Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Подземные воды Колхидской низменности в связи с генезисом в них сероводорода микробного происхождения

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Подземные воды Колхидской низменности в связи с генезисом в них сероводорода микробного происхождения"

'Т&лкеекиЯ Ордека Трудового Красного Знамени ГосударсгвеклкЛ ушпэвроигет км, Й.А. Дкавахкквнли

На правах рукописи УДК 576.654:5^5.711:622.7

•кайч/шзш дш пшшкарпозна

{к8328шв вода колхщжоз низменности в сзязи с генезкси з них оерожорош шрошого пгоксходакт

"-"^■ъятооть 03»СО«07 - Мккробиояопя

А в О ъ е Ф е Р А Т

диссертации на «кдеокание ученой степецд гсидвдата биологических гаук

Тбилкоа 1992

Работа выполнена в Институте микробиологии (ИЩИ) АН РАЯ и в Кавказской институте минерального сырья (КИКС).

Научнао руководители: ,

ьхздежк ЛН СССР И.БДБоаоп .

кандидат биологических каук .ЫиСахБадзй

Офауздыше оппоненты:

доктор биологических наук М ДДарцидзе

кандидат биологических каук 3 .Ш Лоитатидге

Ведущая организация - Институт бкохишш р&етеаяй АН Реопу&Е^клл Грузия

Задета соотоитоя " У/йЙ^, 15Э2 г» яа/^"чйс.

на заседании Специализированного совета К 057.03.1? при Тбилисском Государственном университета ж. И ^^жавахшвгаи ( ЗбОСЛЗ, Тбилиси, ул. Университетская, 2).

С диссертацией иоано ознакомиться в библиотеке ОТ. Автореферат разослан

./О " 199г Гф

Ученый оехретарь Специализированного совета, кандидат биологических наук,

доцент НЛДикцадзе

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблеш. Исследования минеральных источников Захавхазогсой неигорной зоны начато в 40-60 годах (.Челивз, Фсми-чев, 195%). Изучением подзегяых вод Северного Кавказа (Гриненко, Грякэнко, 197'0 доказана биогенная природа сероводорода мезотерм дальних вод^

Микробный характер сероводорода подземных водных горизонтов территории курорта Меидки предполагался eso в результате обследований Кавказских минеральных вод в 80-х годах (Иванов, 1977). Тем не менее, четкие доказательства микробного генезиса сероводорода по РконсксИ впадине и', в частности по Колхидской низменности* представлены не били.

В настоящее время известно больное количество сульфатредуци-руюпщх икс ро организмов, основных продуцентов современного биогенного сероводорода, разлагающих яирныэ кислоты, являющиеся продукта!« аэробного окисления нефти (Беляев с соавг., 1990; Иванов с ooaSTii 1991; Розанова о соазт., 1991).

Изучение процессов, судьфатредукцкя в >гелоЕых оадпкеюих Кол» хкдьг, пр;,*.?азллпзих собой сульфидсносные зкооиотены, характери-зувщксая ¡>á£Q случаев гысскиия температурами ц наличием специ-фичэсзсях opi" iiiixecsHX ssqecra (низшие спирты, летучие нирные кислоты), аатуг лг йо s научной точки зрении Процессы сульфатрвдукции, сопровоздаювивоя «ислениея етрных кислот в вноокотериалышх условиях, не были ранее известны. В целом экология сульфатредуци-оушах* бактерий, ¡.иойользулчих жирные кислота, была слабо изучена. Уточнение природа сероводорода в рассматриваемых экосистемах актуально с практической точки зрения в связи о широким приненеки-е» минеральных к}-термальных вод Колхидской низменности в народном хозяйстве (курорт!"о-прсфилактаческая база, оросительная сис- . тека- селгокохоэлйствен-янх культур, отопительные и тепличные сооружения);- ■

Изучение'трансформации вод и■годовмещавдих пород (сульфатных и силикатных минералов) актуально в овязи о обследованием роли оульфатродуцируюаих бактерий в преобразовании'земноЯ коры, а так- ' не в овязи о разработкой и совершенствованием методоз обогащения руд в промышленных.технология*•

Цели и задачи исследования. Настоящая работа посвящена обоснованию ведущей роли микробиологических процессов в формирсва-

• с -

нии сероводорода в подземных водах Колхидской низменности. Конкретные задачи исследования состояли в следусвей. I. Изучение подземных вод Колхиды как экосистем, способствующих и обеспечивавших развитие процессов сульфатредукции: исследование эколого-геохкадческой обстановки распространения и активности сульфатре-дуцирувиих бактерий. 2; Выделение птаммов сульфатредуцирующих бактерий, принимавших участие в образовании сероводорода в подземных водах Колхиды, изучение их метаболизма, таксономии. 3. Воздействие процессов сульфатредукции, вызываемой сульфатредуцирув-иими бактериями подземных вод, на состав вмещающих пород и вод.

Научная новизна работы. Обнаружено, что ранее не исследованные с микробиологической точки зрения подзеиные водные горизонты меловых отложений Колхидской низменности являются экосистемами, обеспечивающими развитие сульфидсгенных микробиологических процессов в мезотеркальных и выоокотернальных условиях. В пластах присутствуют сульфат редуцирующие бактерии, способные разлагать водорастворимые органические соединения. Активность проце-сов сульфатредукции варьирует в пределах О-О,^ иг 3 ъосот /л в сутки.

Из подземных вод выделены штамм сульфатредуцируювих бактерий, рассматриваемый как новый представитель рода Сези1Гоъасгег1ит и новый вид рода Сези1^1отаси1ип , . ¡сигпе4зоу11.

Новый представитель рода Бе5и1Гоъас1ег1ит обладает уникальны» ми свойствами в вноокотермальных условиях окислять метанол, ацетон, глицерин и жирные кислоты.

Новый вид Мп . кигпе1зоу11 тоже характеризуется способностью метабслизировать жирные кислоты и метанол ввысокотермальных условиях. Ранее была известна возможность разложения этих соединений микрофлорой, воостантвливаящей окисленные соединения серы, лишь в мезотермальной обстановке.

о Впервые изучена возможность трансформации гипса в условиях выоокей температуры при использовании метанола бактерией ,

«сигпе180у11.

Впервые продемонстрировано, что процессы сульфатредукции влияют на структуру силикатных минералов.

* Практическая ценнооть исследования. I; Выявлена биологическая природа сероводорода, содержащегося в водах пл%отов меловых отло» жений Колхидской низменности, используемых в народном хозяйстве. . Обнаружена возможность активизации процессов оульфатредукци, открывающая перспективу управления ими. 2. Данные, полученные по

распространенно и активности сульфатредуцируещих бактерия, полезна при определения четких территориальных границ формирования минеральной води и защити участков как природного ресурса от неблагоприятного антропогенного воздействия. 3. Впервые на основе данных, полученных по трансформации гипса (отход промыаленных технологий) с применением кетанояа (прокипдеккий отход) и по преобразо-ваниа силикатных ,'шнералов предложено использование сульфатредуич-рувщих бактерий (з том числе я вновь выделенных) для обработки минералов и руд бактериальной суспензией с цельс разруиеий силикатных структур ¿и увеличения гидрофобности рудных частиц за счет образования сероводорода. Токая обработка мотет быть использована во-флотации., "В рудо обо г?.ткт в л ьны х технологических схемах.

Апробация работы- Основные материалы диссертация опубликованы ta П статьях и тезисах.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 8 глав, выводов, спиака литературы я приложения. Материалы изложены на 171 странице машинописного текста и включает 34таблицы, 15 рисунков.. С пк со г. литературы содержит 226 наименований работ. Приложение дзхзвезо .на 17 страницах машинописного текста и включает 4 таблицы..

Место »„ гпедеккя работы. Работа выполнена в Институте микробиологии АН СССР (РАН) в лаборатории микробной биогеохимии (зав. отделом акацекик АН СССР (РАН) Иванов М.В.) и в Кавказском институте минерального сырья в лаборатории биотехнологии минерального сырья (зав. лабораторией кандидат биологических наук Сахвадзе Л.И.).

05шсш и шсщд гождований.

Метода полевых исследований. Объектами изучения служили 10 самоизливавщихся скважин Колхидской низменности, принадлежащих медовому горизонту Кодорокого, Колхидского, Мегрельского, Цхалтуб-ского и Аргветского бассейнов поровых и треоинных вод.

Ей и рН в изучаемых водах определяли в аоаэробных условиях (Романенко, Кузнецов, 1974). Измерения осуществляли о учетом значений электрода сравнения (хлор-серебряный) при различной температуре воды плаотов (Наумов с соавт., 1971). Концентрации кислорода, растворенного в водах, исследовали о помощью обра„вого йодомэтри-ческого титрования, модифицированного для анализа в присутствия органического вещества и восстановителей (Резников с соавт.,1970). ' Определение других газов (водород, азот, метан) осуществляли газо-

.хроматографическим способом. Количественное определение обцзй _ восстановленной титруемой сери осуществляли йодометричесхим неходок (Резников с соавт., 1970; Романенко, Кузнецов, 1974) и колориметрически ( С11пе , 1969).

Количетсвешшй учет сульфатредуцируювдх микроорганизмов' проводили методом предельных разведений ка средах с лахтатом-, йота-колой, бутнратон-, пропиокатом, которые вносили в концентрации 1,5 г/л. Минеральной основой слушши оолевие состава сред Постгейта "Б" к Видделъ-Пфеннпга (БП). Увеличение концентрации, сероводорода в них служило критерием развития микроорганизмов.

Интенсивность бактериального восстановлена: сульфата в изолированных пробах изучаемых вод определяли радиоизотопным кето-дси (Иванов, 1956? Романенко, Кузнецов, 1974), модифицировав кэ-тодику для использования в условиях повшешшх температур в с

цель» учета различных физиолого-окологичеоких групп сульфатрсду-цирувдих бактерий в пластовых водах.

Методы лабораторных исследований. Биомассу оульфатрздуцирую-еих бактерий определяли весовым методой и по мутности (Розанова, 1978).

МасспектрометрическиЯ анализ стабильных изотопов серы осуществляли в прецизионном режиме на приборах МЙ-1Э05 и МИ-1201 (Устинов, Гркненко, 1965).

Культивирование сульфатредуцируювих. бактерий при повышенных температурах и давлении осуществляли в тнтановах автоклавах (сплав ВТ-в) о фторопластовой футеровкой; Условия безградиектные. Давление и температура задавались по коэффициенту заполнения автоклава.

Количественные определения содержания в растворах катионов кальция проводили атомно-абоорбционним методом (Бричке-, 1982).

Рентино-отруктурнне иоследовання минералов проводили на медном монохроматизированном излучении. Режим съемки подбирало» индивидуально в зависимости от образца (Фрашс-Яаменецкий, 1983).

Приготовление питательных сред, выделение и культивирование сульфатредуцируювдх бактерий осуществляли согласий принципам работы с анаэробными микроорганизмами ( Нипва$е , 1969) и рекомендациям Ф.Видделя (1980). Чистые культуры микроорганизмов получали путем многократных переоевов колоний, выращенных в толще агара питательной среды ВП и Поотгейта "Б", на соответствующую кид-"Уя* Чистоту культур контролировали микроскопированием и посева-

•s» 5 к,

<ffl «а ЧфЪйй для'анаэробных "гетеротрофных бактерий. МорфойбКЯз t 1:йс'роСргаяйзм он изучали в световой микроскопе н Reichert 41 И " .Zetopan" с фазово-контрастным устройством и з электронном теикро-Шопе osir-T'GCk. Препарата для кикроойопйи приготовляли обдепркнятн-11и нгтода;:!!-»

Выде'лекзэ ДНК из бактерий осувествляли по ¡reibSy Йармура

(1961). Сгйе^ааяив G +С определяли по таей1е$ййу$е йяавлёния да с йокощьз Спйй'грсфЬтсмзтра " ВеЗаааа%

MaieftaWJeöRyn обработку 'дакййх эдгэдъвеня'бй интенсйвкссФй ме» тодок однофаХторноГо £>лсТ>&рсШй1ЪТ'о сяатаза проводили согласий комевдацийй Лакана Щ*®-)«.

результаты иссщсадний.

-1ч чЯгоШРйя 'йуХьфатредуцирувщйх бактерий подземных -горизонтов Колхидской низменности.

Отпеченные сульфидогеннымй процесса.'® водоносные горизонты изучакгоЯ территории содержат воды., отнесенные к минеральным я геотерка.тьлык. Они рассматривается в качестве экологичес&кх нии, обвопечипатциг приоу»-?вив биогенного сероводорода. Гйфогеологи-' ческая xci t.xvepucTmsa их представлена в таблице I-» ТЮйзшнне водные горизонты Колхвди в основном характеризуется -Глубоким залеганием в меловых отложениях (верхний , нижний мел)-. Их Температура на забое и изливе в пестах пробура скважин вЪр&ДОем варьирует до 5-IO°C. pH в прзделах нейтральных значений, tffo самое высокое значение 8,3. Eh определяется величинами., доТгуйкавиики развитие суль-фатредуцирукяих бактерий. Самое положительное его значение отмечено в воде скважины Цапки IÄ (л325 мВ) , в ней же обнаружен.растворимый б воде киолсрад 's количестве 8,5 мг/л, чего не отмечено . по 'другим .ittaarast-» Для 'Мз'опроявлений пластовой воды характерен котанов'Ш (Ш SSif) "л азотный -состав, иногда присутствует водород. iifeSirieö'fBij Ъ'й&'ей »ъсстановлейной титруемой серы-в воде колеблется ТГо пластам от •0,8 мг/л до 75 мг/л-. Общая минерализация воды возрастает по мере падения горизонта с северо-востока на юго-запад территории от 1,5 до 13-,7 г/л, соответствуя увеличению содержания в Еоде количества микроэлементов. Отмечено увеличение содержания общей титруемой восстановленной серы в воде при пезыпениа активности водообмена пластов,

Газо-хроматогра$ический анализ воды исследованных пластов обнаружил присутствие В НИХ -летучий SiÜplMX кислот и низших спиртов

Таблица Г; Гидрогеологическая характеристика изученных подземные водных

плаотов Колхидской низменности

Сква- Водонос- Глубина то~ „„ _н ЕЙ НоЗ , Дебит, яп-2 Формула химического состава еодз, жина ний го- скважины, А » л/оек. • мг-экв-2 (КурловаЗ

ризонт

интервал проявления воды, и

иэливе забое

мг/л

8

10

Ама-глоба ме. 45

1250 940-990

12 6.3- 6,81 "¡¡5~ 6,5 +67

5,0 97,9

С1"е4 наоз

<10 г -—•'"о • " —

(Ыа+К)71 Са 17 Ме 12

Ама- Верхний 1000 37-43 6,6- 13,6 0,5- 19,7 Глеба мелА^) Ю00 ~55 6,7 -46 0,75

01" 69 НС03 |0

<зч <

17,64 ;/а+бв к^+215 Са+213 К+4

Вани Верхний, 1615 56 6,7- 3,0 6,9 597,9 6СМ Мбл (Ю,) 55о_95о ^ 6,6 +52

"2,09

С1~55 20~238 НСО" 7 Са+245 г!а+35 Кя+216 К+4

Самтре- Нижний 3045 ' 62 6,9- 2,0 3,0- 606,6 дня 1 мел(К|) 1265-1620 64-65 7,0 ♦ГОб 5,0

01=45 ао^гб нcoJ 37

са+г50 «а+зб 1!Е+2г4

2,9

Та<шша I., продолжение.

Сана- Нижний.!600¡Л 50 7,5- 25,0" пиро келСК1)1С80_ 7,6 -55 30,0

9 1600

2*0

ИСОД)

М= а • 2»5

10

С1 92 НСО~ в

(Па+К) 88 Са^б Мв+2 б

Суху- Нижний 3250 50 6,6

?Яеч- мел(КРг800-копи) . 3250

еггу

6г8 +99

1,3-: 1,5

285,9

С1~ез нсо^5 З0д212

2(8"

Иа+40 Са+239 Мв+2П

Бео- Нижний 1572 ^1,6 6,2- 5*0

лети келО^Л^хоо г)з ~ б+71 ® " Ш0~

^ 551*1" ¡, 2°4251 СХ"29 НСО^гО

' (Иа+К)б2 Са+219 Мз+г17 «

-з

8'

Дран- Нижний 3371 93,0 8,0- 0»85

да- иелСкр ет1с_ 100 6 6,3 *80 • ьар- 3360 /

4,0

Зар.

ча

И

159,9181,0 й

30^48 НС0~30 С1"22 (ма+к)47 са+г42 М5+2и

Цак- Нижний 71-Ю 7.5- 0,8 V*0- 598,0-

т ко^СК^) "Тот"! "со 7,6 +125 9,0 619 »0 ,

ЗОд 53 С1"32 НСО~м

1А

1,8-

Са+246 (На+К)42 Кв+2П

Мои-. Верхний 780 | 30 7,2-дки 452-479 35-40 7,5 _б0

2'»

"7370-370^

4,2

102,0

538-635

13,7

С1**9б НСО~ 3

( НаГК)9г г!з+246 Са+24

В

з количестве от; 0,001 до <¡¿069 г/л органического аг^ес^.в-я (шУи 2), явдлюцихоя промежуточными продуктами оедодачда ба-»

туминозной.» угольной » торфяной органивди

Табдэда 2* Содержание летучих хкрцых кислот и низших спщ><» тов. в пластовой воде йзучцкшх окдзадиз«

Скважина Органическое среди-* нэнй© с чисг.е» едо-«. ков С» г/д Пересчет- на Сппр в зедео.твах» ' * г/д Суммарное со-дсржгуц;е С, в

I 2 3 4

Ляаглеба С? - спирт - 0,007 'О 0е0037 0.0037

Л::аглеоа С, - спирт - 0,011 71 С? - кйслота-0,049 0,0057 о.ск 0,027

Вани 6СМ Со - спирт - 0,006 - спирт - 0,003 0,003 0,004 •

Сачтредпя Со - спирт - 0,004 1 0,0024 0,0024

Сакапкро 9 Со - спирт - 0,002 Со -кислота- 0,002 Щ -кислота- 0,003 0,0012 0,0008 0,001 0,0030

Сухуми(1еч-Со - спирт - 0,002 когаг)8ГГУ С5 -кислота-0,020 С| - спирт - 0,005 0,001 0,008 0,011

Беслети Изо спирт - 0,015 И С ацетон) -кислота- 0,006 0,009 0,0024 0,011

Дранда- Ср - спирт - 0,001 Варча Изо сСз~спирт - 0,003 1Т "Л ацетон) 0,0005 0,0035

Цаоти Ст - спирт - 0,00138 0,0005 ЗА Изо С4 - спирт - 0,006 0,0024 •* (ацетон) С> - спирт - 0,006 0,003 С| -кислота- 0,043 0,017 0,023

Нендхи 24 Ст - спирт - 0,042 Со - спирт - 0,003 С£ - спирт - 0,004 - кислота-0,033 0,016 0,0016 0,0024 0,013 0/03

Численность микрофлоры, восстанавливавдей соединения серы определяли на селективных средах согласно эк олого-метаболическим группам сульфатредуцирувдих бактерий С ИЫйе! , 1986), то есть . на лактате, ацетате и пропиокатв. Данные изложены в таблице 3.

Таблица 3. ЧкОлеккооть оульфатредуцирущих бактерий в воде, пластов-изуч'енных скважин, кл./мл.

Скваяина Пита тельние о р оды

Постгейта "Б" ВП, ацетат ВП, пропионат

Аиаглеба 45 I03 Ю1 ГО1

Амаглвба 71 ГС? 1С? К?

Вани бСИ 101 1С? 1С2

Сачтрздкя I I02 I01 I02

Санапиро 9 ■V? 10^

С|ос|Ий (Лечкопи) I01 I03

Бволети 8К I03 ю3 н?

Дранда-Варча IT 10° то1 IX?

Цаизш IA 1С? I02 I &

Мендак ?1> ю"4 зс£ id2

По ■ 'йосхедохашшм подземним горизонтам всреднеи количество клеток оульйатредуцирукэдх бактерий колеблется на 1-2 порядка. Продемонстрировано присутствие различных эколого-метаболических групп микроорганизмов, восстанавливавших окиоленныэ соединения сэра, в соответствии с характером обнаруженных органических соединений . • !

Учитывая глуйокоэ погружение водных пластов (более 3000 м) и высокую их текпфатуру (более 100°С), проведены исследования на ваяиваекость зофтаяазяивавчего сульфаты сообщества микроорганизмов при разлкчтшк рекшах, сочетавдих давление в 10, 100, 120 "ctií я тагшаратуру í;0, 120, '150°С. Результаты изучений предотавлены в

тебято

Исследованиями показано, что различные сочетания высоких значений температуры и давления по разному влиявт на метаболизм испытуемого'оообщеотва микроорганизмов. Если при Р 10 атм и Т°С 60 отмечается значительный прирост сероводорода (323,0-336,5 мг/л) относительно Kg, то влияние сочетания Р 103 атм и Т°С 120 оказывает воздействие, подавляющее развитие судьфатредуцируювих бактерий (прирост относительно Kg 99,65 мг/л Н^З ). Резким Т°С 150 и Р 120 атм практически не обеспечивал активности микробного сообще-

Таблица 4. Влияние высоких значений температура (Т°С) и дав«-ления (Р,атн) на развитие сообщества сульфатреду-цирувщих бактерий Колхидской низменности.

Вариант р. атм т°с Исходный Но3 мг/л й Конеч-, ный НоЗ , мг/л НоЗ , мг/л '-исходного инокулята Прирост опытного Н^З » мг/л онооительно такового Кг,

10 80 40,5 37,5 - -

К1 10 80 40,5 39,0 - -

0 10 80 80,5 403,5 .209,5 323,0

0 10 80 80,5 417,0 209,5 336,5

«I 100 120 30,5 23,0 - ' -

100 120 30,5 25 »5 - ' -

0 100 120 81,5 180,5 255,0 99.fi

0 100 120 81 »5 166 »5 255,0 85,0

кг 120 150 29,0 27,5 «к ■ - - *

% 120 150 29,0 29,0 * - .

0 120 150 77,0 89 ,5 ' 240,5 12,5

0 120 150 77,0 . 95,0 240.5 18,0

—- 1 ■ ■ '' ■■ .■ " ' 11 ■ '■ ■ К| - контроль, учитывающий содержание сероводорода в среде;

К^ - контроль, учитывавший сероводород среды*культивирования и инокулята, но без воздействия Т°С и Р.

ства. Однако, высев испытуемой суспензии на контрольную среду (ВП с лактатом или пропионатом).обнаружил развитие клеток.

Из анализа полученных результатов следует, что выделенная микрофлора, восстанавливающая соединения серы, вполне может существовать в экстремальных условиях пластов и возможно является аборигенной.

Для констатации процесса восстановления сульфата в подземных водных пластах Колхиды применен изотопный метод о На 235з 0 разцы воды, взятые для анализа, обозначены как естественные^ц стимулированные пробы. Естественная проба представляет собой сочетание пластовой воды и изотопа серы. Стимулированная проба содержит дополнение к компонентам естественной пробы, как то - органическое, сульфатное, азотное и фосфорное питание для сульфатреду-

пирующих бактерий, восстановители. В качестве органического вещества использовали сочетание лгктата о бутиратои (1:1) с целью обеспечения жизнедеятельности различных эколого-метаболических групп. Данные по интенсивности сульфатредукции представлен« в таблице 5. Согласно величине измеренной скорости восстановления сера в суточных пробах можно заключить, что за счет количества изначально присутствующих в пластовой воде клеток бактерий, сероводород образовался лишь в воде двух скважин (Амаглеба 45 - 0,403 мг 3 Боост./л и Иенджя 24 - 0,179 мг 3 воост#/л). В виду того, что в ряде случаев по стимулированным суточным пробам отмечена жизнедеятельность сульфатредуцирувщих микроорганизмов, можно предположить дифицит факторов, обеспечивающих метаболизм бактерий.

• Констатация процесса биогенного восстановления сульфата за 7 и 30 суток размножившимися клетками микроорганизмов позволяет предположить наличие периода адаптации бактерий к наземным условиям. Увеличение значений стимулированной интенсивности сульфат-редукции по отношению к результатам по естественным пробам на порядок 'тог.о указывает на недостаток питательных компонентов. Низкие же значения суточной интенсивности О - 0,4 мг 3 Е000Т-/л могут объясняться малой концентрацией клеток сульфатредуцирувщих бактерий -ъ воде. -Газопроявления пластовых вод позволяют предположить о -Протекании шах микробиологических процессов, кроме вос-ОФая'ОВЛения серных соединений, возможно более конкурентоспособных в отношении метаболизма органических соединений»

На величину интенсивности ьоастановления сульфата оказывают влияние различные факторы, Методая однофакторного дисперсионного анализа впервые исследовало вдиянк® температуры на интенсивность генерации сероводорода в естественных пробах. С этой целью при- . нята условная единица значений естественной интенсивности, полученная пересчетом всех значений на сутки. Расчетами установлено, что доля общей вариации признака 3 еот , определяемая влиянием фактора Т°С составляет 58,8$. То есть, констатировано значительное положительное влияние температуры на процесс восстановления серы-. Это соответствует общеизвестному положении термодинамики о возрастании скорости процессов, протекающих в живых организмах с йовышением температуры (Громов, Павленко, 1989). Использование иатематичеокого метода способствует более объективной оценке зли-яшм этого фактора.

Таблица 15. Значения интенсивности сульфатредукции rjo ^э^аекии водоноскам горизонтам.

нажина 'Г С . инкубации Интенсивность сульфатредукции, иг 3 восст Стимулирующие факторы

в естественной пробе за экспозицию в стимулироЕаэдЙ пробе за экопозицию

сутки 7 суток 30 суток сутки 7 суток 30 суток

Амаглеба 45 45 0,403 2,695 н.д. 5,740 4*,860 183,866 БЬ;ЗРТ2; Щ Р; орг. в-во V

Амаглеба 71 55 0 1,626 6,336 0 33,85? 129,990 ЗЕЬ ;2оТ2 ; N ; Р; орг. в-во

Вани 6СМ 6570 0 4,032 14,874 0 4,285 164,02 БЬ,- Я» р;°рг. в-во.

Самтре-дия I 6570 0 4,521 н.д. 0 6,911 196,96 ЕЬ| Р!0рг. в-во.

Санапиро 5055 0 н.д. 3,29 4,836 26,31 82,051 ЕЬ; И; Р}0рг, 1-во. V .% - ^

Сухуми Слечкопи) ■8ГГУ 6570 0 3,096 Н.Д. 7,283 43,122 209 ,?Ю ЕЬ| 30"^ Л,- Р? орг. В-во.

Беслети ас 45 0 2,069 Н.Д. 0 36,62 • н.д. орг. в-во, " * »

5ранда-_ Варча 1Т 9095 0 3,981 Н.Д. 0 23,27 Н.Д. « бьшяч орг. в-во.

Дании 1а 8590 0 4,624 16,53 3,203 23,804 24,318 97,739 в-во. Б^ЗОТ2^,-?,- орг.в- ... во.

4евд*и 24 3540 0,179 1,175 4,19 2,389 67,663 102,775 Ей|80"г{:;гр? орг.в- - - - во,

Приведены средние значения нескольких измерений.

Обозначения: н.д. -нет данных; К -соли азота} Р- соли фосфора} орг. в-во - органичеокоэ вецество» 30г2- сульфат.

1 Изучение. воздействия концентрации органического вещества а -пэдзекных водах Колхида показало оледувщсз. Во всех случаях про« анализированных количеств летучих жирных кислот и низших спиртов достаточно для протекания процесса, со охсрсстьо,, установленной за зутки экспозиция» 3 данной варианте- оргзжяшсйог лещеси» ко ли»и-тпрует процесса. Б го дифкцит иояяо полагата- та прейю-а естественной ягаенсивнсотя, экспонируемая. в течений Ш-вухж. €маквикальна1 зкспоз'дцяя) по скгзгзайш; Бани 6СИ-, Саитредуд Д;ргняа-®арча. 1Т.

Наследуя згйнио' концентрация сульфата в воде, ноля предполагать некоторая недостаток этого соединения по пластал Анаглеба 45,71 и Мска-п 24. ■ -

Результата каеспектрекетричеоких анализов состава стабильных кзотопоэ сера сульфатов я сульфидоэ есдн изучаемых подземных годных горизонтов предстазлстш в табгше 6.

Тгбдкаа б.-СразиэяЕЗ состава отабидышя изотопов серы воды изучаедох подземных* горизонтов.

Ьззззииа- О^гехт анализа ,.34 «о/ ° 3 'оо

Амаглеба 45 • сульйид +5,7

Амаглоба 71 сульфа? +18,93

Ванн 6СМ вкрапленность пирита з травертин +5,3

Семтрздия I оульфяд. сульфат* ■»•3,5 +21,68 !

Санапиро 9 . сульфид оульаат +2,0 - +3,0 1 +28,91 |

Су^уми^СЛечко- оульф-и сульфат" | +Ц57 ■ !

Вэсдети ЕС оульэат *4,3 - 4,9 +26.9

Дрэдда-Варча ■ вкрапление пирита в грсэзртшг на издлгэ схяютги сульфат «>5,5 +23,44

Цешш ХА сульфид оуяь5ат +3.1 +20,2

Цондка 24 сульфид сульфат ■»5,0 +20,8

йзотоппкй оостяв сору сульфидов и сульфатов води мзлозых от— лояениЯ Кслхздсхой низменности указывает на участив го фракционировании биологических оульфвдогенных факторов» Сора оугьфизр?) воды облегчена относительно цнгидрктсв по Кавказу в- К7 зонтах < 534 2+16,б°/00) я составляет & З43 4-3 ,0 -г

сульфата воды утяжелена и составляет »16,157 •«- *'28,9°Л)0.

Практически не утяжелей сульфат воды скважин Сухуми (Яечкопи/ сТГУ ( 6+1б,67°/00) и Амаглеба 71 ( ЬЗЦ3 +18,93°/00). Это объяснимо образованием сульфата из окисленного сероводорода (вторичная природа). Биогенный характер фракционирования подтверждается анализом сульфидных пород изучаемой территории с в -18,8

- *Ч'е'0/оо' "

2*. Сульфатредуцирусщие бактерии, выделенные из подземных водных пластов Колхидской низменности.

При изучении состава и физиологических особенностей сульфатрс-дуцирующих микроорганизмов подземных водных горизонтов Колхидской ккзмэннооти были исследованы четыре чистые культуры этих микроорганизмов. ■■ ■ " .

Первая из них - штамм 17. • выделена из геотермальной воды скважины Сухуми (Лечкопи) 8ГТУ (Назина о ооавт., 1988). Вторая культура - штамм 2878 - выделена из проб геотермальной воды оква-жинн Вани 6СМ при посеве на среды ВП и Постгейта "Б" с лактатол. Третий штамм высеян из мезотермальной воды пласта Мендки 24» Четвертый микроорганизм - штамм 2877 - получен инокулированием сред геотермальной водой пласта Самтредия I, Морфолого-физиологически® свойства изученных бактерий представлены в таблице 7.

Таблица 7. Свойства сульфатредуцирущих бактерий псд^Шй"» вод Колхидской низменности.

Признаки

БезиИМоша-•си1иа'£сигпе4 ^оуИ, итамм 17

•БезиНоготаси -Хит п1дг1Г1са пг

штамм 2878

Сези1Гоу1-Ьг1о та1еа-

штамм к24

ВеЕихЮЪао-. 1еПии, ]

штамм 2В77

2

4 •

:Морфоло- ! палочковид- палочковид-П'я клеток ные ные

вибрионы

короткие палочки '

: Размеры, мкм

1,0 - 1,4

3,5 - 5,0

0,3 - 0,5 3,0 - 6,0

0,5 -1,0 3,0 - 5,0

0,8 - 1,0 2,0 - 3,0

!Сульфит-!редуктазы

582

582

десульфови-ридин

н.д.

;мол."

■Цктохрома

49,0

49,3

61,0

50,2

н.д.

I

с

ъ

ъ

- 15 -

Таблица ?.» продолжение.

' I__2 3 4 5

Окисление субстратов до СО? а н2о 4 до ацетата и СО2 до ацетата и СО2 -, до СО? и 1^0 г

Использувт при восста новленки сульфатам

. лактат + +

жирные клелотн С1 " С18 - С1 * с18 :

спирта (одяоаток- ные) ?2 с1 - с4

глицерин * ■ ♦

-диокси-ацетон *• ш ■ + н.д.

ацетон - - - +

| иетанол + ■ -

Для; втанна 17 характерна палочковидная форма клеток. Присутствуют споры, икещиэ центральное расположение. Характерна термо-филия. Бактерия окисляет органические субстраты, включая высшие жирные кислоты, спирты С^ - С,{, лактат, метанол до СХ^ и Н?0. Кроме того, микроорганизм'использует водород и форииат без добавок органического, веиества. В отсутствие'сульфата наблюдалось сбраживание пирувата и фумарата. Акцепторами электронов служили сульфат, сульфит, тиосульфат, но не элементарная сера, кислород, нитрат.

На основании совокупности диагностических признаков - спорообразование, термофилия, М9тилотроф:!Яв окисление органических субстратов до СО2 и Н2О,- присутствгл сульфитредуктазы Р^^, состава оснований о +С в ДНК 49,0 кол,% - этот штамм описан з качестве нового вида Вези1£о1;оиаси1иа кизг.еЬзоуЦ.

Клетки штамма 2878 (термофильный) также представляли сооса палочки с заостренными концами, одиночные или в парах. Споры располагались в центре клеток. Характерно неполное расщепление органических субстратов. Микроорганизм не минерализовал выемке лирные кислоты, использовал спирты С^ - С^, 'Не обладал мети.-.отео-фиеП. Наиболее благоприятной для развития является ервда БП лактатом. В процессе восстановления сульфата микроорганизм

пользовал -Hg + СС^ и форякат в прйсукгевии органических взг.естз (лахтата или дрожкэвого экстракта). Акцепторами электронов слуки-ли сульфат, тиосульфат, но из элементарная сера, кислород,нитрат.

Совокупность характеристических признаков, как термофилы, спороновенке, калочковадная фориа клеток, катаболизм органических субстратов до .свзггга ss GOg, состав О.+С <48,3 aofi,%), сульфит ре дуктаза ашохрем Ъ - типа позволяли иденткф-дшрогать штамм 2878 «а :рнввв известный вид Dosulfotonaculua nigrlfl-o&as.

Штаым М24 (*гззоф;12ькай)- характеризовался внбриоддкше! кдсткй-ш; с одним ткиетркки етутгшем. Осуществлял незолноэ расцспязние органических субстратов. Жирные кислота не использовались, в п~ цессе восстановления -сульфата потреблялись: этанол, глицерин l диоксиацетон..Акцепторами электронов служили: сульфат, тиосульфат, сульфит, но не олементарная сера. 0

Обнаружено присутствие десульфовкридика и цитохроиа й — типа, G+C в ДНК составляет 61,0 яол.й.

Все перечисленные идентификационные лризнаки1"-:шс,ф>,рйа клеток, мезофилия, отсутствие спороноаения, характер метаболизма i; . качественное разнообразие субстратов, десульфовиридин, -цитохром с, а в ДНК позволяют описать его в качестве - ранее извзстиего вида -Desulfovibrio vulgaris.

Штамм 2877 представлен неспорообразувдими,■ кеаодвикныии-короткими палочками с закругленными концами. В начале стацкоиерной стадии развития культуры на средах с бутиратои, .валериатом, метанолом и ацетоном обнаружены включения, содержащие запасные вещества и обычно занимавшие центральное полекгние тв ^клетке-. 'Присутствие ацетона в количестве 3,5 r/л обеспечивало нормальное раз-, витие микроорганизма. Бактерия полностью '.окисляла органические субстраты, метаболизировала высшие■ жирные таслота., метанол, ацетон, глицерин. Помимо сульфата восстанавливала сульфит, тиосульфат, но не элементарную серу. 1

Из всего внделенногэ разнообразия оульфатредуцирусвих микроорганизмов вод Колхидской низменности лишь эта "бактерия обладала уникальной способностью окислять ацетон при повышенной температуре. Сочетание метаболизма'высших жирных кислот, метанола, глицерина и ацетона, а также свойства термофилии и отсутствия спорообразования ранее не было известно в отношении сульфатреду-цируюЕих бактерий."

использование •перечисленных субстратов коррелирует с даннкни па качественному разнообразия присутствует з Колхидских пластах органических соединен:!-!.

Обнарузеннне ототия' вчаша 2877 от известных сульфатредуця-рухя»ах микроорганизмов» заклячавщиеся в палочковидной ферме клеток, спектре ясяользуеиих субстратов, озЕсгяешх полностьи при поваленной температура, позволяли считать этот киероорганиги яра-надлекетш« роду сези1гбЪас4сг1ит.

С целью определения более точного ого таксономического положения необходимо-проведение анализов цитохремов, сульфитредуктаз, осуществление гибридизации ДНК-йНЯ молекул с другими бзсспсровы-ия представителями сулъфатрвдуцзрувдих бактерий.

. Зое выделенные представителя сульфатредуцируюиих кгасрооргани?-иоз развивались в прескых ила солоноватых средах с содержание!! МаС1 от О до 30-50 г/т соответственно минерализации воды пластов.

Такия- образом, в псдзе>зшх водных горизонтах Колхидской низ-кзнности обкарузеяо, значительное гидовое- разнообразие сульфатре-дуцирущих бахтернй, представлявших различные эколого-метаболишение группы. Впервые показана возможность минерализации высших жирных кислот в Енсокотермальных условиях подземных вод Колхиды, непосредственно не приуроченных к залежам полезных ископаемых,

3. Участке сульфатредуцкруюцих бактерий подземных водных горизонтов Колхидской низменности в трансформации вод и водовМещавдах пород (сульфатных и силикатных минералов).

С целью демонстрации роли сульфатрздуцирувщих бактерий э преобразовании сульфатных минералов, входящие в состав водовмесая-щих пород (Церцвадзе, 1984) и пластогнх зед проведены исследования по восстановлению термофильной бактерией Вези1:Го1;отаси1ша киг-netsovii природного гипса (дигидрата) до сероводорода на основе метанола. Последний органический субстрат оироко распространен в проанализированной воде Колхидских пластов. В промышленности метанол и химический гипс (дягидрат) часто являются стхсдш»;; различных технологий.

В оксперименте (опытный вариант) процесс преобразована г.-п-са и питательной среды (по аналогии с природной зодс-Я и чодовме— чаевики породами) Колхидских гооизонтоз, протекал при течлегаг/-ре 60°С по уравнениям реакций в завквииоети от г-Н.

^СНэОН + ЗССаз ->~ ЗСаСНС0з)2 * ЗН2э + ЮИ^О

при рН^:7.

* 3(Са 20^*2^0) —Зй^ + ЗСаС03 + СС^ + 11^0 при рН^7. " ~Т"

Значения рН икеот тенденций к возрастании по мерз развития еульфатредуцируюших бактерий. . . - "

Химическое растворение гипса описывается уравнении : са 20^ «г^о—са*2 * зо^ ♦ гн^о

Результаты исследований продемонстрировали преимущество сулг -фатредуцирующих микроорганизмов г- трансформации среды к гипса, что обусловливало возрастание скорости процесса вдвое по отношение к химическое растворению (Рис. I.).

Рис, I. Сравнение результатов по скорости растворения гипсе.. . К-Сконтроль), химическое растворение гипса; О-Сспыг). бавтерлальное растворение гипса. • Как известно, в-состав всех природных минералов входит крем-

1шй а бвзусикшио- присутствует з водовмзщящих породах. Учитывал свойства. креиккетох соединений при повышении рН увеличивать сваз яадиосность в растворах я, таким образом, изменять структуру силикатных мжгорадов» проверено влияние.на процесс бактерий pesuifo-tor.aculuc kuznstSQvli и Dssuirovibrio vulgaris.

На рисунка 2 предстаэлени дифрактограима исходник, соединенна

Рис. 2. Дкфрактограммы исходная соединений я минералов;

l-аиорфныя кремнезем; 2-диатомит; З-^морфннй алгмосили-кат; г1-^)боидиан; 5-пярофкллит-каолинит; б-иускоэкт; 1 тит; 8-флогопит; 9-верникулкт; IG-*obtmofилгоккг.

Дкйрактсгракка на рисунку 3. демонстрируй!' Щойв-'

вадяие в структуре изученных минералов под сульфат*-

редуцярутхх бактерий в зависимости от oxmk<#S¥k bVpytCtypa bksp-лизяруемых объектов»

Рис; 3. Дифрактограммы продуктов преобразования исследуемых.

образцов:'I-аморфный кремнезем; 2-диатомит; З-Ь'бойдкан; 4-пирофиллит-каолинит; 5-мусковит; 6-биотит; 7-€=-'р ные формы: преобразований флогопита; 12-13-различные образования монтмориллонита,

В результате экспериментов с органическими веществами метанолом и глицерином отмечено широкое распространение новоявленной фазы & / п 0,695 нм. В структуре биотита под влиянием бактерий обнаружено появление рефлексов d/n 0,190; 0,473 и 0,352 ни, определяющих политипию 2MI сдвоенных пакетов слоды. Вермикулит и монтмориллонит претерпевают более глубокие изменения с появлеяи-

ея фаз, свидетельствующих о значяогдьнс:* их разрусении.

Влияние оульфатредуцирувязЯ микрофлоры на структуру онлихат-ныя минералов определяется ввдолением з процессе их жизнедеятельности Н3~ (слабой кислоты), Сй^ ПР!1 'раощеплении органического г;•• цества» возрастанием значения pli и воздействием биокассы бактерий (протонный градиент мембраны клеток).

'Полученкне результаты по преобразованна оульфатредуцирузцкии бактериями силикатных минералов являются новыми я в сочетании с данными по трансфор!®ции гипса на основа органачесхого субстрата • метанола ' но гут 'быть поеззнн в совершенствовании флотационной обработай минералов и руд.

В H В О Д H

Î. Bnepsue обследованы подгомкно воды каловых отлокэнкя Кол» хпдск".я нигг.енкостн о цель» установления, прнреан водорастгоркко-го сероводорода.

Установлено', .что исследованные подзёшшо горизонты яьдяотся зкоскотенаки, благоприятными для развит¡1« биологических процессов оульфатредукция; oim характеризуйся температурой -е-30 ь +IOÛ,Q°a, нинопалнзгциея вод I „8 « 13,7 r/л, pli от 6,3 до 6,3 ,Eh -60 -♦325. кВ» отсутствием растворенного кислорода (хрене пласта Район IA)» наличием оз 0,Б до 75,0 иг/я восстановленных соединений сера, от 19,7 до Р;00 кг/л оульфатоз. Содорканне сероводорода в воде уволетдааотоя при возрастании активности водообмена в пластах.

В воде присутствует летучие янркие хислоты и низшие спирты. Их генезио • связан о присутствен в рвгуяна. полезных ископаемых органического происхождения.

2. Установлено, что з педзеннах водах Колхидской низменности развивается биогенные процессы оульфатредукция. Скорость этих процессов э естественных пробах изолированных вод, определяемая за сутки, варьировала в пределах 0 « 0,4 :>г 3-В00СТ</л. Средняя максимальная скорость оульфатредукция 6,335 - 16,53 мг 3 вэсот /л определена "а месяц. Процессы оульфатредукции, протекающие в пробах подзеикых вод могут бить актявизкроганы добавлением ксмп.тв:'.-;а соединений: восстановителей,. сульфата, минеральных солей и органических субстратов - сочетание лахтата и бутнрата (отимулкроьсп» ■ ине. пробы)', Расчетами обнаружено-, что еуа*фата я органические соединения является факторами-, регулируткми процесс, Интенсивное-'г-

процесса восстановления сульфатов возрастает г.о пластак соответственно уведичен:га «яшсратуры.

Изотопный состав езры сероводорода и сульфатов вод и пород нэловых о?ложен;гй Колхздской низменности указывает на участие биологических процессов в образовании сероводорода. Сера сульфида воды и пород облегчена по сравнении с серой сульфата-воды и ангидрита меловых отложений Кавказа (+16,6°/ 5. Значений 6^3 составляют по сероводороду веды +3,0 - +5,7°/00, по сульфату води +16,57 - +28,9°/00, по сульфидам пород -18,8 - +4,8°/00.

if; Показано, что в водах подземных горизонтов Колхидской низменности широко распространены'иезофилыше и термофильные сообщества лактатспецкфических и используюаих жирные кислоты сульфатре» дуцкруших бактерий, ответственных за разложение присутствующих ъ пластовых водах органических соединений с образованием сероводорода. ' ( Из пластовых вод подземных горизонтов Колхидской низменности выделены k-o штамма сульфатредуцирующих бактерий.

Штамм 17 обладает комплексом уникальных свойств и по морфоло-' го-метаболеческой характеристике отнесен к новому -звду jDesuifoto-taculuB kuzneftovti . Он способен разлагать спирты Cj - Сц, жирные кислоты Cj - Cjg в высокотемпературных условиях..

Штамм 2877 тоже отличается уникальными способностями в высоко-термалькых условиях, не обладая спороношением, метаболизировать спирты Cj - Cjj, жирные кислоты Cj - Cjg, ацетон и глицерин. По морфолого-метаболической характеристике микроорганизм отнесен к роду .Dpsulfobacteriun . Значение содержания G+C оснований в его ДИК, составляющее 50,2 мол.#, вполне удовлетворяет таковым характеристикам других представителей этого рода (40,6 - 59,1 мол.*).

Мезофильный и термофильный штаммы, не метаболизирующие жирные кислоты, согласно своим характеристикам соответственно опя-~аны как .Deaulf о vibrio vulgaris , штамм Н24 и Desulfotoaaoulun n.lgrif leans > штамм 2878 известные ранее.

Таким образом, продемонстрировано по подземным водным рори-Еоятги-!, отмеченным оульфкдогенными процессами, распространение различных физиолого-экологических групп сульфат редуцирующих бактерий.

5. Процесса сульфагредук'нш в пластах способствуют лреобразо-ВсЩ;u на основе качественного разнообразия констатированной орга-кикй минералов вмещавших пород и вод: трансформация гипса, сили**

катких минералов и питательней среди культивирования сузъф&трс-дуциругаих бактзркЯ.

Результата, касающиеся преобразования силикатных минералов сульфатредуцируЕщдаш бактериями являются новыми; Впервые показа» но-, что трансформация гипса, наблюдаемая в лабораторных экспери» ментах с использованием термофильного птамма 9ези1£ойотаси1ис ¡мгпейаоуИ и кетанола, протекала в 2 раза бастрее, чем при спсн®-таянсм растворении гшеа.

При развитии сульфатредуцирувщих бактерий з средах с органическими- веществами метанолом и глицерином изменялась структура силикатных минералов. В зависимости от сложности и заряженности структур часть минералов разруиалаоь до скеианослойкых образований - вермикулит, монтмориллонит, у другой части - мусковит, биотит, флогопит - наблвдавтоя-изменения кристаллической решетки.

Результата этих лабораторных исследований с учетом возможко-сти разрушения силикатных минералов при использовании гипса (отхода промышленных технологий) в качестве сульфатного, а метанола как органического питаний оульфатредуцирующих бактерий, могут быть рекомендованы для совершенствования флотационных процессов при обработке минералов и; руд.

Спиоок работ,, опубликозаиннх по материалам диссертации.

I. Чикояаки В.И.',. Каичавели Л Л., Джкшиашвили Л.Т. Выживаемость зульфатредуиируиих бактерий з условиях различной солености и температуры-среди// Тээ. дохл * Респ. конф."Современнее достижения микробиологи»: м-вирусологии в сельском хозяйстве я промышленности". Тбилиси;— IS86.~C.S9.

2; Какчавели Л.П.-Обиогеннсм форкировзпии сульфидных к да е радов в гидротермальных иоточниках Рионской впадины// Тез. докл. яаучно-техн. семинара "Совервенствоагние технологам, схем обегай, и комплексн.пэрэработхи минерального онрья Грузин". Тбилиси.-1967.-СЛ8.

3; Нанчавали ЛЛ; Сульфатредуцирувщие бактерии высокотеряаль-ных подземных вед Рионской впадины 3 иопользукщиа одноуглередпиз ооединения//Извеотия Академии Наук ГССР.-1987.-Т.1Э,)?*.-С,?56-262'.

Назина Т,^., Иванова А.Е., Какчавели Jl.fl., Розанова 2.П. Новая спорообразувная термофильная метилотрофная сульфатвосст-э-

навливаввая бактерий . Вва»1£о1оиаси1ив КигаагеочИ //Микробиология,- 1983;~Т;57,£5.-0.823-827.

5, Сахсадае Л51Е, Калчасели ЯШ., Чиховакк Е.¡I;, Дкигианв::лк Трансформация с'ульфатоз в карбонаты сульфатредуцируюцими бактериями //Тез; докл5 научно-технич; конф."Разработка и внедреназ технологии »способов сбогаа,, переработан --а кошхдохсного оевоенгх полезных ископ." Ейгу};;г;-19бЗ;-СЛ8.

бКахвадзе Л «И», Канчавели ЦП., Чкковани Е.Й., Дяшиашши Л5Т. Приспособительные возможности сульфатредуциру&яих бактерий //Известия Академии Наук ГССР, серия бкол.-19£а;-Т.14,-СЛ2-15, 11 Канчавели Л.П», Сарвдк Х.Ю;, Турсовиля НЛЧУйепарИЕВИзи РШ. Биогенный сероводород яодзЬшшх пластов Колхады-- достакен!..-' современной геоиикробкология // Тез. докл. кокф. микробиологов закавказских республик "Современные ■ достижения кдаробиологии и биотехнологии", Тбилиси.-19© .-С.40.

6; Канчавели Л.П; Получение биогенного сероводорода для флотации руд//Йкфори! листок о научно~теи:хч. досппкеиии.Тбилиса.-Груз.НШНТЙ£;-1989;-2с. .

9. Канчавели Л Л." Удепевлсняе получении биогенного ссроводо- / рода для флотации руд/Л1нформ. лиаток о передовой производатвен-но-технич. опыте. Тбилиси.-Груз. НШВДТЛ.-19Ш.-2 с.

10; Канчавели Л .П., Вяхирев Н.П. Преобразование глянкстих-ми--неролов сульфатредуцирувщини бактериями// Деп. в Груз. НЙИНТИ 18.12490'. Ш8~Г90*-16 с; -

XI; Канчавели Гг.П. Изотопный состав серы и сероводорода Колхидской низменности // Тез. докл. рэгкон.конф. молодых геологов "Актуальн. вопросы геологии к минералогия Кавказа".-1990* -Тбилиси - Бакуриани*.