влияние кальция на сократимость миокарда крыс при эу- и гипертиреозе / Э.К. Сеппет, А.П. Калликорм, И.А. Флейдервиш // Вестн. Рос. АМН. 1987. - №2. - С.45-50.

57. Сеппет Э.К. Гипертиреоидная кардиомиопатия: нарушения в системе транспорта креатина и повышенная чувствительность к ишемическому повреждению / Э.К. Сеппет, А.И. Адоян, А.П. Калликорм // Вестн. АМН СССР. 1984. - №10. - С.48-56.

58. Сеппет Э.К. Особенности частотной зависимости силы сердечных сокращений гипертиреоидного миокарда крысы / Э.К. Сеппет, М.А. Эймре, Л.И. Кадая, А.П. Калликорм // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1989. - №6. - С.665-667.

59. Славина JI.С. Сердце при эндокринных заболеваниях / Л. С. Славина. -М.: Медицина, 1979. 184с.

60. Соболев В.И. Влияние а- и Р-адреноблокаторов на калоригенный эффект адреналина у крыс с экспериментальным гипертиреозом / В.И. Соболев // Пробл. эндокринологии. 1980. - №5. - С.63-66.

61. Соболев В.И. Состояние некоторых адренергических реакций при экспериментальном гипертиреозе / В.И. Соболев // Пробл. эндокринологии. 1981. - №5. - С.63-69.

62. Содержание магния в сыворотке крови и его экскреция почками при гипертиреозе / Н.А. Атаманова, И.В. Благосклонная, В.К. Кудашкина и др. / Пробл. эндокринологии. 1977. - №6. - Р. 18-22.

63. Соодаева С.К. Развитие свободнорадикальных процессов под воздействием пылевых частиц / С.К. Соодаева, Б.Х. Ягмуров // Чучалин

64. A.Г. Патология органов дыхания у ликвидаторов аварии на чернобыльской АЭС / А.Г. Чучалин, А.Л. Черняев, К. Вуазен). М., 1998. - С.140-164.

65. Столярова В.В. Кардиопротекторный эффект препаратов с антиоксидантной активностью при острой церебральной ишемии / В.В. Столярова // Эксперим. и клинич. фармакология. 2001. - №6. - С.31-33.

66. Строев Е.И. Биологическая химия: Учебник для фармац. ин-тов и фармац. фак. мед. ин-тов /Е.И. Строев. М.: Высш. шк., 1986. - 479с.

67. Тикхадзе А.К. Триметазидин как непрямой антиоксидант / А.К. Тикхадзе,

68. B.З. Ланкин, Е.А. Жарова, C.B. Количева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - №10. - С.951-953.

69. Трапкова А.А. Рецепторы тиреоидных гормонов / А.А. Трапкова, Г.В. Верещалина//Пробл. эндокринологии. 1984. - №4. - С.76-80.

70. Тюриков П.Ю. Оценка клинико-метаболической эффективности милдроната у больных стабильной стенокардией напряжения / П.Ю. Тюриков // Вестник СПб. Гос. Мед. акад. им. И.И. Мечникова. 2004. -№3. - С.57-59.

71. Эффективность мексидола при оксидативном стрессе на фоне мозгового варианта гипертонического криза / А.П. Голиков, П.П. Голиков, Б.В. Давидов и др. // Кардиология. 2002. - №3. - С.25-29.

72. Янголенко В.В. Уровень среднемолекулярных пептидов в крови и активность перекисного окисления липидов в дифференциальной диагностике диффузного токсического зоба / В.В. Янголенко, А.Н. Окороков //Пробл. эндокринологии. -1991. -№1. С. 10-12.

73. Acetyl СоА carboxylase regulation of fatty acid oxidation in the heart / M. Saddik, J. Gamble, L.A. Witters, G.D. Lopaschuk // J. Biol. Chem. 1993. -V.268, N4, -R25836-25845.

74. Acid thyroglobulin protease activities in human diseased thyroid glands M. Yoshinari, K. Okamura, A. Shiroozu et al. // Clin. Endocrinol. (Oxf). — 1987. -V.26, N6. -P.685-691.

75. Activities of UDP-glucuronyltransferase, beta-glucuronidase and deiodinase types 1 and П in hyper- and hypothyroid rats / S.M. Van der Heide, B.J. Joosten, M.E. Everts, P.H. Klaren // J. Endocrinol. 2004. - V.181, N3. - P.393-400.

76. Al-Jurf A.S. Effect of altered thyroid status on lysosomal enzymes and thymidylate synthetase activity in tumors and livers of host animals / A.S. Al-Jurf, S.A. Suleiman, A.P. Erenberg // Surg. Oncol. 1982. - Y.20, N1. - P.21-24.

77. Alterations in magnesium and zinc metabolism in thyroid disease / E. Dolev, P.A. Deuster, B. Solomon, U.H. Trostmann //Metabolism. 1988. - Y.37, N1. -P.61-67.

78. Andreoli M. Thyroid diseases: molecular diagnosis and therapeutic perspectives / M. Andreoli, A. Pontecorvi // Recenti. Prog. Med. 2000. - Y.91. - N1. -P.25-32.

79. Angelini C. Carnitine deficiency of skeletal muscle: report of treated case / C. Angelini, S. Ziicke, F. Cantarulti//Neurology. 1976. - Y.26. -P.633-636.

80. Anson M.L. // J. Gen. Physiol. 1939. - V.22. - P. 79.

81. Antioxidants in the treatment of Graves disease / L.N. Guerra, S. Moiguer, M. Karner et al. // IUBMB Life. 2001. - V.51, N2. - P. 105-109.

82. Antioxidant-sensitive triiodothyronine effects on characteristics of rat liver mitochondrial population / P.Venditti, M.C. Daniele, P. Masullo, S. Di Meo // Cell. Physiol. Biochem. 1999. - V.l. -P.38-52.

83. Asayama K. Oxidative muscular injury and its relevance to hyperthyroidism / K. Asayama, IC. Kato // Free Radic. Biol. Med. 1990. - V.8, N3. - P.293-303.

84. Awais D. Thyroid hormone regulation of myocardial Na/K-ATPase gene expression / D. Awais, Y. Shao, F. Ismail-Beigi // J. Mol. Cell. Cardiol. 2000. -V.32, N11. -P.1969-1980.

85. Bahouth S.W. Thyroid hormones transcriptionally regulate the i-adrenergic receptor gene in cultured ventricular myocytes / S.W. Bahouth // G. Biol. Chem. -1991. -V.266. P. 15863-15869.

86. Bartol R. Carnitine and endocrine disorders / R. Bartol // Rew. nout. mid. Sir. Endocrinol. 1981. - V.19, N4. - P. 269-270.

87. Bebawy L.I. Determination of trimetazidine dihydrochloride in the presence of its acid-induced degradation products / L.I. Bebawy, M.F. El. Tarras, S.A. El Sabour // J. AOAC Int. 2004. - N4. -P.827-833.

88. Belardinelli R. Effects of trimetazidine on the contractile response of chronically dysfunctional myocardium to low-dose dobutamine in ischaemic cardiomyopathy / R. Belardinelli, A. Purcaro // Eur. Heart J. 2001. - V.22, N23. —P.2164 - 2170.

89. Beneficial effect of MET-88, a new cardioprotective agent, on ventricular remodeling in rats with chronic heart failure secondary to myocardial infarction / Y. Hayashi, T. Kirimoto, N. Asaka, H. Miyake // Jpn. J. Pharmacol. 1995. -V. 67, Nl.-P.156.

90. Biochemical and morphological study of cardiac hypertrophy. Effects of thyroxine on enzyme activities in the rat myocardium / T. Tanaka, H. Morita, H. Koide et al. //Basic. Res. Cardiol. 1985. - V.80, N2. - P. 165-174.

91. Biochemical mechanisms of mildronate action during ischemic stress / M. Dambrova, D. Daiia, E. Liepin'sh, O. Kir'ianova // Lik. Sprava. 2004. — V.2, N6. - P.68-74.

92. Bremer J. Carnitine in intermediary metabolism: The metabolism of fatty acid esters of carnitine by mitochondria / J. Bremer // J. Biol. Chem. 1962. -V.237, N3. -P.3628-3632.

93. Busselen P. Exogenous palmitoyl carnitine and membrane damage in rat hearts / P. Busselen, D. Sercu, F. Verdonck // J. Mol. Cell. Cardiol. 1988. - V. 20, N5.-P. 905-916.

94. Calcium, magnesium, and zinc status in experimental hyperthyroidism / G. Simsek, G. Andican, E. Unal et al. // Biol. Trace. Elem. Res. 1997. - V.57, N2. —P.131-137.

95. Cardiac effects of long term thyrotropin-suppressive therapy with levothyroxine / B. Biondi, S. Fazio, C. Carella et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1993. - V.77. -P.334—338.

96. Carnitine transport into muscular cells. Inhibition of transport and cell growth by mildronate / B.Georges, F. Le Borgne, S. Galland et al. // J. Demarquoy Biochem. Pharmacol. 2000. -V.59, N11. - P. 1357-1363.

97. Changes in lipid peroxidation and free radical scavengers in kidney of hypothyroid and hyperthyroid rats / B.U. Sawant, G.D. Nadkarni, U.R. Thakare et al. //Indian. J. Exp. Biol. -2003. -V.41, N11. P. 1334-1337.

98. Changes in lipid peroxidation and free radical scavengers in the brain of hyperand hypothyroid aged rats / T. Mano, R. Sinohara, Y. Sawai et al. // J. Endocrinol. 1995. -V. 147, N2. -P.361-365.

99. Cilazapril prevents cardiac hypertrophy and postischemic myocardial dysfunction in hyperthyroid rats / T. Asahi, M. Shimabukuro, Y. Oshiro et al. // Thyroid. 2001.-V. 11, N11.-P. 1009-1015.

100. Cokkinos Y. Can metabolic manipulation reverse myocardial dysfunction? / V. Cokkinos // Eur. Heart J. 2001. - V.22, N23. - P.2138 - 2139.

101. Comparison of trimetazidine with nifedipene in effort angina: a doubleblind, crossover study / S. Dalla-Volta, G. Maraglino, P. Della-Valentina et al. // Cardiovasc. Drugs Ther. 1990. -V.4, N6. -P.853-859.

102. De Pasquale B. L-carnitine for the treatment of acute myocardial infarct / B. De Pasquale, G. Righetti, A. Menotti // Cardiologia. 1990. - V.35, N7. - P. 591-596.

103. Decker R.S. Lysosomal alterations in heart, skeletal muscle, and liver of hyperthyroid rabbits / R.S. Decker, K. Wildenthal // Lab. Invest. 1981. - V. 44, N5. - P.455-65.

104. Decrease in heart mitochondrial creatin kinase activity due to oxygen free radicals / G.X. Yuan, M. Kaneko, H. Masuda et al. // Biochim. et Biophys. Acta. 1992. - V. 1140, N3. - P.78-84.

105. Deficiency of superoxide dismutase in endemic goiter tissue / M. Sugawara, T. Kita, E.D. Lee et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1988. - V.67, N6. -P.1156-1161.

106. Di-Biarse M. The role of metabolic therapy in myocardial infarct / M. Di-Biarse, G. Basko, P. Fizzon // Cardiologia. 1991. - V.36. - P.389-392.

107. Differential effects of 3 beta blockers on lipid peroxidation in hyperthyroid muscle / K. Asayama, H. Hayashibe, K. Dobashi, K. Kato // Endocrinol. Jpn. 1990. V.37, N4. - P.471-478.

108. Effect of hypo- and hyperthyroid states on phospholipid composition in developing rat heart / B. Hamplova, O. Novakova, E. Tvrzicka et al. // Mol. Cell Biochem. 2003. - V.252, N1. - P. 295-303.

109. Effects of trimetazidine on the calcium transport and oxidative phosphorylation of isolated rat heart mitochondria // C. Guarnieri, C. Finelli, M. Zini, C. Muscari //Basic. Res. Cardiol. 1997. - V.92, N2. -P.90-95.

110. Enhanced gluconeogenic capacity from glycerol in hyperthyroid man: evidence in favour of a beta-adrenergic mechanism / A.J. McCulloch, N.R. Steele, P. Kendall-Taylor et al. // Clin. Endocrinol (Oxf). -1984. V.21,N4. -P.399-407.

111. Evaluation of the kinetics of MB creatine kinase in patients undergoing systemic thrombolytic therapy / F. Arrigo, C.M. Sacca, A. Cavalli et al. // Cardiologia. -1991.-V.36, N11. -P.861-866.

112. Exposure of cells to nonlethal concentrations of hydrogen peroxide induces degeneration-repair, mechanisms involving lysosomal destabilization / U.T. Brunk, H. Zhang, H. Dalen, K. Ollinger // Free Radic. Biol. Med. 1995. -V.19, N6. — P.813-822.

113. Fatty acid oxidation and related gene expression in heart depleted of carnitine by mildronate treatment in the rat / P. Degrace, L. Demizieux, J. Gresti et al. //Mol. Cell. Biochem. -2004. V.258, N2. - P. 171-182.

114. Feely J. Use of beta-adrenoreceptor blocking drugs in hyperthyroidism / J. Feely, N. Peden // Drugs. 1984. - V.27. - N5. - P.425-446.

115. Foley C.M. Thyroid status influences baroreflex function and autonomic contributions to arterial pressure and heart rate / C.M. Foley, R.M. McAllister,

116. E.M. Hasser // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2001. - V.280, N5. -P.2061-2068.

117. Ford H.C. Disturbances of calcium and magnesium metabolism occur in most hyperthyroid patients / H.C.Ford, M.J. Crooke, C.E. Murphy // Clin. Biochem. 1989. - V.22, N5. - P.373-376.

118. Free radical activity and antioxidant defense mechanisms in patients with hyperthyroidism due to Graves' disease during therapy / K. Komosinska-Vassev, K. Olczyk, E.J. Kucharz et al. // Clin. Chim. Acta. 2000. - V.300, N1. -P.107-117.

119. Free radicals and Graves' disease: the effects of therapy / R. Wilson, M. Chopra, H. Bradley et al. // Clin. Endocrinol. (Oxf). 1989. - V.30, N4. -P.429-433.

120. George N. Thyroid hormones control lysosomal enzyme activity in liver and skeletal muscle / N. George, L.Martino, Alfred L. Golberg. // Cell Biology. 1978. - V. 75, N.3. - P. 1369-1373.

121. Graves' disease-associated changes in the serum lysosomal glycosidases activity and the glycosaminoglycan content / K. Komosinska-Vassev, K. Olczyk, E.M. Kozma et al. // Clin. Chim. Acta. 2003. - V.331, N1. -P.97-102.

122. Gredilla R. Thyroid hormone-induced oxidative damage on lipids, glutathione and DNA in the mouse heart / R. Gredilla, G. Baija, M. Lopez-Torres // Free Radic. Res. 2001. - V.35, N4. - P.417-425.

123. Guarnieri C. Anti oxy-radical properties of trimetazidine / C. Guarnieri, C. Muscari // Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 1989. -V.64, N2. -P.215-225.

124. Guerrero A. Effect of thyroid status on lipid composition and peroxidation in the mouse liver / A. Guerrero, R. Pamplona, M. Portero-Otin // Free Radic. Biol. Med. 1999. -V.26, N1. -P.73-80.

125. H202-mediated damage to lysosomal membranes of J-774 cells / J. Zdolsek, H. Zhang, K. Roberg, U. Brunk // Free Radic. Res. Commun. — 1993. V.18, N2. -P.71-85.

126. Halliwell В. Free radicals in biology and medicine / B. Halliwell, J.M. Gutteridge // Oxford, 1989. V.2. - P.58-188.

127. Нага H. Serum superoxide dismutase in patients with Graves' disease / H. Hara, Y. Ban, R. Sato // Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi. 1993. - V.69, N2. -P.87-92.

128. Heimberg M. Plasma lipoproteins and regulation of hepatic metabolism of fatty acids in altered thyroid states / M. Heimberg, J.O. Olubadewo, H.G. Wilcox // Endocr. Rev. 1985. - V.6, N4. - P.590-607.

129. Horrum M.A. Thyroxine-induced changes in rat liver mitochondrial cytochromes / M.A. Horrum, R.B. Tobin, R.E. Ecklund // Mol. Cell. Endocrinol. 1985. - V.41, N2. - P. 163-169.

130. Impact of stress and triiodothyronine on plasma magnesium fractions / S. Porta, A. Epple, G. Leitner et al. //Life Sci. 1994. - V.55, N17. -P.327-332.

131. Improvement of long term preservation of the isolated arrested rat heart by trimetazidine: effects of the energy state and mitochondrial function / L. Kay, C. Finelli, J. Aussedat et al. // Am. J. Cardiol. 1995. - V.76. - P.45B-49B.

132. Inhibition of carnitine synthesis protects against left ventricular dysfunction in rats with myocardial ischemia / T. Aoyagi, S. Sugiura, Y. Eto et al. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1997. - V.30, N4. -P.468-474.

133. Inhibition of mitochondrial carnitine palmitoyltransferase-1 by a trimetazidine derivative, S-15176 /М. Hamdan, S. Urien, H. Le Louet et al. // Pharmacol. Res. -2001. -V.44, N2. -P.99-104.

134. Is the antianginal action of trimetazidine independent of hemodinamical changes? / Q. Timour, C. Harpey, F. Durr et al. // Cardiovasc. Drugs. Ther. -1991. -V.5.-P. 1043-1044.

135. Kahaly G.J. Cardiovascular hemodynamics and exercise tolerance in thyroid disease / G.J. Kahaly, C. Kampmann, S. Mohr-Kahaly // Thyroid. -2002. -V. 12,N6. -P. 473-481.

136. Kalra J. Oxygen free radicals and cardiac depression / J. Kalra, K. Prasad // Clin. Biochem. 1994. - V.27, N3. - P. 163-168.

137. Kennedy J.A. Effect of trimetazidine on carnitine palmitoyltransferase-1 in the rat heart / J.A. Kennedy, J.D. Horowitz // Cardiovasc. Drugs Ther. 1998. -V.12, N4. — P.359-363.

138. Klein I. New perspectives on thyroid hormone, catecholamines and the heart /1. Klein, G.S. Levey // Amer. J. Med. 1984. - V.76, N2. - P. 167-172.

139. Klein I. Thyroxine-induced cardiac hypertrophy: time course of development and inhibition by propranolol /1. Klein // Endocrinology. 1988. -V.123, № 1. - P.203-210.

140. Komosinska-Vassev K. Free radical concepts in the etiopathogenesis of Graves-Basedow disease / K. Komosinska-Vassev, K. Olczyk, K. Winsz // Postepy Hig. Med. Dosw. 2000. - V.54, N2. -P.225-237.

141. La Badie J. Hepatic synthesis of carnitine from protein-bound trimethyl-lysine. Lysosomal digestion of methyl-lysine-labelled asialo-fetuin / J. La Badie, W.A. Dunn, NN. Aronson // Jr. Biochem. J. 1976. - V.160, N1. -P.85-95.o I

142. Lavanchy N. Anti-ischemic effects of trimetazidine: P NMR spectroscopy in the isolated rat heart / N. Lavanchy, J. Martin, A. Rossi // Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 1987. - V.286, N9. - P.97-110.

143. Lee J. Metabolic manipulation in ischaemic heart disease, a novel approach to treatment / J. Lee, M. Horowitz // Eur. Heart J. 2004. - V. 25, N8. - P.634 -641.

144. Levy S. Group of South of France Investigators. Combination therapy of trimetazidine with diltiazem in patients with coronary artery disease / S. Levy // Am. J. Cardiol. 1995. - V.76, N7.-P.12B-16B.

145. Lipid peroxidation in patients with diffuse toxic goiter and hypothyroidism / E.S. Rom-Bugoslavskaia, E.V. Somova, T.S. Grinchenko et al. //Lik. Sprava. -1998. V45,N1. —P.88-91.

146. Lipid peroxidation levels in rat cardiac muscle are affected by age and thyroid status / R. Shinohara, T. Mano, A. Nagasaka et al. // J. Endocrinol.2000. V. 164, N1. - P.97-102.

147. Lopaschuk G.D. Trimetazidine in AMI / G.D. Lopaschuk // Eur. Heart J.2001. V.22,N11. -P.977 - 978.

148. Lopaschuk G.D. Glucose and palmitate oxidation in isolated working rat hearts reperfused following a period of transient global ischemia / G.D. Lopaschuk, M.A. Spafford, N.J. Davies // Circ. Res. 1989. - V.66, N5. -P.546-553.

149. Lopaschuk G.D. Inhibiting fatty acid oxidation as a novel therapeutic approach to treating ischaemic heart disease / G.D. Lopaschuk // Cardiovasc. J. S. Afr. 2004. - V. 15, N4 (Suppl 1). -P.l

150. Lopez-Torres M. Effect of thyroid hormones on mitochondrial oxygen free radical production and DNA oxidative damage in the rat heart / M. Lopez-Torres, M. Romero, G. Barja // Mol. Cell. Endocrinol. 2000. - V.168, N1. -P.127-134.

151. Luo L. Effects of thyroid hormone on food intake, hypothalamic Na/K ATPase activity and ATP content / L. Luo, D.B. MacLean // Brain Res. 2003. -V. 973, N2. - P.233-239.

152. Lysosomal enzymes promote mitochondrial oxidant production, cytochrome c release and apoptosis / M. Zhao, F. Antunes, J.W. Eaton, U.T. Brunk // Eur. J. Biochem. -2003. V.270, №18. -P.3778-3786.

153. Ma Q.L. Effects of trimetazidine on serum oxygen free radicals in congestive heart failure / Q.L. Ma, Y. Xie, S.D. Zhang // Hunan Yi. Ke. Da. Xue. Xue. Bao. 2002. - V.27, N6. - P.527-529.

154. Magnesium metabolism in hyperthyroidism / T. Disashi, T. Iwaoka, J. Inoue, S. Naomi // Endocr. J. 1996. - V.43, N4. - P.397-402.

155. Marks Dawn B. Basic medical biochemistry: a clinical approach / Dawn B. Marks, Coleen Smith. Philadelphia, 1996. - 807p.

156. Mitchell M.E. Carnitine metabolism in human subjects. 111. Metabolism in disease / M.E. Mitchell // Am. J. Clin. Nutr. 1978. - V.31, N4. - P.645-659.

157. Monteiro P. Protective effect of trimetazidine on myocardial mitochondrial function in an ex-vivo model of global myocardial ischemia / P. Monteiro, A.I. Duarte, L.M. Goncalves et al. // Eur. J. Pharmacol. 2004. -V.503, N1. -P.123-128.

158. Opie L.H. Metabolic plasticity and the promotion of cardiac protection in ischemia and ischemic preconditioning / L.H. Opie, M.N. Sack // J. Mol. Cell. Cardiol. 2002. - V.34, N9. - P. 1077-1089.

159. Parameters of lipid peroxidation and low density lipoprotein (LDL) oxidation in a course of hyperthyroidism / M. Lampka, A. Nowicka-Lipska, R. Junik et al. // Pol. Merkuriusz. Lek. 2004. - V.16, N96. -P.523-526.

160. Passeron J. Effectiveness of trimetazidine in stable effort angina due to chronic coronary insufficiency: a double-blind versus placebo study / J. Passeron//Presse Med 1986. -V. 15, N7. - P. 1775-1778.

161. Pierce G.N. The contribution of ionic imbalance to ischemia/reperfusion-induced injury / G.N. Pierce, M.P. Czubryt // J. Mol. Cell. Cardiol. 1995. -V.27, N5. — P.53-63.

162. Plasma and erythrocyte magnesium concentrations in thyroid disease: relation to thyroid function and the duration of illness / Y. Shibutani, T. Yokota, S. Iijima et al. // J. Med. 1989. - V.28, N4. - P.496-502.

163. Preferential megalin-mediated transcytosis of low-hormonogenic thyroglobulin: a control mechanism for thyroid hormone release / S. Lisi, A. Pinchera, R.T. McCluskey et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - V.100, N.25. -P.14858-14863.

164. Propranolol diminishes cardiac hypertrophy but does not abolish acceleration of the ischemic contracture in hyperthyroid hearts / C.I. Pantos, I.S. Mourouzis, S.M. Tzeis et al. // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2000. - V.36, N3. -P.384-389.

165. Purification and characterization of the rat liver gamma-butyrobetaine hydroxylase / G. Stephan, L.B. Francoise, G. Denis et al. // Mol. Cell. Biochem. 1998. - V.178, N2. -P. 163-168.

166. Ravichandran L.V. Alterations in the heart lysosomal interaction in rat / L.V. Ravichandran, Krishan R. Puvana, K.T. Joseph // Biochem. 1990. -V.22, N2. - P.387-396.

167. Reduction of carnitine content by inhibition of its biosynthesis results in protection of isolated guinea pig hearts against hypoxic damage / P.K. Dhar, I.L. Grupp, A. Schwartz et al. // J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. 1996. - V.l, N3. — P.235-242.

168. Regulation of fatty acid oxidation in the mammalian heart in health and disease / G.D. Lopaschuk, D.D. Belke, J. Gamble et al. // Biochim. Biophys. Acta 1994. -V. 1213, N4. -P.263-276.

169. Sellier P. The effects of trimetazidine on ergometric parameters in exercise-induced angina: controlled multicenter double blind versus placebo study / P. Sellie // Arch. Mai. Coeur. Vaiss. 1986. - V.79, N3. -P.1331-1336.

170. Serum lysosomal acid hydrolase activities in Graves' disease / H. Guillou, V. David, Y. Lorcy, A. Le Treut // Clin. Chim. Acta. 1982. - V.120, N2. -P.219-224.

171. Severe hyperthyroidism induces mitochondria-mediated apoptosis in rat liver / G. Upadhyay, R. Singh, A. Kumar et al. // Hepatology. 2004. - V.39, N.4. — P.l 120-1130.

172. Simsek G. Calcium, magnesium, and zinc status in experimental hyperthyroidism / G. Simsek, G. Andican, E. Unal et al. // Biol. Trace Elem. Res. 1997-V.57, N2. — P. 131-137.

173. Some biochemical aspects of the protective effect of trimetazidine on rat cardiomyocytes during hypoxia and reoxygenation / E. Fantini, L. Demaison, E. Sentex et al. // J. Mol. Cell. Cardiol. 1994. - V.26, N8. - P.949-958.

174. Stanley W.C. Myocardial energy metabolism during ischemia and the mechanisms of metabolic therapies / W.C. Stanley // J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. -2004. -NI. -P.31-45.

175. Starling J.R. A lysosomal study of cold-induced hyperthyroidism in the rat: comparison to human hyperthyroid tissue / J.R. Starling, J.L. Weese // Surgery. 1983. - V.94, N1. - P. 65-71.

176. Substrate metabolism in untreated and treated thyrotoxicosis / N. Moller, K.Y. Hove, S. Nielsen et al. //Ugeskr. Laeger. 1998. -V. 160, N10. -P. 14751479.

177. Tabbi-Anneni I. Trimetazidine effect on phospholipid synthesis in ventricular myocytes: consequences in alpha-adrenergic signaling / I. Tabbi-Anneni, A. Lucien, A. Grynberg // Fundam. Clin. Pharmacol. — 2003. V.17, N1. —P.51-59.

178. Tabbi-Anneni. Prevention of Heart Failure in Rats by Trimetazidine Treatment: A Consequence of Accelerated Phospholipid Turnover? / Tabbi-Anneni, C. Helies-Toussaint, D. Morin // Exp. Ther. 2003. - V.304, N3.-P. 1003-1009.

179. Taegetmeyer H. Energy metabolism in the heart: from basic concepts to clinical application / H. Taegetmeyer // Curr. Prob. Cardiol. 1994. - V.19, N2. - P.59-113.

180. Thyroid hormone controls carnitine status through modifications of gamma-butyrobetaine hydroxylase activity and gene expression / S. Galland, B. Georges, F. Le Borgne et al. // Cell. Mol. Life Sci. 2002. - V.59, N3. -P.540-545.

181. Thyroid hormone regulation of cardiac bioenergetics: role of intracellular creatine / M.S. Queiroz, Y. Shao, D.A. Berkich et al. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2002. - V.283, N.6. - P.2527-2533.

182. Thyroid proteinase activity in toxic forms of goiter / A.V. Antelava, L.E. Gogiashvili // Probl. Endokrinol. 1983. - V.29, N6. - P.73-76.

183. Tichy M. The determination of serum creatinkinase isoenzymes in the diagnosis of acute myocardial infarction / M. Tichy, V. Pidrman, Gregor // Cas. Lek. Cesk. 1976. - V.115, N22. -P.662-664.

184. Triglycerides impair postischemic recovery in isolated hearts: roles of endothelin-1 and trimetazidine / L.D. Monti, S. Allibardi, P.M. Piatti et al. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. -2001. -V.281, N3. -P.1122 1130.

185. Trimetazidine improves left ventricular function and quality of life in elderly patients with coronary artery disease / Vitale, M. Wajngaten, B. Sposato et al. // Eur. Heart J. 2004. - V.25, N20. - P. 1814 - 1821.

186. Trimetazidine improves recovery during reperfusion in isolated rat hearts after prolonged ischemia / M. Bdzler, S. Dernek, B. Sevin, T. Kural // Anadolu. Kardiyol. Derg. 2003. -V.3, N4. -P.303-308.

187. Trimetazidine, a cellular anti-ischemic agent / C. Harpey, P. Clauser, C. Labrid et al. // Cardiovasc. Drug. Rev. 1989. - V.6, N4. - P.292-312.

188. Trimetazidine: in vitro influence on heart mitochondrial function / L. Demaison, E. Fantini, E. Sentex et al. // Am. J. Cardiol. 1995. - V.76, N6. -P.31-37.

189. Venditti P. Effect of ischemia-repeffusion on heart mitochondria from hyperthyroid rats / P. Venditti, C. Agnisola, S. Di Meo // Cardiovasc. Res. -2002. — V.56, N1. P. 76-85.

190. Venditti P. Effect of thyroid state on susceptibility to oxidants and swelling of mitochondria from rat tissues / P. Venditti, R. De Rosa, S. Di Meo // Free Radie. Biol. Med. 2003. - V.35, N5. - P.485-494.

191. Venditti P. Effects of thyroid state on H202 production by rat heart mitochondria: sites of production with complex I- and complex II-linked substrates / P. Venditti, A. Puca, S. Di Meo // Horm. Metab. Res. 2003. -V.35, N1. —P.55-61.

192. Villa R.F. Effect of ischaemia and pharmacological treatment on enzyme activities of cortical mitochondria and synaptosomes / R.F. Villa, A. Gorini // Int. J. Clin. Pharmacol. Res. 1984. - V.4, N4. - P.263-275.

193. Vitamin E protects against thyroxine-induced acceleration of lipid peroxidation in cardiac and skeletal muscles in rats / K. Asayama, K. Dobashi, H. Hayashibe, K. Kato // J. Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokyo). 1989. - V.35, N5. -P.407-418.

194. Wajdowicz A. Myocardial damage in thyrotoxicosis -ultrastructural studies / A. Wajdowicz, W. Dabros, M. Zaczek // Pol. J. Pathol. 1996. - V.47, N3. -P.127-133.

195. Winder W.W. Response of mitochondria of different types of skeletal muscle to thyrotoxicosis / W.W. Winder, J.O. Holloszy // Am. J. Physiol. -1977. V.232, N5. - P. 180-184.

196. Wuttke H. Clinical significance of serum magnesium concentration in thyrotoxicosis (author's transl.) / H. Wuttke, F.J. Kessler // Med. Klin. 1976. -V.71, N6. -P.235-238.