Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Природные очаги арбовирусных инфекций в центре Русской равнины

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Природные очаги арбовирусных инфекций в центре Русской равнины"

АКАДЕМИЯ МЕДИ1ШНСКИХ НАУК СССР ИНСТИТУТ ВИРУСОЛОГИИ им. п. И. 1ША!ЮеСК01'0

11а. правах рукописи.

КАНЛАУРОВ Евгений Константинович

ПРИРОДНЫЕ ОЧАГИ АРЕОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЯ В ЦЕНТРЕ РУССКОЙ РАВШ1НЫ

I

03.00. Об - вирусология

э

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА - 1992г.

]

академия мелшшюкмх наук ссср институт вирусологии им. л. и. ивановского

На пг.авах рукописи.

КАНЯАУРОВ Евгений Константинович

природные очаги арвовирус'ных инфекций п центре русской равнины

03.00. 06 - виоусология

АВТОРЕФЕРАТ лиссеоташи на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА - 1992г.

*' .¿.'г.«Д { . К

3. И ¡;гш! - тдел I сзртаций I

п

Работа выполнена в Институте вируссл^

АШ1 СССР

ьсчссго

Научный руководитель: А1:адеыик Ш1 СССР, профессор Д. К. Львов Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук С.Я Гайпамович

Доктор биологических наук С. А. Шилова

Ведущее учреждение - Институт полиомиелита и вирусных энцефалита;

Зашита диссертации состоится " " _199 г.

(

в _ часов на заседании Специализированного Ученого Совета

д. от. со. ог >

при Институте вирусологии им. Д. И. Ивановского АМН СССР

(123098. г. Москва, ул. Гамалеи. 16)

О диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института. Автореферат разослан "___"______199 г.

Учений секоетарь Специализированного совета.

¡-.анлидат медицинских наук, А. Ы. Жуг.овский

в

1шлеш1е

Актуальность проблемы.

Практически повсеместное распространенно лрг nriwymr. и их значительная роль в инфекционной патологии человека и животных привело к необходимости широкого изучения территории страны лля выявления природных очагов отих ииФекний. мсобое значение приобретает изучение арбовирусных инфекций в регионах с большой плотностью населения и благоприятными приролно 1сли-матическими условиями, способствующими циркуляции природных очагов различных арбовирусов.

Таким регионом является центр Русстй равнины, располагающийся на плошали 653 тыс. кв. км. и с населением 36 мл чело>

век.которые проживают в Брянской.Орловской.Курсгап.Белгородской. Тамбовской.Липецкой и Воронежской областях. По фиг.-географическим условиям регион относится к лесостепной зоне .благоприятной для обитания разнообразных видов животных, часть из которых является резервуарами арбовирусов.а другая их переносчиками.

Поэтому, изучение природных очагов арбовирусных инфекций в центре Европейской части России является актуальной проблемой позволявшей решать практические вопросы здравоохранения и ветеринарии.

Пель и задачи исследований.

Целью настоящей работы явилось выявление природных очагов арбовирусных инфекиий в центральной части Русской равнины, изучение .экологии изолированных арбовирусов и их роли в инфекционной патологии человека.

- 4 -

Были поставлены следующие ^Ct^CiJXLu' -характеристика территории центральной ъо&тп Pycnuoi равнины.с учетом различных условий существования природпш очагов арбовирусов;

-выявление роли отдельных видов членистоноги): переносчи ков в з1сологии арОовирусов:

-определение участия позвоночных животных в хранена возбудителей арбовирусных инфекций;

-серологическое обследование сывороток крови населения и животных:

-составление карты ареалов арбовирусов в обследуемом регионе.

Научная новизна

Впервые проведены исследования по выявлению природных очагов арбовирусных инфекций в регионе.

Изолировано 37 штаммов четырех вирусов.ранее не отмечавшиеся на этой территории.

Впервые установлена циркуляция в природе вирусов: -комплекса Калифорнийского энцефалита (сем. Bunvaviridae) • Ватанподобпогр вируса юем. Bunyaviridaei; -Укуниеми i сем. Bunvaviridae); -Кгмерово < сем. Reoviridae).

Выявлена роль комаров p. Anopheles в передаче Еатаипо доеного вируса и его тесная связь с крупным рогатым скотом.

.юнаружс-н новый для Европейского континента переносчик ьирусов гр. Калифорнийского энцефалита-комар Aedes cat aphvl la.

Налден новый для этой территории норовый глещ Ixodes l.auor 1.

гневные положения.выносимые на зашиту.

Территория центральной части Русской равнины к 198S году

Сила практически не изучена на арбовирусные инфекции.поэтому все полученные сведения о циркуляции очагов арбопирусных инфекций в этом регионе являются приоритетными.

Получены приоритетные данные о циркуляции природных очагов вирусов гр. Калифорнийского энцефалита. 1:атанподоонога.Уку-Hii&Miit сем. Burwav 1 г idae). Кймс-рово i Reov 1 г tdas i.

