Состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в процессе развития гнойной раны и возможности коррекции его нарушений (экспериментально-клиническое исследование)

Федосов, Сергей Ростиславович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в процессе развития гнойной раны и возможности коррекции его нарушений (экспериментально-клиническое исследование)
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в процессе развития гнойной раны и возможности коррекции его нарушений (экспериментально-клиническое исследование)"

003466772

СОСТОЯНИЕ

ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО БАЛАНСА В ПРОЦЕССЕ РАЗВИТИЯ ГНОЙНОЙ РАНЫ И ВОЗМОЖНОСТИ КОРРЕКЦИИ ЕГО НАРУШЕНИЙ (экспериментально-клиническое исследование)

03.00.04 - биохимия 14.00.27 - хирургия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Краснодар - 2009

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО КГМУ Росздрава).

Научные руководители: доктор медицинских наук профессор

Павлюченко Иван Иванович, доктор медицинских наук профессор Савченко Юрий Павлович.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук профессор

Нагиев Эйзудин Рамазанович, доктор медицинских наук профессор Гуменюк Сергей Евгеньевич.

Ведущая организация: государственное образовательное учреждение

высшего профессионального образования «Ставропольская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», г. Ставрополь.

Защита состоится « » IуС^С^-^2009 г. в 10.00 на заседании диссертационного совета Д208.038.02 при ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. {861} 262-73-75).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Росздрава.

Автореферат разослан «•// »¿¿/•^^-¿¿•¿»^009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Д208.038.02 профессор

Л. А.Скорикова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Разработка эффективных методов диагностики течения раневого процесса, а также выбор оптимального метода лечения продолжает оставаться одной из актуальных проблем в современной хирургии [Б.М. Костюченок и соавт., 1976; В.К. Гостищев, 1996; В.Д.Федоров и соавт., 2005]. Пациенты с гнойно-воспалительными заболеваниями составляют от 40% [Ю.К. Абаев, 2006] до 49% больных хирургического профиля [Б.М. Даценко и соавт., 1995]. Доказано, что одним из проявлений раневого процесса является изменение баланса в системах генерации свободных радикалов и антиоксидантной защиты [М. РгесЫскБоп, 1990], которое может являться также одной из причин неблагополучного и осложненного течения раневого процесса. В настоящее время существует недостаток информации о состоянии прооксидантно-антиоксидантного баланса у отдельных когорт пациентов, что затрудняет обоснованный выбор прооксидантной или антиоксидантной терапии [А.М. И^шк и соавт., 2001].

Учитывая вышеизложенное, целью настоящей работы явилась оценка состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом экссудате и в периферической крови в процессе эволюции гнойной раны для прогнозирования течения раневого процесса и коррекции местного лечения.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1) разработать новый комплексный подход к оценке состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом, включающий авторские методы получения биологического материала, определения выраженности прооксидантных факторов и резервных возможностей антиоксидантной системы;

2) установить особенности изменения прооксидантно-антиоксидантного баланса на местном и системном уровнях в процессе эволюции гнойной раны у пациентов с осложненным и неосложненным течением раневого процесса;

3) определить комплекс основных биохимических и биофизических

показателей, необходимых для объективной оценки уровня дисбаланса в системе прооксиданты - антиоксиданты у пациентов с гнойной раной;

4) выявить закономерности изменения изученных показателей прооксидантно-антиоксидантной системы крови в зависимости от площади гнойной раны у пациентов с осложненным и неосложненным течением раневого процесса;

5) оценить влияние местной антиоксидантной терапии на состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса и клиническое течение раневого процесса на экспериментальной модели гнойной раны в различные фазы ее развития.

Новизна результатов исследования

1. Впервые разработан способ лабораторной диагностики окислительного стресса, включающий определение уровня компонентов прооксидантно-антиоксидантных систем организма, который обладает точностью, достаточной для достоверности определения состояния антиоксидантной системы (АОС) на системном уровне у больных с гнойными ранами.

2. Предложен аппаратно-программный комплекс лабораторной диагностики окислительного стресса, основанный на обработке с помощью ЭВМ биофизических показателей состояния АОС на системном и местном уровнях у больных с гнойными ранами.

3. Впервые предложена программа регистрации сигналов хемилюминотестера ЛТ-1, позволяющая определять максимум и площадь быстрой вспышки хемилюминесценции.

4. Модифицированы и внедрены в хирургическую практику способ получения биологического материала из раны для анализа состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса на местном уровне и метод контроля динамики изменения площади раны, позволяющий производить планиметрию с высокой скоростью и достаточной точностью.

5. Впервые исследована динамика состояния АОС у больных с гнойными ранами параллельно на системном и на местном уровнях в процессе эволюции

гнойной раны, проведен корреляционный анализ изменений отдельных показателей в экссудате раны и в периферической крови в зависимости от площади раны.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Определение прооксидантно-антиоксидантного статуса на локальном уровне дает возможность достоверно дифференцировать характер течения и фазу раневого процесса, а также корректировать проводимое лечение.

2. Имеется прямая взаимосвязь между неферментными показателями, характеризующими окислительный стресс у хирургических больных, и площадью гнойной раны.

3. У всех пациентов с сопутствующим сахарным диабетом отмечается неадекватная реакция АОС на дополнительное ее раздражение в динамике развития гнойного процесса, особенно остро манифестирующая у пациентов с острым гнойным процессом.

4. У пациентов с острым гнойным процессом на фоне сахарного диабета на локальном уровне имеется тенденция к сохранению прооксидатной нагрузки, в то время как у пациентов с хроническим характером течения гнойного процесса особенностью является меньший уровень активации и торпидность динамики оксидативных процессов.

Теоретическая значимость исследования

1. Установлен характер динамики прооксидантно-антиоксидантного баланса на местном уровне (в раневом экссудате) и на уровне организма (в периферической крови) в процессе развития гнойной раны.

2. Доказано наличие взаимосвязи изменений показателей прооксидантно-антиоксидантной системы на местном и системном уровнях.

3. Продемонстрированы различия в изменении прооксидантно-антиоксидантного баланса в условиях неосложненного раневого процесса и в условиях раневого процесса, отягощенного сахарным диабетом.

Практическая значимость исследования. Предложенные методы

исследования позволяют оценить характер течения раневого процесса, определить момент перехода раны из одной фазы раневого процесса в другую и оценить индивидуальную потребность в средствах коррекции прооксидантно-антиоксидантного баланса. Разработаны методические рекомендации для проведения исследований, направленных на определение влияния лекарственных средств, применяемых для местного лечения гнойных ран, на прооксидантно-антиоксидантный баланс.

Сведения о практическом использовании результатов исследования. На основании полученных фактов предложены практические рекомендации, используемые в отделении гнойной хирургии краевой клинической больницы № 1 и в отделении хирургии госпиталя МСЧ ГУВД Краснодарского края. Отдельные положения диссертации включены в лекции для общих хирургов и хирургов гнойной специализации на курсах повышения квалификации, а также используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии и кафедре общей хирургии Кубанского государственного медицинского университета.

Апробация работы. Основные материалы диссертации докладывались и обсуждались: на IV Всероссийской конференции общих хирургов с международным участием «Раны и раневая инфекция» (14—15 мая 2007, Ярославль); на XIV Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии» (1-5 июня 2006, Украина, Крым, Ялта - Гурзуф); на V Всемирном конгрессе по иммунопатологии и аллергии (21-24 апреля 2007, Москва); на XI Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (22-29 апреля 2006, Тенерифе, Канарские острова, Испания). По результатам исследования опубликовано 14 печатных работ, включая 2 патента на изобретения, 1 патент на полезную модель и 1 свидетельство на регистрацию программы для ЭВМ.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, шести

глав, заключения, выводов, списка литературы и трех приложений. Список литературы включает 108 отечественных и 64 зарубежных источника. Диссертация изложена на 204 страницах, иллюстрирована 52 рисунками (в том числе 7 фотографиями), 12 таблицами, представлено 3 клинических примера. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В основу клинических исследований положены результаты наблюдения и лечения 62 больных с гнойными ранами. С целью проведения аналитического и статистического анализа больные были разделены на три основные и две контрольные группы, отличающиеся по нозологии (табл. 1). Пациенты были сопоставимы по возрасту и полу между группами А и группой К1, группой В и группой К2 (р>0,05).

Таблица 1

Распределение пациентов по группам

Группа Нозология Количество

А1 Флегмона стопы на фоне синдрома диабетической стопы 20

А2 Гнойная рана стопы на фоне синдрома диабетической стопы 19

В Флегмона шеи 23

К1 Пациенты, страдающие тяжелым сахарным диабетом 22

К2 Лица, не страдающие соматическими заболеваниями на момент исследования 20

Всего 104

(классификация фаз раневого процесса Б.М. Даценко, 1995). Средние сроки момента смены фаз в различных группах составили: в группе AI - 12±0,4 (1,5) суток, в группе А2 - 10±0,4 (1,7) суток, в группе В - 7±0,2 (1,1) суток.

Площадь раневой поверхности (рис. 1) измерялась на следующие сутки после проведения хирургической обработки гнойного очага с использованием авторского метода [Ю.П.Савченко, С.Р.Федосов, A.M. Плаксин, 2007] и составила в группе AI 56,7 ±1,4 (5.9) см2, в группе А2 - 67,5±1,8 (7,6) см2, в группе В - 77,3±1,6 (7,6) см2.

Рис. 1. Пример фотографии гнойной раны, подготовленной для контроля изменения ее площади в динамике раневого процесса (справа приведен условный эталон площади 25 см2)

Для определения показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса на системном уровне забиралась кровь непосредственно из вены пациента с использованием стандартного инструментария и гепаринизировалась в соотношении 1:10, после чего охлаждалась до 8-10° С. Для определения показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса на местном уровне отделяемое раны забиралось по методике [А.Р. Ромм и соавт., 1986] в авторской модификации [М.И. Быков и соавт., 2007]. Кровь и экссудат раны забирались на 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 14-е сутки от момента хирургической обработки гнойного очага.

Экспериментальная часть работы была направлена на оценку влияния гидрофильных мазей с антиоксидантными свойствами на состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом и клинические показатели течения раневого процесса. Опыты выполнены на двенадцати беспородных кроликах-самцах весом 2,5-3 кг. Кролики были разделены на три группы по четыре животных в каждой: в контрольной группе лечение осуществлялось физиологическим раствором хлорида натрия, в группе № 1 -мазью «Левомеколь», в группе №2 - гидрофильной мазью на основе водного экстракта Fructus Sophorae japonicae. Раневой процесс моделировался гибридным методом, включающим метод моделирования резаной раны [Н.Р. Ehrlich и соавт., 1968] и метод моделирования абсцесса [JI.A. Мамедов и соавт., 1988]. Сформированная гнойная рана подвергалась лечению путем ежедневных перевязок. Экссудат раны забирался на 1,3, 5, 7 и 10-е сутки.

Состояние АОС организма оценивали по активности каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов, по уровню восстановленных тиоловых групп эритроцитов и амперометрическому определению антиокислительной активности плазмы крови. Активность КАТ исследовали в гемолизате эритроцитов и раневом отделяемом по методу [R. Beers и соавт., 1952] в авторской модификации [И.И. Павлюченко и соавт., 2006], основанному на оценке скорости убыли субстрата фермента (перекиси Еодорода). Активность СОД определяли в гемолизате эритроцитов и раневом отделяемом по методике [В.А. Костюк и соавт., 1990] в авторской модификации [И.И. Павлюченко и соавт., 2006], которая основана на способности СОД ингибировать индуцированную реакцию аутоокисления кверцетина. Количество тиоловых групп в гемолизате эритроцитов определяли модифицированным методом с использованием реактива Эллмана [В.Н. Орехович, 1977]. Определение АОА плазмы крови и экссудата раны проводилось модифицированным амперометрическим способом [А.Я. Яшин и соавт., 2003] на анализаторе «Яуза-01-AAA». Способ основан на измерении электрического тока, возникающего

при окислении биологического образца на поверхности рабочего электрода при определенном потенциале.

Состояние прооксидантной системы оценивали в плазме крови по исходному количеству продуктов окислительной модификации биомолекул, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБЧ), а в эритроцитах определяли как базальный их уровень, так и состояние после предварительной индукции [И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили, 1977]. Также в плазме крови и в экссудате раны оценивали интенсивность быстрой вспышки хемилюминесценции (БВХЛ) с помощью люминотестера JIT-01 в составе системы для диагностики окислительного стресса [И.И. Павлюченко, A.A. Басов, С.Р. Федосов, 2006], включающей аналогово-цифровой преобразователь и ЭВМ с авторской «Программой регистрации сигналов хемилюминотестера ЛТ-01», позволяющей регистрировать амплитуду и площадь хемилюминесценции.

В связи с тем что исследуемые показатели зависят от количества эритроцитов, определяли также количество эритроцитов в цельной крови по методу Ресселя [Л.К. Рессель, И. Тодоров, 1961].

Статистический анализ производился на ЭВМ с использование свободного программного обеспечения - системы статистического анализа R [R Development Core Team, 2008].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ При анализе полученных результатов по отдельным показателям прооксидантно-антиоксидантного статуса на местном уровне (исследование раневого отделяемого) можно отметить следующие закономерности. В сравнении с неосложненным течением раневого процесса (группа В) у пациентов с острым гнойным процессом на фоне сахарного диабета (группа AI) имеется тенденция к сохранению уровня оксидативной нагрузки, в то время как у пациентов с хроническим его характером (группа А2) особенностью является меньший уровень активации и торпидность динамики оксидативных процессов. Эти процессы отмечаются на фоне неадекватной

реакции АОС на местном уровне в обеих указанных группах, особенно отчетливо проявляющейся у пациентов с острым гнойным процессом (группа А1).

Проявляющееся со 2-х суток и отмеченное во всех группах снижение АОА раневого экссудата (рис. 1) отражает два одновременно развивающихся процесса: снижение функциональных возможностей АОС в тканях раны и уменьшение образования раневого экссудата по мере перехода раны во вторую фазу. К 14 суткам отмечено снижение этого показателя на 47% (группа А1, р<0,05), 33,5% (группа А2) и 55,7% (группа В, р <0,05).

На 2—4-е сутки во всех группах зарегистрирован наибольший уровень максимума и площади БВХЛ раневого экссудата (рис. 2), что является результатом активации прооксидантных систем в тканях раны в первой фазе раневого процесса как побочного эффекта интенсификации окисления при «окислительном взрыве» в фагоцитах. К 14-м суткам отмечено снижение этих показателей на 56,2% (группа А1, р < 0,05), 22,3% (группа А2) и 76,4% (группа В, р<0,05).

Первоначальное снижение соотношения КАТ/СОД в раневом экссудате на фоне сахарного диабета у пациентов с гнойной раной соответствует развивающему на локальном уровне дисбалансу звеньев АОС в сторону СОД. Отмеченная у пациентов с сахарным диабетом и хронической гнойной патологией динамика характеризует течение раневого процесса - затянутая первая фаза находит отражение в значительном размере плато соотношения КАТ/СОД. Напротив, динамика соотношения КАТ/СОД у пациентов с флегмонами шеи отражает характер неосложненного течения раневого процесса - по мере смены одной фазы другой снижается активность СОД и увеличивается активность КАТ.

С первого наблюдения отмечается снижение АОА плазмы крови (рис. 2) у пациентов с сахарным диабетом (на 44,8% в группе А1 и на 48,2% в группе А2 относительно контрольных значений; р < 0,05). Это является следствием

истощения АОС крови в результате длительной активации факторов прооксидантной направленности как ответа макроорганизма на гнойное воспаление. Обращает на себя внимание, что характер описанного в группе В изменения АОА плазмы имеет значительные отличия от характера изменения в эти сроки аналогичного показателя групп А1 и А2. Так, в группах А1 и А2 изначально показатель АОА был ниже и снижение его на протяжении всего периода наблюдения отмечалось относительно медленнее и с меньшей амплитудой, чем в группе В. Это может быть связано с тем, что у пациентов с сахарным диабетом изначально отмечается дисбаланс АОС и снижение ее резервных возможностей по нейтрализации возрастающей в результате развития гнойного процесса прооксидантной нагрузки.

Описываемое во всех группах повышение максимума и площади БВХЛ плазмы крови (рис. 3) в начале развития раневого процесса является результатом активации факторов прооксидантной направленности крови как системного ответа макроорганизма на микробную агрессию, проявляющуюся развитием флегмоны. Обращает на себя внимание, что в группах А1 и А2 изначально показатель максимума БВХЛ был выше контрольных значений на 44,8 и 48,2% соответственно (р < 0,05), а увеличение его в последующем периоде наблюдения происходило относительно медленнее и с меньшей амплитудой, чем в группе В. Это может быть связано с тем, что у пациентов с сахарным диабетом развивается эндотоксикоз, в том числе повышается концентрация в крови продуктов азотистого обмена (обладающих антиоксидантными свойствами), и снижение напряженности иммунных реакций, которое предопределяет уменьшение прооксидантной нагрузки, что детерминирует фиксацию прооксидантно-антиоксидантного баланса на более высоком уровне с тенденцией к дисбалансу в сторону прооксидантного звена.

группа А1

4 6 8 10 12 сутки наблюдения

группа А2

— — !

4 6 3 10 12 сутки наблюдения

группа В

4 6 В 10

сутки наблюдения

Рис. 2. Динамика соотношения антиокислительной активности плазмы крови и экссудата раны (вертикальная линия отмечает момент перехода раны из гнойно-некротической фазы в фазу грануляций)

"■'•■ф...... системный уровень (кровь) -Я- локальный уровень (экссудат)

Динамика концентрации БН-групп в плазме крови в ранние сроки течения раневого процесса отражает продолжающееся снижение емкости наиболее быстро реагирующего на прооксидантную агрессию звена АОС (минимальное значение в группе А1 составило 73,5%, в группе А2 - 60,6%, в группе В - 63,4% от показателя контрольной группы; р < 0,05). Отмечаемый в более поздние сроки прирост концентрации БН-групп является отражением регенерации этого звена АОС при снижении прооксидантной нагрузки. Большая скорость регенерации БН-групп у пациентов с сохранным метаболизмом (группа В) в сравнении с пациентами, страдающими СД и имеющими патологию обмена веществ (группы А1 и А2), отражает дисфункцию звена быстрого реагирования АОС при сахарном диабете.

Зарегистрированное во всех группах на 2-4-е сутки повышение ТБЧ плазмы (группа А1 на 142,9%, группа А2 на 83% и группа В на 204% от показателя контрольной группы; р < 0,05) и ТБЧ эритроцитов (группа А1 на 110%, группа А2 на 68,9% и группа В на 79% от показателя контрольной группы; р < 0,05) соответствует накоплению в плазме крови продуктов перекисного окисления, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой, и является результатом активации прооксидантной системы на фоне снижения функциональной активности АОС.

Отчетливое снижение активности КАТ в первые несколько суток в гемолизате эритроцитов у пациентов с гнойными ранами (в группе А1 на 39,2%, р < 0,05; в группе А2 - на 32,6%, р < 0,05; в группе В - на 12% от показателя контрольной группы) может соответствовать ингибированию этого фермента в результате накопления в крови токсических продуктов. Прирост активности КАТ в середине периода наблюдения соответствует восстановлению ее активности в результате прекращения поступления токсинов и естественной детоксикации. Динамика активности КАТ в более поздние сроки отражает восстановление защитных механизмов АОС у больных в результате проведения стационарного лечения и благоприятного течения заболевания.

X —

группа А1

I—

——:-!-•--г-

8 10 12 14

сутки наблюдения

группа А2

1 ■

-,--,-•-

2 4 6 8 10 12 14

сутки наблюдения

группа В

4 6 8

сутки наблюдения

Рис. 3. Динамика соотношения максимума быстрой вспышки хемшпоминесценции плазмы крови и экссудата раны (вертикальная линия отмечает момент перехода раны из гнойно-некротической фазы в фазу грануляций)

......Ф...... системный уровень (кровь) -"- локальный уровень (экссудат)

Описываемый в начале эволюции раны рост активности СОД в гемолизате эритроцитов (в группе А1 - на 34%, в группе А2 - на 32% и в группе В - на 32,6% от показателя контрольной группы; р < 0,05) может соответствовать активации этого фермента как звена первой линии АОС и является ответом на гиперакгивацию синтеза активных форм кислорода. У пациентов групп А1 и А2 отмеченная динамика характеризует активацию СОД как фермента первой линии АОС в условиях нарушений метаболизма, обусловленных сахарным диабетом: реакции прооксидантного и антиоксидантного компонента торпидны, а амплитуда реакции значительно снижена.

Зарегистрированная в группах А1 и А2 динамика коэффициента окислительной модификации биомолекул эритроцитов — КОМБэр (повышение в 3,2 и 3,4 раза соответственно показателю контрольной группы) отражает как исходную тяжесть повреждения биомолекул в результате прооксидантной нагрузки, так и неспособность организма к быстрой компенсации развившегося окислительного стресса. В группе В, напротив, следует отметить как тяжелое исходное повреждение биомолекул в результате прооксидантной нагрузки, так и нормальную реакцию АОС, позволяющую добиться быстрой компенсации окислительного стресса. Несмотря на значительную активацию прооксидантного звена, в группе В отмечается быстрое снижение КОМБэр (в 7 раз от начала наблюдения к 10-м суткам), отражающее адекватное функционирование и высокую реакционную способность АОС за счет сохранности ее резервов.

Необходимо отметить факт статистически значимого (р < 0,05) влияния площади раны на большую часть показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса, за исключением ферментов (КАТ и СОД). Влияние на уровень БВХЛ, АОА, ТБЧ и количество БН-групп имеют строго определенную направленность, которая соответствует представлениям о возрастании прооксидантной нагрузки при увеличении морфологического субстрата - раневой поверхности. Напротив,

активность КАТ и СОД имеет индивидуальный и вариабельный характер, поэтому не удалось обнаружить прямой зависимости их активности от площади раны.

Таким образом, показатели прооксидантно-антиоксидантного баланса в экссудате раны и в крови не могут быть охарактеризованы ни как полностью идентичные, ни как полностью антагонистичные. В процессе эволюции гнойной раны показатели АОА и БВХЛ изменяются с отчетливой взаимосвязью. Так, изменения АОА крови и АОА экссудата раны характеризуются разнонаправленностью, а изменения максимума/площади БВХЛ крови и максимума/площади БВХЛ экссудата раны - однонаправленностью. В отличие от них показатели активности ферментов в крови и в экссудате раны изменяются без определенной взаимосвязи, что отражает их индивидуальность как структурную, так и функциональную в связи с особенностями синтеза,

сутки

Контроль —»-- Лезомеколь Софора

Рис. 4. Динамика антиоксидантной активности экссудата раны

сутки

—•— Контроль —»- - Левомекопь —Софора Рис. 5. Динамика площади экспериментальной раны

На модели гнойной раны у экспериментальных животных (кроликов) показано, что по совокупности оцениваемых показателей АОА гидрофильной мази на основе вытяжки из БшсШб БорЬогае ]аротсае значительно превосходит аналогичный показатель мази «Левомеколь» (рис. 4). Важно отметить наличие некоторого антиоксидантного эффекта применения мази «Левомеколь», что в связи с отсутствием в составе этой мази антиоксидантных компонентов следует оценивать как непрямое антиоксидантное действие, связанное с облегчением течения раневого процесса и ускорением перехода раны в фазу грануляций.

При анализе скорости снижения площади экспериментальной модели гнойной раны отмечено (рис. 5), что первые 7 суток наименьшая площадь раны отмечалась в группе экспериментальных животных, получавших местное лечение мазью «Левомеколь» (группа Л). Наиболее выраженные отличия регистрировались к 3-м суткам, когда скорость заживления раны в этой группе

превышала скорость в группе экспериментальных животных, не получавших местного лечения (группа К, р <0,05), в 1,5 раза и превышала скорость в группе экспериментальных животных, получавших лечение мазью «Софора» (группа С, р<0,05), в 2,8 раза. К 5 суткам группа сравнения занимала последнее место по скорости заживления раны, группа Л - второе (в 3 раза быстрее группы К, р < 0,05), группа С - первое (в 5 раз быстрее группы К, р < 0,05). После пяти суток скорость заживления раны в группе Л продолжала снижаться, что в сочетании с продолжающимся нарастанием скорости заживления раны в группе С привело к выходу последней в лидеры по эффективности местного лечения. Относительно группы сравнения к 10 суткам скорость заживления раны в группе Л была ниже на 30%, а в группе С - выше в 2,8 раза (р<0,05).

Таким образом, под действием мази с антиоксидантными свойствами прооксидантно-антиоксидантный баланс достоверно смещается в сторону антиоксидантного звена, а также удлиняется первая фаза раневого процесса и увеличивается скорость эпителизации во второй фазе раневого процесса.

ВЫВОДЫ

1. Разработанный новый комплексный подход к диагностике состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом (методы измерения площади раны, забора биологического материала из гнойной раны и оценки прооксидантно-антиоксидантного баланса) позволяет проводить достоверную оценку состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом на протяжении всего периода экссудации.

2. В процессе эволюции гнойной раны отмечены изменения показателей прооксидантно-антиоксидантной системы, характеризующие развитие окислительного стресса, в условиях которого на ранних этапах течения раневого процесса отмечаются характерные сдвиги в сторону прооксидантного звена, которые частично стабилизируются на более поздних этапах за счет снижения прооксидантной нагрузки в ране.

3. Проведенными исследованиями установлено, что наибольшую ценность для

практического применения имеют биофизические и интегральные показатели, отражающие общий уровень прооксидантной нагрузки и степень истощения антиоксидантной системы, а определение этих показателей в раневом отделяемом позволяет достоверно различать характер динамики гнойной раны, фазу раневого процесса и осуществлять коррекцию хирургического лечение.

4. Установлено, что показатели прооксидантно-антиоксидантной системы крови имеют прямую статистически значимую зависимость от площади раны, что определяет степень выраженности окислительного стресса. Выявлено снижение антиокислительной активности и количества сульфгидрильных групп, а также повышение показателей хемилюминесценции и концентрации ТБК-активных продуктов при увеличении морфологического субстрата — поверхности гнойной раны.

5. При местном лечении экспериментальной гнойной раны с использованием гидрофильной мази на основе вытяжки из РгисШэ БорЬогае ]арошсае с экспериментально доказанными антиоксидантными свойствами было установлено смещение прооксидантно-антиоксидантного баланса в сторону антиоксидантного звена, что детерминирует удлинение первой и укорочение второй фазы раневого процесса.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ В клинической практике целесообразно использовать показатели прооксидантно-антиоксидантного баланса, демонстрирующие отчетливую взаимосвязь при определении их в экссудате раны и в крови. Можно утверждать, что изолированное повышение прооксидантного звена в гнойной ране, как правило, свидетельствует о некупированном гнойном процессе в ней, а изолированное повышение прооксидантного звена в крови может свидетельствовать о наличии другого (недренированного) гнойного очага, сочетанное же повышение или снижение этих показателей отражает неосложненное течение раневого процесса. Контроль в динамике таких показателей позволяет осуществлять мониторинг проводимого лечения.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации 1. Basov A.A., Pavluchenko I.I., Fedosov S.R. Inhibition of peroxide oxidation in author's test-system by the different medicines // Internation Conference «Reactive oxygen and Nitrogen species, antioxidant and human health». Smolensk, 22-25 September 2003. - Smolensk, 2003. - P. 8-9.

* 2. Басов A.A., Павлюченко И.И., Плаксин A.M., Федосов C.P. Использование аналогово-цифрового преобразователя в составе системы сбора и обработки информации с хемилюминотестера LT-1 // Вестник новых медицинских технологий. - 2003. - Т. 10, №4. - С. 67-68.

* 3. Басов A.A., Павлюченко И.И., Федосов С.Р. Некоторые аспекты разработки программного обеспечения для экспериментальной биохимической лаборатории // Вестник новых медицинских технологий. - 2002. - Т. 9, № 2. -С. 87.

* 4. Быков М.И., Павлюченко И.И., Басов A.A., Федосов С.Р., Луговая И.А., Моргоев А.Э. Параметры системы про-/антиоксидаяты крови и гнойных ран у больных сахарным диабетом // Аллергология и иммунология. - 2006. - Т. 1, №7.-С. 117.

* 5. Быков М.И., Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Моргоев А.Э. Анализ эффективности использования методики «Sorption&Imprinting» с целью забора биологического материала из раны для биохимического анализа // Аллергология и иммунология.-2007.-Т. 1,№8.-С. 110-111.

* 6. Луговая И.А., Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Басов A.A., Быков М.И. Активность ферментов антирадикальной защиты в эритроцитах и в раневом отделяемом у больных с осложненным течением сахарного диабета // Открытое образование. - 2006. - № 3. - С. 425-427.

7. Павлюченко И.И., Белоножкина Е.С., Павлюченко Е.В., Басов A.A., Федосов С.Р. Антиоксидантные свойства некоторых пищевых веществ и фармпрепаратов // Материалы национальной научно-практической конференции с международным участием «Свободные радикалы, антиоксиданты и болезни человека». Смоленск, 19-22 сентября 2001. -Смоленск, 2001. - С. 13-14.

8. Павлюченко И.И., Быков И.М., Басов A.A., Федосов С.Р., Быков М.И., Гайворонская Т.В., Моргоев А.Э., Луговая И.А. Интегральные методы диагностики и мониторинга эндотоксикоза и окислительного стресса у больных с различной патологией // Материалы научно—практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». - Астрахань - Волгоград - Москва, 2006. - С. 229-232.

9. Савченко Ю.П., Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Охременко О.С. Использование экспериментальных моделей IN VITRO для оценки антиоксидантной активности мазевых лекарственных форм, применяемых для местного лечения ран // Материалы IV Всероссийской конференции общих хирургов с международным участием «Раны и раневая инфекция». Ярославль, 14-15 мая 2007. - Ярославль, 2007. - С. 199-202.

10. Савченко Ю.П., Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Охременко О.С. Использование экспериментальных моделей IN VIVO для оценки антиоксидантной активности мазевых лекарственных форм, применяемых для местного лечения ран // Материалы IV Всероссийской конференции общих хирургов с международным участием «Раны и раневая инфекция». Ярославль, 14-15 мая 2007. - Ярославль, 2007. - С. 202-205.

* - работа опубликована в журнале, включенном ВАК в Перечень ведущих и рецензируемых научных журналов и изданий.

Список патентов на изобретения и полезные модели

1. Пат. 2182706 Российская Федерация, МПК7 G01N 33/48. Способ контроля антиокислительной активности профилактических и лечебных антиоксидантных средств / И.И. Павлюченко, A.A. Басов, Федосов С.Р.; заявитель и патентообладатель Павлюченко И.И., Басов A.A., Федосов С.Р. -№2003123776; заявл. 28.07.2003; опубл. 10.09.2004 // Бюл. - 2004. - №25. -20 с.

2. Пат. 2236008 Российская Федерация, МПК А61К 33/00. Способ лабораторной диагностики окислительного стресса организма человека / И.И. Павлюченко, A.A. Басов, С.Р. Федосов; заявители и патентообладатель Павлюченко И.И., Басов A.A., Федосов С.Р. - № 2006101586/22; заявл. 19.01.2006; опубл. 27.07.2006 //Бюл. -2006. -№21. -2 с.

3. Свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ 2006611562. Программа для регистрации сигналов хемилюминотестера JIT-1 / И.И. Павлюченко, С.Р. Федосов, A.A. Басов; заявитель и правообладатель Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Басов A.A. - № 2006610783; заявл. 16.03.2006; зарег. 10.05.2006.

4. Пат. 2301626 Российская Федерация, МПК А61В 10/00. Способ определения площади дефекта кожи и контроля ее изменений / Ю.П. Савченко, С.Р. Федосов, A.M. Плаксин; заявитель и патентообладатель Савченко Ю.П., Федосов С.Р., Плаксин А.М. - № 2005135783/14; заявл. 17.11.2005; опубл. 27.06.2007 // Бюл. - 2007. - №18. - 4 с.

Список сокращений

АОА - антиокислительная активность

АОС - антиоксидантная система

БВХЛ - быстрая вспышка хемилюминесценции

КАТ - каталаза

КОМБэр - коэффициент окислительной модификации биомолекул

эритроцитов

сод - супероксиддисмутаза

ТБЧ - тиобарбитуровое число

ЭВМ - электронная вычислительная машина

SH-группы - сульфгидрильные группы

Подписано в печать 06.04.2009. Формат 60x84 '/16. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,63. Тираж 100 экз. Заказ № 107 от 08.04.09 г. Напечатано в типографии «АДАС» с оригинал-макета заказчика. 350000, г. Краснодар, ул. Ленина, 65, оф. 502. Тел.:(861)275-02-30

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Федосов, Сергей Ростиславович

СОДЕРЖАНИЕ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО БАЛАНСА У БОЛЬНЫХ С ГНОЙНЫМИ РАНАМИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Уровень прооксидантной-нагрузкиу больных с гнойными ранами.

1.1.1. Продукция активных форм кислорода клетками-фагоцитами.

1.1.2. Продукция активных форм кислорода клетками не фагоцитарного ряда.

1.1.3. Неконтролируемая продукция активных форм кислорода.

1.2. Состояние антиоксидантной системы у больных с гнойными ранами

1.3. Состояние баланса прооксидантных и антиоксидантных факторов в динамике раневого процесса.

1.4. Принципы и способы исследования состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса у больных с гнойными ранами.

ГЛАВА 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ С ГНОЙНЫМИ РАНАМИ И ИСПОЛЬЗОВАННЫХ КЛИНИЧЕСКИХ И СПЕЦИФИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ (МАТЕРИАЛЫ И

МЕТОДЫ).

2.1. Материалы исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Общепринятые клинические лабораторные методики.

2.2.2. Методика определения площади раны.

2.2.3. Методика забора биологического материала.

2.2.4. Методики оценки прооксидантно-антиоксидантного статуса биологического материала.

2.2.4.1. Люминол-зависимая Н202-индуцированная хемшпоминесценция.

2.2.4.2. Амперометрический анализ антиокислительной активности

2.2.4.3. Определение активности каталазы.55.

2.2.4.4. Определение активности супероксиддисмутазы.

2.2.4.5. Определение продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой.58,

2.2.4.6. Определение количества сульфгидрильных. групп.

2.2:5. Методика^ расчета интегрального показателя коэффициента окислительной модификации биомолекул эритроцитов.

2.2.6. Методика постановки.экспериментальной части исследования. 62'

2.2.8. Методики оценки про-/антиоксидантной активности лекарственных субстанций.

2.2.8.1. Методика определения антиоксидантной активности лекарственных субстанций in vitro с помощью однократной индукции перекисного окисления.

2.2.8.2. Методика определения антиоксидантной активности, лекарственных субстанций, in vitro с помощью пролонгированной индукции перекисного окисления.

2.2.8.3: Методика- определения антиоксидантной активности лекарственных субстанций in vitro в тест-системах с плазмой при помощи индуцированной люминол-зависимой хемилюминесценции

2.2.8.4. Методика амперометрического определения антиоксидантной активности лекарственных субстанций in vitro в тест-системах с плазмой крови.

2.2.9. Морфологические методы.

2.2.10: Методы статистического анализа.

ГЛАВА 3. СОСТОЯНИЕ ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО БАЛАНСА НА ЛОКАЛЬНОМ УРОВНЕ У НАБЛЮДАЕМЫХ БОЛЬНЫХ В ДИНАМИКЕ ЭВОЛЮЦИИ ГНОЙНОЙ РАНЫ.

3.1. Максимум быстрой вспышки хемилюминесценции раневого экссудата.

3.2. Площадь быстрой вспышки хемилюминесценции раневого экссудата

3.3. Антиокислительная активность раневого экссудата по данным амперометрического детектирования.

3.4. Активность каталазы в раневом экссудате.

3.5. Активность супероксиддисмутазы в раневом экссудате.

3.6. Коэффициент соотношения активности каталазы и супероксиддисмутазы в раневом экссудате.

ГЛАВА 4. СОСТОЯНИЕ ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО БАЛАНСА НА СИСТЕМНОМ УРОВНЕ У НАБЛЮДАЕМЫХ БОЛЬНЫХ В ДИНАМИКЕ ЭВОЛЮЦИИ ГНОЙНОЙ РАНЫ (КЛИНИЧЕСКОЕ

ИССЛЕДОВАНИЕ).

У НАБЛЮДАЕМЫХ БОЛЬНЫХ.

4.1. Максимум быстрой вспышки хемилюминесценции плазмы крови.

4.2. Площадь быстрой вспышки хемилюминесценции плазмы крови.

4.3. Антиокислительная активность плазмы крови по данным амперометрического детектирования.

4.4. Тиобарбитуровое число плазмы и эритроцитов.

4.5. Концентрация сульфгидрильных групп в гемолизате эритроцитов

4.6. Активность каталазы в гемолизате эритроцитов.

4.7. Активность супероксиддисмутазы в гемолизате эритроцитов.

4.8. Соотношение активности каталазы и супероксиддисмутазы в гемолизате эритроцитов.

4.9. Коэффициент оксидативной модификации биомолекул эритроцитов

4.10. Зависимость показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса от площади раневой поверхности.

ГЛАВА 5. КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО БАЛАНСА НА МЕСТНОМ И СИСТЕМНОМ УРОВНЯХ У НАБЛЮДАЕМЫХ БОЛЬНЫХ В ДИНАМИКЕ ЭВОЛЮЦИИ ГНОЙНОЙ РАНЫ.

ГЛАВА 6. ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СУБСТАНЦИЙ, ПРИМЕНЯЕМЫХ ДЛЯ МЕСТНОГО ЛЕЧЕНИЯ РАН, НА ПОДОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ.

6.1. Оценка в экспериментальных моделях in vitro.

6.2. Оценка антиоксидантной активности мазевых лекарственных форм, применяемых для местного лечения ран, в экспериментальных моделях in vivo.

