Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Разработка и использование новой пробиотической кормовой добавки на основе функциональной микрофлоры в рецептуре комбикормов для перепелов

ВАК РФ 03.01.06, Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Автореферат диссертации по теме "Разработка и использование новой пробиотической кормовой добавки на основе функциональной микрофлоры в рецептуре комбикормов для перепелов"

На правах рукописи

005059328

ЛЫСЕНКО ЮРИЙ АНДРЕЕВИЧ

РАЗРАБОТКА И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НОВОЙ ПРОБИОТИЧЕСКОИ

КОРМОВОЙ ДОБАВКИ НА ОСНОВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ В РЕЦЕПТУРЕ КОМБИКОРМОВ ДЛЯ ПЕРЕПЕЛОВ

03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1В МАЙ 2013

Ульяновск-2013

005059328

Работа выполнена на кафедре биотехнологии, биохимии и биофизики Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный аграрный университет»

Научный руководитель ПЕТЕНКО АЛЕКСАНДР ИВАНОВИЧ

доктор сельскохозяйственных наук, профессор

Официальные оппоненты: ЛЕБЕДЕВА ИРИНА АНАТОЛЬЕВНА

доктор биологических наук, доцент ГНУ «Уральский научно-исследовательский ветеринарный институт» Россельхозакадемии, отдел экологии и иммунопатологии, старший научный сотрудник

ЕЖКОВА ГАЛИНА ОЛЕГОВНА доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Казанский национальный исследовательский технологический университет», кафедра технологии пищевых производств, института пищевых производств и биотехнологии

Ведущая организация Государственное научное учреждение «Северо-

кавказский научно-исследовательский институт животноводства» Россельхозакадемии

Защита состоится «¿^ 2013 года в « часов на заседании

диссертационного совета Д 220.065.01 при ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина» по адресу: 432017, г.Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1, тел. 8 (8422)44-30-58; e-mail: kormIen@yandex.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина», а с авторефератом в сети Интернет на официальном сайте Министерства образования и науки РФ www.vak.ed.gov.ru

Автореферат разослан «<&£» 2013 года

Ученый секретарь .—.

диссертационного совета ^/¿t * CS'— Пыхтина Лидия Андреевна

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Промышленное птицеводство - одна из ведущих отраслей сельского хозяйства. Важный фактор, обуславливающий индустриализацию отрасли - скороспелость птицы и быстрая окупаемость вложений (И. Голубое, 2011).

Одним из направлений в птицеводстве является перепеловодство, главная задача которого обеспечение населения качественным и экологически безопасным мясом и яйцом, обладающим высокими диетическими свойствами. При нарушении баланса микрофлоры пищеварительного тракта в пользу условно-патогенной, несбалансированном кормлении, неправильном содержании, применении кормовых антибиотиков происходит снижение биоресурсного потенциала птиц, в частности, получаемой от них продукции (Н. Данилевская, В. Субботин и др., 2005; А. Гайдук, Ф. Хазиахметов, 2011).

Развитие биотехнологии привело к появлению кормовых продуктов и биологически активных добавок с новыми свойствами. К их числу относятся пробиотики. Последние при введении в организм ведут себя как своеобразный «биореактор», осуществляющий синтез биологически активных веществ с последующей их «доставкой» к сайтам-мишеням макроорганизма. При их приеме начинают выделяться биологически активные вещества и функционировать системы микробных клеток, оказывающие как прямое действие на патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, так и опосредованное - путем активации специфических и неспецифических систем защиты организма. В этот же период бактериальные клетки пробиотика активно продуцируют ферменты, аминокислоты, антибиотические вещества и другие физиологически активные субстанции, дополняющие комплексное лечебно-профилактическое действие рационов. Результатом является повышение переваримости и использования питательных веществ кормов, а, следовательно, и увеличение прироста живой массы (А. Н. Панин и др., 1996, 2000, 2002, 2007; Б. Бессарабов, 1996, 2006, 2009; Н. И. Малик и др., 2001, 2002; И. Егоров и др., 2002, 2003, 2004, 2005, 2007; А. И. Петенко, 2003; А. Кощаев, А. Петенко, А. Калашников, 2006; А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, 2007; И. А. Лебедева, 2011; Я Пышманцева и др., 2011).

До конца не изученными остаются вопросы определения наиболее эффективных штаммов микроорганизмов или их ассоциаций, рациональных доз и схем применения пробиотиков в промышленном птицеводстве, в частности перепеловодстве, что позволяет более полно раскрыть биоресурсный потенциал птиц. В связи с этим ученым советом ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» утвержден тематический план научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ на 2011-2015 гг. от 20 декабря 2010 г, протокол № 10. Диссертационная работа является разделом научных исследований, в соответствии с темой № 12: «Разработка и научное обоснование способов получения и использования экологически безопасных функциональных кормовых и пищевых концентратов и добавок на основе ресурсосберегающих биотехнологий: высококалорийные концентраты и добавки; микробиологические добавки и биопрепараты» (№ госрегистрации 01201153631).

Цели н задачи исследований. Цель работы — изучение возможности повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы за счет новой пробиотической кормовой добавки в сравнении с рыночным аналогом, как прие-

мов оптимизации процессов пищеварения, морфо-биохимического статуса крови и обмена веществ, обуславливающих высокий уровень сохранности поголовья, проявления мясной и яичной продуктивности, биологической ценности мяса и яиц птицы.

В соответствии с целью были поставлены задачи:

- разработать технологию получения высокоэффективной пробиотической кормовой добавки «Промомикс» на основе сочетанного использования молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов для формирования новых функциональных свойств, обеспечивающих оптимальный уровень реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы;

- оценка реализации биоресурсного потенциала перепелов при использовании разработанной пробиотической добавки «Промомикс» в сравнении с рыночным аналогом «Пробиолакт»;

- изучить влияние используемых пробиотических кормовых добавок на переваримость питательных веществ комбикормов, а также физиологические, биохимические и морфологические показатели перепелов японской породы;

- определить влияние пробиотических кормовых добавок на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника перепелов японской породы;

- установить влияние исследуемых пробиотических кормовых добавок на качество получаемой продукции;

- предложить производству схему использования и дать рекомендации по применению изучаемых пробиотических кормовых добавок при разведении перепелов японской породы.

Научная новизна. Разработана новая пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» (СТО 9291-008-00493209-13) на основе молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов. Государственным управлением ветеринарии по Краснодарскому краю утверждены «Методические рекомендации по применению пробиотической кормовой добавки «Промомикс» в хозяйствах по выращиванию перепелов», протокол № 3 от 29 октября 2012 года.

Впервые оценена возможность использования ассоциации молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов в качестве продуцентов биологически активных субстанций в составе рационов для перепелов. Проведены сравнительные испытания влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника перепелов японской породы. За счет использования пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс», впервые показана возможность повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов по живой массе и яйценоскости на среднюю несушку. Предложена экономически эффективная схема применения пробиотических кормовых добавок «Промомикс» и «Пробиолакт» на перепелах японской породы на основе комплексной оценки мясной и яичной продуктивности, качества получаемой продукции и физиолого-биохимического статуса птицы.

Практическая значимость работы. Результаты изучения эффективности применения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» раскрывают возможности повышения уровня реализации потенциала продуктивности перепелов японской породы, их сохранности, улучшения состава мяса и пищевых качеств яиц:

1. Применение в рационах перепелов до 42-х дней пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» обуславливает повышение прироста живой массы птицы на 5,02-6,32 и 5,24-5,67 %; сохранности поголовья на 2,7-4,0 и 2,03,4 %; снижение расхода кормов на килограмм прироста живой массы на 2,2-3,4 и 3,4-3,7%. Повышается выход потрошенной тушки птицы на 11,35-14,78 и 10,4814,16 %, а также содержание аминокислот в мясе перепелов по изолейцину на 19,47 и 16,74 %, метионину - 28,69 и 25,88 % и фенилаланину - 15,54 и 14,60 %.

2. Использование пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» в рационах перепелок-несушек способствуют сокращению срока начало яйцекладки на 4 и 3 дня; повышению сохранности, в среднем, на 9,0 % и яйценоскости на среднюю несушку на 18,39 и 12,24 %. Птица реализует не только биологические ресурсы яичной продуктивности, но и производит яйца с лучшими товарными и биохимическими показателями, так масса яиц больше на 5,35 и 7,48 %, количество витамина В2 в желтке на 10,33 и 9,24 %, уровень каротиноидов на 11,43 и 9,01 %.

3. Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» при выращивании перепелов японской породы позволяет повысить прибыль на 13,51 и 20,54%.

Результаты исследования эффективности применения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» могут быть использованы в хозяйствах по разведению данной птицы для повышения её сохранности, продуктивности и получения высококачественной мясной и яичной продукции.

Основные положения выносимые на защиту:

- новые элементы технологии получения пробиотической кормовой добавки «Промомикс» для повышения уровня реализации потенциала продуктивности перепелов японской породы, их сохранности, улучшения состава мяса и пищевых качеств яиц позволяют получить кормовой продукт, дающий хороший биологический и экономический эффект в составе стандартных рационов для перепелов;

- применение в составе комбикормов для перепелов новой пробиотической кормовой добавки «Промомикс» способствует повышению живой массы птицы, яйценоскости на среднюю несушку, сохранности поголовья, снижению расхода кормов на килограмм прироста живой массы и 10 яиц;

- использование в рационе перепелов разработанной пробиотической кормовой добавки «Промомикс» способствует активизации обменных процессов за счет позитивного влияния на динамику морфологических и биохимических показателей крови птиц;

- добавление в комбикорм перепелов изучаемых пробиотических добавок повышает в желудочно-кишечном тракте птиц содержание полезной микрофлоры и снижает условно-патогенной;

- в результате использования пробиотиков повышается биологическая полноценность мяса перепелов, а также улучшаются товарные и биохимические показатели яиц птиц.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы докладывались на: Ежегодных научных конференциях (Краснодар, КубГАУ, 2010-2012) Міжнародної научково-практичноі конференції «Зоотехнічна наука: історія, проблеми, перспек-

тиви» (Камянець-Подшьський, 2011); Юбилейной научно-практической конференции, посвященная 50-ти летаю факультета ветеринарной медицины АГАУ, 100-летию со дня рождения д.б.н., профессора И.С. Ржанициной (Барнаул, 2012); Международной студенческой конференции «Знание молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны» (Санкт-Петербург, 2012).

Публикации. По теме проведенных исследований опубликовано 7 научных статей, в том числе 4 в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ (Журналы: «Птицеводство» - 1, «Ветеринария Кубани» - 2, «Труды КубГАУ» - 1).

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, выводов, предложений производству, списка литературы и приложения. Содержание работы изложено на 126 страницах машинописного текста, включая 5 приложении, содержит 27 таблиц и 5 рисунков. Библиографический список состоит из 237 источников, в том числе 29 иностранных авторов.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа проводилась с 2009 по 2012 год на кафедре биотехнологии, биохимии и биофизики факультета перерабатывающих технологий, в виварии факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета, в Кропоткинской краевой ветеринарной лаборатории, в фермерском хозяйстве республики Адыгея.

Объектом исследований являлись две пробиотические кормовые добавки:

1. «Пробиолакг» (ТУ 9291-001-64038840-2010) - сухая пробиотическая кормовая добавка, представляющая собой смесь молочнокислых и симбиотических бифи-добактерий. Количество КОЕ/г - 2,5 х 109. Производитель ООО НПО «Биотехнологии Кавказа», Краснодарский край. В перепеловодстве до наших исследований данная добавка не применялась.

2. Новая пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» (СТО 9291-00800493209-13) - представляет собой жидкую смесь молочнокислых и пропионово-кислых микроорганизмов, выращенных на молочно-растительной среде. Препарат является разработкой кафедры биотехнологии, биохимии и биофизики КубГАУ и производится в содружестве с ОНО «Экспериментальная биофабрика» г. Углич. Подана заявка на изобретение.

Исследования проводились на перепелах японской породы (Coturnix japónica) яичного направления. Всего в опытах было использовано 1500 перепелов.

В ходе исследований было проведено 2 научных эксперимента и производственное испытание.

За основу нами была взята технология содержания перепелов, представленная в работах С. Зиброва (С. Зиброва, 2010, 2011). С первых суток до 42-х дней самок и самцов содержали вместе, а в 42-х дневном возрасте нами формировались производственные группы и переводились в клетки по 40 голов (из них 34 самки) для получения яиц. Выбракованных перепелов отправляли на убой для получения тушек и дальнейшей реализации.

Целью первого научного опыта было определение влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на рост, развитие и мясную про-

дуктивность перепелов японской породы до формирования производственных групп самок на яйцекладку. Продолжительность опыта составила 42 дня. Опыт проводили в виварии факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета.

Для проведения опыта нами было сформировано по принципу групп-аналогов три группы перепелов по 50 голов: I группа - контрольная, которую кормили стандартным комбикормом, рекомендованным ВНИТИП; II опытная группа - с кормом задавали пробиотическую кормовую добавку «Пробиолакт» в дозе 0,2 % на массу корма; III опытная группа - в комбикорм добавляли новую пробиотическую кормовую добавку «Промомикс» в дозе 0,2 % на массу корма (таблице 1).

1. Схема первого научного опыта

Группы Количество голов Условия кормления

1-контроль Н-опытная Ш-опытная 50 50 50 ОР — основной рацион (полнорационный комбикорм - ПК) ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК)

Перепелов содержали в деревянных пятиярусных клетках собственной конструкции. Технологические параметры содержания - температура, влажность воздуха, освещенность - выдерживались в соответствии с нормами ВНИТИП.

Кормление перепелов в опытные периоды осуществлялось комбикормом, сбалансированным по основным питательным и биологически активным веществам в соответствии с возрастными нормами ВНИТИП. Другие условия кормления и содержания в контрольной и опытных группах были одинаковыми.

В ходе проведения первого научного эксперимента учитывались следующие показатели: динамика живой массы, сохранность, прирост живой массы, потребление кормов, переваримость и баланс питательных веществ, показатели мясной продуктивности в 42-х дневном возрасте, морфологические и биохимические показатели крови, микробиологические показатели кишечника.

Второй научный опыт проведен в хозяйстве республики Адыгея и состоял из двух этапов: 1-й этап - подтверждение результатов влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на рост, развитие и мясную продуктивность перепелов японской породы до 42-х дней и 2-ой этап — определение влияния исследуемых пробиотических кормовых добавок на яичную продуктивность перепелов японской породы после формирования производственных групп.

Перепела содержались в специально сконструированных производственных шестиярусных клетках. Поение осуществлялось из ниппельных поилок, к которым птица имела постоянный доступ. Раздачу кормов производили вручную. Технологические параметры — температура, влажность воздуха, освещенность -выдерживались в соответствии с нормами ВНИТИП. Кормление осуществляли по общей схеме. Условия содержания перепелов контрольной и опытных групп были одинаковыми.

Опыт проводили методом групп-аналогов по 150 голов в каждой (таблица 2).

Схема первого этапа соответствовала схеме первого научного эксперимента.

В 42-х дневном возрасте для учета яичной продуктивности, формировали производственные группы по 40 голов в каждой (34 самки и 6 самцов). Выбракованную птицу отправляли на убой для получения тушек.

2. Схема второго научного опыта

Группы Количество голов Условия кормления

до 42-х дневного возраста

1-контроль Н-опытная Ш-опытная 150 150 150 ОР — основной рацион (полнорационный комбикорм - ПК) ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК)

после 42-х дневного возраста

1-контроль П-опытная Ш-опытная 40 40 40 ОР — основной рацион (полнорационный комбикорм - ПК) ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК)

В ходе второго научного опыта учитывали следующие показатели: динамику живой массы, сохранность, прирост живой массы, потребление кормов, показатели мясной продуктивности выбракованной птицы в 42-х дневном возрасте, возраст птицы на начало яйцекладки, интенсивность яйцекладки, качественные характеристики яйца, затраты кормов в период интенсивной яйцекладки, морфологические и биохимические показатели крови перепелок-несушек.

Производственную апробацию пробиотических кормовых добавок «Пробио-лакт» и «Промомикс» проводили на 900 перепелах японской породы в хозяйстве республики Адыгея.

Схема производственных испытаний исследуемых пробиотических кормовых добавок представлена в таблице 3.

3. Схема производственных испытаний пробиотических кормовых добавок

Группы Количество голов Условия кормления

до 42-х дневного возраста

1-контроль Н-опытная Ш-опытная 300 300 300 ОР — основной рацион (полнорационный комбикорм - ПК) ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК)

после 42-х дневного возраста

1-контроль И-опытная Ш-опытная 120 120 120 ОР — основной рацион (полнорационный комбикорм - ПК) ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК)

В процессе проведения производственных испытаний учитывали следующие показатели: динамику живой массы, сохранность, потребление кормов, прирост живой массы до 42-х дневного возраста, возраст птицы на начало яйцекладки, интенсивность яйцекладки, затраты кормов в период интенсивной яйцекладки, экономическую эффективность применяемых пробиотических кормовых добавок в условиях производства.

Определение учитываемых показателей в научных опытах и производственном

испытании проводили согласно действующим методикам и нормативным документам.

Для определения морфологических и биохимических показателей крови и ее сыворотки от 10 голов в каждой группе в возрасте 42-х и 154-х дней при контрольном убое брали кровь в специальные пробирки с антикоагулянтом.

Определение морфологических показателей крови перепелов проводили на анализаторе Medonic СА 620. Лейкоформулу подсчитывали в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза (А. А. Кудрявцев, JI. А. Кудрявцева, 1973).

Определение биохимических показателей сыворотки крови проводили на полуавтоматическом анализаторе Stat fax 1904 Plus и спектрофотометре Unico 2800 UK/VIS.

Для оценки качества яиц изучали содержание в них витаминов (А, В2) и кароти-ноидов (Ю. 3. Буртов, ¡990). Отбор проб осуществляли 3 раза в период интенсивной яйцекладки птицы, через каждые четыре недели, по 10 яиц (U1.А. Имангулов, 2004). Исследование витамина А проводили на жидкостном хромотографе Wathers HPLC, витамина В2 на флюорате 02-2 М (фирмы Люмекс), каротиноидов на фотометре КФК-3-01-«30M3».

Качественные показатели мяса определяли общепринятыми методами: отбор проб мяса осуществляли по ГОСТ 9792-73, определение влаги - ГОСТ 9793-74, жира - ГОСТ 23042-78, белка - ГОСТ 25011-81. Энергетическую ценность мышц определяли по методике, рекомендованной ВНИТИП.

Содержание аминокислот белка мышц перепелов определяли методом капиллярного электрофореза на приборе Капель -103 РТ.

Для определения переваримости питательных веществ комбикорма был проведён физиологический (балансовый) опыт на перепелах в период с 37 по 42 сутки (Ш. А. Имангулов, 2004).

Химический анализ кормов и выделений проводили по ГОСТ и согласно «Методы исследования кормов, органов и тканей животных» (П. Т. Лебедев, А. Т. Усович, 1965).

Определение количественного и качественного состава микрофлоры кишечника перепелов сравниваемых групп проведены сразу после контрольного убоя перепелов в возрасте 42-х дней. При отборе проб, посеве и определении состава микрофлоры кишечника пользовались методическими рекомендациями по выделению и идентификации бактерий желудочно-кишечного тракта животных (Методические рекомендации, 2004).

В ходе опытов по определению зоотехнических и хозяйственных показателей руководствовались методическими рекомендациями ВНИТИП «Проведение научных и производственных исследований по кормлению сельскохозяйственной птицы» (Ш.А. Имангулов, 2004) и справочным пособием «Инкубация яиц» (ЮЗ. Буртов, 1990).

Расчет экономической эффективности использования пробиотических кормовых добавок в рационах перепелов японской породы проводили с учетом стоимости расхода кормов и добавок на 1 кг прироста живой массы и на 10 яиц.

Все результаты исследований обрабатывали биометрическими методами математической статистики (Б.А. Доспехов, 1980). Статистически достоверными считали различия при Р < 0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 ОСНОВНЫЕ АСПЕКТЫ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ И ОЦЕНКИ СОСТАВА ИЗУЧАЕМЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК

Как указывалось выше, объектом исследований являлись две пробиотические кормовые добавки:

1. «Пробиолакг» (ТУ 9291-001-64038840-2010) - сухая пробиотическая кормовая добавка, производится ООО НПО «Биотехнологии Кавказа», Краснодарский край. Представляет собой концентрат четырех штаммов молочнокислых бактерий и трех штаммов симбиотических бифидобактерий: Lactococcus lactis subsp. lactis, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei и симбиотические бифидоактерии Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium adolescentis. Концентрация КОЕ/г-2,5* Ю9.

По внешнему виду ПК «Пробиолакт» представляет собой сухой порошок от светло-кремового до кремового цвета с чистым кисломолочным вкусом и запахом, полученный методом глубинного культивирования в биоферментаторах с последующей сублимационной сушкой нативной формы препарата в защитной среде.

2. Новая пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» (СТО 9291-00800493209-13) является разработкой кафедры биотехнологии, биохимии и биофизики КубГАУ и производится в содружестве с ОНО «Экспериментальная биофабрика» г. Углич. Включает в себя ассоциацию следующих видов бактерии: в качестве Lactobacillus acidophilus используют штаммы Lactobacillus acidophilus РКМБ - 6А и РКМБ - 9А, в качестве Lactobacillus plantarum - штаммы Lactobacillus plantarum РКМБ - 2ПЛ и РКМБ - 1ПЛ, в качестве бактерий вида Propionibacterium shermanii используют штаммы Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii РКМБ - 8П и РКМБ - 6П, в качестве Lactococcus lactis - штаммы Lactococcus lactis subsp. lactis РКМБ -Ml 99 к РКМБ - 90C.

Пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» включает в себя микроорганизмы, способные развиваться в желудочно-кишечном тракте птицы, оказывая положительное влияние на организм хозяина. Так, молочнокислые микроорганизмы Lactococcus lactis, Lactobacillus plantarum и бактерии вида Lactobacillus acidophilus, попадая в организм хозяина, нормализуют микрофлору желудочно-кишечного тракта, выделяют биогенные органические кислоты (и в первую очередь молочную), ин-гибируя рост и развитие патогенной микрофлоры. Propionibacterium применяются в качестве продуцента пропионовой кислоты, которая подавляет рост условно-патогенных микроорганизмов, а также являются активными продуцентами витаминов группы В (В 12, В2, пантотеновая и никотиновые кислоты).

Все указанные в добавке штаммовые культуры входят в Российскую коллекцию молочнокислых микроорганизмов ГНУ «Всероссийский НИИ маслоделия и сыроделия», включенной Постановлением Правительства РФ от 24.06.1996 г. № 725-47 в «Перечень коллекций, депонирующих для государственных нужд микроорганизмы, культивируемые клетки растений и соматические клетки позвоночных». Культуры выделены из естественных или производственных источников без применения генных модификаций, идентифицированы и паспортизованы в установленном порядке.

Входящие в состав микрофлоры культуры традиционно применяются при производстве ферментированных молочных продуктов в России и за рубежом и включены в перечень микроорганизмов с документально подтвержденной историей безопасного использования в пищевых продуктах (Бюллетень Международной Молочной Федерации № 377/2002) и согласно классификации микроорганизмов, приведенной в Санитарных правилах СП 1.2.731-99, относятся к микроорганизмам не патогенным для человека.

Готовая добавка имеет титр не менее 1 млрд. КОЕ/мл и представляет собой жидкую светло-зеленого цвета смесь с кисломолочным запахом.

Для получения жидкой пробиотической добавки «Промомикс» использовали лиофилизированный бактериальный концентрат с содержанием лактобацилл не менее 50 млрд. КОЕ/г, пропионовокислых бактерий не менее 10 млрд. КОЕ/г и лакто-кокков не менее 100 млрд. КОЕ/г, производимый ОНО «Экспериментальная биофабрика» г. Углич. Для культивирования микроорганизмов использовали питательные среды на основе сыворотки из цельного молока, а также варианты сред с обогащением экстрактом томатного сока, в качестве стимулятора роста молочнокислой и пропионовокислой флоры.

Технологический процесс получения пробиотической добавки «Промомикс» включает три этапа:

- получение лабораторной культуры. В стерильных условиях образец лиофи-лизированного бактериального концентрата вносили в питательную среду объёмом 1 л на основе молочной сыворотки, обогащенной экстрактом томатного сока. Культивирование осуществляли в течении 18 ч при температуре 34 °С в термостате;

- получение маточной (засевной) культуры. 5 % лабораторной закваски (культуры) в стерильных боксах засевали в питательную среду того же состава. Культивирование осуществляли в течении 18 ч при температуре 34 °С в термостате;

- далее маточную культуру в количестве 5 % к рабочему объему ферментера переносили в аппарат. Культивирование осуществляли в питательной среде на основе молочной сыворотки в течении 24 ч при периодическом перемешивании (2030 об/мин), при температуре 34 °С, рН = 7,0-7,2, которую поддерживали в течении всего времени культивирования, путем подщелачивания Ю-% раствором КОН. Процесс проводили без аэрации. Каждые 6 часов отбирали пробу на биохимические и микробиологические анализы. После достижения через сутки титра 109 КОЕ/мл, асептически биомассу переносили в предварительно простерилизованные ёмкости.

3.2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК В КОРМОСМЕСЯХ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ МЕТАБОЛИЗМА И ПОВЫШЕНИЯ МЯСНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ ПЕРЕПЕЛОВ

Согласно методике исследований, представленной в разделе 2, при определении влияния пробиотических кормовых добавок на рост, развитие и мясную продуктивность перепелов японской породы, был проведён первый научный опыт, а подтверждением ему по некоторым хозяйственным показателям стал первый этап второго научного эксперимента.

3.2.1 РОСТ И РАЗВИТИЕ ПЕРЕПЕЛОВ

Результаты первого научного опыта по основным зоотехническим показателям перепелов представлены в таблиие 4.

4. Сохранность, динамика живой массы и расход комбикормов перепелами в первом научном опыте, п = 50

Показатели Группы

[-контроль Н-опытная Ш-опытная

Сохранность за период выращивания, % 92 96 94

Динамика живой массы, г

Суточные 7,32±0,10 7,34±0,10 7,35±0,13

7 дней 23,40±0,58 22,39±0,69 23,91±0,44

14 дней 40,74±1,42 45,37±1,91 43,62±1,18

21 день 73,93±1,15 83,50±1,33* 83,30±1,55*

28 дней 100,06±0,32 108,77±1,13* 107,20±0,59*

35 дней 130,32±3,04 138,71±3,41 135,64±2,99

42 день 147,31±2,22 15б,18±3,04 155,28±3,18

Прирост живой массы перепелов за период выращивания (0-42 дня)

Одной головы в среднем, г 139,99 148,84 147,93

Среднесуточный, г 3,33 3,54 3,52

Расход комбикорма за период выращивания (0-42 дня)

На 1 голову, г 598,56 615,54 608,86

На 1 кг прироста, кг 4,28 4,13 4,12

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Данные таблицы 4 показывают, что в первую неделю жизни интенсивность прироста живой массы перепелов была высокой и увеличилась за данный период почти в 3 раза. Однако, в разрезе групп этот показатель не имел существенных различий. К четырнадцатому дню живая масса перепелов в опытных группах превысила этот показатель к контрольной на 11,36 и 7,07 %. В 21-м дневном возрасте живая масса перепелов во II и III группах составила 83,50 и 83,30 г, что больше, чем в контрольной на 12,94 и 12,67 % (Р < 0,05).3атем интенсивность роста у перепелов опытных групп стала незначительно снижаться, но разница по сравнению к контрольной сохранилась. Так, в 28-ми дневном возрасте живая масса перепелов во II и III группах составила 108,77 и 107,20 г, что больше, чем в I группе на 8,70 и 7,13 % (Р < 0,05). В 35-ти дневном возрасте живая масса перепелов II группы составила 138,71 г, III - 135,64 г, что больше по сравнению с контролем на 6,44 и 4,08 %. К 42-х дневному возрасту живая масса перепелов во II и III группах достигла 156,18 и 155,28 г, что больше, чем в I группе на 6,02 и 5,35 %.

Следует отметить, несмотря на то, что потребление кормов перепелами II и III групп было больше, чем в контрольной, их затраты на прирост живой массы были меньше на 3,5 и 3,7 %.

В целом за период выращивания перепелов японской породы (0-42 дня) в первом научном опыте прирост живой массы птицы II и III групп составил 148,84 и 147,93 г, что больше по сравнению с I группой на 6,32 и 5,67 %.

Сохранность перепелов II и III групп составила 96 и 94 %, против 92 % в I группе.

Данные второго научного опыта до 42-х дней по основным зоотехническим показателям перепелов представлены в таблиие 5.

5. Сохранность, динамика живой массы и расход комбикормов перепелами до 42-х дневного возраста во втором научном опыте, п = 150

Показатели Группы

1-контроль Н-опытная Ш-опытная

Сохранность за период выращивания, % 94,6 97,3 98,0

Динамика живой массы, г

Суточные 7 дней 14 дней 21 день 28 дней 35 дней 42 день 7,49±0,14 23,62±0,42 49,97±1,67 81,32±1,77 106,17±2,01 130,78±2,09 152,79±3,01 7,63±0,15 24,90±0,57 53,75±1,33 85,03±1,51 118,47±1,77* 142,86±1,72* 160,23±3,13 7,46±0,09 25,95±0,63 51,17±1,79 83,95±1,45 117,46± 1,51 * 141,75±1,53* 160,38±2,71

Прирост живой массы перепелов за период выращивания (0-42 дня)

Одной головы в среднем, г Среднесуточный, г 145,30 3,46 152,60 3,63 152,92 3,64

Затраты комбикорма за период выращивания(0-42 дня)

На 1 голову, г На 1 кг прироста, кг 603,45 4,15 620,33 4,06 614,72 4,01

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Из данных таблицы 5 видно, что во втором научном опыте, как и в первом, прирост живой массы перепелов за период выращивания (0-42 дня) в опытных группах был больше по сравнению к контрольной. Так у перепелов II группы прирост живой массы составил 152,60 г (среднесуточный - 3,63 г), в III - 152,92 г (среднесуточный -3,64 г) против 145,30 г (среднесуточный - 3,46 г) в контрольной группе.

Затраты комбикормов на 1 кг прироста у перепелов II и III групп составили 4,06 и 4,01 кг, что меньше по сравнению с контрольной на 2,17 и 3,37 %. Сохранность за период выращивания (0-42 дня) составила у перепелов II группы 97,3 %, III — 98,0 % против 94,6 % в контрольной.

3.2.2 МЯСНАЯ ПРОДУКТИВНОСТЬ, РАЗВИТИЕ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ И КАЧЕСТВО МЯСА ПЕРЕПЕЛОВ

Результаты контрольного убоя птицы первого научного опыта, представленные в таблице 6, убеждают, что средняя масса потрошеной тушки перепелов II и III групп больше по сравнению с контрольной на 11,35 и 10,48 % (Р < 0,05). В целом, средняя масса всех мышц у перепелов II и III групп составила 61,41 и 61,76 г, что на 22,38 и 23,08 % больше по сравнению к контрольной (Р < 0,05). Достоверных различий по массе внутренних органов у перепелов в группах не выявлено.

Аналогичная тенденция наблюдалась по изучаемым показателям при анатомической разделке тушек перепелов во втором научном опыте, результаты контрольного убоя которого представлены в таблице 7.

6. Мясная продуктивность и развитие внутренних органов перепелов в первом научном опыте, п = 6

Показатели Группы

1-контроль Ш-опытная Ш-опытная

Живая масса птицы перед убоем, г 150,62*3,27 160,12±3,55 157,27*3,69

Масса потрошеной тушки, г 104,30*1,64 116,14*1,81* 115,23*1,69*

Масса бедренных мышц, г 10,62*0,31 13,97*0,45* 14,22*0,61*

Мышцы голени, г 7,12*0,12 8,51*0,29* 8,21*0,23*

Масса грудных мышц, г 27,44±0,52 32,25±0,51* 32,93*0,63*

Остальные мышцы, г 5,00±0,14 6,68*0,20* 6,40*0,22*

Всего мышц, г 50,18±1,15 61,41±1,30* 61,76*1,16*

Печень, г 3,73*0,09 3,76*0,11 3,75*0,12

Сердце, г 1,91*0,08 1,94*0,07 1,92*0,05

Мышечный желудок, г 2,99*0,10 3,22*0,09 3,10*0,13

Кишечник, г 5,32*0,16 5,69*0,17 5,42*0,21

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

7. Мясная продуктивность и развитие внутренних органов перепелов на 42-е сутки во втором научном опыте, п = 6

Показатели Группы

1-контроль Н-опытная Ш-опытная

Живая масса гггицы перед убоем, г 152,93*3,41 163,54*3,15 163,32*3,23

Масса потрошеной тушки, г 110,32*2,11 125,10*2,43* 124,48*2,09*

Масса бедренных мышц, г 11,33*0,29 13,02*0,33 12,54*0,37

Мышцы голени, г 7,32*0,11 8,85*0,22* 8,74*0,31*

Масса грудных мышц, г 28,75*0,57 33,27*0,84* 34,15*0,92*

Остальные мышцы, г 5,73*0,13 7,22*0,16* 7,47*0,09*

Всего мышц, г 53,13*1,11 62,36*1,03* 62,90*1,18*

Печень, г 3,42*0,14 3,51*0,12 3,44*0,13

Сердце, г 1,45*0,05 1,44*0,05 1,49*0,06

Мышечный желудок, г 2,59*0,09 3,01*0,10 2,99*0,08

Кишечник, г 5,30*0,11 5,46*0,15 5,52*0,12

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Из данных таблицы 7 видно, что средняя масса потрошеной тушки перепелов II и III групп составила 125,10 и 124,48 г, что больше этого показателя в I группе на 14,78 и 14,16 г (Р < 0,05). Масса всех мышц у перепелов II и III групп составила, 62,36 и 62,90 г, что на 9,23 и 9,77 г больше по сравнению с контрольной (Р < 0,05). Достоверных различий по массе внутренних органов у перепелов не выявлено.

Результаты исследований основных показателей химического и аминокислотного состава мяса перепелов представлены в таблице 8 и 9.

Из таблицы 8 видно, что наблюдается тенденция к возрастанию количества белка в мясе перепелов II и III групп в первом научном опыте на 0,24 и 0,21 %, а во втором опыте - 0,32 и 0,56 % и уменьшению количества жира в мышцах перепелов в первом научном опыте на 0,01 и 0,05 %, а во втором опыте - 0,10 и 0,07 %.

Показатели Группы

1-контроль I И-опытная Ш-опытная

Первый научный опыт

Влага Белок Жир Зола Энергии в 1 кг мышц, кДж 76,13±2,23 20,25±0,73 3,13±0,11 0,48±0,02 6074,88 75,89±2,01 20,49±0,71 3,12±0,10 0,50±0,02 6128,17 75,93±2,13 20,46±0,83 3,08±0,09 0,53±0,01 6105,14

Второй научный опыт

Влага Белок Жир Зола Энергии в 1 кг мышц, кДж 75,52±2,45 20,37±0,71 3,32±0,13 0,79±0,03 6178,98 75,68±2,27 20,69±0,65 3,22±0,09 0,41 ±0,01 6215,61 75,19±2,36 20,93±0,62 3,25±0,07 0,63±0,02 6284,80

9. Аминокислотный состав мяса перепелов, мг/г

Показатели Группы

1-контроль Н-опытная Ш-опытная

Валин Изолейцин Лейцин Лизин Метионин + цистин Треонин Фенилаланин + тирозин Триптофан Сумма незаменимых аминокислот 60,45±2,17 40,62±1,12 85,57±2,43 67,76±2,75 32,28±0,83 42,68±1,34 56,90±1,25 20,18±0,61 406,44 62,13±2,01 48,53±1,01* 86,17±2,31 68Д1±2,56 41,54±1,14* 43,18±1,61 65,74±1,13* 22,13±0,72 434,63 61,79±2,11 47,42±0,92* 87,37±2,47 68,83±2,81 40,63±1,03* 42,82±1,42 65,19±1,09* 21,54±0,78 432,69

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Данные таблицы 9 показывают, что в мясе перепелов II и III групп достоверно повышается по сравнению с I группой содержание изолейцина на 19,47 и 16,74 %, метионина - 28,69 и 25,88 % и фенилапанина - 15,54 и 14,60 % (Р < 0,05). Общее содержание незаменимых аминокислот в мясе перепелов опытных групп больше, чем в контроле в среднем на 6,7 %.

Дегустационная оценка грудных, бедренных мышц перепелов и бульона из них в опытных группах была высокой. Во всех изучаемых группах мясо имело приятный аромат и вкус, характеризовалось средней жесткостью, и было достаточно сочным. Посторонних запахов или привкусов, которые могли бы придать мясу и бульону изучаемые пробиотические кормовые добавки, не установлено.

3.23 ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПЕРЕПЕЛОВ

Для определения влияния пробиотических кормовых добавок на морфологические и биохимические показатели была взята кровь перепелов в возрасте 42-х дней. Результаты её исследований, представленные в таблице 10 и 11, убеждают что достоверных различий между группами перепелов по морфологическим показателям не наблюдалось. Однако, содержание гемоглобина у перепелов во II

группе на 4,70 %, а в III на 6,23 % больше по сравнению с контрольной. Количество тромбоцитов было больше у перепелов опытных групп, чем в контрольной на 4,07 и 3,37 %.

10. Морфологические показатели крови перепелов, п = 10

Показатели Группы Норма (Кудрявцев АА, 1977)

1-контроль И-опытная Ш-опытная Колебания Среднее

Эритроциты, 10'^/л 3,39±0,07 3,49±0,08 3,51±0,10 3,2-4,4 3,8

Гемоглобин, г/л 129,13±4,68 135,19±3,17 137,18±4,32 128-157 143

Тромбоциты, 10% 123,18±3,51 128,20*3,64 127,34±4,01 _ 130

Лейкоциты, 109/л 23,30±0,72 22,40±0.6 23,03±0,70 16,0-29,9 23.1

Лейкоцитарная формула, %

Базофилы 0,25±0,01 0,22±0,01 0,28±0,01 0-0,4 0,2

Эозинофилы 3,73±0,09 3,91±0,07 3,94±0,11 3,5-5,1 4,3

Псевдоэозинофилы 18,30±0,52 18,71±0,64 18,45±0,61 18,1-24,6 21,8

Лимфоциты 75,70±1,84 75,23±1,61 75,15±1,74 65,0-94,6 71,6

Моноциты 2,02±0,07 1,93±0,06 2,18±0,08 1,8-2,5 2,1

Следует отметить, что количество эритроцитов у перепелов II и III групп больше этого показателя в I группе на 2,95 и 3,53 %, а лейкоцитов меньше на 3,87 и 1,29 %. Это свидетельствует о благоприятном протекании обменных процессов и отсутствии воспалительных реакций в организме. Анализ лейкоцитарной формулы показывает, что существенных различий между группами по относительному количеству базофилов, эозинофилов, псевдоэозинофилов, лимфоцитов и моноцитов не выявлено. Они находились в пределах физиологических норм.

Как видно из данных таблицы 11, уровень холестерина в сыворотке перепелов II и III групп меньше, чем у контрольных на 7,84 и 7,11 % (Р < 0,05). У них наблюдалось и достоверное повышение (Р < 0,05) количества фосфора на 0,20 и 0,67 ммоль/л и кальция на 0,72 и 0,62 ммоль/л.

11. Биохимические показатели сыворотки крови перепелов, п = 10

Показатели Группы

1-контроль П-опытная Ш-опытная

Общий белок, г/л 31,10±1,03 35,10±1,35 32,70±1,17

Апьбумины, г/л 13,43±0,33 15,87±0,78 14,63±0,47

Глобулины, г/л 17,67±0,27 19,23±0,39 18,07±0,40

- а, г/л 2,82±0,03 2,94±0,01 2,64±0,01

- Р, г/л 5,73±0,13 6,01±0,14 6,02±0,11

- у, г/л 9,12±0,31 10,28±0,37 9,41 ±0,2 6

А/Г коэффициент 0,76±0,03 0,83±0,01* 0,81±0,01*

Холестерин, ммоль/л 4,08±0,05 3,76±0,05* 3,79±0,04*

Мочевая кислота, ммоль/л 175,21±3,76 163,31±4,50 163,24±4,20

ACT, Ед/л 376,71±7,91 451,53±8,63* 438,04±6,72*

АЛТ, Ед/л 28,13±1,04 32,21±1,17* 33,72±1,13*

Фосфор, ммоль/л 2,20±0,04 2,50±0,03* 2,87±0,05*

Кальций, ммоль/л 2,56±0,03 3,28±0,05* 3,18±0,04*

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Уровень ферментов АСТ у перепелов II и III групп больше, чем в контрольной на 74,82 и 61,33 Ед/л, а АЛТ на 4,10 и 5,59 Ед/л (Р < 0,05). Белковый индекс в сыворотке крови перепелов II и III групп был достоверно больше по сравнению с контролем на 9,21 и 6,58 % (Р < 0,05). Это говорит о более интенсивном протекании процессов биосинтеза белка и белкового обмена. Достоверной разницы по содержанию мочевой кислоты, общего белка и белковых фракций в группах не наблюдалось.

3.2.4 ПЕРЕВАРИМОСТЬ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ ПЕРЕПЕЛАМИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК

Данные о влиянии пробиотиков «Пробиолакт» и «Промомикс» на переваримость перепелами питательных веществ комбикорма представлены в таблице 12.

12. Переваримость питательных веществ комбикорма, %

Питательные вещества Группы

1-контроль Ii-опытная Iii-опытная

Сухое вещество 57,72±1,81 60,71±1,74 62,62±1,92

Органическое вещество 58,29±1,75 61,24±1,99 63,41 ±2,03

Сырой протеин 51,62±1,95 55,30±1,93 56,84±1,83

Сырой жир 80,31±3,65 82,71±3,61 82,10±3,56

Сырая клетчатка 35,13±1,13 42,30±2,01* 42,70±2,04*

БЭВ 39,64±0,98 54,20±1,56* 60,20±1,82*

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Перепела II и III групп переваривали питательные вещества комбикорма лучше, чем контрольные - сухое вещество на 2,99 и 4,9 %, органическое вещество на 2,95 и 5,12 %, протеин на 3,68 и 5,22 %, жир на 2,40 и 1,79 %, клетчатку на 7,17 и 7,57 % и безазотистые экстрактивные вещества (БЭВ) на 14,56 и 20,56 % (Р < 0,05). Это обусловлено тем, что включение в рацион перепелов пробиотических кормовых добавок способствовало подкислению среды пищеварительного тракта за счет образующихся органических кислот (молочной, пропионовой), а синтезирующийся пропионокислыми бактериями «Промомикса» витамин В12 способствует усилению обмена серосодержащих аминокислот, что обеспечивало более интенсивное переваривание компонентов корма.

Обмен кальция и фосфора. Влияние исследуемых пробиотических кормовых добавок на баланс и использование минеральных веществ перепелами представлены в таблице 13.

13. Среднесуточный баланс и использование макроэлементов перепелами

Показатели Группы

1-контроль | Ii-опытная I Ш-опытная

Кальций

Принято с кормом, г Выделено в помёте, г Удержано в теле, г % от принятого 0,0990±0,0034 0,0608±0,0021 0,0382±0,0018 38,60±1,01 0,1041 ±0,0031 0,0550±0,0023 0,0491 ±0,0023* 47,20±1,87* 0,1030±0,0041 0,0532±0,0026 0,0498±0,0023* 48,40±1,96*

Фосфор

Принято с кормом, г Выделено в помёте, г Удержано в теле, г % от принятого 0,1030±0,0029 0,0760±0,0035 0,0270±0,0012 26,20±1,01 0,1042±0,0037 0,0668±0,0031 0,0374±0,0017* 35,90±1,24* 0,1060±0,0042 0,0665±0,0032 0,0395±0,0018* 37,30±1,31*

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Из данных таблицы 13 видно, что коэффициент использования минеральных веществ перепелами опытных групп был достоверно больше, чем в контрольной. Так, для кальция он составил у перепелов II группы 47,20 %, а в III - 48,40 % против 38,60 % к контрольной. Использование фосфора перепелами II и III групп — 35,90 и 37,30 %, в то время как в контроле 26,20 % (Р < 0,05).

3.2.5 МИКРОБИОЦЕНОЗ КИШЕЧНИКА У ПЕРЕПЕЛОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК

Во время контрольного убоя в возрасте 42-х дней, было проведено микробиологическое исследование химуса кишечника перепелов контрольной и опытных групп, данные которого представлены в таблице 14. У перепелов II и III групп количество бифидобакгерий достоверно больше по сравнению с контрольной в 26,66 и 6,66 раз, а молочнокислых бактерий в 8,33 и 1,66 раз (Р < 0,05).

14. Микробиологический анализ химуса кишечника перепелов, п = 6

Показатели Группы

1-контроль И-опытная Ш-опытная

Бифидобактерии, 10ш КОЕ/г Молочнокислые бактерии, 107 КОЕ/г Эшерихии, 103 КОЕ/г Энтерококки, 102 КОЕ/г Стафилококки, 102 КОЕ/г Стрептококки, 102 КОЕ/г 0,3±0,01 0,6±0,02 5,0±0,17 3,0±0,05 1,0±0,03 5,0±0,21 8,0±0,21* 5,0±0,30* 0,3±0,01* 0,3±0,01* 0,4±0,01* 2,0±0,07* 1,0*0,03* 3,0±0,07* 0,4±0,01* 0,9±0,03*

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

Благодаря развитию полезных микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте перепелов опытных групп, наблюдалось статистически достоверное (Р < 0,05) вытеснение ими условно-патогенной микрофлоры. Так, титр эшерихий у перепелов II группы составил 3,0 * 102 КОЕ/г, в III - 3,0 * 103 КОЕ/г против 5,0 х ю3 КОЕ/г в контрольной. Количество энтерококков у перепелов опытных групп отсутствовало, в то время как в контрольной составило 3,0 х 102 КОЕ/г. Титр стафилококков в кишечнике перепелов II группы составил 3,0 * 101 КОЕ/г, а в III - 4,0 х 101 КОЕ/г (Р < 0,05) против 1,0 х Ю2 КОЕ/г в контроле. У перепелов опытных групп в 1 г химуса обнаружено стрептококков 4,0 х 101 и 9,0 х 101 КОЕ/г, а в I группе 5,0 х Ю2 КОЕ/г.

Следовательно, под влиянием данных пробиотических кормовых добавок более активно происходило размножение лакто- и бифидобактерий, они оказывали инги-бирующее действие на размножение в желудочно-кишечном тракте перепелов условно-патогенных микроорганизмов. За счет этого наблюдается повышение жизнеспособности, улучшение переваримости и в итоге возрастание прироста живой массы птицы (табл. 4 и 5), а следовательно повышается уровень реализации биоресурсного потенциала породы.

3.3 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК ДЛЯ КОРРЕКЦИИ МЕТАБОЛИЗМА И ПОВЫШЕНИЯ ЯИЧНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ ПЕРЕПЕЛОК-НЕСУШЕК

Для определения влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на яичную продуктивность перепелов японской породы во втором на-

учном опыте в 42-х дневном возрасте были сформированы из контрольной и опытных групп одноименные группы по 40 голов (34 самки и 6 самцов), которых продолжали кормить, как и до 42-х дней.

3.3.1 ЯИЧНАЯ ПРОДУКТИВНОСТЬ ПЕРЕПЕЛОВ

Учет яичной продуктивности перепелок-несушек начали в 42-х дневном возрасте, что определено стандартом технологии.

Данные основных хозяйственных показателей перепелок-несушек представлены в таблице 15.

15. Хозяйственные показатели перепелок-несушек

Показатели Группы

1-контроль Н-опытная Ш-опытная

Количество несушек на 42-й день опыта, гол. 34 34 34

Количество несушек на конец опыта, гол. 30 33 33

Сохранность несушек, % 88,23 97,05 97,05

Количество несушек в среднем за опыт, гол. 32,76 33,62 33,44

Возраст при снесении первого яйца, дни 43 39 40

Период яйцекладки, дни 111 112 112

Валовый сбор яиц, шт. 2423 2944 2776

Конверсия на 10 яиц, кг 0,50 0,44 0,46

Яйценоскость на среднюю несушку, шт. 73,96 87,56 83,01

Интенсивность яйценоскости, % 66,63 78,18 74,11

Из данных таблицы 15 видно, что количество несушек на конец эксперимента во

II и III группах составило 33 головы, что больше по сравнению с контрольной на 8,82 %. Возраст при снесении первого яйца перепелами II и III групп отмечен в 39 и 40 день, что раньше, чем в контрольной на 4 и 3 дня. Валовый сбор яиц за весь период учета яйцекладки (112 дней) у перепелов II группы составил 2944 шт., а в III — 2776 шт., что больше, чем в I группе на 521 и 353 яйца или 21,50 и 14,57 %. В целом, яйценоскость на среднюю несушку у перепелов II и III групп больше, чем в контроле на 18,39 и 12,24%.

3.3.2 ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПЕРЕПЕЛОВ В ПЕРИОД ИНТЕНСИВНОЙ ЯЙЦЕКЛАДКИ

Во втором научном опыте в 154-х дневном возрасте, проводили контрольный убой перепелок-несушек и взятие крови для исследований её морфологических и биохимических показателей. Исследования крови показали, что достоверной разницы в морфологических показателях не наблюдалось. Все они находились в пределах физиологических норм. Результаты биохимических исследований крови перепелок-несушек, представленные в таблице 16, убеждают, что добавка пробиотиков в их рацион положительно повлияла на биохимический состав крови.

Так, уровень холестерина у перепелов II и III групп меньше, чем в контроле на 7,75 и 6,78 % (Р < 0,05). У перепелов II и III групп наблюдалось достоверное понижение (Р<0,05) количества фосфора на 0,21 и 0,24 ммоль/л, кальция на 0,19 и 0,13 ммоль/л, глобулинов на 3,19 и 2,99 г/л. Уровень ферментов ACT у перепелов II и

III групп больше, чем в контрольной на 91,00 и 72,69 Ед/л, а АЛТ на 5,79 и 3,88 Ед/л

(Р < 0,05).Это свидетельствует о высоком расходе резервов электролитов и аминокислот сыворотки крови, идущих на построение структур яйца перепелок-несушек в период интенсивной яйцекладки. Количество мочевой кислоты в крови перепелов II и III групп меньше, чем в контрольной на 12,15 и 10,98 % (Р<0,05). Достоверной разницы по содержанию в сыворотке крови общего белка и альбуминов в группах не наблюдалось.

16. Биохимические показатели сыворотки крови перепелок-несушек, п - 10

Показатели Группы

1-контроль И-опытная Ш-опытная

Общий белок, г/л 32,30±0,98 30,10*1,01 29,70±1,03

Альбумины, г/л 13,18±0,43 14,17±0,41 13,57±0,39

Глобулины, г/л 19,12±0,51 15,93±0,41* 16,13±0,57*

А/Г коэффициент 0,69±0,03 0,89±0,04* 0,84±0,03*

Холестерин, ммоль/л 4,13±0,05 3,81±0,04* 3,85±0,04*

Мочевая кислота, ммоль/л 182,54±4,12 159,32±4,04* 162,63±4,05*

ACT, Ед/л 323,18±8,93 414,18±9,53* 395,87±9,87*

АЛТ, Ед/л 33,42±1,12 39,21±1,03* 37,30±1,14*

Фосфор,' ммоль/л 2,22±0,09 2,01±0,06* 1,98±0,07*

Кальций, ммоль/л 2,63±0,04 2,44±0,06* 2,50±0,04*

Примечание: * - разница с контролем достоверна (Р < 0,05)

333 ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА КАЧЕСТВО ЯИЦ

ПЕРЕПЕЛОК-НЕСУШЕК

Для определения влияния пробиотических кормовых добавок на качественные показатели яиц перепелок-несушек были изучены их морфологические и биохимические показатели, данные которых представлены в таблице 17.

Таблица 17. Качественные показатели яиц перепелок-несушек

Группы

1-контроль И-опытная Ш-опытная

Масса яйца, г 9,89±0,31 10,42±0,30 10,63±0,42

Толщина скорлупы, мм 0,108±0,003 0,119±0,004 0,125±0,006

В желтке

Витамин А, мкг/г 11,53±0,39 12,13±0,38 13,21±0,60

Витамин Вз, мкг/г 5,52±0,19 6,09±0,21 6,03±0,19

Каротиноиды, мкг/г 12,77±0,43 14,23±0,70 13,92±0,57

В белке

Витамин В2, мкг/г 2,06±0,09 2,21±0,08 2,20±0,08

Достоверных различий по изучаемым показателям не выявлено, однако, наблюдалась тенденция к их возрастанию. Так, у перепелов II и III групп масса яиц больше по сравнению с контролем на 5,35 и 7,48 %, а толщина скорлупы на 11,11 и 16,66 %. Количество витамина В2 в желтке яиц перепелов II и III групп больше по сравнению с контролем и составило 6,09 и 6,03 мкг/г против 5,52 мкг/г. Уровень ка-ротиноидов у перепелов опытных групп достиг 14,23 и 13,92 мкг/г против 12,77 мкг/г в контроле. В белке яиц количество витамина В2 у перепелов II и III групп больше, чем в контрольной на 0,15 и 0,14 мкг/г или 7,28 и 6,80 %.

3.4 ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ИСПЫТАНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА ПЕРЕПЕЛАХ В УСЛОВИЯХ ФЕРМЕРСКОГО ХОЗЯЙСТВА

Апробация эффективности использования в рационах перепелов пробиотиче-ских кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» была проведена в том же хозяйстве на 900 перепелах японской породы (таблице 18).

18. Эффективность выращивания перепелов на мясную и яичную продуктивность при использовании пробиотнческих кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» в производственных условиях

Показатели Группы

1-контроль И-опытная Ш-опытная

Выращивание перепелов до 42-х дневного возраста

Поголовье на начало опыта, гол. Сохранность, % Выбракованное количество голов на42-е сутки, гол 300 95,0 165 300 97,3 172 300 97,0 171

Прирост живой массы перепелов всего, кг Затраты корма всего, кг Конверсия корма на 1 кг прироста, кг 24,89 99,43 3,99 27,49 105,93 3,85 27,12 104,84 3,86

Экономическая эффективность

Стоимость израсходованного корма всего, руб. Стоимость потраченной добавки всего, руб. Стоимость израсходованного корма и добавки на прирост, руб. Выручка от реализации мяса перепелов, руб. Прибыль от реализации мяса перепелов, руб. % к контролю 1690,31 1690,31 4978,00 3287,69 100,00 1800,81 105,00 1905,81 5498,00 3592,19 109,26 1782,28 18,90 1801,18 5424,00 3622,82 110,19

Выращивание перепелок-несушек после 42-х дневного возраста

Поголовье несушек, гол. Сохранность несушек, % Валовый сбор яиц, шт. Яйценоскость на среднюю несушку, шт. Затраты корма за период яйцекладки (42-252 д ня), кг Затраты корма на 10 штук яиц, кг 102 90,19 13 347 140,34 634,32 0,48 102 96,07 15 677 156,84 715,64 0,46 102 95,09 15 803 160,10 704,86 0,45

Экономическая эффективность

Стоимость израсходованного корма, руб. Стоимость израсходованной добавки, руб. Стоимость израсходованного корма и добавки за период яйцекладки всего, руб. Выручка от реализации яиц, руб. Прибыль от реализации яиц, руб. % к контролю 9514,76 9514,76 20 020,50 10 505,74 100 10734,63 715,00 11449,63 23 515,50 12 065,87 114,85 10572,91 126,90 10699,81 23 704,50 13 004,69 123,78

Экономическая эффективность применения пробиотических кормовых добавок «Пробипакт» и «Промомикс» за весь период выращивания перепелов

Прибыль от реализации мяса перепелов, руб. Прибыль от реализации яйца, руб. Прибыль всего, руб. 3287,69 10 505,74 13 793,43 3592,19 12 065,87 15 658,06 3622,82 13 004,69 16 627,51

% к контролю 100,00 113,51 120,54

Расчёты экономической эффективности применения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» до 42-х дневного возраста показали, что при-

быль от реализации мяса перепелов во II и III группах составила 3592,19 и 3622,82 руб. против 3287,69 руб. в контрольной группе.

Анализ экономической эффективности применяемых пробиотических кормовых добавок после формирования производственных групп перепелок на яйценоскость показал, что прибыль от реализации яиц перепелов II и III групп составила 12 065,87и 13 004,69 руб. против 10 505,74 руб. в контроле.

В итоге, прибыль от реализации мяса и яйца перепелов за весь период выращивания птицы во II и III группах больше, чем в контрольной на 1864,63 и 2834,08 руб. или 13,51 и 20,54%.

4. ВЫВОДЫ

1. Мониторинг и результаты проведенных экспериментов с использованием исследуемых пробиотических кормовых добавок показали, что уровень биоресурсного потенциала перепелов японской породы в фермерских хозяйствах реализуется не полностью. Разработанная пробиотическая добавка, сочетающая ассоциацию молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов позволяет повысить реализацию биоресурсного потенциала птицы. Введение в состав новой пробиотической добавки «Промомикс» кроме молочнокислых кокков и бацилл, как представителей факультативной анаэробной микрофлоры еще и пропионовокислого штамма, как жесткого анаэроба синтезирующего другие функционально активные вещества (пропионовая кислота, витамины группы В) позволило получить кормовой продукт успешно решающий задачи повышения эффективности традиционных кормовых смесей при увеличении количества и качества продукции перепеловодства.

2. Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» положительно влияет на уровень проявления хозяйственных показателей перепелов в период их развития и интенсивной яйцекладки. Это подтверждается:

- превосходством сохранности перепелов в период их развития при использовании «Пробиолакта» на 2,7-4,0 % и «Промомикса» на 2,0-3,4 %, а в период интенсивной яйцекладки, в среднем, на 9,0 %;

- большими приростами живой массы птицы при даче «Пробиолакта» на 5,02-6,32 % и «Промомикса» на 5,24-5,67 %, на фоне улучшения конверсии корма на 1 кг прироста живой массы у перепелов получавшие пробиотик «Пробиолакт» на 2,17-3,5 % и «Промомикс» - 3,37-3,70 %. При этом, средняя масса потрошеной тушки перепелов, употреблявшие «Пробиолакт» на 12,36 % и «Промомикс» на 11,66 % больше, чем в контрольной группе;

- высокой интенсивностью яйценоскости перепелов при использовании «Пробиолакта» на 11,55% и «Промомикса» на 7,48%, на фоне улучшения конверсии корма на десяток яиц у перепелов получавших пробиотик «Пробиолакт» на 12,0 % и «Промомикс» - 8,0 %.

3. Под влиянием «Пробиолакта» и «Промомикса» в крови перепелов, на уровне физиологических норм, увеличивается концентрация эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов, снижается уровень лейкоцитов, а также повышается содержание общего белка, его фракций и альбумино-глобулиновый коэффициент, но снижается мочевая кислота и холестерин, что свидетельствует об отсутствии негативных влияний на организм пере-

пелов со стороны используемых пробиотических добавок и более интенсивно протекающих окислительно-восстановительных процессов, обмена веществ и энергии.

4. Переваримость питательных веществ и коэффициент использования минеральных веществ комбикорма перепелами, которые получали пробиотические кормовые добавки «Пробиолакт» и «Промомикс» были лучше, чем получавшие только основной рацион без добавок: по сухому веществу на 2,99 и 4,9 %, органическому веществу - 2,95 и 5,12 %, протеину - 3,68 и 5,22 %, жиру - 2,40 и 1,79 %, клетчатке — 7,17 и 7,57 %, безазотистым экстрактивным веществам (БЭВ) —14,56 и 20,56 %, по кальцию на 8,60 и 9,80 %, фосфору - 9,70 и 11,1 %, что обусловлено подкисле-нием среды пищеварительного тракта органическими кислотами и другими биологически активными продуктами жизнедеятельности микроорганизмов.

5. Результаты микробиологических исследований показали, что ввод в рацион перепелов японской породы исследуемых пробиотических кормовых добавок обусловило усиление размножения полезных микроорганизмов и снижение количества условно-патогенных. Так, у перепелов, которые получали «Пробиолакт» количество бифидо- и лактобактерий было больше по сравнению с контрольной в 26,66 и 8,33 раза, а у перепелов, которые получали «Промомйкс» больше в 6,66 и 1,66 раз.

6. Использование пробиотиков «Пробиолакт» и «Промомикс» положительно влияет на биохимические показатели мяса и яиц перепелов, что проявляется в:

- снижении в мясе перепелов количества жира, при одновременном повышении содержания белка, а также достоверном повышении по сравнению с контролем содержания таких незаменимых аминокислот, как изолейцина на 19,47 и 16,74%, метионина - 28,69 и 25,88 % и фенилаланина - 15,54 и 14,60 %;

- увеличении у перепелов массы яиц на 5,35 и 7,48 %, количества витамина В2 в желтке на 10,33 и 9,24 %, каротиноидов на 11,43 и 9,01 % и витамина В2 в белке яиц на 7,28 и 6,80 %.

7. Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» при выращивании перепелов японской породы экономически целесообразно и позволяет повысить прибыль на 13,51 и 20,54 %.

8. По всем изученным хозяйственно полезным признакам, физиолого-биохимическим параметрам обмена веществ, разработанная пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» не уступает рыночному аналогу «Пробиолакт», но существенно превосходит его по экономическим параметром, что является его главным конкурентным преимуществом.

5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

С целью повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы по мясной и яичной продуктивности, сохранности поголовья и увеличения прибыли от получаемой продукции, нами рекомендуется применение про-биотической кормовой добавки «Промомикс» в дозе 0,2 % к массе корма с первых суток и на протяжении всего периода выращивания, как экономически более выгодной. Пробиотик «Пробиолакт», учитывая его эффективность использования, рекомендуется в случаях отсутствия наличия «Промомикса» и более высоких экономических результатов в сравнении с ним на конкретных перепелиных фермах. Введение добавок в кормосмесь необходимо осуществлять при ступенчатом смешивании.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лысенко, Ю. А. Значение пробиотаков в птицеводстве / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Матеріали мінародноі науково-праетичноі конференціі / Подільський державний аграрно-технічний университет. Кам'янець-Подільський. -

2011.-С. 101-103.

2. Лысенко, Ю. А. Особенность формирования микробиоценозов ЖКТ и эффективность обменных процессов у перепелов при использовании пробиоти-ческих кормовых добавок / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Ветеринария Кубани. - 2012. - № 4. - С. 24-26.

3. Лысенко, Ю. А. Повышение биологического потенциала перепелок-несушек при использовании пробиотических кормовых добавок / Ю. А. Лысенко, А. И. Петенко // Ветеринария Кубани. - 2012. - № 5. - С. 5-7.

4. Лысенко, Ю. А. Кормовые добавки в рационах перепелов / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Птицеводство. - 2012. - № 9. - С. 36-38.

5. Лысенко, Ю. А. Влияние пробиотиков на мясную и яичную продуктивность перепелов / Ю. А. Лысенко // Труды КубГАУ. - 2012. - № 5 (38). - С. 145-148.

6. Лысенко, Ю. А. Влияние пробиотиков на перепелов / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Юбилейная научно-практическая конференция / ФГБОУ ВПО Алтайский государственный аграрный университет. Барнаул. - 2012. - С. 40-44.

7. Лысенко, Ю. А. Использование пробиотических кормовых добавок в пере-пеловодстве / Ю. А. Лысенко, А. И. Петенко // Материалы международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны». - СПб.: ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ». -

2012.-С. 122-125.

Лысенко Юрий Андреевич

Разработка и использование новой пробиотической кормовой добавки на основе функциональной микрофлоры в рецептуре комбикормов для перепелов

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 20.04.2013 г. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100. Заказ № 266 Типография ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13

Текст научной работыДиссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лысенко, Юрий Андреевич, Краснодар

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение ! высшего профессионального образования «Кубанский государственный аграрный университет» I

На правах си

ЛЫСЕНКО ЮРИЙ АНДРЕЕВИЧ

РАЗРАБОТКА И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НОВОЙ ПРОБИОТИЧЕС] I КОРМОВОЙ ДОБАВКИ НА ОСНОВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНс1й

МИКРОФЛОРЫ В РЕЦЕПТУРЕ КОМБИКОРМОВ ДЛЯ ПЕРЕПЕЛО^

! !

03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

I I

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научный руководитель:

доктор сельскохозяйственных наук, профессор Петенко Александр Иванович

Краснодар - 2013

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ......................................................................................................................................................4

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................................................10

1.1 История открытия пробиотиков..............................................................................10

1.2 Характеристика бактериальных препаратов, применяемых в птицеводстве..........................................................................................................................................15

1.3 Классификация пробиотиков....................................................................................22

1.4 Характеристика микроорганизмов, используемые для производства пробиотиков....................................................................................................25

1.5 Требования, предъявляемые к пробиотикам..............................................30

1.6 Значение пробиотиков и их применение в птицеводстве..................35

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ........................................44

2.1 Методика проведения опытов на перепелах................................................44

2.1.1 Первый научный опыт....................................................................................44

2.1.2 Второй научный опыт....................................................................................48

2.1.3 Производственные испытания пробиотических кормовых добавок..............................................................................................................49

2.2 Учитываемые показатели и методы их изучения....................................50

2.2.1 Определение физиолого-биохимических и микробиологических показателей..........................................................................50

2.2.2 Определение зоотехнических и хозяйственных показателей..................................................................................................................................52

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ .... 55

3.1 Основные аспекты технологии получения и оценки состава изучаемых пробиотических кормовых добавок......................................................................55

3.2 Использование пробиотических кормовых добавок в кормо-смесях перепелов для коррекции метаболизма и повышения их мясной продуктивности................................................................................................................63

3.2.1 Рост и развитие перепелов..........................................................................63

3.2.2 Мясная продуктивность, развитие внутренних органов

и оценка качества мяса перепелов........................... 68

3.2.3 Влияние пробиотических кормовых добавок на морфологические и биохимические показатели крови перепелов 76

3.2.4 Переваримость и использование питательных веществ перепелами при использовании пробиотических кормовых добавок..................................................................... 79

3.2.5 Микробиоценоз кишечника у перепелов при применении пробиотических кормовых добавок............... 82

3.3 Использование пробиотических кормовых добавок для коррекции метаболизма и повышения яичной продуктивности перепелок-несушек............................................................ 85

3.3.1 Рост, развитие и потребление кормов перепелами в период яйцекладки....................................................... 85

3.3.2 Яичная продуктивность перепелов........................... 86

3.3.3 Влияние пробиотических кормовых добавок на показатели крови перепелов в период интенсивной яйцекладки.................... 89

3.3.4 Влияние пробиотических кормовых добавок на качество яиц перепелок-несушек................................................... 91

3.4 Производственное испытание пробиотических кормовых добавок на перепелах в условиях фермерского хозяйства................ 93

ВЫВОДЫ........................................................................ 99

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ.................................... 102

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ................................................ 103

ПРИЛОЖЕНИЯ............................................................... 126

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Промышленное птицеводство - одна из ведущих отраслей сельского хозяйства. Важный фактор, обуславливающий индустриализацию отрасли - скороспелость птицы и быстрая окупаемость вложений (И. Голубов, 2011).

Одним из направлений в птицеводстве является перепеловодство, главная задача которого обеспечение населения качественным и экологически безопасным мясом и яйцом, обладающим высокими диетическими свойствами. При нарушении баланса микрофлоры пищеварительного тракта в пользу условно-патогенной, несбалансированном кормлении, неправильном содержании, применении кормовых антибиотиков происходит снижение биоресурсного потенциала птиц, в частности, получаемой от них продукции (Н. Данилевская, В. Субботин и др., 2005; А. Гайдук, Ф. Хазиахметов, 2011).

Развитие биотехнологии привело к появлению кормовых продуктов и биологически активных добавок с новыми свойствами. К их числу относятся пробиотики. Последние при введении в организм ведут себя как своеобразный «биореактор», осуществляющий синтез биологически активных веществ с последующей их «доставкой» к сайтам-мишеням макроорганизма. При их приеме начинают выделяться биологически активные вещества и функционировать системы микробных клеток, оказывающие как прямое действие на патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, так и опосредованное - путем активации специфических и неспецифических систем защиты организма. В этот же период бактериальные клетки пробиотика активно продуцируют ферменты, аминокислоты, антибиотические вещества и другие физиологически активные субстанции, дополняющие комплексное лечебно-профилактическое действие рационов. Результатом является повышение переваримости и использования питательных веществ кормов, а, следовательно, и увеличение прироста живой массы (А. Н. Панин и др., 1996, 2000, 2002, 2007; Б. Бессарабов, 1996, 2006, 2009; Н. И. Малик и др., 2001, 2002; И.Егоров и др., 2002, 2003, 2004, 2005, 2007; А. И. Петенко, 2003; А. Кощаев, А. Петенко, А. Калашников, 2006; А. Г. Кощаев,

А. И. Петенко, 2007; Е. В. Якубенко, 2008; А. Г. Кощаев, Е. В. Якубенко, А. И. Петенко, 2010; И. А. Лебедева, 2011; Н. Пышманцева и др., 2011).

До конца не изученными остаются вопросы определения наиболее эффективных штаммов микроорганизмов или их ассоциаций, рациональных доз и схем применения пробиотиков в промышленном птицеводстве, в частности перепеловодстве, что позволяет более полно раскрыть биоресурсный потенциал птиц. В связи с этим ученым советом ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» утвержден тематический план научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ на 2011-2015 гг. от 20 декабря 2010 г, протокол № 10.

Диссертационная работа является разделом научных исследований, в соответствии с темой № 12: «Разработка и научное обоснование способов получения и использования экологически безопасных функциональных кормовых и пищевых концентратов и добавок на основе ресурсосберегающих биотехнологий: высококалорийные концентраты и добавки; микробиологические добавки и биопрепараты» (№ госрегистрации 01201153631).

Цель исследований. Цель работы - изучение возможности повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы за счет новой пробиотической кормовой добавки в сравнении с рыночным аналогом, как приемов оптимизации процессов пищеварения, морфо-биохимического статуса крови и обмена веществ, обуславливающих высокий уровень сохранности поголовья, проявления мясной и яичной продуктивности, биологической ценности мяса и яиц птицы.

В соответствии с целью были поставлены задачи:

- разработать технологию получения высокоэффективной пробиотической кормовой добавки «Промомикс» на основе сочетанного использования молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов для формирования новых функциональных свойств, обеспечивающих оптимальный уровень реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы;

- оценка реализации биоресурсного потенциала перепелов при использовании разработанной пробиотической добавки «Промомикс» в сравнении с рыночным аналогом «Пробно л акт»;

- изучить влияние используемых пробиотических кормовых добавок на переваримость питательных веществ комбикормов, а также физиологические, биохимические и морфологические показатели перепелов японской породы;

- определить влияние пробиотических кормовых добавок на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника перепелов японской породы;

- установить влияние исследуемых пробиотических кормовых добавок на качество получаемой продукции;

- предложить производству схему использования и дать рекомендации по применению изучаемых пробиотических кормовых добавок при разведении перепелов японской породы.

Научная новизна. Разработана новая пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» (СТО 9291-008-00493209-13) на основе молочнокислых и про-пионовокислых микроорганизмов. Государственным управлением ветеринарии по Краснодарскому краю утверждены «Методические рекомендации по применению пробиотической кормовой добавки «Промомикс» в хозяйствах по выращиванию перепелов», протокол № 3 от 29 октября 2012 года.

Впервые оценена возможность использования ассоциации молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов в качестве продуцентов биологически активных субстанций в составе рационов для перепелов. Проведены сравнительные испытания влияния пробиотических кормовых добавок «Пробио-лакт» и «Промомикс» на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника перепелов японской породы. За счет использования пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс», впервые показана возможность повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов по живой массе и яйценоскости на среднюю несушку. Предложена экономически эффективная схема применения пробиотических кормовых добавок «Промомикс» и «Пробиолакт» на перепелах японской породы на основе комплексной

оценки мясной и яичной продуктивности, качества получаемой продукции и физиолого-биохимического статуса птицы.

Практическая значимость работы. Результаты изучения эффективности применения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» раскрывают возможности повышения уровня реализации потенциала продуктивности перепелов японской породы, их сохранности, улучшения состава мяса и пищевых качеств яиц:

1. Применение в рационах перепелов до 42-х дней пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» обуславливает повышение прироста живой массы птицы на 5,02-6,32 и 5,24-5,67%; сохранности поголовья на 2,7-4,0 и 2,0-3,4 %; снижение расхода кормов на 1 кг прироста живой массы на 2,2-3,4 и 3,4-3,7 %. Повышается выход потрошенной тушки птицы на 11,3514,78 и 10,48-14,16%, а также содержание аминокислот в мясе перепелов по изолейцину на 19,47 и 16,74 %, метионину - 28,69 и 25,88 % и фенилаланину -15,54 и 14,60 %, соответственно.

2. Использование пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» в рационах перепелок-несушек способствуют сокращению срока начало яйцекладки на 4 и 3 дня; повышению сохранности, в среднем, на 9,0 % и яйценоскости на среднюю несушку на 18,39 и 12,24 %. Птица реализует не только биологические ресурсы яичной продуктивности, но и производит яйца с лучшими товарными и биохимическими показателями, так масса яиц больше на 5,35 и 7,48 %, количество витамина В2 в желтке на 10,33 и 9,24 %, уровень каротинои-дов на 11,43 и 9,01 %.

3.Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» при выращивании перепелов японской породы позволяет повысить прибыль на 13,51 и 20,54 %.

Результаты исследования эффективности применения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» могут быть использованы в хозяйствах по разведению данной птицы для повышения её сохранности, продуктивности и получения высококачественной мясной и яичной продукции.

Основные положения выносимые на защиту:

- новые элементы технологии получения пробиотической кормовой добавки «Промомикс» для повышения уровня реализации потенциала продуктивности перепелов японской породы, их сохранности, улучшения состава мяса и пищевых качеств яиц позволяют получить кормовой продукт, дающий хороший биологический и экономический эффект в составе стандартных рационов для перепелов;

- применение в составе комбикормов для перепелов новой пробиотической кормовой добавки «Промомикс» способствует повышению живой массы птицы, яйценоскости на среднюю несушку, сохранности поголовья, снижению расхода кормов на 1 кг прироста живой массы и 10 яиц;

- использование в рационе перепелов разработанной пробиотической кормовой добавки «Промомикс» способствует активизации обменных процессов за счет позитивного влияния на динамику морфологических и биохимических показателей крови птиц;

- добавление в комбикорм перепелов изучаемых пробиотических добавок повышает в желудочно-кишечном тракте птиц содержание полезной микрофлоры и снижает условно-патогенной;

- в результате использования пробиотиков повышается биологическая полноценность мяса перепелов, а также улучшаются товарные и биохимические показатели яиц птиц.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы докладывались на: Ежегодных научных конференциях (Краснодар, КубГАУ, 2010-2012) 1УПжнародно1 научково-практично1 конференци «Зоотехшчна наука: ютор1я, проблеми, перспективи» (Камянець-Подшьський, 2011); Юбилейной научно-практической конференции, посвященная 50-летию факультета ветеринарной медицины АГАУ, 100-летию со дня рождения д.б.н., профессора И.С. Ржани-циной (Барнаул, 2012); Международной студенческой конференции «Знание молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны» (Санкт-Петербург, 2012).

Публикации. По теме проведенных исследований опубликовано 7 научных статей, в том числе 4 в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ (Журналы: «Птицеводство» - 1, «Ветеринария Кубани» - 2, «Труды КубГАУ» - 1).

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, выводов, предложений производству, списка литературы и приложения. Содержание работы изложено на 126 страницах машинописного текста, включая 5 приложений, содержит 27 таблиц и 5 рисунков. Библиографический список состоит из 237 источников, в том числе 29 иностранных авторов.

1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 История открытия пробиотиков

В современном промышленном птицеводстве особое внимание уделяется экологически безопасным препаратам, не допускающим заболевание птицы и способствующим увеличению продуктивности. Широко применяются ферменты, препараты на основе нуклеиновых кислот, пробиотики, биологически активные вещества, кормовые добавки. Они оказывают позитивное влияние на организм птицы: улучшают кишечный и микробный баланс и, следовательно, повышают устойчивость организма к действию неблагоприятных факторов внешней среды, сохранность и продуктивность. Применение пробиотиков позволяет ускорить рост молодняка и уменьшить его отход. Сегодня широко применяются такие пробиотики как нарине, бактисубтил, максилин, лактобифадол, энтеробифидин, бифитрилакт и разработкой новых более эффективных пробиотиков занимаются во всех экономически развивающихся странах мира (Б. В. Тараканов, 1987, 2000; И. М. Карпуть, М. П. Бабина, 1996; А. Я. Шурыгин и др., 1996; О. Л. Корочкин, 1996, 1997; В.В.Субботин, 1999;Г. А. Ноздрин и др., 2001, 2002, 2003, 2005; Б. А. Шендеров, 2001; А.Н.Панин, 2007; В. Г. Герасименко, 2008).

Основоположником концепции пробиотиков был И. И. Мечников, который еще в 1903 г. предложил практическое использование микробных культур-антагонистов для борьбы с болезнетворными бактериями. Первоначально название «пробиотик» применяли для описания субстанций, продуцируемых одним простейшим, который стимулировал рост других, а позднее - кормовых добавок, оказывающих полезный эффект на животное-хозяина путем влияния на его кишечную микрофлору. В настоящее время роль пробиотика определяют как «организм и вещества (субстанции), которые делают вклад в микробный баланс кишечника» (Б. В. Тараканов, 2000).

В работе Б. А. Шендерова с соавторами (1997) прослежена история появления термина пробиотикии толкование этого термина различными

исследователями. По их мнению, термин пробиотик ввели D. М. Lilly и R. Н. Stillwell в 1965 г. для обозначения микробных метаболитов, обладающих способностью стимулировать рост микроорганизмов. В 1970 г. М. Gros, G. Jhielin назвали пробиотиками биологические препараты, представляющие собой стабилизированные культуры симбионтных микроорганизмов или продукты их ферментации, которые способствуют росту последних. В 1974 г. R. В. Parker назвал пробиотиками микробные препараты (микроорганизмы или их компоненты), регулирующие микрофлору кишечника.

В 1977г. Л.Ричард и Р.Паркер термин «проби