Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Система перекисного окисления липидов и взаимосвязь ее с резистентностью организма животных

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Система перекисного окисления липидов и взаимосвязь ее с резистентностью организма животных"

АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР Казахский институт региональных проблем питания

На правах рукописи

ДЖАПАРЗВЛ. Асия Кумаровна

СИСТЕМА ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И ВЗАИМОСВЯЗЬ ЕЕ С РЕЗИСТЕНТНОСТЬЮ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ

диссертации на соискание ученей степени кандидата Сююлогмческих наук

03,00.04 - биешмия

Авторе ф е р а т

Алма-Ата 1990

Работа выполнена в Московском ордена Ленина институте химической физик» АН СССР и Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте во ВАСХНИЛ.

Научный руководитель — Лауреат Государственной премии

ССР, доктор биологических наук, Профессор

Е. К БУРЛАКСеА.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор

З.С. СЕШШ,

Ведущая организация - Московская ветеринарная академия

им. К. И. Скрябина.

Зашта диссертации состой » I <К 1яф в " /А " часов на заседании специализированного Совета Д 001. 35.01 щи Институте региональных проблем питания АМН СССР по адресу: 460008, г. Алма-Ата, узь Клочюова, 66.

С диссертацией можно ознакомоться в библиотеке Казахского ин статута региональных проблем питания АНН СССР

Автореферат разослан « X/ _1990 г.

доктор биологических наук, профессор

А Т. НАЭЫРСе

УЧеный секретарь специализированного совета, доктор медицинских наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОШ

Актуальность темы. Структурная и функциональная устойчивость биологических систец, иивжцая важное значение для дробей народнохозяйственного значения, непосредственно связана о ункционированием системы перекисного окисления яипвдов (ПОЛ).

Однш из механизмов поракения клеток человека и аивотных од воздействием вредных факторов, в том числе и патологичес -ах агентов, является интенсификация ПОЛ, в основе которой лент высокая потенциальная склонность ненасыщенных липидов.вхо-ящих а состав клеточных мембран, к окислительной деструкции Бурлакова Е.Б., 1970,1986; Двинская Л.М., 1972,1974; Давыдов 1.В., 1987; Зыбина Н.Н/* 1983; фликов B.D.,"I976KI933; ' ieopcoH-Э.З., 1984,1988). -- • .......

Анализ накопленных данных позволяем сделать и®од,что вы-;окая окислительная устойчивость клеточных липвдов определяет-!Я а значительной степени функционированием антиоксвдантных метем САО-Гсисте»!), поддеркивавщия стационарность процессов исислешм, сумдарное тормозящее действие котершс отражается в отиэкислительной активности (АОА) (Бурлакова Е.Б., 1967,1986; 1альмика Н.П., 1975,1932), Согласно• современным представлениям огуляция системы ПОЛ-в организме кокет осуществляться не толь-со биоантноксвдантагга, но к специализированными задитннмя "анти-жсвдантными" ферментными скстенвки, в частности, пероксвдазами, агалаэсй, супервксвдрздуктазой (Яаншш В.З., 1983; йапарханава \С., 1988). В связи с этш знание этих показателей в определен-юй степени иоззт быть полезным при прогнозировании устойчивос-;и организма животных.

До настоящего времена из изучались показатели системы ПОЛ, 5 первуп очередь АОА лшищов во взаимосвязи с естественной ре-шстентностьо организг» (е.р.) к продуктивность» высокопродук-гивного хфупного рогатого скота (KPG). Мезду тем, проведение ^следований в экспериментальных-условиях позволит определить 5дин из механизмов формирования устойчивости аивотных,раскрыть 1екоторые причинно-следственные фактора отдельных звеньев этого процесса.

Цель и.задачи исследования. Целью настоящей работы яви-юсь изучение показателей системы перекисного окисления липи-юв в лабораторных и производственных условиях для оценки

функционального состояния и естественной резистентности организма животных и возможности использования в качестве допол -нительного критерия оценки их устойчивости. Дня этого были поставлены следующие задачи:

1. Изучить динамику изменения АОА и состава липидов лабораторных животных после введения препаратов (адриамицин, глио-фен) в максимально переносимой дозе (МЦД) и при хронической введении.

2. Исследовать характер совместного введения одного из препаратов с антиоксидантоы-ионолоы в целях повышения устойчивости организма животных к повреждающим воздействиям. Определить при этом ЛД§0» ^Г - среднее время жизни, состав липидов.

3. Изучить изменения антиокислительной активности липидов (АОА) у первотелок алатауской породы, алатауско-швицких помеоей в зависимости от кровкости, сроков лактации (3,6,9 месяцев) и во взаимосвязи с показателями естественной резистентности.

4. Определить показатели ПОЛ (содержание ТШ-активных продуктов, ЩА (малонового диальдегида), активность каталазы.перо-ксадазы у первотелок алатауской порода, алатауско-швицких помесей в различные сроки лактации.

5. Оценить характер возможных корреляций между изменениями АОА, ИЧА в крови коров данной резистентности с их продуктивностью.

Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые были использованы показатели системы перекисного окисления липидов (АОА липидов, Ш!Д, активность ферментов) в характеристике функционального состояния и естественной резистентности высокопродуктивного крупного рогатого скота в зависимости от сроков лактации и кровности. Изучена взаимосвязь АОА, ЦДЛ с показателями естественной резистентности и продуктивностью алатаус-кнх животных, алатауско-швицких помесей.

Показано, что АОА липидов - один из показателей функцио -нального состояния организма, характеризующих устойчивость лабораторных животных к повреждающему действию агентов. В условиях промышленного комплекса большие значения АОА лилвдов .коррелируют с более высокими показателями естественной резистентности организма животных.'

Выявленные закономерности перспективны в селекционной работе, так как содействуют развитию прикладных аспектов животно-

шдства - возможности использования показателей система ПОЛ в юыплексной оценке функционального состояния и устойчивости ¡рганизма животных к вредным (стрессовым) условиям промьшшен-¡ой технологии при прогнозировании хозяйственно-полезных Примаков.

Результаты выполненной работы нашли отражение в методиче-:$шх указаниях: "Использование! метода антиокисяительной актив-юсти липвдов в характеристике естественной резистентности и функционального состояния организма .тавотных" (составители: [skhci-зя Л.М., Бурлакова Е.Б., Дзапарова А.К., • Семензэтина С,А., ¡еменатин В.З., Иванова I.M. - Боровск, X99I).

На пубдичнув защиту выносятся следувдиз положения:

I. Показатели системы перекисного окисления липидов в первую очередь антиокислительная активность липвдов) в ксперкментадьных и производственных условиях могут быть ис-ользованы для характеристики функционального состояния н ес-вственной резистентности организма животных:

а) характер изменений АОА липидов в органах лабораторных ивотных при хроническом и однократном (максимально переноси-ая доза) введении препаратов, вызывающих ослабление устойчи-ости организма к повреядениз, связан с уменьшением значений нтиокислительной активности;

б) состав липидов тканей нивотных э динамике введения пре-аратоэ, вызываяпук уменьшение значений АОА липидов имеет сущэ-гвенноо отклонение от контрольных значений;

в) повышение устойчивости организма животных (увеличение HgQ, 'V- среднего временя яизни, "сглаживание" изменений в эставе липидов и приближение их значений к норме достигает-% при совместном введении препарата с антиокевдантом - ионо-зм, повышающим антиокевдантный статус организма;

г) значения антиокислительной активности липвдов крови фвотелок алатауской породы, алатауско-ивицхих помесей святы с показателями естественной резистентности, характериэу-1ими их устойчивость к стрессовым условиям производственных )мплексов: более.высокие величины АОА липвдов алатауской (естной) породы животных к 2-3 месяцам лактации в срок наи->лее эффективного народнохозяйственного использования корре-ируют с большими значениями показателей естественной резис-знтности;

д) изменения активности ферментов (каталаза, пероксида-за), содержания конечных продуктов перекисного окисления липидов крови первотелок отражают своеобразие адаптационной способности впервые селекционированных в Казахстане животных разной кровности в периоды лактации (3,6,9 месяцев) к условиям внепшей среды. • •

Апробация полученных результатов. Основные положения диссертации доложены на научно-практической конференции молодых ученых и специалистов КазНИВИ, Алма-Ата, 198?; на межведомственной научной конференции молодых ученых-и специалистов КазНИВИ, НИИ ЭШ1Б МЗ КазССР, АЗВИ, ИЗБ АН КазССР, Алма-Ата, 1983; на совместном заседании отделов науки зооинженорного и ветеринарного факультета Белгородского учебно-научного центра по сельскому хозяйству, Белгород, 1989; на Заседании Белгородского отделения Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова, п.Майский, 1989.

Публикация результатов исследований.. По материалам диссертации опубликовано.5. статей CI статья в печати); разработаны методические указания. • '

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из сдедутадос разделов;~ введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение, выводы, список использованной литературы.

Работа изложена на 137 страницах машинописного текста, иллюстрирована 16 рисунками, 7 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРЩИОШОЙ РАБОШ

Материал и методы исследования. Опыты'проводились в эксп< рймэнтальных и производственных условиях. Исследования по onpi делению АОА и состава липидов для объяснения механизма формир вания устойчивости организма к повреждающим воздействиям были выполнены на лабораторных животных - мышах, 2-месячных гибрид линии Г|ССВА х C57BL) весом от 16-18 г. Животные находились в одинаковых вивардах условиях. Четыре серии опытов по изучению ADA после однократного внутрибрютного введения адриамицина в МЕД (7,7 мг/кг) были проведены на 380 мышах. Животные забивались -декапитацией через 1ч, 6 ч, 1-8,10,12,14 суток после be деняя препарата. Для выделения липидов- объединяли ткани от 5-

шей (печень, иозг), 15 (сердце) животных.

Определение АОА липвдов печени при внутрибрдаинном хрони-геском введении глиофена в дозе 4 мг/кг в течение ХО дней про-юдили трехкратно на мшах указанной вше линии. Животные задались декапитацией через X ч, б ч, I с, 3,5,7,10,15 суток юслв введения препарата. Параллельно изучалась контрольная Труппа. Для экстракции липвдов объединяли ткани 5 животных, ¡сего в опытах было использовано 130 мышей.

В исследованиях по изучению АОА липвдов печени при введе-[ии глиофена в ЩД, равной 40 мг/кг использовались мыши линии j (СБА х GgipBL). Для ввдевения липвдов объединяли ткани 5 жи-10ТНЫХ через I ч, 6 ч, X с, 3,5,7,10,15 суток после внутрибрю-инного введения препарата. Опыты повторялись 3 раза. Всего ри этом было использовано 130-140 мышей.

Эксперименты по изучении -формирования устойчивости орга-изма.животных антиоксидантом-конолом на основании изменений ÜA были проведены на 350 мышах той же линии.

В производственных условиях показатели ПОЛ определялись у ервотелок алатауско-швицких помесей, которые находились в лемсовхозе "Каменский" Алма-Атинской области. Селекционные ра-оты проводились сотрудниками КаэНШЖа, По генотипу опытные хн-отные были разделены на алатауские, 1/4 кровные, 1/2 кровные, /4 кровные и высококровные по швицу.-Групда были подобраны по ринципу аналогов. Объектом исследований бьии эритроциты крови, роаь для биофизических исследований брали в различные сроки актации (3,6,9 месяцев) 3-4 раза. Дяя ввделения липвдов в це-ях определения АОА объединяли кровь 10 животшх каздой породы.

Липиды экстрагировали по методу Блайя и Дайера з ыодифика-ии Кейтса (Кейтс Ы., 1985). Антиокислительную активность лили-зв изучали-на метилолеатной модели (Бурлакова Е.Б., 1967).Раз-зление и количественное определение-фосфолипвдов проводили ме-здом Чена (Кейтс М., 1975). Пероксвдазнуга активность исследо-иш по Попову Т., Нейкевска Л. (НРБ), 1985, активность катала-i по Баху A.M., Зубковой (1955), содержание конечных продук-)в окисления изучали по CfcdAi Jtin в модификации Гонча-шко ¡4.С., 1975. Определение показателей естественной резис->нтности проводилось кандидатом биологических наук Ворояище->й Л.М.

Полученные результаты обрабатывали общепринята! методами

вариационной статистики (Байли Н., 1963). Корреляционные за-' висшости рассчитывали, используя прикладные пакеты "JÁz-üt*? на ЭВМ I/v*fhad (&РГ).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЩОВАНИЙ

Изменения АОД и состава липнаов органов лабораторных животных под действием препаратов. На рис.1,2 представлены кривые изменения значений АСА липвдов после-введения лабораторным животным двух препаратов - глиофена (печень), адриамицина (печень, мозг, сердце) в МВД.

(кедует отметить, что в литературе имеется работы,в кото рых исследуется действие физиологически активные веществ,CTpei са на организм,-вызывающее ослабление его устойчивости,связан ное с одинаковыми изменениями в ADA липвдов, - с понижениями ее значений (Бурлаяова Е.Б., 1975; Меерсон 4.3., I984). Црепа раты, безусловно, обладают специфическим физиологическим действием. Но нас интересовало токсическое их влияние на организ вызывающее понижение устойчивости, а также возможность ее уои ления при повышении антиоксиданного статуса (введение анти-оксвданта). В связи с зтим в последующей работа исследовалась взаимосвязь изменений АОА липидов и показателей естественной резистентности животных, характеризующая их устойчивость к стрессовым условиям промышленной технологии, а также другие п казатели системы ПОЛ. Анализ кривой зависимости АОА липидов о времени показывает, что наибольшее уменьшение АОА гомогенатов печени мышей при введении им глиофена в МЦД (40 ыг/кг) приходится на 4-6 сутки (см. рис.1). После введения тлиофена АОА начинает снижаться ераэу с Х-суток, возвращение значений к Норме приходится на 10 сутки, тогда как в случае введения ад-риамицина (А.) значение АОА достигает контрольного к 14 суткам, что свидетельствует о более глубоком влиянии едриамицинг на АОА. На рис,2 приведены кривые изменения АОА после введет А. в МОД (7,7 иг/кг) не только в печени (кривая 1), но и в мс re (кривая 2), сердце (кривая 3) в течение 14 суток после шп екции. Можно отметить,-что все кривые имеют'-одинаковый экстр« мальный характер, но время достижения минимальных значений и возвращение к контрольному уровню различаются. В печени мини-• мум АОА отмечен на 4-5 сутки, в мозге - на 3 сутки, в сердце

Рас. I

оЛ

Изменение АОА липидов печени (кривая I), мозга (кривая 2), сердца (кривая 3) после введений аАриамищна (? мг/кг)

Рас. 2

а

на 3-4 сутки. Возвращение к корив происходит в сердце через б-. -8 суток, в мозге - через 8-10 суток, в печени - через 14 суток.

В результате проведенных исследований АОЛ липвдов-печени ¡дшшй после хронического введения глиофена в дозе 4 иг/кг в течение 10 дней была отмечена периодичность в изменении АОА,причем характер изменения кривой аналогичный, полученной при введении МВД. Своеобразие изменения при хроническом введении в том что экстремальное уменьшение значений АСА липвдов приходится на I сутки.

Влияние препаратов на фосФолипианый состав тканей. На рис.3,4,5 приведены кривые изменения состава фосфолишздов печени, мозга, сердца мышей после введения А. в МЛД. Относительное содержание всех фосфолшвдов (в % к общему фосфору) претерпевает существенные изменения, носящие стадийный характер с максимумами и минимумами, приходящимися на различные сроки после введения препарата. !Сак, в печени (рис.3) происходит статистически достоверное (Р^0,05) уменьшение содержания фосфатидил-холидо (ФХ) через X час,-на 3,5 сутки и фосфатидилэтаноламина (ФЭА) через I, б часов и с первых по третьи сутки. В этом же органе отмечено достоверное (Р«^0,05) увеличение содержания сфингомиедина (ОФ) через I и-б часов и с третьих по шестые сутки; суммы минорных компонентов фосфолипидов - фосфатвдидсерина (ФС) и фосфатидидинозита (ФИ) в течение б суток; суммы кардио-липина (К) и фосфатидной кислоты (Ж) с первых по третьи и на пятые сутки после введения А.

В головном мозге достоверное (Р^0,01) уменьшение отмечено для ФЭА до 8-10 суток после инъекции А-.* (рис.4); содержание остальных фосфолшвдов увеличивается; Ш --на 5--сутки, 03 - через X, 6 часов, (К+Ж) - через X сутки, (ФСИ6И) увеличено в течение всего времени. «

Дшг фосфолипидов сердца (рис.5) установлено достоверное уменьшение содержания Шк (Р * 0,05) с X часа по 5 сутки, увеличение Ш на X сутки (Р * 0}01); -Ой - через X и б часов (Р«0,01); (¿СС+ФИ) - через 6 часов ■ (Р *-0,Х) и (К-ИЙС) в интервале времени с первых по пятые сутки (Р * 0,05).

Анализ проведенных исследований фосфолипидного состава поело введения А, в МОД позволяет сделать вывод, что экстремальное уменьшение ADA сопровождается существенными изменениями в составе липвдов по сравнению с нормой, Сопоставляя изменения содержа-

90

Рис. 3, Шмекеике состав» фосфолипндо* ткани печек« после введения адриамицина (7 чг/кг) (а процентах по отношению к обшим фосфслнпн^аи). По оси вбсиисс~ »реи* воем ввелени* препарат», сут. в — ФХ. ФЗА, СФ. 6— ФЛк+ФС; К+ФК

Рис. V» Изменение состам фосфолипидов ткани мозга после звеленчя вдриамкикна (7 мг/кг) (а яроиектах по атноиьгнмю к обшмм фосфгиктшч}. о —ФХ, ФЭА, СФ, б —ФИн + ФС; К+ФК

Рис. 5

Изменение состава фосйЬолапидов ткани сердца после введения адриамищша (7 мг/кг) (в % до отношению к общим фосфолипидам) а - ОХ, ФЭА, СФ; б - ФС + ФИН, К + «К.

яя отдельных фосфолипвдов в трех различных органах можно от-зтить, что наиболее стабильным компонентом является ®Х: во гех органах, особенно в мозге и сердце шел минимальное коли-эство-достоверных отклонений от нормы. Сильная токсичность А. сердце происходит на фоне накопления кардиолишша (от первых о пятые сутки), значительно уменьшено содержание ФЭА (в 3 ра-а). Необходимо отметить существенное отклонение от контроль-ых значений для ША (в 2. раза), для (К+8К) в 1,5 раза в тка-ях печени и мозга. Степень токсического повреждения в тканях аходится в соответствии с представлением о развитии в них т-енсшзного, избыточного ПОЛ, уменьшением значений АОА. Как уже поминалось (рис.2), самое значительное уменьшение АОА в серд-,е и токсическое действие на этот орган метано объяснить m олько масштабом колебаний АОА, но и изменением знака этой венчики на отрицательный, что.свидетельствует о проокевдантноц ффекте лишздной вытяжки.

Изменение фосфолиптаного состава после введения глиофена. арактер изменений состава липидов мышей после введения в ЖЩ 'лиофена имеет свои особенности (см. рис.6а,б). При анализе.кри-юй изменения ФЭА отмечается увеличение его относительного со, ерзания в ранние сроки, возвращение к "норме" наблодается на .5 сутки после введения препарата. Повышение содержания ФЭА шедует вслед за уменьшением АОА липвдов.

Динамика изменения КЛ, St аналогична изменению ФЭА. Статистически достоверное (Р = 0,05) увеличение ЙХ наблодается на ¡ервые сутки посла инъекции препарата, Ж продолжает повшать-:я до пяти суток, к седьмым суткам значения его достигают нор-5Ы и нэ меняются существенно до 15 суток. Динамика изменения 3 характеризуется уменьшением его значений (Р^ 0,01) к I с 5-последующим увеличением к 3 с, контрольные-значения достигался к 15 суткам.

Увеличение устойчивости организма животных антиоксодантом-юнолом. Задачей исследований явилось определение режима введе-шя глиофена и ионола с цельо увеличения устойчивости организ-ia к токсическому.действии глиофена, а также подбор дозы анти-жеиданта (АО). Выбор дозы является важным, так как особенностью действия AQ-ингибиторов является их способность по-разному вли-ггь на АОА в зависимости от дозы. Введенные в малой дозе они лсладьшаются по действию с эндогенными АО, повышая АОА, в боль-

а

Изменение состава фэсфолипидов печенж после введения глиофена в МЦЦ

а - ФЭА, Ш + ФС; ФК * К

б - ФХ, СФ

ФИН + ФС

к

£—гзгр

Рис. 6а

% Р

50.

25-

ФХ

суг

Рис. 66

,шх - подавляют синтез природных АО, увеличивают скорость их , расходования (Бурлакова Е.Б., Храпова Н.Г., 1975,1981).

Глиофен вводился в дозах от ЫПД и до Ш-мг/кр-и-ионол в различных концентрациях и при разном характере введения (однократное, хроническое). Лучшее снятие токсичности приходилось на комбинацию 80 мг/кг глиофена + введение ионола в доза 30 мг/кг на первые -сутки посла инъекции препарата, при этом JI/J§q для глиофена повысилась в опытной группе до 60 ыг/кг против .

равной 45 мг/кг в контроле, а среднее время жизни увеличилась до Т» 9 с по сравнению с контрольным Т* 6,4 с.

Характер изменения фосфолипидного состава печени животных после введения ш в ЙЦД глиофена с последующим введением ионола на 1,3,5,8 с в дозе 30 мг/кг представлен на рис.?а,б. Сравнение кривых изменения относительного содержания всех фосфоли-падев (в % к общему Р) показало, что комбинирвванное введение препарата с АО дает "сглаживание" изменений в составе лкладов и приближение их значений к норме.

Таким образом, в экспериментальных условиях было показано, что повреждающее действие препаратов связано с их влиянием на АОА, с уменьшением этой величины. Введение антиоксиданта в определенных концентрациях повышает АО-статус организма, увеличивает значения среднего времени жязни - /ZT, ДЦсд, а также вызывает "выравнивание" в фосфолшидном составе, что в целом может свидетельствовать об увеличении устойчивости организма к повреждению.

После того, как была получена взаимосвязь АОА липидов с устойчивостью организма животных к повреждению в эксперименте нами были проведены исследования в промышленных условиях, где оцределядась антиокислительная активность липидов и Других показателей системы ПОЯ у первотелок алатауской порода, алатау-сно-швицких помесей в зависимости от их функционального состояния (крозности, сроков лактации). Шло показано, что большие значения АОА липидов эритроцитов крови животных коррелировали с более высокими показателями естественной резистентности , в определенной степени отражающими устойчивость особей к вредным (стрессовым) условиям промышленного комплекса.

Изучение АОА липидов эритроцитов первотелок алатауско-швицких помесей от времени лактации и кровности, взаимосвязь

13а

Определение дозы ДДзд для глиофена

О

д

Обозначения:

- контроль (без антиоксиданта)

- препарат + ионол

но

концентрация препарата

Рве, I А

Изменение фосфолшгадного "состава печени после введения глиофена в МЦЦ и ионола на 1,3,5,8 сутки

а - ФХ + ионол, СФ + ионол; б - ФЭА + ионол, К+ФК + ионол

%Р

50

г5-

С$ + ионол

ФХ + И

»»

I

•, - ■ *

■ Рис. 7а

с естественной резистентностью. Величины АОА, рассчитанные по • кривым накопления гидроперекисей в метилолеата с добавленными липвдами из эритроцитов'крови к третьему месяцу лактации у ала-тауских животных равны 500 час-мл/г (см. рис*8), у 0,5 кровных-300, у 3/4 помесных - 200,' т.е. к этому сроку лактации по мере увеличения генотипа по швицу значения АОА уменьшаются, достигая минимальных у 3/4 помесных коров. Максимальный уровень АОА имеют алатауские животные, что, по-видимому, связано с лучшими адаптационными свойствами материнской породы.

Наряду с исследованиями по липвдному обмену,именно в этот период интенсивного, народнохозяйственного использования животных, изучались показатели естественной резистентности сыворотки крови, которые представлены в табл.1. При этом установлено, что у коров адатауской породы комплементарная активность сыворотки крови на ,25% выше, чем у высококровных по швицу; с увеличением генотипа от алатауской породы до 3/4 помесных значения комплементарной активности уменьшаются. При сравнении данных по антиокиолгаеяыюй активности лпледов у первотелок с изменениями комплемента сыворотки крови можно отметитьs что они носят однонаправленный характер. Большему оначешда АОА 0,500-10^ частил/г соответствует большее значение комплемента (0 у.е.). " Величина АОА липвдов и комплемента соответственно уменьшаются у 1/2 кровных 0,300.Ю3 и 7 у.е.; у 3/4 помесных до 0,200-Ю3 и 6 у.е. Коэффициент -множественной корреляции, вычисленный-по пакету прикладных программ "Статан" на ЭВМ Jb^ií^^-^W), 'меаду значениями АОА. липвдов и комплементарной активностью у исследуемых групп животных составляет 0,98 (R. = 0,93). Величина R, указывает на наличие линейной зависимости у оберсдаемгяс характеристик, которая описывается уравнением регрессии: у= -7I7+I5&x. Из данных таОл.Х ввдно, что у алатауской породы животных она- •• чаше бактерицидной активности вше, чем в группах'помесных тавотных и составляет 96,5$, Большему значению бактерицидной активности у.алатауских животных соответствует большее среднее значение антисккслительной активности липвдов - 500 час-мл/г, у 1/2 кровных и 3/4 «ровных помесей отмечаются меньшие величины бактерицидной активности и АОА липвдов. Коэффициент множественной корреляции между обсуждаемыми величинами исследуемых групп животных составляет 0,95 (R» 0,95). Взаимосвязь меаду антиокис-

Кинетические кривые изменения АОА липидов эритроцитов алатауской породы животных - кривая I, 0,5 кровных -кривая 2; 3/4 кровных - кривая 3

т

500

ЦОр.

30 о_

200.

100,

Обозначения:

- алатауские □ - 0.5 кровные О - 3/4 кровные

$ 4г

сроки лактации

Рас. 8

лительной и бактерицидной активностями описывается в ввде урав* нения регрессии: у » -13691,2 + 147,1 х.

• •' — - ••■ - Таблица I

Показатели естественной резистентности и антиокислительной актяаности лилядов (АОА) у первотелок к 3 месяцам лактации

I группа -Показатели {алатаускне {животные, 1 Ь1 +hv I П группа -jI/2-чкровные, ] ' М ±т Ш группа -¡3/4 кровные, ] ' ' М + т-

Комплементарная активность (у.е.) . 8 7 6

Лиэощашая активность © 16,8+2,2 22,6+3,9 14,9+4,2

Бактерицэдшая активность {%) 96,5¿0,8 94,8+0,5 ' 94,8+1,15

Лиэофш'в мм (ДЗЗР) отношении , 17 16 17

АОА, час<мл/г 500 300 200

Активность шмунных комплексов (у.е.) 225 277 297

Пдвьшаиз кровносш животных по вшицу до 75% (3/4 кровные) вызвало снижение лизоцииной активности у них на 11,3 по сравнения с материнской (алатауской) породой жнвотнш:. Ошдует отмзтить, ;-ао у 1/2 кровных особей значения лизоцимной активности оказались вале, чем у алатаусшх кивохиых, При исследовании активности лизоцша сьзоротки хшвотшк всех гругш в отношении бруцеллезного штамма - Б'i, сгЛг/«л crr. 19 было показано, что показатели лизоцимной «даивноса'н близки по -значению во всех группах и составляют у алатеусккх- кивоа'нш: и 3/4 кровных по 17 ым (ДЗЗР), у 1/4 кровных и 1/2 кровных по 16 ш (.ДЗЗР), Взаимосвязь.некду активностью лизофада и AUA лшшдов в-той и другоы случае слабая. Ко-еф£афшге множественней корреляции соответственно равен £=0,05;

0,09., ,

.. • 11ри изучении содержания иммунных комплексов сыворотки крови по ыере увеличения генотипа к трем месяцам лактации наблюдается увеличение их содержания от 225 до 297 у.е. Из сравнения взаимосвязи между АОА лщщдов и содержанием иммунных комплексов следу-

.eï, чх'о их изменения носят характер обратной зависимости.Коэффициент множественной корреляции, вычисленный по прикладной программе "Статен" на вышеуказанной ЭВМ, между обсуждаемыми характеристиками исследуемых групп животных составляет 0,99. Значение &указывает на существование линейной зависимости-у обсуждаемых величин, которая описывается уравнением регрессии: у - -4,1 х + 1125.

• Большая продуктивность помесных животных в отличие от первотелок алатауской породы наблюдается на фоне понижения показателей естественной резистентности и АОА липидов. По мере увеличения кровности животных по швшу алатауские - 1/2 кровные -3/4 кровные удой молока от них к трем месяцам лактации - пик лактации - составляет соответственно 3836+142 л; 4045+149 д; 434I+I6I л; показатели бактерицидной, кощшэизнтарной• активностей,- АО А липидов в исследуемых грушах животных при этом уменьшаются. Коэффициент обратной корреляционной зависимости мааду изменениями бактерицидной активности и продуктивностью животных составляет 0,81; м&вду комплементарной активностью и продуктивностью 0,99;- АОХ липидов и "продуктивностью 0,36. Линейная связь описывается в первом случае в виде уравнения регрессии: у = 0,003 х + 1ШД7; во втором - в ввдо у = -0,004 + 22,98; в последнем - как - у = -0,57 х + 2683,9. Взаимосвязь между лизо-циыной активностью сыворотки крови и-продуктивностью существует, хотя и слабая, равная 0,33. Таким образом, показатели естественной резистентности сыворотки крови животных, отражающие в определенной степени устойчивость организма в стрессовых условиях промышленной технологии н АОА липидов, характеризующие устойчивость организма к повреждению в экспериментальных и производственных условиях меняются однонаправленно.

Некоторые, показатели ПОЛ (ОДА, активность ферментов). их взаимосвязь со временем лактации и кротостью животных. Обмен веществ, как известно, тесно связан и со свойствами ферментных систем, которые обусловлены генетической природой особей. Работы многих исследователей (Михлин Д.М., i960; Крайнев С.И. ,1970;*

^¿mîî S, , 1979; Кузнецова Т.А., 1982)- посвящены изучению активности эритроцитарной каталазы.в связи с ее основной функцией - защита клеток от избыточного количества перекисей.

При изучении кривых изменения активности катаяазы у ала-.тауских животных в зависимости от сроков лактации можно отме-'

тиль, что активность ее к 3,9 месяцам представлена более высокими показателями (см.табл.'й). Помеси к трем месяцам лактации имеют наибольшие значения, затем они понижаются к шести месяцам, достигая минашальвдх значений к девяти месяцам лактации. Пероксидазная активность крови в наших исследованиях изменяется к трем месяцам лактации незначительно. Изменения показателей активности ферментов, содержания конечных продуктов окисления, МДА по срокам лактаций и кровности представлены в табл.2,3,4.

Таблица 2

Биохимические показатели крови у первотелок к трем месяцам лактации

Дровность кивотнык

!количест-]14ЦА (нмоль) .во Щ1ВОТ-. в мл эритро-ньк, взя-,цитов крови тех в 5

¡Активность . каталаэы 1^показатель^

I. мг ^О^

¡опыт ( ) _ ,

I • I Х + Х I Х + Х

¡Активность

{цероксвдазы

|ишт.ед.)

I Х + Х

Алат&уские 1/4 1/2 3/4

10 10 10 10

. 0,43+0,03 о,за+р,о2

0,47+0,03 0,64+0,02*

3,56+0,13 4,50+0, Iй 3,78+0,06 3,59*0,02

зоа;5+з,87 3X3,53+1,3 312,27^0,74 3(М, 1+3,1

Примечание: Йдесь и в табл.3,4 звездочка - различия между опытной и контрольной группами статистически достоверны (Р^0,Х).

X - оредное'арифметическое,

X - среднеквадратичная ошибка среднего ________, _ ^иф^етического_____________

Биохимические показатели крови первотелок к шести месяцам лактации

Таблица 3

Щэовность животных

,МДА (шоль) мл ¡эритроцитов

! Х+Х

{1ка- • ииуийии^^"4

|талазы(мг Н^) [активность,

Показатель ка- !псроксидазная

Х + Х

I ТЛ'

Алатауские 1/4 Х/2 3/4

0,67+0,03 О,7850,008х 0,6810,02 0,68+0,03

з;оз+о,15 2,67+0,Х8 3,36+0,22 3,56+0,23

307,"96+8,б 332,4+4,23* 323,6+0,15 310,44+12,64

Шлица 4

Биохимические показатели крови коров к девяти месяцам лактации

Кровность \Ш {нмоль) мл ¡Показатель катагЛероксвдазная животных |эритроцитов {лазы Смг.Н^) j активность

Алатауская 0,4SW>,005 4,0740,34 311,99+9,2

1/4 0,46+0,005х 3,17+0,12й 313,07±11,4

1/2 0,БС0>»ОГ 3,92*0,33 330,84+14,33

•3/4 0,6Ь0,02* а.еэ^э.ое'5 эп,24£3,78 ■

Примечание: Звездочка - различия между опытной и контрольной группами (алат&уские животные) статистически достоверны.

Полученные данные правомерно рассматривать в свете современных представлений об адаптации животных разной помесности к условиям метаболизма, внешней среды (Ульямс Р., i960; Ковальчи-кова М.,. Ковальчик К., 1978). •.. --

Рассматривая динамику' изменений АОА липвдов крови у первотелок и конечных продуктов окисления в зависимости от хровности и сроков лактации, можно отметить, что она взаимозависима; между интенсивностью СРО и антмокислительной активностью липвдов к трем месяцам лактации наблюдается в наших исследованиях характер обратной зависимости, что демонстрирует разнонаправленность этих показателей. 1ак, по мере увеличения кровности по шипу, уменьшению АОА липадоа от 0,5«10^ до 0,2-10^ час-мл/г соответствует увеличение содержания-ОДА от 0,4253 дсг 0,6475 нмоль. Коэффициент множественной корреляции, определяемый по прикладной программе "Статал" на ЭВМ ^^itadi^Sf), между АОА липидов и содержанием конечных продуктов окисления к 3 месяцам - период интенсивного народнохозяйственного их использования, составляет 0,8; взаимозависимость описывается в виде уравнения регрессии:- у - -0,93х + 801,89. Корреляционная связь манду интенсивностью СРО липидвв и-продуктивностью высокая и описывается в ввде уравнения: у = -1,37 + 0,005 х; Я- 0,92. Величина коэффициента обратной корреляционной -зависимости к . 9 месяцам лактации меиду АОА липи-дов и ИЖ-активнши продуктами, в том числе и ОДА, составляет 0,75; взаимосвязь данных величин описывается в ввде уравнения: у - 725- 0,5 х.

Девду антиокислительной активностью лкладов к содержанием конечных продуктов окисления к 6 месяцам лактации существует зависимость, хотя и слабая (£ 0,24).

Таким образом, нами было показано, что антиокислитальная активность липадов - один из основных показателей системы ПОЛ отражает устойчивость организма к повреждению. Большие величины антиокислительной активности к 3 месяцам лактации - в период максимального народнохозяйственного, использования у алатаус-ких штатных коррелируют с большими значениями показателей естественной резистентности,но большая продуктивность высокопомесных особей отличается на фоне уменьшения естественной резистентности и антиокислитедьной активности липидов.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что уменьшение значений антиокислительной активности - основного показателя системы перекисного окисления липадов - в экспериментальных условиях коррелирует с пов-реядшцим влиянием препаратов, вводимых в максимально-переносимой дозе и хроническом введении, а в промышленных условиях-с донышаш значениями показателей естественной резистентности.

2. Повышение устойчивости организма гшвотных при совместном введении препарата с антиокевдантом-ионолом приводило к увеличении Т-среднего времени яизни и ДЦзд, а в фосфолипвд-ноа составе к "выравнивание" и приблиаенкю значений к контрольны^!.

3. Показано, что значения антиокислительной активности липвдов крови первотелок с увеличением кровности по ивицу (алатаус-киа - 1/2 кровные - 3/4 кровные) в стрессовых условиях промышленной технологии к 2-3 месяцам лактации - в срок наиболее аффективного их хозяйственного использования - уменьшаются от 500 до 100 час .мл/г. Наибольшей. АОА активностью в этот период обладают местные алатауские животные, что коррелирует с более высокими значениями показателей естественной резистентности. Большая продуктивность помесных животных характеризуется меньшими значениями показателей резистентности.

. Установлено, что к б месяцам лактации с увеличением кровно-сти по швицкой породе отмечается увеличение значений антиокислительной активности липвдов; 9 месяцев лактации характеризуется увеличением всех абсолютных значений АОА липвдов, что в определенной степени отражает особенности липвдного обмена в период стельности.

. Проведено изучение показателей системы ПОЛ (каталазы.пвро-ксидазы, содержания ТШ-активных продуктов, -ВДА) крови первотелок. У 1/4 кровных животных к 3,9 месяцам лактации наблодаются статистически достоверные различия активности каталазы, к 9 месяцам - пероксидазной активности; 3/4 помесные особи имеют достоверные различия значений каталитической активности к 9 месяцам лактации. Между значениями антиокислительной активности липвдов и интенсивностью свободнорадикального окисления к 3,9 месяцам лактации отмечается характер обратной зависимости.

. Возможность использования метода антиокислительной активности липвдов в селекционной практике наша отражение в рекомендации "Использование метода антиокислительной активности липидов в характеристике функционального состояния и естественной резистентности организма животных".

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Пальмина Н.П., Джапарова. А.К., Гаинцева В.Д., Бурлакова Е.Б. Изменение состава фосфолипидоэ и антиокислительной активности липидов органов мышей после введения адриами-цина» - Биохимия,"1968, Т.53, C.I888-I894.

2. Иванова Т.Н., 'Джапарова А.К., Воровдева 1.И. Состояние лилидного обмена и неояецифической резистентности у коров алатаускоа/ швицких пород и их помесей. Совершенствование мер борьбы с бруцеллезом и туберкулезом сельскохозяйственных животных. - Алма-Ата., 1969, с,173-177.

3. Джапарова А.К., Пальмина Н.П., Бурлакова Е.Б. Снятие ток-

оичности препарата анмокоидантом-иоколом (в печати).

*

Днапарова А.К., Иванова Т«М. Показатели оиотемы перекис-ного окисления липидов у первотелок алатауско-швицких помесей и trx потомства, - Дел.рукопись Д 2941 ВИНИТИ, И., 1990, J5 4/222/, с.т*

5. Кацова Л.Б., Иванова Т.Н., Грузинцева В.Н., Бочекалова B.C. Даадарова А.К. Биохимические показатели одаоротки крови первотелок алатауокочавицких помеоей. Селекция сельскохозяйственных нивотных на устойтавость к болезням и повышение резистентности в уаловиях промышленной технологии. - М. 1988, вып.8, 0.83-84,- ДСП.

б» Palrr.ina IJ.У., Dzchaparova А.К., Gainzeva V.D., Eurlakova Е. Adri&rnycin - induced Changes in lipid antioxidation activist and phospholipid Composition of different mouse tissues. / International confrence on roculation of free radical reactions ( biomedical aspects ) Bulgaria, Varna, 13-16 sept., 1989./