5.3. Оценка ранозаживляющей активности мазевых лекарственных форм, применяемых для местного лечения ран, в экспериментальных моделях in vivo.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в процессе развития гнойной раны и возможности коррекции его нарушений (экспериментально-клиническое исследование)"

Актуальность проблемы. Разработка эффективных методов диагностики течения раневого процесса, а также выбор оптимального метода лечения продолжает оставаться одной из актуальных проблем в современной хирургии [Б.М.Костюченок и соавт., 1976; В.К.Гостищев, 1996; В.Д.Федоров и соавт., 2005]. По данным литературы, в настоящее время пациенты с гнойно-воспалительными заболеваниями составляют от 40% [Ю.К.Абаев, 2006] до 49% больных хирургического профиля [Б.М.Даценко и соавт., 1995], а пациенты с трофическими язвами и длительно незаживающими ранами составляют около 1,5% от всего населения и 10% от числа больных общехирургических стационаров [В.Г.Морозов и др., 1998]. Рациональное лечение ран остается одной из наиболее острых и сложных проблем, эффективное решение которой будет искать еще не одно поколение врачей [К.В.Гайдуль и соавт., 2005].

Исследования раневого процесса имеют многовековую историю, причем весьма вероятно, что именно с лечения ран начинался такой раздел медицины как хирургия [Б.М:Даценко и др., 1995]. Общепринятой дефиницией раневого процесса является сложный комплекс реакций, развивающихся в ответ на повреждение покровных тканей и проявляющихся в виде местных и общих реакций [Б.М.Даценко, 1977]. В настоящее время одним из проявлений раневого процесса принято считать изменение баланса в системах генерации свободных радикалов и антиоксидантной защиты [М. Fredrickson, 1990].

Исследования в области redox-биологии, напротив, следует отнести к новым направлениям в науке. Однако, уже можно считать устоявшимся мнение, что взаимодействие свободных радикалов и антиоксидантов является неотъемлемой частью жизнедеятельности аэробных организмов. В рамках этого взаимодействия антиоксиданты поддерживают требуемый уровень свободных радикалов, которые выполняют важнейшие регуляторные функции [B.Halliwell, 2006].

В настоящее время считается установленным фактом развитие окислительного стресса у различных категорий больных с хирургической патологией, сопровождающейся эндотоксикозом. Выраженные сдвиги баланса в системе прооксиданты-антиоксиданты, связанные с превалированием прооксидантных факторов, являются типовой патофизиологической реакцией при развитии в организме человека заболеваний гнойно-воспалительного характера [J. Gutteridge и соавт.,

2000]. Не- является исключением из этого правила и раневой процесс [J.Dissemond и др., 2002].

Значительная прооксидантная нагрузка вызывает интенсификацию реакций свободно-радикального окисления и перестройку всех компонентов АОС как в организме больного в целом, так и на уровне пораженных тканей [Ю. А.Владимиров, 2000]. Для коррекции возникающих нарушений необходимо иметь методы диагностики, позволяющие с достаточной точностью определять уровень и степень дисбаланса в защитных системах организма.

Несмотря на расширение познаний о закономерностях изменения прооксидантно-антиоксидантного статуса в процессе заживления ран [A.Gupta и соавт., 2002] существует недостаток информации о его состоянии у отдельных групп пациентов, что затрудняет обоснованный выбор прооксидантной или антиоксидантной терапии [А. М. Rasik и соавт.,

2001].

Для оценки состояния АОС обычной практикой является исследование активности показателей ее ферментного звена в такой биологической жидкости как кровь и в ее компонентах [О. А.Гомазков, 2003]. Очевидно, что исследования такого рода позволяют определять влияние гнойной раны на состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса лишь косвенно. Изменение равновесия в данной системе при локальном процессе на системном уровне значительно менее выражены, чем на местном, что связано с превалированием местных реакций над организменным ответом, формированием зоны изоляции от общего гомеостаза, отчетливой стадийностью эволюционирования раны.

Такие особенности раневого процесса позволяют утверждать, что в большинстве случаев особый интерес представляет определение состояния системы прооксиданты-антиоксиданты непосредственно в ране [А.Р.Ромм и соавт., 1986]. По факту увеличения прооксидантных процессов в ране для ее эффективного лечения требуется коррекция АОС на. местном уровне. Применяемые при лечении гнойных ран мазевые лекарственные формы в большинстве случаев способны оказывать значительное влияние на свободнорадикальные процессы как в ране, так и в предлежащих здоровых структурах [S.Shetty и соавт., 2007], но этот эффект остается недостаточно изученным в связи с отсутствием адекватных методов оценки состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в ране.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

3) определить комплекс основных биохимических и биофизических показателей, необходимых для объективной оценки уровня дисбаланса в системе прооксиданты - антиоксиданты у пациентов с гнойной раной;

В) оценить влияние местной антиоксидантной терапии на состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса и клиническое течение раневого процесса на экспериментальной модели гнойной раны в различные фазы ее развития.

Новизна результатов исследования

5. Впервые исследована динамика состояния АОС у больных с гнойными ранами параллельно на системном и на местном уровнях в процессе эволюции гнойной раны, проведен корреляционный анализ изменений отдельных показателей в экссудате раны и в периферической крови в зависимости от площади раны.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

Теоретическая значимость исследования

1) Установлен характер динамики прооксидантно-антиоксидантного баланса на местном уровне (в раневом экссудате) и на уровне организма (в периферической крови) в процессе развития гнойной раны.

2) Доказано наличие взаимосвязи изменений показателей прооксидантно-антиоксидантной системы на местном и системном уровнях.

3) Продемонстрированы различия в изменении прооксидантно-антиоксидантного баланса в условиях неосложненного раневого процесса и в условиях раневого процесса, отягощенного сахарным диабетом.

Практическая значимость исследования. Предложенные методы исследования позволяют оценить характер течения раневого процесса, определить момент перехода раны из одной фазы раневого процесса в другую и оценить индивидуальную потребность в средствах коррекции прооксидантно-антиоксидантного баланса. Разработаны методические рекомендации для проведения исследований, направленных на определение влияния лекарственных средств, которые применяются для местного лечения гнойных ран, на прооксидантно-антиоксидантный баланс.

Сведения о практическом использовании результатов исследования. На основании полученных фактов предложены практические рекомендации, используемые в отделении гнойной хирургии краевой клинической больницы №1 имени профессора С.В. Очаповского и в отделении хирургии госпиталя МСЧ ГУВД Краснодарского края (см. приложение 3). Отдельные положения диссертации включены в лекции для общих хирургов и хирургов гнойной специализации на курсах повышения квалификации, а также используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии и кафедре общей хирургии Кубанского государственного медицинского университета.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, списка литературы и трех приложений. Список литературы включает 108 отечественных и 64 зарубежных источника. Диссертация изложена на 204 страницах, иллюстрирована 52 рисунками (в том числе 7 фотографиями), 12 таблицами, представлено 3 клинических примера.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Федосов, Сергей Ростиславович

ВЫВОДЫ

1) Разработанный новый комплексный подход к диагностике состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом (методы измерения площади раны, забора биологического материала из гнойной раны и оценки прооксидантно-антиоксидантного баланса) позволяет проводить достоверную оценку состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом на протяжении всего периода экссудации.

2) В процессе эволюции гнойной раны отмечены изменения показателей прооксидантно-антиоксидантной системы, характеризующие развитие окислительного стресса, в условиях которого на ранних этапах течения раневого процесса отмечаются характерные сдвиги в сторону прооксидантного звена, которые частично стабилизируются на более поздних этапах за счет снижения прооксидантной нагрузки в ране.

3) Проведенными исследованиями установлено, что наибольшую ценность для практического применения имеют биофизические и интегральные показатели, отражающие общий уровень прооксидантной нагрузки и степень истощения антиоксидантной системы, а определение этих показателей в раневом отделяемом позволяет достоверно различать характер динамики гнойной раны, фазу раневого процесса и осуществлять коррекцию хирургического лечение.

4) Установлено, что показатели прооксидантно-антиоксидантной системы крови имеют прямую статистически значимую зависимость от площади раны, что определяет степень выраженности окислительного стресса. Выявлено снижение антиокислительной активности и количества сульфгидрильных групп, а также повышение показателей хемилюминесценции и концентрации ТБК-активных продуктов при увеличении морфологического субстрата — поверхности гнойной раны.

5) При местном лечении экспериментальной гнойной раны с использованием гидрофильной мази на основе вытяжки из Fructus Sophorae japonicae с экспериментально доказанными антиоксидантными свойствами было установлено смещение прооксидантно-антиоксидантного баланса в сторону антиоксидантного звена, что детерминирует удлинение первой и укорочение второй фазы раневого процесса.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Разработка эффективных методов диагностики течения раневого процесса, а также выбор оптимального метода лечения продолжает оставаться одной из актуальных проблем в современной хирургии [Б.М. Костюченок и соавт., 1976; В.К. Гостищев, 1996; В.Д. Федоров и соавт., 2005]. Пациенты с гнойно-воспалительными заболеваниями составляют от 40% [Ю.К. Абаев, 2006] до 49% больных хирургического профиля [Б.М. Даценко и соавт., 1995]. Доказано, что одним из проявлений раневого процесса является изменение баланса в системах генерации свободных радикалов и антиоксидантной защиты [М. Fredrickson, 1990], которое может являться также одной из причин неблагополучного и осложненного течения раневого процесса. В настоящее время существует недостаток информации о состоянии прооксидантно-антиоксидантного баланса у отдельных когорт пациентов, что затрудняет обоснованный выбор прооксидантной или антиоксидантной терапии [A.M. Rasik и соавт., 2001].

В основу наших клинических исследований положены результаты наблюдения и лечения 62 больных с гнойными ранами. С целью проведения аналитического и статистического анализа больные были разделены на три основные группы и две контрольные группы,' отличающихся по нозологии. Основная группа А включала 39 больных с осложнениями синдрома диабетической стопы, которые были разделены на две подгруппы А1 - пациенты с флегмоной стопы (N=20) и А2 -пациенты с гнойными ранами стопы (N=19). Основная группа В включала больных с флегмонами шеи, вызванными не анаэробной неклостридиальной флорой (N=23). Все включенные в исследование пациенты не имели осложнений в виде флегмон граничных областей и тяжелого сепсиса.

С целью обеспечения сопоставимости статистического анализа были выделены две контрольные группы. В группу К1 были включены пациенты, находившиеся на лечении в отделении эндокринологии ГУЗ ГБ №2 г.Краснодара (N=22). В группу К2 были включены лица, не страдающие соматическими заболеваниями на момент обследования (N=20). Пациенты были сопоставимы по возрасту и полу между группами А и группой К1, группой В и группой К2.

При поступлении в клинику пациентам выполнялась адекватная хирургическая обработка гнойного очага по традиционной методике [Б.М. Костюченок и соавт., 1986]. В дальнейшем осуществлялись ежедневные перевязки с санацией раны водным раствором антисептика (хлоргексидина биглюконат). Использовались повязки с мазью «Левомеколь» на протяжении всего исследования. Индивидуально для каждого пациента фиксировался момент перехода раны из гнойно-некротической в фазу грануляций (использовалась классификация фаз раневого процесса Б.М. Даценко, 1995). Средние сроки момента смены фаз в различных группах составили: в группе А1 — 12±0,4 (1,5) сутки, в группе А2 — 10+0,4 (1,7) сутки, в группе В — 7±0,2 (1.1) сутки.

Площадь раневой поверхности измерялась на следующие сутки после проведения хирургической обработки гнойного очага с использованием авторского метода [Ю.П. Савченко, С.Р. Федосов, A.M. Плаксин, 2007] и составила в группе А1 56,73 ±1,35 (5,88) см2, в группе А2 - 67,47±1,79 (7,61) см2, в группе В - 77,26+1,61 (7,55) см2.

Для определения показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса на системном уровне забиралась кровь непосредственно из вены пациента с использованием стандартного инструментария и гепаринизировалась в соотношении 1:10, после чего охлаждалась до 810° С. Для определения показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса на местном уровне отделяемое раны забиралось по методике [А.Р. Ромм и соавт., 1986] в авторской модификации [М.И. Быков и соавт.,

2007]. Кровь и экссудат раны забирались на 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 14-е сутки от момента хирургической обработки гнойного очага.

Экспериментальная часть работы была направлена на оценку влияния гидрофильных мазей с антиоксидантными свойствами на состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в раневом отделяемом и клинические показатели течения раневого процесса. Опыты выполнены на двенадцати беспородных кроликах-самцах весом 2,5-3 кг. Кролики были разделены на три группы по четыре животных в каждой: в контрольной группе лечение осуществлялось физиологическим раствором хлорида натрия, в группе №1 — мазью «Левомеколь», в группе №2 -гидрофильной мазью на основе водного экстракта Fructus Sophorae japonicae. Раневой процесс моделировался гибридным методом, включающим метод моделирования резаной раны [Н.Р. Ehrlich и соавт., 1968] и метод моделирования абсцесса [Л.А. Мамедов и соавт., 1988]. Сформированная гнойная рана подвергалась лечению путем ежедневных перевязок. Экссудат раны забирался на 1, 3, 5, 7 и 10-е сутки.

Состояние АОС организма оценивали по активности каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов, по уровню восстановленных тиоловых групп эритроцитов и амперометрическому определению антиокислительной активности плазмы крови. Активность КАТ исследовали в гемолизате эритроцитов и раневом отделяемом по методу [R. Beers и соавт., 1952] в авторской модификации [И.И. Павлюченко и соавт., 2006], основанному на оценке скорости убыли субстрата фермента (перекиси водорода). Активность СОД определяли в гемолизате эритроцитов и раневом отделяемом по методике [В.А. Костюк и соавт., 1990] в авторской модификации [И.И. Павлюченко и соавт., 2006], которая основана на способности СОД ингибировать индуцированную реакцию аутоокисления кверцетина. Количество тиоловых групп в гемолизате эритроцитов определяли модифицированным методом с использованием реактива Эллмана [В.Н. Орехович, 1977]. Определение АОА плазмы крови и экссудата раны проводилось модифицированным амперометрическим способом [А.Я. Яшин и соавт., 2003] на анализаторе «Яуза-01-ААА». Способ основан на измерении электрического тока, возникающего при окислении биологического образца на поверхности рабочего электрода при определенном потенциале.

Состояние прооксидантной системы оценивали в плазме крови по исходному количеству продуктов окислительной модификации биомолекул, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБЧ), а в эритроцитах определяли как базальный их уровень, так и состояние после предварительной индукции [И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили, 1977]. Также в плазме крови и в экссудате раны оценивали интенсивность быстрой вспышки хемилюминесценции (БВХЛ) с помощью люминотестера ЛТ-01 в составе системы для диагностики окислительного стресса [И.И. Павлюченко, А.А. Басов, С.Р. Федосов, 2006], включающей аналогово-цифровой преобразователь и ЭВМ с авторской «Программой регистрации сигналов хемилюминотестера ЛТ-01», позволяющей регистрировать амплитуду и площадь хемилюминесценции.

При анализе полученных результатов по отдельным показателям прооксидантно-антиоксидантного статуса на местном уровне (исследование раневого отделяемого) можно отметить следующие закономерности. В сравнении с неосложненным течением раневого процесса (группа В) у пациентов с острым гнойным процессом на фоне сахарного диабета (группа А1) имеется тенденция к сохранению уровня оксидативной нагрузки, в то время как у пациентов с хроническим его характером (группа А2) особенностью является меньший уровень активации и торпидность динамики оксидативных процессов. Эти процессы отмечаются на фоне неадекватной реакции АОС на местном уровне в обеих указанных группах, особенно отчетливо проявляющейся у пациентов с острым гнойным процессом (группа А1).

Проявляющееся со 2-х суток и отмеченное во всех группах снижение АОА раневого экссудата отражает два одновременно развивающихся процесса: снижение функциональных возможностей АОС в тканях раны и уменьшение образования раневого экссудата по мере перехода раны во вторую фазу. К 14 суткам отмечено снижение этого показателя на 47% (группа А1, р<0,05), 33,5% (группа А2) и 55,7% (группа В, р<0,05).

На 2-4-е сутки во всех группах зарегистрирован наибольший уровень максимума и площади БВХЛ раневого экссудата (рис. 2), что является результатом активации прооксидантных систем в тканях раны в первой фазе раневого процесса как побочного эффекта интенсификации окисления при «окислительном взрыве» в фагоцитах. К 14-м суткам отмечено снижение этих показателей на 56,2% (группа Al, р < 0,05), 22,3% (группа А2) и 76,4% (группа В, р < 0,05).

С первого наблюдения отмечается снижение АОА плазмы крови у пациентов с сахарным диабетом (на 44,8% в группе А1 и на 48,2% в группе А2 относительно контрольных значений; р < 0,05). Это является следствием истощения АОС крови в результате длительной активации факторов прооксидантной направленности как ответа макроорганизма на гнойное воспаление. Обращает на себя внимание, что характер описанного в группе В изменения АОА плазмы имеет значительные отличия от характера изменения в эти сроки аналогичного показателя групп А1 и А2. Так, в группах А1 и А2 изначально показатель АОА был ниже и снижение его на протяжении всего периода наблюдения отмечалось относительно медленнее и с меньшей амплитудой, чем в группе В. Это может быть связано с тем, что у пациентов с сахарным диабетом изначально отмечается дисбаланс АОС и снижение ее резервных возможностей по нейтрализации возрастающей в результате развития гнойного процесса прооксидантной нагрузки.

Описываемое во всех группах повышение максимума и площади БВХЛ плазмы крови в начале развития раневого процесса является результатом активации факторов прооксидантной направленности крови как системного ответа макроорганизма на микробную агрессию, проявляющуюся развитием флегмоны. Обращает на себя внимание, что в группах А1 и А2 изначально показатель максимума БВХЛ был выше контрольных значений на 44,8 и 48,2% соответственно (р < 0,05), а увеличение его в последующем периоде наблюдения происходило относительно медленнее и с меньшей амплитудой, чем в группе В. Это может быть связано с тем, что у пациентов с сахарным диабетом развивается эндотоксикоз, в том числе повышается концентрация в крови продуктов азотистого обмена (обладающих антиоксид антными свойствами), и снижение напряженности иммунных реакций, которое предопределяет уменьшение прооксидантной нагрузки, что детерминирует фиксацию прооксидантно-антиоксидантного баланса на более высоком уровне с тенденцией к дисбалансу в сторону прооксидантного звена.

Динамика концентрации SH-групп в плазме крови в ранние сроки течения раневого процесса отражает продолжающееся снижение емкости наиболее быстро реагирующего на прооксидантную агрессию звена АО С минимальное значение в группе А1 составило 73,5%, в группе А2

60,6%, в группе В - 63,4% от показателя контрольной группы; р < 0,05). Отмечаемый в более поздние сроки прирост концентрации SH-групп является отражением регенерации этого звена АОС при снижении прооксидантной нагрузки. Большая скорость регенерации SH-групп у пациентов с сохранным метаболизмом (группа В) в сравнении с пациентами, страдающими СД и имеющими патологию обмена веществ (группы А1 и А2), отражает дисфункцию звена быстрого реагирования АОС при сахарном диабете.

Описываемый в начале эволюции раны рост активности СОД в гемолизате эритроцитов (в группе А1 - на 34%, в группе А2 - на 32% и в группе В - на 32,6% от показателя контрольной группы; р < 0,05) может соответствовать активации этого фермента как звена первой линии АОС и является ответом на гиперактивацию синтеза активных форм кислорода. У пациентов групп А1 и А2 отмеченная динамика характеризует активацию СОД как фермента первой линии АОС в условиях нарушений метаболизма, обусловленных сахарным диабетом: реакции прооксидантного и антиоксидантного компонента торпидны, а амплитуда реакции значительно снижена.

Зарегистрированная в группах А1 и А2 динамика коэффициента окислительной модификации биомолекул эритроцитов - КОМБэр (повышение в 3,2 и 3,4 раза соответственно показателю контрольной группы) отражает как исходную тяжесть повреждения биомолекул в результате прооксидантной нагрузки, так и неспособность организма к быстрой компенсации развившегося окислительного стресса. В группе В, напротив, следует отметить как тяжелое исходное повреждение биомолекул в результате прооксидантной нагрузки, так и нормальную реакцию АОС, позволяющую добиться быстрой компенсации окислительного стресса. Несмотря на значительную активацию прооксидантного звена, в группе В отмечается быстрое снижение КОМБэр (в 7 раз от начала наблюдения к 10-м суткам), отражающее адекватное функционирование и высокую реакционную способность АОС за счет сохранности ее резервов.

Необходимо отметить факт статистически значимого (р < 0,05) влияния площади раны на большую часть показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса, за исключением ферментов (КАТ и СОД). Влияние на уровень БВХЛ, АОА, ТБЧ и количество SH-групп имеют строго определенную направленность, которая соответствует представлениям о возрастании прооксидантной нагрузки при увеличении морфологического субстрата — раневой поверхности. Напротив, активность КАТ и СОД имеет индивидуальный и вариабельный характер, поэтому не удалось обнаружить прямой зависимости их активности от площади раны.

Резюмируя можно отметить, что в клинической практике целесообразно использовать показатели прооксидантно-антиоксидантного баланса, демонстрирующие отчетливую взаимосвязь при определении их в экссудате раны и в крови. Можно утверждать, что изолированное повышение прооксидантного звена в гнойной ране, как правило, свидетельствует о некупированном гнойном процессе в ней, а изолированное повышение прооксидантного звена в крови может свидетельствовать о наличии другого (недренированного) гнойного очага, сочетанное же повышение или снижение этих показателей отражает неосложненное течение раневого процесса. Контроль в динамике таких показателей позволяет осуществлять мониторинг проводимого лечения.

На модели гнойной раны у экспериментальных животных (кроликов) показано, что по совокупности оцениваемых показателей АОА гидрофильной мази на основе вытяжки из Fructus Sophorae japonicae значительно превосходит аналогичный показатель мази «Левомеколь». Важно отметить наличие некоторого антиоксидантного эффекта применения мази «Левомеколь», что в связи с отсутствием в составе этой мази антиоксидантных компонентов следует оценивать как непрямое антиоксидантное действие, связанное с облегчением течения раневого процесса и ускорением перехода раны в фазу грануляций.

При анализе скорости снижения площади экспериментальной модели гнойной раны отмечено, что первые 7 суток наименьшая площадь раны отмечалась в группе экспериментальных животных, получавших местное лечение мазью «Левомеколь» (группа Л). Наиболее выраженные отличия регистрировались к 3-м суткам, когда скорость заживления раны в этой группе превышала скорость в группе экспериментальных животных, не получавших местного лечения (группа К, р < 0,05), в 1,5 раза и превышала скорость в группе экспериментальных животных, получавших лечение мазью «Софора» (группа С, р < 0,05), в 2,8 раза. К 5 суткам группа сравнения занимала последнее место по скорости заживления раны, группа Л - второе (в 3 раза быстрее группы К, р < 0,05), группа С - первое (в 5 раз быстрее группы К, р < 0,05). После пяти суток скорость заживления раны в группе Л продолжала снижаться, что в сочетании с продолжающимся нарастанием скорости заживления раны в группе С привело к выходу последней в лидеры по эффективности местного лечения. Относительно группы сравнения к 10 суткам скорость заживления раны в группе Л была ниже на 30%, а в группе С - выше в 2,8 раза (р<0,05).

Таким образом, под действием мази с антиоксидантными свойствами прооксидантно-антиоксидантный баланс достоверно смещается в сторону антиоксидантного звена, а также удлиняется гнойно-некротическая фаза раневого процесса и увеличивается скорость эпителизации в фазе грануляций.

При анализе скорости снижения площади экспериментальной модели гнойной раны отмечено, что первые 7 суток наименьшая площадь раны отмечалась в группе экспериментальных животных, получавших местное лечение мазью «Левомеколь» (группа Л). Наиболее выраженные отличия регистрировались к 3 суткам, когда скорость заживления раны в этой группе превышала скорость в группе экспериментальных животных, не получавших местного лечения (группа К, р<0,05), в 1,5 раза и превышала скорость в группе экспериментальных животных, получавших лечение мазью «Софора» (группа С, р<0,05), в 2,8 раза. К 5 суткам группа сравнения занимала последнее место по скорости заживления раны, группа Л - второе (в 3 раза быстрее группы К, р<0,05), группа С - первое в 5 раз быстрее группы К, р<0,05). После 5 суток скорость заживления раны в группе JI продолжала снижаться, что в сочетании с продолжающимся нарастанием скорости заживления раны в группе С привело к выходу последней в лидеры по эффективности местного лечения. Относительно группы сравнения к 10 суткам скорость заживления раны в группе Л была ниже на 30%, а в группе С - выше в 2,8 раза (р<0.05).

Таким образом, под действием мази с антиоксидантными свойствами достоверно смещается прооксидантно-антиоксидантный баланс в сторону антиоксидантного звена, а также удлиняется первая фаза раневого процесса и значительно увеличивается скорость эпителизации во второй фазе раневого процесса.

Подводя общий итог проведенной работе хочется отметить, что исследование активных форм кислорода в биологических системах находится только в начале своего пути и потребуется еще множество исследований для формирования всеобъемлющей концепции и полноценного использования полученных данных в практическом здравоохранении. Сопоставление влияния прооксидантных и антиоксидантных факторов на гнойную рану в настоящее время достаточно затруднительно в связи с отсутствием препаратов, обеспечивающих стойкий прооксидантный эффект.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Федосов, Сергей Ростиславович, Краснодар

1. Абаев Ю.К. Раны и раневая инфекция. - Ростов-на-Дону: "Феникс", 2006. - 247 с.

2. Абдуллаева А.З. Антиоксиданты в комплексной терапии перитонита: автореф. дис. канд. мед. наук М., 1998. - 20 с.

3. Агаев А.Ю., Николаев А.В., Абасов Б.Х., Мамедов Л.А., Захаров В.В., Баширов Э.А., Багиров Г.С. Антиоксидантотерапия гнойных ран в эксперименте // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1989. №7. - С. 35-37.

