Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сообщества микромицетов пещер как источник штаммов для сельскохозяйственной и экологической биотехнологии

ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Сообщества микромицетов пещер как источник штаммов для сельскохозяйственной и экологической биотехнологии"

На правах рукописи

Ипиенц Ильмира Робертовна

Сообщества микромицетов пещер как источник штаммов для сельскохозяйственной и экологической биотехнологии

03.02.08 - экология (биология)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 7 (.1.-.Р 2011

Красноярск - 2011

4840647

Работа выполнена на кафедре защиты растений и биотехнологии Института агроэкологического менеджмента ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»

Научный руководитель доктор биологических наук, доцент

Хижняк Сергей Витальевич

Официальные оппоненты доктор биологических наук, профессор

Сорокин Николай Дмитриевич доктор биологических наук Тирранен Ляля Степановна

Ведущая организация ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет»

Защита диссертации состоится «24» марта 2011 г. в II22 часов на заседании диссертационного совета Д 220.037.04 при ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет» по адресу: 660049, г. Красноярск, проспект Мира, 90. Факс: (391)227-36-09

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан » февраля 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор Г.А. Демиденко

Актуальность проблемы. В последние десятилетия в мире наблюдается растущий интерес к использованию психрофильных и психротолерантных микроорганизмов в биотехнологии (Russell, 1998; Lettinga et al., 2001; Margesin et al., 2008). При этом основным источником психрофильных и психротолерантных изолятов до сих пор остаются Арктика и Антарктика (Hoover, Pikuta, 2010).

Исследования, проведённые в Красноярском государственном аграрном университете, показали, что низкотемпературные карстовые пещеры Средней Сибири являются уникальным природным источником психрофильных и психротолерантных бактерий и грибов (Хижняк и др., 1999, 2001, 2003, Нестеренко, 2007; Хижняк, 2009). Показано, что психрофильные и психротолерантные бактерии сибирских пещер могут быть использованы в сельскохозяйственной биотехнологии в качестве эффективного при низких температурах начала вегетационного периода и безопасного для теплокровных биологического средства защиты растений от болезней (Хижняк и др., 2009; Панкина, 2010). В этой связи представляется актуальным оценить возможность использования микробных сообществ низкотемпературных пещер в качестве источника психрофильных и психротолерантных штаммов микромицетов, представляющих интерес с точки зрения защиты растений. Подобные штаммы могут найти применение не только в сельском хозяйстве, но и в основанных на высших растениях биорегенеративных замкнутых системах жизнеобеспечения (СЖО), предназначенных для внеземных поселений (Соглашение о научно-исследовательском сотрудничестве между Красноярским государственным аграрным университетом (Россия) и Пекинским аэрокосмическим университетом (КНР) от 25.06.09). Из-за жёстких требований химической и биологической безопасности психрофильные и психротолерантные микроорганизмы, не способные к росту при температуре человеческого тела, фактически не имеют альтернативы в качестве средства защиты растений в подобных системах.

Ещё одним направлением использования пещерных микромицетов может стать борьба с антропогенным и биологическим загрязнением в пещерах, не имеющих в силу своей геологической истории автохтонных микробных сообществ. В таких пещерах после проникновения в них человека на органических отходах развиваются сообщества аллохтонных мезофильных грибов, представляющие реальную опасность для посетителей (Мазина, 2009, 2010). Можно ожидать, что интродукция в подобные пещеры микромицетов, эволюционно адаптированных к низкотемпературным условиям подземной среды, позволит вытеснить опасные для человека мезофильные виды и ускорит биологическое самоочищение подземной среды.

Целью настоящего исследования является изучение перспектив использования пещерных микробных сообществ в качестве источника штаммов микромицетов для сельскохозяйственной и экологической биотехнологии.

Основные задачи:

1. Создание коллекции микромицетов карстовых пещер Средней Сибири и пещеры Сарма (Кавказ) и изучение влияния температуры на кинетику роста пещерных изолятов.

2. Изучение влияния температуры и стартовой численности на исходы конкуренции за субстрат между психрофильными и мезофильными микромицетами.

3. Изучение возможности применения пещерных микромицетов для конкурентного вытеснения опасных для человека мезофильных видов из пещер рекреационного значения.

4. Поиск психрофильных и психротолерантных изолятов, проявляющих антагонизм в отношении фитопатогенных грибов p.p. Bipolaris и Alternaria.

5. Изучение факторов, влияющих на относительную встречаемость штаммов-антагонистов в пещерах.

Научная новизна. Впервые показано присутствие психрофильных и психротолерантных микромицетов в пещерах Кавказа, составлена коллекция и изучены биологические особенности микромицетов пещеры Сарма (плато Арабика, Западный Кавказ).

Впервые изучено влияние температуры на кинетику роста психрофильных и психротолерантных микромицетов, выделенных из пещер. Изучены исходы конкуренции за субстрат между психрофильными и мезофильными микромицетами при разных температурах. Показана возможность использования психрофильных и психротолерантных микромицетов, выделенных из пещерных микробных сообществ, в качестве эффективного и безопасного для теплокровных средства для биологической защиты сельскохозяйственных растений от болезней, а также для конкурентного вытеснения опасных для человека аллохтонных мезофильных грибов из антропогенно загрязнённых пещер.

Изучены факторы, влияющие на встречаемость антагонистов в пещерных сообществах. Установлено, что максимальная встречаемость антагонистов наблюдается в участках пещер с малоинтенсивным, но исторически длительным притоком органического вещества, минимальная - в антропогенно загрязнённых участках, при этом наиболее высокая встречаемость антагонистов наблюдается среди представителей p. Chrysosporium. Создана коллекция изолятов, представляющих практический интерес для биологической борьбы с корневой гнилью зерновых культур в условиях Сибири, а также изолятов, перспективных для биологической очистки антропогенно загрязнённых пещер и для использования в СЖО.

Защищаемые положения:

1. Пещерные психрофильные и психротолерантные микромицеты в диапазоне температур +4...+21°С выигрывают конкуренцию у мезофильных грибов за счёт существенно более короткой лаг-фазы, более высокой максимальной удельной скорости роста мицелия и удельной скорости образования новых точек роста, а также за счёт более дружного прорастания спор.

2. Психрофильные микромицеты, выделенные из микробных сообществ пещер Сибири и Кавказа, могут быть использованы для биологической очистки не имеющих собственных автохтонных психрофильных сообществ антропогенно загрязненных пещер рекреационного значения.

3. Психрофильные микромицеты, выделенные из микробных сообществ пещер Сибири, могут быть использованы в качестве безопасных для теплокровных биопрепаратов для защиты зерновых от корневых гнилей.

Практическое значение работы. Штаммы, перспективные для использования в защите зерновых от корневой гнили, переданы в Красноярский НИИСХ для испытания в полевых условиях. Результаты исследований используются в Центре космической биологии и технологии жизнеобеспечения Пекинского аэрокосмического университета (ВДАА) при разработке системы защиты растений в биорегенеративных системах жизнеобеспечения (справка от 25.12.2010).

Изоляты С-5.1 и 011-3.2 депонированы во Всероссийской коллекции микроорганизмов (регистрационные номера соответственно ВКМ Р-4102Б и ВКМ Р-4103Б) и в настоящее время проходят процедуру патентования в качестве основы биопрепаратов для биологической очистки антропогенно загрязненных пещер.

Коллекция выделенных в пещерах Сибири психрофильных и психротолерантных микроорганизмов используется в преподавании дисциплины "Микология" для специальностей 110102, 110203 и 110201М на кафедре защиты растений и биотехнологии ФГОУ ВПО КрасГАУ (Акт внедрения от 15.10.2009).

Апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 2 - в изданиях, рекомендованных ВАК Российской Федерации. Материалы исследований были представлены: на научно-практической конференции "Пещеры: охрана, история исследований, культура, туризм, современное состояние и перспективы научных исследований в пещерах на территории бывшего СССР" (Красноярск, 2008); I (Красноярск, 2009, 1-е место) и

II (Новосибирск, 2009, 1-е место) этапах Всероссийского конкурса на лучшую научную работу среди молодых ученых Минсельхоза РФ; Всероссийской научно-практической и научно-методической конференции с международным участием "Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития" (Красноярск, 2009); П международной (заочной) научно-практической конференции молодых ученых «Инновационные тенденции развития агропромышленного комплекса России», (Красноярск, 2009); XIII международной научной школе-конференции студентов и молодых учёных «Экология Южной Сибири и сопредельных территорий» (Абакан, 2009);

III международной научно-практической конференции молодых ученых «Инновационные тенденции развития Российской науки» (Красноярск, 2010); XVII международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых: Ломоносов - 2010 (Москва, 2010); IV международной конференции молодых ученых «Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых

ученых (Новосибирск 2010); конкурсе Красноярского регионального отделения Российского аграрного движения на «Лучший инновационный проект в сфере АПК» (Красноярск, 2010, лауреат); Третьей общегородской ассамблее «Красноярск. Технологии будущего» (Красноярск, 2010).

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах текста, содержит 80 рисунков и 15 таблиц. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения, практических рекомендаций, выводов и списка литературы, содержащего ссылки на 205 источников, из которых 115 - на иностранных языках.

Личный вклад автора. Образцы из пещер Сибири отбирались автором лично (пещеры Женевская и Ледяная) либо были предоставлены Е.В. Нестеренко. Образцы из пещеры Сарма предоставлены спелеосекцией СФУ и Красноярским спелеоклубом, из пещеры Снежная - С.Е. Мазиной (спелеосекция МГУ). Выделение изолятов, эксперименты, обработка и интерпретация результатов, написание работы выполнены лично автором.

Благодарности. Автор выражает искреннюю благодарность д.б.н., доценту C.B. Хижняку за методическое руководство, д.б.н., профессору Е.Я. Мучкиной за научные консультации, П.В. Рудко, В.В. Сухачеву, Н.В. Кинчиной и другим участникам экспедиции "Арабика-2010", а также С.Е. Мазиной за предоставленные образцы грунта из пещер Кавказа.

Глава 1. Обзор литературы

В главе 1 проводится обзор современного состояния изученности микромицетов карстовых пещер. Наиболее изученными в микологическом плане на территории бывшего СССР являются сухогалерейные пещеры Средней Сибири, где обнаружено присутствие специфических микробных сообществ, адаптированных к низкой температуре подземной среды (Хижняк и др., 1999, 2001, 2003, Нестеренко, 2007; Хижняк, 2009). Среди других работ можно отметить исследования аллохтонной микобиоты в пещерах Урала (Лисина-Кулик, 1967, 1968, 1969), Архангельской области (Иванова, 2002; Семиколенных, 2004), а также патогенных и условно-патогенных для человека микромицетов в пещерах хребта Кугитанг-Тау, Узбекистан (Semikolennykh, 1997) и в пещере Снежная, Абхазия (Мазина, 2008, 2009). Большинство зарубежных исследований выполнены в тропических и субтропических пещерах и носят преимущественно санитарно-микробиологическую направленность. Зарубежные работы, посвященные автохтонной микобиоте пещер, появились только недавно и носят описательный характер (Novakova, 2009).

Глава 2. Объекты и методы исследования

Объектами исследования служили микромицеты, выделенные автором из микробных сообществ низкотемпературных (температура воздуха и грунта +4...+6°С) пещер Средней Сибири - Айдашинская (41/25), Большая Орешная (43470/215), Ручейная (1300/85), Темная (2500/55), Торгашинская (2965/176), Ледяная (720/32), Караульная-2 (540/34), Женевская (6020/90),

Кубинская (3000/274), Партизанская (6649/125), Маячная (1100/60), Парлагольская (600/34) и Кавказа - Сарма (13000/1550), Снежная (19000/1370) (в скобках показаны протяжённость и глубина пещеры, м). Выделение изолятов из образцов и их лабораторные исследования выполняли по методикам, принятым при изучении пещерных микроорганизмов (Нестеренко, 2007; Хижняк, 2009). Тест-объектами при изучении антагонистической активности изолятов служили фитопатогенные грибы Bipolaris sorokiniana, Alternaria tenuissima, A. infectoria, выделенные автором из поражённых органов ячменя и пшеницы, тест-объектами при изучении исходов конкуренции - сапротрофные и условно-патогенные мезофильные грибы, способные к росту при температуре пещер.

Глава 3. Таксономический состав и биологические особенности микромицетов пещер Средней Сибири и Кавказа

Выделенные из пещер Красноярского края психрофильные и психротолерантные микромицеты представлены главным образом р.р. Chrysosporium и Мисог, обнаружены также представители p.p. Pénicillium, Paecilomyces, Verticillium, Doratomyces. Среди психрофильной и психротолерантной микобиоты пещеры Сарма (Кавказ) преобладают представители р. Мисог, выявлены также представители p.p. Pénicillium, Fusarium и неидентифицированные мицелиальные и диморфные грибы.

Температурный оптимум роста варьирует в пределах +17...+24°С, максимальная температура - в пределах +22...+28°С. Типичная кинетика роста пещерных изолятов при разных температурах в сравнении с мезофильными грибами, выделенными из почв региона, показана на рисунках 1 и 2.

Рисунок 1 - Типичная динамика роста роста психрофильных и мезофильных грибов при разных температурах на примере изолятов р. Мисог. 0-5.1 -психрофильный изолят из пещеры Женевская, М-1 - мезофильный изолят из почвы ОПХ «Минино». По оси абсцисс - время (час), по оси ординат - длина мицелия (мкм на 1 ростовую трубку). Правые графики - зависимость логарифма длины мицелия от времени в экспоненциальной фазе роста

Рисунок 2 - Зависимость максимальной удельной скорости роста (А) и максимальной удельной скорости образования точек роста (Б) пещерного (на примере 0-5.1) и почвенного (на примере М-1) изолятов от температуры. По оси абсцисс - температура. Показатели рассчитаны по экспоненциальной фазе роста

Адаптация пещерных микромицетов к низкой температуре проявляется и в

Рисунок 3 - Динамика прорастаиия спор у психрофильных и мезофильных грибов при разной температуре на примере изолятов 0-5.1 и М-1. По оси абсцисс - время (час), по оси ординат - % проросших спор

При температуре, близкой к естественной температуре пещер, время прорастания спор психрофильных изолятов в 5-40 раз меньше, чем время прорастания спор мезофильных почвенных грибов, способных к росту при низкой температуре. Различия обусловлены главным образом существенно более длинной лаг-фазой у мезофильных грибов, составляющей в среднем более ста часов против 5-15 часов у психрофильных изолятов, а также более дружным прорастанием спор. При температуре +17...+21°С лаг-фаза у психрофильных и мезофильных изолятов практически сравнивается, однако при данных температурах для психрофилов характерно более дружное прорастание спор, что находит отражение в более высоких углах наклона соответствующих линий регрессии (рис. 4).

Таким образом, при температуре, близкой к естественной температуре пещер, психрофильные пещерные изоляты имеют преимущество перед мезофильными грибами за счёт существенно более короткой лаг-фазы и более высокой скорости роста мицелия, а при температурах в пределах +17...+21°С -за счёт более дружного прорастания спор и (при температурах ниже 20°С) за счёт более высокой скорости роста мицелия. Между автохтонными изолятами, выделенными из пещер Сибири и из пещеры Сарма, не наблюдается принципиальных различий по кинетике роста на разных температурах, что можно объяснить близкими температурными характеристиками указанных пещер, а также близким таксономическим составом изолятов. В то же время пещерные представители Ъу%отусо\& в среднем демонстрируют существенно более высокую скорость роста в диапазоне температур от +4 до +22°С в сравнении с пещерными АзсотусМа и Оеи1сготусо1а (табл. 1). Таблица 1 - Типичные показатели роста автохтонных пещерных микромицетов в сравнении с мезофильными почвенньми грибами (прирост мицелия приведён

на 1 точку роста в экспоненциальной фазе)

Источник изолятов Показатель Температура, °С

4...8 | 14...17 | 20...22

Пещеры Сибири время прорастания спор, час 5-22 5-6 5-6

прирост мицелия, мкм/ч 1,6-8,6 29,1 34,7

Пещера Сарма время прорастания спор, час 5-24 5-12 5-8

прирост мицелия, мкм/ч 15-25 25-40 32-47

Почвы Сибири время прорастания спор, час 70-112 10-12 6-8

прирост мицелия, мкм/ч 0,6-1,8 6-8 35,2-39,3

Авсоту^а, БеШеготу^а

Пещеры Сибири время прорастания спор, час 5-24 4-20 5-6

прирост мицелия, мкм/ч 0,8-1,6 0,4 -12 0,8-15

Пещера Сарма время прорастания спор, час 18-24 8-10 8-10

прирост мицелия, мкм/ч 1,0-1,6 12-15 12-20

Почвы Сибири время прорастания спор, час 70-100 5-6 4-5

прирост мицелия, мкм/ч 0,1 - 0,5 15-20 40-49

Рисунок 4 - Уравнения линейной регрессии зависимости числа проросших спор от времени с момента окончания лаг-фазы у психрофильного (0-5.1) и мезофильного (М-1) изолятов при температуре +б°С, +17°С и +21°С. По оси абсцисс - время (час), по оси ординат - % проросших спор

При температурах, приближающихся к максимальным, у психрофильных и психротолерантных изолятов наблюдается прорастание отдельных спор, однако они формируют аномальный и нежизнеспособный мицелий, который впоследствии прекращает рост и не восстанавливает его даже при переносе в низкотемпературные условия.

Интересной с практической точки зрения особенностью ряда пещерных изолятов является накопление жироподобных веществ. Так, в гифах выделенного в пещере Ледяная психрофильного штамма ОЬ-3.2 накапливаются липиды в количестве до 50-60% от абсолютно сухого веса, представляющие потенциальный интерес как возможный источник полиненасыщенных жирных кислот. Аналогичное накопление липидов отмечено и для ряда других пещерных изолятов.

Глава 4. Перспективы использования психрофильных и психротолерантных изолятов для вытеснения условно-патогенных мезофильных грибов из пещер рекреационного значения Для решения проблемы загрязнения опасной для человека аллохтонной микобиотой пещер рекреационного значения, не имеющих собственных психрофильных сообществ, нами была предложена идея конкурентного вытеснения мезофильных видов грибов путём интродукции в эти пещеры психрофилов из автохтонных сообществ низкотемпературных пещер.

Для анализа возможных исходов конкуренции между мезофильным и психрофильным изолятами была использована следующая модель: <ИЛ/<И = т1(8)*Р1 ' с1Ь2/ск = т2(8)*Р2

<1Р1/<И = Кр11*т1(8)*Р1-Кл1*Р1*Ь <ЗР2/с11 = Кр12*т2(8)*Р2-Кл2*Р2*Ь

т 1 (Б) = Мтах 1 * 8/(Кз 1 + 8) т2(8) = Мтах2*8/(Кв2 + 8)

сй/ск = -У1*с11Л-К1*1Л-У2*с1Ь2-К2*Ь2 Ь=Ь1+Ь2,

где L1 и L2 - длина мицелия соответственно первого и второго гриба; Mmaxl и Мтах2 - максимальные скорости роста первого и второго гриба; Ksi и Ks2 -константы Михаэлиса первого и второго гриба; S - количество субстрата; Р1 и Р2 - число активных точек роста первого и второго гриба; Kil и Ki2 -коэффициенты, отражающие прекращение роста первого и второго гриба при "встрече" с уже имеющимся мицелием; КрП и Кр12 - коэффициенты ветвления первого и второго гриба; Y1 и Y2 - расход субстрата на синтез биомассы первого и второго гриба; К1 и К2 - расход субстрата на поддержание биомассы первого и второго гриба соответственно.

Несмотря на упрощённый характер модели, кривые роста, рассчитанные по модели с использованием экспериментально полученных коэффициентов, соответствуют реальным экспериментальным кривым, что свидетельствует в пользу адекватности предложенной модели.

Компьютерный анализ модели с использованием экспериментально полученных зависимостей скоростей роста психрофильных и мезофильных изолятов от температуры (см. табл. 1) показал, что в условиях ограниченного субстрата при температуре +4...+6°С и равной дозе засева автохтонные пещерные Zygomycota выигрывают конкуренцию и у аллохтонных Zygomycota (рис. 5, А), и у аллохтонных Ascomycota и Deuteromycota (рис. 5, В). Автохтонные Ascomycota и Deuteromycota при тех же условиях выигрывают конкуренцию и у аллохтонных Zygomycota (рис. 5, С), и у аллохтонных Ascomycota и Deuteromycota (рис. 5, D). Преимущество пещерных изолятов перед почвенными сохраняется даже при соотношении инокулюма 1:100 в пользу почвенного гриба (рис. 5, Е). Только при более высоких соотношениях преимущество начинает получать почвенный гриб (рис. 5, F, соотношение инокулюма 1:400 в пользу почвенного гриба). Преимущество пещерных изолятов перед мезофильными грибами проявляется и при температуре +17..+20°С (рис. 5, G, соотношение инокулюма 1:50 в пользу мезофильного гриба), хотя это преимущество не столь велико, как при более низких температурах (рис. 5, Н, температура +17...+20°С, соотношение инокулюма 1:100 в пользу мезофильного гриба).

Выводы, полученные при анализе модели, были подтверждены лабораторными экспериментами по анализу итогов конкуренции между психрофильными (изоляты G-5.1 и DL-3.2) и мезофильными {Pénicillium sp, Mucor sp) грибами на субстратах, моделирующих антропогенное загрязнение пещер согласно типичным экспедиционным раскладкам (хлеб, отварной рис, сыр и варенье). При температуре +4...+6°С на всех субстратах конкуренцию выигрывали психрофильные изоляты, при этом мезофильные грибы в совместной культуре вообще не формировали споры. При температуре +17...+20°С (температура субтропических пещер) полного вытеснения мезофильных грибов не наблюдалось, однако количество сформировавшихся спор у мезофильных грибов статистически значимо снижалось.

Полученные результаты позволяют рекомендовать психрофильные микромицеты для биологической очистки пещер от субарктической до субтропической зоны.

Рисунок 5 - Рассчитанная по модели динамика роста пещерного ВВ8 и почвенного ■ изолята при совместном культивировании в условии ограниченного субстрата (пояснения - в тексте): но оси абсцисс - время, по оси ординат - суммарная длина мицелия; на круговых диаграммах показано соотношение биомасс пещерного и почвенного изолята после достижения стационарного состояния

Глава 5. Пещерные сообщества микромицетов как источник штаммов для борьбы с болезнями растений в условиях Сибири

Из 73 проанализированных изолятов пещерных микромицетов 34 проявили антагонистическую активность в отношении фитопатогенных грибов, что проявляется в статистически значимом ингибировании прорастания конидий и развития мицелия тест-культуры в присутствии их культурального фильтрата. При этом более половины изученных изолятов являются сильными антагонистами и подавляют прорастания конидий тест-культур на 75-100% (рис. 6).

45

,40

ш" 35 -к 30 ¡25

20 -"15 10

0

1|11

|

10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% Степень подавления прорастания конидий тест-культуры, % Рисунок 6 - Распределение изолятов по степени антагонизма в отношении фитопатогенных грибов на примере В. зогоЫтапа

Повышенная встречаемость антагонистов в пещерных местообитаниях была отмечена и для бактерий (Ланкина, 2010). Возможно, это связано с эволюцией микробных сообществ в условиях жёсткого субстратного лимитирования, когда способность к продуцированию антибиотических веществ становится одним из важных преимуществ в конкуренции за субстрат. Максимальная встречаемость сильных антагонистов отмечена для микроорганизмов, выделенных в пещерах с низкой и умеренной степенью антропогенного загрязнения (пещеры Парлагольская, Партизанская, Маячная, Кубинская, Тёмная, Ручейная, Водораздельная). В пещерах с высокой степенью антропогенного загрязнения (Караульная-2, Ледяная, Большая Орешная, Торгашинская, Айдашинская) относительная встречаемость сильных антагонистов статистически значимо (р < 0,05 по критерию и Б-критерию) ниже и составляет 40% от общего числа выделенных в данных пещерах штаммов (рис. 7). По относительной встречаемости антагонистов среди проанализированных изолятов лидируют представители р. р. С1ас1о5рогтт, Вога1отусе% и Скгузоярогшт. Среди грибов, относящихся к данным родам, сильную антибиотическую активность в отношении грибов р. В1ро1ап& проявили соответственно 100, 90 и 80 % изолятов. Наибольшую активность в отношении одновременно

В. sorokiniana, A. tenuissima и A. infectoria проявили изоляты Тм-1, Т-30, П-31, П-33, J1-85, 0-97, Руч-102, Кем-104, Кем-108, М-117.

Рисунок 7 - Относительная встречаемость сильных (подавление прорастания конидий тест-культуры на 75-100%) и слабых (подавление прорастания конидий тест-культуры на менее чем 50%) антагонистов среди изолятов, выделенных в пещерах с высоким и низким уровнями антропогенного загрязнения

Кроме подавления прорастания конидий отмечен ярко выраженный эффект полного или частичного конкурентного вытеснения грибов р.р. Bipolaris, Alternaría и Fusarium при совместном культивировании с пещерными изолятами в диапазоне температур от +4 до +20°С (температура почвы в первой половине вегетационного периода). Следует отметить, что, хотя указанные фитопатогены относятся к мезофилам, скорость прорастания конидий и роста мицелия при низкой температуре у них существенно превышает аналогичные показатели для сапротрофных почвенных мезофильных грибов (табл. 2), что, очевидно, позволяет им выигрывать конкуренцию у почвенных сапротрофов в начале вегетационного периода.

Таблица 2 - Показатели роста фитопатогенных грибов р.р. Bipolaris, Alternaría

и Fusarium при разной температуре

Изолят Температура, °С Лаг-фаза, час Максимальный прирост гифы, мкм/час Удельная скорость роста, мкм/(мкм*час)

В. sorokiniana +6 3 5,1 0,349

+17 2,5 29,2 0,421

+22 2 37,2 0,462

A. infectoria +6 7 2,5 0,079

+17 6 6,6 0,242

+22 6 15,5 0,217

Fusarium oxysporum +6 7 2,3 0,025

+17 6 6,7 0,168

+22 2 5,9 0,267

Способность грибов р.р. Bipolaris, Alternaría и Fusarium к быстрому росту при низкой температуре наблюдается только на ранних стадиях развития мицелия, вероятно, за счёт использования запасных питательных веществ и ферментов, имеющихся в конидиях, затем рост замедляется до типичных для мезофильных грибов величин (рис. 8).

Рисунок 8 - Динамика роста фитопатогенных грибов p.p. Bipolaris, Alternaría и Fusarium при разной температуре: по абсцисс - время (час), по оси ординат -длина мицелия (мкм на проростковую трубку)

Компьютерное моделирование показало, что в диапазоне температур от +4 до +20°С пещерные изоляты могут быть использованы для конкурентного вытеснения данных фитопатогенных грибов из субстрата. В то же время почвенные мезофильные грибы при низких температурах для этой цели неэффективны, в первую очередь - из-за существенно большей, чем у фитопатогенов, лаг-фазы (рис. 9). Выводы модели были подтверждены экспериментами по совместному культивированию фитопатогенных, психрофильных и мезофияьных грибов, что открывает возможность использования пещерных изолятов для вытеснения фитопатогенных грибов из корнеобитаемой зоны в начале вегетационного периода. Открывается также возможность использования пещерных микромицетов в качестве безопасного для теплокровных агента для вытеснения фитопатогенных грибов из субстратов в биорегенеративных СЖО, основанных на высших растениях.

Bipolaris яшт Почвенный мезофипьный изопят

i

Щ Bipolaris шт ' ж Пещерный

Щ психрофильный дд%-Ш изопят

тш и*»"1 " '

Рисунок 9 - Рассчитанная по модели динамика роста фитопатогенного (р. В1ро1апз), мезофильного (Мисог эр.) и психрофильного изолятов (Мисог ¡р.), по оси абсцисс - время, по оси ординат - суммарная длина мицелия; на круговых диаграммах показано соотношение биомасс изолятов после достижения стационарного состояния

Лабораторные испытания показали, что пещерные изоляты эффективно предотвращают развитие симптомов корневых гнилей и улучшают

биометрические показатели проростков при искусственном заражении семян пшеницы (рис. 10)._

Рисунок 10 - Влияние обработки семян пещерными изолятами на интенсивность развития корневой гнили у проростков пшеницы при искусственном заражении семян В. sorokiniana в лабораторных условиях

Практические рекомендации

1. Красноярскому НИИСХ Россельхозакадемии рекомендуем провести полевые испытания изолятов Кем-108, П-31 и JI-85 в качестве биофунгицидов для защиты зерновых культур от корневых гнилей и аньтернариоза в условиях Сибири.

2. Лаборатории космической биологии и биорегенеративных систем жизнеобеспечения Пекинского аэрокосмического университета рекомендуем провести испытания психрофильных изолятов G-5.1 и DL-3.2 в качестве безопасных для человека биодеструкторов органических отходов в замкнутых системах жизнеобеспечения.

3. Экологической экспедиции при спелеосекции МГУ им. М.В. Ломоносова (рук. к.б.н. Мазина С.Е.) рекомендуем провести испытания выделенных из пещер Красноярского края и пещеры Сарма (Кавказ) психрофильных и психротолерантных микромицетов в качестве биологических агентов для очистки пещеры Снежная (Кавказ) от условно-патогенных мезофильных грибов.

4. Рекомендуем использовать имеющуюся коллекцию пещерных психрофильных микромицетов для преподавания дисциплин микробиологической направленности в ФГОУ ВПО КрасГАУ.

Выводы

1. Среди психрофильной и психротолерантной микобиоты пещер Красноярского края выявлены представители p.p. Chrysosporium, Mucor, Pénicillium, Paecilomyces, Verticillium, Doratomyces, преобладающими являются представители p.p. Chrysosporium и Mucor.

2. В пещере Сарма (Кавказ) присутствуют адаптированные к низким температурам микромицеты, среди которых выявлены представители p.p. Mucor, Pénicillium, Fusarium.

3. Адаптация микромицетов к условиям пещер проявляется в существенно более короткой, чем у мезофильных почвенных грибов, лаг-фазе при прорастании спор при температуре пещер (15-20 часов против более

чем 100 часов у мезофильных изолятов при +4...+б°С); более высокой, чем у мезофильных изолятов, максимальной удельной скорости роста в диапазоне температур от +4...+6°С до +17°С; более высокой скорости образования новых точек роста в диапазоне температур от +4...+6°С до +21°С; неспособности к прорастанию и росту при температурах выше +26..+28°С.

4. Пещерные микромицеты выигрывают конкуренцию у мезофильных грибов в диапазоне температур от +4...+6°С до +17...+20°С, даже если доза инокулята мезофильными грибами превышает дозу инокуляции психрофильными на 2 порядка. Это позволяет использовать автохтонную микобиоту пещер Сибири, а также пещеры Сарма в качестве интродуцентов в антропогенно загрязнённые пещеры, не имеющие собственных автохтонных микробных сообществ, для вытеснения развивающихся на органическом мусоре опасных для человека мезофильных микромицетов в пещерах от субполярного до субтропического пояса.

6. Из 73 проанализированных психрофильных и психротолерантных изолятов пещерных микромицетов 34 проявляют антибиотическую активность в отношении фитопатогенных грибов p.p. Bipolaris и Alternaría. В условиях совместного культивирования пещерные изоляты подавляют развитие фитопатогенных грибов не только за счёт антибиотической активности, но и за счёт конкурентного вытеснения.

7. Существует статистически значимая связь между уровнем антропогенного загрязнения пещеры и степенью антагонизма выделенных из нее изолятов. В среднем максимальная антибиотическая активность характерна для изолятов, выделенных из пещер с умеренным и низким уровнем антропогенного загрязнения, минимальная - для пещер с высоким уровнем антропогенного загрязнения. Наиболее высокая встречаемость антагонистов наблюдается среди представителей р. Chrysosporium.

9. Изоляты Кем-108, П-31 и JI-85 подавляют развитие обыкновенной корневой гнили зерновых в лабораторных условиях и могут быть рекомендованы для полевых испытаний в качестве биофунгицидов для защиты зерновых от гельминтоспориоза, альтернариоза и фузариоза, а также для защиты растений в биорегенеративных СЖО.

Основные положения диссертации опубликованы в работах: Издания, рекомендованные ВАК РФ

1. Хижняк, С.В. Оценка эффективности психрофильных пещерных микроорганизмов в биологической борьбе с обыкновенной корневой гнилью зерновых / С.В. Хижняк, Е.П. Панкина, И.Р. Илиенц // Вестник КрасГАУ. -2009. - № 6. - С. 49-52.

2. Хижняк, С.В. Связь между уровнем антропогенной нагрузки и антибиотической активностью пещерной микробиоты / С.В. Хижняк, И.Р. Илиенц, Е.П. Ланкина // Вестник КрасГАУ. - 2009. - № 7. - С. 52-55.

Из публикаций в других изданиях основными являются:

3. Воробьева, С.В. Микробные сообщества олиготрофных местообитаний как потенциальный источник продуцентов антибиотиков / С.В. Воробьёва,

И.Р. Илиенц, Е.П. Панкина // Инновационные тенденции развития российской науки: мат-лы III Междунар. (заочная) науч.-практ. конф. молодых учёных / Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2010. - С. 36-37.

4. Илиенц, И.Р. Перспективы практического использования микромицетов карстовых пещер Средней Сибири / И.Р. Илиенц, Е.В. Нестеренко // Ломоносов - 2010: тез. докл. XVII Междунар. конф. студентов, аспирантов и молодых учёных; секция "Биология"; 12-15 апреля 2010 г. - М.: МГУ им. М.В. Ломоносова, 2010. - С. 153.

5. Илиенц, И.Р. Перспективы использования психрофильных и психротолерантных микромицетов в защите зерновых от гельминтоспориоза и альтернариоза / И.Р. Илиенц, C.B. Хижняк // Экология Южной Сибири и сопредельных территорий. Вып. 13: в 2 т. T.II / Хакасский гос. ун-т им. Н.Ф. Катанова. - Абакан, 2009. - С. 181.

6. Ланкина, Е.П. Перспективы использования психрофильных и психротолерантных микроорганизмов в защите зерновых от корневых гнилей / Е.П. Ланкина, И.Р. Илиенц, C.B. Хижняк // Инновационные тенденции развития агропромышленного комплекса России: мат-лы II Междунар. (заочной) науч.-практ. конф. молодых учёных / Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2009. -С. 48-52.

7. Ланкина, Е.П. Микробные сообщества экстремальных местообитаний как источник продуцентов антибиотиков для борьбы с болезнями животных и человека / Е.П. Ланкина, C.B. Воробьёва, И.Р. Илиенц // Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых: мат-лы IV Междунар. конф. молодых ученых, посвящ. 40-летию СО Россельхозакадемии / Рос. акад. с.-х. наук. Сиб. регион, отд. - Новосибирск, 2010. - Ч. 2. - С. 85-88.

8. Хижняк, C.B. Перспективы использования психрофильных и психротолерантных микроорганизмов в защите зерновых от обыкновенной корневой гнили / C.B. Хижняк, И.Р. Илиенц, Е.П. Ланкина // Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития: мат-лы Всерос. очно-заочной науч.-практ. и науч.-метод. конф. с междунар. участием / Краснояр. гос. аграр. ун-т. - Красноярск, 2009. - С. 222-225.

9. Хижняк, C.B. Перспективы использования микроорганизмов карстовых пещер в сельскохозяйственной биотехнологии / С. В. Хижняк, Е. П. Ланкина, И.Р. Илиенц, Е.В. Нестеренко // Пещеры: охрана, история исследований, культура, туризм, современное состояние и перспективы научных исследований в пещерах на территории бывшего СССР: мат-лы науч.-практ. конф. - Красноярск: Поликом, 2009. - С. 228-229.

Санитарно-эпидемиологическое заключение № 24.49.04.953.П. 000381.09.03 от 25.09.2003 г. Подписано в печать 17.02.2011. Формат 60x84/16. Бумага тип. № 1 Печать - ризограф. Усл. печ. л. 1,0 Тираж 100 экз. Заказ № 1071 Издательство Красноярского государственного аграрного университета 660017, Красноярск, ул. Ленина, 117

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Илиенц, Ильмира Робертовна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Особенности пещер как природных объектов.,.,.,.

1.2. Особенности пещер как среды обитания живых организмов.

1.3. Основные направления исследований пещерных микромицетов за рубежом.

1.4. Изучение микромицетов в пещерах на территории бывшего

СССР.

Глава 2. Объекты и методы исследования.

2.1 Объекты исследования.

2.2 Методы исследования.,.

Глава 3. Таксономический состав и биологические особенности микромицетов пещер Средней Сибири и Кавказа.

3.1. Таксономический состав.

3.2. Биологические особенности изучаемых изолятов.

Глава 4. Перспективы использования психрофильных и психротолерантных изолятов для вытеснения условно-патогенных мезофильных грибов из пещер рекреационного значения.

Глава 5. Пещерные сообщества микромицетов как источник штаммов для борьбы с болезнями растений в условиях Сибири.

5.1, Антибиотические свойства психрофильных и психротолерантных изолятов в отношении фитопатогенных грибов.

5.2. Возможность использования пещерных изолятов для конкурентного вытеснения фитопатогенных грибов p.p. В ¡polaris, Alternaria и Fusarium

5.3 Лабораторная оценка эффективности штаммов антагонистов в защите пшеницы от гельминтоспориоза.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Сообщества микромицетов пещер как источник штаммов для сельскохозяйственной и экологической биотехнологии"

В последние десятилетия в мире наблюдается растущий интерес к использованию психрофильных и психротолерантных микроорганизмов в биотехнологии (Russell, 1998; Lettinga et al., 2001; Margesin et al., 2008). При этом основным источником психрофильных и психротолерантных изолятов до сих пор остаются Арктика и Антарктика (Hoover, Pikuta, 2010). Исследования, проведённые в Красноярском государственном аграрном университете, показали, что низкотемпературные карстовые пещеры Средней Сибири являются уникальным природным источником психрофильных и психротолерантных бактерий и грибов (Хижняк и др., 1999, 2001, 2003, Нестеренко, 2007; Хижняк, 2009).

Одним из направлений возможного использования пещерных микроорганизмов является защита растений от болезней. Биологические средства, разработанные на основе микроорганизмов - антагонистов возбудителей заболеваний растений, являются хорошей альтернативой химическим препаратам в силу своей безопасности для окружающей среды, и область их применения постоянно расширяется (Возняковская, 1993; Штерншис, 2004; Pal and McSpadden, 2006). Однако применяемые в настоящее время биопрепараты создаются на основе мезофильных микроорганизмов. Это снижает их эффективность в условиях низких температур начала вегетационного периода. Кроме этого, ряд авторов отмечают потенциальную опасность микробиологических препаратов для здоровья человека и сельскохозяйственных животных. В первую очередь это относится к микроскопическим грибам (Саттон, 2001; Strasser, 2006; Andreas, 2008). Использование биопрепаратов на основе психрофильных и психротолерантных штаммов позволит устранить риск для здоровья человека. Температурные пределы роста подобных микроорганизмов позволяют им успешно развиваться в почвах, особенно — в начале вегетационного периода. В то же время они не способны к росту при температуре человеческого тела, что исключает возможность возникновения заболеваний у человека и теплокровных животных даже при массированной инокуляции организма.

Показано, что психрофильные и психротолерантные бактерии сибирских пещер могут быть использованы в сельскохозяйственной биотехнологии в качестве эффективного при низких температурах начала вегетационного периода и безопасного для теплокровных биологического средства защиты растений от болезней (Хижняк и др., 2009; Ланкина, 2010). В этой связи представляется актуальным оценить возможность использования микробных сообществ низкотемпературных пещер в качестве источника психрофильных и психротолерантных штаммов микромицетов, представляющих интерес с точки зрения защиты растений. Подобные штаммы могут найти применение не только в сельском хозяйстве, но и в основанных на высших растениях биорегенеративных замкнутых системах жизнеобеспечения (СЖО), предназначенных для внеземных поселений (Соглашение о научно-исследовательском сотрудничестве между Красноярским государственным аграрным университетом (Россия) и Пекинским аэрокосмическим университетом (КНР) от 25.06.09). Из-за жёстких требований химической и биологической безопасности психрофильные и психротолерантные микроорганизмы, не способные к росту при температуре человеческого тела, фактически не имеют альтернативы в качестве средства защиты растений в подобных системах.

Ещё одним направлением использования пещерных микромицетов может стать борьба с антропогенным и биологическим загрязнением в пещерах, не имеющих в силу своей геологической истории автохтонных микробных сообществ. В таких пещерах после проникновения в них человека на органических отходах развиваются сообщества аллохтонных мезофильных грибов, представляющие реальную опасность для посетителей (Мазина, 2009, 2010). Можно ожидать, что интродукция в подобные пещеры микромицетов, эволюционно адаптированных к низкотемпературным условиям подземной среды, позволит вытеснить опасные для человека мезофильные виды и ускорит биологическое самоочищение подземной среды.

Целью настоящего исследования является изучение перспектив использования пещерных микробных сообществ в качестве источника штаммов микромицетов для сельскохозяйственной и экологической i биотехнологии.

Основные задачи:

1. Создание коллекции микромицетов карстовых пещер Средней Сибири и пещеры Сарма (Кавказ) и изучение влияния температуры на кинетику роста пещерных изолятов.

2. Изучение влияния температуры и стартовой численности на исходы конкуренции за субстрат между психрофильными и мезофильными микромицетами.

3. Изучение возможности применения пещерных микромицетов для конкурентного вытеснения опасных для человека мезофильных видов из пещер рекреационного значения.

4. Поиск психрофильных и психротолерантных изолятов, проявляющих антагонизм в отношении фитопатогенных грибов р.р. Bipolaris и Alternaría.

5. Изучение факторов, влияющих на относительную встречаемость штаммов-антагонистов в пещерах.

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Илиенц, Ильмира Робертовна

Выводы

1. Среди психрофильной и психротолерантной микобиоты пещер Красноярского края выявлены представители p.p. Chrysosporium, Mucor, Pénicillium, Paecilomyces, Verticillium, Doratomyces, преобладающими являются представители p.p. Chrysosporium и Mucor.

2. В пещере Сарма (Кавказ) присутствуют адаптированные к низким температурам микромицеты, среди которых выявлены представители p.p. Mucor, Pénicillium, Fusarium.

3. Адаптация микромицетов к условиям пещер проявляется в существенно более короткой, чем у мезофилъных почвенных грибов, лаг-фазе при прорастании спор при температуре пещер (15-20 часов против более чем 100 часов у мезофилъных изолятов при +4.+6°С); более высокой, чем у мезофилъных изолятов, максимальной удельной скорости роста в диапазоне температур от +4.+6°С до +17°С; более высокой скорости образования новых точек роста в диапазоне температур от +4.+6°С до +21°С; неспособности к прорастанию и росту при температурах выше +2б.+28°С.

4. Пещерные микромицеты выигрывают конкуренцию у мезофилъных грибов в диапазоне температур от +4.+6°С до +17.+20°С, даже-если доза инокулята мезофильными грибами превышает дозу инокуляции психрофильными на 2 порядка. Это позволяет использовать автохтонную микобиоту пещер Сибири, а также пещеры Сарма в качестве интродуцентов в антропогенно загрязнённые пещеры, не имеющие собственных автохтонных микробных сообществ, для вытеснения развивающихся на органическом мусоре опасных для человека мезофильных микромицетов в пещерах от субполярного до субтропического пояса.

6. Из 73 проанализированных психрофильных и психротолерантных изолятов пещерных микромицетов 34 проявляют антибиотическую активность в отношении фитопатогенных грибов p.p. Bipolaris и Alternaria. В условиях совместного культивирования пещерные изоляты подавляют развитие фитопатогенных трибов не только за счёт антибиотической активности, но и за счёт конкурентного вытеснения.

7. Существует статистически значимая связь между уровнем антропогенного загрязнения пещеры и степенью антагонизма выделенных из нее изолятов. В среднем максимальная антибиотическая активность характерна для изолятов, выделенных из пещер с умеренным и низким уровнем антропогенного загрязнения, минимальная — для пещер с высоким уровнем антропогенного загрязнения. Наиболее высокая встречаемость антагонистов наблюдается среди представителей р. Скгуяозрогшт.

9. Изоляты Кем-108, П-31 и Л-85 подавляют развитие обыкновенной корневой гнили зерновых в лабораторных условиях и могут быть рекомендованы для полевых испытаний в качестве биофунгицидов для защиты зерновых от гельминтоспориоза, альтернариоза и фузариоза, а также для защиты растений в биорегенеративных СЖО.

Практические рекомендации

1. Красноярскому НИИСХ Россельхозакадемии рекомендуем провести полевые испытания изолятов Кем-108, П-31 и Л-85 в качестве биофунгицидов для защиты зерновых культур от корневых гнилей и альтернариоза в условиях Сибири.

2. Лаборатории космической биологии и биорегенеративных систем жизнеобеспечения Пекинского аэрокосмического университета рекомендуем провести испытания психрофильных изолятов 0-5.1 и БЬ-3.2 в качестве безопасных для человека биодеструкторов органических отходов в замкнутых системах жизнеобеспечения.

3. Экологической экспедиции при спелеосекции МГУ им. М.В. Ломоносова (рук. к.б.н. Мазина С.Е.) рекомендуем провести испытания выделенных из пещер Красноярского края и пещеры Сарма (Кавказ) психрофильных и психротолерантных микромицетов в качестве биологических агентов для очистки пещеры Снежная (Кавказ) от условно-патогенных мезофильных грибов.

4. Рекомендуем использовать имеющуюся коллекцию пещерных психрофильных микромицетов для преподавания дисциплин микробиологической направленности в ФГОУ ВПО КрасГАУ.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Илиенц, Ильмира Робертовна, Красноярск

1. Абросов, Н.С. Экологические механизмы сосуществования и видовой регуляции./ Н.С, Абросов Б.Г.Ковров, О.А.Черепанов. Новосибирск, Наука, 1982. - 287 с.

2. Бабьева, И.П. Биология почв./ И.П. Бабьева, Г.М. Енова. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1983. - 247 с.

3. Берсенев, Ю.И. Памятники природы карстового происхождения Приморского края. Тихоокеанский институт географии./ Ю.И. Берсенев. -Владивосток: ДВНЦ АН СССР, 1985. 48 с.

4. Березикова, A.A. Пситхротолерантные микроорганизмы, перспективные для использования в рекультивации загрязненных нефтепродуктами почв / A.A. Березикова, C.B. Хижняк // Вестник КрасГАУ. 2001. - Вып. 7 - С. 8788.

5. Бластомикоз Буссе // Вестник инфектологии и паразитологии, 2005. -www.infectology.ru/nosology/infectious/mycosis/BUSSE.aspx

6. Бластомикоз Гилкриста // Вестник инфектологии и паразитологии, 2005. -http://www.infectologv.ru/nosology/infectious/mycosis/GILCHR.aspx

7. Варфоломеев С. Д., Гуревич К. Г. Биокинетика. Практический курс. M ФАИР-ПРЕСС, 1999 — 720 с.

8. Ведров, Н.Г. Селекция и семеноводство яровой пшеницы в экстремальных условиях./ Н.Г. Ведров. Красноярск: Изд-во Краснояр. ун-та, 1984. - 240 с,

9. Великанов, JI.JI. К вопросу о биологической роли токсических метаболитов Helminthosporium sorokinianum Sacc / JI.JI. Великанов // Микробиологические процессы в почвах и урожайность сельскохозяйственных культур. 1978. - С.69-71.

10. Власов, Д.Ю. Развитие микромицетов на каменистом субстрате в условиях эксперимента / Д.Ю. Власов, М.С. Зеленская // Микол. и микопатол, 2003. - Т. 37, вып. 6. - С.ЗЗ - 37.

11. Возняковская, Ю.М. Биологические основы борьбы с корневой гнилью ячменя / Ю.М. Возняковская, А.К. Никонорова // Доклады Россельхозакадемии. 1993. - Вып. 2. - С.38-42.

12. Гвоздецкий, H.A. Карст./ H.A. Гвоздецкий. — М.: Мысль,-1981. 270 с.

13. Георгиева, О. Применение триходермина при культивировании томата на искусственных субстратах / О. Георгиева, Г. Георгиев // Защита Растений. — 2007. № 1. - С.29-31.

14. Гергедава, Б.А. Подземные ландшафты./ Б.А. Гергедава. — Тбилиси: Мецниереба, 1983.- 140 с.

15. Гистоплазмоз // Вестник инфектологии и паразитологии, 2005. -http://www.infectology.ru/nosology/mfectious/mycosis/histop.aspx

16. Голод, В.М. Рекомендации по выявлению, учёту, оформлению и организации охраны пещер в качестве государственных памятников природы./ В.М. Голод, Б.Р. Мавлюдов. М.: ВООП, 1984. - 50 с.

17. Дублянский, В.Н. Карстовые пещеры и шахты Горного Крыма./ В.Н. Дублянский. Л.:Наука, 1977. — 182 с.

18. Дублянский, В.Н,, Андрейчук, В.Н. Спелеология, Терминология, связи с другими науками, классификация полостей./ В.Н. Дублянский, В.Н. Андрейчук. Кунгур, 1989. - 33с.

19. Дублянский, В.Н. Терминология спелеологии./ В.Н. Дублянский, В.Н. Андрейчук. Кунгур: УрО АН СССР, 1991. - 202 с.

20. Дублянский, В.Н. Занимательная спелеология./ В.Н. Дублянский. -Челябинск: Урал, 2000. 527 с.

21. Дурынина, Е.П. Почвенные фитопатогенные грибы./ Е.П. Дурынина, Л.Л. Великанов. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1984. - 107 с.

22. Дьяков, Ю.Т. Введение в альгологию и микологию./ Ю.Т. Дьяков. — М.: Изд.-во МГУ, 2000. 190 с.

23. Дьяков, Ю.Т. Введение в генетику грибов./ Ю.Т. Дьяков. — М.: Академия, 2005.-304 с.

24. Егорова, JI.H. Почвенные грибы Дальнего Востока: Гифомицеты./ JI.H. Егорова. Л.: Наука, 1986. - 192 с.

25. Жизнь микробов в экстрем^ьных условиях. / Под ред. Д. Кашнера. М.: Мир, 1981.-520 с.

26. Иберла, К. Факторный анализ./ 1С Иберла. М.: Статистика, 1980. - 398 с.

27. Кадастр пещер Красноярского края. Красноярск. - 1999. - Т. 1, -304 с.

28. Кирцидели, И.Ю. Почвенные микромицеты архипелага Северная Земля. / И.Ю. Кирцидели, Б.А. Томилин. // Микол. и фитопатол. — 1997. — 31(6). — С. 1 -6.

29. Кирцидели, И.Ю. Почвенные микромицеты горных тундр (Полярный Урал и плато путорана) / И.Ю. Кирцидели // Микология и фитопатология, -2001 Т. 35. вып. 5. - С.48 - 53.

30. Коршунова, А.Ф. Корневые гнили зерновых в Сибири,/ А.Ф. Коршунова и др. Л.: Колос, 1974. - 125 с.

31. Ланкина, Е.П. Бактериальные сообщества пещер как источник штаммов для биологической защиты растений от болезней // Автореф. дисс. . канд.биол. наук: 03.02.08. Красноярск: Краснояр, гос. аграр. ун-т, 2010. -19 с.

32. Лисина-Кулик, Е.С. Микофлора почв, воды подземных озер и льда разных типов Кунгурской ледяной пещеры. / Е.С. Лисина-Кулик, Л.Д. Барсукова // Микология и Фитопатология. 1967 - 1 (2) — С. 140-146.

33. Лисина-Кулик, Е.С. Микофлора почв некоторых карстовых пещер Кавказа (Краснодарский край). / Е.С. Лисина-Кулик. // Микология и Фитопатология. 1968. - 2 (6) - С. 458-461.

34. Лисина-Кулик, Е.С. Микофлора почв и пород некоторых карстовых пещер южного Приморья./ Е.С. Лисина-Кулик. // Микология и Фитопатология. 1969. - 3 (6). - С. 538-542.

35. Лоскутова И.А. Плесневые грибы пещеры Шульган-Таш (Каповой) и их связь с экскурсионной нагрузкой / Лоскутова И.А., Фирсов H.H. // Пещерный палеолит Урала: Матер. Междунар. конф. Уфа, 1997. - С. 115-119.

36. Любищев, A.A. Дисперсионный анализ в биологии./ A.A. Любищев. М.: Изд-во МГУ, 1986, - 200 с.

37. Максимович, Г.А. Карстосфера и типы карста./ Г.А, Максимович. // Карст и гидрогеология Предуралья. 1979. - С. 16-21.

38. Маруашвили, Л.И. Карстосфера, ее размеры и отношение к другим геосферам./ Л.И. Маруашвили // Сообщ. АН ГССР. 1970. - Т. 57, N 2. - С. 357-360.

39. Мельник, В.А. Класс Hyphomycetes: определитель грибов России; сем. Dematiaceae. Ч. 1./ В.А. Мельник СПб.: Наука, 2000. - 371 с.

40. Методы экспериментальной микологии: справочник./ Под ред. В.И. Билай. Киев: Наукова думка, 1982. - 551 с.

41. Микробиология и основы патологии растений: Метод, указания. 1. Морфология грибов / Красноярск: Краснояр. гос. аграр. ун-т., 1999. — 34 с.

42. Михеев, В.Е. Пещера Маячная / В.Е. Михеев, Н. Мартынович // Материалы научно практической конференции - Красноярск, 1999. - С. 56 -58.

43. Мучкина, Е.Я. Методы статистической обработки в агрохимических и биологических исследованиях. 4.1./ Е.Я. Мучкина, C.B. Хижняк. -Красноярск, 2001. 57 с.

44. Мюллер, Э. Микология./ Э. Мюллер, В. Лёффлер. М.: Мир. - 1995.-343 с.

45. Наблюдения и поисковая работа спелеологов в пещерах с палеолитическими остатками/ Е.П. Близнецов. Пермь: УрОРАН, 1992. - 78 с.

46. Нестеренко, Е.В. Микромицеты пещер Красноярского края / Е.В. Нестеренко, Ю.Е. Гладкова // Материалы конф., посвященной 85-летию кафедры микологии и альгологии МГУ им. М.В. Ломоносова. 2004. - С.100.

47. Нестеренко, Е.В. Микромицеты карстовых полостей Средней Сибири // Автореф. дисс, . канд.биол. наук: 32.00.16, Красноярск: Краснояр, гос. аграр. ун-т, 2007. - 19 с.

48. Петров, В.Б. Микробиологические препараты в биологизации земледелия России/ В.Б. Петров, В.К. Чеботарь, А.Е. Казаков. ГНУ Всероссийский НИИ сельскохозяйственной микробиологии — 2004. - http://www.agroru.com/cgi-bin/newsshow.pl?article=3 6

49. Плохинский, Н. А. Биометрия./ Н. А. Плохинский. М.: Изд-во МГУ, 1970.-360 с.

50. Поллард, Д. Справочник по вычислительным методам статистики./ Д. Поллард. М.: Финансы и статистика, 1982. - 344 с.

51. Полонская, Д.Е. Экологические особенности функционирования микробоценозов в почвах Красноярской и Канской лесостепей / Д.Е. Полонская. Красноярск, 2000. - 30 с.

52. Прикладная статистика: классификация и снижение размерности./ С.А. Айвазян, и др. М.: Финансы и статистика, 1989. - 607 с.

53. Рогозин, Д.Ю. Отчет о научно-исследовательской работе по гранту М0041 Красноярского краевого фонда науки и научно-образовательногоцентра "Енисей" "Микробиологический мониторинг пещер Красноярского края", Красноярск, 2000 25 с.

54. Родигин, М.Н. Общая фитопатология./ М.Н. Родигин. М.: Высшая школа, 1978. - 365 с.

55. Руководство по инфекционным болезням с атласом инфекционной патологии./ Под ред. Ю.В. Лобзина, С.С. Козлова, А.Н. Ускова. СПб, 2000. -www.infectoIogy.spb.ru

56. Руководство по охране пещер и карста. Всемирный союз охраны природы (IOCN) и его Комиссия по охраняемым территориям (WCPA), 1997.

57. Саттон, Д. Определитель патогенных и условно патогенных грибов./ Д. Саттон, А. Фотергилл, М. Ринальди. М.: Мир, 2001. - 486 стр.

58. Семиколенных, A.A. Динамика почвенных микробоценозов северотаежных моренных и карстовых ландшафтов Архангельской области / A.A. Семиколенных, М.В. Согонов // Сибирцевские чтения: Труды XI съезда Русского географического общества. —2000. Т.6. - С.39-41.

59. Сравнительный анализ специфичных для мрамора микобиот / Е.В. Богомолова, Д.Ю. Власов, Е.С. Сагуленко // Микол, и фитопатол, 1997. -Вып. 5.-С.9-15.

60. Туристские спортивные маршруты: перечень классифицированных туристских маршрутов на 1989 — 1992 г.г. — М.: Профиздат, 1989

61. Хижняк, C.B. Микрофлора пещер окрестностей г.Красноярска / C.B. Хижняк, И.В. Таушева, И.Н. Маяцих // Вестник Красноярского государственного аграрного университета. —1999. Вып. 5. - С.80-84.

62. Хижняк, C.B. Гетеротрофные микроорганизмы пещер Красноярского края / C.B. Хижняк и др. // Научная страница РСС 2000. - № 1 - С.3-4.

63. Хижняк, C.B. Санитарно-биологическая оценка источников питьевой воды в карстовых пещерах Красноярского края / C.B. Хижняк и др.// Проблемы экологии и развития больших городов: Мат-лы Всерос. научно-практ. конф. 5-6 июня 2000. 2000. - С. 157.

64. Хижняк, C.B. Естественная микрофлора пещер Красноярского края / C.B. Хижняк и др. // Проблемы экологии и охраны пещер: Мат-лы 1-й Общероссийской научно-практ. конф.: Сб. науч. тр. Красноярск, 2001. - С. 48-57.

65. Хижняк., C.B. Численность и качественный состав микрофлоры карстовых пещер Красноярского края / C.B. Хижняк и др// Проблемы экологии Сибири: Сб. науч. трудов — Красноярск: Изд. Краснояр. гос. аграр. ун-та., 2001 С.69-76.

66. Хижняк, C.B. Психрофильные и психротолерантные гетеротрофные микроорганизмы карстовых полостей средней Сибири / Хижняк C.B. и др. // Экология. 2003. - № 4. - С.261-266.

67. Хижняк, С,В. Основы систематики, морфологии и экологии грибов. / C.B. Хижняк, Е.И. Сорокатая. Краснояр. гос. аграр. ун-т - Красноярск, 2003 — 113 с.

68. Хижняк, C.B. Биологическое разнообразие беспозвоночных карстовых полостей Красноярского края, / C.B. Хижняк, Ю.Е. Гладкова. // Проблемы использования и охраны природных ресурсов Центральной Сибири. -Красноярск: КНИИГИМС, 2004. Вып. 6. - С.85 - 88.

69. Хижняк, C.B. Методы статистической обработки в агрохимических и биологических исследованиях. Ч.З./ С,В. Хижняк, Е.Я. Мучкина. -Красноярск, 2005. 103 с.

70. Хижняк, C.B. Оценка эффективности психрофильных пещерных микроорганизмов в биологической борьбе с обыкновенной корневой гнилью зерновых / C.B. Хижняк, Е.П. Ланкина, И.Р. Илиенц // Вестник КрасГАУ. — 2009.-№6.-С. 49-52.

71. Хижняк, C.B. Связь между уровнем антропогенной нагрузки и антибиотической активностью пещерной микробиоты / C.B. Хижняк, И.Р. Илиенц, Е.П. Ланкина // Вестник КрасГАУ. 2009. - № 7. - С. 52-55.

72. Цыкин, P.A. Пещеры Красноярского края./ P.A. Цыкин, и др. -Красноярск: Красноярское книжное изд-во, 1974.-104 с.

73. Цыкин, P.A. Карст восточной части Алтае-Саянской складчатой области./ P.A. Цыкин, Ж.Л. Цыкина. Новосибирск: Наука, 1978.-94 с.

74. Цыкин, P.A. Пещеры Алтае-Саянской горной области. / P.A. Цыкин, Ж.Л. Цыкина, К.П. Черняева. Красноярск: ВИНИТИ, 1979. - 163 с.

75. Цыкин, P.A. Отложения и полезные ископаемые карста./ P.A. Цыкин. -Новосибирск: Наука, 1985. 267 с.

76. Цыкин, P.A. Пещеры Алтае-Саянской горной области / P.A. Цыкин // Пещеры. Итоги исследования: Межвузовский сб. науч. трудов. — Пермь: Изд. Перм. ун-та, 1993. С.59-70.

77. Цыкина, Ж.Л. Специализированное обследование пещер и горных выработок юга Красноярского края./ Ж.Л. Цыкина, Л.А. Забусов. -Новосибирск: Наука, 1975. — 76 с.

78. Чулкина, В.А. Корневые гнили хлебных злаков в Сибири./ В.А. Чулкина -Н.: Наука, 1985.- 188 с.

79. Щтерншис, М.В. Биолргическая защита растений / М.В. Штерншис, Ф.С. Джалилов, И.В. Андреева, О.Г. Томилова. — М.: Колос, 2004. — 264 с.

80. Яковлев, А.Ю. Низкртемпературньте защитные белки грибов и растений / А.Ю. Яковлев, Г.В. Боровский // Микол. и микопатол. 2003. - №6. - С.87—91.

81. Ajello, L. Bat histoplasmosis in Alabama / L. Ajello, T.S. Hosty, J. Palmer // Am J Trop Med Hyg. 1967. №16 (3). - P.329-331. World Cave Database. -http://wvAv-sop.inria.fi-/agos-soDhia/sis/DB/database.html

82. Ajello, L. Isolation of Histoplasma capsulatum from an oil bird (steatornis caripensis) cave in Venezuela / L. Ajello, T. Briceno-Maaz, H. Campins, J.C. Moore // Mycopathologia. 1960. - Vol. 12, Number 3 / March. - P.199-206.

83. Al-Doory, Y. Isolation of Histoplasma capsulatum from a texas cave / Y. Al-Doory, eds. // Mycopathologia. 1968. - Vol. 35, Numbers 3-4 / October. - P.201-207.

84. Ashford, D.A. Outbreak of histoplasmosis among cavers attending the National Speleologicat Society annual convention / D.A. Ashford et al. // Am J Trop Med Hyg Texas, 1999. - №60. P.899-903.

85. Bartlett, P.C. Bats in the belfry: an outbreak of histoplasmosis / P.C, Bartlett, eds.//Am J Public Health. 1982. - December, 72(12). - P. 1369-1372.

86. Bat-Inhabited Caves in Japan // Applied And Environmental Microbiology, Nov., 2005. P.7626-7629.

87. Baum, G.L. Isolation of fungi from judean desert soil / G.L. Baum, D. Artis // Mycopathologia. 1966. - Vol. 29, Numbers 3-4 / August. - P.350-354.

88. Benoit, J.B. Mycoflora of a Trogloxenic Cave Cricket, Hadenoecus cumberlandicus from Two Small Caves in Northeastern Kentucky / J.B. Benoit, eds. // Annals of the Entomological Society of America. 2004. - Vol. 97, Issue 5 (September). -P.989-993.

89. Betancourt, C. Evaluación micológica de la Cueva Ensueño, Hatillo, Puerto Rico Mayagüez./ C. Betancourt, O. Pérez, D. Seguí, I. Emmanueli. Puerto Rico: Estudio Técnico para la Compañía Lebrón &Associates, 1988. - P.78 - 82.

90. Boston, PJ. Cave biosignature suites: microbes, minerals, and Mars./ P.J. Boston, et.al. // Astrobiology, 2001. vol. 1. - P. 25-55.

91. Burford, E.P. Geomycology: fungi in mineral substrata / E.P. Burford, M.K. Gadd, G.M. Gadd // Mycologist. 2003. - №17. - P.98-107.

92. Buxton, J.A. Outbreak of histoplasmosis in a school party that visited a cave in Belize: role of antigen testing in diagnosis / J.A. Buxton, et al. // J Travel Med, 2002. №9. - P.48-50.

93. Campins, H. An epidemic of histoplasmosis in Venezuela / H. Campins, M. Dorante, L.G. Lopez, C. Zubillaga // Am J Trop Med Hyg. 1956. - Jul. 5(4). -P.690-695.

94. Chick, E.W. A combined field and laboratory epidemic of histoplasmosis. Isolation from bat feces in West Virginia / E.W. Chick, eds. // Am Rev Respir Dis. 1972. - Jun. 105(6). - P.968-971.

95. Clinton F. Hodges. Comparative total and proportional rate of germination of Bipolaris sorokiniana and Curvularia geniculata conidia is influenced by culture age and temperature / Clinton F. Hodges — Mycopathologia,

96. Springer Netherlands(Online), Volume 57, Number 1, 1975 r, p. 9-14

97. Cubbon, B.D. Cave flora / B.D. Cubbon, T.D. Ford, C.H.D. Cullingford // The science of speleology: London, Academic Press. 1976. - P.423-452.

98. Culver, D.C. Cave life. Evolution and ecology / D.C. Culver // Cambridge & London, Harvard University Press. 1982 - P. 14.

99. Culver, D.C. Species interactions in cave stream communities: experimental results and microdistribution effects. American Midland Naturalist./ D.C. Culver, D.W. Fong. 1991. - № 126. - P. 364-379.

100. Cunningham, K.I. Bacteria, fungi and biokarst in Lechuguilla Cave, Carlsbad Caverns National Park, New Mexico / K.I. Cunningham, et al, // Environmental Geology. 1995. - vol.25, n.l. -P.2-8.

101. Dawson, H.E. Hydrochemistry of Lechuguilla Cave. / H.E. Dawson. // Technical report to Carlsbad Caverns National Park. — 1996. P.6.

102. Dighton, J. The Fungal Community./ J. Dighton, J.F. White, P. Oudemans. / Taylor & Francis, 2005 936 p.

103. DiSalvo, A.F. Histoplasmosis in South Carolina: support for the microfocus concept. / A.F. DiSalvo, W.M. Johnson. // Am J Epidemiol. — 1979. — Apr. 109(4). P.480^192.

104. Dix, N.J. Fungal Ecology./ N.J. Dix, J. Webster. Chapman & Hall. -1995.-560 p.

105. Dr. Fungus-Fungi Descriptions — http://www.doctorfungus.org/tiiefungi/Descriptionindex.htm

106. Elhottova, D.K. Domica and Ardovska Cave study of interactions between fauna and microflora / D.K. Elhottova, eds. // Aragonit. - 2003. - №8. — P.38-40.

107. Elliot, W.R. Plants and Fungi of the Missouri Karst. / W.R. Elliot, T. Smithhttp://www.utexas.edu/tmm/sponsored sites/biospeleology/handouts/karstplants.rtf

108. Emmons, C.W. Association of bats with histoplasmosis / C.W. Emmons // Public Health Rep. 1958. - Jul. 73(7). - P.590-595.

109. Englert, E.Jr. Acute diffuse pulmonary granulomatosis in bridge workers / E.Jr. Englert, A.W. Phillips // Am J Med. 1953. - Nov. 15(5). - P.733-740.

110. Erkens, K. Histoplasmosis in a group of bat researchers returning from Cuba / K. Erkens, et al. // Deutsche Medizinische Wochenschrift. 2002. - 127(1-2). — P.21-25.

111. Febbriorello, P. Mycology Studies in the Rio Corredor Basin / P. Febbriorello // National Speleological Society Bulletin. 1993. - vol. 55, nr. 1-2 / June-Dec. P.91-95.

112. Fungi in the Ramioul cave — http://www.botany.utoronto.ca/ResearchLabs/ MallochLab/Malloch/Caves/Ramioul.html

113. Geoffrey M. Gadd e.p.burford@dundee.ac.uk

114. Gerald E. Manifestations of Human Aspergillosis / Gerald E., Pierard J.E. // Exogenous Dermatology. 2004. - № 3. - P. 144-153.

115. Gottstein, M.S. An overview of the cave and interstitial biota of Croatia / M.S. Gottstein, eds. //Nat. Croat 2002. - Vol. 11, Suppl. 1. - P.l-112.

116. Graening, G. Subterranean biodiversity in the Ozark Plateaus of Arkansas. Final report to AR Natural Heritage Commission / G. Graening, M. Slay, A. Brown // AR Game & Fish Commission. Dept. of Biological Sciences, UAF. 2001. - 52 p.

117. Grieken, V. Cultural heritage and the environment / V. Grieken, eds. // Pure & Appl. Chem. 1998. - Vol. 70. - No. 12. - P.2327-2331.

118. Grishkan, I. Micromycetes from the Saline Arubotaim Cave: Mount Sedom, the Dead Sea Southwestern Shore, Israel / I. Grishkan, E. Nevo, S.P. Wasser // Journal of arid environments (J. arid environ.). 2004. - vol. 57, no4. -P.431-443.

119. Hasenclever, H.F. The natural occurrence of Histoplasma capsulatum in a cave. I. Epidemiologic aspects / H.F. Hasenclever, M.H. Shacklette R.V. Young, G.A. Gelderman // Am J Epidemiol. 1967. - Jul.86(l). - P.238-245.

120. Hatakeyama, S. Cave-associated acute pulmonary histoplasmosis in two Japanese returning from Mexico / S. Hatakeyama, eds. // Nihon Kokyuki Gakkai Zasshi. 2001. - Apr. 39(4). - 293p.

121. Histoplasma capsulatum: an integrative study in Guerrero, Mexico. // Revista Mexicana de Biodiversidad. 2006. - №77. - P. 153-168.

122. Hoff, G.L. The role of the bats in the propagation and spread of histoplasmosis / G.L. Hoff, W.J. Bigler // A review: Journal of the Wildlife Diseases. 1981. - v. 17. - P.191-196.

123. Hsu, M.J. Occurrence and diversity of thermophilous soil microfungi in forest and cave ecosystems of Taiwan / M.J. Hsu, G. Agoramoorthy // Fungal Diversity. Vol. 7, June 2001. - P.27-33.

124. Hunt, P.J. Histoplasma capsulatum. Isolation from an Australian cave environment and from a patient / P.J. Hunt, eds. // Med J Aust. 1984. - Sep 1., 141(5).-P.280.

125. Huppert, G.N. Significant Step for International Cave Conservation / G.N. Huppert // NSS News, 1988. Vol. 46, no. 2, February. - P.37-38.

126. Infectious Disease Names and their Etiologies http://www.kcom.edu/faculty/chamberlainAVebsite/diseases.htm

127. Isbister, J. Histoplasmosis: an outbreak occurring among young men who visited one cave / J. Isbister, M. Elliott, S. Nogrady // Med J. 1976. - Aug. 14. 2(7). - P.243.

128. Jakal, J. Prakticka speleologia./ J. Jakal. Bratislava: Osveta, 1982. -157 p.

129. Kajihiro, E.S. Occurrence of dermatophytes in fresh bat guano / E.S. Kajihiro // Appl. Microbiol. 1965. - №13. - P.720-724.

130. Kis-Papo, T. Evolution of genomic diversity and sex at extreme environments: Fungal life under hypersaline Dead Sea stress / T. Kis-Papo, eds. // Proc Natl Acad Sci USA.- 2003. December 9, 100(25). - P. 14970-14975.

131. Koehn, R.D. Monera population indigenous to an artesian community within the Edwards Aguifer / R.D. Koehn, K.A. Kuehn, R.M. O'Neil 11 Suthwest. Natur. 1991. - 36, №3. - P.368 - 373.

132. Koilraj, J. Fungal diversity inside caves of Southern India / J. Koilraj, eds. // Current Science. 1999. - Vol. 77, Num. 8. - P.1081-1084.

133. Kubâtovâ, A. Entomopathogenic fungi associated with in-sect hibernating in underground shelters / A. Kubâtovâ, L. Dvorak // Czech Mycol. -2005. 57(3 -4). - P.221 -237.

134. Lottenberg, R. Pulmonary histoplasmosis associated with exploration of a bat cave / R. Lottenberg, R.H. Waldman, L. Ajello, G.L. Hoff, W. Bigler, S.R. Zellner // Am J Epidemiol. 1979. - Aug. 110(2). P. 156-161.

135. Lettinga, G., Rebac, S., Zeeman, G. Challenge of psychrophilic anaerobic wastewater treatment // Trends in Biotechnology Volume 19, Issue 9, 1 September 2001, Pages 363-370

136. Malloch, D. Découverte d'une nouvelle éé de Microascaceae dans la Grotte de Ramioul / D. Malloch, J.-M. Hubart // Bulletin des Chercheurs de Wallonie. 1986. - №27. - P.97-100.

137. Malloch, D. An unusual subterranean occurrence of fossil fungal sclerotia. / D. Malloch, D. Grenville, J.-M. Hubart. // Canad. J. Bot. 1987. - №65. - P.1281-1283.

138. Malloch, D. Three fungal records from the Cave of Ramioul / D. Malloch, R.S. Khan. // Bulletin des Chercheurs de Wallonie. 1998. - №28. -P. 189-197.

139. Maltsev, A, The model of soil-like system formation in caves of Kougitangtou ridge / A. Maltsev, V. Korshunov, A. Semikolennykh // Proc. of 12th Int. Cong, of Speleology. La Chaux-de-Fonds, Switzerland. - Vol.1. - P.34-38.

140. Margesin R. Hydrocarbon degradation and enzyme activities of cold-adapted bacteria and yeasts/ Margesin R., Gander S., Zacke G., et. al. // Extremophiles.- 2003 Vol. 7.- №. 6,- P. 451 458

141. Matoces, G. An overview of the cave and interstitial biota of Croatia. / G. Matoces. // Nat. Croat. Vol. 11. - P. 1 - 112.

142. Martínez-Oquendo, J.A. Sistema de Cavernas del Río Camuy: Concepto de un desarrollo para la recreación y su conservación / J.A. Martínez-Oquendo // Revista de Planificación ANÁLISIS. 1983. - V. 2, n. 3. - P.34-35,

143. Martini, A. Yeasts in cavern environments / A. Martini // Archiv fur Mikrobiologie. 1963. - №45. - P.l 11-114.

144. McSpadden Gardener. Diversity and ecology of biocontrol Pseudomonas spp. in agricultural systems / McSpadden Gardener // Phytopathology. 2007. - V. 97.-N. 2.-P. 221-226.

145. Monroe, W.H. The karst landfonns of Puerto Rico / W.H. Monroe.// U.S. Geological Survey Professional Paper. 1976. - №899. - P. 1-69.

146. Montagna, M.T. Cavernicolous habitats harbouring Cryptococcus neoformans: results of a speleological survey in Apulia, Italy / M. T. Montagna eds. //Med. Mycol. 2003. - №41. P.45M55.

147. Murray, J.f. Benign pulmonary histoplasmosis (cave disease) in South Africa / J.f. Murray // S Afr Med J. 1957. - Mar 16, №31(11). - P.245-253.159. Mycology Online http://www.mycology.adelaide.edu.au/FungalDescriptions/

148. NABN: North American Biospeleology Newsletter. -. 2005. №51. -http://www.utexas.edu/tmm/sponsored sites/biospeIeology/nabn/nabn51 .pdf

149. Nechet. Bipolaris euphorbiae as a Biological Control Agent for Wild

150. Poinsettia (Euphorbia heterophylla): Host-Specificity and Variability in Pathogenand Host Populations/ Nechet, :, Kátia; Barreto, Robertl; Mizubuti, Eduardo

151. BioControl, Volume 51, Number 2, April 2006 , pp. 259-275(17)t

152. Nieves-Rivera, A.M. Mycological Survey of Rio Camuy Caves Park, Puerto Rico / A.M. Nieves-Rivera // Journal of Cave and Karst Studies. v. 65, n. 1. - P.23-28.

153. Northup, D.E. Lechuguilla cave biological inventory / D.E. Northup, eds. // Technical report to Carlsbad Caverns National Park. 1992. P. 175.

154. Novakova A. Microscopic fungi isolated from the Domica Cave system (Slovak Karst National Park, Slovakia) / A, Novakova // Journal of Speleology, 38 (1). -2009, P. 71-82.

155. Orpurt, P.A. The microfungal flora of bat cave soils from Eleuthera Island, The Bahamas / P.A. Orpurt // Canadian Journal of Botany. 1964. - №42. -P.1629-1633,

156. Panackal, A.A. Fungal Infections among Returning Travelers / A.A. Panackal, et al // Travel medicine Cid 2002. №35 (1 Nov). - P.1088-1095.

157. Pohlman, J.M. A stable isotope study of organic cycling and the ecology of an anchialine cave ecosystem. / J.M. Pohlman, T.M. Illife, L.A. Cifiientes // Marine Ecology Progress Series. 1997. Vol. 155. p. 17-27.

158. Pradhan, R.K. Meal scheduling modulation of circadian rhythm of phototactic behaviour in cave dwelling fish. / R.K. Pradhan, A.K. Pati, S.M. Agarwal. // Chronobiol Int. 1989 - 6(3) - P. 245-249.

159. Recognition and Designation Of Caves As Underground Wilderness. // Proceedings of the National Cave Management Symposium. 1991. - Oct. 23-30. -P.263-266.

160. Renker, C. Diversity of Cryptococcus and Dioszegia yeasts (Basidiomycota) inhabiting arbuscular mycorrhizal roots or spores / C. Renker, eds. // Ferns Yeast Research. 2004, - №4. - P.597-603.

161. Rutherford, J.M. Study of Fungi of Remote Sediments in West Virginia Caves and a Comparison with Reported Species in the Literature / J.M. Rutherford, L.H.A. Huang // The NSS Bulletin 1994. - Vol. 56 Number 1. - P.38-45.

162. Russell, N. J. (1998) Molecular adaptations in psychrophilic Bacteria: potential for biotechnological applications. Advances in Biochemical Engineering/ Biotechnology 61,1 -21.

163. Sarbu, S.M. A chemolithotrophically based groundwater ecosystem. / S.M. Sarbu, T.C. Kane, BX. JCinkle. // Science, vol.272. 1996. P. 1953-1955,

164. Sarbu, S.M. Microbial characteriazation of a sulfide-rich groundwater ecosystem. / S.M. Sarbu, et.al. // Geomicrobiological Journal, 1994. 12. - P. 175182.

165. Sedlbauer, K. Prediction of mould fungus formation on the surface of and inside building components: Doctoral Dissertation, Fraunhofer Institute for Building Physics. 2002 - 247 p.

166. Sernikolennykh, A.A. Microorganisms in caves of Kougitangtou ridge (Turkmenistan) / A. Sernikolennykh // Proc. of 2nd Int. Symp. on Karst Water Resources. 1998.-P. 143.

167. Semikolennykh, A.A. Microorganisms in the caves of former-USSR: geography, ecology, geochemical activity / A. Semikolennykh. // Proc. of 12th Int. Cong, of Speleology. . 1997. r Vol.3. P.293-299.

168. Semikolennykh, A.A. The Ecology of Microbial Cpmmunities in Soils and Gypsum Caves in Taiga Region (Russia). / A. Semikolennykh, M. Gorlenko,

169. A. Ivanova. // Contributions to the IGCP448 meeting in Bowling Green, Ky, USA. June3-6, 2003 Part HI - P.99-100.

170. Sladechek System of water qualify from the biological point of view. // Arch. Hydrobiol. Ergeb. Limnol. 1973. - Bd. 7. - P.210 - 218.

171. Sorley, D.L. Bat-associated histoplasmosis'in Maryland bridge .workers-'/ D.L. Sorley, eds.//Am J Med. 1979. - Oct, 67(4). - P.623-626.

172. Stomeo, F. Microbial diversity on paintings and engravings in Doña Trinidad Cave (Ardales, Spain) / F. Stomeo, L. Laiz, J.M. González, C. Saiz Jimenez // Heritage, Weathering and Conservation (HWC-2006) Conference. -Madrid, 21 24 June 2006.

173. Sugita, T. Trichosporon species isolated from guano samples obtained from bat inhabited caves in Japan. / T. Sugita, et al. // Environmental microbiology. 2005. - Nov. 2005. - P.7626 - 7629.

174. Suzaki, A. An outbreak of acute pulmonary histoplasmosis among travelers to a bat-inhabited cave in Brazil / A. Suzaki, eds.// Kansenshogaku Zasshi. 1995. - №69. - P.444-9.

175. Turin, H.J. Lechuguilla cave pool chemistry / H.J. Turin, M.A. Plummer // Journal of Cave and Karst Studies. 2000. - v. 62. - P.135-143.

176. Ulloa, M. Contribution to the study of the mycobiota present in the natural habitants of gistoplasma capsulatum: integrative study in Guerra, Mehico. / M. Ulloa, et al. // Revista Mecsicano bio Riversidat. 2006 - 77. - P.53 - 168.

177. Washburn,. A.M. Cave Sickness—A New Disease Entity / A.M. Washburn, eds. // Am J Public Health Nations Health. 1948. - Nov, 38(11). -P.1521—1526.

178. Weinberg, M. Histoplasmosis in Travelers to Nicaragua / M. Weinberg, eds. // Emerging Infectious Diseases. 2003. - Vol. 9, No. 10, October. - P. 1322 -1325.

179. Wheat, L.J. Histoplasmosis: a review for clinicians from non-endemic areas / L.J. Wheat // Mycoses. 2006. - Vol. 49 Issue 4. - P.274-282.

180. Wilhm and Dorris. Biological parametrs for water quality criteria / Wilhm and Dorris // Bioscence. 1968. - 18. - P. 477.

181. William R. Elliott and Tim Smith Plants and Fungi of the Missouri Karst http://www.utexas.edu/tmm/sponsoredsites/biospeleology/handouts/karstplants.rtf

182. World Cave Database^ 2006. http://www-sop.inria.fr/agos-sophia/sis/DB/database.html

183. Zalar, P. Mucor troglophilus a new species from cave crickets / P. Zalar, eds. // Mycotaxon. 1997. - №65. - 507 -516.

184. Zeller, L. Chrysosporium species from the "Baradla" cave in Aggtelek (Biospeologica Hungarica XXIV) / L. Zeller // Mycopathologia. 1968. - Vol. 34, №3-4 / May. - P.296-301.

185. Zygomycetes http ://www.zygomycetes.org/index.php