Разработка элементов технологии, направленной на расширение генетического разнообразия баклажана при селекции на качество

Верба, Вадим Михайлович

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Разработка элементов технологии, направленной на расширение генетического разнообразия баклажана при селекции на качество
ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Разработка элементов технологии, направленной на расширение генетического разнообразия баклажана при селекции на качество"

На правах рукописи

ВЕРБА Вадим Михайлович

УДК 635.646: 631.524.7

РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ, НАПРАВЛЕННОЙ НА РАСШИРЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ БАКЛАЖАНА ПРИ СЕЛЕКЦИИ НА КАЧЕСТВО

Специальности: 06.01.05 - селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений 03.00.23 - биотехнология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

2 ИЮН 2011

Москва-2011

4848347

Диссертационная работа выполнена в лаборатории селекции и семеноводства пасленовых культур Всероссийского научно-исследовательского института селекции и семеноводства овощных культур в 2009-2011 годах.

Научные руководители:

доктор сельскохозяйственных наук, профессор

Мамедов Мубариз Иса оглы

доктор сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник

Шмыкова Наталья Анатольевна

Официальные оппоненты:

доктор сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник

БухаровАлександр Фёдорович

кандидат сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник

Кан Людмила Юрьевна

Ведущая организация: Российский государственный аграрный университет -МСХА им. К.А. Тимирязева

Защита диссертации состоится «/с» июня 2011 года в «/%» часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 220. 019. 01 при ВНИИ селекции и семеноводства овощных культур (143080, Московская область, Одинцовский район, п/о Лесной городок, пос. ВНИИССОК).

Факс: (495) 599-22-77 e-mail: vniissok@mail.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНИИССОК

Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 220. 019.01

доктор сельскохозяйственных наук,

aspirantura@vniissok.ru

Автореферат разослан «¿5» мая 2011 года

старший научный сотрудник

Пышная О.Н.

Общая характеристика работы Актуальность темы. В настоящее время проблема селекции сортов и гибридов Б] баклажана с различными параметрами, удовлетворяющих требования производства и потребителей, стоит очень остро. Динамичное развитие общества приводит к увеличению требований потребителей как к качеству и разнообразию продукции, так и к ее объемам. В связи с этим у производителей сельскохозяйственной продукции возникают соответствующие требования к селекционным достижениям, в первую очередь направленные на повышение урожайности и качества продукции (в т.ч. высокое содержание биологически активных веществ (БАВ)). В условиях современного рынка потребительский спрос постоянно растет и меняется, это создает необходимость в наличии у селекционера генотипически разнообразного исходного материала, наличие которого позволит быстро удовлетворять требования современного производства в короткие сроки и создавать линии с высокой комбинационной способностью для селекции на гетерозис.

В связи с этим создание генотипически разнообразного исходного материала с использованием межвидовой гибридизации и разработка методов биотехнологии, способствующих решению ряда проблем при его создании, являются актуальными. Это позволит расширить спектр поиска ценных селекционных форм, повысить эффективность выявления линий с высокими комбинационной способностью и содержанием БАВ для селекции высокоурожайных сортов и гибридов Р) баклажана с широкой нормой реакции к условиям различных культивационных сооружений и открытого грунта.

Цель и задачи и исследований. Цель работы - расширение генотипиче-ского спектра изменчивости на основе внутривидовых и межвидовых скрещиваний баклажана для создания разнокачественного исходного материала и отбор перспективных образцов для дальнейшей селекции.

Для реализации данной цели исследований были поставлены следующие задачи:

¡.Изучить комбинационную способность и определить эффект гетерозиса по комплексу хозяйственно ценных признаков линий западноазиатского подвида S. melongena L. sp. occidentale Наг.

2. Разработать основные элементы методики клонального микроразмножения баклажана (состав питательных сред, типы эксплантов).

3. Провести межвидовые скрещивания и разработать основные элементы методики эмбриокультуры in vitro для зародышей межвидовых гибридов.

4. Оценить полученные межвидовые гибриды по комплексу морфологических, биометрических и биохимических показателей.

Научная новизна работы. Впервые выявлены различия по содержанию фенольных соединений (антоцианы, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты) и пектиновых веществ в отечественных сортах и гибридах, полученных на основе внутри- и межвидовой гибридизации. Установлено, что основным антоцианом кожуры плодов баклажана является дельфинидин-(6-кумароил)-3-глюкозид. Показано, что образцы S.macrocarpon, S.aethiopicum превосходят по содержанию флавоноидов и фенолкарбоновых кислот сортообразцы S. melongena.

Разработана методика клонального мшфоразмножения отечественных сортов баклажана.

Впервые разработана методика эмбриокультуры с использованием ти-диазурона и получены новые генотипы растений на основе межвидовой гибридизации, расширяющие спектр генотипической изменчивости: S. melongena х S.macrocarpon, S.melongena х S.aethiopicum, S.macrocarpon x S.melongena, S.aethiopicum x S.melongena, S.aethiopicum x S.macrocarpon.

Установлены различия в динамике развития зародышей у разных видов баклажана и их гибридов.

Практическая значимость. Выделены селекционно ценные линии с высокой комбинационной способностью и содержанием фенольных соединений. Полученный в результате исследований исходный селекционный материал может быть использован для создания сортов и гибридов Ft с высоким содержанием БАВ.

Подобраны питательные среды для клонального микроразмножения баклажана и эмбриокультуры, определены оптимальные сроки получения полноценных растений-регенерантов из незрелых зародышей.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- оценка комбинационной способности линий баклажана по комплексу хозяйственно ценных признаков;

- межвидовая гибридизация баклажана для расширения спектра геноти-пической изменчивости;

- разработка биотехнологических средств для селекции баклажана.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на VII Международном симпозиуме по фенольным соединениям (Москва, 2009 год), на Международной ежегодной научно-практической конференции РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева (2009 - 2010 гг).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ, 2 из которых в журналах «Вестник РАСХН», «Сельскохозяйственная биология», входящих в перечень рецензируемых научных изданий.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на ^страницах, состоит из введения, «^глав, выводов, предложений для использования в селекционной практике, списка использованной литературы, содер-жащего^2^наименований, в том числе^^ностранных авторов, приложения, иллюстрирована ^Йаблицами, ^рисунками.

Материал и методика проведения исследований

Материалом исследований служили селекционные линии 5. те1оп§епа Ь. (Л-Беглец, Л-Солярис, Л-Бак, Л-Алмаз, Л-Багратион, Л-Бриллиант) и дикорастущие виды Б.аеШоркит Ь. и &.тасгосагроп Ь. из генофонда лаборатории селекции и семеноводства пасленовых культур ВНИИССОК Скрещивания проводили по полной диаллельной схеме (рис.1).

S. mclonocna

S. aethiopicum

S.integnTolium

Рис 1. Схема диаллельного скрещивания видов рода Solanum L.

Учитывая, что баклажан является факультативным самоопылителем, все скрещивания проводили с кастрацией в фазе хорошо развитых бутонов за день до раскрытия цветка. Пыльцу для опыления собирали с бутонов через день после их раскрытия и до растрескивания пыльников. Опыление выполняли в день кастрации в утренние часы (с 10 до 12) свежесобранной пыльцой с последующей изоляцией опыленных цветков. Завязавшиеся на момент скрещивания плоды и раскрытые цветки удаляли.

Линии, гибриды и межвидовые гибридные комбинации выращивали в вегетационной камере с досвечиванием, пленочной теплице и в зимних обогреваемых теплицах с малообъемной технологией возделывания по общепринятой агротехнике выращивания селекционного материала.

Разработку элементов методик клонального микроразмножения и эм-бриокультуры проводили по общепринятым методам работы с культурами растительных тканей (Бутенко, 1984).

Изучение качественного состава антоцианов в кожице плодов баклажана проводили на кафедре химии МГУ и в лаборатории химии пищевых продуктов Института питания РАМН.

Количественное содержание антоцианов определяли в лаборатории биотехнологии и лаборатории применения агрохимических средств в семеноводстве овощных культур ВНИИССОК в соответствии с Руководством по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище (2004), флавоноидов - в соответствии с Gajula et al. (2009), фенолкарбоновых кислот (ФКК) в мякоти - в соответствии с методикой Ларькиной М.С. и др.

(2008)

При определении содержания нерастворимых пектинов в мякоти плодов использовали объемный метод, предложенный Раик С.Я. (Волобуева, Шатилова, 2008), в лаборатории токсикологии Института питания РАМН.

Комбинационную способность рассчитывали при помощи пакета статистической обработки результатов диаллельного скрещивания «Arpo-Calk». Расчет комбинационной способности проводился по I методу Б. Гриффинга.

Статистическую обработку данных проводили по Доспехову Б.А. (1985) с использованием пакета прикладных программ MICROSOFT EXCEL 7,0.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

1. Оценка эффекта гетерозиса у гибридов Fj баклажана по количественным признакам

В 2009 - 2010 гг. проведена оценка гибридов Fb полученных при скрещивании 5 линий баклажана. Изучение родительских линий показало, что они отличались разнообразием по всем признакам, кроме раннеспелости. У гибридов Fj разнообразие было отмечено по всем учитываемым признакам, в том числе и по раннеспелости - ряд гибридов превосходили родительские линии по раннеспелости на 10-20 суток.

По признаку «ранняя урожайность» эффект гетерозиса варьировал в пределах 101,9 - 391,3%, по признаку «общая урожайность» - в пределах 108,2 -295,1%. Таким образом, проявление эффекта гетерозиса по ранней урожайности, в наших исследованиях, было выше, чем по общей (табл. 1).

Лучшим по ранней урожайности оказался гибрид F] Л-Беглец х Л-Бак -6,8 кг/м2 (эффект гетерозиса - 164,9%). Обе линии имели одинаково высокие показатели по ранней урожайности. Гибридная комбинация F; Л-Алмаз х Л-Багратион, имевшая высокий эффект гетерозиса - 189,5%, была получена при скрещивании линий контрастных по ранней урожайности.

В целом, при анализе других гибридных комбинаций четкой закономерности в проявлении эффекта гетерозиса в зависимости от показателей родительских форм выявить не удалось. Гетерозис проявлялся как в гибридах с участием родительских линий с резко контрастными, так и с близкими по величине показателями.

Таблица 1

Эффект гетерозиса по ранней и общей урожайности у гибридов _баклажана (2009-2010 годы) _

№№ Линии и гибридные Ранняя урожайность Общая урожайность

п/п комбинации кг/м^ гетерозис,% кг/м2 гетерозис,%

1 Л-Багратион 2,8 - 11,0 -

2 Л-Бак 4,0 - 14,7 -

3 Л-Алмаз 0,7 - 4,1 -

4 Л-Солярис 0,7 - 2,7 -

5 Л-Беглец 4,1 - 8,9 -

6 Р] Л-Багратион х Л-Бак 4,3 107,8 15,9 108,2

7 Б] Л-Багратион х Л-Алмаз 4,6 166,7 15,8 143,6

8 Р[ Л-Багратион х Л-Солярис 3,4 123,9 12,5 113,6

9 Р/ Л-Багратион х Л-Беглец 6,1 147,0 17,7 160,9

10 Р] Л-Бак х Л-Багратион 3,9 99,5 14,1 95,9

И Р] Л-Бак х Л-Алмаз 4,2 105,8 14,7 100,0

12 р1 Л-Бак х Л-Солярис 3,1 78,0 12,2 83,0

13 Л-Бак х Л-Беглец 6,4 153,8 17,0 115,6

14 р1 Л-Алмаз х Л-Багратион 5,2 189,5 17,0 154,5

15 Р) Л-Алмаз х Л-Бак 1,1 26,8 6,7 45,6

16 Р( Л-Алмаз х Л-Солярис 2,0 289,9 12,1 295,1

17 Л-Алмаз х Л-Беглец 4,2 101,9 10,9 122,5

18 Р| Л-Солярис х Л-Багратион 3,5 128,3 12,1 110,0

19 Б) Л-Солярис х Л-Бак 4,5 114,9 13,3 90,5

20 Б) Л-Солярис х Л-Алмаз 2,7 391,3 9,8 239,0

21 Р) Л-Солярис х Л-Беглец 3,0 71,7 12,0 134,8

22 Л-Беглец х Л-Багратион 6,0 144,8 19,1 173,6

23 Р) Л-Беглед х Л-Бак 6,8 164,9 16,9 115,0

24 Л-Беглец х Л-Алмаз 5,1 124,2 16,1 180,9

25 Л-Беглец х Л-Солярис 4,2 102,2 8,9 100,0

По признаку «общая урожайность» наиболее высокий эффект гетерозиса был у гибридов с участием тех же линий - Л-Солярис и Л-Алмаз. Однако по абсолютному показателю они так же уступали гибридам, у которых эффект гетерозиса был ниже. В целом, 70% гибридов показали превышение по этому признаку над лучшей родительской линией.

Наиболее высокоурожайные гибриды были получены при скрещивании линий с высокими и средними показателями: Б) Л-Багратион х Л-Беглец, Л-Бак х Л-Беглец, Б] Л-Беглец х Л-Багратион, Б] Л-Беглец х Л-Бак. Урожайность их составила 16,9-19,1 кг/м2. Эффект гетерозиса при этом был 115,0 -160,9%.

По признаку «число плодов на растении» гетерозис был выраженным. Варьирование эффекта гетерозиса по признакам «общее» и «товарное число

плодов на растении» составило 101,0 - 160,1% и 102,2 - 246,9%, соответственно.

Таким образом, максимальные абсолютные значения, средний и высокий уровень эффекта гетерозиса проявлялись в скрещиваниях, соответствующих схеме высокий х средний или средний х средний уровень признака у родительских линий. Резко контрастные линии в скрещиваниях реже показывали высокий гетерозис и абсолютные значения признака. Однако, четких закономерностей проявления эффекта гетерозиса не наблюдалось.

По признаку «продолжительность периода «всходы-техническая спелость» набор родительских форм был достаточно однообразным. Линии, в результате скрещивания которых были получены более раннеспелые формы, не обладали существенно короткими межфазными периодами «всходы-цветение» и «цветение-созревание». Например, у наиболее раннеспелого гибрида Р] Л-Алмаз х Л-Солярис родительские линии проходили эти фазы за примерно одинаковый срок.

2. Комбинационная способность линий баклажана по количественным признакам

Оценка линий проведена по признакам урожайности (ранняя и общая), числу плодов на растении (общее и товарное) и продолжительности периода «всходы-техническая спелость».

При дисперсионном анализе оценка по критерию Р показала, что общая комбинационная способность (ОКС) оказывала существенное влияние на все признаки, но в значительной степени на раннюю и общую урожайность и число плодов на растении (общее и товарное); в меньшей степени на раннеспелость. Специфическая комбинационная способность (СКС) также оказывала существенное влияние на все изучаемые признаки, но в большей степени на число товарных плодов и общую урожайность. Кроме того, дисперсионный анализ выявил высокую долю эффекта ОКС, которая превосходила эффект СКС в 2-4 раза по всем изучаемым признакам, кроме признака «продолжительность периода «всходы-техническая спелость», где эффект СКС был выше эффекта ОКС почти в два раза.

Сравнение эффектов ОКС (&) показало, что они существенны по всем признакам. Л-Багратион и Л-Бак обладали существенной ОКС по таким важным признакам как «общая урожайность» и «число товарных плодов на растении». Л-Алмаз, обладая высокой ОКС по признаку «продолжительность периода «всходы-техническая спелость», отличалась существенно низкой ОКС по всем остальным признакам. Л-Беглец, обладая наибольшей ОКС по признакам «ранняя урожайность» и «общее число плодов на растении», уступала Л-Багратион и Л-Бак по признакам «общая урожайность» и «число товарных плодов на растении».

Не установлено четкой связи между уровнем ОКС и средним значением признака у исходных линий. Наблюдалось некоторое сходство между максимальными и минимальными значениями признака с уровнем ОКС по всем признакам, кроме признака «продолжительность периода «всходы-техническая спелость». Изучение варианс специфической комбинационной способности показало, что различия СКС по признаку «ранняя урожайность» несущественны. Наибольшей специфической комбинационной способностью по этому признаку обладала линия Л-Алмаз.

По признаку «общая урожайность» существенной максимальной СКС обладала только линия Л-Алмаз. Несколько меньше она была у Л-Багратион. У остальных изученных линий СКС по этому признаку была несущественной.

Вариансы СКС более контрастны по признаку «общее число плодов» и «число товарных плодов». Существенно высокой СКС по этим признакам обладала Л-Багратион, несколько меньше она была у Л-Алмаз.

По признаку «продолжительность периода «всходы-техническая спелость» существенно высокой СКС обладали две линии Л-Алмаз и Л-Солярис.

Анализ величин общей и специфической комбинационной способности показал, что ни одна линия не обладает существенными эффектами СКС и ОКС по всем изученным признакам (табл. 2).

Таблица 2

Сочетание высоких ОКС и СКС у линий баклажана по количественным __признакам (2009-2010 годы)_

Название линий Наличие (+) высокой ОКС и СКС по признакам

Урожайность Число плодов на растении Продолжительность периода «всходы-техническая спелость»

ранняя общая общее товарных

ОКС СКС ОКС СКС ОКС СКС ОКС СКС ОКС СКС

JI-Багратион + + + + + +

Л-Бак + + + + +

Л-Алмаз + + + + + +

Л-Солярис +

Л-Беглец + + + +

Сочетание в JI-Алмаз эффектов ОКС и СКС по признаку «продолжительность периода «всходы-техническая спелость» существенно сказывалось на раннеспелости гибридов с участием этой линии. Сочетание высоких эффектов СКС в Л-Алмаз и Л-Солярис позволило получить гибрид со значительной раннеспелостью - 80-85 суток. Эффект СКС по этому признаку проявляется только в том случае, если Л-Алмаз выступал в качестве материнского компонента в скрещиваниях. В то же время Л-Солярис, не обладая значительной ОКС по этому признаку, во всех остальных гибридных комбинациях не влияла на раннеспелость гибридов.

По другим признакам наблюдалась аналогичная закономерность. Так Л-Беглец, Л-Бак и Л-Багратион, обладая высокой ОКС по признакам «ранняя» и «общая урожайность» в гибридных комбинациях, показали положительные результаты - большинство высокоурожайных гибридов Fi были получены с участием этих линий. Особенно сильно действие ОКС проявилось в гибриде Fi Л-Беглец х Л-Багратион.

Результаты анализа линий по ОКС и СКС позволили отобрать линии с высокой комбинационной способностью, которые в дальнейшем могут послужить для создания высокогетерозисных гибридов Fi: Л-Багратион, Л-Бак могут использоваться для получения более высокоурожайных гибридов. Линия Л-Алмаз, обладая высокой ОКС и СКС по признаку «продолжительность периода

«всходы-техническая спелость», может быть использована для получения более раннеспелых гибридов, либо для создания популяций при селекции на раннеспелость.

3. Биохимический состав плодов баклажана

Оценка линий и гибридов Е) баклажана вида 3.те1оп£епа по содержанию фенольных соединений (флавоноиды и фенолкарбоновые кислоты) в мякоти плодов показала, что их суммарное содержание варьирует в пределах от 1,7 до 2,4% (табл. 3). У линий суммарное содержание фенольных соединений изменялось в пределах от 1,8 до 2,2%. Среди гибридов Б] наибольшее содержание суммарного количества фенольных соединений было у следующих гибридов: р1 Л-Беглец х Л-Солярис - 2,3%, Б] Л-Беглец х Л-Алмаз - 2,3%, Б] Л-Алмаз х Л-Беглец - 2,3%. У дикорастущих видов баклажана БмеЛюркит и Б.тасгосагроп общее содержание исследуемых фенольных соединений было в 1,5 раза выше, чем у 5. melongena - до 2,9 - 3%.

Содержание флавоноидов в исследованных нами гибридах Б] и линиях баклажана варьировало в пределах 0,7 - 1,1%. Виды Б.тасгосагроп и 8.аеХЫор1сит содержали большее количество флавоноидов: Б.аеМоркит - до 1,4%, Б-тасгосагроп - до 1,2%.

Общее содержание фенолкарбоновых кислот в линиях и гибридах Б] вида S.me¡ongena было 1,0-1,5%, Б.аеМоргсит -1,5%, Б.тасгосагроп - 1,8%.

Содержание нерастворимых пектинов в линиях и гибридах Р| S.melongena составило 0,27 - 0,63%, в Б.аеМоркит и Б.тасгосагроп оно было незначительно выше, чем у Б.теЬ^епа и составило 0,51 - 0,64%.

Хроматографический анализ качественного состава антоцианов показал, что для всех исследуемых линий и гибридов Б] характерно наличие одинакового качественного состава антоцианов в кожице плодов (рис. 2). Все пики имели одинаковое время удерживания и различались только площадью.

Определение химической структуры антоцианов в кожуре плодов линий и гибридов Б] показало, что основным антоцианом является дельфинидин-(6-кумароил)-3-глюкозид (рис. 3).

Таблица 3

Содержание фенольных соединений в мякоти плодов различных видов

№ № п/п Линия, гибридная комбинация Содержание фенольных соединений,% Содержание нерастворимых пектинов,0/»

Содержание анто-цианов в кожуре плодов Содержание ФКК в мякоти плодов Содержание флаво-ноидов в мякоти плодов Общее (4+5)

2 3 4 5 6 7

Линии и гибриды 8.те1оп$гпа

1 Р; Л-Багратион х Л-Бак 0,19 ±0,03 1,4 ±0,0 0,8 ± 0,0 2,2 0,48

2 Б] Л-Багратион х Л-Алмаз 0,17 ±0,02 1,2 ±0,0 0,7 ±0,1 1,9 0,45

3 р1 Л- Багратион х Л-Солярис 0,14 ±0,02 1,3 ±0,0 0,9 ±0,1 2,2 0,30

4 р1 Л-Багратион х Л-Беглец 0,12 ±0,02 1,2 ± 0,0 1,0 ±0,1 2,2 0,32

5 Р[ Л-Бак х Л-Багратион 0,15 ±0,06 1,4 ±0,0 0,7 ±0,1 2,1 0,35

6 Р] Л-Бак х Л-Алмаз 0,25 ± 0,03 1,4 ±0,0 0,7 ± 0,0 2,1 0,32

7 Р) Л-Бак х Л-Солярис 0,17 ±0,02 1,4 ±0,0 0,7 ±0,0 2,1 0,46

8 Л-Бак х Л-Беглец 0,13 ±0,01 1,0 ±0,0 0,7 ± 0,1 1,7 0,42

9 Р[ Л-Алмаз х Л-Багратион 0,12 ±0,02 1,0 ±0,0 0,8 ± 0,1 1,8 0,63

10 р1 Л-Алмаз х Л-Бак 0,19 ±0,04 1,2 ±0,0 0,7 ± 0,1 1,9 0,38

11 Р[ Л-Алмаз х Л-Солярис 0,33 ± 0,05 1,4 ±0,0 0,8 ±0,1 2,2 0,35

12 Л-Алмаз х Л-Беглец 0,14 ± 0,02 1,2 ± 0,0 1,1 ±0,0 2,3 0,45

13 Л-Солярис х Л-Багратион 0,16 ±0,00 1,4 ±0,0 0,8 ± 0,0 2,2 0,33

14 Р) Л-Солярис х Л-Бак 0,17 ±0,03 1,1 ±0,0 1,0 ±0,1 2,1 0,44

15 р! Л-Солярис х Л-Алмаз 0,22 ± 0,06 1,3 ±0,0 0,7 ±0,1 2,0 0,43

16 р1 Л-Солярис х Л-Беглец 0,09 ±0,02 1,5 ±0,0 0,7 ±0,1 2,2 0,40

17 Р] Л-Беглец х Л-Багратион 0,11 ±0,01 1,1 ±0,0 0,8 ± 0,0 1,9 0,40

18 И] Л-Беглец х Л-Бак 0,12 ±0,03 1,0 ±0,0 0,7 ± 0,0 1,7 0,27

19 р1 Л-Беглец х Л-Алмаз 0,18 ±0,02 1,4 ±0,0 0,9 ± 0,0 2,3 0,37

20 Л-Беглец х Л-Солярис 0,22 ± 0,03 1,3 ± 0,0 1,0 ± 0,0 2,3 0,40

21 Л-Беглец 0,11 ±0,02 1,1 ±0,0 0,7 ± 0,0 1,7 0,44

22 Л-Багратион ОД 8 ±0,02 1,3 ±0,0 0,9 ±0,1 2,2 0,46

23 Л-Бак 0,16 ±0,05 1,0 ±0,0 0,8 ±0,1 1,8 0,37

24 Л-Алмаз 0,12 ±0,05 1,0 ±0,0 0,8 ± 0,0 1,8 0,48

25 Л-Солярис 0,11 ±0,01 1,3 ±0,0 0,8 ±0,1 2,1 0,47

26 Л-Бриллиант 0,13 ±0,04 1,0 ±0,0 0,8 ±0,1 1,8 0,58

Дикорастущие виды

27 Б.аеЛюркит - 1,5 ±0,0 1,4 ±0,0 2,9 0,64

28 Б.тасгосагроп - 1,8 ± 0,0 1,2 ±0,1 3,0 0,51

IT тг To-

■arj тг

■i.........i.......

"1........4.........r

Retention Time (min)

10 11 12

Рис. 2. Разделение смеси антоцианов, содержащихся в кожуре плодов баклажана при 520 нм (анализ 23.06.10 г) (снизу вверх): Багира, Л-Багратион, Л-Бак, Л-Алмаз, Л-Солярис? Л-Беглец._

^^ЛЬфИ]

+MS2(611.5), 15.2min (#507) Intens. хЮ5

дельфинидин-

3-глюкозид дельфинидан-(6-кумароил)-

464 q 3-глюкозид

j 'У 611,5

паю пл

Рис. 3. Результаты определения химической структуры антоциана, содержащего в кожуре плодов Б.теЬщепа, на масс-детекторе (ТОР-МБ) (520 нм).

Количество антоцианов в кожуре плодов гибридов и линий варьировало в пределах 0,09 - 0,33% (табл. 3).

В пересчете на 1 кг плодов содержание антоцианов в линиях и гибридах составило в среднем 0,12 - 0,31 г/кг. 60% гибридов по этому признаку не превышали родительские линии. У 40% гибридов наблюдался эффект гетерозиса по данному признаку 105,6 -193,8%.

Более высокое содержание флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в дикорастущих видах баклажана говорит о необходимости вовлечения их в селекционный процесс, для повышения содержания их в селекционных образцах.

4. Разработка методики клонального микроразмножения

Одним из методов преодоления межвидовых барьеров является эмбрио-культура, однако в основе всех биотехнологических методов лежит клональное микроразмножение.

При подборе оптимальных сред для инициации каллусообразования использовали 7 вариантов сред. В качестве основной среды использовали среду Мурасиге и Скуга (MC) (Murashige, Skoog, 1962) с добавлением регуляторов роста: 0,2 мг/л TflZ; 0,02 мг/л TflZ; 0,2 мг/л БАП; 2,0 мг/л БАП; 2,0 мг/л НУК; 0,2 мг/л кинетина; 2,0 мг/л кинетина.

Через 3-4 недели экспланты наиболее интенсивно развивались на среде с добавлением 0,02 мг/л и 0,2 мг/л TflZ. У 100% эксплантов семядолей формировался плотный темно- и светло-зеленый каллус с множеством почек (3-30 шт./эксплант). У 80-90% эксплантов начинали развиваться микророзетки. Для 90-100% эксплантов гипокотиля было характерно образование белого рыхлого каллуса с почками, побеги чаще формировались в верхней части гипокотиля. Незначительное число почек и побегов развилось в вариантах с регулятором роста БАП (0,2 и 2,0 мг/л) и НУК (2,0 мг/л). Единичные побеги образовывались на среде с 0,2 мг/л кинетина на эксплантах гипокотиля. Экспланты не развивались на средах с 2,0 мг/л кинетина.

Подсчет числа почек и побегов у эксплантов сорта Снежный через 15 суток после введения в культуру in vitro показал, что наибольшее их число образовалось на каллусе семядолей в варианте с 0,02 мг/л TJJZ - 39,9 шт./эксплант и 13,9 шт./эксплант, соответственно. В варианте с 0,2 мг/л Тда образовывалось 17,2 шт./эксплант почек и 9,1 шт./эксплант побегов.

В связи с тем, что большинство почек не тронулись в рост даже через 28 суток после начала культивирования, возникла необходимость в переносе почек с каллусом на регенерационные среды. Для этих целей использовали среду MC с пониженной концентрацией Тда в комбинации с БАП, так как ТД2 в высоких концентрациях вызывает витрификацию и значительно снижает процент укоренившихся побегов (Magioli et al,, 1998а, Franklin et al., 2004).

Через 15 суток наибольшее число почек каллуса семядолей развивалось при переносе с индукционной среды, содержащей 0,2 мг/л ТД2, на регенераци-онные среды, содержащие 0,01 мг/л ТДг + 0,01 мг/л БАП и 0,01 мг/л ТДг, -39,2 шт./эксплант и 38,8 шт./эксплант, соответственно (табл. 4, рис. 4а). При переносе с индукционной среды, содержащей 0,02 мг/л ТД2, развивалось в среднем 17-17,6 шт./эксплант. В остальных вариантах число побегов было незначительное.

Таблица 4

Число побегов (шт./эксплант) баклажана (S.melongena, сорт Снежный), развившихся на каллусе семядолей на регенерационных средах (через 15 суток), (2009 год)

Регулятор роста, мг/л в регенера-ционной среде Индукционная среда (регулятор роста, мг/л)

0,2 тдг 0,02 тдг 0,2 БАП 2,0 НУК

0,01 тда + 0,01 БАП 39,2±3,6 17,6±2,1 1,7±2,8 0,2±0,4

0,01 тдг 38,8±2,8 17,0±3,8 5,1±2,6 0,0±0,0

Безгормональная 10,0±6,3 5,8±2,9 1,8±1,6 0,0±0,0

Рис. 4. Образование почек и развитие побегов баклажана (Б. те1ощепа -сорт Снежный) на различных эксплантах, культивируемых на среде МС с добавлением 0,02 мг/л тидиазурона; а - образование почек и развитие побегов на семядольном экспланте, б - побегообразование из участка гипокотиля.

Важным этапом работы был подбор среды для укоренения полученных побегов. Так как в эксперименте для регенерации использовались сниженные концентрации тидиазурона, побеги, развившиеся из почек каллуса семядолей, укоренялись с частотой 85% после двукратной пересадки на среду МС половинным содержанием основных компонентов ('Л МС) без добавления регулято-

ров роста с интервалом полторы-две недели. На среде МС без добавления регуляторов роста укоренение шло с частотой 76%.

Почки и микророзетки из почек рыхлого каллуса гипокотиля, через две недели культивирования на регенерационных средах были слабо развиты, поэтому их отделяли от каллуса и повторно высаживали на аналогичные среды (0,01 мг/л тдг и 0,01 мг/л Тда + 0,01 мг/л БАП) для пролонгации. Через две недели наблюдалось развитие побегов 0,5 - 2,0 см длиной (рис. 46).

Для укоренения и снижения витрификации полученные побеги отделяли от каллуса и дважды (с интервалом 14 суток) пересаживали на среду МС и МС без добавления регуляторов роста. Исключение регуляторов роста на этом этапе позволило снизить степень эндогенных цитокининов и, тем самым, уменьшить процент витрифицированных растений. Через 30 суток на среде 1Л МС побеги укоренялись с частотой 78%, на среде МС - 66% (табл. 5, рис. 5а, б).

После акклиматизации полученные растения не имели отклонений по фенотипу и аномалий развития.

Таблица 5

Результаты укоренения побегов баклажана (5.те\ощепа, сорт Солярис), полученных из каллуса гипокотиля, на индукционных средах с добавлением 0,2 и

0,02 мг/л ТД2 (2009 год)

Сутки Число розеток, шт.

общее погибших укоренившихся общее погибших укоренившихся

MS '/2 MS

15 Всего 50 2 12 50 5 26

% 4 24 10 52

30 Всего 50 5 33 50 9 39

% 10 66 18 78

Таким образом, лучшей для введения эксплантов сортообразцов Солярис и Снежный в культуру in vitro была среда Мурасиге и Скуга с добавлением ТД£ концентраций 0,02 и 0,2 мг/л. Для регенерации побегов оптимальными были среды с уменьшенной концентрацией тидиазурона (0,01 мг/л ТДХ и 0,01 мг/л ТД7 +0,01 мг/л БАП). Укоренение побегов происходило лучше на среде 54 МС.

Рис. 5. Укоренение побегов баклажана (S. melongena - сорт Солярис) на среде МС с половинной концентрацией компонентов без регуляторов роста: 1 -начало укоренения, 2 - укоренившиеся побеги, готовые к посадке in vivo.

Полученные данные позволяют говорить о том, что тидиазурон является перспективным регулятором роста при использовании его для культуры тканей баклажана.

5. Разработка методики культивирования in vitro зародышей межвидовых

гибридов

После определения регулятора роста, на который ткани баклажана имели хороший отклик, была начата разработка методики эмбриокультуры. Важным при этом является знание стадий и динамики развития исходных видов и межвидовых гибридов. В исследовании учитывали 5 стадий развития: глобулярный эмбриоид, сердечковидный эмбриоид, торпедовидный эмбриоид, почти сформировавшийся зародыш, сформировавшийся зародыш (рис. 6).

Рис. б. Стадии развития зародышей представителей рода Solanum L (,S.melongena, S.aethiopicum, S.macrocarpon): 1 - глобулярный эмбриоид; la -глобулярный эмбриоид с зародышевым мешком; 2 - сердечковидный эмбриоид; 3 - торпедовидный эмбриоид; 4 - почти сформировавшийся зародыш; 5 -сформировавшийся зародыш.

Наиболее быстро развитие зародыша шло у вида S.aethiopicum - зародыш

формировался на 30 сутки после опыления, а все учитываемые стадии развития

проходили за 10-12 суток. У S.melongena зародыш полностью формировался на

40, а у S.macrocarpon - на 45 сутки после опыления (табл. 6).

Таблица 6

Динамика и стадии развития зародышей у представителей рода Solanum L. _(S.mefongena, S.aethiopicum, S.macrocarpon) (2009 год)_

Вид Время после опыления, сутки Размер зародышей (длина), мм Стадия развития зародыша

S.melongena (JI-Алмаз, Л-Бриллиант) 20 0,032±0,001 глобулярный эмбриоид

23 0,10±0,01 сердечковидный эмбриоид

27 0,60±0,06 торпедовидный эмбриоид

31 1,20±0,06 торпедовидный эмбриоид

35 3,80±0,09 почти сформировавшийся зародыш

40 4,30±0,09 сформировавшийся зародыш

£ aethiopicum 20 0,080±0,007 глобулярный - сердечковидный эмбриоид

25 2,2±0,3 торпедовидный эмбриоид - почти сформировавшийся зародыш

30 4,10±0,05 сформировавшийся зародыш

S.macrocarpon 20 0,070±0,005 глобулярный эмбриоид

25 0,15±0,03 сердечковидный эмбриоид

30 1,1±0,1 торпедовидный эмбриоид

35 1,8±0,2 торпедовидный эмбриоид

40 3,9±0,2 почти сформировавшийся зародыш

45 4,5±0,1 сформировавшийся зародыш

Скорость прохождения учитываемых фаз у межвидовых гибридов отличалась от скорости развития зародышей у исходных видов. В гибридах с аеШоркит (в качестве отцовского компонента), зародыши развивались быстрее, а у гибридов с Б.теЪщепа (в качестве отцовского компонента) развитие зародышей шло более медленно. В гибридах с Я.тасгосагроп в качестве отцовского компонента такого эффекта не наблюдалось. Размеры зародышей у межвидовых гибридов не имели значительных отличий от размеров у родительских линий.

Для культивирования недозрелых зародышей основополагающим является состав питательной среды для индукции развития зародышей после изоляции. При подборе среды использовалась среда МС с добавлением двух регуляторов роста: тидиазурона (ОД мг/л) и НУК (10 мг/л).

Развитие зародышей после высадки на среды имело общие закономерности. У всех трех видов и межвидовых гибридов видов развитие у 20-суточных зародышей не наблюдалось. 25-30-суточные зародыши на среде с 0,1 мг/л ТД2 развивались в нормальные растения только у вида 5. аеШоркит и межвидовых гибридов с его участием. У видов с 5". те1ощепа и З.тасгосагроп и полученных

с их участием межвидовых гибридов - начиная с 35-суточного возраста. На среде с 0,1 мг/л ТД7. зародыши через 1,5-2 недели развивали нормальные семядоли (рис. 7).

рйЩр!

Р Я" Г««. , ______

щШЦ^Ш

1111

Рис. 7. Развитие зародышей (возраст 35 суток) гибрида 5. теЬщепа (Л-Бриллиант) х аеМоргсит после посадки на индукционную среду МС + 0,1 мг/л ТД2.

На среде с добавлением 10 мг/л НУК зародыши в возрасте 20-25 суток не развивались. 30-40-суточные зародыши в большинстве комбинаций развивались очень слабо - на них образовывался белый рыхлый каллус и ненормально развитые семядоли, без точки роста и корней или, наоборот, с мощным главным корнем без придаточных корешков (рис. 8а, б).

Рис. 8. Развитие зародышей (возраст - 35 суток) гибрида 5. те1ощепа (Л-Бриллиант) х ае(Ыор1сит после посадки на индукционную среду МС + 10 мг/л НУК: а - через 4-5 суток после начала культивирования, б - через 10-14 суток.

Зародыши комбинации З.тасгосагроп х 5. аеМоркит для культивирования получить не удалось. Плоды не завязывались или формировались очень мелкие и без семян.

Учет выживаемости показал, что в большинстве комбинаций у зародышей в возрасте 20-25 суток (глобулярный - торпедовидный эмбриоид) она была низкой (0-10%) на обеих средах (табл. 7). У зародышей возрастом 30-40 суток

(торпедовидный эмбриоид - полностью сформировавшийся зародыш) частота выживаемости была на уровне 50-100%.

Через 1,5-2 недели зародыши с развившимися семядольными листочками пересаживали на среду Уз МС для укоренения.

Таблица 7

Выживаемость зародышей межвидовых гибридных комбинаций баклажана на индукционной среде через 2 недели после введения в культуру in vitro (среда _МС с добавлением регуляторов роста) (2009 год)

Гибрид Сутки после опыления Выживаемость,%

0,1 мг/л тд Z 10 мг/л НУК

S.macrocarpon х S.melongena (Л-Бриллиант) 25 0 0

30 100 50

35 100 100

40 50 100

S.aethiopicum х S.melongena (Л-Бриллиант) 20 10 0

25 90 0

30 100 100

35 60 50

S.melongena (Л-Бриллиант) х S.aethiopicum 20 0 0

25 0 0

30 100 100

35 100 100

S.melongena (Л-Бриллиант) х S.macrocarpon 25 0 0

30 100 100

35 100 100

40 100 100

S.aethiopicum х S.macrocarpon 20 0 0

25 0 0

30 60 60

40 80 100

Среднее 57,5 53

В среднем процент укоренившихся и пригодных к пересадке в почву растений составил 69% для зародышей, развивавшихся на среде с добавлением 0,1 мг/л Тда и 9,6% на среде с добавлением 10 мг/л НУК. Процент укоренения зародышей возрастом 35 и более суток в большинстве комбинаций был выше 80%.

6. Оценка полученных родительских форм и межвидовых гибридов по морфологическим признакам, биометрическим и биохимическим показателям

В 2009-2010 годах проведено изучение полученных межвидовых гибридов баклажана по комплексу биометрических, морфологических показателей и содержанию фенольных соединений (табл.8,9).

Таблица 8

Биометрическая характеристика видов и межвидовых гибридов баклажана рода Solanum 1.(2009-2010 годы)

№№ п/п Вид, гибридная комбинация Длина междоузлия, см Параметры листа Параметры плода

Длина, см Ширина, см Длина черешка, см Диаметр, см Масса, г

1 S.melongena 13,2 ± 1,3 36,6 ±1,5 27,3 ± 1,4 13,8 ±0,6 7,3±0,9 174,6±5,8

2 S.macrocarpon 6,5 ± 0,8 38,3 ±1,7 28 ±1,5 3,9 ± 0,4 3,2±0,2 26,9±2,5

3 S.aethiopicum 11,0 ±0,9 35,3 ± 1,3 26,4 ± 1,2 12,5 ±0,4 3,7±0,3 44,4±3,6

4 S.macrocarpon x S.melongena (Л-Бриллиант) 2,3 ± 0,6 16,6 ±2,4 9,2 ± 1,6 6,0 ± 0,5 2,7±0,3 25-35

5 S.melongena (Л-Бриллиант) x S.macrocarpon 1,7 ±0,3 14,4 ±0,9 7,5 ±0,4 5,8 ±0,3 3,2±0,2 25-35

6 S.melongena (Л-Бриллиант)x S.aethiopicum 8,5 ± 0,9 32,0 ±2,7 27,2 ± 3,4 12,4 ±0,9 2,6±0,1 25-30

7 S.aethiopicum x S.melongena (Л-Бриллиант) 7,9 ± 0,5 39,4 ±2,0 33,1 ±2,3 13,4 ±0,5 4,1±0,1 30-50

8 S.aethiopicum x S.macrocarpon 2,5 ±0,2 11,4 ±1,3 6,9 ±0,9 2,8 ±0,2 1,7±0,1 4-6

Установлено, что гибриды первого поколения в основном наследуют при-

знаки дикорастущих видов по таким признакам как форма, размер, масса плода. У ряда комбинаций проявлялись шипы, которые отсутствовали у родительских форм.

По таким признакам как габитус растения, форма листа и опушенность, наследование зависело от гибридной комбинации. Закономерностью является лишь то, что как прямые, так и обратные гибриды диких видов с S.melongena по основным морфологическим признакам и биометрическим показателям являются довольно схожими, что, предположительно, говорит о более сильной экспрессии генов диких видов в межвидовых гибридах.

Фертильность пыльцы межвидовых гибридов была на уровне 23 - 33%. Наиболее высокой она была у межвидового гибрида Р] Б.тасгосагроп х Б.теЪщепа (Л-Бриллиант) - 32,9%.

Таблица 9

Морфологические признаки различных видов и межвидовых гибридов бакла-

№№ п/п Вид, гибридная комбинация Высота растения, см Окраска цветка Характеристики плода

Форма Окраска в технической спелости Окраска в биологической спелости

1 S.melongena 250-300 сиреневый цилиндрический темно-фиолетовая светло-фиолетовая

2 S.macrocarpon 160-220 темно-сиреневый округлый желтая желтая

3 S.aethiopicum 200-270 белый овальный светло-красная красная

4 S.macrocarpon x S.melongena (Л-Бриллиант) 16-20 темно-сиреневый округлая, слегка удлиненная желто-зеленая желтая

5 S.melongena (Л-Бриллиант)x S.macrocarpon 13-18 темно-сиреневый округлая, слегка удлиненная светло-серая, лиловая желтая

6 S.melongena (Л-Бриллиант)x S.aethiopicum 180-190 белый округлая, овальная желтая оранжевая

7 Saethiopicum x S.melongena (Л-Бриллиант) 30-35 белый овальная, яйцевидная желтая оранжевая

S S.aethiopicum x S.macrocarpon 30-55 светло-сирененвый округлая светло-оранжевая оранжевая и красно-оранжевая

Гибридность полученных в ходе межвидовых скрещиваний растений баклажана была также подтверждена с помощью ПЦР-анализа с использованием ISSR и IRAP праймеров. В спектрах амплифицированных ISSR- и IRAP-фрагментов индивидуальных растений Fi были выявлены как отцовские, так и материнские компоненты (рис. 9).

По результатам проведенного молекулярного анализа трех гибридных комбинаций была подтверждена гибридная природа всех индивидуальных растений F| полученных с использованием метода эмбриокультуры in vitro.

Биохимический анализ мякоти плодов межвидовых гибридов баклажана показал, что суммарное содержание флавоноидов и фенолкарбоновых кислот составило 2,6 - 2,7%, что в 1,5 раза выше по сравнению с родительским видом S.melongena (Л-Брнллиант). В межвидовых гибридах количество флавоноидов было в 1,3 раза выше по сравнению с родительским видом S.melongena (Л-Бриллиант) (табл. 10).

Рис 9. Электрофореграмма продуктов ПЦР-амплификации с помощью IS SR (А и Б) и IRAP (В) праймеров у трех родительских форм баклажана (S. rnelongena, S. aethiopicum и S. integrifolium) и их межвидовых гибридов Fi. М -маркер молекулярных масс (GeneRuler, 100 bp DNA Ladder, "Fermentas", Литва).

Таблица 10

Содержание фенольных соединений в мякоти плодов межвидовых гибридов _баклажана (2010 - 2011 годы)_

Линия, гибридная комбинация Содержание фенольных соединений,% Содержание нерастворимых пектинов,%

Содержание анто-дианов в кожуре плодов Содержание ФКК в мякоти плодов Содержание флаво-ноидов в мякоти плодов Общее (4+5)

2 3 4 5 6 7

S.aethiopicum х S.melongena (Л-Бриллиант) - 1,7 ±0,0 0,9 ± 0,0 2,6 0,57

S.aethiopicum х S.melongena (Л-Алмаз) - 1,6 ±0,0 1,0 ±0,0 2,7 0,56

S.melongena (Л-Бриллиант) х S.macrocarpon - 1,6 ±0,0 1,1 ± 0,0 2,7 0,58

Содержание фенолкарбоновых кислот в межвидовых гибридах F¡ соста-

вило 1,6 - 1,7%, что в 1,6-1,7 раза больше по сравнению с родительским видом S. rnelongena (Л-Бриллиант). По содержанию пектинов межвидовые гибриды незначительно отличались от исходных родительских видов и их содержание было промежуточным по отношению к ним.

Выводы

1. Показано, что раннеспелость гибридных комбинаций (80-85 суток) зависит от сочетаний высоких эффектов ОКС и СКС у родительских линий.

По количественным признакам, определяющим урожайность гибридных комбинаций Fi по проявлению эффекта гетерозиса, закономерности не наблюдается.

2. Основным антоцианом линий и гибридных комбинаций Fi селекции ВНИИССОК является дельфинидин-(6-кумароил)-3-глюкозид, который ранее не был выявлен в баклажане. Содержание антоцианов в плодах родительских линий составляет 0,12-0,18 г/кг плодов, в гибридных комбинациях - 0,14 - 0,31 г/кг. По данному признаку у 40% гибридных комбинаций F] наблюдается эффект гетерозиса 105,6 - 193,8%.

3. Изучение морфогенетических реакций in vitro разных типов эксплантов показало, что наибольшей регенерационной активностью обладают семядольные экспланты, которые могут найти широкое применение для массового получения регенерантов баклажана на среде Мурасиге и Скуга с добавлением низких концентраций тидиазурона (0,02 - 0,2 мг/л TflZ).

4. На основе изучения динамики развития зародышей видов S.melongena L., S.macrocarpon L., S.aethiopicum L. и их гибридов установлено, что зародыши проходят основные стадии развития (от глобулярного эмбриоида до полностью сформировавшегося зародыша) в промежутке 20 - 45 суток после опыления. Наиболее быстрое развитие зародыша наблюдается у вида S.aethiopicum -за 30 суток, у S.melongena — за 40 суток, у S.macrocarpon - за 45 суток. Скорость развития зародышей межвидовых гибридов незначительно отличается от скорости развития зародышей родительских видов.

5. Предложены элементы технологии получения межвидовых гибридов баклажана методом эмбриокультуры, состоящие из условий стерилизации семян, стадий развития зародышей, составов питательных сред для индукции, регенерации побегов, укоренения растений-регенерантов.

6. В межвидовых гибридных комбинациях баклажана в большей степени проявляются морфологические и биометрические признаки генеративных органов дикого вида. Показано, что прямые и обратные комбинации являются схо-

жими по основным признакам (габитус растения, форма, размер и масса цветка и плода).

Фертильность пыльцы всех межвидовых гибридов, полученных при скрещивании Б.теЬщепа Ь., Б.тасгосагроп Ь. и Б.аеШоркит Ь. не превышает 30-35%. Все плоды партенокарпические. Семена образуются только при опылении пыльцой культурного вида 5". теЪ^епа.

7. Содержание флавоноидов в межвидовых гибридных комбинациях в 1,3 раза, фенолкарбоновых кислот - в 1,6-1,7 раза выше, чем у вида Б.те1о^епа.

Рекомендации к практическому использованию в селекции

1. Для получения перспективных гибридов Рь отличающихся высокой урожайностью, можно использовать линии Л-Багратион, Л-Бак и Л-Беглец, раннеспелостью - линию Л-Алмаз.

3. Для клонального микроразмножения селекционно ценных форм баклажана отечественных сортов использовать среду Мурасиге и Скуга с добавлением 0,02 и 0,2 мг/л Тда. Для регенерации побегов рекомендуется использовать среды с уменьшенной концентрацией тидиазурона (0,01 мг/л ТДг и 0,01 мг/л ТД2 + 0,01 мг/л БАЛ). Для укоренения побегов, развившихся из почек каллуса семядолей и гипокотиля - среду Мурасиге и Скуга с половинным содержанием основных компонентов без добавления регуляторов роста.

4. Для получения межвидовых гибридов баклажана культивировать незрелые зародыши на стадии торпедовидного эмбриоида (> 2 мм) и более поздних (возраст >30 суток с момента опыления) на среде Мурасиге и Скуга с добавлением 0,1 мг/л ТДг. Срок развития зародышей на индукционной среде не должен превышать 7-14 суток. Для укоренения оптимальна среда Мурасиге и Скуга с половинным содержанием основных компонентов без добавления регуляторов роста.

5. Линии Л-Алмаз и Л-Солярис можно использовать как исходный материал для получения форм с высоким содержанием антоцианов в кожуре плодов баклажана.

6. Для получения форм с высоким содержанием фенольных соединений в мякоти плодов использовать межвидовые гибридные комбинации Б.аеЫорхсит х 8.те1ощепа (Л-Бриллиант), Б.аеШоркит х S.melongena (Л-Алмаз), Б.теЬщепа (Л-Бриллиант) х Б.тасгосагроп.

1. Верба В.М. Антоцианы в плодах баклажана селекции ВНИИССОК/ М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, H.A. Шмыкова, В.М. Верба, Передеряев О.И.// Фенольные соединения: фундаментальные и прикладные аспекты. - М.: Научный мир, 2010. - с. 135-144.

2 Верба В.М. Клональное микроразмножение баклажана / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, H.A. Шмыкова // Доклады ТСХА. - М: РГАУ-МСХА. - 2010. - Вып. 282. - Ч. 1. - с. 603 - 607.

3. Верба В.М. Содержание антоцианов в плодах линий баклажана селекции ВНИИССОК в условиях малообъемной гидропоники / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, H.A. Шмыкова // Овощи России. - 2009. - № 3. - с.37-

4. Верба В.М. Культурный баклажан - происхождение, задачи селекции и генетические источники / М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, В.М. Верба // Овощи России.-2009.-№4(6).- 2010,- № 1 (7) .-с.27-33.

5. Верба В.М. Получение межвидовых гибридов баклажана методом эм-бриокультуры / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, H.A. Шмыкова // Сельскохозяйственная биология. - 2010.- №5.- с.66-71.

6. Верба В.М. Клональное микроразмножение баклажана путем органогенеза / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, H.A. Шмыкова // Вестник РАСХН. - 2010. - № 6. - с.57-59.

7. Верба В.М. Определение количественного состава антоцианов в плодах баклажана (S. melongenä) селекции ВНИИССОК / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, H.A. Шмыкова // Доклады ТСХА. - М: РГАУ-МСХА, 2011 (в печати).

Список научных публикаций

42.

Подписано в печать 11.05.2011 г.

Формат 60/84 1x16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. п. л. 1,625 Тираж 100 экз. Заказ №П-126

Типография «Телер» 125130, Москва, ул. Клары Цеткин д.ЗЗ кор.50 Тел.: (495) 937-8664

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Верба, Вадим Михайлович

Введение

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Происхождение и народно-хозяйственное значение баклажана

Solanum melongena L.)

1.2. Задачи и проблемы селекции баклажана.

1.3. Использование межвидовой гибридизации в селекции баклажана

1.4. Трудности, возникающие при межвидовой гибридизации баклажана

1.5. Использование биотехнологических методов в селекции баклажана

1.5.1. Использование эмбриокультуры для преодоления межвидовых барьеров при гибридизации

1.5.2. Клональное микроразмножение баклажана

1.6. Биохимический состав плодов баклажана

1.6.1. Полифенольные соединения

1.6.2. Пектиновые вещества

2. УСЛОВИЯ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКИ ПРОВЕДЕНИЯ ОПЫТОВ

2.1. Задачи и цель исследований

2.2. Условия проведения исследований

2.3. Материал и методика проведения исследований

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. Оценка эффекта гетерозиса у баклажана по количественным признакам

3.2. Комбинационная способность линий баклажана по количественным признакам

3.3. Оценка плодов баклажана по биохимическим показателям

3.4. Разработка методики клонального микроразмножения

3.5. Разработка методики культивирования in vitro зародышей межвидовых гибридов

3.6. Оценка полученных межвидовых гибридов по морфологическим признакам, биометрическим и биохимическим показателям

3.6.1. Морфологическая и биометрическая характеристика родительских форм

3.6.2. Морфологическая и биометрическая характеристика межвидовых гибридов

3.6.3. Фертильность межвидовых гибридов

3.6.4. Подтверждение гибридности при помощи ПЦР

3.6.5. Биохимический анализ полученных гибридов 118 Выводы 119 Рекомендации по практическому использованию в селекции 120 Список использованной литературы 122 Приложение

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Разработка элементов технологии, направленной на расширение генетического разнообразия баклажана при селекции на качество"

Актуальность темы. В настоящее время проблема селекции сортов и гибридов Р] баклажана с различными параметрами, удовлетворяющих требования производства и потребителей, стоит очень остро. Динамичное развитие общества приводит к увеличению требований потребителей как к качеству и разнообразию продукции, так и к ее объемам. В связи с этим у производителей сельскохозяйственной продукции возникают соответствующие требования к селекционным достижениям, в первую очередь направленные на повышение урожайности и качества продукции (в т.ч. высокое содержание биологически активных веществ (БАВ)). В условиях современного рынка потребительский спрос постоянно растет и меняется, это создает необходимость в наличии у селекционера генотипически разнообразного исходного материала, наличие которого позволит быстро удовлетворять требования современного производства в короткие сроки и создавать линии с высокой комбинационной способностью для селекции на гетерозис.

В связи с этим создание генотипически разнообразного исходного материала с использованием межвидовой гибридизации и разработка методов биотехнологии, способствующих решению ряда проблем при его создании, являются актуальными. Это позволит расширить спектр поиска ценных селекционных форм, повысить эффективность выявления линий с высокими комбинационной способностью и содержанием БАВ для селекции высокоурожайных сортов и гибридов Б] баклажана с широкой нормой реакции к условиям различных культивационных сооружений и открытого грунта.

Научная новизна работы. Впервые выявлены различия по содержанию фенольных соединений (антоцианы, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты) и пектиновых веществ в отечественных сортах и гибридах, полученных на основе внутри- и межвидовой гибридизации. Установлено, что основным антоцианом кожуры плодов баклажана является дельфинидин-(6-кумароил)-3~глюкозид. Показано, что образцы Б.тасгосагроп, З.аеШоржит превосходят по содержанию флавоноидов и фенолкарбоновых кислот сортообразцы 8.те1о^епа.

Разработана методика клонального микроразмножения отечественных сортов баклажана.

Впервые разработана методика эмбриокультуры с использованием ти-диазурона и получены новые генотипы растений на основе межвидовой гибридизации, расширяющие спектр генотипической изменчивости: 8.те1о^епа х 8.тасгосагроп, S.melongena х З.аеМоргсит, &тасгосагроп х 51.melongena^ ^.аеШоргсит х 8.те1ощепа, З.аеШортит х 5.тасгосагроп.

Установлены различия в динамике развития зародышей у разных видов баклажана и их гибридов.

Практическая значимость. Выделены селекционно ценные линии с высокой комбинационной способностью и содержанием фенольных соединений. Полученный в результате исследований исходный селекционный материал может быть использован для создания сортов и гибридов Р) с высоким содержанием БАВ.

Обоснование и достоверность научных положений. Исследования выполнены по методикам, рекомендованным научными учреждениями страны. Все выводы и предложения подтверждены экспериментальными исследованиями, статистической обработкой полученных данных. у Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- оценка комбинационной способности линий баклажана по комплексу хозяйственно ценных признаков;

- межвидовая гибридизация баклажана для расширения спектра генотипической изменчивости;

- разработка биотехнологических средств для селекции баклажана.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на

185 страницах, состоит из введения, 3 глав, выводов, предложений для использования в селекционной практике, списка использованной литературы, содержащего 405 наименований, в том числе 348 иностранных автора, приложения, иллюстрирована 40 таблицами, 32 рисунками.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Верба, Вадим Михайлович

Выводы

1. Показано, что раннеспелость гибридных комбинаций (80-85 суток) зависит от сочетаний высоких эффектов OKG и СКС у родительских линий.

По, количественным признакам, определяющим урожайность, гибридных комбинаций Fi по проявлению эффекта гетерозиса, закономерности не наблюдается.

2. Основным,антоцианом линий и гибридных комбинаций Fi селекции. ВНИИССОК является* дельфинидин-(6-кумароил)-3-глюкозид, который ранее не был выявлен в баклажане. Содержание антоцианов в плодах родительских линий составляет 0,12-0,18 г/кг плодов^ в гибридных комбинациях — 0,14 - 0,31 г/кг. По данному признаку у 40% гибридных комбинаций Fi наблюдается эффект гетерозиса 105,6 - 193,8%.

3. Изучение морфогенетических реакций ш vitro разных типов эксплан-тов показало, что наибольшей регенерационной активностью обладают семядольные экспланты, которые могут найти широкое применение для массового получения регенерантов баклажана на среде Мурасиге и Скуга с добавлением низких концентраций тидиазурона (0,02 - 0,-2'мг/л TДZ).

4. На основе изучения динамики развития зародышей видов S.melongena L., S.macrocarpon L., S.aethiopicum L. и их гибридов установлено, что зародыши, проходят основные стадии развития-(от глобулярного эмбриоида до полностью сформировавшегося зародыша) в промежутке 20 — 45 суток после опыления. Наиболее быстрое развитие зародыша наблюдается у вида S.aethiopicum — за 30 суток, у S.melongena — за 40 суток, у S.macrocarpon - за 45 суток. Скорость развития зародышей межвидовых гибридов незначительно отличается от скорости развития зародышей родительских видов.

Фертильность пыльцы всех межвидовых гибридов, полученных при скрещивании S.melongena L., S.macrocarpon L. и S.aethiopicum L. не превышает 30-35%. Все плоды партенокарпические. Семена образуются только при опылении пыльцой культурного вида S. melongena.

7. Содержание флавоноидов в межвидовых гибридных комбинациях в 1,3 раза, фенолкарбоновых кислот — в 1,6-1,7 раза выше, чем у вида S.melongena.

Рекомендации к практическому использованию в селекции

1. Для получения перспективных гибридов Fi, отличающихся высокой урожайностью, можно> использовать < линии* Л-Багратиощ Л-Бак и Л-Беглец, раннеспелостью - линию Л-Алмаз.

3. Для клонального микроразмножения селекционно ценных форм баклажана отечественных сортов использовать среду Мурасиге и Скуга с добавлением 0,02 и 0,2 мг/л TJ\Z. Для регенерации побегов рекомендуется использовать среды с уменьшенной концентрацией тидиазурона (0,01 мг/л TJJZ и 0,01 мг/л ТД2 + 0,01 мг/л БАП). Для укоренения побегов, развившихся из почек каллуса семядолей и гипокотиля - среду Мурасиге и Скуга с половинным содержанием основных компонентов без добавления регуляторов роста.

4. Для получения межвидовых гибридов баклажана культивировать незрелые зародыши на стадии торпедовидного эмбриоида (> 2 мм) и более поздних (возраст >30 суток с момента опыления) на среде Мурасиге и Скуга с добавлением ОД мг/л ТД£. Срок развития зародышей на индукционной среде не должен превышать 7-14 суток. Для укоренения оптимальна среда Мурасиге и Скуга с половинным содержанием основных компонентов без добавления регуляторов роста.

6. Для получения форм с высоким содержанием фенольных соединений в мякоти плодов использовать межвидовые гибридные комбинации 8.аеШор1сит х 8.те1о^епа (Л-Бриллиант), 8.ае1Ыор1сит х 8.те1ощепа (Л-Алмаз), 8.те1ощепа (Л-Бриллиант) х 8.тасгосагроп.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Верба, Вадим Михайлович, Москва

1. Авдеев Ю.И., Кигашпаева О.П., Алексеева B.C. Селекция баклажана на гетерозис// Международный симпозиум по гетерозису с/х растений (Материалы докладов 1-5 декабря 1997) . — М., 1997. С. 85-86.

2. Аветисов В.А. Биотехнологические основы расширения генетического разнообразия картофеля: Автореф. дис. . д-ра биол наук. — М., 1997. — 46 с.

3. Алпатьев A.B. Перцы и баклажаны. М., 1952, - 80с.

4. Анисимова Д. М. Пищевые волокна в рациональном питании человека: Сб., научн. тр. М., 1989. - С.90-93.

5. Атанасов А.И. Биотехнология в растениеводстве. — Новосибирск: ИЦиГ СО РАН, 1993.-242 с.

6. Батыгина Т.Б., Васильева В.Е. Размножение растений.- СПб.: Изд-во.СПб: ун-та, 2002.- 230 с.

7. Биотехнология растений: культура клеток / Пер. с англ. В.И. Негрука. // Болвелл Г.П., Вуд K.P., Гонзалес P.A. и др. М.: Агропромиздат, 1989.280 е.: ил.

8. Бухаров А.Ф., Бухарова А.Р Генетический потенциал диких сородичей баклажана и перспективы вовлечения их в селекционный процесс// Селекция и семеноводство овощных культур в XXI веке. М., 2000.- T.I.- С. 146148

9. Бухаров А.Ф., Соломатин М.И. Методические подходы и перспективные направления отдаленной гибридизации пасленовых культур. // Труды ученых Мичуринского государственного аграрного университета. Мичу-ринск.-«Кварта», 2005.- С.90-97

10. Бухарова А.Р., Бухаров А.Ф. Репродуктивные взаимоотношения культивируемых и дикорастущих форм в родовых комплексах томата, перца и баклажана//Докл. TGXA, Вып. 274.-М., 2002.-С.393-396.

11. Верба В.М., Мамедов М.И, Пышная О.Н., Шмыкова Н:А Клональное микроразмножение баклажана путем органогенеза // Вестник РАСХН, № 6, 2010.- С.57-59

12. Волобуева В.Ф:, Шатилова Т.И. Практикум по-биохимии овощных, плодовых, ягодных, эфироносных и лекарственных культур — Москва, 2008. — С. 45-47.

13. Воробьева Г.А., Приходько Н.И. Использование культуры зародышей in vitro для получения межвидовых гибридов томатов // Тр. по прикладной ботанике; генетике, селекции.-1980.-Т.68.-В.З.- С.64-74.

14. Дейнеко Е.В., Карначук P.A., Гвоздева Е.С., Шумный В.К. Биотехнология и генная инженерия растений (учебное пособие).-Томск, 2006.- С.256

15. Джое Е. А. Создание исходного материала'перца с использованием1 отдаленной межвидовой гибридизации // Дисс. на соиск. уч ст. канд с.-х. наук, Москва, 2009

16. Дикий С.П., Студенцова Л.И. Гетерозисные гибриды баклажана Майкопской опытной станции ВИР // Научн.-техн. бюлл. ВИР.-1981.-№ 111. -С.41-45.

17. Донченко Л. В. Технология пектина и пектинопродуктов. М., 2000 . — 256 с.

18. Дудкин М. С., Щелкунов И. Ф., Денисюк Н. А. с соавт. Пищевые волокна — радиопротекторы // Вопросы питания . 1997. - № 2, С. 12-14.24.3апрометов М.Н. Фенольные соединения: распространение, метаболизм и функции в растениях. М:Наука, 1993 .- 178с.

19. Игнатова С.И. 40 лет работы с пасленовыми культурами // Картофель и овощи.- 2001.- № 5.- С.23

20. Игнатова С.И. Отдаленная гибридизация в семействе пасленовых культур, как метод получения исходного материала // Автореф. дис. на соиск. уч. ст. канд.-с.х.-наук.-М., 1972.-26 с.

21. Истомин А-. В., Пилат Т. Л. Гигиенические аспекты использования пектина и пектиновых веществ в лечебно-профилактическом питании: пособие для врачей. — М. 2009: — 44 с.

22. Истомин А. В., Чижов С. С. Экология и гигиена профилактического питания. М.: Вера плюс, 2000. - 97 с.

23. Ишмуратова М.И., Ткаченко К.Г. Семена травянистых растений: особенности латентного периода, использование в интродукции и размножении in vitro. Уфа: Гилем.- 2009.- 116 с.

24. Кан Л.Ю., Романов B.C., Тимин Н.И. Комплексная оценка межвидовых гибридов лука // Вавиловские чтения 2007. Саратовб 2007. - Т.З. - с. 8688.

25. Картель H.A., Кильчевский A.B. Биотехнология в растениеводстве: уче(5--ник.-Мн:Тэхналопя, 2005.-310 е.: ил.

26. Качалай Д. П. и др. Методические указания.по-использованию в лечебно--профилактических целях пектинов и пектиносодержащих продуктов. — IVCEEE^ СССР, Киев, Разраб. НИИ микробиол. и вирусол. АН УССР . 1990^ с.

27. Кашинцев П. А., Залевский В. И., Мазанчук В. П. и др. Пищевые волокыг:^^^ в рациональном питании человека . -М., 1989 . С. 155-160.

28. Кружилин A.C., Шведская З.М. Помидоры, перцы, баклажаны. Биология: и^^г агротехника. -М.: Россельхозиздат, 1972. 144с.

29. Курсаков Г.А., Иноземцев В.А. Опыт применения искусственной культз^—. ры зародышей при отдаленной гибридизации яблони с грушей // Бюлзтзс науч. инф./ЦЛГ им. И.В. Мичурина.- 1973.- В.20.- С.11-14

30. Лазарева Е. Б., Шрамко Л. У., Донская Е. В., Меньшиков Д. Д. // Рос. жу^>—. нал гастроэнтерологии . 1995 . - №3 . - С.133-134.

31. Ливщиц. О. Д. Профилактическая роль местных пектиносодержащих 1Щг—.щевых продуктов при свинцовых интоксикациях // Вопросы питания . -.1969 .-№4'.-С.76-77.

32. Мартинчик А. Н., Маев И. В., Янушевич О. О. Общая нутрициология.--.

33. М.: Медпресс-информ, 2005 . 392 с.

34. Мартинчик Э.А. Оценка- уровня потребления флавоноидов отдельньич^я^^ группами населения Российской федерации: Автореф. дис. . канд.наук. -М., 2007. -С. 131.

35. Меныпиков Д. Д., Лазарева Е. Б., Попова Т. С. и др. // Антибиотики и х^з:— миотерапия. 1997 . - № 12 . - С. 10-15.

36. Молканова О.И., Короткое О.И., Е.М. Ветчинкина, H.A. Мамаева, 0-ИГ\ Васильева Генетические банки растений: проблемы формирования, ocz>— хранения и. использования // Вестник Удмуртского университета.- 201 Вып. 3.- С.33-39.

37. Наджиев Д.Н., Арамов М.Х. Испытание и оценка гибридов Fl баклажана на раннеспелость и по хозяйственно-ценных признакам // Международная научно-практическая конференция «Селекция и семеноводство' овощных культур в XXI веке».-т.2.-М.-2000.-С. 109-111.

38. Оганесян А.Г. Техекагир Гюхатнечакан Гитутюниер // Известия сельско-хояйственых наук Армении.- 1976.-№ 10.-C.33-38

39. Пивоваров В.Ф., Мамедов М.И., Бочарникова Н.И. Пасленовые культуры: томат, перец, баклажан, физалис. М, 1998. - С.295

40. Пилат Т. Л., Иванов А. А. Биологически активные добавки к пище (теория, производство, применение). М., 2002 . - 710 с.

41. Пондева Р., Загорска Н. Использование методов in-vitro для преодоления стерильности межвидового гибрида Capsicum аппиит х Capsicum praetermissum' // Культура клеток растений и биотехнология.- М. Наука, 1986.- С.171-175.

42. Прохоров И.А., Крючков A.B., Комиссаров В.А. Селекция и семеноводство овощных культур. М.: Колос, 1998.- 448 с

43. Пупыкина К.А., Кудашкина Н.В. Изучение возможности пряно-ароматических и эфирномасличных растений для экопротективной помощи населению // Вестник ОГУ, 2009, № 6. С.499-502

44. Соболев Ml Б., Хацкель С. Б., Мурадов А. Ю. Энтеросорбция некрахмальными полисахаридами, как метод лечения детей с меркуриализмом // Вопр. питания . 1999. - Т.68, № 1 . - С.28-30.

45. Тимин Н.И:, Агафонов А.Ф., Шмыкова Н.А. и др. Межвидовая гибридизация в роде Allium L. и её использование в селекции (методические рекомендации) М., 2007. - 47 с.

46. Ткачев A.A., Поляков A.B. Регенерация растений огурца in vitro II Биотехнология овощных, бахчевых, цветочных и малораспространенных культур: Сборник науч. трудов Междунар. научно-практ. конф. 22—25 марта 2004 г. М., 2004. - С. 118-121.

47. Туровская Н.И., Матушкина О.В., Пронина И.Н. Методические указания по микроклональному размножению клоновых подвоев яблони и груши. -М., 1996.-17 с.

48. Уткина Е.А. Зависимость антиоксидантной активности флавоноидов от физико-химических характеристик в различных системах: Автореф: дис. . канд.мед. наук. — М., 2005. — С.114.

49. Фирсова Э.К., Мезенцев, Рубцов Межвидовая гибридизация клевера с использованием культуры зародышей // Селекция и семеноводство.-1980.-№1.- С.16-18.г

50. Юркова Г.Н., Галецкая Г.Р. Регенерационная способность коллекционных образцов культурного томата // Пробл. теор. и прикл. генет. в Казахстане: Матер. Респ. конф., Алма-Ата, 18-22 ноября 1990 г. Алма-Ата, 1990. - С. 122-123.

51. Яртиев А.А., Костенко С.И. Особенности микроклонального размножения-кормовой свеклы // Докл. ВАСХНИЛ. 1988. - № 10. - С.15-17.

52. Acciarri N;, Restaino F., Vitelli G.,et al. Genetically modified parthenocarpic eggplants: improved fruit productivity under both greenhouse and-, open field cultivation //BMC biotechnology. 2002. Vol.2, № 4. -P.l01-114.

53. Aherne S.A., O'Brien N.M, Dietary flavonols: chemistry, food content, and metabolism // Nutrition. 2002. Vol.18. - P.75-81.

54. Alba,V., Lotti Т., D'Alessandro A., Mennella G., Riciardi L., Sunseri f. Genetic diversity on African eggplant: molecular and chemical analyses. // Proc. XLIX Italian Soc. Agric. Gen. Ann. Congress (12-15 Sept. 2005, Potenza, Italy)-2005.-P. 135-139.

55. AH M:', Okubo H., Fujieda K. In vitro multiplication of intra- and interspecific Solanum hybrids through somatic embryogenesis and adventitious organogenesis. //J. Jpn. Soc. Hortic. Sei.- 1991. Vol;60.- P.60r-612.

56. Alicchio R., Antonioli C., Palenzona D. Karyotic variability in plants, of Solanum melongena regenerated from callus grown in presence of culture filtrate of Verticillium dahliae // Theor. Appl. Genet. 1984. Vol.67. -P.601-612

57. Alicchio R., Del Grosso E., Boschieri E. Tissue cultures and plant regeneration from different explants in six cultivars of Solanum melongena II Experientia. -1982. Vol.38. P.449—450.

58. Amagai M.,Ohashi K.,Kimura S. et al. Breeding of interspecies hybrid between Allium fistulosum and A.tuberosum by embryo culture. // Bull. Tochigi. Agr. Exp. Stn.- 1995. Vol.43.- P.87-94.

59. Anaso H., Okereke G.U., Uzo J.O. Breeding for high yield of berries and improved yield attributes in S.aethiopicum L. // Tropical,Agric.- 1990.- V. 67, №*4.- P.371-375.

60. Anaso H.U. Comparative cytological- study of S.aethiopicum Gr. Gilo ,5.aethiopicum Shum group and Solanum anguivi. II Euphytica.- 1991.-V. 53, №2.-P. 81-85.

61. Anderson R.F., Amarasinghe C., Fisher L.J. et al. Reduction in free-radical-induced DNA stand breaks and base damage through fast- chemical- repair by flavonoids //Free Radic. Res. 2000. Vol.33 - P.91—103.

62. Ando T., Saito N., Tatsuzawa F., Kakefiida T. et al. HPLC profiles of floral an-thocyanins in the native taxa of Petunia (Solanaceae) // Tech. Bull. Fac. Hortic. Chiba UniV. 1999. Vol.53. - P:135-144.

63. Ano G., Hebert Y., Prior P., Messiaen C.M. A new source of resistance to bacterial wilt of eggplants obtained from a cross: Solanum aethiopicum L. x Solanum melongena L.//Agronomie.- 1991.-V. 11.-P.555-560.

64. Arous S., Boussai'd M., Marrakchi M. Plant regeneration from zygotic embryo hypocotyls of Tunisian chili (Capsicum annuum L.) // J. Appl. Hort. — 2001 Vol.3, № 1.-P. 17-22.

65. Arts I.C., Hollman P.C. Polyphenols and disease risk in epidemiologic studies // Am. J. Cli.n Nutr. 2005. Vol.81. -P.317-325.

66. Asao H., Tanigawa M., Okayama K., Arai S. Breeding of.resistant Solarium spp. for bacterial wilt by cell selection using a wilt-inducing product // Bulll Nara. Agric. Exp. Stn. 1992. Vol.23. -P.7-12.

67. Ashfaq Farooqui M., Rao A., Jayasree T., Sadanandam A. Induction of atrazine resistance and somatic embryogenesis in Solarium melongena II Theor. Appl. Genet. 1997. V.95. -P.702-705.

68. Attav/an B.N., Jelenkovic G., Pollack B.L. Crossability of selected non-tuberous Solanum species. // J. Amer. Soc. Hort. Sci.-1983.-V. 108, №1.- P. 15-20.

69. Ayotte R., Harney P.M., Machado VOL. The transfer of triazine resistance from Brassicanapus L. to B.oleracea L.I. Production of F! hybrids through embryo rescue. //Euphytica.- 1987! Vol.36.- P.615-624.

70. Azuma K., Ohyama A., Ippoushi K., Ichiyanagi T., Takeuchi A., Saito T., Fu-kuoka H. Structures and antioxidant activity of anthocyanins in many accessions of eggplant and its related species // J: Agric. Food Chem. — 2008. Vol.56. — P.10154—10159.

71. Baksh S. et al. Breeding system of Solanum integrifolium Poir. with am emphasis on sex potential and intercrossability. // Euphytica.- 1978:- 27, №3.-P. 811-815.

72. Banerjee M:K., Kalloo G., Singh M. et.al Wide hybridization of eggplant (Solanum sps.); II Caps. Egg. Newsl.- 2002. Vol.21.- P. 89-92.

73. Behera T.K., Sharma P., Singh B.K. et al. Assessment of genetic diversity and species relationships in eggplant (Solanum melongena~L.) using STMS markers // Sci.Hort. — 2006. Vol.107. P.52-357.

74. Behera T.K., Singh N. Interspecific crosses between eggplant (Solanum melongena L.) with related Solanum species // Scientia Horticulturae.- 2002.- V. 95.-P. 165-172.

75. Beyries A. Le greffage, moyen de lutte contre les parasites telluriques des so-lanées cultivées pour leurs fruits. // Thèse Dr Univ, Univ Sci et Tech du Languedoc,?. Montpellier.- 1979.-P. 166.

76. Bhatt P., Bhatt D., Sussex I. Organ regeneration from leaf discs of Solarium nigrum, S. dulcamara, S. khasianum II Z. Pflanzenphysiol. — 1979. Vol.95. — P.355-362.

77. Bhattarai S. P., de la Pena R: C. Midmore D.J. Palchamy K. In vitro culture of immature seed* for rapid generation advancement in tomato // Euphytica.- 2009. Vol.167.-P:23-30;

78. Binzel M.L., Sankhlà N., Joshi S. et. al Induction of direct embryogenesis and plant regeneration in pepper (Capsicum annuum L.) // Plant Cell Rep.- 1996. Vol. 15.- P.536-540;

79. Bletsos F., Roupakias D., Tsaktsira M:, Scaltsoyjannes A. Production and characterization of interspecific hybrids* between three eggplant {Solanum melon-gena L.) cultivars and" Solanum macrocarpon L. // Scientia Horticulturae.-2004.-V. 101.-P. 11-21.

80. Block G., Patterson B., Subar A. Fruit, vegetables and cancer prevention: a review of the epidemiological evidence. -Nutr. Cancer. — 1992.Vol.18. -P.l-30.

81. Bohmer P., Meyer B., Jacobsen H.-J. Thidiazuron-induced high frequency of shoot induction and plant regeneration in protoplast derived pea callus // Plant Cell Rep. 1995. VoL15. -P.26-29.

82. Borkowski B. Phenolic acids and their esters. Part II // Herba.Pol. 1993. Vol.39.-P. 139-145.

83. Borkowski B., Besiadecka A., Litwinska B. Comparison of virusostatic activity of caffeic, chlorogenic and rosmarinic acids // Herba Pol. 1996. Vol.42. — P. 317-321.

84. Brakenchielm E.R., Cao Y. Suppression of angiogenesis, tumor growth, and wound healing by resveratrol, a natural compound in red wine and grapes // FASEB. 2001.Vol.15. - P.1798—1800.

85. Bukenya Z.R. Solanuum macrocarpon: an underutilised but potential vegetable in Uganda. // Proceedings Xlllth Plenary Meeting AETFAT, 17-24, Sept. 1994. Malawi (J.H.Senyani and A.C. Chikuni, eds).- 1994. P.34-41.

86. Bukenya Z.R., Carasco J.F. Biosystematic study of Solanum macrocarpon S. dasyphyllum complex in Uganda and relations with Solanum linnaeanum. II East African Agric. For. J.- 1994,- V.59, №3.-P. 187-204.

87. Bukenya Z.R., Hall J.B. Six cultivars of Solanum macrocarpon (Solanaceae) in Ghana. //Euphytica.- 1987.-V.17, №1.-P. 91-95.

88. Buyukalaca S., Mavituna F. Somatic embryogenesis and plant regeneration of pepper in liquid media // Plant Cell Tiss. Cult.- 1996. Vol.46.- P.227-235.

89. Carlson P.S., Smith H.H., Dearing R.D. Parasexual interspecific plant hybridization. //Proc. Natl. Acad. Sei.- 1972. Vol.69.- P.2292-2294.

90. Caruso G. Morpho-physiological characterization of S.aethiopicum L. Gr. Gilo . //Agric. Mediterr.- 2001. -V.131(3-4).-P. 153-163.

91. Casa Nova S. et al. Hypoglycemic effect of eggplant {Solanum melongena L.) in rats. // Cienc. Tecnol. Aliment. 2002. Vol.22, № 2. - P. 164-169

92. Chakravarthi D.V.N., Rao Y.V., Rao M.V.S., Manga V. Genetic analysis of in vitro callus and production of multiple shoots in eggplant // Plant Cell Tiss. Organ. Cult. -2010. Vol.102. -P.87-97.

93. Chen H., Ho C. Antioxidant activities of caffeic acid and its related hy-droxycinnamic acid compounds // J! Agric. Food Chem. 1997. Vol.45. -P.2374-2378.

94. Chen J.F., Staub J., Adelberg J., Lewis S. and Kunkle B. Synthesis and preliminary characterization of a new species (amphidiploid) in Cucumis II Euphytica.- 2002. Vol.123, №3.- P.315-322.

95. Chen Y-K.H., Palta J.P., Bamberg J.B. Freezing tolerance and tuber production in selfed and backcross progenies derived from somatic hybrids between Solanum tuberosum L. and Solanum commersoni Dun. I I Theor. Appl. Genet.-1999.-V. 99.-P.100-107.

96. Chiriac G., Andronic L., Bujoreanu V., Marii L. Features of crossingover in virus-infected tomato // Central European Journal of Biology.- 2006.-Vol.l, №3.-P.l-13.

97. Chopde P.R., Wanjari K.B. Interspecific hybrids of Solanum. In: Proceedings of the Second Congress of SABRAO. //Indian J.Genet.- 1973.-Vol.34A.-P.1318-1323.

98. Cieslik E., Gr^da A., AdamusW. Contents of polyphenols in fruit and vegetables // Food Chem . 2006 . Vol.94, № 1. - P. 135-142.

99. Cnakrabarti A. K., Choudhury B. Breeding brinjal resistant to little leaf disease. //Proc. Indian Nat. Set. Acad.-1975.-Vol. 4.-P. 379—385.

100. Collonnier C., Fock I., Kashyap V. et al. Applications of biotechnology in eggplant II Plant Cell Tiss. Org. Cult. 2001. Vol.65, № 2. - P. 91-107.

101. D'Arcy, W.G. Solanaceae studies. II. Typification of subdivisions of Solarium 11 Ann. Missouri. Bot. Guard. 1972. Vol.59. - P. 262-278.

102. Das S.C., Barman T.S., Singh R. Plant regeneration and establishment in nursery // Assam. Rev.Tea News. 1990. Vol.79. - P.24-27.

103. Daunay M.C., Chaput M.H., Sihachakr D., Allot M., Vedel F., Ducreux G. Production and characterization of fertile somatic hybrids of eggplant (Solarium melongena L.)with S. aethiopicum L. // Theor. Appl. Genet.-1993.-Vol. 85.-P. 841-850.

104. Daunay M.C., Lester R.N. The usefulness of taxonomy for Solanaceaebreeders, with special reference to the genus Solanum and to Solanum melongena L. (eggplant). // Cap. New.- 1988.-Vol.7.- P. 70-79.

105. Di Vito M., Zaccheo G. Catalano F. Source for resistance to root knot nematodes Meloidogyne spp in eggplant. // In: Proc. VHIth Eucarpia meeting on Genetics and Breeding of Capsicum and Eggplant.- 1992.- P.301-303.

106. Dixon R.A., Palva N.L., Stress-induced phenylpropanoid metabolism // Plant Cell. 1995. Vol.7. -P.1085-1097

107. Doganlar S., Frary A., Daunay M.G., Lester R.N., Tanksley S.D: A comparative genetic linkage map of eggplant (Solarium melongena} arid its implications for genome evolution, in the Solanaceae. II Genetics.- 2002.-V. 161.-P. 1697-1711.

108. Donzella G., Spena A., Rotino G.L. Transgenic parthenocarpic eggplants: superior germplasm for increased winter production // Mol. Breed. 2000. Vol.6, № l . -P. 79-86:

109. Dubouzet J.G., Shinoda K., Murata N. Interspecific hybridization of A Ilium giganteum Regel: production and- early verification of putative hybrids // Theor.Appl.Genet.- 1998.- Vol.96. P.385-388.

110. Estebam R. M., Lopez-Andreu F; J;, Martin-Gabrejas ML A: et al. Pectin changes during the development and ripening of eggplant fruits // Food Chem. 1993. Vol.46, № 3. - P.289-292.

111. Fang M., Mao R., Xie W. Breeding of cytoplasmically inherited male sterile lines of eggplant (,Solarium melongena L.): // Acta-: Hortic. Sim.r 1985.-V.12.-P. 261-266.

112. Fari M., Csanyi M., Mityko J. et al. An alternative pathway of in vitro organogenesis in higher plants: plant regeneration via decapitated hypocotyls in three solanaceous vegetables genera // Hort. Sei. 1995. Vol.27. - P.9-16.

113. Farooqui M.A., Rao A.V., Jayasree T. et al. Induction of atrazine resistance and somatic embryogenesis in Solanum melongena II Theor. Appl. Genet. — 1997. Vol.95.-P. 702-705.

114. Fasolo F., Zimmerman R., Fordham I. Adventitious shoot formation on excised leaves of in vitro grown shoots of apple cultivars // Plant Cell Tissue Organ. Cult. 1989. Vol.16. -P.75-87.

115. Fassuliotis G. Regeneration of whole plants from isolated stem parenchyma cells of iSolanum sisymbrifolium 11 J. Amer. Soc. Hort. Sei. 1975. Vol.100. — P.636-638.

116. Fassuliotis G., Dukes P.D. Disease reaction of Solanum melongena and Solanum sisymbrifolium to Meloidogyne incognita and Verticillium' alboatrum. II J. Nematol.-1972.- V. 4(4).- P. 222-223.

117. Fassuliotis G., Nelson B., Bhatt D. Organogenesis in tissue culture of Solanum melongena cv. Florida market // Plant Sei. Lett. 1981. Vol.22. - P.l 19125.

118. Faure O., Diemer F., Moja S. et al. Mannitol and thidiazuron improve in vitro shoot regeneration from spearmint and peppermint leaf disks // Plant- Cell Tiss. Org. Cult. 1998. Vol.52. -P.209-212.

119. Felgines C., Talavera S., Gothier M.P. et al. Strawberry anthocyanins are recovered in urine as glucuoro- and sulfoconjugates in humans // J. Nutr. 2003. Vol.133.-P.1296-1301.

120. Fobert P.R., Webb D.T. Effects of polyamines, polyamine precursors, and polyamine biosynthetic inhibitors on somatic embryogenesis from eggplant {So

121. Fournier D., Lejeune F., Tourte Y. Cytological events during the initiation of meristematic nodules in calli derived from eggplant protoplasts. // Biol. Cell.-1995. Vol.85.- P.93-100.

122. Frankenberger A., Hasegawa P.M., Tigchelaar E.C. Diallel analysis of shoot-forming capacity among selected tomato genotypes // Z. Pflanzenpirysiol. -1981. Vol.102. -P.233-242.

123. Franklin G., Sheeba C., Sita G. Regeneration of eggplant (Solatium- melongena L.) from root explants // In vitro Cell Dev. Biol. Plant. — 2004. Vol.40. — P.188-191.

124. Frary A., Doganlar S., Daunay M.C. QTL analysis of morphological traits in eggplant and implications for conservation of gene function during evolution of solanaceous species. // Theor. Appk Genet.- 2003.- V.107- P.359-370.

125. Fukumoto L., Mazza G. Assessing antioxidant and prooxidant activities of phenolic compounds // J. Agric. Food Chem. 2000. Vol.48. - P.3597-3 604.

126. Gallo-Meagher M-., English R.G., Abouzid A. Thidiazuron stimulates shoot regeneration of sugarcane embryogenic callus // In vitro Cell. Dev. Biol.Plant. -2000! Vol.36. P.37-40:

127. Gawell N. J., Robacker C. D. Genetic control of somatic embryogenesis in cotton petiole callus culture // Euphytica. 1990. Vol.49. - P.249-253.

128. George E.F. Plant Tissue Culture Procedure Background // Plant Propagation by Tissue Culture 3rd Edition, Springer.- 2008. Vol.1.- Ch.l.- P. 1-28.

129. Gill R., Ozias-Akins P. Thidiazuron-induced highly morphogenetic callus and high frequency regeneration of fertile peanut (Arachis hypogaea L.) plants II In vitro Cell. Dev. Biol. Plant. 1999. Vol.35. - P.445 - 450.

130. Gleddie S., Keller W., Setterfield G. Plant regeneration from tissue, cell and protoplast cultures of several wild Solanum species // J. Plant. Physiol. — 1985. Vol.109.-P.405-418.

131. Gleddie S., Keller W., Setterfield G. Production and characterisation of somatic hybrids between S.melongena and S.sisymbrifolium Lam. // Theo-ret.Appl.Genet.- 1985b. Vol.71.-P.613-621.

132. Gleddie S., Keller W., Setterfield G. Somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf explants and cell suspensions of Solanum melongena II Can. J. Bot. 1983. Vol.61. -P.656-666.

133. Goldfarb B., Howe G.T., Bailey L.M. et al. A liquid cytokinin pulse induces adventitious shoot formation from Douglas-fir cotyledons // Plant Cell Rep. -199k Vol.10.-P.156-160.

134. Gowda P.H.R., Shivashankar K.T., Joshi Sh. Interspecific hybridization between Solanum melongena and Solanum macrocarpom study of the F1 hybrid plants.//Euphytica.- 1990.-Vol.48.-P.59-61.

135. Gupta S.D., Conger B.V. In vitro differentiation of multiple shoot clumps from intact seedlings of switchgrass // In vitro Cell. Dev. Biol. Plant. — 1998. Vol.34.-P.196-202.

136. Guri A, Sink K.C. Interspecific somatic hybrid plants between eggplant S.melongena and S.torvum. II Theoret. Appl. Genet.- 1988a. Vol.76.- P.490-496.

137. Guri A, Sink K.C. Organelle composition in somatic hybrids between an atrazine resistant biotype of S.nigrum> and S.melongena II Plant Sci.- 1988b. Vol.58.- P.51-58.

138. Guri A., Volokita M., Sink K. Plant regeneration from leaf protoplasts of Solanum torvum II Plant Cell Rep. 1987. Vol.6. - P.302-304.

139. Hagiwara T., Saski H., Inaba T., Yanase Y. Genetical studies on habit in the progeny of spontaneous hybrids of Solanum Gilo // Bull. Coll. Agric. Vet. Med. Nibon. Univ.- 1963.- Vol.16.- P. 47-58;

140. Häkkinen A., Karenlampi G., Mykkanen D. et.al Influence of domestic processing and storage on flavonol contents in berries // J. Agric. Food Chem. 2000. Vol.48. - P.2960-2965.

141. Han S., Tae J., Kim J., Kim D. et al. The aqueous extract of Solanum melon-gena inhibits PAR2 agonist-induced inflammation // Clinica Chimica Acta. -2003. Vol.328. P.39-44.

142. Hansen L.N., Earle E.D. Transfer of resistance to Xanthomonas campestris pVol. campestris into Brassica oleracea L.by protoplast fusion. // Theor.AppkGenet.- 1995. Vol.91.- P.1293-1300. •

143. Hare P., Van Staden J. Inhibitory effect of thidiazuron on the activity of cy-tokinin. oxidase isolated from soybean callus // Plant Cell Physiol. — 1994. Vol.35.-P.l 121-1125:

144. Harini I., Lakshmi S. G. Direct somatic embryogenesis and plant»regeneration from immature embryos of chilli (Capsicum annuum L.) // Plant Sci.-1993. Vol.89.- P.107-112.

145. Hensel A., Meier K. Pectins and xyloglucans exhibit antimutagenic activities against nitroaromatic compounds // Planta Med. — 1999. Vol.65, № 5. P.395-399.

146. Herling A.W., Burger HJ., Schwab D. et.al Pharmacodynamic profile of a novel inhibitor of the hepatic glucose-6-phosphatase system // Am. J. Physiol. -1998. Vol.274. P. 1087-1093.

147. Hertog M.G.L, Feskens EJ.M:, Hollman P.C.H. et al. Dietary antioxidant flavonoids and the risk of coronary heart disease: The in Zutohen Elderly Study // Lancet. 1993.Vol.342.-P. 1007—1011.

148. Hocher V., Sotta B., Maldiney R. et al. Changesinindole-3-acetic acid levels during tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) seed development // Plant.Cell. Rep. 1992. Vol.11, №5-6. - P.253-256.

149. Hou D.X. Potential mechanisms of cancer chemoprevention by anthocyanins // Curr. Mol. Med. 2003. Vol.3. - P.149-159.

150. Huetteman C., Preece J. Thidiazuron: a potent cytokinin for woody plant tissue culture // Plant Cell Tiss. Org. Cult. 1993. Vol;33. - P1105-119.

151. Hyde C., Phillips G.C. Silver nitrate promotes shoot development and plant regeneration of chile pepper (Capsicum annuumli,.) via organogenesis // In vitro Cell Dev. Biol. Plant: 1996. Vol.32. - P:72-80.

152. Ichikawa H., Ichiyanagi T., Xu B. et al. Antioxidant activity of anthocyanin extract from purple black rice // J- Med. Food. 200V. Vol.4. - P.211-218.

153. Ichiyanagi T., Hatano Y., Matsugo >S. Simultaneous comparison of relative reactivities of twelve major anthocyanins in bilberry towards reactive nitrogen species // Chem. Pharm. Bull. 2004(c). Vol.52. - P. 1312-1325.

154. Ichiyanagi T., Hatano Y., Matsugo S. Structural dependence of HPLC separation pattern of anthocyanins from bilberry (Vaccinium myrtillus L.) // Chem. Pharm. Bull. 2004(b). Vol. 52. - P.628-630.

155. Ichiyanagi T., Hatano Y., Matsugo S., Konishi T. Comparison of anthocyanin reactivity towards hydroxyl radical, superoxide anion ang singlet oxygen // ITE Lett. 2003. Vol.4. - P.788-793.

156. Ichiyanagi T., Hatano Y., Matsugo S., Konishi T. Kinetic comparison of anthocyanin reactivity towards AAPH radical, hydrogen peroxide and tbuthylhydroperoxide using capillary zone electrophoresis // Chem. Pharm. Bull.- 2004(d). Vol.52. P.434-438.

157. Ichiyanagi T., Kashiwada Y., Ikeshiro Y. et al. Complete assignment of bilberry (Vaccinium myrtillus L.) anthocyanins separated by capillary zone electrophoresis // Chem. Pharm. Bull. 2004(a). Vol.52. - P.226-229.

158. Ichiyanagi T., Rahman M.M., Kashiwada K. et al. Absorption and metabolism of delphinidin 3-O-ß-D-glucopyranoside in rats // Free Radical Biol. Med.- 2004(f). Vol.36. P.930-937.

159. Ichiyanagi T, Kashiwada Y, Shida Y. et al. Nasunin from eggplant consists of cis-trans isomers of delphinidin 3-4-(p-coumaroyl)-L-rhamnosyl (1—>6)glucopyranoside.-5-glucopyranoside // J. Agric. Food Chem. 2005(a). Vol.53.-P. 9472-9477.

160. Ichiyanagi, T., Kashiwada, Y., Shida, Y. et.al Nasunin from eggplant consists of cis-trans isomers of delphinidin 3-4-(p-coumaroyl)-L-rhamnosyl(l-6) glucopyranoside.-5-glucopyranoside // J. Agr. Food Chem. 2005. Vol.53. -P.9472-9477.

161. Igarashi K. Functions of anthocyanins // Food* Processing (in Japanese) . — 1998. Vol.33.-P.ll-14.

162. Igarashi K., Yoshida T., Suzuki E. Antioxidative activity of nasunin in Chouja-nasu (Little eggplant, Solanum melongena L. 'Chouja) // Nippon Sho-kuhin Kogyo Gakkaishi. 1993. Vol.40. -P.138 - 143.

163. Isouard G., Raquim C., Demarly Y. Obtention de plantes haploides et dip-loides par culture in vitro antheres d'aubergine (,Solanum melongena L.) // C. R. Acad. Sei. Paris. 1979. Vol.288. -P.987 - 989:

164. Isshiki S., Kawajiri N. Effect of cytoplasm of Solanum violaceum Ort. on fertility of eggplant(S.me/o«g£?2<3 L.). // Sei. Hort.- 2002.-V.93.-P. 9-18.

165. Isshiki S., Okubo H., Fujieda K. Segregation of isozymes in selfed progenies of a synthetic amphidiploid between S.integrifolium and S.melongena. II Euphytica.- 2000.-V. 112.-P. 9-14.

166. Isshiki S., Suzuki S., Yamashita K. RFLP analysis of mitochondrial DNA in eggplant and related Solanum species // Genet.Res.CropEvol. 2003. Vol.50. -P.133-137.

167. Isshiki S., Taura T. Fertility restoration of hybrids between Solanum melongena L. and S. aethiopicum L. Gr. Gilo by chromosome doubling and cyto-plasmiceffect on pollen fertility // Euphytica. 2003. Vol.134. - P.195-201.

168. Isshiki S., Yoshida S. Characteristics of the cytoplasmic male sterility in the eggplant (Solanum melongena L.) carrying the cytoplasm of S.violaceum Ort. // Bull. Fac. Agr. Saga. Univ.- 2002.- V.87.- P.87-93.

169. Isshiki S., Uchiyama T., Tashiro Y. et al. RFLP analysis of a PCR amplified region of chloroplast DNA in eggplant and related Solanum species // Euphytica.- 1998. Vol.102. P.295-299.

170. Iwamoto Y., Hirai M., Ohmido N. et al: Fertile somatic hybrids between Solanum integrifolium and S. sanitwongsei (syn. S. kurzii ) as candidates for bacterial wilt-resistant rootstock of eggplant // Plant Biotechnology.- 2007. Vol.24.-P. 179-184.

171. Iwamoto,Y., Hirai M., OhmidoN. et al. Fertile somatic hybrids between Solanum integrifolium and S. sanitwongsei (syn. S. kurzii ) as candidates for bacterial" wilt-resistant rootstock of eggplant // Plant Biotechn. 2007. Vol.24f. — P. 179-184.

172. Jain S., Das S., Barman T. Enhancement of root induction from in vitro regenerated shoots of tea (Camellia sinensis L.) // Proc. Ind. Natl Sei. Acad. -1993. VoliB59.-P.623 628.

173. Jarl C., Rietveld E.M., Haas J.M. Transfer of fungal tolerance through interspecific somatic hybridisation between Solanum melongena and Solanum tor-vum. II Plant. Cell. Rep.- 1999.- V.18.- P.791-796.

174. Jin-Zhuo D., Shi-Rong J. High efficiency plant regeneration from cotyledons of watermelon (Citrullus vulgaris Schrad.) // Plant Cell Rapt. 1991. Vol.9, N10. — P.559-562.

175. Joshipura K.J., Hu F.B., Manson J:E. et al. The effect of fruit and vegetable intake on risk for coronary heart disease // Ann. Int. Med. 2001.Vol.134. -P.l 106—1114.

176. Kalda T.S., Swarup V., Choudhury B. Resistance toPhomosis blight in eggplant. //Veg. Sci.- 1977.- V.4.- P.90-101.

177. Kalloo G. Eggplant (Solarium melongena L.). // In: Kalloo G. (Ed.) Genetic improvement of vegetable crops. Oxford: Pergamon Press, 1993.- P.587-604.

178. Kamat M., Rao N. Vegetative multiplication of eggplants (Solarium melongena) using tissue culture techniques I I Plant Sci. Lett. 1978. Vol.13. -P.57-65.

179. Kanadaswami C., Lee L.T., Lee P.P: et al. The antitumor activities of fla-vonoids II In Vivo. 2005.Vol.19. - P.895-909.

180. Kandasamy P. Heterosis and combining ability in eggplant // Indian J. Agr. Sci.- 1983.- 53.-V.4.-P.201-206.

181. Kaneyuki T., Noda Y., Traber M. et al. Superoxide anion and hydroxyl radical scavenging activities of vegetable extracts measured using electron spin resonance // Biochem. Mol. Biol. Int. 1999. Vol.47, № 6. - P.979-989

182. Kankonen M., Heinonen M. Antioxidant activity of anthocyanins and their aglycons // J? Agric. Food Ghem. 2003. Vol.51. - P.628-633.

183. Kanyand M., Dessai A., Prakash C. Thidiazuron promotes high frequency regeneration of peanut (Arachis hypogaea) plants in vitro II Plant Cell Rep. — 1994. Vol.14.-P.l-5.

184. Karami O., Saidi A. The molecular basis for stress-induced acquisition of somatic emryogenesis // Mol. Biol. Rep.- 2009. Vol.37, № 5.- P.2493-2507.

185. Karihaloo J.L., Brauner S., Gottlieb L.D. Random amplified polymorphic DNA variation in the eggplant, Solanum melongena L. {Solanaceae). // Theor. Appl. Genet.- 1995.- V.90(6).- P.767-770.

186. Karihaloo J.L., Kaur M., Singh S. Seed'protein diversity in Solanum melongena L.and its wild and weedyrelatives // Genet.Res.Crop Evol. — 2002. Vol.49. P.533—539.

187. Karihaloo J.L., Kaur M., Singh S. Seed protein diversity in Solanum melongena L. and its wild and weedy relatives. // Genet. Res. Crop Evolution.- 2002.-V.49(9).- P.533-539.

188. Kartha K., Pahl K., Leung N. Plant regeneration from meristems of grain legumes: soybean, cowpea, peanut, chickpea, and bean // Can. J. Bot. — 1981. Vol.59.-P. 1671-1679.

189. Katsube N., Iwashita K., Tsushida T., Yamaki K., Kobori M. Induction of apoptosis in cancer cell by bilberry (Vaccinium myrtillus L.) and the antho-cyanins // J. Agric. Food Chem. 2003. Vol.51. - P.68-75.

190. Kawaii S., Tomono Y., Katase E. et al. Antiproliferative activity of flavon-oids on several cancer cell lines // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1999.Vol.63. -P.896—899.

191. Kayamori F., Igarashi K. Effects of dietary nasunin on the serum cholesterol level in rats // Biosci. Biotech. Biochem. 1994. Vol.58. -P.570 - 571.

192. Kazi A., Smith D.M., Daniel K. et al. Potential molecular targets of tea polyphenols in human tumor cells: significance in cancer prevention // In vivo. -2002.Vol.16. -P.397-403.

193. Kishor R. and Sharma G. J. Intergeneric hybrid of two rare and endangered orchids, Renanthera imschootiana Rolfe and Vanda coerulea Griff, ex L. (Orchidaceae): Synthesis and characterization Euphytica Volume 165, Number 2, 247-256, 2009

194. Komatsuda T., Enomoto S., Nakajima K. Genetics of callus proliferation and shoot differentiation in barley // J. Hered. 1989. Vol.80. - P.345-350.

195. Kong J.M., Chia L.S., Goh N.K. Analysis and biological activities of antho-cyanins // Phytochemistry. 2003. Vol.64. - P.923-933

196. Korszicow B.M. Lecznicze wlasciwoski roslin uprawnyh // Medical properties of cultivated plants (PWRiL,Warshawa, 1991) . 1991. - P. 9-11.

197. Kowalski R., Kowalska G. Phenolic acid contents in fruits of aubergine (Solarium melongena L.) // Polish J Food Nutr. Sci. 2005. Vol.14(55) , № 1. — P. 37-42.

198. Kowlozyk T., Mackenzie I., Cocking E. Plant regeneration from organ explants and protoplasts of medicinal plant Solanum khasianum Clarke var. Chat-tergeeanum Sengupta (Syn. Solanum viamm Dunal) // Z. Pflanzenphysiol. — 1983. Vol.11. -P.55-68.

199. Kumar N., Ram H.H. Combining ability and gene effect analysis of quantitative characters in eggplant // Indian J. Agr. Sci.- 1987.-57.-V.2.-P.89-102.

200. Kumar P.A., Mandaokar A., Sreenivasu K. et al. Insect-resistant transgenic brinjal plants // Mol. Breed. 1998. Vol.4, № 1. - P. 33-37.

201. Kuroda C., Wada M. The coloring matter of eggplant (Nasu) // Part II. Proc. Imp. Acad. 1935. Vol.11. -P.235-237.

202. Kuroda C., Wada M. The coloring matter of eggplant (Nasu) // Proc. Imp. Acad. 1933. Vol.9. -P.51-52.

203. Lai O.P., Sharma R.K., Verma T.S., Bhagchandan P.M., Chandra J. Resistance in Brinjal to shoot and fruit borer (Leucinodes orbonalis Guen., Pyralidi-dae: Lepidoptera).//Veg. Sci.- 1976.- V.3.- P.lll-116.

204. Lambert J.D., Hong J., Yang G.Y. et al: Inhibition of carcinogenesis by polyphenols: evidence from laboratory inves-tigations // Am. J. Clin. Nutr. -2005.Vol.81. — P.284-291.

205. Leblay C., Chevreau E., Raboin L. Adventitious shoot regeneration from in vitro leaves of several pear cultivars (Pyrus communis L.) I I Plant Cell Tissue Organ Cult. 1991. Vol.25. -P.99-105.

206. Lester R.N. Genetic resources of Capsicum and eggplants. // Xth EUCAR-PIA Meeting on Genetic and Breeding of Capsicum and Eggplant, Avignon, France.- 1998.- P.25-30.

207. Lester R.N., Niakan L. Origin and domestication of the scarlet eggplant, Solanum aethiopicum, from S.anguivi in Africa. // In: D'Arcy W.G. (Ed.), So-lanaceae\ Biology and Systematics. Columbia University Press, NewYork, USA.- 1986.- P.433-456.

208. Lester R. N., Grace N.W. Inheritance in Solanum aethiopicum, the scarlet eggplant//Euphytica.- 1989.-V. 40.-P. 67-74.

209. Levin R.A., Myers N.R., Bohs L. Phylogenetic relationship among the "spiny Solanumsu (Solanum subgenus Leptostemonum, Solanaceae). II Am. J.Bot.- 2006.-V. 93.- P. 157-169.

210. Levin R.A., Watson K., Bohs L. A four-gene study of evolutionary relationships in Solanum section Acanthophora. // Am. J. Bot.- 2005.- V.92, № 4.-P.603-612.

211. Lim B. O., Yamada K., Nonaica M. et al. Dietary fibers modulate indices of intestinal immune function in rats // J. Nutr. — 1998. Vol.127, № 5. P.663— 667.

212. Liu K.B., Ly M., Sink K.C. Assymetric somatic hybrid plants between an interspecific Lycopersicon hybrid and Solanum melongena II Plant Cell Rep.-1995. Vol.14.- P.652-656.

213. Liu Wen, Chen Xuesen, Liu Guanjun, Liang Qing Interspecific hybridization of Prunus persica with P. armeniaca and P. salicina using embryo rescue // Plant Cell Tiss. Organ Cult. 2007. Vol. 88, № 3. - P.34-41.

214. Lun-Yi Z., Greg C., Henry G. et.al Effect of chlorogenic acid on hydroxyl radical //Mol. Cell.Biochem. -2003. Vol. 247, № 1-2. -P.205-210.

215. MacDonald N. S., Eznurlian F., Spain P. et al. Agents diminishing skeletal accumulation of lead // Arch. Indust. Hyg. Occup. Med. 1953. Vol.7, № 3. -P.217-220.

216. Mace E.S., Lester R.N., Gebhardt C.G. AFLP analysis of genetic relationships among the cultivated eggplant, Solanum melongena L.,and wild relatives (Solanaceae). // Theor. Appl.Genet.- 1999.- V.99.- P.626-633.

217. Macha E.S. African eggplants promising vegetables for home consumption and sale in Tanzania. // Proceedings of the Third Horticulture Workshop on* Sustainable Horticultural Production» in the Tropics, Maseno, Kenya, 26-29* Nov.- 2005.

218. Madalageri B.B., Gowda P.H.R. Inheritance of characters in the progeny of Solanum macrocarpon and Solanum melongena. II Proc. Conf. on Cytol. and Genet.- 1988.-V.1.-P. 199-202 .

219. Magioli C, Mansur E. Eggplant {Solanum melongena L.): tissue culture,genetic transformation and use as an alternative model plant. // Acta Bot. Bras.- 2005. Vol.19, № 1.- P.139-148.

220. Magioli C., Rocha A.P.M., de Oliveira D.E. Somaclonal variant for tolerance to little leaf disease of eggplant {Solanum melongena L.) regenerated from tissue culture of infected plants // New Bot. 1998b. Vol.16. - P.291-292.

221. Magioli C., Rocha A., de Oliveira D. Efficient shoot organogenesis of eggplant {Solanum melongena L.) induced by thidiazuron II Plant Cell Rep. — 1998a. Vol.17.-P.661-663.

222. Magioli C., Mansure E. Eggplant (Solanum melongena L.): tissue culture, genetic transformation^and use as an alternative model plant // Acta Bot. Bras. — 2005. Vol.19, № 1. — P. 139-148.

223. Magoon M.L., Ramanujam S., Copper D.C. Cytogenetical studies in relation to the origin and differentiation of species in the genus Solanum L. // Caryolo-gia.- 1961.- V.15.- V.151-152.

224. Mao W.H., Du L.M., BaoC.L. et al. Genetic diversity and genetic relatives analysis of southern long-eggplant germplasm based on inter-simple sequence repeat (ISSR) // Acta.Horticult;Sin. 2006. Vol.33. - P.l 109-1112.

225. Mariani P. Eggplant somatic embryogenesis combined with synthetic seed technology // Capsicum Newslett. 1992: Vol.5. - P.289-294.

226. Mariani P. Eggplant somatic embryogenesis combined with synthetic seed* technology // Capsicum Newslett. — 1992. — P.289-294 (special issue).

227. Masuda K., Kikuta Y., Okazava Y. A.Revision, of the medium» for somatic embryogenesis in carrot suspension culture // J. Fac. Hokkaido Univ. — 1981. Vol.60.-P.183-193.

228. Materska M., Perucka I. Antioxidant-activity of the main phenolic compounds isolated from hot pepper fruit (Capsicum annuum L,.) II J. Agric. Food Chem. -2005. Vol.53". -P.1750-1756.

229. Materska M:, Piacente S., Stochmal A. et.al Isolation and structure elucidation of flavonoid and phenolic acid glycosides from pericarp of hot pepper fruit Capsicum annuum L // Phytochemistry. 2003. Vol.63. — P.893-898.

230. Matsubara K., Kaneyuki T., Miyake T. Antiangiogenic activity of nasunin, an antioxidant anthocyanin, in eggplant peels // J. Agric. Food" Chem; — 2005; Vol.53.-P.6272-6275.

231. Matsumoto H., Hanamura S., Kawakami T. et al. Preparative-scale isolation of four anthocyanin components of black currant (Ribes nigrum L.) fruits //. J. Agr. Food Chem.-2001 . Vol.49 .-P.1541-1545.

232. Matsumoto H., Hanamura S., Tachibanaki S. et al. Stimulatory effect of cyanidin 3-glycoside on the regeneration of rhodopsin // J. Agric. Food Chem . -2003 .Vol.51 . P.3560-3563.

233. Matsuoka H. Factors affecting embryoid formation in hypocotyl callus of Solarium melongena L. // Jpn. J. Breed. — 1983. Vol.33. — P.303-309.

234. Matsuoka H., Hinata K. NAA-induced organogenesis and embryogenesis in hypocotyl callus of Solanum melongena L. // J. Exp. Bot. 1979. Vol.30. — P.363-370.

235. Matsuta N., Hirabayashi T. Embryogenic cell lines from somatic embryos of grape (Vitis vinifera L.) // Plant Cell Rep. 1989. Vol.7. - P.684-687.

236. Mehta Urmil J., Sahasrabudhe N., Hazra S. Thidiazuron-induced morphogenesis in tamarind seedlings // In vitro Cellular and Developmental* Biology Plant. 2005. Vol.41, № 3. - P.240-243.

237. Miszke W., Skucinska B;, Kruczkowska Y., Pawlowska H: Klonowania in' vitro kapusty glowiastej dla potrzeb, hodowli // Acta agr. et silv. Ser. agr. — 1988.-N27.-P. 87-99.

238. Mitra D., Gupta N. Somaclonal variant for tolerance to little leaf disease of eggplant (Solanum melongena L.) regenerated from tissue culture of infected plants. // New Bot. 1989. Vol.l6s - P.291-292.

239. Mitra D., Gupta N., Bhaskaran S. Development of plantlets from brinjal (Solanum melongena L.) stem tissue infected with little leaf, a mycoplasma disease // Ind. J. Exp. Bot. 1981. Void9. -P.l 177-1178.

240. Miura S., Watanabe J., Sano M. et al. Effects of various natural antioxidants on the Cu2+ mediated oxidative modification* of low-density lipoprotein // Biol. Pharm. Bull. - 1995 . Vol. 18 . - P.l-4.

241. Miyoshi K. Callus induction and plantlet formation through culture of isolated microspores of eggplant (Solanum melongena L.) // Plant Cell Reports. 1996. Vol.15. -P.391-395.

242. Mochizuki H., Yamakawa K. Resistance of selected eggplant cultivars and related wild species to bacterial wilt (Pseudomonas solanacearum). // Bull. Veg. Ornemental Crops Res. Stn.- 1979.- V.6.- P. 1-10.

243. Mohinuddin A.K.M., Chowdhury M.K.U., Zaliha A. Influence of silver nitrate (ethylene inhibitor) on cucumber in vitro shoot regeneration // Plant Cell Tissue Organ. Cult.- 1997. Vol.51. -P.75-78.

244. Molinier J., Fritsch O., Shwermann D., Hohn B. The dual nature of homologous recombination in plants // Trends in genetics.- 2005.- V.21.- P. 172-181.

245. Molinier J., Ries G., Bonhoefer S., Hohn B. Interchromatid and interhomolog recombination in Arabidopsis thaliana // Plant Cell.- 2004.- V.16.-P.342-352.

246. Momotaz A., Kato M., Kakihara F. Production of intergeneric hybrids between Brassica and Sinapis species by means of embryo rescue techniques. // Euphytica.- 1998. Vol.103.- P.123-130.

247. Monma S., Sato T., Matsunaga T. Evaluation of resistance to bacterial fusa-rium and, verticillium wilt in eggplant and eggplan-related species collected in, Ghana// Caps. Egg. Newl.- 1996.- V.15.- P. 71-72.

248. Moon J., Terao J. Antioxidant activity of caffeic acid and dihydrocaffeic acid in lard and human low-density lipoprotein // J. Agric. Food Chem . — 1998 . Vol.46.-P.5062-5065.

249. Morton L., Browse J. Facile transformation of Arabidopsis // Plant Cell Rep. 1991. Vol.10.-P.235-239.

250. Moyers S.B., Kumar N.B. Green tea polyphenols and cancer che-moprevention: multiple mechanisms and endpoints for phase II trials // Nutr. Rev. 2004.Vol.62. - P.204-211.

251. Mukherjee S., Rathnasbapathi B., Gupta N. Low sugar and osmotic requirements for shoot regeneration from leaf pieces of Solanum melongena IIL. Plant Cell Tissue Organ. Cult. 1991. Vol.25. - P. 12-16.

252. Nasrallah M.E., Hopp RJ. Interspecific crosses between S.melongena L.(eggplant) and related Solanum species. // Proc. Amer. Soc. Hort. Sei.- 1963.-V.83- P.571-574.

253. Ndoutoumou P., Toussaint A. and Baudoin J. Embryo abortion and histological features in the interspecific cross between Phaseolus vulgaris L. and P. coccineus L // Plant Gell, Tissue and Organ Culture Volume 88, Number 3, 2007

254. Nettancourt D de., Devreux M; Incompatibility and in vitro cultures. // In: Reinert & Bajaj (eds.).- 1977.- P.426-441

255. Nöda T., Kneyuki T., Igarashi K. et al. Antioxidant activity of nasunin, an anthocyanin in eggplant peels // Toxicology . -2000 . Vol.148 . P.119-123 .

256. Nomura Y., Oosawa K. Production of interspecific hybrids between Allium chinense and A.thunbergii by in ovulo embryoculture. // JpnJ.Breed.- 1990. Vol.40. -P;531-535.

257. Omidiji M.O. Cytogenetic studies on the F1 hybrid between the African eggplant, Solanum Gilo Raddi and S.melongena L. // Hort. Res.- 1981.- V.21.-P.75-82.

258. Omidiji M.O. Evaluation of some F1 hybrids and cultivars of the local eggplant, Solanum Gilo Raddi in South-Western Nigeria. // Acta. Hort.- 1983.-V.123.-P. 91-98.

259. Omidiji M.O. Interspecific hybridisation in the cultivated, non-tuberous Solanum species//Euphitica.-l 975.-V.24.-№2.-p. 342-353.

260. Omidiji M.O. The biology and taxonomy of the Solanaceae. Edt. J.G. Hawker, R.N. Lester, A.K. Skelding. Linnean Society of London by Academic Press.- 1979.-P. 602.

261. Omidiji M.O. The role of hybridization in the evolution of Solanum species in the sub-genus Leptostemonum (Dun.) Bitt . In: W.G. D'Arcy (Ed.), Solanaceae-. Biology and Systematics.-Columbia University Press, New York, 1986:

262. Ou G., Wang W.C., Nguyen H.T. Inheritance of somatic embryogenesis and organ regeneration from immature embryo cultures of* winter wheat // Theor.Appl. Genet. 1989. Vol.78. - P. 137-142.

263. Patil H.S., Shinde I.M. Combining ability studies for different characters in eggplant //1. Maharashtra Agr. Univ.-1985.-10.-V.2.-P.155-159.

264. Pessarakli M.M., Dris R. Pollination and breeding of eggplants // Food, Ag-ric. Envirom-2004. Vol.2, № 1. -P. 218-219.

265. Petolino J.F., Thompson S.A. Genetic analysis of anther culture response in maize // Theor. Appl. Genet. 1987. Vol.74. - P.284-286/

266. Phillips G.C. Valera-Montero L.L., Fan Z. Chile improvement through biotechnology: in vitro plant regeneration and genetic transformation // Chile Conference in New Mixico Chile Pepper Institute (8 February 2000). New Mixico, 2000.

267. Picoli E.A.T., Otoni W.C., Figueira M.L. et al. Hyperhydricity in in vitro eggplant regenerated plants: structural characteristics and involvement of BiP (Binding Protein) // Plant Sci. 2001. Vol.160. - P.857-868.

268. Plaami S. P. Content of dietary fiber in foods and its physiological effects // Food Rev. Int. 1997. Vol.13, № 1. -P.29-76.

269. Pola S. ManbN, Ramana T. Plant tissue culture studies in Sorghum bicolor immature embryo explants as sourse material //Int J. of PI. Prod. 2(1), 2008

270. Polanco M. C., Ruiz M. L. Factors that affect plant regeneration from in vitro culture of immature seeds in four lentil cultivars. // Plant Cell Tiss. Org. Cult.- 2001. Vol.66.- P.133-139.

271. Popov S. V., Popova G. Y., Ovodova R.G. et al. Effects of polysaccharides from Silene vulgaris on phagocytes // Int. J. Immunopharmacol. . 1999. Vol.21, № 9. -P.617-624.

272. Prabhavathi V., Yadav J.S., Kumar PA. et al. Abiotic stress in transgenic eggplant (Solanum melongena L.) by introduction of bacterial mannitol phos-phodehydrogenase gene // Mol. Breed. 2002. Vol.9, № 2. - P. 137-147.

273. Pradeep Reddy M., Sarla N., Siddiq E.A. Inter simple sequence repeat (ISSR) polymorphism and its application in plant breeding // Euphytica. -2002. Vol.128. P.9-17.

274. Prior R.L., Cao G. Analysis of botanicals and dietary supplements for antioxidant capacity: a review // J AOAC Int. 2000.Vol.83, № 4. - P.950—956.

275. Procyk A. Nutritional and medical value of aubergine // Wiad. Ziel. 1993. Vol.3.-P.9.

276. Prohens J., Nuez F. Handbook of plant breeding: Vegetables II. New York: Springer. 2008. USA.

277. Rahman M.A., Rashid M.A., Salam M.A. et al. Performance of some grafted eggplant genotypes on wild Solanum root stocks against root-knot nematode // OnLine J. Biol. Sci. 2002. Vol.2, № 7. - P. 446-448.

278. Rajasekaran S. Cytogenetic studies of the F1 hybrid Solanum indicum L. x S.melongena L. and its amphidiploid. // Euphytica.- 1970.- V.19.- P.217-224.

279. Rajasekaran S.S. Cytological studies on the Fl, hybrid Solanum xanthocar-pum x S. melongena and its amphidiploid. // Caryologia.- 1971.-V.24.-P. 261267.

280. Rakoczy-Trojanowska M., Bolibok H. Characteristics and a comparison of three classes of microssatellite-based markers and their application in plants // CellIMol.Biol.Lett. 2004. Vol.9. - P.221-238.

281. Ranga Swamy N.S. Applications of in vitro pollination and in vitro fertilization. in Reinert & Bajaj (eds.).- 1977.- P.412-425.

282. Rangasamy P., Kadambavana Sandram M. Incompatibility in interspecific hybrid S.indicum x S.melongena L.// Madras Agr. J.-1973 (a).-V.60.-N 9-12,-p.1617-1621.

283. Rangasamy P., Kadambavana Sandram M. Interspecific hybridisation in Solanum S.melongena x S.indicum L.//Madras Agr. J.-1973 (6).-V.60.-№ 9-12.-p.1687-1694.

284. Rao G., Baksh S. Relationship between Solanum melongena L. and S.integrifolium Poir. // Indian J. Gensi. Plant Breed!- 1981.- V.41(l).- P.46-53.

285. Rao N. Narashima The barriers to hybritization between Solanum melongena• and some other species of Solanum II Biol, and Texon.Solanaceae, London.-1979.- P.605-614.

286. Rao P: Narayanaswami I. Induced morphogenesis in tissue cultures of Solanum xanthocarpum // Planta. 1968. Vol.81. - P.372-375.

287. Rao P., Singh B. Plantlet regeneration from encapsulated somatic embryos of hybrid Solanum melongena L. // Plant Cell Rep.- 1991. Vol.10.- P.7-11.

288. Rathus C., Nguen T., Avle J.A. Optimizing- Sorghum transformation technology via somatic embryogenesis // In: Seetharama N., Godwin I.(eds.) Sorghum tissue culture and transformation.- 2004.- P.25-34.

289. Rekha Kathal S.P. Plant regeneration from hypocotyl explant of Cucumis melo L. cv. Pusa Sharbati // Embryology and seed reproduction: Abstracts XI Int: Symp. (3-7 July 1990). Leningrad, 1990. - P. 72.

290. Ren W., Qiao Z., Wang H. et al. Flavonoids: Promising Anticancer Agents // Med. Res. Rev. 2003.Vol.23; № 4. - P.519—534.

291. Reuther G. Adventitious organ formation and somatic embryogenesis in callus of Asparagus and Iris and its possible application. // Acta Hortic.- 1977. Vol.78.- P.217-224.

292. Rice-Evance C., Miller N. Structure antioxidant activity relationships of fla-vonoids and phenolic acids II Free Radical Biol. Med . — 1996 . Vol.20 . — P.933-956.

293. Rice-Evans C.A., Miller N.J., Paganga G. Structure-antioxidant activity re-larionship of flavonoids and phenolic acids // Free Radie. Biol. Med. -1996.Vol.20.-P.933—956.

294. Rick C.M., Chetelat R.T. Utilization of related wild species for tomato improvement // First International simposium on Solanacea for Fresh market, Malaga, 28-31.03.1995/Acta Horticulture.- 1995.- V.412.- P.21-38.

295. Rotino G. L., Sihachakr D., Rizza F et al. Current status in production and utilization of dihaploids from somatic hybrids between eggplant («Solanum melongena L.) and its wild relatives // Acta Physiol. Plant.- 2005. Vol.27, № 4B.- P. 723-733.

296. Rotino G.L., Dorr I., Pedrazzini E. Fusione di protoplasti tra melanzana (S.melongena) e Solanum selvatici. // In: Proc. XXXIX Convegno Annuale S.I.G.A, Vasto Marina, Italia, 1995.- P.157.

297. Rotino G.L., Falavigna A., Fiume F. et al. Possibility of eggplant (Solanum melongena L.) improvement through in vitro techniques // Genet. Agraria. — 1987. Vol.41.— P.314—315.

298. Rotino G.L., Perri E.D., D'Alessandro A. Characterisation of fertile somatic hybrids between eggplant and S.integrifolium // In:Proc. Xth Eucarpia meeting on Genetics and Breeding of Capsicum and Eggplant, Avignon., France, 1998.-P.213-217.

299. Roudebush P., Davenport D.J., Novotny B.J. The use of nutraceuticals in cancer therapy // Vet. Clin. North. Am. Small Anim. Pract. 2004.Vol.34. -P.249-269.

300. Sacks E. J. Ovule rescue efficiency of Gossypium hirsutum x G. arboreum progeny from field-grown fruit is affected by media composition and antimicrobial compounds // Plant Cell, Tissue and Organ Culture.- 2008. Vol.93, № 1.- P.15-20.

301. Sadanandam A., Farooqui M. Induction and selection of lincomycin-resistant plants in Solanum melongena L. // Plant Sci. 1991'. Vol.79. - • P.237-239.

302. Saito T., Nishimura S. Improved culture conditions for somatic embryogenesis using an aseptic ventilative filter in eggplant (Solanum melongena L.). // Plant Sci.- 1994. Vol.102.- P. 205-211.

303. Sakamura S., Watanabe S., Obata Y. The structure of the major anthocyanin in eggplant. // Agric. Biol. Chem. 1963. Vol.27. - P.663-665.

304. Salman H., Bergman M., Djaldetti M. et al. Citrus pectin affects cytokine production by human peripheral blood mononuclear cells // Biomed Pharmaco-ther. — 2008. — P.8.

305. Samaj J., Bobak M:, Blehova A. et al. Importance of cytoskeleton and cell wall in somatic embryogenesis // Plant Cell Monogr. 2006. Vol.2. - P. 35-50.

306. Sambandam C.N. Guide chart for. color combinations in hybrid eggplants // Econ. Bot.- 1967.-21(4).-P.309-311

307. Sarvayya C.V. The first generation of an interspecific in Solanum between S.melongena and S. xanthocarpum II Madras Agric. J.-1936.- V.24.-P." 139-142.

308. Sealbert A.,.Manach C., Morand C. et al. Dietary polyphenols and the prevention of diseases // Crit. Rev. Food. Sei. Nutr. 2005.Vol.45. - P.287-306.

309. Schaff D.A., Boyer C.H., Pollack,B-L. Interspecific hybridization of Solanum melongena L. x S. macrocarpon L. // Hort Science.- 1980.- V.15.- P.342.

310. Schaff D.A., Jelenkovic G., Boyer C.D., Pollack B.L. Hybridization and fertility of. hybrid derivatives of Solanum melongena L. and Solanum-macrocarpon L. II Theoret. Appl. Genet.- 1982.- V.62.- P. 149-153.

311. Scocciänti.V., Sgarbi E., Biondi S. Organogehesis from Solanum melongena L. (eggplant)-coltyledon explants in assotiated with hormone: modulation of polyamine biosynthesis and conjugation // Protoplasma. 2000. Vol.211. -P.51-63.

312. Sekara A., Cebula S., Kunicki E. Cultivated eggplants origin, breeding objectives and'genetic resources (a review) // Folia Horticulturae Ann. - 2007. Vol.19, №1.-P. 97-114.

313. Serraino I., Dugo L., Dugo P. et al. Protective effects of cyanidin-3-O-ß-D-glucoside from blackberry extract against peroxynitrite-induced endothelial dysfunction and vascular failure // Life Sei. 2003. Vol.73 . - P. 1097-1114.

314. Shah D. G., Malcolm S., Belonje B. et al. Effect of dietary cereal brans on the metabolism- of trace elements in a long-term rat study // Cereal Chem. — 1991. Vol.68, № 2. — P. 190—194.

315. Sharma D. R., Chowdhury J: B., Ahuja U., Dhankhar B. S. Interspecific hybridization in genus Solanum. A cross between S. melongena and S. khasianum through embryo culture // Zeitschrift fur Pflanzenzuchtung.- 1980. Vol.85, №3.-P. 248-253.

316. Sharma D.R., Sareen P.K. Chowdhuru J.B. Crossability and pollination in some non-tuberous Solanum species. // Indian J. Agric. Sei.- 1984. Vol. 54, №6.- P.514-517.

317. Sharma P. The role of polyamines in the regulation of growth and differentiation in in vitro cultures of eggplant (Solanum melongena L.): PhD thesis, University of Delhi, Delhi, 1994.

318. Sharma P., Rajam M. Induction of laterals in root cultures of eggplant (Solanum melongena L.) in hormone-free liquid medium: a novel system to study the role of polyamines// Plant Sei.- 1997. Vol.125. P.103-111.

319. Sharma P., Rajam M~ Spatial and temporal changes in endogenous poly-amine levels associated with somatic embryogenesis from different hypocotyl segments of eggplant {Solanum melongena L.) // J Plant Physiol. 1995b. Vol.146. - P.658-664.

320. Sharma P., Rajam M. Genotype, explant and position effects on organogenesis and somatic embryogenesis in eggplant {Solanum melongena L.)// J. Exp. Bot.- 1995a. Vol.46, № i. P.135-141.

321. Sheela K., Gopalakrishnan P.K., Peter K.V. Resistance to bacterial wilt in a set of eggplant breeding lines. // Indian J. Agric. Sei.- 1984.- V.54, № 6.-P.457-460.

322. Shimonaka M., Hosoki T.,Tomita M. et al. Production of somatic hybrid plants between Japanese bunching onion {Allium fistulosum L.) and bulb onion {A.cepa L.) via electrofusion. // J. Jpn. Soc. Hortic. Sei.- 2002. Vol.71.- P.623-631.

323. Shiro I., Naoko I. IS SR1 variations in eggplant {Solanum melongena L.) and related Solanum species // Sei. Hort. 2008. Vol.117. - P.186-190.

324. Sidhu A.S., Bai S.S., Behera T.K. et al. An outlook in hybrid eggplant breeding // J. New Seeds. 2005. Vol.6, № 2-3. - P. 15-29.

325. Sihachacr D., Haicour R, Serraf I et. al. Electrofusion for the production of somatic hybrid plants of S. melongena and S. khasianum Clark // Plant. Sci.-1988. Vol.57.- P.215-223.

326. Singh A.K., Singh M., Singh A.K., Singh R., Kumar S., Kalloo G. Genetic diversity within the genus Solanum (Solanaceae) as revealed by RAPD markers. // Current Sei.- 2006.- V.90, № 5.- P.711-716.

327. Singh S.N. Hazarika M.N. Note on relationship between performance per se and general combining ability of parents in eggplant // Indian I. Agric.Sic.-1982.-Vol.9.-P.614-615.

328. Skälovä D., Dziechciarkovä M., Lebeda A., Kristkovä E. and Navrätilovä B. Interspecific hybridization of Cucumis anguria and C. zeyheri via embryo-rescue // Biol. Plant. 2008. Vol. 52, № 4.-P.775-778.

329. Skirm G.W. Embryo culturing as an aid to plant breeding. // J. Hered.- 1942. Vol.33.- P.211-215.

330. Skroch P:W., Nienhuis J., Beebe S., Tohme J., Pedraza F. Comparison of Mexican common bean (Phaseolus vulgaris L.) core and reserve germplasm collections. // Crop Sei.- 1998. Vol.38.- P.488-496.

331. Smith P.G. Embryo culture of a tomato species gybrid. // Prac. Am. Soc. Hort. Sei.-1944. Vol.44.-P.413-416

332. Sreedhar R.V., Venkatachalam L., Thimmaraju R. et al. Direct organogenesis from leaf explants of Stevz'a rebaudiana and cultivation in bioreactor // Biol. Plant. 2008. Vol.52. - P.355-360.

333. Stedje B., Bukenya-Ziraba R. RAPD variation in Solanum anguivi Lam.and S. aethiopicum L. (Solanaceae) in Uganda. // Euphytica.- 2003.- V.131.- P.293-297.

334. Stoclet J.C., Chataigneau T., Ndiaye M. et al. Vascular protection by dietarypolyphenols // Eur. J. Pharmacol. 2004.Vol.500. - P.299-313.

335. Sudheesh S., Vijayalakshmi N. R. Role of pectin from cucumber (Cucumis sativus) in modulation of protein kinase С activity and regulation of glycogen metabolism in rats // Indian J. Biochem. Biophys. 2007. Vol.44, № 3. — P.183-185.

336. Suezawa K., Matsuta N., Omura M. Plantlet formation from cell suspensions of kiwifruit (Actinidia chinensis Planch, var. chinensis) // Sci. Hort. — 1988. Vol.37. P.123-128.

337. Swarup V. Genetic resources and breeding of aubergine (Solanum melongena L). // Acta Hort.- 1995.- V.412.- P.71-79.

338. Та С. A., Zee J. A., Desrosiers T. et al. Binding capacity of various fibre to block pesticide fesidues under simulated gastrointestinal conditions // Food-Chem. Toxicol. 1999 . Vol.37, № 12 . - P.l 147-1151.

339. Taper H. S., Roberfroid M. Influence of inulin and oligofructose on breast cancer and tumor growth // J. Nutr. 1999. Vol.129, № 7. - P.1488-1491.

340. Tateyama G., Igarashi K. Anthocyanin and chlorogenic acid contents of some selected eggplant (Solanum melongena L.) cultivars, and the radical scavenging activities of their extracts // J. Japan. Soc. Food Sci. Tech. — 2006. Vol.53, №.4.-P.218-224.

341. Tatsuzawa F., Ando Т., Saito N. et al. Acylated delphinidin 3-rutinoside-5-glucosides in the flowers of Petunia reizii II Phytochemistry . 2000 . Vol.54 . -P.913-917.

342. Tseng Т., Hsu J., Lo M. Ihibitory effect of Hibiscus protocatechuic acid on tumor promotion in mouse skin // Cane. Lett. 1998. Vol.126. - P. 199-207.

343. Tukey H.B. Artificial culture methods for isolated, embryos of deciduous fruits. // Proc. Am. Soc. Hort. Sci.- 1934. Vol.32.- P.313-322.

344. Vinson J., Hao Y., Su X. Phenol antioxidant quantity and quality in foods: vegetables // J. Agric. Food Chem. 1998. Vol.46. - P.3630-3634*.

345. Visarada K.B., KishoreS.N., Balakrishna D. Transient gus expression studies in sorghum to develop a simple-protocol for Agrobacteriummediated genetic transformation."// J. Genet. Bred.- 2003. Vol.57.- P. 147-154.

346. Wanjari K.B. Cytogenetic studies on F! hybrids between Solarium melon-gena L. and Solarium macrocarpon L. // Hort.Res.- 1976.- V.15.- P.77—82.

347. WanY., Sorrensen Y., Liang G.H. Genetic control of in vitro regeneration in alfalfa (Medicago sativa L.) // Euphytica. 1988. Vol.39. - P.3-9.

348. Wen J., Tu J., Li Z., Fu T. Improving ovary and embryo culture techniques for efficient resynthesis of Brassica napus from reciprocal crosses between yellow-seeded diploids B. rapa and B. Oleracea II Euphytica. 2008. - Vol.162, № 1. - P.81-89.

349. Whalen M.D. Conspectus of species groups in Solanum subgenus Leptoste-monum II Gentes Herbarum. - 1984. Vol.12. - P. 282.

350. Winkel-ShirleyB .Biosynthesis of flavonoids and effects of stress // Cur. Opin. Plant Biol. 2002. Vol.5. - P.218-223.

351. Wu X. Адсорбция и метаболизм: антоцианинов человека после употребления голубики // J.Nutr. 2004: Vol: 134. - Р.2603-2610.

352. Wu X., Cao G., Prior R. Absorption and metabolism of anthocyanins in elderly women, after consumption of elderberry or blueberry // J. Nutr . 2002. Vol.132.-P.1865-1871.

353. Xing Y., Yu Y., Luo X. High efficiency organogenesis and analysis of genetic stability of the regenerants in Solanum melongena I I Biol. Plant. 2010; Vol.54, № 2.-P.231-236.

354. Yeung E. C., Thorpe T. A.,. Jensen C. J. /« v/'/ro fertilization and embryo culture: /Яп: Thorpe T. A:,(ed:), 198L (q.v.).- 1981.-P.253-271.

355. Yoshimoto Mi, Okuno S., Yamaguchi M. Antimutagenicity of deacylated anthocyanins in purple-fleshed sweetpotato // Biosci. Biotechnol. Biochem. — 2001. Vol.65 .-P.1652-1655.

356. Zenkteler M. Intra ovarian and in vitro pollination. I I In: Vasil I.K. (ed.) 1980b (q.v.).- 1980.- P.137-156.

357. Zhang F.L., Takahata^ Y.Inheritance of microspore embryogenic ability in Brassica crops // Theor. Appl: Genet. 2001.Vol. 103; - P.254-258.

358. Zhang P., Phansiri S., Puonti-Kaerlas J. Improvement of cassava shoot organogenesis by the use of silver nitrate : ш vitro II Plant Cell Tissue Organ Cult. 2001. Vol.67. - P.47-54.

359. Zobayed S. M. A., Afreen F., Xiao Y. Recent advances in research on photoautotrophic micropropagation using large culture vessels with forced ventilation 11 In vitro Cell. Dev. Biol. Plant. 2004. Vol.37. - P.450-458.

360. Список выступлений и публикаций (2008-2011 годы)

361. VII Международный симпозиум по фенольным соединениям ГУ Российской академии наук Институт физиологии растений- им. К.А. Тимирязева РАН (Москва, 19-23 октября 2009 года).

362. Международная ежегодная научно-практическая конференция РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева (Москва, 15-18 декабря 2009 года).

363. Верба В.М. Содержание антоцианов в плодах линий баклажана селекции ВНИИССОК в условиях малообъемной гидропоники / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, Н.А. Шмыкова // Овощи России. 2009. - № 3. - с.37-42.

364. Верба В.М. Культурный баклажан происхождение, задачи селекции и генетические источники / М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, В.М. Верба // Овощи России. - 2009. - № 4 (6) . - 2010. - № 1 (7) . - с.27 - 33.

365. Верба В.М. Антоцианы в плодах баклажана селекции ВНИИССОК/ М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, Н.А. Шмыкова, В.М. Верба, Передеряев О.И.// Фенольные соединения: фундаментальные и прикладные аспекты. — М.: Научный мир, 2010.« с. 135-144.

366. Верба В.М. Клональное микроразмножение баклажана / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, Н.А. Шмыкова // Доклады ТСХА. М: РГАУ-МСХА. - 2010. - Вып. 282. - 4.1. - с. 603 - 607.

367. Верба В.М. Получение межвидовых гибридов баклажана методом эмбриокультуры./ В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, Н.А. Шмыкова //Сельскохозяйственная биология. 2010. — №5.- с.66-71.

368. Верба В.М. Клональное микроразмножение баклажана путем органогенеза / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, Н.А. Шмыкова // Вестник РАСХН.- 2010.- №6. с.57-59.

369. Верба В.М. Определение количественного состава антоцианов в плодах баклажана (S. melongena) селекции ВНИИССОК / В.М. Верба, М.И. Мамедов, О.Н. Пышная, Н.А. Шмыкова // Доклады ТСХА. М: РГАУ-МСХА, 2011 (в печати).

Информация о работе

Верба, Вадим Михайлович
кандидата сельскохозяйственных наук
Москва, 2011
ВАК 06.01.05

Диссертация

Разработка элементов технологии, направленной на расширение генетического разнообразия баклажана при селекции на качество - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Разработка элементов технологии, направленной на расширение генетического разнообразия баклажана при селекции на качество - тема автореферата по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы