Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Разработка и усовершенствование иммунологических методов диагностики классической чумы свиней

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лыска, Валентина Маркеловна

Список сокращений.

1. Введение.

1.1. Актуальность темы.

1.2. Цель работы.

1.3. Основные задачи исследования.

1.4. Научная новизна.

1.5. Практическая значимость.

1.6. Основные положения выносимые на защиту.

1.7. Апробация и публикация результатов.

2. Обзор литературы.И

2.1. Физико-химическая и морфологическая характеристика вируса классической чумы свиней.

2.2. Основные биологические свойства вируса классической чумы свиней.

2.2.1. Вирулентность штаммов, патогенез.

2.2.2. Адаптация вируса КЧС на животных разных видов.

2.3. Чувствительность культуральных систем к заражению вирусом КЧС.

2.4. Единичный цикл репродукция вируса КЧС.

2.5.Очистка и электронная микроскопия вируса КЧС.

2.5.1 .Очистка вируса.

2.5.2. Электронная микроскопия.

2.6. Методы обнаружения вируса классической чумы свиней.

2.6.1. Иммуногистохимические методы.

2.6.3. Метод выделения вируса с использованием культур клеток.

2.6.4.Методы обнаружения вирусспецифических антител КЧС.

2.7. Технология изготовления иммунопероксидазных конъгогатов.

2.7.1 .Получение специфических сывороток к вирусу

КЧС и оценка их пригодности для изготовления конъюгатов.

2.72.Получение моноклональных антител.

2.7.3 .Приготовление иммукопероксидазных коныогатов к вирусу КЧС.

3. Собственные исследования.

3.1.Материал ы.

3.1. ¡.Вирусы:.

3.1.2. Животные:.

3.1.3. Клеточные культуры.

3.1.4. Сыворотки.

3.1.5. Питательные среды и добавки к ним.

3.1.6. Реактивы и оборудование.

3.1.7. Растворы.

3.2. Методы.

3.2.1. Определение единичного цикла репродукции вируса КЧС.

3.2.2.Получение и титрование вируссодержащего материала.

3.2.3. Приготовление препаратов очищенного вируса КЧС.

3.2.4. Электоонная микооскопия.

3.2.5 Приготовление специфических и нормальных культуральных антигенов.

3.2.6. Получение гипериммунных сывороток крови к вирусу КЧС

3.2.7. Получение гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к вирусу КЧС.

3.2.8. Выделение

§.П из гипериммунных сывороток к вирусу КЧС.

3.2.9. Приготовление иммукопероксидазных конъюгатов.

3.2.10. Методы иммунопероксидазного анализа.

3.2.11. Методы статистической обработки результатов и математического моделирования.

4. Результаты исследований.

4.1. Чувствительность клеточных систем различного п роисхождения для размножения вируса КЧС.

4.2. Единичный цикл репродукции, морфогенез вируса

КЧС штамма Ши-Мынь, клон ШМ-43.

4.3. Результаты усовершенствования методов концентрирования и очистки вируса КЧС.

4.4. Разработка методов иммунопероксидазного анализа для обнаружения вируса и специфических антител при КЧС.

4.4.1. Получение гипериммунных сывороток и моноклональных антител к вирусу КЧС и оценка их пригодности для приготовления иммуно-пероксидазных конъюгатов.

4.4.2. Выделение и оценка антителосодержащих фракций сывороток для метки ферментом.

4.4.3. Результаты отработки методов конькх ирования антител с пероксидазой хрена.

4.4.4. Разработка схемы и условий постановки методов иммунопероксидазного анализа для обнаружения антигенов вируса КЧС и специфических антител.

4.5. Определение чувствительности и специфичности методов иммунопероксидазного анализа.

4.5.1. Обнаружение и титрование вируса в экспериментальных вируссодержащих материалах.

4.5.2. Выявление вирулентного вируса у экспериментально зараженных свиней

4.5.3. Обнаружение специфических антител к вирусу

КЧС с использованием методов иммунопероксидазного анализа.

4.5.4. Оценка методов иммунопероксидазного анализа при исследовании полевого материала.

5. Обсуждение.

6. Выводы.

7. Практические предложения.

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Лыска, Валентина Маркеловна

6. Выводы

1. Разработана технология изготовления и использования «Набора препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней», основанная на использовании клонированного вируса КЧС «ШМ-43», метода очистки вируса, получении высокоактивных гипериммунных сывороток. Компоненты набора обеспечивают постановку прямого и непрямого метода иммунопероксидазного анализа для обнаружения вирусспецифических антигенов и антител при КЧС.

2. Определён единичный цикл репродукции вируса КЧС, клона «ШМ-43» шт.»Ши-Мынь», Латентный период составил около 4 часов, максимальное накопление внутриклеточного вируса (6,5-7,0 lg ККЙД50/мл) через 10-16 часов, внеклеточного (6,5 lg ККИД50/мл) через 20-24 часа.

3. Разработана технология получения очищенного вируса КЧС, включающая использование клонированного вирулентного вируса КЧС «ШМ-43» о шт.»Ши-Мынь», выращенного при роллерном культивировании культуры клеток РК-15, концентрировании и ультрацентрифугировании в градиенте плотности сахарозы 7-35%. Удельная активность очищенных препаратов вируса составила 109,8 ККИД50/мл на 1 мг общего бежа, при выходе по инфекционно-сти 11 %.

4. Разработан новый и усовершенствован существующий способ получения гипериммунных сывороток к вирусу КЧС, основанные на использовании очищенного вируса и внутрикожной гипериммунизации . Активность антител в полученных сыворотках составила 1:10 000-1:25 600.

5. Отработана методика получения моноклональных антител к вирусу КЧС, клону «ШМ-43». Получена гибридома 8РЗВ2, продуцирующая антитела к структурным полипептидам ^р44/48, 55)

6. При исследовании экспериментальных и полевых экспертизных материалов установлено, что методы иммунопероксидазного анализа имеют чувствительность обнаружения антигенов вируса в инфицированных клетках и специфических антител, соответствующей реакциям иммунофлуоресценции - 56% и 49%. По времени выделения и идентификации вируса прямым методом ИПА в инокулированной. культуре клеток РК-15 экспертизными материалами, вирус был обнаружен через 24 часа в 8% , через 48 часов 42% , через 72 часа в 29% и при проведении 2-х-З-х пассажей - в 31 % случаев .

7. Практические предложения

Разработаны и рекомендованы для практического использования:

- "Методические указания по очистке и концентрированию вируса КЧС";

- "Методические указания по иммуноэлектронной микроскопии вируса КЧС";

Подготовлена и утверждена директором ВНИИВВиМ нормативно-техническая документация на «Набор препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней»: Инструкция, Технические Условия на изготовление и контроль, «Временное наставление по применению набора препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней». Пригодность для практического использования подтверждена внутриинституто скими и межведомственными комиссионными испытаниями.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лыска, Валентина Маркеловна, Покров

1. Авилов B.C., Мникалова Л.А, Сологуб В.К,, Коромыслов Г.Ф., Дзантиев Б.Б., Сорокина Н.В., Егоров AM. Иммуноферментный анализ. // Ветеринария. 1981. № 8, с. 33-35.

2. Авроров А А., Акулов А.В., Бурба Л. Г. и др. под ред. Шишкова В.П. Патологическая диагностика болезни свиней. // М., "Колос". 1984.

3. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимиков. // М. "Мир". 1983.

4. Айрапетян В.Г. Реакция преципитации как метод дифференциальной диагностики при чуме евшей. // Труды Арм. НИВЙ. 1937. с. 2.

5. Базылев П.М. К вопросу серологической диагностики чумы свиней. // Труды ВГНКИ. 1962. т. 10, с. 51-56.

6. Бакулов И.А., Вишняков И.Ф., Николайчук Л.Ф., Котляров В.М. Использование реакции энзим меченых антител при выявлении антигена возбудителя сибирской язвы. // Тез. научн. конф. ВНИИВВиМ, посвященной 60-летию образования СССР. Покров. 1982. с. 308-311.

7. Бакулов И.А, Вишняков И.Ф., Котляров В.М., Николайчук Л.Ф. Оценка специфичности иммуноферментного метода для выявления антигенов возбудителя сибирской язвы. // Тез. научн. конф. ВНИИВВиМ, посвященной 40-летию Победы. Покров. 1985. с. 584-587, П-1026.

8. Барышников П.И. Возможности использования теста иммуноферментного анализа для диагностики и индикации КПП. // Тез. научн. конф. ВНИИВВиМ. Покров. 1983. с. 277-279, П-845.

9. Ю.Барышников П.И. Разработка твердофазного метода иммуноферментного анализа при контагиозной плевропневмонии крупного рогатого скота. // Дисс. канд. вет. наук. Покров. 1985. П-1027.

10. Н.Брок И. Выделение иммуноглобулина (IgG). // Им-мунологические методы. М." Мир". 1979. с. 264-273.

11. Бузун АИ., Курченко Ф.П. Ферментоиммуноанализ при вирусных болезнях животных. НИСХЙ МСХ СССР. // Тез. научн. конф. ВНИИВВиМ, посвященной 60-летию образования СССР. Покров. 1982. с. 456-458, П-784.

12. Венгеров Ю.Ю., Булгарина Т.В., Куш A.B., Воробьев С.М., Северин Е.С. Современные методы иммуноферментного анализа для диагностики вирусных инфекций. // Биотехнология. 1987. т. 3, № 3, с. 291-295.

13. Воллер Ф., Бидуэлл А. Иммукоферментные реакции в диагностической медицине. Теория и практика. // Бюллетень ВОЗ. 1977. № 53, с. 38-45.

14. Вишняков И.Ф., Цыбанова Л.Я. Иммуносорбентный анализ. // Ветеринария. 1983. № 9, с. 68-70.

15. Вишняков И.Ф. Диагностика классической чумы свиней. // Ветеринария. 1986. № 3, с. 27-30.

16. Гаврилова Е.М., Киселев В.Н., Егоров AM., Березин И.В. Конъюгаты АТР-инсулин и их использование для иммуноферментного анализа. // Биохимия. 1981. т. 46, № 2, с. 306.

17. Гизатуллин Х.Г., Юсупов Р.Х. Чума свиней и современные методы ее лабораторной диагностики.//Казань. 1973. с. 120.

18. Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М., Филипова Н.Ю., Егоров А.М., Березин И.В, Получение и свойства комплекса иммуноглобулина Г человека с пероксидазой. // Биохимия. 1978. т. 43, № 6, с. 1054-1061.

19. Дзантиев Б. Б., Егоров А М. Современное состояние и перспективы развитая иммуноферментного анализа. // Журнал Всес. хим. общества им. Д.И. Менделеева. 1982. т. 27, № 4, с. 442-449.

20. Игнатьева Г. А, Сидорович И.Г., Болотовская М.Н. Гибридомы и мококлональные антитела в биотехнологии и медицине. // Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология. М. 1989. т. 20, с. 3-96.

21. Иммунохимический анализ. М. "Медицина". 1968. с. 300.

22. Камфорин JI.E. под ред. Смородинцева A.JI. йммунофер-ментный метод. Современные методы иммунологической диагностики вирусных инфекций. // М. 1981. с. 30-36.

23. Коромыслов Г.Ф., Авилов B.C. Иммунофермеытный анализ и применение его в ветеринарии. // Бюл. ВНИИ эксперим. вет. 1985. № 58, с. 6-9.

24. Кузнецов A.B. Изучение чувствительности и специфичности реакции связывания комплемента и метода флуоресцирующих антител при классической чуме свиней. // Автореф. дисс. канд. вет. наук. Покров. 1975. с. 24.

25. Кузнецов A.B., Попов В.И. Изучение условий получения культуральных компле-ментсвязываюгцих антигенов вируса классической чумы (КЧС). // Акт. вопр. ветер, вирусол. Покров. 1976. №. 1, с. 130-132.

26. Кузнецов AB., Рудобельский Э.В., Попов В.И., Петрачев ДА. Использование поросят СВИБ для получения высокоспецифических гипериммуиных сывороток к вирусу КЧС. // Вопр. ветер, вирусол., микробиол. Покров. 1973. е. 74-75.

27. Кулеско Й.И., Собко А.И. Диффузионная реакция преципитации на агаровой пластинке для диагностики чумы свиней. // Ветеринария. 1960. № 10, с. 68-73.

28. Кулеско И.И., Собко А.И., Соболев Н.М. Иммунофлуорес-центный метод обнаружения вирусного антигена при чуме свиней и болезни Ауески. // Акт. вопр. ветер. вирусол. М. 1965. № 1, е. 45-46.

29. Кулеско И.И., Соболев Н.М. К вопросу о дифференциации эпизоотического и ат-тенуированного штаммов вируса чумы свиней. // Ветеринария. "Урожай". 1969. т. 24, с. 55-58.

30. Куриннов В.В. Разработка и усовершенствование лабораторной диагностики классической чумы свиней. //Дисс. канд. вет. наук. Покров. 1984. с. 222, П-895.

31. Куриннов В.В. и др. // Актуал. вопр. ветер, вирусол, Покров. 1995. с. 50-54.

32. Лакин Г.Ф. // Биометрия. Москва, Высшая школа, 1990. С.352.

33. Левин М.И., Шимко Т.А., Садочкин А.Ю., Навашин С.М. Использование лактама-зы из Bacillus IJcheniformis 7591 для твердофазного иммуноферментного анализа. // Антибиотики и медицинская биотехнология. 1985. № 9, с. 662-665.

34. Лихачев Н.В., Мельникова Л.А и др.0 Изучение синтеза антигена вируса чумысвиней в культуре клеток. // Ветеринария. 1974. с. 37-39.

35. Малахова Й.В., Зорин Е.В., Новохатский A.C. Хранение и восстановление гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к вирусным антигенам. // Молекулярная генетика, микробиол. и вирусол. 1985. №3, с. 41-44. :::

36. Маренникова С.С., Хабахпашева Н.А и др. Получение и сравнительная оценка пероксидазных конъюгатов на основе чистых антител и Fab фрагмента. // Микробиология, эпидемиология и иммунология. 1982. № 9, с. 99-103.

37. Мищенко Н.К. Разработка кулыуральной вирусвакцины для специфической профилактики КЧС. // Дисс. докт. вет. наук. М. 1981.

38. Мищенко Н. К., Шарабрин О.И. Черняк И.Н. Контроль вирусвакцины против классической чцмы свиней на остаточную вирулентность. // Труды ВГНКИ. 1978. т. 25, с. 151-156.

39. Мищенко Н.К., Фисенко О.Ф. Вакцинация поросят против чумы свиней куль-туральной вирусвакциной (ВГНКИ) из штамма "К". Труды ВГНКИ. М. 1975. с. 14-20.

40. Непоклонова И.В. Использование иммунопероксидазного метода для индикации антигена вируса инфекционного ринотрахеита в культуре ткани ПЭК. // Пробл. вирусол., молекул, биол. и гистол. с/х животных. М. 1983. с. 14-15.

41. Николаев В.П., Царькова В.А. Твердофазный иммуноферментный экспресс-анализ для обнаружения вирусных антигенов. // Вопрос, вирусол. 1984. т. 29, № 6, с. 720722.

42. Николаева Н. Структура и свойства вируса классической чумы свиней. // Авто-реф. дисс. канд. биол. наук. Владимир. 1983.

43. Г1анитков М.А. Применение иммунофлуоресценции для индикации вируса чумы свиней. /7 Ветеринария. 1974. № 7, с. 39-40.

44. Панитков М.А Применение реакции иммунофлуоресценции для выявления возможного вирусоносительства при чуме свиней. // Актуальн. вопр. вирусол. Казань. 1980. с. 41.

45. Петрачев Д.Ф. Экспериментальная разработка и усовершенствование способа серийного получения, выращивания и использования свиней-гнотобиотов для вирусологических целей. // Автореф. дисс. докт. вет наук. Покров. 1983. с. 45.

46. Попов В.И. Разработка и усовершенствование средств и способов специфической профилактики классической чумы свиней. // Дисс, докт. вет. наук. Покров. 1981. с. 492.

47. Попов В.И., Кузнецов А.В., Рудобельский Э.В., Петрачев Д.А. Изучение чувствительности и специфичности метода иммунофлуоресценции при классической чуме свиней. // Вопр. ветер, вирусол., мнкробиол., эпнзоотол. Покров. 1981. с. 109-110.

48. Притулин П.И., Конопаткин А А Применение метода флуоресцирующих антител для обнаружения вируса чумы свиней. // Акт. вопр. ветер, вирусол. 1965. № 1, с. 46-47.

49. Рудобельский З.В., Кузнецов АВ., Попов В.И. Петрачев Д.А. Обнаружение вируса классической чумы свиней метдом флуоресцирующих антител. // Вопр. ветер, вирусол., микробиол. иэпизоотол. Покров. 1973. с. 80-83.

50. Собко А.И., Романенко В.Ф., Вожко Г. К. и др. Справочник по болезням свиней. // Киев. "Урожай". 1988. с. 10-22.

51. Совершенствование профилактических и противоэпизооти-ческих мероприятий при классической чуме свиней. // ВНИНВВиМ. Отчет по НИР, тема 6-87. 1988.

52. Сорвачев Е.В. Некоторые данные о размножении и индикации вируса чумы свиней в культуре ткани. // Дисс. канд. М. 1965.

53. Сюрин В.Н., Самуйленко Б.В., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Вирусные болезни животных. // М. ВНИТИБП. 1998. с. 123-124.

54. Сюрнн В.Н., Иванова Г.А., Краснобаев Е.А., Фомин 10.В. // Лабораторная диагностика вирусных болезней животных. М. "Колос". 1972. с. 416.

55. Сюрин В.Н., Смоленский В.И. Биотехнологические методы диагностики и профилактики вирусных болезней животных. // Межд. с.-х. журнал. 1987. № 9, с. 38-42.

56. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных. //М. Агропромиздат. 1986. с. 351.

57. Форни JI. Флуоресцирующие антитела и их применение при анализе лимфоидных клеток. // В кн: Методы исследований в иммунологии. М. "Мир". 1981. с. 164-180.

58. Фримель X. // Иммунологические методы. М. " Мир", с. 9-18.

59. Чермашенцев В.И., Юрков С.Г. Методические указания по обнаружению , идентификации и титрованию вируса классической чумы свиней в культуре ЛС свиней-доноров. II Покров. 1988. с. 21.

60. Шарабрин А И., Агеева Л.С. // Дальнейшее пассирование штамма "Гудзон" на кроликах и клинико-цитоморфологические исследования у привитых свиней . Труды ВГНКИ ветеринарных препаратов. 1971. т. 18, с. 35-40.

61. Цимбалов Е.Н., Вишняков И.Ф., Бакулов И.А, Балабанов В.А Получение специфических коньюгатов для иммуиоферментной диагностики на основе нового фермента. // Тезисы докладов научн.-практической конф. ВНИИВВиМ. Покров. 1988. т.2, № П-1291, с. 116.

62. Цуверкалов Д. А, Курченко И.И. Реакция преципитации при чуме свиней. // Микробиология и иммунология. 1934. т. 12.

63. Юсупов Р.Х. К проблеме лабораторной диагностики вирусных заболеваний животных. // Ветеринарная технология промышленного производства свинины. Киев. 1979. с. 55-57.

64. Юсупов Р.Х., Гизатуллин Х.Г. О некоторых итогах разработки и рименения метода иммунофлуоресценции для ускоренной диагностики чумы свиней. Уч. Записки КГВИ, 1976 №117, с.8-17.

65. Юсупов Р.Х. Изучение иммунного фона при некоторых вирусных заболеваниях свиней. // Вет. пробл. пром. евин. Киев. 1983. с. 61-62.

66. Юсупов Р.Х., Ильясова Г.Х. Белые крысы как модель для получения асщггаческих жидкостей при чуме свиней. // Акт. вопр. ветер.вирусол. Владимир. 1976. с. 168170.

67. Яшин AT., Вишняков И.Ф,, Куриннов В.В., Олейник Л.Я. Критерии иммунных сывороток КЧС для их эффективной метки флуорохромохм, // Вопр. вет. вируеол., микробиолог, и эпизоотол. Покров. !983. с. 100-102.

68. Aiken J., Hoopers К. and Stair E. Repid diagnosis of hog cholera: a direct fluorescent-antibody technigue, // Proc. Amer. Vet. Med. Assoc. 1964. v. 144, p. 283.

69. Aiken J., Hoopers K. and Stair E. and Rhodes M. Repid diagnosis of hog cholera: a tissue impression fluorescent-antibody technigue. // J. Amer. Vet. Med. Assoc. 1964. v. 144, p. 1395-1397.

70. Aiken J., Hoopers K,, Twiehaus M. Nonspecificity of fluorescent-antibody test for distinguishing hog cholera virus strains. // J. Amer. Vet. Med. Assoc. 1967. v. 150, p. 59-61.

71. Anderson Jan. Fetal calf serum brought hits cell kulture laboratories. // Nature. 1980. v. 285, №5760, p. 63.

72. Annual Reports of Oie Reference laboratories and Collaborating Centres Office International des Epizooties. 1996,1997 r.r.

73. Afshar A., Gilles C,, Dulac and Alice Bouffard. Application of peroxidase labelled antibody assays for detection of porcine IgG antibodies to hog holera and bovine viral diarrhea viruses. // J.Virol. Methods. 1989. v. 23, № 3, p. 253-262.

74. Avrameas S. Coupling of enzymes to proteins with glutaraldehyde. // Immunochemistry. 1969. v. 6, p. 43-52.

75. Aynaud J. Etude de la multiplication in vitro d"un clon du virus de la peste porcine. // Rech. Veter. 1968 № 1, p. 25-36.

76. Aynaud J., Cortiere G., Hange H. Influence de limmunite passive transmise par la peste porcine classique chaz le porkelet. // Ann. Rech, veter. 1973. № 4, p. 359-369.

77. Aynaud J., Corthier G., Laude H., Galicher C. and Gelfy J. Sub-clinical swine fever: a survey of neutralizing antibodies in sera of pigs from herds having reproductive failures. // Ann. Rech. Veter. 1976. v. 7, № 1, p. 57-64.

78. Baker J., Shefiy B. A persistent hog cholera viraemia in yong pigs. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1960. v. 105, p. 675-678.

79. Barnaure G., Popa M., Dknitrescu G. Recherches concernant la valeur immunogene dune souche vaccinale attenuee antipeste porcine, cultivi sue cellules tripsinesees. // Lucr. Inst. cecr. vet. dioprep, "Pasteur", 1977. № 13, p. 15-22.

80. Baumgartner W., Krakowka S. A simple method for histochemieal demonstration of viral inclusion bodies in cell monolautrs in microtitration plates. // Stain. Technol. 1986. v. 61, №4, p. 215-218.

81. Bee H. Seroiogische Untersuchungen über Häufigkeit and Vorobreitung neutralisierender Antikörper gegen das Virus Der Europaischen Schweinepest and das Virus der Aujeszky"schtn Krankheit bei Schweinen inHessen. Ii Inaugural-dissertation. 1980. p. 84.

82. Beer J., Urbaneck D., Heinick W., Schwedler H., Wittmann W. Neue Wege bei der Bekämpfung and Prophylaxe der Schweinepest in DDR. // Monatshefte fur Vet. Med. 1972. v. 27, № 13, p. 487-493.

83. Biront P., Leunen J., Vandeputte J. Ingibition of virus replikation in the tonsilsog pigs previously vaccinated with a strain of classical swin fever virus. // Veter. Microbiol. 1987. v. 14, №2, p. 105-113.

84. Brockman S.J., Wood L., Edwards S. and Harkness J.W. Selection of an appropriate pestivirus for border disease serolodiagosis. /7 Veterinary Record. 1988. v. 122. p. 586587.

85. Boorsma D Kaisbeek G Standartixation in peroxidase-immunohistochemistry. /7 Proc. Med. Biol. Soc. Netli. 1973. № 14, p. 54.

86. Boynton W. H. Preliminary report of the propagation of hog cholera vims in vitro. // Vet. Med. 1946. v. 41, p. 364.

87. Caporale V., Rutili(D., Nannini D. et al. Epidemiology of classical cwine fewer in Itali from 1970 to 1985. // Rev Sei. et tech. off. int. epizoot. 1988. v. 7, N° 3, p. 599-617.

88. Carbrey E. The role of immune tolerance in transmission of hog cholera. 11 J. Am. Vet. Med. Assoc. 1965. v. 146, p. 233-237.

89. Carbrey E. Routine laboratory diagnosis of hog cholera employing the flyorescent antibody tissue culture technique. FAO/OIE international Meeting on Hog Cholera and African Swine Fever. // Rome. 1965.

90. Carbrey E., Ericson G., Metz С. Diagnosis of hog cholera. // Prev. Vet. Med. 1984. № 2, p. 103-108.

91. Caij A, Muyldermans J., De Smet A ., Hamers R., Koenen F. Production and characterization on monoclonal antibodies against hog hoi era virus (штамм Альфорг 187). //Arch Virology . 1993. v. 131, p. 185-192,

92. Catty D. Антитела. Методы. // Книга 2. Москва. " Мир". 1991.

93. Ceditest Differentiation of pestiviruses by an immunoperoxidase test, using monoclonal antibodies against hog cholera virus (classical swine fever virus-CSFV), id-dlo, Lelystad. 1996.

94. Charley B. et al. Modification des reaction immunitares an cours de la peste porcine classique. // Ann. Rech. Vet. 1980. v. 11, № 1, p. 27-33.

95. Chasey D. A simple and immunoperoxidase test for the detection of virus antigens in tissue culture. Vet. Record., 1980, v. 106, p. 506-507.

96. Ченчев Й., Милев H., Пеев Я. и др. Доказване на вируса на чумата по свинете чрез заразяване на клетьчни культури с лимфоцита лизарини червени кръвни клетки. // Ветер. Мед. Науки. 1985. т. 22, № 10, с, 16-19.

97. Chevilie N., Mengeling W. The pathogenesis of chronic hog holera (swine fever). Hisiologic, immunoiluorescent and electron microscopic studies. // Lab invest. 1969. v. 20, p. 261-274.

98. Classical Swine Fever and Related Viral Infect, edited by B. Liess. // Boston. 1988. p. 298.

99. Classical Swin Feverand Related Viral Infection. // Ed: by Liess. Boston etc: Martinus Nijhoff Publishing. 1988. p. 298.

100. Cevelle N. F., Mengeling W.L. The patogenesis of chronic hog cholera (swin fever). Histologic, immunofluorescent and electron mikroskopik studies. // Lab. Invest. 1969. № 20, p. 261-374.

101. Collett M.S. Molecular genetics of pestiviruses. // Comp.Immun. Microbiol. Infect. Dis. 1992. v. 15, № 3, p. 145-154.

102. Collett M., Larson R,, Gold C., Strick D., Anderson D., Purchio A Molecular cloning and nucleotide sequence of the genome of hog holera virus. // Virology. 1988. v. 165, p. 191-199.

103. Cowart W., Morehouse L. Effects of attenuated hog cholera virus in pregnant swin at various stages of destation. // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1967. v. 150, p. 1321-1322.

104. Crowther I. Abu Elzein E.M.E. Application of the enayme-linked immunosorbent assay to the detection and identification of foot-and-mouth disease viruses. I. Hyg. 1979. v.83,№3, p. 513-519.

105. Danner K. und Bachmann P. Vermehrung und Ausbreitung von Schweinehest-viras, stamm "München" in PK-15 zellkulturen. // Zbl. Vet. Med. 1970. v. 17, № 3, p. 353-362.

106. Dalazs L., Matyas G. Az optimalis reakciobelosegito tenyezok. // Morphol. es igazsagugyi oro szemle. 1983. v. 23, №4, p. 301-307.

107. Dahle J., Liess B. and Frey H.R. Neutralising antibody development following sequential inoculation of pig with strains of bovine viral diarrhoea virus and hog cholera virus. // Veterinary Medicine. 1987. v. 34, p. 729-739.

108. Danner K, Bachmann P. Vermehrung und Ausbrei von Schweine-pest-Vims, Stamm München in PK-15-Zellkulturen. // Zbl. Vet. Med. Reihe B. 1970. v. 17, № 3, p.353-362.

109. Darbyshire J.H. A serological relationship between swine fever and mucosaldisease of cattle. /./ Veterinary Record. 1960. v. 72, p. 331.

110. Degert D., Bolin S.R., Heckert R.A., Loewen K.G. Monoclonal Antibodies to Bovine Viral Diarrhea Virus. Cross Reactivities to Field Isolates and Hog Cholera Virus Strains. // Can. J. Vet.Res. 1994. v. 58. p. 71-74.

111. Dekker A., Wensvoort G. and Terpstra C .Six antigenic groups within the genus pestiviras as identified by cross neutralisation assays. // Veterinär}7 Microbiology. 1995. v. 47, p. 317-329.

112. Deelder A. A Comparative Study on the preparation of Immunoglobulin-Galactosidase Conjugates. // The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 1981. v. 29, № 11, p. 1273-1280.

113. Diderholm H., Dinter Z. The use of SV 40-transformed cell for titration of bovine viral dirroea and hog cholera viruses // Zbl. Vet. Med. 1965. v. 12, p. 469-475.

114. Dinter Z. Relationship between bovine vims Zentralbatt fiir Bakteriologie Parasitenkunde Infektionskrankheiten und Hygiene. // Zbl. Bakt. Paras. I Orig. 1963. v. 183, p. 1257-1259.

115. Doyle L. and Heuscheie W. Bovine viral diarrhoea vims infec-tion in captive exotic ruminants. Journal of the American // Veterinary Medical Association. 1983. v. 183, p. 1257-1259.

116. Dunne H. Hog cholera. In: Diseases of swine (Eds. Dunne H.W., Leman A.D.). // Iowa State. Univ. Pres. 1975. p. 189- 255.

117. Dunne H., Reich C., Hokanson J. et al. Variations in the virus hog cholera. // Proc. Book. AVMA 1955. p. 148-153.

118. I.Edwards S., Sands J., Harkness J. The application of monoclonal antibody panels to characterize pestivirus isolates from ruminants in Great Britain. // Archives of Virology. 1988. v. 102, №3-4, p. 197-206.

119. Edvards S., Moenning V. And Wensvoort G. The development of an international referens panel of monoclonal antibodies for the differentiation of hog cholera virus from pestiviruses. // Vet. Microbiol. 1991. v.29, p. 101-108.

120. Edwards S., Paton D. Antigenic differences among pestiviruses. // Vet. Clin. North. Am. Food Anim.Pract. 1995. v. 11, № 3, p. 563-577.

121. Engler E., Ludwig C., Fritzach W. et al. Immunohistologiche Intersuchungen bei Schweinepest. 2. Die Bedeutung des Kontrastfluoreszenzverfahrens für die routinema ige Laboratoriumsdiagnostick der Schweinepest. // Arch. Ex. Med. 1972. v. 26, p. 661682.

122. Engvall E., Perlmann P. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). // Antomation in microbiology and immunology eds. Hrden G. 8 Jlleni T. Wiley and Sons. New York. 1973. p. 527-542.

123. Enzmann P.J. Quantitative and rapid assays of togaviruses bu immunofluorecence. H Acta Virol. 1979. v. 23, № 4, p. 329-330.

124. Emerson J. and Delez A Cerebellar hypoplosia, hypomyelinogenesisi and congenital tremors of pigs associated witf prenatal hog cholera vaccination of sows. // J. Am. Veter. Med. Assn. 1965. v. 147, p. 1346-1349.

125. Fortier B., Deville C., Huraux J. Comparison of an ELISA- trchnique with quantal micro-neutralization test for serotyping of HSV-1 or HS V-2-infected patients. // J. Virol.

126. Meth. 1982. v. 5,№l,p. 11-20.

127. Forst J., Liess B., Prager D. Purification and electron microscopical observations of hog hoi era virus. // Comm Eur Commun (EUR5904). 1977. p. 23-30.

128. Francki R.I.B., Fauquet, C.M., Knudson, D.L. and Brown, F. Fifth Report of the International Committee on the Taxonomy of Viruses. // Archives of Virology Supplementum. 1991. v. 2, p.223-233.

129. Fuchs F. Schweinepest. Handbuch der Virusinfectionen bei Tieren. // Band 111/1. Gustav Fischer Verlag. In: Rohrer H., (Editor), 1968. p. 1-250.

130. Goding J.W. Conjugation of antibodies with fluo-rochroms: modifications to the standard methods. // J. Immunol. Methods. 1976. v. 13, p. 215-226.

131. Goldman R., Lieve L. Heterogeneity of antigenic-sidechain ength in lipopolysaccharide from Escherichia coli Olli and almonella typhknurium LT2. // Eur. J. Biochem. v. 107, p. 145-153.

132. Gooding J. Antibody production by hybridomas. // J. Immun. Meth. 1980. v. 39, № 4, p. 285-308.

133. Harkness J. Classical swine fever and its diagnosis: A current view. // Veter. Ree. 1985. v. 116, №11, p. 288-293.

134. Harcness Y. Classical swine fever and its diagnosis a current view. // Vet. rec. 1985. v. 116, №11, p. 288-292.

135. Have P. Detection antibodies against swine fever virus by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). // Acta. vet. Scand., 1984. v. 25, № 3, p. 462-465.

136. Heene D., Hoffmann-Fezer G., Hoffmann R. et al. Gerinnungsstofungen bei acuter Schweinepest. //Bbeitr. Pathol. 1971. v. 144, p. 259-271.

137. Herrmann H. Enzyminimmunoassay Seine Anwendung in der Diagnistik von Intertionskrannlieiten. // Z. med. Labordiagn. 1982. № 6, p. 246.

138. Herrmann J., Morse S. Coupling of peroxidase to poliovims antibody: Characteristict of the conjugates and the use in virus detection. // Infect. Immunol. 1973. № 8, p. 645649.

139. Herting C., Stalder H., Peterhans E. Genetic heterogeneitywiihin the coding regions of E2 and NS3 in strains of bovine diarrhea virus . Gene. 1995. v. 152, № 2, p. 191-195.

140. Hess R., Coulibaly C., Jreiser-Wilke I., Moenning V., Liess B. Identification of hog holera viral isolates by use of monoclonal antibodies to pestivirusts. // Vet. Microbiology 1988. v. 16, №4, p. 315-321.

141. Holm-Jensen M. Detection of antibodies against hog holera virus and bovine viraldiarrhea virus in porcine serum: a comparative examination using. 1981, CF, PLA and NPLA assays. // Acta Vet. Scand. v. 22, p. 85-98.

142. Horzinek M., Uberschar, S. Charakterisierung eines Schweine-Adenovirus im Zusammenhang mit Untersuchungen über das Virus der europaischen Schweinepest. // Arch ges Virusforsch 1966. v. 18, p. 406-421.

143. Horzinek M., Mussgay M. Maess J., Petzold K: Nachweis dreier Virusarten (Schweinepest-, Adeno-, Picoma-Virus) in einem als cytopathogen bezeichneten Schweinepest-Virusstamm. //' Arch ges Virusforsch. 1967. v. 21, p. 98-112.

144. Horzinek M., Reczko E., Petzoldt K. On the morphology of hog cholera virus. // Arch ges Virusforsch. 1967. v. 21, p. 475-478.

145. Hofmann M.A., Brechtbuhl K., Stauber N. Rapid characterization of new pestivirus strains by direct sequencing of PCR-amplified eDNA from the 5' noncoding region. // Arch. Virol. 1994. v. 139, p. 217-229.

146. Jensen H. Detection of antibodies against hog cholera virus in bovine virus diarrhoea virus in porcine serum. A compdrdtive examination using CF, PLA and NPLA assays. // Acta vet. Seand. 1981. v. 22, p. 85-98.

147. Jakotot H Sur la transmissibilite de la peste porsine a diferses especes animales. // Ann. Inst. Pasteur, 1939. № 62, p, 516-533.

148. J.M de las Mulas., Ruiz-VillamorE., Donoso S. et al. Immunohisto-chemical detection of hog cholera viral glycoprotein 55 in paraffin-embedded tissues. // J. Vet Diagn Invest. 1996. v. 9, p. 10-16.

149. Karasszon D., Bodon L. Demonstration of the swin fever virus in tissue culture by immunofluorescence. // Acta Mikrobiol. Acad. Sei. Hung. 1963. № 10, v. 3, p. 287-291.

150. Kennedy J., Kucke L., Wilding P. Protein-prolein compling reactions and the applications of prolein conjugates. // Rwiew. Clin. Chim. Acta. 1976. J70, 5.1-31.

151. Kobe K, Schmidt W. DilTerentaldiagnose Zwischen chonischer Schweinepest und Feikengrippe. // Dtch. Tierarztl. Wschr. 1934. v. 42, p. 145-148.

152. Komaniwa H., Fukusho A., Shimizu Y. Mikro method for performing titration and neutralization test of hog cholera virus using establisched pocine kidney cell strain. // Nat. Inst. Anim. Health Q. 1981. v. 21, № 4, p. 153-158.

153. König M, Lengsfeld T., Pauly T., Stark R., Thiel H. Classical swine fever virus: Independet induction of protective immunity bytwo structural glycoproteins. // J. Virol. 1995. v.69, p. 6479-6486.

154. Korn G. Zur Patogenese der Shweinepesterkrankung. // Tierartztl. Umschau. 1971. v. 26, №7, p. 341-345.

155. Korn G. und Matthaus W. Zur Anwendung der HEIC-Method und der qualitativen Nachweis von Antikörpern nach Impgung mit Schweinepest-Kxistalviolett-vakzinea // Zbl. Bakt. Hyg. J. Abt. Orig. 1971. v. 217, p. 133-140.

156. Korn G. und Matthaus W. On the selection of pig immusera for conjugation in fever diagnosis. Diagnosis and Epizootiology of Classical Swine Fever. // Comm. of the European Communities. 1976. p. 19-20.

157. Kom G. und Matthaus W. Studien über die in Verlauf der sperkranlcung auftretenden Antikorplrten und ihre Zugehörigkeit zu Antigenen. // Zbl. Vet. Med. 1977. v. 24, p. 274-286.

158. Korn G. und Lorenzs R Untersuchungen zur Vermehrung des virus der Europaischen Schweinepest in Makrophagen und Lymphozyten Kulturen von normalen und ummunen Tieren. //Zbl. Bait. Yyg. J. Abt. Orig. 1976. v. 236, p. 163-184.

159. Kohler G., Milstein C. Continuous culture of fused cells secreting antibody of predefined specificity. // Nature. 1975 v. 256, № 5517, p. 495-497.

160. Kohler G., Milstein C, Derivation of specific antibodyproducing tissue culture and tumor lines by cell fasion. // Eur Jimmunol. 1975. v .6, № 7, p. 511-519.

161. Koprowski H., Gerhard W., Croce C. Production of antibodies against influenza virus by somatic cell hybrids between mouse myeloma and primed spleen cells. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1977, v. 74, p. 2985-2988.

162. Kosmidou A, Ahl R., Thiel H.J., Weiland E. Differentiation of classics! swine fever virus (CSFV) strains using monoclonal antibodies against structural glicoproteins. // Vet. Microbiol. 1995. v. 47, p. 111-118.

163. Kresse J. Conformation of Hog Cholera by the Fluorescent Antibody Tissue Section Technique. Memorias Simposium Internacional de Laboratories de Diagnostico. // Mexico. 1977. № 2, p. 341-348.

164. Kress J., Stewart W„ Carbrey E. et al. Sensitivity of swine buffy coat culture to infection with hog cholera virus. // Am. J. Vet. Res. 1976. v. 37, № 11. p. 1315-1318,

165. Kubin G. Neuere Erkernitnissi dei der Diagnostik, Bekempfung und Immunoprophylaxe der Schweinepest. // Wien Tieraztl, Msehr. 1974. v. 61, № 8, p. 213219.

166. Kubin G. In vitro Merkmale des Schweinepestvirus. // Zbl. Vet. Med. 1967. № 14, p. 543-552.

167. Kumagai T., Shimizu G. and Matumoto M. Detection of hog cholera virus by its effect on NDV in swine tissue cultures. // Science. 1958. v. 366, № 128, p. 1-58.

168. Laude H. An improved mrthod for purification of classical swinefever virus in tissue culture. Hog cholera. / Classical Swine Fever and African Swine Fever. // Comm. of European Communities, EUR 5904 EN. 1977. p. 5-22.

169. Laude H. Hog holera virus: arts and facts. // Ann Rech Vet. 1987, v. 18, p. 127-138.

170. Laude H. et Gelfi J. Diagnostic serologique de la peste porcine elassique utilisation d'une souche cytolytique pour la recherche des anticorps neutralisants en microplaque. Ii Ann. Recti. Vet. 1980. v. 3, p. 313-319.

171. Lawer W., Air G., Webster R. et al. Antigenic drift in type A influenza virys: Sequence differences in the hemagglutinin of Hong Kong (H3N2) variants, selected with monoclonal hybridoma antibodies. // Virology. 1979. v. 29, № 1, p. 226-237,

172. Loan R. Stadies on the nucleic acid type and essential lipid content of hog cholera virus. // Am. J. Res. 1964. № 25, p. 1366-1370.

173. Letchworth G., Appleton J. Methods for production of monoclonal antibodies. /7 Agriculture Handbook, U.S. Department of Agriculure. 1986. № 630 p. 50.

174. Leforban Y., Edwards S., Ibata D. and Vannier P. A blocking ELISA to differentiate hog cholera virus antibodies ih hig sera from those due to other pestiviruses. // Annales de Recherehes. 1990.

175. Matíhaeus W. und Korn G. Serologische Identifizierung und Verhalten des hohvirulenten Schweinepestvirus in der Immunoelektrophoreze. // Zbl. Vet. Med. 1975. v. 22, p. 47-59.

176. Matthaeus W., Korn G. On the specifigens of antigens of hog cholera virus detected by agar gel diffusion test and immunofluorescence. Studies on Virus Replication. // Comm. of the European Communities. EUR 5451.1976. p. 350-371.

177. Matthaeus W., Korn G. and Schlotterer E. Studies on precipitation reactions of swine fever. Hog Cholera. Classical Swin Fever and African Swine Fever. // Comm. of the European Communities. EUR 5904 EV. 1977. p. 85-93.

178. Mayr A, Mahnel H: Zbl Bakt I Abt Orig. 1964 v. 195 p. 157-166 (cit Horzinek M, Mussgay M, Maess J, Petzold K: Arch ges Virusforsch. 1967. v. 21. p. 98-112).

179. Mayr A Mahnel H. Weitere Untersuchungen über die Zuchtung von Schweinepestviras in Zellkulturen mit cytopathogenem Effekt. // Zbl Bakt I Abt Orig. 1966. v. 99, p, 399-407.

180. Mayer R., Walker J. Immunochemical Methods in Cell and Molecular Biology. // Academic press, Harcourt Brace Jovanovich Publishers London San Diego New York Berkeley Boston Sydney Tokyo Toronto, 1987. p.315 .

181. Mengeling W., Cheville N. Host response to persistent infection with hog cholera virus, ii Proc. US Anim Livest. Assoc. 1968. p. 283-295.

182. Mengeling W., Packer K. Patogénesis cronic hog cholera: Host response. // Am. J.

183. Vet. Res. 1969. № 30, p. 409-417.

184. Mengeling W., Pirtle E. and Torrey I. Identification of hog cholera viral antigen by immunofluorescence. Application as a diagnostic and assay method. // Canad. J. of Comp. Med. Vet. Sei. 1963. v. 27, p. 249-252.

185. MengeIing W. and Torray J. Evaluationof the Fluorescent Antibody-Cell Culture Test fo Hog Cholera Diagnosis. // Am. J. Vet. Res., 1967. 28, v. 127, p. 1653-1659.

186. Meyers G., Rumenapf T., Thiel K. Molecular cloning and nucleotides sequence of the pestivirus bovine viral diarrhea virus. // Virology. 1989. v. 165, p. 555-567.

187. Meyers G. and Thiel H.J. Cytopathogenicity of Classical Swine Fever Virus Caused Defective Interfering Particles. // J.Virology. 1995. v. 69, № 6, p. 3683-3689,

188. Meyers G., Rumenapf T., Thiel H. Molecular cloning and nucleotide sequence of thegenome of hog cholera virus. // Virology. 1989. v. 171, p. 555-567.

189. Meyer H., Liess B., Hermanns W. and Trautwein G. Experimentelle, diaplazentar infektion vou Schweinefeteu mit duu Virus der Europaischen Schweinepest. // Fortsher. Vet. Med. 1980. v. 30, p. 140-144.

190. Morrin F.; Wilson B., Connor M. Evaluation of an immunoperoxidase monolayer assay for detection of pestivirus antibodies in pigs. // Irish Vet. J. inc. Irish Vet. Times. 1997. v. 50, p. 294-299.

191. Neumann R., Leonhardt W. Belastung und Infectionabwehrbeini Saugferkel // Monatsh Veterinarmed. 1985. № 22, v. 40, p. 781-784.

192. Pan I., Huang T., Pan C. et al. The skin, tongue, and brain as favorable organs for hog holera diagnosis by immunofluorescence.// Arch. Virol. 1993. v. 131, p. 475-481.

193. Paton D.J. Pestivirus diversity. // Journal of Comparative Pathology. 1995. v. 122, p. 215-236.

194. Paton D.J., Ibata G., Edwards S., and Wenswoort G., An ELISA detecting antibody to conserved pestivirus epitopes. // Journal of Virological Methods. 199L v. 31, p. 315324.

195. Paton D.J., Sands J.J., Roehe P.M. BVD monoclonal antibodies: relationchip between viral protein specificity and viral strain specificity. // Arch. Virol. 1991. v. 3, p. 47-54.

196. A. van Rijn H. Gennip, E. de Meijer, R. Moormann. Epitope mapping of envelope glycoprotein El of hog holera virus strain Brescia. // Jörn, of General Virology. 1993. v. 74, p. 2053-2060.

197. Paul John. Cell and tissue culture. // 5th ed Edinbinburgh e.a. Churchill Livingstone. 1975. p. 484.

198. Perlmann D. Use of antibiotices in cell culture media Meth. it Enzymol. New York e. a. 1979. v. 58.

199. Pehl K. Schulze W. Der virusgehalt blutfreier Organe bei der Schweinepest. // Arh, Exp. Vet. Med. 1958. v. 12, p. 861-869.

200. Pierce Chemical. Pierces protein A // Biotechnol. Bull. 1984. v. 3, № 11, p. 8.

201. Pirtle E., Gutekunst D, Relationship between the soluble antigen of hog cholera and bovine viral diarrhoea viruses prepared in tissue culture. /7 VelRec. 1964. v.76, p. 11771180.

202. Plateau E., Vannier Ph., Tillon J. Experimental Study of a Mild Virulence Strain of hog cholera: Individual Variations and Horsontal Transmission. // Zbl. Veterinarmed. 1980. v. 27, № 8, p. 650-657.

203. Porstmann B., Porstmann T., Reinigung handelsüblicher Meerettich-Peroxydase mr den Einsabz in Inzymmunoassay. /7 Z. med. Labor-Diagn. 1979. v. 20, p. 87-95.

204. Potts B., Sever J., Tzan N., Huddieston D., Elder G. Possible role of pestivirusesmicrocephaly. // Lancet 1987. p. 972-973.

205. Ressang A. Studies on the pathogenesis of hog holera. I. Demonstration of hog holera virus subsequent to oral exposure. // Zentralbl Veterinarmed Reine. 1973. v. 20, p. 256288.

206. Ressang A and Boer J. The diagnosis of hog cholera in the Netherlands. // Bull. of. int. epiz. 1971. v. 75, p. 519-531.

207. Ressang A and Boer J. The indirect fluorescent antibody technique as a method for detection serum antibodies against hog cholera. // Part 1. Zbl. Yet. Med. 1969. v. 16, p. 709-716.

208. Ritchie A, Fernelius A. Direct immuno-electron microscopy and some morphological features of hog cholera virus. // Arch ges Virusforsch. 1968. v. 23. p. 292-298.

209. Ritehie A., Fernelius A. Direct immuno-electron mikroscopy and some morphological features of hog cholera virus. // Arch, ges Virusforsch. 1968. № 23, p. 292-298.

210. Robertson A, Bannister G., Boulanger P. et al. Hog cholera. 5. Demonstration of the antigen in swine tissues by the fluorescent antibody technique. // Canad. J. Comp. Med. Vet. Sci. 1965. № 29, p. 299-305.

211. Robertson A, Greid A, Appel M. et al. Hog cholera, 4, Demonstration of the virus in tissue culture preparation by the fluorescent antibody technique. // Canad. J. Comp. Med. Vet. Sci. 1965. № 29, p. 234-241.

212. Rothauer D., Torretta E., Ponti W., Lopalco L. et al. La tecnica ELISA applicata alia diagnosi delle malattie infettive di interesse. // Veterinario. 1971. v. 15, № 4, p. 249-260.

213. Rumenapf T., Meyers G., Stark R. et. al . Molecular characterization of hog holera virus. // Arch. Virol. Supp. 1991. v. 1, № 3, p. 7-18.

214. Rutili D., Titoli F. Ultrastructura! studies of some organs from pigs with swine fever. // Comm Eur Commun (EUR5904). 1977. p. 41-51.

215. Sado K., Matumoto. Enhancection with hog cholera virus replication in swine testicle cells by cointeetion with hog holera virus. // Jap. J. Microbiol. 1971. v. 15, № 5, p. 397406,

216. Scherrer R., Aunaud J., Cohen J., Bic E: Etude au microscope electronique du vims de la peste porcine classique (hog cholera) dans des cjupes ultra-fines de cellules infectees in vitro. // CR Acad Sc Paris. 1970. v. 271, p. 620-623.

217. Schmidt D., Bergmann H., Wittmann E. Zur Ätiologie der chronischen und der atypisch verlaufenden Schweinepest. /7 Arch. Exp. Med. 1965. v. 19, p. 149-156.

218. Schulze P: Elektronenmikroskopische des Lymphknotens erkrankter Schweine. II Arch Exp Vet Med. 1971. v. 25. p. 413-425.

219. Schuurs A, Van Weemen B. Enzymunoassay. Cíinica Chimica. // Acra. 1977. v. 81, p. 1-40.

220. Sincovics J., Dreesman G. Monoclonal antibodies of hybridomas. // Rev. Infect. Dis. 1983. v. 5, №l,p. 9-34.

221. Singh V., Misra R., Srivastava N. etal. Diagnosis of swine fever by indirect haemagglutination test. // J. anim. Health. 1976. v. 15, № 1, p. 45-48.

222. Shannon A, Morrissy C., Mackintosh S., WTestbury H. Detection of hog cholera virus antigens in experimentally infected pigs using an antigen-capture ELISA /7 Vet. Microbiol. 34, 1993. v. 34, p. 233-248.

223. Sherma S., Sachdev B. Pattern of patogénesis of swine fever virus in a herdof pigs at regional pig breeding Station, Aligarh. // Indian Vet. Med. J. 1980. v. 4, № 3, p. 125126.

224. Snodon W.A. and French E.L. The bovine mucosal disease-swine fever complex in pigs. // Australian Veterinary Journal. 1968. v. 44. p. 179-184.

225. Stark R. Rumenapf T., Meyers G., Weiland E., Thiel H-J. Molecular characterization of hog holera virus. // Vaccines 90: Mod. Approaches New Vaccines Includ. Prev.

226. AIDS: Cenf Cold S^rin® Horbor. N.Y. Se^t 1989, Ookl S*)rm& Harbor <"RY.4- I990.1 -КП1.

227. Toiiioii O. Iiffiimnoiogicäi reaction of Riii Yelley fever virus strain ircin Easi anu

228. TjiSScii P. PfaCiiCc and thcyxy of снА^шс шшшииайаа'у. // Lsbviatviy TtCluutjueS Ш biochemistry and molecular biology, 15, Ed. by R.H. Burdon, P.K. "van Knippenberg. Amsterdam. New "Y ork, Oxford, Elsevir. 1985.

229. Shannon A. Morrissv C. Mackintosh S„ Westburv FL Detection of hoe: cholera virus-c у/ i-гtrv гчктс. n«tio "Pity ?it\iiоi^n-г*a\rt> РТ1ЯЛ //1QQ1 тг 1.4 Л11Т4<2

230. К4л1 1QQ4 47 11 WVvO rt 11111»

231. M Д. UtaAVl. IVt., .1 Vv. . »V ^ . V у.'. X. l^.Vi

232. Wj *. tui V/UOVUV L . ^VilgjVUIlUl UUVWUUUO. YV.ifcJtX UV11UI UVWC^U t U WOVO. II T VI. J.mVJLWAVl.r^o^ "^i*. о jc ъi УОЭ. J\" O, p. Jil-JUJ.

233. Van Oirschot J., Teipstra C. A congeiMtai persistent swin fever infection. I. Clinical and virologicat observations. /7 Veter. Microbiol. 1977. v. 2, № 2, p. 121-142.

234. Vasic B., Kesic Z., Vasic N. Uasiozavaap- vrusa sviiijske kug& a celijkiiii kuiairaiiia Bubrega zamoraca i svinja. //' vet. Gi&snik. 1972. v. 26, № iu, p. 759-744.

235. J /,' T3.11 \XT\A TJliU tf\H£L CI „iiicut j' ciiiu-// i->tui. v* mj, iüüi. wi g. I >> ¡\s. v. ^p.

236. Voller A, Bartliei A, Bidwill D. Enzime-Immunoassays for parasitic diseases. /7 Trans. R. Soctrop. Med. Hyg. 1976. v. 70. p. 98-106.

237. T!1 T\II ntt TT Tl .1 ttl Jl. / in-7/! — O «¿r

238. OQO \X/<iTTT-J—.VTiT OrrvK\r i'vi i«TTTTT rtivrtrrttT Af-TjX^. //

239. W/iifP- tif Art tT\iffXKTtC\t\ \t\ ^ICnACtaKli»

240. Wenswoort G., Boonstra J. and Bodzinga B.G. immunoaffinitv purification and characterization of the envelope protein El of hog holera virus: // Journal of General Virology, 1990, v. 71, p. 531-540,

241. ТЧ'. Л, аа oiTi^ rsa атзтгжт^TTÎ\ î^TV^ITTV/ 'TxTïïr^^'L'^'î тт/л гчыжхзг^кт^ ii U^'r^^îiivi^''

242. J /.V J i » t\>»Vt/MlJLy I iyV 41) ill 1 JM VJMi.lA^J 4V>f 1 IHillj^^ VU t I V.WAMW */у. I 1 ^ , ~ (., ' 411. j'l IV^IV,' ^.1 ^ л-i Cl П t'-!1.ftVIVT1. 1ZOV,. 1. J'«- v, Vip. X ¡ -¿.¿1.

243. ВЫПИСКА из АКТА межведомственных приемочных испытаний опытных серий наборов препаратов, методов и технических средств, разработанных при выполнении НИР по теме «Указание-1.1»,утвержденного 09.12.95 г.

244. Приемочная комиссия в составе:

245. Комиссия считает, что представленные диагностические препараты «Наборов препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней» соответствуют ветеринарно-техническим требованиям и выдержавшими испытания.

246. Предложения. Комиссия предлагает одобрить проведенную НИР и рекомендовать разработанный «Набор препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней» для практического использования.

247. Председатель Комиссии: Ю.А. Третьяков1. Члены Комиссии:

248. H.A. Ярёменко (зам. председателя)1. A. Г. Панкратов

249. B.В. Куриннов В.А. Мищенко Ж.А. Шажко

250. H.A. Перевозчикова Г.М. Карпов Х.Г. Мухаметгалиев1. О.В. Мифтахутдинова

251. Главагробиопром при Госкомиссии СССР

252. Всесоюзный научно-исследовательский институт Ветеринарной вирусологии и микробиологии (ВНИИВВиМ)х УТВЕРЖДАЮ Директор институтапрофессор 1 * 1-1. Ф. Вшцняков1. К ." ( » /'

253. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИММУНОЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ ПРЕПАРАТОВ1. ВИРУСА КЧС1. Покров 1990

254. Главагробиопром при Госкомиссии СССР

255. Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии1. ВНИИВВиМ)

256. Директор института, профессор ' у1. Л>£й. /1. ШГОдаЧШШЕ УКАЗАНИЯ

257. Ш ШМГОТОВДЕЕШ кшцштшюшшных очищенных

258. Технические условия ТУ 9388-0/£ -00495549-99 На опытную партию в количестве 500 наборов Срок введения с « » 199 г Срок действия до « »199 г

259. СОГЛАСОВАНО иректор Всероссийского осударственного научно-иссле-овательского института онтроля стандартизации и ертификации ветеринарных репаратов1. А.Н.Панин1. УДК1. Группа Р311. УТВЕРЖДАЮ

260. Директор Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной вируфлЬгйи и вдикробио-логйкРАСХЙ1999 г1999 г21. РАЗРАБОТЧИКИ:1. Научный сотрудник1. ВНИИВВиМ1. В.М.Лыска «/» 0 / 1999 г

261. Ведущий научный сотрудник ВНИИВВиМ

262. УуП^У- // }/ В.В.Куриннов «7» ¿V 1999 Г

263. Заведующий лабораторией "Диагностики" ВНИИВВиМ1. Й^Вишняков» 1999 г

264. Комиссия г, составе:- . ■. ■ ; ■

265. В период с 26.06.95 по 10.07.95 г. в институте'проведеньгиспытания препаратов::: . для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней.

266. Для комиссионных испытаний представлены экспериментальные образцы "Набора препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме. свиней", изготовленные в ноябре-декабре 1994 г.

267. Оборудование, материалы, реактивы и биоматериалы: микроскоп световой -любого типа; магнитная мешалка; термостат 37°С; холодильник бытовой; ■

268. Прямая иммунопероксидазная реакция для обнаружения антигенов вируса К'ЧС;.

269. Непрямая иммунопероксидазная реакция для обнаружения специфических/ антител к вирусу КЧС; ' \ .

270. При проверке специфичности препаратов и методов исследуемые'материалы были зашифрованы. . .•"•■■'■"'Результаты испытаний

271. Заключение: Представленные экспериментальные образцы "Набора препаратов для иммунопероксидазных реакций при классической чуме свиней" активны, специфичны, соответствуют "Временному наставлению по применению набора