4. Андреев А.А., Картавенко В.И., Голиков П.П., Давыдов Б.В., Николаев Н.Ю. Динамика компонентов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных с тяжелой сочетанной травмой // Вопросы медицинской химии. 1998. - №5. - С. 485-493.

5. Андреев А.Ю., Кушнарева Ю.Е., Старков А.А. Метаболизм активных форм кислорода в митохондриях // Биохимия. 2005. - Т.70, №2. - С. 246264.

6. Бшовол А.М. Стан контактно-захисних систем у хворих на екзему: прооксидантно/антиоксидантна система // Дерматол. та венерол. 2005. -№1. - С. 20-26.

7. Балин Д.В. Комплексное использование иммобил. антиоксидантных препаратов для лечения больных с гнойно-воспалительными заболеваниями шеи и челюстно-лицевой области: автореф. дис. . кад. мед. наук. СПб., 2001. - 20 с.

8. Балоболкин М.И., Клебанова Е.М. Роль окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений диабета (лекция) // Проблемы эндокринологии. 2000. - Т.46, №6. - С. 29-34.

9. Басов А.А., Павлюченко И.И., Федосов С.Р. Использование аналогово-цифрового преобразователя в составе системы сбора и обработкиинформации с хемилюминитестером LT-01 // Вестник новых медицинских технологий. 2003. - ТХ, №4. - С. 67-68.

10. Вельских А.Н., Фуфаев Е.Е. Применение антиоксиданта цитофлавина в сочетании с экстракорпоральной гемокоррекцией у больных с острыми лёгочными нагноениями // Вестник интенсивной терапии. 2007. - №2. - С. 75-79.

11. Быков М.И., Павлюченко И.И., Федосов С.Р. Анализ эффективности методики «SORPTION&IMPRINTING» с целью забора биологического материала из раны для биохимического анализа // Аллергология и иммунология. 2007. - №1. - С. 110.

12. Величковский Б.Т. Свободнорадикальное окисление как звено срочной и долговременной адаптации организма к факторам окружающей среды. Вестник РАМН. 2001. - №6. - С. 45-53.

13. Владимиров Ю.А. Электронный парамагнитный резонанс и хемилюминесценция прямые методы исследования свободных радикалов и реакций, в которых они участвуют // Эфферентная терапия. -1999. - №4. - С. 18-27.

14. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский Образовательный Журнал. 2000. - №12. - С.13-19.

15. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов вбиомембранах. М.: "Наука", 1972. - 252 с.

16. Воейков В.Л. Регуляторные функции активных форм кислорода в крови и в водных модельных системах: автореф. дис. . докт. мед. наук. -М., 2004. 48 с.

17. Воробьёва Т.Л., Гайворонская Т.В. Динамика показателей процессов перекисного окисления липидов у больных с флегмонами челюстно-лицевой области при традиционном лечении и проведении антиоксидантной терапии. Москва-Краснодар, 2006. - С. 24-30.

18. Воскресенский О.Н., Жутаев И.А., Бобырев В.Н., Безуглый Ю.В. Антиоксидантная система, онтогенез и старение // Вопросы медицинской химии. 1982. - №1. - С. 14-27.

19. Габитова Д.М., Фархутдинов P.P., Ягафарова Д.Э. Оценка процессов свободнорадикального окисления у больных ишемической болезнью сердца. Смоленск, 2001. - С. 112-113.

20. Гаврилюк Л.А., Лунгу С.Е., Щербатюк Д.И. Антиоксидантная коррекция перекисного окисления липидов при флегмонах челюстно-лицевой области // Стоматология. 1994. - №2. - С. 33-35.

21. Гайдуль К.В., Муконин А.А. Раневая инфекция // Новосибирск: "Аболмед", 2005. 32 с.

22. Галактионова Л.П., Молчанов А.В., Ельчанинова С.А., Варшавский Б .Я. Состояние перекисного окисления у больных с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - №6. - С. 10-14.

23. Гейниц А.В., Тогонидзе Н.А., Смольников П.В., Кузина М.А., Максименков А.В. Применение антиоксиданта мексидола в комплексной терапии больных острым панкреатитом // Вестник интенсивной терапии. -2003. №2. - С. 77-80.

24. Гёлль П. Как превратить персональный компьютер в измерительный комплекс. М.: "ДМК Пресс", 2001. - 144 с.

25. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: «Практика», 1999. - 572 с.

26. Голуб И.Е., Ковыршин А.В., Сорокина JI.B. Перекисное окисление липидов у пациентов с атеросклеротической окклюзией артериальных сосудов нижних конечностей // Вестник интенсивной терапии. 2005. -№5. - С. 212-214.

27. Гольдберг B.JI. Применение антиоксиданта Гипоксен в комплексном лечении одонтогенных флегмон: автореф. дис. . канд. мед. наук.- М., 2002. 20 с.

28. Гомазков О.А. Окислительный стресс на молекулярном, клеточном и органном уровнях // Биохимия. 2003. - №7. - С. 1005-1006.

29. Гостшцев В.К. Оперативная гнойная хирургия (руководство для врачей). -М.: "Медицина", 1996. 426 с.

30. Даценко Б.М. Дифференцированный подход к выбору лекарственных средств для местного лечения с учетом этиопатогенеза и фазности // Материалы Всесоюзной конференции "Раны и раневая инфекция". Москва, 1977. - С. 5-9.

31. Даценко Б.М., Ляпунов М.А., Мохерт Н.А. Теория и практика местного лечения гнойных ран // Киев: "Здоров'я", 1995. 190 с.

32. Джанашия П.Х., Владыцкая О.В., Кобалава М.А., Сукоян Г.В., Шерозия Ц.Р., Андриадзе Н.А. Гипероксидация липидов при нарушении структурной организациии тромбоцитарных мембран у больных с ХПН // Российский медицинский журнал. 2005. - №4. - С. 15-17.

33. Дубинина Е.Е. Активные формы кислорода и их роль в развитии оксидативного стресса // Фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии: труды научной конференции. СПб., 1988. -С. 386-398.

34. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состоянияхокислительного стресса. Вопросы мед. химии. 2001. - №6(47). - С. 561581.

35. Дубинина Е.Е., Шугалей И.В. Окислительная модификация белков // Успехи современной биологии. 1993. - №1(113). - С.71-81.

36. Дугиева М.З., Багдасарова 3.3. Клиническая эффективность антиоксидантной терапии в хирургической практике // Анестезиология и реаниматология. 2004. - №2. - С. 73-76.

37. Епишин А.В., Рудяк Г.И. Применение антиоксидантов у больных с хроническими заболеваниями гепатобилиарной системы (обзор литературы) // Врачебное дело. 1990. - №4. - С. 24-27.

38. Зайцев В.Г., Закревский В.И. Защита клеток от экзогенных и эндогенных активных форм кислорода: методологические подходы к изучению // Фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии: труды научной конференции. СПб, 1998. - С. 401-405.

39. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс. Биохимические и патофизиологические аспекты. М.: "Наука. Интерпериодика", 2001. - 427 с.

40. Зенков Н.К., Менщикова Е.Б. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах // Успехи современной биологии. -1993. №3(113). - С. 296.

41. Зоров Д.Б., Банникова С.Ю., Белоусов З.В., Высоких М.Ю., Зорова Л.Д., Исаев Н.К., Красников Б.Ф., Плотников Е.Ю. Друзья или враги. Активные формы кислорода и азота // Биохимия. 2005. - №70(2). - С. 265272.

42. Камаев М.Ф. Инфицированная рана и ее лечение. М.: "Медицина", 1970. - 492 с.

43. Каримова М.Х., Иноятова Ф.Х. Течение экспериментального увеита, процессы перекисного окисления и активность ферментов антиоксидантной защиты на фоне лечения перфтораном // Вопросы медицинской химии. 2002. - №5(48). - С. 450-454.

44. Келина Н.Ю., Васильков В.Г., Безручко Н.В. Динамика показателей антиоксидантного и оксидантного статуса при перитоните в ранний послеоперационный период // Вестник интенсивной терапии. 2004. - №3. - С. 45-50.

45. Келина Н.Ю., Шикунова Л.Г., Васильков В.Г., Безручко Н.В. Взаимосвязи параметров антиоксидантного и оксидантного статуса крови в развитии эндотоксикоза при разлитом перитоните в токсической стадии // Вестник интенсивной терапии. 2003. - №5. - С. 90-92.

46. Кения М.В., Лукши А.И. Гуськов Е.П. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе // Успехи современной биологии. 1993. -Т.113, №4. - С. 456-469.

47. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О. Свободные радикалы при воспалении // Лабораторное дело. 1988. - №3. - С. 30-32.

48. Клебанов Г.И., Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В. Антиоксидантная активность сыворотки крови // Вестник РАМН. 1999. - №2. - С.15-22.

49. Костюк В.А., Потапович А.И., Ковалева Ж.В. Простой ичувствительный метод определения активности суперооксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина // Вопросы медицинской химии. 1990. - Nb2. - С. 88-91.

50. Костюченок Б.М., Вигдорчик И.В., Березов Ю.Е. Основы гнойной хирургии. М.: "Медицина", 1976. - 382 с.

51. Костюченок Б.М., Карлов В.А. Принципы активного хирургического лечения гнойных ран // Тезисы докладов II всесоюзной конференции "Раны и раневая инфекция". Москва, 1986. - 17-19 с.

52. Кузьмин В.В., Андреева O.JI. Перекисное окисление липидов у пациентов с атеросклеротической гангреной конечностей // Вестник интенсивной терапии. 2005. - №5. - С. 45-46.

53. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита // Соросовский образовательный журнал. 1999. - №1. - С. 2-8.

54. Ланкин В.В., Тихазе А.К. и Беленков Ю.И. Антиоксиданты в комплексной терапии атеросклероза: pro et contra // Кардиология. 2004. -№2. - С. 72-78.

55. Ляхович В.В., Вавилин В.А., Зенков Н.К., Меньшикова Е.Б. Активная защита при окислительном стрессе // Антиоксидант-респонсивный элемент. Биохимия. 2006. - Т.71, №9. - С. 1183-1197.

56. Ляхович В.В., Вавилин В.А., Зенков Н.К., Меньщикова Е.Б. Активная защита при окислительном стрессе // Антиоксид ант-респонсивный элемент. Биохимия. 2006. - Т.71, №9. - С. 1183-1197.

57. Магомедов М.А. Антиоксидантная терапия в лечении послеоперационного пареза кишечника // Хирургия. 2004. - №1. - С. 4345.

58. Матвеев С.Б., Шахова О.Б., Тихомирова Н.И. Состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных с пельвиоперитонитом // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. -№10. - С. 4.

59. Морозов В.Г., Измайлов Г.А., Катухов Ю.П. Хирургическое лечение гнойно-некротических поражений стоп при сахарном диабете // Хирургия. 1998. - №4. - С. 3-8.

60. Мустафина Ж.Г., Краморенко Ю.С., Кобцева В.Ю. Интегральные гематологические показатели в оценке иммунологической реактивности у больных офтальмопатологией // Клиническая лабораторная диагностика. -1999. №5. - С. 47-49.

61. Немцова Е.Р., Уткин М.М., Звягин А.А., Коряков И.А., Чиссов В.И., Золотавкина Ю.Б., Андреева Т.Н., Батыров Ф.А., Якубовская Р.И. Антиоксиданты в интенсивной терапии // Российский медицинский журнал. 2005. - №4. - С. 18-22.

62. Немцова Е.Р., Уткин М.М., Звягин А.А., Коряков И.А., Чиссов В.И., Золотавкина Ю.Б., Андреева Т.Н., Батыров Ф.А., Якубовская Р.И. Антиоксиданты в интенсивной терапии // Российский медицинский журнал. 2005. - №4. - С. 18-22.

63. Орехович В.Н. Современные методы в биохимии. М.: "Медицина", 1977. - 293 с.

64. Орлов А.С., Орлова Е.И. Простая методика количественного определения дезоксирибонуклеиновой кислоты в животных тканях // Биохимия. 1961. -Т.26, №5. - С. 834.

65. Осипов А.Н., Якутова Э.Ш., Владимиров Ю.А. Образование гидроксильных радикалов при взаимодействии гипохлорита с ионами железа // Биофизика. 1993. - №38. - С. 390-396.

66. Островский В.К., Свитич Ю.М., Вебер В.Р. Лейкоцитарный индекс интоксикации при острых гнойных и воспалительных заболеваниях легких // Вестник хирургии. 1983. - №131(11). - С. 21-24.

67. Павлюченко И.И. Окислительный стресс, его мониторинг и критерии оценки антиокислительной активности лекарственных препаратов и Б АД: автореф. дис. . докт. мед. наук. Ростов-на-Дону, 2005. - 45 с.

68. Павлюченко И.И., Басов А.А., Федосов С.Р. Интегральные показатели эндогенной интоксикации и окислительного стресса у больных с почечной недостаточностью // Нефрология и диализ. 2003. - Т.5, №1. -С. 28-32.

69. Парамонов Б.А., Сидельников В.О., Татарин С.Н., Иванцов В.А., Лукашев О.В., Капитонов Л.М., Мошенкова Н.А. Опыт лечения раненых и обожженных препаратами супероксидисмутазы "Эрисод" и "Рексод" // Военно-медицинский журнал. 2002. - №8. - С.59-62.

70. Пасечник И.Н. Механизмы повреждающего действия активированных форм кислорода на биологические структуры у больных в критических состояниях // Вестник интенсивной терапии. 2001. - №4. -С. 3-9.

71. Пескин А.В. Взаимодействие активного кислорода с ДНК // Биохимия. 1997. -Т.62, №12. - С. 1571-1578.

72. Петрович Ю.А., Гуткин Д.В. Свободнорадикальное окисление и егороль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1986. - №5. - С. 85-92.

73. Петросян Н.Э. Коррекция перекисного окисления липидов крови натрия гипохлоритом при лечении флегмон челюстно-лицевой области // Вестник интенсивной терапии. 2005. - №5. - С. 119-123.

74. Петросян Э.А., Сергиенко В.И., Сухинин А.А., Захарченко И.С., Оганесян С.С. Состояние про- и антиоксидантной систем крови при экспериментальном желчном перитоните // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005. - Т.139, №1. - С. 19-21.

75. Подильчак М.Д. Сульфгидрильные группы и сукцинатдегидрогеназа лимфоцитов крови у больных с воспалительными процессами // Хирургия. 1992. - №7-8. - С. 28-30.

76. Рагимов Ч.Р. Роль местной антиоксидантной терапии в предупреждении и лечении гнойно-воспалительных процессов мягких тканей лица и шеи: автореф. дис. докт. мед. наук.- М., 1992. 28 с.

77. Ромм А.Р., Шерстнев М.П., Волков В.В., Владимиров Ю.А. Действие лазерного излучения на перекисную хемилюминесценцию раневого экссудата // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1986. - №102. - С. 426-428.

78. Рябов Г.А., Азизов Ю.М., Дорохов С.И., Кулабухов В.В., Титова И.А., Пасечник И.Н., Бражник Т.Б., Рыбинцов В.Ю. Окислительная модификация белков плазмы крови у больных в критических состояниях // Анестезиология и реаниматология. 2000. - №2. - С. 72-75.

79. Саприн А.Н., Калинина Е.В. Окислительный стресс и его роль в механизмах апоптоза и развития патологических процессов. Успехи биологической химии. 1999. - №39. - С. 289-326.

80. Соловьёв М.М., Алехова Т.М., Артёменко K.JL, Иванов Ю.В., Владимирова Л.Г. Патогенетическое обоснование антиоксидантной терапии в клинике челюстно-лицевой хирургии. СПб., 2005. - С. 167-168.

81. Столяров Е.А., Иванова В.Д., Колсанов А.В. Заживление гнойных ран мягких тканей при местном лечении // Хирургия. 2003. - №9. - С. 2832.

82. Султанов Г.А., Азимов Э.Х., Ибишов К.Г. Антиоксиданты и их применение в медицинской практике // Вестник хирургии. 2004. - Т.163, №4. - С. 94-96.

83. Теселкин Ю.О. Антиокислительная активность плазмы крови как критерий оценки функционального состояния антиоксидантной системы организма и эффективности применения антиоксидантов: автореф. дис. . докт. биол. наук. М., 2003. - 38 с.

84. Титов В.Н., Лисицын Д.М. Регуляция перекисного окисления in vivo как этапа воспаления. Олеиновая кислота, захватчики активных форм кислорода и антиоксиданты // Клиническая лабораторная диагностика. -2005. №6. - С. 3-12.

85. Трубников Г.А., Журавлёв Ю.И. Антиоксиданты в комплексной терапии больных хроническим бронхитом // Рос. мед. журнал. 1998. -№2. - С. 38-41.

86. Трянкина С.А., Колобова О.И., Варшавский Б.Я. Роль перекисного окисления в патогенезе варикозного расширения вен // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. - №6. - С.19-20.

87. Ушкалова В.Н., Иоанидис Н.В., Кадочникова Г.Д., Деева З.М. Контроль перекисного окисления липидов. Новосибирск: "Медкнига", 1993. - 573 с.

88. Федоров В.Д., Светухин A.M. Лекции по гнойной хирургии. М.: "Миклош", 2005. - 365 с.

89. Федосов С.Р., Павлюченко И.И., Басов А.А. Способ повышения информативности прибора «Хемилюминотестер LT-1» // Современные проблемы науки и образования. 2006. - №4(прил. №1) — С. 27-28.

90. Фенчин К.М. Заживление раны. Киев: "Здоров'я", 1979. - 365 с.

91. Феофилов Г.Л., Воробьёв И.В., Семенюк А,В., Моцартов В.Д., Куликова Л.А. Антиоксиданты в комплексном лечении острого холецистита у больных пожилого и старческого возраста // Вестник хирургии имени И.И. Грекова. 1992. - №1-2. - С.17-20.

92. Чучалин А.Г. Хронические обструктивные болезни легких. СПб.: «Невский Диалект», 1998. - 471 с.

93. Шраер Т.И., Легчило А.Г., Баженов И.П., Ан Р.Н. Способ лечения гнойных ран // Хирургия. 1989. - №VIII. - С. 114.

94. Ambruso D.R., Alfenberger K.M., Johnston R.B. Defective oxidative metabolism in newborn neutrophils: discrepancy between superoxide anion and hydroxyl radical generation // Pediatrics. 1979. - №5. - P. 722-725.

95. BabiorB.M., KipnesR.S., Curnutte I.T. Localization and solubilization of the 02-forming enzyme from human neutrophils // Clin. Research. 1978. -№3. - P. 502.

96. Bae Y.S., Kang S.W., Seo M.S., Baines I.C., Tekle E., Chock P.B., Rhee S.G. Epidermal growth factor (EGF)-induced generation of hydrogen peroxide. Role in EGF receptor-mediated tyrosine phosphorylation // J. Biol. Chem. -1997. T.272, №1. - P. 217-221.

97. Bartosz G. Total antioxidant capacity // Adv. Clin. Chem. 2003. - №37.- P. 219-292.

98. Bast A., Haenen G.R.M.M., Doelman C.J.A. Oxidants and antioxidants: State of the art // Amer. J. Med. 2001. - №91. - P. 25-135.

99. Bauer D.F. Constructing confidence sets using rank statistics // Journal of the American Statistical Association. 1972. - №67. - P. 687-690.

100. Beers R., Sizerl. A Spectrophotometric Method for Measuring the Breakdown of Hydrogen Peroxide by Catalase // J. Biol. Chem. 1952. - №195.- P. 133.

101. Dean R.T., Fu S., Stocker R., Davies M.J. Biochemistry and pathology of radical-mediated protein oxidation // Biochem. J. №324. - P. 1-18.

102. Dissemond J., Goos M., Wagner S.N. The role of oxidative stress in the pathogenesis and therapy of chronic wounds // Hautarzt. 2002. - №53. -P. 718-723.

103. Dotan Y., Lichtenberg D., Pinchuk I. Lipid peroxidation cannot be usedas a universal criterion of oxidative stress // Prog. Lipid. Res. 2004. - №43. -P. 2-28.

104. DrathfD.B., Karnovsky M.L. Superoxide production by phagocytic leukocytes // The Journal of Experimental Medicine. 1975. - №141. - p.257-262.

105. Duthie S.J., Collins A.R., Duthie G.G., Dobson V.L. The effect of dietary flavonoids on DNA damage (strand breaks and oxidised pyrimidines) and growth in human cells // Mutat. Res. 1997. - T.393, №3. - P. 223-231.

106. Duwe A.K., Werkmeister J., Roder J.C., Lauzon R., Payne U. Natural killer cell-mediated lysis involves an hydroxyl radical-dependent step // J. Immunol. 1985. - №134(4). - P .2637-2644.

107. Ehrlich H.P., Hunt Т.К. Effect of cortisone and vitamin A on wound healing // Ann. Surg. 1968. - №167. - P .324-328.

108. Fredrickson M. Oxygen free radicals and wound healing // Clin. Plast. Surg. 1990. - №17. - P. 1473-1483.

109. Gordillo G.M., Sen C.K. Revisiting the essential role of oxygen in wound healing // Am. J. Surg. 2003. - №186. - P. 259-263.

110. Grief R., Akca O., Horn E.P., Kurz A., Sessler D.I. Supplemental perioperative oxygen to reduce the incidence of surgical-wound infection // New England Journal of Medicine. 2000. - №342. - P. 161-167.

111. Gupta A., Singh R.L., Raghubir R. Antioxidant status during cutaneous wound healing in immunocompromised rats // Mol. Cell. Biochem. 2002. -№241. - P. 1-7.

112. Gutteridge J., HallewellB. Free radicalis and antioxidants in the year 2000. A historical look to the future // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2000. - №899. -P. 136-147.

113. Haber F., Weiss J. The catalytic decomposition of hydrogen peroxide by iron salts // Proc. R. Soc. Lond. A. 1934. - №147. - P. 332.

114. Halliwell B. Reactive Species and Antioxidants // Redox Biology Is a

115. Fundamental Theme of Aerobic Life. Plant Physiology. 2006. - №141. -P. 312-322.

116. Halliwell В., Gutteridge J.M.C. Free Radicals in Biology and Medicine. -Oxford: "Clarendon Press", 1999. 482 p.

117. Herbert J.M., Bono F., Savi P. The nitogenic effect of H202 for vascular smooth muscle cells is mediated by an increase of the affinity of basic fibroblast growth factor for its receptor // FEBS Letters. 1996. - №395. - P. 43-47.

118. Hollander M., Wolfe D.A. Nonparametric Statistical Methods. New York: "John Wiley & Sons", 1973. - P. 115-120.

119. Hunt Т.К., Ellison E.C., Sen C.K. Oxygen: at the foundation of wound healing introduction // World Journal of Surgery. - 2004. - №28. - P. 291-293.

120. Jackson M.J. An overview of methods for free radical activity in biology // Proc. Nutr. Soc. 1999. - №58. - P. 1001-1006.

121. Keller U., Kumin A., Braun S., Werner S. Reactive oxygen species and their detoxication in healing skin wound // J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. -2006.-№11.-P. 106-111.

122. Kerekes L., Arkossy P., Altorjay I. Evaluation of hemostatic changes and blood antioxidant capacity in acute and chronic pancreatitis // Hepatogastroenterology. 2001. - T.48, №42. - P. 1746-1749.

123. Kivisaari J., Vihersaari Т., Renvall S., Niinikoski J. Energy metabolism of experimental wounds at various oxygen environments // Annals of Surgery. -1975. №181. - P. 823-828.

124. Le Gall J., Lemeshow S., Saulnier F. A new simplified acute physiology score (SAPS II) based on a European / North American multicenter study // JAMA. 1993. - №270. - P .2957-2963.

125. Leff J. A., Burton L. K., Berger E. M., Anderson В. O., Wilke C. P., Repine J. E. Increased serum catalase activity in rats subjected to thermal skin injury // Inflammation. 1993. - T.2, №17. - P. 199-204.

126. Liu X., Zweier J.L. A real-time electochemical technique formeasurement of cellular hydrogen peroxide generation and consumption: evaluation in human polymorphonuclear leukocytes // Free Radic Biol Med. -2001.-№31.-P. 894-901.

127. Lo Y.Y., Cruz T.F. Involvement of reactive oxygen species in cytokine and growth factor induction of c-fos expression in chondrocytes // J. Biol. Chem. 1995. - T.270, №20. - P. 11727-11730.

128. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. -1951. T.193, №1. -P. 265-275.

129. Marietta M.A. Nitric oxide synthase structure and mechanism // J. Biol. Chem. 1993. -T.268, №17. - P. 12231-12234.

130. Mc Cord J.M. Superoxide radical: controversies, contrasictions, and paradoxes // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1995. - №209. - P. 112-117.

131. Mikhal'chik E.V., Anurov M.V., Titkova S.M., Miroshnikova E.A., Lukasheva E.V., Deeva I.B., Ibragimova G.A., Korkina L.G. Activity of antioxidant enzymes in the skin during surgical wounds // Bull Exp Biol Med. -2006. T.142, №6. - P. 667-669.

132. Mikhal'chik E.V.,Titkova S.M., Anurov M.V., Pen'kov L.I., Korkina L.G. Antioxidant enzymes in skin experimental burn trauma // Biomed Khim. -2006. T.52, №6. - P. 576-86.

133. Nathan C.F., Samuel C.S., Brukner L.H., Cohn Z.A. Extracellular cytolysis by activated macrophages and granulocytes. Hydrogen peroxide as a mediator of cytotoxicity// J. Exp. Md. 1979. - №149. - P. 100-113.

134. Nogueirra N. Comtemporary topics in immunobiology. NY., L.: "Perganon Press", 1984. - 53 p.

135. Pehnan P.F., Chowdhury K., Seifert W. Free radicals induce gene expression of NGF and bFGF in rat astrocyte culture // NeuroReport. 1992. -№3. - P. 469-472.

136. R Development Core Team R: A language and environment forstatistical computing. Vienna, Austria: "R Foundation for Statistical Computing", 2008. - 972 p.

137. Rasik A.M., Shukla A. Antioxidant status in delayed healing type of wounds // Int. J. Exp. Path. 2001. - №81. - P. 257-263.

138. Repine J.E., Johansen K.S., Berger E.M. Hydroxyl radical scavengers produce similar decreases in the chemiluminescence responses and bactericidal activities of neutrophils // Infect Immun. 1984. - T.43, №1. - P. 435-437.

139. Rhee S.G. Redox signaling: hydrogen peroxide as intracellular messenger // Experimental & Molecular Medicine. 1999. - №31. - p.53-59.

140. Roas D., Weening R.S. Defects of the oxidative killing of microorganisms by phagocytic leucocytes // Oxygen free radicals and tissue damage: Ciba Foundation Symp. Amsterdam-Oxford-New York, 1979. -P. 225-262.

141. Rosen H., Klebanoff S.J. Bactericidal activity of a superoxide anion-generating system. A model for the polymorphonuclear leukocyte // J. Exp. Med. 1979. - №149. - P. 27-39.

142. Rotilio G. Biochemical mechanisms of oxiradical protection and the role of the antioxidant enzymes in relation to hypoxic and ischemic tissue damage // The Book: Oxygen free radicals shock. Florence: "S.W.", 1986. - p.691.

143. Roy S., Khanna S., Nallu K., Hunt Т.К., Sen C.K. Dermal wound healing is subject to redox control // Mol. Ther. 2006. - №13. - P. 211-220.

144. Royston P. A remark on Algorithm AS 181: The W test for normality // Applied Statistics. 1995. - №44. - P. 547-551.

145. Schultz G., Mast B.A. Molecular analysis of the environment of healing and chronic wounds: cytokines, proteases and growth factor // Wound. 1998.10(suppl. F). P. 1-9.

146. Sen C.K. The general case for redox control of wound repair // Wound Repair Regen. 2003. - №11. - P. 431-438.

147. Sen C.K., Khanna S., Babior B.M., Hunt Т.К., Ellison E.C., Roy S. Oxidant-induced vascular endothelial growth factor expression in human keratinocytes and cutaneous wound healing // Journal of Biological Chemistry. -2002. №277. - P. 33284-33290.

148. Shetty S., Udupa S., Udupa L. Evaluation of Antioxidant and Wound Healing Effects of Alcoholicand Aqueous Extract of Ocimum sanctum Linn in Rats // eCAM. 2007. - №5. - P. 95-101.

149. Shigeki Af., Okika M. и Makamura M. Biochemical and medical aspects of active oxygen. London-Tokyo: "Univ. Park Press", 1977. - 471 p.

150. Shimizu S., Nomoto M., Naito S. Stimulation of nitric oxide synthase during oxidative endothelial cell injury // Biochem. Pharmacol. 1998. - T.55, №1. - P. 77-83.

151. Sundaresan M., Yu Z.X., Ferrans V.J., Irani K., Finkel T. Requirement for generation of H202 for platelet-derived growth factor signal transduction // Science. 1995. - T.5234, №270. - P. 296-299.

152. Van Amersfoort E.S., Van Berkel T.J., KuiperJ. Receptors, mediators, and mechanisms involved in bacterial sepsis and septic shock // Clin. Microbiol. Rev. 2003. - T.16, №3. - P. 379-414.

153. Wakeyama H., Takechige A., Takayanagi R. Superoxide forming NADPH-oxidase preparation of pig polymorphonuclear leucocytes // Biochem. J. 1982. - №3. - P. 593-601.

154. Weening R., Wever D., Roos D. Quantitative aspects of the production ofsuperoxide radicals by phagocytizing human granulocytes // J. Lab. Clin. Med. -1975. №2. - P. 245-252.

155. Yost T.I., Fridovich I. Superoxide radicals and phagocytosis // Arch. Biochem. And Biophys. 1974. - №161. - P. 395-401.

156. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

157. Басов A.A., Павлюченко И.И., Плаксин A.M., Федосов C.P. Использование аналогово-цифрового преобразователя в составе системы сбора и обработки информации с хемилюминотестера LT-1 // Вестник новых медицинских технологий. 2003. - Т. 10, №4. - С. 67-68.

158. Басов А.А., Павлюченко И.И., Федосов С.Р. Некоторые аспекты разработки программного обеспечения для экспериментальной биохимической лаборатории // Вестник новых медицинских технологий. — 2002.-Т. 9, №2.-С. 87.

159. Быков М.И., Павлюченко И.И., Басов А.А., Федосов С.Р., Луговая И.А., Моргоев А.Э. Параметры системы про-/антиоксиданты крови и гнойных ран у больных сахарным диабетом // Аллергология и иммунология. 2006. - Т. 1, № 7. - С. 117.

160. Луговая И.А., Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Басов А.А., Быков М.И. Активность ферментов антирадикальной защиты в эритроцитах и в раневом отделяемом у больных с осложненным течением сахарного диабета // Открытое образование. 2006. - № 3. - С. 425-427.

161. Список патентов на изоС5^ етения и полезные модели

162. Пат. 2236008 Российская -» едерация, МПК А61К 33/00. Способ1бораторной диагностики окислите. ггельного стресса организма человека /

163. И. Павлюченко, А.А. Басов, С.Р. Федосов; заявители иатентообладатель Павлюченко ЕС Ц.И., Басов А.А., Федосов С.Р. №006101586/22; заявл. 19.01.2006; с-т- епубл. 27.07.2006 // Бюл. 2006. - №21.2 с.

164. Свидетельство об официаль>^-з:ой регистрации программы для ЭВМ006611562. Программа для регЕ ^^страции сигналов хемилюминотестера1.-1 / И.И. Павлюченко, С.Р- Федосов, А.А. Басов; заявитель иравообладатель Павлюченко t^., Федосов С.Р., Басов А.А. №

165. Ю066Ю783; заявл. 16.03.2006; зарег- х-. 10.05.2006.1ат 2301626 Российская ФеАе==»рация, МПК А61В 10/00. Способ определения площади дефекта кожи и контроля ее изменений /

166. Ю П Савченко, С.Р. Федосов, A.M. Плаксин; заявитель ипатентообладатель Савченко Ю.1 -~Е., Федосов С.Р., Плаксин A.M. №2005135783/14; заявл. 17.11.2005; с упубл. 27.06.2007 // Бюл. 2007. - №18.-4 с.

167. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ДАЛЬНЕЙШЕМУ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

168. В клинической работе целесообразно использовать следующие показатели прооксидантно-антиоксидантного баланса: максимум и площадь быстрой вспышки хемилюминесценции, амперометрическую антиокислительную активность.

169. При лечении гнойных ран в начале первой фазы раневого процесса показано использование мазей, которые не обладают прямыми антиоксидантными свойствами, а в конце первой и на продолжении всей второй фазы — обладающих такими свойствами.

170. РОССИЙСКАЯ а>Ы1Г РАЦИЯ Kf'Ai:.'(ОЛАГ'СКИИ М'АП

171. ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗД РА ВООХРАН ЕН ИЯ "КРАЕВАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА №1 ИМЕНИ ПРОФЕССОРА С.В.ОЧАПОВСКОГО* ^ДЕПАРТАМЕНТА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ КРАСНОДАРСКО! О КРАЯ ИНН 231104008В 3500В6, г Краснодар, ул. 1-го Мая, 167 Св. № СУма N«от ., . .,утверждать

172. Заведующий отделением гнойной хирургии K.M.H.

173. Врач-хирург отделения гнойной хирургии K.M.H.1. Автор предложения1. ВТ. Славянский1. С.Н. Пятаков1. С.Р. Федосов1. МВД РОССИИ1. ГОСПИТАЛЬ

174. Ф&вшшю lotyjtspcrseHHoro гфвшеюю уфэвтрзнент

175. Маоко-сзнивд«« часгь гРёшь даадкк» «кутемда до крзатзрсахо крл1. ИНН 2311039660о*—;1. HJ t i'iгаук1. П. Савченко3003.20091. АКТоб использовании предложения

176. НАЗВАНИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ: способ измерения площади раны и контроля ее изменений (патент на изобретение №2301625 27.06.2007).

177. АВТОР ПРЕДЛОЖЕНИЯ: врач-хирург отделения гнойной хирургии Краевой клинической больницы №1 имени проф. С.В.Очаповского Федосов Сергей Ростиславович.

178. ПРЕДЛОЖЕНИЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ в отделении хирургии Госпиталя МСЧ ГУВД по Краснодарскому краю с 27.06.2007 г.

179. Врач-хирург отделения хирургии1. Автор предложенияроссииская фь^'идциякраснодарский край государственное учреждение здравоохранения

180. НАЗВАНИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ: способ получения биологического материала из гнойной раны для анализа состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса.

181. АВТОР ПРЕДЛОЖЕНИЯ: врач-хирург отделения гнойной хирургии Краевой клинической больницы Nal имени проф. С.В.Очаповского Федосов Сергей Ростиславович.

182. ПРЕДЛОЖЕНИЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ в отделении гнойной хирургии Краевой клинической больницы №>1 имени проф. С.В.Очаповского с 03.02.2002 г.

183. Заведующий отделением гнойной хирургии K.M.H.

184. Врач-хирург отделения гнойной хирургии K.M.H.1. Автор предложения1. В.Г. Славинский1. С.Н. Пятаков1. С.Р. Федосовмед РОССИИ1. ГОСПИТАЛЬ

185. АВТОР ПРЕДЛОЖЕНИЯ: врач-хирург Краевой клинической больницы №1 Федосов Сергей Ростиславович.отделения гнойной хирургии имени проф. С.В.Очаповского

186. ИСПОЛЬЗУЕТСЯ в отделении хирургии Госпиталя МСЧ ГУВД по Краснодарскому краю с 14.03.2006 г. оспиталя

187. ЭФФЕКТНОСТЬ ПРЕДЛОЖЕНИЯ. Использование данного способа получения биологического материала из гнойной раны Z ZZt состояния прооксидантно-антиоксидантного баланса в неГпо^^ сорить время вьтолнения этой манипуляции при достаточнойTonTZ

188. Заведующий отделением хирургии

189. Врач-хирург отделения хирургии1. Автор предложения

190. НАЗВАНИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ: способ лабораторной диагностики окислительного стресса (патент на изобретение №2236008 28.07.2003).

191. АВТОР ПРЕДЛОЖЕНИЯ: врач-хирург отделения гнойной хирургии Краевой клинической больницы №1 имени проф. С.В.Очаповского Федосов Сергеи Ростиславович.

192. ПРЕДЛОЖЕНИЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ в отделении гнойной хирургии Краевой клинической больницы №1 имени проф. С.В.Очаповского с 15.01.2002 г.

193. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕДЛОЖЕНИЯ. Использование данного способа лабораторной диагностики окислительного стресса позволило достоверно верифицировать состояние антиоксидантной системы у больных с гнойными ранами и проводить адекватную коррекцию лечения.

194. Заведующий отделением гнойной хирургии K.M.H.

195. Врач-хирург отделения гнойной хирургии K.M.H.1. Автор предложения1. В.Г. Славинский1. С.Н. Пятаков1. С.Р. Федосов1. МВД РОССИИиЭ №.1. УТВЕРЖДАЮ1. АКТоб использовании предложения

196. НАЗВАНИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ: способ лабораторной диагностики окислительного стресса (патент на изобретение №2236008 28.07.2003).

197. АВТОР ПРЕДЛОЖЕНИЯ: врач-хирург отделения гнойной хирургии Краевой клинической больницы №1 имени проф. С.В.Очаповского Федосов Сергей Ростиславович.

198. ПРЕДЛОЖЕНИЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ в отделении хирургии Госпиталя МСЧ ГУВД по Краснодарскому краю с 28.07.2003 г.

199. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕДЛОЖЕНИЯ. Использование данного способа лабораторной диагностики окислительного стресса позволило достоверно верифицировать состояние антиоксидантной системы у больных с гнойными ранами и проводить адекватную коррекцию лечения.

200. Заведующий отделение\ Д.В. Шаблин1. Автор предложения

201. Врач-хирург отделения хирургиихирургии1. Л.В.Мякотных1. С.Р. Федосов

Информация о работе

Федосов, Сергей Ростиславович
кандидата медицинских наук
Краснодар, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса в процессе развития гнойной раны и возможности коррекции его нарушений (экспериментально-клиническое исследование) - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы