Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сократительная активность венозных сосудов при лазерном воздействии

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Сократительная активность венозных сосудов при лазерном воздействии"

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

НА ПРАВАХ РУКОПИСИ

РГк од

I ? Шпп Ш

СОКРАТИТЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ВЕНОЗНЫХ СОСУДОВ ПРИ ЛАЗЕРНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ

Захарова Лидия Борисовна

03.00.13 - физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург 2000

Работа выполнена на кафедре нормальной физиологии Санкт-Петербургской Государственной Академии им. И.И. Мечникова

Научный руководитель: д.м.н., проф. Ерофеев Н.П. Официальные оппоненты: д.б.н., проф. Пушкарев Ю.П.

д.б.н., проф. Алексеев Н.П.

Ведущее учережденне: Институт Эволюционной Физиологии и

Биохимии им. И.М. Сеченова РАН

Защита состоится «

»

¿г -с

2000г. в

часов на

заседании Диссертационного совета К 063.57.09 по защите диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук в Санкт-Петербургском Государственном Университете по адресу 199034, Санкт-Петербург, Университетская наб.,7/9 (ауд. 90).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Санкт-Петербургского Государственного Университета.

Автореферат разослан «___»______________ 2000г.

Ученый секретарь

Диссертационного совета, к.б.н. Р.И. Коваленко

Pt/C. Z30SZ D

Общая характеристика работы

Клиническая практика последних 10-15 лет показала, что иазерная светотерапия многих заболеваний по эффективности не /ступает другим средствам и способам лечения и она может с успехом применяться практически ьи всех областях медицины, в том числе в лечении сосудистой системы. Известно, что в клинической медицине дозы облучения при лазерной терапии подбираются эмпирически.

Актуальность проблемы состоит в том, чтобы

1. дать экспериментальное обоснование дозо-зависимым характеристикам используемого лазерного излучения;

2. определить количественные и качественные изменения сократительной деятельности гладкомышечных клеток (ГМК) при лазерном облучении;

3. оценить эффективность направленного и рассеянного луча лазера • на амплитуду и частоту сокращений ГМК.

4. определить роль поверхностной мембраны миоцитов в реализации сократительного ответа стенок кровеносного сосуда при лазерном воздействии;

5. установить, что изменения параметров сократительной активности ГМК (например, при хронической венозной недостаточности) отражают положительный терапевтический эффект при лазерном воздействии;

Цель н задачи исследования. Основная цель исследования состояла в том, чтобы в экспериментах in vitro определить количественные и качественные изменения сократительных ответов ГМК венозных сосудов при действии лазерного излучения различной интенсивности. Исходя из цели исследования были поставлены следующие задачи:

В определить дозо-зависимые характеристики используемого

лазерного излучения; В определить связь направленного и рассеянного лазерного излучения и характера сократительной деятельности сосудов в зависимости от степени автоматии их клеток; И определить связь между изменением сократительных реакций ГМК стенок сосуда и временными параметрами облучения;

■ изучить изменения сократительной активности ГМК и роль поверхностной мембраны под действием лазера в условиях различной концентраций ионной среды омывающего раствора;

■ оценить вызванные лазерным излучением изменения сократительной активности ГМК поверхностных вен нижних конечностей человека при варикозном расширении их.

Научная значимость и новизна работы. В настоящее время в области лазерной медицины проведен достаточно глубокий анализ биохимических и физиологических механизмов лазерного воздействия на ткани, органы и организм в целом. Однако, практически не изучено влияние лазера на эффекторные структуры сосудистой стенки; особенно это касается качественных и количественных оценок сократительной деятельности венозных ГМК. Нами впервые проведены эксперименты по изучению действия лазерного пучка на изолированные сосуды и вызванные им изменения сократительной активности ГМК, обоснованы дозо-зависимые характеристики используемого лазерного излучения, определена роль поверхностной мембраны миоцитов в реализации сократительного ответа на лазерное воздействие, оценена эффективность направленного и рассеянного луча лазера, а также установлено, что положительный терапевтический эффект при варикозном расширении вен связан с длительностью заболевания и с

изменением параметров сократительной активности в ответ на облучение лазером различной интенсивности.

Теоретическая значимость работы. Полученный материал существенно расширяет фундаментальные представления о характере изменений сократительной активности ГМК сосудов при действии красного света гелий-неонового лазера (ГНЛ) различных энергетических характеристик. Представленные в работе экспериментальные данные вносят существенный вклад в понимание роли поверхностной мембраны ГМК в формировании сократительного ответа при лазерном воздействии. Практическая значимость работы. Полученные в ходе исследований материалы позволяют сделать практические рекомендации по характеру и методике лазерного воздействия в лечении сердечно-сосудистых заболеваний, в частности, при варикозном расширении вен. На защиту выносятся следующие положения:

■ Количественная оценка доз лазерного излучения является необходимым условием для достижения изменений параметров сократительной активности гладкомышечных клеток (ГМК) стенки воротной вены крысы.

■ Существует связь между изменением сократительной активности ГМК стенок сосуда и временными параметрами облучения.

■ Существуют различия в изменениях параметров сократительной активности ГМК сосудов при действии направленного и рассеянного лазерного излучения различной интенсивности.

■ Установлена взаимосвязь между уровнем деполяризации мембраны ГМК и характером изменений их сократительной активности при облучении низкоинтенсивным красным светом гелий-неонового лазера (ГНЛ).

В Показано, что лазерный луч оказывает стимулирующий или тормозный эффект на гладкую мускулатуру стенки вены при варикозном расширении ее в зависимости от интенсивности излучения и срока заболевания. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на международном симпозиуме «Лазеры в медицине» (1997) и на городской конференции молодых ученых (1998). По теме диссертации опубликовано 4 научных работы.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания методики проведения исследований, двух глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы.

Диссертация изложена на____ страницах машинописного

текста, включает в себя__рисунков,__таблиц и____графиков.

Список литературы включает_____наименования, в том числе

_____зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы. В качестве объекта исследований

использовались препараты воротной вены крысы и варикозных сегментов вен нижних конечностей человека. Используемая методика позволяла регистрировать и оценивать количественно такие параметры сокращений ГМК как частота, амплитуда и тонус. Для этого приготовленные препараты помещались в камеру из оргстекла объемом около 10 мл. В камеру подавался нагретый до 37°С физиологический раствор Кребса. Для препаратов создавался изометрический режим между неподвижным штырем и штоком механотрона 6МХ 1С, к которому прикреплялся препарат. Величина амплитуды сокращения оценивалась с помощью специально сконструированного калибровочного устройства (Ерофеев Н.П.,

Мандрыко Е.С.(1975)). Запись миограмм производилась на самописце Н 3021-3.

Для облучения препаратов применялся гелий-неоновый лазер красной линии марки ЛГН-10 с длиной волны 633 нм и выходной мощностью 8 мВт. Рассеивание лазерного луча осуществлялось с помощью линзы, а изменение интенсивности в 10 и 100 раз благодаря сменным фильтрам.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

1. Оценка дозо-зависимых характеристик. Изменяя

длительность лазерного воздействия от 1 до 15 минут установили четкие дозо-зависимые характеристики используемого лазерного излучения. Экспозиция равная 5 минутам является пороговой дозой, так как данная длительность лазерного воздействия всегда приводит к изменениям в сократительной активности ГМК. Установили, что даже такое слабое воздействие мощностью 5 ■ 10"6 Вт/см2 (1:100 от максимального) в течение 5 мин. способно вызвать изменение амплитуды на 47±1.2%. Такие параметры как тонус и частота сокращений сосуда при этом оставались без значимых изменений. Отличительной особенностью при действии рассеянным лазерным лучом является наличие латентного периода—времени между нанесением раздражения и изменением параметров сократительной активности ГМК. Длительность такого латентного периода обратнопропорциональна интенсивности лазерного излучения: при интенсивности 5-10'4 Вт/см2 латентный период длится 25-30 мин., а при 5-10'6 Вт/см2 - 15-20 мин. Изменения, возникшие при действии рассеянного лазерного луча, сохранялись в течение 2 часов.

Проведенные нами эксперименты по изучению влияния рассеянного лазерного излучения на изолированные венозные сосуды подтвердили эффекты его длительного последействия при многократном облучении объекта. Установлено, что пятикратное

облучение рассеянным светом гелий-неонового лазера препарата воротной вены крысы в течение 1 мин. с интервалами между воздействиями 10 мин. приводило к увеличению только амплитуды сокращений на 50% (с 1.96±0.41 до 2.94±0.53 мН), а с интервалами в 30 мин. - еще и к снижению частоты ci7±0.98 до 13±0.53 сокр/мин и стабилизации амплитуды.

2. Характеристика ответов различных типов ГМК на лазерное воздействие. Изучение характера воздействия направленного

лазерного луча на участки стенки воротной вены с различной плотностью пейсмекерных ГМК (отличительная особенность таких клеток состоит в том, что мембранный потенциал у них на несколько милливольт ниже, чем у остальных ГМК, благодаря чему они могут спонтанно генерировать потенциалы действия) были получены нижеизложенные данные:

1. При облучении направленным пучком максимальной мощности (5-10"4Вт/см2) проксимального участка препарата воротной вены крысы, где по данным Johansson В. at all.(1977) количество клеток-пейсмекеров велико, лазерное воздействие приводило к увеличению тонуса (на 0.59±0.008 мН), частоты (с 13±1.2 до 45±1.3 сокр./5 мин.) и амплитуды (с 3.1±0.3 до 5.29±0.98 мН) непосредственно в период действия данного физического фактора в течение 5 мин.. После прекращения воздействия тонус сразу же возвращался к исходному уровню, частота в первые 5 минут снизилась до 29.2±1.8 сокр., за вторые 5 мин. - до 24±1.6 сокр., а еще через 5 мин. достигла исходного уровня, который был до облучения 12.6±1.8 сокр. за 5 мин.. Увеличение амплитуды, регистрируемое с начала лазерного воздействия, сохранялось и после его прекращения, но через 30—40 минут значение этого параметра возвращалось к исходным величинам. Оценивая результаты собственных исследований и анализируя имеющиеся литературные источники (Шуба М.Ф.,

Кочемасова Н.Г., Тараненко В.М. и др.), считаем, что лазер действует на разные хранилища кальция: в фазных сокращениях большая роль принадлежит внеклеточным ионам Са^+, а в тонических—ионам, содержащимся в митохондриях и в саркоплазматическом ретикулуме. Следует расценивать полученные экспериментальные данные как изменение под действием направленного луча лазера проницаемости по разным кальциевым каналам в мембране ГМК.

2. В дистальном участке воротной вены клеток-пейсмекеров меньше, чем в проксимальном отрезке. При прямом облучении дистального участка препарата тонус сосуда увеличился на 0.32±0.006 мН, частота достоверно не изменилась (с 18± 1.73 до 20±0.98 сокр. за 5 мин.), амплитуда через 10—12 мин. после прекращения облучения возросла с 2.94±0.81 до 4.12±1.04 мН.

Изменение параметров сократительной активности в этом случае имело ту же направленность, что и при облучении проксимального участка, но прирост амплитуды и увеличение частоты фазных сокращений были менее выражены.

3. Влияние возрастающих концентраций иона К+ и лазерного излучения на сократительную активность ГМК воротной вены крысы. В экспериментах по выявлению связи между параметрами сократительной активности ГМК и уровнем деполяризации мембраны, вызванной повышением концентрации хлористого калия в омывающем препарат растворе Кребса с 5.9 до 20 мМ отмечалось непрерывное нарастание частоты спонтанных сокращений ГМК, а также их амплитуды. При действии рассеянного лазерного излучения максимальной мощности (5-10"4 Вт/см2) на фоне увеличения концентрации КС1 сохранилась тенденция к росту частоты сокращений (на 41 %), как и у не облучаемого объекта (на 42%).Изменение амплитуды спонтанных сокращений ГМК стенки

вены носит противоположный характер: ее значения снижаются на 27% в ответ на лазерное воздействие при увеличении концентрации ионов К+ во внешней среде. Изменений тонуса стенок вены во всех случаях не отмечалось.

Л 1} ...... I. .1 л п'шнттп .лит*■ оп ■.ПИИОИТПИТИИ I* /1II О и Ч'ПРПИПГП

1. ^ .111 .1II11 к ■» V/ ч ч V ч . ....... . .. V .. .. " -- - ----- ]---"----

излучения на сократительную активность ГМК воротной вены крысы. В экспериментах с другим деполяризующим ионом - ионом кальция—результаты неоднозначны. Снижение концентрации кальция в омывающем растворе со 100 до 80% приводит к деполяризации мембраны, а увеличение со 100 до200%, наоборот—к гиперполяризации. При действии света лазера максимальной мощности (5-10"4 Вт/см2) на фоне различных концентраций ионов кальция в омывающем растворе (от80% до 200%) частота спонтанных сокращений ГМК воротной вены всегда уменьшалась вплоть до полного подавления данных параметров при снижении концентрации Са2+ до 80%. Амплитудные характеристики тоже снижались, за исключением, когда концентрация ионов кальция составила 90% -- в этом случае отмечалось увеличение амплитуды фазных сокращений ГМК стенки вены.

Снижение интенсивности лазерного излучения на один порядок (5-10'5 мВт/см2) также приводило во всех случаях к снижению частоты спонтанных сокращений ГМК стенки воротной вены, хотя и не так резко, как при использовании более сильного излучения.

Амплитуда сокращений под воздействием лазера данной интенсивности при снижении концентрации кальция (от 100 до 80%)уменьшалась, в то время как увеличение ионов Са2+ (от 100 до 200%)в омывающем растворе приводило к увеличению амплитуды фазных сокращений.

Дальнейшее снижение интенсивности еще на один порядок (5-10"6 Вт/см2) выявило несколько иную картину изменений параметров

сократительной активности ГМК. Обнаружена противоположная направленность вызванных изменений регистрируемых параметров на фоне деполяризации мембраны (концентрация ионов Са2+ 80% и90%): увеличение частоты сопровождалось снижением амплитуды и наоборот. Однако, необходимо отметить, что частота в этих случаях была всегда больше, а амплитуда меньше, чем при фоновых концентрациях ионов кальция (100%). При гиперполяризации мембраны (концентрация ионов Са2+ 150%) регистрировали не достоверное увеличение амплитуды сокращений ГМК и снижение значений частоты фазных сокращений. Дальнейшая гиперполяризация мембраны за счет увеличения концентрации ионов кальция в омывающем растворе до 200% по сравнению с фоновой приводит к угнетению спонтанной активности, что проявляется в снижении как частоты, так и амплитуды сократительных ответов ГМК. При концентрации Са2+ 150% от фоновой через 20 минут после лазерного воздействия отмечалось увеличение тонуса в течение трех минут, которое повторялось с интервалами в 25-30 минут на протяжении двух часов.

В связи с тем, что мы не ставили своей задачей изучение проницаемости мембранных каналов для ионов кальция, считаем в праве трактовать собственные экспериментальные данные с существующих позиций изменения проницаемости каналов мембраны ГМК для ионов кальция при изменениях концентрации этого иона и иона калия во внеклеточной среде (Arnaudeau S. at all., Long R.J., Soomlyo A.P. at all. Шуба М.Ф. и др.). Вышеизложенные изменения сократительной активности можно объяснить с точки зрения уже имеющихся данных о механизме регуляции сокращений ГМК в зависимости от движения ионов кальция по мембранным каналам. Предполагается, что фазный компонент сокращений ГМК обусловлен входом кальция через быстрые, а тонический компонент

обеспечивается преимущественно ионами кальция, которые входят в клетку через медленные каналы. Анализируя полученные результаты можно предположить, что лазерное излучение малой интенсивности снижает проницаемость ионов по быстрым, а увеличение интенсивности до 5-10"4Вт/см2 угнетает к проницаемость для кальция и по медленным кальциевым каналам.

5. Влияние лазерного излучения на сократительные характеристики варикозных вен человека. В удаленных оперативным путем изолированных варикозных венах нижних конечностей человека возможно зарегистрировать спонтанную сократительную активность. Спонтанные сокращения ГМК поврежденных сосудов по своей конфигурации напоминали синусоиду и следовали друг за другом с довольно правильными интервалами. Частота таких сокращений колебалась в пределах 2-4 в минуту. В отличие от поврежденных сосудов, характер сокращений ГМК препаратов нормальных вен носил аритмический нерегулярный характер.

Спонтанная сократительная активность ГМК варикозных вен обнаружила некоторую закономерность в сохранении частоты определенного ритма в зависимости от срока давности заболевания. У пациентов с небольшим по времени сроком от начала заболевания до оперативного вмешательства (от 1.5 до 5 лет) частота быстрых сокращений была 3-4 в мин.; с увеличением срока болезни она уменьшалась, регулярный рисунок сглаживался и у пациентов, оперированных после 12-15 лет болезни, спонтанная активность ГМК венозных сосудов практически не наблюдалась. В экспериментах использовались две группы сосудов:

1. обладающие спонтанной активностью;

2. не обладающие спонтанной активностью.

Было установлено, что даже слабое когерентное излучение,

13 -■•■".,•

мощность которого составляла 5-10'6 Вт/см2, способно вызвать спонтанную сократительную активность в ГМК поврежденных варикозной болезнью сосудах, изначально не обладавших сократительной активностью. Лазерный пучок вышеуказанной мощности после пятиминутной экспозиции через 25—30 минут после прекращения воздействия вызывал появление первых спонтанных сокращений ГМК стенок большой поверхностной подкожной вены нижних конечностей человека.

Вызванные лазерным излучением спонтанные сокращения ГМК стенок варикозных вен сохранялись в течение 1.5-2 часов. Тонус сосудов не изменялся.

Иной характер изменений регистрировался при облучении варикозных вен, обладающих спонтанной активностью. Так воздействие лазерным пучком мощностью 5-10'6 Вт/см2 не приводило к достоверным изменениям параметров сократительной активности. Облучение в течение 5 мин. красным светом ГНЛ мощностью 5• 10"4 Вт/см2 вызывало увеличение амплитуды на 50% (с 0.59±0.01 до 1.2510.02 мН). Изменений частоты и тонуса не отмечалось.

Пятиминутное воздействие лазерным пучком максимальной мощности (5'Ю-4 Вт/см2) на 20-25 мин. подавляло спонтанные сокращения ГМК вен. После возобновления спонтанной сократительной активности сокращения носят периодический характер. Они возникают пулами. В первом пуле отмечалось по 5-7 сокращений. Амплитуда данных сокращений составляет 1.41 ±0.03 мН, что больше, чем до облучения — 0.98±0.01 мН. В каждом последующем пуле количество сокращений и их амплитуда уменьшались. Интервалы между пулами увеличивались и через 50-60 мин. всякая сократительная активность прекращалась. Следует отметить, что во время пула сокращений увеличивался тонус стенок

сосудов на 0.4+0.098 мН.

Изменения сократительной активности, вызванные

низкоинтенсивным красным светом ГНЛ, нормализуют работу поврежденных варикозной болезнью сосудов. Аналогичные

— - —__-V .. -г — - - —-----л л птт п.. ТТЛ ТТПТ1ПЛ1ГИТ '' ПЛ1Гп{л111111 1 Ж (Т) I11' Т1 Ч

ьи ^ДСИ^ТьИЛ на ЗдирииЫБ ДО! П*- црпиидл! 1ч 1.

а в некоторых случаях даже подавляют спонтанные сокращения ГМК стенок вен. Этот факт позволяет нам предположить, что лазер оказывает благоприятное воздействие только на поврежденные клетки.

ВЫВОДЫ.

1. Установлено наличие полезного времени облучения ГМК стенки сосуда, вызывающее изменения ее функционального состояния. При мощности лазерного луча 5-10'5 Вт/см2 «полезное время» составило 5 минут.

2. Эффект воздействия направленного лазерного луча на ГМК стенок сосудов с выраженной спонтанной активностью наступает без видимого латентного периода. Аналогичный результат в миоцитах со слабо выраженной спонтанной активностью сопровождается выраженным латентным периодом (20-30 мин.).

3. Длительность латентного периода вызванных изменений сократительной активности стенки сосуда зависит от мощности лазерного луча: уменьшение мощности приводит к укорочению латентного периода.

4. Направленный лазерный луч вызывает изменения сократительной активности стенки сосуда, наблюдаемые относительно короткое время (не более 1 часа). Рассеянный лазерный луч вызывает подобные измебнения сокращений сосудистой стенки, которые

регистрируются в течение длительного времени (2 часа и более).

5. Рассеянное лазерное излучение играет роль модулятора пейсмекерной активности миоцитов поскольку на фоне деполяризации клеточной мембраны ионами калия вызывает увеличение частоты и уменьшение амплитуды сокращений.

6. Рассеянный лазерный луч интенсивностью 5-10'6 Вт/см2, 5-10"5 Вт/см2 оказывет стимулирующее действие на стенку большой подкожной вены человека при варикозной болезни вен нижних конечностей в зависимости от срока заболевания.

При отсутствии исходной сократительной активности стенки вены (длительность заболевания более 10 лет) лазерный луч вызывает появление фазных сокращений.

При сохранении фоновой фазной сократительной деятельности (срок заболевания менее 8 лет) рассеянный лазерный луч увеличивает амплитуду сокращений миоцитов сосудистой стенки.

Увеличение интенсивности лазерного луча до 5-10"4 Вт/см 2 подавляет спонтанную сократительную деятельность

варикозных вен человека.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Захарова Л.Б., Ерофеев Н.П., Малькова Н.Ю. Сократительная активность гладкомышечных клеток воротной вены при действии лазерного излучения. В сб. Структурно-функциональные основы лимфатической системы //С-Петербург,1997, с. 63.

2. L. Zaharova, N. Mal kova. Effect of Low-Indensity Laser on Vein Portae Smooth Muscle.Lasers in Medcine / International Workshop, May 24-26, 1997 // St. Peterburg, 1997, p. 36.

3. Захарова Л.Б. Влияние лазерного излучения на сократительную активность гладкомышечных клеток воротной вены / Материалы 1-й Медико-биологической конференции молодых ученых Санкт-Петербурга, 17-19 ноября 1997года // С-

1 rim ~ эа

J. у , 1 У J I , V. JKJ.

4. Захарова Л.Б., Ерофеев Н.П.. Механизмы влияния лазера на гладкомышечные клетки сосудов / Материалы Всероссийской научной конференции с международным участием, посвященная 150-летию со дня рождения академика Ивана Петровича Павлова, 15-17 сентября, 1999 года // Издательство СПбГМУ, С-Петербург, 1999, с147.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Захарова, Лидия Борисовна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Особенности структурно-функциональной организации, молекулярные механизмы сокращения клеток сосудистых гладких мышц и базальный тонус сосудов.

1.2. Взаимоотношения электрической и сократительной активности и проведение возбуждения по ГМК венозных сосудов.

1.3. К механизму действия факторов, регулирующих сократительную активность вен.

1.3.1. Влияние ионов внешней среды.

1.3.1.1. Влияние ионов калия.

1.3.1.2. Роль ионов кальция.

1.3.2. Эффект действия лазерного излучения на биологические объекты.

Глава 2. Методика исследования.

2.1. Подготовка сосудистых препаратов.:.

2.2. Приготовление растворов.

2.3. Термостатирование растворов.

2.4. Регистрация механической активности.

2.5. Блок- схема установки.

2.6. Используемый лазер и дозирование облучения.

Глава 3. Изучение действия лазерного излучения на ГМК сосудов.

3.1. Определение дозо-зависимых эффектов лазерного излучения.

3.2. Характеристика сократительных ответов различных типов ГМК на лазерное воздействие.

3.3. Изучение функциональной роли поверхностной мембраны в сократительной деятельности ГМК вены.

3.3.1. Действие возрастающих концентраций ионов калия на сократительную активность ГМК воротной вены.

3.3.2. Влияние лазерного излучения на сократительную активность ГМК воротной вены на фоне действия возрастающих концентраций КС1.

3.4. Особенности связи возбуждения и сокращения в ГМК вены при действии лазерного излучения.

3.4.1. Действие различных концентраций ионов калия на сократительную активность ГМК воротной вены.

3.4.2. Действие лазерного излучения на фоне различных концентраций хлористого кальция.

Обсуждение результатов.

Глава 4. Изучение действия лазерного излучения на гладкомышечные клетки изолированных варикозных вен нижних конечностей человека.

4.1. Краткие сведения о клинике варикозной болезни нижних конечностей человека.

4.2. Спонтанная активность ГМК и ее связь с давностью заболевания.

4.3. Особенности сократительного аппарата варикозных вен.

4.4. Влияние лазерного излучения на сократитетльную активность ГМК стенок варикозных вен нижних конечностей человека.

Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Сократительная активность венозных сосудов при лазерном воздействии"

Трудно себе представить современную медицину без широкого использования последних достижений науки и техники. Создание оптических квантовых генераторов (лазеров) сразу привлекло внимание медиков, биологов и физиологов.

К настоящему времени созданы различные типы лазеров, работающие в непрерывном и импульсном режимах, генерирующих излучение практически любой длины волны—от инфракрасного до ультрафиолетового. Мощность излучения в зависимости от типа лазера составляет от милливатт до десятков киловатт.

В зависимости от своих технических характеристик лазеры оказывают различные эффекты на ткани живого организма: лазерные лучи применяются для испарения, рассечения, коагуляции, сварки тканей (высокоинтенсивное излучение), а могут и проникать в глубь тканей, не причиняя вреда (низкоинтенсивное излучение). Клиническая практика за последние 10-15 лет показала, что лазерная светотерапия многих заболеваний по эффективности превосходит другие средства и способы лечения. Низкоинтенсивное лазерное излучение может с успехом применятся практически во всех областях медицины. Научные рекомендации для использования в клинической практике этого метода возможны лишь на основе понимания основных сторон механизмов биологического действия излучения лазера. Еще Н.Ф. Гамалея (25) говорил: «Механизм лазерной биостимуляции остается совершенно неясным, что делает этот метод чисто эмпирическим, порождает в отношении его определенный скепсис и заставляет с осторожностью подходить к вопросу о его широком внедрении». С тех пор сделан большой шаг в изучении механизма лазерного воздействия.

В настоящее время широкое применение низкоинтенсивного лазерного излучения основано на ряде исследований по влиянию когерентного светового пучка на ткани человека и животных (5,28,36,42,43,50,51,84,90,92,95,119,169,170,178). Оказалось, что наибольшей проникающей способностью обладает красный свет гелий-неоновых лазеров с длиной волны 630-670 нм. Именно данная группа лазерных установок широко применяется для достижения того или иного терапевтического эффекта при различных заболеваниях. Появились сведения, позволяющие выделить в механизме биологического действия лазерного излучения биофизический и биохимический компоненты. Однако, до сих пор нет единого представления о механизмах лазерного воздействия на организм в целом, его отдельные системы и локальный патологический очаг.

Актуальность проблемы состоит в том, чтобы

1. дать экспериментальное обоснование дозо-зависимым характеристикам используемого лазерного излучения;

2. определить количественные и качественные изменения сократительной деятельности гладкомышечных клеток при лазерном облучении;

3. оценить эффективность направленного и рассеянного луча лазера на амплитуду и частоту сокращений ГМК;

4. определить роль поверхностной мембраны миоцитов в реализации сократительного ответа стенок кровеносного сосуда при лазерном воздействии;

5. доказать, что изменения параметров сократительной активности ГМК (например, при хронической венозной недостаточности) отражают положительный терапевтический эффект при лазерном воздействии.

Цель и задачи исследования. Основная цель исследования состояла в том, чтобы определить количественные и качественные изменения сократительных ответов ГМК венозных сосудов при действии лазерного излучения различной интенсивности. Исходя из цели исследования были поставлены следующие задачи: определить дозо-зависимые характеристики используемого лазерного излучения; определить связь направленного и рассеянного лазерного излучения и характера сократительной деятельности сосудов в зависимости от степени автоматии клеток; выявить связь между изменением сократительных реакций ГМК стенок сосуда и временными параметрами облучения; изучить изменения сократительных активности ГМК и роль поверхностной мембраны под действием лазера в условиях различной концентрации ионной среды омывающего раствора; оценить вызванные лазерным излучением изменения сократительной активности ГМК поверхностных вен нижних конечностей человека при их варикозном расширении.

Научная значимость и новизна работы. В настоящее время в научной литературе представлено много работ об эффектах лазерного воздействия на ткани, органы и организм в целом. Однако, все эти исследования касаются результатов, являющихся итогом тех 8 процессов, которые происходят в клеточных структурах под действием лазерного излучения. Нами впервые проведены эксперименты по изучению действия лазерного пучка на изолированные сосуды и вызванные им изменения сократительной активности ГМК.

Теоретическая значимость работы. Полученный материал существенно расширяет представления о характере изменений сократительной активности ГМК сосудов при действии красного света ГНЛ различных энергетических характеристик. Представленные в работе экспериментальные данные вносят существенный вклад в понимание механизма действия ГНЛ.

Практическая значимость работы. Полученные в ходе исследований материалы позволяют сделать рекомендации по характеру и методике лазерного воздействия при лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Материалы диссертации полностью вошли в отчет «Профилактика заболеваний верхних конечностей от локальной вибрации и физических нагрузок на основе применения низкоинтенсивного лазерного излучения», выполненный совместно с лабораторией охраны труда Северо-Западного Научного Центра Гигиены и Общественного Здоровья.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Захарова, Лидия Борисовна

ВЫВОДЫ.

1. Установлено наличие полезного времени облучения ГМК стенки сосуда, вызывающее изменения ее функционального состояния. При

5 2 мощности лазерного луча 5-10" Вт/см «полезное время» составило 5 минут.

2. Эффект воздействия направленного лазерного луча на ГМК стенок сосудов с выраженной спонтанной активностью наступает без видимого латентного периода. Аналогичный результат в миоцитах со слабо выраженной спонтанной активностью сопровождается выраженным латентным периодом (20-30 мин.).

3. Длительность латентного периода вызванных изменений сократительной активности стенки сосуда зависит от мощности лазерного луча: уменьшение мощности приводит к укорочению латентного периода.

4. Направленный лазерный луч вызывает изменения сократительной активности стенки сосуда, наблюдаемые относительно короткое время (не более 1 часа). Рассеянный лазерный луч вызывает подобные измебнения сокращений сосудистой стенки, которые регистрируются в течение длительного времени (2 часа и более).

5. Рассеянное лазерное излучение играет роль модулятора пейсмекерной активности миоцитов поскольку на фоне деполяризации клеточной мембраны ионами калия вызывает увеличение частоты и уменьшение амплитуды сокращений.

6 2 5 2

6. Рассеянный лазерный луч интенсивностью 5-10"° Вт/см , 5-10 Вт/см

97 оказывет стимулирующее действие на стенку большой подкожной вены человека при варикозной болезни вен нижних конечностей в зависимости от срока заболевания.

При отсутствии исходной сократительной активности стенки вены (длительность заболевания более 10 лет) лазерный луч вызывает появление фазных сокращений.

При сохранении фоновой фазной сократительной деятельности (срок заболевания менее 8 лет) рассеянный лазерный луч увеличивает амплитуду сокращений миоцитов сосудистой стенки. Увеличение интенсивности лазерного луча до 5-10"4 Вт/см ' подавляет спонтанную сократительную деятельность варикозных вен человека.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Захарова, Лидия Борисовна, Санкт-Петербург

1. Агов Б.С., Броун J1.M., Барсуков А.Е., Девятков Н.Д., Монке-Мончинская JI.A., Жук А.Е., Цыкин Д.Б., Муранов А.Н.

2. О механизме лечебного действия гелий-неонового лазера при некоторых сердечно-сосудистых заболеваниях // Врачебное дело— 1985—2, №6—с. 17-21.

3. Акоев Г.Н., Алексеев Н.П. Функциональная организация механорецепторов // Наука, Ленинград—1985—223 с.

4. Алексеев П.П., Багдасарьян B.C. Вопросы патогенеза первичного варикоза вен нижних конечностей// Вестник хирургии им. И.И. Грекова—1977, №7—с. 62-66.

5. Бельский Е.Д., Кокарев A.A., Минут-Сорохтина О.П. Спонтанная активность гладких мышц подкожных сосудов.// Физиология гладкой мышцы. Материалы всесоюзного симпозиума JI. 1972 - с. 5-6.

6. Беляев A.A., Рагимов С.Э., Афанасьева JI.C. Применение лазеров при сердечно-сосудистых заболеваеиях: начало долгого пути (обзор)// Терапевтический архив—1986—LVII, №5—с. 139-146.

7. Бернштейн С.А., Гуревич М.И., Соловьев А.И. Дефицит кислорода и сосудистый тонус // Киев, Наукова думка—1984—с. 259.

8. Богач П.Г. Гладкомышечная клетка // Физиология пищеварения/ Л., Наука—1974—с. 91-119.

9. Богач П.Г. Двигательная деятельность желудка и механизмы ее регуляции // Физиология пищеварения. Руководство по физиологии / Л., Наука—1974—с. 272-310.

10. Бор Д.Ф. Гладкие мышцы сосудов // Периферическоекровообращение /М.: Медицина—1982—с. 26-63.

11. Ю.Борисов A.B., Дворкина М.И., Корнеева Н.Т., Андреев Ю.А.

12. Влияние воздействия лазера на пути лимфо- и гемомикроциркуляции и тучные клетки в эксперименте// В сб. Влияние лазерного излучения на здоровье человека / Ленинград—1885—с.28-32.

13. П.Бородовская A.M. Низкоинтенсивное лазерное излучение в лечении ранних форм сосудистых заболеваний головного мозга // Новое в лазерной медицине и хирургии: (Тез. Междунар. конф.), Переславль-Залесский, 17-19 окт. 1990 г. / М.—1990—с. 101-102.

14. Броун JI.M., Жук А.Е. Изменение микроциркуляции у больных со стенокардией под влиянием лазеротерапии по данным конъюктивальной биомикроскопии // В сб. Влияние лазерного излучения на здоровье человека / Ленинград—1885—с.37-39.

15. Бурлакова Е.Б., Архнпова Г.В., Голощапов А.Н.,Молочкина Е.М., Пальмина Н.П., Храпова Н.Г. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте.// М., Наука—1975—с. 74.

16. Бурлакова Е.Б., Джалябова М.И., Молочкина Е.М. // Докл. АН СССР—1976—227, №4.—с. 991.

17. Бурый В.А., Гурковская A.B., Шуба М.Ф. Выделение трансмембранного кальциевого тока гладкомышечных клеток в бескалиевой среде//Докл. АН СССР—1983—т.268, № 2—с. 481-485.

18. Бурый В.А., Шуба М.Ф. Исследование трансмембранных ионных токов гладкомышечных клеток методом фиксации напряжения// Биофизика мембран / Каунас—1972, т. 2—с. 101-112.

19. ВальдманВ.А. Венозное давление и венозный тонус // JI.—1947.

20. Ванков В.Н. Строение вен.// Медицина М.1974.

21. Виноградов В.В. Гормоны, адаптация и системные реакции организма // Минск, Наука и техника 1989.

22. Водостоев М.В., Григорьев Б.И. Магнито-лазерная терапия с использованием иммобилизированных ферментативных повязок при амбулаторном лечении больных с трофическими язвами голеней// Новые достижения лазерной медицины / М.—1993—421 с.

23. Волковская Н.Г., Уляшев Н.В., Барышев В.Е. Опыт применения гелий-неонового лазера в терапии трофических язв //Актуальные вопросы лазерной хирургии и медицины: Материалы 1 обл. конф. по лазер, медицине, 14-15 нояб., 1995г./Екатеринбург—1995—с. 15-16.

24. Гамалея Н.Ф. Лазеры в эксперименте и клинике // М., Медицина— 1972—232 с.

25. Гамалея Н.Ф., Шмико Е.Д., Яншин Ю.В. Новые данные по фоточувствительности животной клетки к механизму лазерной биостимуляции // Докл. АН СССР—273 ,№1—1983—с. 224-227.

26. ГамалеяН.Ф., Стаднюк В.Я. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на кровь // Врачебное дело~№9—1988—с. 67-70.

27. Георгадзе А.К., Карпов В.И., Кузнецов Е.В., Солдатов A.B., Рукосуев В.П. Лечение длительно не заживающих ран и трофических язв низкоинтенсивным лазерным излучением в условиях поликлиники //Хирургия—1990, №12—с. 93-96.

28. Говырин В.А., Хорьков А.Д. О непостоянстве нервно-мышечных отношений в стенке кровеносных сосудов // Эволюц. биохим. ифизиология.—1975, № 11-е. 198-200.

29. Гуляев В.А., Старосельская А.Н., Зяблицкий В.М., Каплан М.А.

30. Состояние сосудов микроциркуляторного ложа брыжейки у интактных и облученных крыс при многократном лазерном облучении области живота// Физ. медицина—1991,№ сигн.—с. 31-35.

31. Гурковская A.B. Исследование электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток воротной вены.// Автореферат дисс.—Киев, 1971.

32. Гурковская A.B. Спонтанная электрическая активность гладких мышечных клеток воротной вены // Физиол. журнал.—1970—56, №3—с.1157-1163.

33. Гусак В.В. Сравнительная оценка эффективности методов комплексного лечения больных строфическими язвами нижних конечностей с применением физических факторов: автореф. дис. канд. мед. наук // Киев, ин-т усоверш. врачей—Киев, 1992—22 с.

34. Девятков И.Д., Зубкова С.М., Лапрун И.Б., Макеева Н.С. Физико-химические механизмы биологического действия лазерного излучения.// Успехи современной биологии.—1987—103, вып. 1— с. 31-43.

35. Долго-Сабуров Б.А. Иннервация вен // Л.—1958.

36. Дол го-Сабуров Б.А. Очерки функциональной анатомии кровеносных сосудов // Л.-- 1961.

37. Дуденко Г.И., Залюбовский В.И. Лечение острого тромбофлебита нижних конечностей лазерным излучением // Хирургия.—1989, №9— с. 97-99.

38. Ерофеев Н.П. Сократительная деятельность поверхностных вен //

39. Дис. на соиск. . канд. мед. наук—1976.

40. Ерофеев Н.П., Мандрыко Е.С. Модификация системы для исследования изолированных мышечных препаратов // Физиол. ж.— 1975—61, № 8-1260-1261.

41. Жуков Б.Н., Лысов H.A., Шевченко А.И., Бакуцкий В.Н. К вопросу о дозированной лазеротерапии больных с заболеваниями периферических сосудов // Новое в лазерной медицине и хирургии: Материалы международной конф., 8-18 марта 1991г./ М.—1991— с. 235.

42. Иванов A.C. Влияние лазерного излучения на здоровье человека // Сб. научн. трудов / Л.—1985.

43. Козлов В.И.,Ю Литвин НФБ., Синяков B.C., Вдовиченко С.А.

44. Воздействие гелий-неонового лазера на микроциркуляцию в сосудах мягкой оболочки головного мозга у крысы // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины—1988~№ 9—с. 309-311.

45. Колесникова P.C. Клинико-физиологические изменения при хронической венозной недостаточности нижних конечностей и их диагностическое значение. // Сов. мед.—1970, №3—-с. 34-29.

46. Кошелев В.Н. Лазеры в клинической медицине // Под ред. С.Д. Плетнева.—М., 1981—с. 313-330.

47. Крюк A.C., Хохлов И.В. Мостовников В.А. Терапевтическая эффективность низкоинтенсивного лазерного излучения // Минск, Наука и техника—1986.

48. Кучанская А. Варикозное расширение вен // С.-Петербург: Комплект—1998. .

49. Лазеры в медицине. Теоретические и практические основы // СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова: Центр лазерной медицины и каф. мед. и биол. физики под ред. H.H. Петрищева / СПб—1998—108 с.

50. Леонова Г.Н., Чудновский В.М., Майстровская О.С., Орлова Т.Г. Влияние ГНЛ излучения на индукцию интерферона // Лазерная терапия на Дальнем Востоке // Владивосток, Дальнаука—1993.

51. Лысов H.A. Лазерное излучение в лечении и оценке его эффективности у больных заболеваниями нижних конечностей: : автореф. дис. доктора, мед. наук //Самар. гос. мед. ун-т / Самара— 1995—28с.

52. Магидов Л. А. Морфологические исследования сосудов после интравазального лазерного облучения // Вопросы морфогенеза сосудистой системы/ Благовещенск—1993—с. 45-47.

53. Максименков А.Н. Итоги и перспективы в изучении венозной системы // Функциональная и прикладная анатомия венознойсистемы.// Тр. всеросс. тем. конф./Медицина.—М., 1969—с. 5-8.

54. Меерсон Ф.З., Малышев И.Ю. Феномен адаптационной стабилизации структур и защита сердца // М., Наука—1993.

55. Мешков В.М., Пономарев A.B., Алексеенко A.A., Борисов М.А. Микроциркуляция при облитерирующем атеросклерозе сосудов нижних конечностей после лазеротерапии по данным лазерной допплерографии: Сб. ст .// M—1994—с. 227-228

56. Миненков,А.А., Илларионов В.Е., Довганюк А.П., Речицкий В.И. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения инфракрасного диапазона на состояние регионарной гемодинамики больных атеросклерозом артерий ног // Вопр. куруртологии—1988, № 4—с. 5455.

57. Михайлова JLB., Агов Б.С. Конева С.Б., Евстифеева Е.С.

58. Механизм влияния гелий-неонового лазерного облучения на сердце // Пат. физиология и экспер. терапия.—1987, №5—с. 81-82.

59. Мишенькин Н.В., Тихомиров В.В. Качаева И.М. Определение характера сосудистых реакций на воздействие излучения гелий-неонового лазера методом отореографии // Вопросы куруртологии— 1985. № 3-е. 65-67.

60. Несен К.И. Нервно-гуморальные механизмы гипоталамических влияний на моторику желудочно- кишечного тракта // Проблемы физиологии гипоталамуса / Киев—1968— вып. 2—с. 100-105.

61. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы // J1., Медицина—1983—295с.

62. Ноздрачев А.Д. Висцеральные рефлексы // Л., ЛГУ—1991—156 с.7!.Олесин А.И., Максимов В.А., Мажара Ю.П., Павлова Р.Н.,

63. Лобанов H.A., Дьячук Г.И. Биологическое действие лазерного излучения на функциональное состояние кардиомиоцитов // Пат. физиологтя и экспериментальная терапия—1992—5,№6—с. 17-20.

64. Орлов Р. С., Хамитов Х.С., Улумбеков Э.Г. Вопросы структуры и функции клеток гладкой мускулатуры мозговых сосудов // Успехи физиол. наук—1971—2, №2—с. 26-48.

65. Орлов P.C. Физиология гладкой мускулатуры сосудов // Современные проблемы физиологии кровообращения. Тезисы докл. I Всесоюзн. школы-семинара./ Рига—1975— с. 157-168.

66. Орлов P.C., Азии А.Л. Исследование электромеханической связи в гладкомышечных клетках мозговых артериальных сосудов // Физиол. журнал,—1974—60, № 9— с.1439-1445.

67. Орлов P.C., Азии А.Л., Бразговский В.А., Игнатенко A.C. Механизмы активации сокращений гладкой мускулатуры мозговых сосудов // Физиол. ж. СССР—1975—61, № Ю—с. 1458-1465.

68. Орлов P.C., Изаков В.Я., Кеткин А.Т., Плеханов И.П. Регуляторные механизмы клеток гладкой мускулатуры и миокарда // Наука, Л.~ 1971.

69. Орлов P.C. Механизмы распределения внутриклеточного кальция // Успехи совр. биол>—1981—92, № 1-е. 19-34.

70. Орлов P.C., Покудин Н.И., Гулак П.В. Транспорт кальция в гематоцитах: механизмы и их регуляция // М.: Наука—1985—с.192-212.

71. Папазова М. Электрофизиологическое изучение моторной деятельности желудка // София: БАН—1970—189 с.

72. Петров В.К., Воронков И.Ф. Влияние красного лазерногоизлучения на некоторые показатели крови и сосудистой стенки// Современные методы лазерной терапии: Сб. ст./ Ряз. обл. Совет по лазерным исследованиям в биологии и медицине—1988— с. 56-61.

73. Полосухин В.В., Егунова С.М., Чувакин С.Г., Бессонов А.П.

74. Ультраструктура кровеносных сосудов бронхов при хроническом воспалении и эндобранхиальной лазерной терапии // Арх. патологии—1995— № 6— с. 26-31.

75. Пономаренко Г.Н., Стойко Ю.М., Чернов М.Ю. Магнитолазерная терапия больных с осложненными формами варикозной болезни // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечеб. физ. культуры—1998— № 1—с. 14-16.

76. Плетнев С.Д. Лазеры в клинической медицине // М.: Медицина -1981—399 с.

77. Прикладная лазерная медицина. Учебное пособие под ред. Бермена Х.П., Мюллера Г.Й. // Интерэкспорт—1997.

78. Прохончуков A.A. Механизмы терапевтического действия излучения гелий-неонового лазера // Стоматология—1980~№4—с.76-79.

79. Прохончуков A.A., Жижина H.A. Лазеры в стоматологии // Москва, Медицина—1986—175 с.

80. Радионов Б.В., Когосов Ю.А., Коновалов Е.П., Хмель О.В., Гуменюк Н.И. Влияние лазерного излучения малой интенсивности на кровь и сосуды в клинике и эксперименте: обзор // Сов. медицина— 1991, № 1—с. 27-29.

81. Рекалов В.В., Тараненко В.М., Шуба М.Ф. Кальциевый ток и сокращение гладкомышечных клеток // Докл. АН СССР—1985—281, № 2— с. 462-466.

82. Рузов В.И. Морфологические аспекты антиишемического на коронарных сосудах эффекта низкоинтенсивного гелий-неонового лазера // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечеб. физ. культуры— 1995— № 3— с. 27-28.

83. Савицкий H.H. Биофизические основы кровообращения и клинические методы изучения гемодинамики // Медицина.—Л., 1974.

84. Сазонтова Т.Г., Архипенко Ю.В., Меерсон В.З. Увеличение активности антиоксидантных ферментов сердца при адаптации крыс к кратковременным стрессорным воздействиям // Бюл. эксперим. биологии и медицины—1987, № 10—с. 411-413.

85. Салимгереева Б.Ж., Романюк С.Н. Низкоинтенсивное лазерноеизлучение как биостимулятор. Влияние химических и физических факторов окружающей среды на организм: Сб. ст.// Алма-Атинский гос. мед. ин-т.—1988— с. 114-116.

86. Саулебекова М.С., Мельдеханов Т.Т. Влияние монохроматического поляризованного красного цвета на состояние гисто-гематических барьеров // Здравохранение Казахстана—1976, № 5— с. 91-92.

87. Сергеев Н.А., Садов С. В., Дубатолов Г.А. Лечение длительно не заживающих ран и трофических язв нижних конечностей лазерным излучением и магнитным полем // Первый Белорусский международный конгресс хирургов / Витебск—1996—с. 304-306.

88. Сидорова В.Е., Чудновский В.М. Влияние излучения ГНЛ на конформацию бактериальных токсических белков // Лазерная терапия на Дальнем Востоке / Владивосток, Дальнаука—1993.

89. Тараненко В.М. Влияние ионов кальция на электрофизиологические свойства мышечных клеток портальной вены // Физиол. журнал.— 1971—57, №5—с. 704-711.

90. Тараненко В.М. Влияние ионов кальция, бария и марганца на электрофизиологические свойства гладкомышечных клеток воротной вены // Бюлл. эксперим. биологии и медицины.—1974—78, № А— с.15-19.

91. Тараненко В.М. Механизмы действия норадреналина и адреналина на гладкомышечные клетки кровеносных сосудов // Успехи физиол. наук.—1975 — 6, № 1— с. 32-48.

92. Хессельбах В., Вебер Г. Внутриклеточная регуляция мышечного сокращения//Мол. биол.—1964—с. 237-249.

93. Хохлов A.M., Дубова М.Н., Гладких С.П., Константинова И.Э. Роль электролитов в патогенезе артериального спазма и мышечных судорог при варикозной болезни нижних конечностей // Хирургия— 1989, №9—с. 88-92.

94. Цыганюк С.С. Терапевтическая активность когерентного монохроматического красного света при лечении трофических язв голеней // Вестн. дерматологии и венерологии—1993, № 4— с. 73-75.

95. Шабанов А.Н., Дмитриев А.Е. Гольц М.В., Татиевосяи A.C., Клюев A.B., Маженков Э.П., Рудина И.А. Лазер в лечении облитерирующих заболеваний артерий конечностей // Вестник хирургии им. И.И.Грекова—1976, № 12— с. 53-57.

96. Шевкуненко В.Н., Вишневский А.С., Максименков А.Н. Атлас периферической нервной и венозной системы.// Медгиз—М., 1949.

97. Шуба М.Ф. Электрофизиологические свойства мембраны гладкомышечных клеток // Протоплазматические мембраны и их функциональная роль / Киев, Наукова Думка—1965— с. 90-124.

98. Шуба М.Ф., Кочемасова Н.Г. Физиология сосудистых гладких мышц // Киев, Наукова думка—1988.

99. Шуба М.Ф., Кочемасова Н.Г., Тараненко В.М. О сопряжении возбуждения и сокращения в гладкомышечных клетках воротной вены при действии норадреналина // Физиол. ж. АН СССР—1982— 68, № 8—с. 1143-1150.

100. Andersson S.M.,Leu J.A., Kant G.J. Chronic stress increases the binding of the A- adenosine receptor agonists H- cyclohexylanedosine, to rat hypothalamus // Pharmacol, and Biochem. Behav.—1988—30—p. 169.

101. Arnaudeau S., Boittin F.X., Macrez N., Lavie J.L., Mironneau C.,• 2 | Mironneau J. L-type and Ca release channel-dependent hierarchical

102. Ca2+ signalling rat portal vein myocytes // Cell Calcium—1997—22, №5—p. 399-411.

103. Arnaudeau S., Macrezlepretre N., Mironneau J. Activation of calcium sparks by angiotensin II in vasculare myocytes // Biochemical & Biophysical Research Communication—1996—222,№3—p. 809-815.

104. Ashton F.T., Somlyo A.V., Somlyo A.P. The contractile apparatus of vascular smooth muscle: intermediate high voltage stereo electron microscopy // J. Molec. Biol.—1975—98, № 1—p. 17-29.

105. Barr L.L., Jantz T.A. Effects of various laser wavelengths and energy levels on pig rectal submucosal tissue // J. Laparoendosc. Adv. Surg. Tech. A.—1998—8, № 2— p. 83-87.

106. Becker P.L., Williams D.A., Fay F.S. Cytosolic calcium transients in single smooth muscle cells: Kinetic characteristics // Biophys. J. -1987— 51, №2, pt.2—p. 101-107.

107. Benningheff A. Blutgefäße und Hers. // Möllendorff s Handbuch mikr. / Anatom, d. Menschen // Berlin—1930—6, № 1—p. 1.

108. Bohr D.F. Reactivity of vascular smooth muscle from normal and hypertensive rats: effect of several cations // Fed. Proc.—1974—33, № 2— p. 127.

109. Bohr D.F.Vascular smooth muscle updated // Circulât. Res.—1973— 32—p. 665.

110. Boittin F.X., Coussin F., Macrez N., Mironneau C., Mironneau J.1.osgtol 1,4,5—triphosphate and ryanidine-sensitive Ca2+ release channel depended Ca signalling in rat portal vein myocytes // Cell Calcium— 1998—23, №5—p. 303—311.

111. Bulbring F.X., Brading A., Jones A.W., Tomita T. Smooth muscle:an assessment of current knowledge // London: Arnold—1981.

112. Bulbring E., Tomita T. Effect of calcium;, barium and magneuese on the aciion of adrenaline in the smooth muscle of the ginea-pig taenia- coli // Proc. Roy. Soc. Biol.—1969—p. 121, 172.

113. Bucciante L. Microscopie optique de la paroi vensuse. // Simposia Angiologica Suntor // Bas. N-Y—1966—II—p. 211.

114. Burton A.C. F^siology and Biophysics of the Circulation // Chicago— 1965.

115. Carafoli E. The regulation of intracellular calcium // Regul. Phosphate and other Miner. // New York City, 23-27 Sept.—1981 // New York, London—1982—p. 461-472.

116. Casteels R. Ionic mechanisms in smooth muscle and its relation to e&citation-contraction coupling // Proc. Intern. Union Physiol. Sci., XXIV Intern. Congr./ Washington—1968, v. 6—p. 144.

117. Casteels R., Droogmans G. Membran potential and excitationcentraction coupling in smooth muscle // Fed. Proc.—1982— 41—p. 2879-2882.

118. Casteels R., Wuytak F., Himpens B., Raeymaekers L. Regulatory systems for the cytoplasmic calcium concentration in smooth muscle // Diomed. Biochem. acta.—1986—45, № 1-2—p. 147-152.

119. Collins G.A., Sutter M.C., Teiser J.C. The effect of Manganese on the rabbit anterior mesenteric-portal vein // Canad. J. Physiol. & Pharmacol.— 1972—p. 4, 50,300.

120. Devine C.E., Somlio A.P. Thick filaments in vascular smooth muscle // Physiol. Rev.—1962—42—p. 238.

121. Dillon P.F., Aksay M.O., Drisca S.P. et. al. Miosin phosphorilation and the cross-bridge cycle in arterial smooth muscle. Multiple control systems//Science—1981—p. 211.

122. Di Salvo J., Gruenstein E., Silver P. Ca -depended phosphorilation of bovine aortic actomyosin // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.—1978—158, № 2—p. 410-414.

123. Freas W., Hart J.L., Golightly D., McClure H., Muldoon S.M.

124. Contractile properties of isolated vascular smooth muscle after photoradiation// American J. of Physiology—1989—256, №3 (pt. 2)—p. 655-664.

125. Funaki S. Electrical and mechanical activity of isolate smooth muscle from portal vein of rat// Bibl. Anat.—1967, № 8—p. 5.

126. Gal D., Chokshi S., Mosseri M., Clarke R.H., Isner J.M.

127. Percutaneous delivery of low-level laser energy reverses histamin-induced spasm in aterosclerotic Yucatan microswine// Circulation—1992—85,b №2—p. 756-768.

128. Ganitkewich V.Ja., Shuba M.F., Smirnov S.V. Potential- dependent calcium inward current in a single isolated smooth muscle cell of the guinea-pig taentia coli // J. Physiol. (Gr. Brit.) -1986—380— p. 1-16.

129. Golengofen K., Loh D. Intracellular potentialmessungen zur normalen spontanactivitat der isolierten portalvene des meerschweinches// Pflugers Arch.—1970—p. 82,319.

130. Graier W.F., Paltaufdoburzynsca J., Hill B.J.F., Fleischhacker E.,

131. Hoebel B.G., Kostner G.M., Sturek M. Submaxsimal stimulation of porcine endotelial cells causes focal Ca2+ elevation beneath the cell membrane // J. of Physiology—London—1998—506, № 1—p. 109-125.

132. Hauesler J. Contraction, membrane potential and calcium fluxes in rabbit pulmonary arterial muscle // Fed. Proc.—1983—42, № 2— p. 263268.

133. Hoh N., Kuriyama H., Manjo T. Effect of calcium and manganese ions on mechanical properties of intact and skinned muscles from the guinea-pig stomnch// J. Physiol.-1982—333— p. 555-576.

134. Hoh T., Kuriyama H., Suzuki Y. Excitation-contraction coupling in the guinea-pig mesenteric artery // J. Physiol.—1981—321—p. 519-535.

135. Johansson B., Bohr D.E. Rhytmic act ivity in smooth muscle from small subcutaneous arteries // Amer. J. Physiol.—1966—p. 210, 801.

136. Johansson B., Ljung B. Sympathetic control of rf/mically active vascular smooth muscle as studied by a nerve-muscle preparation of portal vein //Acta physiol. scand.—1977—70~p. 299.

137. Johansson B., Ljung B. Spread of excitation in the smooth muscle of the rat portal vein //• Acta physiol. scand.—1977—70— p.312.

138. Johansson B, Jonsson O. Cell volume as a factor influancing electrical and mechanical activity of vascular smooth muscle // Acta Physiol. scand.—1968—72—p. 456.

139. Johansson B., Jonsson O. Similarities between the vascular smooth muscle responses to sudden changes in external potassium, sodium and cloride ion corifrations // Acta. Physiol. scand.—1968—73—p. 365.

140. Johansson B. Active state in the smooth muscle of the rat portal vein in the relation to electrical activity and isometric force // Circulât Res.—1973—32, №2—p. 246

141. Johansson B. Determinants of vascular reactivity // Fed. Proc.—1974—33, №2—p. 121

142. Johansson B., Mellander S. Static and dynamic component in the vascular myogenic response to passive changes in length as revealed by electrical and mechanical recording from the rat portal vein // Circulât. Res.—1975—36, № 1—p. 76.

143. Jones A.W. Vascular smooth muscle and alterations during hypertension. In: Smooth muscle// Eds. Bulbring A, Brading A, Jones A, Tomita T.,London: Edward Arnold—1981-p. 397-429.

144. Karaki H., Hakagawa H., Urakawa N. Comparative effects of varapamil and sodium nitroprusside on contraction and 45Ca uptake in the smooth muscle of rabbit aorta, rat aorta and guinea-pig taenia coli // British J. Pharmacol—1984—81, № 3—p. 393-400.

145. Kohmoto T., DeRosa C.M., Yamamoto N., Fisher P.E., Failey P., Smith C.R., Burkhoff D. Evidence of vascular growth associated with laser treatment of normal conine myocardium // Annals of Thoracic Surgery—1998—65, № 5—p. 1360-1367.

146. Lethias C., Labordette L., Willems R., Comte J., Herbage D. Composition and organization of the extracellular matrix of vien walls: collagen networks // Int-Angiol.—1996—15, № 2 — p. 104-113. .

147. Luing B. Nervous and myogenic mechanism in the control of a vascular neuroeffector system // Acta, physiol. scand.—1970—349— p. 33.

148. Long R.J. Calcium channels in smooth muscle // Proc. Austral. Physiol. Pharmacol. Sci.—1987—18, № 1—p. 31-37.

149. Meerson F.Z., Malyshev I.Yu., Zamotrinsky A.V. Adaptive protection of the heart and stabilization of miocardial structures // Basic Res. Cardiol.—1991—86—p. 87-98.

150. Meerson F.Z., Sazontova T.G., Archipenko Yu.V. Increased resistance of cardiac sarcoplasmic reticulum Ca2+ -pump to autulysis after adaptation of rats to stress // Biomed. Sci.—1990—1—p. 373-378.

151. Morcos N.C., Zaldivar F., Lo Hsueh M., Henry E.L. Bovine coronary artery endotelium: culture, characterization, angiogenesis and sensitivity to laser photodynamic treatment modalities // J. of Clinical & Laboratory Immunology—1991—34, № 3— p. 99-106.

152. Mosseri M., Pickering J.G., Chokshi S., Gal D., Isner J.M. Excimer laser-induced vasoreactivity // Europian Heart Journal—1993—14,№10— p. 1394-1403.

153. Nayler W.G. The segnificance of calcium ions in cardiac excitation and contraction// Amer. Heart. J.—1963—65—p. 404.

154. Nishimura H., Nelson G.H., Rosenblum W.L. Chicago sky blu and a helium-neon laser abolish endothelium depended relaxation in vivo in the microcirculation—1997.

155. Pato M.D., Adelstein R.S. Dephosphorilation of the 20 OOdalton light chain of myosin by two different phosphotases from smooth muscle //

156. J. Biol. Chem.—1980—255, № 6—p. 6535-6538.

157. Popescu L.M. Conceptual model of excitation-contraction coupling in smooth muscle: the possible role of the surface micro vesicles // Studia Biophysica, Berlin—1974—44, № 3—p. 141-153.

158. Roddie J.C. The transmembrane potential changes associated with smooth muscle activity in turtle arteries and viens // J. Physiol.—1962— 163—p. 138.

159. Rosenblum W.I., Nelson G.H, Povlishock J.T. Laser-dependent endothelial damage inhibits endothelium-dependent relaxation in the cerebral microcirculation of the mouse // Circulation Research—1987— 60, №2— p. 169-176.

160. Saida K. Ca2+ and depolarization induced Ca2+ release in skinned smooth muscle fibers // Biomed. Res.—1981—2—p. 453-455.

161. Somlyo A.P., Somlyo A.V. Vascular smooth muscle I. Normaljjstructure, patology, biochemisctry and biophysics // Pharmacol.—1968— 20—p. 197.

162. Somlyo A.P., Somlyo A.V. Electromechanical and pharmacomechanical coupling in vascular smooth muscle // J. Pharmac. Exp.Ther.—1968—159—p. 129.

163. Somlyo A.P., Somlyo A.V. Pharmacology of excitation-concentration coupling in vascular smooth muscle // Fed. Proc.—1969—5—p. 1634.

164. Somlyo A.P., Somlyo A.V. Pharmacological vascular smooth muscle //

165. Pharmacol. R.—1970—22, № 2— p. 249.

166. Somlyo A.P., Somlyo A.V. Solved: how smooth muscle contracts // Medical. World News—1973—14—p. 61.

167. Solmyo A.P., Ealker J.W., Goldman Y.E., Trentham D.R., Kobayashi S., Kitazawa T. Inositol trisphosphate, calcium and muscle contraction // Biological Sciences—1988—320 (1199)—p. 399-414.

168. Somlyo A.P., Bond M., Somlyo A.V., Scarpa A. Inositol trisphosphate-induced calcium release and contraction in vascular smooth muscle // Proc. Nat. Acad. Sci. USA—1985—82, № 15—p. 5231-5235.

169. Somlyo A.P., Wasserman A.J., Kitazawa T., Bond M., Shuman H., Somlyo A.V. Calcium and sodium distribution and movements in smooth muscle // Experientia—1985—41, № 8—p. 981-988.

170. Statius van Eps R.G., Adili F., LaMuraglia G.M. Photodynamic therapy inactivates cell-associated basic fibroblast growth factor: a silent way of vascular smooth // Cardiovascular Research—1997—35, № 2— p. 334-340.

171. Steedman W.M. Microelectrode studies on mammalian vascular muscles // J.Physiol.—1966—186—p. 382.

172. Stevenson M.A., Calderwood S.K. Members of the 70 kDa head shock protein family contain a highly conserved calmodulin-binding domain // Moll, and Cell. Biolog.—1990—vol. 10—p. 1234-1238.

173. Suer A.H., Woli F.A. Effect of varapamil on uptace of calcium in theabsence and presence of sodium and potassium ion channel blockers in rat isolated ileum // J. Physiol. (Gr. Brit.)—1986—380—p.73-75.

174. Szent-Gyorgyi A.V. Calcium regulation of muscle contraction // Biophys.—1975—15, № 5—p. 707-723.

175. Tsien R.W., Benham C.D., Fox A.P., Hess P., Lansman J.B., Lipscombe D., Mc Claskey E.W., Madison D.V., Rosenberg R.L. Calcium channels: functional instincts and structural implications // Boiphys. J.—1987—51, №2—p. 2-32.

176. Vaneps R.G.S., Adili F., Lamuraglia G.M. Photodynamic therapy inactivates cell-associated basic fibroblast growth factor—a cilent way of vascular smooth muscle cell eradication // Cardiovascular Research— 1997—35, № 2—p. 334-340.

177. Vanhoutte P.M., Rimele T.J., Booke T.W. Calcium entry and the contraction of vascular muscle // Adv. Cycl. Nucl. and Protein Phosphorylat: Res. 17: Int. Conf. Milan, 27 June- 1 July—1983—New York—1984—p. 569-573.

178. Wahlstrom A. Ionic fluxes in the rat portal vien and the applicability of the Goldman equation in predicting the membrane potential from flux data //Acta, physiol. scand.—1973—89,3№~p. 436-448.

179. Webb R.C., Bohr D.F. Regilation of vascular tone, molecular mechanisms // Progr. Cardiovasc. Dis.—1981—24, № 3 p. 213-242.

180. Yamamoto N., Kohmoto T., Gu A., De Rosa C., Smith C.R., Burkhoff D. Angiogenesis is enhanced in ischemic canine myocardium by transmyocardial laser revascularization //J. of the American College of Cardiology—1998—31 ,№6—p. 1426-1433.

181. Yamatogushi Y. Recording of intracellular Ca2+ from smooth muscle123cells by sub-micron tip, double-botrelled Ca -selective microelectrodes // Cell Calcium—1986—2, № 4—p.203-219.

182. Zhu Q.Y., Yu W., Yang X.P., Hicks G.L., Lanzafarae R.J., Wong T.C. Foto-irradiation improved functional preservation of the isolated rat heart // Lasers in Surgery & Medicine—1997—20, № 3—p. 332-339.

183. Zwillenberg L.O., Lasst L., Zwillenberg H. Die Feinstructur der Venen—wand bei Varicove // Angiologica,Basel—1971—pp. 6,8,318.