Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Регуляция регенерации кости в условиях остеосинтеза у больных ахондроплазией

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Ковинька, Михаил Александрович

• СТГ - Соматотропный гормон

• ТЛЩФ - Термолабильная щелочная фосфатаза

• ТРКФ ~ Тартратрезистентная кислая фосфатаза

• ТФР - Трансформирующий фактор роста

• ФНО - Фактор некроза опухоли

• фрф фактор роста фибробластов

• ЧДО - чрескостный дистракционный остеосинтез

• ЩФ - Щелочная фосфатаза

• ЭТ - Эфферентная терапия

• ЭФР - Эпидермальный фактор роста

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Сущность ахондроплазии с точки зрения молекулярной биологии и физиологии.

1.2.0сновиые направления в лечении ахондроплазии.

13. Общие закономерности ответа организма на хирургическое вмешательство на скелете.

1.4.0 возможности использования в ортопедической практике препаратов модифицированной плазмы крови, содержащих костные рострегулирующие факторы.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Биохимические методы исследования.

2.3 Биотестирование сывороточных фракций посредством оценки их влияния на гемопоэз.

2.4. Основные принципы оперативного вмешательства и клинические методы иследования больных ахондроплазией.

2.5. Приготовление препарата для стимулирования созревания дистракционного регенерата у больных ахондроплазией.

2.6. Показания к применению стимуляции репаративного остеогенеза предложенными препаратами при удлинении конечностей.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Исследование электролитного обмена у детей, ахондроплазией.

3.2. Исследование углеводного обмена у детей ахондроплазией.

3.3. Исследование активности фосфомоноэстераз у больных ахондронлазией.

3.4. Изменение качественного состава сывороточных белковых фракций у больных с ахондронлазией.

3.5. Гемопоэтическая активность белковых фракций сыворотки крови, содержащих костные рострегулирутщие факторы.

3.6. Клинический анализ удлинения голени у больных ахондронлазией.

ГЛАВА 4. СТИМУЛИРОВАНИЕ СОЗРЕВАНИЯ ДИСТРАКЦИОННОГО РЕГЕНЕРАТА У БОЛЬНЫХ

АХОНДРОПЛАЗИЕЙ.

4.1. Использование приемов эфферентной терапии в ортопедической клинике.

4Л, Апробация предложенных способов эфферентной терапии.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Регуляция регенерации кости в условиях остеосинтеза у больных ахондроплазией"

Актуальность проблемы: К началу 80-х гг. прошлого века проблема увеличения роста оперативным путем у больных с врожденным системным недоразвитием осевого скелета была решена посредством применения полилокального полисегментарного чрескостного дистракционного остеосинтеза (ПГГЧДОС) по Г. А. Илизарову [19, 20, 64, 79,88]. Однако, углубленный клинико-рентгенологический и лабораторно-диагностический анализ его применения в широких масштабах уже к середине 80-х гг. выявил факторы, лимитирующие интенсивность и продолжительность хирургической коррекции. Во-первых, у значительной части пациентов после 7-8 месяцев дистракции изменения во внутренней среде свидетельствовали об истощении регуляторных и пластических ресурсов организма, что обусловливало необходимость временного прекращения ППЧДОС, проведения его в 2, 3 этапа [1,19,36]. Во-вторых, оказалось, что время оссификации соединительно-тканной прослойки, разделяющей костные отделы дистракционного регенерата в 2-3 раза превышало период дистракции, являясь таким образом, главным фактором, определяющим сроки лечения. Особенно велики сроки лечения в группе больных ахондроплазией [1, 8, 16, 19, 34, 35, 49, 105]. В связи с этими обстоятельствами возникла необходимость в надежных методах лабораторного мониторинга течения адаптационно-компенсаторных процессов, протекающих в организме при ППЧДОС, и стимулирования оссификации соединительнотканной прослойки дистракционного регенерата.

Первая из них могла бы быть решена определением в крови больных в динамике ППЧДОС концентраций адаптогенных и остеотропных гормонов, цитокинов, специфических метаболитов синтеза и деградации коллагена методами радиоиммуного, иммуноферментного анализа или 7 полимеразной цепной реакции. Однако, при широком использовании ППЧДОС этот путь неэкономичен [7, 113]. В то же время в РНЦ «ВТО» в течении ряда лет разрабатываются методы определения продолжительности фаз общей реакции организма на скелетную травму и последующий репаративный процесс простыми лабораторными тестами с привлечением элементов математического моделирования для их оценки [13, 15, 23, 26, 36,48].

В решении задачи ускорения созревания дистракционного регенерата положительную роль сыграли разработки биомеханического воздействия на это образование: метод «воспитания регенерата», высокодробная автоматическая дистракция, способ «переменного темпа дистракции» [1, 34, 35, 49], позволившие сократить период фиксации дистракционного регенерата до срока его дистракции. Дальнейшее сокращение сроков лечения больных методом ППЧДОС может быть достигнуто фармакологическим потенцированием репаративного остеогенеза, т.к. чисто биомеханические приемы не решают таких проблем, сопутствующих костной патологии, как иммунопатия, нарушения электролитного баланса, остеопороз интактного скелета.

С конца 60-х гг. прошлого века был совершен значительный прорыв в знаниях о регуляции клеточной функции и роли остеотропных гормонов в поддержании скелетного гомеостаза. В связи с чем, для стимуляции репаративного остеогенеза использовали препараты калъцитонина, гидроксилированных производных витамина D, анаболических гормонов [9, 21, 29, 31, 33, 47, 92, 119, 145]. Открытие нового класса регуляторных веществ - местных факторов роста, обладающих остеотропным действием, - подтолкнуло к разработке новых фармакологических средств, стимулирующих остеорепарацию [2, 3, 6, 25, 30, 32, 38, 40, 41, 51, 52, 53, 54]. Композиции местных факторов роста, полученные из костной ткани сельхозживотных были успешно апробированы в эксперименте, но 8 возникшая в этот период проблема прионов - патологических белков, накапливающихся в костной ткани отодвинуло в неопределенное будущее возможность промышленного получения композиций местных факторов роста для применения в травматологии и ортопедии.

Развивающаяся костная ткань депонирует в процессе своего развития несколько десятков полипептидов неколлагеновой природы, обладающих способностью воздействовать на пролиферативную, дифференцировочную и экспрессивную активности клеток, в ходе физиологического ремоделирования костной ткани и в условиях патологической резорбции скелета эти соединения поступают в циркулягорное русло, что позволяет говорить об эндокринной функции костной ткани и создает предпосылки для выхода из описанной выше ситуации [30, 31, 32, 40, 41, 54]. Еще в 20-х гг. Эпштейн, в 60-х гг. -Дунаев, Соловьев, Колпаков, в 70-х гг. - В.И. Филимонов, Н.П. Лепехова, К. С. Десятниченко предприняли сравнительно успешные попытки стимулировать репаративные осгеогенез используя сыворотку крови доноров-животных с активным остеогенезом. Эксперименты, проведенные в нашем Центре вселяют уверенность, что препараты экстракорпорально модифицированной плазмы крови могут быть использованы при полилокальном полисегментарном чрескостном дистракционном остеосинтезе для регуляции роста у пациентов с ахондроплазией [6].

Цель исследования: Охарактеризовать изменения, происходящие во внутренней среде организма больных ахондроплазией в динамике удлинения конечностей при чрескостном дистракционном остеосинтезе (ЧДО) и предложить новые способы фармакологического потенцирования оссификации дистракционного регенерата.

Для достижения сформулированной цели, были поставлены следующие задачи: 9

Задачи исследования:

1. Изучить динамику показателей внутренней среды у больных ахондроплазией при удлинении конечностей одновременно на нескольких уровнях.

2. Изучить физико-химические и биологические свойства препаратов костных рострегулирующих факторов, получаемых из сыворотки крови больных ахондроплазией.

3. Оценить связь между сывороточной концентрацией полипептидных факторов роста и характером изменения основных биохимических параметров, отражающих течение репаративного процесса

4. Апробировать предложенные способы ускорения оссификации дистракционного регенерата в клинике.

Положения, выносимые на защиту:

1. Удлинение конечностей на большие величины (более 50% от исходной длины) методом ЧДО, вызывают срыв адаптационно-компенсаторных ресурсов организма уже через 2 месяца после начала дисгракции, что приводит к замедленному сращению в период фиксации.

2. Использование препаратов модифицированной аутоплазмы, содержащих костные рострегулирующие факторы, путем введения в соединительнотканную прослойку дистракционного регенерата в первые дни фиксации позволяет сократить сроки лечения данной группы ортопедических больных.

Материалы и методы: Работа выполнена на базе лаборатории биохимии Государственного учреждения науки Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. академика Г.А. Илизарова. Объектами исследований являлись: ортопедические больные - 52, лабораторные животные (белые мыши - 150). Материал работы составили: костная ткань, ее минеральная составляющая,

10 неколлагеновые белки костной ткани, периферическая кровь,белки сыворотки крови.

В ходе выполнения данной работы использовались методы: биохимические - хроматография (ионообменная, MIX), электрофорез, диализ, высаливание, спектрофотометрия, центрифугирование, ультрафильтрация; анализ периферической крови, рентгенологический метод; методы математической обработки результатов исследований.

Научная новизна исследования:

Получены новые данные о процессах, происходящих во внутренней среде организма больных ахондроплазией на этапах лечения методом чрескосгного дистракционного остеосинтеза. Изучено воздействие сывороточных белковых фракций, содержащих костные рострегулирующие факторы, на новообразованную костную ткань при удлинении конечностей у больных с ахондроплазией, а также динамика и активность этих фракций у больных ахондроплазией в процессе коррекции свойственных им патологических изменений.

Практическая значимость работы:

Оценена информативность ряда биохимических и гематологических показателей, динамика их изменения в процессе удлинения конечностей, что позволяет осуществлять лабораторный контроль за течением репаративного процесса у больных на этапах их хирургической коррекции. Разработана методика стимулирования новообразования костной ткани у больных при ЧДО

Получено положительное решение по заявке на изобретение (К. С. Десятниченко, А.А. Ларионов, О.Л. Гребнева, С.А. Ерофеев, М.А. Ковинька «Способ стимуляции репаративного остеогенеза» - заявка на изобретение № 98105940 РФ, МПК7 А 61 В 17/56, А 61 К 35/16 Способ стимуляции репаративного остеогенеза / К.С. Десятниченко, А.А. Ларионов, О.Л. Гребнева, С.А. Ерофеев, М.А. Ковинька (РФ). - Заявлено

11

26.03.98.

Материалы работы доложены на: международной научно-практической конференции РНЦ «ВТО» им. академика Г.А. Илизарова 1996 год, международной научно-практической конференции «Новые технологии в медицине» и симпозиуме «Способы контроля процессов остеогенеза и перестройки в очагах костеобразования» г. Курган, 2000 год, доклад по теме данного диссертационного исследования стал лауреатом III фестиваля-конкурса научно-исследовательского, технического и прикладного творчества молодежи «Молодежь Зауралья - третьему тысячелетию».

Публикации: по теме диссертации опубликовано 16 печатных работ в республиканских и областных изданиях.

Объем и структура работы: диссертация состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 148 работы (из них 56 - отечественные, 92- зарубежные); изложена на 99 страницах машинописного текста, иллюстрирована 31 рисунками и 8 таблицами. Диссертация выполнена в составе комплексной темы НИР Государственного учреждения науки Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. академика Г.А. Илизарова.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Ковинька, Михаил Александрович

ВЫВОДЫ:

1. Динамика исследуемых показателей внутренней среды у больных ахондроплазией при удлинении конечностей говорит об истощении адаптационных резервов организма уже через 1,5-2 месяца дистракции. Это приводит к замедлению репаративных процессов в период фиксации.

2. Через 10 дней после начала дистракции сыворотка крови больных обладает наибольшим остеогенным потенциалом, и в этот период наиболее целесообразно забирать кровь больного для получения препарата, стимулирующего репаративный процесс.

3. Изменения основных биохимических параметров, отражающих течение репаративного процесса согласуются с изменениями уровня биологически активных веществ, модулирующих репаративные процессы в костной ткани, что позволяет осуществлять более полный контроль течения репаративного процесса.

4. Использование препаратов модифицированной плазмы крови, содержащих костные рострегулирующие факторы, способствует ускорению оссификации дистракционного регенерата у больных ахондроплазией.

5. Существенные нарушения в скелетном гомеостазе, вызванные генетическими причинами и оперативным вмешательством на скелете, в результате которых происходит замедление новообразования костной ткани, возможно, скорректировать препаратами модифицированной аутоплазмы.

83

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Ахондроплазия - системное поражение скелета. Среди всех возможных способов ее коррекции оптимальным является хирургическая. Любое хирургическое вмешательство сопровождается различной степенью нарушения гомеостаза, обусловленными как самой операцией, так и последствиями медикаментозной терапии, направленной на поддержание гемодинамики и метаболизма в пределах нормальных значений.

Состояние репаративного процесса отражают интегральные индексы. Это системный индекс электролитов, системный индекс гликолиза, индекс фосфатаз.

Интегральные индексы СИЭ, ИФ, СИГ претерпевают в ходе лечения достоверные изменения по сравнению с нормой и дооперационным уровнем. Так СИЭ в норме составляет 237,3±61,3, у больных ахондроплазией 244,3±58,9. Сразу после операции СЮ достоверно увеличивается до 392,0±44,5, это ответ организма на оперативное вмешательство заключающийся в интенсификации костной резорбции. Повышенный уровень СИЭ сохраняется вплоть до 6-7 недели дистракции, после чего происходит его снижение вплоть до дооперационного уровня, а после 90 дней дистракции значение СИЭ составляет 167,4±45,8. Во второй половине дистракции и на период фиксации СИЭ ниже нормы, к моменту снятия аппарата повышается, но исходного уровня не достигает. Фосфатазный индекс информирует о соотношении между костной резорбцией и костеобразованием, в норме составляет 14,5±3,2. У больных с ахондроплазией он равен 11,2+1,5, то есть сдвинут в сторону резорбции. На 3-5 день после операции ИФ достоверно увеличивается до 19,8±3,6, что связано с появлением в кровяном русле факторов роста, стимулирующих остеогенные клетки. Как и СИЭ фосфатазный индекс снижается после 6-7 недель дистракции до 10,2±2,2, и остается сниженным после снятия аппарата.

79

Системный индекс гликолиза позволяет оценить степень восстановления микроциркуляторного русла и оксигенации регенерирующих тканей или их созревание. В норме СИГ составляет 31,4±15,8. С началом дистракции он достигает 117,6121,8, а к концу второго месяца фиксации возвращается к норме.

Изменение процентного соотношения сывороточных белковых фракций, обладающих свойствами костных рострегулирующих факторов сорбирующихся (а) и несорбирующийся (Оа) на анионообменнике отмечено на 3-5 день после операции, когда увеличивается доля al(oa) глобулиновой фракции (5,0+1,3%). Содержание а2 (оа) глобулиновой фракции достоверно увеличивается на 3 месяце дистракции(40,2±4,1%), с началом фиксации ее рост прекращается и после снятия аппарата приближается к дооперационному уровню.

Изменения гемопоэтической активности сыворотки крови имели место сразу после оперативного вмешательства Этот факт согласуется с представлениями о реакции опорно-двигательного аппарата на любое его повреждение. Характерно подавление эритропоэзау мышей в ответ на введение сывороточных белковых фракций, содержащих костные рострегулирующие факторы, полученные из сыворотки крови больных ахондроплазией. Сразу после операции происходит достоверное увеличение показателей гемопоэза, что говорит об активизации процессов ремоделирования в системе костной ткани. С началом дистракции в сыворотке крови начинают преобладать компоненты, активизирующие процессы эритропоэза. В сроки следующие после 1 месяца дистракции происходит снижение этих показателей. На более поздних сроках фиксации появляется тенденция к росту активности фракций, оказывающих влияние на активность пролиферации моноцитов.

Полученные результаты обосновывают необходимость забора биологического материала для приготовления препарата, стимулирующего

80 остеогенез на этапе дистракцни в течении первой ее недели, так как активность активных фракций в этот период наиболее велика.

Такая динамика исследуемых показателей говорит об истощении адаптационных резервов организма уже через 1,5-2 месяца дистракции. Это приводит к неравномерному созреванию дистракционных регенератов при одновременном вмешательстве на нескольких сегментах.

Сокращение сроков лечения ортопедических больных посредством ускорения созревания дистракционного регенерата - одна из основных задач, практической медицины в настоящее время. Оперативное вмешательство на опорно-двигательном аппарате вызывает изменения состава внутренней среды организма. В этих условиях нарастает напряжение во всех существующих системах поддержания гомеостаза. Длительные сроки лечения ортопедических больных влекут за собой отклонения в реализации этими системами своих функций. Особенно остро эта проблема возникает при ахондроплазии, когда сроки лечения особенно велики и хирургическое вмешательство осуществляется одновременно на нескольких сегментах, что приводит к истощению адаптационно-компенсаторных ресурсов организма на поздних сроках дистракции. Кроме того, в период фиксации в сыворотке крови больных уровень биологически активных веществ, оказывающих влияние на репаративный остеогенез значительно понижен, по сравнению с периодом дистракции. А для нормальной регенерации необходимо наличие соответсвующего микроокружения. Следовательно, законсервировав в период дистракции необходимую дозу препарата, представляющего собой фракции костных рострегулирующих факторов, и введя его в дистракционный регенерат в период фиксации, можно оптимизировать процессы остеорепарации.

Предложенная методика стимуляции остеогенеза была апробирована в клинике. Для стимуляции созревания дистракционного регенерата из сыворотки крови больного с ахондроплазией был приготовлен препарат с модулирующим остеогенез эффектом, по предложенной выше схеме, который

81 был введен в соединительно-тканную прослойку дистального регенерата (более поздно созревающего по наблюдениям клиницистов) после прекращения дистракции. В результате этого темпы формирования костной ткани дистракционного регенерата, подвергнутого введению препарата, существенно превышали таковые в не стимулированных фрагментах и в результате сроки созревания дистального и проксимального регенерата совпали.

Таким образом, существенные нарушения в скелетном гомеостазе, вызванные генетическими причинами и оперативным вмешательством на скелете, в результате которых происходит замедление новообразования костной ткани, возможно скорректировать препаратами модифицированной аутоплазмы. Существующие методы эфферентной терапии отличаются простотой выполнения, высокой эффективностью, иммунологической корректностью. Полученные нами предварительные результаты применения биологически активных компонентов аутоплазмы в клинике говорят о перспективности использования в ортопедии приемов эфферентной медицины с целью сокращения сроков лечения ортопедических больных, повышения эффективности лечения и предотвращения негативных последствий вмешательства на скелете.

82

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Ковинька, Михаил Александрович, Курган

1. Ахондроплазия: Руководство для врачей/ Под ред. А.В. Попкова, В.И. Шевцова. - М.: Медицина, 2001. - 352 с.

2. Влияние белковых рострегулирующих факторов внеклеточного матрикса костной ткани на репаративный остеогенез и кроветворение / Десятниченко К.С., Балдин Ю.П., Дьячков А.Н. и др. // Цитология, 1989. Т.31. - N 9. ~ С. 92.

3. Влияние высокомолекулярной фракции неколлагенового белка костной ткани на остеогенез и кроветворение при удлинении конечности в эксперименте / Десятниченко КС., Балдин Ю.П., Шрейнер А.А. и др. // Вопросы мед. химии. 1987. - Т.ЗЗ, вып.1- С.79-84.

4. Волков М.В.и др. Наследственные системные заболевания скелета/ Волков М.В., Меерсон Е.М., Нечволодова О.Л. и др. М.: Медицина, 1982. - 320 с.

5. Волков М.В. Болезни костей у детей. М.: Медицина, 1985. - 512 с.

6. Выделение и биотестирование костных рострегулирующих факторов: Метод, рекомендации/ ВКНЦ «ВТО»; Сост.: Десятниченко К.С., Балдин Ю.П., Дьячков А.Н. и др. Курган, 1990. - 24 С.

7. Герасимов A.M., Фурцева JI.H. Биохимическая диагностика в травматологии и ортопедии. М.: Медицина, 1986. - 240с.

8. Губерниев М.А., Лейкина Е.М., Романова Л.К., 1967. цит.по кн.: Условия регенерации органов у млекопитающих / Под ред. Л. Д. Лиознера. -М.: Медицина, 1972. - 328 С.84

9. Ю.Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознования патологических процессов. Л.: Медицина, 1978. - 296 с.

10. П.Данини Е.С. О факторах окостенения // Успехи современной биологии. -1946. Т.21, вып.2. - С.235-247.

11. Десятниченко К.С., Балдин Ю.П. Физико-химические свойства неколлагеновых белков органического матрикса костной ткани // Тез.докл. V съезда травматологов-ортопедов респ. Закавказья. Ереван, 1984. -С.153-155.

12. Десятниченко К.С. О нейрогуморальных механизмах контроля за репаративным процессом // Тез. докл. Всесоюзн. научно-практ. конф. Т.2. - Курган. - 1982. - С. 152-154.

13. Десятниченко К.С., Балдин Ю.П. Экспериментально-теоретические исследования, подтверждающие концепцию Г.А.Илизарова о единстве генеза костной и кроветворной тканей // Гений ортопедии. 1995. - № 1. -С.32-38.

14. Десятниченко К.С., Гайдамак А.Н. Показатели экскреции электролитов и компонентов органического матрикса у здоровых лиц и при переломах голени // Лечение переломов по методу Илизарова. Л., 1979. - С.71-77.

15. Джанбахишев Г. С. Одновременное удлинение обеих голеней по Илизарову у больных ахондроплазией, как первый этап увеличения роста: Дис. . канд. мед. наук. Курган, 1989. - 148 с.

16. Динамика некоторых показателей биологических жидкостей при открытой и закрытой травме/ Хицан Р.Г., Леонтьева Ф.С., Рынденко В.Г. и др. // Ортопед, травматол. 1976. - N 12. - С. 51-53.

17. Долгушин И.И., Эберт Л.Я., Лифшиц Р.И. Иммунология травмы. -Свердловск: Изд-во Урал.ун-та. 1989. - 188 с.

18. Илизаров Г.А., Новиков К.И. Удлинение бедра по Илизарову после компактотомии на двух уровнях у больных ахондроплазией: Метод, рекомендации/ МЗ РСФСР; ВКНЦ «ВТО». Курган, 1992. - 21 с.85

19. Илизаров Г. А. Попова Л. А., Шевцов В.И. Метод чрескостного остеосинтеза новый этап в развитии отечественной травматологии и ортопедии // Ортопед.травматол. - 1986. - № 1. - с, 1-5.

20. Кейлоны и регуляция деления клеток / Романов Ю.А., Кетлинский С.А., Антохин А.И., Окулов В.Б. // М.: Медицина, 1984. 208С.

21. Корж А. А., Белоус А.М., Панков Е.Я. Репаративная регенерация кости / М,: Медицина 1972. - 232 с.

22. Кулагин Г.Н. Патофизиология травмы и шока. Л., 1978. - 288 с.

23. Кусень С.И., Стойка Р.С. Молекулярные механизмы в действии полипептидных факторов. М.: Наука, 1985. - 240 С.

24. Лепехова Н.П. Биохимические показатели в оценке гуморальных влияний на репаративную реакцию кости: Автореф.дис.канд.биол.наук Ташкент, 1979. - 18 С.

25. Медведев В.И. Взаимодействие физиологических и психологических механизмов в процессе адаптации// Физиология человека. 1988. - Т. 24, №4.-С. 9-12.

26. Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам. М.: Медицина, 1988. - 256с.

27. Меньшиков В.В. Методы в клинической биохимии гормонов и медиаторов// М.: Медицина, 1985. 162 с.

28. Осипенко А.В., Никитенко Е.Т. Осообенности кроветворения и регенерации костной ткани при дистракционном остеосинтезе//Физиол. журн. 1984. -Т.ЗО. -N4. -С.450-454.

29. Попков А.В. Современные принципы лечения больных с укорочениями конечностей// Гений ортопедии. 1998. - 119 с.

30. Попков А.В., Дендиберя Е.В., Щукин А.А. Ахондроплазия. Билокальный дистракционный остеосинтез голени: Метод. рекомендации/МЗ РФ. РНЦ «ВТО». Курган, 1998.

31. Поков А.В., Десятниченко КС., Кузнецова Л.С. Системная реакция организма при полилокальном автоматическом удлинении конечностей// Травматол. ортопед. России. 1995. - №5. - С. 11-14.

32. Романова Л.К. Внутритканевая регуляция восстановительного роста / Условия регенерации органов у млекопитающих // М. :Медицина. 1972. -С.136-163.

33. Романчиков Ю.М. Факторы роста, вторичные мессенджеры и онкогены // Усп.совр.биол. 1991. -Т.111. -№ 1. -с.19-33.

34. Созон-Ярошевич А.Ю. О роли вегетативной нервной системы и продуктов распада тканей в процессах регенерации // Вестник хирургии. 1934. -Т.35, кн.101-102. - С. 152-163.

35. Соловьев Г. С. Реакция остеогенных элементов на действие стимуляторов остеогенеза / Реактивность и пластичность эпителия и соединительной87ткани в нормальных, экспериментальных и патологических условиях. // Свердловск, 1974. С.27-29.

36. Соловьев Г.С., Колпаков В.В. Дифференцировка костномозговых клеток под влиянием остеопоэтической сыворотки / Мат-лы VII науч.-техн.конф. молодых ученых специалистов Тюмени // Тюмень, 1973. С. 174176.

37. Прохончуков А.А. , Десятниченко К.С., Кузнецова JI.C. Образование органических кислот и содержание карбоната в костной ткани крыс после космического полета// Космич. Биол. 1983. - № 1. - С.60-62.

38. Стахеев И.А. Роль микроциркуляции в процессе формирования костного срещения с трубчатыми трансплантатами // Матер, итог, научн. сессии НИИТО МЗ БССР. Минск. - 1975. - С. 154-157.

39. Тодоров Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии / София: Медицина и физкультура. 1968. - 1064 С.

40. Условия регенерации органов у млекопитающих / Под ред. Лиознера Л. Д. // М.: Наука, 1972.-330 С.

41. Фриденштейн А Я, Лалыкина К.С. Индукция костной ткани и остеогенные клетки-предшественники / М.: Медицина, 1973. 226 С.

42. Функциональные биохимические исследования в клинике ортопедии и травматологии / Методические рекомендации (сост. К. С. Десятниченко, Л.С.Кузнецова, ЛИ.Грачева) // Курган, 1990. 28 с.

43. Шевцов В.И., Попков А.В. Оперативное удлинение нижних конечностей. М.: Медицина, 1998. - 198 с.

44. Шевцов В.И., Попков А.В., Десятниченко К.С. Биохимические маркеры88активности костеобразования при удлинении бедра в автоматическом режиме//Гений ортопедии. 1999. - №1. - С. 35-39.

45. Щепеткин И.А. Полипептидные факторы остеогенеза// Усп.совр.биол. 1994. -Т. 114, вып. 4.-С. 454-466.

46. Щепеткин И.А. Фактор некроза опухоли, как полипептидный фактор роста // Усп.совр.биол. 1993. - Т. 113, вып.5 -С.617-625.

47. Эльяшев А.И. Регенерация костной ткани и способы ее стимуляции / Л.,1939. 142 С.

48. Эпштейн М.Э. Регенерационные вещества в крови и сыворотке, способствующие заживлению повреждений и ран, их теоретическое и практическое значение // Новый хирургический архив. 1925. - Т.6, кн.4. -С.449-456.

49. Ястребов А.П., Осипенко А.В. Система крови и регенерация костной ткани. Свердловск: Изд-во Урал.ун-та, 1990. - 124 с.

50. А.с. 1399935 СССР. Способ получения вещества, ингибирующего эктопический остеогенез/ Сумароков Д.Д., Петрович Ю.А., Кулиш М.А. и др. -. N 4131092. Заявлено 17.10.86; опубл. 01.02.88

51. Abnormal subcortical somatosensory evoked potentials indicate high cervical myelopathy in achondroplasia. Boor R., Fricke G., Bruhl K., Spranger J. //Eur J Pediatr. 1999. - Aug;158(8). - S :662-667.

52. A case of achondrogenesis type II associated with huge cystic hygroma: prenatal diagnosis by ultrasonography / Won H.S., Yoo H.K., Lee PR, Lee I.S., Kim A., Nam J.H., Mok J.E. // Ultrasound Obstet. Gynecol. 1999. - Oct;14(4). - S: 288290.

53. Achondroplasia and Down syndrome in the same patient. Sanchez O., Guerra D., Nastasi J., Escalona J. // Invest. Clin. 1999. - Jun;40(2). - S: 143-154.

54. Achondroplasia associated with Down syndrome/ Carakushansky G., Rosembaum S., Ribeiro M.G., Kahn E., Carakushansky M.// Am J Med Genet. 1998. - May 1;77(2).-S: 168-1689.89

55. Achondroplasia associated with pelvic lipomatosis / Ono Т., Tanaka H., Moriwake Т., Kanzaki S., Seino Y. Lancet. 1999. - Mar 20;353(9157). - S: 1017.

56. Achondroplasia-hypochondroplasia complex in a newborn infant / Huggins M.J., Smith J.R., Chun K„ Ray P.N., Shah J.K., Whelan D.T. // Am J Med Genet. -1999. Jun 11;84(5). - S: 396-400.

57. Achondroplasia: molecular study of 28 patients/ Climent C., Lorda-Sanchez I., Urioste M., Gain J.M., Rodriguez J.I., Rubio V. // Med Clin (Bare). 1998. -Apr 18; 110(13). - S: 492-494.

58. Aldegheri R. Distraction osteogenesis for lengthening of the tibia in patients who have limb-length discrepancy or short stature// J Bone Joint Surg Am. 1999. -May;81(5). - S:624-634.

59. A mild form of pseudoachondroplasia: minimal epi-metaphyseai involvement of long bones / Manabe N., Nakamura K., Ikegawa S., Kimizuka M. // Eur. J. Radiol.- 1998. Sep;28(2). - S: 155-159.

60. Analysis of the FGFR3 gene in Japanese patients with achondroplasia and hypochondroplasia / Katsumata N., Mikami S., Nagashima-Miyokawa A., Nimura A., Sato N., Horikawa R., Tanae A., Tanaka T. // Endocr J. 2000. - Mar 47 Suppl. - S121-124.90

61. Anesthesia for an achondroplastic dwarf with bilateral vocal cord granuloma: use of a Xomed Hunsaker Mon-Jet ventilation tube. / O'Donneil J., Williams C.J., Rosen C.A., Sonbolian N. // CRNA. 1998. - May;9(2). - S: 67-76.

62. A novel missense mutation Ile538Val in the fibroblast growth factor receptor 3 in hypochondroplasia. Mutations in brief no. 122. / Grigelioniene G., Hagenas L., Eklof O., Neumeyer L., Haereid P.E., Anvret M. // Hum Mutat. 1998. - 11(4). -S: 333.

63. An uncommon G375C substitution in a newborn with achondroplasia/ Addor M.C., Gudinchet F., Truttmann A., Schorderet D.F.// Genet Couns. 2000; 11(2), S: 169-174.

64. Aterman K. From Horns the child to Hephaestus who limps: a romp through history.Am J Med Genet. 1999 Mar 5;83(l):53-63.

65. Bittar Z. Major congenital malformations presenting in the first 24 hours of life in 3865 consecutive births in south of Beirut. Incidence and pattern. J Med Liban. 1998 Sep-0ct;46(5):256-260.

66. Bone dysplasia series. Achondroplasia, hypochondroplasia and thanatophoric dysplasia: review and update / Lemyre E., Azouz E.M., Teebi A.S., Glanc P., Chen M.F. // Can Assoc Radiol J. 1999. - Jun;50(3). - S: 185-197.

67. Bone dysplasias: an introduction/ Azouz E.M., Teebi A.S., Eydoux P., Chen M.F., Fassier F.// Can Assoc Radiol J. 1998. - Apr;49 (2). - S : 105-109.

68. Callus formation in the humerus compared with the femur and tibia during limb lengthening / Tanaka K., Nakamura K., Matsushita Т., Horinaka S., Kusaba I., Kurokawa T. // Arch. Orthop. Trauma Surg. 1998. - 117(4-5). - S: 262-264.91

69. Changes of callus diameter during axial loading and after fixator removal in leg lengthening / Nakamura K., Matsushita Т., Mamada K., Okazaki H., Ou W., Okuma Y., Kurokawa T. // Arch. Orthop. Trauma Surg. 1998. - 117(8). - S: 464-467.

70. Characterization of cartilage oligomeric matrix protein (COMP) in human normal and pseudoachondroplasia musculoskeletal tissues. Hecht J.T., Deere M., Putnam E., Cole W., Vertel В., Chen H., Lawler J. / Matrix Biol. 1998. - Aug;17(4). - S: 269-278.

71. Cohen M.M. Achondroplasia, hypochondroplasia and thanatophoric dysplasia: clinically related skeletal dysplasias that are also related at the molecular level. ИЫ J Oral Maxillofac Surg. 1998. - Dec;27(6). - S: 451-455.

72. Cohn D.H., Sykes B. Identification of five novel mutations in cartilage oligomeric matrix protein gene in pseudoachondroplasia and multiple epiphyseal dysplasia. // Hum Mutat. 1998. - Suppl 1. - - S: 10-17.

73. Congenital anomalies in the teratological collection of Museum Vrolik in Amsterdam, The Netherlands. II: Skeletal dysplasias / Oostra R.J., BaJjet В.,92

74. Dijkstra P.F., Hennekam R.C. I I Am J. Med. Genet. 1998. - May 1;77(2). - S: 116-134.

75. DiMario F.J., Bauer L, Baxter D. Respiratory sinus arrhythmia of brainstem lesions.// J Child Neurol. 1999. - Apr; 14(4). - S: 229-232.

76. Distinct patterns of respiratory difficulty in young children with achondroplasia: a clinical, sleep, and lung function study / Tasker R.C., Dundas I., Laverty A., Fletcher M., Lane R„ Stocks J. // Arch. Dis. Child. 1998. - Aug;79(2). - S: 99108.

77. Downs A.M., Kennedy C.T. Somatotrophin-induced acanthosis nigricans// Br. J. Dermatol. 1999. - Aug; 141 (2). - S: 390-391.

78. Duffy G.P., Trousdale R.T., Stuart M.J. Total knee arthroplasty in patients 55 years old or younger. 10- to 17-year results. //Clin Orthop. 1998. - Nov;(356). -S: 22-27.

79. Effect of growth hormone therapy in children with achondroplasia: growth pattern, hypothalamic-pituitary function, and genotype / Tanaka H., Kubo Т., Yamate Т., Ono Т., Kanzaki S., Seino Y. // Eur. J. Endocrinol. 1998. -Mar; 138(3). - S: 275-280.93

80. Effects of fibroblast growth factor-2 on longitudinal bone growth / Mancilla E.E., De Luca F., Uyeda J.A., Czerwiec F.S., Baron J. // Endocrinology. 1998. -Jun; 139(6). - S: 2900-2904.

81. Enderle A. Dwarfism and gigantism in historical picture postcards// J. R. Soc. Med. 1998. - May;91(5). - S: 273-278.

82. FGFR3 gene mutation (Gly380Arg) with achondroplasia and i(21q) Down syndrome: phenotype-genotype correlation/ Chen H., Mu X., Sonoda Т., Kim K.C., Dailey K., Martinez J., Tuck-Muller C., Wertelecki W. //South Med J. -2000. Jun;93(6). - S.622-624.

83. Fibroblast growth factor receptor-3 as a marker for precartilaginous stem cells / Robinson D., Hasharoni A., Cohen N., Yayon A., Moskowitz R.M., Nevo Z. // Clin. Orthop. 1999. - Oct;(367 Suppl). -S: 163-175.

84. Genotype and phenotype in hypochondroplasia. Ramaswami U., Rumsby G., Hindmarsh P.C., Brook C.G. // J Pediatr. 1998. - Jul;133(l). - S: 99-102.

85. Gly369Cys mutation in mouse FGFR3 causes achondroplasia by affecting both chondrogenesis and osteogenesis/ Chen L., Adar R, Yang X., Monsonego E.O., Hauschka P.V., Yayon A., Deng C.X.// J Clin Invest. 1999. - Dec;104(ll). -S:1517-1525.

86. Gordon N. The neurological complications of achondroplasia. // Brain Dev. -2000. Jan;22(l). - S: 3-7.94

87. Genotype phenotype correlation in achondroplasia and hypochondroplasia / Matsui Y., Yasui N., Kimura Т., Tsumaki N., Kawabata H.5 Ochi T.J // Bone Joint Surg Br. 1998. - Nov;80(6). - S: 1052-1056.

88. Haverkamp F., Noeker M. 'Short stature in children--a questionnaire for parents': a new instrument for growth disorder-specific psychosocial adaptation in children. //Qual Life Res. 1998. - Jul;7(5). - S: 447-455.

89. Health-related quality of life of patients with genetic skeletal dysplasias/ Apajasaio M., Sintonen H., Rautonen J., Kaitila I.// Eur J Pediatr. 1998. - Feb; 157(2).-S:114-121.

90. Humeral lengthening and deformity correction / Yasui N., Kawabata H., Nakase Т., Shibata Т., Ohno H., Ochi T. // Orthopade. 2000. - Jan;29(l). - S: 58-62.

91. Hypochondroplastic dwarfism in the Irish setter. / Hanssen I., FaJck G., Grammeltvedt А.Т., Haug E., Isaksen C.V. // J Small Anim Pract. 1998. -Jan;39(l). - S: 10-14.

92. Julian D., Abbott U.K. An avian model for comparative studies of insulin teratogenicity// AnatHistol Embryol. 1998. - Oct;27(5). - S: 313-321.95

93. Keiper G.L., Koch В., Crone K.R. Achondroplasia and cervicomedullary compression; prospective evaluation and surgical treatment // Pediatr Neurosurg. -1999. Aug;31(2). - S: 78-83.

94. Kume H., Kume Y., Takamoto K. Achondroplasia associated with pelvic lipomatosis / Lancet. 1999. - Mar 20. - 353(9157). - S: 1017.

95. Mahomed N.N., Spellmann M., Goldberg M.J. Functional health status of adults with achondroplasia. // Am J Med Genet. — 1998. Jun 16;78(1). - S: 3035.

96. Marik I., Kozlowski K. Severe pseudoachondroplasia in a mother and her son. // Radiol Med (Torino). 1998. - Jul-Aug;96(l-2). - S: 98-100.

97. Medical complications of achondroplasia: a multicentre patient review / Hunter A G., Bankier A., Rogers J.G., Sillence D., Scott C.I. // J Med Genet. 1998. -Sep;35(9). - S: 705-712.

98. Mettler G., Fraser F.C. Recurrence risk for sibs of children with "sporadic" achondroplasia. // Am J Med Genet. 2000. - Jan 31;90(3). - S :250-251.

99. Molecular defects in achondroplasia and the effects of growth hormone treatment / Seino Y., Moriwake Т., Tanaka H., Inoue M., Kanzaki S., Tanaka Т., Matsuo N„ Niimi H.// Acta Paediatr. Suppl. 1999. - Feb;88(428). - S: 118-120.

100. Morrow M.J., Black I.H. Epidural anaesthesia for caesarean section in an achondroplastic dwarf. // Br. J. Anaesth. 1998. - Oct;81(4). - S: 619-621.

101. Mutations of the fibroblast growth factor receptor 3 gene in achondroplasia. / Zhao P., Ma H., Wang Y., Mi Z., Wu Y., Jiang M, Gao H., Li Y. // Zhonghua Yi Xue YiChuanXueZaZhi. 1999. - Feb 10;16(1). - S: 16-18.

102. Mutations in the fibroblast growth factor receptor 3 (FGFR3) cause achondroplasia, hypochondroplasia, and thanatophoric dysplasia: Taiwanese data. / Tsai F.J., Tsai C.H., Chang J.G., Wu J.Y. // Am. J. Med. Genet. 1999. - Sep. 17;86(3). - S: 300-301.

103. Mutation in the gene encoding the fibroblast growth factor receptor-3 in Korean children with achondroplasia / Yang S.W., Kitoh H., Yamada Y., Goto H., OgasawaraN. // Acta. Paediatr. Jpn. 1998. - Aug;40(4). - S: 324-327.

104. Nerve conduction changes during lower limb lengthening. Somatosensory evoked potentials (SEPs) and F-wave results / Polo A., Zambito A., Aldegheri R., Tinazzi M., Rizzuto N. // Electromyogr. Clin. Neurophysiol. 1999. - Apr-May;39(3). - S: 139-144.

105. Neuroanatomic and neuropsychological outcome in school-age children with achondroplasia / Thompson N.M., Hecht J.T., Bohan T.P., Kramer L. A., Davidson K., Brandt M.E., Fletcher J.M. // Am. J. Med. Genet. 1999. - Apr 16;88(2). - S: 145-153.

106. Obstructive sleep apnea in children with achondroplasia: surgical and anesthetic considerations. / Sisk E.A., Heatley D.G., Borowski B.J., Leverson97

107. G.E., Pauli R.M. // Otolaryngol. Head. Neck. Surg. 1999. - Feb;120(2). - S: 248-254.

108. Orthodontic treatment of Class II division 1 malocclusion in a patient with achondroplasia / Ohba Т., Ohba Y., Tenshin S., Takano-Yamamoto T. // Angle Orthod. 1998. - Aug;68(4). - S: 377-382.

109. Pauli R.M., Modaff P. Jugular bulb dehiscence in achondroplasia. // Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. 1999. - May 5;48(2). - S: 169-174.

110. Prenatal sonographic diagnosis of hypochondroplasia in a high-risk fetus. / Huggins M.J., Mernagh JR., Steele L., Smith J.R, Nowaczyk M.J. // Am J Med Genet. 1999. - Nov 26;87(3). - S: 226-229.

111. Pseudoachondroplasia with de novo deletion del(l I)(q21q22.2). / Ikegawa S, Ohashi H, Hosoda F, Fukushima Y, Ohki M, Nakamura Y. // Am J Med Genet. -1998. Jun 5;77(5). - S: 356-359.

112. Rao G.N., Greger N.G., Nelson D.A. Whole body bone mass and body composition in a girl with achondroplasia, at ages 9 through 12. // J. Clin. Densitom. 1999. - Summer;2(2). - S: 185-190.

113. Ravenscroft A., Go vender Т., Rout C. Spinal anaesthesia for emergency caesarean section in an achondroplasia dwarf // Anaesthesia. 1998. - Dec 53(12). - S: 1236-1237.

114. Reindal S.M. Disability, gene therapy and eugenics--a challenge to John Harris. // J. Med. Ethics. 2000. - Apr;26(2). - S: 89-94.

115. Reoperation for spinal restenosis in achondroplasia./ Ain M.C., Elmaci I., Hurko O., Clatterbuck RE., Lee RR, Rigamonti D.// J Spinal Disord. 2000; Apr ;13(2); S:168-173.

116. Repression of hedgehog signaling and BMP4 expression in growth plate cartilage by fibroblast growth factor receptor 3 / Naski M.C., Colvin J.S., Coffin J.D., Ornitz D M. // Development. 1998. - Dec;125(24). - S: 4977-4988.

117. Roberts D, Pexa C, Clarkowski В. Morey M, Murphy M. Fatal laryngeal injury in an achondroplastic dwarf secondary to airbag deployment. Pediatr Emerg Care. 1999 Aug; 15(4):260-261.

118. The diameter of callus in leg lengthening: 28 tibial lengthenings in 14 patients with achondroplasia / Mamada K., Nakamura K., Matsushita Т., Okazaki H., Shiro R, Ou W., Tanaka K., Kurokawa T. // Acta Orthop Scand. 1998. -Jun;69(3). - S: 306-310.99

119. Treatment of achondroplasia with growth hormone: six years of experience / Ramaswami U., Rumsby G., Spoudeas H.A., Hindmarsh PC., Brook C.G. // Pediatr. Res. 1999. - Oct;46(4). - S: 435-439.

120. Trinucleotide expansion mutations in the cartilage oligomeric matrix protein (COMP) gene/ Delot E„ King L.M., Briggs M.D., Wilcox W.R., Cohn D.H. // Hum Mol Genet 1999. - Jan;8(l). - S: 123-128.

121. Young I.D. Achondroplasia: a case of neglect? // Lancet. 1998. - Dec 19-26;352(9145). - S: 1950-1951.