Роль хронического поражения печени самок крыс в нарушении морфофункционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов потомства

Шаврина, Екатерина Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль хронического поражения печени самок крыс в нарушении морфофункционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов потомства
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Роль хронического поражения печени самок крыс в нарушении морфофункционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов потомства"

На правах рукописи

Шаврина Екатерина Юрьевна

РОЛЬ ХРОНИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ САМОК КРЫС В НАРУШЕНИИ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ СИСТЕМЫ МОНОНУКЛЕАРНЫХ ФАГОЦИТОВ ПОТОМСТВА

03.03.04 Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 О ДЕК 2012

Оренбург, 2012

005047424

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинский государственный университет»

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Брюхин Геннадий Васильевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

профессор кафедры микробиологии, вирусологии, иммунологии ГБОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Чайникова Ирина Николаевна

доктор биологических наук, профессор заведующий кафедрой незаразных болезней животных ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет» Сеитов Марат Султанович

Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное

учреждение высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Защита диссертации состоится « » декабря 2012 года в часов на

заседании диссертационного совета Д 208.066.04 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации по адресу: Россия, 460000, г. Оренбург, ул. Советская, 6, зал заседаний диссертационного совета.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации».

Автореферат разослан « » ноября 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Н.Н. Шевлюк

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Заболевания гепатобилиарной системы во всем мире являются одной из актуальных медико-социальных проблем в связи с широкой распространенностью и высокой частотой развития хронических форм (Шахгильдян И.В. с соавт., 2003; Комиссаров С.Н., 2008). К числу приоритетных задач общества и государства относится обеспечение «здорового старта» в жизни ребенка, которое начинается задолго до его рождения. При этом особая роль отводится здоровью будущих матерей (Никольская J1.A., 2003). Важное место в течении беременности занимает экстрагенитальная патология (Шехтман М.М, 1987; Савченко И.М, 2002; Медведь В.И., 2004; Майоров М.В., 2009; Шехтман М.М., 2011), среди которой нередко встречаются заболевания гепатобилиарной системы, в том числе хронические гепатиты, холециститы и желчнокаменная болезнь (Медведь В.И., 2004; Медведь В.И., 2007).

В настоящее время медиками активно изучается влияние патологии печени на течение беременности и здоровье будущего ребенка (Цогоева J1.M. с соавт., 2010). Точные ответы даны пока не на все вопросы, однако уже есть некоторые важные данные. Так многочисленными исследованиями сотрудников кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии в экспериментальных условиях установлено, что патология гепатобилиарной системы матери неблагоприятно влияет на морфофункциональное становление различных органов и систем потомства, в том числе кроветворных и мононуклеарных (Брюхин Г.В., 19902012; Грачев А.Ю., 1990-2004; Евченко Е.В., 2001; Бояков A.A., 2004; Брюхин Г.В., Вторушина Е.В., 2004; Пашнина E.H., Брюхин Г.В., 2004; Пивень Г.В., Брюхин Г.В., 2004; Федосов A.A., Брюхин Г.В., 2004; Ильиных М.А., Брюхин Г.В., 2006; Леонов Н.В., Брюхин Г.В., 2007; Барышева C.B., Брюхин Г.В., 2008; Кузнецова А.Б., Брюхин Г.В., 2008; Переходное A.C., Брюхин Г.В., 2008; Романов A.C., 2008; Бирюкова Т.И., Брюхин Г.В., 2009; Николина О.В., Брюхин Г.В., 2009; Солянникова Д.Р., Брюхин Г.В., 2009; Смекалина О.Ю., 2011; Сизоненко М.Л., Брюхин Г.В., 2012).

В то же время, одним из факторов, определяющих реактивность и резистентность организма, является морфофункциональное и цитохимическое состояние иммунной системы, одним из важных компонентов которой являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов.

В связи с вышеизложенным, целью настоящего исследования явился анализ функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы различной этиологии.

Для. достижения поставленной цели нами были сформулированы следующие задачи:

1. Оценить функциональную активность моноцитов периферической крови потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени в различные сроки постнатального развития.

2. Оценить особенности функционального состояния макрофагов различных компартментов потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы различной

. этиологии.

3. Изучить ловушкообразующую способность альвеолярных и . перитонеальных макрофагов потомства самок крыс с экспериментальным

хроническим Б-галактозаминовым поражением печени.

4. Исследовать в условиях длительного культивирования суммарную секреторную активность перитонеальных макрофагов потомства самок крыс с экспериментальным токсическим поражением гепатобилиарной системы.

Положения, выносимые на защиту

1. Экспериментальное поражение печени самок крыс, обусловленное введением супернатанта культуры Е.соН и Э(+) - галактозамина, является фактором риска, оказывающим существенное влияние на морфофункциональное состояние моноцитов периферической крови.

2. Экспериментальная патология гепатобилиарной системы самок крыс, обусловленная введением супернатанта культуры Е.соН и Б(+) -галактозамина гидрохлорида, является фактором риска, оказывающим неблагоприятное влияние на антенатальное и постнатальное морфофункциональное состояние клеток системы мононуклеарных

" фагоцитов различных компартментов потомства.

3. У потомства самок крыс с экспериментальным О-галактозаминовым поражением печени имеет место нарушение ловушкообразующей способности перитонеальных и альвеолярных макрофагов.

4. Хроническая токсическая патология гепатобилиарной системы матери обусловливает выраженные изменения секреторной активности перитонеальных макрофагов потомства.

Научная новизна

Впервые на адекватных экспериментальных моделях, воспроизводящих различные формы поражения гепатобилиарной системы (Е.соН и галактозамин), проведена комплексная оценка влияния патологии печени самок крыс на функциональную активность клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов потомства в различные сроки постнатального онтогенеза.

Получены данные, свидетельствующие, что экспериментальная патология печени матери приводит к изменению числа и функциональной активности макрофагов потомства. Так установлено, что хроническое поражение печени самок крыс обусловливает нарушение становления поверхностно-рецепторного аппарата (миграция, адгезия, распластывание), внутриклеточной кислородзависимой (НСТ-тест) и кислороднезависимой метаболической активности (лизосомы), ферментативной активности (СДГ, КФ,а-ГФДГ, миелопероксидаза), фагоцитарной и бактерицидной активности (фагоцитоз, киллинг) мононуклеаров различных компартментов потомства.

Впервые произведена оценка ловушкообразующей способности макрофагов различных компартментов потомства самок крыс с экспериментальной хронической патологией гепатобилиарной системы.

Впервые предложена оценка суммарной секреторной активности макрофагов перитонеального экссудата по выработке цитокинов в условиях длительного культивирования (Патент РФ на изобретение №2460783 «Способ оценки суммарной секреторной активности макрофагов различных компартментов по выработке цитокинов в условиях длительного культивирования» от 10 сентября 2012 г.).

Практическое и теоретическое значение

Диссертационная работа относится к фундаментальным исследованиям. Совокупность полученных в ходе проведенного экспериментального исследования данных и их анализ дают представление о характере иммунологических и секреторных изменений в клетках системы мононуклеарных фагоцитов потомства при хроническом экспериментальном поражении гепатобилиарной системы матери, что расширяет представление о физиологических механизмах и адаптации мононуклеаров.

Проведенное экспериментальное исследование позволяет оценить роль патологии печени матери в морфофункциональном становлении макрофагов различных компартментов потомства, что может быть использовано для анализа дефектов фагоцитарных клеток у больных с различными патологическими процессами и заболеваниями, а также для обоснования направленной иммунной коррекции состояния детей, рожденных от матерей с поражением гепатобилиарной системы.

Полученные в ходе эксперимента данные расширяют представление о роли хронической патологии печени матери в нарушении становления звена

неспецифической резистентности иммунной системы у потомства, что обосновывает необходимость выделения детей от матерей с поражением гепатобилиарной системы в группы повышенного риска, требующие диспансерного наблюдения у врача - иммунолога.

Результаты диссертационного исследования используются в научном и учебном процессах на биологическом факультете Челябинского государственного университета в дисциплинах: «Иммунология» (раздел «Система мононуклеарных фагоцитов»), «Физиология человека и животных» (раздел «Неспецифическая реактивность и резистентность организма в норме и патологии»), а также на кафедре гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии в разделах: «Кровь», «Соединительная ткань», «Специальные методы исследования», «Культивирование».

Апробация работы

Результаты исследования были представлены на конференции, посвященной 65-летию кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии (Челябинск, 2009); на XXXIII студенческой научной конференции «Студент и научно-технический прогресс» (Челябинск, 2009); на всероссийской научной конференции молодых ученых «Проблемы биомедицинской науки третьего тысячелетия» (Санкт-Петербург, 2010); на I международной (VIII итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2010); на международной научно-практической конференции «Физиологические механизмы адаптации человека» (Тюмень, 2010); на всероссийской научной конференции «Регенеративная биология и медицина» (Москва, 2011); на II международной (IX итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2011); на IX всероссийской конференции иммунологов Урала, посвященной 90-летию профессора Л.Я. Эберта (Челябинск, 2011); на III эмбриологическом симпозиуме Всероссийского научного медицинского общества анатомов, гистологов, эмбриологов «ЮГРА-ЭМБРИО-2011. Закономерности эмбрио-фетальных морфогенезов у человека и позвоночных животных» (Ханты-Мансийск, 2011); на III международной (X итоговой) научно-практической конференций молодых ученых (Челябинск, 2012).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 16 работ, в том числе 7 в изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при Министерстве образования и науки Российской Федерации, получен 1 патент РФ на изобретение.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 250 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов й методов исследования,

главы описания результатов собственного исследования и их обсуждения, выводов, списка использованной литературы, включающего 375 наименования, в том числе 100 работ зарубежных авторов. Работа содержит 23 таблицы, 104 рисунка, в том числе 35 микрофотографий.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В эксперименте были использованы белые половозрелые лабораторные крысы (самки) «Вистар» и их потомство на 1-ый, 15-ый, 30-ый, 45-ый и 60-ый дни постнатапьного онтогенеза. Выбранные нами сроки исследования согласуются с общепризнанным подразделением возрастных периодов для данной группы животных (Западнюк И.П. с соавт., 1983).

Исходя из поставленных задач данного исследования, животные были разделены на 3 группы. В первую группу выделено потомство от интактных матерей - контрольная группа (К - 82 животных из 27 пометов). Вторую группу составили крысята от самок с хроническим поражением печени, вызванным введением супернатанта Е.соН - опытная группа №1 (01 - 51 животное из 15 пометов), третью - животные от матерей с экспериментальным Б-галактозаминовым поражением печени - опытная группа №2 (02 - 62 животного из 18 пометов).

Работа с экспериментальными животными проводилась в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.77. Исследование проводилось с учетом суточных и сезонных колебаний. При этом животные содержались в одинаковых условиях вивария и получали стандартный пищевой рацион.

Модель хронического поражения печени, вызванного введением супернатанта культуры Е.соП. Методика получения экспериментального аутоиммунного поражения гепатобилиарной системы заключалась в двукратном введении супернатанта 6-ти дневной культуры Е.соН (штамм АТСС 25922) под эфирным наркозом лабораторным животным (половозрелым самкам крыс). Сенсибилизирующую инъекцию в объеме 0,2 мл фильтрата шестидневной культуры Е.соН, в разведении физиологическим раствором 1:4, производили в три участка печени (по одной с обеих сторон у основания мечевидного отростка и справа у реберного края по срединно-ключичной линии). Через сутки экспериментальным животным в хвостовую вену производилась разрешающая инъекция фильтрата 6-ти дневной культуры Е.соН в разведении 1:4 в объеме 0,3мл на 1кг массы тела. Через неделю к самкам,подсаживали здоровых самцов для получения потомства. . Формирование поражения печени подтверждали морфологическими, биохимическими и иммунологическими критериями (Сааков Б. А. с соавт., 1967). '

Модель хронического поражения печени, вызванного введением Щ+)-галактозамнна гндрохлорида. Данную модель патологии печени создавали путем однократного внутрибрюшинного введения под эфирным наркозом взрослым половозрелым самкам крыс гепатотропного яда Б(+) -

галактозамина гидрохлорида («Sigma - G500», США) на 0,9% растворе натрия хлорида в дозе 250 мг/кг массы тела животного. Через 10 дней после введения галактозамина к самкам производилась подсадка здоровых самцов. Токсическое поражение гепатобилиарной системы экспериментальных животных верифицировали с помощью морфологических, биохимических и иммунологических критериев (Сугробова Н.П. с соавт., 1992).

Морфологические методы исследования. В работе в качестве объекта исследования служили перитонеальные (Фримель Г., 1987), альвеолярные (Учитель И.Я., 1978; Вазина И.Р. с соавт., 1984), селезеночные (Mosier D.E., Picree C.W., 1972; Учитель И.Я., 1978), печеночные макрофаги (Crofton R.W. et al., 1978; Брюхин Г.В. с соавт., 1987), а также моноциты периферической крови (Gordon S. et al., 1975), которые выделяли с использованием общепринятых методик. Полученные мононуклеарные фагоциты подвергались дальнейшим исследованиям в мазках (Фримель П, 1987) и монослое клеток (Хейфец Л.Б., Абалакина В.А., 1973).

Иммунологические методы исследования. Для оценки жизнеспособности клеточных элементов СМФ использовали смесь 0,1% раствора трипанового синего на дистиллированной воде и 0,1% раствора эозина в растворе Хенкса (Кондратьева И.А., Самуилов В.Д., 2001).

Для подсчета мононуклеаров различных компартментов к 0,1 мл клеточной взвеси добавляли 0,9 мл раствора Тюрка. Полученной клеточной взвесью заполняли камеру Горяева. Подсчет клеток производили в 100 больших квадратах.

Для изучения локомоторных функций макрофагов под агарозным покрытием использовали метод, предложенный Nelson R.D. et al. (1975). Помещенные в лунку, вырезанную в слое агарозы, мононуклеары проявляют способность к спонтанной миграции, образуя вокруг лунки равномерную кольцевую зону. По величине данной зоны оценивали степень миграционной активности моноцитов/макрофагов (СМА). Если в центральную лунку поместить стандартный хемоатграктант (супернатант активированных латексом нейтрофилов), в крайние лунки - среду 199, а в средние лунки поместить исследуемые макрофаги и проинкубировать, то формирование асимметричной зоны миграции, вытянутой в сторону лунки с хемотаксическим фактором, позволяет оценить активность хемотаксиса (АХ) мононуклеаров: АХ = А/В, где А — миграция клеток к хемоаттрактанту; В — миграция клеток к среде 199 (Тотолян А.А., Фрейдлин И.С., 2000).

Адгезивные свойства исследуемых клеток оценивали нединамическим методом (Редчиц Е.Г., Гузева В.О.', 1991), который основан на способности клеток прикрепляться к чистой обезжиренной стеклянной поверхности (Имельбаева Э.А. с соавт., 1996). Параллельно с оценкой адгезии проводили оценку распластывания (Rollany Н., Degre, Н., 1982). Оценку распластывания проводили путем подсчета числа распластанных и нераспластанных макрофагов. Результаты теста распластывания мононуклеаров оценивали при

подсчете 100 клеток. Определяли процентное соотношение распластанных форм к общему числу прикрепившихся клеток.

Активность лизосом в клетках СМФ изучали по методу (Фрейдпин И.С. с соавт., 1976), основанному на инкубации монослоя фагоцитов в среде, содержащей флюоресцирующий краситель - акридиновый оранжевый. При оценке результатов данного теста определяли лизосомальную активность -число макрофагов, имеющих лизосомальные гранулы

(акридиноранжпозитивные клетки). Также учитывали процентное содержание клеток с разной степенью лизосомальной активности. Для этого оценку проводили визуально полуколичественным методом с вычислением среднего цитохимического коэффициента (СЦК) Astaldi и Verga.

Для оценки поглотительных и киллинговых свойств мононуклеаров в качестве фагоцитируемых объектов выступали частицы полистеролового латекса и суточная культура St.aureus (штамм АТСС 25923). Для оценки фагоцитарной способности макрофагов (Фримель Г., 1987) подсчитывали фагоцитарный показатель (процент фагоцитирующих клеток), фагоцитарный индекс (количество частиц латекса или St.aureus, поглощенных 100 клетками в перерасчете на 1 клетку) и киллинг (количество убитых микроорганизмов, поглощенных 100 макрофагами в перерасчете на 1 клетку).

Постановку НСТ-теста осуществляли в модификации Виксмана М.Е. и Маянского А.Н. (1979) в 2х вариантах - спонтанном и индуцированном. При постановке индуцированного НСТ-теста в качестве стимулятора использовали инертные частицы латекса диаметром 1,2 мкм (Бумагина Т.К., Шмелев Е.И., 1981). При учете реакции определяли процент НСТ-позитивных клеток. Кроме того, рассчитывали функциональный резерв макрофагов (коэффициент стимуляции НСТ-теста), который определяли как частное от деления числа индуцированных на число спонтанных НСТ-положительных клеток.

Для оценки способности фагоцитов к образованию внеклеточных ловушек (МВЛ) в качестве тестовой культуры использовали живую суточную культуру клинического штамма St. aureus (штамм АТСС 25923). Вышеназванный способ позволяет оценить число макрофагальных ловушек (количество МВЛ из 100 подсчитанных клеточных структур), число активных внеклеточных ловушек (количество МВЛ, содержащее бактериальные клетки в сетеподобных структурах из 100 подсчитанных фагоцитов) и индекс МВЛ (число бактерий в 100 подсчитанных ловушках в перерасчете на 1 структуру).

Цитохимические методы исследования. Для оценки содержания кислой фосфатазы в мононуклеарах использовали реакцию азосочетания Burstone. Исследование активности миелопероксидазы оценивали по методу Лилли Р. (1980). Для комплексной оценки активности кислородзависимого метаболизма клеток СМФ нами было проведено исследование интенсивности цитохимической реакции на сукцинатдегидрогеназу по методу Хейхоу Ф.Г.Дж. и Кваглино Д. (1983). Определение а-глицерофосфатдегидрогеназы производили по методу Нарциссова Р.П. (1969). Выявление гликогена осуществляли с помощью ШИК-реакции по Мак-Манусу (1980).

Для количественного выражения результатов всех цитохимических исследований ферментов и гликогена использовали средний цитохимический коэффициент: СЦК=0хА+1*Б+2хВ+ЗхГ/п, где 0,1,2,3 - интенсивность содержания фермента или гликогена в клетке; А, Б, В, Г - число клеток с разным уровнем ферментной активности; п — общее количество учтенных клеток.

Метод длительного культивирования (Патент РФ на изобретение №2460783 от 10 сентября 2012 г.). В качестве исследуемого материала выделяли перитонеальные макрофаги. Проводили их культивирование в течение 7 суток. Выделенные мононуклеарами цитокины добавляли к моноцитам крови, совместное инкубирование которых производили в течение последующих 2 суток. Затем производили комплексную оценку морфофункционального состояния моноцитов периферической крови.

Статистические методы исследования. Статистическая обработка производилась с использованием программного обеспечения Microsoft Excel 2007 и лицензированного пакета прикладных компьютерных программ SPSS 17.0. При обработке полученных данных использовались методы вариационной статистики (определение среднего арифметического и его ошибки (М±ш)). Достоверность результатов оценивалась с помощью непараметрического критерия Манна - Уитни (Реброва О.Ю., 2002). При этом достоверными считали различия, где уровень значимости (р) был меньше 0,05 (Платонов А.Е., 2000).

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Определение содержания клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартмеитов

Известно, что количественный состав фагоцитирующих клеток играет важную роль, обусловливающую адекватность клеточных реакций (Ильин Д.А., Архипов С.А., 2005).

В результате проведенного исследования нами установлено, что у потомства самок крыс как опытных, так и- контрольной групп в ходе постнатального онтогенеза происходит постепенное увеличение числа макрофагов различных компартментов (таблица 1,2, рис. 1).

Таблица 1

Содержание перитонеальных и альвеолярных макрофагов у экспериментальных _____животных (М±гп)_

грума' /день Число клеточных элементов СМФ в единице объема

Перитонеальные макрос >аги (хЮ6 / мл) Альвеолярные макрофаги (хЮ6/ орган)

1 15 30 45 60 1 15 30 45 60

К 2,95± 0,44 3,25 ± 0,05 5,28 ± 0,52 9,74 ± 0,71 12,81 ± 1,03 0,98 ± 0,11 2,48 ± 0,37 3,77 ± 0,54 5,35 ± 0,65 6,29 ± 0,47

Ol 1,99 ± 0,18 2,58 ± 0,05* 2,92 ± 0,41 * 3,21 ± 0,91 * 5,96 ± 0,93* 0,54 ± 0,15 2,03 ± 0,21 2,33 ± 0,18* 3,15 ± 0,39* 4,55 ± 0,27*

02 1,41 ± 0,09* 1,97 ± 0,15 * 2,85 ± 0,68* 4,08 ± 0,89* 6,04 ± 0,77* 0,32 ± 0,19* 1,51 ± 0,32 1,97 ± 0,48 2,85 ± 0,5* 3,12 ± 0,43*

# ---——----*--1--Î--Z1Z.-

- результаты статистически достоверны по сравнению с контролем (р<0,05)

В то же время, как видно из таблицы, у подопытных животных на всех сроках исследования количество мононуклеаров снижено по сравнению с контролем.

Общеизвестно, что печени принадлежит важная роль в механизмах защиты плода (Огир-ри.чо е1 а1., 2005). Печень является первым органом у плода на пути возбудителя (Хлыстова З.С., 1987; Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф., 2002), и от ее морфофункционального состояния зависит функциональное состояние системы резистентности плода.

1 день 15 день Ждень 45 день ?>0дёнь

Рис. 1. Содержание клеток Купфера у экспериментальных животных (* 106)

(* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Полученные в результате эксперимента данные также свидетельствуют о том, что для опытных животных характерно уменьшение числа моноцитов крови на разных этапах постнатального развития (таблица 2). Снижение содержания моноцитов сопровождается достоверным уменьшением числа органо- и тканеспецифических макрофагов. Исключение составили лишь клетки Купфера, содержание которых у подопытных крысят существенно увеличилось по сравнению с контролем.

Из всех изученных компартментов системы мононуклеарных фагоцитов увеличение содержания клеток Купфера, скорее всего, связано с тем, что при патологии печени матери в организме плода в первую очередь нагрузка приходится на одноименный орган (Брюхин Г.В., 1994; Евченко Е.В., 2001), следовательно, именно ему необходима усиленная защита, обеспечивающаяся рекрутированием дополнительного количества макрофагов, где они и превращаются в клетки Купфера. Можно предположить, что такое рекрутирование моноцитов/макрофагов в печень, прежде всего, происходит из-за формирования высокого градиента хемааттрактантов для этих клеток в зоне локализации активированных клеток Купфера (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989).

Таблица 2

Содержание моноцитов периферической крови у экспериментальных

животных(М±ш)

группа^ ^день Число клеточных элементов СМФ в единице объема

Моноциты периферической кпови (х Ю5/мл)

1 15 30 45 60

К 2,68 ± 0,21 3,37 ±0,13 3,82 ± 0,21 5,44 ±0,12 7,09 ±0,16

01 2,25 ± 0,02 2,87 ± 0,08 * 2,93 ± 0,13 * 3,65 ±0,76* 4,55 ± 0,93 *

02 1,09 ±0,13* 1,66 ±0,22* 2,08 ± 0,34 * 2,88 ±0,35 * 2,73 ± 1,13 *

(* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Таким образом, результаты данной серии исследований позволяют сделать заключение о перераспределения клеток СМФ в организме подопытного потомства. При этом можно заметить, что уменьшение содержания исследуемых макрофагов в подопытных группах во многом зависит от снижения числа моноцитов периферической крови, являющихся предшественниками зрелых органо- и тканеспецифических макрофагов. 2. Исследование поверхностно-рецепторного аппарата макрофагов экспериментальных животных

Одним из важных показателей течения любого патологического процесса в организме является интенсивность подвижности фагоцитов. Помещенные в лунку макрофаги проявляют способность к случайной миграции, образуя вокруг лунки равномерную кольцевую зону.

Во всех экспериментальных группах в процессе постнатального онтогенеза спонтанная миграционная активность макрофагов постепенно возрастает, достигая максимальных величин к 60-му дню онтогенеза (рис. 2).

8 Т "Контроль ЕЗОпыт I И Опыт 2

15 день 30 день 45 день 60 день

Рис. 2. Динамика изменений спонтанной миграции перитонеальных макрофагов экспериментальных животных (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) Однако замечено, что процент угнетения спонтанной миграционной активности легочных фагоцитов обеих опытных групп достигает наибольшей выраженности уже к 15-му дню развития потомства. На 30-ый же день данный показатель снижается практически в 2 раза, но к 45-му дню снова происходит усиление угнетения спонтанной миграции, которое и продолжается вплоть до 60-го дня онтогенеза (рис. 3).

1.........!-

~~ 33.79

1 В02

20 30 40

Рис. 3. Процент угнетения спонтанной миграции легочных макрофагов

(* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Исследование индекса хемотаксиса клеток СМФ выявило увеличение данного показателя у всех экспериментальных групп в процессе постнатального развития. Однако у опытного потомства наблюдается снижение исследуемого показателя по сравнению с контрольными значениями. Причем у всех макрофагов максимальные различия наблюдаются на 60-ый день постнатального развития (рис. 4).

Выявленное в ходе эксперимента угнетение спонтанной миграционной и хемотаксической активности клеток системы мононуклеарных фагоцитов у потомства самок крыс с экспериментальной патологией печени различного генеза может быть связано с разрушением весьма чувствительного мембранного компонента клеток и рецепторного аппарата на их поверхности.

1.85 2:09

141 / 1,5

Ц12

ГоГ^ '••■А'' — — 02

094

15 30 45 60

Рис. 4. Активность хемотаксиса альвеолярных макрофагов (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) Адгезия фагоцитирующих клеток к субстрату является одним из проявлений их активации. Она необходима для осуществления всех стадий фагоцитоза, начиная от распластывания клеток СМФ на поверхности объекта-мишени и заканчивая перевариванием субстрата (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989; Луговская С.А., 1997).

В результате проведенного исследования нами установлено, что процент макрофагов, подвергшихся адгезии при 30-минутном культивировании у всех экспериментальных животных после рождения постепенно увеличивается, достигая максимума к 60-му дню жизни (рис. 5).

Рис. 5. Адгезивная способность перитонеальных макрофагов, подвергшихся адгезии после 30-минутной инкубации (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Анализ влияния патологии гепатобилиарной системы матери на адгезивные свойства клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства показал угнетение исследуемых характеристик у обеих опытных групп по сравнению с контрольными значениями соответствующего возраста. Так максимальное достоверное снижение адгезивной способности (практически в 2 раза) перитонеальных макрофагов после 30-ти минутной экспозиции наблюдается у 60-дневных крысят первой опытной группы.

При исследовании другого показателя функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов - способности к распластыванию была отмечена следующая закономерность.

В ходе исследования замечено увеличение числа контрольных распластанных клеток в процессе онтогенеза при 60-ти минутном культивировании (рис. 6). Однако обращает на себя внимание, что на 45-ый и 60-ый день развития у макрофагов подопытных групп обнаруживается тенденция к снижению пластических свойств.

90 80 70 60 50 40 30

79.15 _____

69.22

д---- * — — * —« + # - — ^

й.....Г * * ♦

-К

• 01 ■ 02

1 день 15 день 30 день 45 день 60 день

Рис. 6. Способность перитонеальных макрофагов к распластыванию при 60-ти

минутной инкубации (%) (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Кроме того было выявлено, что способность к распластыванию макрофагов крысят контрольной группы значительно превышает таковую в опыте при 60-ти минутной экспозиции.

3. Лизосомальная активность мононуклеарных фагоцитов различных комнартментов

Неспецифическая резистентность организма человека во многом зависит от характера фагоцитарных свойств мононуклеаров, тогда как эффективность фагоцитоза, прежде всего, определяется наличием в цитоплазме лизосом (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989).

В результате проведенного нами исследования было установлено, что лизосомальная активность мононуклеаров различных компартментов у всех экспериментальных животных после рождения постепенно увеличивается, достигая максимума к 60-му дню онтогенеза (рис. 7, рис. 8).

Однако обращает на себя внимание то обстоятельство, что лизосомальная активность альвеолярных макрофагов выше, чем в фагоцитах других компартментов.

Анализ влияния поражения гепатобилиарной системы матери на лизосомальную активность мононуклеаров потомства выявил угнетение исследуемого параметра в макрофагах подопытных животных.

Рис. 7. Лизосомальная активность (%) макрофагов перитонеального экссудата потомства экспериментальных животных (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

1 15 30 45 60

Рис. 8. Лизосомальная активность (%) альвеолярных макрофагов потомства экспериментальных животных (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) Следствием вышеописанных изменений явилось достоверное уменьшение среднего цитохимического коэффициента в обеих опытных группах по сравнению с контролем на всех сроках исследования (рис. 9).

1день

бОдень

15день

........

45день

ЗОдень

Рис. 9. Средний цитохимический коэффициент лизосомальной активности перитонеальных макрофагов (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

4. Оценка активности лизосомальных ферментов мононуклеарных фагоцитов

Физиологическую стимуляцию макрофагов отражает изменение активности кислой фосфатазы, являющейся маркерным лизосомальным гидролитическим ферментом.

В ходе проведенного эксперимента было замечено, что средний цитохимический коэффициент при исследовании реакции на кислую фосфатазу во всех мононуклеарах в ходе постнатального развития постепенно увеличивается, достигая максимальных значений к 60-му дню.

Исследование влияния патологии печени матери на активность кислой фосфатазы в клетках потомства показало угнетение данного показателя по сравнению с контрольным потомством (рис. 10).

Рис. 10. Интенсивность цитохимической реакции на кислую фосфатазу в перитонеальных макрофагах (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) Так как кислая фосфатаза также является ферментом, участвующим в деградации углеводных субстратов (Плехова Н.Г. с соавт., 2007; Цыганкова О.В. с соавт., 2009), то ее снижение в макрофагах потомства матерей с поражением печени может быть связано с интенсивным расходованием ее для утилизации углеводов в клетках опытных групп.

Секреция миелопероксидазы является важнейшим фактором бактерицидности и патогенности макрофагов, обеспечивающим антимикробную резистентность организма (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989; Орлова Е.Г., Ширшев C.B., 2007).

Обращает на себя внимание то обстоятельство, что наибольшая активность миелопероксидазы наблюдается в моноцитах периферической крови (рис. 11).

Рис. 11. Содержание пероксидазопозитивных моноцитов крови (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Однако можно заметить, что для моноцитов периферической крови опытного потомства характерно наименьшее угнетение пероксидазной активности по сравнению с контрольными образцами. Таким образом, полученные в ходе эксперимента данные выявили снижение активности миелопероксидазы в моноцитах/макрофагах потомства матерей с патологией печени различной этиологии.

5. Оценка внутриклеточной кислородзависимой метаболической активности мононуклеарных фагоцитов различных компартментов

Наиболее простым и в тоже время очень надежным в оценке «респираторного взрыва» фагоцитирующих клеток является НСТ-тест.

Итак, в результате проведенного эксперимента было обнаружено, что в ходе постнатального онтогенеза в макрофагах всех экспериментальных групп активность НСТ-теста постепенно увеличивается, достигая наибольших величин к 60-му дню развития (рис. 12).

1 сутки 15 сутки 30 сутки 45 сутки 60 сутки

Рис. 12. Активность спонтанного НСТ-теста (%) в моноцитах периферической

крови.

(* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

Анализ влияния патологии гепатобилиарной системы матери на активность спонтанного НСТ-теста в макрофагах потомства выявил угнетение исследуемого показателя у крысят от самок с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза.

Активированный тест с нитросиним тетразолием позволяет оценить внутренний функциональный метаболический резерв кислородзависимого механизма бактерицидности фагоцитов.

Анализ неблагоприятного влияния поражения гепатобилиарной системы матери на активность стимулированного НСТ-теста в мононуклеарах потомства выявил угнетение исследуемого показателя у крысят обеих опытных групп по сравнению с контрольными величинами. Причем наибольшее снижение индуцированной кислородзависимой метаболической активности наблюдается на более поздних сроках исследования (рис. 13).

Анализ функционального резерва бактерицидной активности клеток системы мононуклеарных фагоцитов показал, что коэффициент стимуляции нет -теста во всех макрофагах контрольной группы превышает 100%.

Однако обращает на себя внимание тот факт, что в большинстве случаев у подопытных животных активность стимулированного НСТ-теста либо

практически не отличается от спонтанной активности, либо даже снижается по сравнению с ней (рис. 14).

20.51

1 сутки 15 30 45 60 сутки сутки сутки сутки

Рис. 13. Активность стимулированного НСТ-теста (%) в клетках Купфера экспериментальных животных (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

■ К ••■0--О1 02

170

У--.

1 15 30 45 60

Рис. 14. Коэффициент стимуляции НСТ-теста в клетках Купфера

экспериментальных животных (%) (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) 6. Оценка фагоцитарной активности макрофагов различных компартментов

Процесс фагоцитоза является одним из важнейших защитно — приспособительных механизмов живого организма против различных патогенных бактерий.

бОдень

45деиь ао2

П01

ЗОдень щ, „ к

15день

¿_

О 2» 40 60 80 100

Рис. 15. Активность фагоцитоза St. aureus альвеолярными макрофагами на разных этапах раннего онтогенеза (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) В ходе проведенного исследования фагоцитарных свойств на модели поглощения St. aureus с возрастом отмечена тенденция к повышению

функциональной активности макрофагов различных компартментов всех экспериментальных групп в ходе онтогенеза (рис. 15, рис. 16).

Оценка влияния патологии печени матери на фагоцитарный показатель и фагоцитарный индекс мононуклеаров потомства выявила угнетение изучаемых показателей у крысят опытных групп.

■ К ЕЮ1 ао2

Рис. 16. Интенсивность фагоцитоза St. aureus альвеолярными макрофагами на разных этапах раннего онтогенеза (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) 7. Исследование ловушкообразующей способности мононуклеарных фагоцитов

Так как образование макрофагальных внеклеточных ловушек является дополнительным механизмом, обеспечивающим защиту макроорганизма от бактериальной инвазии, нами производилась оценка данной способности мононуклеаров на примере альвеолярных и перитонеальных макрофагов на 30-ый день онтогенеза.

Детальное микроскопирование позволило установить, что число макрофагальных внеклеточных ловушек, образованных фагоцитами контрольной группы животных, оказалось выше аналогичного показателя в опыте (таблица 3). Также как видно из таблицы, у подопытных животных имеет место угнетение числа активных ловушек, а также снижение индекса макрофагальных внеклеточных структур.

Таблица 3

Число макрофагальных внеклеточных ловушек, активных ловушек и индекс

МВЛ в альвеолярных и перитонеальных макрофагах потомства (М ± т)

группа Альвеолярные мак эофаги Перитонеальные макрофаги

Число МВЛ Индекс МВЛ Число активных МВЛ Число МВЛ Индекс МВЛ Число активных МВЛ

Контроль 14,04 ± 1,46 ^ н- 76,91 ± 6,08 13,17± 1,97 ""* н- 44,98 ± 5,11

Опыт 2 8,19 ± 0,78* 2,15 ± 0,27* 51,14 ± 4,29* 8,22 ± 0,63 3,34 ± 0,55* 23,69 ± 1,18*

(* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) 8. Оценка суммарной секреторной активности макрофагов

С целью определения суммарной секреторной активности макрофагов по

выработке цитокинов в условиях длительного культивирования нами

производилась комплексная оценка морфофункционального состояния моноцитов крови, подвергшихся инкубации совместно с цитокинами макрофагов.

В результате проведенного эксперимента нами была замечена следующая закономерность: при культивировании моноцитов периферической крови без супернатанта перитонеальных макрофагов абсолютно все исследуемые показатели фагоцитов снижены по сравнению с таковыми в группах, инкубируемых с супернатантом мононуклеаров брюшной полости (рис. 17, 18, 19, таблица 4).

93.06

92.31

Бе? цитокинов С контрольным» С опытными цитокинами цитокинами

Рис. 17. Жизнеспособность моноцитов периферической крови (%) (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) Однако замечено, что при инкубации моноцитов с цитокинами как интактных, так и опытных макрофагов перитонеального экссудата значения изучаемых показателей в клетках потомства матерей с Б-галактозаминовым поражением печени увеличиваются по сравнению с группой, культивируемой без добавления супернатанта мононуклеаров. В то же время обращает на себя внимание, что значения исследуемых параметров в клетках подопытного потомства, культивируемых с опытными цитокинами, достигают аналогичных результатов группы, инкубируемой совместно с контрольным супернатантом (рис. 17, таблица 4), а в ряде случаев даже превышают контрольные значения (рис. 18, рис. 19).

Таблица 4

Характеристика фагоцитарных свойств моноцитов периферической крови на

Группа Фагоцитарный показатель Фагоцитарный индекс

Без цитокинов С контрольными цитокинами С опытными цитокинами Без цитокинов С контрольными цитокинами С опытными цитокинами

Опыт 2 53,17±4,06 * 92,88±6,52 90,96±6,04 2,39±0,17 * 11,01±1,69 10,12±1,04

(* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) Таким образом, нами установлено, что перитонеальные макрофаги потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы, вызванным введение гепатотропного яда О (+)-галактозамина гидрохлорида, проявляют в условиях длительного культивирования большую секреторную активность по сравнению с таковой в контроле.

Без цитокинов С С опытными

контрольными цнтокинами штжинамн

Рис. 18. Содержание акридиноранжпозитивных моноцитов крови (%) (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05)

1. '9

С опытными цнтокинами

С контрольными цнтокинами

Без цитокинов

Рис. 19. Интенсивность цитохимической реакции на кислую фосфатазу (СЦК) в моноцитах периферической крови (* - результаты статистически достоверны по сравнению с контролем, р<0,05) На основании данных литературы и результатов собственных исследований механизм выявленных изменений морфофункционального состояния мононуклеаров опытного потомства можно представить следующим образом. Известно, что различные изменения гомеостаза материнского организма сказываются на развитии плода, обусловливая врожденные уродства и даже его гибель, а у потомства, родившегося живым, - существенные изменения обмена веществ (Савченков Ю.И., 1981). Общепризнанно, что печень в постнатальном онтогенезе является основным органом, выполняющим одновременно метаболические, экскреторные и барьерные функции (Арцимович Н.Г. с соавт., 1993). Введение гепатотропного яда Ъ(+) -галактозамина гидрохлорида и супернатанта культуры Е.соН вызывает у самки угнетение основных функций печени, а именно дезингексикационной, белково-синтетической, а также нарушение углеводного и липидного обмена веществ (Сугробова Н.П. с соавт., 1992; Подымова С. Д., 1993). Нарушение вышеназванных функций печени неизбежно приводит к накоплению в организме матери токсичных метаболитов и шлаков, которые вызывают морфофункциональные нарушения различных органов и систем организма матери, а именно иммунной, кроветворной, эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной, что приводит к изменениям межсистемных, межорганных, межтканевых, межклеточных и клеточно-матриксных взаимоотношений (Азизова Ф.Х. с соавт., 2006). Продукты обмена веществ поступают в общий кровоток и могут оказывать негативное действие на органы и системы. Из крови продукты превращения могут захватываться почками, легкими и другими

органами, а также повторно печенью (Зобнин Ю.В., 2006), вызывая в них изменения.

По данным литературы известно, что при различных заболеваниях печени развиваются изменения клеточного и гуморального иммунитета (Майер К.П., 1999). Так супернатант культуры E.coli и гепатотропный яд D(+) — галактозамин гидрохлорид обладают гепатотоксическим действием, связанным с повреждающими эффектами макромолекул и других метаболитов на гепатоциты. Наименее изученным механизмом гепатотоксичности является аутоиммунный процесс, который в некоторых случаях может стать преобладающим. Повреждения печени в таком случае сопровождаются нарушениями не только гуморального, но и клеточного звена иммунитета (Александрова И.В., 2009). Вызвано это тем, что индукция мембранных ферментов может привести к образованию аутоантител и повреждению гепатоцитов. Возможно появление антител к поврежденным токсическим агентом органеллам клетки (Зобнин Ю.В., 2006).

Как известно, различные патологические процессы, протекающие в организме матери, приводят к увеличению проницаемости гематоплацентарного барьера (Савченков Ю.И., Лобынцев К.С., 1980). Вследствие данного нарушения из крови матери в организм плода беспрепятственно будут проходить конечные и промежуточные продукты обмена веществ, а также сенсибилизированные лимфоциты, циркулирующие иммунные комплексы, специфические аутоантитела (Крыжановский Г.Н. с соавт., 1980; Аверкина Р.Ф., 1985). Известно, что плацента препятствует-прохождению ряда материнских клеток и цитотоксических антител к плоду, что зависит от состояния синцитиотрофобласта. В случае его повреждения, например, в результате отложения иммунных комплексов, существенно изменяются и протеолитические свойства трофобласта, благодаря которым осуществляется инактивация чужеродных белков, связывание и нейтрализация антител системы ABO крови матери, антилейкоцитарных и других антител. Нарушается избирательное распознавание различных классов иммуноглобулинов матери и секреция их в кровоток плода, вследствие чего резко ограничивается иммуномодулирующее эндогенное влияние материнского организма и задерживается формирование гуморального звена иммунитета у плода (Ёвсюкова И.И., 2001). В то же время при токсическом гепатите в органах иммунной системы отмечаются признаки антигенной активации, обусловленные как непосредственным действием токсического агента на лимфоидную ткань, так и реакцией иммунной системы в ответ на'усиление процессов альтерации во внутренних органах, в первую очередь печени, как органа-мишени. Показано, что токсическое поражение печени приводит к дисбалансу основных звеньев иммунитета (Сивоконюк О.В., 2010).

поражению одноименного органа у потомства (Брюхин Г.В., 1994; Евченко Е.В., 2001), что еще больше усугубляет и так измененные условия внутриутробного развития плода Данное нарушение обусловливает изменение процессов гистогенеза, органогенеза и системогенеза, что, в свою очередь, приводит к нарушению морфофункционального становления многих систем жизнеобеспечения развивающегося потомства, в том числе кроветворной и системы мононуклеарных фагоцитов.

Нами установлено, что у потомства самок крыс с экспериментальной патологий гепатобилиарной системы различной этиологии происходит нарушение морфофункционального состояния макрофагов различных компартментов. В процессе онтогенеза нами замечено максимальное угнетение функции макрофагов опытного потомства, что связано с прогрессированием нарушений процессов межклеточной, межтканевой и межорганной кооперации.

Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о присутствии угнетающего эффекта патологии печени матери, обусловленной введением супернатанта культуры Е.соП и Б(+) - галактозамина гидрохлорида, на морфофункциональное состояние и стимулирующего эффекта на цитокинпродуцирующую способность клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства.

В целом, полученные данные научно обосновывают положение о том, что потомство матерей с хронической патологией гепатобилиарной системы является иммунологически компрометированным и диктуют необходимость выделения таких детей в группу риска.

ВЫВОДЫ

1. Экстрагенитальная патология матери, обусловленная введением супернатанта культуры Е.соП и 0(+) - галактозамина гидрохлорида приводит к изменению функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства.

2. Хроническая экспериментальная патология гепатобилиарной системы матери вызывает количественное перераспределение макрофагов различных компартментов потомства: увеличение содержания клеток Купфера и уменьшение количества мононуклеаров других органов и тканей.

3. Экспериментальное хроническое поражение печени матери различной этиологии обусловливает неспецифические функциональные изменения макрофагов различных компартментов потомства, что проявляется в угнетении локомоторных функций, снижении адгезивных и пластических свойств, депрессии кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма, а также угнетении фагоцитарных и бактерицидных свойств.

4. Экстрагенитальная патология матери, обусловленная введением 0(+) -галактозамина гидрохлорида приводит к нарушению ловушкообразующей способности перитонеальных и альвеолярных макрофагов потомства.

5. Экспериментальное хроническое токсическое поражение печени матери обусловливает у потомства подопытных животных увеличение суммарной

секреторной активности перитонеальных макрофагов в условиях культивирования.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шаврина, Е. Ю. Влияние неблагоприятного воздействия поражения печени матери на морфофункциональные особенности клеток системы мононуклеарных фагоцитов у потомства в эксперименте / С. В. Барышева, Е. Ю. Шаврина // «Роль патологии печени матери в нарушении развития реактивности и резистентности потомства в условиях эксперимента»: сб. научных трудов / под ред. Г.В. Брюхина. - Челябинск : ЧГМА, 2009. - Вып. 2. -С. 128-138.

2. Шаврина, Е. Ю. Влияние экспериментального поражения печени матери на становление клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства / Е. Ю. Шаврина // Студент и научно-технический прогресс : тез. докл. XXXIII студенч. науч. конф. / отв. за вып. Л. И. Сахно ; Челяб. гос. ун-т. - Челябинск : Изд-во Челяб. гос. ун-та, 2009. — С. 14-16.

3. Шаврина, Е. Ю. Морфофункциональная характеристика нейтрофилов периферической крови потомства самок крыс с хроническим поражением печени / Н. В. Невзорова, Е. Ю. Шаврина // Материалы I международной (VIII итоговой) научно-практической конференции молодых ученых. - Челябинск : Челябинская государственная медицинская академия, 2010. - С. 162-164.

4. Шаврина, Е. Ю. Роль патологии печени матери в нарушении морфофункционального состояния моноцитов периферической крови потомства (экспериментальное исследование) /Е. Ю. Шаврина, Н. В. Невзорова // Материалы I международной (VIII итоговой) научно-практической конференции молодых ученых. — Челябинск : Челябинская государственная медицинская академия, 2010. - С. 273-275.

5. Шаврина, Е. Ю. Морфофункциональная характеристика перитонеальных макрофагов у потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы в различные сроки постиатального онтогенеза / Е. Ю. Шаврина, Г. В. Брюхин // Медицинский академический журнал. - 2010. - Т. 10 (№ 5). - С. 80.

6. Шаврина, Е. Ю. Роль патологии печени матери в нарушении реакций кислородзависимого метаболизма в клетках Купфера у потомства в различные сроки постнатального развития / Е. Ю. Шаврина, F. В. Брюхин // Физиологические механизмы адаптации человека: материалы международной научно-практической конференции. — Тюмень : Лаконика, 2010. — С. 89-92.

7. Шаврина, Е. Ю. Сравнительная оценка количественного соотношения макрофагов различных компартментов у потомства животных с поражением печени различного генеза (экспериментальное исследование) / Е. Ю. Шаврина // Материалы II международной (IX итоговой) научно-практической конференции молодых ученых. — Челябинск : Челябинская государственная медицинская академия, 2011.-С. 287-291.

8. Шаврина, Е. Ю. Исследование поверхностно-рецепторного аппарата мононуклеарных фагоцитов различных компартментов у потомства матерей с экспериментальным поражением гепатобилиарной системы / Е. Ю. Шаврина, Г. В. Брюхин // Вестник Уральской медицинской академической науки.-2011.-№ 2/1 (35). - С. 76-77.

9. Шаврина, Е. Ю. Морфофункциональная характеристика клеток Купфера у потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы / Е. Ю. Шаврина, Г. В. Брюхин // Вестник международной академии наук экологии и безопасности жизнедеятельности. -2011. - Т. 16 (№ 3). - С. 201-206.

10. Шаврина, Е. Ю. Влияние патологии гепатобилиарной системы матери на реактивность мононуклеарных фагоцитов различных компартментов у потомства / Е. Ю. Шаврина // Фундаментальные исследования. -2011.-№ 12 (ч. 4).-С. 716-722.

11. Шаврина, Е. Ю. Возрастная характеристика миграционной активности перитонеальных макрофагов и моноцитов крови потомства матерей с хронической патологией печени / Е. Ю. Шаврина // Регенеративная биология и медицина: сборник научных трудов Всероссийской конференции. - М. : Нарконет, 2011.-С. 164-165.

12. Шаврина, Е. Ю. Оценка цитохимического и морфофункционального состояния альвеолярных макрофагов у потомства животных с хронической патологией печени / Е. Ю. Шаврина, Г. В. Брюхин // Морфология. - 2011. - Т. 140 (№ 5). - С. 64.

13. Шаврина, Е. Ю. Оценка фагоцитарных и бактерицидных свойств моноцитов периферической крови потомства животных с патологией гепатобилиарной системы различной этиологии / Г. В. Брюхин, Е. Ю. Шаврина // Вестник Южно-Уральского государственного университета. Сер. Образование, здравоохранение, физическая культура. — 2011. — Вып. 29. - №39 (256). - С. 85-89.

14. Шаврина, Е. Ю. Роль поражения гепатобилиарной системы матери в развитии гипохромной анемии у потомства на разных этапах постнатального онтогенеза (экспериментальное исследование) / Е. Ю. Шаврина, Т. Д. Мальгина // Материалы III международной (X итоговой) научно-практической конференции молодых ученых. - Челябинск : Челябинская государственная медицинская академия, 2012. - С. 375-379.

15. Шаврина, Е. Ю. Влияние экспериментальной патологии гепатобилиарной системы матери на функциональную активность альвеолярных и перитонеальных фагоцитов потомства / Е. Ю. Шаврина // Вестник Уральской медицинской академической науки. — 2012. — № 3 (40). -С. 33-36.

16. Шаврина, Е. Ю. Сравнительная характеристика цитохимического состояния перитонеальных и альвеолярных макрофагов потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени / Г. В. Брюхин, Е. Ю. Шаврина // Вестник Южно-Уральского государственного

университета. Серия образование, здравоохранение, физическая культура. - 2012. - Вып. 32. - № 28 (287). - С. 85-88.

Изобретения по теме диссертации: 1. Патент РФ на изобретение № 2460783 Способ оценки суммарной секреторной активности макрофагов различных компартментов по выработке цитокинов в условиях длительного культивирования / Г. В. Брюхин, Е. Ю. Шаврина, С. В. Барышева. - № 2011133138; заявл. 05.08.2011; опубл. 10.09.2012, Бюл. № 25.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шаврина, Екатерина Юрьевна

Список принятых сокращений

Введение

Глава I. Обзор литературы: «Современные представления о системе мононуклеарных фагоцитов»

1.1. Становление системы мононуклеарных фагоцитов в антенатальном периоде

1.2. Активация и функциональная гетерогенность клеток СМФ

Глава II. Материалы и методы исследования

2.1. Общая характеристика экспериментальных животных

2.2. Экспериментальные модели хронических поражений печени

2.2.1. Модель хронического аутоиммунного поражения гепатобилиарной системы с помощью фильтрата Е.соН

2.2.2. Модель хронического поражения гепатобилиарной системы с помощью Б - галактозамина

2.3. Описание методов исследования

2.3.1. Методы выделения клеточных элементов СМФ различных компартментов

2.3.2. Получение монослоя клеток СМФ

2.3.3. Получение мазков клеток СМФ

2.3.4. Иммунологические методы исследования

2.3.4.1. Определение жизнеспособности клеточных элементов

2.3.4.2. Определение количества макрофагов

2.3.4.3. Оценка локомоторных функций клеток СМФ

2.3.4.4. Определение адгезии и распластывания клеток СМФ

2.3.4.5. Оценка лизосомальной активности клеток СМФ

2.3.4.6. Исследование фагоцитарной и бактерицидной активности

2.3.4.7. Оценка внутриклеточного кислородзависимого метаболизма макрофагов

2.3.4.8. Определение макрофагальных внеклеточных ловушек

2.3.5. Цитохимические методы исследования

2.3.5.1. Реакция на выявление пероксидазы по Лелле

2.3.5.2. Реакция на выявление сукцинатдегидрогеназы по Кваглино и Хейхоу

2.3.5.3. Реакция на кислую фосфатазу (реакция азосочетания Burstone)

2.3.5.4. Определение а-глицерофосфатдегидрогеназы по методу Нарциссова Р.П. (1969)

2.3.5.5. Выявление гликогена с помощью ШИК-реакции по Мак-Манусу

2.3.6. Метод длительного культивирования макрофагов

2.3.7. Статистические методы исследования

Глава III. Полученные результаты и их обсуждение

3.1. Содержание клеток СМФ

3.2. Исследование поверхностно-рецепторного аппарата макрофагов

3.2.1. Оценка локомоторных функций клеток СМФ

3.2.2. Анализ распластывания и адгезивных свойств макрофагов экспериментальных животных

3.3. Лизосомальная активность мононуклеарных фагоцитов различных компартментов экспериментальных животных

3.4. Оценка лизосомальных ферментов мононуклеарных фагоцитов различных компартментов

3.4.1. Исследование активности кислой фосфатазы

3.4.2. Оценка пероксидазной активности клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов

3.5. Оценка внутриклеточной кислородзависимой метаболической активности мононуклеарных фагоцитов различных компартментов

3.5.1. Исследование спонтанного НСТ-теста

3.5.2. Исследование стимулированного НСТ-теста

3.5.3. Оценка содержания сукцинатдегидрогеназы

3.6. Оценка фагоцитарной активности макрофагов различных компартментов

3.6.1. Исследование фагоцитоза частиц латекса

3.6.2. Исследование фагоцитоза суточной культуры St. aureus

3.7. Исследование внутриклеточной бактерицидности мононуклеарных фагоцитов

3.8. Исследование состояния энергетического аппарата мононуклеаров

3.8.1. Оценка содержания альфа-глицерофосфатдегидрогеназы

3.8.2. Оценка содержания гликогена в макрофагах различных компартментов

3.9. Исследование ловушкообразующей способности мононуклеарных фагоцитов

ЗЛО. Оценка суммарной секреторной активности перитонеальных макрофагов по выработке цитокинов в условиях длительного культивирования

Глава IV. Заключение

Выводы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль хронического поражения печени самок крыс в нарушении морфофункционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов потомства"

Актуальность исследования. Согласно результатам Всероссийской переписи населения России 2010 года, опубликованным Федеральной службой государственной статистики (Росстат), за 20 лет число жителей России сократилось более чем на 4 миллиона. Главной причиной уменьшения численности населения эксперты называют естественную убыль. Низкие показатели рождаемости, относительно высокая младенческая и детская смертность, рост распространенности хронических болезней у детей в России в значительной степени определяют величину репродуктивных потерь, негативно влияющих на развитие общества (Вельтищев Ю.Е., 2000). Именно поэтому воспроизводство здорового населения является ведущей проблемой современного общества. Заболевания гепатобилиарной системы во всем мире являются одной из актуальных медико-социальных проблем в связи с широкой распространенностью и высокой частотой развития хронических форм (Шахгильдян И.В. с соавт., 2003; Комиссаров С.Н., 2008). К числу приоритетных задач общества и государства относится обеспечение «здорового старта» в жизни ребенка, которое начинается задолго до его рождения. При этом особая роль отводится здоровью будущих матерей (Никольская Л.А., 2003). Важное место в течении беременности занимает экстрагенитальная патология (Шехтман М.М, 1987; Савченко И.М, 2002; Медведь В.И., 2004; Майоров М.В., Жученко С.И., 2009; Шехтман М.М., 2011), среди которой нередко встречаются заболевания гепатобилиарной системы, в том числе хронические гепатиты, холециститы и желчнокаменная болезнь (Медведь В.И., 2004; Медведь В.И, 2007).

Развитие и функция иммунной системы плода и новорожденного имеет характерные черты по сравнению с иммунитетом взрослого человека. Эти особенности основываются как на врожденных генетически обусловленных свойствах иммунитета, так и благодаря ограничению зародыша от внешней среды, осуществляемого плацентой как специфическим барьером

Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф., 2002). Однако вследствие ослабления здоровья матерей страдает и здоровье новорожденного (Савченков Ю.И., 1981; Белоусов Ю.Б., Леонова М.В., 2002; Сидорова И.С. с соавт., 2009).

В настоящее время одной из важных задач здравоохранения является углубленное изучение пато- и морфогенеза заболеваний известной этиологии, возникших как антенатально, так и постнатально, уточнение их частоты, морфологических проявлений и особенностей современного течения (Цинзерлинг A.B., 1993; Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф., 2002). Частым, но значительно менее изученным является влияние заболеваний организма матери на становление систем жизнеобеспечения плода (Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф., 2002).

Отсутствие четких данных о влиянии заболеваний гепатобилиарной системы матери на развитие реактивности и резистентиости плода, о реакции иммунной системы на данный стрессовый фактор, невозможность в полной мере оценить роль заболевания матери в развитии ранней постнатальной неполноценности и хронических заболеваний в отдаленный постнатальный период жизни, проследить их морфогенез и патогенез - все это определяет необходимость проведения экспериментальных исследований в данной области (Надеев А.П., 2006).

В настоящее время медиками очень активно изучается виляние патологий печени на течение беременности и здоровье будущего ребенка (Цогоева JIM. с соавт., 2010). Точные ответы даны пока не на все вопросы, однако уже есть некоторые важные данные. Так многочисленными исследованиями сотрудников кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии в экспериментальных условиях установлено, что патология гепатобилиарной системы матери неблагоприятно влияет на морфофункциональное становление различных органов и систем потомства, в том числе кроветворных и мононуклеарных (Брюхин Г.В., 1990-2012; Грачев А.Ю., 1990-2004; Евченко Е.В., 2001: Бояков A.A., 2004; Брюхин Г.В., Вторушина Е.В., 2004; Пашнина E.H.,

Брюхин Г.В., 2004; Ливень Г.В., Брюхин Г.В., 2004; Федосов A.A., Брюхин Г.В., 2004; Ильиных М.А., Брюхин Г.В., 2006; Леонов Н.В., Брюхин Г.В., 2007; Барышева C.B., Брюхин Г.В., 2008; Кузнецова А.Б., Брюхин Г.В., 2008; Переходнов A.C., Брюхин Г.В., 2008; Романов A.C., 2008; Бирюкова Т.И., Брюхин Г.В., 2009; Ыиколина О.В., Брюхин Г.В., 2009; Солянникова Д.Р., Брюхин Г.В., 2009; Смекалина О.Ю., 2011; Сизоненко М.Л., Брюхин Г.В., 2012).

Так как функциональные свойства клеток моноцитарного происхождения весьма многообразны, то их неполноценность, а именно нарушение функций, как следствие или причина патологического процесса, со временем неизбежно приводит к развитию серьезных инфекций, хронических воспалений, аутоиммунных заболеваний, а также к инициации и прогрессии опухолей, то есть формирует системное поражение организма (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989; Тотолян A.A., Фрейдлин И.С., 2000; Плехова Н.Г., Сомова Л.М., 2010).

В связи с вышеизложенным, целью настоящего исследования явился анализ морфофункционального становления клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы различной этиологии.

Для достижения поставленной цели нами были сформулированы следующие задачи:

1. Оценить функциональную активность моноцитов периферической крови потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза в различные сроки постнатального развития.

3. Изучить ловушкообразующую способность альвеолярных и перитонеальных макрофагов потомства самок крыс с экспериментальным хроническим О-галактозаминовым поражением печени.

Положения, выносимые на защиту

1. Экспериментальное поражение печени самок крыс, обусловленное введением супернатанта культуры Е.соН и В(+) - галактозамина, является фактором риска, оказывающим существенное влияние на морфофункциональное состояние моноцитов периферической крови.

2. Экспериментальная патология гепатобилиарной системы самок крыс, обусловленная введением супернатанта культуры Е.соН и — галактозамина гидрохлорида, является фактором риска, оказывающим неблагоприятное влияние на антенатальное и постнатальное морфофункциональное становление клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов потомства.

3. У потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени имеет место нарушение ловушкообразующей способности перитонеальных и альвеолярных макрофагов.

4. Хроническая экспериментальная патология гепатобилиарной системы матери обусловливает выраженные изменения секреторной активности перитонеальных макрофагов потомства.

Научная новизна

Впервые на адекватных экспериментальных моделях, воспроизводящих различные формы поражения гепатобилиарной системы (Е.соН и Б(+)галактозамин), проведена комплексная оценка влияния патологии печени самок крыс на функциональную активность клеток системы мононуклеарных фагоцитов различных компартментов потомства в различные сроки постнатального онтогенеза.

Получены данные, свидетельствующие, что экспериментальная патология печени матери приводит к изменению числа и функциональной активности макрофагов потомства. Так установлено, что хроническое поражение печени самок крыс обусловливает нарушение становления поверхностно-рецепторного аппарата (миграция, адгезия, распластывание), внутриклеточной кислородзависимой (НСТ-тест) и кислороднезависимой метаболической активности (лизосомы), ферментативной активности (СДГ, КФ, а-ГФДГ, миелопероксидаза), фагоцитарной и бактерицидной активности (фагоцитоз, киллинг) мононуклеаров различных компартментов потомства.

Впервые предложена оценка суммарной секреторной активности макрофагов перитонеального экссудата по выработке цитокинов в условиях длительного культивирования (Патент на изобретение №2460783 «Способ оценки суммарной секреторной активности макрофагов различных компартментов по выработке цитокинов в условиях длительного культивирования» от 10 сентября 2012 г.).

Практическое и теоретическое значение

Проведенное экспериментальное исследование позволяет оценить роль патологии печени матери в морфофункциональном становлении макрофагов различных компартментов потомства, что может быть использовано для анализа дефектов фагоцитирующих клеток у больных с различными патологическими процессами и заболеваниями, а также для обоснования направленной иммунной коррекции состояния детей, рожденных от матерей с поражением гепатобилиарной системы.

Полученные в ходе эксперимента данные расширяют представление о роли хронической патологии печени матери в нарушении становления звена неспецифической резистентности иммунной системы у потомства, что обосновывает необходимость выделения детей от матерей с поражением гепатобилиарной системы в группы повышенного риска, требующие диспансерного наблюдения у врача - иммунолога.

Результаты диссертационного исследования используются в научном и учебном процессах на биологическом факультете Челябинского государственного университета в дисциплинах: «Гистология человека» («Эмбриональное развитие человека. Нарушение внутриутробного развития»), «Иммунология» (раздел «Система мононуклеарных фагоцитов»), «Физиология человека и животных» (раздел «Неспецифическая реактивность и резистентность организма в норме и патологии»), а также на кафедре гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии в разделах: «Эмбриональное развитие человека. Нарушение внутриутробного развития», «Кровь», «Соединительная ткань», «Специальные методы исследования», «Культивирование».

Апробация работы

Результаты исследования были представлены на конференции, посвященной 65-летию кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии

Челябинской государственной медицинской академии (Челябинск, 2009); на XXXIII студенческой научной конференции «Студент и научно-технический прогресс» (Челябинск, 2009); на всероссийской научной конференции молодых ученых «Проблемы биомедицинской науки третьего тысячелетия» (Санкт-Петербург, 2010); на I международной (VIII итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2010); на международной научно-практической конференции «Физиологические механизмы адаптации человека» (Тюмень, 2010); на всероссийской научной конференции «Регенеративная биология и медицина» (Москва, 2011); на II международной (IX итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2011); на IX всероссийской конференции иммунологов Урала, посвященной 90-летию профессора Л.Я. Эберта (Челябинск, 2011); на III эмбриологическом симпозиуме Всероссийского научного медицинского общества анатомов, гистологов, эмбриологов «ЮГРА-ЭМБРИО-2011. Закономерности эмбрио-фетальных морфогенезов у человека и позвоночных животных» (Ханты-Мансийск, 2011); на III международной (X итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2012).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 16 работ, в том числе 7 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ для изложения основных научных результатов диссертаций на соискание ученых степеней кандидата и доктора наук, получен 1 патент РФ на изобретение.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 250 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы описания результатов собственного исследования и их обсуждения, выводов, списка использованной литературы, включающего 375 наименования, в том числе 100 работ зарубежных авторов. Работа содержит 23 таблицы, 104 рисунка, в том числе 46 микрофотографий.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Шаврина, Екатерина Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Экстрагенитальная патология матери, обусловленная введением супернатанта культуры Е.соН и - галактозамина гидрохлорида приводит к изменению функционального состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства.

4. Экстрагенитальная патология матери, обусловленная введением В(+) - галактозамина гидрохлорида приводит к нарушению ловушкообразующей способности перитонеальных и альвеолярных макрофагов потомства.

5. Экспериментальное хроническое токсическое поражение печени матери обусловливает у потомства подопытных животных увеличение суммарной секреторной активности перитонеальных макрофагов в условиях культивирования.

Глава IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

По мнению многих авторов, патология печени является системным заболеванием и ведет к изменению состояния многих органов и систем в организме, в том числе, констант гомеостаза (Ванесян В.А., 1989; Ланкин В.З. с соавт., 2001; Ярославский В.К. с соавт., 2001).

Многочисленные исследования, проводимые по всему миру в настоящее время, позволяют утверждать, что все ткани, органы и системы органов нашего организма находятся под непрерывным контролем иммунной системы, неотъемлемым компонентом которой являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов (Дранник Г.Н., 2005). В связи с чем очевидным является важность оценки морфофункционального состояния макрофагов различных компартментов потомства, рожденного от матерей с хронической патологией гепатобилиарной системы.

Анализ полученных результатов позволил выявить ряд закономерностей. Так в первой серии исследований нами оценивалось количественное соотношение мононуклеаров различных компартментов. Было выявлено количественное перераспределение клеток СМФ в организме подопытного потомства. Полученные данные демонстрируют изменение содержания клеток системы мононуклеарных фагоцитов опытного потомства, что выражается в уменьшении числа моноцитов периферической крови. Снижение количества моноцитов сопровождается достоверным уменьшением числа оргапо- и тканеспецифических макрофагов (альвеолярных, перитонеальных и селезеночных). Однако в результате эксперимента выявлено увеличение количества клеток Купфера опытного потомства, что отражает участие данных макрофагов в патогенезе формирующихся патологических расстройств в печени потомства.

В следующей серии исследований нами производился анализ состояния поверхностно-рецепторного аппарата мононуклеаров и связанные с его работой функции клеток. В ходе эксперимента выявлено изменение весьма чувствительного мембранного компонента клеток и нарушение рецепторного аппарата на поверхности макрофагов, что проявляется в снижении спонтанной миграционной и хемотаксической активности, адгезивных, пластических, фагоцитарных свойств, а также ловушкообразующей способности клеток системы мононуклеарных фагоцитов у потомства самок крыс с экспериментальной патологией печени различного генеза.

Следующим нашим этапом был анализ реакций кислородзависимого и независимого метаболизма, в ходе которого было выявлено снижение лизосомальной, пероксидазной, фосфатазной активности, а также угнетение спонтанного и индуцированного НСТ-теста в мононуклеарах опытного потомства. В другой серии исследований нами оценивался энергетический аппарат макрофагов различных компартментов. Было выявлено снижение содержания основного энергетического субстрата в клетках (гликогена), но увеличение количества а-глицерофосфатдегидрогеназы.

При всех вышеописанных изменениях морфофункционального I состояния клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства матерей с экспериментальной хронической токсической патологией гепатобилиарной системы для макрофагов перитонеального экссудата характерна усиленная продукция цитокинов по сравнению с контролем.

На основании данных литературы и результатов собственных исследований механизм выявленных нарушений морфофункционального состояния мононуклеаров можно представить следующим образом.

Известно, что различные изменения гомеостаза материнского организма сказываются на развитии плода, обусловливая врожденные уродства и даже его гибель, а у потомства, родившегося живым, -существенные изменения обмена веществ (Савченков Ю.И., 1981). Общепризнанно, что печень в постнатальном онтогенезе является основным органом, выполняющим одновременно метаболические, экскреторные и барьерные функции (Арцимович Н.Г. с соавт., 1993). Введение гепатотропного яда Б(+) - галактозамина гидрохлорида и супернатанта культуры Е.соН вызывает у самки угнетение основных функций печени, а именно дезинтексикационной, белково-синтетической, а также нарушение углеводного и липидного обмена веществ (Сугробова Н.П. с соавт., 1992; Подымова С.Д., 1993). Нарушение вышеназванных функций печени неизбежно приводит к накоплению в организме матери токсичных метаболитов и шлаков, которые вызывают морфофункциональные нарушения различных органов и систем организма матери, а именно иммунной, кроветворной, эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной, что приводит к изменениям межсистемных, межорганных, межтканевых, межклеточных и клеточно-матриксных взаимоотношений (Азизова Ф.Х. с соавт., 2006). Продукты обмена веществ поступают в общий кровоток и могут оказывать негативное действие на органы и системы. Из крови продукты превращения могут захватываться почками, легкими и другими органами, а также повторно печенью (Зобнин Ю.В., 2006), вызывая в них изменения.

По данным литературы известно, что при различных заболеваниях печени развиваются изменения клеточного и гуморального иммунитета (Майер К.П., 1999). Так супернатант культуры E.coli и гепатотропный яд D(+) - галактозамин гидрохлорид обладают гепатотоксическим действием, связанным с повреждающими эффектами макромолекул и других метаболитов на гепатоциты. Наименее изученным механизмом гепатотоксичности является аутоиммунный процесс, который в некоторых случаях может стать преобладающим. Повреждения печени в таком случае сопровождаются нарушениями не только гуморального, но и клеточного звена иммунитета (Александрова И.В., 2009). Вызвано это тем, что индукция мембранных ферментов может привести к образованию аутоантител и повреждению гепатоцита. Возможно появление антител к поврежденным токсическим агентом органеллам клетки (Зобнин Ю.В., 2006).

Вследствие данного нарушения из крови матери в организм плода беспрепятственно будут проходить конечные и промежуточные продукты обмена веществ, а также сенсибилизированные лимфоциты, циркулирующие иммунные комплексы, специфические аутоантитела (Крыжановский Г.Н. с соавт., 1980; Аверкина Р.Ф., 1985). Известно, что плацента препятствует прохождению ряда материнских клеток и цитотоксических антител к плоду, что зависит от состояния синцитиотрофобласта. В случае его повреждения, например, в результате отложения иммунных комплексов, существенно изменяются и протеолитические свойства трофобласта, благодаря которым осуществляется инактивация чужеродных белков, связывание и нейтрализация антител системы ABO крови матери, антилейкоцитарных и других антител. Нарушается избирательное распознавание различных классов иммуноглобулинов матери и секреция их в кровоток плода, вследствие чего резко ограничивается иммуномодулирующее эндогенное влияние материнского организма и задерживается формирование гуморального звена иммунитета у плода (Евсюкова И.И., 2001). В то же время при токсическом гепатите в органах иммунной системы отмечаются признаки антигенной активации, обусловленные как непосредственным действием токсического агента на лимфоидную ткань, так и реакцией иммунной системы в ответ на усиление процессов альтерации во внутренних органах, в первую очередь печени, как органа-мишени. Показано, что токсическое поражение печени приводит к дисбалансу основных звеньев иммунитета (Сивокошок О.В., 2010).

Однако каждый орган плода активно работает, обеспечивая качественное своеобразие его гомеостаза, и реагирует на сдвиги этого гомеостаза изменением своей структуры и функций (Савченков Ю.И., 1981). Именно поэтому хроническая патология гепатобилиарной системы матери приводит к поражению одноименного органа у потомства (Брюхин Г.В., 1994; Евченко Е.В., 2001), что еще больше усугубляет и так измененные условия внутриутробного развития плода. Данное нарушение обусловливает изменение процессов гистогенеза, органогенеза и системогенеза, что, в свою очередь, приводит к нарушению морфофункционального становления многих систем жизнеобеспечения развивающегося потомства, в том числе кроветворной и системы мононуклеарных фагоцитов.

Нами установлено, что у потомства самок крыс с экспериментальной патологией гепатобилиарной системы различной этиологии происходит нарушение морфофункционального состояния макрофагов различных компартментов. Высокотоксичные вещества, прошедшие через гематоплацентарный барьер в организм плода могут вызывать нарушение липидного обмена и белково-синтетической функции, что неизбежно приведет к изменениям в структуре биологической мембраны, а также к дестабилизации мембранных органоидов организма потомства, в частности синтетического аппарата, к которому относятся ЭПС и комплекс Гольджи. Именно деградация последнего будет являться причиной снижения лизосомальной активности в клетках потомства. Данные токсичные метаболиты также приводят к изменениям внутриклеточной концентрации ионов НГ и свободного Са , вследствие чего будет нарушаться функция сократительного аппарата макрофагов. Кроме того, увеличение проницаемости фетаплацентарного барьера неизбежно отразится на уровне рН среды, влияя тем самым на активность большинства ферментов, состояние аппарата цитоскелета макрофагов, на формирование фаголизосомы, а, следовательно, и на процесс фагоцитоза в целом. Также в связи с поражением гепатобилиарной системы матери в клетках системы мононуклеарных фагоцитов потомства страдают рецепторзависимые и мембранозависимые процессы, такие как миграция, адгезия, распластывание, фагоцитоз, кислородзависимые и кислороднезависимые механизмы цитотоксичности. В процессе онтогенеза нами замечено максимальное угнетение функции макрофагов опытного потомства, что связано с прогрессированием нарушений процессов межклеточной, межтканевой и межорганной кооперации.

Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о присутствии угнетающего эффекта патологии печени матери, обусловленной введением супернатанта культуры Е.соН и Э(+) -галактозамина гидрохлорида, на морфофункциональное состояние и стимулирующего эффекта на цитокинпродуцирующую способность клеток системы мононуклеарных фагоцитов потомства.

В целом, полученные данные научно обосновывают положение о том, что потомство матерей с хронической патологией гепатобилиарной системы является иммунологически компрометированным, и диктуют необходимость выделения таких детей в группу риска.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шаврина, Екатерина Юрьевна, Оренбург

1. Абрамов, В.В. Закономерности миграции и циркуляции иммунокомпетентньтх клеток: фундаментальные и прикладные аспекты / В.В. Абрамов, О.В. Ершов, Е.В. Филатенков // Успехи современной биологии. 2007. - Т. 127, вып. 3. - С. 257-266.

2. Аверкина, Р.Ф. Морфофункциональные связи между почками матери и плода / Р.Ф. Аверкина. М.: Медицина, 1985. - 184 с.

3. Адамян, Л.В. Генитальный эндометриоз: клиника, диагностика, лечении. Методические рекомендации / Л.В. Адамян, E.H. Андреева М., 1997. - 31 с.

4. Азизова, Ф.Х. Раннее постнатальное формирование органов иммунной системы в условиях хронического токсического гепатита у матери / Ф.Х. Азизова, М.Х. Рахматова, А.Н. Атажанова, Н.З. Исаева // Морфология. -2006.-Т. 129.-№4.-С. 6.

5. Александрова, И.В. Экстракорпоральная гемокоррекция в комплексном лечении печеночной недостаточности: дисс. докт. мед. наук. Москва, 2009.-251 с.

6. Алексеев, И.В. Развитие системы кроветворения у плода человека / И.В. Алексеев, И.В. Замараева, Е.Б. Владимирская, H.A. Курмашева // Гематология и трансфузиология. 1995. - Т. 40. - №5. - С. 26-29.

7. Антонов, В.Ф. Биофизика мембран / В.Ф. Антонов // Соросовский Образовательный Журнал. 1996. -№ 6. - С. 1-15.

8. Арцимович, Н.Г. Роль печени в иммунобиологической регуляции гомеостаза / Н.Г. Арцимович, H.H. Настоящая, Д.Б. Казанский // Гематология и трансфузиология. 1993. - Т. 38. - №6. - С. 42-44.

9. Асадов, Ч.Д. Связь между фагоцитарной функцией и цитохимическими показателями нейтрофилов крови / Ч.Д. Асадов, JI.C. Нумерова, М.Э. Мирзоева//Лабораторное дело. 1990.-№11.-С. 19-21.

10. Бабайлов, М.С. Особенности цито-иммунологических показателей мокроты и функциональной активности легочных макрофагов детей с бронхиальной астмой контролируемого и неконтролируемого течения: дисс. канд. мед. наук. Челябинск, 2012.-132 с.

11. Баринова, М.Э. Гетерогенность реакции макрофагов при заживлении ран нижних конечностей у больных сахарным диабетом / М.Э. Баринова, О.Н. Сулаева // Морфология. 2009. - Т. 3. - №1. - С. 22-27.

12. Барсуков, A.A. Анализ функциональной активности макрофагов при адгезии / A.A. Барсуков, В.М. Земсков, С.А. Безносенко // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1986. -№1. - С. 3-8.

13. Барышева, C.B. Морфофункциональные особенности перитонеальных макрофагов у животных с экспериментальным гепатитом / C.B. Барышева, Г.В. Брюхин // Вестник Челябинского государственного университета: Биология. 2008. - вып. 1. - №4. - С. 60-64.

14. Басова, И.М. Сравнительная оценка содержания гликогена в лимфоцитах периферической крови крупного рогатого скота в норме и при хроническом лимфоидном лейкозе / И.М. Басова, Л.А. Кудрявцева // Цитология. 1991. - Т. 33. - №2. - С. 85-88.

15. Бахшинян, М.З. Изменения структуры и функции макрофагов селезенки в условиях злокачественного роста / М.З. Бахшинян, A.B. Азнаурян // Морфология. 2004. - Т. 126. - №5. - С. 45-48.

16. Белоусов, Ю.Б. Клиническая фармакология лекарственных средств при беременности, в родовом и послеродовом периодах / Ю.Б. Белоусов, М.В. Леонова // Фарматека. 2002. - №6(58). - С. 43-48.

17. Биологические мембраны: Сборник / Под ред. Д.С. Парсонса, пер. с англ. М.: Атомиздат, 1978. - 230 с.

18. Болдырев, A.A. Биохимия мембран. Книга 1: Введение в биохимию мембран / A.A. Болдырев // Учебное пособие для биологических и медицинских специальностей вузов / Под редакцией A.A. Болдырева. М.: Высшая школа, 1986. -112 с.

19. Брюхин, Г.В. Влияние хронических поражений гепатобилиарной системы матери на развитие, реактивность и резистентность потомства: дисс. докт. мед. наук. Челябинск, 1994. - 472 с.

20. Брюхин, Г.В. Основы общей и клинической цитологии (учебно-методическое пособие) / Г.В. Брюхин. Челябинск: Иероглиф, 2000. - 100 с.

21. Брюхин, Г.В. Особенности становления фолликулогенеза в яичниках у потомства матерей с хроническим поражением гепатобилиарной системы в условиях эксперимента / Г.В. Брюхин, Е.В. Вторушина // Проблемы репродукции. 2004. - №3. - С. 54-57.

22. Брюхин, Г.В. Удостоверение №1 от 13.01.1987 на рац. предложение. «Способ выделения печеночных макрофагов» / Г.В. Брюхин, А.Ю. Грачев, И. А. Шикирянская. Челябинск.

23. Брюхин, Г.В. Фагоцитарная активность моноцитов периферической крови и перитонеальных макрофагов у потомства самок с хроническим поражением печени / Г.В. Брюхин, А.Ю. Грачев // Физиологический журнал. 1990. - №6. - С. 99-102.

24. Бумагина, Т.К. Использование активированного НСТ-теста для выявления расстройств фагоцитоза при воспалительных заболеваниях легких / Т.К. Бумагина, Е.И. Шмелев // Лаб. дело. 1981. - №4. - С. 200202.

25. Бушмакина, И.М. Влияние липосомального «биена» на функциональную активность альвеолярных макрофагов / И.М. Бушмакина, Н.И. Дроздова, М.А. Мартынова // Химико-фармацевтический журнал. -2011.-Т. 45.-№1.-С. 51-53.

26. Быкова, A.A. Состояние фагоцитарной системы крови в НСТ-тесте в отдаленном периоде у участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС / A.A. Быкова, Н.С. Сединина // Клиническая лабораторная диагностика. -2003. №7. - С. 16-19.

27. Вазина, И.Р. Методика выделения и функциональная способность альвеолярных макрофагов / И.Р. Вазина, С.И. Пылаева, З.Е. Матусис // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1984. - №6. - С. 756-758.

28. Вазина, И.Р. Нарушение процесса фагоцитоза альвеолярных макрофагов при термической травме / И.Р. Вазина, С.И. Пылаева, O.A. Васильчук // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1984. - №5. - С. 542-544.

29. Ванесян, В.А. Активность аланинаминотрансферазы у женщин детородного возраста, больных вирусным гепатитом / В.А. Ванесян // Врачебное дело, 1989.-№5.-С. 119-121.

30. Васильева, Г.И. Кооперативное взаимодействие моно- и полинуютеарных фагоцитов, опосредованное моно- и нейтрофилокинами / Г.И. Васильева, И.А. Иванова, С.Ю. Тюкавкина // Иммунология. 2000. -№5.-С. 11-17.

31. Васильева, JI.C. Воспаление и стресс / JI.C. Васильева, В.В. Малышев, В.В. Кузьменко, С.Б. Белогоров. Иркутск: Изд-во «Лисна и К», 1995. - 120 с.

32. Вельтищев, Ю.Е. Проблемы охраны здоровья детей России / Ю.Е. Вельтищев // Российский Вестник перинатологии и педиатрии. 2000. - Т. 45.-№1.-С. 5-9.

33. Венгеровский, А.И. Метаболизм липидов и функциональное состояние печени при интоксикации D-галактозамином у крыс / А.И. Венгеровский, A.C. Саратиков // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1988. - №3. - С. 52-54.

34. Виксман, М.Е. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия: Методические рекомендации. / М.Е. Виксман, А.Н. Маянский. — Казань: Казанский НИИЭМ, 1979. 15 с.

35. Виноградов, А.Д. Сукцинат: убихинон-редуктазный участок дыхательной цепи / А.Д. Виноградов // Биохимия. 1986. - Т. 51. - №12. -С. 1944-1973.

36. Вихоть, Н.Е. Факторы естественной резистентности / Н.Е. Вихоть, Е.У. Пастер // Иммунология: Практикум. Киев: Выща школа, 1989. - С. 265297.

37. Войтенков, Б.О. Основные характеристики макрофага как клетки-эффектора / Б.О. Войтенков, В.Б. Окулов // Вестник РАМН. 1995. - №4. -С. 59-64.

38. Воложин, А.И. Адаптация и компенсация универсальный биологический механизм приспособления / А.И. Воложин, Ю.К. Субботин. -М.: Медицина, 1987. - 176 с.

39. Гамалей, И.Ф. Перекись водорода как сигнальная молекула / И.Ф. Гамалей, И.В. Клюбин // Цитология. 1996. - Т. 38. - №12. - С. 1223-1247.

40. Горланов, И.А. Атопический дерматит у детей / И.А. Горланов, A.B. Севашевич, О.П. Гурима, А.Е. Блинов // Тез. докл. Международной конф. -Екатеринбург, 1994. С. 6-7.

41. Гоц, Т.Ю. Изменение субпопуляций альвеолярных макрофагов под воздействием ксенобиотиков, вулканической пыли и частиц воздуха 1648 / Т.Ю. Гоц // Электронный журнал «Современные проблемы токсикологии». -2001.- №2.

42. Грачев, А.Ю. Система мононуклеарных фагоцитов у потомства матерей с хроническим аутоиммунным и холестатическим поражением печени: дисс. канд. мед. наук. Челябинск, 1994. - 225 с.

43. Гудима, Г.О. Клеточный центр макрофагов, гранулоцитов и лимфоцитов при распластывании, поляризации и движении клеток in vitro / Г.О. Гудима, И.А. Воробьев, Ю.С. Ченцов // Цитология. 1984. - Т.26. - № 9. - С. 10021007.

44. Гунин, А.Г. Содержание гистамина и функциональная активностьальвеолярных макрофагов / А.Г. Гунин, Д.С. Гордон, И.Р. Вазина // Иммунология,- 1990,-№6.-С. 12-13.

45. Дамбаева, C.B. Влияние некоторых иммуномодуляторов на функциональную активность фагоцитарных клеток периферической крови доноров / C.B. Дамбаева, Д.В. Мазуров, Н.М. Голубева, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2000. - №6. - С. 15-20.

46. Демидов, JI.B. Гранулоцитарно макрофагальный колониестимулирующий фактор в лечении меланомы кожи и рака почки / JI.B. Демидов, Г.Ю. Харкевич, И.В. Тимофеев // Медицинская кафедра. -2005.-№5.-С. 42-49.

47. Долгушин, И.И. Нейтрофильные внеклеточные ловушки и методы оценки функционального статуса нейтрофилов / И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева, А.Ю. Савочкина М.: Издательство РАМН, 2009. - 208 с.

48. Дранник, Г.Н. Строение и функции иммунной системы. Лекция № 1. Врожденный неспецифический (естественный) иммунитет. Клеточный иммунитет // Клиническая иммунология. Аллергология. Инфектология. -2005. -№ 1.

49. Дроздов, А.А. Заболевания крови. Полный справочник / А.А. Дроздов, М.В. Дроздова. М.: Эксмо, 2008. - 151 с.

50. Дубровин, М.М. Развитие иммунной системы плода / М.М. Дубровин, Е.С. Дубровина, А.Г. Румянцев // Педиатрия. 2001. - №4. - С. 67-72.

51. Душкин, М.И. Макрофаги и атеросклероз: патофизиологические и терапевтические аспекты / М.И. Душкин // Бюллетень СО РАМН. 2006. -№2 (120).-С. 47-55.

52. Евсюкова, И.И. Влияние неблагоприятных факторов в антенатальном и раннем постнатальном онтогенезе на развитие аллергических реакций у детей / И.И. Евсюкова // Аллергология. 2001. - №1. - С. 37-44.

53. Евченко, Е.В. Роль иммунного компонента в поражении одноименного органа у потомства самок крыс с хронической экспериментальной патологией гепатобилиарной системы: автореф. дисс. канд. мед. наук. -Челябинск, 2001. 22 с.

54. Еремеев, В.В. Взаимодействие макрофаг микобактерия в процессе реакции микроорганизма на туберкулезную инфекцию / В.В. Еремеев, К.Б. Майоров // Проблемы туберкулеза. - 2002. - №3. - С. 54-58.

55. Зайцева, Л.Г. Коррекция функциональной активности перитонеальных макрофагов мышей фоспренилом и гамавитом при введении высоких доз альфа-токсина Staphylococcus aureus / Л.Г. Зайцева, В.А. Бехало, И.К.

56. Васильев, P.C. Годунов, И.В. Киреева, Т.Н. Кожевникова, Е.В. Нагурская, А.Н. Наровлянский, C.B. Ожерелков, A.B. Пронин, A.B. Санин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2005. - №6. - С. 5157.

57. Западнюк, И.П. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария, Б.В. Западнюк. 3-е изд., перераб. и доп. - Киев: Вища школа, 1983.-383 с.

58. Земсков, В.М. Гетерогенность мононуклеарных фагоцитов / В.М. Земсков, E.H. Николаева, C.B. Родионов // Успехи современной биологии. -1993. Т. 113, вып. 3. - С. 336-350.

59. Земсков, В.М. Fc-рецепторы макрофагов / В.М. Земсков // Успехи современной биологии. 1983. - Т. 95. -№1. - С. 100-117.

60. Зенков, Н.К. Механизмы активации макрофагов / Н.К. Зенков, Е.Б. Меныцикова, В.А. Шкурупий // Успехи современной биологии. 2007. - Т. 127. -№3.- С. 243-256.

61. Змушко, Е.И. Клиническая иммунология / Е.И. Змушко, Е.С. Белозеров, Ю.А. Митин. СПб.: Питер, 2001. - 575 с.

62. Зобнин, Ю.В. Токсическое повреждение печени / Ю.В. Зобнин // Сибирский медицинский журнал. 2006. - №9. - С. 87-90.

63. Зубова, С.Г. Молекулярные механизмы действия фактора некроза опухолей а и трансформирующего фактора роста ß в процессе ответамакрофага на активацию / С.Г. Зубова, В.Б. Окулов // Иммунология. 2001. - №5. - С. 18-22.

64. Ивашкин, В.Т. Особенности иммунного ответа у больных хроническим вирусным гепатитом С / В.Т. Ивашкин, С.Н. Мамаев, Е.А. Лукина и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. -2001. -№3.- С. 24-29.

65. Ивков, В.Г. Липидный бислой биологических мембран / В.Г. Ивков, Г.Н. Берестовский. М.: Наука, 1982. - 224 с.

66. Ильин, Д.А. Бинуклеарные макрофаги (обзор литературы) / Д.А. Ильин // Фундаментальные медико-биологические науки и практическое здравоохранение: сб. науч. трудов 1-й Международной телеконференции. -Томск: СибГМУ, 2010.-Т. 1.-№1.-С. 104-105.

67. Ильин, Д.А. Использование липополисахарида для определения функциональной активности макрофагов и лаброцитов в культурах перитонеальных клеток / Д.А. Ильин // Сборник научных трудов «Естествознание и гуманизм». 2006. - Т. 3, вып. 3. - С. 22.

68. Ильин, Д.А. Модель взаимодействия гетерогенных клеточных культур / Д.А. Ильин, С.А. Архипов / Компенсаторно-приспособительные процессы: Всероссийская конференция. Новосибирск, 2004. - С. 32-33.

69. Ильинская, А.Н. Компонент бактериального пептидогликана как фактор созревания макрофагов / А.Н. Ильинская, Л.В. Пичугина, Н.С. Олиферук,

70. B.Л. Львов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2005. - №1. - С. 12-15.

71. Иммунологические, цитохимические и биохимические методы исследования фагоцитирующих клеток. Методические рекомендации / Под ред. Э.А. Имельбаевой. Уфа: БГМИ, 1996. - 85 с.

72. Исачкова, JI.M. Новые данные к современной концепции антиинфекционной резистентности / Л.М. Исачкова, Н.Г. Плехова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1997. — №5. -С. 67-69.

73. Казначеева, Л.Ф. Динамика изменения лизосомальных факторов при атопическом дерматите у детей / Л.Ф. Казначеева, H.A. Рычкова, H.H. Маянская, Л.В. Вохминцева // Аллергология. 1999. - №3. - С. 12-16.

74. Казначеева, Л.Ф. Современные проблемы аллергологии и клинической иммунофармакологии / Л.Ф. Казначеева, Е.А. Выпова, О.В. Курагина, И.В. Равкина. М.: Медицина, 1997. - 379 с.

75. Kapp, Я. Макрофаги: обзор ультраструктуры и функции / Я. Kapp. M: Медицина, 1978.- 188 с.

76. Кетлинский, С.А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология. 1995. - №3. - С. 30-44.

77. Кетлинский, С.А. Эндогенные иммуностимуляторы / С.А. Кетлинский, A.C. Симбирцев, A.A. Воробьев. СПб.: Изд. Гиппократ, 1992. - 186 с.

78. Ю1.Кисляк, Н.С. Клетки крови у детей в норме и патологии / Н.С. Кисляк, Р.В. Ленская. М.: Медицина, 1978. - 256 с.

79. Клиническая иммунология. Учебник для медицинских ВУЗов / Под редакцией A.B. Караулова. М.:МИА, 1999. - 603с.

80. Козинец, Г.И. Интерпретация анализов крови и мочи. Клиническое значение анализов / Г.И. Козинец. СПб.: АОЗТ «Салит», 1995. - 123 с.

81. Козинец, Г.И. Исследования системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И. Козинца, В.А. Макарова. -М.: «Триада-Х», 1997. 480 с.

82. Комиссаров, С.Н. Сравнительная клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронических гепатитов С и В с учетом регенераторной способности печени: автореф. дисс. канд. мед. наук. СПб., 2008.-21 с.

83. Крыжановский, Г.Н. Перекисное окисление липидов в очаге гиперреактивности в коре головного мозга / Г.Н. Крыжановский, Е.В. Никушин, В.Е. Браславский // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1980. - № 1. - С. 14-16.

84. Кузнецов, М.Е. Морфофункциональное состояние клеток перитонеальной полости крыс при острой кровопотере и введении колцихина: дисс. канд. мед. наук. Челябинск, 2005. - 176 с.

85. ПО.Кузник, Б.И. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И. Кузник, Н.В. Васильев, H.H. Цыбиков. М.: Медицина, 1989.-280 с.

86. Ш.Кузьмин, В.Н. Плацентарная недостаточность при вирусных инфекциях: учебное пособие / В.Н. Кузьмин, JI.B. Адамян, B.C. Музыкантова. М.: Медицина, 2005. - С. 103.

87. Кульчавени, Е.В. Лазеры против туберкулеза / Е.В. Кульчавени //Лазер-Информ.- 1999.-№17-18.-С. 176-177.

88. Кульчиков, А.Е. Нарушение фагоцитоза и его фармакокоррекция при геморрагическом инсульте / А.Е. Кульчиков, С.Г. Морозов, Е.А. Гриненко, А.Н. Макаренко // Цитокины и воспаление. 2011. - Т. 10. - №3. - С. 102107.

89. Курманова, Г.М. Оценка иммунного статуса и дифференцированная иммунокоррекция при бруцеллезе: метод, рекомендации / Г.М. Курманова, А.К. Дуйсенова, К.Б. Курманова, Н.Х. Спиричева. Алматы, 2002. - 30 с.

90. Кутина, С.Н. Особенности развития цирроза печени у крыс при стимуляции печеночных макрофагов / С.Н. Кутина, Д.Н. Маянский // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1981. - №9. - С. 366-370.

91. Пб.Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях / В.З. Ланкин, А.К. Тихадзе, Ю.Н. Беленков. -М.: РКНПК МЗ РФ, 2001. 78 с.

92. Леонов, Н.В. Влияние хронического алкогольного поражения печени матери на морфофункциональное состояние тучных клеток тимуса потомства / Н.В. Леонов, Г.В. Брюхин // Морфологические ведомости. -2007.-№3-4.-С. 43-45.

93. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли. М.: Мир, 1980. - 343 с.

94. Литвитский, П.Ф. Врожденный иммунитет: механизмы реализации и патологические синдромы / П.Ф. Литвитский, Т.Г. Синельникова // Вопросы современной педиатрии. 2009. - Т. 8. - №12. - С. 95-101.

95. Лобанова, Е.М. Влияние сочетанного действия гипоксии и гипертермии на фагоцитарную активность альвеолярных макрофагов / Е.М. Лобанова // Сборник научных работ «Труды молодых ученых». Минск, 2004. - С. 7780.

96. Лобанова, Е.М. Влияние сочетанного действия гипоксии и гипертермии на функциональную активность альвеолярных макрофагов / Е.М. Лобанова // Медицинская панорама. 2004. - №10. - С. 48-49.

97. Лобанова, Е.М. Сочетанное влияние дефицита кислорода и высокой температуры на показатели метаболизма альвеолярных макрофагов / Е.М. Лобанова, А.Д. Таганович // Белорусский медицинский журнал. 2005. - Т. 13.-№3.-С. 14-16.

98. Лобанова, Е.М. Фагоцитарная активность стимулированных альвеолярных макрофагов в условиях гипоксии и гипертермии / Е.М. Лобанова, А.Д. Таганович // Белорусский медицинский журнал. 2005. - Т. 11.-№1 .-С. 66-68.

99. Лобынцев, К.С. Морфофункциональное состояние печени у поколений животных, перенесших в период беременности токсический гепатит, частичную гепатэктомию и одностороннюю адреналэктомию: автореф. дисс. док. биол. наук. Москва, 1972. - 40 с.

100. Локтионов, А.Л. Цитокинпродуцирующая активность перитонеальных макрофагов в зависимости от этиологии острого панкреатита / А.Л.

101. Локтионов, И.Ю. Уханова, В.Ф. Ликов, А.И. Конопля, O.A. Суняйкина, A.B. Караулов // Иммунология. 2010. - Т. 31. - №6. - С.321-325.

102. Луговская, С.А. Структура и функции моноцитов и макрофагов (обзор литературы) / С.А. Луговская // Клиническая лабораторная диагностика. — 1997.-№9.-С. 10-16.

103. Лукина, Е.А. Система мононуклеарных фагоцитов и биологические эффекты провоспалительных цитокинов / Е.А. Лукина // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. -№5. -С. 7-13.

104. Луппа, X. Основы гистохимии / X. Луппа; Пер. с нем. И.Б. Бухвалова, Е.Д. Вальтер. Под ред. Н.Т. Райхлина. -М.: Мир, 1980. 343 с.

105. Майер, К.П. Гепатит и последствия гепатита: практ. рук. / пер. с нем.-под ред. A.A. Шептулина. -М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. 432 с.

106. Майоров, М.В. Беременность и экстрагенитальная патология: заболевания печени и желчевыводящих путей / М.В.Майоров, С.И. Жученко // Провизор. 2009. - № 22. - С. 10-14.

107. Малышев, И.Ю. Функциональные ответы альвеолярных макрофагов, сурфактантный белок D и заболевания легких / И.Ю. Малышев, C.B. Лямина, Ш.Л. Шимшелашвили, E.H. Вассерман // Пульмонология. 2011. -№3.-С. 101-107.

108. Малышева, Е.В. Репрограммирование клеточных ответов макрофагов: новая стратегия управления воспалительным процессом: дисс. докт. мед. наук. Москва, 2007. - 175 с.

109. Мальдов, Д.Г. Активация препаратом симфорте моноцитов и макрофагов / Д.Г. Мальдов, Е.А. Чирвон, A.B. Ильичев, С.С. Бабаян // Иммунология. 2011. - Т. 32. - №4. - С. 195-200.

110. Манько, В.М. Макрофаги: гетерогенность и роль в иммунных реакциях /

111. B.М. Манько, P.M. Хаитов // Успехи современной биологии. 1985. - Т. 99, вып. 1.-С. 110-122.

112. Маслов, К.А. Бактерицидный эффект и активность миелопероксидазы макрофагов при персистировании микобактерий туберкулеза и лепры / К.А. Маслов // Вестник новых медицинских технологий. 1999. - №1. - С. 7679.

113. Маянский, А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. Казань: Магариф , 1993. - 192 с.

114. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. 2-е изд., перераб. и доп. - Новосибирск: «Наука». Сибирское отделение, 1989. - 343 с.

115. Маянский, А.Н. Фагоцитоз: проблемы и перспективы / А.Н. Маянский // Вестник РАМН. 1993. - № 4. - С.52-55.

116. Маянский, Д.Н. Клетка Купфера и патология печени / Д.Н. Маянский // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1985. - №4. -С. 80-86.

117. Маянский, Д.Н. Лекции по клинической патологии: руководство для врачей / Д.Н. Маянский, И.Г. Урсов. Новосибирск: Изд-во СО РАМН, Новосиб. мед. ин-т, 1997.-249 с.

118. Маянский, Д.Н. Реактивность макрофагов легких и печени нормальных и предварительно стимулированных животных / Д.Н. Маянский, Д.Д. Цырендоржиев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1989. - №4. - С. 44-48.

119. Маянский, Д.Н. Хроническое воспаление / Д.Н. Маянский. М.: Медицина, 1991. - 272 с.

120. Медведева, С.Ю. Роль макрофагов в патогенезе токсического гепатита у крыс / С.Ю. Медведева, И.Г. Данилова, Б.Г. Юшков, В.Г. Сенцов, М.Т. Абидов, И.Ф. Гетте // Уральский медицинский журнал. 2010. - №9 (74). -С. 127-132.

121. Медведь, В.И. Введение в клинику экстрагенитальной патологии беременных / В.И. Медведь. К.: Авиценна, 2004. - 168 с.

122. Медведь, В.И. Введение в клинику экстрагенитальной патологии беременных / В.И. Медведь. 2-е изд., исправл. - К: Гидромакс, 2007. - 168 с.

123. Меньщикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньщикова, В.З. Панкин, Н.К. Зенков, И.А. Бондарь, Н.Ф. Круговых, В.А. Труфакин. М.: Слово, 2006. - 556 с.

124. Милованов, А.П. Патология системы мать-плацента-плод : рук. для врачей / А.П. Милованов. М.: Медицина, 1999. - 448 с.

125. Милюкене, В.В. Определение количественных параметров фагоцитоза Escherichia Coli перитонеальными макрофагами мыши /В.В. Милюкене, Г.Ю. Бизюлявичене, Л.П. Хаустова, A.B. Пилинкене, Г.А. Бизюлявичюс // Цитология.-2007.-Т. 49.-№10.-С.853-857.

126. Минц, Р.И. Структурная альтерация биологических жидкостей при информационном воздействии / Р.И. Минц, С.А. Скопинов // Действие электоромагнитного излучения на биологические объекты и лазерная медицина. Владивосток: ДВО АН СССР, 1989. - С. 6-41.

127. Михайленко, Е.Т. Беременность и роды при хронических заболеваниях гепатобилиарной системы / Е.Т. Михайленко, A.A. Закревский, Н.Г. Богдашкин, Л.Б. Гутман. К.: Здоровья, 1990. - 184 с.

128. Моисеева, Е.Г. Метаболический гомеостаз и иммунная реактивность организма в динамике воспаления в тканях пародонта (экспериментальное исследование): автореф. дисс. докт. мед. наук. Москва, 2008. - 45 с.

129. Молекулярные механизмы повреждения клеток / Под ред. Г.В. Порядина. М.: РГМУ, 1997. - 23 с.

130. Москалева, Е.В. ВИЧ-инфекция у детей с позиции клинической иммунологии / Е.В. Москалева, А.Г. Петрова, C.B. Смирнова // Сибирский медицинский журнал. 2006. - № 9. - С. 105-108.

131. Муслимов, С.А. Функциональная морфология макрофагов при регенерации тканей, индуцированной аллогенными биоматериалами / С.А.

132. Муслимов, Л.А. Мусина // Регенеративная хирургия. Периодическое интернет-издание . 2006.

133. Нагоев, Б.С. Значение теста восстановления нитросинего тетразолия для изучения функциональной активности лейкоцитов (обзор литературы) / Б.С. Нагоев, М.Г. Шубич//Лабораторное дело. 1981. -№ 4. - С. 195-198.

134. Нагоев, Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците / Б.С. Нагоев. -Нальчик: Эльбрус, 1986. 144 с.

135. Надеев, А.П. Вариантность структурной организации печени, системы мононуклеарных фагоцитов в норме, при инфекционной патологии в пери-и постнатальный период: дисс. док. мед. наук. Новосибирск, 2006. - 245 с.

136. Назаренко, Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований / Г.И. Назаренко, A.A. Кишкун. М.: Медицина, 2005. - 541 с.

137. Назарова, А.О. Состояние клеточных компонентов перитонеального микроокружения у крыс с экспериментальным эндометриозом и эффективность хирургического лечения / А.О. Назарова, A.B. Валькова,

138. И.Ю. Шарабанова, JT.B. Посисеева, С.Б. Назаров // Проблемы репродукции. -2004. -Т.10. -№3. -С.12-15.

139. Нарциссов, Р.П. Применение n-нитротетразолия фиолетового для количественной цитохимии дегидрогеназ лимфоцитов человека / Р.П. Нарциссов // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1969. - Т. 56. -№4.-С. 18-22.

140. Натан, Г.Д. Регуляция кроветворения / Г.Д. Натан, К.А. Зифф // Гематология и трансфузиология. 1994. - Т. 39. - №2. - С. 3-10.

141. Окулов, В.Б. Актуальные проблемы иммунотерапии опухолей в контексте эволюционно закрепленной реакции макрофага на повреждениетканей / В.Б. Окулов // Вопросы онкологии. 1997. - Т. 43. - №1. - С. 102106.

142. Окулов, В.Б. Роль макрофагов в опухолевом росте / В.Б. Окулов, Б.О. Войтенков//Вопросы онкологии.-1990.-Т. 36.-№10.-С. 1172-1177.

143. Олиферук, Н.С. Оценка фагоцитарной и бактерицидной активности нейтрофилов, макрофагов и незрелых дендритных клеток / Н.С. Олиферук,

144. A.Н. Ильинская, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2005. -№1. - С. 10-12.

145. Омарова, Х.М. Особенности плацентарного кровообращения у беременных с варикозной болезнью / Х.М. Омарова // Казанский медицинский журнал. 2008. - №4. - С. 482-484.

146. Орлова, Е.Г. Влияние лептина на микробицидную активность моноцитов человека / Е.Г. Орлова, C.B. Ширшев // Физиология человека. -2007.-Т. 33.-№4.-С. 109-113.

147. Пальцев, М.А. Значение биомедицинских фундаментальных исследований для фтизиатрии / М.А. Пальцев // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - №2. - С. 3-7.

148. Панин, Л.Е. Биохимические механизмы стресса / Л.Е. Панин. — Новосибирск : Наука, 1983. 232 с.

149. Панин, Л.Е. Явление стимуляции резидентными макрофагами биосинтеза белка в паренхимных клетках органов и тканей / Л.Е. Панин // Бюллетень СО РАМН. 1998. - №3. - С. 11-23.

150. Пауков, B.C. Роль макрофагов в патогенезе ограниченного воспаления /

151. B.C. Пауков, С.А. Даабуль, Н.Ю. Беляева // Архив патологии. 2005. - Т. 67.-№4. С. 3-10.

152. Перельман, М.И. Фтизиатрия / М.И. Перельман, В.А. Корякин, И.В. Богадельникова. М.: Медицина, 2004. - 519 с.

153. Переходнов, A.C. Влияние алкогольного поражения печени матери на состояние надпочечников потомства / A.C. Переходнов, Г.В. Брюхин // Фундаментальные исследования. 2008. - №2. - С. 48-49.

154. Печковский, Д.В. Усиление бактерицидности, но не фагоцитарной активности нейтрофилов человека под действием интерлейкина 6 / Д.В. Печковский, М.П. Потапнев, A.B. Вознюк // Иммунология. 1993. - №6. -С. 29-30.

155. Пинегин, Б.В. Макрофаги: свойства и функции / Б.В. Пинегин, М.И. Карсонова // Иммунология. 2009. - Т. 30. - №4. - С. 241-249.

156. Платонов, А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов. М.: Издательство РАМН, 2000. - 52 с.

157. Плехова, Н.Г. Изменение метаболической активности макрофагов под влиянием вируса клещевого энцефалита // Н.Г. Плехова, JIM. Сомова, Е.И. Дробот, Н.В. Крылова, Г.Н. Леонова // Биохимия. 2007. - Т. 72. - вып. 2. -С. 236-246.

158. Плехова, Н.Г. Роль моноцитов/макрофагов в патогенезе вирусных инфекций / Н.Г. Плехова, JI.M. Сомова // Тихоокеанский медицинский журнал. 2010. - №3. - С. 5-9.

159. Подымова, С.Д. Болезни печени / С.Д. Подымова. М.: Медицина, 1993. - 544 с.

160. Практикум по иммунологии / Под ред. И.А. Кондратьевой, В.Д. Самуилова. М.: Изд-во МГУ, 2001. - 224 с.

161. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica / О.Ю. Реброва. М.: Медиа сфера, 2002. - 312 с.

162. Редчиц, Е.Г. Адгезия нейтрофилов: патогенетические и методические аспекты (обзор литературы) / Е.Г. Редчиц, В.О. Гузева // Лаб. дело. — 1991. -№5. С. 4-8.

163. Ройт, А. Иммунология: пер. с англ. / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. -М.: Мир, 2000. 592 с.

164. Романов, A.C. Характеристика миграционной активности сперматозоидов у потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени / A.C. Романов // Вестник ЧелГУ, Биология. 2008. - вып. 1. - №4. - С. 84-87.

165. Ромашкина, M.B. Влияние перекиси водорода и стауроспорина на гибель моноцитов/макрофагов периферической крови доноров и больных раком молочной железы / М.В. Ромашкина, В.А. Трофимов // Морфологические ведомости. 2008. - №3-4. - С. 201-204.

166. Сааков, Б.А. Моделирование воспалительного процесса в печени / Б.А. Сааков, А.И. Поляк, В.Е. Рычнев, Е.П. Вострикова, М.Р. Аминов // Моделирование, методы изучения и экспериментальная терапия патологических процессов. Часть I. М., 1967. - С. 119-123.

167. Савченко, И.М. Анализ неблагоприятных исходов у беременных с осложнениями беременности и родов на фоне экстрагенитальной патологии различной этиологии / И.М. Савченко // Медицинские новости. 2002. -№3.

168. Савченков, Ю.И. Очерки физиологии и морфологии функциональной системы мать плод / Ю.И. Савченков, КС. Лобынцев. - М.: Медицина, 1980.-254 с.

169. Савченков, Ю.И. Функциональная система мать-плод. Опыт системного подхода к физиологии плодово-материнских взаимоотношений / Ю.И. Савченков // Акушерство и гинекология. 1981. - №6. - С. 3-6.

170. Селютин, A.B. Морфофункциональные характеристики плацентарных макрофагов при различных исходах беременности: дис. канд. биол. наук. -Санкт-Петербург, 2003. 113 с.

171. Серов, В.В. Воспаление / В.В. Серов, B.C. Пауков. М.: Медицина, 1995.-640 с.

172. Сивоконюк, О.В. Иммуноморфология фармакокоррекции токсического гепатита: дисс. канд. мед. наук. Харьков, 2010. - 163с.

173. Сидорова, И.С. Беременность и эндокринная патология / И.С. Сидорова, И.О. Макаров, Е.И. Боровкова. 2-е изд. - М.: Практическая медицина, 2009.-144 с.

174. Сизоненко, M.JI. Морфофункциональная характеристика сперм атогенного пласта у потомства самок с хроническим экспериментальным лекарственным поражением печени / M.JL Сизоненко, Г.В. Брюхин // Проблемы репродукции. 2012. - №4. - С. 12-15.

175. Славинский, A.A. Люминесцентный цитохимический метод количественного определения активированных фагоцитов / A.A. Славинский // Лаб. дело. 1989. - №4. - С. 32-34.

176. Смекалина, О.Ю. Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза: дисс. канд. мед. наук. Оренбург, 2011. - 302 с.

177. Сонова, М.М. Роль макрофагов перитонеальной жидкости при наружном генитальном эндометриозе / М.М. Сонова, A.A. Осипова //

178. Материалы IX Всероссийского научного форума «Мать и дитя». М., 2007. -С. 522-523.

179. Суслова, Т.Е. Кислородзависимые процессы в моноцитах и метаболические факторы риска атерогенеза / Т.Е. Суслова, О.В. Груздева, Т.С. Федорова, P.C. Карпов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. - Т. 137. - №5. - С. 495-497.

180. Теппермен, Дж. Физиология обмена веществ и эндокринной системы / Дж. Теппермен, X. Теппермен. М.: Мир, 1989. - 653 с.

181. Титов, В.Н. Роль макрофагов в становлении воспаления, действии интерлейкина-1, интерлейкина-6 и активность гипоталамо гипофизарной системы (обзор литературы) / В.Н. Титов // Клиническая лабораторная диагностика. -2003. -№12. - С. 3-10.

182. Тихомирова, Е.И. Участие лектина Paenibacillus Polymyxa в процессах киллинга бактерий в макрофагах / Е.И. Тихомирова, Л.В. Карпунина, О.В. Абросимова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -2008.-№6.-С. 82-84.

183. Торубарова, H.A. Кроветворение плода и новорожденного / H.A. Торубарова, И.В. Кошель, Г.В. Яцык. М: Наука, 1993. - 252 с.

184. Тотолян, A.A. Клетки иммунной системы / A.A. Тотолян., И.С. Фрейдлин. СПб.: Наука, 2000. - 231 с.

185. Учитель, И.Я. Макрофаги в иммунитете / И.Я. Учитель. М.: Медицина, 1978.-200 с.

186. Федорова, М.В. Плацентарная недостаточность / М.В. Федорова // Акушерство и гинекология. 1997. - № 6. - С. 40-43.

187. Фетисов, B.B. Архитектоника поверхности альвеолярных макрофагов / В.В. Фетисов, З.М. Гасимова // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1985. -№3. - С. 84-88.

188. Фомина, A.A. Влияние бактериальных гликополимеров на функционально-метаболический статус лейкоцитов и активность ключевых ферментов метаболизма мышей: дисс. канд. биол. наук. Саратов, 2010. -149 с.

189. Фрейдлин, И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляторной сети / И.С. Фрейдлин // Иммунология. 1995. - №3. - С. 4448.

190. Фрейдлин, И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / И.С. Фрейдлин. -М.: Медицина, 1984. 272 с.

191. Фримель, Г. Иммунологические методы: Пер. с нем. / Г. Фримель. М.: Медицина, 1987. - 472 с.

192. Фролова, O.E. Морфофункциональная характеристика моноцитов. Значение исследования нуклеолярного аппарата (обзор литературы) / O.E. Фролова // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - №10. - С. 3-8.

193. Хаитов, P.M. Основные задачи клинической иммунологии по изучению функциональной активности фагоцитирующих клеток / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин / Иммунология. 1995. - №3. - С. 6-10.

194. Хаитов, P.M. Роль макрофагов в патогенезе ВИЧ инфекции / P.M. Хаитов, Г.Н. Чувиров, Т.П. Маркова // Иммунология. - 1995. - №3. - С.10-14.

195. Харин, Г.М. Характер и механизмы нарушения функциональной активности печеночных макрофагов после экстремальных воздействий на организм / Г.М. Харин // Казанский мед. журнал. 1994. - №3. - С. 199-202.

196. Хейфец, Л.Б. Разделение форменных элементов крови человека в градиенте плотности верографин-фиколл / Л.Б. Хейфец, В.А. Абалакина // Лаб. Дело. 1973. - №10. - С. 579-581.

197. Хейхоу, Ф.Г. Дж. Гематологическая цитохимия / Ф.Г.Дж. Хейхоу, Д. Кваглино. -М.: Медицина, 1983. 320 с.

198. Хлыстова, З.С. Становление системы иммуногенеза плода человека / З.С. Хлыстова. М.: Медицина, 1987. - 256 с.

199. Храмова, И. А. Секреторно-синтетическая активность моноцитов крови и перитонеальных макрофагов при бесплодии у женщин / И.А. Храмова, И.П. Кольцов // Дальневосточный медицинский журнал. 2012. - №1. - С. 68-70.

200. Цинзерлинг, A.B. Основные нерешенные проблемы перинатальной и детской патологии / A.B. Цинзерлинг // Архив патологии. 1993. - № 5. -С. 3-5.

201. Цинзерлинг, В.А. Перинатальные инфекции. (Вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клинико-морфологических сопоставлений): Практическое руководство для врачей / В.А. Цинзерлинг, В.Ф. Мельникова. СПб.: Элби-СПб, 2002. - 352 с.

202. Цогоева, JIM. Профилактика вирусных гепатитов / JI.M. Цогоева, Ю.П. Снопко, Е.В. Лаврова // Медицина неотложных состояний. 2010. -№5(30). - С. 32-34.

203. Цыганкова, О.В. Лизосомальные ферменты. Новый взгляд на фундаментальные материи с позиций кардиолога / О.В. Цыганкова, Л.А. Руяткина, З.Г. Бондарева / Цитокины и воспаление. 2009. - №4. - С. 1117.

204. Чайжунусова, Н.Ж. Неспецифическая резистентность при полихимитерапии рака яичников / Н.Ж. Чайжунусова, Г.С. Шамсутдинова // Астана медициналык; журналы. 2012. -№3(71). - С. 156-158.

205. Чередеев, А.Н. Количественная и функциональная оценка Т- и В-систем иммунитета у человека / А.Н. Чередеев // Общие вопросы патологии. Итоги науки и техники. М.: ВИНИТИ, 1976. - Т. 4. - С. 124-160.

206. Черешнев, В.А. Иммунофизиология / В.А. Черешнев, Б.Г. Юшков, В.Г. Климин, Е.В. Лебедева. Екатеринбург: УрО РАН, 2002. - 259 с.

207. Шаронов, A.C. Оценка изменений стабильности лизосомных мембран мононуклеарных фагоцитов как метод аллергоиммунодиагностики и скрининга мембранотропных и радиопротективных препаратов: метод, рекомендации МЗ СССР. -М., 1989. 14 с.

208. Шахгильдян, И.В. Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика) / И.В. Шахгильдян, М.И. Михайлов, Г.Г. Онищенко. М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2003. - 384 с.

209. Шевак, И.М. Макрофаги и другие вспомогательные клетки / И.М. Шевак // В кн. Иммунология. Т. 1. - М.: Мир, 1987. - С. 115-172.

210. Шевалдин, А.Г. Хронический гепатит С и резидентные макрофаги печени / А.Г. Шевалдин // Фундаментальные исследования. 2010. - №2. -С. 138-147.

211. Шехтер, А.Б. Воспаление, адаптивная регенерация и дисрегенерация (анализ межклеточных взаимодействий) / А.Б. Шехтер, В.В. Серов // Архив патологии. -1991.-Т. 53.- №7. С. 7-14.

212. Шехтман, М.М. Руководство по экстрагенитальной патологии у беременных / М.М. Шехтман. М.: Триада-Х, 1999. - 816 с.

213. Шехтман, М.М. Руководство по экстрагенитальной патологии у беременных / М.М. Шехтман. 5-е изд. - М.: Триада - X, 2011. - 896 с.

214. Шехтман, М.М. Экстрагенитальная патология и беременность / М.М. Шехтман. JL: Медицина, 1987. - 296 с.

215. Шкурупий, В.А. Антибактериальная эффективность пролонгированной формы изониазида в эксперименте / В.А. Шкурупий, Ю.Н. Курунов, С.А. Архипов // Проблемы туберкулеза. 1997. - № 2. - С. 51-56.

216. Шкурупий, В.А. Лизосомотропизм проблемы клеточной физиологии и медицины / В.А. Шкурупий, Ю.Н. Курунов, H.H. Яковченко. -Новосибирск: НГМА, 1999. - 289 с.

217. Шпак, С.И. Альвеолярные макрофаги при воздействии ксенобиотиков / С.И. Шпак, Ю.И. Шрамко // Морфология. 2000. - Т. 118. - №6. - С. 66-68.

218. Яворковский, Л.И. Система мононуклеарных фагоцитов и ее злокачественные заболевания / Л.И. Яворковский. Рига: Зинатне, 1987. -181 с.

219. Якимова, Е.Р. Динамика изменения состояния основных защитных систем организма в условиях воздействия белка одноклеточных / Е.Р. Якимова, В.И. Немыря, О.В. Заремба, Л.Х. Мухамбетова // Гигиена и санитария, 1991. -№6. -С. 12-14.

220. Яковлев, М.Ю. Альвеолярные макрофаги в физиологии и патологии легких / М.Ю. Яковлев, Л.Д. Зубаирова, А.Н. Крупник, Н.К. Пермяков // Архив патологии. 1991.-№4.-С. 3-8.

221. Янкелевич, М.Я. Некоторые аспекты применения гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора в детской онкологии / М.Я. Янкелевич, Г.Л. Менткевич, И.С. Долгополов, Д.Г. Ижогин // Российский онкологический журнал. 1998. - № 6. - С.47-50.

222. Ярилин, А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. М.: Медицина, 1999.-608 с.

223. Ярилин, А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии / А.А. Ярилин // Иммунология. 1997. - №5. - С. 714.

224. Ярославский, В.К. Репродуктивная функция у женщин с гемоконтактным вирусным гепатитом / В.К. Ярославский, А.А. Яковлев, Т. А. Либова, Э.Б. Солитан // Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2001. - Т. 1. -№3. - С. 15-18.

225. Anderson, R.S. Comparative effects of inhaled silica or synthetic graphite dusts on rat alveolar cells / R.S. Anderson, S.M. Thomson, L.L.Jr. Gutshall // Arch. Environ. Contain. Toxicol. 1989. - V. 18. - №6. - P. 844-849.

226. Auwerx, J. The human leukemia cell line, THP-1: multifaceted model for the study of monocyte-macrophage differentiation / J. Auwerx // Experientia. 1991. -V. 47. -№1. - P. 22-31.

227. Balansky, R.M. Induction, persistence and modulation of cytogenetic alterations in cells of smoke-exposed mice / R.M. Balansky, F. D' Agostini, S. De Flora // Carcinogenesis. 1999. - V. 20. - № 8. - P. 1491-1497.

228. Balkwill, F. Cytokine amplification and inhibition of immune and inflammatory responses / F. Balkwill // Journal Viral Hepatitis. 1997. - №4, suppl. 2.-P. 6-15.

229. Bantel, H. Toxin is a mediator of Staphylococcus aureus induced cell death and activates caspases via the intrinsic death pathway independently of deathreceptor signaling / H. Bantel, В. Sinha, W. Domschke et al. // JCB. 2001. - V. 155(4).-P. 637-648.

230. Bassoe, C.F. Concurrent measurement of antigen- and antibody-dependent oxidative burst and phagocytosis in monocytes and neutrophils // C.F. Bassoe, I. Smith, S. Sornes, A. Holstensen. A.K. Lehmann // Methods. 2000. - V. 22. - P. 202-220.

231. Bobe, P. Nitric oxide mediation of active immunosuppression associated with graft-versus-host reaction / P. Bobe, K. Benihoud, D. Grandjon et al. //Blood. -1999.-V. 94. №3. - P. 1028-1037.

232. Bras, A. Nitric oxide regulates clonal expansion and activation-induced cell death triggered by staphylococcal enterotoxyn В / A. Bras, L. Rodriguez-Borlado, A. Gonzalez-Garsia et al. // Infect, and Immun. 1997. - V. 65. - №10. -P. 4030-4037.

233. Brown, E.J. Complement receptors and phagocytosis / E.J. Brown // Curr. Opin. Immunol. 1991. -V. 3. - P. 76-82.

234. Burster, T. Influenza A virus elevates active cathepsin В in primary murine DC / T. Burster, T. Giffon, M.E. Dahl, P. Bjórck, M. Bogyo, E. Weber, K. Mahmood, D.B. Lewis, E.D. Mellins // Int. Immunol. 2007. - V. 19. - P. 645655.

235. Bursuker, I. On the origin of macrophage heterogeneity: a hypothesis / I. Bursuker, R. Goldman // Journal RES. 1983. - V. 33. - №3. - P. 207-220.

236. Charboard, P. Early ontogeny of the human marrow from long bones: An immunohistochemical study of hematopoiesis and its microenvironment / P. Charboard, M. Tavian, L. Humeau, B. Peault // Blood. 1996. - V. 87. - P. 4109-4119.

237. Colombo, J.L. Time course of lipid-laden pulmonary macrophages with acute and recurrent milk aspiration in rabbits / J.L. Colombo, T.K. Hallberg, P.H. Sammut // Pediatr. Pulmonol. 1992. - V. 12. - №2. - P. 95-98.

238. Crofton, R.W. The origin, kinetics and characteristics of the Kupffer cells in the normal steady state // R.W. Crofton, D. Disselhoff, R. Van Furth // Journal Exp. Med. 1978.-V. 148.-P. 1-17.

239. Cross, J.C. Placental function in development and disease / J.C. Cross // Reprod. Fertil. Dev. 2006. - V. 18. - № 2. - P. 71-76.

240. D'Agostini, F. Chemoprevention of genotoxic damage in lung cells of rats exposed to cigarette smoke / F. D'Agostini, L. Scatolini, M. Maggiani, R. Balansky//Boll. Soc. Ital. Biol. Sper. 1992. -V. 68. -№ 2. - P. 137-142.

241. De Felici, M. Macrophages in the urogenital ridge of the mid-gestation mouse fetus / M. De Felici, J. Heasman, C.C. Wylie, A. McLaren // Cell Difer. 1986. -V. 18.-P. 119-129.

242. De Flora, S. Prevention by N-acetylcysteine of benzoa.pyrene clastogenicity and DNA adducts in rats / S. De Flora, F. D'Agostini, A. Izzotti, R. Balansky // Mutat. Research. 1991. - V. 250. - № 1-2. - P. 87-93.

243. Denz, H. Immune activation and anemia of chronic disorders / H. Denz, B. Orth, P. Huber et al. //Blood. 1993. -V. 81. - P. 1404-1409.

244. Di Santo, J.P. Common cytokine receptor gamma chain (gamma c)-dependent cytokines: understanding in vivo functions by gene targeting / J.P. Di Santo, R. Kuhn, W. Muller//Immunological Reviews. 1995. -V. 148. - P. 19-34.

245. Dragneva, Y. Subcytocidal attack by Staphylococcal alpha-toxin activates NF-kB and induces interleukin-8 production / Y. Dragneva, C.D. Anuradha, A. Valeva et al. // Infect, and Immun. 2001. - V. 69 (4). - P. 2630-2635.

246. Drouin, S. Transforming growth factor-p2 regulates C3 secretion in monocytes through a protein kinase C-dependent pathway / S. Drouin, S. Kiley, J. Carlino, S. Barnum // Molec. Immunol. 1998. -V. 35. - P. 1-12.

247. Enzan, H. Electron microscopic studies of macrophages in early human yolk sacs / H. Enzan // Acta Pathol. Jpn. 1986. - V. 36. - P. 49-64.

248. Fang, F.C. Nitric oxide production by human macrophages: there is NO doubt about it / F.C. Fang, A. Vazquez-Torres // Am. Journal Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2002. - V. 282. - №5. - P. 941-943.

249. Foster, S.L. Gene-specific control of inflammation by TLR-induced chromatin modification / S.L. Foster, D.C. Hargreaves, R. Medzhitov//Nature. — 2007.-V. 447.-P. 972-978.

250. Furth van, R. Origin and turnover of monocytes and macrophages / R. van Furth//Cell kinetics inflammatory reaction. Berlin. 1989. - P. 125-150.

251. Geissmann, F. Blood monocytes consist of two principal subsets with distinct migratory properties / F. Geissmann, S. Jung, D.R. Littman // Immunity. 2003. -V. 19.-№1.-P. 71-82.

252. Gogichadze, G.K. Hypothesis explaining simultaneous development of acquired immunodeficiency syndrome and malignant tumors / G.K. Gogichadze, T.G. Dolidze // Med. Hypotheses. 1995. - V. 44. - №5. - P. 307-308.

253. Golding, P.L. Multisystem involvement in chronic liver disease. Studies on the incidence and pathogenesis / P.L. Golding, M. Smith, R. Williams // Amer. Journal Med. 1973. -V. 55. - P. 772-782.

254. Gordon, S. Alternative activation of macrophages / S. Gordon //Nat. Review Immunology. 2003. - V. 3. - P. 13-35.

255. Gordon, S. Monocyte and macrophage heterogeneity / S. Gordon, P.R. Taylor // Nat. Review Immunology. 2005. - V. 5. - P. 953-956.

256. Gordon, S. The macrophage as secretory cell / S. Gordon, I.C. Unkelles, Z.A. Cohn // Immune recognition. New York, 1975. - P. 589-614.

257. Gordon, S. The macrophage: Past, present and future / S. Gordon // Eur. Journal Immunol. 2007. - 37 Suppl 1: S9-17.

258. Gotzos, V. In vitro culture of human peritoneal fluid cells /V. Gotzos / Acta. Anat. (Basel). 1977. -V. 98. -№ 3. - P. 281-294.

259. Gratchev, A. Alternatively activated antigen-presenting cells: molecular repertoire, immune regulation, and healing / A. Gratchev, K. Schledzewski, P. Guillot, S. Goerdt // Skin Pharmacol. Appl. Skin Physiol. 2001. - V. 14. - P. 272-279.

260. Gratchev, A. Interleukin and dexamethasone counter regulate extracellular matrix remodeling and phagocytosis in type-2 macrophages / A. Gratchev, J. Kzhyshkowska, J. Utical, S. Goerdt // Skand. Journal Immunol. 2005. - V. 61. -P. 10-17.

261. Greenberg, S. Phagocytosis and innate immunity / S. Greenberg, S. Grinstein //Curr. Opin. Immunology.-2002.-V. 14.-P. 136-145.

262. Grup-puso, P. Effects of maternal starvation on hepatocyte proliferation in the late gestation fetal rat / P. Grup-puso, J. Boylan, P. Anand, T. Bienieki // Pediatr. Res. -2005. -V. 57. -№ 2. P. 185-191.

263. Guo, C.J. S-Nitrosylation of surfactant protein-D controls inflammatory function / C.J. Guo, E.N. Atochina-Vasserman, H. Abramova, J.P. Foley, A. Zaman, E. Crouch, M.F. Beers, R.C. Savani, A.J. Gow // PLoS Biology. 2008. -V. 6(ll):e266.

264. Hao, J.S. Immune enhancement and anti-tumour activity of IL-23 / J.S. Hao, B.E. Shan // Cancer. Immunol. Immunother. 2006. - V. 55. - P. 1426-1431.

265. Hopkinson-Wooley, J. Macrophage recruitment during limb development and wound healing in the embryonic and foetal mouse / J. Hopkinson-Wooley, D. Hughes, S. Gordon, P. Martin // Journal of Cell Science. 1994. - V. 107 (5). -P. 1159-1167.

266. Johnson, N.F. Estimation of the dose of radon progeny to the peripheral lung and the effect of exposure to radon progeny on the alveolar macrophage / N.F. Johnson, G.J. Newton // Radiat. Research 1994. - V. 139. - № 2. -P. 163-169.

267. Joker, A.M. Immunopathology of Acute Galactosamine Hepatitis in Rats / A.M. Joker // Hepatology. 1990. - V. 11. - №4. - P. 622-627.

268. Konig, B. Activation of human effector cells by different bacterial toxins (leukocidin, alveolysin, and erytrogenic toxin A): generation of interleukin-8 / B. Konig, M. Koller, G. Prevost et al. // Infect, and Immun. 1994. - V. 62 (11). -P. 4831-4837.

269. Kutteh, W. Regulation of interleukin-6 production in human fetal Kupffer cells / W. Kutteh, W. Rainey, B. Carr // Scand. Journal Immunology. 1991. -V. 33. -№5. - P. 607-613.

270. Lang, R.A. Macrophages are required for cell death and tissue remodeling in the developing mouse eye / R.A. Lang, J.M. Bishop // Cell. 1993. - V. 74. - P. 453-462.

271. Lehmann, A.K. Phagocytosis: measurement by flow cytometry / A.K. Lehmann, S. Sornes, A. Halstensen // Journal Immunol. Methods. 2000. - V. 243.-P. 229-242.

272. Levin, M.L. Acquisition of coinfection and simultaneous transmission of Borrelia burgdorferi and Ehrlichia phagocytophila by Ixodes scapularis ticks / M.L. Levin, D. Fish //Infect. Immunity. -2000. V. 68. -№ 4. -P. 2183-2186.

273. Ma, J. Regulation of macrophage activation / J. Ma, T. Chen, J. Mandelin, A. Ceponis, N.E. Miller, M. Hukkanen, G.F. Ma, Y.T. Konttinen // Cell. Mol. Life Sci. -2003. V. 60. - P. 2334-2346.

274. Mantovani, A. Macrophage Polarization Comes of Age / A. Mantovani, A. Sica, M. Locati // Immunity. 2005. -V. 23 (4). - P. 344-346.

275. Marin, J.J. Molecular bases of the excretion of fetal bile acids and piegments through the fetal liver-placenta-maternal liver pathway / J.J. Marin, R. Macias, O. Briz, M. Perez et al. // Ann. Hepatol. 2005. - V. 4. - № 2. - P. 70-76.

276. Martinez, F.O. Macrophage activation and polarization / F.O. Martinez, A. Sica, A. Mantovani, M. Locati // Front Biosci. 2008. - V. 1(13). - P. 453-461.

277. Melnicoff, M.J. Maintenance of peritoneal macrophages in the steady state / M.J. Melnicoff, P.K. Horan, E.W. Breslin, P.S. Morahan // Journal Leukocyte Biology. 1988. - V. 44. - №5. - P. 367-375.

278. Metcalf, D. The hemopoetic colony stimulating factor. Amsterdam: Elsevier, 1984.-312 p.

279. Montagna, W. The architecture of black and white facial skin / W. Montagna, K. Carlisle // Journal Am. Acad. Dermatol. 1991. - №6. (Pt. 1). - P. 929-937.

280. Mosier, D.E. Functional maturation of thymic lymphocyte populations in vitro / D.E. Mosier, C.W. Picree // Journal Exp. Med. 1972. - V. 136. - P. 1484-1500.

281. Myers, K.R. Regulation of actin cytoskeleton dynamics by Arf-family GTPases / K.R. Myers, J.E. Casanova // Trends Cell. Biol. 2008. - V. 18. -№4.-P. 184-192.

282. Naito, M. Development, differentiation, and maturation of macrophages in the fetal mouse liver / M. Naito, T. Takahashi, S. Nishikawa // Journal Leukocyte Biology. 1990. - V. 48. - P. 27-37.

283. Nau, G. Human macrophage activation programs induced by bacterial pathogens / G. Nau, J. Richmond, A. Schbesinger et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - V. 99. - № 3. - P. 1503-1508.

284. Nauwynck, H.J. Entry of porcine reproductive and respiratory syndrome virus into porcine alveolar macrophages via receptor-mediated endocytosis / H.J.

285. Nauwynck, X. Duan, H.W. Favoreel et al. I I Journal General. Virol. 1999. - V. 80.-P. 297-305.

286. Oosterhout, A.J.M. Thl/Th2 paradigm: not seeing the forest for the trees? /

287. A.J.M. Oosterhout, A.C. Motta // Eur. Respir. Journal. 2005. - V. 25. - P. 591593.

288. Paddenberg, R. Essential role of complex II of the respiratory chain in hypoxia-induced ROS generation in the pulmonary vasculature / R. Paddenberg,

289. B. Ishaq, A. Goldenberg, P. Faulhammar et al. / Am. Journal Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. -2003. -V. 284. P. 710-719.

290. Powell, C.S. Mitochondrial Complex I, aconitase and succinate dehydrogenase during hypoxia-reoxygenation: Modulation of enzyme activities by MnSOD / C.S. Powell, R.M. Jackson / Am. Journal Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2003. - V. 285. - P. 189-198.

291. Rollany, H. Effect of beta-interferon on in vitro spleading of mouse peritoneal macrophages / H. Rollany, H. Degre // Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. 1982.-V. 890.-№6.-P. 389-395.

292. Rosenzwajg, M. Human dendritic cell differentiation pathway from CD34+ hematopoietic precursor cells / M. Rosenzwajg, B. Canque, J.C. Gluckman // Blood. 1996. -V. 87. -№2. - P. 535-544.

293. Sanhua, V.M. Relation among pathological maternal history and weight diagnosis at birth / V.M. Sanhua, C. Juarez, C. Mdel. Moreno, E.G. Posada, M.K. Horwitz, R.V. Ramos, V.C. Enriquez, H.A. Rosas // Ginecol. Obstet. Mex. -2004.-V. 72.-P. 561-569.

294. Schlesinger, L.S. Entry of Mycobacterium tuberculosis into mononuclear phagocytes / L.S. Schlesinger // Curr. Top. Mycrobiol. Immunol. 1996. - V. 215.-P. 71-96.

295. Segovia-Juarez, J.L. Identifying control mechanisms of granuloma formation during tuberculosis infection using an agent-based model / J.L. Segovia-Juarez, S. Ganguli, D. Kirschner // Journal Theor. Biol. 2004. - V. 213. - № 3. - P. 357-376.

296. Spano, A. Expression of cell kinetics and death during monocyte-macrophage differentiation: effects of Actinomycin D and Vinblastine treatments / A. Spano, G. Monaco, S. Barni, L. Sciola / Histochemistry and Cell Biology. 2007. - V. 127.-№1.-P. 79-94.

297. Spiteri, M.A. Alveolar macrophages that suppress T-cell response may be crucial to the pathogenic outcome of pulmonary sarcoidosis / M.A. Spiteri, S.W. Clarke, L.W. Poulter // Eur. Respir. Journal 1992. - V. 5. - P. 394-403.

298. Spiteri, M.A. Characterization of immune inducer and suppressor macrophages from the normal human lung / M.A. Spiteri, L.W. Poulter // Clin. Exp. Immunol.-1991.-V. 83.-P. 157-162.

299. Stuart, L.M. Response to Staphylococcus aureus requires CD36-mediated phagocytosis triggered by the COOH-terminal cytoplasmic domain / L.M. Stuart, J. Deng, J.M. Silver et al. // Journal Cell Biology. 2005. - V. 170. - P. 477-485.

300. Tacke, F. Migratory fate and differentiation of blood monocyte subsets / F. Tacke, G.J. Randolph // Immunobiology. 2006. - V. 211. - №6-8. - P. 609618.

301. Thio, T. Malignant histiocytosis of the brain in three dogs / T. Thio, M. Hilbe, P. Grest, A. Pospischil // Journal Comp. Pathol. 2006. - V. 134. - №2-3. - P. 241-244.

302. Tite, J.P. The involvement of tumor necrosis factor in immunity to Salmonella infection / J.P. Tite, G. Dougan, S.N. Chatfield // Journal Immunol. 1991. - V. 147.-P. 3161-3164.

303. Walev, I. Staphylococcal alpha-toxin kills human keratinocytes petmeabilizing the plasma membrane for monovalent / I. Walev, E. Martin, D. Jonas et al. // Infect, and Immun. 1993. - V. 61 (12). - P. 4972-4979.

304. Wawro, B. Tropomyosin regulates elongation by formin at the fast-growing end of the actin filament / B. Wawro, N.J. Greenfield, M.A. Wear, J.A. Cooper, H.N. Higgs, S.E. Hitchcock-DeGregori // Biochemistry. 2007. - V. 46. - № 27. -P. 8146-8155.

305. Weitberg, A.B. Stimulated human phagocytes produce cytogenetic changes in cultured mammalian cells / A.B. Weitberg, S.A. Weitzman, M. Destrempes, S.A. Latt, T.P. Stossel //New Engl. Journal Med. 1983. - V. 308. - P. 25-29.

306. Yoshida, M. GM-CSF regulates protein and lipid catabolism by alveolar macrophages / M. Yoshida, M. Ikegami, J.A. Reed, Z.C. Chroneos, J.A. Whitsett // Am. Journal Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2001. - V. 280. - P. 379-386.

307. Ziegler-Heitbrock, H.W. Definition of human blood monocytes / H.W. Ziegler-Heitbrock // Journal Leukocyte Biology. 2000. - V. 67. - P. 603-606.

Информация о работе

Шаврина, Екатерина Юрьевна
кандидата биологических наук
Оренбург, 2012
ВАК 03.03.04

Диссертация

Роль хронического поражения печени самок крыс в нарушении морфофункционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов потомства - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы