Состояние липидов крови у детей при дистрофических и диспластических процессах в тазобедренном суставе

Стрелкова, Ира Геннадьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Состояние липидов крови у детей при дистрофических и диспластических процессах в тазобедренном суставе
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Состояние липидов крови у детей при дистрофических и диспластических процессах в тазобедренном суставе"

На правах рукописи

СТРЕЛКОВА ИРА ГЕННАДЬЕВНА

СОСТОЯНИЕ ЛИПИДОВ КРОВИ У ДЕТЕЙ ПРИ ДИСТРОФИЧЕСКИХ И ДИСПЛАСТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССАХ В ТАЗОБЕДРЕННОМ СУСТАВЕ

03.00.13 - физиология 03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород — 2006

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные руководители: Заслуженный деятель науки РФ

доктор медицинских наук профессор Ежов Юрий Иванович

кандидат медицинских наук старший научный сотрудник Сидоркина Александра Николаевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук профессор Мухина Ирина Васильевна доктор медицинских наук профессор Переслегина Ирина Александровна

Ведущая организация: Московский государственный университет им. МЛомоносова

Защита диссертации состоится « ¿С/ » ^¿^^£¿2006 г. в на

заседании диссертационного Совета Д 212.166.15 при ФГОУ ВПО «Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского» (603950, г. Нижний Новгород, пр-т Гагарина, 23).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского».

Автореферат разослан « && » /¿^и^^г _2006 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета кандидат биологических наук

доцент

Корягин А.С.

Общая характеристика работы

Актуальность темы

Липиды играют исключительно важную роль в нормальном функционировании живых систем. Разнообразие и уровень липидов в тканях определяются интенсивностью процессов их метаболизма, включающих транспорт, поглощение и утилизацию этих молекул клетками," синтез de novo, разрушение и выведение из организма (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1999; Наза-ренко Г. И., Кишкун А.А., 2002; Марри Р. и соавт., 2004).

Липидный обмен тесно связан с перекисным окислением липидов (ПОЛ), так как жирные кислоты, циркулирующие в крови в составе липопротеидных комплексов, являются субстратом окисления активными формами кислорода. Образующиеся продукты ПОЛ выполняют определенные физиологические функции, направленные на нормальное протекание метаболических процессов (Владимиров Ю.А. и соавт., 1991; Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б., 1993; Porter N.A. et al., 1995; Arnold J., 1999).

В процессе эволюции для защиты от повреждающего действия избыточной липопероксидации жизненно важных субстратов и поддержания продуктов перекисного окисления липидов на безопасном для организма уровне создана эффективная система антиоксидантов, в состав которой входят многочисленные метаболиты ферментативной и неферментативной природы (Андраханова Б.В. и соавт., 1990; Кривожухина Л.В. и соавт., 2000). Интенсивность процессов ПОЛ и состояние механизмов антирадикалыюй защиты биологических систем в условиях физиологической нормы сбалансированы и находятся в динамическом равновесии. Ослабление какого-либо звена способствует нарушению гомеостаза клетки и развитию многих патологических процессов (Владимиров Ю.А., 2001; Павлов Е.В., 2004; Васильева Е.М. и соавт., 2005; Haulica I. et al., 2001).

Значительный интерес представляет состояние липидного обмена и возможная роль его нарушений в развитии таких частых и тяжелых заболеваний опорно-двигательного аппарата у детей и подростков, какими являются врожденный вывих бедра и болезнь Пертеса (остеохондропатия), приводящие к деформирующему артрозу, а в 50-90% случаев - к инвалидизации пациентов (Минеев К.П., Белякова Л.А., 1997; Мирзоева И.И., 2000; Педь Э.В., 2002).

В литературе удалось встретить лишь немногочисленные публикации о роли нарушений обмена липидов в развитии остеонекроза головки бедра (Jacobs В., 1978; Lee С.К., 1980; Kawai К. et al., 1985). Авторы считают, что изменения липидного метаболизма при асептическом некрозе приводят к жировой эмболии мелких сосудов, питающих головку бедра. Исследования, проведенные Ю.И. Ежовым и И.А. Чулошниковой (1997, 1998), свидетельствуют о том, что у взрослых пациентов, страдающих коксартрозом и асептическим некрозом головки бедра, часто наблюдаются гиперлипопротеидемии, сопровождающиеся интенсификацией свободнорадикальных процессов. Активацию процессов перекисного окисления липидов при остехондропатии от-

мечают С.С. Беренштейн (1995), а также С.Е. Львов и соавт. (2005), объясняя повышенное содержание продуктов липонероксидацни функциональным перенапряжением антиоксидантной системы, неполноценностью этих механизмов.

Наши предварительные исследования в этом направлении также выявили нарушения в обмене лигюпротеидов и усиление процессов перекисного окисления липидов у детей и подростков, страдающих остеонекрозом и врожденным вывихом бедра, причем эти отклонения зависели от характера альтерации у обследованных пациентов (Стрелкова И.Г. и соавт., 1997; 2002). Полученные результаты позволили предположить, что нарушения метаболизма липидов могут быть одним из механизмов возникновения и прогрессирова-ния изучаемых процессов, которые начинают проявляться в детском возрасте, продолжают сохраняться и прогрессировать у пациентов зрелого, а также пожилого возраста, будут способствовать разработке принципов ранней диагностики, адекватных методов профилактики и нехирургических методов лечения заболеваний в доклиническом периоде. Вышеизложенное обусловливает важность и актуальность выполненной работы.

Цель и задачи исследования

Целью исследования явилось изучение липидного спектра сыворотки крови, уровня свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты в условиях физиологической нормы, при дистрофических и диспластических процессах, протекающих в тазобедренном суставе у детей и подростков.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

- оценить состояние липидного метаболизма у детей и подростков в условиях физиологической нормы и при дистрофических и диспластических процессах на основании определения содержания в крови триглицеридов, общего холестерола, холестерола липопротеидов высокой и низкой плотности;

- провести типироваиие гиперлипопротеидемий в контрольной группе и при изучаемых состояниях;

- изучить свободнорадикальные процессы в условиях нормы и при деформациях тазобедренного сустава;

- дать характеристику состояния антиоксидантных систем по результатам изучения клеточной (эритроциты) и внеклеточной системы антиоксидантных ферментов - супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы, глута-тионредуктазы, церулоплазмина;

- на основе полученной информации разработать лабораторные тесты для диагностики стадий болезни Пертеса и характера осложнений врожденного вывиха бедра.

Новизна научных исследований

- на основании результатов определения показателей липидного спектра сыворотки крови здоровых детей и подростков (контрольная группа, 228 человек) рассчитаны референтные диапазоны нормы общего холестерола, холе-стерола липопротеидов высокой плотности, холестерола липопротеидов низкой плотности и холестерола липопротеидов очень низкой плотности, а также триглицеридов. Не выявлено статистически значимых различий изучаемых показателей в зависимости от пола и возраста;

- рассчитаны диапазоны физиологической нормы показателей интенсивности свободнорадикальных процессов (по данным регистрации спонтанной хемилюминесценции сыворотки крови, определения в ней малонового диаль-дегида), а также активности систем антиоксидантной защиты (церулоплаз-мин, супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионредуктаза и глутатионперок-сидаза);

- на основании проведенного типирования гиперлипопротеидемий выявлена взаимосвязь нарушений липидного метаболизма с развитием дистрофических и диспластических процессов в тазобедренном суставе у детей и подростков, разработан способ дифференциальной диагностики осложнений врожденного вывиха бедра (коксартроз или асептический некроз головки бедренной кости) (положительное решение на выдачу патента по заявке №2005131558);

- установлено возрастание по сравнению с физиологической нормой процессов перекисного окисления липидов у детей с деформациями тазобедренного сустава;

- отмечена активация ферментов антиоксидантной системы крови, которая усиливается с утяжелением дистрофического процесса. На основании выявленной закономерности изменения активности супероксиддисмутазы в зависимости от характера течения остеохондропатии головки бедренной кости разработан способ дифференциальной диагностики стадии болезни Пертеса (положительное решение на выдачу патента по заявке № 2005115009);

- выявлено истощение антиоксидантного резерва плазмы крови и эритроцитов при врожденном вывихе бедра и остеохондропатии тазобедренного сустава по сравнению с физиологической нормой.

Научно-практическая значимость работы

Работа расширяет представления о причинах и механизмах инициации и прогрессирования изменений в тазобедренном суставе, приводящих к глубоким нарушениям анатомического и функционального характера, способствует разработке адекватных методов профилактики и лечения заболеваний. Предложенные биохимические методы лабораторной диагностики этих состояний, основанные на результатах определения в крови пациентов липидного профиля, интенсивности процессов перекисного окисления липидов и активности ферментов антиоксидантной системы дадут возможность клиницистам

повысить качество ранней диагностики, следить за динамикой течения изучаемых процессов, своевременно проводить коррекцию и использовать их для выявления групп риска при массовых популяционных обследованиях у детей, начиная с раннего возраста.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Липидный метаболизм в условиях физиологической нормы характеризуется сбалансированностью показателей липидного спектра крови - ли-попротеидов различных классов и триглицеридов, о чем свидетельствует высокий уровень нормолипопротеидемий (93,3%), зафиксированный у детей контрольной группы. При этом активность свободнорадикальных процессов адекватно лимитируется сопряженными с ними системами антиоксидантной защиты.

2. Выявленные отклонения в содержании в сыворотке крови различных фракций липидного спектра и высокий процент дислипопротеидемий при исследуемых заболеваниях по сравнению с физиологической нормой, свидетельствуют о связи нарушений липидного метаболизма с развитием дистрофических и диспластических процессов тазобедренного сустава.

3. Изменения в тазобедренном суставе дистрофического и диспластиче-ского характера сопровождаются интенсификацией процессов перекисного окисления липидов.

4. Дистрофические и диспластические процессы сопровождаются активацией различных систем антиоксидантной защиты. По мере их утяжеления и интенсификации свободнорадикальных реакций антиоксидантный резерв изучаемых биологических систем снижается.

Апробация работы

Основные положения работы доложены и обсуждены на VI съезде травматологов и ортопедов России (Н.Новгород, 1997), на Международной конференции "Reactive oxygen and nitrogen species, antioxidants and human health" (Смоленск, 2003), научных совещаниях и семинарах отделения лабораторной диагностики ФГУ «ННИИТО Росздрава» (2002, 2003, 2005).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 10 статей. Созданы технические решения (2), заявленные в качестве изобретений, на которые получены положительные решения о выдаче патента по заявке №20051115009 и №2005131558.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста, включает 38 таблиц и 18 рисунков. Работа состоит из введения, четырех глав (обзор литературы, характеристика материала и методы исследования, результаты исследований и их обсуждение, заключение), выводов и списка литературы, содержащего 251 источник, из которых 106 иностранных.

Содержание работы

Материалы и методы исследования

Исследования проведены на базе ФГУ "Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" согласно плану научно-исследовательских работ № 025/056/002 «Современные технологии диагностики, лечения и реабилитации больных с травмами и заболеваниями опорно-двигательной системы» в отделении лабораторной диагностики.

Объектом исследования были эритроциты, плазма и сыворотка крови пациентов с дистрофическими и диспластическими процессами, протекающими в тазобедренном суставе. Состояние липидного спектра, антиоксидантной системы и интенсивность свободнорадикальных процессов в условиях физиологической нормы изучено на образцах крови 228 детей и подростков в возрасте от 3 до 19 лет, в том числе 60% - мальчики и 40% - девочки, которые составили контрольную группу, а также у пациентов с врожденным вывихом бедра (143 человека, из них мальчиков - 21, девочек - 122) и болезнью Пертеса (57 человек, из них 44 мальчиков и 13 девочек). Всего исследовано 428 образцов крови и выполнено 2960 анализов.

Забор крови для проведения лабораторных исследований, диагностика заболеваний и оценка тяжести течения процесса, протекающего в тазобедренном суставе, осуществлялись специалистами ортопедического отделения на основании данных клинико-рентгенологических обследований.

Дети и подростки с врожденным вывихом бедра в зависимости от характера нарушений разделены на три группы: страдающие врожденным вывихом бедра без осложнения течения заболевания (48 пациентов), врожденным вывихом бедра, течение которого осложнилось коксартрозом (57 пациентов), и врожденным вывихом бедра, осложненным асептическим некрозом головки бедренной кости (38 детей). Страдающие болезнью Пертеса разделены на группы со II, III, IV стадиями заболевания.

Исследования липидного спектра сыворотки крови, взятой натощак, выполняли с помощью биохимического автоанализатора EXPRESS PLUS фирмы Ciba-Corning (Англия). У обследованных контрольной группы и пациентов, страдающих врожденным вывихом бедра, а также болезнью Пертеса, определяли содержание общего холестерола, холестерола липопротеидов высокой плотности (ХС-ЛПВП), холестерола липопротеидов низкой (ХС-ЛПНП) и очень низкой плотности (ХС-ЛПОНП), триглицеридов, а также рассчитывали коэффициент атерогенности. При этом использованы методы биохимических исследований, адаптированные фирмой Ciba-Corning в качестве автоматизированных аналитических процедур: энзиматический метод определения общего холестерола (Allain С. et al., 1974; Witte D. et al., 1974; Meiat-toni F., 1978), метод P.R. Finley et al. (1978) определения концентрации холестерола липопротеидов высокой плотности, методика U. Nagele et al. (1984)

исследования содержания триглицеридов. На основании полученных данных рассчитывали концентрацию холестерола липопротеидов низкой и очень низкой плотности, а также коэффициент атерогенности в соответствии с рекомендациями, изложенными в работах B.R. Rifkind (1970), W.J. Friedwald et al. (1972), А.И. Климова и H .Г. Никульчевой (1980), Д.Б. Шестова (1985).

Процедуру типирования гиперлипопротеидемий проводили в соответствии с алгоритмом, разработанным И.В. Жулькевичем и С.Г. Вайнштейном (1986). Так как в процессе типирования гиперлипопротеидемий хиломикроны не обнаружены ни в одном из анализированных образцов, электрофорез сыворотки крови не применяли.

Интенсивность свободнорадикальных реакций в сыворотке крови исследовали с помощью хемилюминометра марки ХЛМ1Ц-01 (г. Киев). На основании результатов регистрации уровня сверхслабого свечения препаратов судили о величине продукции липоперекисных радикалов (Владимиров Ю.А., Арчаков P.M., 1972; Журавлев А.И., Журавлева А.И., 1975; Карнаух И.М., УрысонЮ.А., 1983).

Концентрацию малонового диальдегида определяли раздельно в плазме и эритроцитах по методу, разработанному В.Г. Сидоркиным и И.А. Чулошни-ковой (1993; A.c. СССР №1807410), который позволяет характеризовать интенсивность свободнорадикальных реакций и антиоксидантный резерв биологических систем. Ферментативно-активный церулоплазмин исследовали по методу H. A. Ravin (1961) в интерпретации B.C. Асатиани (1965) и модификации Т.И. Мжельской и соавт., 1989. Оценку активности супероксиддисму-тазы (СОД) проводили по методу M. Nishikimi et al. (1972) в модификации А.Т. Журкина и Е.Е. Дубининой (1986) - определяли способность СОД эритроцитов ингибировать реакцию восстановления нитросинего тетразолия. Уровень активности каталазы оценивали по уменьшению концентрации Н202 в результате действия фермента (Aebi H., 1970). Активность глутатионредукта-зы эритроцитов исследовали по методу Y. Yavata и К. R. Tanaka (1974), а глутатионпероксидазы - по методу R.E. Pinto и W. Barley (1969) в модификации И.А. Переслегиной и М.В. Ермолиной (1986).

Статистический анализ результатов исследований выполнен с помощью персонального компьютера и программы Stadia (Тюрин Ю.М., Макаров A.A., 1995; Кулаичев А.Г1., 1998).

Результаты исследования и их обсуждение

1 .Характеристика показателей липидного обмена в норме и при дистрофических и диагностических npoifeccax в тазобедренном суставе

При обследовании образцов крови в контрольной группе не было выявлено статистически значимых половых и возрастных различий по какому-либо параметру липидного спектра. Вышеизложенное явилось основанием для объединения информации о состоянии различных звеньев липидного обмена у детей и подростков всех возрастных групп без учета пола в условиях нормы и при изменениях в тазобедренном суставе, что позволило увеличить число

наблюдений в каждом из вариационных рядов, повысить результативность статистических исследований.

У пациентов с дистрофическими и диспластическими нарушениями тазобедренного сустава наблюдаются отклонения в обмене липидов по сравнению с контрольной группой, о чем свидетельствует более высокая концентрация в сыворотке крови содержания общего холестерола (ХС), холестерола липопротеидов низкой (ХС-ЛПНП) и очень низкой плотности (ХС-ЛПОНП), триглицеридов и коэффициента атерогенности (табл. 1). При этом все анализированные показатели в группах пациентов с врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса были практически идентичны и статистически значимо не различались.

Обнаружено статистически значимое различие показателей обмена липидов в образцах крови пациентов, страдающих врожденным вывихом бедра, у которых развилось осложнение в виде коксартроза или асептического некроза головки бедра, — концентрации общего холестерола, ХС-ЛПНП, ХС-ЛПОНП и триглицеридов. При этом в условиях осложнения в виде асептического некроза головки бедра содержание общего холестерола (4,77±0,198 ммоль/л) и ХС-ЛПНП (2,93±0,204 ммоль/л) оказалось выше на 12,8% и 24,2% соответственно, чем в группе детей и подростков, страдающих врожденным вывихом, осложненным коксартрозом, в то время как концентрация ХС-ЛПОНП (0,32±0,026 ммоль/л) и триглицеридов (0,71±0,060ммоль/л) — ниже на 25,7% и 23,7% соответственно. Выявленные изменения положены в основу технического решения, заявленного в качестве изобретения, посвященного лабораторным аспектам дифференциальной диагностики осложнений этого патологического процесса (положительное решение о выдаче патента по заявке №2005131558).

Зафиксировано статистически значимое различие содержания ХС-ЛПОНП и триглицеридов в сыворотке крови у пациентов, страдающих болезнью Пертеса II и III стадии в то время как различия других показателей липидного обмена были несущественными. Усредненный показатель содержания ХС-ЛПОНП у детей со II стадией заболевания составил 0,54±0,081 ммоль/л, что было выше на 40,7% (р<0,02), чем в группе пациентов, страдающих болезнью Пертеса III стадии. Концентрация триглицеридов у пациентов II стадии течения заболевания оказалась равной 1,18±0,178 ммоль/л, а III стадии — 0,69±0,081 ммоль/л. Различие среднеарифметических величин составило 41,5% (р<0,02).

2. Результаты типирования дислипопротеидемий

Анализ типирования дислипопротеидемий в условиях физиологической нормы показал следующее. Нормолипопротеидемия выявлена в 93,3% случаев от общего числа обследованных (164 человека). Гиперлипопротеидемия IIa типа зафиксирована в 3,0%, а IV типа - в 3,7% случаев. Гиперлипопроте-

Таблица 1

Показатели липидного состава сыворотки крови у практически здоровых детей и страдающих заболеваниями тазобедренного сустава, М ± ш

Группы обследозанных ХС общий, ммоль/л хс-лпвп, ммоль/л хс-лпнп, ммоль/л хс-лпонп, ммоль/л Триглице-риды, ммоль/л Коэффициент атеро-генности, отн. ед.

1 2 3 4 5 6 7

Здоровые (контроль) 3,79±0,048 (164) 1,40±0,022 (163) 2,13±0,045 (163) 0,26±0,006 (162) 0,57±0,014 (162) 1,80±0,042 (162)

Пациенты с альтерацией тазобедренного сустава 4,39±0,078 (122) 1,43±0,026 (119) 2,57±0,068 (122) 0,38±0,016 (120) 0,83±0,034 (120) 2,17±0,070 (122)

р,< 0,001 р2>0,5 Рз <0,001 р4 < 0,001 р5 <0,001 р6 <0,001

Отличие анализируемых показателей у пациентов от обследованных в контрольной группе +15,8% +2,1% +20,6% +46,1% +45,6% +20,6%

Примечание: в скобках указано количество обследованных; рх — рб — достоверность различия соответствующих показателей в графе 2 - 7 у здоровых детей и пациентов с альтерацией тазобедренного сустава.

идемия Нб типа, наиболее опасная в плане раннего возникновения и прогрес-сирования атеросклеротического поражения сосудов, не обнаружена. У детей и подростков с альтерацией тазобедренного сустава только в 56,2% случаев (68 человек) выявлена нормолипопротеидемия, в то время как гиперлипопро-теидемии составили 43,8% (53 человека), что в 6,5 раза превышает аналогичный показатель контрольной группы (рис.1). При этом распределение частоты встречаемости гиперлипопротеидемий по типам оказалось следующим: гиперлипопротеидемия IIa типа обнаружена в 14,9% случаев, Иб типа - в 6,6%, а IV типа - в 22,3% случаев. Следует подчеркнуть, что различия показателей частоты встречаемости нормолипопротеидемий и гиперлипопротеидемий IIa, Нб и IV типа в сравниваемых группах обследованных являются статистически значимыми при высокой степени достоверности (табл.2). Ги-перлипопротеидемии I, III и V типов не обнаружены, что согласуется с данными литературы, так как эти типы нарушений обмена липидов являются генетически детерминированными и встречаются крайне редко (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1999; Титов В.Н. и соавт., 2002).

Результаты сравнительного анализа долевого распределения нормолипопротеидемий и гиперлипопротеидемий в зависимости от характера нарушений показали, что частота обнаружения нормолипопротеидемий в группе пациентов с болезнью Пертеса оказалась несколько ниже, чем в группе детей и подростков, страдающих врожденным вывихом бедра, однако это различие было статистически недостоверным (рц>0,2; табл.2). Заметной особенностью типа гиперлипопротеидемий, выявленных у больных с деформацией тазобедренного сустава, является повышение в 2,8 раза доли гиперлипопротеидемий Нб типа в группе пациентов с болезнью Пертеса в сравнении с обследованными, которые страдают врожденным вывихом бедра (р13<0,05; табл. 2).

Таким образом, нами выявлены некоторые закономерности изменения содержания в сыворотке крови изучаемых метаболитов у пациентов с врожденным вывихом бедра и остеохондропатией тазобедренного сустава, что позволяет предположить значимость нарушений липидного обмена в развитии изучаемых процессов.

3. OifenKd интенсивности свободнорадикальных процессов

Дислипопротеидемии, как правило, сопровождаются интенсификацией процессов перекисной модификации полиненасыщенных жирных кислот. Исследования спонтанной хемилюминесценции сыворотки крови, проведенные нами, свидетельствуют о возрастании процессов перекисного окисления липидов у пациентов с дистрофическими и диспластическими процессами тазобедренного сустава по сравнению с таковыми в контрольной группе (рис. 2). В контроле интенсивность сверхслабого свечения образцов сыворотки крови составила 131±5,7 имп./ЗО с, а у детей и подростков с нарушениями в тазобедренном суставе анализируемый параметр достигал 309±23,0 имп./ЗО с, то есть увеличивался в 2,4 раза при высокой степени достоверности различия

сравниваемых показателей (р<0,001). Следует отметить, что характер изучаемого процесса не влияет на величину спонтанной хемилюминесценции сыворотки крови.

100% п

90% -

80% -70% -60% -

50% -40% -30% 20% 10% -I

0% -и-м-и-ц

1 2 3 4

Рис. 1. Доля нормо- и гиперлипопротеидемий различного типа у здоровых детей и подростков контрольной группы (1), а также у пациентов с врожденным вывихом бедра и остеохондропатией (2), дифференцированно с врожденным вывихом бедра (3) и остеохондропатией (4). Усл. обозн.: На - гипер-липопротеидемия На типа; Нб — гиперлипопротеидемия Нб типа; IV - гипер-липопротеидемия IV типа.

.\\\\\\\\ч\\ч\\\\\'>

.\W\4W4\W4W.W .\NSSSSSN\W444S4V

'Л'Л'^УЛУьУчУЛУч

\\\\\чч\ч\\\\ч\ч\\

\ч\\чч\ч\ч\\\ч\\ч\ ■ " -----ч\\\\\\\

\\W\SN\

\\ч\\чч\

Па

Нормо-липо-протеид-емия

Таблица 2

Результаты типирования гиперлипопротеидемий (%) у здоровых детей и страдающих врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса, М ± ш

Группы обследованных Всего, % Нормоли- попротеид- емия Гиперлипопротеидемий IIa тала Гиперли-попротеид-емияПб типа Гиперли-попротеид-емия IV типа Гиперли-попротеид-емии IIa + 116 +IV типа

1 2 3 4 5 6 7

Здоровые (контроль) 100 (164) 93,3±1,95 (153) 3,0±1,33 (5) 0 (0) 3,7±1,47 (6) 6,7±1,95 OD

Пациенты с врожденным вывихом бедра 100 (76) 59,2±5,64 (45) Pi <0,001 14,5±4,04 (И) р2 < 0,01 3,9±2,22 (3) рз > 0,05 22,4±4,78 (17) р4< 0,001 40,8±5,64 (31) р5 < 0,001

Пациенты с болезнью Пертеса 100 (45) 51,1 ±7,45 (23) рб <0,001 Рп > 0,2 15,6±5,41 (7) Р7 < 0,05 Pi2 > 0,5 11,1+2,37 (5) р8 < 0,02 Po <0,05 22,2±6,20 (Ю) р9 < 0,01 Рм>0,5 48,9±7,45 (22) Рю< 0,001 Pis > 0,2

Примечание: в скобках указано количество исследований; pi -р5 - достоверность различия соответствующих показателей в графе 3 - 7 у здоровых детей и подростков контрольной группы и пациентов с врожденным вывихом бедра; р6 - р10 - у обследованных контрольной группы и страдающих болезнью Пертеса; рп - р15 - у пациентов с врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса.

Состояние процессов перекисного окисления липидов оценивали также по содержанию одного из промежуточных продуктов липопероксидации -малонового диальдегида (МДА) в плазме крови и эритроцитах. Сравнительный анализ концентрации МДА в плазме и эритроцитах в условиях нормы, а также у страдающих врожденным вывихом бедра и остеохондропатией тазобедренного сустава, выявил статистически значимое увеличение Исследуемого показателя у пациентов с дистрофическими и диспластическими процессами, протекающими в головке бедренной кости, по сравнению с контролем: на 21,9% - в плазме (0,78±0,030 мкмоль/л и 0,64±0,034 мкмоль/л соответственно; р<0,01) и на 22,9% - в эритроцитах (8,64±0,239 мкмоль/л и 7,03±0,369 мкмоль/л соответственно; р<0,001). Следует отметить, что уровень МДА, в отличие от величины спонтанной хемилюминесценции сыворотки крови, зависит от характера процесса в пораженном суставе (рис. 2).

Выявлены различия в содержании МДА в плазме пациентов с врожденным вывихом бедра, осложненным коксартрозом в сравнении с аналогичным показателем у пациентов, страдающих врожденным вывихом бедра, течение которого осложнено асептическим некрозом головки бедренной кости. Концентрация МДА в последнем случае оказалась равной 0,92±0,064 мкмоль/л, что на 22,7% выше, чем в образцах крови пациентов, имеющих осложнение в виде коксартроза, это различие оказалось статистически значимым (р<0,05). В эритроцитах отмечена аналогичная тенденция - содержание МДА в группе пациентов с асептическим некрозом (10,04±0,988 мкмоль/л) было больше, чем у пациентов с коксартрозом (8,51±0,402 мкмоль/л) на 18,8%, но различие было статистически недостоверным (р>0,1).

Следует отметить, что на фоне роста уровня МДА в группе детей и подростков, у которых врожденный вывих бедра осложнен асептическим некрозом, наблюдается повышение содержания ХС-ЛПНП по отношению к аналогичным показателям у пациентов с врожденным вывихом бедра, осложненным коксартрозом. Вероятно, интенсификация процессов ПОЛ вызывает пе-рекисную модификацию липопротеидов атерогенной фракции. Известно, что вследствие содержания в липопротеидах низкой плотности большого количества полиненасыщенных жирных кислот и очень низкой концентрации анти-оксидантов они в большей степени подвержены окислению, чем липопротеи-ды очень низкой плотности (Титов В.Н., 2005; Esterbauer Н. et al., 1991; Bow-ry V. et al., 1992), уровень которых повышен значительнее у детей с коксартрозом. Появление в кровотоке видоизмененных ЛПНП способствует увеличению их поглощения моноцитами-макрофагами, локализованными в сосудистой стенке, и гладкомышечными клетками (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1999; Haberland М.Е. et al., 1992; Seed М., 1996). В результате они превращаются в "пенистые" клетки, которые погибают. При этом в интиме сосудов накапливаются эстерифицированный и неэстерифицированный холестерол, кристаллы моногидрата холестерола, создаются условия для негативных изменений в сосудистой системе (в том числе в области тазобедренного сустава),

300 250 200 150 100 50

ЕЕ

Сыворотка

0,9 0,8

С 0,7 О

Щ о.б

§; о,5

s 0,4 гт

п 0,3

Ы 0.1

Плазма

к s гг го о.

II О)

Эритроциты

Рис. 2. Интенсивность свободнорадикальных процессов по данным регистрации хемилюминесценции сыворотки крови и содержания в плазме и эритроцитах малонового диальдегида у здоровых детей и подростков (1), страдающих врожденным вывихом бедра (2) и остеохондропатией тазобедренного сустава (3).

приводящие к нарушению питания и процессов оксигенации костной ткани (Липовецкий Б.М., Виноградова Т.В., 2002; Kruth Н., 1997). При осложнении врожденного вывиха бедра асептическим некрозом эти нарушения, по-видимому, выражены в большей степени, чем при осложнении коксартрозом, что подтверждают полученные результаты.

У пациентов с остеохондропатией в различные стадии течения процесса содержание МДА изменяется неоднотипно. Во II стадии (стадия импресси-онного перелома) уровень МДА в плазме составлял 0,95±0,188 мкмоль/л, а в эритроцитах - 10,91±0,852 мкмоль/л, что на 48,4% (плазма, р>0,1) и 55,2% (эритроциты, р<0,01) превышает аналогичный показатель в контрольных образцах. В III стадии остеохондропатии (стадия некроза и резорбции костной ткани, образование кист) концентрация МДА также статистически значимо повышена на 31,2% (плазма, р<0,05) и 32,1% (эритроциты, р<0,01) в сравнении с контролем. По мере клинического улучшения течения заболевания у детей с IV стадией процесса отмечается снижение концентрации МДА как в плазме (0,66±0,098 мкмоль/л), так и в эритроцитах (8,41±0,815 мкмоль/л). При этом величины изучаемых показателей приближаются к таковым в образцах крови контрольной группы. Полученные данные могут свидетельствовать о том, что увеличение концентрации МДА в крови пациентов с остеохондропа-

тией отражает возросшие процессы деструкции костной ткани в головке бедренной кости. Восстановительная фаза этого процесса сопровождается снижением величины показателя. Полученные результаты подтверждаются данными литературы. Согласно исследованиям С.С. Беренштейн (1995), С.Е. Львова и соавт. (2005) содержание МДА зависит от выраженности дистрофических изменений в пораженном суставе.

Анализ состояния систем антиоксидантной защиты

Ферменты антиоксид антной системы

Активность ферментов антиоксидантной системы крови (содержание фер-ментативно-активного церулоплазмина, активность супероксиддисмутазы, глу-татионпероксидазы и глутатионредуктазы) у пациентов с альтерацией в тазобедренном суставе повышена. Исключение составляет активность каталазы, которая не изменялась. Содержание ферментативно-активного церулоплазмина в группе пациентов с дистрофическими и диспластическими процессами в тазобедренном суставе (486±9,7 мг/л) превышает аналогичный параметр в контрольной группе на 45,0% (р<0,001), активность супероксиддисмутазы (СОД) (222±7,5 ед./Hb мин) - на 56,3% (р<0,001), глутатионпероксидазы (919±15,3 мкмоль гл.ок./г Hb мин) — на 4,4% (р<0,05) и глутатионредуктазы (3,34±0,102 мкмоль НАДФН2/г Hb мин) - на 13,9% (р<0,001). Активация систем антиоксидантной защиты, очевидно связана с необходимостью подавления более интенсивно протекающих процессов ПОЛ, что позволяет рассматривать выявленную закономерность как физиологический механизм адаптивной перестройки изучаемых процессов, направленный на восстановление нормального функционирования организма.

Показано, что изменения активности ферментов антиоксидантной защиты зависит от характера нарушений (табл. 3). Если в группе пациентов с врожденным вывихом бедра все показатели ферментативной активности превышают таковые в контроле, то у пациентов с остеохондропатией, наряду с повышением активности некоторых ферментов антиоксидантной системы, наблюдается снижение активности каталазы и глутатионпероксидазы. Это может приводить к избыточному накоплению Н202 и гидроперекисей липидов, которые оказывают повреждающее действие на эндотелий сосудов, нарушают физико-химические свойства сосудистой стенки (Дубинина Е.Е., 2001; Пасечник И.Н., 2001). Данные продукты перекисного окисления липидов, подавляя синтез простациклина и увеличивая продукцию тромбоксана, усиливают агрегацию тромбоцитов и тем самым способствуют нарушению микроциркуляции (Владимиров Ю.Н., 1998; Биленко М.В., 1989; Chilton F.H., 1996), что в сочетании с врожденным недоразвитием сосудистой сети в области тазобедренного сустава и усилением процессов ПОЛ, усугубляет дистрофические нарушения при изучаемой патологии. Об этом свидетельствует повышение интенсивности свечения сыворотки крови и концентрации МДА.

У пациентов с врожденным вывихом бедра в зависимости от характера осложнений (развитие коксартроза или очага асептического некроза) было выявлено, что активность СОД и каталазы возрастает при неосложненном

Таблица 3

Активность ферментов антиоксидантной защиты и содержание ферментативно-активного церулоплазмина у здоровых детей и подростков, а также страдающих врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса, М ± m

Группы обследованных Фермента-тивно-активный церулопл аз-мин, мг/л Супероксид-дисмутаза, ед./г НЬ-мин Катал аза, ед./г НЬ-мин Глутатион-пероксидаза, мкшлыжж/ г НЬ-мин Глутатиоьгре- дуктаза, мкмоль надфн2/ г НЬ-мин

Здоровые (контроль) 335±4,2 (161) 142±4,9 (74) 112±2,7 (74) 880±10,6 (72) 2,93±0,046 (74)

Врожденный вывих бедра 497+13,9 (59) P! < 0,001 239±8,7 (117) р2< 0,001 123±3,5 (117) р3 < 0,02 961±17,6 (71) р4< 0,001 3,45±0,123 (98) р5< 0,001

Болезнь Пертеса 478±15,2 (39) р6< 0,001 Ри>0,5 172±12,3 (38) р7 < 0,05 р12< 0,001 95±5,2 (40) Рз <0,01 р13< 0,001 844±24,8 (40) Р9>0,1 р,4< 0,001 3,08±0,179 (40) Pio>0,5 Pis >0,05

Примечание: в скобках указано количество исследований; pj — р5 — достоверность различия соответствующих показате лей в графе 2 - 6 у здоровых детей и подростков, страдающих врожденным вывихом бедра; р6 - Рю - в графе 2 - 6 - у здоровых детей и подростков, страдающих болезнью Пертеса; рм - р15 - в графе 2 - 6 - у страдающих врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса.

течении врожденного вывиха бедра, что, по-видимому, носит адаптивный характер и отражает глубину нарушений.

У пациентов, страдающих II, III и IV стадиями болезни Пертеса, также наблюдались изменения активности ферментов антиоксидантной системы. Активность супероксиддисмутазы во II (201±22,2 ед/г Hb мин) и III (191±22,9 ед/гНЬ мин) стадиях болезни Пертеса, при которых происходит активная резорбция губчатой кости, фрагментация эпифиза и формирование в шейке кист, была практически идентичной (р>0,5), в то время как в IV стадии (стихание процесса рассасывания кости, нарастание признаков репарации, реваскуляризация эпифиза и замещение его новообразованной костью) зафиксировано снижение анализируемого показателя по сравнению с аналогичным параметром в группе пациентов с болезнью Пертеса II (36,8%; р<0,01) и III стадии течения дистрофического процесса (33,5%; р<0,05). Выявленная зависимость активности СОД от периодизации болезни Пертеса положена в основу технического решения, заявленного в качестве изобретения, посвященного дифференциальной диагностике стадий этого заболевания (положительное решение о выдаче патента по заявке № 005115009). Динамика активности каталазы также зависит от стадии заболевания. Во II и III стадиях течения болезни Пертеса активность каталазы, как и активность СОД, практически не различается - 82±9,5 и 89±6,8 ед./г Hb мин соответственно (р>0,1), в то время как в IV стадии активность фермента возрастает до 112±7,0 едУг Hb мин, что на 36,5 (р<0,01) и 25,8% (р<0,05) больше, чем при болезни Пертеса II или III стадии течения. Зафиксировано повышение активности глутатионредуктазы в III стадии остеохондропатии головки бедренной кости (3,60±0,318 мкмоль НАДФН2/г Hb мин) по сравнению со II на 55,8% при высокой степени достоверности различия (р<0,01), в IV стадии в сравнении со II - на 32,5% (р<0,05). Однако существенных различий в активности этого фермента при III и IV стадиях заболевания не выявлено (р>0,2). Содержание ферменгативно-активного церулоплазмина и активность глутатионпе-роксидазы при различных стадиях течения дистрофического процесса варьировали незначительно и изменения данных показателей были статистически недостоверны.

Таким образом, выявленные закономерности изменений активности ферментов антиоксидантной защиты при болезни Пертеса отражают состояние различных звеньев адаптационных механизмов, направленных на коррекцию процессов ПОЛ, интенсивность которых варьирует в различные стадии течения изучаемого процесса, что может быть использовано клиницистами в качестве лабораторных критериев в комплексной дифференциальной диагностике стадий этого заболевания.

Антиоксидантный резерв крови по данным исследования малонового

диальдегида

Разработанный в нашей лаборатории новый метод определения малонового диальдегида раздельно в плазме и эритроцитах (A.c. № 1807410) позво-

лил определить антиоксидантный резерв сыворотки крови, который выражается в условных единицах с отрицательным знаком. Значения с отрицательным знаком, в большей мере приближающиеся к нулю, характеризуют достаточно высокий антиоксидантный резерв плазмы или эритроцитов.

Антиоксидантный потенциал плазмы (-1,40±0,069 усл.ед./л) и эритроцитов (-8,70±0,364 усл.ед./л) при дегенеративно-дистрофических процессах в тазобедренном суставе снижен по сравнению с анализируемым показателем в условиях физиологической нормы как в плазме (-0,74±0,028 усл.ед./л; р<0,001), так и в эритроцитах (-5,85±0,290 усл.ед/л; р<0,001). Эти данные согласуются с результатами изучения интенсивности свободнорадикальных процессов у детей и подростков с деформацией тазобедренного сустава, у которых выявлено резко выраженное возрастание процессов перекисного окисления липидов по данным регистрации сверхслабого свечения сыворотки крови и определения концентрации МДА. По-видимому, возросшие процессы ПОЛ на фоне измененного спектра липидов сопровождаются истощением антиоксидантного потенциала, который не в состоянии в полной мере обеспечить антирадикальную защиту.

Более выраженное падение антиоксидантного резерва выявлено у обследованных с болезнью Пертеса в сравнении с пациентами, страдающими врожденным вывихом бедра (различия были статистически значимыми -р<0,001; рис.3). Следовательно, у пациентов, страдающих болезнью Пертеса, развиваются более глубокие нарушения антиоксидантной защиты, чем у детей с врожденным вывихом бедра.

-0,2

0) -0,4

5 -0,6

О. 0> ф -0,8

о. >5 -1

X Е -1,2

! -1,4

£ < -1,6

-1.8

-1,56 ф 3 Плазма

Эритроциты

Рис.3. Антиоксидантный резерв плазмы и эритроцитов здоровых детей и подростков (1), а также страдающих врожденным вывихом бедра (2) и остео-хондропатией тазобедренного сустава (3).

Изучение антиоксидантного резерва плазмы крови и эритроцитов в зависимости от стадии болезни Пертеса позволило предположить, что степень

дефицита антиоксидантного потенциала зависит от стадии течения дистрофического процесса, достигая максимальных значений в период деструкции и резорбции костной ткани, а по мере преобладания восстановительных процессов показатель недостаточности антиоксидантного резерва уменьшается. Антиоксидантный резерв плазмы и эритроцитов у пациентов, страдающих II и III стадиями болезни Пертеса, находится в пределах -1,76±0,182 усл.ед./л и -1,59±0,177 усл.ед./л в плазме; - 12,26±1,036 усл.ед./л и - 11,03±1,042 усл.ед/л в эритроцитах, в то время, как в фазе восстановления структуры кости (IV стадия) его дефицит в плазме и в эритроцитах составил -1,31±0,147 усл.ед./л и -8,22±0,666 усл.ед./л, соответственно.

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что у детей и подростков с дистрофическими и диспластическими процессами в тазобедренном суставе наблюдаются изменения липидного обмена — существенные сдвиги в липидном спектре (содержание холестерола различных классов липопрогеидных частиц, триглицеридов), а также гиперлипопротеи-демии IIa, Иб и IV типов, интенсифицируются процессы перекисного окисления липидов и снижается антиоксидантный резерв крови. Это свидетельствует о вкладе выявленных нарушений метаболизма липидов и возрастания сво-боднорадикальных реакций в механизме развития изучаемых процессов. Предполагается, что выявленные изменения приводят к повреждению сосудов (в том числе и в зоне тазобедренного сустава, особенно в сочетании с врожденной аномалией сосудистой сети в этой области), к последующей ишемии и гипоксии хрящевых, костных тканей, заканчивающихся развитием в них дистрофических процессов.

Выводы

1. Липидный состав сыворотки крови здоровых детей и подростков характеризуется сбалансированностью содержания общего холестерола, холестерола липопротеидных частиц различных фракций и триглицеридов, о чем свидетельствует высокий процент выявленных нормолипопротеидемий (93,3%), в то время как нарушения этих соотношений - гиперлипопротеидемии обнаружены только в 6,7%.

2. Липидный спектр сыворотки крови пациентов, страдающих дистрофическими и диспластическими процессами в тазобедренном суставе, отличается от такового при физиологической норме и характеризуется увеличением общего холестерола (на 16%), холестерола липопротеидов низкой плотности (21%) и очень низкбй плотности (46%), триглицеридов (46%), а также возрастанием доли холестерола атерогенных частиц липопротеидов по сравнению с контролем.

3. Результаты типирования дислипопротеидемий свидетельствуют о связи нарушений липидного обмена с развитием дистрофических и диспластиче-ских процессов в тазобедренном суставе. Количество гиперлипопротеидемий IIa типа увеличивается по сравнению с контролем в 4,9 раза, IV типа - в 6, суммарно гиперлипопротеидемии IIa, 116 и IV типа - в 6,5 раза. Болезнь Пер-

теса сопровождается возрастанием частоты обнаружения гиперлипопротеид-емии Пб типа в 2,8 раза по сравнению с врожденным вывихом бедра.

4. Изменения в тазобедренном суставе дистрофического и диспластиче-ского характера характеризуются интенсификацией процессов перекисного окисления липидов по данным регистрации сверхслабого свечения сыворотки крови, которое оказалось выше в 2,4 раза по сравнению с образцами сыворотки в контрольной группе, а также увеличением содержания малонового диальдегида как в плазме, так и в эритроцитах.

5. Дистрофические и диспластические процессы в тазобедренном суставе и сопутствующая интенсификация свободнорадикальных реакций сопровождается активацией различных звеньев системы антиоксидантной защиты. Активность супероксиддисмутазы по сравнению с контролем повышается на 56%, глутатионредуктазы - на 14%, содержание ферментативно-активного церулоплазмина - на 45%.

6. Антиоксидантный резерв плазмы крови и эритроцитов, рассчитанный по содержанию малонового диальдегида, при врожденном вывихе бедра и остеохондропатии тазобедренного сустава резко снижается в сравнении с контролем: в плазме - на 89%, в эритроцитах - на 49%. Наиболее выраженный дефицит антиоксидантного резерва наблюдается при остеохондропатии в плазме - на 29%, в эритроцитах - на 40% ниже, чем при врожденном вывихе бедра.

7. Полученные результаты, свидетельствующие о выраженных сдвигах в обмене липидов, интенсификации свободнорадикальных процессов, изменениях в системе антиоксидантной защиты, являются доказательством вклада этих нарушений в инициацию и прогрессирование дистрофических и диспла-стических изменений в тазобедренном суставе, которые проявляются у детей и подростков, начиная с раннего возраста, что в конечном итоге позволяет с новых позиций рассматривать проблемы возникновения и развития, своевременной диагностики, профилактики и разработки эффективных методов лечения данных заболеваний.

Практические рекомендации

Разработанные совместно с врачами-клиницистами критерии дифференциальной диагностики стадий болезни Пертеса (положительное решение ФИПС от 29.06.06 г. о выдаче патента по заявке №2005115009) и типа осложнений врожденного вывиха бедра (положительное решение ФИПС от 03.10.06 г. о выдаче патента по заявке №2005131558) можно рекомендовать для внедрения в практику клинико-биохимических лабораторий научных и лечебных учреждений соответствующего профиля с целью повышения качества диагностики фазы течения остеохондропатии и характера осложнения врожденного вывиха бедра, что имеет важное значение для проведения своевременных и адекватных мероприятий, действие которых направлено на предупреждение или замедление прогрессирования дистрофических нарушений в области тазобедренного сустава.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Стрелкова И.Г. Активность супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов у больных с врожденным вывихом бедра и асептическим некрозом головки бедренной кости /В.Г. Сидоркин, O.A. Баталов, М.А. Старикова, А.Г. Соснин, И.Г. Стрелкова; Нижегородский НИИТО. Н.Новгород, 1994. - 19 с. - Деп. в ВИНИТИ 01.01.1994, № 413-В94.

2. Стрелкова И.Г. Свободнорадикальные процессы и состояние системы антиоксидантной защиты у детей и подростков с врожденным вывихом бедра и асептическим некрозом головки бедренной кости /И.Г. Стрелкова, В.Г. Сидоркин, O.A. Баталов // 6-ой съезд травматологов-ортопедов России (тез. докл.). - Н.Новгород, 1997. - С. 688.

3. Стрелкова И.Г. Активность церулоплазмина в сыворотке крови у детей и подростков с дистрофическими и диспластическими заболеваниями тазобедренного сустава / И.Г. Стрелкова, А.Н. Сидоркина, А.Б. Богосьян; Нижегородский НИИТО. Н.Новгород, 2001.- 6 с. - Деп. в ВИНИТИ 11.03.2001, № 601-В2001.

4. Стрелкова И.Г. Содержание холестерола в сыворотке крови детей и подростков, страдающих дистрофическими и диспластическими заболеваниями тазобедренного сустава /И.Г. Стрелкова, А.Б. Богосьян, А.Н. Сидоркина // Матер, науч. конф. "Актуальные проблемы травматологии и ортопедии" - Н. Новгород, 2001. - С. 342 - 343.

5. Стрелкова И.Г. Состояние антиоксидантной системы сыворотки крови у детей и подростков с дистрофическими и диспластическими заболеваниями тазобедренного сустава /И.Г. Стрелкова, А.Н. Сидоркина, А.Б. Богосьян // Матер, науч. конф."Актуальные проблемы травматологии и ортопедии" -Н.Новгород, 2001. - С.345 - 346.

6. Стрелкова И.Г. Содержание триглицеридов в сыворотке крови детей и подростков, страдающих дистрофическими и диспластическими заболеваниями тазобедренного сустава / И.Г. Стрелкова, Ю.И. Ежов, А.Н. Сидоркина //Клин. лаб. диагностика. - 2002. - № 10. - С. 19.

7. Стрелкова И.Г. A malondialdehyde level in blood of patients with Perthes disease / И.Г. Стрелкова, А.Н. Сидоркина, В.Г. Сидоркин //Internation conference "Reactive oxygen and nitrogen species, antioxidants and human health". — Смоленск, 2003. - С. 132.

8. Стрелкова И.Г. Активность ферментов антиоксидантной защиты и состояние перекисного окисления липидов при болезни Пертеса /И.Г. Стрелкова, Ю.И. Ежов, А.Н. Сидоркина // Межд. конф. "Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека". — Смоленск, 2005. - С. 306.

9. Стрелкова И.Г. Состояние лииидного метаболизма у детей с болезнью Пертеса / И.Г. Стрелкова, А.Н. Сидоркина, В.Г. Сидоркин //Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения заболеваний и травм. Новые направления в медицине. - Минск, 2005. - С.267.

10. Стрелкова И.Г. Обмен липидов у детей и подростков, страдающих болезнью Пертеса / И.Г. Стрелкова, Ю.И. Ежов, А.Н. Сидоркина // Нижегородский мед. журн. Приложение «Травматология, ортопедия, комбустиология». -2006.-С. 262-264.

Подписано в печать 16.11.2006. Формат 60и84 1/16 Бумага писчая. Усл. печ. л. 1. Тираж 100 экз. Ризограф 011-3750

ФГУ «Нижегородский НИИ лравматологии Федерального агентства по здравоохранению и социачыюму развитию»

Лицензия ЛР №020899 603155, г. Нижний Новгород, Верхне-Волжская наб., 18.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Стрелкова, Ира Геннадьевна

1. Обзор литературы.

1 1. Обмен липидов и его нарушения .И

1 2 Современные представления о процесса«, перекисного окисления липидов и регуляции их активности. I

1 3. Некоторые аспекты этиопатогенеза дегенера тивно-дистрофических и диспластических заболевании тазобедренного сустава у дртри и подростков.

2. Характеристика материала и методы исследований

2 1. Характеристика материала

2.2. Методы исследований . .1л

3. Результаты исследования . Г

3 1. Характеристика показателей липидного обмена . \

3.2. Результаты типирования дислипопротеидемии. . ь з.?. Оценка интенсивности свободнорадикальньк процессов по данным регистрации свьрлслаоого свсчения сыворотки крови и исследования содержания малонового диальдегида . /а.

3.4. Анализ состояния системы аншоксидантнои защиты. . г>

3.4.1. Ферменты антиоксидантнои сигпмы <

3.4.2. Антиоксидантныи рРоСрь крш и по данным исследования с оде] л мил малоноЕого диальдегида. . 1п.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Состояние липидов крови у детей при дистрофических и диспластических процессах в тазобедренном суставе"

Метаболизм липидов на протяжении последних деглпш тли является объектом пристального внимания исгледорателси, чго ci язано с универсальной ролью липидов в прощ сое жизнедеятельности организма. Лигшды - это не только осноршш источник энергии в тканях организма. Они входят f. состав mt mfy ан клеток и субклеточных структур, а также учат уют ь регуляции метаоолических процессов (Климов А.Н., Никульчеьа Н Г , 1999, Ткачук В.Л., ¿002; Назаренко Г.И., КишкунА.А., ?002; Чиркин A.A. и соавт., 2003)

В плазме крови липиды циркулируют в виде водорасп оримпу макромолекулярных комплексов, называемых липопротеидами они осуществляют транспорт липидов , жирорастворимых ьигаминоЕ. гормонов и других биологически активных веществ, а также обеспечивают перенос избыточно образовавшегося холестерина из клеток периферических тканей в печень для окисления в желчные кислоты и выведения с желчью (Холодова Ю.Д., Чаяло П.П., 1990; Титов В.Н., 19976, 20000, 2002, 2005; Gibbonn G F. с Г al , 1932; Corvilam В., 1997).

Нарушения обмена липопротеидов приводят к агеросклерпгп-ческим поражениям сосудов, которые сопровождаются разштием гипоксии органов и тканей, что способствует усилению процег сов nept кисного окисления липидов (Вогралик В. Г. г поп , 1984; Липовецкий Б. М., Виноградова! В., 2002; Коне тпнтинпе^ Е. 3., 2004). Все это является причиной развития различных патологических состоянии.

О этой точки зрения представляет большой интерес г »змол ная роль нарушений липидного обмена в развитии врожденного рн-виха бедра и остеохондропатии тазобедренного сустаЕх которые являются частыми и тяжелыми деформациями опорно-двигатепьнпго аппарата у детей, приводящие к развитию деформирующего артроза, а .затем, в 50 - 89,57 случаев, к инвалиди.зации пациентор (Минеев К.П., Белякова Л. А., 1997; Мирзоога И.И., 200и; Леди Э.В., 200?; Корольков А. И., ХмызовС.А., ¿003, Orapei СЛ., 2003, Соколовский 0.А., 2004; Богосьян А.Б , 2005; Поздникин И.Ю., 2006; Suzuki S , 2000; Bennett J.T. et al., 1991, Ziout L E et al., 2005). Следует отметить, что оба процесса связа ны с нарушениями кровообращения в области тазобедренного сустава, которые отчасти обусловлены врожденной аномапион ( ису-дистои сети в этой области (Волков М.Б., Дедова В Д., 1УоО, Маг Liée Б. О , Дедова В. Д., Беляева А. А., 1985, Допьницкии О В , Радомский А.А., 1987; Фафенрот В.А., 1990; Исаков Ю Ф. о го-авт., 1998; Русалов P. M и соавт., 2004; Baton J., 19o?; Liu S L , Но T С., 1991; Atsurni T. et al., 2000).

В литературе имеются немногочисленные пубпикации о роли обмена липидов в развитии остеонекроза гоповки бедра (Jacolo В., 1978; Lee С.К., 1980; Kawai К et al., 1985) Авторы считают, что изменения липидного метаболизма при асешическом некрозе приводят к жироЕ.ой эмболии мелких сосудов, пиыоши-головку бедра.

В работе A.L. Boskey (1983) было показано увеличение содержания холестерола и общих липидов в остеонскротичесп!/. головка/ оедренной кости, которое может спосопстгоьать гиоепи клеток вследствие нарушенного метаболизма их мембран.

Исследования, проведенные Ю.И. Ежовым с соаьт. Ш9/> и

И.А Чулошниковои с соавт. (1995, 1998), свидетельствуют о том, что у взрослых пациентов, страдающих кокоартрозом и асептическим некрозом головки бедра, часто наблюдаются гиперли-лопротридемии, сопровождающиеся интенсификацией ссоОпдт радикальных процессов.

Активацию процессов перекисного окисления липидоь при ос-теохондропатии также отмечают ряд авторов (Бьренштыш С.С., 1995; Львов С.Е. и соавт., 2005), объясняя повышенное содержание продуктов липопероксидации функциональным перенапряжением антиоксидантной системы, неполноценностью этих механизмов.

Процессы перекисного окисления липидов являю юя универсальными модификаторами физико-химических свойств оиологических мембран. Их избыточное усиление представляет оопьшую опасность для клеток, тканей и организма в целом, а образующиеся при этом в чрезмерном количестве перекиси являются эндогенными токсинами.

Наши предварительные исследования в этом напраьпении также выявили нарушения в обмене липопротеидов и усиление процессов перекисного окисления липидов у детьй и подргслков, страдающих остеонекрозом и врожденным выьихом бедра, причем эти отклонения зависили от характера изучаемы^ процьссог у оОследованных пациентов (Стрелкова И.Г. и соавт., 1у97; 2002).

В доступной литературе нам не удапось найти работ, посгя щенны/ изучению состояния липидного обмена пипирлание, ги-перлипопротеидемий, оценка процессов липопероксидации, и активности ферментов антиоксидантнои защиты) г развитии рассматриваемых костных деформаций опорно-двигательного аппарата у дегей и подростков. Можно предположить, что нарушения метаболизма липидов может быть одной из причин разЕития врожденного вывиха бедра и болезни Пертеса. Это позволяет под ноеым углом зрения рассматривать причины возникновения и прогресси-рования изучаемых процессов, протекающих в тазобедренном сус-таье у дегей и подростков, а также может способствовать раз-раоотке принципов ранней диагностики, адекьатннх методов профилактики и нехирургических методов лечения заоолевании и до клиническом периоде.

Вышеизложенное обусловливает важность и актуальность выполненной работы.

Цель и задачи исследования

Целью исследования явилось изучение липидного спектра сыворотки крови, уровня свободнорадикальных процессов и ан-тиоксидантнои защиты в условиях физиологической нормы, при дистрофических и диспластических процессах, протькаыщих в тазобедренном суставе у детей и подростков.

Для достижения поставленной цели необходимо решить еле-дующиг задачи:

- оценить состояние липидного мегаботгма у детей и подростков в условиях физиологическои нормы и при дистрофических и диипластических процессах на основании определения содержания ь крови триглицеридоь, оощего холестерола, холестерола липопрогеидов высокой, низкой и очень низкои плотнооги,

- провести гипирование гиперпипопротеидьмии в юнцюпь ной группе и при изучаемых состояниях,

- изучить свободнорадикальные процессы в условиях нормы и при деформациях тазобедренного сустава; дать характеристику состояния антиоксидантных систем по результатам изучения клеточной (эритроциты; и ьнекпаточной системы антиоксидантных ферментов - супероксиддисмугазы, каталазы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы, церуло-плазмина;

Работа выполнена в соответствии с планом НИР на ба0е спе-циалишроьанного детского травматолого-ортопедического отделения Нижегородского НИИ травматологии и ортопедии Лабораторным исследованиям были подвергнуты пациенты с iврожденным вывихом бедра (143 человека), болезнью Пертеса (57 чогювек) и практичьски здоровые дети и подростки (228 человек), которые (.оставили контрольную группу. В процессе ьыполнения работы проведено 2960 биохимических исследований.

Новизна научных исследований

1 На основании результатов определения показателей ли-пидного спектра сыворотки крови здоровых детей и подростков (контрольная группа, 228 человек) рассчитаны референтные диапазоны нормы общего холестерола, холестерола липопротищов высокой плотности, холестерола липопротеидоь низкой пигл ногти и холестерола липопротеидов очень низкой плотности, а также григлицеридов. Не выявлено статистически значимы): различий изучаемых показателей в зависимости от пола и возраста; л Рассчитаны диапазоны физиологической нормы показателей интенсивности свободнорадикальных процессов (гю дзнннм регистрации спонтанной хемилюминесценции cutоротки 1роьи, определения в ней малонового диальдегида), а также активности систем антиогсидантной защиты (церулоплазмин, суперпкгид-дисмутаза, каталаза, глутатионредукгаза и глугатионпгрокьи-даза);

3. На основании проведенного типирования гиперлипопроте-идемип выявлена взаимосвязь нарушений липидного метаоолизма о развшием дистрофических и диспластических процессор р тазобедренном суставе у детей и подростков, разраоотан iпособ дифференциальной диагностики осложнении tрожденного вывиха бедра (коксартроз или асептический некроз головки Оедренной кости) (положительное решение ФИПС от 03.10 06 г о выдаче патента по заявке N 2005131558);

4. Установлено возрастание по сравнению с физиологической нормой процессов перекисного окисления липидов у детей с деформациями тазобедренного сустава;

5. Отмечена активация ферментов антиоксидантной игстгми кроЕИ, которая усиливается с утяжелением дистрофического про цесса. На основании выявпенной зависимости изменения активности супероксиддисмутазы в зависимости от характера течения остеохондропатии головки бедренной кости разработан способ дифференциальной диагностики стадий болезни П^-ргеса (положительное решение ФИПС от 29.06.06 г. о индаче патента по заявке N 2005115009);

6. Выявлено истощение аннюксидангного pir^pt^ плч мы крови и эритроцитов при врожденном вывихе бедра и 01 теохонд-ропатии тазобедренного сустава по сравнению с физиологическом нормой.

Научно практическая значимость работы

Работа расширяет представления о причинах и хк >лшг,мау инициации и прогрессировать изменений в тазобедренном суставе, приводящих к глубоким нарушениям анатомического и функционального характера, способствует разработке адекватны< методов профилактики и лечения заболеваний. Предложенные биохимические методы лабораторной диагностики этих состоянии, основанные на результатах определения в крови пациентов липидного профиля, интенсивности процессов перекисного окисления лили дов и актигности ферментов антиоксидантнои системы дадут возможность клиницистам повысить качество ранней диагностики, следить за динамикой течения изучаемых процессов, своевременно проредить коррекцию и использовать их для выявления Iрупп риска при массовых популяционных обследованиях у детей, начи ная с раннего возраста.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Липидный метаболизм в условиях физиологическои нормы характеризуется сбалансированностью показателей липидного спектра крови - липопротеидов различных классов и триглице-ридов, о чем свидетельствует высокий уровень нормолипопроте идемии (93,3'), зафиксированный у детей контрольной группы. При этом активность свободнорадикальны* процесса ад^кьатно лимитируется сопряженными с ними системами антиоксидантнои оащитп.

2. Выявленные отклонения в содержании в сыворотке крог-и различных фракции липидного спектра и высоким процент дисли-попрптеидемий при исследуемых заболеваниях по сравнению с ФИоИОлогической нормой, свидетельствуют о егя.,и наруш! ний пипидного метаболизма с развитием дистрофически* и ди> пластических процессов в тазобедренном суставе.

3. Изменения в тазобедренном суставе дистрофического и диспластического характера сопровождаются интенсификлциит процессов перекисного окисления липидоб.

4. Дистрофические и диспластические процессы сопровождаются активацией различных систем антиоксидантнои защити. По мере их утяжеления и интенсификации свободнорадикапьных реакций антиоксидантный резерв изучаемых биологических систем снижается.

Апробация работы

Основные положения работы доложены и обсуждены на iv съезде травматологов и ортопедов России (Н.Новгород, 10У7г.) и на Международной конференции "Reactive oxygen and nitrogen specie^, antioxidants and human health" (Смоленск, д)СПг.), научных совещаниях и семинарах отделения лабираторнои диагностики ФГУ "ННИИТО Росздрава" (2002, 2003, 20п5).

1. Обзор литературы

1.1. Обмен липидов и нго нарушения

L иргчнизме человека липиды содержатся в диюнироЕаннпи Форме и выполняют самые разнообразные Функции. Они служат и* -точником знрргии, входят в состав клеточных меморан, oonnt ют вьк окими теплоизолирующими свойствами, выполняю1 г opia низме сигнальные функции, являются кофакторами, принимающими участие в ферментативных реакциях (Климов А. II , Никульчеп Н.Г., 1999; Назаренко Г. И., Кишкун A.A., 2002; Марри Р. и гг. авг., 2001).

Осногными липидами, находящимися р плазме кроги чеппг ка, яеляются жирные кислоты, триглицериды, фосфюлшшдн, i таклсе холестерол и его эфиры.

Жирные кислоты (ЖК) представляют углеводородную цепь, ю стоящую и. 4-х и более атомов углерода. В организме чел »и* а содержатся насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты с длин ной и неразветвленнои цепью из 16 и 18 углеродных атомоь

Насыщннные ЖК, окисляясь в митохондриях, яеляются осн >г-ными поставщиками АТФ для клетки. Полиненасыщеные ЖК выполняют структурную функцию, определяют специфичности клгтг1чнн< меморан и являются предшественниками синтеза эйкозаниид'i простагландинов, тромооксанов, лейксприенов Питмь L II., 19970)

Иерпюсчиком свободных ЖК являются альбумины, пднчю jp-новная масса ЖК циркулирует в составе эфиров холи п-рпл1 (15У), фо^фолипидов (35/0 и триглицеридоь (15/) nimoiipoTt щ ных комплексов. Общее содержание неэстерифициританных лчцнн' кислот в плазме крови Езрослих здоровых людей составляет 0,28 о, 71 ммоль/ji (Климов А Н., Никульчева Н.Г., ЮЭ^j

Триглицериды (ТГ) представляют собой эфиры трн-упомн ги спирта глицерина и высших жирных кислот. В зависимости от числа я ирных кислот различают moho-, ди- и триглицериды. Гун -ацилглицериды, как правило, содержат смесь жирных пи лот и синтезируются в печени, тонком кишечнике и жировои ткани но глицерофосфатному и ß-моноглицеридному пути (Галлер Г. и го авт., 1079; Mansbach С.М. et al., 1982).

Триглицериды циркулируют в гидратированнои среде i i ос-таве липопротеидов и хиломикронов. Их функционапьная р »ль заключается в активном участии в транспорте жирных кислит i клеткам (Титов В.Н , 2000в). Содержание ТГ в плазме криги здоровых людей варьирует в пределах 0,56 - 2,15 ммоль/ п t К ни мов А Н , Никульчева Н Г., 1995), а у детей о, 40 1,Г>С ммоль/л (Шабунина Е.И и соавт., 2004). фосфопипиды (ФЛ) представляют соОой соедит ния, оодны^ с тригпицеридами, но один из остатков жирных кислот . амещнн фосфатом и азотистым основанием. Молекулы ФЛ могуг опт, лп-няться друг с другом и образовывать молекулярные мпно и си слои в виде пленок. Это свойство лежит в основе образа ания биологических мембран и липопротеидных частиц (Климов А 11., Никульчева Н.Г , 1999). ФЛ легко образуют комплексы с 'ока ми, чем и объясняется преимущественное их участие ь Формиро ьании клеточных оболочек и внутриклеточных мембран, фисфоли пиды играют важную роль в структуре и функции клеточных мрм бран, агитации мембранных и лизосомальных энзимов, прежде нии huplhbix импульсов, свертывании крови, иммунологич^ пк реакциях, процессах клеточной пролиферации и рненерашш и v нси, транспорте электронов по дыхательной цепи, а таьк»- \>; всасывании продуктов расщепления жиров. Таким ооразом, и-' Функция ь организме млекопитающих очень многообразна и д» конца ощь не выяснена.

В плазме крови человека содержится ?,0 -4,1 ммоль л фосфолипндоь (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1995), а дстри

1,07 - 4,68 ммоль/л (Шабунина Е.Н и соавт , 2001).

Хилестерол (ХС) относится к классу стероидов, в его 3-м положении расположена гидроксильная группа, or>yi паьлирающ )я полярный геойстеа этого соединения, а от 17-го атома утл^р) да отходит боковая разветвленная алифатическая цепь из Р атомов углерода.

ОсноЕное биохимическое превращение ХС - образование эфирной связи с кислотами, прежде всего с неэстериФнцированными ЖК. При этом он почти весь является компонентом биологич( ких меморан, где содержание его в наружном монослое сущм г венно гыше, чем во внутреннем. В то же время в сыьорпгке (плазме) крови 2/3 этого метаболита представлено ь Форме эфирносвязанного холестерола (ЭХС )(Колоскова С.В и u>dPT , 2001) Источником экзогенного ХС служат продукты лиьиттп происхождения. Однако он не имеет жизненно важного зрнчшп, так как достаточное количество его синтезируется в нечыш и, аиетил-КоА при участии фермента ß-гидрокси, ß-метилглутарил кознзим А-редуктазы. Холестерол экскретируется с желчью пипо в неизменном виде, либо в виде продуктов его метаболизм 1 желчных кислот (Титов В. М., 20000; Ткачук H.A., /002).

Концешрация общего ХС ь крови определяется скоростью поступпения этого соединения из плазмы в клетки и скоростью его транспортировки из клеток в кровь (Лопухин Ю.М. и со^л., 1983; Маршалл В.Д., 1999) Уровень ХС ь плазме у здоровых пы дей колеблется в пределах 3,88 6,46 ммол/л, а у дет^и 3,11 - 5,18 ммоль/л (Тиц Н.У., 1997).

Физиологическая роль ХС многообразна. В биологических мембранах он яЕляетея пластическим материалом, обеспечив )я их стабшиность. Но основной функцией данного стероида Я1 in ьтся к] атдосрочная адаптация клетки в условиях р^кого нения химического состава межклеточной жидкости носредстl ом мооилизации холестерола из депо путем гидролиза ЭХС и chhlv за ХС de novo (Титов В.H., 20006).

Br е представленные липиды плазмы транспортируются f щл-ротокр ь гостаье липопротеидных комплексор (пипопротеидны ' часлиц), структура которых рассмогрьна ниже.

Липопро1еиды (ЛП) плазмы крови яеляются высокомолекулярными Еодорастворимыми частицами, представляющие собой коми леке белков и липидов, образованный некоьалешными связями и обоспечиЕающий транспорт липидов как экзогенного, тиь и эндогенного происхождения в систему циркуляции, а далее - к месту утилизации или депонирования (Титов В.Н., 19473; Map шалп Е.Дж., 1999). Отдельные ЛП осуществляют \.ахват" избыточного ХС из клеток периферических тканей и его "обратный" транспорт в печень для окисления в желчные кислоты и выгоде ния с желчью. Кроме юго, ЛП осуществляют транспорт жирорл, ТЕорИМЫХ ЕИТаМИНОЕ, гормонов и Других биологически аПИЕНЫ/ ьеще< г1в.

В современной литературе представлены различные глин строения ЛП. Плазменные липопротеидные частицы имекп (фиги ческую Форму, внутри находится жировая "капля", иодь} жлщая неполярные липиды (ТГ и ЭХС), формирующая гидрофобное ядро ино окружено оболочкой, состоящей из монослоя ЛИПИДОЕ иМ, НЭХС) и белка (апопротеины), которые формируют повер/Ниспши гидрофильным слой, защищающий внутреннюю гидрофобную лиши ную сферу о г водной среды и обеспечивающий растворимо^ rt и транспор! липопротеиднои частицы в этой же водной грьд« (lei -тов В.Р и соавт., 1995) Апопротеины выполняют функцию пи гандоЕ при взаимодеисгвии липопротеида со специфическими р цегпорами на клеточных мембранах, поддерживая гомгосп: ' ^ стеропа в клетках и в организме в целом (Титов L. И., Chatterton J.E et al , 1995), регулируют актиЕность некото рых ферменюв липидного обмена - лецитин-холитерол ацип трансферами, липопротеидлипазы, печеночной триглицеридлшп и

На риг. 1.1.1 показана схема строения липопротеиднои истицы, а на рис. 1.1.2 - ее трехмерная модель. 1акая струпу миле г обеспечивать непосредственный контакт белковых моласуп с липидами. Интргральность структуры ЛП-частицы обеспечив а ет^я гидрофобными и, ь меньшей степени, ионными связями, при этом имеют место следующие взаимодействия: липид-лигшд, лн-пид пелок (Титов В.Н , Творогова М.Г., 2001).

Классификация и номенклатура ЛП плазмы крови основаны на определении электрофоретическои подвижности и пи на скорости Флотации и ценрифугировании в солевой среде при заданной ьн личине плотности (табл. 1.1.1).

На основании подвижности ЛП в электрическом поле их делят на фракции, одна из которых остается на старте (хиломик рони), другие мигрируют к зоне глобулинов - (5-ЛП, прг-р-ЛН, а-ЛП По величине гидратированной плотности ЛП принято депять на четыре класса, хиломикроны (ХМ), липопртоиди очень низкой плотности (ЛПОНП), липопротеиды ниокои илптн »с ти (ЛПНП) и липопротеиды высокой плотности (ЛПВП).

Хиломикроны плазмы человека являются самыми крупными ЛП-частицами с необычно низкой плотностью (сКО,^), блп1оДфя чему они г сплывают при обычном центрифугирорании шш дгшкш -ном гюянии плазмы г пробирке. Они ооразуются в эпитргшль ных клетках кишечника из пищевых жиров (в основном !ь ТГ и ХС), попадают в лимфатическую систему через грудной проток.

ХМ ЯВЛЯЮТСЯ ОСНОВНОЙ ТраНСПОрТНОЙ ФОРМОЙ ЭК^ОГеННЫ/ АИрОЕ , которые освобождаются из них под действием фермента лшюп! -тсидлипазы (ЛПЛ), расположенной на поверхности эндотелия Iрп всносных капилляров жировой ткани, миокарда, ск^летньк мышц и моночных желез, е результате чего свободные ЖК поступаю! е клетки и используются в качестве энергетических субстр)т( ь

В процессе гидролиза ЛП частицы теряют 96/ г вой! пг ы, ь оьноенмд за счет триглицеридоь, а также апо£ и С-П и 141-?

Периферическим »побелок (например, АлO'Ci преиму щ«. твенио змфипатическими липидами

Рис. 1.1.1, Схема строения частицы липопротеидов {Марри Р. и соавт., 1993)

Рис.1.1.2, Трехмерная модель частицы липопротеидов низкой плотности (Brown М., Goldstein J., 1984)

Характеристика линспротеидсв (из раоота! М.Г. ТЕороговой, 2СС1; вкдоизменеьа,

Обозначение Хклсь:икроны ЛГОНЛ ЛПЬГ J *пвп

1 2 3 4 5

ПгОТНОСТо 'Г/мл < 0,95 0,96 - 1,006 1,02 - 1,063 1,064 - 1,21

Дламетр (чи^ > 100 43 22 8

Электрофоретическая подвижности остаются на старте гтое р яре Р а

Место образования тонкая кишка печень катаболизм ЛПОНП печень, тонкая кишка, катаболизм ХМ и ЛПОНП

Основная функция Состав: трлглкцеридги ( ^ транспорт экзогенных ТГ 90 транспорт эндогенных ТГ 65 транспорт холестерсла 5 обратный транспорт холестерола 5 слестер~>л ) 5 15 50 20 сфолппиды ' , 1 ч 10 25 25 селок 1 10 20 50 --4Я, с, Е Э-1СС, Е, - Е-1 0 0 С, Е, Д ращаю!ья г ремнанты ХМ. Освобожденные с поверхности ХМ хот-стерол, фосфолипиды, апоА и апоС поглощаются ЛПВП. Обработанные остаточные компоненты ХМ имеют гидрагиросанную плотн< *ti Л1ЮНП и ЛПГ1П. В норме из сыворотки крови их элиминируют r-iu-тоциты посредством специфических рецепторов (агюЕ-рецептпрьь (Титов В.Н., 2000в; 2002; Титов В.Н., Творогова М Г , ¿0О1>.

Липонротеиди очень низкой плотности по своим физико-/имн ческим свойствам сходны с хиломикронами, но тем не мен^ они принципиально отличаются по транспортной функции, так к ik пе реносяг эндогенные триглицериды, синтезированные в печени. Гепатоциты синтезируют апоВ-100, который связывает оптимизм роьанныс экзогенные и синтезированные de novo эндогенные JKK, образуя насцетные ЛПОНП (н-ЛПОНП). В просвете кроряного си нуоиида н ЛПОНП также включаются апоС-П и апоЕ из ЛПВП, i результате чего формируются ЛПОНП. В дальнейшем происходит обмен липопротеидных компонентов ЛПОНП с мембранами эритро ци тоь, луикоцитов и других клеток, их деградация под влияни ем пиполитических Ферментов - гепаринзависимой ЛПЛ и печ( ни чной триглицеридлипазы. По мере того, как ЛПОНП умтымкт^ч в размера/, от их поверхности отщепляются ФЛ, свободный vi ц аполипопротеины, которые поглощаются ЛПВП (Tall Егез1о// J., 1996; Eckardstem А., Азыпап G., 1998) При этом ЛПОНН через промежуточные структуры превращаются в ЛПНП

Лигюпротеиды низкой плотности являются наибоцее ат^р темной Фрнциеи лмпопротеидов. В составе ЛПНП содержи юя примерно 2 3 ьс^го холестерола. В огличие от ЛПОНП в оболочки ч il тицы ЛПНП содержание фосфолипидов возрастает до гп :о (Кпимов к. II., Никульчева Н.Г., 1У99).

ЛПНП в результате различия их функциональных owjCVhhui геи и в соответствии с их плотностью разделяют на ipn < ¿о класса- легкие (ЛПНП-1), промежуточные (ЛГ1НП-2) и л потны» (ЛПНП-3) ^Титов В.Н., 2000Е, 2004, Chapman M.J. el al , 1*»GV,)

Все они ягляются продуктами последовательных мстаоолических превращений ЛПОНП, протекающих главным образом ь токе крипь

В ходе гидролиза триглицеридов и освобождения i поьрр*'-ности этих липопрптеидных частиц ФЛ, апоС и Е происходит оо-разогание комплексов, богатых эфирами ХС и белком (апоГ), ко торые после взаимодействия с рецептором клетки подвергаются эндоцитозу (De Paria Е. et al., 1996). Эндосомы, поглошвшис ЛПНП, сливаются с лизосомами, где компоненты ЛПНП кат.юопи^п руются, при этом происходит освобождение свободного холп те рола. Таким образом осуществляется функция снаожсния кл( юк периферических тканей холестеролом, который используется для построения мембран, а в тканях внутренней секреции синп а стрроидны> гормонов, в печени - желчных кш лот.

Считается, что ЛННП становятся атерогенными только посдр опред» ленных превращений, в частности, в результате перекис ного окисления (Коган А.Х., 1999; ТертоЕ В В , 1999; Оенкоь H.H. и соавт., ¿001; Esterbauer Н. et al., 1991, Dieber kut-heneder M et al., 1991; Anderson J W et al , 1999). Окисленные липопрогеидные частицы захватываются макрофагами, ю торые после этого превращаются в "пенистые клетки", нагружен ные эфирами холестерола, являющиеся классическим компоненюм атероматозных бляшек.

Липопротеиды высокой плотности (антиатерогенныь Л1Ь п] ^д— ставлены наиболее маленькими частицами, весьма Рогатыми ф.офо липидами и оелками Они синтезируются преимущественно в m чс ни и, в мгньшей степени, в клетках тонкого кишечника (Климег А.Н., Никульчева Н Г , 1999) Эю так называемые иьрппшь ЛПШ, имеющие форму диска (Титов В. Н., ¿000а) Началвши-ЛПВП захватывают свободный холестерол из клеток, ХМ и ЛПоНП, превращаясь в ЛПВП-3 Далее фермент лецитин хопеетерол опил-трансфераза использует ХС для этерификации iiept не сенны* ir энтерпцитоЕ полиненасыщрнных жирных кислот с пора- ut ihw м эфироь хопестерола, которые мигрируют в ядро липопротецднои частицы, превращая ее в сферическую форму. Часть образовавшихся зфиров ХС транспортируется в составе этих ЛП в печень, другая - переходит из ЛПВП-3 в ЛПВП-2 и при участии Оеика, переносящего эфиры холестерола, передается на ЛП, содерпщие апоВ, что приводит к снижению эфиров ХС и угеличению 1Г t ЛПРП (Творогова М.Г., 2001; Мс Pearson R., Marcel 1991). Обогащенные триглицеридами ЛПВП-2 подвергаются дрйстбию пече-ничнои тригпицеридлипазы, при этом происходи! пиполи. If, о->-вобождение эфиров ХС и превращение ЛПВП-2 в ЛПЬП-3. (;сгиб «ж денные ЗХС в составе апоВ,Е рецепторов доставлякися в печень для окисления в желчные кислоты, а также в другие органы и ткани для дальнейших преобразований.

Таким образом, основными функциями ЛПРП являююя транс порт полиненасыщенных жирных кислот и краткосрочная адагт ция клетей в условиях резкого изменения химического ooi iaiа межклеточной жидкости (Липовецкий Б.М., 1Э97; Титов Р.Н., ЯОООа; Tada II., Yoshida H., 2003). В сосудистом русле роль ЛПВП заключается в удалении из 1сровотока ЭХС и ТГ, a ri гкл^ г осуществлении обратного транспорта ХС из ткани ь печень дгн окисления в желчные кислоты (Курашвили Л.В., 199/; Ткачук В.А., 2002). Следует отметить и другое важное своттво ЛПН1 - это способность стабилизировать ЛПНП и защищать их от пик-литииной деструкции по перекисному типу (Климоь А H и г и авт., 1997, 1999; Khoo J. et al., 1990; Barter P. т et Л , 2004).

В з1ключении можно сказать, что ЛП плазмы крови, разд» -пенные на классы физическими, химическими и иммунологичи ги-ми методами, метаболически составпяют единную систсму.

Крушения метаболизма липопротеидоь характеризует я по вышешим нигшдоь и ЛП крови (гиперлипопротеидемия;, ( шш ни ем (шюлипопротеидемия) или изменением соотношения г ни сов липидов и липопрогеидов (дислипопротеидемия).

Дислипопротеидемия (ДЛП) - один из главных факторог рис ка многих заболеваний, в первую очередь атеросклеротичегки> поражении сосудистой системы. Необходимо подчеркнуть, что ДЛП может быть специфически первичным проявпением нарушении в обмене липидов и липопротеидов, имеющих генетическую при роду, а также зависить от фактороь окружающей среды, в частности, от рациона и режима питания, сопутствующих забошва нии

Наиболее распространенными типами ДЛП яеляются 1Л11 Па, ПО и IV типа, в то время как ГЛГ1 I, III и V шпа встр< чаются очень редко. Также редко обнаруживаются и другие дш липо-протридемии - дис-альфа-липопротеидемия, гипо-зльфа-лииопри теидемия, ан-альфа-липопрогеидемия, гипо-бета-липопрогеиде-мия (Шевченко Н.Г., 1986; Климов А.Н , Никульчева Н.Г. , 1 ЛО; ОиггшрДоп Р , 1995)

Гиперлинопротеидемия I типа - гиперхиломикронемия, редко встречающееся наследственное заболевание. Характерно резкон увеличение уровня триглицеридов, при этом уровень холестнро ла в плазме нарастает не столь значительно. Причиной данного типа является генетически обусловленный дефект, в осноЕе ю-торого лежит отсутствие способности организма Еыра^атыг ш липопротеидную липазу, расщепляющую богатые триглицнрцпми липонротеиновые частицы. Атеросклеротических изменении при этом типе ДЛП не наблюдается, так как ХМ не ооладают лт»рп генным действием.

Гиперлипопротеидемия Па типа - гипер-бета липопритчц емия. Это генетически детерминированная гиперхолестеролемпл Различают гомозиготную семейную гиперхолестеринемию, при которой клетки не имеют апоВ-100 рецепторов, и гетерооиготную фирму, когда число рецепторов снижено в 2 раза. Причиной < л кады поглощения клетками полиненасыщенных жирных кислот ямлстоя генетически обусловленное отсутствие синтеза агюЕ 1 >0 рьцептороЕ, реже - генетический дефект последователе сгп аминокислотных остатков в том участке молекулы апоВ-100, ко торыи формирует лиганд для апоВ-100-рецептора (Титов В.Н., ¿001) Из-за отсутствия апоВ-100-рецептороь или непоиноц^нн )-сти лиганда клетки не могут поглощать ЛПНП-2. При болен длительной циркуляции ЛПНП-2 в кроги продолжается липолиз. Е рг зультате (формируются ЛПНП-3, лишенные активного лиганда. Ней трофилы путем сиалирования, ацилирования и перекисного oim, ления апоЬ-100 вызывают модификацию ЛПНП, а моноциш и миро фаги поглощают ЛПНП-3, образуя пенистые клетки, а .затем jie ромы, субстратом которых будут этерифицированные ХС эиунциальный поли-Ж. Содержание общего холестерола в плазме кроги пациентов повышено в основном за счет холестерола ЛПНП, кон цьнграция триглицеридов находится на уровне нормы, ХМ ni\yri труют Нарушение липидного метаболизма по этому типу ьеД(Т г развитию атеросклеротического поражения сосудов, в пррЕую ичк редь - сосудов сердца, что сопровождается развитием ишьмпчрр-кои болезни и зачастую инфарктом миокарда ь молодом вг^ритг Кроме того, у таких пациентов наблюдаются ксантомы кожи и < / хожилий.

Гиперлипопротеидемия 116 типа - гипер-бета- и гиперпрс-бета-липопротеидемия, характеризуется гиперхолестеринемиеи, ооуспоьленной увеличением содержания в крови ЛПНП, и гипе^т-риглпцеридемиеи за счет возрастания в крови ЛПОНП Эют тип достаючно близок к IIa типу по генезу заболевания, но итпп чается липидным суостратом атеромы, который составляют липи ды ЛПНП-1, смссь ТГ и поли-ЭХ. Причинои данного типа ж нян1-оя блокада гидролиза ТГ в ЛПНП-1 за счет низкои активна ш пи попротиидлипазы (Титов В. Н., ?000в; Huttunen J. ft iL, 1

Гит рлипипротеидемия III типа (дис-бета-лшюпро^ идемлч; - pt д!о»е ^аболеванир, возникает при нарушении структуры im белка Е, что способствует увеличению концентрации в плам крови ЛПОНП и ХМ (Титов В.Н., 2005). Концентрация холеотеро ла и триглицеридоь повышена. Образование дефектных изофпрм апоЕ сочетается с другими метаболическими аномалиями - ди i бггом, гипотиреозом, которые способствуют образованию Oni х тых триглицеридами липопротьидных частиц.

Гиперлипопротеидемия IV типа - гиперпре-бета-липопрс rni демия. Этот тип ГЛП встречается достаточно чаек» и осябишо характерен для зрелого возраста. В плазме крови поеыннспл содержание триглицеридоь за счет нарушенного гидролиза е кро-ьи эндогенных триглицеридов, идет накопление ЛПОНП в результате медленного превращения их в остаточные ЛПОНП (Гигов Р II. 13970). Причина блокады гидролиза ТГ в линопротеидах ити ы низкой плотности заключается в избыточном сод« ржании i т[»и глицеридах пальмитиновой кислоты. Концентрация общего Уилео-терола находится в пределах нормы или увеличена также 3d счет ЛПОНП. Холестерол ЛПНП не возрастав!.

Клинически ГЛП этого типа проявляется поражением кпр< нарньг/ и периферических сосудов, развитием ишемичеепщ ои лезни сердца, но прогрессировать атеросклеротического искажения сосудов идет медленно.

Гиперлипопротеидемия V типа - гиперуиломикронемия и ги-riepnpf - бета-липопротеидемия, обусловленная повышением i н центрации уиломикронов и ЛПОНП. Это редкое забилканш, i рактеризующееся отсутствием активности липопротеидлипази и тяжелой гипертриглицеридемией, при котором резко онил^ тс я толсраншость к жирам и углеводам (Титов В. Н., 20п\ Barter P.J. et al., 1Э90).

Гатим образом, выявление разных типов ДЛП даст визм i ность получить диагностическую информацию о нарушении ]ранс-портной функции ЛП и поглощении клетками разных клаг^оор пи-пидив, чю позволяет назначать адекЕатное лечение и щ i iho ироглть исход течения патологического процесса.

Липидныи метаболизм тесно связан с перекисным окис цент м липидиЕ, так как субстратом окисления активными Формами ки -лорода являются жирные кислоты, которые в крови циркулируют в состава липопротеидных комплексов.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Стрелкова, Ира Геннадьевна

129 Выводы

1. Липидный согтаь сыроротки крови здоровых детей и под росгкоь, х фактеризуется сбалансированностью содержания об щеги ^'олгРтерола, холестерола липопротеидных частиц различных Фракций и триглицеридов, о чем свидетельствует еысокии процент выяепенных нормолипопротеидемий (93,3/), в то Еремя к 1К нарушения этих соотношений - гиперлипопротеидемии, еос-таьили ь, V. Липидныи спектр сыворотки крови пациентов, страдающие дистрофическими и диспластическими процессами в тазооедрен-ном суставе, отличается от такового при физиологическом нор ме и характеризуется увеличением общего холестерола (нл 16/), холестерола липопротеидов низкой (21%) и очень низкой плглноьтп (16/), триглицеридов (46/), а также возрастанием до пи хопестерола атерогенных частиц липопротеидов по сраЕнению с контролем.

1 Результати гипирования дислипопротеидемий сгидетьль I тг.уют о связи нарушений липидного обмена с развитием дистрофических и диспластических процессов в тазобедренном сус-таьс. Ропич( ство гиперлипопротеидемий Па типа увеличивает! я пи сравнению с контролем в 4,9 раз, IV типа - в 6, суммарно гиперлипопротеидемии Па, 116 и IV типа - в 6,5 раз. Болезнь Перке а сопровождается возрастанием частоты обнаружения ги-пернипощ отеидемии По типа в 2,8 раза по сраЕ нению о ьрг 5денным еыьихом бедра

1 Изменения в тазобедренном суставе дистрофического и дисшпстического характера характеризуется интенсификаииеи процнсы>е нерекисного окисления липидов по данным решсцм ции сверхслабого свечения сыворотки крови, которое оказано» в б ышг в ?, 1 раза по сравнению с образцами сыворотки е контрольной группе, а также увеличением содержания малонового диал}дегида как в плазме, так и в эритроцитах ь Дистрофические и диспластические процессы в гп-обед реннг.м суставе и сопутствующая интенсификация свободноради-кашиы^ реакций сопровождается активациеи различных зЕепвеЕ (исюмы антиоксидантнои защиты. Активность суперокгиддиьму-тазы, по сравнению с контролем, повышается на 56°', глутатп-онредукта.зы - на 14%, содержание ферментативно-актиьного це-рулоплазмина - на 4.0%. и Ангиоксидантныи резерв плазмы крови и эритроцитов, рассчитанный по содержанию малонового диальдегида, при врожденном швихе о^дра и остеохондропатии тазобедренного суста ьа 1 езко снижается в сравнении с контролем: в плазме на РО/, эритроцитах на 49/. Наиболее выраженный дефицит антп-оксид 1нтного резерва наблюдается при остеохондропатии - в плазме на '¿о/, в эритроцитах - на 40% - ниже, чем при врожденном вывихе бедра

7. Полученные результаты, свидетельствующие о выраженных сдвигах в ооиене липидов, интенсификации свободнорадикальних процессов, изменениях в системе антиоксидантнои защити, яв-пяюпя доказательно ¡вом вкпада этих нарушений в инициацию и пригрет сироЕ ание дистрофических и диспластических иоминении в 1гзобедр! ннм иуставе, которые проявляются у детей и под ростков начиная I раннего возраста, что в конечном итоге позволяет с ноеы/ позиции рассматривать проблемы Еогникнпье ния и разЕИ'ШЯ, СЕоевременной диагностики, профилактики и разраоопл эффективных методов лечения данных заболеь шии

Заключение

Липиды играют исключительную роль в нормальном функционировании растущего организма. Они обеспечиваю! пластические функции, энергетические процессы, оказьшают влияние на имму нологические факторы, участвуют в формировании компонент} свертывающей системы крови и клеточных Езаимодеиствия^ (Кпи мов А.Н., Никульчева Н.Г., 1999, Назаренко Г И , Кишкун А А , 2002; Марри Р. и соавт., 2004).

В кровотоке липиды (жирные кислоты, холестерол и его эфи-ры, тригпицериды, фосфолипиды) транспортируются е ам оциацпи со специфическими транспортными белками (апопротеинами), формируя сложные надмолекулярные комплексы, которыг на осногании определения элекгрофоретической подвижное1И, гидратированноп плотности и скорости флотации делятся на несколько классов

Разнообразие и уровень липидов в клетках, ткапл/ и гргп нах определяются процессами липидного метаболизма, кот^лк включают их транспорт, поглощение, использование клетками, синтез de novo, разрушение и выведение.

Липидныи метаболизм тесно связан с перекионым окислением липидов (ПОЛ), так как жирные кис поты, циркулирующш l кроь и в составе липопротеидных комплексов, являются (уостратом окисления активными формами кислорода.

Образующиеся продукты ПОЛ выполняют в организме ощлде ленные Физиологические функции - наряду г обновлением июли гических мембран, они оказывают влияние на ее прошшаеми( ть, изменяют митотическую активность клетки, участвуют в iany* rv воспалительных реакций, процессов фаю и пиноцитоса, а ТтК же в регуляции биосинтеза простагландинов, леикотриеноь и г. д (Дубинина Е Е , 1989, Маянский А.Н., Маянекий Д.H , 1сИ9; Владимиров Ю А и соавт., 1991; ЗенковН.К., МеныцикоЕч Е. С., 1993; Parler C.W. et al., 1994; Arnold J., 1999) Игглрдоеп-ниями многих авюров доказано, что значительна псвипн нш пк тигности СЕоОоднорадикального окисления липидов ведп it глубоким нарушениям мембранных структур, которые связаны с ио разоЕанием межмолекулярных липид-лииидных и липид белкоьых "ciuhfok", приводящих к изменению физико-химических свойств липидного матрикса, и как следствие, к снижению его "текучее ти", нарушению ориентации жирнокислотных остатков фосфолигги-дое, усилению пассивной ионной проницаемости (Ьилешо М.В., 1989; Ряоов Г.А. и соавт., 1991; Пасечник И H , /Oui, omît nam N et al., 1998; Haulica Let al., 2001; Fuji ta T , 20M.

E прицьссе эеолюции для защиты от повреждающего деисшгя пергкисного окисления липидов жизненно важных субстратов и для поддержания пероксидных метаболитов на нормальном уроЕне создана эффективная система антиоксидантов, f ( остав которой входят многочисленные биологически активные вещества и метаболиты ферментативной и неферментативной природы (ВладимироЕ Ю.А., Арчаков А.И., 1972; Андраханова Б.В , Лунина F А., Ленская Е.Г., 1990, Кривожухина Л В. и соавт , 200u; Puthie ч.G. et al., 1990). Ослабление какого-либо звена антиоы шинной системы обязательно приводит к активации реакций ПОЛ, нару mat гея существующая между ними взаимосвязь, в резулпсае происходит накопление вредных продуктов, изменение функции м» и брш, что способствует нарушению гимеостаза клетки

Интерес к изучению системы липидного метаболизм i ооуьловлен ее важной ролью в жизнедеятельности организма, а также тем, что нарушения ее функционирования приводит к ате роскперотическому поражению сосудов, развитию гипоксии rroi j состояния тканей, что способствует активации процессов пе^н-кионого окисления липидог», зачастую приводящих к возникновению различных альтераций (Давыдова A.A. и соаьт., 19-^П; Ду оинина Е.Е., 2001; Волчегорский И А. и соавт., 2003, Р.юипь-ева Е M и соавт , 2005; Gutteridge J. M., ЮЭ5; J un -S К , Pa line 1 IL, 1997, Haulica I. et al., 2001)

Нас интересовало состояние липидного обмена и визможная роль его нарушений при развитии таких частых и тяжелых деформации опорно-двигательного аппарата у детей и подтип л, какими являются врожденный вывих бедра и бол^нь 1Ь ] т» < i, которые приводят к развитию деформирующего артроза и в 50 90/ олучаев - к инвалидизации пациентов (Минеев К.П , Беля-KOEd Л А., 1997; Мирзоеьа И. И., 2000; Педь Э.В., 20iv; Огч ревЕ.В., 2003; Bennett J.T. et al., 1991; Kerry P.П., °i rnonds G.W , 1998 ).

Имеется большое количество различных теорий о причинах развития дисплазии тазобедренных сустаров и асептического некроза при болезни Пертеса, многие из которых предо иг л m интере» , но не могут объяснить всего сложного продев а. Центральное месю в возникновении остеохондропатии тазосед-ренного сустава занимает сосудистая теория, раосматржающая возникновение некроза голоьки бедренной кости к^к < ппдппь первичного нарушения ее кровоснабжения и ткешеи супи-шй капсулы (Фафенрот В.А., 1990; Русалоь P.M. и соавт., 2пи4; Patori J.m 1982; Liu S.L., Но Т.е., 1991; Atcumi T. et al ,

2000). Врожденный вывих бедра логично рассматривать каг первично системное изменение метаболизма, которое проягпяеюл поражением тазобедренного сустаьа, приводящее к рахитик) дегенеративно дистрофических процессов и отчасти также сЕЯзано с нарушением кровоснабжения в этой области (Волков М В , Дедова В. Д., 1980, Поздникин Ю. И. и соаьт., 2П01; Ким I ь , МасЕ^^еп С.Б., 1991) Наблюдаемые в микроциркуллторнпй < иен ме вазомоторные изменения, которые сопроЕиждаются таимом сосудов. , затруднением кровотока, падением ого екороьти, ведут к развитию тканевой гипоксии, недостаточному снаожишю клеток пластическим материалом, ухудшению функции ирганог и ¡канеи. Зти состояния, по данным В.Г. Вогралика и соавт. (1904), находятся в тесной зависимости от степени нарушения липидного метаболизма.

Целью настоящего исследования явилось Иоучешк липидного спектра СЫВОрОТ1СИ КрОВИ, УРОВНЯ СЕОбОДНОраДИ! -1ЛЕН!К процессов и антиоксидантной защиты в условиях физиологичее-кои нормы, при дистрофических и диспластических прописок. протекающих в тазобедренном суставе у детей и подрогткоь.

Лабораторные исследования образцов криви проводили< ь у детей и подростков обоего пола, различного возраста, страдающих Ерожденным вывихом бедра (143 человека) и болезнью Пер теса (Ь7 человек), а также у практически здоротых дг пи, п. ставивших контрольную группу (228 человек).

Результаты проведенных исследовании показали, чю у ш циентов с дистрофическими и диспластическими нарушениями в ооласти тазобедренного сустава наблюдаются отклонения ь ог-мене липидоь по сравнению с таковыми у ооследованны/ ш нтрольной группы, о чем свидетельствует более высокая концентрация в сыворотке крови содержания общего холестерола (ХП, холсстерола липопрогеидов низкой (ХС-ЛПНП) и очень низкоп плотности (ХС-ЛПОНП), триглицеридов и коэффициента атерпген-ности При этом все анализированные показать ли б группа < врожденным гывихом бедра и болезнью Пергеса были практичен и иденшчны и статистически значимо не различаются

Обнаружена интересная закономерность различия величин по казателси обмена липидов в группах пациентов, страдающих врл} денным вывихом бедра, у которых развилось осложнение г тиде коксартроза или асептического некроза голоски бедра. В усло-еиях развития осложнения в виде асептического некроза голов ки бедра годержание общего ХС и ХС ЛПНП окаоалпсь выше, чем в группе детей и подростков, страдающих ьро минным вывихом, осложненным коксартрозом, а концентрация ХС-ЛПОНП и тригли церидов - ниже Выявленные изменения положены в основу теу иичрского решения, заявленного в качестве изобретши, посвященного лабораторным аспектам дифференциальной диагностики осложнении этого диспластического процесса (гюложитглвное решение о выдаче патента по заявке II 2005131558).

Следует отметить, что на фоне роста ХС-ЛПНГ1 в этой же группе наблюдается сушесгвенное повышение уровня малоновпго диальдегида (МДА) как в плазме, так и в эритроцита/ по игн< шеншо V аналогичному показателю у пациентов ( г рожденным вп вихом, осложненным коксартрозом Это, вероятно, вылиает м Д1ЫШ ацию данной атерогеннои фракции, которая Еслед1твие п держания большого количества полиненасыщенных жирных в и т т и очень низкой концентрации антиоксидантоь сильнее подвергна окис пению, чем липопротеиды очень низкой плотности, чго способствует увеличению их поглощения моноцитами-макрофагами или гладкомышечными клетками (Титов В Н., POO'S; Esterb tunr Н. et al., 1991). В результате они прргращаются в пенш тые кпетки, создаются условия для негатитных изм< нении f сосу диетой системе (в том числе в области тазобедренного гуслч та), приводящие к нарушению питания и процессов ою игенации костной ткани (Климов АЛ1., НикульчеБа., 1W;. При ос полненном течении диспластического процесса асептическим пск[и-зом эти нарушения, вероятно, выражены в большей степени в отличие от пациентов с врожденным вывихом, осложненным кок-сартризом, что подтверждают полученные нами результаты

О нарушении липидного метаболизма свидетельствуй ре/л ее увеличение в 6,5 раз коэффициента кратности гиперлипопрот»п-демии у детей с деформацией тазобедренного сустава в сравнении с обследованными контрольной группы. При этом киличестЕО гиперлипопротеидемий Па типа в группе пациенюь, страдающил врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса, превышает аналогичный показатель в контрольной группе в 4,9 раза, а IV типа - в G раз. Iиперлипопротеидемия 116 тита ь труппе здо ровых детей, наиболее опасная в плане ргшнегп вооникнотенич и прогрессирования атеросклеротического поражения еосудиг, не обнаружена, а в группе с диспластическими и дистрофическими изменениями f тазобедренном суставе она наблюдается ь ь, 6' гпучаев.

Результаты сравнительного анализа долевого распред> ления нормолипопротеидемии и гиперлипопротеидемии Па, По, а тпк же IV типа в зависимости от характера изучаемых проц^ссиЕ врожденный вывих бедра и болезнь Пертеса), показали, что частота обнаружения нормолипопротеидемии в группе пациентов ( болезнью Пертеса оказалась несколько ниже, чем б группе детей и подростков, страдающих врожденным вывихом бедра, однако это различие было статистически недостоверным заметной особенностью типа гиперлипопротеидемий, выявленных у (юльны' г нарушениями в тазобедренном суставе, являет! я поршшши г 2,(3 раза доли гиперлипопротеидемий Пб типа ь группе пщиен юв с болезнью Пертеса в сравнении с обследованными, которые С1радают врожденным вывихом бедра.

Кроме повышенного уровня липидных компонентов в шорот-ке крови у детей с дистрофическими и диспластическими процессами газобедренном суставе было показано усиление процессов перекисного окисления липидов, о чем свидетельству* г воз растание интенсивности спонтанной хемилюминесценции образцов сыворотки крови и увеличение содержания в ней одного и щи -межуточных продуктов липопероксидации - мапоноЕого диальдеги да по сравнению с контрольными образцами При этом характер процесса не влияет на величину спонтанной хемилюминесценции сыьоротки крови. Анализ содержания МДА в плазме и эритроши и у детей с врожденным вывихом бедра и болезнью Пертеса показал, что уровень МДА зависит от выраженности дистрофически' изменений в пораженном суставе.

Результаты сравнительного анализа активности Ф»рш н-тоь антиоксидантнои системы крови у детей и подростков и дисплазиеи и остеохондропатией тазобедренного супа! 1, I ги-детельствуюг о том, что активность еоотьетпьующил эн.импр, .¿а исключением активности каталазы, превышает аняпошчные параметры в группе здоровых детей Это отражает активацию системы антиоксидаитной защиты, что сопряженно с подавлением интенсивно протекающих в биологических cm генах nponetсов ПОЛ, и позволяет рассматривать выявленную с ikoho мерность как физиологический механизм адаптивной перестрсши мембран и липопротеидных частиц, направленный на Еосстанш ление нормального функционирования организма

В группе пациентов с врожденным вывихом бедра FCt показатели ферментативной активности превышают таковые в группе контроля, а у пациентов с болезнью Пертеса, наряду и повышением активности некоторых ферментов антиоюлщашной системы, наблюдается снижение активности ката лазы и глутатионперокеи-дазы. Это может приводить к избыточному накоплению Н^о? и гидроперекисей лигшдов, которые оказывают повреждающее днио типе на эндотелий сосудов, нарушают физико-химические свойс тва сосудистой стенки. Данные продукты ПОЛ, подаиляя син1ез простациклина и увеличивая продукцию тромбокеана, у< ипив Ш1 агрегацию тромбоцитов и тем самым нарушают микроциркуляцию, что е» сочетании с врожденным недоразвитием сосудистии сети г. области тазобедренного сустава и усилением проце( сов пере кисного окисления липидов, усугубляет дистрофически^ нарушения при изучаемой патологии. Об этом свидетельствует гювыш» ние интенсивности свечения сыворотки крови и юнценграции ИДА При оценке состояния антирадикальной системы защиты у детей и подростков с врожденным вывихом бедра в заьи'имосги от характера осложнении (развитие кошартрога или очам act птического некроза) было выявлено, что активность cyiu роксиддисмутазы (СОД) и каталазы возрастает при неогложш н ном течении врожденного вывиха бедра, что, по-шдимому, носит адаптивный характер и отражает глубину нарушишь

Интересные данные были получены при опр* делении ^гьн-Hocin СОД в зависимости от стадии болезни Пертеса При И и III стадии течения остеохондропатии тазобедренного сустага, когда дистрофические изменения наиболее выражены, пшЕлаю поЕЫшение активности исследуемого фермента, f то fpt мя как при IV стадии (стихание рассасывания кости, нарастание про цессов репарации, реваскуляризации эпифиза и замещение его новообразованной костью) наблюдается снижение изучаемого из рамстра по сравнению с аналогичным показателем в группе гн циентов с II и III стадиями. Аналогичные изменения выявлены при определении содержания МДА в плазме крови и эритроцитах у этой группы детей и подростков Максимальная величина этих показателей соответствовала II и III стадии болезни II* ртрс а По мере клинического улучшения у детей с IV стадиен си гохон-дропатии наблюдается стабилизация процессов пероксидации и приближение величин изучаемых показателей к таковым г, оораз-цах крови здоровых детей и нодросткоЕ.

Активация СОД во II и III стадии остелондропатии го not ки бедренной кости при повышении содержания МДА, по-ьидимо му, связано с неадекватными компенсаторными возможностями у данной группы пациентов. Выявленная осооенность изменения ак тиЕНисти ('ОД в зависимости от периодизации болезни 1Ь ртг„ а положена ь основу технического решения, заявленного в качмл-ве изобретения, на которое получено положигельное решение о выдаче патента но заявке II 2005115009.

Разработанный в нашей лаборатории ноеыи м^ггд ип]и\Ц(л» ния малинового диальдегида раздельно в плазме и эритроцит к (Ас N 1807410) позволил определить антиоксидантный резерв сыворотки крови. На оснавании проведенных исспедогании сцр-лан вывод о снижении антиоксидантного потенциала у дети! и подростков с альтерацией тазобедренного суотаЕ а по отношению к контролю Причем у обследованных с болезньп Перт и: а ото падение антиоксидантного резерва крови быпо более выраженное в г равнении с пациентами, страдающими врожденным вывихом бедра. Эти данные согласуются с результатами Поучения гп боднорадикальных процессов у больных с нарушениями р та.,о-бедришом суставе, у которых выявлено их резко выраженное возрастание.

Результаты проведенных исследований показа пи, что у детей и подростков с дистрофическими и диспластичоскими процессами в тазобедренном суставе часто наблюдаю юя изменения липидного обмена (гиперлипопротеидемии Па, Пб и IV типа), интенсифицируются процессы перекисного окисления липидсн и снижается антиоксидантныи резерв крови Это свидетеЛ1 стгугт о гкладе выявленных нарушений метаболизма лигшдов и во. раота-ния СЕободнорадикальных реакции в развитии изучаемых процес о01. Предполагается, что данная сторона нарушении реализует ся посредс1вом повреждения сосудов (в том чиопе и г оно 1 I-ообндренного сустава, особенно в сочетнии с врожденноп п-ь манией сосудистой сети в этой ооласти), являющегося етде-¡вием глубоких сдвигов в обмене липидов, посш дующей ишемии и гипоксии хрящевых, костных тканей, заканчивающегося ра ;гн тием в них дистрофических и диспластичесюр прели и иг. < этил позиций полученная информация является оригинальной и позволяет под новым углом зрения рассматривать причины воз никноьения и прогрессирования врожденного вывиха бедра, болезни Пертеса, что в конечном итоге способствует болы прг1-ьи явному пониманию сути дистрофически/ и щюппа< тичеи и> нарушений, а также разработке адекватных методов профипакти ки и нехирургических методов лечения заболеваний в доклиническом периоде.

Наиболее важным результатом Еыполненной работы яьпяет^я сформировавшееся представление о том, что нарушение липиднп-го обмена, сопутствующая этому процессу интенсификация сво боднорадикальнпх реакции и ее следствие - декомпенсация ра± личны> зьнньев сис1емы антиоксидантной защиты, отнкяюя к категории оощих звеньев инициации, развития дшлрафичеоких и диспластичеьких нарушении в тазобедренном суставе. Они начинают проявляться в детском возрасте, продолжают сохраняться и прогрессировать у пациентов зрелого, а также пожилого виз-ра<та, сопровождая различные дегенеративно дистрифичеспи процессы в тазооедренном суставе, что было показано ранее г исследованиях сотрудников нашей лаооратории (Чулошникива И.А , 19УС).

Ьизникает комплекс проблем, который в перщектиЕе неоьх; димо решать с целью эффективного использования ре. ультаки-настоящего исследования в практическом аспекте Наибогке гаж-ными из них, являются следующие.

У пациентов с дистрофическими и дне пластическими гЮолг ваниями тазобедренного сустава помимо выполнения стандарты/ лабораторных исследовании рекомендуется изучать состояние ли пидного обмена, интенсивность свободнорадикальньг«' реакции и антиоксидантный резерв организма. В случае обнаружения отпю нении в этих метаболических системах следует параллельно с ос нивными лечебными мероприятиями, обычно проводимыми у таких больных, выполнить коррекцию нарушений липидного обмена, снизить чрезмерные процессы ПОЛ, повысить эффектность штиок-еидсштных механизмов. При зтом необходимо выяснить гпюз ти-перлипопротеидемии - является ли она первичнои (генетически детерминированной) или вторичной, то есть обусловленной другими заболеваниями, в первую очередь, сахарным диабетом, гипотиреозом, нефротическим синдромом, а также нарушением диеты ( чрезмерным потреблением жиров и углеводов). F г пи ж удается установить причину, которая вызывает вторичную гипер липопротеидемию, то наблюдаемую аномалию следует счишь п<-р ьичнои. В этом случае может быть полезной информация о сос тоянии липидного обмена, развитии раннего атеросклерос а, инк-мической болезни сердца и цереброваскулярных нарушений у ро дрпчлеи пациента

Ь подавляющем большинстве случаев при вторичных гиперли попротеидемиях устранение основной причины (успешное лечение сопутствующего заболевания, назначение соответствующей дне ты, исключение других факторов, провоцирующих гиперлипопро теидемии) позволяет нарушенный обмен липидов перевепи е нор-молипопротеидемию.

Если приобретенная гиперлипопротеидемия не устраняется (а также при врожденных формах гиперлипопротеидемии;, для та-как детей целесообразно разработать оптимальную схему i oppei -ции нарушения липидного обмена с применением ооЕргменнн/ средсТЕ лекарственной терапии При гиперхолесгерольмпи peí о мендуегся назначить статины, которые угнетают оиосингез /о лестерола в печени, препараты, ускоряющие катабализм холе(-терола, а также секвестраны желчных кислот, обеспечивающие ускорение деградации ЛПНП в печени. Гипертриглицеридемия г] е бует применения таких препаратов, как фибраты, дгпиирующие катабализм ЛПОНП, никотиновую кислоту и ее производные, кою рые угнетают синтез ЛПОНП.

ПерспектиБными для использования являютья другие пргпираты липостабил (содержит свыше 707 полиненасыщешшл мирных кислот), который активирует катаболизм ЛПНП (атерогпшые частицы) и образование ЛПВП (антиатерогенные пипопротеиды), оказывает нормализующее влияние на клеточные мембраны, о» о бенно печени, а также препараты, приготовленные и? /ир I мп[ ских и осетровых рыб, содержащие омега-3 эйкозапентаенорую и омега-3 докозогексаеновую жирные кислоты (снижают образоьа-ние ЛПОНП).

При тяжелых нарушениях липидного обмена, 0( обенно гипер липопротеидемиях генетической природы гомозигошого тип*. г практику комплексного лечения пациентов с дистрофическими и диспластическими процессами тазобедренного сустава целесообразно рекомендовать включить экстракорпоральны^ мы оды уда ления из кроьотмка атерогенных Фракций лигюпрптщдиь - шн*-маферсз или афсрез ЛПНП.

Представ ляется целесоооразным разработать и примьпять на практике у тяжелых больных комплекс лекарственных срндгть, направленных на снижение процессов ПОЛ и повышение анпюк(И-дантного резерва. В этом плане могут представить интерес Фе -нольние соединения природного происхождения ^альфа-! коферол), некоторые органические кислоты (аскорбиновая, никотиновая), Ферменш-антиоксиданты (церулоппазмин и супером ид диомутаза как фармакологические препараты), а также питти чес кие вещества инактиЕаторы системы образования актиинн' форм кислорода, блокаторы циклооксигеназного и липоксигеназ-ного путей метаболизма арахидоновой кислоты, ¿елаторы, связывающие ионы железа, и другие препараты, рынок которых сиг тематически пополняется

Другим важным направлением работ в аспекте этой проблемы является организация широкомасштабного популяционного исследования липопротеидного спектра у детей дошкольного и школьного Е.озраста с целью выявления лиц с нарушением ппменл пи-пидов. Обязательному обследованию должны быть подвергнуты дети, родители которых страдают гиперлипопротеидемиями и имеют ранние признаки атсросклеротического повреждения с<п удое, страдающие дегенеративно-дистрофическими процессами в тазобедренном суставе, ишемической болезнью сердца, гипертониче ской болезнью, цереброваскулярными расстройствами. Конечная задача таких обследований - формирование групп риска из чт ла обследованных, которые в дальнейшем должны сиьтематичп ки нд-блюдиься у специалистов ортопедов с целью выяснения, пр^и лактики и своевременного лечения дислипопротеидемий с помощью диеты, различных оздоровительных мероприятий и физических уп ражнении, а в случае необходимости - фармакологической кор рекции линидного статуса.

Созданные в процессе выполнения настоящей работы техни чески« решения, заявленные в качестве изобретении, иоиЕященп различным аспектам дифференциальной диагностити стадий болн. ни Пертеса и характера осложнений врожденного вывиха оедра Предложенные методы лабораторной диагностики этих соспяний, основанные на результатах определения в крови пацш нтов ав-тивности супероксддисмутазы, а также липидного профиля, могут быть использованы в качестве дополнительных объективны-, кри терпев в комплексной оценке этих состоянии для поводневного использования в практике клиник ортопедо-хирургического про Филя, особенно в тех случаях, когда при использовании традиционных методов дифференциальная диагностика затруднгна

Разработка комплекса методов рациональной и адекватной фармакотерапии дистрофических и диспластических процессе! тазобедренного суства у детей и подростков с учетом пилу ченных нами новых данных, наряду с традиционными хирургичи -кими методами лечения, а также ранее выявление в дпьлинич^-ком периоде предрасположенности к поражению с^судиотои сети и возможности развития у обследуемых этих нарушений, является целесообразной перспективой дальнейших научных ии, подов а-ний в рамках данной проблемы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Стрелкова, Ира Геннадьевна, Нижний Новгород

1. А.с 1807410 СССР, МКИ G 01 N 33/52. СпосоО определе ния малонорого диальдегида в крови /В.Г. Сидоркин, И.А Чу-лошникова (СССР) И 4823410/14; Заявлено 07 05 90, Опубл О/ 04.93, Бюл. N 13 //Изобретения (заявки и патенты) 1993. II 13.

2. Абаиров А.А., Мельгунов А. В., Богосьян А. Б. ¿септический некриз головки бедренной кости у детей с ерожденным fliph/.om оедра //Ортопедия, травматология и протезирование. Н8ь II 3. - С. 10 - 13.

3. С. Аорамова }R И., Оксенгендлер Г.И. Человек и протиьоо-пимшельные вещества. Л.: Наука, 1985. - 230 с

4. Ь Асагиани B.C. Новые методы биохимической фотометрии М. Н г/ка, 1965. 547 с.

5. АХ1Ямов И Ф. Дегенеративно-дистрофические заболевания тазобедренного сустава у детей и подростков. Казань КГМУ, Г003. 15/ с.

6. Г'лрабои В.А., БрехманИ.И., Голотин В.Г. Перекиснос окисление и стресс. СПб., 1992. - 148 с.

7. Ггнгус Д.М , Дедух Н.В., Шевченко С.Д., Корольков £ И. Врожденная дисплазия тазобедренного сустава. Эпидемии логия и «ракгоры риска: (обзор лит.) //Ортопедия, травматология и пробирование. 1995 - N 4. С. 75 - 82

8. К». L пэдимирпь Ю.А Роль нарушении * еоиртг пипидтг .

9. С ПОЯ MtMOplH F laSFtrillll ИаЮЛОГИЧьсКИХ ПрпЦ( С( Г.Г / П 1 г< i ц ¡и чи 1 лл Филмногия и эксп. терапия. 1939 II 4 с / 1 t;.

10. Р падимиров Ю. А. Свободнорадикальное окисленш шиш дгв и физические сЕоистга липидного слоя биологически' м» Mt ран / Бис|Цьика 19F7. - Т. 32, вып. 5. - С 330 - ц

11. К Ьпадимиров Ю.А. Свободные радикалы и пнтинь идянш bei гн Р'МН. 1998. - И 7 - С. 43 - 51.

12. LпадимироБ Ю.А., /зизова O.A., Дееь А И и др i'r<» оодньк радикалы в живых сиотемах ./Итоги науки и ттшки. Биофизика. 1991. - Т 29 - 252 с.п. Ргщимиров Ei. А., Арчаков P.M. Перекисное о, иг jiphiu липид)ь t онологичг ских меморанах. М .Наука, Н7. . fi

13. Ъ Ролков М В., Дедова В Д. Детская оргоп»дия II Iu-дицпн I, reo 312 с

14. Ролкоь И. В., Тер-ЕшазароЕ Г.М., Юкина Г А Ррожден ныи ьыьих оедра М. • Медицина, 1972 - 159 i

15. Ринчегорский И. А., Шапошник ИИ , Алеком t L.II , Уарчншоьа II. В Показатели системы П0Л-А03 Kai мтрпры ' рничм{пи erрдочнои недостаточности при кзрдт миопии i■

16. Кпинпч медицина. 2003. N 8. С. 2Р> 2г.1.аллер I , Ганефельд М., Яросс В Нарушения пипицне го обмена (диагностика, клиника, терапия). М. Медицин!, 1970. 2^3 с.

17. Легг Калы е-Пер1еса //Ортопедия, травматология и прог^.що рание ¿002. - N 1 - С Ы - 64.

18. Данщоь А. А., Жидовиноь Г И., Адельшин1 Г ч и д{ ВзаимосЕЯ^ь инеонсиеногти свободнорадикалвного ишьлишя < уропнсм сЫБпроточного билирубина при поражения:« генаIпоилиц ной системы / Клинич. лаб. диагностика 1003 И / (1 11 13.

19. П Данилова Л. А., Юрьев В. В , Франке Е.В и др Нф н! ! состояния сшиоксидШ1НПИ системы при различны* .абоп гпш 1 /Клинич. лаб. диагностика -2001. -НЮ С ; /

20. V. Дкалилов А.П , Нуриев М Н. Причины во^никн мнил дисплазии газобедренного сустава и ее ранняя дилноаш I //Проолемы биопогии и медицины. 200? - N 3 - С. 10 - 1 .

21. СЗ Дольнищий О В., Радомский А А Вариант рсрпь• жения области тазобедренного сустава при болезни Пергка и их связь с течением пагплошческого процесса /(»рюш дил, траьматплг)гия и протезироЕание. 1987. - И Ю. - с 1' - 1

22. ЗЬ. Дупиннн! Е.Б. Роль активных Форм кислорода е качг 1 ве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояния-окислительного стресса //Вопр. мед. химии. 2001. 1 4/, еып г> с 561 - 581.

23. Дубинина Е.Б., Шугалей И.В. окислительная модпфпк I-ция Снлкоь //Успехи соврем биологии. 1993 Т II,, пш 1 -С. 71 81.

24. ЖураЕлев А. И , Журавлева А. И СверхелабЕю оемцния сыворотки крови е комплексной диагностике. П.: Мсдшшна, 1975: - 1,7 с.

25. Журкин А I , Дубинина Е.Е., Гундалах А.И лгшнооп супероксиддисмутазы в эритроцитах кроги бопьнн> пи»., ш и г* пиитом ЛЮ. дело. 198Е. N 7. - С. 4?0 4 Г4/ -пЕпроЕа А. П., Мингазетдиноь Л.Н., КамилоЕ '1 л., и Т .

26. Климов А Н., Никифорова А А , Кузьмин А А. 0 cnoiоь ноет пипопро1еидов высокой плотногти удалять т ^оютока окисленные фосфилипиды //11 съезд биохимического о-Еа р<>с Акад наук (19 23 мая) Тез докл Пущине, 1 о/ i ЮЗ

27. Климов / Н , Никульчева Н. Г. Дислипопротепде мни и методы их диагностики /'Дислипопротеидемия и ишемическая гю лезнь сердца /Пид ред А.Н Климова М : Медицина, Рмо1. С. г 0 г я

28. Климов А Н., Никульчеьа Н.Г. Липиды, липопрот» иды и атеросклероз СПб : Питер Пресс, 1995 304 с

29. Mj Климое А Н., Никульчева 11 Г. Обмен липидов и липеп ротеидов и его нарушения, СПб.: Питер Ком, 1999 5L <\

30. Ьо Кпиническля биохимия /Под ред. В А 1качука И. ГЭ01АР МЕД, /002 - 300 с - (Сер/*XXI век").

31. Константинова Ь.Э. Основные закономерно»ти изменения реологических свойств кроги и состояния микропиркупяции у сольных ишемической оолезнью сердца в условиях дислипопрсле-инемии ТрпмОоз, гемостаз и реология. ,-004. IJ Г С. »

32. Корнилов Н В., Аврутин А. С Адаптационна прицисп в органах скелета. СПб.: МОРСАР АВ, 2001 26 > с

33. V. КрИЕожи.<ина Л. В., Климова Е. В., ЕрмоласЕа Е Н but толигпчг с i \ь эффекты церулоплазмина //Материапы TI Ры конгр. по патофизиологии М., 2000. С УЗ 91.

34. Кулапчев А.П. Методы и средства анализа данньк в сре де nmdovn. Ctadia 6,0. М : Информатика и компькперы, юо- 2/0 с

35. Курашьипи Л В. Липопротеиды высокой шкнниш. фи и Чите значение / 41тгол. физиология и экст рим иг ниш 1007. N 3 - с 40 - 43.r>. jhfcmlhko И. А., Фадеев В В. Субклиниче<ч ии гшпыры / /Щ ибЛ( мы эндокринологии. 2002. - Т. 48, 112 С. К - г

36. Лузина Г В. К этиологии врожденных аномалий 1нлщ человека / Врожденные деформации опорно-двигательного апп та та Ташкент, 1931 - С. 40 - 45

37. Г/квыев В 0., Дедова В.Д., Беляева А.А. Крщшнкш ние тазобедренного сустава при остеохондропагии у дпт / / Ортоти дия, травматология и протезирование. II 1- С 13 45.

38. Паянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск: Наука, 1989. 344 с.

39. Ь . Мшепе а 3 М. Биомеханическая вонщпипя ра ^тля кж гознои перестройки, аваскулярного некроза гплоеки мдрнной кости и оооснование способа их лечения //V Воерое i tf д траьмаюлогов-ортопедов: Тез. докл. Ярославль, 199U. Ч- С. 183 190.

40. Могоряну II. Д., Амоашей Д. С. Гиперкальциурии у детг и //Педиатрия 1091 - N 6 - С 70 - 75

41. Г7 Нейфах С.А , Васильев В.Б , Шавпонскии М И ■ грш-ние, прщ политические свойства и эволюция церупопл актина и другие гоиубых белког /Успехи биологическом лимии Под пд Р.Ф. Поглазова. М . Наука, 1988 -1 28. г 10^ - 1, 1.

42. F8 Шчголодова О Л , Меерсон Е.М., Михайлова Л. Р. и др Новое в изучении патогенеза болезни Пертеса '/Реет tpibmh. и ортопедии им H.H. Приорова. 1996. IJ 3. - ('.41 - ц

43. Османов Р.Ю , Умурзаков K.M. Консервативное гюи-ни» врожденною вывиха бедра у детей в возрасте 2-5 пет г< нии ортопедии. 2001. - N 2. - С 137-138.

44. ПаБлоЕ Е.В. Содержание продуктов липоперою.идщи и г гыепроIвсе крови как показатель дислипидемичесвих pat г той. tf /'Клинич. лаб. диапюотика. 2004. IJ 3.-е н - 1,.

45. Пасечник И Н. Механизмы повреждающего допствил и тивньк Фирм кислорода на биологические структуры у Оощшг i кривиче! ки/ coi юяниях //Вести, интенсив, тершии. пщ II 1 с : - 9.

46. Jd. РеЕеЛЛ I А Патология кости /Пер. с пнгп Н / Г in окон. И : Медицина, 1993. - ¿68 и

47. Русалок Р М., Корнилов Н.В., Ташаев Ш. С. и др Им ледовiHiie локального кровотока и давление в тканях и сосуда тазобедренного сустава у экспериментальных живот ныл Еюп экстрим биологии и медицины. 2004. - Т 137, II С. pJI ^21

48. Ряоов Г А , Пасечник И Н , Азизов Ю.М Aktufhei^ Фо{ мы (1г и их роль при некоторых патопогическил соотсяншк Анестезиоло1ия и реаниматология. 1991. -Ml С. 6 t <

49. Рябог Г А , Азизов Ю.М., Дорохов С И. и др. щш пи тепЕная модификация оелков плазмы кроьи у больных ? iьити-ческих состояниях //Анестезиология и реаниматология. люи -NT. б. /2 - 75.

50. Ctгизбаеь А У., Семенов Г В. Пагоморфологичсckhi изме нения ь тканях, окружающих тазобедренный сусгаг, у боль HEix с рр<»fденнЕ1м вывихом бедра //Вопросы ортопедии и ко i но су танки о ¡уберкулеза. Усмь Каменогор! к, 19ьч - hm 1 С. mi 83

51. Ю4. ыколое Г.Д., Чуранов Г.Д., Булгаков Ь.Г и др. Исследования моанизмоь действия продуктов перекисного оки< ления липидов на проницаемость бислоиных лииидныл меморш '/Гиофилжа 1981 - 1. 26, N 1. С. 111 - 149.

52. СОКОЛОГСКИИ O.A. ОООСНОЕаНИе COBpCMeHHEh pHbMHt труктиьно-BoccTaHOFитепьннх вмешательств при дисппа:ии it о бедренного сустата у подростков: Автореф. дис. . . д ра м- i наук Минск, 200. - 37 с.

53. Ю7. способ определения активности Н2и,. глуши нпе роксида. ы Удостоверение II Р4<> от 19°6г. на рац. прел 'Ь Жг ни»

54. Переслегина И.А., Ермолина M.L.

55. Оторсжук П Г , Сторожук А П. ооразоьанш и упрчшние ррактивных оксигенных радикалов е эритроцитах и их ги,логическая роль (с учетом ин1енсиЕной терапии) / Ceci ин тен< ив. Ti- рапии 1993. - II 4. -С 17 - 21

56. Тарасов В И. Ранняя диагностика и лечение врожден нот Еыви/а бедра А Мед помощь. /ООО. - N 6. С. 41 4

57. Гертоь В. В Множественно модифицированные липопро-теины НИЗКОЙ ПЛОТНОСТИ, циркулирующие ь КрОЕИ ЧеЛОЕьКа hH-ГИОЛ И < ОСУД хирургия 1999 - II S (при Л. ). С. 1- V !

58. Гертов Р В., Каплун Р. В., Орехов А.Н. Ewiui-с ш ннр лигшдн в липопротеидах низкой плотности человек* 71юл оксперим биологии и медицины. 1995 - Т. 120, N ь. С 155 - 158

59. ТворогоЕа М.Г. Лабораторная диагностика нарушении ли пидного опмена //Лаб. медицина. 2001. - N 4. - С. Ь/ /1.

60. Тимофррга М.И К этиологии заболеваний гыыдргн-ниго cy^idEa у детей //Вест хирургии им. И.И. Греюв^ 1984. Т loo, N 8. I. 10b 108

61. Титор В H Липопротеины очень низкой и низкои плот ности- (функция, транспорт жирных кислот и диагшк тичи кг»-значение (лекция) '/ Клинич лаб. диагностика. ¿-.опор. II 11. - С. ?1 ~ 33

62. ЬЗ. Чиркин А. А , Доцснко J. А , Юпатоь Т И. Лииидныи он мен. M :Иед. шп., 2003. - 12? с.

63. Чулошникоьа И. А. Состояние липидного оомена при де генератиЕПо дистрофических заболеваниях тазооедренн и <> су, tie a: Ai и реф. дис. . канд. биол. наук. h.HoErof д,1999. -,2 с.

64. Шьаое Л Ю Хирургическое лечение оолезни Перткм. Ангорьф дис. . Еанд мед наук Киев, 198/. - 1/ с

65. ПО. Шевченко Н.Г Обмен пипидов в норме и при паюл i ип //Клиническая биохимия. Рук. по клиническои лабораторной диагностике /Под ред. М.А. Базарновой, Т В Иоризогои Ки ев.: Ьищ! шк , 19Е6. С. 89 123.

66. ШеЕченки о. II., Орлова О.В , Дайоанырова Л. В. оценка диагностического значения церулоплазмина и СРВ при инфекцп онно fоспалительны> заболеваниях и осложнениях у ппциенюь < пересш иным сердцем /Клинич. лаб. диагностика оог Ии12 С. Ь Г).

67. Шестов Д. Б. Расчет холестерина липопргт идеи ни кои плотности в миллимолях //Лаб.дело. 1985. - N 6. г. з 1 3-Н

68. Шинкаренко Л. И. Антиокислительная система церупои лазмин-трансферин при гипербарическои оксигенации у крм Еюл эксперим. биологии и медицины. 1987. Т. Ю4, II ч. С. 291 Лз.

69. Akiba Nagatomo R., Hauaina M. et al Lipid ои'о-xide vercomes the inarnlity ot platelet seoretaty pho {hull разе h( to hydrolyzp membrane phospholipids in rabbit platelet /J Liocheih. 1907. - V. 122, II 1 - P 859 -JЛ

70. Axhausen G Neber die Osteochondritis disjoint Ho ning'b //Kim. Wschr. 1928. - Ed. 28, N 2 S. 104 10c

71. Peaumont J., Carlson 1 , Cooper G. Cla^si i nation of hyperlipoidemia and hyperlipoproteinemias //Lull. V'ld. Hlth. Org 1970. - V. 43 - P. 891 - 915

72. Dieber Porheneder M., Puhl H , Waeg G. et a. Ef fe<'t of oi a] supplementation with D-alpha-tocophf- rnl on the vitamin E content of human low denoity lipoproteins and re sLtnnoe to oxidation VJ Lipid Res. 1991. V ,v, II 8- P. 13^ 1332.

73. Dogonad.e M A. Zur Atlohathogenese angeborener Luxations hui ten (Hiu tdysplasie) //Beitr Orthop. Iraunntol. 1973 Ld. 20, H.3. - S.151 - 160.

74. Purrmgton P Hyperlipidaemia Diagnosis and mana gement Oxford: Bitterworth-Hememann Ltd , 1995. 103 p

75. Duthie G G., Robertson J.D., MaughanK.J. et il blood antioxidant status and erythrocyte lipid. Pen^idatrm following ill stance running //Arch Biochem. Biophy. 1990 -V. 2d2, II 2. 0. 78 - 8l

76. Eekardstein A., ¿ssman G. High density lipoprotein, and reverse cholesterol transport: lessons from mutations //Atherosclerosis. 1998 V. 137, N. - P. 7-11.

77. Eltom A., Elnagar B., Gerbe-Medhm M. Thyroid hor inone and iodine "tatus m Sudanese pregnant women with t!{ i tf r /lilt J. Food. Sci Niitr. 1999. - V. 50, IJ 2 P In', 109

78. Fredi irksori D., Levy R., Leos R. Fat transport m lipoproteins an integrated approach to mechanisms and disorders /IJew Engl. J. Med. - 1967. V. 276. P. 31 - 11, 94 - 103, 148 - i56; 215 - 224; 273 - 231.

79. Fridovich I. Superoxide radical and superoxide di muta^s //Annu. Rev. Biochem. 1995 - V. 64 - P. 97 - 11

80. Friedwald W.J., Levy R., Fredrickson D. Estimation oi the con^ nitration of low-density lipoprotein cholesterol m plasma withaut use of the preparative ultracentrifuge //Clin Chem. 1972. - V. 18. - P. 499 - 502.

81. Gibbons G F., Mitropoulos K.A , Myant II.P rIhe Li ochemistry of Cholecterol.- Amsterdam: Elsevier, 19P2 -3i 9p

82. S. Guttcridge J.M., Halliwell B. Free radical: anJ an tiOAidant in the yrar MO. A historical look to the in tun ,/Ann. II. V. Acad. Lei. 2000. V. 899. P. 136 - 11,

83. Halliwell B., Gutteridge J.M., Croso r F hv n-dicals, antlOAidants, and human disease: where are wh nnwv //J. Lab. Clm. Med 1992. - V. 119, II 6. - P 598 - 6^0

84. Kawai K., Tana K., Hirahata K. Steroid-induofd <u -cumulation oi lipid in the usteocytes of the rabbit iг moral head A histochemical and electron micros copio studn I bone Jt. Surg. 1985. V. 67 A, N 4. - P. 755 /f3.

85. Knight J A Free radicals, antioxodanto, and rtn un rriune .ycttrri //Arm CI in. Lab Sci. 2000 - V 30 - Г 11е 158.с 12. Knowle: R G., Moneada S. IJitric OAide ynthi ^ mi marniriiU /,PLoCheni J 1994 II 298. - P "¿Ad - ¿b-.

86. Koizumi W., Moriya H., Tsuchiya K. et al. Ludlofi's medial aifroaih for open reduction of congenital di°lotati m oi the hip A 20-year follow-up //J. Lone Jt. Sury. 1996. V. /o-B, II 6.- P. 924 - 929.

87. Kramer J.H , Misik V , Weglicki W. B. Lipid pnru'i elation-derived iree radical production and postischemc myo cardiol rtperiirion injury //Ann. N. Y. Acad Sci lrui. V 1/, II /23. P 180 196.

88. Kubat R. Der Zusainmenhang zwischen Atiolo»ie und KliniK dcr Hui tgelenksluxation //Beitr. Orthop. Tr'aumat < I 19 77 Bd 24, II 12 S. 673 675.

89. Loo C., Corcoran S., Parsons J. Hyperlipemia and idiopathic aseptic necrosis of the femoral head in adult //Orthopedics. 1980. - V.3. - P. 651 - 656.

90. Marklund S.L. Extracellular superoxide dicmut //Method: Enzyrriol. 2002. - V. 349. P 74 80.2 o Mr Pe-trson R., Marcel Y. Role ol cholesteryl e M-transier protein m reverse cholesterol transport tliu Card 1991. V 14. P. 31 - 34.

91. Meiattoni F. The 4-hydroxyhenzoat/4-aininophHjia^ nr chromogenic system used in the tyzyrnatic determination ot °erum cholesterol "Clin. Chem. 1978. - V 24, N 12. -P 2161 - 2165.

92. Me^zctfi A., Di Ilio C., Calafiore A M et al. Glu tathionr peroxidase, glutathione reductase and glutathionetransferase activities in the human artery, vein and heart

93. J. Mol Cell Cardiol. 199U - V 22, II 9. - P. 935 938.

94. Mylonas C., Kouretas D. Lipid peroxidation and tjsue damage //In Vivo 1999 - V. 13 - P. 295 309.

95. Nagele U., Hagele E. Reagent tor the enzymati 1 dt termination of serum total triglycerides with improved lipo litic ei t lcimcy //J. Clin Chem. Clm Biocherri. 19°4. -V. 2, , II 2. - P. 165 - 174.

96. Porter N. A., Caldwell S E., Mills K.A. Mechanisnr of free radical nxidation oi unsaturated lipids VLipkb. 1995 v ^o, N 4. P. 277 - 290.

97. Rilkind B.R. Tupmg of hyperlipoproteinemia / /АНн rosclerosis. 1970. - V. 11 - P 545 - b46

98. Specht E Congenital dislocation oi the hip. -Wobt J. Med. 197b - V. 121, N 1. - P. 18 - /1.

99. Tada II , Yoshida H. Diacylglycerol on lipid metabolism //Curr. 0pm. Lipidol 2003. - V. 14, N1. - P. 29 -33.

100. Tall A , Breslow J. Plasma high density lipoprotf ins ami atherogencsis //Atherosclerosis and coronary artery' di^ea e Ed by V. Fuster et al. Philadelphia Lippm-cott-Pave Press Publiohers, 1996. P. 105 127

101. Thompson G.H., Salter R.B Legg-Calve-Perthe. disease / Clin. Symposia. 1986. - V. 38, N 1. - P. 1-31.246 lomaschewski H.K. Early histologic undines in Perthes disease VBeitr. Orthop. Traumatol 1981. - EJ 31, H. 12. - S. 613 - 621

102. Vasey H M Necrose aseptique de la tete iemorale che: le > une adulte //Int. Orthop. 1981. - V i, II 2 P 77 - 88.

Информация о работе

Стрелкова, Ира Геннадьевна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Состояние липидов крови у детей при дистрофических и диспластических процессах в тазобедренном суставе - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы