Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Пострадиационные изменения активности мембраносвязанных ферментов и радиомодификация адениловыми соединениями

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Пострадиационные изменения активности мембраносвязанных ферментов и радиомодификация адениловыми соединениями"

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ ГРУЗИЯ ИНСТИТУТ БИОХИМИИ РАСТЕНИЯ ИИ.С.В.ДУРЦЩЩЗЕ

На правах руко'пиои

БЕРИДЗЙ МАйН ГШЕШ

УДК 577.39I.59I.8X8.6I5.739

П0СТРАДИАЦИО1ШЕ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ МЕЫБРАНОС8ЯЗАННЫ1 ФЕРМЕНТОВ И РАДИОМОДИФИКАЦИЯ АДЕНИЛОВИМИ

соадншши

03.00.0^ - Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации ва соиоканио ученой степени кандидата биологических наук

Тбилиси - 1992

Работа выполнена в лаборатории радиационной биохихии Научно-иооледовагельского центра радиационной биологии и радиационной экологии

Научные руководители

Официальные' о лпоненты -

Ведуцая организация

члек-корр. Ан Грузии, доктор иедицинских наук, профессор

НАДАРШВИЛИ К.И.

канд.биологических наук, стараий научный сотрудник

ЧЙКВАШВИЖ Д.В.

доктор медицинских наук, БАРА£03 В.А.

доктор биологичеоких наук, БУАДЗЕ O.A.

Научный центр онкологии Министерства здравоохранения Грузии

Защита ооотоится 29 июня 1992 г. в 12 чао. на заседании Специализированного совета Д-007.04.01 в Институте биохимии растений ии.С.В.Дуршшидзе АН реопублики Грузия по адресу: 380059, Тбилиои, Аллея Давида Агиашенебели, 10 кк.

С диссертацией ыохно ознакомиться в библиотеке Института биохимии растений АН реопублики Грузия.

Автореферат равосван "29" мая 1992 г.

. Ученый секретарь . Специализированного совета

кандидат биологических наук ¡' i.,г^-и.В.Бендианииввли

Актуальность проблема. Неравномерное распределен*« юно» натрия я калия между клетками н средой является одной из важнейших предпосылок нормального функционирования клотки. Белки, входящие в состав мембран, выполняют самую различную функциональную нагрузку. К числу вводах мембртюсвязпнних формантов следует отнести транспортные АТРазы. Локализация транспортных АГРаэ тесно связан^ с их биологической роль», функциональными особенностями органов и тканей» содержащих тот или иной фермент /Матюшичев и др.. 1977/. Этим обусловлен интерес исследования радиопоражаемости различных органов по тесту мембрано-связанных ферментов.

. Под влиянием ионлзируиаей радиации происходит более или менее выраженное нарушение ионного>гбалансо клетки, характеризующееся изменением в ней концентрации ионов калия и замощением их ионами натрия.

Изучение механизма радиационного воздействия на активность йа,К-АТРазы относится к числу актуальных задач радиобиологии нервной ткани, в частности, изучения закономерностей лучевого ЦЦС-синдрома /Дворецкий.1990/. Однако в литературе о влиянии ионизирующей радиации на активность Же.К-АТРазы имеются данные, носявде несистематизированный и довольно противоречивый характер.

Особенно большой интерес представляет изучение пострадиационных нарушений мембран нервной ткана, они могут бить ведущими в развитии ранних неврологических расстройств и возникновении церебральною синдрома. Лучевая болезнь не относится к числу специфических поражений нервной системы, а является общим поражением всего организма, однако, состояние ЦНС, как регуляторной системы, играет важнув роль в развитии и течешш

лучевого поражения /Таралова,1988/. Воздействие радиации на

возбудима мембраны нервной клетки проявляется главным образом

»

через увеличение ионной проницаемости.

Проблема повышения устойчивости организма к лучевому поражению относится к числу важнейших в радиобиологии. Успехи в 8той области во многом зависят от глубины понимания механизмов радиационного воздействия на критические органа и системы /1^уЯряшов. 1967; Бурлакова к др., 1975/.

Последние года Характеризуются интенсивным поиском радиопротекторов среди различных классов химических соединений. Среди огромного числа испытанных препаратов и радаозапштных рецептур важное место занимает группа аденалогах соединение. Длительное защитное действие этих соединений, как и некоторых других веществ биологического .'происхождения, отличается от эффекта клас-*

сических радиопротекторов и обозначается как биологическая радиозащит«.

" Учитывая очевидную важность адениловых соединений для нормального функционирования мембраносвязанных ферментов мы попытались использовать их для радиомодификации лучевых нарушений функции мембранных АТФаз.

' Цель работа. Цель» данного исследования было изучение ра- . « диочувствитвлъностн ферментов системы активного транспорта ионов в различных органах отличающихся пород крыс, в широком диапазоне доз облучения, и радиомодифицируицее действие адениловых соединений на пострадиационные изменения ферментативной активности мембраносвязанных АТфаэ.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

I) установить радиочувствительность ферментов система активного трансаорта ионов головного мозга крыс различных пород

при действии ионизирующей радиации:

2) изучить влияние возрастающих доз ионизирующей радиации на интенсивность перекясного окисления лиоидов (ПОЛ) и содержание тиоловых соединений в ткани головного мозга у крыс линии Вистар и бесчородных;

3) исследовать рпдиомодифицирутсщее действие аденилатов на пострадиационные изменения ферментативной активности мембранных фракций клеток головного мозга кр«с;

4) исследовать радиомодифицирующее действие АТР и АДР на пострадиационные изменения ферментативной активности препаратов в различных радиочувствительных органах;

5) исследовать активность ионтранспортирунцих Ферментов, продуктов липопероксидяции и уровня сульйгидрильних групп в условиях радиомодиФицирувдвго действия аденилатов при экспериментальном ЩС-синдроме.

Няучнзя новизна работу. Впервые проведено исследование влияния ионизирует го излучения в дозах 3,5 Гр, 7 Гр и 108 Гр по тесту активности иоятраиспортирущих ферментов. Установлено, что при этих дозах радиации ферментная система чувствительна к действию ионизирующего излучения.

Впервые проведен сравнительный анализ влияния возрастающих доз ионизирующей радиации на интенсивность ПОЛ и на активность мембраносвязанвдх ферментов в ткани головного мозга у крыс линии Вистср и беспородных. У крыо линии Вистар обнаружен более высокий уровень антиоксидантноЯ защиты. Наблюдалась неидентичная реакция у крас линии Виотар и беспородных по тео-ту изменения АТРазных активностей. Радиационные нарушения % -АТРазяой активности обусловливают направленность изменения !,'а.К-АТРазно?. активности препаратов.

Впервые исследовано радиомодифицирующее влияние аденило-

пых соединений на пострадиационное изменение активности мем-браносвязанных ферментов и ПОЛ. Установлено, что из аценила-: тов лишь аденозин проявляет радиозащитное действие при ЦНС-синдроме.

Теоретическое и практическое значение работа. Результата и вывода данного исследования расширяют и значительно дополняет существующие представления о механизме действия ионизирующего излучения на мембраноснязанше АТРазы. У к рис линии Бйотер обнаружен более высокий уровень антиоксидантной защити, а до тесту пострадиационного изменения активности мембраносая-заяных ферментов ирисы линии Бйстяр более радиочувствительны, чем беспородные.

Проведенные исследования расширяют представления о хкми-чясжой защите организма при радиационном поражении веществ акт биологического происхождения о адаптогенной активностью.

Хотя адалгогеш не являются классическими радиопротекторами, они обладают рядом преимуществ. Среди шос: их природное • происхождение, малая токсичность, противолучевой эффект, связанный о нормализущрш действием на энергетический и генетический аппараты клеток.

Публикации. По материалам исследования опубликовано 6 работ.

Структура диссертации. Диссертация .состоит из введения, пяти глав и выводов. Первая глава содержит обзор литературных данных по действию ионизирующей радиации на мембраносвязвяные ферменты, вторая - посвящена радиомодифицирувдбму действию аданиловых соединений. В третьей главе дано описание использованных материалов и методов исследования. Далее следуют две главы с излбкениом и обсуадениеы экспериментальных результа-

тов. В конце диссертации приведен список цитируемой литератур«, включающий 211 источников. Работа излокене на 124 стр. машинописного текота, содержит 3 рисунка и II таблиц.

МАТЕРИАЛЫ И ¡шона ИССЛЕДОВАНИЯ. .

Объектом исследования служили мембранные фракция, получаемые из различных тканей и органов белых беспородных и крко линии Вистар с использованием ссответствутеих методик. Получали мембранные фракции по несколько модифицированному методу Дв Робвртиоа и Уиттейкера /1* НоЪегг1а, 1969; '«МъъьУиг ^ъ а1, 1959/ с обработкой 'фракции дезоксихолятой /ДОУ по Скоу /ь':о«, 1952/. Препарат ( Р2Ир ) содержал синаптические мембраны, полученные после осмотического тока грубой митохондриальной фракции - ?2' Выделение »¿икросом сердца л мозга проводила в среде гомогенизации, содержащей 0,25 И сахарозы. 0,05$» ДОХ и 5 мМ ЭДГА / 1%2/.

Крыс подвергали тотальному однократно^ облучению рентгеновскими йучами на апларате^НПЛ-Г?. Мощность дозы 0,875 Гр/мин; 1,125 Гр/мин; 3,6 Гр/мин при дозах облучения 1,75 - 12,25 Гр; 3,5 Гр; 7 Гр; 108 Гр соответственно. Напряжение 200 кВ, сила тока 15 мА. фильтры Си 0,5 ш + А1 1,0 мм.

После облучения крыо декапитироваяи через 15 мин., I чао, сутки, трое и пять суток в зависимости от поставленной задачи.

Водные растворы адегаиатов вводили внутрибрюшнно за 15 мин. до облучения (I ыМ/кг). Специальные контрольные опыты были проведены также при инъекции только растворителя (плацебо). '

Определение Д - АТРазной активности проводила в растворе, содержащем СмМ): ИьС! - 120, КС1 - 20, - 3.

АТР - 3. трис-НС1 буфер - 40 СрН 7,6). Активность рассчиты-

вали, вычитая из суммарной АГРазной активности Ць2* -зависимую, которую определяли в присутствии 0,2 мМ оуебаина.

Активность Са^-АТРазы определяли в среде инкубации, соде>-кадей (мМ): СаС12 - 0,01; ¡¿еС^. - 2,5; Ш - 2,5; KCI - 100; ЭДТА - 1{ оуабаик - 0,2. HCOg - AT?азу измеряли как разность между актявйостью препарата в среде (ыМ); Запсо^ - 10;

- 2,5; ATP - 2,5; трио-НСГ - 30 (рЯ 7,8) и _ io,

V.gGL2 - 2,5; ATP - 2,5.

За единицу активностей ферментов принимали количество *наорг. на одан йелка в 480• Неорганический фосфор определяли спектрофотометрически при длина волны 600 нм по методу Оиокв и Суббароу / Fis>o, subberow, 1925/.

Определенно К*~-р.'£Р?гэноЗ активности проводили до методу Эммелота и' Боса / b'^elot, Bos, IS6G/. Стандартная инкубационная среда содержала (мМ): KCI - 10, КеС1<г - 5, p.N"PF - 5, тргс-HCI - 40 (рН 7,8). Величину активности определяли по образующемуся р-нитрофенолу спектрофотометрированлем при длине волны 410 нм.

Содержание сульфгндрильных групп в тканях мозга определяли до методу Седлака и Линдсея / Sedlbk, Lindsay, I9S8/. Регистрировали наличие промежуточных продуктов ПОЛ-гадролераклсаЗ * / Aaatowa, Ifotsushita, IS80/ и ТБЗС-активныХ продуктов /оккаш et al., 1979/. Концентрацию белка определяли по методу Лоури /Ьоwry, 1951/.

Результаты экспериментов обрабатывались статистически, достоверность различий оценивали по критерию Огьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОЗАШЯ И ИХ СБСУВДШИЕ

Дострадиашюдшя изменения активности мембраносзязанных ¡Кдрментов. Ведущее место в функционировании Еозбудашх мембран

занимает электрогенный N8 -насос, осуществляющий метаболическую регуляцию целого ряда процессов в нервной клетке /Дворецкий и др., 1990/. Учитывая, что ряд ферментов участвует в построения мембран в качеств» интегральных компонентов, мы изучали пострадиационные изменения мембраносвязанных ферментов яа , К-АТРазной системы.

Согласно литературным данным, под влиянием рентгеновского облучения в группе беспородных к[жс резко снижается активность На ,К-АТРазы, однако торможение несоразмерно с ростом активности ке -АТРазы /Чиквашвили, 1968/. При проведении нашего эксперимента была замечена неодинаковая направленность вариации ективности ферментов , К-АТРазной систеш в пострадиационный период в зависимости от порода и группы крыо.

% Таблица I.

Действие рентгеновского облучения на ке -АГФазную активность млкросомальной фракции головного мозга

Доза. Гр -.-ГругЩ КРИЗ-

Беспородные • Вистар

100,00 - 1.067 100,00 ± 0,065

1.75 151,85 ± 1,687 107,41 ± 0,745

3,50 184,28 1 2,085 107,96 ± 0,103

5.25 218,63 ± 2,504 113,08 ± 0,104

7,00 238,?? 1 2,774 111,46 ± 0,670

8,75 250,03 ±2,904 114,54 ± 0,323

Ферментативная активность выражена в процентах. За 100$ принята активность Кв -АТФазн интактных организмов. Вое данные достоверно значимы по отношению к контрольным • . соответствующей группы.

Анализируя данные таблица I, слезет заметить, что под влиянием ионязируюцей радиации в микре'сомальной фракции головного мозга крас различных групп наблюдается неодинаковый уровень увеличения Мб -АТфазы: резкое активирование фермента у беспородных а небольшое увеличение в группе крыс Вистар. Сопоставляя пблученные результата о различной направленности изменения , К-АТОазной и пара-нитрофенилфосфатазной активностей в различных группах животных (данные таблиц I и 3), мы предполагаем, что направленность изменения возможно обусловлена уровнем варьирования -а -АТ5азы, '

Кдг.и полученные различия в реахщш мембраносвязанных ферментов На ,К-насоса макросом головного мозга крыс - беспородных и линии Вкстар - на действие радиации в резных дозах, возможно, связаны с особенностям активации свободкорадикального аерекисного окисления липидов (ПОЛ) /Кудряиов,1967/.

. исследовали в пострадиационный период в головном мозге крыо содержанка продуктов дерекисного окисления липидов, гидроперекисей и ТБК-активннх продуктов.

У обеих групп крыс наблюдается однонаправленное изменение уровня гидроперекисей в ткани мозга, однако с различной скоростью. У крыс лкнш Вистар активация ПО® существенно менее выражена и развивается нелинейно с дозой радиации; соответственно ыакош.уцу активации ПОЛ наблюдается и максимум активности Ла ,К-А1Разы.

К числу факторов устойчивости к пострадиационной активации ПОЛ откосятся тканевые столовые соединения, в особенности восстановленный глютатион и серосодержащие аминокислоты /Гон-чаренко и Кудряиов. 1981.1985. гьаЪа et а., I987/. Как видно из таблицы 2, содержание обоих и, в особенности, небелковых тиолов, у шзтактшх крыс линии Вистар существенно выше, чем

Сода ржание S Н-груод в нервной тк&нж крыо

Таблица 2

Группа, _Тоталънце тиолы_Нябелкозие тиоли

Доза, Гр Беспородные Вистар Беспородные Вистар

Интактные 17.2034*0,754 20,525*0,294 2.4304*0,140 5,486*0,338

1.75 20,0449*0,115 18.530*0,339 3,0324*0,216 5,583*0,295

3,50 18,5726*0,036 18,9772*0,337 3,1500*0,256 4,671*0,295

'5,25 19,7342*0,035 18,6564*0,175 3,234*0,147 4,004i0,Z7I

7.00 19.5082*0,165 18,4842*0.516 2,8616*0,055 3,673±0,175

8,75 I6.0992t0.683 18,2898±0,566 3,0688*0,153 4,018*0,212

10,00 I5.7896i0.4I4 I6.04I7i0.334 3,4664*0,239 3,915*0,239

12,25 16.6496*0,371 16,3285*0,312 3,1444*0,171 4,391*0,133

у беспородных, что подтверждает наше предположение о более высокой радиорезистентности этих животных.

Биологические мембраны являются одной яз критических мишеней пря радиационном поражеюпг /Рискулов«, 1996/, а синаптгчео-кая передача я процесса, связанные о активным транспортом - рв-шащимх в явлениях памяти. Исходя из положения, что всякий агент, расстраивающий активный транспорт, нарушает одновременно я нормальное течение процессов обучения и памяти /Кометиани и др., 1980/, мы изучали изменение активности ферментов На .К-АТРаз-ной система при рентгеновском облучении крыо.

Экспериментальные данные показали, что протекание процесса возбуждения в ЦНС. проявляющееся в выработке различных форм инстинктивного поведения в ранний пострадиационный период сочетается с угнетением работе натриевого насоса и наоборот.

Радяомолй'Мгкитя адрниловыми соединениями. Шбор тестов для оценки эффекта радиомодификащш пострадиационного изменения активности мембраносвязанных ферментов обусловлен важностью систем переноса, на осуществление которых расходуется половина вырабатываемой в клетке энергии. С целью возможного сравнительного анализа вариабельности истинности Ферментов при модифицирующем действии АТР.и АДР мы выбрали ткани мозга я сердца. Нервная и сердечная ткали отличаются слог*Я радиочувствительностью, в также уровнем содержания мембрлносвяэсш.их »орментов.

Как видно кз таблиц! 3, введение АТР не влпяот на активность f«o ,К-АТРази в мтпфосомах-мозга крис, облучеших в до-80 7 Гр. Данное обстоятельство можно объяснить особенностью метаболизма пуриновых нуклеотидов в мозге. 3 ходе эволюции мозг поставлен в условия исключительно.'; зависимости от доставки глюкозы как основного эноргоичоского субстрата /Хва-това и др., 1967/, легко преодолсваадеГ; гет-атоэнце^атичоский

барьер (ГЭБ) /Гольдптейн, Бец, 1986/. АТР не лороходит из крови через WE.

АДР. являющийся одним из возможных регуляторов восстановительных процессов в клетке и организма после облучения, проникая через ГЭБ, активирует ::а ,К - АТРазу шжросом мозга, чтс можно рассматривать как проявление противолучевого эффекта. Не обнаружено действия АДР в препаратах микросом сердца.

tig2+ -АТРаза нечувствительна к действию адениловых соединений в интактных организмах, хотя отмечается протекторное действие АДР в препаратах мозга.

Са^-АТРазы микросом мозга и сердца не подвержены радио-модифицирупцецу действию АТР и АДР.

Ввиду того, что перенос ионов кальция и магния тесно связан с транспортом No и К*, не исключена возможность компенсаторной активации знергозавискмой Са ^"-транспортирующей сио-теш, используемой клеткой как побочный механизм доя поддержания своего гомеостаза (при отоокой радиочувствительности Na, К-АТФазы). Выбор в качестве объекта исследования Са^-АТфазноЯ системы не вызывает сомнения, ибо именно фракцию "тяжелых" и "легких" микросом чаще всего используют для изучения структуры и. функции данного ферментного механизма.

HCCg-АТРаза может служить показателем изменения процесса окислительного фо&Торилировашш в облученном организме /Дворецкий, 1987/. Активность этого фермента в митохондриях мозга повидается при действии радиации. Введение АТф интактшм животным вызывает разков -увеличение активности фермента. Реакция бияарбонат-сти^круемой АТФазы на экзогенный АТО - очевидно, результат не ее непосредственного воздействия, а ответ на метаболические процессы, не ®пссированные нами в данном эксперименте .

Действие АТф ж АДФ ва пострадиационные изменен«* ферментативной активности препаратов головного мозга

Таблица 8.

Группа

Интахтныв Свдучеякыв йзедекле ¿13: Необлученные, Облученные Введение АЮ: Необлучгшие Облучен же

._росомазь ная *раюдш___Митохондрии_

:<*б ,К -АТфаза Ся -АТ5аза рЫРРаза Не -АХфаза НСОд -АТфаза

41,970*0,820 12,502*3,060 5,151*0,170 37,953*1,500 9,575*1,230

47,492*0,730 9,958*1,600 5,004*0,042 39.832*1,320 16,445*2,160

44,726*1,070 7,942*2.370 4.661*0.130^.784*1,330 17.119*1.400*

48.465*4.200 5,385*1.050 4.636*0,150 43,080*1,050 35,790*4,520

62.370*3.180* 18.480*1,450 6.096*0,160* 47.586*3,150 10,050*4,280

56.718*1,250** 15.318*1,240 5.285*0,300**49,680*1.230** 17.752*5,Г70

* Различие достоверно по сравнении с результатами, полученными у интактных животных соогветсгзуааея группы, до Различие достоверно до сразнекию с результатам«, полученными у облученных животных соответствулсег группы.

Доза облучения 7 Гр.

рЯРРазы микросом мозга я сердца,, определяемые работой калиевого фосфатазного центра Ыа.К-АТРазы, обладают невысокой ферментативной активностью.

При введении животным АТР в микросомах сердца повышается активность фермента, что свидетельствует о действии его в результате метаболического превращения. Ачалогично судим и о действии АТф в мжросомах мозга, АДФ как радиопротектор выступает модификатором р*РРазы микросом обеих тканей.

Неидентичность реакций ряда знвргозавиепшх ферментов на ионизирующее излучение и модификацию химическими агентами при--родного происхождения можно объяснить наличием компенсаторных систем на молекулярном, клеточном и тканевом уровнях. Расшифровка этих процессов невозможна-без учета разных сторон деятельности мембранных клеточных структур,

Ионтранспортирующие ферменты выполняют ряд функций в нервных клетках, имеющих непосредственное отношение к радиобиологическим паттернам центральной нервной системы (ЦНС) /Давыдов, Ушаков,1987/, среди которых значительная роль отводится транспорту через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) /Бредбари.1963/. При болъпшх дозах радиации изменения в синапсах выступают на первое место и играют ведущую роль в развитии церебральной формы лучевой болезни. Согласно литературным данным, изменение проницаемости барьера для ряда химических соединений наблюдается через сутки посла облучения в дозах, вызывающих развитие ЦНС-синдрома /Упеков,1965/.

Мы исследовали радкомодатицирукдай эВДюкт адениловых сое-диненнй на активность ионтранспортирувших мембранных ферментов при экспериментальном ЩС-сивдроме. Выбор адвниннуклеотидов объясняется их малой токсичностью и значительным противолучевым эффектом, обусловленным их влиянием на энергетический и

генетический аппараты клеток /Барабой,19в8; Гончаренко. 1фдри-шов,19в5/.

Согласно литературным данным, в поздние сроки после облучения тавотных происходит срыв компенсаторно-приспособительных реакций и наблюдается дефицит адениловых соединений» Вводимнх аде-нилатов, видимо, оказывается недостаточно для того, чтобы компенсировать уменьшение содержания адениловых нуклеотидов у крыо, облученных в сверхлетальной дозе, приводящей к церебральному синдрому. Поэтому введение адекилатов таким крысам не оказывает радиопротекторного влияния /Дворецкий, Герасименко,1990/.

При введении этих препаратов наиболее вероятным действующим фактором является пуриновое основание - аденозин, выступающий и в качестве ингибитора свободаорадикальннх реакций /Каган и др., 1966/, влияющих на белковую компоненту биомембран. Ш исслёдо-вадя ради ©модифицирующее действие аденозина на ионтранспортирую-гае ферменты. Как видно из таблицы 4, на активность Na.К-АЗРаз к рЛРРазы необлученных крыо аденозин не влияет.

Для облученных крыс через I сут после облучения в дозе 106 Гр обнаруживается защитное влияние аденозина.

Вероятным механизмом радиозащитного влияния аденозина может явиться торможение активированного у облученных крыс перекисногс окисления. По нашим данным (табл.5) при введении крысам аденозина и последышем облучении животных через I сут после облучения наблюдалось снижение содержания гидроперекисей и ТБК-актта-ных продуктов, т.е. аденозин и по этим тестам оказывал радиопротекторное влияние.

Из вышесказанного следует, что аз ряда адениловых соединений лишь аденозин оказывает выраженное радаоэдаитное действие при экспериментальном ЦЦС-синдроме чорэз I сут после облучения, в период, когда радиационный синдром проявляется в изменении пр

. Таблщт 4

Вжякие аденозива на активность мембраносвязанкых ферментов в тканях головного мозга необученных и облученных крыс

Вариант опыта Актквьость АТФаз. мкг Рн на I мг белка за I ч Активность рИР."'-

ц0 ,К-АТФазы . -АТФазы Са-АТФазы азы, мкг пара-нитрофенола на 'I мг_реляа за I Ч. Х+

Контроль /интакт-ные животные/ Облучение Введение адено-зша Облучение + введение аденозина 4I.970to.820 56,780*1.796 40,378*1,967 72,799+4.773 37,953*1.500 44.270t3.586 37.100*2.190 47.906*2.296 12.507*3.060 3.921*0,310 6,961*0.053 5,220*0,216 5.151*0,170 19,883^0,282 5.292*0.010 24,663*0.671*

х Различие достоверно по сравнении с результатами, полученными у облученных животных, которым аденозил не вводили. Таблипа 5 Влияние аденозина на содержание 5 Н-групп ж продуктов перегаского окисления лышдов в тканях мозга облученных крыс

Вариант опыта Содвсжаете определяемых компонентов

общих ТЕ0Л0В небелковых тиодов гидроперекисей ТЕК актЕвныт сое-7 делений 7x10-3 /

Без введения аденозина Введение аденозина 33,81*2,27 40,38*3.79 2 Д 3*0,04 2,07*0,06 0 ,82*0 ,01 0,06*0,01 2,8*0,5 1,3*0,2

Нйцаемости ГЭБ.

Полученные данные позволяют предположить, что существует

универсальный механизм пострадиационного повреждения мембранного аппарате клетки, что может быть использовано для оценки

различных радиобиологических эффектов и разработки противолу-

«

чввнх мероприятий.

BU води

1. Мембраносвязанше ионтранспортирующие ферментные систеш различных органов и тканей крыс чувствительны к действию радиации. В ткани мозга крыс Вист£ф поело облучения наблюдается повышение ,К-АТРазной. -казной и рЙРРазно.1 активности фермента и уменьшение активности Са-АТРазы.

2. Направленность пострадиационного изменения ,К-АТРазной

и рАРРпзной активностей в различных группах животных обусловлена главшы образом радиочувствительностью iig -АТРазы.

3. У крыо линии йютер сравнительно с босаородными животными установлен более высокий уровень аитиоксидантной зашиты,

а частности, за счет более высокого содержания ноболковнх тиолов, что проявляется в менее выраженной активами ПОП с ростом дозы ррдиащга.

■4. При однократном тотальном рентгеновском облучении в дозе 3,5 Гр варьирование "и .К-АТРпзной активности но проявляет полную аналогию с изменения!«! нейрохимических коррелятов намята и поведения.

5. Из ряда ядониловых соединений при экспериментальном ЦНС-ОЕНДрома в сроки - 24 часа после облучения в дозе 108 Гр, в период проявления специфики радиационного синдрома по показателям проницаемости ГЗЕ, рад^озящитное действие проявляет лишь аденознн.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

Г. Чиквашвили Д.В., Беридзе М.Г. Яа ,К-ЛТРаэная система и память животных при рентгеновском облучении // Труды У Все-союз. межуниверситетской конф. "Биология клетки".- Тбилиси, 1967.- Ч. П.- C.62I-624.

!. Ееридзе М.Г., Надярейивили К.Ш., Чкквашвилк Д.В. Пострадиационные изменения активности мембраноевязанных ферментов нервной ткани // Радиобиология.- 1989.- 29, вып. 5.-С. 601-604.

. Надаройшвили К.Ш., Чгасваовили Д.В., Борлдзе М.Г. Радиочувствительность Na, К-АТРазной систем* и ее модификация аденн-ловыми соединениями // Радиационные исследования.- Тбилиси: Мецниереба, 1989.- Ban. У. - С. 67-78.

, Чиквашвили Д.В., Надарейшвили К.Ш., Ееридзе М.Г. Действие АТР и АДР на пострадиационные изменения мембраноевязанных ферментов // Модификация радиочувствительности: теоретические аспекты и экспериментальные данные: Материалы Всесоюзной иколы-семинара по радиобиологии (г.Пермь, 1988).-М.: Наука, 1991.- С. 88-92.

Чиквашвили Д.В., Беридзе М.Г., МаЯсурадзе В.Н. Пострадиационные изменения активности мембраноевязанных АТРаз и влияние ядяниловых соединения // Радиационные исследования. -Тбилиси: Мецниереба. 1991,- вып. УТ.- С.48-56. Беридзе М.Г. Радномодйнкашя ионтранспортирупцих мембранных ферментов при экспериментальном ЦНС-синдроме // Цитология.- 1992. -> 34, № 4. - С. 70-73.

.и htfi*

aono &OÔDO оьзад ьолоао

ögöSftoßacvi ¿nb&foçoèijniKn

ОЗЧ'КО^О^0 <?° бсхгп ftoçonônçxïjojayoa oçgôoçnb Aojob боо^Э^оо

оЗб^ОЗО^^б*1

к

®0«100в* ь05

*jHoa,>r>,J »¿»(.аЬл, зеооьо ¿sto^o"13 d»