Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Состояние обмена сиалосодержащих соединений в тканях желудка и тонкой кишки при иммобилизации и голодании
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия
Автореферат диссертации по теме "Состояние обмена сиалосодержащих соединений в тканях желудка и тонкой кишки при иммобилизации и голодании"
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И МЕДИЦИНСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
БАШКИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ
На правах рукописи ВОЛЬХИНА Ирина Витальевна
УДК 611.3:541.64:612.812.33
СОСТОЯНИЕ ОБМЕНА СИАЛОСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ В ТКАНЯХ ЖЕЛУДКА И ТОНКОЙ КИШКИ ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИИ И ГОЛОДАНИИ
(03.00.04 — Биохимия)
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученом сгеиснн кандидата биологических наук
¡~~~17г?~~Г.....• ' ,
I ".. '"'." ' _- ' . ' . , '
Уфа 1995 " ------
Работа выполнена в Ижевском государственном медицинском институте.
Научный руководитель — доктор медицинских наук, профессор П. Н. Шараев.
•Официальные оппоненты: академик РАЕН, доктор медицинских наук, профессор Ю. С. Татарииов; академик АНРБ, доктор биологических наук, профессор В. А. Вахитов.
Ведущая организация — Институт питания РАМН.
Защита диссертации состоится «_» _ 1995 г.
в _ часов на заседании диссертационного совета К 084.35.02
при Башкирском государственном медицинском институте по адресу: 450000, ул. Ленина, 3. I
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Башкирского государственного медицинского института (г. Уфа, ул. Ленина, 3).
Автореферат разослан «_» _______ 1995 г.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук,
профессор Э. Г. Давлетов
•я:им ХйРмпкгИ'Лшш
й к т у и л t. н и с г ь а ¡1 и о л е м ы, Ь последние 11>дц !10ЯВ.<ЫйПЯ t;Cd ОиЛЬЫе ПУОЛИКЛЦИЙ, НОСВЯЧеШШХ ЩтбЛвЛЧ CTpfcCCa. Иреаде ucefü ¿то связано с резки* гигзраскишс* числа и ишен^иь-UuUtl **4l>ipUft, KöVOtiUÜ LtlucOOCTftyffil Г1ерс(ЫНрЛ*еНИЮ нервмо-иси-хиче<.«ий сфлри человека. Многократный сильный стресс все чаще стал iweifc отпадение к возникновение болезней, в том числе и органов ¡ищеварекиа 1 К.tt.Судаков, ta7ii; ft.Ö.Калинки н др., 1385; > М.Юрикигопайтис. t'Jöß;'Ф.Э;Мекрсин,. I9bö, 1393; 3.Scott, 1991; CiT-kiclidfiisot)'),. 1085), В механизме развития "стрессогенних' язв вл«ное значение отводится сдвигам в центральной и гуморальной ре гуляции, Ш1)1уиепцв ирувоиорйЦвний стенки аелудка ¡-E.fi.hucbKo, Ш2; 'Ф.Й.Омрдпй. t'Jti7;'Й.н.Яриесыргая, i'JS4). К соааленив при И j'J'li.'l.'Hli «riAilttil эНий р.иьИТИЯ НиВреКДеНИИ слизнетий иООЛоЧКИ ГаСТрОДУиДенаИЫЫЙ СПС Геяй При С.ТрессогВШШХ Во ТДе.ю ГЫ1ЯХ Не-дос »лично i>n»sw jitHvi иори'дакт^й na гметоянне слизистого tiapiiipd.
CunUulO CuBpeueilHU« Представлении*. ИехаййзЬ X'ifcotifipa.iilB.1 .чиу в у у л ч и, tu* и двенадцатииерс niut't киакь сводится rt нарушении сии Ibe n. 1 lull) bt. зду факторJUH af рйССИН НИЦВВарИГбЛЫШХ СОКОВ и мачитннми huJHuüitiucTMMii слитие гик оьоличек гастридуоденалвниИ сиси-ми i b.И.Есенин и др., 1'375; iM.i альнерии, П. И. Лазарев, )Уоо; b,Х.Василенко и Др.. 1U&?; В,Г.Мыи\ 1987).
К ÄäsiüJM биохимическим компонентам защитного Очрьера аелу дочио-инкечшн о fp.-'iita юлили, эшпелиа, сосдинительнотканних элс-иьшиь хелудка и кшзечиика) относятся различные соединения, . содержание сиаловйе кислоты t С К J: ейалопшкопротеини, нритеигли-каны й ган'слийзиди. CK, являясь, концевыми ионосахараии, солДаен
MotfHtfC 0 1 р'йЦаТС-ЛыШе аарИДЦ ВОКРУГ сЛиаШНХ ОВЛНиН . CBÜjUbd«) i О о п с -
а о«.- киличеови кидц, помигают формировании, геяь-фильтрув«пх стп;,/. тур н препятствует протвйЛН'гйческому разрушений глнкоирогеииов слил'.. Все зГо ciiocoocifiijBT зацнте слизистой оболочки нелудочно-кии.;чниГ1> ip..Kiä от действия соляной кислоты и других повреждающих фиктиров (Н.к.Богер; 1У86; Ö.X.Баснленко, 1S87? В.И.Белое-. тонкий, Н.1..аиирй'Б„ Ш4>.
Показатели oßHi'iid CK я сиалоспдериачкх гликопритенноа в слизистой опойочне гас 1 радуоденадьной система при её дотрут ¿Bt:u> повромдешшх а эксперименте и клшгике ела о о изучена. Следует ука~
алгь, что азвешше пирамения иелудично-кивечнигч трата наблюдается такме при длит ельник голодании, которое относят к числу i ильных стрессогенных факторов í Й.С.Горожанин, В.Б.Лобкоь, lílütf; H.Rúbíji'L и.a., 1963). В связи e зги«. иеследуемио показатели он- , ридольшаь при многократных иммобилизациях и проДолиительной лишении ними. ..'':.'.'""
i! ОДШИрОВШШИ СЛИЗИСТЫХ Образований ¡»ёлудКа II КИаоЧНИКа 1)11'
ределениув дилв вносит нуклеиновые кис.лиги, и сиалосодеркащие глй-килшшдм. сравнительное изучение их содерианм при стресс-реакци-ах представляет немалый интерес для лучыего понимания;оиохиыичес» ких механизмов йзвоооразоваиия. ■
Цель и э а д а ч и и с с ле до в а н и ы. Целью ра-оотц ивляетеа изучение иомена сиалосодермаинх соединений в сличи и стенке мелудка и проксимального отдела тонкий кишки ъ динамике НПО! ÜKpuíHUX ВОЗДеЙСТЁИЙ СТреССОГеШШМИ фактора»« (иммобилизаций и полное голодание). Исходя из этого в исследовании стаьдтся сле-диачии задачи: •
t. Изучить показатели оомена сиалосодеркацих соединений в олизи и стенки мелудка и тонкого киие'чнпка, а. такте б плазме крови крис г. динамике многократного нммооили'зиционно1 о строем;
¿..Виявить особенности изменений в содержании сиалолинидов ианглиозидов> и нуклеиновых кисяот и тканих аелудка и тонкого кишечника' íiри многократной иммобилизации и продолжительном полном ГОЛОДаНИИ. ... ,■■.." .
i. Установить особенности в изменении показателей "обмана' сиадосодер&абгих соединений у крыс с повреждениями и без-гтвреа-дений слизистой "полочки иелудка при воздействиях стрессогешш- ■. ии факторами. '
4. Параллельно с показателями обмена с.алосодераащих соединений предсталить динамику изменений содержания 11-окситрти-костероидов в крови и соотношения масс надпочечников h массе ми~. аопшх при многократной кммобнлизации.и длительном полной голоДании.
j. Разработать и внедрить в практическое здравоохранение методы количественного определении свооодних н связанних форм сиалових кислот, а также сиалидазиой активности в биологических объектах..._,'.■
II а у ч н а я н о в и з н а.- Впервые получена сраьнитедь-
■■-...■■■'"''' ' -' _ з V
ные даппно о состоянии обмена анласпдпряааих соедшсенкй ь плзл-не крови, слиэи к стенке яелудка и тонкого киьйчника при ратных иимп^илиззниях и проДолштеяьиок полним голодании.
Вмявлеиа принципиальная разница в направленности изм»кений ••'.бвло'к- и липйдсвязанних сиэлобнх кислот-и«яч тм»к*и ^эдй и проксиммьногп отдрта тонкой ними в янтннир дтэтшх эк«,-трепанных воздействий, О^наруяена зависимость кчшдч этики различиям и появление« деструктивных повревдсний слизистой оЯмл^чки велудка в результата стресс-реакиии.
Показана двукфазиость изменений в обмене мшосодеряачих соединений во всех изучаемых тканях в динамике многократных иммобилизаций, что соответствует изменение уровня И-оксикортико-' СТРрОИДОЭ в плазме крови.
Г ¡1 а у ч н о - п р а г; т и ч в с к в я и е н и о г т >> работы. Розулызтн исследомния расеиряят имеоииесэ прс-п-стлвлечия и иатохимии стрвг.совмх язв гастоодчояензльчой систрич. " ж позволяют гг^Ояк изучить при мнлгчкратных стрессог^нных го'-действиях прииинно-следст.нные связи маруавний обмена сиалчм дермляих соединений, кпторуе "Оеспечмсмпт заяятны» свойства </и эистпй «ролечкн «елуяачно-кисеччого тракта.
В ход« иесяевонзмкд ряд нетодпв анализа поч-=»э.»твтй обуеиз оиалосодершачих юединрьий модифицирован в целях гншымии ерсме ни на исследование и дорсгостоявих реактивов. Они внедрены в ла-. лерзтчрнуо практику больнии е вид« методических рекомендаций Н.Ч России.
Основные пола « е и и я. ■. в ы н осиные
» '} э <* к и т у: " .'"■-/'"-• .
1; При юггокротнои с грессеЛ иммобилизации. полной голодании» нм^ет место нарушение обмена сиаллсодергагих соединений в п тканях хелудка и тонкой кияки.
¿< Снкяенс.е содер«аш<а белок- и «йпкпевчяанкях сизл;'.вчх кис-' лит щ и стрессе откпс.нст к одншу видуаих факторов развятич п>изисн»- лзвениих ппвреядений слизистой оболочки келудка, ,
3. 8.н«?хзнязие нарушения обмена сяалосодер*зиих соединений при стрессе вамное значение имеет.'устойчиво вираяенная гиперфункция надпочечников. -
й п (10 6 л ц и я р а б о т и , Результат исследований . дило'хены на 1-й конфессииии "Внутреньзй среда и здоровье населе-
нил" ^Ижевск, 19911, 1-й Кавказсной конференции ни проблеме ге~ ронтш'югви и гериатрии" с Тбилиси, 1992), 5?-й молодежной научной , конференций БГИИ '.'Вопросы теоретической и практической медицины" (Уфа. (99^), ^гогивай научной конференции Ижевского государственного медицинского института »Ижевск, 1993), научно-практической ийн^ср.енции молодых ученых, посвяценной 60-яети» ИГЙИ IИжевск, 19'.)3>, научно-технический конференции Шевск. -1994), -заседании . : кзфедры.оийхимии, межкафедралмюго заседания Ижевского медицинского института и отделения физиологического общества и», ИЛ!. Павлова (Ижевск,-1994). » "• ..'. ';. ■ -
' 0 у б д и к а ц « и р е з у л; ь т а I о вис с л 6 д о -.: м ни, По теме диссертации ооуоликоваио 12 работ иурнадыше статьи - 3, тезисц - 7, методические рекомендации - 2).
Структура и объем диссертации.
Диссертаций состоит из введения, обзора литература, 5.глав еьб-пбьшшх исследований, обсуждения, выводов и списка литератур»!, Материал изложен на ИЗ страницах мавинописного текста, включает 30 гиолиц и 2? рисунков. Список литературы содержит .301 название ()?5 и|8чоственлых и 126 зарубежник авторов). . . " : /
шерна/шМ методы исследования
Эксперименты проводились на 827. взрослых белых крысах-самцах линии Ристар массой 160-200 г. в осенне-зимнее,время. "'•.
Подопытные ливотные подвергались воздействию различных го • ■ , направленности действия стрессоров: иммобилизации и'голоданий,
Нммобилизаци шый стресс у лрцс рызывался путем ежедневной . 3-х часовой Фиксации на спиче в течение 5 дней (Р.А.Тигранян, , 1935; И.Й.Крикатоиайтис, 19ЬС; У.Р.Сеогйе, Р.Р.НИЦаш. 1382). Стресс-реакция при прноци длительного полного /олоцаиия (то есть со'свободным доступом к воде! I продолжалась до 8 дней. Контролем • для всех отцов сдари кррсы, находящиеся в обычных условиях , вивария до е дни проведения экспериментов, . . V ■л;; {СрнтролЬьыкги (шдрнытнах аивотны* забивали.в различные срони ошпш» на Фоне кратковременного эфирного, наркоза. 9 циёотных ^ралн елизйстые наложения < Гальперин и. др,, 1982 )„. стенку *е- , • луд^а и црокс^льногр отдела тонкого киаечника ¿суммарно все слои, кроче -слизистых; образований), 'цитратнув плазму кроци..Р4з-
') -
витие состояния сильного стресса определялось по наличию трех Факторбв: эрозий и язв в слизистой «елудка, а такие по увеличению массы надпочечников и росту содермання 11-оксикортикосте-роидов Ш-ОКС) в плазме крпви не менее, чем на 20% но отношение к контроле. '
Изменение обмена сиалосодериачих соединений изучали по следующим показателям:
Г. Для определения свободной, олиго- 4 белоксвязанных форм СК (соотв-тственно ССК, ОСИ и БСК) в биоматериалах используются различные способы их выделения. Нами совместна с соавторами сП.Н. Вараев и соавт,У1993) разработан новый мктод для одновременного выделения указанных форм СК из одной пробы плазмы крови или гомг,-генатов тканей.!. При. этом количество СК находили тиобароитуроьыы методом (А.Й.Титаев и соавт., 1964; И.В.Цветкова, ft.6.Козина. 1968 ).
2. Определение сиадидаэной активности (СО) в сыворотке крови проводили на основе метода И,В.Цветковой. А,Б,Козиной (1968) в модификации П.Н.вараева с соавт.(1993).
3. Выделение линидсвязанных СК (ЛСК) в плазме крови выполняли по методу N.Katopodis е.a. tl982 ), Определение количества сиа-ловых кислот в пробах проводили тиобарбитуроиым методом (Й.Й.Ти-таев и др., 1964; И.В.Цветкова4 й.Б.Козина, 1968).
4. Выделение и определение количества суммарных нуклеиновых чйсяот (ПК) проводили по методу ft.С.Спирина (195В) и 3.Davidson
( 1976).
5; Серойукоидц leij- кислые гликопротейны) выделяли из плазмы Крови и тканей «елудочно-кийечного тракта по методу P.fi.Char 1 uood е,а. (19?6) И в.них определяли белки (O.H.Luury е.а., 1951» и СК (fi.fi.Тигаев и соавт, 19t>4; И.В.Цветкова. Я.Б.Козина, 1968).
Весь цифровой материал обработан статистически, достоверность изменений определялась по критерии (t) Спюдента,
" ■ - - в - У'-; ..■ - ,
чРЕЗЗМЙТи ДООДВМф.
При многократной иммобилизации у«е после 1-го стрессогенно-гц воздействия наОлвдадос^ увеличение (Р <0.001) среднего ¿одер-'. канияССК. ОСИ иа слизи'«елддк,»'&Н до Э,6»0,6 ; мг/укг сухой тн^.соф^т^т^н^о.ч-^д;Ц); Урюрнъ Б£Н м ЙСК ; достоверно не менялся. В стенке желудка ^прои£.*одйлИ аналогичные . изменения содержания ССК, ДСК й 6.СК,* Кдн«ентрация ЛСК в стейкё иелуцка уменьшалась со 120*9 иг/кг сцхййтнанина 23Х ( Р <0,01).
Увеличение цроеня всех показателей в сдиэи. .ки»е>ишка. такие начиналось;срази* и«Ав1'|»Го днй; ююобйА^заЦии (т^бл. V). Содёрт мание ССк повысилось на 302 (Р <0.03). Концентрация 6СК - на 22% .'.'; <Р <0,0.01).' лдостоаерно >«е'У^Ц^фйт кон*ррм»ного. :
Концентрация ЛСК уменьвилась на 282 (Р <0,001). В стенке проксимального отдела тонкого кивечника содервание ССК оставалось в Ч-следовых количес'ть.ах,;вровень ССК й ЬСН увеличился с 38.4»! ,4 и 508*15 иг/кг сухой ткани на 13 и 21К с%т»б1ст&еннф.;Концентра-/ ция ЛСК иненьвилась. со; 145±1Д иг/кг Сцхой ткани; на. <0,05)У;
.8..я<цэме. «дейва;»^.*«^ '
казателей. - .-"•'•'. •.-■■-. "г.--''---л'. ' ■''"'"■:''■•,'■ - .•" ■
3 -й декь воздействий сопрово*Дался увеличение С£К,. 0СК и Сйв слизи «елудка на 30. 23Х и до 16.1^1,4 иг/ч/кг сухой ткани соответственно; на 2?Х 1Р <0,01).
Уровень ЛСК' достоверно не менялся. В стенке «елудка в зтат день эксперимента щже наблюдалось^^ авелйченйё-.содерканкй ССК и 0СК ■ на 3? й 34х. Одновременно йреисхЭДйдр^^.уме^вейи^. концёнтйаадй БОЙ и. ЛСК на 41 и. .442 йо*еетстве|Шэ Л Р1 ¿0-.'и.:' СК серомукоидов сакиалось :н> .ЙЗ' и 3?Х. С.оотйрвение %лак/СК ^ ■ очищенних препа{а"1дхпадив»«р'с*41иа; 23%'.$ -¿0, №1 'К; :
После 3-й иммобилизации $ слизи и стенке тонкого киаечуика отцечались увеличения содержания 'ССК/- йСК.уБСК И СЯ, в, то время; как концентрации ЛСК достоверно не отличались; от контрольной'■: , Соотношение белок/СН в серомукойдзх побйс.икось. на Ш (Р <0,05). В плазме крови направленность изменений уровня ССК, ОСК, ' БСК и Сй была аналогична Йзменеш1ян их:В тканях тонкого: кишечни- ' на. Концентрация ЙСК увеличивалась на 2Ш< (Р <0,001),
Ь последующие дни многократного иымЬ&илиэациоаног о стресса наблюдалось уменьнение содервания ССК. ОСК и СА, имедцее теиден-
Таблица 1
Изменения содержания показателей сиалосодераащих соединений (мг/кг сухой ткани или мг/ч/кг сухой ткани) в слизи аелудкл и тонкой киики при иммобилизации (й+а)
Чсловия одытов ССК . ОСК БСК (1СК СА
слизистые налояения аелудка
Контроль '22,64 2?4± 30531 1061 следы
0.9 10 111 19
Иммобилизация
1 дн. 28,3± 3481 2769± 1401 8,6±
0,? 7 ' 119 .3 0;8
Р <0,001 <0,001 >0,05 >0.05 <0,001
3 дн. 29,3± 346± 2241* 142± . 18,3л
2,3 И 115 9 1,4
Р <0,001 <0,001 <0.01 >0,05 <0,001
5 дн. 26.31 30?! 32171 349* 5.71
0.8 9 240 37 0.3
Р <0.01 <0,05 >0,05 <0,001 <0,01
8 дн. 21,8* 2821 3351* 1401 2,6±
0,7 20 160 8 0,3
Р >0,05 >0,05 >0.05 >0,05 <0,05
слизистые наложения тонкой кивки
Контроль 38,91 3461 3963* 147± 7,31
1.8. 13 131 10 1.6
Иммобилизация
1 ДН. 50,51 3741 40211 106± 23,61
5,2 20 148 4 . 2.2
Р <0,05 >0.05 <0,001 <0.001 <0.001
3 дн; 63.51 4901 53741 16?* 30.51
4.3 24 157 22 1.2
Р <0,001 <0,001 <0,001 >0,05 <0.00!
5 дн. 48,31 , 4524 51121 238± 36,6*
4.7 24 142 62 5,1
Р >0.05 <0.01 <0,001 <0,01 <0,001
3 дн. 44,21 3941 3876* 1641 25.31
3,0 20 139 14 3.7
Р >0,05 <0,05 >0,05 >0,05 <0,01
- 8 - . цив к нормализации этих показателей во всех исследуемых тканях.
После 5-й иммобилизации в слизи желудка концентрации ССК и ОСК были выве исходных на 16 и 12У. (Р <0,01 и Р <0,05 соответственно). Сй равнялась 5.740,3 кг/ч/кг сухой ткани,, Уровень БСК достоверно не отличался от контрольного. Содерпание ЛСК на 1092 превышало уровень у интактных крыс, В стенке желудка направленность изменений имела аналогичный характер.
На 5-й день опытов в слизи кивечника средние содержания ССК, ОСК, БСК и ЛСК были на 24. 31, 29 и 62% соответственно вы»е контрольных. Сй равнялась 35,6*5,1 мг/ч/кг сухой ткани. 8 стенке тонкого кивечника изменения дровней этих показателей имели такую же направленность,
К концу эксперимента (8-й день стресса) в слизи желудка содержания ССК, ОСК, БСК и ЛСК достоверно не отличались от контрольных. СЙ равнялась 2,6*0,3 мг/ч/кг сухой ткани (Р <0.05). В стенке желудка концентрации ССК. ОСК и ЛСК были вы»е, чем у интактных крыс, на 16. 18 и 14Х соответственно, Уровень БСК достоверно не отличался от контрольного.
В слизи тонкой киики после 8-го дня иммобилизации содержания ССК, БСК и ЛСК не отличались достоверно от исходных. Концентрация ОСК на 14% превышала норму (Р <0,05). Сй равнялась 25,343,7 мг/ч/кг сухой ткани. В стенке тонкого кижечника уровень ЛСК не отличался от контрольного. Содержания ССК, ОСК и БСК на 21, 38 и 16% соответственно превыиэли эти концентрации у интактных крыс,
В плазме крови уровни ССК, ОСК, БСК н ЛСК были выве контрольных на 38. 52, 32 и 61% соответственно. Сй равнялась 0.93*0,09 иг/ч/Л (Р <0,001).
Согласно исследованиям многих авторов (П.Д.Горизонтов, Т.Н. Протасова. 1968; Ю.Л.Пвров, В.В.Евдокимов. 1976: й.С.Заводская, Е.В.Корева, 1981) у крыс при стрессогенных воздействиях практически не удается получить эрозмвно-язвенные повреждения в слизистой тонкой киики. Нааи опыты показали, что после I. 3. 5 и 8-го дней иммобилизации деструктивные образования появлялись у 25, 79, 50 и 14% крыс соответственно только в слизистой оболочке желудка.
Для определение выраженности стрессовой реакции у крыс было исследовано содержание 11-ОКС в плазме-крови. 9 контрольных животных оно равнялось 411*10 мкг/л. После 1-й иммобилизации концентрация 11-0КС увеличилась на 38% (Р <0,001). Максимальное по-
вывение среднего значения этого показателя (на 105Х выий контрольного уровня) наблюдалось после 3-го дня стресса. В последующие дни эксперимента имела место тенденция к нормализации уровня Н-ОКС, хотя их содержание 'на 5 и 8-й дни иммобилизации была вы-ве исходного на 53 и 22'/. соответственно. При этом у подопытных »каотных с деструктивными повреждениями слизистой желудка в динамике стрессогенных воздействий на протяжении всего эксперимента уровень 11-ОКС в плазме крови был выше, чем у крнс без повреждений. Достоверное увеличение соотнояения массы надпочечников к массе крысы на ЪТ/. наблюдалось после 3-го иммобилизационного воздействия (Р <0.05).
Как известно, сильный стрессор вызывает резкое увеличение содержания катехоламинов и кортикостергидов в (фови, Под действием последних активируются лизосомальние Ферменты и катабпли-ческие реакции в обмене биополимеров, в том числе соединительной ткани С Л. Е.Панин и др., 117?; И.н.Горпвинская и др., 198?; А. I .Ой'.ампеп е.а., ПВ6). Этим обстоятельством можно объяснить поБыаение СЛ и содеряания продуктов распада сиалогликопротеинов и гэнглиозидов в виде ССК и ОГК (табл. !> как в исследуемых тканям желудочно-кивечного тракта, так и в плазме крон» при многократных иммобилизациях. При анализе этих данных видно, что рост катаболических проявлений на 3-й день иммобилизации сопровождается появлением эрозий и язз в слизистой желудка у 737. подопытных животных. В последующие дни эксперимента происходило уменьшение средних значений бользинствй из этих показателей параллельно с сокращением числа крнс. имеющих деструктивные повреждения в желудке.
Деление подопытных крыс на животных, имеющих деструктивные повреждения слизистой оболочки желудка (1-я группа) и без повреждений (2-я группа) выявило различия в изменении изучаемых показателей между ними. Содержание ССК. ОСИ и СО, характеризующих распад сиалосоДержащих соединений, у крыс 1-й группы в тканях желудка было значительно больае, чем концентрация этих показателей у животных 2-й группы в динамике многократной иммобилизации, В тканях проксимального отдела тонкой кийки и плазме крови концентрации всех исследуемых показателей в динамике киогпкратной иммобилизации У животных с эрозиями и язвами в желудке были выае, чем у крыс без повреждений.
Известно, что сиалогликопротеины (БСК), в той числе серому-коиды, являются основными компонентами слизистых образований пищеварительной системы. При отщеплении CK от сиалогликопротеинов снимется вязкость слизи и уменыаается устойчивость гликопротеи-нов к действию протеолитических ферментов. В желудке, в отличие от тонкого кииечника, в первые дни многократного стресса наблюдается снижение концентрации БСК. Причем у крыс с повреждениями (1-я группа) уровень БСК на протяжении всего эксперимента оставался ниже, чем у животных без повреждений в слизистой оболочке аелудка (рис. 1),
Снижение содераання БСК в тканях велудка при стрессе можно связать с гиперфункцией надпочечников и ростом 11-QKC в плазме крови, так как глшкокортикоиды являются, с одной стороны, алло-стеричеекими ингибиторами глюкозаминсинтетазы и угнетают биосинтез предиественников CK - глюкозаминои (П.Н.Нараев и др., 1988: В.Г.Иванов, 1390), С другой стороны, в литературе имеются данные, которые свидетельствуют о снижении кортикостероидами активности сиалилтрансферазы, присоединявшей CK к различным соединениям (Н. Chu shu-heh, H.A.Halker, 198Ö; J.Kolinska е.а., 1988).
ЛСИ (ганглиозиды) входят в состав всех клеточных мембран и, вместе с другими компонентами слученного эпителия, имеются s составе слизистых образований желудочно-киаечного тракта. Интенсивность биосинтеза белков и характерная для данного типа клеток скорость деления зависит от содержания РНК в клетке. С.ß.Пришва (1985) наблюдал, что уровень ДНК в слизистой оболочке аелудка и 12-лерстной кишки у больных язвенной болезнью гастродуоденальной системы не отличался от здоровых, в то время как концентрация РНК уменьшалась в стадию обострения и повышалась в период ремиссии, но не достигала нормы.
По наиим данным, наибольшие снижения ilÇK и НК в желудке наблюдались после 3-й иммобилизации, тогда как в тканях тонкой кишки уже шел процесс восстановления этих показателей после уменьшения в 1-й день стресса. Такие изменения свидетельствуют о торможении деления клеток эпителия желудочно-кишечного тракта и более быстром восстановлении физиологической регенерации в слизистой оболочке кишечника крыс, которая защищает последнюю от процессов язво-образования. При этом у крыс 1-й группы te эрозиями в желудке) содержание ЛС К после 3-й иммобилизации в стенке келудка било дос-
"Т-1------—---(■'■■" 1 ■
1 3 5 8 дни
Рис. 1. Динамика изменений содержания БСК в слизи (А) и стенке (Б) желудк.. (---) и кишечника (- -) крыс при иммобилизации (разница в % по отношению к контролю).
товерно нияе, чем у «ивотных без повреидений в слизистой яелудка.
Ф.З.Меерсон и др. (1982) отмечают, что при стрессе, особенно в первые дни. увеличение скорости распада белка и рибосомной РНК во всех органах сочетается с угнетением биосинтеза РНК и белка. Последнее вызывает замедление скорости физиологической регенерации клеток. В литературе имеются сведения об аменьаении интенсивности деления клеток при повреядениях слизистых оболочек яелудка и кипечника (О.С.Радбиль, С.Г.Вайнитейн. 196?: С.С.Лагучев, 1972; 1Э75: И.С.Заводская. Е.В.Морева, 1981: С.С.Тимовин и др.. 1991; С.Pfeiffer, 1971). Это долено приводить к поражении в организме в первую очередь быстрообновляемых тканей.
Увеличение содер«ания ЛСК. ССК. ОСК и БСК в плазме крови с 1-го дня иммобилизации мояно объяснить, с одной стороны, катабо-лическими процессами в организме, которые приводят к повышенному распаду клеток при стресс-реакциях и выходом в кровь их содерми-мого, а с другой стороны, синтезом защитных вецеств, поступающих в кровь из печени.
В направленности изменений исследуемых нами показателей обмена сиалосодеркавих соединений в слизистых налоаениях и стенке желудка в динамике многократных ежедневных иммобилизаций выявляются 2 фазы, Прогрессирующий рост концентрации ССК. ОСК и Сй и. с другой стороны, уменьшение БСК до 3 дня опытов включительно составляют первую фазу Скатаболическув). Затем следует вторая (анаболическая) Фаза: постепенное восстановление этих показателей к 8-у дню стресса. Указанные сдвиги в показателях обмена сиалосодерщащих соединений хороио согласуются со степенью проявлений стрзсса.
Длительное голодание - одно из наиболее интенсивных по глубине вызываемых им физиологических и биохимических сдвигов экстремальных воздействий.
При длительном полном голодании, то есть лиаением пищи со евпоодним доступом к воде, э слизи щелудка достоверное уменьшение содервания ЛСК со 167*15 мг/кг сухой ткани на 33 и 49Z наблюдались лишь чер^з 120 и 192 часа эксперимента соответственно Iтабл. 2). В стенке «елудка после 1-х суток голодания происходило увеличение концентрации ЛСК нь 28?. (Р <0.05), Б последующие . дни (через 3. 5 и 8 суток лииения пищи) уровень ЛСК постепенно уменьшался, достигая к концу опытов 712 по отношению к контролю
(Р <0.05). Уменыаение содеряания СК ссромукоидов «осле 24, ?2 и 120 часов голодания отмечалось на 21. 40 и 407,'соответственно. Падение'концентрации белков серомукоидов через 3 и 5 суток лиже-ние пищи происходило на и ¿5'/.. Увеличение соотношение белок/СК в молекулах серомукоидов на 34'/. наблюдалось после. Z и 5 суток го-.лоплния,
В слизи кишечника достоверное увеличение содержания ЛСК отмечалось после 192 часов голодания. В стенке тонкой киики рост уровня ЛСК наблюдался через 5 суток ливения пици (Р <0.05). В остальные дни опытов концентрация ЛСК в этих тканях достоверно не отличалась от контрольного. Достоверное уменьиение содержания белков к СК в серомукоидах наблюдалось только после 120 часов лишения пижи.Рост соотножения белок/СК в молекулах серомукоидов на 13 и 12Z отмечался после 3 и 5 суток голодания.
По навим данным, в этик условиях деструктивные ловреяления слизистой келудка встречаются у 33, 50 и 1007 грызунов на 3, 5 и 8-й дни ливения пиии соответственно. Параллельно наблюдалось увеличение содержания I1-0KC в плазме крови и резкое повышение соотношения суммарной массы надпочечников к о-'щей массе крысы, что связано, с одной стороны, с увеличением массы надпочечников, а с другой стороны, со снижением «пссы животного в условиях полного голодания. Эти данные позволяют говорить о развитии экспериментального, стресса 9 подопытных животных.
После первых 24-х часов ливения пиши со свободным доступом к воде наблюдалось увеличение содеряания ЛСК е плазме крови и е исследуемых тканях гастродуоденальной системы. В литературе имеются данные о повыиении уровня обжих белков в плазме крови у крысят 20-суточного возраста после 24-х часового голодания (L.I.Amia е.а.,.1384). Через ?2 часа голодания отмечалась нормализация ¿того показателя во всех исследуемых тканях (кроме стенки яелуд-ка, где его значение оказалось на 25Z достоверно выие контрольного).
В цальнеймем наступает последняя стадия длительного голодания, которая сопровождается резким разделением крыс на 2 группы по характеру повреждений в'желудке и изменении концентрации ЛСК в исследуемых тканях. При этом у животных 1-й группы (с эрозиями через 5 суток лишения пици и многочисленными кровоточащими язвами на. 8-й день) уровень ЛСК был значительно ниже в плазме и в
'• . Таблица 2
Содержание показателей сиалосодеркацих соединений (иг/кг сухой ткани» в стенке желудка и тонкой кивки при голодании (Май)
Условия опытов ЛСН сероиукоиды белок СК бело"/СК
Контроль Голодание 1 ДН. Р стенка желудка 125А10 160±14 <0.03 1900±99 1583*116 >0.05 201x11 160*12 <0.05 9.451.0.19 9,93*0,34 >0.05
3 дн. Р 151Ы0 <0,05 1483*134 <0,05 120±14 <0,001 '12.6ii.6-<0.001
5 д. Р 136*9 >0.05 13501.181 <0,05 108*16 <0,001 12.7*1,6 . <0,001
' 8 дн; Р 89,2*11,2 <0.05 - - • - '. .
. Контроль Голодание 1 дн. Р стенка тонкой 174±10 19Ш5 >0.05 кишки 1943^114 2010^71 >0,05 241±14 2351±19 >0,05 8,07*0.20 8.40*0,14 >0.05
3 дн. Р 185*16 >0.05 1833±147 >0.05 202*14 >0,05 ' 9.08*0.33 <0.05
5 дн. Р 2Ш2? <0,05 146? *163 <0,05 162*16 <0,01 9.02*0,16 <0.01
8 дн. Р 207±2? <0,05 - •
- . - is -
Ttfaim желудки, чем '4 r(>ujy»tbB ¿ й- группы (без.эрозий поел« 5 . сутокголлд.чния'vi .отдельными точечными эрозиями в конце эксперимента). Т-дКие различив нижно объяснить бипве быстры», истоцением jjiiniiitix »uiMüSHücTeft-организма, а такие болйе резким торможени-^H3>töjiofii'4e.i.KüA per енера'щш' M« глм анитеяия 1елудКа, с идя ни (;iifli'|i»jfiri»i /ГСК о слизи v.Turp отдела *ел!мично-ки»еЧного тракта и шачт к лениму уменьиенив; массы, тела у «иаотных 1-й группы в сравнении с грызунами J-rt. Зти выводы находят косвенное подтверждение »'исследованных других авторов, отме-чаищих снииение синтеза гли KonpoieHiPiii b «е.здке и уменьшение скоростймиграции знтероцитоь, кристальней й: вирсиночной i-иrioплAäifеА после, 3-й суток голодания у крыс CS.И.Saut ü.,1., 19öS; S.Dirara, K.Hottä, I9Ü5; Р.«.Holt , 11ЯÖ.O iа .т.1К*'е;наруйение регенераторной способности ели -•iWhif! ооолОТки желудс-а крыс при экспериментальном сцшссе 1И.С. Заводская. H.A.Минина, IHÜ7K
Ü тинной кивке после. 6 сути голодания у крыс l-П группы, ь игличис- ит изменений в желудке, содержание /1СК выло достоверно ныае. чем у «иьигних ¿-й группы. Уто можно объяснить, с одной гторшш, поступлением из иелудка в тинкув кижку крови и слущенно-1о •шитилия, компоненты которых адсорбировались на слизистой тон-кии кимм'. I. лругой ( Тираны, при голодании в терминальную стадии . происходит imuiHH" иитирной дея гельностй /желудка икивбчника t С.Я.Канл.ян.ккй; 14??). \ '
Т.ч'ним" uopiijij«, при длительном полном голодании, как и при мниг»кр.1тн0й иммобилизации, наблюдаются изменения состояния обме— на.сиалосидершащпхсоединений. При этом отмечается соответствие . между, с UAHibV cTopoHtt' увеличением уровня П^ОКС в плазме крови, сиогноыения-масси надпочечников -"'к Иассе животных, про,цента часто" Ти'.ниьреадепий b желудке у подопытных крыс и, с другой стороны, снижением содержания АСК и серомукоидов и уменьжение остатков' ГК ■в «'оликулаХ' СйромуЫидйВ в желудке как при иммобилизации, так и при пилном голодании. .' . , ,, ,-.■•■."
. .¡!ри, срасжцтйлцйом анализе исследуемых биохимических Показателей.« тканях желудка- и тонкой киики. е'динаиике многократной им-мооилимцаи и длительного полного голодания обнаружена определен нЦ .'связь; меадй, появлениям эрозивно-язвённых. поражений в велудкл ' и соДерваниеы ЬШ и ЛСК ^ тканях зт&го органа. Это рыражалось е • tum, что резкие снижение концентраций зтих показателей, а также
уменьшение остатков СК в молекулах серомукоидов в тканях желудка способствовали уменьиеии» заыитных свойств слизистого барьера в желудке и, следовательно» образование различных деструкций в его слизистой, ' , ■
Известно, что нарушен»е биосинтеза гликонротеинов и. таким иоразом, процессов слизеобразования, снижение скорости физиоло- -гической регенерации эпителия желудичо-киночного тракта способствует нарушении защитных возможностей слизистой оболочки гастроду-мденальиой системы, что может привести к образованию деструктивных повреждений. С другой стороны, по нашим данным, стрессовые ситуации вызывает рост катабодических реакций, которые приводят и уменьшению содержания сиалогликопротеинов, ганглиозидов «.суммарных НЬ в слизистых образованиях.и стенках желудка и проксимального отдела тонкой кивки.
Таким образом, многократная иммобилизация и длительное полнив голодание сопровождаются изменениями в обмене сиалосодержачих соединений,.чти, наряду с другими причинами, способствует образовании деструктивных повреждений слизистой оболочки лелудка у крыс,
вцводы ■ ;
1, Многократные иммобилизации у крыс, начиная с 1-го дня эксперимента сопровождались увеличением скорости катаболических , уеакиий в обмене сиалосодержацих соединений с максимумом проявлений на 3-й день воздействий,
¿. Изменения показателей обмена сиалосодержацих соединений и суммарного содержания нуклеиновых кислот при многократных им-миоилизациях во всех исследуемых тканях имели двухфазный характер, подтверждая катаболическув и анаболическую отадии стресса.
3. Направленность Изменений показателей обмена сиалосодер-¡(ацих соединений в динамике длительного голодания подтверждает ¿регрессирование процессов катаболизма в организме.
4. Наблюдается прямая зависимость между появлениом эрозий к язь в желудке и снижением содержания белок- и липидсвязашшх сиаловых кислот в этом отделе желудочно-кишечного тракта при мно-гвнрзтний иммобилизации и длительном полном голодании.
¿¡. Нарушения в обмене сиалосадераащих соединений яьлявтеа одним из важных факюров, способствующих развитию стрессовых
■-.'•• "•'■•■•■■ ' - i? ' повримдоний слили, i oft ибилочки a«.
ü. Определенна показателей обмена сиалосодеряачих сиеднне--Ш1й в слили »«дудка монет служить и-стим для оценки состояния его слизистой иоолочки. •• . , .
СПИСОК НМЧЧНЙК PflBOT; (ШУШЫБйШШХ fit) Ш£ ДИССЕРТАЦИИ
1. биохимические методы анализа показателей обмена биополи меров соединительной ткани (методические разработки) - Имевши, 113 РСФСР,им,- Ис. icuäBT, П.И.Вараев и др.)
2. 0 состоянии соединительной ткани стенки «елудочно-кнвеч-Huru тракта при моделировании окрунавчих человека стрессогенних Факторов // Тезисы докладов конференции' "Внутренняя среда и здоровье нлеелишя"- Ияевск: Дом науки и техники, 139', C.iSti-lb?
| ton»т. 13. Г. Иванов, и.Н.ЗуОарев. Н.Г.Наумова),
3. Влияние возраста на рь-акцию слизистой «полочки яелудка и кишечника на iIриссогенные воздействия // Тезисы докладов 1 Кавказской конференции по проблеме геронтологии и гериатрии - Тбилиси; НИИ терапии, 1992, С.319 1сиавт, П.Оараев, Н.Г,Наумова л
4. Изучение показателей обмена биополимеров соединительной ткани при зкетремальных воздействиях // Тезисы докладов 5?-й мо-лодеаний научной конференции БГЫИ "Вопроси, теоретической и практической медицины"- Уфа; Изд-во БГМИ, 1992, С,26 (соаот, О.Н.Зу--барев, )1.Л.Снсулина, 11.Г,Наумова).
ü. инраделенив свободной и связанной форм сиаловых кислот в биологических объектах // Клин. лаб. диагн,- 1993, N 4, С.44-46 (соавт. П.Н.Йаравв и др.), , . ... ,
6. О 'сиалосодермацих соединениях слизи при стрессогенных воздействиях // Тезисы докладов научно-практической конференции молодых.ученых, посвященной 60-летиа ИГИИ - Иневск, 1993, t, 16.
?. Оценка состояния соединительной ткани при экстремальных воздействиях // Тезисы дукладцв. научно-практической, конференции по результатам хоздоговорных работ, Посвяченной бО-летию ИЩИ -Ииевск, 1393, t,34-33 (соавт* П.Мараев, Г.Х.Гумярова. Н-Г.Нау-
Мова И др. 1. ; - ■■ V V.- . :
■ ä. Содержание липидно-свазанных сиаловых. кислот в крови и ' «¡елудочцо-киаечном т.оакге у крыс при иммобилизации.// Тезисы
докладов научных студенческих работ 71-й конФертенции, - Ияевсс, 1993, С.2-3 (соавт. Т,В,Попова. С.З.Иустлева). . .:
9. Определение активности сналидаяы в сыворотке Крови и ¿лине /7 Клин. ¿Йб.' диагн.- 1393. К б. С. 15-16 (спавт. •■П.Н.Вараев и др. '. - ' _ ■ , '.;.• У .'у .'-.у ; . у
10. Исследование ферментов в норме и яри зкстреиалышх воздействиях (методические разработки) - Ияевсй, 1993,- !4с. («оавт. П.Н.Вараев). ';.
И . Изменение биохимических, показателей крови при Адаптации . к сильному стрессогенноку воздейстйяю // Тезиса докладов научно-технической конференции - Ижевск. 1994, С. 147 (соавт. П.Н.Вараев^: Н.Г.Наумова). .. ' 1 '•' '
12. Обмен сиалосодержачих соединений в слизистой оболочке. У яелудка и кивечника при иммогшлизациЬннои стрессе //Билл. эисп. биол. и.мед.- 1994. Т.Н8, N 9. С.268-259 (соавт. П.Н.Вараев).
- Вольхина, Ирина Витальевна
- кандидата биологических наук
- Уфа, 1995
- ВАК 03.00.04
- Изменение показателей обмена сиалогликопротеинов печени и плазмы крови при стрессогенных воздействиях различного генеза
- Состояние обмена коллагена в стенке желудка и тонкого кишечника при стрессогенных воздействиях
- Особенности обмена сиалогликопротеинов желудка и тонкой кишки у крыс с различной устойчивостью к стрессу (экспериментальное исследование)
- Обмен гликозаминогликанов желудка при стрессогенных воздействиях
- Возрастные особенности энзиматического барьера тонкой кишки при экстремальных воздействиях