Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА АНТГЕЛЬМИНТНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ НОВОЙ ФОСФОРНОЙ СОЛИ ПИПЕРАЗИНА ПРИ АСКАРИДИОЗЕ КУР

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "СРАВНИТЕЛЬНАЯ ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА АНТГЕЛЬМИНТНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ НОВОЙ ФОСФОРНОЙ СОЛИ ПИПЕРАЗИНА ПРИ АСКАРИДИОЗЕ КУР"

л-г ъбъъ

На правах рукописи

Гяйсина Людмила Андреевна

Сравнительная патоморфологнческая оценка антгельминтной эффективности новой фосфорной соли пиперазина при аскариднозе кур

16.00.02. - патология, онкология и морфология животных 03.00.19. - паразитология

М

АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Казань 2004

Работа выполнена на кафедрах патологической анатомии и паразитологии Казанской государственной академии ветеринаркой медицины им. Н. Э. Баумана (КГАВМ).

Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор

Заняло« Ильдар Надырович доктор ветеринарных наук, профессор Лутфуллнн Минсагит Хайруллович Официальные оппоненты: доктор ветеринарных, профессор

Ситдиков Рашнд Ислаыутдинович кандидат биологических наук, доцент Соколина Флюра Мухаметгалеевна

Ведущая организация • Нижегородская государственная

сельскохозяйственная академия

Защита диссертации состоится ¿е&Аг'аЛ004 г. в часов на заседании диссертационного совета Д- 220. 034. 01. при Казанской государственной академии ветеринарной медицины нм. Н. Э. Баумана (420074, г. Казань, ул. Сибирский тракт,35)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанской государственной академии им. Н. Э. Баумана

Автореферат разослан 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

д. вет. н., профессор (£>»-с—М. С. Ежкова

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА PAKOTM

Актуальность темы,' Лскаридноч является одним - in наиболее распространенных гельмннгозов кур при напольном содержании (Агаиович Ж. Л., Кормлен А.ЧС,- 1979, Малахов А. В., 1990, Лринкин Л. В., 1998, Сафиуллин Р. Т., Абрамов В. Е.,. Горюнова' Т. А, 1999,'Тимохина; Ю.В., 2002) и наносит существенный экономический ущерб лгтниеводсгву (Алимова В. Д., 1967, Азарян Л. Т., 1969,. Акопян С. А.', Чабаиян А, Г., Ханбсгян P.A., 1977, Воробушков А. Г., 1989, Аринкнн А. В. it др.' 1997, Береснева, Е.

в., фирсов н. ф., 2000). ".;; ,

Основным методом борьбы при аскаридиозе является химиотерапия. В неблагополучных по атому заболеванию птицеводческих хозяйствах кур дегедьмиитизируют ежемесячно. Длительное использование одних it тех же шгггельмннтнков' приводит к снижению эффеетнвности дегельшпптоашш за счет появления препарат - устойчивых шояятов паразитов (Малахов А. В., 1981, 1982, Богоявленский Ю. К., 1989, Архипов И. Ai, 2002,. Кузьмина Т. А., ИегруцаЕ. *А. и др„ 2002, Priclianl R., Half С. A:, Kelly j. D. el al., 1980,' Wallet P. ]., 1997). Для успешной борьбы снематодозами и во тбежаиие появления . резистентных шолятов' необходимо иметь набор шптельмштшков разной химической природы и механизма действия. Успех обработки во многом зависит от правильного выбора антгельмшпного препарата с учетом не только его экстенс - и ютенсэффективностн, но и влияния его на организм хозяина. Поэтому' при внедрении в практику нового антгельминтшеа возникает необходимость проводить гистологические и гистохнмпческие исследования тканей паразитов н их хозяев после прнме-нсш1я препаратов, чтобы выяснить степень вызванных деструкпшгых процессов, имеющих место в тканях гельминтов и их хозяев, а также устано-шпъ возможность восстановления, происшедших изменений-' '

Пс.-ч. и калачи исследований.. Целью .нашейра боты является шучение сравнительной пзтоморфологической оценки атгельминтной эффекпшпост новой фосфорной соли ттсразина (НФСП) и внедрение ее к ветеринарную практику. Для реализации указанной. цели были поставлены следующие задачи: . .. . .

- изучить эпизоотологию, сезонную и возрастную динамику аска-рндиоза кур в хозяйствах Республики Татарстан;

- установить терапевтическую дозу новой фосфорной соли пипера-

- выявить характер патоморфологнческих изменений у Ascaridh galli in vitro после воздействия на них НФСП, авертина, ннперазии аднпииатан альбендазола;

- изучить влияние новой фосфорной соли шшсразина, авсрпша, тшсратн адишшата и альбендагюла на органы н ткани кур, а также на их яйценоскость. Научная ноююиа. Изучено шгтгельмшггнос действие новой фосфор-iioii cant пинеразина н установлена се высокая эффективность при аекзри-днозе кур в лабораторных н прогаводствснных условиях.. Впервые дана срав-шггельная пзтоморфологическая оценка шгггельмшггной эффективности НФСП. Установлено, что препарат отноС1ггся к 4 классу токсичности (согласно ГОСТ 12. 1.007. 76). • ' - .:

Изучены процессы регенерации в органах желудочно-кишечного тракта, печени и почках.

Практическая цен ноги» паботм. В качестве эффективного слабо рс-акгогенного препарата для дегельминтизации ннвазнровашшх асквриднозом кур рекомендуется использовал, новую фосфорную соль ттеразшга.

Внедрение исследований. Новая фосфорная соль пютераэшт испытана в П П Р «ЮдинскиЙ» в качестве аштельмннтного средства при аскарндио-зе кур, На основании проведенных i (следований получен naxeirr иатоСрсте-шш ¿62211835. Приоритет изобретения 19. 04. 02. Заявлено 19. 04.02. Заявка Кз. 2002110605, Зарешстр. в Госуд. реестре изобретений 10. 09. 03. Результаты проведенных лсследовшшй, сформулированные в диссертации, внедрены в учебный процесс на кафедрах патологической анатомии и шркипологин Казанской государственной.акадешш ветеринарной медицины. . . " ^ "

Л проДан и я работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на республиканской научно-прЬюводствснной'конфереишш (Казань, 2001), на Всероссийской 1!аупно-протводстве1шо{*Гкопфереицш1 по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехшш (Казань, 2002, 2003), на cecctnt коор-дююшюююго совета по ветерннарноП гельмшгтолопш (Москва,2003), рас-шнрешюм заседшпш сотрудников кафедр паразитологии, патологической анатомии, эгаооотологни, хирурпш'и шытомш! (Казань, 2003).

' Основные положения, пмиоснмие мж цпиггу: — .

1. Эпизоотология, сезонная и возрастная динамика аскаридноза кур на птицефабриках Республики Татарстан; : ' 2. Изучение патоморфологнческнх шмененнй, вызванных действием НФСП in vitro наоргшш нткздш нематоды Ascaridiagalli; *

3. Определение терапевтической дозы НФСП при аскарнднозе кур;

4. Потоморфологнческие изменения .в органах п тканях птнц после -■ применения в лечебных и повышенных дозах НФСП, ааерпша, пн-

пераз1ш адипнната и альбендазола. - -

Публикации. Но материалам исследований опубликовано 9 научных рабог, в которых изложены основные наложения н выводы по изучаемым вопросам.

Ofii.cM и структура диссертации. Диссертация наложена на 220 страницах ком и LKjTCpi юго текста, иллюстрирована 24 таблицами и 59 рисунками. Включает введение, обзор литературы, результатов собсгвеннных исследовании, обсуждения, выводов, практических предложения и приложения. Список использованной лотературы, включает 327 источников, в том числе 42 иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Материалы и методы

Работа выполнялась на кафедрах патологической анатом ни, наразн-толопш Казанской государственной академии; ветер)тарной медицины имен» H. Э. Баумана, а также птицефабриках Республики Татарстан (ллсмрепродукторе первого порядка . «Юдннский», птицефабрике "Казанская" Зеленодольского района, «Ак Барс» Пестричинсхого района, "Буинская" Буинского района) в 1999 - 2003 гг. Исследования проводили в соответсшш! с планом научно - исследовательской работы академии (Ni госудорственной регистрации 01980005948). .При выполнении экспериментальных ксследовашЛ нам» использован материал следующего характера. ■ • , ..... . ' .

Распространение, возрастную » сезонную динамику аскаридиоза шучали по результатам регулярной гсльышгтоопоскогапссюк нсследовшшй и дашплхгелъшпп'олоппсского вскрытия.

Дтя выяснения загрязненности птичшасов яйцами и личинками аекзридий проводили исследования помета, соскобов взятых с пола, насестов, стен, поилок/кормушек и проб подстилочного материала по Г. Л. Котслышкову(1984).

Определите параметров острой тошиности НФСП проводили на 120 беспородных белых мышах массой 16-18 г., го которых было сформировано б опытных групп, по б особей в каждой. Препарат вводили предварительно растворяя его в воде натощак, перорально, однократно в дозах 500-3000мг/кг (ДВ) массы тела. Наблюдешге за состоящем животных проводили в течение.10 дней. Средне смертелы1ую дозу (ЛДм) вычисляли по Керберу.(М Л. Беленький, 1963). ' . .

Для успшовдения терапевтической дозы НФСП сравшггельной шгт-гельмштюН эффективности н пзтоморфологнческнх исследований 70-ти суточных цыплят заражали перорально инвазионными яйцамн Ascaridta galli в дозе по 500 яиц на птицу. Предварительно осуществляли культивирование яиц аекарцлий по методике П. Т. Тверд охлебова (1965).

Заражение проводили из .глазной пинетки, индивидуально, ■ однократно. Приживаемость гельминтов определяли в промежутке .1-2 месяца после заражения цыплят на основании гельминтоовосконии помета но метолу Фюллсборна, Калантзрян, Мал л ори, а также при иослеубоПном осмотре кишечников кур. .' ' ^

Титрацию различных доз новой фосфорной соли шшеразииа при экспериментальном аскаридиозе проводили на 67 цыплятах. Птицам первых шести групп (по 10 голов в каждой) задавали испытуемый препарат в дозах 150, 200,250, 500, 750 и 1000 мг на голову два дня подряд, один раз в дет.. Сольные цыплята 7-oft группы оставались не леченными м служили контролем. Препарат вводили индивидуально, орально, предварительно растворив его в воде. Учет шгтгельмшгтной эффективности препарата проводили через 14 суток путем послеубойного гельмшгтологичсского обследования опытных и К01ПрОЛЬНЫХ птиц. '

Изучение сравнительной шптсльмтггной эффективности НФСП проводили при экспериментальном аскаридиозе на 65-ти зараженных цыплятах 4,5 месячного возраста НФСП испытывали в сраанстги с авертином, ннпе-раз ином аднпинатом н альбендазолом.

Сравшггельнун) шптельмшггную эффективность и шшотше * на яйценоскость'НФСП в дозе 500 мг, аоертина в: дозе 150 мг, пиперазин ' одитшата - '500 мг и альбендазола —100'на гтпщунзучали it ППР "Юдинский" на 1500 курах 320 -дневного возраста кросса "Конкурент1- 2, спонтанно шгаазированиых аскаридиозом. Все препараты задавали птице утром групповым способом с половиной нормы коицентрнро ванн ого корма. В период проведет» опыта куры находились в аналогичных условиях содержания и кормления. УчСг исходной гжстенсинвазнрованностн (ЭИ) и шгтенсинвазированности (НИ) и последующей эффекптности шпгсльмшггихоп через' 14 дней после дегельминтизации, проводили на основании гельм'ингоовоскопического метода Фюллеборна и Маллори.

С целью изучения пэтоморфологических изменений при экспериментальном аскаридиозе проводили убой подопытных - цыплят (27 голов) в зависимости от фазы развития гельминтов на 14, 21 и 56 дни после заражения. Сравнительные патоморфологнческне шменения изучали на 84 цыплятах после пр1шёнения НФСП, олертина,'пилеразина адшшната и альбеида-зола в дозах 500 мг, 150 мг, 500 мги 100 мг соответственно на 3, 9 и 2Г сутки нослс последней дачи препарата. В период проведения опыта птицы находились в аналопгишх условиях содержания й кормления.

Изучение переносимости и пэтоморфологических изменений после применения увеличенных терапевтических * доз антгельм шпиков проводили на 30 цыплятах, разделенных по принципу аналогов на 5 групп. • Птицам первой группы назначали двухкратно повышенную дозу НФСП (1000 мг), второй- пяти кратноу в сличенную дозу ИФСП (2500мг), третьей -авертин 750 мг, четвертой - альбендазол 500 мг (50 мг) но ДВ, пятой-

шшсраш» ашшинат 2500мг на птицу один раз в денц дна дня подряд. Нее препараты залапали типам индивидуально. Цыплята контрольной группы остапались без лечения." Общее состояние. оценивали по лшшмм клинических наблюдений за два дня до дачи,.затем через 1, 2, 3, 4, б, 24, 48, 72 часа, а также через 4 и 5 суток после назначения повышенных доз.

Для , проведения . патоморфологмческих и ,- гистохимических исследований кусочки стенок мышечного и железистого желудка, стенки . трнкого отдела кишечника, кусочки печени и почки фиксировали & 10%? ном нейтральном . формалине, этанол-формалине. Уплотнение . фиксированного материала проводили , путем, заливки а пзрафин и > шготавлнвали . гистологические срезы толщиной . 5-10, мкм, которые окрашивали . гематоксилин-эозином, азур-эозином, гликоген и нейтральные мукополисахориды выявляли Шифф-реакцией по Л. Л... Шабадашу (1947), аскорбиновую кислоту, по Баххусу р.. Пирс, 1962). * Опенку уровня содержания аскорбиновой кислоты к гликогена проводили -вшуалыюпочетырехбалыюйсистеме.,. , . •„;,.■< ... .

Изучали наго морфологические измеиешю возникающие в организме А$сал'(1ш са1Н. под . влиянием , испытуемых ., шптельмшггнков. после предварительной 40-минугной, 3-х и 12-ти .часовой экспозиции живых гсльмшпов & водных растворах (1:1000) НФСП, авертина,. гатсразина адипикзта и альбендазола. Ко1прольных нематод инкубировали при Ш1ХЮГИЧИЫХ условиях в физиологическом растворе.. После инкубирования контрольных н подопытных нематод фиксировали г в'холодном" 2%- ном растворе гдутарового - альдегида на ОД М'; фосфатном . буфере, дофнксировалн в 2°/о- ном растворе тетраоксида'осмия, промывали в 0,1 фосфатном буфере, обезвоживали и заключали в эпон-оралдитную смесь (А. Ф. Киселев и др., 1983; , В. 8. \Уеак1еу, 1975).- Полимеризацию смол проводили при температуре 60 °С в течение 24-72 часов в полиэтиленовых стаканчиках.; Полутонкис срезы толщиной 500нм изготавливали при помощи стеклянных ножей на ультрамнкрогоме>УМПТ-б. Полученные срезы окрашивали по Ю. Л. Перову (1974). * .. - . .

Морфометричсские, карнометрические исследования проводили при помощи окуляр , насадки (МОВ-1-15)с ;учСтом. ретракции тканей при фиксации. Объем ядер и ядрышек определяли по формуле V = дЕ)1 /6, .где я-оптшеиие длины окружности к диаметру, Ц- диаметр в мкм. Для ядер к ядрышек с элонгацией свыше 1,2 объем определяли по формуле У=1/6 кЬВ1, где Ь-длииная, • В-короткая оси эхтилса , в„ мкм.. Стереометрические исследования проводили по Г. ПАвтандилову и др.,1981, Е.иш1еп\*оос1,1970).

Полученные данные подвергали статистической. обработке по программе «Ехсе!» на ПК «РепПит 2»

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1. Эпизоотология и сезонная н возрастная динамика аскарндноза кур

По результатам изучения распространения аскаридиозной инвазии в птицеводческих хозяйствах РТ установлено, что в большинстве из них нема-тодозы птиц представлены достаточно широко и главным образом в хозяйствах, где в соответствии с технологией выращивания предусмотрено напольное содержания птиц. Из 4739 обследованных кур аскаридиозом было поражено 964 (20,3%). У 1589 цыплят при гельминтологическом вскрытии аска-ридий не было обнаружено. При этом экстенсинвззированность птиц аскаридиозом колебалась от 11,3 до 33,8%, а интенсинвазированность от I до 53 экземпляров. Наиболее сильно была инвазирована птица на птицефабрике «Ак Барс» где из 487 исследованных аскаридиозом заражено 219 (45%) голов. Большая часть из инв аз про ванных птиц имела интенсивность инвазии от 1 до 10 экземпляров, количество которых на птицефабрике «Казанская» составило 66,4%, на ППР «Юдинский»-51,6%, на птицефабрике «Ак Барс»-54,3%. Количество кур с интенсивностью инвазии от 10 до 20 экземпляров составляло соответственно 19,3%, 29,9%, 19,6%. Сравнительно небольшое количество птицы имело сильную степень инвазии от 30 до 40 и от 40 до 50 экземпляров аскаридой и число их на птицефабрике «Казанская» составляло 2,4%, на ППР «Юдинский»-3,8 и 1,63%, а на «Ак Барс»- 9,13 и 5,5% соответственно. Наиболее высокую степень ннтенсннвазированности равную в среднем 14,2 эк- ... . земпляра имели куры на птицефабрике «Ак Барон

Результаты изучения сезонной динамики распространения аскарндноза, проведенные на птицефабрике «Казанская» Зеленодольского района РТ показало, что зараженность птиц аскаридиозом отмечалась на протяжении всего года, при этом показатели экстенс- и интенсннваз иро-ванн ости имели небольшие колебания. Пик экстенсинвазированности наблюдали в августе- сентябре (24,5 и 23,7%), а в марте-апреле произошло снижение этого показателя соответственно до 3,7% и 6,1%.

Колебание иитенсинвазированности были незначительными в течении года. Анализ возрастной динамики распространения аскарндноза, проведенный на птицефабрике «Казанская» показал, что птицы при клеточном содержании с суточного возраста до завершения продуктивного периода не ; инвазируются аскариднями. Заражение репродукторного стада птиц происходит при переводе их на напольное содержание. Наибольшую интенсивность инвазии отмечали у птиц в возрасте 6-8 месяцев. Аналогичную возрастную динамику инвазнрованности птиц отмечали в своих исследованиях С. О. Мовсесян, К. С. Ахумян, Ф. А. Чубарян (1981).

ПрОВСДСННЫС овоскоп инее к не »следования iio j ВОЛ или выявит!, осмии* кис источники заражения кур аскаридиозомг в' исследованных хозяйствах.1 Количество suif и ! личинок ;'Ascarid ¡a gaUï обнаруженных ni несменяемой' подстилке составило- 12,3%, в кормуиксах- 6,8%,*'насестах--5,3% и поилках' 2,1%. Максимальное содержание яиц и личинокаскаршшй'равное 16,7%' обнаруживапивблизипойлок.' " - ' : '"'г■*' ' *'

* . . г.;* .. ..................- . Таблица /.

Результаты изучения этооотологическоП ситуации по аекзридиозу кур. *1 '

п'пгицехозяйствах Республики Татарстан• *

*'' 1 . ' ■ * - * . . - - \ \, . . V . . t. „ Ш 1 , I'

' > ' ■ н. * ** '. 1 г.»' . - , '.'.v ■" . . Ч II

/ Кз П п С j ' • г Название хозяйства' * Исследовано - голов. Кол-во '1 шшазнро-* ''■'■■ вшшых-'аска-: рнднозом Экстеисив-ность ' инвазии ' ■' (%) - Интенсив- •' ность инва-' aim (в сред-* нем) экз.'

1. "Казанская" ' *, 4702,- .... 11.3%:; * 8,6±1,9..

2. ППР ; . -«Юдинскнй» V 729 ■ 184'. " 24,2%'"' 'l2,6±2,33n 1 • * -

3. «АКБЛГС»" •• ; 647 . 219 33,8% » • --14,2 ± 3,36 "

4. «Буиносая»1 ' 250 •- . . 2$ * л 11,2 '* ■9,5 ± 1,2

5. Всего ' , ; 6328' V 964' : 2o;i%' " t.3"1'*

_ ' ■> ' ; '"-i'*. t i.r .*. V ■ . '*■-■■ !,'■..:• ■ ■ ■*. ч

Результаты проведенных эксперт! ентов ло.пероральному заражению

цыплят, породы .бройлер кросса .«KoHxypèirr ,2» штюкошшми яйцами

Ascaridia galli. показали,, что в случае попадании в, желудошю-га аисши ¡1

трзкт патогенных Я1 ai в дозе 500 япц'уд'ается получ1пъ 100%1шваэ11р0вш[:

ность мшвопшх,Ингенйшность аскар1ишотнойи1ш^

следованиях при 3KCnepimeirnùiiiioM ззрзжёшш ссн^пшиаЬт 11 до 24 эк-.

земцляров, при средней ишенсивностн инвазии 12,4 ±0,6 экземпляров.. .

Таким образом результаты изучения этооотаческойагтуащш по аскар 1Ш юзу 1шщ в птицеводческих хозяйствах Республики Татарстан' эксперименты по вослроговсдеиию этой инвазии у пшц свидетельствуют о рас-пространешш этой болезни среди восприимчивого коипаггеита птиц; К определяющем фактором возшисновеши! н распространения этой инвазии срсдн 1ШЩ относятся нарушение зоогигиенических норм содержания, возраст вос-прш1м<11ших1шп^1|ивзз1шнн0стья1щаскэриднй. • . ,

2. 2. Определение токсичности ц установление терапевтнчсск-оИ позы новой фосфорной caiii пнперяэнна при »скарнднозс кур. ,

Известно,.что продолжительное использование одинхи тех же airr-гсльмшпиков приводит к появлению препарат устойчивых' изолятов паразитов н поэтому существует необходимость расширения арсенала высокоэф^ фсктивных, лечебно-профилактических средств.;. - ,.. ...

Нам» в качестве нового высокоэффективного шптсльмиiггиого препарата на основании проведенных лабораторных и производственных испытаний рекомендуется новая фосфорная соль пиперазина, представляющая собой пиперазниовую соль бис /окснметил/ фосфнновой кислоты, синтезированная в ИОФХ им. А. Е. Арбузова КНЦ РАН. Полученное соединение представляет собой белый порошок без запаха, быстро растворяется без остатка в холодной воде и устойчивого в водных растворах, что существенно облегчает его применение в качестве терапевтического средства.

Проведенные испытания токсичности этого соединения на беспородных белых мышах показали, что среднесмертельная доза (ЛД 50) новой фосфорной соли пиперазина составляет-1642 мг/кг, максимально переносимая (ЛДо) - 500 мг/кг, а абсолютно смертельная доза (ЛДюо) -ЗОООмг/кг. Согласно классификации опасности веществ этот препарат относится к малотоксичным веществам ( ГОСТ 12.1.007.76.)

Результаты проведенной титрации НФСП на экспериментально зараженных аскарцдиозом цыплятах показали 100% экстенс- и интенеэффек-тивность на 14-е сутки после применения испытуемого препарат в дозах 0,5; — , 0,75 и 1,0 г два дня подряд. При применении препарата в дозах 0,15, 0,2 и 0,25 г на голову один раз в день, два дня подряд эффективность препарата *

была ниже и колебалась от 63,б до 81,8%. В связи с чем при последующих i

исследованиях по изучению структурных изменений, возникающих в органах и тканях больных аскарцдиозом цыплят была использована наиболее оптимальная доза новой фосфорной соли пиперазина которая составила 0,5 г на голову. Изучение сравнительной антгельминтной эффективности: НФСП, авертина, пиперазнн адигашата и альбендазола проводили на цыплятах экспериментально зараженных аскарцдиозом. По результатам исследований установлено, что на 14-е сутки цыплята, дегельмикгизнрованные шшеразин адшшнатом и НФСП в дозах 500 мг/птицу, авертином 150мг/ голову один раз в день два дня подряд были свободны от аскаршшй. У цыплят которым применяли альбендазол в дозе ЮОмг/птицу показатели экстенс- и интенеэффективности равнялись соответственно 93,3% и 88,6%.

2.3. Сравнительная оценка нематоцндвого действия новой фосфорной соли пиперазина, авертина, альбендазола н пнперазнна ялнпнмата на Ascaridia galli в условиях "in vitro"

Результаты патоморфологических исследований нематод в опытах in vitro после инкубирования с растворами новой фосфорной соли пиперазина (НФСП), авертина, шшеразин адипнната и альбендазола /1:1000/ при температуре 37 °С показали их невравнозначное действие. Установлено, что наиболее быстрые и выраженные процессы разрушения кожно-мышечного аппарата отмечали при воздействии НФСП и в меньшей степени после действия пиперазнн адилината, Трех и особенно 12-часовая экспозиция в водном растворе НФСП способствовало развитию отеков в проводящих отростках и яд-росодержзщих частях косоисчерченных миоцитов с последующим разруше-

нисм порядка расположения миофибрилл, Нарушение механохимичсских процессов регуляции сокращения косоисчерченной мускулатуры паразитом способствовали отслоению кутикулы от субкутикулы, возникновению дистрофических и некробиотических изменений в эпителиальных клетках кишечной трубки и репродуктивных органов. Аналогичные изменения с резким отеком проводящих путей косонсчерченных миоцитов после применения пиперазина адипнната отмечали по истечению 12-часовой экспозиции. Исследуя воздействие пиперазина адипината на аскаридий А. И. Абдулази-зов(1975), И. В. Рачковская (1978) отмечали также вакуолизацию и деформацию валиков гиподермы и разрушение сократимой и плазматической частей мышечных клеток. Патологическое действие авертина, на протяжении 3-х и даже 12 часов вызывало меньшие разрушения в косоисчерченной мускулатуре, что позволяет отдельным гельминтам сохранять тонус мускулатуры и тем самым закрепляться в кишечнике птиц. Меньшая выраженность обнаруженных деструктивных изменений в косоисчерченной мускулатуре нематод по сравнению с солями пиперазина было связано с тем, что макроциклические лактоны в том числе авертнн стимулируют выделение гамма аминомасляной кислоты (ГАМК) нервными окончаниями и блокируют передачу нервных импульсов (Ф. А. Волков, В. А Апалькин, К. Ф. Вапко8,1995) не оказывая патологического влияния на мышечную ткань. Значительные разрушения в репродуктивных органах нематод и выраженное овощщное действие происходили после применения НФСП и авертина, что позволяет рекомендовать эти препараты не только в качестве наиболее эффективных средств лечения но и для профилактики аскаридиозной инвазии у птиц.

3. 4. Сравнительная патоморфологнческая оценка нематопидного действия новой фосфорной солы пиперазина, авертина ннперазнна

Результаты патоморфологических исследований органов и тканей птиц, показали, что ларвальный аскаридиоз проявляется десквамативным катаральным воспалением поверхностно-ямочного эпителия н разрушением экзокреноцитов сложных трубчатых желез. Наиболее тяжелые патоморфо-логическне изменения обнаруживали в стенке тонкого отдела кишечника, где на фоне резкого отека слизистой и подслизистой оболочек, гиперемии сосудов появлялись участки эпителия с явлениями гиперплазии и гиперсекреции бокаловидных клеток, распада и десквамации энтероцитов ворсинок и крипт, местами этот процесс приводил к полному разрушешпо эпителиального покрова ворсинок. Гистохимическими методами у больных птиц в ларвальную фазу инвазии отмечали резкое повышение секреторной активности кишечных эндокриноцитов /ЕС-клеток/. Вокруг подавляющего большинства кишечных эцдокриноцитов, расположенных среди этштелиоцнтов неравномерных по величине крипт располагались многочисленные, различные по величине гранулы аргирофильного материала. Известно, что актив-

нал секреция ЕС-клеткам ¿(кишечника 5ч)ксн1ригпа.чи11а ст1шулкруст секреторную активность Бокаловидных эюокреношггов' (И. С. Дернжанова; 1974, Н/.Т. Райхлнн, Й.И; Квелой,' 1977, В; В. Ягл'ов, 1989, И. Н. Зхзялов, 1998), что в случае аскариднотнойинваэии иосигв целом плантационной характер ориентированный на'выработку протсктивных'мукопротснлов и снижение патогенного действия личинок аскариднй.' В этот период развития болезни» кшисчнихкршггзх отмечали снижение'М1ггот1 »ческой актнвностн клеток эшп'елия на 14-е сутки на 50,6%^ а на на 81,8% по фингепшо с показателями контрольных пттС а! такжесодержания аскорбиновой мутоты. У больных итнц параэ1гг11рование пбловоэрелыхаскзрвдий способствовало появлению на фоне катарально-дескваматнвного, эрозийного энтерита^ , явлений токсикоаллертческого харшаера/тепровождасмые резктгсннже-ниемсишеп^ескогЬ'потежшала клеток эпителия й соединительнотканной основы слизистой оболочкн.торможения их.мшоттеской активности кле-,'ток'регенераторной зоны, глубокогонарушения местной зндЬкршшой регуляции процёсов пищеварения. Течение'инвазии сопровождалось' в'органах желудочно-кишечного тракп^печени и почках резкой пщретацней соединительной ткани, мукоидным набуханием стенки кровеносных сосудов, пикнозом и полиморфизмом клеток энаотсшн и обильными'клеточными 1шфнльтратамн с большим содержанием зюзт'юфнлыпох гранулощггов;. О перв11чных поражет1ях сск^ь1стой систешл'о^ ктнсчных гель-

минтозах и последующих обшетоксических к аллергических реакщгос в организме сообщали в своих иссл едованиях Н. П. Цветаева(1971), Д. * Л. Тов-масян (1973), Н. В. Чебышев (1978),'А, И. 'Абдулазизов (1980), Л. Л. Храм-дова (1984), Ю. Г. Алексеевских, Е А. Гришина (1987), Е. Г. Грштша, Т. Г. Суранова (1988), Е- П. Широкова, Е. А'. Гри™ша(199"!0.''' " 4 ; *

Аллергические' васкулиты в клубочковом аппарате' почек характеризовались мембраиоэним гломерулнтом и тяжелыми дистрофическими явлениями в канатьнгпойсс-ш. Длительное проявление нарастания а}ггпопал{че-ского состоятся в исследованных органах при аскаридиозе сопровождаемое значительным» отложениями в мембранных структурахсосудов микроцир-куляцни почек 111ик-псо1штного материхта, пшволяет от11есл1 обнаруженные изменения к проявлениям мехшромаа>т6агресси11. Тяжелые порзжешш почек при кншечных 1¡емагодозах, сопровождаемые нарушетимн структуры клубочкового аппарата, эпителия канхтьцев отмеч;алн в своих исследованиях М. Ю, Паскальская, В. Н. Озерская (1968), Н А. Ниссенбаум, К." И. Капанхтзе (1970)1 П. С. Тагрншвилн (1973),1 К. Г. Щелканов (1975), 10,' Г. Алекссевскач, Е. А. Гришина (1987) и др/ ................ '•"•*" ' " и

, Результаты исследований <^укгур1ШХ1пменс)»1Й в органах и тканях, больных аскаридиозом птиц.' после дег^ьмттоашш НФСП'в лечебной н . пятикратно повышенной дозах свидетельствован не' только о высокой терапевтической эффективности,*'но^ и' слабой 'выраженности реактогенного

* . 1 --------' V' "V" - кг. . . . ,

действия по сравнению с воздействием ниперазин алии и на га, а верни га и альбендазола.

Быстрое очищение кишечника птиц от гельминтов после применения НФСП и отсутствие токсических реакций в органах и тканях способствовало ускоренному и более выраженному проявлению репаративных процессов в эпителиальной и соединительной ткани органов желудочно-кишечного тракта бальных аскаридиозом птиц. На 3-й сутки после дегельминтизации в железистом отделе желудка и особенно в тонком отделе кишечника резко осла-~бевали проявления десквамативного катара, исчезали очаги эрозий и кровоизлияний на слизистых оболочках. На 9-е сутки после дегельминтизации полностью восстанавливались поверхностно-ямочный эпителий, структура простых и сложных трубчатых желез железистого отдела желудка, усиливалась секреторная активность трубчатых желез мышечного отдела желудка отмечали регенерацию энтероцитов во вновь формирующихся кишечных ворсинках и криптах. В соединительнотканной основе слизистой оболочки резко усиливались гиперплазия ретикулоцитов, мноцитов и малодифферен-цированных клеток, активно пролиферировал эндотелий и мезотелнй мелких сосудов. Содержание фигур митоза в регенераторной зоне кишечных крипт на 3-й, 9-е и 21-е сутки после применения НФСП соответственно достигли 2,4 ± 0,18, 3,77 ± 0,26, 3,92 ± 0,31, что значительно превысило аналогичные показатели митшической активности у птиц после применения пиперазина адипината соответственно в 1,04; 1,3; 1,09 раз, альбендазола в 1,5; 1,48; 1, 38 раз и особенно авертина в 1,17; 2,23; 1,5 раз.

Гистохимические исследования показали, на 3-й и особенно на 9-е сутки после применения НФСП в железистом отделе желудка и тонком отделе кишечника происходило постепенное увеличение содержание популяций желудочно-кишечных эндокриноцитов. Подавляющее их большинство вследст-в1ш активизации синтеза биаминов приобретали характерную для ЕС-эндокриношттов пирамидальную форму цитоплазмы и содержали крупные сферические гранулы аргирофильного материала. Наибольшее содержание эндокриноцитов отмечали среди железистых клеток, расположенных у основания сложных трубчатых желез железистого отдела желудка и эпителноци-тов кишечных крипт. Сравнительная динамика восстановления уровня местной эндокринной регуляции процессов пищеварения в кишечнике птиц после дегельминтизации НФСП на 3-й, 9 и 21-е сутки составило 2,8 ± 0,21; 4,35 ± 0,22; 6,05 ± 0,29 клеток, что существенно превысило аналогичные показатели животных, подвергнутых лечению пиперазином адипинатом соответственно в 1,12; 1,07; 1,03 раз, альбендазолом в 1,14; 1,71, 1,4, авертином 1,09; 1,45; 1,66 раз.

Отсутствие токсического действия НФСП оказало благоприятное влияние на течение обменных процессов в органах и тканях дегельминтизи-рованных птиц. На 9-е сутки эксперимента отмечали резкий подъем уровня синтеза протективных гликопротеидов энтероцитами кишечных ворсинок

(+++) гликогена в печени, содержания аскорбиновой кислоты особенно в структуре исчерченной каемки энтсрощпов и клеток соединительнотканной основы слил иной оболочки кишечника. Действие других антгельмшгтных препаратов и прежде всего овертина, альбецдазола н в меньшей степени пн-перазин адшпшагта сопровождались более низким уровнем ,сшггеза в исследованных органах ШИК-позитквного матсрихза (++) и аскорбшюй кислоты (++) на 9-е н даже на 21-е суткиэксперимента. ,,, . , ;

Наиболее специфичным проявлением постинвазионной перестройки в исследованных органах, и тканях птиц, подвергнутых лечению НФСП явилось более быстрое и шггснсивное, по сравнению с действие пиперазнна ади-пинота, аверпша к альбендазола, снижение оллертческих .реакций. Ослабление сосудистой проницаемости, -дезорганизации компонентов соединительной .ткани, разрежение клеточных инфильтратов преимущественно за счет эозиноф1шьных гранулошттов, подавление механшма аутоагресош, отмечали у подопытных птиц после дегельми >гтшации НФСП на 3-й и особенно]» 9-е сутки эксперимента,- • . - • . ; . ... ' V ■ Применение аверпша, несмотря на его высокую терапевтическую эффективность,.не привело к полному исчезновению патологических эффеков аллергии,- вследствие чего на протяжении' трех недель'в органах и тканях подопытных птиц отмечали проявление 'аигиопатии у этих яатотных. Особенно выражение проявлялся. щггопагнч'есюй эффект у этих ппщ о виде усилешм дистрофических, иекробиотических процессов, сшсасення стететн-ческоИ активности в клетках эпителия органов желудочно-кишечного тракта, печени и почек на 3-й н 9-е сутки опыта.-Действие аверпша привело к развитию в исследованных органах и тканях резкого расширения капилляров, повышения прошщаемосги стенок с одновременным сужашем-просвета круп-пых сосудов и накопление эозш1офилькых гр^|уло1оггов, что свидетельствовали о значительной рази в патогенезе посгмедикамситозной онгиопзтин ва-зоастивных биамннов гнетамнна и серотошша, Отмечашые проявления ал-лсрппескнх васкулитов коррел!фовали по срокам с периодом максимального опустошения кишечных эндокреношгтов. Обнаруживаемое отложение 1Ш1К-позитшшого материала в мембранах и мезангиуме почечных клубочков как при хроническом аекзридиозе, так и при применений аверпша имели в своей основе аутоиммунный механизм развития в связи стем^нто токсические вещества повреждая ткани желудочно-кишечного траста,. прошосая в сосудистую систему концентрироватись в максимальном количестве в почках, вызывая более выраженные и местные ■ повреждения с отложением иммунных комплексов. -■•,!

По результатам исследований исследований Ю. Г. Алексеевских и Е. -Л.-Гришиной (1987), Е. А. Гришиной:» Т. Г. Сурановой (1988) применение препарэтов из группы бешимидазолового ряда пршодит.к расстройству кро-- вообрашения в почках, развитию дистрофий и некрозу эпителия канальцев у цыплят больных аскариднозом и гетеракидозом. Значительно меньшая вы-

ражснность реактогснности альбендазола » наших исследованиях по сравнению с пиперазином одит шагом, аисртином было обусловлено свян-шашсм ■этого производного беюимидазола с природными цеолитами, составляющими 90% от массы. Известно, что благодаря чрезвычайно насыщенной системе внутренних каналов природные цеолиты активно адсорбируют различные вещества (Ю. И, Москалев, 1985, Л. Горбунов; 2003), в том числе и токсические продукты паразитов н лекарственных веществ. После применения аль-беидазола в лечебных дозах экстсис к шгтснсэффсктивность дегельминтизации больных аскарцаиозом цыплят составляла о экспериментальных условиях 93,3%, 95,1%, а в производственных 98%н 95,6% соответственно. В результате неполной дегельмикпоайип у части птиц продолжалось проявление аскаридиоза. '..

.. При применении повышенных доз препаратов клеточные элементы лимфоидных скоплений становилсь разрежет шмил и в них отсутствовали герминативные центры. Всасывающая кайма сохранялась только ' у основания отдельных , ворсинок Количество . шик- положительного материала заметно увеличивалось, после применения ИФСП если на 3-ий день его распредсние^ было неравномерным, то на 9-ый н 20-ые дни он равномерно распределялся по всей длине ворсинок, вокруг сосудов.

2. 5. Влияние аитгельмннтнков (НФСП, авертииа, альбендазола, пиперазнна-аднпниата) иа яйценоскость кур^иесушек

' В 1троюводствс1 шых условиях на ППР к Юдинский» щучили влияние ш птельм интиков на яйценоскость кур^ Использованные нами шптельминти-,ки вызывали снижеше яйценоскости, особенно заметное снижение продуктивности протошлн на 4-день после применения препаратов. В дальнейшем к 8-9 дню п группах'где применяли новую'фосфорную соль тошеразина, пи-перазшг адшншзт и албендазол происходило воссталоалешге продуктивности, а в группе где применяли ааертин на 7-суткн наступало повторное снижение продуктивности. Яйценоскость птиц по сравнению с контрольными за 10 суток наблюдения снизилась после применения пипераэнна адишшата-12,1%; авертнна- 32%; албеидазола-6,8% новой фосфорной соли пиперазнна-б,б%: .. . • ;

,'; Таким образом результаты проведенных исследований свидетельствуют о высокой немотоцндной эффективности слабой реактогешюсти новой фосфорной соли пиперазина по сравненшо с пиперазином адшшнаюм, аверпшом и ольбенлазолом, <гто позволяет его рекомендовать его для лечеб-но-проф]тактического средства при аскаридиозе

• выводы

1. В настоящеевремя в птицеводческих хозяйствах Республики Татарстанэкстснытвааированостъ аскарндиозом кур составляет от 11,2% до 33,8%, а шптнсшгоаэированность - trr l до 53экземпляров. V' 2. Токсичность новойфосфорной'соли пнперазина (НФСП), на белых мышах ЛД 1642мг/кг. üpeiispar' относится к 4 классу малоопасных соединений (ГОСТ 12.007-76).' Доза пятикратно превышающая терапевтическую не вызывает у кур токсических явлений.'

. 3. ПФСП in vitro на организме нематод Ascaridia galti вызывает резкий отек ядросодержашей части и отростков мышечных клеток, что npimoiirr к нарушению, течешм * мехонохтшческих ' процессов в косоисчерченной мускулатуре, 'отделешоо купосули от субкупасулы. Повышенная пщрофнльность'* НФСП ' способствовала эффективному разрушению эпителиальных' клеток кишечной1 трубки, яйцеводов, яичников и оказывала виражешtoe овощщное действие.

4. Пятихрап'юепревышеш1Сдозы НФСП по сравнешпо с пиперазнном аднгошатом, авертином и альбекдазолом на 9-е сутки не вызывало деструктив!сихгоменений в органах желудочно-кишечного тракта, печени и почках, а тшоке нарушении местной гемоциркуляшш.

5. Эффективное нематошшное действие НФСП способствовало ускорению течения репаративиых lipoueccoe в эпителиальной ткшн! желудочно-кишечного тракта, печени и почек. ' В слизистой оболочке

' железистого желудка тонкого отдела кишечника после дегсльмшггнзатш наблюдали резкое; усиление мнтотпческой активности клеток в , регенераторных зонах,' увеличение содержания желудочно-кишечных эндокринощгтов, акгивнзашЬо аппетнчесюк процессов вэгаггелиальнЬй ц соедюаттсльной тканях.' . " •.'!''''' ' " . 6.' По результатам клшпшьморфологичесюix, ntcroxilmipiесюtx, морфомстричесхих исследований, оценки . уровня токсичности, п производственных испытаний установлено, что эффекпюная лечебная доза НФСП составляла 0,5 г на голову, в течмош 2-х суток, позволнпшая получить 100%- экстенс-н тпенсэффётшность против' половозрелых особей аекпрнднй, * ' ' ' '*■*'

7, При парззтфовашш 'личиночной формы Наблюдается повышенный сшгтез и , секреция" „ЕС- клетками биамннов, что активизировало секрецию этпелиощггов слюистой оболочки желудка и тонкого отдела кишечника При кишечной форме аскарндноза в , желудочно-кюиечном тракте ппщ выявляли катаралыю-дееквамагнвиое воспаление с наличием многочисленных зрозий и мелких язв, тяжесть этого процесса усугу блялась глубоким нарушением местной эндокринной

регуляции выработки клетками слизистых оболочек желудка и кишечника нротекпюных глнкопротсидоо.

8. Аскариднозная инвазия у птиц сопровождалась мембранозио-нролиферативным гломерулонсфритом с. резким нарушением ■ , проницаемости капилляров клубочков, выраженностью дистрофических 11 нскробиотических. процессов в канальцах , нефронов,сочетасмых гепзтоцеллюлярным и холесгатическим поражением печени. •

9. Аллергические гомененнл в органах больных аекзридиозом птиц • после дегельмштоашш исчезали на 9-е сутки после применения НФСП, овертина и пнперазина „адипшота, и сохранялись до 21-х суток в * слабоаырзженной степени при использовании альбешшола. • ; .

, 10. Дегсльм! и тоаш1я больных ас карим юзом птиц с применением , НФСП по сравнению с использованием авертина, гашеразшт адяшшага и . альбендазола оказывала меньшее влияние на продуктивность.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ:

1. Для дегельмштоашш кур при аскаридиозе рекомендуется приме- , пять новую фосфорную соль гашеразпнавдозе 500 мг на голову од1ш раз в день два дня подряд. , . '' . |

2. При оценке структурно-функционального состояния органов желудочно-кишечного тракта птиц, больных кишечными нематодазамн рекомендуется исследовать состояние клеток ДЭС эпос органов.

Список пайот, опубликованных по теме диссертации

1. ГаЙсшт Л. Л. Эпизоотолоппеская ситуация по аекзрнднозу кур в хозяйствах Республики Татарстан. //Мат-лы по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии.- Казань, 2001- ч.1,- С.25.

2. Гайаша Л.А., Шидяева Ю. И, Сравнительная эффективность флотационных методов при диагностики аскаридноза ппщ, //Материалы Всероссийской лэучно-протводствешю конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехшш.- Казань, 2002. — ч. I .-С. 31 - 32.

3. ГаЙсина Л. А., Залялов И. И., Фаттахов С. Г., Шоркнн И. С. Сравнительная оценка ' действия шгтгсльмннтихов. //Материалы Всероссийской научно-прогаводствешюй конференции по проблемам ветершшрии и зоотехиии.- Казань, 2002. ч,- С. 32-33.

4. Гайсина Л Л„ Залялов И. Н„ Фаттахов С Г, Шуче|ше терапевтической эффективности различных доз шттгельмшггного препарата «Куралис» при аскарцдиозе кур. //Материалы Всероссийской научно-производственной конференции по проблемам ветеринарии и зоотехнш!. Казань, 2002,-ч.1 С.34-35.

5. Залялов И. (1„ Га Йен на Л. А,-Лутфулдин- М.Х., Фагтахов С Г. Пато морфологическая оценка- эффективности ' новой фосфорной соли пинеразина • при- аскарнднозе* кур. '//Труды Всероссийского института гельминтологии им, К. И: Скрябина, М:; 2003.-т.'-39.-С. 114-120.

6. ' Залялов И. П., Гайсина Л А'.,■ Фагтахов С.Т Действие антгельмшгтиков на микроморфологическую структуру нематод. //Материалы Всероссийской научно-производственной ^ ' конференции " по' '• актуальным" ' проблемам ветеринарии и зоотехнии^ - Казань; 2003.-ч: К- С.50.

7. Залялов И. Н., Гайсииа- Л А.,' ' Лутфулдин' Фагтахов С.' Г. Пагоморфологическая оценка 'эффективности - новой ' фосфорной соли пилеразина-при аскарнднозе: кур. //Ученые записки КГАВМ им. И. Э. Баумана.-;2003.-т. 174.-С.81 -85. ; '•"■"' > - •*

8. , ; Гайсина Л. А., Залялов И.'-Н.,' Лутфуллин > М.-Х.,' Фагтахов С. Г„ Шоркин И. С. Оценка немзтоцидной эффективности новой фосфорной соли пиперазина при аскаршшозе кур. //Ветеринарный врач.-2003,- КгЗ.-С. 71 - 73.

9. Патент на-изобретении-№2211835.Пнперазиноваясоль бис (окснметил) фосфиновой кислоты, обладающая антигельмннтной активностью /Фагтахов С. Г., Лутфудлин М. X!, Залялов К'Н.'.ГайсинаЛ. А!; Резник В. С., Латыше Д; Г.',' Ыагдеев Й. N1,' Синяшин О.'Г. Приориггёг'изобретения 19. 04. 02. Заявлено 19, 04.02, Заявка 2002110605. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 10. 09. 03. : , ;; 'ЛГ;:;7

Подписано к печати Заказ Я9 Тираж 00 эта. Бумага офсетная

Формат 60x84/16 Усл.-печ. л. Печать RISO

Центр информационных технологий КГАВМ 420074. Казань. Сибирский тракт, 35.

í-307?