В стойких очагах Батаиподобного вируса получены сведения о зараженности комаров р. Anopheles и связи этого вируез с крупными домашними и дикими животными.

Результаты серологичесгаго обследования здорового населения, домашних и диких животных показало.что на территории региона в процесс циркуляции изолированных арбовирусов широко вовлечено население, также домашние и дикие животные.которые являются резервуарами этих вирусов:

Получены сведения о новом переносчике вирусов гр. Калифорнийского энцефалита, которым является кошр Aedes cataphvlla.

Практическая ценность.

Знание эпидемической ситуации в областях Центра европейской части Рсссии.этом густонаселенном регионе.позволит практическим органам здравоохранения этих областей разработать неооходимые профилактические мероприятия по защите населения от природноочаговых вирусных инфекций.

Анализ результатов вирусологических и серологических исследований позволил:

выявить природные очаги вирусов.относящихся к осм. ßimvaviridae и охарактеризовать циркуляцию Батаипсдосного ьируса и гр. Калифорнийского энцефалита в ооластях обследованного региона:

-установить циркуляцию вируса Укуниеми i пом. lui.vavir к1ао)

- ti -

и Кемерово i сем. Roovir idao) :

-серологический анализ сывороток здорового населения.домашних и диких животных показал.что на территории региона циркулируют та!-ж вирусы клетевого энцефалита и лихорадют Западного Нила.

Результаты исследований были доведены до органов здравоохранения каждой из обследованных областей в форме отчетов.в которых указывались все изолированные вирусы и их роль в краевой инфекционной патологии и сведения по циркуляции других вирусов, выявленных в процессе серологических исследований сывороток крови здорового населения.

Апробация работы.

Основные материалы диссертации были доложены на симпозиуме "Арбовирусы и арбовирусные инфекции"состоявшийся с 1-4 апреля в Лыткино и на заседании Совета предварительной экспертизы диссертационных работ по медицинской вирусологии при Институте вирусологии им. Д. И. Ивановского АМН СССР 9 июля 1991 года.

Основное содержание диссертационной работы отражено в 15 научных публикациях.

Объем и структура работы.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы. С, глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и указателя литературы ( V5 отечественных и 72 зарубежных источников), •сший объем работы 101 страниц машинописного текста, включающего 13 таблиц. 3 карты.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы.

Работа по сбору полевого материала .в гпотггтг-тшш о программой Центра экологии возбудителей инфекционных г.аг.олева ниИ. проходила в эпндсезоны 1'J35-193'.' гг.-.теле лопались <-.г, ласти, входящие р центральную часть Русской равнины: Брянская. Курог-ая. ■ чэлог.екая. Липецкая. Тамбовская. Белгородская. Вороне жгкал.

С 1935 г. обследовалась Брянская область. Работы проводились с апреля по сентябрь. Материал собирался в й,тоиическом. Брянском. Трубчевском и Новоэыбковском районах. Точки сбора выбирались из расчета охвата типичных ландшафтов характерных для области. Предварительно, в марте 1985 г. плп обшего гг.накомления

с ландшафтным разнообразием.был проведен облет территории об-

■

ласти на самолете АН-;', на высоте 150 м. ОСший налет составил 7. 5 часов, облет проводился совместно с органами управления охотничьего хозяйства.которые проводили авиаучет диких копытных животных.

В Брянской области проходит граница лесной и лесостепной природно-климатических зон.хорошо просматривается переход от полосы смешанных и сосновых лесов к лесостепи.

Учитывая •экологию пеоеносчиков.для сбора материала выбирались пойменные.надпойменно-террасовые и приречные типы местности. Поэтому материал собирался в угодьях.связанных с поймами рек.ручьев или другими водоемами.

В 1936 году.единовременно.с середины апреля по сентябрь обследовались три области: Орловская.Курская и Белгородская. Эти области центральной России лежат целиком в лесостепи.а юг Белгородской области i р-ны: Валуйский и Вейделевский) относятся •;тче к степной зоне.где степь представлена обширными агроцено-

- а -

сами. В этих областях места сбора материала также были приурочены к определенным типам местности.благоприятных для переносчиков. иоследовано 17 административных района и отдельные населенные пункты. Наряду со сбором материала в естественных угодьях, обращалось большое внимание на обследование сельских населенных пунктов.где концентрируются домашние жиьотние.

Липецкая.Тамбовская и Воронежская обл. обследовались в 198? году. В этих областях.расположенных в восточной части региона заметно сказывается континентальность климата, о чем говорилось выше. В Липецкую,Тамбовскую и на север Воронежской области весна приходит с опозданием на 12-15 дней по сравнению с южными районами тей же Воронежской области (Еогучарским и Россошанским). Имеются значительные массивы широколиственных и сосновых лесов.которые являются местообитанием крупных iconur них животных i Воронежский и Хоперский заповедники).

На сбор материала и обследование обширной территории региона потребовалось 8880 человеко/дней,протяженность маршрутов пеших и автомобильных составляет более 4500 км. ta это время было отловлено и обследовано 18000 иксодовых кленей,199000 зкз. комаров,361 экз. позвоночных животных.собрано 1007 сывороток от здорового населения.обнаружено 75 больных и обследовано 176 сывороток от различных животных.

Голодных клещей собирали с использованием стандартных волокуш и на флаг. Напившихся и полунапившихся клещей собирали с домашних животных: коров.овец,лошадей.собак,а тагле с трупов добытых диких животных (мышевидных грызунов.зайцев.кабанов. оленей и др. 1,Норовый клещ Ixodes ka i sen был найден благодаря норной собаки в Ракитянском районе Белгородской области.

Комаров.активно нападающих в природе,отлавливали стандартным энтомологическим сачком и эксгаустером с ловца и до

мгшних животных. Отлов комаров р. ЛпорЬе1ег. провод;™ исключи тельно эксгаустером на дневках, в закрыли помещениях гл<? содержится домашний скот.

Мелких млекопитающих добывали с помощью стандартных ла гилок и живоловок. Крупные животные добывались путем отстрела в соответствии с разрешениями Главохоты РС'К'Р на добычу животных в научных целях. Отработан метол прижизненного взятия крови у некоторых крупных млекопитающих из сердца.с последующим наблюдением за этими животными. Так бралась кровь у бобров п Воронежском заповеднике и у сурков-байбаков г. Богучарском районе . Все животные остались живы без каких-либо видимых нарушений здоровья.

Острых больных выявляли активно.обследуя Центральные районные больницы, участковые боль ниш, инфекционные отделения и больницы в областных городах." От Сольных получали парные сыворотки: первая бралась в остром периоде, а вторая через 2-3 недели. Из вирусологическое обследование брали сгустки крови в первые 5-7 дней болезни.

Весь биологический материал.кроме клешей.транспортировался и хранился до обследования в пластмассовых контейнерах, помешенных в жидкий азот с температурой 196 градусов.

Голодные клещи помещались во влажные камеры или во влажный бинт и доставлялись в тшеом виде в лабораторию.после чего помешались в бытовой • холодильник.где они сохранялись живыми необходимое время. Напившиеся и полунапившиеся клещи транспортировались и сохранялись во влажных камерах.

Сыворотки для серологических исследований собирали от здорового населения через станции переливания крови. При кратковременном хранении сывороток их помешали в бытовой холодильник с температурой +4 градуса,а на длительное хранение с тем-

пературой -20 градусов или в лиофилизированном состоянии.

Изоляцию,идентификацию вирусов,определение инфекционнсс-ти вирусов и серологические исследования проводили в лаоорато-рии экологии вирусов. Злектронномикроскопические исследования в лаборатории структуры и морфогенеза вирусов Института вирусологии им. Д. 11 Ивановского.

Изоляцию вируса проводили на мышах- сосунках 1-2 дневного возраста. Клещей группировали в пулы по 50 экземпляров,а комаров пс 200 экземпляров. Материалы от позвоночных животных i печень,селезенка,мозг) объединяли от одного животного в один пул,иногда объединяли в один пул до 3-х экземпляров животных одного вида,отловленных в одном месте,в одно время. Материал тщательно растирался в ступке и приготовлялась 101 суспензия со средой N 199,содержащей канамицин и гентамицин с концентрации 100 ед/мл. Приготовленную суспензию осветляли центрифугированием при 2000 сб/мин. Надосадочную жидкость использовали для внутримозгового заражения мышей-сосунков,которых наблюдали в течение 14 дней. Животных забивали на высоте клинической картины. При изоляции штамма.обязательно проводили последующую ре-изоляцию из хранящэйся при -70 градусах первичной суспензии. После двух пассажей на животных мозговой материал лиофилизировали и закладывали на хранение. В период изоляции вирусов из полевых материалов не проводилась работа с музейными штаммами арбовирусов.

Титрование вирусов проводили на мышах-сосунках и в клеточных культурах. В первом случае десятикратным разведением ви-руссодержащей суспензии заражали интрацеребрально по V мышей сосунков на каждое разведение. В клеточных культурах десятикратными разведениями осветленной вируссодержащей сус Пснзни заражали ib объеме ü.l мл) по 4 пробирки со сфсрмиро-

вавшимся монослоем клеток.инкубировали в термостате при яу градусах.просматривая ежедневно под микроскопом по наступления неспецифической регенерации в контроле. Титdu определяли по ме толу Рила и Менча .

Антигены к выделенным штаммам готовили из мг,.-;гл гаоол» е-ишх мышей-сосунков методом сахарозо-ацетоновой экстракции. К Ш объемам охлажденного химически чистого ацетона посэвляли "OZ мозговую суспензию, приготовленную на 3, bZ сахарозы. Центрифугировали при "ООО об/мин 5 минут.удаляя надосадочную жидкость. Осадок тщательно растирали и добавляли снова СО объемов ацетона.после чего выдерживали 1 час при +4 градусах и ценри-фугировали (2000 об/мин.5 мин). Удаляли надосадочную жидкость и добавляли к осадку небольшое количество ацетона.который после

очередного центрифугирования в том же режиме удаляли. Осадок

■

сушили под вакуумом,а затем растворяли в боратном буфере с pH 9.0 в объеме равном первоначальному. После выдержи в течение 20 часов при +4 градусов центрифугировали в течение часа при 1000 об/мин. Надосадочная жидкость представляла собой антиген, который в PCR использовали в разведении 1:20. При постановке РЛ11А антиген концентрировали в 10 раз полиэтиленгликолем.

Иммунные асиитические жидкости (ИАЖ) получали по методу ■Я Гайдамович и др. 1969. Тридцати самцам белых мышей вводили вначале подкожно i0.2 мл).а затем внутрибрюшинно (0.1 мл) 10% мозговой суспензии с равным количеством адъюванта Ярейн-да. Внутрибрюшинное введение повторяли до б раз. ИАЖ собирали по мере накопления и затем лиофилизировали.

Лля идентификаци выделенных штаммов использовали набор референс ПАЯ к арбовирусам из коллекции Института вирусологии им. Я. и. Ивановского. Идентификацию в РСК проводили макрометодом с тремя дозами комплимента при +4 градусах. Использовали широ-

%

кий спектр ИАЖ к вирусам комплекс/) ¿^ц^^гшокгэднцефалита, группы Укуниеми,комплекса Вуньямвера.группы Кемерово.

Для идентификации ряда вновь выделенных штаммов использовали РН в культуре клеток ОГОВ со 100 ЦПД и ИАЖ к прототип-ным штаммам вирусов. Перед опитом ПАЯ прогревали при 56 граду сах в течение 60. Двукратные разведения ИАЖ 11:20-1: 40960) соединяли с рабочим разведениями идентифицируемых штаммов. Смесь выдерживали в течение 60 при 37 градусах. В опыт включал:! .титрование вирусов как контроль рабочей дезы результаты учитывали нз 5-6 день после инфицирования культуры,регистрируя ЦГЩ по 4- х крестовой системе в инвертированном микроскопе. За титр антител принимали наибольшее разведение ИАЖ.при котором обеспечивалась защита клеток от цитопатогенно-го эффекта.

Для электронной микроскопии использовали монослой клеток ВНК-21 или мозг мышей-сосунков. В первом случае клетки осаждали на малых скоростях. Осадок фиксировали 2.5Х глюгаральдегидом на фосфатном буфере рН 7,4 в течение 1 часа,а затем в аабуферном растворе 12 Оз 04.обезвоживали и заключали в аралдит. Ультратонкие срезы.полученные на ультратоме Райхерт( Австрия)окрашивали ы уранилацетатом на 50 градусном метаноле и раствором цитрата свинца.

Реакцию диффузной преципитации на агаре (РДПА) проводили в и агаре Дифко на физиологически растворе по методу иисМ.ег1оп7. Агар разливали по 10 мл на обезжиренные в смеси спирта и эфира стекла на горизонтальной поверхности. В застывшем агаре прорезали лунки диаметром 4 мм,расстояние между лунками 10 мм. В лунки вносили реагенты вровень с поверхностью агара и помешали во влажную камеру при комнатной температуре. Реакцию учитывали через 24-48 часов по наличию или отсутс-

твию полосы преципитации в проходящем свете.

Реакцию связывания комплимента ( РСК) ставили макрометодом в объеме 0.5 мл на холоде по обычной методике с тремя дозами комплимента. Комплиментом служила нативная сыворотка морских свинок. ИМ после предварительной инактивации разводилась от 1:8 до 1:1024. Антиген использовали в разведении 1:20. В про-сирку.где находилось 0.1 мл сыворотки добавляли 0.1 мл антигена и 0.1 мл комплимента.который брали в разведении,соответствующий рабочей дозе. Выдерживали в течение ночи при +4 градусах,заливали 0,5 мл гемолитической системы и помещали в термостат при 37 градусах. Учет реакции производили после проявления полного гемолиза в контрольных пробирках по 4-х крестовой системе.

Реакция нейтрализации (РН) ставилась микрометодом в перевиваемой культуре СШВ с тремя рабочим дозами вируса, которые выбирались по результатам предварительного титрования. Десятикратные разведения вируссодержащей суспензии смешивали с равным объемом (0,1 ил) нормальной,гомологичной иммунной и исследуемой сывороток,разведенных 1:10. Инкубировали смесь в СО инкубаторе ,освобождали от среды монослой клеток и вносили 0,1 мл смеси. Проводили инкубацию в течение 1 часа,смесь удаляли и вносили 0,2 us поддерживающей среды. После инкубации учитывали результаты по мере наступления ЦПД. Индекс нейтрализации подсчитывали по методу Рида и Ыенча.

Вирусы, адаптированные к клещам.

В 1986 году из клещей Ixodes гicinus,собранных в период с 10 по 14 мая с крупного рогатого скота в селе Должанко-во.Обояньского района.Курской области было изолировано два штамма: Кр11752 и Кр11767 идентифицированных как вирус укуние-

тм сом. Rimvav ir Мае). <!ело располагается в пойме небольшого ручья, по г.грегам которого произрастает широколиственный лее. олуткл лоса.ла и сам лесной массив является местом выпаса крупного рогатого скота.принадлежащего жителям села.

Учитывая тот Факт.что вирус Укуниеми был изолирован из органов желтогорлой мыши и рыжей полевки, небольшой г исток леса в окрестностях с. Лолжашюво может быть тем местом, где постоянно циркулирует этот вирус,поскольку желтогсрлзя мышь и рыжая полевка являются типичными обитателями этого биоценоза и олновремено являются прокормителя ми нимф и личинок Ixodes ricinus.

Вирус Укуниеми впервые выделен в этом районе. Дальнейших находок этого вируса в последующее время в регионе не было. Серологическое обследование сывороток здорового населения.сель скохозяйственных и диких животных в РН показало.что у населения и домашних животных отсутствуют антитела к этому вирусу и только в одном случае нейтрализующие антитела к вирусу Укуниеми йвЯаружны у сурков-байбаков (Mormota bobac).отловленных в Богучарском районе.Воронежской области.примерно в 350-400 км от места изоляции вируса и уже в степной воне.

Значение вируса Укуниеми в патологии человека пока не выяснено.хотя у населения эндемичных районов обнаружена иммунная прослойка к вирусу в пределах О.5 1ОХ .

Факту изоляшш вируса Укуниеми в Курской осласти и его экологическим связям в природе erne предстоит дать объяснение при отдельном углубленном изучении этой проблемы.

В 1986 году из клеоей Ixodes гtclnus.собранных с общественного скота в п. Шзбекино.Белгородской области в период с 11 по 16 мая был изолирован штамм БЛ13775.который был идентифици рован как вирус Кемерово (сем. Reovirldae)

- 15 -

Вирус Кемерово впервые изолирован из клещей Ixodes persulcatus в Кемеровской области в 1962 году. В лесостепной зоне ценральной части России этот вирус выделен впервые. Заболевания людей,связанные с этим вирусом,характеризуются лихорадкой, головной болью, развитием серозного менингита. При исследовании сывороток здоровых людей и животных в нашем регионе находок антител к этому вирусу не отмечено. Изучение механизма цикуляции вируса Кемерово, его экологические связи и роль в краевой инфекционной патологии является особой задачей, решению которой необходимо посвятить целенаправленные исследования.

В эпидсезоны 1985-1987 г. было собрано и обследовано вирусологическими методами 18029 экз. иксодовых клещей двух ви-floßlxodes ricinus и Dermacentor reticulatus. При этом на долю Ix. ricinus пришлось 4006 экз.a D. reticulatus-14023 экз.

Вирусофорность клещей.

Ixodes ricinus Dermacentor reticulatus

обследовано изолир. штаммов обследовано изолир. штаммов

к-во z к-во

4006 22,1: 3 1402

Из таблицы видно,что наиболее вирусофорным видом клеша в нашем регионе является 1х. гюшиз.от которых выделено два штамма вируса Укуниеми и один штамм вируса Кемергл-.о. ОСи^я за-

раженность клешей в регионе составляет 1:6009.а зараженность lx. ricinus 1:1335.что предопределяет его как потенциально опасного переносчика вирусных инфекций и к нему должно Сыть привлечено особое внимание со стороны паразитологов санитарно-эпидемиологической службы.

Вирусы.переносимые комарами.

Фауна комаров представлена пятью родами: Culiseta.Culex, Mansorua. Anophelea.Aedes. Наиболее многочисленными видами комаров в сборах были представители рода Aedes,видовой состав которого наиболее богато представлен во всех ландшафтных зонах и во всех биотопах нашего региона. Виды этого рода подавляют своей численностью представителей других родов и всегда доминировали в сборах. На втором месте по численности в сборах представлен род Anopheles с тремя видами. Далее роды: Cull seta, Culex.Mansonia самые малочисленные в сборах.

На территории Брянской области в 1985 году было собрано 31548 экз. комаров 18 видов,из которых изолировано два штамма вирусов. Оба штамма,на основании идентификации в РОК с набором референс-ИАЖ к арбовирусам были отнесенны к гр. Калифорнийского энцефалита(сем. Bunyaviridae.p. Bunvavirus).

Штамм Бр10613 был изолирован из пула кошров Aedes cataphvlla.отловленных 13 июня 1985 г. в бору, на территории охотхозяйства "Десна". Выгонического района В этой точке было отловлено комаров A. cataphvl 1а всего 604 экз.

Игамм Бр10628 выделен из пула комаров Aedes сinereus.которые были отловлены 3 июля 1985 г. в пойме небольшого ручья, в 1.5 км от г. Злынка,Новозыбковского района. Комары этого вида в сборах в этой точке составили 1380 экз.

Факт изоляции двух штаммов вируса из точек отнесенных

друг от друга на расстояние Солее чем на 250 км наводит на мысль,что этот вирус широко циркулирует на территории области, а выделение его из комаров различных видов говорит о широком круге переносчиков. Моноциклический,холоднолюбивый вид Aedes oataphvlla впервые отмечается на Европейском континенте в качестве переносчика вируса гр. Калифорнийаздго энцефалита и это при том,что этот вид не доминировал в численности и даже не был многочисленным. A. cataphvlla широкоареалышй вид и обычен в высоких широтах,что может служить одной из причин распространения вирусов гр. Калифорнийского энцефалита на большей части территории страны.

A. cinereus известный переносчик вирусов гр. Калифорнийс кого энцефалита,но в сезон 1935 года он также не был в числе доминирующи или многочисленных, об идя зараженность комаров штаммами вируса гр. Калифорнийского энцефалита в Брянской области составила 1: 15770,однако.зараженность в точках изоляции вирусов будет иной:в Выгоническом районе она составляет 1: ltfF.üO.a в Новозыбковском районе 1:4960. В Европе основным переносчиком вирусов группы Калифорнийского энцефалита является А. •vи его зараженность составляет 1: Г,'СЮ при общей зараженности 1: 1600. оценивая видовую зараженность комаров в Брянской области,находим,что она значительно выше,т. к. выделены штаммы ил малочисленных в этом сезоне комаров. Зараженность A. cataphvlla 1:302, а у A. cine rus 1:690.

По отдельным областям иммунная прослойка населения коле6 лотся в пределах от 13* до 21, УХ. Территория региона огромна и физнономически различна, но нейтрализующее антитела г. вирусами гр. Калифорнийского энцефалита обнаружены во г,с^х районах,откуда поступили сыворотки. Каких либо резких колебании г. иммунной прослойке у населения региона не наблюдается. Имеотел некоторые

различия по отдельным административным районам.которые не влияют на общую картину.

Наряду с обследованием сывороток здорового населения, удалось проследить участие некоторых диких и домашних животных в циркуляции вирусов гр. Калифорнийского энцефалита. У 20Х обследованных животных были обнаружены антитела к вирусам этой группы. Отдельные еиды. например.бобры и кабаны наиболее восприимчивы к вирусам гр. Калифорнийского энцефалита и в их крови содержится наибольшее количество антител к вируса».! этой группы. На наш взгляд это зависит от интенсивности контактов этих животных с комарами p. Aedes.

Вирусы гр. Калифорнийского энцефалита являются патогенными для человека в различной степени. Высокий показатель популя-ционного иммунитета населения при отсутствии эпидемических вспышек в местах изоляции вирусов.указывает.что инфекция может протекать в стертой форме и не распознаваться при диагностике.

Наряду с отловом комаров в естественных угодьях большое внимание уделялось сбору их в населенных пунктах, на дневках. В Орловской,Курской и Белгородской обл. было собрано 62092 экз. комаров,в том числе на дневках 13488 экз. p. Anopheles, что составило 21.77. от всех сборов и из них изолировано 23 штамма.

В Липецкой, Тамбовской и Воронежской обл. било собрано в сезон 1937 года 107219 экз. комаров,из которых 22673 экз. составили комары p. Anopheles или 21,12 от сборов этого года. Из комаров p. Anopheles здесь выделено 8 штаммов вирусов. Идентификация изолированных штаммов показала.что все штаммы однотипные и относятся к Батаиподобным вирусам (сем. Bunvaviridae).

Все населенные пункты .где отлавливались комары.из которых выделились штаммы,расположены в поймах различных рек.относящихся к бассейнам рек Дона и Днепра

U условиях лесостепной гони Европейской части l'.v^mi. Натаиподсбный вирус переносится комарами р. Annphe Ь-:-. Исследуя зараженность комаров.можно видеть.что в передаче 1!атлнпопг'бно го вируса комар» р. Aedes участия не принимают или их долл г-этом процессе не поддается учету.

ИнФииированность комаров.

Anopheles Прочие

t Culex.Сч! 1 I п. I.hri."niai

Обследовано к-во " выл. шт. к-во 5 выл. пгг. к-во ?. выл. шт. 132330 66.7 2 40328 20.2 31 23392 13.1 О

Зараженность комаров p. Anopheles составляет по региону 1:1300.в то же время зараженность дневок может быть необычайно высокой. На дневке в г. Грайворон. Во рис о г. с ко г о района. Белгородской области было отловлено 300 пкп. ЛгюрЬеЬь- ivocul ipenni и изолирован штамм. В Валуйском районе в с. Колосково было отловлено 6. 03. 35 г. 1600 пкз. An. macul ipennis и изолировано три яггаммп. в е*ле Хохллво отловлено 700 яка того же вида и выделен штамм. А п селе Гладкого у. 03.36 поймано г.гогс 16г, экс. Aiiopl^lc- macul ipormi.: и также выделен штамм. Поэтому.на наш взгляд. средняя зараженность Anopheles не всегда может представить истинную ичртнну зараженности комаров этих гидов.

При обследовании сывороток крови плорових люлей по областям, выяснилось, что популяинонный иммунитет к Глтаиподобному вирусу довольно низкий. Несмотря на обилие штаммов.изолирован-

liux на территории региона, мы счиТа-ен^То щдкнц процент серо-позитивных сывороток не отражает р<—аыы1 шртшш популяцион-ного иммунитета населения,поскольку в число доноров чаше попадают городские жители,которые мало контактируют с домашними животными и менее подвержены нападениям комаров. Поэтому направленное серологическое оСследование сельского населения должно.на наш взгляд выявить иные результаты, b качество приме ра укажем на Валуйский район Белгородскои области, откуда вы делено наибольшее количество штаммов и где удалось осследовать именно сельское население. Здесь процент серопозитигных сывороток к Гатаиподобному вирусу составляет 1и.Б. Близки к приведенным данным сведения,полученные из п. Журшшчи. Брянской области, где сыворотки были получены только от сельского населения и серопозитивные составили здесь 13,62.

Серологическое обследование крупного рогатого скота в местах изоляции штаммов показало высокий процент нейтрализующих антител к Батаиподобному вирусу. Например,в Валуйском районе Белгородской области,где ' было выделено из комаров р. Anopheles семь штаммов,процент иммунных животных составил 61,Б,в других же районах лесостепья этот показатель колеблется от 6.57. до 48?..

Еатаиподооный вирус связан не только с крупными домашними животными,но и дикими. Обследуя сыворотки диких животных,мы нашли.что антитела к этому вирусу имеются у бобров.оленей,ка-оаиоЕ и даже у сурков-байбаков. Очевидно, еде предстоит объяснить связи этих животных с Ьатаиподобным вирусом.т. к. слишком уж различны группы животных участвующих с его циркуляции.

До последнего времени роль Батаиподооных вирусов в патологии человека оыла не выяснена.что можно было осъяснить отсутствием исследований с этой группой вирусов. Уже первые целе-

направленные усилия по выявлению Сольных арбовирусныыи инфекциями позволяют считать Батаиподобный вирус патогенным для людей.

Кроме того,обследуя в РТГА сыворотки людей и животных, собранных в Воронежской области в 1987 году,мы обнаружили, что кроме уже известных нам вирусов,здесь циркулируют вирус клещевого энцефалита и вирус Западного Нила.

Таким образом,на территории Центра Русской равнины циркулирует природный очаг Батаиподобных вирусов,переносимый комарами, тесно связанный с крупным рогатым скотом и другими дикими и домашними животными.

Выводы.

1. Впервые была обследована территория Центра Русской равнины с площадью 653 тыс. кв. км и населением около 36 мл человек, проведены вирусологические и серологические исследования.направленные на выявление природных очагов арбовирусных инфекций.

2. Впервые на этой территории выделено два штамма вирусов, отнесенных к гр. Калифорнийского энцефалита

3. Впервые на Европейском континенте вирус гр. Калифорнийского энцефалита выделен от комаров Aedes cataphvlla.

4. Впервые изучен популяционный иммунитет здорового населения к вирусам гр. Калифорнийского энцефалита

5. Впервые на территории Центра Русской равнины выделены 31 штамм Батаиподобных вирусов.

6. Основными переносчиками Батаиподобных вирусов являются комары p. Anopheles.связанные с крупными домашними животными.

7. Изучен популяционный иммунитет здорового населения к

Батаипсщобным вирусам.

3.Серологическое обследование домашних и диких животных показало.что антитела к вирусам гр. Калифорнийского энцефалита и Батаиподобному вирусу содержатся у значительной части этих животных.

9. Впервые в регионе из клещэй Ixodes ricinus выделено два штамма вируса Укуниеми ( Bunyaviridae) и один штамм вируса Кемерово ( Reovlridae).

10. При обследовании в РТГА сывороток здорового населения Воронежской области выяснилось,что небольшая группа людей имеет антитела к вирусам клещевого энцефалита( 0,2Z) и Западного Нила (1.02Х).

Список работ,опубликованных по теме диссертации.

1. Птицы очагов лихорадки Западного Нила на юго-востоке Азербайджана. A. IL Алешин, Л. П. Никифоров, Е. К. Кандауров. 5 Симп. по изуч. перел. птиц и распр. арбовирусов. Тез. докл. Новосибирск, 1969.

2. Работа с позвоночными в природных очагах арбовирусов. Е П. Андреев. Г. А. Сидорова, Е. К. Кандауров. Сб. Арбовирусы, U. ,1986, с. 51-61.

3. Изоляция вирусов Залива Терпения и Тягиняподобного из комаров, собранных в тундре, леелтундре и северной тайге полуострова Кольский, Таймыр и средней тайге Карелии. С. Д. Львов, Е Л Гро-машевский. Г. Е Богоявленский. Ф. Н. Байлук, Т. М. Скворцова, IL Г. Кондрашина. Е. К. Кандауров. Мед. паразитол. и параз. б-ни, М.. 1937. H 6. с. 40-42.

4. Isolation of some arboviruses in central areas of URSS. E. К. Kandaurov. V. A. Aristova. Q.A. Sldorova. et al. Int. svnp. on

>

ecology of arboviruses, Smolenlce, Sept., 7-11, 1987, p. 60.

5. Isolation of arboviruses (Bunvavtrldae. Bunyavlrus, Uukuvirus) from mosquitoes collected from north to polar circle on Cola and Taimyr peninsulas. S.D.Lvov, V. L. Gromashevsky. G. V. Bofrovavlensky, Т. M. Skvortsova, F. N. Bal luk, A. M. Butenko, N. G. Kondrashina. E. K. Kandaurov et al. Int. symp. on ecology of arboviruses, Smoienice, 1987, p. 59.

6. Изоляция ТягиняподоСного вируса (Bunyaviridae, Etunvavirus, комплекс калифорнийского энцефалита) на севере о. Сахалин. Д. К. Львов, Л Д. П^рбина, Г. К. Заиров, Н.ИАртюхов, С. Д. Львов, А. А. Шилов, Е Л. Громашевский, Е. К. Кандауров и др. Вопр. виру-ссл. , М. , 1987, N 5, с. 589-590.

7. Выявление арСовирусных инфекций в Белгородской области.

Е. К. Кандауров, а Л. Громашевский, Л. !1 Абрамова, Н. С. Савосина. Сб.

%

11; Вс. конф. по прир. очаг-сти б-ней, Новосибирск, 1989.

3. Экологическое зондирование больших территорий на арбови-русы. Д. К. Львов, А. Д. Авершин, а А. Аристова, В. П. Андреев, Е. А. Ва-кулина, A. U. Бутенко, Е. А. Владимирцева, о, ЕВолцит, И. а Галкина, а А Громашевский, Е. А. Гущина, Г. А. Дмитриев, Е. К. Кандауров и др. Со. АрСовирусы и арбовир. инф. Тез. докл. меад. симп. U., 3-5 окт. , 1989. с. 5-6.

9. Природные очаги вирусов в высоких широтах Евразии. 0. Д. Львов, а Л. Громашевский, И. Я. Егоров, Э. Ф. Канев, Е П. Андреев, Г. М. Скворцова, R Г. Кондрашина, Т. Н. Морозова. Е. А. Гущина, А. Д. Авершин. О. аволцит, а А. Аристова, Г.А.Дмитриев. Л. Е Колобу-хина. Г. а Богоявленский,Е. К. Кандауров и др. В сб. Арбосирусы и ар-оовирусные инфекции. Тезисы докладов Мэж дународного симпозиума. Москва 1989, стр. 13-14.

10. Survei 1 lance for arboviruses in th<- Soviet Ur.ion: relationships between ecolog-v гсг.^;; ar,j viruses

distribution. Lvov D. К. .Avershin A.D. .Andreev V. P. . Ar i stova

V. A. .Butenko A.M. .Galklna 1. V., Gromashevskv V.L.. Dmltrlev G. A..

J59L

Kondaurov Y. K. et al. Archives of viroloeyrT7p. 259-267.

11. Natural foci of arboviruses in far northern latitudes of Eurasia Lvov 3. D. . Gromashevsky V. L., Andreev V. P., Skvortsova Т. M. . Kondrashlna N. G. . Kbrozova T.N.. Avefshln A. D. . Aristova V.

A.. Dmitriev G. A. . Kandaurov E. K. et al. Archives of virology, J99 1. p. 267-277.

12. Арбовирусы в Центральной части Русской равнины. Е. К. Кан-дауров, В. П. Андреев, О. ЕВолцит и др. Материалы Всесоюеного симпозиума арбовирусы и арбовирусные инфекции. Москва-Лыткино, 1991, с. 46.

13. Изоляция вируса Батаи в центре Европейской части России. Е А. Аристова, Е Л. Громашевский, Т. М. СкворцоЬа, Е. К Кандауров и др. Материалы Всесоюзного симпозиума a t>6o вирусы и арбовирусные инфекции. Москва-Лыткино, 1991,с. 47.

14.Экологическое зондирование'территории СССР на арбовирусные инфекции. Д. К. Львов, А. Д. Авершин, Е А. Аристова, Е И Андреев, Е. А. Бакулина, А. М. Еутенко, Е. А. ВлаДийирцева, И. Е Галкина, Е JL Громашевский. Е. А. Гущина, Г. А. Дмитриев, Е. К. Кандауров и др. Материалы Всесоюеного симпозиума арбовирусы и арбовирусные инфекции. Мэсква- Лыткино, 1991, с. а

15. Циркуляция вирусов комплекса Калифорнийского энцефалита в Средней и Западной Сибири. С. Д. Львов,Е Л. Громашевский,Т. М. Сквор-цова, Е А. Майер,Е П. Андреев, Е Р. Галимов, А. М. Хритаяков.Е. А. Гущина, Н. Г. Кондрашина,Т. Н. Морозова, Е Ф. Чернявский, А. А. Кузнецов, И. Е Галкина, М. Е Щипанова, А. Д. Авершин, Е. К. Кандауров Материалы Всесоюеного симпозиума арбовирусы' и арбббирусные инфекции. Москва-Лыткино, 1991, с.9.