ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ТКАНЕВЫХ ФАКТОРОВ РОСТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РАЗВИТИЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА

Рыжков, Игорь Иванович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ТКАНЕВЫХ ФАКТОРОВ РОСТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РАЗВИТИЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА
ВАК РФ 03.02.07, Генетика

Автореферат диссертации по теме "ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ТКАНЕВЫХ ФАКТОРОВ РОСТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РАЗВИТИЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА"

На правах рукописи

РЫЖКОВ Игорь Иванович

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ТКАНЕВЫХ ФАКТОРОВ РОСТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РАЗВИТИЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА

03.02.07-генетика

-8 ДЕК 2011

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Белгород - 2011

005004945

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук,

профессор Полоников Алексей Валерьевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор Асанов Алий Юрьевич

доктор медицинских наук,

профессор Должиков Александр Анатольевич

Ведущее учреждение:

ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет» Минздравсоцразвития России

Защита диссертации состоится «22» декабря 2011 г. в 11.00 на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.015.13 при ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» по адресу: 308015, г. Белгород, ул. Победы, 85.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет».

Автореферат разослан « Я »

Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций,

доктор биологических наук

В.И. Кочкаров

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Деформации позвоночного столба во фронтальной плоскости занимают первое место среди заболеваний позвоночника у детей и подростков, а их частота в популяции составляет от 8 до 15%, из которых 1,5-2% занимают грубые сколиозы с выраженными косметическими и функциональными нарушениями [Балашов С.П., 2010; Ульрих Э.В., Мушкин А.Ю., 2002]. Для 80% сколиозов причины заболевания неизвестны, что послужило основанием для выделения отдельной формы болезни - идиопатического сколиоза (ИС). ИС - наиболее распространенный тип латерального искривления позвоночника, который определяется как сложная трехплоскостная деформация позвоночного столба, прогрессирующая с ростом и развитием организма и сопровождающаяся структурными изменениями тел позвонков. В зависимости от возраста манифестации заболевания идиопатический сколиоз подразделяется на младенческий (infantile, дебют до 3-х лет), детский (juvenile, дебют в возрасте 4-9 лет), подростковый (adolescent, дебют в возрасте 10-14 лет) и сколиоз взрослых (adult).

Представление о генетической природе идиопатического сколиоза сформировалось в 70-х годах двадцатого столетия. С тех пор предметом научного поиска является как определение типа наследования, так и заинтересованности отдельных генов в развитии патологии [Михайловский М.В., Зайдман A.M., 2004]. Описаны случаи аутосомно-доминантного [Salehi L.B. et al., 2002] и X-сцепленного [Justice С.М. et al., 2003] наследования ИС. Кроме того, предложена модель наследования, основанная на эффекте главного гена с неполной пе-нетрантностью [Зайдман A.M. с соавт., 2005; Lowe T. et al., 2000], а также полигенная модель [Bonaitic W. et al., 1976]. Большинство исследователей придерживается мультифакториальной модели наследования идиопатического сколиоза [Cheng J.C. et al., 2007; Qiu X.S. et al., 2007].

Попытки идентифицировать предполагаемые гены, детерминирующие развитие идиопатического сколиоза, проводились в двух направлениях: в идентификации предполагаемых генов методом сканирования генома и поиске генов-кандидатов, выбор которых основывается на потенциально значимых для заболевания физиологических, биохимических и структурно-морфологических компонентах позвоночника. Описаны регионы хромосом, несущие вероятные гены, связанные с развитием идиопатического сколиоза: 6р, 10q и 18q [Wise С.А. et al, 2000]; 17pll.2-12 [Salehi L.B. et al., 2002]; 19pl3.3 и 2q [Chan V. et al., 2002; Alden K.J. et al., 2006]; Xq23-26.1 [Justice C.M. et al., 2003]; 8qll [Ba-shiardes S. et al., 2004]; 1, 3, 5, 6q, 7,11, 12 [Miller N.H. et al., 2005]; 9q31.2-q34.2 и 17q25.3-qtel [Осака L. et al., 2008].

В качестве генов-кандидатов идиопатического сколиоза рассматривались гены коллагенов и других компонентов внеклеточного матрикса хряща межпозвонковых дисков [Carr A.J. et al., 1992], эластина и фибриллина [Miller N.H. et al., 1996], гликозаминогликанов хрящевой ткани [Zaidman A.M. et al., 2006], рецепторов эстрогенов [Masatoshi I. et al., 2002], рецептора мелатонина [Sobaima

S. et al., 2003] и другие, но однозначно определить роль данных генетических маркеров в патогенезе сколиоза на сегодняшний день не удалось.

Тканевые факторы роста представляют собой мощнейшие модуляторы роста и развития тканей организма, в том числе и позвоночника. Участие факторов роста в формировании патологии опорно-двигательного аппарата подтверждается рядом исследований. Показано статистически достоверное повышение уровня трансформирующего фактора роста в замыкательной пластинке позвонка на вогнутой стороне сколиотической дуги. [Xu Н. et al., 2005]. Экспрессия фактора роста соединительной ткани в межпозвонковых дисках может служить маркером дегенеративно-дистрофического поражения [Peng В. et al., 2009]. Генетический полиморфизм инсулиноподобного фактора роста 1 типа может определять выраженность угла сколиотической деформации [Yeung H.Y. et al., 2006]. Однако отсутствие системного подхода приводит к опровержению полученных ранее положительных результатов об ассоциации генетического полиморфизма и сколиотической болезни [Takahashi Y. et al., 2011].

Все вышеизложенное послужило поводом для проведения комплексного исследования генетического полиморфизма тканевых факторов роста при идиопатическом сколиозе у детей и подростков.

Цель исследования

Исследовать вовлеченность полиморфных вариантов генов тканевых факторов роста в формирование предрасположенности к идиопатическому сколиозу и изучить их влияния на особенности клинических проявлений и течения болезни.

Задачи исследования:

1. Исследовать ассоциации полиморфизма генов тканевых факторов роста (ТФР) с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу.

2. Установить особенности взаимосвязей полиморфных вариантов генов ТФР с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу с учетом полового диморфизма в их проявлении.

3. Выявить особенности взаимосвязей полиморфных вариантов генов ТФР с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу в зависимости от возраста манифестации заболевания.

4. Изучить вклад полиморфизма генов ТФР в детерминацию клинических симптомов и количественных метрических показателей позвоночника при идиопатическом сколиозе по данным рентгенологического и оптико-топографического исследований.

5. Изучить взаимодействия между генами ТФР и их роли в формировании предрасположенности к идиопатическому сколиозу.

6. Разработать уравнения регрессии с целью вероятностного прогнозирования риска развития идиопатического сколиоза.

Научная новизна

В рамках настоящего исследования впервые проведен комплексный анализ ассоциации полиморфизма генов тканевых факторов роста с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу. Впервые исследованы и установлены особенности ассоциаций генов ТФР с риском развития ИС в зависимости от пола и возраста манифеста болезни. Впервые изучены взаимодействия между полиморфными вариантами генов ТФР при ИС и установлена их роль в формировании генетической компоненты подверженности заболеванию. Выявлены взаимосвязи полиморфных генов ТФР с клиническими особенностями течения болезни и количественными метрическими показателями строения позвоночника. Впервые с использованием данных генотипирования полиморфизма генов ТФР разработаны уравнения регрессии индивидуального прогнозирования риска развития ИС.

Научно-практическая значимость исследования

В результате исследования на основе тестирования полиморфных генов тканевых факторов роста были разработаны статистические регрессионные модели вероятностного прогнозирования риска развития идиопатического сколиоза. Практическое использование моделей дает возможность врачам-генетикам, ортопедам и детским хирургам своевременно формировать группу повышенного риска идиопатического сколиоза, оптимизировать и индивидуализировать мероприятия по превентивной коррекции нарушений статики позвоночника. Разработка способов вероятностного прогнозирования риска развития сколио-тической болезни, характера ее течения и клинических проявлений на основе анализа полиморфных генов тканевых факторов роста позволит устанавливать диагноз идиопатического сколиоза на начальных этапах развития патологии, а также проводить отбор пациентов, нуждающихся в оперативной коррекции деформации на ранних сроках. Результаты, полученные в ходе исследования, не только формируют новые представления о роли полиморфизма генов в формировании предрасположенности к идиопатическому сколиозу, но и создают теоретическую и концептуальную основу для их внедрения в образовательный процесс. В частности, результаты исследования могут быть использованы при чтении специальных курсов по медицинской и клинической генетике, травматологии и ортопедии, детской хирургии, патофизиологии в вузах медицинского профиля и на курсах повышения квалификации медицинских работников.

Положения, выносимые на защиту:

1. Полиморфные варианты генов тканевых факторов роста вносят значительный вклад в формирование предрасположенности к идиопатическому сколиозу и на молекулярно-генетическом уровне объясняют природу полового диморфизма подверженности болезни в популяции.

цессе роста и развития позвоночника могут реализоваться по-разному у представителей противоположного пола.

3. Полиморфные гены тканевых факторов роста являются важными предикторами возраста манифестации и степени тяжести сколиотической болезни, связаны с формированием патоморфологических изменений позвоночного столба и выступают в качестве модификаторов клинических проявлений и течения заболевания.

4. Гены тканевых факторов роста являются прогностически ценными маркерами в оценке вероятности развития идиопатического сколиоза, что обосновывает необходимость использования разработанных статистических регрессионных моделей в клинической практике ортопедов и генетиков при формировании групп риска развития заболевания.

Апробация результатов работы и публикации:

Материалы диссертации доложены на VIII Научной конференции с международным участием «Генетика человека и патология» (Томск, 28-30 ноября 2007 г.), VI Съезде Российского общества медицинских генетиков (Ростов-на-Дону, 14-18 мая 2010 г.), итоговой научной конференции сотрудников КГМУ, ЦЧНЦ РАМН и отделения РАЕН, посвященной 76-летию Курского ГМУ (2-3 февраля 2011 г.), IV Архангельской международной медицинской научной конференции молодых ученых и студентов (к 300-летию со дня рождения М.В Ломоносова) (26-27 апреля 2011 г.), 2-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (17-19 мая 2011 г.), 73-й, 74-й и 75-й межвузовских итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых (Курск, 2008, 2009 и 2010 гг.). По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в т. ч. 4 публикации в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикаций результатов диссертационных исследований по медицинским наукам.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных результатов, общего обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и приложений. Работа изложена на 141 странице машинописного текста, иллюстрирована 27 таблицами и 9 рисунками, содержит 2 приложения. Список литературы включает 216 источников: 38 отечественных и 178 зарубежных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Материалом для исследования послужила популяционная выборка неродственных детей русской национальности - жителей Москвы и Московской области в количестве 600 человек. Формирование выборок больных ИС и здоровых детей осуществлялось сплошным методом. Всего за период с 2007 по 2010 гг. было обследовано 300 больных ИС, которые находились на стационарном лечении в ортопедических отделениях Детской городской больницы № 19

им. Т.е. Зацепина г. Москвы. Пациенты включались в группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помощью клинических и рентгенологических методов обследования. Общеклинические методы включали в себя традиционный сбор жалоб, анамнеза болезни и жизни, объективного исследования систем органов. Исключались случаи врожденных деформаций позвоночника, первичной неврологической патологии, синдро-мальной патологии (синдром Марфана, синдром Элерса-Данло), нейрофибро-матоз, эндокринные заболевания, системные заболевания соединительной ткани. В исследование включались дети, деформация позвоночника у которых была выявлена в возрасте 10-14 лет, что соответствовало подростковому идиопа-тическому сколиозу согласно международной классификации.

Инструментальное обследование включало рентгенографию позвоночника в прямой стоя и лежа и в боковой проекциях. Измерение величины дуги искривления во фронтальной плоскости и оценка выраженности патологической ротации производились по методике J. Cobb [Абальмасова Е.А., 1963]. При оценке выраженности торсии пользовались методикой В.О. Маркса (1978).Для определения степени тяжести деформации пользовались классификацией М.В. Волкова [Волков М.В., Дедова В.Д., 1980]. Всем пациентам проводилась компьютерная оптическая топография (ООО «Метос», 2003-2010). Контрольная группа включала 300 добровольцев с нормальной ориентацией позвоночника, сформированная при профилактических осмотрах на протяжении того же периода времени. Критерием включения индивидов в контрольную группу были: отсутствие деформации позвоночника, отсутствие стойких хронических заболеваний по данным субъективного обследования. Анкетирование больных ИС и здоровых детей проводилось при непосредственном общении с использованием оригинальных анкет, разработанных на кафедре биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета.

Для проведения молекулярно-генетических исследований у всех обследуемых проводился забор венозной крови. Молекулярно-генетические исследования проводились на базе лаборатории кафедры биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета (г. Курск), а также лаборатории экологической генетики Медико-генетического научного центра РАМН (г. Москва). Выделение геномной ДНК осуществляли из замороженной венозной крови стандартным двухэтапным методом феноль-но-хлороформной экстракции [Marmur J., 1961]. Генотипирование полиморфизмов генов тканевых факторов роста проводилось методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) и рестрикционного анализа по методикам, опубликованным в литературе.

Для оценки соответствия распределений генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга (РХВ) и для сравнения распределений частот генотипов и аллелей в выборках больных ИС и здоровых детей использовали критерий х2 Пирсона [Вейр Б., 1995]. Для сравнения частот аллелей и генотипов между различными группами использовали критерий % с поправкой Йетса на непрерывность [Реброва О.Ю., 2003]. Об ассоциации аллелей или генотипов с предрасположенностью к заболеваниям судили по величине отноше-

ния шансов (OR) [Pearce N., 1993]. Проверку распределений количественных признаков на нормальность проводили с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. При статистически значимом отклонении исследованных количественных показателей от нормального распределения оценка влияния исследуемых полиморфизмов на данные параметры осуществлялась непараметрическим методом Краскела-Уоллиса.

Межгенные взаимодействия изучали посредством сравнительного анализа частот парных комбинаций генотипов между группами и расчета отношения шансов с целью оценки тенденций в накоплении определенных сочетаний генотипов ТФР у больных ИС в отличие от контроля. Метод MDR (Multifactor Dimensionality Reduction) использовался с целью моделирования межгенных взаимодействий ТФР при идиопатическом сколиозе [Ritchie M.D. et al, 2003; Ritchie M.D., Motsinger A.A., 2005]. Неравновесие по сцеплению и гаметические корреляции между парами ДНК-маркеров рассчитывались методом максимального правдоподобия исходя из частот генотипов в таблицах сопряженности 3x3 при условии кодоминирования между оцениваемыми полиморфизмами отдельного гена [Lewontin R.C., 1988]. Метод логистической регрессии использовался для оценки влияния полиморфных генов на риск развития ИС, его клинические симптомы, клинико-морфологические параметры и особенности течения болезни [Hosmer D. W., Lemeshow S., 2000]. Статистическая обработка данных проводилась на персональном компьютере с использованием программных пакетов Statistica 8.0 ("StatSoft") и MS Excel 2007.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Общая и клиническая характеристика обследованных пациентов

Средний возраст больных ИС составил 13,3±2,8 лет, здоровых детей -12,8±2,1 года. Мальчиков в группе больных было 144 (48%), в контрольной группе 140 (46,7%). Девочек соответственно 156 чел. (52%) в группе больных ИС и 160 чел. (53,3%) в контрольной группе. Статистически значимых межгрупповых различий по возрасту и полу не установлено.

Распределение больных ИС по стадиям заболевания отвечало закономерности, существующей в популяции: наибольшая часть больных (51,3%) с 1 степенью сколиоза, наименьшая (3,3%) - с 4 степенью. Первичная дуга сколиоза в грудном отделе отмечена у 56,1% больных, в грудопоясничном отделе - у 39,2%, в поясничном отделе - у 4,7% пациентов. Основные типы деформаций позвоночника по King встречались со следующей частотой: I тип - 9,7%, II тип - 26,0%, III тип - 22,6%, IV тип - 18,7%, V тип - 2,0%, атипичные деформации -в 21,0% случаев. Болевой синдром выявлен у 20,7% пациентов. У 81,7% больных идиопатическим сколиозом наблюдался мышечный валик на выпуклой стороне дуги; реберный горб выявлен у 10% больных. Мобильность дуги ско-лиотической деформации при наклонах туловища вбок отмечена у 32,3% пациентов. Ограничение подвижности позвоночника выявлено у 31,7% больных. У 67,7% детей сколиотическая деформация была скомпенсирована, а у 77,7% положение туловища в пространстве характеризовалось как стабильное. Быстрое прогрессирование деформации отмечалось в 11,3% случаев. Остеохондропатия

позвоночника сопутствовала течению идиопатического сколиоза в 16,7% случаев, другие заболевания опорно-двигательной системы - в 28,3% случаев. Наследственная отягощенность по сколиозу была установлена у 15,3% больных. Наследственная отягощенность по остеохондрозу позвоночника выявлена у 19,0% пациентов.

Характеристика частот аллелей и генотипов генов тканевых факторов роста в исследуемых группах

Распределения частот генотипов полиморфных генов TGFB1 Arg25Pro, IGF1 -1245G/A, IGF2 +3123G/A и CTGF -945G/C в исследуемых группах соответствовали популяционному равновесию Харди-Вайнберга (РХВ). Статистически значимые отклонения от РХВ (р<0,05) установлены для полиморфизмов +61G/A гена EGF и С-509Т гена TGFB1 в группе больных сколиозом.

В таблице 1 представлены статистически значимые ассоциации аллелей генов ТФР с риском развития ИС.

Таблица 1

Ассоциации аллелей генов ТФР с риском развития идиопатического сколиоза

Ген Полиморфизм и его локализация в гене Аллели1 Частоты аллелей Р2

Больные ИС (п=300) Контрольная группа (п=300)

TGFB1 С-509Т (5'UTR) С 0,713 0,812 *0,0001

Т 0,287 0,188

EGF +61G/A (5'UTR) G 0,450 0,525 ♦0,01

А 0,550 0,475

'Вариантные аллели (мутации) представлены в нижних ячейках ДНК-маркеров. 1 уровни значимости р различий частот аллелей между группами (р<0,05)

Частота мутантного аллеля -509Т гена ТСРВ1 была статистически значимо выше у больных ИС, чем у здоровых детей (СЖ=1,73; 95% С1 1,32-2,27; р=0,0001). Также установлено повышение частоты вариантного аллеля +61А гена £С77 у больных идиопатическим сколиозом в сравнении с группой здоровых детей (СЖ=1,35; 95% С1 1,08-1,70; р=0,01). Статистически значимых различий в частотах аллелей других полиморфных генов тканевых факторов роста между контрольной группой и больными ИС не установлено.

В таблице 2 представлены результаты сравнительного анализа частот генотипов ТФР между группами больных ИС и здоровых детей. Частота гомозигот дикого типа -509СС гена ТСРШ у здоровых детей была выше, чем у больных ИС (СЖ=1,56; 95%С1 1,12-2,17, р=0,01), а частота гомозигот мутантного аллеля -509ТТ, напротив, была выше у больных ИС (011=4,82; 95%С1 2,20-10,58, р=0,00004). Частота гомозиготного генотипа +312300 гена ЮР2 также была выше у здоровых детей, чем у больных ИС (011=1,54; 95%С1 1,11-2,13, р=0,01), в отношении же гетерозиготного генотипа +31230А этого гена наблюдалось обратное соотношение - частота его встречаемости была выше у больных ИС (011=1,59; 95%С1 1,15-2,20, р=0,005). Гетерозиготный генотип +6ЮА гена ЕС/Г встречался чаще у здоровых индивидуумов (011=0,67; 95%С1 0,48-0,93, р=0,015), а частота гомозигот мутантного аллеля +61АА этого гена выше у больных ИС (011=1,78; 95%С1 1,26-2,53, р=0,001).

Таблица 2

Распределение генотипов генов ТФР у больных ИС и в группе контроля _ (представлены статистически значимые различия)__

Ген Полиморфизм и его локализация в гене Генотипы1 Распределение генотипов, п (%) Р2

Больные ИС (п=300) Контрольная группа (п=300)

N % N %

ТСРВ1 С-509Т (5'иТЯ) СС 163 54,3 195 65,0 *р=0,01

СТ 102 34,0 97 32,3 р>0,05

ТТ 35 11,7 8 2,7 *р=0,00004

ЮР2 +3123С/А (З'иТЯ) 121 40,3 153 51,0 *р=0,01

вА 147 49,0 ИЗ 37,7 *р=0,005

АА 32 10,7 34 11,3 р>0,05

ЕСР +6Ш/А (5'ита) 83 27,7 91 30,3 р>0,05

йА 104 34,7 133 44,3 ♦р=0,015

АА 113 37,7 76 25,3 *р=0,001

'Вариантные гомозиготные генотипы представлены в нижних ячейках ДНК-маркеров. 2 уровни значимости р различий частот генотипов между группами (♦ р<0,05)

Таким образом, аллели и генотипы полиморфизмов генов С-509Т

и ЕСР +6\С/А ассоциировались с риском развития идиопатического сколиоза.

Анализ ассоциации полиморфных генов тканевых факторов роста и идиопатического сколиоза у детей в зависимости от пола

Распределение частот аллелей полиморфных генов ТФР у больных ИС и здоровых детей в зависимости от пола приведено в таблице 3.

Таблица 3

Распределение частот аллелей генов ТФР в группах больных ИС и здоровых индивидов в зависимости от пола (представлены только статистически значимые различия)

Ген Полиморфизм Аллели1 Частоты аллелей Р2

Больные ИС Контрольная группа

Мальчики (п=284)

терт С-509Т С 0,726 0,804 ♦0,0369

Т 0,274 0,196

ЕСР +6Ш/А в 0,424 0,511 *0,0375

А 0,576 0,489

Девочки (п=316)

ТСРВ1 С-509Т С 0,702 0,819 *0,0008

Т 0,298 0,181

ЮР1 -12450/А в 0,718 0,797 *0,0206

А 0,282 0,203

ЮР2 +3123С/А в 0,407 0,309 ♦0,0104

А 0,593 0,691

'Вариантные аллели (мутации) представлены в нижних ячейках ДНК-маркеров. 2 уровни значимости р различий частот аллелей между группами (* р<0,05)

При раздельном анализе по полу частота аллеля -509С гена ЮРВ1 среди мальчиков составила 0,726 в группе больных сколиозом и 0,804 в группе здоровых детей ((Ж=1,54; 95% С1 1,04-2,28; р=0,04), а среди девочек - 0,702 и 0,819 соответственно (ОК=1,91; 95% С1 1,32-2,77; р=0,0008). У девочек со сколиозом

аллель -12450 гена ЮР1 встречался реже (0,718), чем у здоровых девочек (0,797); данная ассоциация была статистически значимой (011=1,54; 95% С1 1,07-2,23; р=0,02). У девочек со сколиозом аллель +31230 гена ЮР2 в генотипе встречается чаще (0,407), чем у здоровых (0,309) (СЖ=0,65; 95% С1 0,47-0,91; р=0,01). Более высокая частота аллеля +61А гена ЕСР установлена у мальчиков с ИС (011=1,42; 95% С1 1,02-1,98; р=0,04).

Распределение частот генотипов полиморфных генов ТФР в зависимости от пола приведено в таблице 4.

Таблица 4

Распределение частот генотипов генов ТФР в группе больных ИС и здоровых детей в зависимости от пола (представлены только статистически значимые различия)

Ген

Полиморфизм

Генотипы1

Частоты генотипов

Больные ИС

Контрольная группа

Мальчики (п=284)

ТСРВ!

С-509Т

СС

СТ

ТТ

56,9

31,3

11,8

62,9

35,0

2,1

0,37

0,59

*0,003

Девочки (п=316)

ТвРВ1

С-509Т

СС

СТ

ТТ

51,9

36,5

11,5

107

66,9

30,0

3,1

*0,01

0,27

*0,01

50,0

106

66,3

*0,003

/сет

-1245С/А

вА

43,6

26,9

♦0,002

АА

6,4

6,9

0,87

ее

13,5

11,9

0,67

1СР2

+31230/А

йА

54,5

38,1

*0,004

АА

32,1

50,0

*0,001

Ой

34,0

30,0

0,449

ЕвР

+6Ю/А

йА

26,9

44,4

*0,001

АА

39,;

25,6

*0,011

Вариантные гомозиготные генотипы представлены в нижних ячейках ДНК; уровни значимости р различий частот генотипов между группами (*р<0,05

•маркеров.

В распределении частот генотипов полиморфизма гена ШРВ1 С-509Т у мальчиков статистически достоверно различие между частотами гомозигот му-тантного аллеля -509ТТ (011=5,39; 95% С1 1,67-17,42; р=0,003). В распределении генотипов у девочек имели место различия в отношении «дикого» гомозиготного генотипа -509СС (011=1,86; 95% С1 1,18-2,93; р=0,01), так и для му-тантного гомозиготного генотипа -509ТТ (011=3,78; 95% С1 1,42-10,05; р=0,008). В отношении частот генотипов полиморфизма гена ^GF^ -12450/А у девочек были установлены статистически значимые различия между группами по «диким» гомозиготам (011=1,96; 95% С1 1,25-3,09; р=0,005) и гетерозиготам (011=2,10; 95% С1 1,31-3,37; р=0,003). При анализе частот генотипов полиморфизма гена ЮР2 +31230/А у девочек установлены статистически значимы различия между частотами мутантных гомозигот (011=0,47; 95% С1 0,30-0,75; р=0,001) и гетерозигот (011=1,94; 95% С1 1,24-3,04; р=0,004). Среди девочек на-

блюдалось преобладание гомозиготных вариантных генотипов ЕСЕ в группе больных идиопатическим сколиозом (011=1,86; 95% С1 1,15-3,01; р=0,01) и ге-терозигот среди здоровых детей (011=0,46; 95% С10,29-0,74; р=0,001).

Таким образом, ассоциации полиморфизма С-509Т гена ЮРВ! с риском развития идиопатического сколиоза проявлялись вне зависимости от пола. Кроме этого, у мальчиков с ИС был ассоциирован полиморфизм +6Ш/А гена Ж?/7, а у девочек - полиморфизмы генов инсулиноподобных факторов роста. Выше изложенное демонстрирует проявление полового диморфизма в ассоциациях генов ТФР с формированием идиоаптического сколиоза.

Исследование влияния полиморфизмов генов тканевых факторов роста на возраст манифестации идиопатического сколиоза

Распределение больных по возрасту манифестации ИС, оцененное по критерию Колмогорова-Смирнова, не соответствовало критериям нормального (р<0,01). Медиана возраста манифестации ИС у мальчиков составила 13 лет. Начало заболевания у девочек происходит в среднем на два года раньше. Нами был выбран 13-летний возраст у мальчиков и 11-летний возраст у девочек как пограничный для разделения больных с ранней (до установленного возраста) и поздней (после установленного возраста) манифестацией ИС.

Распределение частот аллелей полиморфных генов ТФР у больных ИС и здоровых детей в зависимости от возраста манифеста приведено в таблице 5.

Таблица 5

Распределение частот аллелей генов ТФР в группах больных ИС и здоровых индивидов

в зависимости от возраста манифестации _(представлены только статистически значимые различия) _

Ген Полиморфизм Аллели1 Частоты аллелей Р2

Больные ИС (п=300) Контрольная группа (п=300)

Ранний манифест (до 13 лет - мальчики, до 11 лет - девочки)

ТСГВ1 С-509Т С 0,664 0,812 *0,000004

т 0,336 0,188

Поздний манифест (после 13 лет - мальчики, после 11 лет - девочки)

ТС ГШ С-509Т с 0,750 0,812 *0,03

т 0,250 0,188

+6Ш/А в 0,433 0,517 *0,01

А 0,567 0,483

У детей с ранней манифестацией идиопатического сколиоза частота алле-ля -509С составила 0,664 (011=2,18; 95% С1 1,57-3,03; р=0,000004), а среди детей с поздней манифестацией - 0,750 (ОЯ=1,44; 95% С1 1,05-1,97; р=0,03). Таким образом, риск раннего развития идиопатического сколиоза у носителей ал-леля С полиморфизма гена ЮЕВ1 С-509Т был ниже. Высокая частота аллеля +61А гена ЕОЕ отмечена среди больных ИС при поздней манифестации заболевания (011=1,40; 95% С1 1,07-1,83; р=0,01).

зиготами дикого (медиана 4,7 мм; 25% и 75% процентили 2,9 мм и 6,7 мм) и вариантного (медиана 4,45 мм; 25% и 75% процентили 3,05 мм и 4,95 мм) типов.

Таким образом, практически все клинико-рентгенологические проявления заболевания ассоциировались с различными полиморфными вариантами генов тканевых факторов роста; общая тенденция проявилась в накоплении вариантных аллелей (исключая полиморфизм гена ЮР2 +3123 & А) среди пациентов с более тяжелым течением сколиоза и наличием другой патологии скелета.

Анализ взаимодействий между генами тканевых факторов роста при идиопатическом сколиозе

Первоначально нами был проведен анализ ассоциаций парных сочетаний генотипов ТФР меду группами больных ИС и здоровых детей. Анаоиз показал, что наиболее патогенетически значимыми для развития ИС у мальчиков были сочетания генотипов следующих полиморфизмов: 7,GF57 С-509Т с одной стороны и ТСРВ1 Я25Р, ШР1 -12450/А, 1СР2 +31230/А с другой. Наиболее значимыми сочетаниями генотипов, увеличивающими вероятность развития ИС у мальчиков, были следующие: ТвРВ1 -ШПуЛОРВ! 25М1 (011=5,04 95%С1 1,65-15,39 р=0,006), ТСРВ1 -509ТТхЛ^2 +3123АА (ОЯ=19,7 95%С1 1,14-341,8 р=0,008) и ТСРВ1 25ЯРх£Х^+61АА (011=4,16 95%С1 1,44-12,06 р=0,007). Напротив, парное сочетание генотипов ГGFB7 25RPx£GF +6ШО (011=0,17 95%С10,04-0,65 р=0,008) у мальчиков чаще встречалось у здоровых детей.

У девочек наиболее значимыми были взаимодействия полиморфизмов генов С-509Т гена ТСРВ1, +31230/А гена ЮР2 и +6Ш/А гена ЕОР. Увеличивали вероятность развития ИС у девочек: ТОРВ1 -509TTx^GF7 -1245АА (011=25,37 95%С1 1,48-434,4 р=0,002), ТСРВ1 -509СТх/С^7 +3123СА (011=2,41 95%С1 1,27-4,60 р=0,006), ТвРВ! -509ТТх/С/-7 +3123СА (011=9,20 95%С11,67-50,78 р=0,004), ТвРВ1 25RRx7GF7 -12450А (011=1,98 95%С1 1,21-3,25 р=0,006), ЮР1 -1245GAx^GF2 +31230А (011=3,00 95%С1 1,60-5,64 р=0,0004), ЮР2 +31230Ах£С/" +61АА (0Л=3,36 95%С1 1,62-6,96 р=0,001). Наоборот, сочетания генотипов ТФР: ТСРВ1 -509CCx^GF7 -1245АА (ОЯ=0,52 95%С1 0,32-0,83 р=0,006), ТОРВ! -509ССx^GF2 +3123АА (011=0,45 95%С1 0,26-0,78 р=0,004), ТСРВ1 25ЯРх£СГ +6ЮА (011=0,21 95%С1 0,07-0,61 р=0,003), ЮР1 -\245GGxlGF2 +3123АА (011=0,45 95%С1 0,26-0,78 р=0,004), ЮП -\245GGxEGF +6ЮА (011=0,34 95%С1 0,19-0,62 р=0,0003), ЮР2 +3123ААх£ОТ+6ЮА (011=0,42 95%С1 0,22-0,80 р=0,007) ассоциировались с пониженным риском ИС у девочек.

При анализе гаметических корреляций (г„) в контрольной группе были установлены статистически значимые (р<0,05) гаметические корреляции между следующими аллельными вариантами генов ТФР: ЮР1 -12450/А и 1СР2 +31230/А (гв=+0,109), ЮР1 -12450/А и ЕСР +6Ш/А (ге=+0,175), ЮР1 -12450/А и -9450/С (г8=+0,112). В группе больных ИС были установлены статистически значимые (р<0,05) гаметические корреляции между аллельными вариантами генов ГС^ В1 С-509Т и ЮР1 -12450/А (г6=+0,120) (рисунок 1).

Рисунок 1

Схематическое изображение межлокусных гаметических корреляций полиморфных вариантов генов ТФР у здоровых индивидов и больных ИС (номера хромосом обозначены сверху)

4q25

U IGF II

11р15.5

№

TGFI31

Гаметические корреляции у здоровых детей Гаметические корреляции у больных ИС

Затем мы смоделировали взаимодействия между генами методом MDR. Для оценки межгенных взаимодействий использовался алгоритм всестороннего поиска (Exhaustive search algorithm). В тех случаях, когда этот алгоритм не позволял выявить статистически значимую модель взаимодействия локусов, использовали алгоритм Forced, на основании которого для создания и-локусных комбинаций маркеров вручную выбирались генные локусы, которые на предыдущих этапах анализа показали вовлеченность в развитие болезней. При анализе общей выборки пациентов наиболее статистически значимой была двухло-кусная модель (воспроизводимость-90%, точность предсказания-57,5%), включающая взаимодействия генов TGFB1 С-509Т х EGF+61G/A (р=0,010) при ИС.

После этого был проведен стратифицированный по полу анализ. У мальчиков с использованием алгоритма Forced была выявлена четырехлокусная модель взаимодействия генов TGFB1 С-509Т х IGF1 -1245G/A х IGF2 +3123G/A х CTGF -945G/C (воспроизводимость - 100%, точность предсказания - 67,3%) при ИС (р=0,001). В данной модели взаимодействие полиморфных генов IGF1 -1245G/A и CTGF -945G/C характеризовалось выраженным синергизмом, взаимодействие генов IGF2 +3123G/A и TGFB1 С-509Т - выраженным антагонизмом; влияние этих двух групп полиморфных генов друг на друга можно было описать как умеренный антагонизм (рисунок 2).

У девочек установлена четырехлокусная модель взаимодействия генов TGFB1 С-509Т х IGF1 -1245G/A х IGF2 +3123G/A х EGF +61G/A воспроизводимость 100%, точность предсказания 64,2% (р=0,001). Выраженная степень антагонизма наблюдалась между полиморфными вариантами генов TGFB1 С-509Т, IGF1 -1245G/A и IGF2 +3123G/A.

Рисунок 2

Кластерный анализ межгенных взаимодействий полиморфизмов при ИС у мальчиков

!——————————— ТСРВ1_С-609Т

ГОР2_+3123ИА

Синий цвет - выраженный антагонизм; зеленый цвет - умеренный антагонизм; красный цвет

- выраженный синергизм.

В меньшей степени, выражен антагонизм между указанными генами и полиморфизмом £6^+61 в/А (рисунок 3). Таким образом, нами был обнаружен сложный характер взаимодействия между полиморфизмами генов тканевых факторов роста при идиопатическом сколиозе, как у мальчиков, так и у девочек.

Рисунок 3

Кластерный анализ межгенных взаимодействий полиморфизмов при ИС у девочек

—...........Ее=_»6Ю1А

г——————— ЮЯ2_*312Э&А

ТСРВ1_С-509Т

Синий цвет - выраженный антагонизм; зеленый цвет - умеренный антагонизм.

Прогнозирование риска возникновения идиопатического сколиоза с использованием данных генотипирования полиморфизма генов ТФР

Оценка влияния исследуемых ДНК-маркеров на риск развития ИС осуществлялась методом бинарной логистической регрессии, которая позволяла построить статистическую модель для прогнозирования вероятности заболевания. Среди всех оцененных моделей наиболее прогностически ценной в отношении риска развития ИС была модель, включающая следующие предикторы: 3 полиморфизма генов ТФР - ТСРВ1 С-509Т, ЮР2 +3123С/А и ЕОГ +61 С/А (р=0,00002). Параметры логистической регрессионной модели представлены в таблице 9. Величина отношения шансов для представленной регрессионной модели составляла 1,88, показывая, что при увеличении на единицу значения г'-го признака шанс возникновения ИС увеличивается более чем в 1,5 раза. Указанная модель правильно предсказывала в 57% случаев возникновение ИС и в 59% случаев правильно классифицировала здоровых детей.

Таблица 9

Логистическая регрессионная модель прогнозирования риска возникновения ИС на основе анализа данных генотипирования полиморфизмов генов ТФР

Независимые (объясняемые) признаки (X,) и их градации Регрессионные коэффициенты, b¡ Уровень значимости (р) для Ъ,

0. Интерцепт (константа) 0,708 -

С-509Т (1,2,3) -0,551 0,00007

2. ЮР2 +31230/А (1,2, 3) 0,258 0,040

3. ¿О/^+бЮ/А (1,2, 3) -0,248 0,021

Параметры лог-регрессионной модели (п=600):

Уровень значимости модели в целом р=0,00002 (х2=24,55; с#=3, (Ж=1,88); Процент правильной классификации: больные ИС - 57%, здоровые - 59%.

Примечательно то, что в общей группе больных в лог-регрессионную модель не вошел ни один из отмечаемых нами средовых признаков (уровень общей физической подготовки, регулярные занятия спортом, наследственная отя-гощенность по идиопатическому сколиозу и остеохондрозу позвоночника), а также антропометрические особенности пациентов (рост, телосложение, костный возраст).

У мальчиков наиболее прогностически ценной в отношении риска развития ИС была модель, включающая следующие предикторы: 2 полиморфизма генов ТФР - ГСга/ С-509Т и ЕвЕ +6Ш/А, а также рост пациента (р=0,011). Параметры лог-регрессионной модели представлены в таблице 10.

Таблица 10

Логистическая регрессионная модель прогнозирования риска возникновения ИС на основе анализа данных генотипирования полиморфизмов генов ТФР и антропометрических особенностей (среди мальчиков)

Независимые (объясняемые) признаки (ЛЭ и их градации Регрессионные коэффициенты, b¡ Уровень значимости (р) для b¡

0. Интерцепт (константа) 2,731 -

\.ТвРВ1 С-509Т (1,2, 3) -0,460 0,022

2. ЕйЕ +6Ю/А (1,2,3) -0,323 0,046

3. Рост пациента, см -0,009 0,033

Параметры лог-регрессионной модели Сп=284):

Уровень значимости модели в целом р=0,011 (х2=11,23; с!]=Ъ, (Ж=1,57); Процент правильной классификации: больные ИС - 55%, здоровые - 56%.

Величина отношения шансов для представленной регрессионной модели составляла 1,57, показывая, что при увеличении на единицу значения /-го признака шанс возникновения ИС увеличивается более чем в 1,5 раза. Указанная модель правильно предсказывала в 55% случаев возникновение ИС и в 56% случаев правильно классифицировала здоровых мальчиков.

У девочек наиболее прогностически ценной в отношении риска развития ИС была модель, включающая следующие предикторы: 3 полиморфизма генов

ТФР - ТСРВ1 С-509Т, ЮР1 -12450/А и ЮР2 +31230/А, а также рост пациента (р=0,00002). Параметры модели представлены в таблице 11.

Таблица 11

Логистическая регрессионная модель прогнозирования риска возникновения идиопатическо-го сколиоза на основе анализа данных генотипирования полиморфизмов генов ТФР и антропометрических особенностей (среди девочек)

Независимые (объясняемые) признаки (X/) и их градации Регрессионные коэффициенты, 6,- Уровень значимости (р) для 6/

0. Интерцепт (константа) -1,310 -

1.ГО™ С-509Т (1,2,3) -0,629 0,001

2. ЮР1 -12450/А (1, 2, 3) -0,460 0,018

Ъ.ЮР2+ШЪЪ!К (1,2,3) 0,540 0,003

4. Рост пациента, см 0,011 0,077

Пяпяметпы лог-оегоессионной модели (п=316):

Уровень значимости модели в целом р=0,00002 (х2=27,34; <#=4, СЖ-2,68); Процент правильной классификации: больные ИС - 58%, здоровые - 66%.

Величина отношения шансов для представленной регрессионной модели составляла 2,68, показывая, что при увеличении на единицу значения г'-го признака шанс возникновения ИС увеличивается более чем в 2,5 раза. Указанная модель правильно предсказывала в 58% случаев возникновение ИС и в 66% случаев правильно классифицировала здоровых девочек.

Таким образом, предлагаемые регрессионные модели прогнозирования идиопатического сколиоза могут использоваться для формирования групп риска развития заболевания.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что аллели и генотипы полиморфизмов генов тканевых факторов роста ассоциированы с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу. Наибольший вклад в развитие заболевания вносят полиморфные варианты С-509Т гена ТСРВ1 и +61 в/А гена ЕСР.

2. В ассоциациях полиморфных вариантов генов тканевых факторов роста с риском развития идиопатического сколиоза наблюдался половой диморфизм: у мальчиков статистически значимые ассоциации с болезнью выявлены для ал-леля -509Т и генотипа -509ТТ ГGFS/, а также аллеля +61А ЕвР, у девочек -для аллеля -509Т и генотипа -509ТТ ТСРВ1, аллеля -1245А и генотипа -12450А ЮР1, аллеля +3123А и генотипа +3123АА КР2, а также генотипа +6ША ЕСР.

3. Аллели и генотипы полиморфизмов генов тканевых факторов роста оказывали влияние на возраст манифестации идиопатического сколиоза: раннее начало заболевания ассоциировалось с полиморфными вариантами С-509Т гена ТСРВ] у мальчиков и -12450/А 1СР1, +31230/А ЮР2, +6Ю/А ЕвР и С-509Т гена ГGFB^ у девочек, поздняя манифестация болезни была связана с носитель-ством полиморфных вариантов +61 О/А ЕвР у мальчиков и -12450/А /С^,+3123О/А ^GF2 и +6Ю/А у девочек.

4. Полиморфные варианты генов тканевых факторов роста оказывали влияния на течение, клинические проявления идиопатического сколиоза, а

также морфологические изменения позвоночного столба. Полиморфизм С-509Т гена TGFB1 ассоциировался со степенью тяжести болезни, +61G/A гена EGF был сопряжен с типом деформации позвоночника и углом Кобба, ло-кусы -1245G/A1GF1 и +3123G/AIGF2 ассоциировались с латеральной девиацией позвоночника, +3123G/AIGF2 был связан с ротацией позвоночного столба, -945G/C гена CTGF был связан с болями в позвоночнике, полиморфизмы +3123G/AIGF2 и -945G/C CTGF ассоциировались с развитием остеохондропа-тии позвоночника, а полиморфизмы TGFB1 R25P +3123G/AIGF2 были сопряжены с развитием других заболеваний опорно-двигательной системы.

5. Анализ парных сочетаний генотипов генов тканевых факторов роста позволил выявить их статистически значимые ассоциации с риском развития идиопатического сколиоза: по 4 парным комбинациям генотипов у мужчин - по 12 парным комбинациям генотипов у женщин, которые в целом характеризовались накоплением среди больных комбинаций генотипов, ассоциации которых с болезнью наблюдались и каждого по отдельности.

6. Методом стохастического моделирования MDR были установлены ключевые взаимодействия генов, которые вносили наибольший вклад в формирование предрасположенности к идиопатическому сколиозу. У мальчиков наиболее патогенетически важными были взаимодействия между генами: TGFBI С-509Т, IGF1 -1245G/A, IGF2 +3123G/A и CTGF -945G/C, у девочек - между генами: TGFBI С-509Т, IGF1 -1245G/A, IGF2 +3123G/A и EGF+6\G!A.

7. У здоровых индивидов, в отличие от больных идиопатическим сколиозом, установлены статистически значимые гаметические корреляции между ал-лельными вариантами генов тканевых факторов роста, таких как: IGF1 -1245G/A и IGF2 +3123G/A, IGF1 -1245G/A и EGF +61G/A, 1GF1 -1245G/A и CTGF -945G/C. В то время как у детей с идиопатическим сколиозом выявлена единственная гаметичсская корреляция между аллельными вариантами генов TGFBI С-509Т и IGF1 -1245G/A.

8. Результаты логистического регрессионного анализа показали, что полиморфные варианты генов тканевых факторов роста являются прогностически ценными предикторами для расчета вероятности возникновения идиопатического сколиоза у детей.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать для внедрения в практику медико-генетических консультаций при выяснении генетических причин формирования сколиотической болезни, а также при дифференциальной диагностике идиопатического сколиоза с клинически сходными заболеваниями позвоночника, проводить у пациентов генетическое тестирование полиморфизма генов тканевых факторов роста TGFBI С-509Т, EGF +61G/A, IGF2 +3123G/A и 1GF1 -1245G/A, которое может также использоваться в качестве скрининг-теста для формирования среди детского населения группы повышенного риска развития сколиотической болезни.

2. При медико-генетическом консультировании семей, отягощенных идиопатическим сколиозом, с целью оценки вероятности развития болезни у потомков в зависимости от пола рекомендуется использовать приемы ее математического прогнозирования с учетом комплекса диагностически ценных признаков, установленных в ходе логистического регрессионного анализа, а именно: генотипов полиморфизмов TGFB1 С-509Т и EGF +61G/A, а также роста для мальчиков; генотипов полиморфизмов TGFB1 С-509Т, IGF1 -1245G/A, IGF2 +3123G/A, а также роста для девочек.

3. В случае установления диагноза идиопатического сколиоза рекомендовать для внедрения в практику работы врачей-ортопедов регрессионные модели для оценки вероятности благоприятного течения болезни с учетом диагностически ценных признаков, таких как полиморфизм TGFB1 С-509Т, тип деформации позвоночника по King, наличие сопутствующей патологии опорно-двигательного аппарата, наследственная отягощенность по сколиозу. Рассчитанные таким образом вероятностные оценки могут оказаться полезными при выборе стратегии и тактики лечения и оценке прогноза заболевания.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Рыжков, И. И. Генетические аспекты этиопатогенеза идиопатического сколиоза / И. И. Рыжков, А. В. Полоников // Генетика человека и патология : сб. науч. тр. / РАМН, Сиб. отд-ние, Том. науч. центр, НИИ мед. генетики ; под ред.

B. П. Пузырева. - Томск, 2007. - Вып. 8. - С. 72-76.

2. Рыжков, И. И. Тканевые факторы роста и идиопатический сколиоз: соврем. состояние проблемы / И. И. Рыжков, А. В. Полоников // Университетская наука: теория, практика, инновации : сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем, науч. центра РАМН : в 3 т. / КГМУ [и др.]; под. ред. А. И. Лазарева, В. А. Лазаренко, О. О. Куриловой. - Курск, 2008. - Т. 1. - С. 83-88.

3. Рыжков, И. И. Соответствие метрических показателей оптико-топографического исследования при сколиозе / И. И. Рыжков // Молодежная наука и современность : материалы 74-ой итоговой науч. межвуз. конф. студентов и молодых ученых, посвящ. Году молодежи в России, Курск, 21-22 аир. 2009 г. : в 3 ч. / Курск, гос. мед. ун-т, Центр.-Чернозем. науч. центр РАМН, РАЕН; редкол.: В. А. Лазаренко [и др.]. - Курск, 2008. - Ч. 1. - С. 72-73.

4. Исследование влияния промоторного полиморфизма С-509Т гена трансформирующего фактора роста на риск развития идиопатического сколиоза у детей / А. Д. Абрамов, И. И. Рыжков, А. В. Полоников [и др.] // Медицинская генетика. - 2010. - Спец. вып. - С. 2. - (Материалы VI Съезда Рос. о-ва мед. генетиков, Ростов-на-Дону, 14-18 мая 2010 г.). (из списка ВАК)

5. Связь полиморфизма +61G>A гена эпидермального фактора роста с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу / И. И. Рыжков, А. В. Полоников, Е. Е. Борзилов [и др.] // Медицинская генетика. - 2010. - Спец. вып. -

C. 155. - (Материалы VI Съезда Рос. о-ва мед. генетиков, Ростов-на-Дону, 14-18 мая 2010 г.). (из списка ВАК)

6. Полиморфизм +61G>A гена эпидермального фактора роста и предрасположенность к идиопатическому сколиозу у детей / И. И. Рыжков, А. В. По-лоников, Е. Е. Борзилов [и др.] // Университетская наука: взгляд в будущее : материалы итоговой науч. конф. сотрудников КГМУ, Центр.-Чернозем, науч. центра РАМН и отд-ния РАЕН, посвящ. 76-летию Курского гос. мед. ун-та, Курск, 2-3 февр. 2011 г. : в 3 т. / Курский гос. мед. ун-т ; под ред. В.А. Лазаренко [и др.]. - Курск, 2011. - Т. 1. - С. 241-243.

7. Связь полиморфизма +61G>A гена эпидермального фактора роста с риском развития идиопатического сколиоза / А. В. Полоников, И. И. Рыжков, М. А. Солодилова [и др.] // Медицинская генетика. - 2011. - № 3. - С. 34-36. (из списка ВАК)

8. Рыжков, И. И. Ассоциации рентгенометрических показателей позвоночника и полиморфизма генов тканевых факторов роста при идиопатическом сколиозе у детей / И. И. Рыжков, А. Н. Петухов // Бюллетень Северного государственного медицинского университета. - 2011. - № 1, вып. XXVI. -С. 218-219. - (IV Архангельская междунар. мед. науч. конф. молодых ученых и студентов : к 300-летию со дня рождения М.В. Ломоносова).

9. Рыжков, И. И. Полиморфизм генов тканевых факторов роста при идиопатическом сколиозе и особенности оптико-топографического исследования позвоночника / И. И. Рыжков, А. Н. Петухов // Бюллетень Северного государственного медицинского университета. - 2011. - № 1, вып. XXVI. - С. 220221. - (IV Архангельская междунар. мед. науч. конф. молодых ученых и студентов : к 300-летию со дня рождения М. В. Ломоносова).

10. Петухов, А. Н. Полиморфизм G-945C гена фактора роста соединительной ткани не ассоциирован с идиопатическим сколиозом / А. Н. Петухов, И. И. Рыжков, А. В. Полоников // Медико-биологические аспекты мультифак-ториальной патологии : II всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием, Курск, 17-19 мая 2011 г. / Курский гос. мед. ун-т [и др.] ; отв. ред. В. П. Иванов. -Курск,2011.-С. 85-86.

11. Рыжков, И. И. Вовлеченность полиморфизма гена эпидермального фактора роста в развитие и течение идиопатического сколиоза / И. И. Рыжков, М. А. Райгородская, А. В. Полоников II Медико-биологические аспекты муль-тифакториальной патологии : II всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием, Курск, 17-19 мая 2011 г. / Курский гос. мед. ун-т [и др.] ; отв. ред. В. П. Иванов. - Курск, 2011. - С. 94-95.

12. Полиморфизм генов инсулиноподобных факторов роста I и II типов и идиопатический сколиоз / И. И. Рыжков, М. А. Райгородская, В. А. Спицын [и др.] // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии : II всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием, Курск, 17-19 мая 2011 г. / Курский гос. мед. ун-т [и др.] ; отв. ред. В. П. Иванов. - Курск, 2011. - С. 98-100.

13. Полиморфизм генов инсулиноподобных факторов роста I и II типов и идиопатический сколиоз / И. И. Рыжков, М. А. Райгородская, Е. Е. Борзилов [и др.]//Человек и его здоровье. - 2011.-№3.-С. 138-143.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ИС - идиопатический сколиоз;

ПЦР - полимеразная цепная реакция;

РХВ - равновесие Харди-Вайнберга;

ТФР - тканевые факторы роста;

CI - confidence interval, доверительный интервал;

MDR - биоинформационный метод multifactor dimensionality reduction;

OR - odds ratio, отношение шансов;

rg - гаметическая корреляция;

UTR - untranslated region, нетранслируемая область гена.

CTGF- фактор роста соединительной ткани;

EGF- эпидермальный фактор роста;

IGF1 - инсулиноподобный фактор роста I типа;

IGF2I- инсулиноподобный фактор роста II типа;

TGFB1 - трансформирующий фактор роста pi.

Подписано в печать 14.11.2011. Формат 60x84/16. Гарнитура Times. Усл. п. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 282. Оригинал-макет подготовлен и тиражирован в ИПК НИУ «БелГУ» 308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

/1-/6

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Рыжков, Игорь Иванович

Список сокращений и список используемых сокращенных названий генов согласно международной номенклатуре

ВВЕДЕНИЕ 5

Глава I. Литературный обзор

1.1. Современные представления об этиологии и патогенезе сколиотической болезни 12

1.2. Генетические аспекты идиопатического сколиоза 17

1.3. Тканевые факторы роста и их биологическая роль 22

1.4. Полиморфизм генов тканевых факторов роста и его роль в патологии 30

Глава II. Материал и методы исследования

II. 1. Характеристика материала исследования и диагностика идиопатического сколиоза 42

II.2. Характеристика методов исследования 44-46 И.З. Генетико-статистические методы 46

Глава III. Результаты собственных исследований

III. 1. Общая и клиническая характеристика обследованных пациентов 50

111.2. Характеристика частот аллелей и генотипов генов тканевых факторов роста в исследуемых группах 53

111.3. Стратифицированный анализ ассоциации полиморфных генов тканевых факторов роста и идиопатического сколиоза у детей в зависимости от пола. 56

111.4. Исследование связи полиморфизмов генов тканевых факторов роста с возрастом манифестации идиопатического сколиоза. 61

111.5. Оценка влияния генов тканевых факторов роста на клинические, рентгенологические, оптикотопографические параметры и течение идиопатического сколиоза 71

111.6. Анализ межгенных взаимодействий при идиопатическом сколиозе 75

111.7. Лог-регрессионный анализ и прогнозирование возникновения идиопатического сколиоза 88

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 95

ВЫВОДЫ 109

Введение Диссертация по биологии, на тему "ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ТКАНЕВЫХ ФАКТОРОВ РОСТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РАЗВИТИЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА"

Деформации позвоночного столба во фронтальной плоскости занимают первое место среди заболеваний позвоночника у детей и подростков, а их частота в общей популяции составляет, по данным разных авторов, от 8 до 15%, из которых 1,5-2% занимают грубые сколиозы с выраженными косметическими и функциональными нарушениями [Балашов С.П., 2010; Ульрих Э.В., Мушкин А.Ю., 2002]. Если исключить из числа всех деформаций позвоночника случаи врожденных деформаций, первичной неврологической патологии, синдромальной патологии, нейрофиброматоз, эндокринные заболевания, системные заболевания соединительной ткани, то получится, что для 80% сколиозов причины заболевания не известны, что послужило основанием для выделения отдельной формы болезни -идиопатического сколиоза (ИС). ИС - наиболее распространенный тип латерального искривления позвоночника, который определяется как сложная трехплоскостная деформация позвоночного столба, прогрессирующая с ростом и развитием организма и сопровождающаяся структурными

V уf изменениями тел позвонков. В зависимости от возраста манифестации заболевания идиопатический сколиоз подразделяется на младенческий (infantile, дебют до 3-х лет), детский (juvenile, дебют в возрасте 4-9 лет), подростковый (adolescent, дебют в возрасте 10-14 лет) и сколиоз взрослых.

Исторически причины развития сколиоза связывали с самыми различными состояниями - от нарушений осанки и «неправильного» сидения за школьной партой до некачественного питания и рахита [Абальмасова Е.А., 1965; Волков М.В., Дедова В.Д., 1980]. В последние годы выделяют до 15 групп, включающих сходные концепции этиопатогенеза заболевания [Burwell R.G. et ah, 2008]. Практически все касаются патогенеза идиопатического сколиоза, но, при этом, ни в одной из них не идет речь о первопричинах, которые могли бы лежать в основе развития патологии.

Представление о генетической природе идиопатического сколиоза сформировалось в 70-х годах двадцатого столетия. С тех пор предметом научного поиска является как определение типа наследования, так и заинтересованности отдельных генов в развитии патологии [Михайловский М.В., Зайдман A.M., 2004]. Описаны случаи аутосомно-доминантного [Salehi L.B. et al., 2002] и Х-сцепленного [Justice С.М. et al., 2003] наследования ИС. Кроме того, предложена модель наследования, основанная на эффекте главного гена с неполной пенетрантностью [Зайдман A.M. с соавт., 2005; Lowe Т. et al., 2000], а также полигенная модель [Bonaitic W. et al., 1976]. Однако большинство исследователей придерживается мультифакториальной модели наследования идиопатического сколиоза [Cheng J.C. et al., 2007; Qiu X.S. et al., 2007].

Попытки идентифицировать предполагаемые гены, детерминирующие развитие идиопатического сколиоза, проводились в двух направлениях: в идентификации предполагаемых генов методом сканирования генома и поиске генов-кандидатов, выбор которых основывается на потенциально значимых для заболевания физиологических, биохимических и структурно-морфологических компонентах позвоночника. Описаны регионы хромосом, несущие вероятные гены, связанные с развитием идиопатического сколиоза: 6р, 10q и 18q [Wise С.А. et al, 2000]; 17pll.2-12 [Salehi L.B. et al., 2002]; 19pl3.3 и 2q [Chan V. et al., 2002; Alden KJ. et al., 2006]; Xq23-26.1 [Justice C.M. et al., 2003]; 8qll [Bashiardes S. et al., 2004]; 1, 3, 5, 6q, 7, 11, 12 [Miller N.H. et al., 2005]; 9q31.2-q34.2 и 17q25.3-qtel [Осака L. et al., 2008].

Тканевые факторы роста представляют собой мощнейшие модуляторы роста и развития тканей организма, в том числе и опорно-двигательного аппарата. Трансформирующие факторы роста стимулируют пролиферацию костной [Крылов М.Ю. с соавт., 2009; Langdahl B.L. et al., 2003] и хрящевой [Okazaki R. et al., 1996; Chua K.H. et al., 2004] тканей, выработку коллагена [Li H. et al., 2008]. Инсулиноподобные факторы роста экспрессируются в скелетных мышцах, в костной ткани [Han J.-L. et al., 2005]. В хрящевой ткани инсулиноподобные факторы роста регулируют пролиферацию и созревание хондроцитов, позволяя формировать кости соответствующего размера и прочности [Wang Y. et al., 2006]. Фактор роста соединительной ткани стимулирует пролиферацию фибробластов, продукцию внеклеточного матрикса, адгезию и формирование грануляций [Fonseca С. et al., 2007].

Участие факторов роста в формировании патологии опорно-двигательного аппарата подтверждается рядом исследований. Показано статистически достоверное повышение уровня трансформирующего фактора роста в замыкательной пластинке позвонка на вогнутой стороне сколиотической дуги. [Xu H. et al., 2005]. Экспрессия фактора, роста соединительной ткани в межпозвонковых дисках может служить маркером дегенеративно-дистрофического поражения [Peng В. et al., 2009]. Генетический полиморфизм инсулиноподобного фактора роста 1 типа ассоциирован с величиной угла сколиотической деформации [Yeung H.Y. et al., 2006]. Однако отсутствие системного подхода приводит к опровержению полученных ранее результатов о связи того или иного генетического полиморфизма и сколиотической болезни [Takahashi Y. et al., 2011].

Цель работы

Задачи исследования:

Научная новизна

В рамках настоящего исследования впервые проведен комплексный анализ ассоциации полиморфизма генов тканевых факторов роста с предрасположенностью к идиопатическому сколиозу. Впервые исследованы и установлены особенности ассоциаций генов ТФР с риском развития ИС в зависимости от пола и возраста манифеста болезни. Впервые изучены взаимодействия между полиморфными вариантами указанных генов при ИС и установлена их роль в формировании генетической компоненты подверженности заболеванию. Выявлены взаимосвязи полиморфных генов ТФР с клиническими особенностями течения болезни и количественными метрическими показателями строения позвоночника. Впервые с использованием данных генотипирования полиморфизма генов ТФР разработаны уравнения регрессии индивидуального прогнозирования риска развития ИС.

Научно-практическая значимость работы

В результате исследования на основе тестирования полиморфных генов тканевых факторов роста были разработаны статистические регрессионные модели вероятностного прогнозирования риска развития идиопатического сколиоза. Практическое использование моделей дает возможность врачам-генетикам, ортопедам и детским хирургам своевременно формировать группу повышенного риска идиопатического сколиоза, оптимизировать и индивидуализировать мероприятия по превентивной коррекции нарушений статики позвоночника. Разработка способов вероятностного прогнозирования риска развития сколиотической болезни, характера ее течения и клинических проявлений на основе анализа полиморфных генов тканевых факторов роста позволит устанавливать диагноз идиопатического сколиоза на начальных этапах развития патологии, а также проводить отбор пациентов, нуждающихся в оперативной коррекции деформации на ранних сроках. Результаты, полученные в ходе исследования, не только формируют новые представления о роли полиморфизма генов в формировании предрасположенности к идиопатическому сколиозу, но и создают теоретическую и концептуальную основу для их внедрения в образовательный процесс. В частности, результаты исследования могут быть использованы при чтении специальных курсов по медицинской и клинической генетике, травматологии и ортопедии, детской хирургии, патофизиологии в вузах медицинского профиля и на курсах повышения квалификации медицинских работников.

Положения, выносимые на защиту:

2. Генетическую основу предрасположенности к идиопатическому сколиозу составляют сложные аддитивные и эпистатические взаимодействия между генами тканевых факторов роста, фенотипические эффекты которых в процессе роста и развития позвоночника могут реализоваться по-разному у представителей противоположного пола.

Апробация результатов работы и публикации: материалы диссертации доложены на VIII Научной конференции с международным участием «Генетика человека и патология» (Томск, 28-30 ноября 2007 г.), VI Съезде Российского общества медицинских генетиков (Ростов-на-Дону, 1418 мая 2010 г.), итоговой научной конференции сотрудников КГМУ, ЦЧНЦ РАМН и отделения РАЕН, посвященной 76-летию Курского ГМУ (2-3 февраля 2011 г.), IV Архангельской международной медицинской научной конференции молодых ученых и студентов (к 300-летию со дня рождения М.В.Ломоносова) (26-27 апреля 2011 г.), 2-й Всероссийской научнопрактической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (17-19 мая 2011 г.), 73-й, 74-й и 75-й межвузовских итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых (Курск, 2008, 2009 и 2010 гг.). По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в т. ч. 4 публикации в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикаций результатов диссертационных исследований по медицинским наукам.

Объем и структура диссертационной работы

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных результатов, общего обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и приложений. Работа изложена на 141 странице машинописного текста, иллюстрирована 27 таблицами и 9 рисунками, содержит 4 приложения. Список литературы включает 216 источников: 38 отечественных и 178 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Рыжков, Игорь Иванович

110 выводы

2. В ассоциациях полиморфных вариантов генов тканевых факторов роста с риском развития идиопатического сколиоза наблюдался половой диморфизм: у мальчиков статистически значимые ассоциации с болезнью выявлены для аллеля -509Т и генотипа -509ТТ TGFB1, а также аллеля +61А EGF, у девочек - для аллеля -509Т и генотипа -509ТТ TGFB1, аллеля -1245А и генотипа -1245GAIGF1, аллеля +3123А и генотипа +3123 ААIGF2, а также генотипа +61GA EGF.

3. Аллели и генотипы полиморфизмов генов тканевых факторов роста оказывали влияние на возраст манифестации идиопатического сколиоза: раннее начало заболевания ассоциировалось с полиморфными вариантами С-509Т гена TGFB1 у мальчиков и -1245G/A IGF1, +3123G/A IGF2, +61G/A EGF и С-509Т гена TGFB1 у девочек, поздняя манифестация болезни была связана с носительством полиморфных вариантов +61G/A EGF у мальчиков и -1245G/A 7GF7,+3123G/AIGF2 и +61G/A EGF у девочек.

4. Полиморфные варианты генов тканевых факторов роста оказывали влияния на течение, клинические проявления идиопатического сколиоза, а также морфологические изменения позвоночного столба. Полиморфизм С-509Т гена TGFB1 ассоциировался со степенью тяжести болезни, +61G/A гена EGF был сопряжен с типом деформации позвоночника и углом Кобба, локусы -1245G/A IGF1 и +3123G/A IGF2 ассоциировались с латеральной девиацией позвоночника, +3123G/A IGF2 был связан с ротацией позвоночного столба, -945G/C гена CTGF был связан с болями в позвоночнике, полиморфизмы +3123G/A IGF2 и -945G/C CTGF ассоциировались с развитием остеохондропатии позвоночника, а полиморфизмы ГGF57 Я25Р +3123 О/А ЮР2 были сопряжены с развитием других заболеваний опорно-двигательной системы.

5. Анализ парных сочетаний генотипов генов тканевых факторов роста позволил выявить их статистически значимые ассоциации с риском развития идиопатического сколиоза: по 4 парным комбинациям генотипов у мужчин, -по 12 парным комбинациям генотипов у женщин, которые в целом характеризовались накоплением среди больных комбинаций генотипов, ассоциации которых с болезнью наблюдались и каждого по отдельности.

6. Методом стохастического моделирования МБК были установлены ключевые взаимодействия генов, которые вносили наибольший вклад в формирование предрасположенности к идиопатическому сколиозу. У мальчиков наиболее патогенетически важными были взаимодействия между генами: ТвРВ1 С-509Т, ЮП -12450/А, ЮР2 +3123С/А и СТОР -9450/С, у девочек - между генами: ТвРВ1 С-509Т, ЮР1 -12450/А, ЮР2 +31230/А и

7. У здоровых индивидов, в отличие от больных идиопатическим сколиозом, установлены статистически значимые гаметические корреляции между аллельными вариантами генов тканевых факторов роста, таких как: ЮР1 -12450/А и ЮР2 +31230/А, ЮР1 -12450/А и ЕвР +6Ю/А, ЮР1 -12450/А и СТОР -945в/С. В то время как у детей с идиопатическим сколиозом выявлена единственная гаметическая корреляция между аллельными вариантами генов ТвРВ1 С-509Т и ЮР1 -1245С/А.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать для внедрения в практику медико-генетических консультаций при выяснении генетических причин формирования сколиотической болезни, а также при дифференциальной диагностике идиопатического сколиоза с клинически сходными заболеваниями позвоночника, проводить у пациентов генетическое тестирование полиморфизма генов тканевых факторов роста TGFB1 С-509Т, EGF +61G/A, IGF2 +3123G/A и IGF1 -1245G/A, которое может также использоваться в качестве скрининг-теста для формирования среди детского населения группы повышенного риска развития сколиотической болезни.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Рыжков, Игорь Иванович, Белгород

1. Балашов, С. П. Хирургическое лечение детей с прогрессирующими формами сколиотической болезни : автореф. дис. канд. мед. наук : 14.01.15 / С. П. Балашов ; Рос. ун-т дружбы народов. М., 2010. -21 с.: ил.

2. Беленький, В. Е. Биомеханические аспекты патогенеза и лечения диспластического сколиоза : автореф. дис. д-ра мед. наук : 14. 00. 22 / В. Е. Беленький ; ЦНИИ травматологии и ортопедии, ЦНИИ протезирования и протезостроения. М., 1981.-31 с.: ил.

3. Вейр, Б. Анализ генетических данных : дискрет, генет. признаки : пер. с англ. / Б. Вейр. М.: Мир, 1995. - 400 с.: ил.

4. Волков, М. В. Детская ортопедия : учеб. для педиатр, фак. мед. ин-тов / М. В. Волков, В. Д. Дедова. 2-е изд., перераб. и доп. - М. : Медицина, 1980.-312 с.: ил.

5. Генные сети / Н. А. Колчанов, Е. А. Ананько, Ф. А. Колпаков и др. // Молекулярная биология. 2000. - Т. 34, № 4. - С. 533-544.

6. Дудин, М. Г. Выявление особенностей нейрогуморальной регуляции опорно-двигательного аппарата у больных идиопатическим сколиозом методом биотестирования / М. Г. Дудин, Т. В. Авалиани, Д. Ю. Пинчук // Хирургия позвоночника. 2004. - № 2. - С. 58-63.

7. Дудин, М. Г. Центральная нервная система и идиопатический сколиоз / М. Г. Дудин, Д. Ю. Пинчук // Хирургия позвоночника. — 2005. № 1.-С. 45-55.

8. Изучение полиморфизма числа тандемных повторов в экзоне 03 гена агрекана в семьях с идиопатическим сколиозом / И. В. Зоркольцева, О. А. Любинский, Р. Н. Шарипов и др. // Генетика. 2002. - Т. 38, № 2. - С. 259-263.

9. Кон, И. И. Диспластический сколиоз: механогенез, диагностика, лечение / И. И. Кон, В. Е. Беленький, Р. Д. Назарова. М.: Медицина, 1994. -22 с.

10. Лебедева, М. Н. Клинико-функциональные характеристики тяжелых форм сколиотических деформаций позвоночника / М. Н. Лебедева // Хирургия позвоночника. 2008. — № 4. - С. 65-71.

11. Маркс, В. О. Ортопедическая диагностика : руководство-справ. / В. О. Маркс. Минск : Наука и техника, 1978. - 511 с.

12. Механизм наследования идиопатического сколиоза / А. М. Зайдман, Т. И. Аксенович, М. А. Садовой и др. // Хирургия позвоночника. -2005.-№1.-С. 112-121.

13. Михайловский, М. В. Этиология, патогенез и патомеханизм идиопатического сколиоза / М. В. Михайловский, А. М. Зайдман // Хирургия позвоночника. 2004. - № 2. - С. 88-97.

14. Мовшович, И. А. Рентгенодиагностика и принципы лечения сколиоза / И. А. Мовшович, И. А. Риц. М.: Медицина, 1969. - 391 с.: ил.

15. Мовшович, И. А. Сколиоз: хирург, анатомия и патогенез / И. А. Мовшович. М.: Медицина, 1964. - 255 с.

16. Никитина, Г. И. Клинико-генетический анализ диспластического сколиоза : (по материалам Москвы и Моск. обл.) : автореф. дис. .пканд. мед. наук : 14.00.22 / Г. И. Никитина ; ЦНИИ травматологии и ортопедии. М, 1991.-26: ил.

17. Плеханова, С. А. Нетравматический апаллический синдром (персисти- рующее вегетативное состояние) : клинико-нейрофизиол. исслед.: автореф. дис. канд. мед. наук :14.00.13 / С. А. Плеханова ; Рос. АМН, НИИ неврологии. М., 1997. - 33 с.: ил.

18. Полиморфизм гена трансформирующего фактора роста бета 1 при постменопаузальном остеопорозе / М. Ю. Крылов, К. А. Маслова, Т. А. Короткова и др. // Научно-практическая ревматология. — 2009. № 1. - С. 18-23.

19. Предварительный анализ наследования сколиоза / Т. И. Аксенович, И. Р. Семенов, Э. X. Гинзбург и др. // Генетика. 1988. - Т. 24, № 11.-С. 2056-2063.

20. Проценко, В. Н. Неврологические и ортопедические аспекты формирования сколиотической деформации позвоночного столба / В. Н. Проценко // Мануальная терапия. 2002. - № 3. - С. 48-58.

21. Ратнер, А. Ю. Поздние осложнения родовых повреждений нервной системы / А. Ю. Ратнер. Казань : Изд-во Казан, ун-та, 1990. - 308 с.

22. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных : применение пакета прикл. программ 8ТАТ18Т1СА / О. Ю. Реброва. М. : Медиа сфера, 2003. - 305 с.: ил., табл.

23. Сампиев, М. Т. Хирургическое лечение больных с прогрессирующими формами сколиотической болезни : автореф. дис. . д-ра мед. наук : 14.00.22 / М. Т. Сампиев ; Рос. ун-т дружбы народов. М., 2007. - 34 с.: ил.

24. Сумин, Ю. Г. Хирургическое лечение сколиоза с применением дистракторов у взрослых : автореф. дис. . канд. мед. наук : 14.00.22 / Ю. Г. Сумин ; Рос. НИИ травматологии и ортопедии. СПб., 1995. - 19 с.

25. Ульрих, Э. В. Вертебрология в терминах, цифрах, рисунках : учеб. для мед. вузов / Э. В. Ульрих, А. Ю. Мушкин. СПб.: Элби-СПБ, 2002. - 185 с.

26. Ульрих, Э. В. Хирургическое лечение пороков развития позвоночника у детей / Э. В. Ульрих, А. Ю. Мушкин. СПб. : Элби-СПб, 2007. - 102 с.: ил.

27. Фищенко, В. Я. Сколиоз / В. Я. Фищенко. Макеевка : Полипрес, 2005. - 558 с.

28. Фогель, Ф. Генетика человека: пробл. и подходы : в 3 т. пер. с англ. / Ф. Фогель, А. Мотульски. М. : Мир, 1989. - Т. 1 : История. Хромосомы человека. Формальная генетика. - 312 с.

29. Фогель, Ф. Генетика человека: пробл. и подходы : в 3 т. пер. с англ. / Ф. Фогель, А. Мотульски. М. : Мир, 1990. - Т. 2 : Действие генов. Мутации. Популяционная генетика. - 378 с.

30. Фомичев, Н. Г. Вертебрология Российской Федерации: проблемы и пути улучшения организации специализированной помощи / Н. Г. Фомичев, М. А. Садовой // Хирургия позвоночника. 2004. - № 1. - С. 25-32.

31. A functional polymorphism in the epidermal growth factor gene is associated with risk for hepatocellular carcinoma / В. K. Abu Dayyeh, M. Yang, B. C. Fuchs et al. // Gastroenterology. 2011. - Vol. 141, № 1. - P. 141-149.

32. A genetic locus for adolescent idiopathic scoliosis linked to chromosome 19pl3.3 / V. Chan, G. C. Fong, K. D. Luk et al. // Am. J. Hum. Genet. 2002. - Vol. 71, № 2. - P. 401-406.

33. A large multicentre analysis of CTGF -945 promoter polymorphism does not confirm association with systemic sclerosis susceptibility or phenotype / B. Rueda, C. Simeon, R. Hesselstrand et al. // Ann. Rheum. Dis. 2009. - Vol. 68, № 10.-P. 1618-1620.

34. A polymorphism in the CTGF promoter region associated with systemic sclerosis / C. Fonseca, G. E. Lindahl, M. Ponticos et al. // N. Engl. J. Med.-2007.-Vol. 357, № 12.-P. 1210-1220.

35. A single nucleotide polymorphism in the 5' untranslated region of the EGF gene is associated with occurrence and malignant progression of gastric cancer / Y. Hamai, S. Matsumura, K. Matsusaki et al. // Pathobiology. 2005. -Vol. 72, №3.-P. 133-138.

36. A survey of haplotype variants at several disease candidate genes: the importance of rare variants for complex diseases / P. Y. Liu, Y.Y. Zhang, Y. Lu et al. // J. Med. Genet. 2005. - Vol. 42, № 3. - P. 221-227.

37. Abnormalities of the axial and proximal appendicular skeleton in adults with Laron syndrome (growth hormone insensitivity) / L. Kornreich, O. Konen, M. Schwarz et al. // Skeletal. Radiol. 2008. - Vol. 37, № 2. - P. 153160.

38. Absence of association between SNPs in the promoter region of the insulin-like growth factor 1 (IGF-1) gene and longevity in the Han Chinese population / L. Xie, Y. Y. Gong, S. G. Lian et al. // Exp. Gerontol. 2008. - Vol. 43, № 10.-P. 962-965.

39. Adolescent idiopathic scoliosis and the single-nucleotide polymorphism of the growth hormone receptor and IGF-1 genes / Y. Yang, Z. Wu, T. Zhao et al. // Orthopedics. 2009. - Vol. 32, № 6. - P. 411.

40. Age-related changes in expression of transforming growth factor-ß and receptors in cells of intervertebral discs / S. Matsunaga, S. Nagano, T. Onishi et al. // J. Neurosurg. 2003. - Vol. 98, suppl. 1. - P. 63-67.

41. Aggrecan gene expression disorder as aetiologic factor of idiopathic scoliosis / A. M. Zaidman, M. N. Zaidman, A. V. Korel et al. // Stud. Health. Technol. Inform. 2006. - Vol. 123. - P. 14-17.

42. Analysis of the transforming growth factor ßl gene-509 C/T polymorphism in patients with advanced-stage endometriosis / J. J. Kim, Y. M. Choi, S. H. Choung et al. // Fertil. Steril. 2010. - Vol. 93, № 7. - P. 2121-2124.

43. Analysis of transforming growth factor betal gene polymorphisms in patients with systemic sclerosis / A. Crilly, J. Hamilton, C. J. Clark et al. // Ann. Rheum. Dis. 2002. - Vol. 61, № 8. - P. 678-681.

44. Assignment of a locus for autosomal dominant idiopathic scoliosis (IS) to human chromosome 17pll / L. B. Salehi, M. Mangino, S. De Serio et al. // Hum. Genet. 2002. - Vol. 111, № 4-5. - P. 401-404.

45. Assignment of two loci for autosomal dominant Adolescent Idiopathic Scoliosis (AIS) to chromosomes 9q31.2-q34.2 and 17q25.3-qtel / L. Osaka, C. Zhao, J. A. Reed et al. // J. Med. Genet. 2008. - Vol. 45, № 2. - P. 87-92.

46. Association between a TGFßl promoter polymorphism and rhinosinusitis in aspirin-intolerant asthmatic patients / S.-H. Kim, H.-S. Park, J. W. Holloway et al. // Respir. Med. 2007. - Vol. 101, № 3. - P. 490-495.

47. Association between EGF + 61 G/A and glioma risk in a Chinese population / S. Wang, Y. Zhao, Z. Ruan et al. // BMC Cancer. 2010. - Vol. 10. -Art. 221.

48. Association between EGF +61A/G polymorphism and gastric cancer in Caucasians / A. P.Araüjo, B. M. Costa, A. L. Pinto-Correia et al. // World J. Gastroenterology. 2011. - Vol. 17, № 4. - P. 488-492.

49. Association between endometriosis and polymorphisms in insulin-like growth factors (IGFs) and IGF-I receptor genes in Korean women / H. Kim, J. H.

50. Park, S.-Y. Ku et al. // Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2011. - Vol. 156, № 1. -P. 87-90.

51. Association between epidermal growth factor polymorphism and esophageal squamous cell carcinoma susceptibility / L. Cui, X. M. Pan, C. F. Ma et al. // Dig Dis Sei. 2010. - Vol. 55, № 1. - P. 40-45.

52. Association between estrogen receptor gene polymorphisms and curve severity of idiopathic scoliosis / I. Masatoshi, M. Shohei, N. Yoshinori et al. // Spine. 2002. - Vol. 27, № 21. - P. 2357-2362.

53. Association between functional polymorphism in EGF gene and malignant melanoma / M. Shahbazi, V. Pravica, N. Nasreen et. al. // Lancet. -2002. Vol. 359, № 9304. - P. 397-401.

54. Association between transforming growth factor betal polymorphisms and left ventricle hypertrophy in essential hypertensive subjects / H. Y. Xu, X. W. Hou, L. F. Wang et al. // Mol. Cell. Biochem. 2010. - Vol. 335, № 1-2. - P. 1317.

55. Association of a polymorphism of the transforming growth factor beta-1 gene with prevalent vertebral fractures in Japanese women / Y. Yamada, A. Miyauchi, Y. Takagi et al. // Am. J. Med. 2000. - Vol. 109, № 3. - P. 244-247.

56. Association of a TGF-ßl gene-509 C/T polymorphism with breast cancer risk: a meta-analysis / S. U. Woo, K. H. Park, O. H. Woo et al. // Breast. Cancer. Res. Treat. 2010. - Vol. 124, № 2. - P. 481-485.

57. Association of cytokine gene polymorphisms with malignant melanoma in Caucasian population / P. N. Nikolova, G. P. Pawelec, S. M. Mihailova et al. // Cancer. Immunol. Immunother. 2007. - Vol. 56, № 3. - P. 371-379.

58. Association of polymorphisms of the transforming growth factor-beta 1 gene with the rate of progression of HCV-induced liver fibrosis / J. Gewaltig, K. Mangasser-Stephan, C. Gartung et al. // Clin. Chim. Acta. 2002. - Vol. 316, № 1-2.-P. 83-94.

59. Association of the transforming growth factor ßl promoter polymorphism, C-509T, with smoking status and survival in advanced non-small cell lung cancer / Y. Togashi, K. Masago, S. Fujita et al. // Oncol. Rep. — 2011. — Vol. 25, №2.-P. 377-382.

60. Association of transforming growth factor-1 gene C-509T and T869C polymorphisms with atherosclerotic cerebral infarction in the Chinese: a case-control study / Z. Peng, L. Zhan, S Chen et al. // Lipids. Health. Dis. 2011.i1. Vol. 10.-Art. 100.

61. Association study between epidermal growth factor receptor and epidermal growth factor polymorphisms and endometriosis in a Japanese population / M. Inagaki, S. Yoshida, S. Kennedy et al. // Gynecol. Endocrinol. -2007. Vol. 23, № 8. - P. 474-478.

62. Association study of a polymorphism of the CTGF gene and5 susceptibility to systemic sclerosis in the Japanese population / Y. Kawaguchi, Y.

63. Ota, M. Kawamoto et al. // Ann. Rheum. Dis. 2009. - Vol. 68, № 12. - P.1921-1924.

64. Biochemistry of adolescent idiopathic scoliosis / G. Lombardi, M.-Y. Akoume, A. Colombini et al. // Adv.Clin. Chem. 2011. - Vol. 54. - P. 165-182.

65. Blobe, C. Role of transforming growth factor beta in human disease / G. C. Blobe, W. P. Schiemann, H. F. Lodish // N. Engl. J. Med. 2000. - Vol. 342, № 18.-P. 1350-1358.

66. BMP7 null mutation in mice: developmental defects in skeleton, kidney, and eye / N. Jena, C. Martin-Seisdedos, P. McCue et al. // Exp. Cell. Res. 1997. - Vol. 230, № 1. - P. 28-37.

67. Burwell, R. A multifactorial concept of the causation of idiopathic scoliosis / R. Burwell, P. Dangerfield // Etiology of adolescent idiopathic scoliosis.

68. Chromosomal localization of seven members of the murine TGF-beta superfamily suggests close linkage to several morphogenetic mutant loci / M. E. Dickinson, M. S. Kobrin, C. M. Silan et al. // Genomics. 1990. Vol. 6, № 3. -P. 505-520.

69. Clinical significance of the insulin-like growth factor I gene promoter (PI) polymorphism in thyroid nodular disease / R. Wasko, K. Michalek, J. Pacholska et al. // Neuro. Endocrinol. Lett. 2005. - Vol. 26, № 6. - P. 699-703.

70. Collagen 1 Alpha 1 and transforming growth factor-beta polymorphisms in women with cervical insufficiency / J. E. Warren, R. M. Silver, J. Dalton et al. // Obstet. Gynecol. 2007. - Vol. 110, № 3. - P. 619-624.

71. Connective tissue growth factor (CTGF) acts as a downstream mediator of TGF-betal to induce mesenchymal cell condensation / J. J. Song, R. Aswad, R. A. Kanaan et al. // J. Cell. Physiol. 2007. - Vol. 210, № 2. - P. 398410.

72. Connective tissue growth factor coordinates chondrogenesis and angiogenesis during skeletal development / S. Ivkovic, B. S. Yoon, S. N. Popoff et al. // Development. 2003. - Vol. 130, № 12. - P. 2779-2791.

73. Cowell, H. R Genetic aspects of idiopathic scoliosis. A Nicholas Andry Award essay, 1970 / H. R. Cowell, J. N. Hall, G. D. MacEwen // Clin. Orthop. Relat. Res.- 1972.- Vol. 86. -P. 121-131.

74. CTGF/Hcs24, hypertrophic chondrocyte-specific gene product, interacts with perlecan in regulating the proliferation and differentiation of chondrocytes / T. Nishida, S. Kubota, T. Fukunaga et al. // J. Cell. Physiol. -2003. Vol. 196, № 2. - P. 265-275.

75. Cytokines and growth factors in the protruded intervertebral disc of the lumbar spine / N. Specchia, A. Pagnotta, A. Toesca et al. // Eur. Spine J. -2002.-Vol. 11, №2.-P. 145-151.

76. Dairy intake associates with the IGF rs680 polymorphism to height variation in periadolescent children / G. V. Dedoussis, E. Louizou, C. Papoutsakis et al. // Eur. J. Clin. Nutr. 2010. - Vol. 64, № 3. - P. 253-258.

77. Deuel, T. F. Polypeptide growth factors: roles in normal and abnormal cell growth / T. F. Deuel // Annu. Rev. Cell Biol. 1987. - Vol. 3. - P. 443-492.

78. DNA linkage analysis of familial idiopathic scoliosis / I. Masatoshi, M. Shohei, K. Hiroshi et al. // Etiology of adolescent idiopathic scoliosis

79. Effects of transforming growth factor Ps and basic fibroblast growth factor on articular chondrocytes obtained from immobilized rabbit knees / R.

80. Okazaki, A. Sakai, T. Nakamura et al. // Ann. Rheum. Dis. 1996. - Vol. 55, № 3.-P. 181-186.

81. Effects of transforming growth factor-ß on aggrecanase production and proteoglycan degradation by human chondrocytes in vitro / N. Moulharat, C. Lesur, M. Thomas et al. // Osteoarthritis. Cartilage. 2004. - Vol. 12, № 4. - P. 296-305.

82. EGF promoter SNPs, plasma EGF levels and risk of breast cancer in Chinese women / Y. Wang, T. Tian, Z. Hu et al. // Breast. Cancer. Res. Treat. -2008.-Vol. Ill, №2.-P. 321-327.

83. Epidermal growth factor 61 A/G polymorphism and uterine cervical cancer / S. Kang, J. W. Kim, N.-H. Park et al. // Int. J. Gynecol. Cancer. 2007. -Vol. 17, №2.-P. 492-426.

84. Epidermal growth factor A61G polymorphism and cardiac autonomic control in adults / S. Puttonen, L. Keltikangas-Jarvinen, M. Elovainio et al. // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 2005. - Vol. 29, № 5. - 702707.

85. Epidermal growth factor a61g polymorphism is associated with the age of onset of schizophrenia in male patients / K. Hänninen, H. Katila, S. Anttila et al. // J. Psychiatr. Res. -2007. Vol. 41, № 1-2. - P. 8-14.

86. Epidermal growth factor gene (EGF) polymorphism and risk of melanocytic neoplasia / M. R. James, N. K. Hayward, T. Dumenil et al. // J. Invest. Dermatol. 2004. - Vol. 123, № 4. - P. 760-762.

87. Epidermal growth factor gene functional polymorphism and the risk of hepatocellular carcinoma in patients with cirrhosis / K. K. Tanabe, A. Lemoine, D. M. Finkelstein et al. // JAMA. 2008. - Vol. 299, № 1. - P. 53-60.

88. Epidermal growth factor gene polymorphism is different between schizophrenia and lung cancer patients in Korean population / Y. J. Lim, J.-W. Kim, J. Y. Song et al. // Neurosci. Lett. 2005. - Vol. 374, № 3. - P. 157-160.

89. Epidermal growth factor genetic variation, breast cancer risk, and waiting time to onset of disease / A. P. Araujo, R. Ribeiro, D. Pinto et al. // DNA Cell Biol. 2009. - Vol. 28, № 5. - P. 265-269.

90. Epidermal growth factor serum levels and the 61 G/A polymorphism in patients with acute pancreatitis / G. I. Papachristou, V. Muddana, D. J. Papachristou et al. // Dig. Dis. Sei. 2010. - Vol. 55, № 9. - P. 2676-2680.

91. Epimutation of the telomeric imprinting center region on chromosome lip 15 in Silver-Russell syndrome / C. Gicquel, S. Rossignol, S. Cabrol et al. // Nat. Genet. 2005. - Vol. 37, № 9. - P. 1003-1007.

92. Etiology of idiopathic scoliosis: current trends in research / T. Lowe, M. Edgar, J. Y. Margulies et al. // J. Bone Joint. Surg. Am. 2000. - Vol. 82-A, №8.-P. 1157-1168.

93. Evaluation of the transforming growth factor ßl codon 25 (Arg—>Pro) polymorphism in alcoholic liver disease / C. H. Österreicher, J. Halangk, T. Berg et al.//Cytokine.-2008.-Vol. 42,№ l.p. 18-23.

94. Evaluation of transforming growth factor and vascular endothelial growth factor polymorphisms in Taiwan Chinese patients with pterygium / D. T. Bau, C. C. Chiang, Y.Y. Tsai et al. // Eur. J. Ophthalmol. 2008. - Vol. 18, № 1. -P. 21-26.

95. Expression and role of connective tissue growth factor in painful disc fibrosis and degeneration / B. Peng, J. Chen, Z. Kuang et al. // Spine. 2009. -Vol. 34, № 5. - P. E178-E182.

96. Expression of insulin-like growth factor in the cancellous bone of lumbar spine in ovariectomized rats / J.-L. Han, J. Liu, X.-S. Mu et al. // Chinese Journal of Clinical Rehabilitation. 2005. - Vol. 9, № 47. - P. 112-113.

97. Genetic analysis of structural elastic fiber and collagen genes in familial adolescent idiopathic scoliosis / N. H. Miller, B. Mims, A. Child et al. // J. Orthop. Res. 1996. - Vol. 14, № 6. - P. 994-999.

98. Genetic association of complex traits: using idiopathic scoliosis as an example / J. C. Cheng, N. L. Tang, H. Y. Yeung et al. // Clin. Orthop. Relat. Res. 2007. - Vol. 462. - P. 38-44.

99. Genetic association study of growth hormone receptor and idiopathic scoliosis / X. S. Qiu, N. L. Tang, H. Y. Yeung et al. // Clin. Orthop. Relat. Res. -2007.-Vol. 462.-P. 53-58.

100. Genetic association study of insulin-like growth factor-I (IGF-I) gene with curve severity and osteopenia in adolescent idiopathic scoliosis / H. Y. Yeung, N. L. Tang, K. M. Lee et al. // Stud. Health. Technol. Inform. 2006. -Vol. 123.-P. 18-24.

101. Genetic control of the circulating concentration of transforming growth factor type betal / D. J. Grainger, K. Heathcote, M. Chiano et al. // Hum. Mol. Genet. 1998. - Vol. 8, № 1. -P. 93-97.

102. Genetic polymorphism in EGF is associated with prostate cancer aggressiveness and progression-free interval in androgen blockade-treated patients / A. L. Teixeira, R. Ribeiro, D. Cardoso et al. // Clin. Cancer. Res. 2008. - Vol. 14,№ 11.-p. 3367-3371.

103. Genetic polymorphism in the transforming growth factor pi gene (509 C/T and -800 G/A) and colorectal cancer / Z. Amirghofrana, S. A. Jalalia, A. Ghaderia et al. // Cancer Genet. Cytogenet. 2009. - Vol. 190, № 1. - P. 21-25.

104. Genetic risk factors of bronchopulmonary dysplasia / P. Kwinta, M. Bik-Multanowski, Z. Mitkowska et al. // Pediatr. Res. 2008. - Vol. 64, № 6. -P. 682-688.

105. Genetic susceptibility in Dupuytren's disease. TGF-fll polymorphisms and Dupuytren's disease / A. Bayat, J. S. Watson, J. K. Stanley et al. // J. Bone Joint. Surg. Br. 2002. - Vol. 84-B, № 2. - P. 211-215.

106. Genetic susceptibility of epidermal growth factor +61A>G and transforming growth factor betal -5090T gene polymorphisms with gallbladder cancer / M. Vishnoi, S. N. Pandey, D. R. Modi et al. // Hum. Immunol. 2008. -Vol. 69, №6.-P. 360-367.

107. Genetics of adolescent idiopathic scoliosis / A. Czeizel, A. Bellyei, O. Barta et al. // J. Med. Genet. 1978. - Vol. 15, № 6. - P. 424-427.

108. Genetics of idiopathic scoliosis / C. Bonaïti, J. Feingold, M. L. Briard et al. // Helv. Paediatr. Acta. 1976. - Vol. 31, № 3. - P. 229-240.

109. GH IGF-I axis in young patients with adolescent idiopathic scoliosis (AIS) and Scheuermann's disease (SD) coupled with AIS / S. Viola, F. Péter, I. Nagy et al. // Etiology of adolescent idiopathic scoliosis

110. Growth factors and cancer / A. S. Goustin, E. B. Leof, G. D. Shipley et al. // Cancer Res. 1986. - Vol. 46, № 3. - P. 1015-1029.

111. Gruber, H. E. Anti-apoptotic effects of IGF-1 and PDGF on human intervertebral disc cells in vitro / H. E. Gruber, H. J. Norton, E. N. Jr. Hanley // Spine. -2000. Vol. 25, № 17. - P. 2153-2157.

112. Hamamura, K. IGF2-driven PI3 kinase and TGFbeta signaling pathways in chondrogenesis / K. Hamamura, P. Zhang, H. Yokota // Cell. Biol. Int. 2008. - Vol. 32, № 10. - P. 1238-1246.

113. High glucose promotes collagen synthesis by cultured cells from rat cervical posterior longitudinal ligament via transforming growth factor-(31 / H. Li, D. Liu, C.-Q. Zhao et al. // Eur. Spine. J. 2008. - Vol. 17, № 6. - P. 873-881.

114. Hogan, B. L. Bone morphogenetic proteins: multifunctional regulators of vertebrate development / B. L. Hogan // Genes. Dev. 1996. - Vol. 10, № 13. -P. 1580-1594.

115. Hosmer, D. W. Applied logistic regression / D. W. Hosmer, S. Lemeshow. New York : Wiley, 2000. - 373 p.

116. Identification of candidate regions for familial idiopathic scoliosis / N. H. Miller, C. M. Justice, B. Marosy et al. // Spine. 2005. - Vol. 30, № 10. - P. 1181-1187.

117. Identification of genetic variants that influence circulating IGF1 levels: A targeted search strategy / C. Palles, N. Johnson, B. Coupland et al. // Hum. Mol. Genet. 2008. - Vol. 17, № io. - P. 1457-1464.

118. Identification of human ccn2 (connective tissue growth factor) promoter polymorphisms / I. E. Blom, A. J. van Dijk, R. A. de Weger et al. // Mol. Pathol. 2001. - Vol. 54, № 3. - P. 192-196.

119. Idiopathic scoliosis: identification of candidate regions on chromosome 19pl3 / Alden KJ, Marosy B, N. Nzegwu et al. // Spine. 2006. -Vol. 31, № 16.-P. 1815-1819.

120. IGF-1 regulation of type II collagen and MMP-13 expression in rat endplate chondrocytes via distinct signaling pathways / M. Zhang, Q. Zhou, Q. Q. Liang et al. // Osteoarthritis Cartilage. 2009. - Vol. 17, № 1. - p. 100-106.

121. IGF-I polymorphism is associated with lean mass, exercise economy and performance among premenopausal women / M. Lopez-Alarcon, G. R. Hunter, B. A. Gower et al. // Arch. Med. Res. 2007. - Vol. 38, № 1. - P. 56-63.

122. IGF-II gene region polymorphisms related to exertional muscle damage / J. M. Devaney, E. P. Hoffman, H. Gordish-Dressman et al. // J. Appl. Physiol.-2007.-Vol. 102, №5.-P. 1815-1823.

123. Immunosuppressive cytokine gene polymorphisms and outcome after related and unrelated hematopoietic cell transplantation in a Chinese population / H. Xiao, W. Cao, X. Lai et al. // Biol. Blood. Marrow. Transplant. 2011. - Vol. 17,№4.-P. 542-549.

124. Immunosuppressive cytokine gene polymorphisms and outcomes after related and unrelated hematopoietic cell transplantation / H. Xiao, X. Lai, G. Wu et al. // Biol. Blood. Marrow. Transplant. 2010. - Vol. 16, № 2, suppl. 2. - P. S271.

125. Implication for melatonin and its receptor in the spinal deformities of hereditary Lordoscoliotic Rabbits / S. Sobajima, A. Kin, I. Baba et al. // Spine. -2003. Vol. 28, № 6. - P. 554-558.

126. Inhibition of pulmonary and skeletal metastasis by a transforming growth factor-ß type I receptor kinase inhibitor / A. Bandyopadhyay, J. K. Agyin, L. Wang et al. // Cancer. Res. 2006. - Vol. 66, № 13. p. 6714-6721.

127. Insulin-like growth factor 2 (IGF2) and IGF2 receptor gene variants are associated with fetal growth / K. Kaku, H. Osada, K. Seki et al. // Acta Paediatr. 2007. - Vol. 96, № 3. - P. 363-367.

128. Insulin-like growth factor-1 treatment prevents anti-Fas antibody-induced apoptosis in endplate chondrocytes / Y. J. Wang, Q. Shi, P. Sun et al. // Spine. 2006. - Vol. 31, № 7. - P. 736-741.

129. Insulin-like growth factor-2 genotype, fat-free mass, and muscle performance across the adult life span / M. A. Schräger, S. M. Roth, R. E. Ferrell et al. // J. Appl. Physiol. 2004. - Vol. 97, № 6. - P. 2176-2183.

130. Insulin-like growth factor-I is essential for embryonic bone development / Y. Wang, S. Nishida, T. Sakata et al. // Endocrinology. 2006. -Vol. 147, № 10.-P. 4753-4761.

131. Interaction between insulin-like growth factor-1 with other growth factors in serum depleted culture medium for human cartilage engineering / K. H. Chua, B. S. Aminuddin, N. H. Fuzina et al. // Med. J. Malaysia. 2004. - Vol. 59, suppl. B.-P. 7-8.

132. Interactions between secondhand smoke and genes that affect cystic fibrosis lung disease / J. M. Collaco, L. Vanscoy, L. Bremer et al. // JAMA. -2008. Vol. 299, № 4. - P. 417-424.

133. Juul, A. Serum levels of insulin-like growth factor I and its binding proteins in health and disease / A. Juul // Growth. Horm. IGF Res. 2003. - Vol. 13, № 4. - P. 113-170.

134. King, R. A. The genetic basis of common diseases / R. A. King, J. I. Rotter, A. G. Motulsky. 2nd ed. - Oxford ; New York : Oxford University Press,2002. 1076 p.: ill. - (Oxford monographs on medical genetics ; № 44).<

135. Lack of association between TGF-beta-1 genotypes and microalbuminuria in essential hypertensive men / G. Dell'Omo, G. Penno, L. Pucci et al. //Nephrol. Dial. Transplant. 2009. - Vol. 24, № 6. - P. 1864-1869.

136. Lack of association between the TGF-pl gene polymorphisms and recurrent spontaneous abortion / D. Amani, A. S. Dehaghani, J. Zolghadri et al. // J. Reprod. Immunol. 2005. - Vol. 68, № 1-2. - P. 91-103.

137. Lack of significant association between TGF-(31-590C/T polymorphism and breast cancer risk: a meta-analysis / Y. Huang, Y. Hao, B. Li et al. // Med. Oncol. 2011. - Vol. 28, № 2. - P. 424-428.

138. Large-scale population-based study shows no association between common polymorphisms of the TGFB1 gene and BMD in women / F. E. A. McGuigan, H. M. Macdonald, A. Bassiti et al. // J. Bone Miner. Res. 2007. -Vol. 22, №2.-P. 195-202.

139. Lewontin, R. C. On measures of gametic disequilibrium / R. C. Lewontin // Genetics. 1988. - Vol. 120, № 3. - P. 849-852.

140. Linkage analysis of genetic loci for kyphoscoliosis on chromosomes 5pl3, 13ql3.3, and 13q32 / N. H. Miller, B. Marosy, C. M. Justice et al. // Am. J. Med. Genet. A. 2006. - Vol. 140, № 10. - P. 1059-1068.

141. Localization of susceptibility to familial idiopathic scoliosis / C. A. Wise, R. Barnes, J. Gillum et al. // Spine. 2000. - Vol. 25, № 18. - P. 23722380.

142. LTGF-pi polymorphism determines the progression of joint damage in rheumatoid arthritis / S. Y. Kim, S. W. Han, G. W. Kim et al. // Scand. J. Rheumatol. 2004. - Vol. 33, № 6. - P. 389-394.

143. Marmur, J. A procedure for the isolation of DNA frommicroorganisms J. Marmur // J. Mol. Biol. 1961. - Vol. 3, № 2. - P. 208-218.

144. Maturity assessment and curve progression in girls with idiopathic scoliosis / J. O. Sanders, R. H. Browne, S. J. McConnell et al. // J. Bone Joint. Surg. Am. 2007. - Vol. 89, № 1. - P. 64-73.

145. Miller, N. Adolescent idiopathic scoliosis: a brief summary on genetics / N. Miller // Etiology of adolescent idiopathic scoliosis.

146. Morton, N. E. Tests and estimates of allelic association in complex inheritance / N. E. Morton, A. Collins // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1998. -Vol. 95, № 19. P. 11389-11393.

147. Nerlich, A. G. Expression of fibronectin and TGF-pl mRNA and protein suggest altered regulation of extracellular matrix in degenerated disc tissue / A. G. Nerlich, B. E. Bachmeier, N. Boos // Eur. Spine. J. 2005. - Vol. 14, № 1. -P. 17-26.

148. No association between EGF gene polymorphism and gastric cancer / Y. Goto, T. Ando, H. Goto et al. // Cancer. Epidemiol. Biomarkers Prev. 2005. -Vol. 14, № 10. - P. 2454-2456.

149. No association between epidermal growth factor and epidermal growth factor receptor polymorphisms and nasopharyngeal carcinoma / L. B. Gao, Y. S. Wei, B. Zhou et al. // Cancer. Genet. Cytogenet. 2008. - Vol. 185, № 2. -P. 69-73.

150. No association between SNPs regulating TGF-pi secretion and late radiotherapy toxicity to the breast: results from the RAPPER study / G. C. Barnett,

151. C. E. Coles, N. G. Burnet et al. // Radiother. Oncol. 2010. - Vol. 97, № 1. - P. 9-14.

152. Novel mode of processing and secretion of connective tissue growth factor/ecogenin (CTGF/Hcs24) in chondrocyte HCS-2/8 cells / S. Kubota, T. Equchi, T. Shimo et al. // Bone. 2001. - Vol. 29, № 2. - P. 155-161.

153. Ober, C. Sex-specific genetic architecture of human disease / C. Ober,

154. D. A. Loisel, Y. Gilad // Nat. Rev. Genet. 2008. - Vol. 9, № 12. - P. 911-922.

155. Pearce, N. What does the odds ratio estimate in a case-control study? / N. Pearce // Int. J. Epidemiol. 1993. - Vol. 22, № 6. - P. 1189-1192.

156. Pedicle growth asymmetry as a cause of adolescent idiopathic scoliosis: a biomechanical study / A. M. Huynh, C. E. Aubin, T. Rajwani et al. // Eur. Spine J. 2007. - Vol. 16, № 4. - P. 523-529.

157. Polymorhisms in the transforming growth factor-pi gene (TGF-pi) and the risk of advanced alcoholic liver disease / J. Oliver, J. A. G. Agundez, S. Morales et al. // Liver. Int. 2005. - Vol. 25, № 5. - P. 935-939.

158. Polymorphism in the insulin-like growth factor 1 gene is associated with age at menarche in caucasian females / J. Zhao, D. H. Xiong, Y. Guo et al. // Hum. Reprod. 2007. - Vol. 22, № 6. - P. 1789-1794.

159. Polymorphism of the IGF2 gene, birth weight and grip strength in adult men / A. A. Sayer, H. Syddall, S. D. O'Dell et al. // Age Ageing. 2002. -Vol. 31, №6.-P. 468-470.

160. Polymorphisms in the transforming growth factor beta 1 gene and osteoporosis / B. L. Langdahl, M. Carstens, L. Stenkjaer et al. // Bone. 2003. -Vol. 32, №3.-P. 297-310.

161. Polymorphisms of transforming growth factor-(31 associated with increased risk of gastric cardia adenocarcinoma in north China / W. Guo, Z. Dong, Y. Guo et al. // Int. J. Immunogene. 2011. - Vol. 38, № 3. - P. 215-224.

162. Possible pathogenesis of painful intervertebral disc degeneration / B. Peng, J. Hao, S. Hou et al. // Spine. 2006. - Vol. 31, № 5. - P. 560-566.

163. Renal failure after clinical heart transplantation is associated with the TGF-pi codon 10 gene polymorphism / C. C. Baan, A. H. Balk, C. T. Holweg et al. // J. Heart. Lung. Transplant. 2000. - Vol. 19, № 9. - P. 866-872.

164. Ritchie, M. D. Multifactor dimensionality reduction for detecting gene-gene and gene-environment interactions in pharmacogenomics studies / M. D. Ritchie, A. A. Motsinger // Pharmacogenomics. 2005. - Vol. 6, № 8. - P. 823-834.

165. Role of transforming growth factor-pl -509 C/T promoter polymorphism in gastric cancer in south Indian population / A. C. Bhayal, B. Prabhakar, K.P. Rao et al. // Tumor Biol. 2011. - Vol. 11, № 5. - P. 1049-10531

166. Role of transforming growth factor-pi gene polymorphisms in childhood idiopathic thrombocytopenic purpura / B. Atabay, H. Oren, G. Irken et al. // J. Pediatr. Hematol. Oncol. 2003. - Vol. 25, № 11. - P. 885-889.

167. Segregation of structural collagen genes in adolescent idiopathic scoliosis / A. J. Carr, D. J. Ogilvie, B. P. Wordsworth et al. // Clin. Orthop. Relat. Res. 1992. - Vol. 274. - P. 305-310.

168. Serum levels and genetic variation of TGF-betal are not associated with Alzheimer's disease / E. Rodríguez-Rodríguez, P. Sánchez-Juan, I. Mateo et al. // Acta Neurol. Scand. 2007. - Vol. 116, № 6. - P. 409-412.

169. Shimode, M. Asymmetry of premotor time in the back muscles of adolescent idiopathic scoliosis / M. Shimode, A. Ryouji, N. Kozo // Spine. 2003. - Vol. 28, № 22. - P. 2535-2539.

170. SNTG1, the gene encoding gammal-syntrophin: a candidate gene for idiopathic scoliosis / S. Bashiardes, R. Veile, M. Allen et al. // Hum Genet.2004.-Vol. 115, № 1.-P. 81-89.

171. Solari, V Association of transforming growth factor-betal gene polymorphism with reflux nephropathy / V. Solari, D. Owen, P. Puri // J. Urol.2005.-Vol. 174,№ 4, pt. 2.-P. 1609-1611.

172. Stevens, D. A. Hormone regulation of chondrocyte differentiation and endochondral bone formation / D. A. Stevens, G. R. Williams // Mol. Cell. Endocrinol. 1999. - Vol. 151, № 1-2. - P. 195-204.

173. Test of association between variant tgpl alleles and late adverse effects of breast radiotherapy / S. Martin, M. Sydenham, J. Haviland et al. // Radiother. Oncol. 2010. - Vol. 97, № 1. - P. 15-18.

174. TGFB1 and IL8 gene polymorphisms and susceptibility to visceral leishmaniasis / A. F. Frade, L. C. Oliveira, D. L. Costa et al. // Infect. Genet. Evol. 2011. - Vol. 11, № 5. - P. 912-916.

175. TGF-beta 1 variants in chronic beryllium disease and sarcoidosis / A. C. Jonth, L. Silveira, T. E. Fingerlin et al. // J. Immunol. 2007. - Vol. 179, № 6. -P. 4255-4262.

176. TGF-betal polymorphisms and arterial stiffness; the Rotterdam Study / M. P. Sie, F. U. Mattace-Raso, A. G. Uitterlinden et al. // J. Hum. Hypertens. -2007. Vol. 21, № 6. - P. 431-437.

177. TGFbetal polymorphisms and late clinical radiosensitivity in patients treated for gynecologic tumors / K. De Ruyck, M. Van Eijkeren, K. Claes et al. // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2006. - Vol. 65, № 4. - P. 1240-1248.

178. TGF-betal polymorphisms and risk of myocardial infarction and stroke: the Rotterdam Study / M. P. Sie, A. G. Uitterlinden, M. J. Bos et al. // Stroke. 2006. - Vol. 37, № 11. - P. 2667-2671.

179. TGF-ßl codon 25 gene polymorphism is associated with cirrhosis in patients with hereditary hemochromatosis / C. H. Österreicher, C. Datz, F. Stickel et al. // Cytokine. 2005. - Vol. 31, № 2. - P. 142-148.

180. The -509 C/T genotype of TGFbetal might contribute to the pathogenesis of benign airway stenosis / L. Rovö, M. Szell, Z. Bella et al. // Otolaryngol. Head. Neck. Surg. 2010. - Vol. 142, № 3. - P. 441-443.

181. The 61 A/G EGF polymorphism is functional but is neither a prognostic marker nor a risk factor for glioblastoma / E. Vauleon, N. Auger, A. Benouaich-Amiel et al. // Cancer. Genet. Cytogenet. 2007. - Vol. 172, № 1. -P. 33-37.i

182. The relationship between the concentration of TGF-betal in serum and its gene polymorphisms in CWP / W. Yao, Z. M. Wang, M. Z. Wang et al. // Sichuan. Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2005. - Vol. 36, № 6. - P. 827-829.

183. Transforming growth factor beta 1 (TGFbetal) gene polymorphisms and Chagas disease susceptibility in Peruvian and Colombian patients / J. E. Calzada, Y. Beraún, C. I. González et al. // Cytokine. 2009. - Vol. 5, Issue № 3.-P. 149-153

184. Transforming growth factor beta 1 gene variants increase transcription and are associated with liver cirrhosis in Chinese / H. Wang, Y. P. Zhao, C. F. Gao et al. // Cytokine. 2008. - Vol. 43, № 1. - P. 20-25.

185. Transforming growth factor beta gene maps to human chromosome 19 long arm and to mouse chromosome 7 / D. Fujii, J. E. Brissenden, R. Derynck et al. // Somat. Cell Mol. Genet. 1986. - Vol. 12, № 3. - P. 281-288.

186. Transforming growth factor beta superfamily members: role in cartilage modeling / S. R. Frenkel, P. B. Saadeh, B. J. Mehrara et al. // Plast. Reconstr. Surg. 2000. - Vol. 105, № 3. - P. 980-990.

187. Transforming growth factor-(31 polymorphisms, airway responsiveness and lung function decline in smokers / E. Ogawa, J. Rúan, J. E. Connett et al. // Respir. Med. 2007. - Vol. 101, № 5. - P. 938-943.

188. Tumor necrosis factor-a and transforming growth factor-pi polymorphisms in bronchial asthma / A. Kumar, V. Gupta, H. Changotra et al. // Indian. J. Med. Sci. 2008. - Vol. 62, № 8. - P. 323-330.

189. Validation of connective tissue growth factor (CTGF/CCN2) and its gene polymorphisms as noninvasive biomarkers for the assessment of liver fibrosis / E. Kovalenko, F. Tacke, O. A. Gressner et al. // J. Viral. Hepat. 2009. - Vol. 16,№9.-P. 612-620.

190. VEGF, FGF1, FGF2 and EGF gene polymorphisms and psoriatic arthritis / c. Butt, S. Lim, C. Greenwood et al. // BMC Musculoskelet. Disord. -2007.-Vol. 8.-P. 1.

191. Xu, J.-J. Differences in the expression of insulin-like growth factor in normal and degenerated intervertebral discs / J.-J. Xu, Q.-Q. Zhu // Journal of clinical rehabilitative tissue engineering research. 2007. - Vol. 11, № 6. - P. 1028-1030.

192. Zhang, R. Effects of TGF-betal and IGF-1 on proliferation of human nucleus pulposus cells in medium with different serum concentrations / R. Zhang, D. Ruan, C. Zhang // J. Orthop. Surg. Res. 2006. - Vol. 1. - Art. 9.

Информация о работе

Рыжков, Игорь Иванович
кандидата медицинских наук
Белгород, 2011
ВАК 03.02.07

Диссертация

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ТКАНЕВЫХ ФАКТОРОВ РОСТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РАЗВИТИЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИДИОПАТИЧЕСКОГО СКОЛИОЗА - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы