Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Разработка технологии утилизации отходов пищевой промышленности и сельского хозяйства методом биоконверсии

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата технических наук, Тактаров, Эдуард Александрович

НАД - никотинамиддинуклеотид;

ТФФ - трифенилформазан;

Ау - активность уреазы, MrNH3/l г субстрата * сут;

Ад - активность дегидрогеназы, мг ТФФ/1 г субстрата * сут;

Ак - активность каталазы, мл O2/I г субстрата * сут;

Екаж - кажущаяся энергия активации, Дж/моль;

R - универсальная газовая постоянная, Дж/моль * К;

Wo - предэкспоненциальный множитель уравнения Аррениуса, 1/час;

W - скорость биосинтеза, 1/час; и - удельная скорость биосинтеза аминокислот, 1/час; г 0,4 - время достижения концентрации аминокислот 0,4 г/100 г асв в субстрате, час; Р - продуктивность, г/100 г асв * час; S - субстрат; Е - фермент;

ES - фермент-субстратный комплекс; Р - продукт; ki, k.j - константы скорости образования и диссоциации ферментсубстратного комплекса, 1/час; к2 - константа скорости мономолекулярного превращения фермент-субстратного комплекса, 1/час;

Vmax - максимальная скорость биосинтеза, г/100 г асв*час; Кт - константа Михаэлиса; Ki - константа ингибирования;

Wj - приведенная скорость биосинтеза, г/

Ха - массовая доля аминокислот;

Crb - мочевина;

Asp - аспарагиновая кислота;

Тге - треонин;

Ser - серин;

Glu - глутаминовая кислота;

Уа1-валин;

Met - метионин;

Leu - лейцин;

Iso - изолейцин;

Туг - тирозин;

Phe - фенилаланин;

Ami - у-аминомасляная кислота;

AM - аммиак;

Lys - лизин;

Arg - аргинин;

Gly - глицин;

Ala - аланин.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Торф как сырьевой источник биотехнологических производств

1.1.1. Общая характеристика торфа

1.1.2. Использование торфа в сельском хозяйстве

1.1.3. Компосты торф-органические отходы

1.1.4. Утилизация отходов животноводства с помощью метанового брожения

1.2. Микробиологические аспекты процесса биоконверсии

1.2.1. Биосинтез аминокислот

1.2.2. Влияние внешних факторов на биосинтез аминокислот

1.2.2.1. Влияние аэрации

1.2.2.2. Влияние температуры

1.2.2.3. Влияние влажности среды

1.2.2.4. Влияние кислотности среды

2. МЕТОДЫ И МЕТОДИКИ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И АНАЛИЗОВ

2.1. Установка для проведения эксперимента по биоконверсии

2.2. Методика эксперимента

2.3. Количественное определение содержания аминокислот с помощью автоматического аминокислотного анализатора

2.3.1. Подготовка образца аминокислот для анализа

2.3.2. Определение аминокислот на автоматическом анализаторе

2.3.3. Расчет содержания отдельных аминокислот

2.3.4. Подготовка реактивов

2.3.4.1. Подготовка натрий-лимоннокислых буферов и регенерирующего раствора

2.3.4.2. Приготовление раствора нингидрина

2.3.4.3. Приготовление стандартных растворов аминокислот

2.4. Определение ферментативной активности

2.4.1. Колориметрический метод определения активности уреазы

2.4.2. Колориметрический метод определения активности дегидрогеназы

2.4.3. Газометрический метод определения активности каталазы

2.5. Микробиологический анализ субстрата

2.5.1. Подготовка образца к микробиологическому анализу

2.5.2. Определение содержания микроорганизмов в субстрате

2.6. Использованные реактивы

3. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССА БИОКОНВЕРСИИ ТОРФОНАВОЗНЫХ СУБСТРАТОВ

3.1. Исследование влияния физико-химических параметров биоконверсии на протекание биосинтетических процессов

3.1.1. Влияние аэрации на ход процесса

3.1.2. Влияние соотношения торф-навоз на ход процесса биоконверсии

3.1.3. Варьирование температуры. Решение обратной задачи биохимической кинетики и расчет энергии активации

3.1.4. Влияние величины рН на ход биоконверсии

3.2. Исследование влияния добавок отходов пищевых производств на биосинтез аминокислот

3.2.1. Влияние добавок отходов различных пищевых производств

3.2.2. Варьирование количества отходов хлебопекарной промышленности

3.3. Оценка агрохимической и кормовой ценности продукта биоконверсии

3.4. Результаты жидкостной хроматографии. Аминокислотный состав продукта биоконверсии

4. КИНЕТИЧЕСКИЕ МОДЕЛИ ПРОЦЕССА БИОСИНТЕЗА И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Особенности моделирования биосинтетических процессов

4.1.1. Подходы к решению кинетических задач

4.1.2. Компьютерное моделирование кинетики синтеза продукта в микробиологических процессах

4.2. Математическое моделирование процесса синтеза аминокислот в ходе биоконверсии

4.3. Результаты решения обратной задачи биохимической кинетики с использованием явного интегрального метода

4.4. Индукционный период на кривых биосинтеза

5. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ УТИЛИЗАЦИИ ОТХОДОВ ЖИВОТНОВОДСТВА КОМПОСТИРОВАНИЕМ

НА МОДУЛЬНОЙ УСТАНОВКЕ

5.1. Обоснование выбора и расчета модульной установки по утилизации отходов животноводства твердофазной ферментацией торфонавозных компостов

5.2. Расчет материальных и тепловых потоков

5.3. Расчет материального баланса производства

5.4. Описание предлагаемой технологической схемы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Разработка технологии утилизации отходов пищевой промышленности и сельского хозяйства методом биоконверсии"

Одним из важных направлений биотехнологии является разработка способов утилизации отходов животноводческих комплексов и отходов пищевой промышленности [1, 2], их обезвреживания и сохранения как удобрения [3]. Целесообразность осуществления таких процессов определяют главным образом экономические и технические факторы.

Продукты, полученные биотехнологическими методами, выгодно отличаются от традиционных химических тем, что сырьем для их получения служат возобновляемые материалы животного и растительного происхождения, а также отходы различных производств [4, 5]. Экономические и экологические вопросы этих проблем определяют актуальность разработки эффективных биотехнологических способов переработки отходов животноводческих комплексов и пищевой промышленности с целью их обезвреживания и получения практически ценных продуктов [6].

В настоящее время разработаны биотехнологические способы получения органических удобрений на основе компостирования отходов сельского хозяйства, и кормовых продуктов на основе отходов пищевой промышленности [7, 8, 9]. Проведенные ранее на кафедре Биотехнологии и химии ТГТУ совместно с Всероссийским научно-исследовательским институтом мелиорированных земель (ВНИИМЗ) исследования показали возможность получения удобрения биоконверсией торфонавозной смеси при повышенной температуре и аэробно-анаэробных условиях. Однако оптимальные режимы процесса исследованы не были. Таким образом, определение параметров биоконверсии является актуальным.

Целью настоящей работы являлась разработка способов биоконверсии торфонавозных смесей и отходов пищевой промышленности для получения эффективных органических удобрений (компостов).

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: - изучение влияния физико-химических параметров на процесс биоконверсии торфонавозной смеси (соотношения торф-навоз в исходном субстрате, продолжительности и периодичности аэрации, температуры, кислотности среды); исследование влияния добавок отходов пищевых производств (хлебопекарной, молокоперерабатывающей, крахмалопаточной промышленности) на процесс биоконверсии торфонавозной смеси; определение химического состава, проведение агрохимической и зоотехнической характеристики полученного " продукта, исследование накопления аминокислот, как показателя синтетической активности микроорганизмов;

- исследование кинетики и построение математических моделей синтеза аминокислот в процессе биоконверсии с помощью ПЭВМ;

- разработка экологически чистой технологии утилизации отходов пищевой промышленности методом биоконверсии при использовании торфонавозных смесей в качестве основного субстрата;

- расчет технико-экономических показателей эффективности возможного производства по утилизации отходов хлебопекарной промышленности путем биоконверсии с торфонавозными смесями на модульной установке.

Научная новизна. Впервые исследован процесс биоконверсии торфонавозной смеси с отходами пищевой промышленности (хлебопекарной, молокоперерабатывающей, крахмалопаточной) для получения эффективных органических удобрений (компостов). Установлено, что отходы хлебопекарной промышленности, содержащие углеводы, активируют микробный синтез свободных аминокислот при биоконверсии торфонавозной смеси. Показана эффективность использования аэробно-анаэробных условий для активации биоконверсии.

Математическая обработка экспериментальных данных позволила определить кинетические параметры процесса биоконверсии торфонавозных смесей с отходами хлебопекарной промышленности и предложить математические модели, описывающие эксперимент.

Практическая ценность. Показано, что добавление в торфонавозную смесь углеводов (отходов хлебопекарной промышленности) повышает

10 активность аэробной группы микроорганизмов, а также увеличивает содержание аминокислот, минеральных веществ в продукте, что определяет получение на основе биоконверсии торфонавозной смеси с отходами хлебопекарного производства продукта со свойствами, соответствующими требованиям как к органическим удобрениям (по ТУ 98-41001-00668732-93 "Компост многоцелевого назначения").

В ходе работы разработана экологически чистая технология утилизации отходов пищевой промышленности и сельского хозяйства методом биоконверсии, отличающаяся от существующих более низкой себестоимостью и небольшим сроком окупаемости (около 2,5 лет); разработан лабораторный регламент и выданы исходные данные для проектирования модульной установки мощностью 1150 т/год.

Апробация работы. Представленные исследования проводились в рамках проекта Министерства Образования Российской Федерации "Научные исследования высшей школы в области химии и химических продуктов" (Подпрограмма: Биотехнология).

По результатам работы опубликовано 18 печатных работ, в том числе, в 2 изданиях центральной печати, получено 2 патента Российской Федерации. И

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Тактаров, Эдуард Александрович

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В диссертационной работе рассмотрена группа вопросов, связанных со способами интенсификации процесса биосинтеза биологически активных веществ методом биоконверсии и разработки технологического процесса утилизации органических отходов, а именно: определение оптимальных физико-химических параметров проведения процесса; исследование влияния добавок отходов различных пищевых производств на ход процесса и разработка технологической схемы процесса.

В результате проведенной исследовательской работы были решены задачи, связанные с использованием добавок отходов различных пищевых производств в исходный субстрат с целью интенсификации процесса биоконверсии; изучением кинетики и моделирования процесса биосинтеза аминокислот микроорганизмами, присутствующими в исходной смеси, разработкой технологической схемы утилизации отходов пищевой промышленности и сельского хозяйства.

По итогам проведенных исследований можно сделать следующие основные выводы:

1. Впервые исследован процесс биоконверсии торфонавозной смеси с отходами пищевой промышленности (хлебопекарной, молокоперерабатывающей, крахмалопаточной) для получения эффективных органических удобрений (компостов). Показана эффективность использования аэробно-анаэробных условий для активации биоконверсии.

130

2. Определены оптимальные физико-химические параметры получения продукта в процессе биоконверсии торфонавозной смеси:

- соотношение компонентов 50:50;

- аэробно-анаэробные условия осуществляются аэрацией воздухом с периодичностью 24 часа в течение 30 минут;

- оптимальная температура процесса 37 °С;

- величина рН = 7.0;

- продолжительность инкубации 60 часов;

- продолжительность пастеризации 48 часов при температуре 80 °С.

3. Впервые исследовано влияние добавок отходов пищевых производств (хлебопекарной, молокоперерабатывающей и крахмалопаточной промышленности) в исходный торфонавозный субстрат на активность процесса биоконверсии. Показано, что добавки отходов пищевой промышленности повышают активность процессов биоконверсии. Так, использование в качестве добавок отходов хлебопекарной промышленности в количестве 10 % (масс.) от общего количества исходного субстрата приводит к активации процесса накопления аминокислот (от 0,06 г/100 г асв в исходном субстрате до 7,49 г/100 г асв в конечном продукте), что обеспечивает содержание легкоусваиваемого азота для растений.

4. Установлено, что кинетические закономерности биосинтетических процессов при твердофазной биоконверсии торфонавозных субстратов подчиняются основным законам биокинетики и уравнение Михаэлиса-Ментен удовлетворительно описывает протекающие в системе процессы.

5. Разработана экологически чистая технология на основе биоконверсии торфонавозных смесей и отходов хлебопекарной промышленности для получения многоцелевого компоста (МК), который можно использовать в качестве органического удобрения (соответствует действующим ТУ 98-41-001-00668732-93 "Компост многоцелевого назначения").

131

6. Проведен расчет технологической схемы получения МК биоконверсией торфонавозной смеси с добавкой отходов хлебопекарной промышленности, а также выполнен подбор основного оборудования для модульной установки с производительностью 1150 т/год. Проведенная технико-экономическая оценка показала, что данное производство является рентабельным и имеет срок окупаемости около 2,5 лет, при расчетной себестоимости около 140 у.е. за 1 тонну.

132

Библиография Диссертация по биологии, кандидата технических наук, Тактаров, Эдуард Александрович, Москва

1. Lu Y.C., Kelly Т.С. Implications of Sustainable Agriculture for the World Food Situation // Food Reviews International, 1995, Vol. 11, Iss 2, pp. 255280.

2. Kishore G. M., Shewmaker C. Enchaancing human nutrition in development and developing worlds // Proc.Nat.Acad.Sci. USA. 1999. - 96, № 11. -c.5968-5972.

3. Фактор Г.Л. Система сбыта сельскохозяйственного сырья и продовольствия в капиталистических странах: Обзорная информация. // М.: ВНИИТЭИагропром, 1998. 54 с.

4. Виестур У.Э., Шмите И.А., Жилевич А.В. Биотехнология. Рига: Зинатне, 1987. 246 с.

5. Karns J.S., Hapeman C.J., Mulbry W.W., Ahrens E.H., Shelton D.R. Biotechnology for the Elimination of Agrochemical Wastes // Hortscience, 1998, Vol 33, Iss 4, pp 626-631.

6. Somba Z.C., Powell J.M. Seasonal Decomposition of Sheep Manure and Forage Leaves in Soil // Communications in Soil Science and Plant Analysis, 1998, Vol. 29, Iss 19-20, pp 2961-2979.

7. Эрнст Л.К. Перспективы использования в животноводстве кормовых продуктов из нетрадиционного сырья в сб.: «Нетрадиционные корма и добавки», Л., СЗНИИСХ, 1984, с, 3-8.

8. Пономарев А.Ф. Интенсификация кормопроизводства. М.: Росагропроиздат, 1988. 95 с.

9. Тюрина Ж.П., Альман А.В., Десятник А.А. Вторичное растительное сырье и способы улучшения его кормовых качеств. Кишинев: Штиинца, 1989. с. 1-15.

10. Базин Е.Т. Торф и торфяные месторождения: проблемы изучения, осушения, добычи, переработки, комплексного использования, ресурсосбережения и экологии. СПб., 1993. - 85 с.133

11. Лиштван И.И., Базин Е.Г., Гамаюнов Н.И. Физика и химия торфа. М.: Недра, 1989. -304 с.

12. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1974. -381с.

13. Химия и химическая технология. М.: Недра, 1976. - 35 с.

14. Наумова Г.В. Торф в биотехнологии. Минск: Наука и техника, 1987. -258 с.

15. Получение кормовых дрожжей из торфа. Под ред. члена-корреспондента АН БССР В.Е. Раковского. // Наука и техника, 1977. -с. 8-14.

16. Пейве Я.В. Биохимия почв. М.: Сельхозизд., 1961. - 422 с.

17. Орлов Д.С Гумусовые кислоты почв и общая теория гумификации. -М.: Изд-во МГУ, 1990 .- 432 с.

18. Прянишников Д.Н. Избранные произведения // Агрохимия. М.: Колос, 1965. Т.1. 767 с.

19. Авдонин Н.С. Агрохимия. М., 1982. 344 с.

20. Лиштван И.И., Базин Е.Т., Косов В.И. Физические процессы в торфяных залежах // Минск: Наука и техника, 1989. 287 с.

21. Мудрецова-Висс К.А. Микробиология. М.: Экономика, 1985. 256 с.

22. Орлов Д.С. Химия почв. М., 1985. 376 с.

23. Агрохимические методы исследования почв. М: Наука, 1975. 656 с.

24. Торф в биотехнологии // Под ред. Н.И.Лиштвана.-М.: Наука и техн., 1987. 151 с.

25. Забшш м'ясш якост1 свиней при згодовуванн! бюлопчно активно! кормово1 добавки з торфу, багато1 в1тамшом В12 / Буря В.В.,Палфш Ф.Ю.,Самарш Ю.С. и др. // Пробл.агропром.комплексу Карпат.-1995.-Вип.4. с.226-234.

26. Шпель В.М., Васильева А.Н. Кравец А.В. и др. Получение обогащенного корма на основе торфа // В сб. Торф в сельском хозяйстве. ВНИЦ Сельхозторф. Томск, 1990. с. 81-89.134

27. Использование верхового торфа сфагнового торфа в кормлении животных. Временные рекомендации. Томск, 1986. 13 с.

28. Патент Швеция N 8003856 5 .

29. А.С. N 3939201/30-15. Кормовая добавка для коров. Б.И. N 4, 1989.

30. Насимова J1.B., Класс А.Я., Пичугина Т. В. Влияние соотношения исходных компонентов на процесс компостирования. // В сб. Торф в сельском хозяйстве. ВНИЦ. Сельхозторф.- Томск, 1990. с. 63-71.

31. Foster D. Hamilton standard's recycling plant now on stream. // Calif.News., 1979, N 17, pp. 6-28.

32. Sweeten J. Methane production from livestor waste. // Texas Agr. Progress., 1978, N24, pp. 19-22.

33. Левитина H.B., Новосельская А.П. Гидрохимические и биохимические особенности анаэробной обработки животноводческих стоков // Копрологические аспекты промышленного животноводства. Ужгород, 1985.- С.38-39.

34. Ковалев Н.Г. Жидкий навоз потенциальное сырье для получения нетрадиционных кормовых продуктов. // Нетрадиционные корма в питании сельскохозяйственных животных,- Ужгород, 1984.-С.56-57.

35. Дубровский B.C. Виестур У.Э. Метановое сбраживание сельскохозяйственных отходов.- Рига: Знание, 1988, 200 с.

36. Latvietis I. Dzivnieku edinasanas normativi un barlbas sasta-vas. Riga, 1977.-208 p.

37. Vandamme E. J. Production of vitamins, coenzymes and related biochemicals by biotechnological processes. // J. Chem. Technol. Biotechnol., 1992. 53 (4), pp. 313-327.

38. Praer D., Hashimoto A.G. Effluent from anaerobic digester as feed stors. // Energy Biomass., 1980, N 2. pp 6-12.

39. Панцхава E.C. Применение метанового брожения в народном хозяйстве. // Теоретические и методические основы изучения анаэробных микроорганизмов.-Пущино, 1978. с.158-169.135

40. Горновносов И.К. Испытание опытно-производственной биогазовой установки. Запорожье, 1969. 34 с.

41. Baader W., Ortti Н. Nutzung der Bio-Barme. // Fetd u. IVatd, 1978, N 97. pp 5-6.

42. Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов // Под ред. И.Л.Работнова. М: Наука, 1980. 220 с.

43. Калунянц К. А., Ездаков Н. А., Пивняк И. Г. Применение продуктов микробиологического синтеза в животноводстве // М: Колос, 1980. -288 с.

44. Мецлер Д. Биохимия. М.: Мир, 1980. Т.1-3.

45. ГоттшалкГ. Метаболизм бактерий: Пер. с англ. М.: Мир, 1982.

46. Биотехнология: Учеб. Пособие для вузов. В 8 кн. // Под ред. Н.С Егорова, В.Д. Самуилова Кн. 6: Микробиологическое производство биологически активных веществ и препаратов / В.А Быков, И.А. Крылов, М.Н.Манаков и др. М.: Высш. шк., 1987. - 143 с.

47. Wood W.B., Willson J.H., Benbow R.M., etc. Biochemistry, A Problems Approach // Benjamin Cummings Publishing Co., Menlo Park, CA, 1981. p.294.

48. Фробишер M. Основы микробиологии. M.: Мир, 1965.

49. Микробиологический синтез аминокислот (Сборник АН ЛатвССР, ин-т микробиологии им. А.Кирхенштейна). // Под ред. П.А Кукайн, Ю.О.Якобсон, А.Э.Дук. Рига: Зинатне, 1972. - 130 с.

50. Гусев М.В., Минеева JI.A. Микробиология. М.: Изд-во МГУ, 1985.

51. Шамин А.Н., Джабраилов Н.А. Развитие химии аминокислот. М.: Наука, 1974.- 151 с.

52. Davies H.C.,Karush F.,Rudd J.H. Effect of amino acids on steady-state growth of a group A hemolytic Streptococcus // Journal of Bacteriology, N 89, 1965. pp. 421-427.

53. Griffiths J.B., Pirt S.J., Proc. Roy. Soc. B, 168, 421 (1967)

54. Peters V.J., Prescott J.M, Snell E.E., J.biol.Chem., 202, 521 91953)136

55. Kihara H., Snell E.E., J. biol. Chem., 197, 791 (1952)

56. Prescott J.M., Peters V.J., Snell E.E., J.biol.Chem., 202, 533, (1953)

57. Kihara H., Klatt O.A., Snell E.E., J. biol. Chem., 197, 801 (1952)

58. Snell E.E., Ann. Rev. Microbiol., 3, 97 (1949)

59. Lichstein H.C, Ann. Rev. Microbiol., 14, 17 (1960)

60. Kepes A., Cohen G.N., In the bacteria. IV. The phosiology and growth, p. 179. Academic press, New York, 1962.

61. Kelly D.P., Sci. Prog. (Oxford), 55, 276 (1951)

62. Практикум по микробиологии // под ред. Н.С.Егорова, М: Изд-во Моск.Университета, 1976. 3.08 с.

63. Г.Шлегель Общая микробиология. М: Мир, 1987. 568 с.

64. Дмитриев Л.Ф. О механизме сопряжения окисления и фосфорилирования. // Молекулярная биология, 1986. Т.20. В.4. С. 11111125.

65. К.А.Калунянц, Л.И.Голгер Микробные ферментные препараты. М: Пищевая промышленность, 1979. 304 с.

66. Безбородов A.M. Ферментативные реакции в биотехнологии. -М, 1994.

67. М. Диксон, Э. Уэбб. Ферменты. М: Мир, 1982. Т.1. 396 с.

68. Дж.Бейли, Д.Оллис. Основы биохимической инженерии. М: Мир, 1989. Т.1.-692 с.

69. Блинов Н.П. Основы биотехнологии. СПб: Наука, 1995. 600с.

70. Аристовская Т.В. Микробиология процессов почвообразования. Д.: Наука, 1980.71. 136. Жвирблянская А.Ю., Бакушинская О.А. Микробиология в пищевой промышленности. М.: Пищевая промышленность, 1975.

71. Stanier R.Y., Doudoroff М., Adelberg Е.А., The Microbial World< 4th ed., Prentice-HalK Inc., Englewood Cliffs., N. J., 1975.

72. Носкова Г.Л. Микробиология мяса при холодильном хранении. М.: Пищевая промышленность, 1972.137

73. Богданов В.М., Панкратов А .Я. и др. Техническая микробиология пищевых продуктов. М.: Пищевая промышленность., 1968.

74. Березин И.В., Клесов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики. М.: 1976.

75. Промышленная микробиология. // Под ред. Н.С. Егорова. М.: Высшая школа, 1989. 688 с.

76. Яровенко B.JI. Основные закономерности непрерывного спиртового и ацетоно-бутилового брожения. М.: 1975. 103 с.

77. Мудрецова-Висс К.А. и др. Микробиология, санитария и гигиена. -Владивосток, Изд-во ДВГАЭУ, 1998. 312 с.

78. Карклинып Р.Я., Пробок А.К. Биосинтез органических кислот. Рига: 1972.

79. Wouters Р.С., Glaasker Е., Smelt J.P.P.M. Effects of High-Pressure on Inactivation Kinetics and Events Related to Proton Efflux in Lactobacillus Plantarum // Applied and Environmental Microbiology, 1998, vol. 64, Iss 2, pp 509-514.

80. Патент № 2151133 (РФ) Способ биоконверсии органических отходов в кормовую добавку и удобрение / Ковалев Н.Г., Рабинович Г.Ю., Степанюк В.В., и др.

81. Практикум по биохимии // Под ред.С.Е.Северина, Г.А.Савельевой. М:Изд-во МГУ., 1989.

82. Жидкостная колоночная хроматография // Под ред. Э.Дейла и др. М: 1978 в 2 томах.

83. Филиппович Ю. Б. Основы биохимии // М.: Высш. Шк., 1993. -496 с.

84. Bohlen P., Schroeder R. Anal. Chem., 1982, vol. 126, p. 144-152.138

85. Коган Jl.А. Количественная газовая хроматография. М.: Химия, 1975. - 18 с.

86. Simpson R.I., Neuberger M.R., Liw Y.-Y. J. Biol. Chem., 1976, vol. 251, p. 1936-1940.

87. Tsugita A., Scheffler I.I. Eur. J. Biochem., 1982, vol. 124, p. 585-588. Scheffler, J. J., Tsugita, A., Linden, G., Schweitz, H. and Lazdunski, M., 1982. The amino acid sequence of toxin V from Anemonia sulcata. Biochem Biophys Res Commun 107, 272-8.

88. Методы почвенной энзимологии. // Под ред. Ф.Х.Хазиева. М: Наука, 1990.-189 с.

89. Введение в прикладную энзимологию М: 1982

90. Е.Н.Мишустин, В.Т.Емцев Микробиология // М: Агропромиздат, 1987. -368 с.

91. Комплексная биоконверсия органических субстанций. Отчет о НИР/ ТГТУ. г.Тверь, 1998. 86 с.

92. Ingraham, J.L. Growth of psychrophilic bacteria. J. Bact., 1958. 76, 75-80.

93. Monod, J. 1950. La technique de culture continue: Theorie et application. Ann. Inst. Pasteur, Paris 79:390-401.

94. Lane, B.S., Trinci, A.P.J., Gillespie, A.T. Influence of cultural conditions on the virulence of conidia and blastospores of Beauveria bassiana to the green leafhopper, Nephotettix virescens. Mycol., 1991. Res. 95 (7), 829-833.

95. Шульц Г., Ширмер P. Принципы структурной организации белков. М: Мир, 1982. - 354 с.

96. Перт С. Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.: Мир, 1978.-332 с.

97. Киперман С.Л. Введение в кинетику гетерогенных каталитических реакций. -М: Наука, 1964. 608 с.

98. Березин И.В. Исследования в области ферментативного катализа и инженерной энзимологии. -М.: Наука, 1990, 382 с.139

99. Дмитриев Л.Ф. О механизме сопряжения окисления и фосфорилирования // Молекулярная биология, 1986. Т.20. В.4. С 11111125.

100. Сульман Э.М., Тактаров Э.А., Рабинович Г.Ю., Ковалев Н.Г. Биоконверсия отходов животноводства и растительного сырья в удобрения и кормовые добавки Вестник Российской Академии Сельскохозяйственных Наук, N 1, 2001. С. 32-34.

101. Растительные белки и их использование в кормлении сельскохозяйственных животных // Под ред. Э.Э.Маргона, Л: Колос, 1964.-216 с.

102. Продукты микробного синтеза на торфяных субстратах / под ред. М.В.Залашко. Минск: Наука и техника, 1978. - 234 с.

103. Стент Г., Кэлиндар Р. Молекулярная генетика. -М: Мир, 1981.

104. Березин И.В., Варфаломеев С.Д. Биокинетика. -М.: Наука, 1979. 310 с.

105. Варфоломеев С.Д., Калюжный С.В. Биотехнология: Кинетические основы микробиологических процессов. М.: Высшая школа, 1990.296 с.

106. Параметрическое управление биосинтезом микроводорослей / Под ред. И.А.Терскова. Новосибирск; Наука, 1980. - 120 с.

107. Печуркин Н.С. Популяционная микробиология. Новосибирск; Наука, 1978.-277 с.

108. Печуркин Н.С., Терсков И.А. Анализ кинетики роста и эволюции микробных популяций. Новосибирск; Наука, 1975. - 215 с.

109. Гутер Р.С., Резниковский П.Т. Программирование и вычислительная математика.- М.: Наука, 1971. вып.2. - 264 с.

110. Калиткин Н.Н. Численные методы. М.: Наука, 1978. - 512 с.

111. Варфаломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика. Практический курс. М: ФАИР-ПРЕСС, 1999. 720 с.140

112. Ермакова А. Макрокинетика трехфазных гетерогенных каталитических реакций: Дис. . д-ра техн. наук. Новосибирск, 1986. - 468 с.

113. Косивцов Ю.Ю. , Математическое моделирование процессов гидрирования в синтезе витаминов: Дис. . канд. техн. наук. Тверь, 1996. - 129 с.Jоооооооооо ооооооооооо

114. Количество микроорганизмов, млн/гго