Репаративная регенерация и имплантационный рост опорных тканей на фоне динамики морфо-функционального состояния печени при описторхозе.

Баранов, Сергей Викторович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Репаративная регенерация и имплантационный рост опорных тканей на фоне динамики морфо-функционального состояния печени при описторхозе.
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Репаративная регенерация и имплантационный рост опорных тканей на фоне динамики морфо-функционального состояния печени при описторхозе."

На правах рукописи

БАРАНОВ Сергей Викторович

РЕПАРАТИВНАЯ РЕГЕНЕРАЦИЯ И ИМПЛАНТАЦИОННЫЙ РОСТ ОПОРНЫХ ТКАНЕЙ НА ФОНЕ ДИНАМИКИ МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ ПРИ ОПИСТОРХОЗЕ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология 14.00.15 - патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

0034705Э0

Тюмень - 2009

003470590

Работа выполнена на кафедре гистологии, цитологии и эмбриологии им. проф. П.В. Дунаева и кафедре патологической анатомии ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Росздрава»

Научные доктор медицинских наук, профессор

руководители: Соловьев Георгий Сергеевич

доктор медицинских наук, профессор Заслуженный деятель науки РФ, Бычков Виталий Григорьевич

Официальные доктор медицинских наук, профессор

оппоненты: Ерениев Степан Иванович,

ГОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия Росздрава»

доктор медицинских наук, профессор Зуевский Владислав Петрович БУ ВПО «Ханты-Мансийский

государственный медицинский институт ХМАО-Югры»

Ведущая ГОУ ВПО «Новосибирский

организация: государственный медицинский

университет Росздрава»

Защита состоится « » 2009 г. в часов на

заседании диссертационного совета Д 208. 101. 02. при ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Росздрава» (625023, г. Тюмень, ул. Одесская, 54).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Росздрава» (625023, г. Тюмень, ул. Одесская, 61).

Автореферат разослан« » 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета С.А. Орлов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. После открытия и первых описаний возбудителя описторхоза (S. Rivolta., 1884; К.Н. Виноградов, 1891) гельминтоз стал проблемой пристального внимания биологов и врачей. Были разработаны основные положения, касающиеся эпидемиологии, клиники, морфологических проявлений паразитоза (H.H. Плотников 1976; В.Я. Глумов 1984; В.Г. Бычков 1988, 2006 и др.).

В настоящее время социальные, медицинские и биологические вопросы описторхоза не потеряли актуальности, т. к. заболеваемость населения в гиперэндемичных очагах поддерживается на высоком уровне вследствие закрепившихся традиций питания населения. Описторхоз до сих пор остался одной из распространённых форм паразитарной патологии в регионах Среднего Приобья и Обь-Иртышского бассейна (Т.Ф. Степанова, 2004; Г.Г. Крылов, 2005; Т.М. Гузеева, 2009).

Установлено влияние описторхозной инвазии на органы-экониши гельминта и системы организма, в которых паразит не вегетирует (Г.Г. Крылов, 2005; Е.В. Калюжина с соавт., 2008), описторхоз манифестирует соматическую патологию, что заметно экзальтирует течение основных заболеваний (A.A. Беккс соавт., 2008).

К одной из нерасшифрованных особенностей адаптивных реакций организма хозяина на внедрение гельминта, следует отнести создание позитивных морфофизиологических проявлений, свидетельствующих о неоднозначности системы «паразит-хозяин».

В частности подобная ситуация была обозначена применительно к скелетным тканям (О.Э. Вакулина, 2008). Остаётся не изученным механизм вовлечения в ответную системную реакцию на гельминта важнейших форм биологического субстрата организма хозяина -генома, клеток, тканей.

Всё выше упомянутое привело к убеждению в необходимости параллельного исследования биологических потенций тканей мезенхимного генеза печени, скелетных тканей при заживлении дефектов трубчатой кости и в условиях культивирования в организме поражённого описторхозом животного.

Цель исследования:

Выявить особенности репаративной регенерации и имплантационного роста опорных тканей при описторхозе и установить значимость симбиоза «паразит-хозяин» для формирования адаптивных и морфогенетических реакций в пораженном гельминтом организме.

Задачи и исследования:

1. Изучить состояние биологических мембран, биосинтеза и биодеградации коллагена и морфологических преобразований печени на различных сроках при описторхозной инвазии .

2. Провести молекулярно-генетическое исследование генов эпидермального и эндотелиального факторов роста у сирийских хомяков при хроническом описторхозе.

3. Определить особенности гистогенезов скелетных тканей в зоне дефекта трубчатой кости в условиях эксперимента на животных, зараженных описторхозом.

4. Изучить особенности имплантационного роста эмбрионального провизорного гиалинового хряща в культурах «in vivo» по методу Ф. М. Лазаренко у интактных животных и при описторхозной инвазии.

Научная новизна. Впервые показано, что принцип провизорности, как один из механизмов адаптации и эволюционирования, сохраняется на фоне описторхозной инвазии и реализуется в процессе гисто- и органогенезов производных мезенхимы и энтодермальной закладки. При хроническом описторхозе устанавливаются морфофункциональные параллели между состоянием морфологических, ультраструктурных и биохимических показателей печени и тканями, не имеющими непосредственного контакта с гельминтом или его личинками; в печени пролифераты клеток холангиоцитарного дифферона формируют эпителиальные структуры, соответствующие провизорной стадии железистого органогенеза, способные к органотипической дифференцировке; При хроническом описторхозе формируются молекулярно-генетические механизмы регуляции продуктивных процессов, выявляется экспрессия и мутация генов- регуляторов факторов роста и продукции интегральных белков плазмалеммы; ускоряются процессы репаративной регенерации опорных тканей, гисто- и органотипической дифференцировки эмбрионального провизорного гиалинового хряща в культурах в организме.

Установлено, что репаративная регенерация опорных тканей при описторхозе характеризуется конкурентным вовлечением в процессы гистогенеза клеток трёх механоцитарных дифферонов: фиброцитарного, хондроцитарного, остеоцитарного, что приводит к облигатному формированию хрящевых участков в составе регенерата. В то же время морфогенез регенерата у животных незараженных описторхозом характеризуется факультативным хондрогенезом.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Существенно расширены представления о механизме адаптивных реакций организма при описторхозе. Выявлена система молекулярно-генетической регуляции биологических потенций тканей различной генетической природы, продуктивных процессов, в том числе репаративной регенерации, способности к тканево- и органотипической дифференцировке. Показано, что при хроническом описторхозе устанавливаются морфо-функциональные параллели в состоянии печени и тканей, не имеющих непосредственного контакта с гельминтом. Установлено, что репаративная регенерация опорных тканей в зоне дефекта трубчатой кости при описторхозе характеризуется конкурентным вовлечением коммитированных клеток механоцитарных дифферонов и обязательным формированием хрящевых зон в составе регенерата. Результаты исследования могут быть использованы при подготовке учебных пособий и лекций по гистологии, патологии, травматологии и инфекционным болезням.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При описторхозе ускоряются процессы репаративной регенерации опорных тканей и дифференцировка эмбрионального гиалинового провизорного хряща в культурах «in vivo».

2. На фоне описторхозной инвазии гистогенезы опорных тканей при репаративной регенерации и в условиях имплантационного роста осуществляются в соответствии с принципом провизорности.

3. При хроническом описторхозе в систему регуляции репаративных гистогенезов вовлекаются молекулярно-генетические механизмы и устанавливаются морфофункциональные параллели состояния печени и репарации тканей.

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационного исследования были доложены и обсуждены на: Международном форуме по проблемам науки, техники и образования «III тысячелетие - новый мир» (Москва, 2002); Международном симпозиуме «Медицина и охрана здоровья 2003» (Тюмень, 2003); V Общероссийском съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (Казань, 2004); Российской научной конференции «Новое в экспериментально-морфологическом изучении глаза» (Оренбург, 2005); Международном симпозиуме «Медицина и охрана здоровья 2006» (Тюмень, 2006); научном совещании «Актуальные проблемы учения о тканях» (Санкт-Петербург, 2006); научной конференции «Инновационные технологии» (Санкт-Петербургб, 2007); Всероссийской конференции "Актуальные

аспекты паразитарных заболеваний в современный период» (Тюмень, 2008).

По материалам диссертации опубликовано: 12 печатных работ, из них 4 - в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследований внедрены в учебный процесс кафедр травматологии и ортопедии, патологической анатомии, гистологии, цитологии и эмбриологии ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Росздрава» и кафедры гистологии БУ ВПО «Ханты-Мансийский государственный медицинский институт ХМАО-Югры».

Объём и структура работы. Диссертация изложена на 126 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 7 таблицами и 32 рисунками. Состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов собственных исследований, выводов.

Список литературы содержит 216 источников (156 отечественных, 60 иностранных).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования. Модель описторхоза создавали у сирийских хомяков (160) массой 95±4,8 г самцов, животные содержались в стандартных условиях вивария (З.Ф. Лоскутова, 1990). Метацеркарии из язей (Leuciscus idus) одного биотопа выделяли путем ферментативного переваривания по методике Г.А. Глазкова (1977). При выполнении экспериментов соблюдались все правила работы с лабораторными животными (приказ МЗ РФ № 755 от 12.08.77).

Лабораторные животные разделены на II группы; 1 - контрольная (51 животное), II - модель описторхоза - заражение 50 метацеркариями (186).

Печень хомяков подвергнута гистологическим, гистохимическим изучениям. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином, по Ван Гизон и Слинченко, альциановым синим, по Браше, Фельгену, реактивом Щиффа по Мак-Манусу с контролями амилазой, толуидиновым синим на фосфатно-цитратном буфере (рН = 1,0-4,6 и 6,0); ферменты выявлялись по Гомори (ЩФ), Берстону (КФ), Ллойда (СДГ). Активность ферментов оценивалась визуально-полуколичественным балльным методом по В.В.Соколовскому (1971).

Митотический режим эпителиев (% о) определяли в препаратах печени методом И.А. Алова с соавт. (1973), апоптотический индекс вычисляли на полутонких срезах в %о.

Степень воспалительных и склеротических процессов регистрировалась посредством определения индекса площади воспалительных инфильтратов (%), занимаемой клеточным и волокнистым элементами, а также доли (%) последних в составе инфильтратов.Морфометрический анализ клеток проводили на компьютерной тест-системе «МОР - system». Методы биохимического раздела работы представлены в табл. 1

Таблица 1

Биохимические реакции для изучения структуры и функции мембран клеток

Выявляемые соединения Единицы Измерения Автор метода

Диеновые коньюгаты нМоль / г ткани И.Д. Стальная(1977)

Малоновый диальдегид нМоль / г ткани И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили (1977)

Фосфолипазная активность нМол / мг липидов X. Брюкерхов, Р. Дженсен (1978)

СОД (супероксиддисмутаза) ед.акгивности В.Н. Чумаков, Л.Ф. Осинская (1977)

В - каротин мМоль/л A.A. Покровский (1969)

ГАГ Катепсин Д мг/л нМоль / мл Е.В. Корякина с соавт., (1982), А. Баррет, М.Хинт (1980)

Пролин мМоль / л В.И. Крылов с соавт., (1984)

Статистическая обработка полученных количественных характеристик проводилась на ЭВМ с применением специальных программ. В работе использованы корректированные показатели, в сводных таблицах приведены критерии вероятности различия, определяемые по Стьюденту. Стереологиче-ские параметры вычислены согласно с рекомендациями В. Weibel (1979), их номенклатура приведена в соответствие с указаниями МСО.

Трансмиссионная электронная микроскопия выполнялась на микроскопе LEO - 912 АВ (Zeiss) в патологоанатомическом отделении Ханты-Мансийской окружной клинической больницы; часть материалов изучалась в лабораториях электронной микроскопии РОНЦ РАМН им.

Н.Н.Блохина (г. Москва), РКЦ «Восстановительная травматология и ортопедия им. ГАИлизарова» (г. Курган).

Молекулярно-генетические исследования проводили в «ООО Центр молекулярно-генетической диагностики А.Х. Сабирова» (г.Тюмень). Сосудистый эндотелиальный ростовой фактор (VEGFR) выявляли в плазме крови сирийских хомяков (10) с описторхозной инвазией (38 сут) посредством иммуносорбентного анализа в модификации ELISA на микропланшетном ридере Anthos 2020 с тест-системой Biosource фирмы Invitrogen. Состояние эпидермального фактора роста выявляли с использованием праймеров для 18,19,20 21 экзонов гена EGFR при помощи ПЦР (полимеразная цепная реакция) на генетическом анализаторе 3130 XL Applera фирмы Applied Biosistems (США). Результаты анализов проконсультированы к.м.н. А.Х. Сабировым.

Для изучения состояния репаративной регенерации костной ткани на фоне описторхозной инвазии проведены две серии экспериментов (контрольные и опытные). В каждой серии было взято по 24 животных, таким образом, на каждую «точку» исследования приходилось по 3 экспериментальных животных. У сирийских хомяков в стерильных условиях под эфирным масочным наркозом после разреза кожи и мягких тканей отсепаровывали надкостницу передней поверхности большеберцовой кости животного и формировали фиссурным зубоврачебным бором №1 в диафизе дефект (1x3 мм), проникающий в полость костномозгового канала. Рану ушивали наложением кожно-мышечного шва. Через 1, 7, 10, 16, 24, 29, 41, 62 суток животных выводили из опыта, умерщвляли под эфирным наркозом, выделяли большеберцовые кости и забирали для исследования печень, кости помещали в фиксирующую жидкость - 5% раствор азотной кислоты, приготовленный на 10% растворе формалина, заливали в парафин. Гистологические срезы обрабатывали общегистологическими методами. Гистохимически выявляли вещества углеводной природы (ШИК-реакция по Мак-Манусу, реакция связывания коллоидального железа по Хейлу, реакция метахромазии с кризиловым прочным фиолетовым), кальций выявляли по методу Даля (Пирс Э., 1962, В.В. Семченко и др., 2004). Активность процессов минерализации тканей регенераторной «мозоли» выявляли СФ-4А при длине волны 540 нм (Г.С. Соловьев, 1986). Состояние пролиферации клеток механоцитарных дифферонов при заживлении дефектов трубчатой кости определяли путем подсчета меченных ядер с использованием НЗ тимидина на 10 сутки после моделирования дефекта. В данном

разделе эксперимента были взяты результаты от 6 животных (по три животных в контрольной и опытной группах). НЗ-тимидин вводили внутрибрюшинно однократно за 1 час до взятая материала из расчета 3,7x107 Бк на 1 г массы тела животного. При анализе гистоавтографов с Н 3-тимидином меченными считали клетки, ядра которых содержали не менее 5 зерен серебра. В соответствии с рекомендацией С.Д. Валова (2004) в автографах подсчитывали индекс меченых ядер в промиллях на 10 тыс. клеток. Для подтверждения детерминированности гистогенеза скелетных тканей в соответствии с принципом провизорности проведено культивирование провизорной эмбриональной хрящевой ткани «in vivo» по методу Ф.М. Лазаренко (1959). В стерильных условиях забирали материал (хрящевые модели трубчатых костей конечностей зародышей сирийских хомяков на стадии 14 суток утробного развития). Выделенный материал помещали в стерильную чашку Петри с питательной средой 199. Отпрепарированные фрагменты помещали в другую стерильную чашку со свежей порцией питательной среды и антибиотиком (стрептомицин) в разведении 1:50 ООО ед в 1 мл. Хрящевые модели измельчали до размера 2/3 мм3 смешивали с кусочками нейтрального целлоидина аналогичного размера в соотношении 1:2 (одна часть имплантируемой ткани, две части целлоидина). Из приготовленной массы готовили материал для имплантатов и симметрично помещали по одному имплантату (слева и справа) под кожу передней брюшной стенки реципиента. Опытная серия поставлена на животных зараженных описторхозом, в контрольной серии использованы незараженные описторхозом реципиенты. На стадиях 1, 3, 7, 10, 16 , 24, 29, 41, 62 суток подопытных животных умерщвляли под эфирным наркозом, извлекали имплантаты, фиксировали в жидкости Карнуа, заливали в парафин и подвергали гистологической обработке. На каждый срок эксперимента были взяты по три животных в обеих сериях, таким образом в опытной и контрольной сериях на каждом сроке эксперимента было изучено по 6 имплантатов (всего 108 имплантатов). Гистологические срезы окрашивали выше отмеченными обзорными и гистохимическими методами.

Результаты исследования

Структурно-функциональное состояние паренхимы и стромы печени при описторхозе. Исследование динамики показателей альтеративных, продуктивных, воспалительных и

репаративных реакций печени выявило нарастание показателей повреждения гепатоцитов до 193,5%о на 41 сут инвазии (в контроле -40,8%о) и снижение их до 92,8%о к 120 сут эксперимента.

Доля гипертрофированных и двуядерных гепатоцитов (83,1%о и 85,3%о соответственно) достигала максимальных показателей на 24 сут болезни, постепенно снижалась к концу эксперимента до 68,8%о и 45,2%о, что существенно выше нормативных показателей (56,2%о и 21,3%о, соответственно).

Митотический индекс гепатоцитов в период 7-16 сут инвазии составил 0,9%о-0,7%о (в контрольной группе - 1,01%о), в хронической стадии описторхоза этот показатель составил 1,0%о (29 сут) и 3,0%о (120 сут). Прогрессивно-регрессивный индекс (P/R) - отношение суммы показателей гипертрофированных, двуядерных и делящихся гепатоцитов к показателям погибших, в контрольной группе составил 1,9. С 3 сут инвазии P/R - индекс заметно снижался до 0,8 (41 сут) и достиг 1,3 к концу эксперимента (120 сут), что свидетельствует о значительно выраженной атрофии гепатоцеллюлярного дифферона паренхимы печени.

Индекс площади фиброза - доля (%) элементов собственной соединительной ткани к площади воспалительных инфильтратов -нарастала с 3,0% (7 сут) до 62,1% (120 сут) - наиболее выраженный показатель продуктивных реакций в острой и хронической фазах экспериментального описторхоза.

Особый интерес представляет преобразование в печени на 10 сут заражения животных метацеркариями Opisthorchis felineus: индекс площади фиброза (ИПФ) составил 7,56±1,06%. Общая плотность инфильтратов занимала 19,2±5,8% площади срезов, причем увеличивается доля эозинофильных лейкоцитов до 24,17±2,02%, плазматических клеток - 18,52±1,45%, фибробластов - 9,52±0,8%. В составе клеточных коопераций появляются новые элементы, не наблюдавшиеся в более ранние сроки, - коммитированные клетки (КК), доля их составила 6,92 ± 0,93%.

КК (рис. 1) в данном периоде болезни округлой формы со светлым ядром, ядерно-цитоплазматический индекс составляет 2,1 ±0,8. Диаметр их колеблется от 24,08 до 29,07 Pix (26,48±0,53, CV = 6,3±1,41). Кроме того, встречаются свободно лежащие КК овальной формы с более темным ядром ядерноцитоплазматический индекс -2,9±0,7. Размеры клеток по длиннику колеблются от 39,0 до 49,82 Pix (44,90±1,47, CV = 10,37±2,32), в поперечнике - от 18,36 до 26,08 Pix (22,33±0,85, CV = 12,0±2,68). Третью группу КК представили элементы,

строящие ряды, размеры их колебались по длиннику от 31,26 до 40,61 Pix (32,47±2,61, CV = 21,24), в поперечнике - от 17,8 до 23,71 Pix (20,66±0,98, CV = 12,63±3,37). Коммитированные клетки печени - это преобразующиеся клетки, возникающие в процессе пролиферации и созревания стволовых клеток, которые дифференцируются в данный период эксперимента преимущественно в элементы холангиоцеллюлярного дифферона с формированием псевдожелезистых структур - провизорных образований желез.

Морфологический анализ показал, что острая и хроническая стадии описторхозной инвазии характеризуются альтеративными, продуктивными реакциями печени и иммунным воспалением.

Рис. 1. Камбиальные клетки в составе воспалительного инфильтрата при описторхозной инвазии. Печень. ТМх3850.

Апоптоз гепатоцитов наиболее выражен в период 10-41 сут инвазии. Репаративная регенерация элементов гепатоцеллюлярного дифферона осуществляется за счет гипертрофированных и двуядерных гепатоцитов и митотического деления. Однако полной структурной компенсации в печени не происходит, а роль цитокинеза в данном процессе ничтожна, т.е. уже в ранней фазе описторхоза у лабораторных животных наблюдается атрофия паренхимы, т.к. показатели гибели гепатоцитов превосходят таковые репаративных процессов, а прогрессивно-регрессивный индекс снижается до 0,9 (1062 сут), к концу эксперимента (120 сут) повышается до 1,3, но не достигает уровня в контрольной группе (1,9).

Пролиферация холангиоцитов нарастает до 29 сут инвазии, постепенно снижается вплоть до конца эксперимента. Воспалительные инфильтраты в печени возникают с 7 сут эксперимента, наибольшие значения индекса площади их достигают в период яйцепродукции (29 сут инвазии), существенное снижение ИПВИ наблюдается к 120 сут инвазии (18,3% площади среза). Фибропластические процессы развиваются после 7 сут заражения (фибробласты в инфильтратах), к концу эксперимента волокнистые структуры занимают более половины клеточного состава инфильтратов.

Коммитированные, овальные, клетки - дифференцирующиеся элементы стволовых клеток печени (I.V. Uryvaeva, 1993), индукция пролиферации и дифференцировки которых возможны только после тяжелых повреждений генома, причем частичная гепатэктомия к таковым не относится (И.В.Урываева, 1001). При описторхозе сирийских хомяков после 10 сут инвазии в составе инфильтратов появляются КК, которые к 24 сут полностью созревают в холангиоциты, формирующие дуктулярные структуры. Только единичные коммитированные клетки в процессе дифференцировки эволюционируют в гепатоциты, что подтверждает известное правило Leduc (E.H. Leduc, 1964). По мере хронизации болезни животных пролиферация, дифференцировка и формирование псевдожелез достигает максимальных потенций (29 сут), не заканчивающихся к 120 сут инвазии. Данный процесс становится определяющим в картине преобразований печени при хроническом описторхозе в контексте развития осложненных форм гельминтоза.

В современной патологии развитие и исход альтеративных, продуктивных, и других процессов в организме, независимо от этиологии, рассматривается с позиций ведущей роли структурно-функциональной дезорганизации клеточных мембран, нарушение которых связано, прежде всего, с избыточной активностью эндогенных и экзогенных фосфолипаз, процессов пероксидации мембранных липидов и ингибированием антиоксидантной системы (N.Straceu, С. Klassen, 1982). Перекисное окисление липидов, или липидпероксидация, - процесс, протекающий по законам радикально-цепных реакций. Интенсивность деструкции в мембранах связана с избытком липоперекисей и ослаблением антиоксидантной защиты (А.Ш. Бышевский, В.Г. Соловьев, 2007).

Описторхозная инвазия независимо от стадии течения у лабораторных животных вследствие биологических свойств паразита несет в себе мембранодестабилизирующие потенции, заключенные в

фосфолипидном составе описторхисов: в клетках гельминта выявлена большая часть (до 24,5%) лизофосфодитил холина - существенного фактора агрессии на цитомембраны, т.к. лизоформы нарушают ориентацию мембранных структур, формируют дополнительные ионные каналы (В.И. Крылов с соавт., 1984; В.Г. Бычков, 1988). Паразиты способны вызывать повышение активности фосфолипаз и депрессию антиоксидантной защиты. Наиболее выраженная фосфолипазная активность (р < 0,01) по сравнению с нормативными показателями) проявляется к 10 сут инвазии. Однако независимо от длительности вегетирования гельминтов закономерно отмечается повышение уровня пероксидации липидов мембран клеток печени и снижение показателей антиоксидантной системы (табл. 2).

Таблица 2

Динамика активности пероксидации липидов, эндогенных фосфолипаз и антиоксидантов в гомогенатах печени сирийских хомяков в зависимости от длительности описторхозной инвазии

Показатели Количественное выражение показателей

Длительность инвазии (сут)

0 9 60 90 120 180

Диеновые 172,8±7,3 186,6±10,6 226±9,8 190,6±9,8 182,4±7,0 180±6,8

коньюгаты

(н Моль/г) п = 5 п = 15 п = 15 П = 18 П = 14 п = 12

Малоновый 0,22±0,04 0,36±0,08 0,91 ±0,13 0,76±0,2 0,48±0,09 0,33±0,08

диальдегид

(нМоль/г) П = 5 п = 15 п = 15 п = 18 п = 14 п = 12

Фосфоли- 9,2±1,4 29,4±0,9 15,8 ±2,0 18,3±1,8 16,4±0,9 15,6±1,4

пазная

активность п = 5 п = 15 п = 15 п = 18 п = 14 п = 12

(нМоль/мг)

сод 0,2± 0,06 0,48±0,18 0,20±0,08 0,14±0,02 0,14±0,03 0,12±0,02

ед.активности л = 5 п = 15 п = 15 п = 18 п = 14 п = 12

(1 - каротин 0,93±0,3 0,27±0,04 0,40±0,08 0,32±0,007 0,3±0,008 0,25±0,004

(мкМоль/л) П = 5 п = 15 п = 15 п = 18 П = 14 п = 12

В условиях патологии дезорганизация соединительной ткани выявляется различными гистохимическими и биохимическими методами. Уровень суммарной фракции гликозаминогликанов (ГАГ) и катепсина Д в сывортке крови отражает дестабилизацию мезенхимных

элементов на организменном уровне (А.Д. Петрушина с соавт., 1984; А.А. Чернышов, 1987; В.А. Жмуров с соавт., 2007 и др.).

Описторхозная инвазия вызывает резкое повышение ГАГ с 9 сут до 180 сут, наибольшее превышение показателей (3, 4 раза по сравнению с контролем) наблюдается к 90 сут эксперимента, к концу опыта (180 сут) повышение содержания ГАГ незначительно снижается, но существенно выше (р<0,001) по сравнению с данными контрольной группы. Аналогичные тенденции отмечаются в динамике содержания катепсина Д (рис. 2).

Динамика концентрации суммарной фракции ~ _ гликозаминогликанов, катепсина Д в сыворотке крови и пролина в печени хомяков при описторхозе в зависимости от длительности < инвазии _ _ _ _'_

Рис. 2. Динамика концентрации биохимических показателей в сыворотке крови.

Уровень пролина характеризует скорость обновления коллагена в мезенхимальных образованиях, наибольшее содержание его отмечается к 90 сут описторхозной инвазии (44,13±2,3 мкМоль/л), что в 8,5 раза больше по сравнению с нормативными показателями (5,20±0,11 мкМоль/л). Результаты данного исследования совпадают с результатами, полученными N. Hutadilock et al. (1983), которые установили по динамике радиоактивности пролина и его дериватов значительное ускорение полного обновления коллагена в печени у хомяков с Opistorchis veverrini в течение 6 сут по сравнению со здоровыми - 180 сут.

Впервые состояние генетического аппарата сирийских хомяков при описторхозе было исследовано в начале XXI века (В.Г. Бычков, В.П. Сергиев, А.Х. Сабиров и др., 2007). Выявлены с различной частотой мутации генов: р - 53, р - 16, К - ras, В - raf, APC, с - Kit, отвечающие за гибель, трансформацию и другие структурно-функциональные преобразования клеток. В наших исследованиях показано, что при описторхозной инвазии инициируются молекулярно-генетические механизмы регуляции ростовых процессов, кинетики клеточных популяций, системы транспортного обеспечения стимуляторов роста через структуры плазмалеммы клеток -интегральные белки.

Выявлены изменения гена EGFR (20 экзон) эпидермальный фактор роста в ДНК, выделенный из плазмы крови) и экспрессия VEGFR (эндотелиальный фактор роста).

Заживление дефекта трубчатой кости у экспериментальных животных на фоне описторхозной инвазии. Репаративная регенерация как проявление биологических потенций морфологического субстрата реализуется при участии локальных и дистантных факторов регуляции (Фриденштейн А.Я., Лалыкина К.С., 1973; Аврунин A.C., Корнилов Н.В. и др., 2001, 2002; Гололобов В.Г. и др., 2004; Хлусов И.А. и др., 2006). В соответствии с целью настоящего исследования проведено изучение особенностей репаративной регенерации опорных тканей в организме на фоне описторхозной инвазии. Известно, что к факторам, стимулирующим регенераторные процессы скелетных тканей относятся: трансплантации детерминированных клеток, воздействие специфическими субстанциями индуцирующими преобразования стволовых клеток, факторами стимулирующими новообразования кости, которые одновременно являются медиаторами клеточной пролиферации и дифференцировки, а также пассивная стимуляция детерминированных остеогенных клеток предшественников с помощью аллогенных костных или синтетических заменителей кости трансплантатов (Омельченко Н.П., 2002; Пальцев М.А. и др., 2003; Кононович H.A., 2006; Yamaguchi M. et al., 2003). В задачи настоящего раздела работы вошли вопросы, которые могли бы определить локус инициации повышения активности репаративных процессов в зоне дефекта трубчатой кости и различий тканево- и органотипического роста эмбрионального провизорного гиалинового хряща в организме интактного и пораженного описторхозом животного.

Регенераторные процессы, в зоне дефекта трубчатой кости у экспериментальных животных, зараженных описторхозом, соответствуют стадиям репаративной регенерации в зоне перелома трубчатой кости и характеризуются этапностью, закрепленной на уровне фило- и онтогенеза. Исследование показало, что при сквозном дефекте диафиза (проникновение в костно-мозговую полость) проявляются характерные для принципа провизорности этапы гистогенеза скелетных тканей. Зона дефекта трубчатой кости заполняется сгустками фибрина, форменными элементами крови и мелкими кусочками пластинчатой костной ткани, оставшимися после разрушения диафиза зубоврачебным бором. Наличие костных «опилок» рассматривается как позитивный фактор, способствующий образованию ретикулофиброзной костной ткани. По мере заполнения грануляционной тканью зоны дефекта протекают процессы репарации с образованием очагов гистогенеза скелетных тканей. Отмечается появление хондрогенных и остеогенных очагов со стороны эндоста и периоста. Наиболее активно проявляются участки гистогенеза скелетных тканей со стороны костномозговой полости, которая к 10 суткам эксперимента заполняется регенератом. При исследовании пролиферативной активности клеток механоцитарных дифферонов оказалось, что индекс меченых ядер не одинаков в организмах интакгных и зараженных описторхозом животных (рис. 3).

Рис. 3. Индекс меченых ядер клеток механоцитарных дифферонов.

Сравнение показателей индекса меченых ядер позволило выявить повышение активности пролиферативных процессов при заживлении дефекта трубчатой кости на фоне описторхозной инвазии. Одной из структурных особенностей регенерата у пораженных

описторхозом животных оказалось обязательное содержание в регенерате хрящевых участков (рис. 4)..

Рис. 4. Включения Н-3 тимидина в ядра клеток хондроцитарного дифферона в составе регенерата. Инвазированное животное. Стадия опыта 10 сут.

В регенератах интактных животных хрящевые зоны дефекта могли не содержаться. К 16 суткам эксперимента вся зона дефекта восполняется регенератом сложного строения содержащего участки провизорного гиалинового хряща, ретикулофиброзной костной ткани и прослоек рыхлой соединительной ткани. Процесс становления регенераторной «мозоли» сопровождается образованием «костной манжетки», ростом и дифференцировкой хрящевых участков «мозоли», замещением провизорного хряща костной тканью. Преимущественным механизмом остеогенеза является энхондральное замещение, однако в отдельных регенератах определяются и очаги перихондрального костеобразования. В опытах на незараженных животных регенерационная «мозоль» состояла преимущественно из балок ретикулофиброзной костной ткани и прослоек рыхлой соединительной ткани. К 41 суткам эксперимента начинается процесс замещения ретикулофиброзной костной ткани пластинчатой. К 62 суткам эксперимента регенерат полностью не перестраивается, хотя хрящевых участков регенерата уже не выявляется ни в опытной, ни в контрольной сериях. По мере тканевых преобразований регенерата трансформируется гистохимическая текстура основного вещества, в нем накапливаются высокополимерные гликозаминогликаны и меняется их кальцийсвязывающая активность, показатели которой

достоверно увеличиваются в организме зараженных описторхозом животных (рис 5). Последнее свидетельствует о том, что при описторхозе в организме «хозяина» накапливаются продукты жизнедеятельности гельминта, способные выполнять роль регуляторов гистогенеза. Таким образом, при описторхозной инвазии репаративная регенерация опорных тканей характеризуется конкурентным вовлечением в гистогенезы элементов механоцитарных дифферонов и ускорением минерализации межклеточного вещества опорных тканей регенерата.

Срок инвазии (с/т.)

Рис. 5. Содержание Са в инкубационной среде через 24 часа ферментирования тканей регенерата. р<0,05.

Рост и превращения эмбрионального провизорного хряща в культурах в организме по методу Ф.М. Лазаренко изучены с целью расшифровки биологических потенций тканей мезенхимной природы при описторхозе и подтверждения детерминированности принципа провизорности.

Исследования показали, что к концу первых суток эксперимента в зоне имплантата начинает формироваться очаг асептического воспаления. Между кусочками пересаженной ткани и кусочками целлоидина располагаются сгустки фибрина, очаги кровоизлияний, нарушенные фрагменты соединительнотканного ложа имплантата. К 3 суткам воспаление переходит в фибробластическую стадию, начинается оформление соединительнотканного каркаса и сосудистого бассейна имплантата, отмечаются очаги скопления

митотически делящихся клеток трансплантированного материала и соединительнотканных разрастаний. В сгустках фибрина выявляется гранулярный и аморфный ШИК-позитивный материал, Хейл-позитивные субстраты, возрастает степень метахроматической окраски. Процессы тканевого роста постепенно смещаются от периферии к центральным зонам имплантата. В это же время устанавливаются межтканевые отношения формирующегося каркаса и пересаженных кусочков. К 7 суткам эксперимента в скелетогенных и хондроидных островках накапливается гиалуронидазолабильное метахроматическое вещество (гиалуронаты), входящее в состав формирующейся межклеточной субстанции опорных тканей.

На последующих стадиях в центральных отделах хрящевых бластем клетки обретают способность кумулировать гликоген, сульфатированные гликозаминогликаны и дифференцироваться в хондроциты. В хрящевых островках осуществляется оппозиционный и интерстициальный рост, вокруг островков оформляется надхрящница. К 16 суткам опыта кусочки хряща просматриваются невооруженным глазом в экстирпированных имплантатах (поверхность имплантатов имеет бугристый вид). Очаги хондрогенеза в имплантатах выделяются на ранних стадиях эксперимента в периферических участках, а затем выявляются и в центральных зонах. Хрящевые островки характеризуются способностью к тканевой и органотипической дифференцировке: в их центральных отделах образуются изогенные группы хондроцитов, зоны столбчатого и пузырчатого хряща. Процесс замещения хряща костной тканью в имплантатах аналогичен закономерностям развития костной ткани на месте гиалинового хряща в онтогенезе. Вокруг дифференцированных хрящевых фрагментов начинается процесс перихондрального окостенения. Вслед за перихондральным механизмом окостенения в имплантатах выявляются признаки эндохондрального остеогенеза. Глубокие участки хрящевых островков кальцифицируются, в них со стороны надхрящницы врастают тяжи рыхлой соединительной ткани с кровеносными сосудами, формируются сосудистые лакуны и сосудистые каналы. Диффузный механизм трофики хрящевых островков сменяется на ангиогенный. Постепенно, в центральных зонах дифференцированных хрящевых островков формируется костномозговая полость и осуществляется процесс формирования энхондральных костных балок. На заключительных этапах эксперимента ретикулофиброзная костная ткань активно замещается тонковолокнистой костной тканью, образуются остеоноподобные

структуры. Таким образом метод культивирования по Ф.М. Лазаренко позволил подтвердить детерминированность принципа провизорности и охарактеризовать этот принцип как один из адаптивных и морфогенетических механизмов гисто- и органогенезов. Анализ морфологической текстуры имплантатов позволил так же констатировать ускорение гистогенезов опорных тканей при культивировании в организме животного с описторхозной инвазией. Во всех имплантатах опытной серии наблюдалось соотношение кусочков хряща и костной ткани не менее 1:3, в имплантатах интактных реципиентов соотношение хрящевых и костных структур было преимущественно с преобладанием костных образований, хрящевые фрагменты составляли не более 20 %. Результаты исследования с использованием метода культивирования тканей и органов по методу Ф.М. Лазаренко позволили продемонстрировать реальное существование провизорности как механизма гисто- и органогенезов, подтвердить детерминированность провизорности и значимость самого метода в системе экспериментального изучения биологических потенций тканей и органов.

ВЫВОДЫ

1. При описторхозной инвазии отношения в системе «паразит-хозяин» проявляются в виде ускорения продуктивных процессов и инициируются на молекулярно-генетическом уровне.

2. При хроническом описторхозе обнаруживается экспрессия гена (\ZEGER) - фактора роста сосудистого эндотелия и механоцитов, а также отмечается мутация гена (ЕйЕК) - эпидермального фактора роста.

3. Состояние морфологических, ультраструктурных и биохимических показателей печени при хроническом описторхозе отражает морфо-функциональные параллели, формирующиеся в организме зараженного гельминтом животного между «эконишей» (печень) и опорными тканями, не имеющими непосредственного контакта с лярвальными и имагиальными формами паразита.

4. Формирование провизорных железистых структур в печени при хроническом описторхозе подтверждает универсальность принципа провизорности и его значимость в механизмах органогенеза производных энтодермальной закладки.

межклеточного вещества. Индекс меченых ядер в клетках остеоцитарного дифферона в составе регенерата зоны дефекта трубчатой кости статистически достоверно выше при описторхозной инвазии (91,2%о), по сравнению с интактным животным (51,3%о).

6. Морфология репаративной регенерации, тканево- и органотипического роста опорных тканей в культурах в организме при описторхозе свидетельствуют о детерминированности принципа провизорности.

7. Рост и превращения эмбрионального провизорного хряща в культурах в организме по методу Ф.М. Лазаренко осуществляется в соответствии с принципом провизорности и сопровождаются ускорением процессов тканевой и органотипической дифференцировки при описторхозной инвазии.

8. Восстановление дефекта трубчатой кости при описторхозе характеризуется конкурентным вовлечением в процессы гистогенеза клеток трех механоцитарных дифферонов: фиброцитарного, хондроцитарного, остеоцитарного, что обеспечивает формирование клеточных популяций соответствующих дифферонов и образование хрящевых фрагментов в составе регенерата. У неинвазированных животных в составе регенерационной «мозоли» наличие хрящевых участков не является обязательным.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Г.С. Соловьёв. Принцип провизорности - новая концепция фундаментальной морфологии /Г.С. Соловьёв, В.Л. Янин, В.Д. Новиков, С.М. Пантелеев, С.И. Матаев, М.М. Щудло, C.B. Соловьёв, В.Г. Соловьёв, A.B. Соловьёва, В.А. Агарков, О.Ф. Истомина, Р.К. Смышляева, A.B. Богданов, О.В. Винтер, A.B. Контарев, С.А. Молокова, Т.Н. Молчанова, C.B. Баранов // Труды международного форума по проблемам науки, техники и образования «III тысячелетие - новый мир», Москва, 2002, С.93-96.

2. В.Л. Янин. Эмбриональные стандарты как прогностический показатель оценки здоровья популяции /В.Л. Янин, Г.С. Соловьев, C.B. Баранов, A.B. Богданов, Л.Г. Миллер, С.А. Молокова, Р.К. Смышляев а, A.B. Контарев, О.В. Струихина // Материалы международного симпозиума «Медицина и охрана здоровья 2003» посвящённого 40-летию ТГМА, Научный вестник ТГМА, 2003, №3, С.119.

3. С. В. Баранов. Тканевые и органотипические преобразования провизорного гиалинового хряща в условиях имплантационного роста /C.B. Баранов, К.О. Шилин, В.М. Усович // Материалы всероссийской научной конференции молодых ученых, посвященной 40-летию Тюменской

государственной медицинской академии «Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной и клинической медицины», ТюмГМА, Тюмень, 2003, С.90-91.

4. Г.С. Соловьев. Феномен неогенеза при развитии производных промежуточной мезодермы у человека и млекопитающих животных /Г.С. Соловьёв, B.J1. Янин, В.А. Агарков, М.Т. Ахметов, C.B. Баранов, О.Ф. Истомина, A.B. Контарев, Л.Г. Миллер, Р.Ш. Сагитов, Р.К. Смышляева, О.В. Струихина, В.М. Усович // Материалы научно-практической конференции «Медицина и охрана здоровья», 2005, Тюмень, 2005, С.89.

5. Г.С. Соловьёв. Реактивные и пластические свойства эпителиев хрусталика и конъкжтивы глаза в онтогенезе при культивировании по методу Ф.М. Лазаренко в динамике проявления их органотипической детерминированности /Г.С. Соловьёв, В.Л. Янин, В.А. Агарков, О.Ф. Истомина, C.B. Баранов, A.B. Контарев, Л.Г. Миллер, Г.Н. Скорнякова, Р.К. Смышляева, О.В. Струихина, В.М. Усович // Материалы Российской научной конференции «Новое в экспериментально-морфологическом изучении глаза», Вестник ОГУ, Оренбург, сентябрь, 2005, С. 104-108. »

6. Г.С. Соловьёв. Принцип провизорности как один из механизмов эволюционирования гисто-, органо- и системогенезов / Г.С. Соловьёв, В.Л. Янин, С.М. Пантелеев, В.А. Агарков, C.B. Баранов, О.Э. Вакулина, Л.В. Вихарева, О.Ф. Истомина, Л.Г. Миллер, Р.К. Смышляева, О.В. Струихина, В.М. Усович, Т.Н. Молчанова, С.А. Молокова // Научный вестник Ханты-Мансийского государственного медицинского института, Ханты-Мансийск, 2006, №2, С.5-9.

7. О.Э. Вакулина. Регенерация скелетных тканей в дефекте диафиза трубчатой кости на фоне описторхозной суперинвазии (экспериментальное исследование) / О.Э. Вакулина, C.B. Баранов, А.В.Богданов, В.Г. Бычков, Г.С. Соловьёв, В.М. Усович // «Морфологические ведомости», №1-2, Москва-Берлин, 2006, С.12-13. »

8. Г.С. Соловьёв. Неогенез как формообразовательный процесс при развитии производных среднего зародышевого листка /Г.С. Соловьёв, В.Л. Янин, С.М. Пантелеев, C.B. Баранов, О.Э. Вакулина, Л.В. Вихарева, О.Ф. Истомина, Р.К. Смышляева, В.М. Усович // Материалы научного совещания «Актуальные проблемы учения о тканях», С-Пб, 2006, С.95-96.

9. Г.С. Соловьёв. Механизмы развития органов простого и смешанного генеза у человека и млекопитающих животных / Г.С. Соловьёв, В.Л. Янин, С.М. Пантелеев, C.B. Баранов, О.Э. Вакулина, Л.В. Вихарева, P.A. Идрисов, О.Ф. Истомина, A.B. Контарев, С.А. Молокова, Р.К. Смышляева, О.В. Струихина, К.О. Шилин, М.В. Усович // Материалы научной конференции «Инновационные технологии», С-Пб, BMA, 2007, В.2, С. 135-138.

10. Г.С. Соловьёв. Реализация принципа провизорности в имплантатах/Г.С. Соловьёв, В.Л. Янин, С.М. Пантелеев, C.B. Баранов, О.Ф. Истомина, О.Э.

Бакунина, Л.В. Вихарева, К.О. Шилин, Р.К. Смышляева, О.В. Струихина, М.В. Усович, С.А. Молокова/ «Морфология» 2008, №5, С.93. *

11. С.В. Баранов. Проявление феномена провизорности при культивировании скелетогенной мезенхимы у хомяков с описторхозом / Баранов C.B. II Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период. Тезисы докладов. Всероссийская конференция. Тюмень, 2008, С.29.

12. C.B. Баранов. Состояние клеточных мембран, биосинтез и биодеградация коллагена печени при экспериментальном суперинвазионном описторхозе. /C.B. Баранов, В.Г. Бычков, И.В. Гарчук, Г.С. Соловьев, В.М. Усович // «Медицинская наука и образование Урала», №1, 2009, Тюмень, С.58-59. *

* - Журнал, рекомендуемый ВАК для публикации основных результатов диссертации.

БАРАНОВ Сергей Викторович

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология 14.00.15 - патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 23.04.2009 Формат 60x84/16. Печ. л. 1,0. Печать ризограф. Тираж 100. Зак. №563.

Типография ООО «Печатник», лицензия ПД № 17-0027 Тюмень, ул. Республики, 148 корп. 1/2. Тел. (3452) 20-51-13, тел./факс (3452) 32-13-86

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Баранов, Сергей Викторович

ВВЕДЕНИЕ. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Принцип провизорности в гисто- и органогенезах.

1.2. Современное представление о репаративной регенерации опорных тканей.

1.3. Описторхоз — системное заболевание человека и животных, влияние его на течение некоторых заболеваний и формирование новых нозологически форм.

1.3.1 Изменения пищеварительной трубки при описторхозной инвазии.

1.3.2 Патология в сердце при описторхозе.

1.3.3 Особенности течения вирусного гепатита у больных описторхозом.

1.3.4 Холангиоцеллюлярный рак и описторхоз.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Структурно-функциональное состояние паренхимы и стромы печени при описторхозе.

3.2. Заживление дефекта трубчатой кости у экспериментальных животных на фоне описторхозной инвазии.

3.3. Рост и превращение эмбрионального провизорного хряща в культурах в организме по методу Ф.М. Лазаренко.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Репаративная регенерация и имплантационный рост опорных тканей на фоне динамики морфо-функционального состояния печени при описторхозе."

Актуальность проблемы. После открытия и первых описаний возбудителя описторхоза (S. Rivolta., 1884; К.Н. Виноградов, 1891) гельминтоз стал проблемой пристального внимания биологов и врачей. Были разработаны основные положения, касающиеся эпидемиологии, клиники, морфологических проявлений паразитоза (Н.Н. Плотников 1953, 1976; В .Я. Глумов 1984; В.Г. Бычков и др., 1988, 2006).

В настоящее время социальные, медицинские и биологические вопросы описторхоза не потеряли актуальности, т. к. заболеваемость населения в гиперэндемичных очагах поддерживается на высоком уровне вследствие закрепившихся традиций питания населения. Описторхоз до сих пор остался одной из распространённых форм паразитарной патологии в регионах Среднего Приобья и Обь-Иртышского бассейна. (Т.Ф. Степанова, 2004; Г.Г. Крылов, 2005; Т.М. Гузеева, 2008)

Установлено влияние описторхозной инвазии на органы-экониши гельминта и системы организма, в которых паразит не вегетирует (Г.Г. Крылов, С.А. Соколов, 2005); описторхоз манифестирует соматическую патологию, что заметно экзальтирует течение основных заболеваний (А.А. Бекк и др., 2008).

Формирование новой биологической системы «паразит-хозяин» обеспечивается главным образом наличием адаптационных механизмов у гельминта и несовершенством реакций иммунитета в организме хозяина. По выражению Б.А. Астафьева(1986) «существование одного многоклеточного организма в другом, чуждым ему в антигеном отношении, является иммунологическим парадоксом». Исходя из данной ситуации, возникают определенные проблемы в формировании самой системы «паразит-хозяин» и функционирования защитных механизмов в организме хозяина, которые формируются на внедрение чужеродного антигена. Одним из возможных механизмов адаптации организма хозяина на внедрение паразита является активация тканей внутренней среды и нейрогуморальная функция регуляторных систем организма (В.Н. Морозов, А.А. Хадарцев, 1998). Знакомство с литературой, отражающей вопросы паразитизма, показывает, что в природе параллельно происходят два процесса: усложнение морфофизиологической организации живых организмов и упрощение организации ради усиления репродуктивной функции и выносливости, что сопровождается увеличением численности видов паразитов (Л.Ф. Каленова, 2006). К одной из нерасшифрованных особенностей адаптивных реакций организма хозяина на внедрение гельминта, следует отнести создание позитивных морфофизиологических проявлений, свидетельствующих о неоднозначности системы «паразит-хозяин».

В частности подобная ситуация была обозначена применительно к скелетным тканям (О.Э. Вакулина, 2008). Остаётся неизученным механизм вовлечения в ответную системную реакцию на гельминта важнейших форм биологического субстрата организма хозяина — генома, клеток, тканей.

Цель исследования:

Задачи исследования:

1. Изучить состояние биологических мембран, биосинтеза и биодеградации коллагена и морфологических преобразований печени на различных сроках при описторхозной инвазии;

2. Провести молекулярно-генетическое исследование генов эпидермального и эндотелиального факторов роста у сирийских хомяков при хроническом описторхозе;

3. Определить особенности гистогенезов скелетных тканей в зоне дефекта трубчатой кости в условиях эксперимента на животных, зараженных описторхозом;.

Научная новизна.

Впервые показано, что принцип провизорности, как один из механизмов адаптации и эволюционирования, сохраняется на фоне описторхозной инвазии и реализуется в процессе гисто- и органогенезов производных мезенхимы и энтодермальной закладки. При хроническом описторхозе устанавливаются морфофункциональные параллели между состоянием морфологических, ультраструктурных и биохимических показателей печени и тканями, не имеющими непосредственного контакта с гельминтом или его личинками; в печени пролифераты клеток холангиоцитарного дифферона формируют эпителиальные структуры, соответствующие провизорной стадии железистого органогенеза, способные к органотипической дифференцировке; При хроническом описторхозе формируются молекулярно-генетические механизмы регуляции продуктивных процессов, выявляется экспрессия и мутация генов-регуляторов факторов роста и продукции интегральных белков плазмалеммы; ускоряются процессы репаративной регенерации опорных тканей, гисто- и органотипической дифференцировки эмбрионального провизорного гиалинового хряща в культурах в организме.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При описторхозе ускоряются процессы репаративной регенерации опорных тканей и дифференцировка эмбрионального гиалинового провизорного хряща в культурах «in vivo»;

Апробация работы и публикации

Основные положения диссертационного исследования были доложены и обсуждены на: Международном форуме по проблемам науки, техники и образования «III тысячелетие-новый мир» (Москва, 2002); Международном симпозиуме «Медицина и охрана здоровья 2003» (Тюмень, 2003); V Общероссийском съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (Казань, 2004); Российской научной конференции «Новое в экспериментально-морфологическом изучении глаза» (Оренбург, 2005); Международном симпозиуме «Медицина и охрана здоровья 2006»Тюмень, 2006); научном совещании «Актуальные проблемы учения о тканях» (Санкт-Петербург, 2006); научной конференции «Инновационные технологии» (Санкт-Петербургб, 2007); Всероссийской конференции "Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период» (Тюмень, 2008).

По материалам диссертации опубликовано: 12 - печатных работ, из них 4 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследований внедрены в учебный процесс кафедр травматологии и ортопедии, патологической анатомии, гистологии, цитологии и эмбриологии ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Росздрава» и кафедры гистологии БУ ВПО «Ханты-Мансийский государственный медицинский институт ХМАО-Югры».

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 100 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 7 таблицами и 36 рисунками. Состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов собственных исследований, выводов. Список литературы содержит 216 источников (156 отечественных, 60 иностранных).

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Баранов, Сергей Викторович

ВЫВОДЫ

2. При хроническом описторхозе обнаруживается экспрессия гена (VEGER) - фактора роста сосудистого эндотелия и механоцитов, а также отмечается мутация гена (EGER) - эпидермалыюго фактора роста.

5. При описторхозе ускоряются процессы репаративной регенерации опорных тканей, что обеспечивается возрастанием пролиферативной активности клеток механоцитарных дифферонов и повышением способности к минерализации компонентов межклеточного вещества. Индекс меченых ядер в клетках остеоцитарного дифферона в составе регенерата зоны дефекта трубчатой кости статистически достоверно выше при описторхозной инвазии (91,2%о), по сравнению с интактным животным (51,3%о).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Баранов, Сергей Викторович, Тюмень

1. Альперович Б.И., Курысько Ж.А. Лечение хронических описторхозных панкреатитов // Анналы хирург, гепатол., 2004. т. 9. - № 2. -С.203.

2. Ахмедов В.А., Туринова Н.С. Нарушение функции 12-перстной кишки причина формирования рефлюксной болезни у больных хроническим описторхозом // Сибирск. журнал гастроэнтерол. и гепатол., 2000. -№ 11-12. - С. 122.

3. Ахрем-Ахремович P.M. Описторхоз человека. М.Медгиз, 1963. 147с.

4. Бахлыков Ю.Н. Гистохимическая характеристика этапов дифференцировки хрящевой и костной тканей в онтогенезе и в экспериментальных условиях: Дисс. канд. мед. наук, Тюмень, 1972, 268 с.

5. Бахлыков Ю.Н. Экспериментально теоретические аспекты и некоторые закономерности репаративного костеобразования при чрескостном остеосинтезе: Автореф. дисс. . докт. мед. Курган, 2006, 45 с.

6. Бекк А. А., Берендеева И.П., Хардикова С.А., Калюжина В.В. Исследование эмоционально-личностной сферы у больных псориазом в сочетании с хроническим описторхозом // Мед. паразитол. и паразитар. болезни. С-инфо, 2008. № 3. С . 20-22.

7. Беллендир Э.Н., Ариэль Б.М., Экспериментально-морфологические особенности перихондрального хондрогенеза. //Морфология, том 127, 2005, №3, С.63-67.

8. Беэр С.А. Роль теоретической паразитологии в прикладных паразитологических исследованиях / С.А. Беэр, В.А. Ройтман / Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. М., 1995.С.23-25.

9. Беэр С.А. Роль человеческого фактора в эволюции паразитарных систем //Арх. патол., 1993. № 5. - С. 50-56.

10. Беэр С.А. Биология возбудителя описторхоза. М. КМ. К, 2005.11 .Беэр С.А. Роль факторов патогенности паразитов в эволюции орга нического мира. //Успехи общей паразитологии. М.: Наука, 2004.-С. 65-80.

11. Богданов А.В. Структурная характеристика аденогипофиза человека в эмбриональном периоде: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Тюмень 2005, 20 с.

12. Борисов И.Н., Дунаев П.В., Бажанов А.Н. Филогенетические основы тканевой организации животных.- Новосибирск: Наука, 1986.- 237 с.

13. Н.Бородина О.Н. Иммунологическая структура коренного и пришлого населения в различных очагах описторхоза: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. М., 1984. -24 с.

14. Брокерхоф X., Дженсон Р. Липолитические ферменты. М. Мир, 1978. -398 с.

15. Бычков В.Г. Клинико-анатомическая классификация описторхоза // Сов. медицина, 1983. -№> 8. С. 31-35.

16. Бычков В.Г., Асташенко О.И. О кардиальном синдроме при описторхозе. /Проблемы описторхоза в Западной Сибири. Л., 1977. С. 99100.

17. Бычков В.Г., Крылов Г.Г., Сабиров А.Х. Динамика клеточных преобразований в печени при экспериментальном описторхозе.// Мед.паразитол. и паразитар. болезни. С-инфо, 2008. № 3. - С. 9-12.

18. Бычков В. Г., Матаев С.И., Крылов Г.Г. и др. Теория самоорганизации в изучении морфогенеза описторхоза и его осложнений.//Перспективы синергетики в XXI веке. Международная научная конференция: Материалы. Белгород, 2003. -т. 1. -С. 278-280.

19. Бычков В.Г. Описторхоз в гиперэндемичном очаге и проблема канцерогенеза: Автореф. дисс. докт. мед. наук, М. 1988, 49 с.

20. Бычков В.Г. Описторхоз в Обь-Иртышском бассейне (вопросы этиологии и патогенеза). //Мед.паразитол. и паразитар. болезни. С-инфо, 2007. № 4. - С. 3-5.

21. Бычков В.Г., Гиновкер А.Г., Худякова В.В. Мутагенные факторы Среднего Приобья. //XIV ежегодная конференция Европейского об-ва по мутагенам внешней среды. Тезисы докладов. М., 1984. С 85.

22. Бычков В.Г., Молокова О.А., Зуевский В.П. Гранулематозное воспаление при описторхозе. //Архив патологии, 1987. т.49. - в.З. - С. 44-48.

23. Бычков В.Г., Сабиров А.Х. Пантелеев СМ. Крылов Г.Г. Стволовые клетки печени при суперинвазионном описторхозе и в сочетании с частичной гепатэктомией // Медицинская наука и образование Урала, 2006. № 5. -С. 78-79.

24. Бычков В.Г., Соколов С.А., Крылов Г.Г. и др. Особенности течения вирусных гепатитов у больных описторхозом различных эндемичных очагов.//Материалы VI Российского съезда врачей-инфекционистов. СПб, 2003 .-С. 60.

25. Бышевский А.Ш., Соловьев В.Г. О перспективах коррекции природными цеолитами гемостатических сдвигов. Тюмень, 2007. 119с.

26. Вакулина О. Э. Морфо-функциональные параллели состояния печени и регенерации скелетных тканей при описторхозной инвазии (клинико-экспериментальное исследование):Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Тюмень, 2008. 18 с.

27. Валов С.Д. Нейробиологические аспекты регуляции пролиферации, роста и цитодифференцировки железистых эпителиев различного генеза: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Томск, 2004. с. 35.

28. Вильгельм В.Д., Белявский А.Р., Хрячков В.В. Профиль патологии гепатобилиарной системы и поджелудочной железы у коренного и пришлого населения Приобья /Актуальные вопросы неотложной хирургии. Ханты-Мансийск, 2003. С. 3-7.

29. Винников М.Э. Клиника и лечение описторхоза //Клин.медицина, 1959.-Т. 36. -№6.-С. 15-26.

30. Виноградов К.Н. Второй случай сибирской двуустки (Distomum sibiricum) в печени человека. / Отдельный оттиск. Томск, 1891.

31. Вихарева JI.B. Закономерности нефроногенеза в процессе формирования окончательной почки человека в пренаталыюм периоде онтогенеза: Автореф. дисс. докт. мед. наук, Тюмень, 2009, -46 с.

32. Вихарева JI.B., Пантелеев С.М., Соловьев Г.С., Янин B.JI. Оценка формирования генерации нефронов окончательной почки человека с позиции принципа провизорности. Морфологические ведомости, №1-2, 2006 с. 9-14.

33. Волков B.C., Колесникова И.Ю., Беляева Г.С. и др. О роли дуоденально-гастрального рефлюкса в патогенезе язвенной болезни двенадцатиперстной кишки //Эксперимент, и клинич. гастроэнтерология. М., 2003.-№ 1.-С. 12-18.

34. Георгиев И. Ембриология на човека. София: Медицина и физкультура, 1975. - 163 с.

35. Глумов В.Я, Глумова В.А. Репаративные процессы печени у морских свинок при частичном и полном устранении описторхисов гексахлорпараксилолом (хлоксилом). /Гельминтозы человека: Республиканский сб. науч. трудов. Л., 1981. - Вып. 2.-С. 104-109.

36. Глумов В.Я. Морфология, морфогенез и патогенез хронического гепатита и цирроза печени при описторхозе: Автореф. дисс. . док. мед. наук М.,1981. -39с.

37. Глумов В.Я., Глумова В.А. Некоторые аспекты морфо- и патогенеза хронического гепатита и цирроза печени при описторхозе. // Мед. паразитол. 1984.-№2.-С. 78-82.

38. Гомазков О.А. Нейротрофическая регуляция и стволовые клетки мозга. М.: Издательство ИКАР, 2006,- 332 с.

39. Гузеева Т.М. Состояние заболеваемости паразитарными болезнями в Российской Федерации и задачи в условиях реорганизации службы // Мед.паразитол. ипаразитар. болезни. С-инфо,2008.-№ 1.-С. 3-11.

40. Данилов Р.К., Одинцова И.А., Григорян Б.А., Хилова Ю.К., Чепурненко М.Н., Русакова С.Э. Гистионная организация ткани в ходе регенерационного листогенеза. //Морфология, 2008, №2. С. 38-39.

41. Дондуа А.К. и Дондуа Г.К. К анализу митотических циклов. // В сборнике: « Исследование клеточных циклов и метаболизма нуклеиновых кислот при дифференциации. М-Л., 1964. С. 5-36.

42. Доронин А.В. Ранняя фаза описторхоза (клиника и лечение): Автореф. дисс. .канд. мед. наук. М., 1972. 15 с.

43. Дунаев Г.С., Соловьев Г.С. Влияние сыворотки крови животных с травмой органов скелета на процессы остеогенеза в имплантантах эмбрионального хряща. Дифференцировка клеток в гисто и органогенезах. Мат Всесоюзного симпозиума. Киев, 1975, с. 112-116.

44. Дунаев П.В. Закономерности морфогенеза и регуляции тканевых процессов в нормальных, экспериментальных и патологических условиях. / Мат-лы Всерос. науч. конф. анат., гист., эмбрио. Тюмень, 1998. с.5 6.

45. Дунаев П.В., Соловьев Г.С., Мкртчян 0.3. и др. Экспериментальные модели органогенеза и дифференцировки тканей. Свердловск, Свердловский мединститут, Тюменский мединститут, 1976, 133 с.

46. Жинкин JI.H. Синтез ДНК и кинетика клеточных популяций в эмбриональном развитии. / В сборнике: «Клеточная дифференцировка и индукционные механизмы. М., 1965, С. 233 —241.

47. Житников А .Я. Кинетика пролиферации хондроцитов хрящевых закладок и формирующегося метаэпифизарного хряща скелета конечностей млекопитающих. // Арх. анат. 1976. с. 74-81.

48. Зубов Н.А. Патологическая анатомия описторхоза и его осложнений: Автореф. дисс. .докт .мед. наук. Свердловск, 1973. -25 с.

49. Ирьянов Ю.М., Ирьянова Т.Ю. Репаративное костеобразование при удлинении конечности в условиях чрескостного дистракционного остеосинтеза. //Морфология, 2003, №3.- С.83-86.

50. Каленова Л.Ф. Закономерности функционирования иммунной системы в динамике формирования системы «паразит-хозяин» на модели описторхозной инвазии.// Медицинская наука и образование Урала, 2006.-№2.-С.120-128.

51. Калюжина М.И. Состояние органов пищеварения у больных в резидуальный период хронического описторхоза: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Томск, 2000. - 40 с.

52. Кашуба Э.А. Роль дестабилизации клеточных мембран в патогенезе клинических проявлениях и исходах инфекционных и паразитарных заболеваний у детей: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. М., 1986. - 46 с.

53. Клишов А.А. Гистология человека. Л., 1989. 393 с.

54. Кнорре А.Г. Краткий очерк эмбриологии человека. Л.: Медицина, 1967.-268 с.

55. Кнорре А.Г. Эмбриональный гистогенез (морфологические очерки). -Л. :Медицина, 1971. с. 432.

56. Кондинский Г.В. Эколого-эпидемиологический анализ смешанных инфекций-инвазий (модель: брюшной тиф описторхоз): Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Киев, 1984. - 40 с.

57. Кононович Н.А. Репаративная регенерация экспериментальных переломов в условиях механической стимуляции остеогенеза (экспериментальное исследование).// Гений ортопедии, 2006, №3. С. 110-115.

58. Корякина Е.В. Определение суммарной фракции ГАГ в сыворотке крови.//Лабораторное дело, 1982.-№ 10.-С. 591-597.

59. Крылов В. И. Физиологическая характеристика переокисления липидов клеточных мембран и антиоксидантных функций в организме уздоровых детей. // Физиология и патология клеточных мембран. Свердловск, 1984.-С. 13-18.

60. Крылов Г. Г. Пролиферативный эффект описторхиса кошачьего -основа жизнеобеспечения паразита. / Описторхоз: современное состояние, проблемы, перспективы развития. Тюмень. ТГМА, 1991.-С. 111-113.

61. Крылов Г.Г., Соколов С.А. Клинические особенности и структурно-функциональное состояние печени при хроническом гепатите В в сочетании с суперинвазионным описторхозом. // Вопросы вирусологии М., 2005. № 4.- С. 42-44.

62. Кусень С.И., Стойка Р.С. Молекулярные механизмы в действии полипептидных факторов роста. М.: Наука, 1985. 236 с.

63. Литвинова Л.С., Рязанцев Н.В., Новицкий В.В. Дерегуляция взаимодействия иммуноцитов и эозинофилов в формировании эозинофилии при инвазии Opisthorchis felineus. // Мед. паразитол. и паразитар. болезни. С-инфо, 2008. № 3. - С. 13-17.

64. Логинов А.С, Аруин Л.И. Клиническая морфология печени. М., 1985.- 238 с.

65. Лушников Е. Ф., Абросимов А.Ю. Гибель клетки (апоптоз). М., 2001.- 190 с.

66. Малышева Л.Г. Морфогенез печени при суперинвазионном описторхозе (экспериментальное исследование):Автореф. дисс. . докт. мед. наук. -Новосибирск, 1986.-20 с.

67. Мельников В.И. Функционально-морфологические изменения слизистой оболочки желудка и основные желудочные синдромы в различные фазы описторхоза:Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Тюмень, 1974. 16 с.

68. Мельников В.И., Налобин А.В. Аллергический псевдоопухолевый гастрит при ранней фазе описторхоза //Мед.паразитол. и паразитар. болезни, 1972.-№4.-С. 70-73.

69. Молокова О.А. Патоморфология печени в резидуальном периоде экспериментального описторхоза: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. -Челябинск, 1991. -24 с.

70. Морозов В.Н., Хадарцев А.А. Роль синтоксических программ адаптации в предупреждении крионекрозов // Вестник НМТ. 1998. Т. 5. № 34. С. 38-41.

71. Музафаров А.И. Некоторые данные клинико-рентгенологического иследования при описторхозе //Здравоохранение Казахстана, 1983 .-№6.-С. 47-49.

72. Мунин П. И. Нелинейные аспекты устойчивого развития. //Перспективы синергетики в XXI веке. Международная конференция: Материалы. Белгород, 2003. т. 1. - С. 24-28.

73. Мушкамбаров Н.Н., Кузнецов C.JI. Молекулярная биология. М.: МИА, 2003, 544 с.

74. Новиков В.Д. Гистогенетические предпосылки рассмотрения тканей внезародышевых органов в современных классификациях тканей //Морфология, 1997. № 4. С. 91-97.

75. Павленко О.А. Диагностика дуоденальногастрального рефлюкса у больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки в сочетании с хроническим описторхозом.//Мед.паразитол. и паразитар. болезни, 1988. № 5. - С 24-26.

76. Павлов Б.А. Острая фаза описторхоза (острый описторхоз). Томск. Из-во Томского университета, 1979. - 74 с.

77. Павлов Б.А. Острый описторхоз (клиника, диагностика, лечение): Дисс. .канд. мед. наук. Томск, 1987. -331 с.

78. Павлова В.Н., Копьева Т.Н., Слуцкий Л.И., Павлов Г. Г. Хрящ. М. Медицина, 1998. 320 с.

79. Пальцев А.И., Яхина СВ. Дифференциальная диагностика хронического вирусного гепатита С и хронического вирусного гепатита, сочетанного с описторхозом //Сибирский журнал гастроэнт. и гепатол.,2003.-№ 16-17.-С 175-178.

80. Пантелеев С.М., Вихарева Л.В., Соловьев Г.С., Янин В.Л. Метанефрос (нефроногенез). Тюмень 2006 163 с.

81. Пантелеев С.М. Морфометрическая характеристика нефронов почки в онтогенезе и эксперименте: Дисс. . докт. мед. наук.- Тюмень, 1994.-435с.

82. Пантелеев С.М. Структурная и гистохимическая характеристика эпителия нефрона почки в онтогенезе и эксперименте: Дисс. . канд. мед. наук.- Тюмень, 1978. 258 с.

83. Пантелеев С.М., Соловьев Г.С., Янин B.JI. О провизорном характере тканевого уровня организации живых систем. //Морфология, 2008, № 3, с. 8485.

84. Парфенов СБ., Постникова Т.Ф. Сравнительная характеристика клинико-иммунологических показателей разных континентов больных описторхозом в очаге. //Мед.паразитол. и паразитар. болезни, 1988.-№ 5. С 29-34.

85. Петрушина А. Д. Роль мембранопатологии в клинико-патогенетических проявлениях, эффективности терапии и профилактике микробно-воспалительных заболеваний почек у детей: Дис. докт. мед. наук. М., 1988.-327 с.

86. Плотников Н.Н. Описторхоз. М.: Изд-во АМН СССР, 1953. -128 с.

87. Плотников Н.Н., Брегадзе И.Л. Описторхоз. Хирургия паразитарных заболеваний. М: М.,1976.-С142-147.

88. Плотников Н.Н., Брегадзе И.П. Хирургия паразитарных болезней. -М.: М., 1976.-С. 142-147.

89. Покровский А. А., Арчаков А.И. Определение активности катепсина Д. Современные методы в биохимии. М., 1968. С 48-49.

90. Родионова Н.В., Функциональная морфология клеток в остеогенезе. Киев, Наукова Думка, 1989, 186 е.

91. Румянцев А.В. Опыт исследования эволюции хрящевой и костной тканей. М., 1958, 253 с.

92. Рыбников В.И. Описторхоз как вероятный фактор риска заболевания раком женских половых органов. //Актуальные проблемы описторхоза. Томск, 1986. - С. 105-106.

93. Рычагова И. Г. Морфогенез клеточных реакций печени при различных клинико-морфологических формах описторхоза: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Челябинск, 1995. 40 с.

94. Рычкова Е.К. Поражение почек при описторхозе //Первый съезд терапевтов Тюменской области: Материалы. Тюмень, 1970.-С. 88-89.

95. Семченко В.В., Степанов С.С., Боголепов Н.Н. Синаптическая активность головного мозга (фундаментальные и прикладные аспекты). — Омск: Омская областная типография, 2008. 408 с.

96. Сергиев В.П., Литвин В.Ю., Диденко Л.В., Малышев Н.А., Дрынов И.Д. Эпидемиология развивающаяся система взглядов. //Мед. паразитол. и паразитар. болезни. С-инфо, 2003. №1.- С. 3-14.

97. Смышляева Р.К. Структурная и морфометрическая характеристика нефроногенеза провизорного органа- первичной почки птицы (на примере домашней курицы Gallus domesticus L.): Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Томск, 2006 21 с.

98. Смышляева Р.К., Агафонова Н.А., Носова Н.П., Молокова С.А. Развитие и преобразование мзонефронов первичной почки птицы на этапах инкубации выводковой камеры. //Медицинская наука и образование Урала. 2007 г. №6. С. 18-20.

99. Соколов В.И.; Чумасов Е.И.; Атагимов М.З. Гистогенез интерренальной закладки надпочечника свиньи (sub domestica).// Морфология, №3, 2006, С.59-62.

100. Соколов С.А. Клинико-патогенетические взаимосвязи у больных хроническим вирусным гепатитом в сочетании с описторхозом: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Тюмень, 2002. 27 с.

101. Соловьев Г.С. Гистохимическая и структурная характеристика роста и превращения хрящевой ткани в культурах в организме. // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1968, №10, С.88-91.

102. Соловьев Г.С. Дивергентная дифференцировка скелетогенной ткани в имплантатах. «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины», 1969, Т.67, № 3, С.78-81.

103. Соловьев Г.С., Янин B.JL, Пантелеев С.М. и др. Принцип провизорности как один их механизмов эволюционирования гисто-, органо- и системогенезов. //Научный вестник Ханты-Мансийского госмединститута., 2006, №2, С. 5-9.

104. Соловьев Г.С. Принцип провизорности в гисто- и органогенезах у высших млекопитающих животных и человека: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Новосибирск, 2002, 44 с.

105. Соловьев Г.С., Богданов А.В., Пантелеев С.М., Янин В.Л. Эмбриональный морфогенез гипофиза человека.// Морфология. 2007.- № 4. С.52-55.

106. Соловьев Г.С., Янин В.Л., Новиков В.Д. и др. Роль принципа провизорности в реализации филэмбриогенезов. //Морфология, 2005, №4, С.14-19.

107. Соловьев Г.С., Янин В.Л., Новиков В.Д., Пантелеев С.М. Принцип провизорности в морфогенезах. Тюмень, 2004, 128 с.

108. Соловьев Г.С., Янин В.Л., Пантелеев С.М. и др. Механизмы развития органов простого и смешанного генеза у человека и млекопитающих животных. Материалы научной конференции //«Инновационные технологии», СПб, ВМА, 2007, В.2, С. 135-138.

109. Соловьев Г.С., Янин В.Л., Пантелеев С.М. и др. Феномен провизорности в системе магистральных механизмов эволюционирования биологического субстрата. //Морфология. 2008.- № 2.-2008.-С.126.

110. Соловьева А.В. Хронический описторхоз и беременность. М. «ГЭОТАР-Медиа», 2007. 128 с.

111. Стальная И. Д. Метод определения диеновых конъюгаций ненасыщеных жирных кислот. /Современные методы в биохимии М: М., 1977.-С. 63-64.

112. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты (Современные методы в биохимии. М., 1977. С. 66-68.

113. Степанова Т.Ф. Описторхоз. Тюмень: ТГУ, 2002. 196 с.

114. Степанова Т.Ф., Скареднов Н.И. Клинико-иммунологическая характеристика описторхоза в период специфической терапии. /Тез. докл. науч. конф. «Гельминтология сегодня: проблемы и перспективы». 2-4 апреля 1989 г.-М., 1989.-Т.2.-С. 68-73.

115. СтепановаТ.Ф., Подклетнова Л.Ф. Паразитоценологические аспекты инвазионно-инфекционной патологии (описторхоз и туберкулез). Тюмень: Изд. ТГУ, 2002. -112 с.

116. Струихина О.В. Структурная и морфометрическая характеристика яичника человека в эмбриональном и плодном периодах: Автореф. дисс. . канд. мед. наук, Тюмень, 2006, 22 с.

117. Суворов А.И. Эндоскопическая диагностика и морфологическое обоснование патологии желудка и двенадцатиперстной кишки присуперинвазионном описторхозе: Дисс. . канд. мед. наук. Тюмень, 2006. 145 с.

118. Суворов А.И., Крылов Г.Г., Бычков В.Г. Дуоденогастроэозофагеальная рефлюксная болезнь как осложнение суперинвазионного описторхоза. // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 2004. -№3. С. 30-32.

119. Тельцов Л.П.; Шашанов И.Р. Законы индивидуального развития человека и животных.// Морфологические ведомости, №1-2, 2005, С. 171-173.

120. Токин Б.П. Общая эмбриология. Л.: Изд. Ленинградского университета. 1966. -456с.

121. Турилова Н.С., Еремеева О.В., Ахмедов В.А., Еремеев С.И. Морфологические особенности выстилки 12 п.к. больных хроническим описторхозом /Тезисы докладов 2-й Всеармейской научной конференции. СПб, 2000. -С. 94.

122. УрываеваИ. В. Репликативный потенциал гепатоцитов и стволовые клетки печени. // Известия Академии наук. Серия биологическая, 2001.-№6.-С. 728-737.

123. Фриденштейн А.Я., Лалыкина К.С. Индукция костной ткани и остеогенные клетки-предшественники. М.: «Медицина» 1973, 224 с.

124. Хлопин Н.Г. Общебиологические и экспериментальные основы гистологии. М.-Л, Изд. АН СССР, 1946, 632 с.

125. Хлусов И.А., Карлов А.В., Поженько Н.С., Суходоло И.В., Хлусова М.Ю. зависимость остеогенных свойств клеток костного мозга от рельефа и растворимости кальцийфосфатных поверхностей. //Бюлл. экспер. биол. и мед., 2006, Том 141, №1, С. 107-112.

126. Чернышов А. А. Возрастные особенности мембранодестабилизирующих процессов в клинических проявлениях пиелонефрита и гломерулонефрита у детей: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Омск, 1987.-24 с.

127. Чимаров В.М. Описторхоз в системе мать- плод- новорожденных. //Здоровье человека в Сибири. Новосибирск, 1985. 154 с.

128. Чумаков В.Н., Осинская Л.Ф. Количественный метод определения активности цинк-, медьзависимой супероксиддисмутазы в биологическом материале. // Вопр. Мед. химии, 1977. № 5. -С. 712-713.

129. Шайн А.А. Общая онкология. Тюмень. Изд. «Поиск», 2003. 310с.

130. Шайн А.А. Первичный рак печени в Тюменской области: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. М., 1974. 32 с.

131. Шайн А.А. Рак органов пищеварения. М. «Скорпион», 2000. -368с.

132. Шмальгаузен И.И. Проблемы дарвинизма. Л. Наука, 1969, 493 с.

133. Шульцев Т.П., Цаленчук Я.П., Ольхин В. А. Нефротический синдром при описторхозе. //Клин, медицина, 1973,-т. 51.-№8.-С. 132-135.

134. Яблоков Д. Д. О сочетании описторхоза с некоторыми внутренними болезнями. /Описторхоз человека: Международная научно-практическая конференция: Материалы. Томск, 1979.-С. 203-206.

135. Янин В.Л, Дунаев П.В, Соловьев Г.С. и др. Мезонефрос, Екатеринбург, УРО РАН, 2000, 130 с.

136. Янин В.Л. Структурная характеристика мезонефроса и мезо-метанефральные параллели в пренатальном онтогенезе у человека: Автореф. дисс. . докт. мед. наук. Новосибирск, 2001. 46 с.

137. Ярыгин В.Н., Малинина И.Е. Трансплантаты эмбриональной нервной ткани, длительно существующие в головном мозгу млекопитающих. //Морфология, 2008, №2, С. 162.

138. Andrades J.A., Han В., Becerra J. et al. A recombinant human TGF-betal fusion protein with collagen-binding domain promotes migration, growth, and differentiation of bone marrow mesenchymal cells.// Exp. Cell Res., 1999, v. 250, №2, p. 485 -498

139. Arkudas, A. Axial prevascularization of porous matrices by an arteriovenous loop promotes survival and differentiation of transplanted autologous osteoblasts / A. Arkudas, J. Beier, K. Heidner et al. // Tissue Eng. -2007. Vol. 13, № 7. - P. 1549-1560.

140. Askanazy M. Aetiologie n. Pathologie I. Katzenegelerkrankung d. Menschen//D. med. Wschr.,1904. -N. 19. S. 589-601.

141. Barry F., Boynton R.E., Liu В., Murphy J.M. Chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells from bone marrow: differentiation dependent gene expression of matrix components// Exp. Cell Res. 2001. - 268, N 2-p. 189-200.

142. Bychkov V.G., Zolotuchin V.M., Suchkov A.J. et al. Cardial pathology in opisthorchiasis // Abstr. 8-th Intern. Congress, of Parasitology. Izmir, 1994. -V. 2. -P. 396.

143. Cai M, Liu X, Shao J, Qi J, Wang J, Zhu Y, Zhou Q, Wang J, Zhao Q, Li G, Liang J, Lu WW, Deng L. 01С-А006 promotes osteogenesis in vitro and in vivo. Pharmazie. 2008 Oct;63(10):751-6.

144. Doherty MJ, Ashton В A, Walsh S, Beresford JN, Grant ME, Canfield AE. Vascular pericytes express osteogenic potential in vitro and in vivo. //J. Bone Miner Res. 1998 May;13(5):828-38.

145. Dounchis J.S Cartilage repair with autogenic perichondrium cell and polylactic acid grafts.// Clin. Orthoped. Rel.Res. -2001. № 377. P. 248-266.

146. Flavel D.T., Flavel S.U., Field G.F. Opisthorchis viverrini: the relationship between egg production, worm size and intensity of infection in the hamster // Trans. Roy. Trop. Meg. Hyg., 1983. Vol. 77.-N4.-P. 538-545.

147. Garnero P, Schott AM, Prockop D, Chevrel G. Bone turnover and type I collagen C-telopeptide isomerization in adult osteogenesis imperfecta: associations with collagen gene mutations. Bone. 2009 Mar;44(3):461-6. Epub 2008 Nov 21.

148. Gronthos S, Simmons PJ. The growth factor requirements of STRO-1-positive human bone marrow stromal.precursors under serum-deprived conditions in vitro.//Blood. 1995 Feb 15;85(4): 929-40.

149. Hasumura Y., Takeuchi Y. Clinical detection of the hepatic lesion of pericentral sclerosis in chronic alcoholic. // Gut., 1982. V. 23. - P. 215-220.

150. Hoover K. L. Oval cells hyperplasia, liver, mouse, rat. Jones T.C. Mohr U., Hunt R. D. (eds). Digestive system. ILSI Monograph. Washington DC: ILSIPress, 1985.-P. 125-127.

151. Hutadilock N., Thamovit W., Upatam E.S. et al. Liver procollagen prolylhydroxylase in opisthorchis viverriniinfected hamster praziguantel administration.//Mol. Biohim Parasitol, 1983. -V. 9. № 4. - P 289-295.

152. Ishida Y. and Heersche J.N. Progesterone stimulate proliferation and differentiation of osteoprogenitor cells in bone cell populations derived from adult female but not from adult male rats. //Bone, 1997, v. 20, № 1, p. 17-25.

153. Ito Y., Sanyal A., Fitzsimmons J.S., Mello M.A., О Driscoll S.W. Histomorphological and proliferative characterization of developing periosteal neochondrocytes in vitro // J. Orthop. Res. 2001. - №3. - p.405-413.

154. Jiang B, Li M, Cao YJ. Ectopic bone formation of bone marrow mesenchymal stem cells with gene transfer of human bone morphogenetic protein-9 gene in rabbit. Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2008 Sep;39(5):723-7. Chinese.

155. Jilka RL, O'Brien CA, Ali AA, Roberson PK, Weinstein RS, Manolagas SC. Intermittent PTH stimulates periosteal bone formation by actions on post-mitotic preosteoblasts. //Bone. 2009 Feb;44(2):275-86. Epub 2008 Oct 22.

156. Kato Y. and Gospodarowicz D. Sulfated proteoglican synthesis by confluent cultures of rabbit costal chondrocytes groun in the presence of fibroblast growth factor.// J. Cell Biol., 1985, v 100, № 2, p.477-485.

157. Kato Y., Boskey A., Spevak L., Dallas M., Hori M., Bonewald L.F. Establishment of an osteoid preosteocyte like cell MLO A5 that spontaneously mineralizes in culture // J. Bone Miner. Res. 2001. - 16, №9. - p. 1622-1633.

158. Kennedy A.R., Troll W., Litlle T.B. Kaku Y. Role free radicals in the initiation and promotion of radiation transformation in vitro. //Carcinogenesis, 1984. v. 5. -№ 10.-P. 1213-1218.

159. Kodama T, Goto T, Miyazaki T, Takahashi T. Bone formation on apatite-coated titanium incorporated with bone morphogenetic protein and heparin. //Int. J. Oral Maxillofac Implants. 2008 Nov-Dec;23(6):1013-9.

160. Le Geros R.Z. Calcium phosphate-based osteoinductive materials. //Chem Rev. 2008 Nov; 108(11):4742-53.

161. Leduc E. H. Regeneration of the liver // The Liver. Vol. 11. Acad. Press., 1964.-P. 112-187.

162. Li I.W.S., Cheifetz S., Mc Culloh C.A.G. et al. Effects of OP-1 on bone matrix protein expression by fetal rat calvarial cells are differentiation stage specific.// J. Cell. Physiol., 1996, v. 169, № 1, P. 115 125.

163. Long M.W., Robinson J.A., Ashcraft E.A. and Mann K.G. Regulation of human bone marrow-derived osteoprogenitor cells by osteogenic growth factors. //J. Clin. Invest., 1995, v. 95, № 2, p. 881 887.

164. Malaval L., Modrowski D., Gupta A.K. and Aubin J.E. Cellular expression of bone-related proteins during in vitro osteogenesis in rat bone marrow stromal cell cultures. //J. Cell Physiol., 1994, v. 158, № 3, P. 555 572.

165. Maniwa S., Ochi M., Motomura Т., Nishikori Т., Chen J., Naora H. Effects of hyaluronic acid and basic fibroblast growth factor on motility of chondrocytes and synovial cells in culture // Acta Orthop. Scand. 2001. — 72, №3. -p.299-303.

166. Masukava H., Miura Y., Sato I., Oiso Y., Suzuki A.J. Stimulatory effect of endothelin 1 on Na dependent phosphate transport and its signaling mechanism in osteoblast like cells // Cell Biochem. 2001. - 83, №1. -p.47-55.

167. Messermith D.J., Fabrazzo M., Moccetti I., Kromer L.F. Effects of sciatic nerve transplants after fibria-fornix lesion: examination of the role of nerve growth factor // Brain Res. 1991. - V. 557, N. 1-2.- P. 293-297.

168. Meyer U., Terodde M., Joos U., Weismann H.P. Mechanical stimulation of osteoblasts in cell culture // Mund. Kiefer. Gesichtschir. 2001. -№3. - P.166-172.

169. Morko J, Kiviranta R, Mulari MT, Ivaska KK, Vaananen HK, Vuorio E, Laitala-Leinonen T. Overexpression of cathepsin К accelerates the resorption cycle and osteoblast differentiation in vitro.// Bone. 2008 Dec 11. P. 212-214.

170. Muier H. Proteoglycans as organizer of the intercellular matrix. Biohem. Soc. France, 1983, № 6, v.13, P.613-622

171. Nakase Т., Nomura S., Yoshikawa H. et al. Transient and localized expression of bone morphogenetic protein 4 messenger RNA during fracture healing.// J. Bone Miner. Res., 1994, v. 9, № 5, P. 651 659.

172. Noble B.S., Reeve J. Osteocyte function, osteocyte death and bone fracture resistance // Mol. Cell. Endocrinol. 2000. - 159, №1. - P.7-13.

173. Olson L. Grafts and growth factors in CNS. Basic science with clinical promise // Stereotactic and Funct. Neurosurge. 1990. - V. 54 - 55. - P. 250-267.

174. Opie E.L. The pathogenesis of tumors of the liver produced by Butter Yellow. //J. Exp. Med., 1994. V. 80. - P. 231-246.

175. Orris IR, Key ML, Colston KW, Arnett TR. Inhibition of osteoblast function in vitro by aminobisphosphonates.// J Cell Biochem. 2009 Jan 1;106(1): P. 109-118.

176. Palomares KT, Gleason RE, Mason ZD, Cullinane DM, Einhorn ТА, Gerstenfeld LC, Morgan EF. Mechanical stimulation alters tissue differentiation and molecular expression during bone healing. //J Orthop Res. 2009 Feb 25. P. 115-123.

177. Pountos I, Georgouli T, Giannoudis PV. The effect of autologous serum obtained after fracture on the proliferation and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells. //Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2008 Oct 26;54(1): P. 33-39.

178. Rivolta S. Sopra una specie di Distoma nell gatto e nel cane. // Giorn. di anat. fisiol. etpatol. degli animali, 1884. V. 16. -P. 20-26.

179. Slaga T. J. Fischer S.M., Weeks C.E. et al. Specificity and mechanisms of promotersinhibitors in multistage promotion // Cocarcinol. and Biol. Eff. Tumor Promoters. Selec. Pap. Symp., Schloss Elmau, Oct. 13-16, 1980. New York, 1982.-P. 19-34.

180. Slaga T. J. Host factors in the susceptibility of mice to tumour initiating and promoting agents //1 ARC Sci. Publ., 1983. -№>5 l.-P. 257-273.

181. Slaga Т. J. Overview of tumor promotion in animals // Environ. Health Perspect, 1983. V. 50. - P. 3-14.

182. Smith S. R. Tumours of the liver // Ann. Roy. Coll. Surg. Engl., 1979. -Vol. 61.-№ 2. -P. 87-99.

183. Solovyov G.S., Wilhelm V.D., Molokova O.A. et al. Klinical and experimental function state of blood components in opisthorchiasis // VII European multicolloquium of parasitology: Abstracts. Parma, 1996. P. 440.

184. Takeuchi Y., Nakayama K. and Mansumoto T. Differentiation and cell surface expression of transforming growth factor-receptors are regulated by interaction with matrix collagen in murine osteoblast cell. //J.Biol. Chem., 1996, v. 271, P. 3938-3944.

185. Thamavit W., Ngamying M., Boobpucknavig V. et al. Enhancement of Den-induced hepatocellular nodule development by Opisthorchis viverrim infection in Syrian golden hamsters. // Carcino-Genesis, 1987. -Vol. 8. -P. 13511353.

186. Umezawa A., Akutsu H. Osteogenesis and chondrogenesis from a stem cell source.// Clin Calcium. 2008 Dec;18(12): P. 1721-1727.

187. Uryvaeva I.Y. A model of hepatic regeneration and carcinogenesis due total cell injury inducet by dipin and partial hepatectomy. Monogr. Dev. Biol. Basel. Karger, 1992. V. 23. -P. 230-236.

188. Wang L., Ciani C., Doty S.B., Fritton S. P. Delineating bone's interstitial fluid pathway in vivo. //Bone, 2004, v. 34, №3, P. 499-509.

189. Yarnada Т., Murakamik К., Tsuchida К. et al. Ascending cholangitis as cause of piogenic liver abcesses complicated by a gastric submucosal abcesses and fistula// T. Clingastroenterol, 2000. V. 30. - N 3. - P 317-320.

190. Yang Z, Liu M, Zhang Y.G., Guo X, Xu P. Effects of intermittent negative pressure on osteogenesis in human bone marrow-derived stroma cells.// J Zhejiang Univ Sci B. 2009 Mar; 10(3): P. 188-192.

Информация о работе

Баранов, Сергей Викторович
кандидата медицинских наук
Тюмень, 2009
ВАК 03.00.25

Диссертация

Репаративная регенерация и имплантационный рост опорных тканей на фоне динамики морфо-функционального состояния печени при описторхозе. - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы