Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Преодоление нескрещиваемости у хлопчатника действием экзогенных фитогормонов

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Автореферат диссертации по теме "Преодоление нескрещиваемости у хлопчатника действием экзогенных фитогормонов"

РГ6 од

/ з мла

:ия МУК РЕСПУБЛИКА УЗБЕКИСТАН ИНСТИТУТ-БОТАШ1КИ

На правах рукописи

/

/

ДАМИНОВА ДЯЛАРОМ МАГРЛВ1А ПОВИЛ

ПРЕОДОЛЕНИЕ ИЕСИРЕЩИВАЕМОСТИ У ХЛОПЧАТНИКА ДЕЙСТВИЕМ ЭКЗОГЕННЫХ ФИТОГОРНОНО»

03.00.05 - ботаника

.АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на ссекание ученой степени кандидата биологических нэук

1АЕКЕЕТ - 1593

Работа выполнена в лаборатории биотехнологии хлопчатника Узбекского ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института селекции и семеноводства хлопчатника га. Г.С.Зайцева УзАСХЕ.

Научные руководители: - кандидат биологических наук

А.Азизхсдкаев

- доктор биологических.наук, член-корр.АН РУз К.А.Власова

Официальные оппоненты:- доктор биологических наук

Д.Ю.^рсуяов

- доктор биологических наук, члек-корр.Уз АСХН, профессор С.Рахманкулов

Ведущее учрегдение - УзЕИИ растениеводства .

ем. Н.И.Вавзлова

Защита состоится " " fi-^/i&sicS 1993 г. в /О часов на заседании специализированного Совета Л 015.05.21 по защите докторских диссертаций при Институте ботаники АН РУз по адресу: 700125, ул.Ф.&эдааева, 32, Институт ботаники АН РУз

С диссертацией ыоено ознакомиться в фундаментальной библиотеке АН РУз •

Автореферат разослан " " игсь/ít^a. 1993 г.

Ученый секретарь специализированного Совета, доктор биологических наук

С.С.РА'/АЗАЕОВА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

Актуальность таботы. Отдаленная межвидовая гибридизация является незаменимым методом для передачи культурным сортам от диких форм таких качественных признаков как скороспелость, уро-яайкость, устойчивость к неблагоприятным факторам ьнешней среды и др.

Использование диких сородичей в селекции культурных видов в большинстве случаев затруднено и малоэффективно из-за явления мзгвидовой несовместимости, проявляющейся в процессе опыления и оплодотворения. В последнее время для преодоления барьера пескре-щиваекости успешно применяются методы культуры in vitro оплодотворенных семяпочек и незрелых зародышей. Однако этот метод применим в тех вариантах гибридизации, где осуществляется оплодотворение и зародыш проходит первые стадии развития. По данным . многочисленных исследователей (Банникова, 1965; 1975; 1Э86; Ба-тыгина, 1966; Беляева, 1968; 1969; Хведынич, Банникова, 1970 и др.) при отдаленной мэездцовоЯ гибридизации растений, в частности хлопчатника, чаще всего нарушения наблвдаются в период оплодотворения, что приводит к остановке деления зиготы и эндосперма. По всей вероятности это связано, с нарушением функционирования хромосом двух генотипов в одной клетке.- Поэтому большинство исследователей (Арутюнова, Губанов, 1948; Арутюнова, I960; Хведынич, Банникова, 1970; Банникова, 1975; 1982 и др.) считают,- что межвидовая несовместимость выраяается в нарушении физиологических процессов. Для преодоления этого барьера необходимы факторы, регулирующие флзиолого-бйохимические процессы и функции генома в клетке, каковыми являются фитогормош. Влияние экзогенных фитогормо-нов на преодоление неснрещпваемости при отдаленной мбявидовой гибридизации растений, в том числе хлопчатника, мало исследовано. В связи с этим весьма актуальной является разработка методов преодоления нескрещиваемости при разнохромосомной гибридизации хлопчатника с помощью фитогорыонов»

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - изучить природу несовместимости при межвидовой гибридизации хлопчатника . и разработать метода ее преодоления действием экзогенных фигогор-монов. Для выполнения поставленной цели решались- следующие задачи: . - изучение характера нарушений эмбриональных процессов при отда-

ленной межвидовой гибридизации хлопчатника;

- изучение особенностей влияния экзогенных фятогормоноэ на нес-нреяиваемоеть, опадение завязей и развитие гибридных семян в комбинациях G.hirsutum L. х G.raimondii Ulbr., G.hirsutum L.x X G.thurberi Tod., G.hirsutum L..x G.anonalum Waw., G.ñirsu -tua. L. x G.sturtii l!âll.}

- подбор йятогормонов и их концентраций, способствующих эффективному преодолении нескрещиваемости при каздом варианте гибридизации;

- определение особенностей локализации меченых фитогормонов в завязи при скрещивании раэнохромосомных садов.

Научная новизна. Изучено влияние экзогенных фитогормонов на преодоление барьера несовместимости и развитие гибридного зародыша и эндосперма. Установлены наиболее оптимальные сроки обработки завязи фитогормонами. Показано влияние различных фитогормонов на завязываемое ть и формирование семян при гибридизации G.hirsutum L..(2n=52) С дикорастущими видами G. raimon-àii Ulbr., G. thurberi Tod.., G. anomal um V/ aw., G. sturtii Mull. (2n=26). Подобраны доя каздого варианта гибридизации фитогор-моны и их концентрации, способствующие эффективному преодолению нескрещиваемости. Выявлено, что зародыши хлопчатника в возрасте 26-40 дней входят в состояние физиологического покоя, который * можно прервать обработкой зародышей in vitro растворами гиб-берелловой кислоты (70 от/л) шш кинетика (50 мг/л). Установлено, что экзо1енные фитогормоны, проникая в семяпочку, индуцируют нормальное деление зиготы и первичного ядра эндосперма и оказывают положительное влияние на эмбрио- и эндоспермогенез вплоть до образования полноценных семян.

Практическое значение. Разработанный метод обработки завязей фитогормонами является эффективным.способом получения семян при скрещивании тетраплоядного вида G.hirsutua L. с дикими ДИПЛОИДНЫМИ видами G.raiaondii Ulbr., G.thurberi Tod., G.ano -malum Waw., G.Eturtii Müll.

Основные положения, выносимые на задлту:

I. Разнообразные отклонения в ходе оплодотворения и эмбри- • ' огенеза, отмечащиеся при отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника, обусловлены нарушениями физиолого-биохимичесхлх

процессов.

2. Использование специфичных и оптимально подобранных для каждой комбинации скрещивания экзогенных фитогормонов, а также применение методов культуры зародышей in vitro способствует преодолению нескрещиваемости, обеспечивая тем самым получение гибридных семян.

3. Успех отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника в значительной степени зависит от правильного подбора оптимальной концентрации экзогенного фитогормона и стадии развития завязи, наиболее удобной для обработки. Наибольшая завязываемость гибридных семян наблюдается при обработке экзогенными фитогормона-ми двухсуточных завязей. Применение фитогорлонов стимулирует и корректирует процесс оплодотворения, а такие деление зиготы и первичного ядра эндосперма.

Апробация работы и публикации. Основные полояения диссертации доложены на: международной конференции по биологии культивируемых клеток и биотехнологии (Новосибирск. 1988), конференции молодых ученых по ахтуалькш вопросам хлопководства (Ташкент, 1989), международной научной сессии по проблемам селекции и технологии хлопчатника и твердой пшеницы (Чирпан, Болгария, 1990), первом съезде физиологов растений-Узбекистана (Ташкент, 1991).

По материалам диссертации опубликовано 14 работ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 103 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов и рекомендаций. Список литературы включает 249 наименований. Работа иллюстрирована 30 таблицами, 2 графиками к 30 фотографиями. ...

СОДЕРШШЕ 'РАБОШ

ГЛАЗА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Изучению явления несовместимости растений посвящено множест- > во работ. Хорошо изучены и выявлены всевозможные нарушения различных фаз эмбриогенеза при отдаленной межвидовой гибридазацтз растений (Поддубная-Арнольди, 1939; Beaeley, 1940; Cooper,inn;, 1940; Weawer, IS57; Арутюнова, I960; Власова, 1962; Батыгина, ISG6; Долгова-Хведынич, 1967; Беляева, 1968; Банникова, 1965; 1968; 1972; 1975; 1986; Суриков, 1987 и др.).

Значительная часть литературы, посвященная цитоэмбриологн-

ческим исследованиям при отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника ( Skovcted, 1933; 1934; Beasley, 1940; Арутпноза, I960; 1979; Власова, 1962; Ковальчук, 1963; Руми, 1967; Беляева, 1968; 1969; Fundir, 1972; Рули и др., 1976; Власова и др., 1977; 1979; Изиятудлшза, 1983 и др.), направлена на изучение постгамнон несовместимости, поведения1 хромосом в мезтсзе, причин стерильности и т.д.

Ряд исследователей С Beasley, 1940; '.Veawer, 1953; Арутгснс-ваг I960; Еаншкова, 1975; Азизходгаеэ 2 др., 1989; Данилова, 1239 Ii др.) считает, что нгскрезиваемость видоз связана с нарусе-¡;:isus: физиологических процессов при оплодотворении, развитие зиготы z эндосперма. В.П.Банникова (1975) отмечает, что изучение физиологические нарушений при 'тдаленной гибридизации, особенно z процессе оплодотворения,, представляет возможность для преодоления барьера несовместимости з эмбриогенезе.

По утверждению многих исследователей ( Еулаева, 1973; Вагео-гош, 1985; СеливанкиЕа и др., 1988 и др.) рецепторами генома и ответственными за рост и развитие клеток являются фитогормоны.

Имеется несколько работ, в которых авторы пытаются использовать это свойство фитогормоноз для преодоления несовместимости при отдаленной меязвдовой гибридизации растений. Например, и. s» Gill и S.Bajaj (1984) для предотвращения опадения гибридных завязей материнские растения опрыскивали через 5-8 дней посла опыления растворами ЕУК (100 ыг/л) и гибберэллозой кислоты (50 мг/л), а затем путем дальнейшего культивирования зародкпей in vitro получили гибридные растения. И.Д.Когут (1985) применением раствора препарата 2.4.5-Т в концентрации 0,0025-G,СС35% удалось повысить выход гибридных семян картофеля при отдаленной гибридизации. Р.И.Ковальчук (1963) для преодоления нескрещивае-ыосги при отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника кастрированные цветки перед.опылением обрабатывала фитогормонаш. 7 обработанных растений проросших пыльцевых трубок в столбике оказалось вдвое больше. В отдельных случаях автору удалось получить 1-2 нормальшх гибридных семяи. D. Altnan(I988) в своей работе показал, что при отдаленной межвидовой гибридизации обработкой экзогенными фитогормонами мозно регулировать развитие зародила до дифференциации.

Судя по анализу доступной нам литературы, зэдно, что экзогел-

ные Фитогсрмоны моу-ео попользовать такяе з регуляция развития зародышей при отдаленной меязидозой гибридизация растений. Дальнейшее изучение путей регуляции раззития зародыша и эндосперма дало бы зозмояносгь получить нормально сформированные семена при отдаленной меазэдовой гибридизации хлопчатника.

глава 2. жгэрлал и 'Методика

Исследования проводились на опытном участке и з теплице УзЕИИ селекции и семеноводства хлопчатника лм.г.с.Зайцева в течение I987-I99I гг.

В качестзе исходного материала э опытах были использованы сорта IC8—5, С-4727, C-S524 ( GosEypiu--n hirsutia L. ) И ДППЛО-ПДПые дикорастущие ВИДЫ G.rainondii Ulbr., G.thurberi Tod., G. anecaluzi Wa-.v., G.sturtii ГЛ11.

Растения сортов G.hirEutun L., которые во всех вариантах скрещивания использовал:! в качестве ¡..атершмкой Формы,, выращивали на экспериментальном участке УзНЛ'ССХ при общепринятых агротехнических условиях.

В качестзе отцовских форы были использованы растения дикорастущих видов G.thurberi и G.sturtii, прсизпастагсдле на экспериментальном участке и з теплице, а такие G.raiaondii и G.anonalun, произрастающие только з условиях теплицы.

Обработка завязей раствора;.® фитогормокоз проводилась на первые-третьи сутки после опыления путем нанесения на поверхность завязи 3 капель раствора фитогормона. После созревания подсчитывали количество сохранившихся коробочек, лоробочек с семенами и семян в одной коробочке. £ля обработки использовали фитс-гормоны фирмы " Serva " (Германия). Контролем служили зазязи, обработанные дистиллированной водой.

Недозрелые зародыш хлопчатника разного возраста культивировали in vitro на питательной среде (Азизходгяез, 1226). Стерилизацию материала, инструментов, приготовление питательной среды проводили по Еутепко (1264). На гр-.тъи сутки культивирования поверхность зарсдыпей з асептических условиях обрабатывалась растворами ПУК (ICC :.т/л), кинетика (53 мг/л) и гиббчрелло-вой кислоты (70 мг/л). Зародыш: культизпрсзалнзь при освещении 3-4 тыс.люкс, температуре +25+2°С, 2.-е-:-:ост:: ТС7*.

Исследования по локализации экзогенных '"итсгсрмсясз з генеративных органах хлопчатнике лроз'Д-тли з 1!:-:стнтуте бисргапичес-

кой химии Едг.Д.С.Садыкова АН РУз с использованием гиббереллозой кислоты,' мачзаой С*4. Пробы собирали через: 0,5; I; 3; 6;. 24 и 48 часов после обработки. Определение радиоактивных изотопов проводили на сцинтиляяционном счетчике Бета I в сцинтилляцион-ной смеси Брея.

Материал для изучения действия экзогенных.фитогорыонов на эмбриональные процессы при ыеквидовой гибридизация хлопчатника фиксировали в растворе Карнуа (6:3:1). Дальнейшая обработка материала проводилась по общепринятой цитоэмбриологичэской методике (Паушева, 1974). Толщина микротомных срезов варьировала от 12 до 20 ыкм. Препараты окралшвали реактивом Еиффа (по Оельгеку) с подкраской гематоксилином Эрлиха и изучали под микроскопами 11Ш-3 и МЕР-З. Макрофотографии пыполняли с помощью микрофотона-оадоа MSH-II, МЗБ-12.

Дкя вычисления наименьшей существенной разницы показателя среднего количества семян'в одной коробочке и показателей импульсов проводили дисперсионный анализ по Доспехову (1979).

ГЛАВА 3. ДЕЙСТВИЕ ЭКЗОГЕННЫХ'ФИТОГОРМОНОВ ЕА ПРЕОДОЛЕНИЕ' ■ ^ ШСКРШВАЕЖЗШ И ОБРАЗОВАНИЕ ГИБРИДНЫХ СК.1ЯН

3.1. Сохранение завязей в зависимости от возраста в период обработки фитогормонаш

Наиболее удачный для обработки возраст определяли по действию фитогорыонов на 1-, 2-, 3-дневные пооле опыления завязи. Эксперимент проводился при гибридизации G.hirsutum х G.anomalum Фитогормоны (ЮТ, кинетин, гибберелловая кислота) испытывались в двух концентрациях - 5Q и'ICQ мг/л.

Исследования показали, что наиболее эффективное действие на сохранение коробочек и формирование гибридных семян оказала гибберелловая кислота (ГК) и кинетин..

Однодневные завязи трудно поддаются обработке, т.к. пленка, сохраняющаяся на поверхности завязи после удаления тычиночной колонки, мешает работе, а удаление пленю часто пр;;зодиг к механическому повреждению поверхности завязи. Несмотря на это, обработкой 1-дневных завязей гиббереллином удается сохранить .9-13% коробочек, канетином - 16-17%.

На второй день после опыления, как в условиях теплицы, так . и в открытом грунте, на поверхности завязи пленка высыхает, до-

пается и легко отделяется, поэтому очень, удобно обрабатывать' поверхность завязи раствором фитогормона, избегая механического повреждения ее. Данные эксперимента показали, что наибольший процент завязазшихся плодоэлементов отмечается при обработке двухдневных завязей (при обработке Ш - 52-615?, канетином - 2631/5). К этому времени в семяпочке осуществляется один из чувствительных и ответственных этапов эмбриональных процессов - оплодотворение, и обработка завязи именно в этом состоянии, вероятно, дает наилучший эффект.

Образовавшиеся в -результате скрещивания и обработанные на третий день, после опыления завязи, в большинстве случаев .опадают, а сохранившиеся значительно отстают в развитии по сравнению с завязями самоопыленных растений. В таких коробочках формирует- . ся не более 1-2 семян.

- Итак, установлено, что наиболее эффективное действие фито-гормонов при отдаленной менвидовой гибридизации проявляется при обработке завязей на вторые сутки после опыления.

3.2. Влияние экзогенных фитогормонов на образование семян при гибридизации й.ы.ге^ип Ь. х ¿.газлюиаа! Ш.Ъг.

При данной комбинации скрещивания экзогенная }> -иацолилук-сусная кислота (НТК) эффективно влияла на сохранение коробочек и г?ормироваште семян. При обработке низкими концентрациями ИУК (10-20 мг/л) сохранилось Г1-2СЙ'коробочек (табл.1). При этом

■ . ' Таблица I.

Действие ИУК на завязываемость и образование семян

при гибридизации б.^-ГЕи-Ьшп Ь. г Э.га1топй1а ТПЪг.

Концент-: _ Количес т_в о . :Предел коле-:Стзедяее

рация :Ббра2отан-Тсохранивш1Х-:коро5очек :баний кол-ва:кол-~о

ров, мг/л :зей, : :ми, % :робочке, :коро'с

: шт. : : _ _ : шт. •Нв % 1->!

Контроль 96 - - - -

10 83 II 2 0-1 1.0

20 83 20 4 1-2 1.8

40 82 27 9 1-2 1,5

60 84 70 67 1-6 3,3

80 85 34 16 1-5 2,8

100 84 26 4 ; 1-2 1.2 НСР01 0,93

ВС9ГО В 4/j коробочек формируется по 1-2 гибридному семени. По мере увеличения концентрации ИУК повышается процент завязываемое ти. Так, при концентрации 60 мг/л сохраняется 70Í обработанных коробочек, многие из которых содержат от I до 6 семян (в среднем 3,3 семян в одной коробочке).

Обработка 2-дневных завязей растворами 2,4-дихлорфеноксиук-сусной кислоты (2,4-Д) е «i-нафтилуксусной кислоты (ЕУК) различной концентрации не способствует сохранению гибридных коробочек при скрещивании G.Mrsutum х G.raimondii. Лишь обработкой более высокими концентрациями НТК (60, 80, 100 мг/л) удается сохранить 8-10$ коробочек, которые достигают достаточно крупных размеров, но семена в них не развиваются. Влияние данного фито-гормона, вероятно, заключается в том, что он стимулирует рост соматических тканей пестика, но не оказывает положительного влияния на эмбриональные процессы.

Наиболее эффективной для данной комбинации оказалась гиббе-релловая кислота. При. обработке 10-20 мг/л ПС сохраняется до ZQ% завязей, в которых формируется no I-З семени. При использовании ГК в концентрации 80 мг/л сохраняется 85% коробочек, из которых 65% - с семенами. Последние полноценные, имеют высокую всхожесть. При прорастании их нарушений не наблюдается.

Изучение двух представителей группы цитокининов показало, что они на преодоление нескрещиваеыости при гибридизации G.hir-sutum х G.raimondii оказывают различное действие. Так, 6-бензиламинопурин (БАЛ) более высоких концентраций (60, 80, 100 мг/л), хотя и способствует сохранению 30-40^ коробочек, но не оказывает действия на регуляцию эмбрио- и эндоспермогекеза, поэтому в таких коробочках семена не образуются. -

Действие кинетина на сохранение коробочек при рассматриваемой гибридизации почти такое ие, как действие ИУК и ГК, но предел колебаний сформированных семян в коробочке при его действии значительно выше.

Анализируя действие различных смесей фитогормонов на формирование гибридных семян отметили0что наиболее эффективны!® являются смеси фитогормонов ИУК (100 мг/л) + ГК (80 мг/л) и ИУК (80 мг/л) + кинетин (50 мг/л).

3.3. Влияние экзогенных фитогормонов на образование семян при гибридизации G.hirsutun L. х G.thurberi Tod.

G.thurberi Tod. по происхождении и геномной группе (Д) очень близок к G.raimondii uibr., но скрещиваемость их с сортами вица G.hirsutuE L. различна. Из-за резко выраженной несовместимости ВИДОВ G.hirsutun L. и G.thurberi Tod. скрвщиванле ме.тду ними не происходит л всэ завязи опадают. Обработка аэ завязей на зторой иэнь после скрещивания способствует сохранению их и образовании некоторого количества семян. Однако эти показатели значительно шс:е, чем при гибридизации G.hirsutun х G.anomaitc. Бозмокно это связано с прорастанием ограниченного количества пыльца з чужеродной ткани пестика.

Показано, что наибольший эффект на сохранение завязей и формирование В НИХ семян При гибридизации G.hircutun х G.thurberi из группы ауксинов оказывала И7К. Обработка 2-дневных после опыления завязей ПУК да~е низкими концентрациями способствует сохранении до 25f; коробочек. Дальнейшее повышение концентрации ПУД незначительно увеличивало количество завязавшихся коробочек. Только в 4-7^ сохранившихся коробочек развивались гибридные семена, количество которых не презышало 1-2 штук.

НТК во всех концентрациях способствовала сохранению завязей после скресзгаания, но не всегда пологлтельно влияла на образование семян.

Влияние растворов 2,4-Д на сохранение плодозлемензов при гибридизации G.hirsutun х G.thurberi оказалось сходны:.: с таковым, отмеченным при использовании НТК.

При данной гибридизации растворы гийберелловой кислоты действуют на сформирование сзмян в концентрациях от 4С до 60 мг/л. Другие ~е рассмотренные концентрации ГК, хотя и способствуют сохранении завязей, но не регулирует Формирование семян. Самое эффективное влияние отмечено при использовании ГК в концентрации 60 мг/л (6175 сохранившихся коробочек, z 1У. коробочек образуется семена).

да преодоление нескреднзаемсстп из цитокипиноз бслэо благоприятно дейстзует кинстик в низких кс:"5:-:г-.а:-;:-у. (ZZ-iZ мг/л), способствуя нормаль:-:с:.~ деления зигстн и "^сснэ-.ма. Таи, г.;.л с'— работке 40 мг/л раствором кикетина удастся сс.с-апнгъ до г;.аьл-зей, в 145 из которые ее:.:з:-:г.

Изучим • царствия ЕАП на образование семян в геченлз дзух лет не даго пслсл-птельЕых результатов, хотя этот регулятор роста способствует ссхтаненав определенного количества завязей.

Смесь ПУК (ICO кг/л) с ГК (80 от/л) очень эффективно действовала на преодоление нескрещиваемости хлопчатника при гибридизации G,hirsutos х G.thurberi. При этом удалось сохранить до 52$ завязей, из них в 20$ образовались семена (табл.2).

Таблица 2.

Действие смеса ПУК с IK на завязызаемость и образование семян при гибридизации G.MrEUtua L. х G.th.urberi Tod.

Кояцент-: Кол а ч е с т в о :Поедел коле-:Среднее

рация : обработан-" :коробочек:баннй кол- -за:кол-во се-

растзо- : HHX ЗЗЕЯ- сохранявших-:с семена- :семян в ко- :мян в ко-

роз, • : 38ÍÜ ся коробочек:ми ' сГ робочке, :робочке,

СТ. В? . А> 1987 г. : шт. : шт.

Контроль ' 79 - - - -

ИУК + ГК

60 + 80 80 ' 36 9 1-2 1,8

80 + 80 80 ' 31 13 1-2 1,8-

ICO + 80 80 59 20 1-3 1,9

EG?0IC,4S

1988 г.

Контроль 40 - - - —

НТК + ГК

60 + 80 43 42 7 0-1 1.0

80 + 80 43 25 2 0-1 I.o

ICO + 80 42 74 16 ■ 1-3 2,4 HG?CI0,53

Смеси КУК с ГК и ЮТ с канетином влияют только на сохранение завязей, но в них не завязываются семена.

Таким образом, самыми оптимальными для сохранения плодоэле-ментов и формирования семян при гибридизации G.hirsutun х х G.thurberi сказалась ГК в концентрации 60 мг/л и смесь И7К (ICO мг/л) с Ш (83 мг/л).

3.4. Влияние экзогенных фитогормонов на образование семян при гибридизации Б.ЫггиЛиж Ь. х О.аЕошаХит 1/?аш.

В данном варианте гибридизации обработка 2-дневных завязей ИУК и 2,4-Д не оказывала положительного влияния на эмбриональные процессы. ПУК в концентрациях 60-100 мг/л способствовала сохранению 9-18% коробочек, но в них не образовывались семена.

При использовании НТК наблюдалось сохранение значительно большего количества коробочек. Наиболее оптимальной оказалась концентрация ЕГК 60 мг/л, при которой сохранялось до 30$ коробочек, из которых 7$ - с семенами.

Более эффективным действием на завязывание семян при гибридизации й. ЫгЕ^ии х с. апотейиш отличается кинетин. Наилучшие результаты получены при использовании ккнетина в концентрациях 40-60 мг/л. Обработкой 2-днев:шх завязей кинетином в концентрации 60 мг/л удалось сохранить до 33$ коробочек, из них в 14$ коробочек имеются семена.

Бензиламинопурин в концентрации 80 мг/л способствует сохранению довольно большого числа завязей. Однако данное соединение не оказывает влияния на эмбрио- и эндоспермогенез, о чем свидетельствует отсутствие семян в сохранившихся коробочках.

Растворы гибберелловой кислоты' отличаются очень высоким действием на формирование гибридных семян при обработке 2-днез- ■

Таблица 3.

Действие ГК на завязываемость и образование семян

при гибридизации О.МгБаЬит Ь. х 6.апота1ит 1»а*. '

Концент-: Количеств.о _ :Предел коле-: Среднее рация :обработан-! ~ "*:короЗочек:баний кол-ва:кат-?с се-

раство- :ных завя- сохранивших-:с семена-:семян в ко- :мян ? коров, :зей, . :ся коробочек:ми, :робочке, ■ ' :робсч:

Контроль 94 «м • _

10 96 20 14 • 1-6 3,6

20 95 38 • 28 3-10 3,9

40 96 43 39 3-12 5,8

60 97 55 52. 4-14 7.1

80 97 74 62 6-14 9.4

100 96 55 51 4-9 5.7 НСР01 1,47

них завязей G. hirsutum х G. anonalum (табл.3). Обработка ГК, начиная с концентрации 10 мг/л, способствует образованию в одной коробочке от I до 6 семян. Использование раствора ГК более высокой концентрации позволяет значительно повысить процент сохранившихся коробочек,а также семян в них. В отдельных случаях (60 и 80 мг/л)в одной коробочке насчитывалось до 14 штук гибридных семян. Наиболее эффективной концентрацией ГК является 80 мг/л.

При применении ГК совместно с ИУК также удается сохранить до 78% коробочек. При этом Ы% составляют коробочки с семенами.

Другие испытанные нами смеси фитогормонов (НТК + ГК, ИУК + кинетин) оказались малоэффективными.

3.5. Влияние экзогенных фптогормоноз на образование семян при гибридизации G.hirsutum L. х G.fiturtii Müll.

При гибридизации G. hirsutun L. х G. Eturtii Müll. ЕСе ИС-следуеше фитогормоны оказали положительное Елияние на преодоление нескрещиваемости и регуляцию формирования семян. Так, даже низкая концентрация ИУК (10 иг/л) эффективно действовала на сохранение завязей и способствовала образованию большого числа' гибридных семян. При этом предел колебаний количества семян в коробочке составил от 2 до 16 штук, в среднем 6,2.

Необходимо отметить, что в данной комбинации скрещивания в контрольных вариантах (без обработки фитогормонами) сохраняется от 4 до 27% завязей, из которых 1-13$ составляют коробочки с семенами, чего не наблюдалось в предыдущих вариантах гибридизации.

Довольно успешная скрещиваемость меяду G. hirsutun и G". Eturtü наблюдается при обработке завязей синтетическими ауксинами НПС и 2,4-Д, "с помощью которых удается подучить до 30 семян в коробочке. В■предыдущих же вариантах гибридизации, как было отмечено выше, НТК и 2,4-Д фактически не оказывали влияние на эмбриональные процессы. Более эффективное действие этих фитогормонов на результаты..скрещивания в данном варианте, вероятно, связано с тем, что -несовместимость родительских видов здесь не столь глубокая и действием экзогенных фитогормонов она легко снимается. Данные цитоэмбриологи^сских исследований показали, что пыльца G.eturtii достаточно активно прорастает на рыльце G.hirsutum и относительно" нормально растет по столбику, что свидетельствует о более мягком характере несовместимости и воз-

моености легко ее преодолеть. Кроме того, нарушения, вероятно, не связаны с функционированием разных гаплоидных наборов хромосом в одной клетке, которые требовали бы сьецктические фитогор-моны и их определенную концентрацию.

Растворы гибберелловой кислоты во всех'концентрациях в несколько раз повышают завязываемость по сравнении с контролем. При этом з коробочке формируется в 3-3,5 раза больше семян, чем в контроле. Результаты второго года исследований были аналогичными.

Такую картину кокно каблвдать при изучении влияния различных концентраций кзнетина и БАЛ.

Из испытанных смесей фитогормонов более эффективной оказалась смесь ИУК (80 ыг/л) с кинетином (50 мг/л). При обработке этой смесью завязей G.hirsutum х G.sturtii набладался довольно большой процент сохранившихся коробочек, из которых 52% коробочек имели семсна (до 28 штук в одной коробочке).

3.6. Влияние экзогенных фитогормонов на рост зародышей хлопчатника in vitro

Семена, полученные при гибридизации G.hireutun L. х G.aao-aiaium, б отличие от описанных выше трех комбинаций скрещивания, оказались щуплыми и имели плохую всхожесть. Для того, чтобы получить гибридные растения g.' hlrsutun х G. anomalum нами был использован метод культуры недозрелых зародышей in vitro. Для этого 30-35-дневные зародыши высевали на питательную среду, но они очень длительное время не приступали к росту.

В связи с этим мы предположили, что гибридные семена G. bireutmn х G.anomalum в этом возрасте находятся в состоянии покоя за счет изменения баланса эндогенных фитогормонов.

Результаты культивирования зародышей сорта 108^4 (G.hiriu-tum ) in vitro показали, что в возрасте 16, 16, 20 дней они легко переходят к росту, но начиная с 26 по 40 день развития да-., же при длительном их пребывании на питательной среде остаются . без изменения. Проведение же в этот период поверхностной обработки зародышей раствором кднетина и гибберелловой кислоты прерывает покой и вызывает рост зародышей; 40-50-дневные зародыши хорошо растут in vitro и без обработки фитогормонами.

Исходя из результатов, полученных в эксперименте с сортом 1С8-Ф, ваш 30-35-дневные гибридные зародыш. G.hirsutism х G. • anomalum • после введения в культуру были обработаны раствора-

ш ГК (70 от/л), благодаря чему были получены растения, которые после перенесения в грунт нормально развивались и дали полноценные семена.

По полученным экспериментальным данным модно утверздать, что 26-40-дневные зародыши хлопчатника входят в состояние "покоя" и вывести их из этого состояния способны экзогенные фитогормоны.

3.7. Распределение меченого фитогормона в завязи хлопчатника

При поверхностной обработке 2-дкевных завязей экзогенным меченым фятогормоном уне через 30 минут отмечается наличие метки в стенке завязи, в плаценте и семяпочках, а такяе листе, в пазухе которого располагается цветок.

Активность импульсов в семяпочках и частях завязи в пробах, взятых чере? I, 3 и 6 часов после обработки, особо не различается.

Через 24 и 48 часов после обработки наблюдается постепенное снижение активности импульсов в расчете на сырой вес. Возмогло, это связано с интенсивным ростом завязи, за счет чего происходит разбавление проникших меченых фитогормонов.

На 16 день после обработки изучалась активность импульсов у дифференцированных зародышей и эвдосперма. Здесь отмечается-довольно высокое содержание изотопов во всех вариантах гибридизации. Это является доказательством, что после обработки 2-днев-екх завязей экзогенными фитогормовами, последние проникают до -зиготы и эвдосперма и участвуют в регуляции их физиологических процессов. ;

3.8. Влияние экзогенных фитогормонов на цито-

эмбриолотаческие процессы

Исследования показали, что в подавляпцем большинстве случаев во всех рассмотренных вариантах гибридизации без обработки фигогормонами пыльца, хотя и прорастает на рыльце, но пыльцевые трубки не проникают в семяпочки 2 оплодотворения не происходит. Неоплодотворенные зародышевые меи&и имеют узкую и очень вытянутую полость, в которой достаточно долго сохраняются яйцевой аппарат и неслившиеся полярные ядра.

Иногда пыльцевые трубки, хотя и медленно, дорастают до семяпочки, входят в зародышевый мешок и изливают свое содержимое

3 этих случаях оплодотворение происходя?,э основном.на третьи сутки после опыления.

Исследования 4-суточных семяпочек показали, что образовавшаяся зигота я оплодотворенная центральная клетка дальнейшего развития не злели и ка 5-6 сутки завязи опадали. Завязи Ее, которые обрабатывались фитогормонами (оптимальные варианты), развивались нормально.

Анализ семяпочек, взятых из таких завязей показывает, что во многих из них идет нормальное развитие зародыша и эндосперма. Кая первые, тан а последующе деления зиготы и первичного ядра эндосперма во всех вариантах скрещивания происходят однотипно. Но сроки начала деления и темпы их прохождения могут' быть раз-личш в зависимости от подбора родительских пар, эффективности исполъ зу змого фитогормона.

Обг-^отка завязей экзогенными фитогормонами показала, что гормоны, поступившие извне з зародышевый мезон ка третий день после опыления, т.е. через сутки после обработки, яндуцпруэт первое деление зиготы и образование ядерного эндосперма.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Литературные данные и результаты собственных цитоэмбрполо-гических исследований подтверждает, что несовместимость при гибридизации разнохромосомных видов растений является, в оскозком, физиологической.

Изменения Физиологических процессов, происходящих после нормального оплодотворения приводят к сстапозке дальнейшего деления зиготы и эндосперма. При этем экзогенные ^итогормокы играют очень важную роль, способствуя преодоление барьера несовместимости разнохромосомных зздоз хлопчатника. Благодаря им представляется зозмс:п:Ы.м регулирование нормального развития зародыша при гибридизации С1.г.1г£и+:иг. ь. дикими диплоидными видами С.га^поМИ У1Ьг., С.гг.игЪег! То!., ..ал-.-, О.

Е-йог-сИ ¿10,11.

На основании цитсомбрпаюгн.чесгих данных по де::стви". .:т~-гормонов молзо сделать захлтэкпз, "то Г:гз::сл~гическая не^ов::э-стимость при разг.о::рсмоссмко,'1 гибридиза:-;ы: проявляется з сик-гзмнол "азе. Пола-""""с .. .., — стхтулпрует процесс прсдвижения спермлез "осле их в

1С

зародышевый мешок к яйцеклетке и центральному ядру.

Подтверждением такого предположения может служить то, что экзогенные фитогормоны очень легко и быстро проникают в ткани 2-днезных завязей хлопчатника. Исследования показали, что уже через 30 минут после обработки фцтогормоны обнаруживаются во всех частях завязи. Это свидетельствует о непосредственном участии фитогормонов в фязиолого-биохимических процессах хода основных эмбриональных процессов в семяпочках, начиная от опыления. При отдаленной мелзпдозой гибрпдязацил в большинстве случаев оплодотворение происходит на третьи сутки после опыления (Арутюнова, i960; Беляева, ISSS; ïundir, 1972).

Растворы всех растительных гормонов способствуют сохранению определенного количества завязе". При этом, надо отметить, что не все гормоны влияют на регуляцию эмбриогенеза и формирование гибридных семян. Хотя во всех рассмотренных нами четырех вариантах гибридизации в качестве материнской Формы участвует G. hir-sutum'L., тем не менее для кавдого варианта скреъдвания характерны сбои оптимальные концентрации и сочетания фптогормонов. Это свидетельствует о том, что несовместимость при отдаленной мзквдцовой гибридизации хлопчатника (тленно в рассмотренных вариантах) проявляется в нарушении регуляторкой системы двух раз-нохромосомных генотипов в одной клетке. Фитогормоны или их смеси в каждом конкретном варианте гибридизация способны действовать как ре1уляторы деления зиготы и первичного ядра эндосперма, и замена их другим фитогормоном дает другой эффект. Это в свою очередь свидетельствует о том, что нарушения в Функционировании генома вддоспецифичны. Что же касается положительного влияния всех фитогормонов, хотя и в разной степени, при гибридизации G.hlrsutua i G.Êturtii , то это по-видимому, связано с тем, что характерные для данной комбинации не очень глубокие нарушения, при действии любых фитогормонов легко регулируются и индуцируется нормальное развитие гибридного зародыша и эндосперма, чем и обеспечивается получение значительно большего количества полноценных семян, чем в контроле.

Экзогенные фитогормоны при разнохромосомной гибридизации влияют не только на эмбриогенез, но и способствуют активизации роста эпидермальннх клеток, образующих волокно. Отмечено также, что даже при отсутствии оплодотворения под влиянием фитогормонов увеличиваются размеры клеток нуцеллуса, внутреннего и наруж-

кого интегументов семяпочки. Такие явления наблюдаются в большинстве случаев пра участии растворов ИУК и ГК.

ВЫВОДЫ

1.Межвидовая несовместимость при различных комбинациях скрещивания разнохромосомных видов хлопчатника проявляется в различного рода отклонениях эмбриональных процессов, что является следствием физиолого-биохнмических нарушений в тканях завязи, начиная с момента попадания чуяеродной пыльцы на рыльце до образования гибридного семени.

2.Роль экзогенных флтогормонов, з зависимости от степени несовместимости скрещивающихся видов я возраста обрабатываемого материала, сводится к стимуляции роста пыльцезих трубок, к коррекции двиясния спермиев в зародышевом мешке, к регуляции первых делений зиготы я первичного ядра эндосперма.

3.Установлено, что наиболее элективные результаты з опытах по преодолению яескрещяваемости получены во всех вариантах скрещивания при обработке зазязеЗ на второй день после опыления.

4.Из испытанных наш синтетических и естественных фитогор-' моков наиболее эффективны;.® в плане преодоления мензидовой несовместимости и образования гибридных семян оказались ИУК, гпб-берелловая кислота, кинетин и смесь ЮТ с гибберелловой кислотой.

5.Показано, что совершенствование научного.л методического уровня при постановке экспериментов по отдаленной гибридизации способны решить вопрос по преодолению несовместимости практически во всех комбинациях скрещивания. Использование метода культуры зародышей in vitro может нэйти широкое применение для получения гибридных растений, из недоразвитых семян.

РЕКОМЕНДАЦИИ

На основе проведенных научных исследований с использованием экзогенных Фитогормонов разработан способ преодоления нес-крещизаемости при гибридизации разногеномных видов хлопчатника. Использование способа значительно■сокращает селекционный процесс и повышает процент получения гибридных форм для селекции хлопчатника. Специалистам, проводящим подобные работы, рекомендуется:

а) для обработки'фитогормонаыи использовать завязи на второй день после опыления;

б) для обработки завязей при гибридизации G.Mrsutum х G. raimondii лучше использовать раствор кпкегина (40 иг/л), при G.hireutum. х G.thurberi - смесь ЮТ (100 мг/л) С Ш (80 мг/л), при G.'hireutcm х о.алош1ши - раствор гиббереллозой кислоты

(80 1«т/л), при G.hireutum х G.bturtii - смесь ПУК (60 1лг/л) С кинетином (50 мг/л);

в) для выведения дифференцированных гибридных зародышей из состояния покоя необходимо проводить обработку in vitro растворами гибберелловой кислоты (70 мг/л) или кинеища (50 мг/л).

Предлагаемые способы преодоления нескрещиваемости при отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника могут быть применены в практической селзкционной работе Ш1 к на селекционных станциях, занимающихся выведением новых сортов хлопчатника.

По материалам диссертации опубликованы следующие работы:

1.Азпзход^аэз А., Даминова Д.1Л. Пути получения гибридных растений и семян при отдаленной мегзцловой гибридизации хлопчатника .//Пегдународная конференция. Биология культивируемых клеток ж биотехнология: Тез.докл,- Новосибирск, IS68.-T;2.~ -С.204-205.

2.Даминова Д.11. Влияние гибберелловой кислоты на рост незрелых гибридных зародышей хлопчатнике.//Международная конференция. Биология культивируемых клеток и биотехнология: Тез.докл.-Новосибирск, 1388.-Т.2.—С.242. ' - .

3.Азизходааев А., Даминова Д.М. Влияние экзогенных фитогор-монов на рост разновозрастных зародышей хлопчатника in vitro

// Узб.биол.ж.-1Э88.-й5.-С.19-22. '

4.Азпзход~аев А., Эгамбердыев А., Даминова Д., Умаров 3., Лемешев Н. Беккросс-потомство амфцдиплоздов. Получить его помогли йитогормогш./Длопок, IS89.-.'S2.-C.39-40. .

5.Даминова Д.ГЛ. Физиологическая концепция нескрещиваемости при отдаленной меквидовой гибридизации хлопчатника.//Конф.моло-днх ученых по актуальны:.? вопросам хлопководства.-Ташкент, IS89, -С.12-13. fc

6.Умаров З.М., Дашкова Д.М., 5зураев Б.С. Использование бпсгехнологических методов в практической селекции хлопчатника. //Кокф.молодых ученых по актуальны:,т вопросам хлопководства.-Ташкент, 1989.-С.13-14.

7.Азизходкаев А., Даминова Д.М., Умароз З.М., Д-сураез Б.С., Маматкаримова М.Э. Постгамная несовместимость при отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника и пути ее преодоления.//Ге-нетика, селекция и семеноводство хлопчатника.- Ташкент, 1990.--С.77-82.

8.Азизход~лзз А., Даминова Д., Умаров 3. Культура на зародил; при отдалечеката хибридизадия на памука./Д^егдун.. науч.сесия Проблема на селэкцията на паг.^ка я твърдата пшеница: Тез .докл.-Болгария, Чирпан, 1990.-С.23-24.

9.Азиз::о*шаев А., Даминова Д.;.'. Культура генеративных органов при отдаленной ме;Езпдозой гибридизации хлопчатратка.//Биология культивируемых клеток и биотехнология растений.-'.!."Наука", I99I.-C.II7-II9.

Ю.Азизходдаев А., Умэроэ 3."., ¿дмл.чова Д.Л. Гормональная регуляция ■ эмбриогенеза in vitro щи отдаленной разнохромосом-ной гибридизации хлоичаткика.//Узб.биол.я., I29I.-J,'I.-C.69-72.

П.Азизходжаев А., Даминова Д.М., Д-зураев Б.С. Влияние экзогенных фитогормонов на преодоление нескре^гзаемостп при отдаленной межвидовой гибридизации хлопчатника.//! съезд физиологов растений Узбекистана: Тез.докл.- Ташкент, IS9I.-C.I54.

12.Азизходнаев А., Эгамбердыез А.Э., Дашкова Д.1.1. Эмбрио-культура хлопчатника.//Техничесние культуры. Селекция, технология, переработка,- М."Агропромиздат", ISSI.-C.92-99.

13.Азизходжаев А., Умаров З.М., Даминова Д.М., Дгураез Б.С. Эмбриокультура при беккроссировании амфидиплокдов хлопчатника. //У1 съезд УзОГИС: Тез.докл.-Ташкент, I992.-C.I2I.

14.Азизходнаев А., Дашкова Д.1.1., Дзураев Б.С. Пути регуляции эмбриогенеза при разнохромосомной гибридизации хлопчатника. //Генетика, селекция и семеноводство хлопчатника и лгцерны. -Ташкент, 1992.-С.50-53.

гуз/да: ношосиблик холатини экзоген фитогормокла?

шсирида бартараф этиш

. Изланиидэ гузанинг Gossypium hirsutum L. (2п=52) туригэ ыансуб паданий кавларни диплоид ёввойи турлвр G.raimondii Ulbr., G. thurberi Tod., G. anomalum V.'aw., G. sturtii Mull. билан чатиштирганда улардаги цитоэцбриологик номуносибликни Ургании ва уни экзоген $итогормонлэр ёрдамидэ оар^араф этиш ца^сад чи-либ чуйилган. Цитозмбриологик изланиылвр шуни кУрсвтдики, турт-тала ёввойи турни G.hirsutum l. навлари билан чатиптиралгандэ куп х;олларда прогак (уруглангунгачв булган давр) номуносиблик хисобигэ сперма тухум хунайраспгэчэ етиб бориайди ва натикада уругланиш караёни утмайди. Шунгя царамасдан айриы лолларда сперма тухум хукзйрэсигача етиб боради ва мвъёрида уругланадн. Бунда хосил булгэн дурвгай зигота бош^а ривожлониайди ва усии-дан тухтайди.

Гузани турлараро чатилтиришда инки кунлик тугунчзга экзоген фитогормонлар билан ишлов берилгэнда номуносиблик туспги-шшг бартараф этилгзнлиги кузатцлди. Бунда G.hirsutum билан G.rainondii чатиштирилганда нинетин эритмасидан (40 мг/л) фойдаланил яхши натижэ берди ва булиц уруг олишга эришилди. Бу борада G.hirsutum х G.thurberi да ИУК (100 ИТ/л) В8 ГК (80 ur/я) аралашмвси; G.Mrsutun х G.sturtii да эса *зша фиюгормонлар яхши натике берди.

G. hirsutum L. билан G.anoaialun ЧатИПИИрИЛГандан оунг ЭК-зоген фиюгормонлар ёрдамида олингэн уруг етарликчв ривонланиади. Шунинг учун ыуртаклардан in vitro усули асосидэ фойдзданилди ва иур2аклэр:-:;п-:г 26-40 кун оралигида физиологик тиним холэтидз эканлиги аницланди. Бу холатни бузиб усиыта олиш учун ыуртзккэ in vitro да экзоген фитогорыонлар билан ишлов берилса, У усиа-га утади ва натижэда яхши ривожлэнгэн них;ол олинади.'

Фиюгормонлар эритмаси тугунча устидан суртилганда у тездэ шиыилиб тугунчанинг хэр-хил аъзолзрйга етиб борэди. Бу горыонлар чанглангандан уч кун утгач зиготанинг биринчи марта булинишига туртни беради. Шундай-цилиб зигота ва эндосперм бирламчи ыагиз-нинг будивши утназилган бэрча вариантларда бирхилда утади. Левая улэрнивг будинйшга утиш иуддати ва булинии тезлиги ота-она syjiaapara ва ¿атогорионнинг хилига цараб турлича булади.

Тажрибалар асосида гузанинг турдарвро дурагвйларини олиш учун амалий нурсатмалар кшлаб чицилди»

overcoming the cross iixijess op cotton uifluziics OF 2x0geh2 phyt0h0rm0iis3

The influence of exogene phytchormone3 on overcoming barri-f of emccmpatability, development of hybrid embryo and endosperm зге studied. Faytohormones, being reoponoible for physiological госезя in the tisane, stimulate the growth of pollen tube3, cor-sot the movement of sperms in.embryo sack, regulate the first ivision of zygote and endosperm.

It was settled that most effective action of cnytohoraonea

i distant interspecific hybridization 1з ravoalol during the reatment of ovary on the 2r*d day after pollination. The rols of liferent phytohcrmones on ovulation and formation of seed by hyb-idiaation of G.hirsutum L. (2n=52) with diploid species G.raimon-

ii Ulbr., G.thurberi Tod., G.anomalum './aw., G.sturtii Mull. (2n= 26) are shewn.

Phytohormones and tneir concentrations are sorted out for ach variant of hybridization. They are attributed to the effec-ive overcoming of crossingness. Thus, phytohormonea and their cncentrations for G.hirsutura L. x G.raimondii Ulbr. arc the зо-ution of kinetin (40 mg/l), for G.hirsutum L. x G.thurberi Tod.-he mixture of indolilacetic acid (1C0 mg/l) with gibberellin cid (80 mg/l); for G.hir3utum L. x G.sturtii Mill.- all hormone nfluenced positively. The majority of 3eeds were taken by treat-ent with mixture of indolilacetic acid (80 mg/l) with Kinetin 50 mg/l).

In all combination of crossing reclived seeds were viabl.. nd had good germination, ekcert G.hirsutum x G.anomalua. V/o rs-eived viable seeds by hybridisation using ti33ue culture in vito. Embryoes of cotton at the age of 25-40 days enter into t'r.« tate of physiological рьасе, which may 'oe interrupted by the reatment of embryo in vixro with gi'DDerellin acid (70 mg/l) ' r inetin (50 mg/l).

Phytohormone3, putted on the surface of ovules, very у penetrate into cotyledons, zygotes and еглагрегтя, tack t.. n the regulation of physiological ргоевзз.

The practical recomendation3 of rc-cecving distant inters;.'.-ific hybrids of cotton are given or. the baci3 cf experimental esearches.