Роль маркеров перекисного окисления липидов и метаболитов нитроксидэргической системы в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита и оценке эффективности лечения с помощью аппарата "Тонзилло

Лифанова, Наталья Александровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль маркеров перекисного окисления липидов и метаболитов нитроксидэргической системы в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита и оценке эффективности лечения с помощью аппарата "Тонзилло
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Роль маркеров перекисного окисления липидов и метаболитов нитроксидэргической системы в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита и оценке эффективности лечения с помощью аппарата "Тонзилло"

На правах рукописи

Л$

ЛИФАНОВА НАТАЛЬЯ АЛЕКСАНДРОВНА

РОЛЬ МАРКЕРОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И МЕТАБОЛИТОВ НИТРОКСИДЭРГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ХРОНИЧЕСКОГО ТОНЗИЛЛИТА И ОЦЕНКЕ

ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ С ПОМОЩЬЮ АППАРАТА «ТОНЗИЛЛОР"

03.00.04-Биохимия 14.00.04-Болезниуха, горла и носа

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Челябинск-2005

Работа выполнена в Челябинском государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Челябинская государственная медицинская академия Министерства Здравоохранения Российской Федерации" на кафедрах биологической химии и оториноларингологии с курсом глазных болезней.

Научные руководители:

Доктор биологических наук,

профессор Цейликман Вадим Эдуардович

Доктор медицинских наук,

профессор Кофанов Роберт Васильевич

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук,

профессор Высокогорский Валерий Евгеньевич

Доктор медицинских наук,

профессор Григорьев Глеб Михайлович

Ведущее учреждение: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет "

Защита диссертации состоится „Д^ LUJQ^caJl 2005 г. в_

часов на заседании Диссертационного Совета Д 208.117.02 при Челябинском государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Челябинская государственная медицинская академия Министерства Здравоохранения Российской Федерации " по адресу: 454092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Челябинская государственная медицинская академия Министерства Здравоохранения Российской Федерации ".

Автореферат разослан „ ,50 ■■ ЫиЗиЛ 2005 г.

Учёный секретарь диссертационного совета: доктор медицинских наук,

профессор Л. В. Кривохижина

¿Ш)& -¿г

з жт?

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Хронический тонзиллит (ХТ) традиционно рассматривается как заболевание воспалительной природы, возникающее в ответ на очаговую инфекцию. Поэтому динамика развития воспалительного процесса в нёбных миндалинах во многом определяется бактерицидным потенциалом лейкоцитарных клеток. По-видимому, нарушения элиминации инфекционных агентов связаны с низкой фагоцитарной активностью поли-морфноядерных лейкоцитов и моноцитов-макрофагов в воспалительном очаге. Неэффективная противомикробная защита приводит не только к усилению обсеменённости нёбных миндалин микроорганизмами и к выходу микроорганизмов в кровоток, но и к переходу от компенсированной формы тонзиллита к декомпенсированной.

Известно, что осложнения, возникающие, при декомпенсированной форме тонзиллита часто затрагивают жизненно важные органы и системы. К сожалению, в оториноларингологии отсутствуют надёжные критерии для дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсирован-ных форм ХТ. Отчасти, это связано с объективными затруднениями, возникающими при попытке охарактеризовать функциональную активность фагоцитирующих клеток в воспалительном очаге. В последнее время появились новые данные, рассматривающие молекулярные продукты пере-кисного окисления липидов (ПОЛ) как косвенные признаки активации ней-трофилов в воспалительном очаге (Волчегорский И. А. идр.,2001). Подобные исследования имеют единичный характер и не затрагивают такое распространённое заболевание воспалительной природы, как ХТ. К биохимическим маркёрам воспалительного процесса также следует отнести стабильные метаболиты монооксида азота (N0). Известно, что в воспалительном очаге продукция монооксида азота связана с цитокин-зависимой активацией !ЧО-син-тазы мононуклеарными фагоцитами, инфильтрировавшими воспалительный очаг. Однако, при ХТ отсутствуют данные, касающиеся содержания нитритов/нитратов в воспалительном очаге. Таким образом, молекулярные продукты ПОЛ и метаболиты нитроксидэргической системы действительно отражают функциональный статус фагоцитирующих клеток, инфильтрирующих воспалительный очаг. Поэтому в перспективе их можно использовать в качестве маркёров для дифференциальной диагностики ХТ.

Цель исследования - доказать целесообразность использования биохимических показателей, характеризующих уровень липопероксидации и состояние нитроксидэргической системы в нёбных миндалинах для дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированной

форм хронического тонзиллита.

Достижение поставленной цели предопределило постановку и решение следующих задан:

1. Разработать усовершенствованный способ извлечения содержимого из лакун миндалин при хроническом тонзиллите.

2. Провести сравнительный анализ некоторых показателей, характеризующих уровень перекисного окисления липидов в лакунах миндалин в группах больных с компенсированным и декомпенсированным хроническим тонзиллитом.

3. Провести сравнительный анализ концентрации стабильных метаболитов оксида азота (N0) в лакунах миндалин в группах больных с компенсированным и декомпенсированным хроническим тонзиллитом

4. Разработать на основании полученных показателей активности перекисного окисления липидов и концентрации продуктов метаболизма оксида азота алгоритм для дифференциальной диагностики компенсированного и декомпенсированного хронического тонзиллита

5. Провести сравнительный анализ предложенных клинико-лабора-торных критериев для определения эффективности лечения на аппарате "Тонзиллор".

Научная новизна. Впервые для объективизации дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита предложен комплекс клинико-лабораторных критериев, характеризующих уровень ПОЛ, содержание стабильных метаболитов N0 и количество молочной кислоты непосредственно в лакунах нёбных миндалин. Для компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита определён диапазон значений индекса цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ в воспалительном очаге, что позволяет с высокой степенью точности проводить дифференциальную диагностику заболевания.

Показано, что высокая эффективность использования аппарата "Тонзиллор" в лечении хронического тонзиллита обусловлена его уникальными возможностями, позволяющими осуществить локальное введение в воспалительный очаг противовоспалительных медикаментов типа гидрокортизона.

Практическая значимость. Предложенную методику забора материала из лакун миндалин целесообразно использовать для более точного определения показателей бактериальной обсемененности, клеточного состава отделяемого из миндалин, а также активности перекисного окисления липидов и концентрации продуктов метаболизма оксида азота (нитритов и нитратов).

Использование аппарата "Тонзиллор" позволяет добиться более надежной санации миндалин при хроническом тонзиллите и, соответственно, снижения риска развития осложнений, что приведет к сокращению числа дней нетрудоспособности у больных.

Основные положения, выносимые на защиту:

1 При хроническом тонзиллите усиление лейкоцитарной инфильтрации сопровождается увеличением содержания молекулярных продуктов ПОЛ, и возрастанием концентрации стабильных метаболитов оксида азота в лакунах нёбных миндалин.

2. Снижение коэффициента цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ при декомпенсированной форме хронического тонзиллита отражает низкую эффективность бактерицидной функции фагоцитирующих клеток в лакунах нёбных миндалин.

3. Осуществляемый с помощью аппарата "Тонзиллор" фонофорез гидрокортизона позволяет снизить уровень обсеменёгогости бактериальной микрофлоры, уменьшить лейкоцитарную инфильтрацию, нормализовать уровень ПОЛ и провести коррекцию кардиологических осложнений.

4. Использование усовершенствованной методики забора материала из миндалин изолированно от ротовой полости позволяет добиться точных результатов в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита.

Внедрение работы. Результаты работы внедрены в практику работы поликлинического отделения городской больницы №15 г. Челябинска и отделения оториноларингологии Челябинской областной клинической больницы.

Материалы диссертации используются в учебном процессе на кафедре оториноларингологии Челябинской государственной медицинской академии.

Вклад автора. Основная часть исследований по получению материала из лакун нёбных миндалин с помощью аппарата «Тонзиллор» и биохимическому анализу содержимого нёбных миндалин и сыворотки крови выполнена автором самостоятельно. Анализ содержания молекулярных продуктов ПОЛ проводился в биохимической лаборатории УГМДДО.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 80-летию академика И.Б. Солдагова (Самара, май 2003 года) - 2 доклада; научно-практической конференции, посвященной 64-летию Челябинской облает-

ной клинической больницы "Актуальные проблемы практической медицины" (Челябинск, октябрь 2003 года); врачебной конференции Челябинской государственной медицинской академии "Современные методы лабораторной диагностики хронического тонзиллита" (Челябинск, ноябрь 2003 года); на заседании научно-практического общества отоларингологов "Хронический тонзиллит в патогенезе кондукгивной и смешанной тугоухости" (Челябинск, декабрь 2003 года). Материалы диссертации доложены на заседании научно-практического общества оториноларингологов 28 октября 2004 г.

Публикация. По материалам диссертации опубликовано 9 статей, из них - 5 в центральной печати. Получены решения о выдаче патентов на изобретения № 2003123155/14(024473) от 22.07.2003 г., № 2003137864/15/040434 от26.12.2003 г.

Объём и структура диссертации. Работа изложена на 133 страницах машинописного текста, иллюстрирована 7 рисунками и 21 таблицей, состоит из введения, четырёх глав, выводов и практических рекомендаций и списка использованной литературы, включающего 201 источник, из которых 148 отечественных и 53 иностранных.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования.

Отбор больных для проведения настоящего исследования проводился из пациентов, проходивших лечение в поликлиническом отделении городской клинической больницы №15 в период с 2002 по 2004 год.

В исследование были включены 326 больных с подтвержденным диагнозом хронического тонзиллита. Диагноз выставлялся на основании жалоб, анамнеза, отоларингологического осмотра и дополнительных обследований, включающих анализ крови и мочи.

В ходе исследования больные были распределены на две группы. В первую группу вошли больные с компенсированной формой хронического тонзиллита, её численность составила 207 человек Во вторую группу вошли 119 больных с декомпенсированной формой хронического тонзиллита.

В зависимости от использованных методов исследования больные в каждой группе были разделены на 3 подгруппы. В первой подгруппе проводились клинико-лабораторные обследования, включающие бактериологический цитологический и биохимический анализ содержимого лакун нёбных миндалин и сыворотки крови. Во второй подгруппе проводились электрокардиографические обследования, а в третьей — ритмокардиогра-фические.

Для изучения характерного для компенсированной формы состояния нитроксидэргической системы и уровня липопероксидации крови в качестве контроля использовали кровь от здоровых доноров. Все измененйя, характерные для декомпенсированной формы заболевания сопоставлялись с аналогичными показателями, выявленными у лиц с компенсированной формой.

Средний возраст больных в обеих группах составил 30,41±1,74. В 1 группе он составил 29,89±2,17, а во 2 группе 31,57±1,61 и существенно не различался. Необходимо отметить, что основное количество пациентов составляют относительно молодые и трудоспособные люди.

Для выделения содержимого воспалительного очага из нёбных миндалин применяли разработанную нами методику ("Способ оценки эффективности консервативного лечения хронического тонзиллита " Патент № 2003123155 от 22.07.2003 г.).

Содержимое лакун нёбных миндалин использовалось для приготовления мазков-отпечатков, в которых определялись представители патогенной микрофлоры, а также нейтрофилы, моноциты, макрофаги, и лимфоциты. Кроме того, в содержимом лакун нёбных миндалин и в крови определяли содержание молекулярных продуктов ПОЛ, уровень нитритов и нитратов, содержание лакгата, а также активность лактата и лактатдегидроге-назы.

Биохимические методы исследования.

Все лабораторные анализы были проведены на базе биохимического отдела Центральной научно-исследовательской лаборатории Уральской государственной медицинской академии дополнительного образования (заведующая лабораторией к.м.н. Н.С.Орлова).

Определение содержания нитритов/нитратов. Содержание нитритов/нитратов в крови и в содержимом лакун миндалин определяли по методу Н. Л. Емченко. Предварительно проводили осаждение белков сульфатом цинка. После чего осуществляли реакцию диазотирования сульфаниловой кислоты с последующим соединением соли диазония с {3-нафтиламином и образованием азокрасителя ¡фасного цвета. На фотоэлектрокалориметре при длине волны 540 нм определялась интенсивность окраски.

Определение содержания молекулярных продуктов ПОЛ. Определение концентрации малонового диальдегида (МДА) в крови и содержимом лакун миндалин проводилась по методу К. 5аф (1968), основанному на образовании комплексного соединения МДА с 2-тиобарбитуровой кислотой. Интенсивность окраски образующегося триметинового комплекса определялась спекгрофотометрически на СФ-46 при длине волны 532 нм.

Содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали спектрофотометрически в липидном экстракте исследуемых тканей по методике Волчегорского И. А. и др. (1989)

Результаты выражали в виде так называемого индекса окисления, для чего рассчитывали соотношение Е232/Е220 и Е278/Е220 (И.А.Волчегорский и др.,1989).Кроме того, для определения уровня Шиффовых оснований использовали, предложенное Е И. Львовской соотношение Е400/Еио (Е.И.Львовская и др. 1991).

Методика определения содержания лактата и лактатдегидрогеназы в сыворотке крови и в содержимом лакун нёбных миндалин.

Уровень молочной кислоты в крови определяли по методу Storm( 1949), который основан на превращении лактата в ацетальдегид, с последующим колориметрированием окрашенного продукта взаимодействия ацетальде-гида с параоксидифенилом.

Активность ЛДГ оценивалась на основе реакции превращения лактата в пируват с использованием реактивов фирмы "Human" (Германия) по модифицированному методу, рекомендованному Скандинавским Комитетом по ферментам. Для определения концентрации лактата и активности ЛДГ использовали анализатор ФП-901М (Финляндия).

Методика определения активности каталазы в содержимом лакун нёбных миндалин.

Активность каталазы в содержимом лакун нёбных миндалин определяли по методике М.А. Королюк и соавт. (1988).

Оценка биохимических критериев проводилась до и после проведённого лечения. Для определения активности каталазы также использовали анализатор ФП-901М (Финляндия).

Функциональные методы исследования. В данном исследовании использовались электрокардиографический и ритмокардиогорафический методы исследования. Изменения миокарда определялись по характерным изменениям ЭКГ, регистрация, которой осуществлялось в стандартных отведениях (I, II и III стандартных отведениях, а так же аVI., aVR и V1 - V 6). Оценивались интервалы PQ, QRS, R-R и ST. Анализ ЭКГ проводился врачом - функциональным диагностом

Ритмокардиография проводилась в лаборатории нарушений ритма под руководством проф. В.А.Миронова. При этом использовался компьютерный анализ данных.

Данные обрабатывались общепринятыми методами вариац ионной статистики и выражались в виде среднеарифметической (М) и её стандар-

тной ошибки (ш). О достоверности различий средних величин судили по критерию Стьюдента (t). Дополнительно применяли критерии непараметрической статистики: Вилкоксона-Манна-Уитни (U) и Вальда-Вольфовитца(АУ;у), точный односторонний критерий Фишера (ТКФ). Достоверность различий у одних и тех же лиц до и после лечения оценивали с помощью критерия Вил-коксона. Все математические расчёты выполнены с помощью программы Statistica for Windows (StatSoft Inc.), версия на персональном компьютере Celeron-1300 Mhz. 5.1.

Результаты собственных исследований и их обсуждение

В ходе исследований установлено, что в случае декомпенсированно-го, как и в случае компенсированного тонзиллита в лакунах нёбных миндалин выявляются гемолитический стрептококк и различные патогенные стафилококки, а также спиралевидные бактерии Венсана. Следует отметить (рисунок 1), что при декомпенсированной форме тонзиллита степень обсеменённости патогенной микрофлоры несколько больше, чем при компенсированной (р=0,0433, точный односторонний критерий Фишера). Данные таблицы 1 свидетельствуют об увеличении в содержимом нёбных миндалин при декомпенсированной форме тонзиллита относительного содержания нейтрофильных гранулоцитов при одновременном снижении уровня

Бактериальная обсемевенность лакун нёбных миндалин

Рис. №1. Наличие патогенной микрофлоры с содержимым лакун нёбных мивдалин у больных с компенсированной и декомпенсированной формой ХТ. Примечания: вышеуказанные цифры обозначают число больных с выявленной патогенной микрофлорой. Достоверность различий определялось с помощью точного одностороннего критерия Фишера. Темным цветом обозначена деюм-пенсированная форма, светлым - компенсированная.

Таблица 1

Клеточный состав воспалительного очага при хроническом тонзиллите

Группы больных НЕЙТРОФИЛЫ (%цитограммы) МАКРОФАГИ (% цитограммы) ЛИМФОЦИТЫ (% цитограммы)

Компенсированная форма хронического тонзиллита п=56 52,7±2,59 21,8±3,01 6,6±0,

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита п=44 68,9±9,35 Р=0.058 МЫ' 8,5±1,68 Р=0,017Ш 3,8±0,86 Р=0,002Ш

Примечание: здесь и в других таблицах \¥\у-критерий Вальда-Вольфовитца и-критерий Вилкоксона-Манна-Уитни

моноцитов Вместе с тем, в воспалительном очаге в 2 раза уменьшено относительное содержание лимфоцитов. Возрастание содержания нейтрофилов, безусловно, связано с их поступлением в ткань миндалин из сосудистого русла. Напротив, снижение представительства лимфоидных клеток в лакунах миндалин может отражать угнетение пролиферативные процессы в пределах криптолимфона.

Таким образом, несмотря на увеличение содержания нейтрофильных гранулоцитов, при декомпенсированной форме хронического тонзиллита наблюдалось усиление обсеменённости лакун миндалин различными представителями патогенной микрофлоры. Подобные результаты свидетельствуют скорее о неэффективности бактерицидной функции нейтрофилов. Как уже ранее упоминалось, молекулярные продукты ПОЛ принято считать косвенными характеристиками функционального статуса нейтрофилов (И. А.

Таблица 2

Содержание показателей ПОЛ в содержимом лакун миндалин у больных с компенсированной и декомпенсированной формами хронического тонзиллита (до лечения)

Группы больных Диеновые коньюгаты (Е232/Е220) Кетодиены и сопряжённые триены (Еяв/Егго) Основания Шиффа (Е-ю/Егго)

Компенсированная форма хронического тонзиллита п=56 0,291±0,006 0,204*0,0041 0,0432±0,00620

Декомпенсированная форма хронического тонзилелита п=44 0,388±0,008 Р=0,0312и 0,248^0,0063 Р=0,0242и 0,045±0,0011 Р=0,01521/

Волчегорский и др. 2000). Поэтому, с ростом содержания нейтрофилов в воспалительном очаге, правомерно ожидать усиление ПОЛ. Установлено, что одновременно с увеличением уровня малонового диальдегида у больных с декомпенсированным тонзиллитом наблюдалось увеличение содержания как диеновых конъюгатов, так и кетодиенов и сопряжённых триенов. Так же было повышено содержание Шиффовых оснований. По-видимому, происходит интенсификация ПОЛ в воспалительном очаге с увеличением содержания нейтрофилов в воспалительном очаге. Так, наблюдалась прямая корреляционная связь между содержанием малонового диальдегида и уровнем нейтрофилов в воспалительном очаге (гр=0,73 р<0,05). Аналогичная зависимость отмечена для диеновых конъюгатов (греагаоп=0,69 р<0,05). Напротив, д ля Шиффовых оснований и содержанием нейтрофилов в очаге отмечена отрицательная корреляционная связь (г = -0,9 р<0,05).. В связи с этим, необходимо отметить, что в условиях индуцированного бактериальной инфекцией воспалительного процесса особо значима их бактерицидная функция, определяемая фагоцитарной способностью и генерируемыми цитотоксич-ными факторами. Стоит обратить внимание на различный уровень токсичности диеновых конъюгатов, кетодиенов и Шиффовых оснований. В частности, токсичность кетодиенов и Шиффовых оснований намного выше, чем у диеновых конъюгатов. Поэтому мы предложили дополнительный коэффициент, обозначаемый как индекс цитотоксично ста молекулярных продуктов ПОЛ(ИЦТ),

КтСт+ШО

ИЦТ= -,

ДК

где ДК - концентрация диеновых конъюгатов;

КтСт - концентрация кетодиенов и сопряжённых триенов;

ШО - концентрация Шиффовых оснований.

При значениях 0,808 и выше диагностируют компенсированную форму хронического тонзиллита, а при значениях ниже 0,808 диагностируют деком-пенсированную форму хронического тонзиллита (патент№2003137864/ 15(040434) от 26.12.2003 г.). В связи с этим необходимо отметить определённое противоречие, связанное с увеличением доли низкотоксичных диеновых конъюгатов среди молекулярных продуктов ПОЛ у больных с декомпенсиро-ванной формой тонзиллита.

У больных с более отчётливым характером воспалительных патологии темпы накопления токсичных продуктов липопероксидации снижены. При

этом у них отмечено более высокое содержание нейтрофильных гранулоци-тов в воспалительном очаге. Данное противоречие может быть объяснено на основе концепции В.Н.Галанкина (1984) о ключевой роли нейтрофильных гранулоцигов с низкой биоцидной активностью в развитии воспалительной патологии. В соответствии с упомянутыми представлениями, причина развития воспалительного инфильтрата - снижение функциональной активности фагоцитирующих клеток, проявляющееся в ограничении респираторного взрыва и фагоцитарной способности, что снижает эффективность элиминации чужеродного фактора. Будучи ограниченными в своих функциональных возможностях такие нейтрофилы экстенсивным путём, за счёт увеличения своей численности пытаются устранить инфекционный агент. Применительно к данной ситуации - при декомпенсированном тонзиллите возрастание доли диеновых конъюгатов среди продуктов ПОЛ может означать уменьшение цитотоксичности нейтрофилов, что и отягощает динамику развития заболевания.

Таблица 3

Содержание нитритов и нитратов в содержимом лакун миндалин у больных с компенсированной и декомпенсированной формами хронического тонзиллита

Группы больных Содержание МО"2 мкмоль/л (М±т) Содержание N0*3 мкмоль/л (М±т)

Компенсированная форма хронического тонзиллита п=56 0,17±0,004 0,29±0,008

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита п=44 0,19±0,006 Р=0,0342и 0,32±0,016 Р=0,0412и

Из представленных в таблице 3 результатов видно, что при этом уровень продуктов N0 выше в группе с декомпенсированной формой. По-видимому, исходное снижение цитотоксического потенциала фагоцитирующих клеток является пусковым сигналом для активации N0 - синтазы лейкоцитарными клетками воспалительного очага. Как уже ранее упоминалось, про-воспалительные цитокины вызывают экспрессию гена индуцибельной N0 -синтазы, полиморфноядерных лейкоцитов и мононуклеарных фагоцитов. Вероятно, при доминировании в воспалительном очаге профессиональных фагоцитов с низкой функциональной активностью, усиление продукции N0 является компенсаторной реакцией, направленной на усиление биоцидного

потенциала, так как это создаёт дополнительные условия для продукции пе-роксинитрита.

Таким образом, в результате наших исследований установлено, что использование показателей ПОЛ, а также концентрации продуктов метаболизма оксида азота, позволяют довольно точно проводить дифференциальную клинико-лабораторную диагностику между компенсированным и декомпенсированным хроническим тонзиллитом с учетом клинических данных.

Эти же биохимические показатели целесообразно определять не только в воспалительном очаге, но и в крови, так как с их помощью можно представить возможные механизмы развития осложнений при декомпен-сированной форме тонзиллита.

Известно, что уклоняющиеся из воспалительного очага в кровоток бактериотоксины могут обладать кардиотксическим действием путём индукции оксидативнош стресса, сопровождающегося усилением ПОЛ и повышением уровня перокси нитрита. Данные, представленные в таблицах 4 и 5 свидетельствуют, что даже при компенсированной форме ХТ наблюдалось увеличение содержания циркулирующих молекулярных продуктов ПОЛ и повышение содержания нитритов и нитратов. При декомпенсированой форме, по сравнению с компенсированной, отмечено повышение содержание изопропанол-растворимых диеновых конъюгатов при одновременном приросте содержания стабильных метаболитов N0. Кроме того, наблюдалось увеличение уровня циркулирующего лактата, что свидетельствует о наличии более выраженной гипоксии для декомпенсированной формы ХТ. По-видимому, лица с подобными изменениями вышеприведённых биохимических показателей составляют определённую группу риска для развития кардиологических расстройств.

Таблица4

Содержание молекулярных продуктов ПОЛ крови в изопропанолыюй фракции

Группы больных ДК (Е232/Е220) СКТ (Е278/Е220) шо (Е400/Е220)

Контроль п=57 0,697±0,057 0,175±0,03 0,03 5±0,007

Компенсированная форма хронического тонзиллита п=56 0,86±0,05 0,22±0,02 0,10±0,002

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита п=44 1,17±0,089 Р=0,0449и 0,30±0,11 0,104±0,01

Таблица5

Содержание нитритов и нитратов в крови у больных с хроническим

тонзиллитом

Группы больных Содержание N0 2 мкмоль/л Содержание N0 *з мкмоль/л

Контроль 11=57 0,11±0,002 0,27±0,004

Компенсированная форма хронического тонзиллита п=56 0,37±0,006 0,45±0,009

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита п=44 0,50±0,004 Р=0,0068и 0,62±0,01 Р=0,0152и

В то же время, по данным ЭКГ прослеживались определённые различия между компенсированной и декомпенсированной формами. Установлено, что при декомпенсированной форме по сравнению с компенсированной увеличивается частота встречаемости синусовой тахикардии (р=0,0446 ТКф), гипертрофии левого желудочка миокарда (р=0,005 ТКФ), дистрофических изменений в миокарде (р=0,0291 ТКФ).

Тахикардия

□т ■ 2

3,3

Рис. 2. Наличие тахикардии у больных с компенсированной и декомпенсированной формой ХТ. Примечания: Здесь цифры обозначают число больных с выявленной тахикардией. Достоверность различий определялось с помощью точного одностороннего критерия Фишера. Темным цветом обозначена декомпенсиро-ванная форма, светлым - компенсированная.

Гипертрофия левого желудочка

11,6 _

и2

1,3

Рис. 3. Наличие гипертрофии левого желудочка у больных с компенсированной и декомпенсированной формой ХТ.

Примечания: Здесь цифры обозначают число больных с выявленной патогенной микрофлорой Достоверность различий определялось с помощью точного одностороннего критерия Фишера. Темным цветом обозначена деком-пенсированная форма, светлым - компенсированная

Таким образом, основными при обеих формах тонзиллита являются изменения миокарда 1 а степени в различных отделах сердца, элементы нарушения процессов метаболизма и нарушения внутрижелудочковой проводимости. С увеличением длительности заболевания у лиц, страдающих хроническим декомпенсированным тонзиллитом, превалируют изменения на ЭКГ в виде тахикардии и повышения нагрузки на левый желудочек. Анализ рит-мокардиограммы показывает, что признаки нормосистолии чаще имею место у больных компенсированной формой хронического тонзиллита (90 % случаев р=0,0013 ТКФ). Напротив, нарушения ритма в виде тахикардии (р=0,0024 ТКФ). и экстрасистолии (р=0,0315 ТКФ) более выражены при декомпенсированной форме (р=^0,0024 ТКФ)

Оценка эффективности лечения больных с декомпенсированной и Г компенсированной формами ХТ с использованием аппарата "ТОНЗИЛЛОР"

Несмотря на наличие большого количества различных методов лечения, в последнее время всё чаще внимание отоларингологов обращают на себя методы фонофореза лекарственных средств непосредственно в ткань миндалин, а так же ультразвуковой кавитации на аппарате "ТонЗиллор".

В наших исследованиях с помощью фонофореза непосредственно в ткани нёбных миндалин вводили тюкортикоидный препарате антивоспали-

Декомпенсированная форма Баетериальная обсемененность лакун до и после лечения

■ 1

□ 2

Рис. 5. Наличие бактериальной обсеменённости у больных декомпенсированной формой ХТ до и после лечения. Примечания: Здесь цифры обозначают число больных с выявленной патогенной микрофлорой. Достоверность различий определялось с помощью точного одностороннего критерия Фишера. Темным цветом обозначена обсе-менённость до лечения, светлым - после.

тельным действием- гидрокортизон. Важно отметить, что влияние гидрокортизона на функциональную активность нейтрофилов неоднозначно.

В условиях in vivo он обладал способностью стимулировать фагоцитарную активность нейтрофилов при одновременном снижении их микро-бицидного потенциала по данным НСТ теста (Шилов Ю.И. и др.2003).

Как показали наши исследования, промывание лакун с использованием низкочастотного ультразвука в режиме кавитации с применением перекиси водорода и фонофореза гидрокортизона привело к снижению обсеменённости миндалин патогенной микрофлорой как при компенсированной (р=0,0310ТКФ), так и при декомпесированной форме (р=0,0431ТКФ). Как видно из таблицы 6, применяемое лечение имело отчётливый антивоспалительный эффект независимо от наличия или отсутствия декомпенсации. Так, в случае компенсированной формы хронического тонзиллита в смывах из нёб- Л

ных миндалин отмечено снижение содержания нейтрофилов и лимфоцитов. Таким образом, по данным цитограммы содержимого лакун нёбных миндалин можно прийти к заключению о высокой эффективности лечения ХТ путём фонофореза гидрокортизона. Этот факт легко объясним, если принять во внимание возможность адресной доставки в воспалительный очаг глюкокор-тикоидного препарата, обладающего антивоспалительным действием. Оста-

Компенсированная форма Бактериальная обсемененность лакун до и после лечения

Рис. 6. Наличие бактериальной обсеменённости у больных с компенсированной формой ХТ до и после лечения.

Примечания: Здесь цифры обозначают число больных с выявленной патогенной микрофлорой. Достоверность различий определялось с помощью точного одностороннего критерия Фишера. Темным цветом обозначена обсе-менённость до лечения, светлым - после.

ётся неизвестным, в какой степени молекулярные продукты ПОЛ и показатели нитроксидэргической системы в тканях миндалин проявят чувствительность к данному варианту противоспалительной терапии? Если они действи-

Таблиця 6

Клеточный состав смывов из лакун нёбных миндалин у больных с хроническим тонзиллитом (до и после лечения)

Группы больных НЕЙТРОФИЛЫ (% цитограммы) МАКРОФАГИ (%цитограмм) ЛИМФОЦИТЫ (% цитограммы)

Компенсированная форма хронического тонзиллита (до лечения) п=56 52,7±2,59 21,8±3,01 6,6±0,4

Компенсированная форма хронического тонзиллита (после лечения) п=56 38,1±2,76 Р=0,0166 23,3±3,46 3,8±0,66 Р=0,0078

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита (до лечения) п=44 68,9±9,35 8,5±1,68 3,8±0,86

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита (после лечения) 48,9±5 Р=Ю,0468 16,9±3,72 3,5±1,24

тельно являются маркёрами функциональной активности фагоцитирующих клеток, то правомерно ожидать синхронности и однонаправленности изменений данных биохимических показателей с показателями цитограммы Данные таблицы 7 свидетельствуют о резком снижении содержания всех категорий молекулярных продуктов ПОЛ в лакунах нёбных миндалин у больных как компенсированной, так и декомпенсированной формы ХТ. Аналогичная тенденция наблюдалась в отношении содержания нитритов/нитратов в лакунах нёбных миндалин (таблица 8).

Таблица7

Содержание показателей, характеризующих интенсивность ПОЛ в лакунах миндалин у больных с компенсированной и декомпенсированной формами хронического тонзиллита до и после лечения (все показатели приведены в

единицах экстинкции)

Группы больных ДК (Е232/220) СКТ (Е278/220) ШО (Е400/220)

Компенсированная форма хронического тонзиллита (п = 56) 0.291 ±0.006 0,187±0,003 Р=0,0038 0,204±0,004 0,043±0,006

0,083±0,002 Р=0,0065 0,019±0,001 Р=0,0043

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита (п= 44) 0.388±0.008 0,216±0,006 Р=0,0038 0,248±0,006 0,096±0,005 Р=0,0077 0,045±0.001 0,023±0,001 Р=0,0028

Примечание: СКТ - концентрация сопряженных кеютриенов, ШО - концентрация Шиффовых оснований, ДК - концентрация диеновых шнъюгатов.

Таблица8

Содержание метаболитов NO в лакунах миндалин у бальных с компенсированной и декомпенсированной формами хронического тонзиллита до и после лечения (М±ш)

Группы больных Концент] рация NO2 Концент] >ация NO3

до лечения, мкмоль/л после лечения, мкмоль/л до лечения, мкмоль/л после лечения, мкмоль/л

Компенсированная форма хронического тонзиллита (п = 56) 0,175±0,004 0,111±0,016 Р=0,0017 0,293±0,008 0,12±0,002 Р=0,0068

Декомпенсированная форма хронического тонзиллита (п = 44) 0,195±0,006 0,11±0,005 Р=0,0044 0.329*0,016 0,14±0,003 Р=0,0029

Как видно из табл. 7 и 8 фонофорез гидрокортизона сопровождался снижением уровня липопероксидации и содержания стабильных метаболитов N0 у больных с компенсированной и декомпенсированной формой тонзиллита. По-видимому, наблюдаемые изменения в крови имеют вторичный характер и отражают события, связанные с минимизацией системных нарушений в результате элиминации из воспалительного очага патогенной микрофлоры. Вместе с тем наблюдаемые изменения могут быть связаны с непосредственным влиянием глюкокортикоидов на лейкоцитарные клетки крови, а также на липидсинтезирующую функцию печени. В связи с этим необходимо отметить, что у здоровых лиц индекс массы тела и содержание циркулирующих продуктов ПОЛ являются совокупностью взаимосвязанных маркёров состояния нейтрофильных гранулоцитов. Между тем, гидрокортизон обладает способностью угнетать бактерицидную функцию не только у нейт-рофилов воспалительного очага, но и у нейтрофилов крови. Следует отметить, что после фонофореза уровень нитритов и нитратов уменьшался параллельно снижению уровня лактата. Это может означать, что в отличие от воспалительного очага, к росту содержания нитритов/нитратов, помимо иду-цибельной ЫО-синтазы причастна эндотелиальная изоформа фермента. Вероятно, прирост содержания циркулирующих нитритов и нитратов обусловлен способностью накапливаемых при гипоксии метаболитов усиливать активность эндотелиальной К'О-синтазы. Следовательно, с минимизацией ги-поксических расстройств может быть связано снижение уровня стабильных метаболитов оксида азота в крови.

Одновременно с нормализацией содержания циркулирующих молекулярных продуктов ПОЛ и уровня нитритов/нитратов у больных с декомпенсированной формой ХТ наблюдалось купирование миокардиальных расстройств В частности, при декомпенсированной форме наблюдалось снижение ЧСС.

Таким образом, молекулярные продукты ПОЛ наряду с метаболитами нитроксидэргических систем адекватно отражают изменения, происходящие в самом воспалительном очаге при ХТ. Это позволяет использовать их для дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированной форм заболевания. Синхронность нормализации значений этих биохимических показателей с "затуханием" обострения ХТ и с нивелированием кардиальных осложнений свидетельствует о их высокой чувствительности по отношению к процессам, проходящим в лейкоцитарном инфильтрате при данной форме патологии.

ВЫВОДЫ

1. К основным метаболическим маркёрам хронического тонзиллита относятся: усиление липопероксидации, увеличение уровня нитритов/нитратов и повышение концентрации молочной кислоты в лакунах нёбных миндалин и в сыворотке крови.

2. Для декомпенсированной формы хронического тонзиллита по сравнению с компенсированной формой характерен более высокий уровень диеновых кош.югатов, кетодиенов и сопряжённых триенов, а также Шиффовых оснований в лакунах нёбных миндалин.

3. При декомпенсированной форме хронического тонзиллита в лакунах нёбных миндалин уменьшается доля молекулярных продуктов ПОЛ с высоким уровнем цитотоксичности на фоне увеличения обсеменённости лакун миндалин патогенными микроорганизмами и усилением нейтрофиль-ной инфильтрации при одновременном снижении содержания макрофагов и лимфоцитов.

4 Для дифференциальной диагностики декомпенсированной и компенсированной форм хронического тонзиллита целесообразно использовать индекс цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ в лакунах нёбных миндалин, который определяется как соотношение между суммарным содержанием кетодинев с сопряжёнными триенами и Шиффовых оснований к диеновым конъюгатам.

5.Увеличению уровня циркулирующих молекулярных продуктов ПОЛ, гиперлактатемии и приросту содержания стабильных продуктов метаболизма оксида азота в сыворотке крови при декомпенсированной форме хронического тонзиллита сопутствовало появление кардиологических осложнений, выявляемых с помощью электрокардиографии и ритмокардиогра-фии.

6. Локальное введение гидрокортизона в ткани нёбных миндалин привело к снижению выраженности инфекционно-аллергического процесса при одновременном уменьшении выраженности кардиологических осложнений. Для достижения этих терапевтических эффектов целесообразно использовать аппарат "Тонзиллор".

7. Антивоспалительное действие гидрокортизона сопровождалось снижением содержания молекулярных продуктов ПОЛ и концентрации нитритов и нитратов в лакунах миндалин и в циркулирующей крови, что делает эти биохимические показатели перспективными для мониторинга эффективности лечения хронического тонзиллита.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕ1ЩАЦИИ

1 Для дифференциальной диагностики хронического тонзиллита целесообразно использовать индекс цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ непосредственно в содержимом лакун миндалин. Такой подход превосходит по информативности исследование липопероксидации в крови.

2. Для исследования содержимого лакун миндалин целесообразно использовать аппарат «Тонзиллор».

З .Фонофорез гидрокортизона непосредственно в ткани миндалин является эффективным подходом для лечения хронического тонзиллита

Список печатных работ, опубликованных по теме диссертации

1 Лифанова H.A. «Тонзиллор » и динамика ЭКГ-показателей при лечении хронического тонзиллита /Н А. Лифанова //Научно-практический журнал «Иероглиф».-1999.-№7.-С.29-31.

2. Лифанова H.A. Хронический тонзиллит и связанные с ним изменения со стороны нервной системы /Н.А.Лифанова //Научно-практический журнал «Иероглиф».-2000.-№14.-С.16-19.

3. Лифанова H.A.Сочетание хронического тонзиллита и хронического фарингита //Научно-практический журнал «Иероглиф».-2000.-№14,-С.27-28.

4. Лифанова H.A. Неврологические аспекты хронического тонзиллита /Н.А.Лифанова, Р.В.Кофанов // Проблемы реабилитации в оториноларингологии. Труды Всероссийской конференции, с международным участием. -Самара.-2003.-С.370-372.

5. Лифанова Н.А.Хронический тонзиллит в патогенезе кондуктив-ной и смешанной тугоухости /Н.А.Лифанова, Р.В.Кофанов // Проблемы реабилитации в оториноларингологии. Труды Всероссийской конференции, с международным участием. - Самара.-2003.-С.372-374.

6. Лифанова H.A. Ритмокардиография и электрокардиография в диагностике хронического тонзиллита/Н. А. Лифанова //Сборник тезисов научно-практической конференции, посвященные 64-летию Челябинской областной клинической больницы «Актуальные проблемы практической медицины».-Челябинск.-2003С. 57-60.

7. Лифанова H.A. Влияние терапии аппаратом «Тонзиллор» на динамику показателей электрокардиограммы /Н.А.Лифанова //Бюллетень НЦСХХ им. А.М.Бакулева.-2004.-Т5.-№5.- С.326

8. Лифанова H.A. Влияние хронического тонзиллита на некоторые показатели электрокардиограммы /Н.А.Лифанова //Бюллетень НЦСХХ им. А.М.Бакулева.-2004.-Т5.-№5,- С.325

9. Лифанова H.A. Перекисное окисление липидов как показатель интенсивности воспаления при хроническом тонзиллите /H.A. Лифанова //Российская оториноларингология.-2005.-№2.-С. 62-68.

Получены решения о выдаче патентов на изобретения:

1. «Способ оценки эффективности консервативного лечения хронического тонзиллита» от 22.07.2003г. № 2003123155/14(024473).

2. «Способ оценки состояния миндалин при различных формах хронического тонзиллита» от26.12,2003г. № 2003137864/15(040434).

ЛИФАНОВА НАТАЛЬЯ АЛЕКСАНДРОВНА

РОЛЬ МАРКЕРОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И МЕТАБОЛИТОВ НИТРОКСИДЭРГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ХРОНИЧЕСКОГО ТОНЗИЛЛИТА И ОЦЕНКЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ С ПОМОЩЬЮ АППАРАТА «ТОНЗИЛЛОР"

03.00.04-Биохимия 14.00.04-Болезниуха, горла и носа

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Отпечатано в издательстве «Челябинская государственная медицинская

академия». Лицензия № 01906. Подписано к печати 23.05.05 г. Объем 1 ал. Формат 64x84. Гарнитура «Times New Roman суг». Бумага для офисной техники, 80 мг/м2. Тираж 100 экз.

1 37 0 1

РНБ Русский фонд

2006-4 8798

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Лифанова, Наталья Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Хронический тонзиллит как медико-социальная проблема.

1.2. Морфофункциональная организация небных миндалин.

1.3. Особенности динамики воспалительного процесса в миндалинах.

1.4. Клинико-лабораторная диагностика хронического тонзиллита на современном этапе.

1.5. Стабильные метаболиты монооксида азота и молекулярные продукты ПОЛ как маркёры воспалительного процесса.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Общая характеристика клинического материала.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Функциональные методы исследования.

2.2.2. Методика получения содержимого лакун миндалин.

2.2.3. Биохимические методы исследования.

2.2.3.1. Определение содержания нитритов/нитратов.

2.2.3.2. Определение содержания молекулярных продуктов ПОЛ.

2.2.3.3. Методика определения содержания лактата и лактатдегидрогеназы в сыворотке крови и в содержимых лакун нёбных миндалин.

2.2.3.4. Методика определения активности каталазы в содержимом лакун нёбных миндалин.

2.2.3.5. Определение индекса цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ для дифференциальной диагностики хронического тонзиллита.

2.2.4. Методика статистического анализа.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Анализ уровня метаболитов NO и продуктов перекисного окисления липидов в содержимом лакун миндалин при хроническом тонзиллите. Усовершенствование способа получения содержимого из лакун нёбных миндалин.

3.2. Характеристика воспалительного очага при компенсированной и декомпенсированной форме хронического тонзиллита.

3.3. Сравнительная характеристика анализируемых групп по показателям концентрации некоторых продуктов метаболизма оксида азота (NO).

3.4. Сравнительная характеристика групп больных компенсированным и декомпенсированным хроническим тонзиллитом по содержанию метаболитов NO и по данным ритмо- и электрокардиографического методов исследования.

3.5. Оценка эффективности лечения больных с декомпенсированной и компенсированной формами хронического тонзиллита с использованием аппарата «Тонзиллор» по показателям концентрации перекисного окисления липидов и продуктов метаболизма оксида азота.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль маркеров перекисного окисления липидов и метаболитов нитроксидэргической системы в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита и оценке эффективности лечения с помощью аппарата "Тонзилло"

Актуальность проблемы. Хронический тонзиллит (XT) традиционно рассматривается как заболевание воспалительной природы, возникающее в ответ на очаговую инфекцию [85]. Особый интерес вызывает связь хронического тонзиллита и патологии внутренних органов и систем вследствие учащения диффузных заболеваний соединительной ткани, а также пересмотра ограничений для тонзиллэктомии [15, 38, 70]. Поэтому динамика развития воспалительного процесса в нёбных миндалинах во многом определяется бактерицидным потенциалом лейкоцитарных клеток. По-видимому, нарушения элиминации инфекционных агентов связаны с низкой фагоцитарной активностью полиморфноядерных лейкоцитов и моноцитов-макрофагов в воспалительном очаге. Неэффективная противомикробная защита приводит не только к усилению обсеменённости нёбных миндалин микроорганизмами и к выходу микроорганизмов в кровоток, но и к переходу от компенсированной формы тонзиллита к декомпенсированной [4, 86, 89, 90,100].

Известно, что осложнения, возникающие, при декомпенсированной форме тонзиллита часто затрагивают жизненно важные органы и системы. К сожалению, в оториноларингологии отсутствуют надёжные критерии для дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированных форм XT. Большинство существующих субъективных и объективных признаков хронического тонзиллита являются малоинформативными и могут быть связаны в своих проявлениях с наличием других заболеваний [50, 72, 148]. Отчасти, это связано с объективными затруднениями, возникающими при попытке охарактеризовать функциональную активность фагоцитирующих клеток в воспалительном очаге. В последнее время появились новые данные, рассматривающие молекулярные продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ) как косвенные признаки активации нейтрофилов в воспалительном очаге (Волчегорский И.А. и др., 2001). Подобные исследования имеют единичный характер и не затрагивают такое распространённое заболевание воспалительной природы, как XT. К биохимическим маркёрам воспалительного процесса также следует отнести стабильные метаболиты монооксида азота (N0). Известно, что в воспалительном очаге продукция монооксида азота связана с цитокинзависимой активацией NO-синтазы мононуклеарными фагоцитами, инфильтрировавшими воспалительный очаг. Однако при XT' отсутствуют данные, касающиеся содержания нитритов/нитратов в воспалительном очаге. Таким образом, молекулярные продукты ПОЛ и метаболиты нитроксидэргической системы действительно отражают функциональный статус фагоцитирующих клеток, инфильтрирующих воспалительный очаг. Поэтому в перспективе их можно использовать в качестве маркёров для дифференциальной диагностики XT.

Основные задачи исследования:

1.Разработать усовершенствованный способ извлечения содержимого из лакун миндалин при хроническом тонзиллите.

3.Провести сравнительный анализ концентрации стабильных метаболитов оксида азота (N0) в лакунах миндалин в группах больных с компенсированным и декомпенсированным хроническим тонзиллитом.

4.Разработать на основании полученных показателей активности перекисного окисления липидов и концентрации продуктов метаболизма оксида азота алгоритм для дифференциальной диагностики1 компенсированного и декомпенсированного хронического тонзиллита.

5.Провести сравнительный анализ предложенных ~ клинико-лабораторных критериев для определения эффективности лечения на аппарате "Тонзиллор".

Научная новизна.

1.Впервые для объективизации дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита предложен комплекс клинико-лабораторных критериев, характеризующих уровень ПОЛ, содержание стабильных метаболитов NO и количество молочной кислоты непосредственно в лакунах небных миндалин.

2.На основании выявленных критериев разработан диагностический индекс цитотоксичности молекулярных продуктов липопероксидации в воспалительном очаге, позволяющий проводить дифференциальную диагностику компенсированной и декомпенсированной формы хронического тонзиллита.

3. Установлена высокая эффективность использования аппарата «Тонзиллор» в лечении хронического тонзиллита, позволяющая осуществить сочетанное воздействие низкочастного ультразвука и введения в воспалительный очаг противовоспалительных медикаментов типа гидрокортизона.

Основные положения, выносимые на защиту:

1.При хроническом тонзиллите усиление лейкоцитарной инфильтрации сопровождается увеличением содержания молекулярных продуктов ПОЛ и возрастанием концентрации стабильных метаболитов оксида азота в лакунах нёбных миндалин.

3.Осуществляемая с помощью аппарата "Тонзиллор" ультразвуковая кавитация миндалин с использованием антисептических средств и фонофорез гидрокортизона позволяет снизить уровень обсеменённости бактериальной микрофлоры, уменьшить лейкоцитарную инфильтрацию, нормализовать уровень ПОЛ и провести коррекцию кардиологических осложнений.

4.Использование усовершенствованной методики забора материала из миндалин изолированно от ротовой полости позволяет добиться точных результатов в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 80-летию академика И.Б. Солдатова (Самара, май 2003 года) — 2 доклада; научно-практической конференции, посвященной 64-летию Челябинской областной клинической больницы "Актуальные проблемы практической медицины" (Челябинск, октябрь 2003 года); врачебной конференции Челябинской государственной медицинской академии "Современные методы лабораторной диагностики хронического тонзиллита" (Челябинск, ноябрь 2003 года); на заседании научно-практического общества отоларингологов "Хронический тонзиллит в патогенезе кондуктивной и смешанной тугоухости" (Челябинск, декабрь 2003 года). Материалы диссертации доложены на заседании научно-практического общества оториноларингологов 28 октября 2004 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 статей, из них 5 - в центральной печати. Получены решения о выдаче патентов на изобретения № 2003123155/14(024473) от 22.07.2003 г., № 2003137864/15/040434 от 26.12.2003 г.

Объём и структура диссертации. Работа изложена на 133 страницах машинописного текста, иллюстрирована 7 рисунками и 21 таблицей, состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, результатов исследования и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы, который включает в себя 148 отечественных и 53 работ зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Лифанова, Наталья Александровна

выводы

1. Разработан усовершенствованный способ извлечения содержимого из лакун миндалин (патент № 2003123155/14/024473).

2. Для декомпенсированной формы хронического тонзиллита по сравнению с компенсированной формой характерен более высокий уровень диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряжённых триенов, а также Шиффовых оснований в лакунах нёбных миндалин. При декомпенсированной форме хронического тонзиллита в лакунах нёбных миндалин уменьшается доля молекулярных продуктов ПОЛ с высоким уровнем цитотоксичности на фоне увеличения обсеменённости лакун миндалин патогенными микроорганизмами и усилением нейтрофильной инфильтрации при одновременном снижении содержания макрофагов и лимфоцитов.

3. При декомпенсированной форме, по сравнению с компенсированной, отмечено повышение содержания стабильных метаболитов N0, что связано с усилением биоцидного потенциала фагоцитирующих клеток.

4. Для дифференциальной диагностики декомпенсированной и компенсированной форм хронического тонзиллита целесообразно использовать индекс цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ в лакунах нёбных миндалин, который определяется как соотношение между суммарным содержанием кетодинев с сопряжёнными триенами и Шиффовых оснований к диеновым конъюгатам.

5. Увеличению уровня циркулирующих молекулярных продуктов ПОЛ, гиперлактатемии и приросту содержания стабильных продуктов метаболизма оксида азота в сыворотке крови при декомпенсированной форме хронического тонзиллита сопутствовало появление кардиологических осложнений, выявляемых с помощью электрокардиографии и ритмокардиографии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для дифференциальной диагностики хронического тонзиллита целесообразно использовать индекс цитотоксичности молекулярных продуктов ПОЛ непосредственно в содержимом лакун миндалин. Такой подход превосходит по информативности исследование липопероксидации в крови.

2. Для исследования содержимого лакун миндалин целесообразно использовать аппарат «Тонзиллор».

3. Фонофорез гидрокортизона непосредственно в ткани миндалин является эффективным подходом для лечения хронического тонзиллита

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Лифанова, Наталья Александровна, Челябинск

1. Алексашин Я.В. К характеристике содержимого лакун небных миндалин при субкомпенсированном хроническом тонзиллите / Я.В. Алексашин // Журн. ушных, носовых и горловых болезней 1963. -№ 5. - С.66.

2. Алексеев А.А. Человек и лекарство / А.А. Алексеев, О.Е. Фадюкова, B.C. Кузенков и др. // Тезисы докладов 6-го Российского национального конгресса. М., 1999. - С. 10.

3. Андалова О.В. Применение «Тонзиллор-03» в лечении хронического тонзиллита / О.В. Андалова, В.В. Педдер // Проблема реабилитации в оториноларингологии: тр. Всерос. конф. с междунар. участием. — Самара, 2003 С. 336-337.

4. Антонив В.Ф. Некоторые аспекты тонзиллярной проблемы в настоящее время / В.Ф. Антонив, А.И. Перекрест, Т.В. Короткова //Вестн. оториноларингологии. 1995. - №6.- С. 43-45.

5. Арефьева Н.А. Иммунный статус небных миндалин и методы его оценки: метод, рекомендации / Н.А. Арефьева, Л.Ф. Азнабаева, В.В. Сперанский. Уфа, 1997. - 31с.

6. Арефьева Н.А. Иммунологические аспекты оториноларингологии /Н.А. Арефьева, Ю.А. Медведев // Новости оториноларингологии и логопатии.- 1997. Т.4, №12. -С.3-10.

7. Бажора Ю.И. Клинико-иммунологическое обоснование криохирургического лечения тонзиллита: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Ю.И. Бажора. Киев, 1987.

8. Батчер Э.С. Иммунология / Э.С. Батчер, И.Л. Вайссман; под ред. У. Пола.-М., 1987.- 340с.

9. Башкатова В.Г. Оксид азота в механизмах повреждений мозга, обусловленных нейротоксическим действием глутамата / В.Г.

10. Башкатова, К.С. Раевский // Биохимия. 1998. - Т.63, № 7. - С. 10201028.

11. Безель А.В. Иммунодиагностика и некоторые иммунологические аспекты стафилококкого хронического тонзиллита: автореф. дис. . канд. мед. наук / А.В. Безель. Алма-Ата, 1995.

12. Берберова Н.Т. Из жизни свободных радикалов / Н.Т. Берберова // Соросовский образоват. журн. 2000. - Т.6, № 5. - С.42.

13. Береговой Д.В. Инструмент для забора содержимого из лакун небных миндалин / Д.В.Береговой // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1982. - № 2. - С.89-90.

14. Бобырев В.Н. Антиоксиданты в клинической практике / В.Н. Бобырев, О.Н. Воскресенский // Терапевт, арх. 1989. - № 3. - С.122-125.

15. Богданов К.Г. Консервативное и криохирургическое лечение хронического тонзиллита и иммунологическая реактивность небных миндалин по данным исследования материала из лакун: автореф. дис. . канд. мед наук / К.Г.Богданов. Одесса, 1991.

16. Бондаренко В.М. Антимикробная активность окиси азота и ее роль в инфекционном процессе / В.М. Бондаренко, Н.А. Виноградов, В.В. Малеев // Журн. микробиологии. 1999. - № 5. - С.67-72.

17. Бродовская О.Б. Эффективность местного применения беталейкина у больных хроническим тонзиллитом / О.Б. Бродовская, Е.А. Бачерикова, А.С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т.2, №3. - С. 9-12.

18. Брусов О.С. Влияние природных ингибиторов радикальных реакций на автоокисление адреналина / О.С. Брусов, A.M. Герасимов, Л.Ф. Панченко // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1976. - № 1. -С.33-35.

19. Быков В.Л. Дендритные антигенпредставляющие клетки слизистой оболочки полости рта в норме и при патологических состояниях / В.Л. Быков // Арх. патологии. 1997. - №2. - С.71-75.

20. Быкова В.П. Лимфоэпителиальные органы в системе местного иммунитета слизистых оболочек / В.П. Быкова // Арх. патологии. -1995. -Вып.1. С. 11-16.

21. Быкова В.П. Морфофункциональная организация небных миндалин как лимфоэпителиального органа / В.П. Быкова // Вестн. оториноларингологии. — 1998. № 1. - С.41-45.

22. Быкова В.П. Морфофункциональная характеристика небных и глоточной миндалин у детей с хроническим тонзиллитом и аденоидами / В.П. Быкова, А.А. Иванов, В.Р.Пакина // Арх. патологии. 1996. - №6. - С. 16-22.

23. Быкова В.П. Современный аспект проблемы тонзиллярной болезни / В.П. Быкова // Арх. патологии. 1996. - №3. - С.23-30.

24. Ванин А.Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях / А.Ф. Ванин // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. - № 4. - С.3-4.

25. Ванин А.Ф. Оксид азота: регуляция клеточного метаболизма без участия системы клеточных рецепторов / А.Ф. Ванин // Биофизика. -2001. Т.46, Вып.4. - С.631-641.

26. Вершигора А.Е. Иммунобиология небных миндалин / А.Е. Вершигора. Киев: Вища школа, 1978. - 120с.

27. Вершигора А.Е. Общая иммунология / А.Е. Вершигора. Киев, 1990. -320с.

28. Владимиров Ю.А. Нарушение барьерных свойств внутренней и наружной мембран митохондрий, некроз и апоптоз / Ю.А. Владимиров // Биол. мембраны. 2002. - Т. 19, № 5. - С. 356-377.

29. Владимиров Ю.А. Биологические мембраны и ^запрограммированная смерть клетки / Ю.А. Владимиров // Соровский образоват. журн. 2000. - Т.6, № 9. - С.22-24.

30. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М., 1972. - 252с.

31. Власова В.В. Особенности клиники и лечения хронического тонзиллита у лиц с избыточной массой тела: автореф. дис. . канд. мед. наук / В.В. Власова. СПб., 1997. - 22с.

32. Галанкин В.Н. Об особенностях взаимодействия системы полиморфноядерного лейкоцита с бактериальными агентами / В.Н. Галанкин // Арх. патологии. 1984. - Вып11. - С.80-86.

33. Голиков П.П. Оксид азота и перекисное окисление липидов как факторы эндогенной интоксикации при неотложных состояниях / П.П. Голиков, Н.Ю. Николаева, И.А. Гавриленко // Патологич. физиология и эксперим. терапия. 2000. - № 2. - С.6-9.

34. Гурин А.В. Роль монооксида азота в процессах жизнедеятельности / А.В. Гурин. Минск, 1998. - 162с.

35. Гюллинг Э.В. О повышенной чувствительности клеток миндалин больных хроническим тонзиллитом к стрептококку и стафилококку / Э.В. Гюллинг, О.Ф. Мельников // Вестн. оториноларингологии. -1974. №4. - С. 46-48.

36. Джеральд М. Фаллер. Молекулярная биология клетки: руководство для врачей / М. Фаллер Джеральд, Д. Шилдс. М.: Бином, 2003. -368с.

37. Дикий И.Л. Современные методы фармакотерапии хронического тонзиллита / И.Л. Дикий. Киев, 1990. - 19с.

38. Драгомирецкий В.Д. Применение иммунологического обследования у больных хроническим тонзиллитом, подвергшихся консервативному лечению / В.Д. Драгомирецкий, Ю.И. Бажора // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1986. - № 6. - С.8-10.

39. Дьяконова Т.А. Влияние нитрита на возбудимость нейронов мозга виноградной улитки / Т.А. Дьяконова, В.П. Реутов // Рос. физиол. журн. им. Сеченова. 1998. - Т.84, № 11. - С. 1264-1273.

40. Дюмин О.В. Методы диагностики и лечения больных хроническим тонзиллитом / О.В. Дюмин, А.И. Манюта, К.Г. Богданов // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1999. - № 1. - С.56-64.

41. Ермакова Н.Г. Хемотаксис лейкоцитов периферической крови у больных разлитым гнойным перитонитом / Н.Г. Ермакова // Арх. патологии. 1988. - Вып.1. - С.59-63.

42. Жуманкулов М.С. Реабилитация больных головы и шеи / М.С. Жуманкулов, В.Г. Перелыгин. Вильнюс, 1988. - 146с.

43. Заболотный Д.И. Вопросы иммунодиагностики хронического тонзиллита / Д.И.Заболотный, О.Ф. Мельников, В.К. Кищук // Вестн. оториноларингологии. 1995. - № 5. - С. 17-20.

44. Заболотный Д.И. Иммунодиагностика функционального состояния клеток небных миндалин больных хроническим тонзиллитом / Д.И. Заболотный, В.В. Кищук, О.Ф. Мельников. Киев, 1998. - 84с.

45. Заболотный Д.И. Клинико-иммунологические основы классификации хронического тонзиллита / Д.И. Заболотный, О.Ф. Мельников, В.В. Кищук // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 2003. - № 5. . с. 44-48.

46. Завгородняя Е.Г. Эффективность метода прижизненной оценки функционального состояния небных миндалин человека / Е.Г. Завгородняя, З.Н. Ловпаче // Вестн. оториноларингологии. — 1990. -№ 3. С.27-29.

47. Зайчик А.Ш. Основы общей патологии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. СПб.: Элби СПб, 1999. - 1200с.

48. Зенков Н.К. NO-синтазы в норме и при патологии различного генеза / Н.К. Зенков, Е.Б. Меньшикова, В.П. Реутов // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. - № 4. - С.30-33.

49. Ильичева О.И. Состояние моноцитарного звена системы мононуклеарных фагоцитов у больных хроническим тонзиллитом / О.И. Ильичева // Вестн. оториноларингологии. 1986. - № 2. - С. 3942.

50. Исачкова Л.М. Морфология гранулематозного воспаления при псевдотуберкулезе / Л.М. Исачкова // Арх. патологии. 1993. -Вып.5. - С. 52-55.

51. Исхаки Ю.Б. Детская оториноларингология / Ю.Б. Исхаки, Л.И. Колыитейн. Душанбе, 1984. - 398с.

52. Каган В.Е. Об участии свободных активных форм кислорода в ферментном перекисном окислении липидов в биомембранах / В.Е. Каган, Л.Л. Гушелипко, В.М. Савов и др. // Биохимия. 1979. -Вып.З.-С. 482-488.

53. Кандауров Н.Ф. О диагностической ценности препаратов — отпечатков с небных миндалин у детей при различных формах хронического тонзиллита / Н.Ф. Кандауров // Вестн. оториноларингологии. 1969. - № 1. - С. 109-110.

54. Карабаев Х.Э. Нарушения перекисного окисления липидов в крови у детей с гнойно-воспалительными заболеваниями уха и их коррекция / Х.Э. Карабаев // Журн. ушных, носовых, горловых болезней. 1996. - №3.- С.41-45.

55. Карабаев Х.Э. Показатели перекисного окисления липидов крови у детей с гнойно-воспалительными заболеваниями носа и околоносовых пазух / Х.Э. Карабаев, В.Ф. Антонив, О.Г. Дустбекова и др. // Вестн. оториноларингологии. 1997. - № 4. - С. 44-45.

56. Карпова-Россоха Л.Г. Цитологический состав содержимого в диагностике хронического тонзиллита / Л.Г. Карпова-Россоха // Вестн. оториноларингологии. 1950. - № 5. - С.59-64.

57. Клиническая биохимия: учеб. пособие для студентов мед. вузов / под ред. В.А. Ткачука. М.: ГЭОТАР, 2002. - 360с.

58. Клячко Л.Л. Показатели иммунитета в прогнозировании течения хронического тонзиллита / Л.Л.Клячко, B.C. Анхимова // Проблемы иммунологии в оториноларингологии: материалы Всерос. симп. -СПб., 1994.-С.8.

59. Колесова О. Е. Перекисное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах / О.Е. Колесова, А.А. Маркин, Т.Н. Федорова // Лаб. дело. 1984. - № 9. - С. 540-546.

60. Комаров О.С. Роль полиморфноядерных лейкоцитов в активации перекисного окисления липидов при увейте / О.С. Комаров // Патологич. физиология и эксперим. терапия. 1994.- №2. -С. 15-19.

61. Константинова Н.П. Хронический тонзиллит: проблемы и перспективы лечения / Н.П. Константинова, С. Морозова // Врач. -1999. № 12. - С.4-6.

62. Коренченко С.В. Диагностическое и прогностическое значение реотонзиллографии у больных хроническим тонзиллитом / С.В. Коренченко // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. — 1991. -№4.- С.18.

63. Кофанов Р.В. Клиника, диагностика, классификация хронического тонзиллита у взрослых и детей / Р.В. Кофанов, М.С. Ангелович // Мед. вестн.; Сер. «Оториноларингология» . — 1996. № 2. - С. 59-67.

64. Кочетова С.В. Изучение активности естественных киллеров у больных хроническим тонзиллитом и хронической пневмонией / С.В. Кочетова, А.П. Фесенко, И.В. Богдашин и др. // Вестн. оториноларингологии. 1987. -№ 2. - С. 36-39.

65. Лесков В.П. Клиническая иммунология для врачей / В.П. Лесков, А.Н. Чередеев. М.,1997. - 420с.

66. Лущак В.И. Окислительный стресс и механизмы защиты от него бактерий / В.И. Лущак // Биохимия. 2001. - Т.66, Вып.5. - С. 592609.

67. Львовская Е.И. Спетрофотометрическое определение конечных продуктов перекисного окисления липидов / Е.И. Львовская, И.А. Волчегорский, С.Е. Шемяков, Р.И. Лифшиц // Вопр. мед. химии. -1991. №4. - С.92-93.

68. Маеда X. Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке / X. Маеда, Т. Акаиди // Биохимия. 1998. - Т.63, Вып.7. - С. 1007-1028.

69. Мальцева Г.С. Применение иммуномодуляторов в комплексном лечении хронического тонзиллита: метод, рекомендации / Г.С. Мальцева. СПб., 1994. - 21с.

70. Манухина Е.Б. Оксид азота в сердечно-сосудистой системе: роль в адаптационной защите / Е.Б. Манухина, И.Ю. Малышев, Ю.В. Архипенко //Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. - № 4. - С. 16-20.

71. Марков Х.М. Окись азота в физиологии и патологии почек / Х.М. Марков // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 1996. - № 7. - С. 73-78.

72. Марков Х.М. Окись азота и окись углерода новый класс сигнальных молекул / Х.М. Марков // Успехи физиологии, наук. -1996. - № 4. - С.30-43.

73. Матвеева J1.A. Метод цитологического анализа назального секрета / JI.A. Матвеева // Сборник трактатов Томского медицинского института. Томск, 1981.- С.51-53.

74. Маянский А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. Казань: Магариф, 1993. - 192с.

75. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1989. - 344с.

76. Маянский Д.Н. Хроническое воспаление / Д.Н. Маянский. М.: Медицина, 1991.- 270с.

77. Мельников О.Ф. Антитшозалежна цитотоксична актившсть тонзилоцит1в у хворих на хрошчний декомпенсирований тонзшпт / О.Ф. Мельников, Т.А. Заец // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1998. - № 3. - С. 16.

78. Мельников О.Ф. Иммунологические аспекты генеза хронического тонзиллита и регуляции функциональной активности миндалин: автореф. дис. . д-ра мед. наук / О.Ф. Мельников. Киев, 1981.

79. Мельников О.Ф. О механизме угнетения реакций иммунитета при тонзиллите / О.Ф. Мельников // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1978. - № 5. - С.52-56.

80. Мельников О.Ф. Современные теоретические аспекты тонзиллярной проблемы / О.Ф. Мельников. Киев,1998. - 301с.

81. Мельников О.Ф. Сучасш проблеми отоларингологи / О.Ф. Мельников. Киев, 1993 .-310с.

82. Меныцикова Е.Б. Оксид азота и NO-синтазы в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков, В.П. Реутов // Биохимия. 2000. - Т.65, Вып.4. - С. 485-503.

83. Мишенькин Н.В. Лечение хронического тонзиллита низкочастотным ультразвуком в условиях поликлиники: метод, рекомендации / Н.В. Мишенькин, В.И. Лощилов, В.Г. Педдер. М.,1983. - 24с.

84. Низкочастотная ультразвуковая терапия в хирургии и оториноларингологии / под ред. Н.В. Мишенькина. -Новосибирск, 1992. 44с.

85. Николаев А .Я. Биологическая химия / А.Я. Николаев. М., 2001. -496с.

86. Николаевская В.П. Физические методы лечения в оториноларингологии / В.П. Николаевская. М.: Медицина, 1989. -113с.

87. Нурищенко Н.Е. Активнють ферменив л1мфощгпв та нейтрофипв кров1 у хворих на хрошчный декомпенсирований тонзшит / Н.Е. Нурищенко, О.О. Улановська, А.Ф. Карась и др. // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1998,- №4.- С.53.

88. Овчинников Ю.М. Эффективность тонзиллэктомии и низкочастотной ультразвуковой терапии у больных хроническим тонзиллитом, страдающих бронхиальной астмой / Ю.М. Овчинников, Н.В. Костюк // Вестн. оториноларингологии. 1986. - № 2. - С. 42-45.

89. Одыванова JI.P. Окись азота (N0) в нервной системе / JI.P. Одыванова, А.А. Сосунов, Я. Татчев // Успехи современ. биологии. -1997. Т.117. - С.374-389.

90. Пальчун В.Т. Лечебно-диагностические подходы к проблеме хронического тонзиллита / В.Т. Пальчун, Т.С. Полякова, О.Н. Романова//Вестн. оториноларингологии. -2001. № 1. - С.4-7.

91. Пальчун В.Т. Оториноларингология / В.Т. Пальчун, А.И. Крюков. -М.: Литера, 1997. 235с.

92. Пауков B.C. Морфология лимфатических узлов при вторичном иммунодефиците, обусловленным острым разлитым перитонитом / B.C. Пауков, Б.В. Шлопов // Арх. патологии. 1991. - Вып.7. - С.66-70.

93. Пауков B.C. Патогенетические аспекты хронического воспаления / B.C. Пауков, Б.Б. Салтыков, Н.Г. Ермакова и др. // Арх. патологии. — 1998.- № 1.- Т.60. С.34-38.

94. Петрович Ю.А. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса / Ю.А. Петрович, Д.Ю. Гудкин // Патологич. физиология. 1986. - № 5. - С. 85-92.

95. Плужников М.С. Клиническое значение процессов перекисного окисления липидов / М.С. Плужников, Б.С. Иванов, М.С. Жуманкулов // Вестн. оториноларингологии. 1991. - № 3. - С.88-89.

96. Подовжний А.Г. Обоснование оптимальных сроков стационарного периода при типичных оперативных вмешательствах на лор-органах: автореф. дис. . канд. мед. наук/А.Г. Подовжний. Киев, 1991.

97. Попа В.А. Особенности клинического течения и лечения хронического тонзиллита у детей / В.А. Попа // Вестн. оториноларингологии. 1990. - №1. - С. 38-41.

98. Попа В.А. Хронический тонзиллит / В.А. Попа. Кишинев, 1984. -255с.

99. Попов Е.Л. Иммунологические особенности, определяющие участие небных миндалин в местном иммунитете / Е.Л. Попов, В.А. Косенко // Проблемы иммунологии в оториноларингологии: материалы Всерос. симп. -СПб., 1994. С.9-10.

100. Попов Е.Л. К характеристике состояния внешней иммунологической функции миндалин по данным исследования материала из крипт / Е.Л. Попов, П.Н. Пущина // Актуальные вопросы физиологии и патологии верхних дыхательных путей: сб. трудов. М.,1982. - С.12-19.

101. Раевский К.С. Роль оксида азота в глутаматергической патологии мозга / К.С. Раевский, В.Г. Башкатова, А.Ф. Ванин // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. - № 4. - С.11-15.

102. Реутов В.П. No-синтазная и нитритредуктазная компоненты цикла оксида азота / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина // Биохимия. 1998. - Т.35, №7.-С. 1029-1040.

103. Реутов В.П. Медико-биологические аспекты циклов оксида азота и супероксидного анион-радикала / В.П. Реутов // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. - № 4. - С.37.

104. Реутов В.П. Цикл окиси азота в организме млекопитающих / В.П. Реутов // Успехи биологич. химии. 1995. - Т.35. - С. 189-228.

105. Реутов В.П. Цикл оксида азота в организме млекопитающих и принцип цикличности / В.П. Реутов // Биохимия. 2002. - Т. 67, Вып.З. - С.353-376.

106. Руководство по оториноларингологии / под ред. И.Б. Солдатова. -М., 1994. 348с.

107. Рябов Г.А. Роль оксида азота как регулятора клеточных процессов при формировании полиорганной недостаточности / Г.А. Рябов, Ю.А. Азизов // Анестезиология и реаниматология. 2001. - № 1. - С. 8-12.

108. Сапин М.Р. Иммунная система человека / М.Р. Сапин, JI.E. Этинген. -М.: Медицина, 1999. 304с.

109. Сахарова А.В. Ультраструктурная локализация NO-синтазной NADPH-диафоразы в периферическом нерве и ее изменение при дифтерийной полинейропатии / А.В. Сахарова, С.М. Ложникова // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2000. - № 4. - С.48.

110. Сахарова А.В. Экспрессия NADPH-диафоразы в периферическом нерве и ее изменение на разных стадиях дифтерийной полинейропатии / А.В. Сахарова, С.М. Ложникова, В.Н. Пирогов и др. // Арх. патологии. 1999. - Вып.1. - С.39-46.

111. Северина И.С. Растворимая гуанилатциклаза в молекулярном механизме физиологических эффектов оксида азота / И.С. Северина //Биохимия. 1998.- Т.63. - С. 939-947.

112. Сергеев М.М. Диагностическое значение клинических и некоторых лабороторных тестов при хроническом тонзиллите / М.М. Сергеев // Вестн. оториноларингологии. 1979. - № 3. - С.42-45.

113. Сквирская И.В. Состояние процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантная активность мембран эритроцитов и сыворотки крови у больных полипозным гайморитом и этмоидитом /

114. И.В. Сквирская // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. -1992. № 5-6. - С.55-58.

115. Смердов Г.Н. Иммунологические показатели небных миндалин у больных хроническим тонзиллитом / Г.Н. Смердов. К.С. Шабашов // Вестн. оториноларингологии. — 1988. № 2. - С.42-45.

116. Снайдер С.Х. Биологическая роль окиси азота / С.Х. Снайдер, Д.С. Бредт//В мире науки. 1992. - №7. - С. 16-26.

117. Солдатов И.Б. Научно-технический прогресс в медицине / И.Б. Солдатов, Н.С. Храппо, С.В. Корнеченко. Ульяновск, 1985. - 111с.

118. Сорокина Е.Г. Механизм потенцирующего действия альбумина при токсического воздействия глутамата: возможная роль окиси азота / Е.Г. Сорокина, В.П. Реутов, В.Г. Гинелис и др. // Биологич. мембраны. 1999. - Т. 16, № 3. - С.318-323.

119. Терещенко И.П. Роль системы нейтрофильных гранулоцитов в формировании особенностей развития патологического процесса / И.П. Терещенко, А.П. Кашулина // Патологич. физиология. 1993. -№4. - С.56-60.

120. Фаль Н.И. Роль анаэробных стрептококков в этиологии хронического тонзиллита / Н.И. Фаль, Л.И. Смольникова, Г.Э. Тимин // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1983. - № 4. - С. 18-20.

121. Филатов В.Ф. Некоторые закономерности соотношения дефицита барьерной функции миндалин и системного иммунитета при хроническом тонзиллите / В.Ф. Филатов, И.Л. Дикий, В.Д. Яковенко //Вестн. оториноларингологии. 1987. - № 3. - С.61-63.

122. Филатов В.Ф. Новый метод консервативного лечения больных хроническим тонзиллитом с помощью лазеро-оксигенного воздействия / В.Ф. Филатов, Л.С. Нечипа // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1991. - № 4. - С. 1-5.

123. Хмельницкая Н.М. Клинико-морфологическая оценка функционального состояния небных миндалин при клинических проявлениях хронического тонзиллита / Н.М. Хмельницкая, А.А. Ланцов//Вестн. оториноларингологии.- 1998. № 5. - С.38-39.

124. Хмельницкая Н.М. Морфологическая характеристика функционального состояния небных миндалин как органаиммуногенеза / Н.М. Хмельницкая // Арх. патологии. 1983. - Т.2. -С.83-89.

125. Хмельницкая Н.М. Морфологические изменения гипертрофированных небных миндалин у детей при различных методах консервативной терапии / Н.М. Хмельницкая // Арх. патологии. 1990. - Т.5. - С.36-40.

126. Хмельницкая Н.М. Оценка функционального состояния небных миндалин у больных хроническим тонзиллитом / Н.М. Хмельницкая, В.В. Власова, В.А. Косенко // Вестн. оториноларингологии. 2000. -№4. - С.33-39.

127. Хмельницкая Н.М. Характеристика морфофункционального состояния тканей небных миндалин и содержимого лакун при хроническом тонзиллите / Н.М. Хмельницкая, E.JI. Попов, П.Н. Пущина // Арх. патологии. 1983. - № 4. - С.49-54.

128. Хмельницкий O.K. Кандидоз / O.K. Хмельницкий, Р.А. Аравинский, О.М. Экземпляров. М.,1984. - 199с.

129. Хышиткуев Б.С. Состояние свободнорадикальных процессов в системе легочного сурфактанта у больных хроническим бронхитом / Б.С. Хышиткуев, В.Н. Иванов, М.З. Жий // Вопр. мед. химии. 1991.- Т.37, № 1. С.79-82.

130. Хэм А. Гистология: пер. с англ. / А. Хэм, Д. Кормак. М.,1982. - Т.2.- 254с.

131. Цинзерлинг А.В. Хламидиозы: диагностика, роль в патологии человека / А.В. Цинзерлинг // Арх. патологии. 1989. - Вып.1. - С.З-9.

132. Цирульникова Л.Г. Процессы перекисного окисления липидов у больных хроническим фарингитом грибковой этиологии / Л.Г. Цирульникова, В.Я. Кунельская, Б.В. Старосветский // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1990. - № 6. - С.45-48.

133. Шварцман Я.С. Местный иммунитет / Я.С. Шварцман, А.Б. Хазенсон. Л.: Медицина, 1978. - 254с.

134. Шевченко В.В. Перекисное окисление липидов у больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом с сопряженным ревматизмом / В.В. Шевченко, С.Б. Бесшапочный, О.И. Цербжинскийи др. // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1993. - № 1. -С.45-99.

135. Шилов Ю.И. Влияние гидрокортизона на функции фагоцитирующих клеток в условиях блокады Р адренорецепторов / Ю.И. Шилов, Д.В. Ланин, С.В. Ширшев // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова .- 2003.- Т.89, №5. С.543-551.

136. Щепеткин И.А. Генерация нитрорадикалов саназола ксантиноксидазой / И.А. Щепеткин // Биохимия. 1998. - Т.63, № 12.- С.1621-1629.

137. Яковенко В.Д. К вопросу о причинно-следственных взаимосвязях в патогенезе хронического тонзиллита как инфекционно-аллергического процесса / В.Д. Яковенко, В.Ф. Филатов, И.Л. Дикий // Вестн. оториноларингологии. 1990. - № 2. - С.52-56.

138. Яковенко В.Д. Экспериментально-клиническое обоснование аллергодиагностики хронического тонзиллита: автореф. дис. . канд. мед. наук / В.Д. Яковенко. Киев,1991. ~ 25с.

139. Baggiolini М. Interleukin-8 chemotactic and inflammatory cytokines / M. Baggiolini, M.C. Clark-Lewis // FEBS Letters. 1992. - Vol. 307, № 1. -P. 97-101.

140. Baumann H. The acute phase response / H. Baumann, J. Gauldie // Immunology. Today. 1994. - Vol. 15, № 2. - P. 74 - 80.

141. Betts W.H. Neutrophil as a source of nitric oxide at sites of inflammation on rats / W.H. Betts, C.L. Zhang, G.A. Murphy // Austr. N.Z.J. Med. -1993.-Vol. 23, №5. -P. 556.

142. Brandtzaeg P. Molecular and cellular aspects of the secretory immunoglobulin system / P. Brandtzaeg // APMIS. 1995. - Vol.103, №1. -P. 1-19.

143. Brandtzaeg P. Immunopathological alterations in tonsillar disease / P.Brandtzaeg // Acta. Otolaryngol. Suppl. 1988. - Vol.454. - P.64-69.

144. Brandtzaeg P. Immunology and immunopathology of tonsils / P. Brandtzaeg, T.S. Halstensen // Adv. Otorhinolaryngol. 1992. - Vol.47.1. Р.64-75.

145. Brandtzaeg P. The B-cell development in tonsillar lymphoid follicles / P. Brandtzaeg // Acta. Otolaryngol. Suppl. 1996. - Vol.523. - P.55-65.

146. Bult H. Nitric oxide as an inhibitory non-adrenergic non-cholinergic Neurotransmitter / H. Bult, G.E. Boeckxstaens, P.A. Pelckmans // Nature.-1990.- Vol.345, № 6273. P.346-347.

147. Curran R.C. Immunoglobulin-contaming cells in human tonsils as demonstrated by immunohistochemistiy / R.C. Curran, E.L. Jones // Clin. Exp. Immunol. 1977. - Vol.28, №1. - P. 103-115.

148. Curran R.C. Immunoglobulin in Reed-Stemberg and Hodgkin cells / R.C. Curran, E.L. Jones // J. Pathol. 1978. - Vol.126, №1. - P.35-37.

149. Denham S. Inhibition of the reactive proliferation of lymphocytes by activated macrophages: the role of nitric oxide / S. Denham, I.J. Rowland // Clin. Exp. Immunol. 1992. - Vol.87, №1. - P. 157-162.

150. Drucker M.M. Cell-mediated immune response to bacterial products in human tonsils and peripheral blood lymphocytes / M.M. Drucker, Y. Agatsuma, I. Drucker et al. // Infect. Immun. 1979. - Vol.23, № 2. -P.347-352.

151. Fujiyoshi T. Functional architecture of the nasopharyngeal tonsil / T. Fujiyoshi, T. Watanabe, I. Ichimiya, G. Mogi // Am. J. Otolaryngol. -1989. -Vol.10, №2. P.124-131.

152. Furchgott R.F. The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine / R.F. Furchgott, J.V. Zawadzki // Nature. 1980. - Vol.288, № 5789. - P.373-376.

153. Gaudecker von B. The development of the human tonsilla palatina / B. von Gaudecker, H.K. Muller-Hermelink // Cell. Tissue. Res. 1982. -Vol.224, № 3. -P.579-600.

154. Haddad I.Y. Mechanisms of peroxynitrite-induced injury to pulmonary surfactants / I.Y. Haddad, H. Ischiropoulos, B.A. Holm // Am. J. Physiol. -1993. Vol.265.-P.555-564.

155. Hall E.D. Central nervous system trauma and stroke. II. Physiological andpharmacological evidence for involvement of oxygen radicals and lipid peroxidation / E.D. Hall, J.M. Braughler // Free. Radic. Biol. Med. -1989. Vol.6, №3. - P.303-313.

156. Halliwell B. Free radicals, antioxidants, and human disease: where are we now? / B. Halliwell, J.M. Gutteridge, C.E. Cross // J. Lab. Clin. Med. -1992. -Vol.119, №6.-P.598-620.

157. Hibbs J.B.Jr. Nitric oxide: a cytotoxic activated macrophage effector molecule / J.B.Jr. Hibbs, R.R. Taintor, Z. Vavrin, E.M. Rachlin // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1988. - Vol.157, №1. - P.87-94.

158. Ignarro L.J. Endothelium-derived relaxing factor produced and released from artery and vein is nitric oxide / L.J. Ignarro, G.M. Buga, K.S. Wood et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1987. Vol.84, № 24. - P.9265-9269.

159. Josee H.B. Sequntial morphologic events during apoptosis of human neutrophils / H.B. Josee, T. Tomoko, H. Holtholpher // J. Immunol. -1996.-Vol. 23.-P. 171-175.

160. Kerwin J.F.Jr. Nitric oxide: a new paradigm for second messengers / J.F Jr. Kerwin, J.RJr. Lancaster, P.L. Feldman // J. Med. Chem. 1995. - Vol.38, № 22. - P.4343-4362.

161. Kraal G. Germinal centre В cells: antigen specificity and changes in heavy chain class expression / G. Kraal, I.L. Weissman, E.C. Butcher // Nature. 1982. - Vol.298, № 5872. - P.377-379.

162. Liew F.Y. Biology of nitric oxide in neuroimmunoregulation / F.Y. Liew // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. - Vol.741. - P.39- 45.

163. Liew F.Y. Regulation of nitric oxide synthesis in infectious and autoimmune Diseases / F.Y. Liew // Immunol. Lett. 1994. - Vol.43, № 1-2. - P.95-98.

164. Marietta M.A. Approaches toward selective inhibition of nitric oxide synthase / M.A. Marietta // J. Med. Chem. 1994. - Vol.37, №13.- P.1899-1907.

165. Marietta M.A. Macrophage oxidation of L-arginine to nitrite and nitrate: nitric oxide is an intermediate / M.A. Marietta, P.S. Yoon, R. Iyengar et al. // Biochemistry. 1988. - Vol.27, № 24.- P.8706-8711.

166. Moncada S. Nitric oxide: physiology, athophysiology, and pharmacology / S. Moncada, R.M. Palmer, E.A. Higgs // Pharmacol. Rev. 1991. -Vol.43, № 2. -P.109-142.

167. Movat H. Inflammatory reactions. Amsterdam, Elselvier, 1985. - 365 p.

168. Nakane M. Cloned human brain nitric oxide synthase is highly expressed in skeletal muscle / M. Nakane, H.H. Schmidt, J.S.Pollock et al. // FEBS Lett. 1993.-Vol.316, № 2. - P.175-180.

169. Nathan C.F. Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity / C.F. Nathan, J.BJr. Hibbs // Curr. Opin. Immunol. 1991. -Vol.3, №l.-P.65-70.

170. O'Donnell V.B. Nitric oxide inhibition of lipid peroxidation: kinetics of reaction with lipid peroxyl radicals and comparison with alpha-tocopherol / V.B. O'Donnell, P.H. Chumley, N. Hogg // Biochemistry. 1997. -Vol.36, № 49. - P.15216-15223.

171. Palmer R.M. Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor / R.M. Palmer, A.G. Ferrige, S. Moncada//Nature. 1987. - Vol.327, № 6122. - P.524-526.

172. Quayle J. Cytokine expression by inflammatory neutrophils / J. Quayle, S. Adams, R. Bucknal, S. Edwards // FEMS Immunol. Med. Microbiol. -1994. Vol. 8, № 3. - P. 233 - 240.

173. Radi R. Peroxynitrite oxidation of sulfhydryls. The cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide / R. Radi, J.S. Beckman, K.M. Bush, B.A. Freeman// J. Biol. Chem. 1991. - Vol.266, № 7. - P.4244-4250.

174. Radi R. Peroxynitrite-induced membrane lipid peroxidation: the cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide / R. Radi, J.S. Beckman, K.M. Bush, B.A. Freeman // Arch. Biochem. Biophys. 1991. - Vol.288, № 2. - P.481-487.

175. Rajarathnam K. Neutrophil activation by monomeric interleukin 1 / K. Rajarathnam, B. Sykes, C. Kay // Science. 1994. - Vol. 264, № 5155. - P. 90 - 92.

176. Rossi F. Mechanism of production of toxic oxygen radicals by granulocytes and macrophages and their function in the inflammatory process / F. Rossi, P. Bellavite, G. Berton // Pathol. Res. Pract. 1985.-Vol.18, № 2. - P.136-142.

177. Sengelov H. Mobilization of granules and secretory vesicles during in vivo exalation of human neutrophils / H. Sengelov, P. Follin, L. Lars et al. // J. Immunol. 1995. - Vol. 154, № 8. - P. 4157 - 4165.

178. Serra M.C. Effect of SP on superoxid anion and IL-8 production by human PML / M.C. Serra, F. Calzetty, M. Ceska, M.A. Casatella // Immunology. 1994.-Vol. 253.-P. 142- 145.

179. Simon S. L-selectin cross-linking signals neutrophil adhesive functions via the Mac-1 □2-integrine / S. Simon, A. Burns, A. Taylor // J. Immunol. -1995. Vol. 155, № 3. - P. 1502 - 1514.

180. Smedly L. Neutrophil-mediated injury to endothelial cells. Enhancement by endotoxin and essential role of neutrophil elastase / L. Smedly, M. Tonnesen, R. Sandhous // J. Clin. Invest. 1986. - Vol. 77. - P. 1233 -1243.

181. Surjan LJr. Tonsils and lympho-epithelial structures in the pharynx as immuno-barriers / LJr. Surjan // Acta. Otolaryngol. 1987. - Vol.103, № 5-6. -P.369-372.

182. Tanaka S. Detection of cytokine expression in human palatine tonsils / S. Tanaka, S. Nakagawa, M. Furukawa // Acta. Otolaryngol. Suppl. 1996. -Vol.523. -P.78-79.

183. Vercelotty G. Granulocyte oxigen radicals as a potential supressors of haemopoiesis, potentiating roles of lactoferine and elastase / G. Vercelotty, J. Stroneck, H.S. Jacobs // Blood. Cells. 1987. - Vol. 13. - № 1-2.-P. 169-204.

184. Ward P. Mechanisms of neutrophil-mediated killing of endothelial cells /

185. P. Ward, J. Varani // J. Leuk. Biol. 1990. - Vol. 48. - P. 97 - 116.

186. Yamanaka N. Immune response of tonsillar Blymphocytes / N. Yamanaka, F. Matsuda, H. Tsubota, A. Kataura // Acta. Otolaryngol. Suppl. 1988. - Vol.454. - P. 148-152.

187. Yamanaka N. Immunohistological study of tonsil. Distribution of T cell subsets / N. Yamanaka, S. Sambe, Y. Harabuchi, A. Kataura // Acta. Otolaryngol. 1983. - Vol.96, №5-6. -P.509-516.

Информация о работе

Лифанова, Наталья Александровна
кандидата медицинских наук
Челябинск, 2005
ВАК 03.00.04

Диссертация

Роль маркеров перекисного окисления липидов и метаболитов нитроксидэргической системы в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита и оценке эффективности лечения с помощью аппарата "Тонзилло - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы