Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Перекисное окисление липидов и применение антиоксидантов при акустическом стрессе

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Перекисное окисление липидов и применение антиоксидантов при акустическом стрессе"

.-) ' с^'^ /

■ ► ■■ -к, ;

/ X"-

АКАДШИЯ НАУК АШЯНСКОИ ССР ИНСТИТУТ ШОЮШ

На правах рукописи

МЕЛКОНЯН МАГДАЛИНА МГЕРОВНА

УЖ [577.115:542.943+678.048.004.м] : 534.322.3

ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИЩОВ И ПРИМЕНЕНИЕ АНТИОКСКДАНТСВ ПИ АКУСТИЧЕСКОМ СТРВССЕ

03.00.04 - Биохимия

.Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Ереван - 1988

Работа выполнена в Ереванском государственном медицинском институте Министерства здравоохранения Арм.ССГ к лаборатории биохимии липкдов Института экспериментальной биологии АН Арм. ССР.

Официальные оппоненты: I. доктор биологических наук,

профессор -Е. Б. Бурлакова

2. доктор медицинских наук, профессор'Ф.З.Меерсон

3. доктор биологических наук, профессор Н.А.Асланян

Ведущее учреждение - Ленинградский государственный университет.

Защита состоится "_"_ 1989 г. в_

часов да заседании специализированного совета Д 005.15.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора биологических наук при Институте биохимии АН Арм.СС? (375044, Ереван-41. ул. П.Севака, 5/1).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института биохимии АН Ары.ССР.

Автореферат разослан "_"__ 1989 г.

Ученый секретарь специализированного совета,

докт.биол.наук, профессор ¿,¿¿4сс-Сч, ^ А.А.Симонян

ОНЦЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Изучение патогенетических механизмов стресиа является одной из актуальных проблем современной биохимии. Многовековая история развития живого, в том числе человека, характеризовалась многочисленны™ проявлениями адаптации к различным внешним воздействиям, среда которых шумовой фактор не занимал первостепенного шло пения.

Бурное развитие црсшшленности, энергетики, транспорта, индустриализации сельскохозяйственного производства привели к чрезвычайному усложнению взаимоотношений кивых организмов , ыегду собой и окруаапцей средой, развитии экологии как науки. Среди вреднеЯиих факторов окруяащвй среда чрезвычайно опасным является высокий уровень промышленного, транспортного и битового шуш, резко понижащего сопротивляемость организма к различным заболеваниям (Н.М. Эмануэль, 1984; Н.М.Кргачевская, 1982), в частности нервно-, психическим, п, как замечает доктор Берн О.Кнудсен, основатель Американского акустического общества, шум, как и смог, наступает в роли орудия медленной смерти. По недашо появившимся определениям, шум рассматривается как форма загрязнения окруяанцей среда, не менее опасная и губительная, чем токсические вещества, выбрасываемые в атмосферу и вод-

йспользованные сокращения: АЕП - аскорбатзависшое перекиснов окисление; Ш - глутагаонпероксидаза; ГР - глутатионредуктаза; Г-6-ФД - глвкозо-в-фосфатдэпщрогеназа; КФЛ - кислые фосфоли-пида; Ж - дшгопротеида; ЛПШ - липопрогеида высокой плотности; ЛПШ - лилопротеида низкой плотности; ®Х - лизофосфатидалхо-лин; МЕД - малоиошй диальдегид; МЭ - мембраны эритроцитов; ЛАК - низкочастотные акустические колебания; НЖ - насыщенные кирше кислоты; НЗП -НАДО.Н-зависише пэрекисное окисление ли-швдов; ВМ - нейтральные фосфолипида; ОХ - общий холестерин; ШЖК - полиненасыщенные кирше кислоты; ПОЛ - перекиснов окисление липидов; СОД - сулероксвдцнсиутаза; СХ - свободный холестерин; ос -Т - ос -токоферол; < -ТА - ос-токофоролацетат; М -фосфолипида; ФЛП - фоновые липзадше перекиси; ФС - фосфатидил-серин; ФХ - фосфатидзлхолин; ФЭ - фосфатидилэтанолашш; X - холестерин; ЭХ - эстерифшодюваккый холестерин; ТГ - траглицериды.

ные бассейны/ï.Meckiin, 1969/ и "одним из основных видов загрязнения городской среда, способным приводить к повышенной раздракительностк, потере слуха и дакъ тякелшд физиологическим и психологическим последствиям" (А.М.Фарукй, 1986; Г.Хюб-нер, 1987).

Звуковые колебания, в зависимости от их частоты условно подразделяются на щфразвукоша (нике 20 гц), акустические (от 20 гц до 20 кгц) и ультразвуковое (свыше 20 кгц). Это обусловлено особенностями слухового анализатора человека воспринимающего лишь определенный диапазон частот. За последние года сведения об акустических свойствах биологических материалов несколько обогатились, хотя по-прежнему продолжают оставаться крайне скудными и противоречивыми. По мнению ряда aBTopoa(H.P.Schv»an, 1934), швне ткани являются активныш поглотителями звука, хотя один из наиболее распространенных физических методов клинической диагностики - УЗ эхоскошш, базируется на способности акустических волн к быстрому распространению в биологических тканях (Ю.М.Фукс и соавт., 1987; P.M.Embree е.а.,1984, F .M.Krernkau е.а.,1984, A.Verhoef е.а., 1985).

Сознательно и бессознательно воспринимаемая шумовая нагрузка воздействует на НДС и через нее на регуляторные механизма различных физиологических систем организма. В результате применения многочисленных лечебно-профилактических методов обследования при шумовых воздействиях стали очевидными сниае-ше общей резистентности организма и значительный рост психосоматических нарушений в виде неврозов, гипертонической болезни, потеря слуха различной степени, язвенной болезни жалудка и двенадцатиперстной кишки, сахарного диабета, вроаденных уродств ж патологий, половых нарушений, базедовой болезни, падения иммунологической реактивности (А.М.Волков и соавт., IS63; Б.МЛДамардан, 1974; Л.С.Годин и соавт., 1975; Н.Н.Шаталов, 1976).

Показано, что степень нарушений находится в известной зависимости от интенсивности звука, длительности его воздействия, частотного спектра, функционального состояния ЦНС, индивидуальной, сугубо специфической для данного организма восприимчивости к нему, а также характера трудовой деятельности (В.Н.Коваленко, 1971; Ф.В.Суддиловский и соавт., 1974; А.Г.

Санова, 1975; Г.Н.Моторин и соавт., 1977; Н.Ф.Свадковская, 1978; В.Г.Артамонова, 1979; Л.В.Прокопенко, 1979; Н.И.Карпова и соавт., 1981; Л.Цанева и соавт., 1981; Ф.П.Лахов, 1982; Л.И.Колбенева и соавт., 1982; А.М.Фаруки, IS86; P.Chaucharrl, 1960; V.R.Gavreau, 1968).

Шумовая патология характеризуется самыми различными проявлениями, условно подразделяемыми на изменения специфические, наступающие непосредственно в органе с луза, и неспецифические, проявляющиеся в других органах и системах организма.

В отмеченной связи в литературе ташек подробные сведения, посвшденные описанию изменений, наблюдаемых в отдельных звеньях слухового анализатора (С.Ничков и соавт., 1969; Е.Ц. Андреева-Галашша и соавт., 1972; В.Н.Ерохин и соавт., 1979). При длительном, хроническом воздействии шума на организм, органические изменения со стороны сердечно-сосудистой и нервной системы проявляются значительно раньше, чем в слуховом анализаторе - органа слуха (С.В.Алексеев и ссавт., 1963; Н.К.Бялко и соавт., 1963; Н.Н.Шаталов, 1976; П.Г.Лекарь и соавт., 1979). Отмечается, что многие из изученных показателей мвштгея при относительно низких (около 70 дЕА) уровнях звукового давления (И.А.Карагодина и соавт., 1972), и, возмолно, могут проявляться лишь в ответ на определенные дозы звуковой энергии (Э.Н. Малышев, 1979). Б связи с отмеченным представляет интерес впервые описанная, так называемая, шумовая болезнь, конкретизированная определенный комплексом клинических синдромов, свидетельствующих о зависимости выраженности и направленности наблюдаемых изменений от частотных характеристик, интенсивности звука, природа исследуемой ткани, органа, вида подопытных животных (Е.Ц.Андреева-Галашша и соавт., 1972).

Длительное воздействие высоких уровней шума на работающий организм приводат к серьезным неблагоприятным последствиям, понижению его трудоспособности, сопряженному с возникновением значительного социально-экономического ущерба. Основу профилактических мероприятий, направлениях против патологического влияния шумов на человеческий организм составляет комплекс по гигиеническому норглированию его отрицательных эффектов лишь на слуховой аппарат (Международный стандарт /¿'О R 1999 (1975). Установлено, например, что при 10-летней экспозиции шута в 90 дЕА риск потери слуха составляет 10$, при 85 дЕА - 3%, а безопас-

ним считается уровень 80 дБЛ (Г.А.Суворов и соаБТ., 1984).

Анализ существующих данных позволяет предоолонить о ведущей роли повреждения биомембран в механизме реализации деструктивного действия шума. Однако, в литературе практически нет указаний, касающихся метаболизма лшщцов, связанного со структурными особенностями биомембран, в условиях: шумозого воздействия. Не освещены молекулярю-биохимические механизмы, лека-щае в основе деструктивных процессов, развивающихся в ответ на воздействие шума высоких энергий.

Б связи с существенным возрастанием в современных условиях шумового риска и усложнением характера воздействующего шу-иа, большое значение приобретает изучение особенностей его влияния на биологические системы, в частности на клеточные орган едлы ж главным образом на мембранные образования. В связи с отмоченным,, особого внимания заслуживают последствия шумовых эффектов на структурную организации липидной фаза биомембран, на интенсивность течения процессов перекисного окисления лиш-дов, на качественные к количественные изменения липидвых компонентов крови, состояние аятиожислительной активности лидп-дов различных тканей, а также активность многочисленных мем-брааосвязанных лкпидзависишх ферментов, в частности транспортных АТФаз, игралцих суцеотвеннув роль в регуляции процессов ионного транспорта, проницаемости биомеибран. Такой подход дает основание дан выявления патогенетических механизмов, лева-.щих в основе влияния шума на организм, с последупцей разработ-• кой патогенетически обусловленных мер профилактики. Он может Ъдасобстговать такие выявлению диагностической значимости отдельных биохимических параметров в крови работящих на производствах с высоким уровнем шуш.

Цель и основные задачи исследования. Цель работы заключается в установлении роли процессов перекисного окисления липи-дов я систем антиоксидактной защиты тканей в формировании функ-ционально-ыетаболических расстройств в условиях воздействия акустических колебаний различного частотного спектра, интенсивности, продолжительности и разработке научных основ профилактики антиоксидантами, Для достижения намеченной цели были поставлены »ведущие основные задачи: I) изучить изменения интен-^сивдосгНйЩхэцессов ЛОЛ, сопряженных с ними количественных отклонений эяйв'.енвого ь -Т г сдвиги активности ферментов антгцвди-

- II -

Реализация результатов исследования. По результатам исследования подготовлены, утверждены Министерством здравоохранения Армянской ССР и изданы методические рекомендации "Применение витамина "Е" в профилактике и лечении шумовой болезни" (Ереван, 1987). Эти рекомендации внедрены на некоторых предприятиях Министерства легкой промышленности Армянской ССР. Материалы данного исследования включены в программу курсов биохимии,гигиены труда, патологической физиологии ЕрШ.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 29 работ в журналах, сборниках научных трудов, материалах Международных съездов, конгрессов, симпозиумов, Всесоюзных и республиканских конференций, симпозиумов. На основании результатов исследования изданы методические рекомендации (см. выше); получено 2 удостоверения на рационализаторское предложение.

Апробация работа. Основные положения работы доложены на Ш республиканском съезде санитарных врачей и гигиенистов Армэ-няи, Всесоюзном совещании по биоантиоксидантам (Черноголовка, 1983), Всесоюзном симпозиуме по стрессу, адаптации и функциональным нарушениям (Кишинев, 1984), )Ш Международном конгрессе по биохимии (Амстердам, Нидерланды, 1985), X Меадународном съезде по нейрохимтг (Виза дель Гарда, Италия, 1985), УГ Закавказской конференции патофизиологов (Ереван, 1985), У Всесоюзном съезде по биохимии (Киев, 1986), П Всесоюзной конференции по биоантиоксидантам (Черноголовка, 1986), Научной конференции УЖ МЗ Ары. ССР по проблемам физико-химической биологии и биотехнология в медицине (Ереван, 1984, 1986), Съезде европейских биохимических обществ по нейрохимии (Прага, 1986), У республиканской областной научно-практической школе-семинаре (Ростов-на-Дону, 1987), на УП и IX объеданетюм симпозиумах биохимических обществ ГДР и СССР (Лейпциг, ГДР, 1983 и Йена, ГДР, 1987), XIX Всемирном конгрессе международных обществ по изучению липядов (Токио, Япония, 1988), вяегоднкх научных конференциях Epi.ll (Ереван, 1984, 1985, 1986). Диссертационная работа апробирована на объединенном заседании кафедр общей и бзюорга-ническои хш.иа, патологической физиологии, гигиены труда и био-хкепт ЕрГ-З!, Центральной научно-исследовательской лаборатории Ереванского ПШЗ и лаборатория биохимии липидов Института экспериментальной бкологил АН Арм.ССР.

Объем и оттлукт-та габотп. Ллосергация заполнена на за1.ед-

- 12 -

ре биохимии Ереванского государственного медицинского института г в лаборатории биохимии дишдрв Института экспериментальной биологии АН Аруганской ССР. Она изложена на 381 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методики, 6 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций. Список использованной литературы включает 729 источников, из них 295 отечественных и 434 иностранных автора. Работа иллюстрирована 69 таблицами в 19 рисунками.

МА.ТЗША1 И МЕТОД! ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводились на беспородных белых tqucax обоего шла кассой 150-200 г, содержащихся на обычном пищевом рационе.

При изучении влияния на организм акустических колебаний слышимого диапазона шумовая нагрузка достигалась генератором белого шума, состаковаяннмс аттенюатором, обеспечивалцим переключение уровней с шагом в 10 дБ.

Усиление сигнала осуществлялось 6-ти ваттным усилителем модности, нагрузкой которого являлась акустическая система, мощностью 12 ватт, состоящая из двух головок электродинамического типа (6 ГД-1 ЕРЗ), обеспечивавдих воспроизведение диапазона частот 63-16000 гц, с неравномерностью ¿10 дБ.

Животные подвергались воздействию постоянного широкополосного шума уровнем 91 дЕА и 97 дБА с максимумом звуковой энергии в области средних и шооких частот, в автоматическом решив работы. Длительность действия шума подбиралась с учетом рекомендации iso r 1999 (1975). В соответствии с вышесказан-(Ш при действии шума уровнем 91 дБА животные подразделялись т 6 экспериментальных групп: I - контрольная; животные 2-6 fK¡rnn подвергались действию» шума длительностью соответственно f. 3 ч, 7, 28 и 56 дней ежедневно в течение 8 ч. В случае дей-Угтя шума уровнем 97 дЕА его продолжительность составляла со-'Угготственяо 15 мин, 2 ч, 7, 28 к 56 дней с ежедневной экспо-*т«ей в течение 2 ч.

При изучении влияния низкочастотных акустических колебаний (неслышимого диапазона), уровень их составлял 105 дБ с мак-'игтлыюй энергией в области 16 гц.

Выбор данного круглосуточно действующего ретаа HAK бил

продиктован удобством содержания экспериментальных животных на территории, прилегающей к центральной компрессорной станции Ереванского метрополитена, в соответственно оборудованном помещении. Акустический контроль воздействущих акустических колебаний проводился аппаратурой фирмы "Брюль и Кьер" (Дания) в соответствии с действухвдими нормативно-методическими документами. При этом были использованы: измерительный микрофон 4145, интегрирующий прецизионный шумомер 2218, измерительный усилитель 2607, фильтры 1618. Данный раздел работы является фрагментом исследований, проводим^ лабораторией медико-биологических проблем Республиканского акустического научного центра 1.!инлстерства здравоохранения Ары.ССР. 2ивотные подвергались обследованию через 2, 3, 4, 8, 12 и 16 недель я соответствсгшо отмеченным срокам составили 2, 3, 4, 5, 6и7 группы экспериментальных животных. I группа - контрольная.

Учитывая существование суточной периодичности изменения биохимических показателей, в том числе тканевой антиокислитель-кой активности липидов (А.В.Алесекко а соавт., 1971), все эксперименты и забой животных (декаштация) проводились в определенное время суток. В эксперимент брали гомогенаты, сутгернатан-ты мозговой, печеночной и миокардиальной тканей, изолированных на холоду, плазму крови, отмытые эритроциты в зх мембраны, а также экстракты. Мозг предварительно очищали от сосудистой оболочки, печень и сердце освобождали от остатков крови путем их перфузирования ледяшш 0,154 М раствором хлористого калия. Ткани измельчали и гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком в соотношении со средой выделения (0,2 М фосфатный буфер, рН 7,4) 1:10 ШтЛо.ВагПеу, 1969). Для определения ферментативной активности, гомогенизацию проводили с применением тритона 1-100, в конечной концентрации 0,1$ и использовали постмитохондриальну» надосадочну® жидкость. При исследовании процессов ПОЛ и антиоксидантной системы использовали гомогенаты без обработки тритоном Х-100. Для осаждения ядер к митохондрий гомогенат подвергали повторному центрифугированию при 15000 д в течение 15 мин.

При исследовании профилактического действия <=с -ТА использовали его 0,1% раствор, приготовленный на теин-80, который'

перед введением животным разбавляли стерилизованной дистиллированной бодой до конечной концентрации 0,5% и вводили внутря-брюшикко из расчета I ыг на I кг массы кивотного. Первое введение осуществляли за И ч до действия стрессора, а в последующем процедуру повторяли через день с введением той ке дозы препарата в одно и то же время суток в течение в^его эксперимента. С целью изучения механизма действия синтетического антиоксидан-та ^ -пропанола, его использовали в дозе 5 мг на кг массы. В данной серии экспериментов была обследована дополнительная, 7-ая, гак называемая "интактная" группа аивотных, получавшая jr-пропанол и обследованная через 24 ч после введения препарата.

Эффекты обоих антиоксидантов изучались на самцах в условиях действия широкополосного шума уровнем 91 дЕ&, а в случаях с

использованием оС-ТА изучались также па самках и при действии шума уровнем 97 дЕА. при той кз очередности групп.

Определение показателей лшшдаого обмена, ПОЛ и АОА лиш-дов производили такке в крови 44 работниц (в возрасте 24-60 лег) ткацкого цеха камвольного комбината г.Еревана, работавших в условиях шума уровнем 87-90 дБА. Обследуемые были распределены на 3 группы в зависимости от стана работы: I группа - до 10 лет, П - 10-20 лет, Ш - свыше 20 лет. Для сравнительных целей были исследованы 2 контрольные группы лиц, не связанных с "шумовым" производством, из числа студентов и сотрудников медицинского института: I) до 30 лет и 2) саше 30 лет.

Дача антисксядантов работницам ткацкого цеха производилась через день з рабочие дни в виде капсул oi -ТА в дозе 100 мг. Биохимическое обследование крови после систематического приема ¿¿-ТА производили спустя I год. Определение уровня общих липвдов и ТГ в плазме крови, активности СОД и Ш - в эритроцитах, содеряания фракций X и ЛИ, U-T, интенсивности течения процессов ПОЛ в плазме крови и МЗ производили с использованием современных методов исследования.

Интенсивность индуцированных процессов переокисления ла-пидов в тканях и 1ЛЭ определяли по реакции ВДА. с тиобарбитуро-вой кислотой (Владимиров, Арчаков, 1972), уровень фоновых ла-пидных перекисей в тканях и плазме крови определяли по методу Yoshioke е.а. (1979, 1982), диеновых конъюгатов ненасыщен-

- 15 -

них жирных КИСЛОТ крови - по Piaoer е.а. (196б).

МЭ выделяли ПО LinVber е. а. (1970).

Содержание свободного o¿ -Т определяли флуорометрическим методом Duggan (1959) о использованием спектрофлуорометра •фирмы Hitachi.

Исследование активности ферментов адтирадикалькой защиты клетки проводили спектрофотометрическими методами: СОД - да методу Niahikimi е.а. (1972) , Ш И ГР ПО Pinto,' Bartley (1969), активность Т-6-ФД - по Glock,Mclean (1963), АТФ-азы - по Цильмер, Тарве (1975). Содержание неорганического фосфора определяли методом Fiske, Sutbarow (1925). Общие ляпиды экстрагировали по Folch е.а., (1957). Определение ФЛ проводили по методу Marinetti, stotz (1956), в модификации К.Г.Карагезяна и А.А.Смирнова и соавт. (1961), Определение жирнокислотного состава липидов МЭ проводилось после приготовления метиловых эфиров SK (М.Ю.Прохоровой, 1969) методом газо-хроматографического анализа на аппарате Praotovap.

Содержание НЭЖК в сыворотке крови определяли по метолу М.Ю.Прохоровой и др. (1977), общтх липидов и ТГ с помощью набора реактивов фирмы "La Chema" (ЧССР), спектра ЛП - методом диск-электрофореза на полиакриламидном геле (Н.Л.Асланян, 1976), X во фракциях ЛИ - прециотт анионными методами разделениям (В.Е.ФормазЮК И Соавт., 1986; Assman е.a.,1983:Schriewer е.а.,1934).

Содержание общего X и его фракций в сыворотке крови и фракциях ЛП определяли по методу Н.А.С-еятебовой (1977) с модификациями. Определение суммарной пероксидазной активности в сыворотке крови, проводили по методу, описанному А.А.Покровским (1969). Статистическая обработка результатов проведена методом вариационной статистики с использованием критерия Стьвдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведенных исследований установлено активирование процессов ПОЛ в, исследуешх тканях при кратковременном г. длительном однократном воздействии шутла, сменяющееся нормалиэа-цне:: интенсивности течения процесса перек'сеобразования с интересными, на rar; пзгглд, отклонешшди в интенсивности течения индуцированных ПОЛ от контрольного - урошя (табл.1) з дальнейпеь. На основашгл полученных результатов наии условно определены

фазы активации (I и С ч), адаптации и истощения. В зависимости от сроков эксперимента в различных органах прослеживается определенная специфичность изменений в интенсивности течения процессов индуцированных ферментативного и неферментативного ПОЛ, а также в реакциях формирования фоновых липвдных перекисей.

Аналогичная закономерность прослежена и в динамике уровня диеновых конъюгатов ШШК в крови и ферментативном процессе ПОЛ в МЭ, что свидетельствует об информативности изученных тестов с подтверждением фазовости изменений интенсивности ПОЛ в зависимости от длительности шумовой экспозиции. Примечательно, что индуцированные процессы ПОЛ в МЭ оамок также активируются с удлинением сроков воздействия, однако повышенный выход ляшдаых перекисей в ряде групп наблюдается в более поздние сроки, что вводит определенный элемент специфичности, обусловленный половыми различиями, проявляющимися, в частности, в значительно более внсокой степени интенсивности изученного процесса у самцов. В мозге самок, в отличие от самцов, активирование процессов ПОЛ происходит как в условиях острого стресса, так и при продолжительных воздействиях шума. Отмеченное наш отсутствие интенсификации реакций индуцированных ПОЛ в шокардиальной ткани самок в течение'всего эксперимента в подавляющем большинстве случаев свидетельствует о выраженной защищенности ее у самок. Эти факты позволяют заключить о полозависимой различной степени чувствительности животных к воздействию "шумового" стрессора. Они проявляются менее выраженными изменениями в интенсивности течения процессов ПОЛ у самок, что, по-видимому, можно интерпретировать как проявление ярко выраженной тканевой резистентности, обусловленной высоким потенциалом АОА, обеспечиваемой и участием эстрогенных гормонов, активность ряда представителей которых, как например, 2-оксиэстрадиола и 2-оксиэстрона, по некоторым данным ( Уав! е.а., 1986; Иакаио е.е., 1987 ) Оказывается вше, чем аналогичные свойства ос -т. Последующая нормализация интенсивности течения реакций СЮ липидов свидетельствует о наличии мощных регуляторннх механизмов типа антиоксидантной системы, срабатывапцей в экстремальных условиях существования организма. При этом фактор продолжительности воздействия шума как основного действующего начала в формировании нарушений стационарного уровня процесса нерекисеобразования имеет важное коррелирующее значение. Оно проявляется как в повышенш;, так

Таблица I

Интенсивность течения индудированяых процессов пэрекисного окисления яшшдов (июль ЗДА/мг Салка) и уровень фоновых лшшданх перекисей (ямоль ВДА/г ткана) в тканях белых крыс-самцов в условиях действия шума уровнем 91 дБА. (I), на фоне введения аС-токоферолацетата (II) и ^ -пропавола (И)

Изучавшие ткан» ■ параметр*

8 ч

х 8 ч

56 16 ч

Контроль

(¿18)

П

(1Ь9)

Ш

I П (п=18) Са=Э)

И

(П=Э)

(П=18)

п ч (п=э)

(п=9)

ЙГ о

АЗП Н31 <Ш АЗ!

нш ош

1,6± о.п

(¿8) $

П1

0.2

(4з) 4-§±

0 2Г

(48)

3,0+ 0,23

0,13 13.5±

7.Р;

1.7±

0,2

2.3 .62

0,4» 1?17*

1,2+

0,2^

0,81+ 0,053

№

кР

7,0+ 3,6+ 0,5® ода

5,7+ 5,0+ 5,5+ 0.4В 0.4« 0.4®

0,4* 57,7 -

6,3

0,4®

0,6+ О,Г"

0,7+ О,X®

15,4+

0,2=

3,8+ 0,2"

»

0,1*

5,2+ 0,3В

№

1,3+

0,8+ о;^

23,9+ 1,6

3,1+ 0,4»

0.2СГ

48.6+ 3,6 ~

1,4+

о;г

15,8± 1,0

№

2,1+

2,4+ 0,1»

о9:!«

5,9+ 0.4®

57,7+

2 Л

0,81+ 0.023

0,21+ 0,012

31,6+ 1,6.4,54

0,2

3,9+ 0,4

61.5+ 3,2

АЭ1

нал

•ш

2,0+

(54) 2,7±

0,2

0,73 0,73

5,3+ 6,3+

0,2

о.рт

3,3+ 0,43

0,1*

1,5+ 0.8+ 0,1й 0,1«

6.5+ 0.2®

1,3+ 0,9»

2,5± 0,3

6.5+ 0.5е

п!Т£

1<!х 0.1?

6,0+ 0,2~

2,5*

0,2

1,7+ 0,2®

8,1+ 0,2а

4,2+ 0,5*

6.5+ 0.3й

1,9*

0,2

1,9+ 0,2е

5,1+ 0.5

1.3+ 0.1й

0,1*

104±

Приыачгшае: у 3 скобках указано чпело оштое, а, в, о - достоверность по отношению 1; контрольным груяааы йез прзТщдигпшя. ЗЧ0,С\.\ ?<0,Г1, ?<С,С5.

и падении интенсивности течения процессов ПОЛ в зависимости от сроков воздействия, вида исследуемой ткани и типа используемых моделей индуцированных ПОЛ (табл.1). По-видимому, отмеченные изменения справедливо интерпретировать как следствие структурно-функциональных срывов в ПОЛ-ангяоксидантной системе, изучению особенностей kotojux и были посвящены дальнейшие исследования. С этой точки зрения, в первую очередь, представляло значительный интерес выявление специфики сдвигов уровня об-Т, важнейшего природного антиоксиданга, активного и обязательного структурного компонента биомембран. Результаты экспериментальных исследований подтвердили наше предположение о выраженной глубине нарушений метаболизма, развивающихся под влиянием шума как одного из мощных агентов, приводящих к падению содержания

в исследованных тканях, особенно в случаях с продолжительным воздействием (табл.2) и создащих тем сашм условия, способствующие активации процессов ПОЛ. Однако, следует пошить, что наряду с сс-Т значительный вклад в пополнение и укрепление тканевого антиокислит ельного статуса вносят также ферменты антирадикальной защиты клетки - СОД, Ш и ГР, активность которых в процессе эксперимента претерпевает существенные отклонения. Полученные результаты до изучению эффектов однократного 8-часового воздействия шума в мозге, печени и сердце свидетельствуют об имеющем место резком активировании СОД, являющемся отражением выраженной ададтационно-приспособительной реакции организма, сменяющейся ее стойким подавлением в последующие сроки.эксперимента. СОД, являясь регуляторным ферментом, чутко реагирующим на концентрацию супероксидаых анион-радикалов, микроэлементный состав и уровень сС -Т в тканях, вносит существенную коррекцию во взаимозависимость между собственной активностью и интенсивностью течения реакций АЗП в мозге и сердце. При этом учитывается вероятность возможного снижения активности фермента вслед-, ствие нарушения процесса активации его предшественника, равно как синтеза СОД de novo при продолжительном действии стрессора ( Oberlay е.в., 1987 ). Существенным подтверждением выдвигаемой точки зрения могут служить-данные о выраженных изменениях со стороны белковых компонентов и ДЖ под воздействием продуктов СРО (Владимиров, 1987; Bisby е.а., 1984; Nair,1986; Tappel, 1986 ). При этом немаловажно! значение убыли уровня оС-Т, принимающего невторостепенное участие в контролирования:'

Таблица 2

Содержание оС-токоферола в мозге (нмоль/г ткани), плазме (мкмоль/дл) и мембранах эритроцитов (нмоль/мг белка), в условиях действия шума уровнем 91 дЕА (I), 97 дЕА (Б), и на фоне введения сс-токоферолацетата и у -пропанола

исследуеше ткани

Группы

У°ошта Контрой I - (8 ч) П - (2 ч) I (28x8ч) П (28x2ч) I (56x8ч) П (56x2ч)

(Ц со о

£0

И

I

га о

л+^-ТА

¿ум+ / -про-

панол

(9)

72+2

(30)

ЙГ

о^-ТА

Шум+ I -про-панол

"'ЙЙ1

а

■о н 2 § 0> Рд

-55-22—

Шум (18)

Ш^М+оС-ТА

Шум+ X -про-панол (.9/_

7,8+0,2 (24)

68+3

44+2а 76+3

75+4 90+За

45+2

55+2а

88+За

75+4 61+5

62+5 в 62±2В 76+3

52+5 95+За

иэ

2,3+0,1 2,3+0,1 2,2+0,1в 2,3+0,07 2,0+0,1В 0,8+0,02а

1,9±0,05а 2,7+0Д 3,0+0Да 1,6+0,08а 2,5+0,1° 2,8+Р,07в

1,9+0,06 2,2^3,1° 1,9+0,06

7,6+0,2 8,6+1,5а 6,1+0,5в 6,5+1,0 4,9+0,3 6,1+0,Зв

4,?+0,2а 6,5±0,4С 5,г+о,за 5.4+0,6в 6,8+0,5а 12,0+1,0а

1,8+0,1а 1,3+0,1а 5,5+0,4а

Примечание: в скобках указано число опытов, а, в, с - достоверность по отношению к контролю, соответственно р<0,001, р<.0,01, р<0,05.

реакций биосинтеза IHK (Г.В.Дснчен::о и соавт., FJ85). Отмечаемое наш в условиях шумового воздействия активирование ITI в определенные сроки эксперимента, характеризующиеся значительной интенсификацией процессов ПОЯ на фоне предшествующего вксокого уровня перекисеобразования, носит, по-видимому, индукционный характер и связано с ростом в тканях липидных перекисей и Н-Д-,. Вместе с тем Ш, в отличие от СОД и ГР, слабо подвержена окислительной деструкции, вследствие чего зависимость между уровнем активности фермента и интенсивностью течения процессов перекчсе-образования оказывается наиболее отчетливой во всех исследованных группах. В то же время в мозге активность ГР, чувствительной к воздействию окислителей в связи с наличием SH групп в ее активном центре оказывается подавленной почти во все исследуемые сроки, тогда как в остром периоде стресса ,в остальных органах, на фоке максимальной интенсификации реакций АЗП, отмечается двукратный рост активности фермента. При этом примечательна высокая способность ГР, поставляющей значительные количества восстановленного глутатиона даже при наличии почти 25% ингибирования ее активности в печени и 805? - в эритроцитах ( Frischer, 1987). Однако, высокая степень подавления активности фермента к.концу эксперимента, как это, например, наблюдается в сердце, по всей вероятности, может слутаггь адекватным показателем истощения фермента.

По нашим данным, активность Г-6-ФД оказывается подавленной во все сроки эксперимента, особенно выракенно в печени, затем в мозге, в то время как в сердце отмечается ее рост, претерпевающий обратное развитие лишь к концу эксперимента.

По-видимому, наблюдаемый в ряде органов низкий уровень перекисеобразования на фоне низкого уровня et-Т и активности ферментов антирадакальной защиты, обусловлен реконструкцией мембранных структур, направленной на снижение их окисляемости в соответствии, с лимитированным состоянием тканевых запасов и. -Т, с форлированн-ем системного структурного "следа" (Ф.З.Ыеерсон, М.Г.Пшенникова, I9S8) -структурного базиса долговременной адаптации.

В связи с вышеизложенным нами была предпринята серия исследований по изучению качественного и количественного состава 1>Д МЭ в условиях воздействия шума. Результаты проведенных наблюдений свидетельствуют об имеющей место у кивотшх обоего пола в те-

чение всего эксперимента выраженной тенденции к увеличению суы-;.л Ш. Примечательно, что отмеченные сдвиги характеризуются дошгппрованпем уровня 1Ы над содержанием КМ, что особенно проявляется в о строг: периоде стресса (табл.3). Увеличение содержания. Л1>Х в ¡.¡0, наблюдаемое во Есех экспериментальных группах, являющееся неблагоприятным признаком в связи с их выраженным мепбранолитпческш, меибранотоксическим действием, обусловлено, по-видимому, расстройствами в соответствующих ферментативных системах ( тьпахга е.в., 19Й5 ) и, в частности, фосфолипаз А2, способных к избирательному активированию продуктами ПОЛ. Поэтому обогащение .МЭ разновидностями ЮЛ (ФХ и СМ), относящихся к трудное кяслггеицк XI, свидетельствует о реализации адаптационного механизма, направленного на снижение способности к окислению мембранных компонентов. Об этом говорят значительные изменения кир— но кислотного состава лнпидов биомембран, нарастающие в ходе эксперимента и характеризующиеся заметным увеличением содержания 1ЕК п снижением количества ШШК (табл.3) при соответствующе:: корреляции со сдвигами в составе М. Аналогичной ролью, по-впдипому, наделен и X, являющийся одним из главных стабилизаторов бпомембран, ответственны:.: за обеспечение плотности упаковки структурных компонентов, играющей немаловажную роль в регуляции процессов ПОЛ. 3 условиях нашего эксперимента на фоне превалирования роста содержания <Ш над количеством X в целом отмечается снижение ¡С Х/-2Л как одного из показателей нарушения липед-леяшд-шх взаимодействий. Развитие выраженных структурных изменений, дефицит в содержании ос-Т, высокий уровень лтщцных перекисей, нарушающих, как уже отмечалось, нормальное течение метаболических процессов в различных биологических структурах (Ю.П.Козлов, 1977), и, по все;: вероятности ряд других сопутствующих факторов ведут к серьезншя ^кзико-зешичеекш расстройствам клеточных мембран, проявляющимся, в частности, в нарушении их стабильности и как следствие - проницаемости. Одним из путей повреждения мембран гложет быть перемещение ЗС и 03 пз внутреннего слоя бпелоя з нарупшП, сопровождавшееся нарушением стационарной ^стгл.гетр::::. Такой сдвиг расценивается ::з.к кра'Лне неблаго-

Таблица 3

Качественные и количественные изменения в составе липидов мембран эритроцитов в условиях действия шума (I) и на фоне введения «С -токоферолацетата (П)

Изучаемые Уело- _

параметр! вия ^ 2

ошта (контроль) (I ч)

Группы

3

(8 4)

4 (7x8 ч) 5 4 (28x8 ч) 6 (56x8 ч)

300+12а 280+16а 307+9а

230+10вв 89+5^' 137+14а'

1650у46а 2466^55а 2681+29а

1007^46а' 838^9°®' 891±21са'

ЗД+0Да 3,2+0 Да 2,8+0,1®

3,4+0 Да 3,8+0,2ас' 3,2+0,2а

1,3+0,2 1,1+0,2 1,5+0,3

0,97^0,08 0,8+0 Д 0,92+0,08

2Ш^а 221+6а 181+14

207+12а 133+5аа' 44,3+1,8аа'

Лизофосфа- I

ИРч пидов (7) 1Ё.

В о К КФЛ/НФЛ

йй (?)

! я5 р.

Коэффициент "насыщенности ЖК (6)

холестерин (нмоль/мг белка) (9)

П

I

II I П I

п

I

п

254^7 164-11 .

(7) 258+10

2118+70а

987+24

216+9

251+31° 1551+21а

(7)

1730+47ав 1Ю4+32са

3,9+0,6

2,32+0,05

(77 2,61+0,04

1.7+0,2° 1.0+0,1 " с (67 1,1+0,1°

2,8+0Дв 3,7+0, Зас' 1,1+0,3 1,3+0,1

175+6

(Ш)

222+14

135+5

а а'

173+7 159+4;

а

м

N

Примечание: В скобках указано число опытов, а, в, с - достоверность по отношению к контролю, а', с'- по отношению к группам без применения профилактики, соответственно, р<0,001, р<0,001, р<0,05.

приятный, поскольку ФЭ.согласно существующим представлениям, способны инициировать коагуляцию крови, а также способствовать агрегации элементов крови с эндотелиальными клетками. Не исключена также роль убыли уровет спактрина в механизме нарушения фосфолипидной асимметрии в МЭ человека, наступающего, например, при обработке эритроцитов МДА. или ^Оо, при которой доказано также значительное снижение обмена плазмы крови с эритроцитами (lain, shohet, 1982 ). В формировании общей деструкции и дестабилизации биомембран определенное участие принимают и поперечные сшивки по типу Ши^фовых оснований меаду молекулами ФС, ФЭ, а также <Ю иФЭ ( lain, Hochsteiri, 1980; lain, 1984 ). Особую значимость приобретает полученные нами; данные по ингибированив в условиях острого стресса и длительного хронического эксперимента активности АТФаз, чутко реагирующих на изменения липидного окружения, микровязкость мембран и интенсивность течения в них процессов ПОЛ (Е.Б.Бурлакова, 1982; А.А.Болдырев, 1985). Падение активности Na+ К^-АТФазы в различных тканях и клеточных органоидах чревато развитием глубоких отклонений в процессах ионного транспорта, возбудимости (передачи нервного импульса), регуляции интенсивности и направленности клеточного метаболизма, уровня внеклеточной жидкости. Наблюдается наиболее высокая чувствительность в условиях акустического стресса уабаин-ингибируемого компонента Ла+ К+-АТФазы. Наряду с много-численными факторами, влияющими на активность АТФаз, важное значение приобретает модулирующее влияние на активность ¡^-зависимой АТБазЫ ЛПОКП плазмы, в частности ЭХ, входящего в их состав. Примечательно, что при длительных кумовых экспозициях, несмотря на незначительные изменения в уровне ОХ, отмечается выраженный рост Х-ЛПНП и снижение Х-Ж1БП, что является показателем нарушения нормального метаболизма ЛП, Известно, что подобные сдвиги во фракциях ЛП являются характерными при сердечно-сосудистых патологиях, главным образом атеросклерозе (А.Н.Климов, Н.Г.Никульчева, 1980; А.Н.Климов, 1985; steinbrecher е.а., 1984).характеризующемся усилением процессов перекисеобразования с модификацией ЛП и извращением их рецепторянх свойств (В.Е.Формазюк и соавт., 1983; 1985, 1986; А.Н.Климов и соавт., 1985; Т.И.Тор-ховская и соавт., 1986). Вышеизложенное в сочетании с расстройствами утилизации ЛПНП (Goldstein е.а., 19В5), завершается

усиленным захватом и деградацией модифицированных комплексов типа ЫДА-ЛПВП ( Кигакат! е.п., 1986)нарушением их функциональной активности, подавлением способности захватывать и транспортировать X из мембран. Именно этим, на наш взгляд, объясняется снижение уровня Х-ЛПВП, при относительном сохранении содержания ШЕЛ.

Таким образом, в механизме описанных выше морфологических, биохимических, физиологических и клинических нарушений, развивающихся под действием шума, одно из главных мест занимает уменьшение уровня -Т - основного липидного антиоксиданта и нарушение интенсивности течения тканевых реакций переокисления лшшдов. Все отмеченное, несомненно, свидетельствует о необходимости применения антиоксидантов в условиях шумового воздействия. В настоящее время нашли свое широкое внедрение в клиническую практику природные антиоксиданта, из которых наиболее эффективным является ос-т, обладающий широким спектром действия.

Исходя из вышеизложенного, с целью предотвращения возникновения нарушений, выявляемых в различных звеньях метаболизма под действием шума, в определенных сериях наших исследований был применен <=С -ТА. На этом фоне прежде всего можно отметить ярко выраженную тенденцию к упорядочению уровня эндогенного оС-Т в исследованных тканях у ряда групп подопытных животных обоего пола. Поддержание уровня ос -Т в сердце, печени и плазме крови у определенной категории животных в точение первых четырех недель в пределах контрольных величин сочетается с незначительным снижением его в мозге (табл.2), что находится в четкой корреляции с содержанием в нем ФЛП, нейтрализация кото-£ых сопряжена с затратами ос -Т. Отмечаемое нами обогащение тканей о(_-Т через 8 недель действия шума, характеризуется активированием индуцированных процессов ПОЛ, что, по-Еидимому, согласно современным представлениям (Е.Б.Бурлакова и соавт., 1982, 1985, 1986), связывается с ростом ПНЕК с повышением АОЛ тканей.

Придавая важное значение роли половых различий в формировании описанных нарушений в условиях шумового стресса, следует обратить внимание на некоторые обстоятельства. Так, например, у самцов, в отличие от самок, использованная доза о(.-ТЛ не во всех тканях способствует его накоплению и, следователь-

-.о, сопровождается проявлением отрицательной корреляции мевду интенсивностью течения индуцированных процессов ПОЛ и динамикой уровня ос-Т в тканях. Тем не менее повышенная способность к переокислению, обнаруживаемая при продолжительном действии стрессора на фоне высокого уровня оС-Т в тканях, как это наиболее отчетливо прослеживается в миокардаальной ткани животных обоего пола (табл.I), является, по-видимому, результатом обогащения этих тканей ПНЕ, основными субстратами ПОЛ. Наблюдаемое в условиях введения <*-ТА повышение интенсивности течения индуцированных процессов ПОЛ тлеет свои отличительные особенности. Они отчетливо проявляется при сравнении характера процесса перекисеобразования, протекающего с одной стороны, на фоне нормального или высокого уровня о(.-Т в тканях, с другой - в условиях чувствительного спада АОА липидов. Проявлению диаметрально противоположных закономерностей способствует сохранение и рост уровня ос -Т, ведущие к изменению кирнокислот-ного состава липидов, повышению их ненасыщенности, а, следовательно, и созданию предпосылок к высокой окисляемостл мембранных липидов (Е.Б.Бурлакова и соавт., 1982). Поэтому, руководствуясь лишь совокупностью данных по состоянию интенсивности течения процессов ПОЛ в сочетании с уровнем тканевых антиокпс-лителышх систем можно судить о диагностической ценности этих тестов. Одновременное использование метода определения ФЛП, в этом смысла можно рассматривать как оценочный тест окислительной активности тканей и нормализующего действия -ТА. Особенно информативным оказывается этот показатель в отношении мозга к плазмы крови, наиболее богатых липидами (табл.I). В правильной оценке систем, включавшихся в общий механизм регуляция интенсивности ПОЛ, необходимо учитывать немаловажное участие ферментов антирадикальной защиты клетки: СОД, ГО, ГР и Г-6-ФД. Сдвиги, отмечаемые в их активности в условиях профилактического применения <* -ТА, свидетельствуют о выраженном параллельно протекающем активировании СОД в полном соответствии' с ростом содержаний оС -1 в тканях крыс-самок и ого предотвращении у самцов в условиях острого стресса, несмотря на увеличение в тканях содержания -Т. Эти факты являются прямым подтверждением существующего мнения о взаимодополняющем и в то же время конкурентном механизме действия с*. -Т и СОД. Примечательно выраженное снижение активности ТП в тканях самцов по сравнению с грул-

паш стрессированных животных, не получавших ос -ТА. Исходя из характера регуляции активности ГП, чутко реагирующей на изменения концентрации соответствующих субстратов-гидроперекисей ЗСК и Н?02 и независимой от концентрации, и. -Т, отмеченное подавление активности ГП является следствием снижения содержания субстратов для фермента. Таким образом, не лишено основания предположение, что попытка регуляции на более ранних этапах зарождения активных форм кислорода, безусловно, влечет за собой адекватное изменение активности ферментов - участников антирадикальной защиты клетки, действующих на более поздних стадиях развития процесса. Динамика сдвигов активности ГР, изменения которой адекватны количеству присутствующих в среде окислителей и окисленного глутатиона, является показателем регуляторных изменений, наиболее выраженно проявляющихся в мозговой ткани. При этом во 2-5 группах стрессированных животных, получавших сС -ТА отмечается рост активности ГР, в срав-.нении с экспериментальными группами без профилактики, что с более высокой амплитудой изменений прослеживается в тканях у самок. Наибольшая стабильность фермента прослеживается в печени жееотяых обоего пола и это на фоне высокого уровня ос -Т может быть обусловлено поддержанием стационарного уровня соотношений между обн и СБ-БС. Вместе с зтим изменения в активности Г-6-ФД свидетельствуют о регуляторном влиянии на нее профилактического введения о<.-ТА. Это особенно отчетливо проявляется в мозге и печени в течение первых 4-х недель, а в сердце - на протяжении всего эксперимента, сопровождающегося постоянным введением Ы. -ТА.

Профилактичэское введение о(.-ТА способствует существенному упорядочению суммы ФЛ в ИЗ у самцов, сокращению процентных расхождений в содержании как индивидуальных, так и сумм ФЛ с контролем (табл.3), убыли количества®)! при продолжительном введении <-ТА, что расценивается как явление положительное и протекающее параллельно со снижением интенсивности течения СРО липэдов л восстановления нормальных уровней К оС-Т/ФЛ. Следует отметить, что несмотря на положительные сдвиги, разыгрывающиеся на фоне введения ос -ТА, тем не менее не удается достичь в МЭ полного восстановления качественного и количественного состава М, особенно у самок. При этом отмечающийся у последних значительный рост содержания Т'Л может бить объяснен закономерным

изменением состава структурных компонентов, приводящим к восстановлению соотношений между ы_ -Т, X и 1>Л и детерминирующим микровязкость липидного бислоя, ее функциональную активность. Более того, изменения, отмечаемые в активности л&+ К+-АТФазы в МЭ самок, проявляющиеся значительным повышением ее, подтверждают их физиологичность, обусловленную, по-видашому, не доминированием абсолютных величин содержания индивидуальных ФЛ, иных структурных компонентов, а поддержанием существующей в норме пропорциональности в количественных соотношениях отдельных представителей, отличавшихся своими структурными и функциональными особенностями, как это видно из сдвигов К НФЛ/КФЛ. О выраженном благоприятном воздействии »С -ТА свидетельствуют также закономерности в сдвигах состава ЮС липидов МЭ. Они характеризуются значительным снижением коэффициента насыщенности в сравнении с группами животных, не получавших -ТА (табл.3).

Нами выявлены значительные отклонения в содержании X и его фракций в МЭ крыс обоего пола под действием экзогенного с£-ТА. При 8 недельном озвучивании животных отмечается заметное снижение К Х/белок, коррелирующего в МЭ с уровнем На этом фоне, уровень X плазма у самок оказывается пониженным во все сроки эксперимента, а у самцов фазовые изменения во 2-5 группах к концу эксперимента сменяются двукратным уменьшением содержания X в плазме с соответствующим весьма важным, на наш взгляд, перераспределением во фракциях ЛП. Нормализующее влияние использованного антиоксиданта, проявляющееся у представителей обоего пола, выражается в снижении уровня Х-ЛПНП как по отношению к соответствующей экспериментальной группе, не принимавшей сс -ТА, так и по отношению к контрольной. Происходящий при этом рост содержания Х-ЛПШ по отношению вышеуказанных групп, у самок тем не менее не приводит к восстановлению контрольных величин. Вышеописанное свидетельствует о чувствительном регуляторном влиянии с^-ТА при его продолжительном применении на метаболизм X как в плазме крови, так и МЭ; эти сдвиги коррелируют с уровнем ос-Т в исследованных биологических системах. Аналогичные сдвиги на фоне применения <х. -ТА отмечаются также в уровне общих липидов и ТГ.

Полученный наш фактический материал подтверждает имеющиеся в литературе указания о значении половых различий в формировании специфических отклонений в метаболизме липидов, что, по-

видимому, является одним из многочисленных факторов, имеющих важное значение в предопределении более высоких адаптационных возможностей, например, у самок в экстремальных условиях их существования. Не исключено, что яменно по этой причине, учитывавшей существование неоднородной у мужчин и женщин расположенности к иыеыической болезни сердца, риску развития инфаркта миокарда (у первых значительно впше), в последнее время эстрогены получили широкое применение в качестве препаратов, предупреждавших развитие инфаркта миокарда. Однако, данные многочисленных исследований, подчас противоречивые, свидетельствуют о том, что наряду с гипохолвстериаеиическпм эффектом, развивающимся на фоне введений эстрогенов, имеет место развитие гшер-триглицеридемии, с соответствующими нарушениями и в липидаом составе всех классов ЛП (М.Г.Творогова, В.Н.Титов, 1986; В.Н. Титов, И.Ф.Чернядьева, 1987). В связи с этим важное значение приобретают эффекта экзогенного антиоксиданта -ТА, характеризующиеся и развитием гшюлшшдешш.

В настоящее время в связи с установлением приоритетной роли антиоксидантов в регуляции целого ряда метаболических процессов, важное значение с практической точки зрения приобретает синтез и подбор новнх препаратов, наделенных антиокси-дантными свойствами, а также изучение их эффективности при различных патологических состояниях организма.

С отмеченной целью наш были предприняты исследования по изучению влияния синтетического антиоксиданта -пропанола на ряд показателей клеточного метаболизма как интактных животных, так и переживающих состояние'шумового воздействия. В доступной нам литературе не ^введены данные относительно биологической роли данного соединения. Полученный нами фактически;! материал свидетельствует в целом о значительном обогащении органов и тканей -Т, наиболее выраженном в сердце во все сроки изучения экспериментального шумового стресса (табл.С). Обращает на себя внимание факт резкого снижения уровня «--Т в МЭ у представителей 5-й экспериментальной группа при наличии резкого возрастания уровня °с-Т в остальных исследуешх органах и плазме крови. Этот факт ш склонны объяснить активным вовлечением I -прополола в реакции переокисленип, способствующим тем сашц сохранению уровня эндогенного х-7 в тканях в пределах, близких к биологическим с встраиванием его в лилидный

бислой, в частности, МО. Конкретизация выдвигаемых суждений в деталях нуждается в более обстоятельном экспериментальном подтверждении.

Введение у -пропа:юла вызывает вырагенное снижение уровня ■ЛИ и подавление интенсивности индуцированных процессов ПОЛ в исследованных тканях почти во все сроки эксперимента. Эти сдвиги коррелируют с уровнем ¿-Т в них, за исключением плазмы крови, где на фоне высокого содержания оС -Т, содержание ФЛП значительно превышает контрольные показатели (табл.1). Не исключено, что малая эффективность ^-пропанола в биологических жидкостях обусловлена отсутствием его эффективного мембраностабилизирую-щего действия, в основе которого, по-видимому, лежит и феномен связывания ^ -пропанола с лшшдаым бислоем мембран.

Изучение активности ферментов в условиях применения ^-пропанола позволяет выявить сохранение некоторых общих закономерностей их функционирования. Так, например, активность Ш оказывается подавленной при низких уровнях перекясеобразования и растет с увеличением интенсивности течения процессов ПОЛ, проявляя известную зависимость от уровня субстратов, стимулируицих его действие. Наш установлена обратная коррелятивная связь между активностью СОД и уровнем об -Т, наиболее отчетливо проявлявшаяся в эритроцитах. Во всех изученных тканях интактных животных, а также в мозговой и миокардаальной тканях почти всех групп экспериментальных животных отмечается значительное подавление активности ГР с проявлением обратной зависимости от уровня оС-Т. Полученные данные позволяют заключить о существовании отчетливой зависимости степени выраженности изменений ферментной активности преаде всего от вида исследуемой ткани, природа фермента, длительности действия шумового фактора. О возможном мембра-нотропном действии у -пропанола свидетельствуют выраженные изменения в МЭ, характеризующиеся резкими качественными и количественными изменениями в них состава как индивидуальных, так и суммарных ФЛ, нарастапцие в ходе эксперимента.

Под воздействием ^ -пропанола имеет место развитие гипо-холестеринемии у интактных и острострессированных животных (2 и 3 группы), а также уменьшение уровня X в МЭ интактных животных с тенденцией к нормализации при продолжительном воздействии стрессора. Интересно отметить, что несмотря на значи-

тельное снижение уровня X в Ш в определенные сроки эксперимента и резкое подавление процессов ПОЛ, активность АТФаз, в особенности Ка4" К+-евой, значительно убы^ет, следовательно, для конкретизации значимости отдельных факторов в механизме регуляции ферментной активности, на первое место, по всей вероятности, следует выдвигать те, которые способны внести существенный коррективы в состояние микровязкости липидной компоненты, в статус лкпид-липидных взаимодействий. В целом следует отметить значительный по выраженности суммарный эффект, проявляющийся снижением окислительной активности мозга, печени, сердца и МЭ. По-видимому, формирование такого ответа, является результатом многогранности механизма действия у-пропанола, который, являясь, с одной стороны, "ловушкой" для радикалов, призван стабилизировать уровень оС-Т в тканях, поддерживая его в пределах величин, близких . к нормальным, с другой, осуществляет свое воздействие как непосредственно, так и опосредованно, путем изменения уровня эндогенных антиоксидантов, активности ферментов антирадикальной защиты клетки, структурной организации лилидяых компонентов биомембран.

В настоящее время обращается серьезное внимание на соблюдение нормативных цензов в отношении уровня воздействупцего шума и длительности его экспозиции, изложенных в рекомендации ]S0 Я 1999 (Гигиенические критерии состояния окружающей среды, 1983; 130,1975с; Martin, 1976 ). Согласно последней, при предполагаемом равном эффекте воздействия, снижение уровня шума на 3 дБА позволяет увеличить продолжительность его воздействия на живые организмы вдвое. Анализ результатов по изучению действия шума уровнем 97 дБА с соответствующим 4-х кратным сокращением длительности экспозиции, позволил придти, к интересным заключениям. Шумы уровнем 91 и 97 дЕА в мозгу, печени, сердце и ЫЭ белых крыс-самцов вызывают выраженные сдвиги в интенсивности течения ферментативного и неферментативного ПОЛ, уровне oi-T (табл.2), активности ферментов антирадикальной защиты (СОД, Ш, ГР). Однако при действии путла более низкого уровня и соответственно подобранной длительности ежедневной экспозиции, развитие равнозначных изменений происходит значительно быстрее, что подчеркивает доминирующее значение фактора времени в изучении конечного эффекта и позволяет нам сделать заключение об отсутствии абсолютного равенства наблюдаемых из-

- 31 -

метений в изученных тканях организма, при подборе уровней и длительности воздействия шума, согласно "правилам затраты энергии". Более высокая эффективность влияния экзогенного об-ТА на метаболизм обнаруживается в тканях животных, подвергающихся действию шума уровнем 97 дБА, но в сравнительно лимитированные промежутки времени.

Современное состояние проблемы включает в себя и другой чрезвычайно важный аспект - зависимость характера изменений, их интенсивности, от частотного спектра воздействующего шума. В этом плане значительный интерес представляет влияние акустических колебаний неслышимого, экстрааурального диапазона, HAK.

Последующие исследования, направленные на изучение особенностей количественных сдвигов в тканях животных, круглосуточно пребывающих-в условиях воздействия HAK, выявили ряд важных закономерностей. Среда них обращает на себя внимание обогащение органов и тканей ос -Т в течение первых 2-3 недель пребывания в условиях действия HAK (рис.1), резкое подавление процессов ПОЛ, чем, возможно, и обусловлено благоприятное, кратковременное дозированное действие HAK, не,нашедшее, однако, широкого .применения. Вместе с тем, продолжительное воздействие HAK приводит к развитию недостаточности оС -Т в мозге и печени, при одновременном наличии высокой способности к дерекисеобра-зованию, прогрессирующему подавлению активности ^ОД, ГР и Г-6-ФД при одновременном росте активности ГП на фоне интенсификации НЗП и убыли тканевого уровня °с -Т. Все отмеченное является свидетельством формирования,развития и генерализации диспропорции в системе П01-А0А липидов.

Выявленные сдвиги представляют существенный интерес в плане установления взаимосвязи между отмеченными изменениями в тканях и сдвигами, происходящими в крови.

Значительный интерес представляют данные по выраженному увеличению содержания суммы ФЛ МЭ за счет качественных и количественных изменений в составе индивидуальных ФЛ, нарастающих с удлинением сроков эксперимента и сопровогдающихся изменением ФЛ-ФЛ соотношений, играющих решающую роль в обеспечении жизненно важных физиологических функций организма (К.Г.Карагезян, 1968; 1972; 1979; Е.М.Крепс, 1981).

Обращает на себя внимание отсутствие значительных изменений в уровне ОХ плазмы крови в течение первых 4-х недель пребы-

йю.1. Уровень фоновых липвдных перекисей (а), -токоферола (б), интенсивность АШ Св) и НЭП (г) в мозге (-), печени (-х-)

и сердце С---) белых кшс-самцов в условиях действия

шума уровнем 91 дЬА.

вания животных в условиях действия HUÍ и выракенная тенденция к снижению его в МЭ, где этот эффект проявляется в более поздние сроки. Однако, удлинение последних сопровождается увеличением содержания ОХ в плазме крови и тенденцией к восстановлению его уровня до контрольного в МЭ. 3 обоих случаях направленность изменений обусловлена сдвигами в.уровне ЭХ, что определяет важную роль Х-метабэлизирующих ферментных систем в условиях эксперимента. Особый интерес представляет снижение количества ОХ на фоне роста ut-T в МЭ, что сопровождается значительными колебания?,от величины ОХ/«:. -Т. Отмеченный факт с точки зрения мембраностабилизирупдей функции X, по-видимому, носит взаимо-заменякщий характер. Таким образом, приведенные результаты свидетельствуют в целом об имеющих место структурных превращениях, направленных на поддержание микровязвости мембранных липидов в пределах нормальных состояний. Однако, данные исследования говорят о значительном подавлении активности АТФаз МЭ во все сроки эксперимента, за исключением 8 недельного воздействия, ■ который, на наш взгляд, может считаться критическим с точки зрения структурных перестроек.При этом содержание ОХ иос-Т в МЭ достигая наинизшего уровня, сопровождается резким подъемом активности АТФаз и обусловливающего этот эффект уабаин-ингаби-руемого компонента АТФаз, чрезвычайно чувствительного к изменению жвдкостности мембран. При длительных сроках эксперимента в МЭ отмечается возрастание содержания как ОХ, так и o¿-T, с выраженным сопутствущим подавлением активности АТФаз. Тем не менее, отмеченные выше структурные изменения в целом значительно тормозят течение.гемолитических процессов (снижается повреждаемость и проницаемость мембран эритроцитов), что проявляется снижением активности Г-6-ФД ж суммарной пероксидазной активности плазмы под действием КАК на протяжении более, чем 3-х недель.

Результаты проведенных исследований позволяют заключить, что в условиях влияния НАК выявление изменений в интенсивности течения процессов ПОЛ, уровне <х. -Т, фракциях X в плазме крови и МЭ имеет важное значение для выяснения характера метаболических нарушений и их специфичности, развивающихся в органах и тканях, особенно в сердце, определения диагностической значимости сдвигов показателей липидаого обмена, ПОЛ и антиоксидант-ной системы. Важность поставленной задачи по ранней диагностике

и прогнозирования развития шумовой болезни имеют первостепенное значение.

В плазме крови и МЭ работниц тканкого цеха, характеризующегося высоким уровнем шума, нами установлены существенные изменения показателей липидного обмена, ПОЛ и антиоксидантной системы.

Характер отмеченных изменений оказывается наиболее демонстративным у работниц со станем работы до 10 и свыше 20 лет. Особый интерес представляют количественные сдвиги в уровне ос-Т в плазме крови и МЭ, а также отклонения интенсивности течения индуцированных процессов ПОЛ в МЭ (рис.2). Резкое уменьшение количества ос-Т в отмеченных биологических системах сочетается с одновременным ростом интенсивности течения АЗП и НЗП в МЭ, что является показателем снижения в последних АОА липидов. Установленное нами отсутствие выраженных изменений в уровне фоновых липидных перекисей плазмы является, на наш взгляд, следствием активирования И1 эритроцитов и затрат <=с-Т на лимитирование процессов ПОЛ. Одновременное возрастание содержания общих липидов (ОЛ), обуславливаемое, в значительной мере, достаточно высоким уровнем ОХ плазмы крови приводит к резкому уменьшению К °<.-Т/0Л и оС-Т/Х, являющихся, по нашему мнению, объективными критериями обеспеченности плазмы крови антиоксидантом. Не менее информативным является также увеличение в МЭ показателя 01/Ы. -Т. Предпринятое нами впервые профилактическое применение °с~ТА способствует приближению уровня

т и величин отмеченных К к норме в плазме крови с некоторым его превышением в МЭ. Нет'сомнений, что снижение уровня главного, если не единственного жирорастворимого антиоксиданта плазмы, ОС -Т ( Burton е.а.,1983, 1985, 1986), чревато серьезными нарушениями в метаболизме ЛП плазмы и структурно-функциональной целостности биомембран.

Согласно результатам проведенных наблюдений, степень изменения изученных К находится в обратной зависимости от стажа работы в условиях воздействия высокого уровня щума. На первый взгляд кажущаяся парадоксальность отмеченного факта обусловлена возрастными метаболическими сдвигами, характеризующимися в целом ростом содержания ТГ, общих липидов и X и сохранением или ростом уровня od-Г, а также спецификой распределения X и оС-Т во фракциях ДП. Определение Х-ЛПНП во всех группах, вняв-

5,0

40

3,0-

Ж

ко

| 1 контр ж

\8883i да приема Л-т

после , „ !■•■■ ¡приема ¿.-Т

Л

п

л

Ф~Р< 0,001 О-р < 0,01

о-р < 0,05

Ж

оС-Т сС-Т/ОЛ Х-ЛПНП/

„_ х-ллвл,

стаж до Ю лет

оС-Т А-Т/ОЛ х-лпнп/ к_х-лпвп )

стаж Ю-20^ет

о( -Г <А-Т/(?Л Х-МНП/

х-мпвп

"V

стаж свыше ?Олет

Рис.2. Уровень с<. -токоферола, отношения ос -Т/общие липида нлазш, коэффициента атерогенности у рабочих ткацкого цоха с различным станем работы.

С~1

сл

ляет закономерно выраженный рост содержания Х-ЛПКП и К атеро-генности, особенно у рабочих 1-й груши. После проведения антиоксидантотерапии ^-ТД, уровень Х-ЛПНП в ряде случаев почти полностью возвращается к норме, а К атерогенности опускается ниже контрольного уровня, что, несомненно, может быть объективным показателем эффективности применения предлагаемого наш метода при воздействиях высоких уровней шума.

Применение оС-ТА в течение года способствует заметному снижению утраты трудоспособности, продолжительности ее временной потери (на 20-60$ в зависимости от стажа работы), а также уреженив случаев субъективных жалоб на неудовлетворительное самочувствие, головокружение и утомляемость.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют, что определение содержания-Т, интенсивности течения процессов ПОД, количественных колебаний X и X отдельных фракций ЛП, других представителей липидов в плазме крови и МЭ, а также активности ГП и СОД имеет важное значение как в плане фундаментальных исследований, направленных на выяснение глубины патологических изменений в ответ на вредоносное действие акустических колебаний различного уровня и частотного спектра, так и для формирования предложений прикладного характера и оценки целесообразности широкого применения с целью профилактики и внедрения в лечебную практику впервые предлагаемого нами при шумовых стрессах метода антиоксидантотерапии.

оше вывода

I. Развитие акустического стресса характеризуется: а) активированием процессов ПОЛ в мозге, плазма и МЭ белых крыс-самцов в условиях острого стресса (91 дБА) и хронического эксперимента, в то время как в сердце и печени активирование ПОЛ в условиях острого стресса сменяется его подавлением при продолжительном действии шума. 7 самок белых крыс в тех же условиях эксперимента изменения носят подобный характер, но менее выражены, б) снижением уровня об-Т различной степени в мозге, печени, сердце, плазме и МЭ самок и самцов в условиях продолжительного пребывания под действием шума (91 дЕА), выявляя тесную взаимосвязь между изменением содержания «С -токоферола и интенсивности течения процессов ПОЛ; в) изменениями активности супероксидцисмутазы, гдутатионпероксидазы, глутатионредуктазы, глюкозо-6-фоофатдегвд-

- 37 -

рогеказы в изученных тканях, свидетельствующих об активном участии указанных ферментов в разыгрывающихся метаболических процессах.

2. Действие шума сопровождается прогрессирующим увеличением в МО суммы фосфолипццов, превалированием в них уровня нейтральных фосфолзпвдов над кислыми, увеличением количества лизо-фосфатидилхолинов, возрастанием коэффициента насыщенности жирных кислот липидов, изменением отношения холестерин/белок и фракционного состава холестерина, коэффициента холесгернн-фоофолипвды,падением активности 11а+К+-АТФазы в течение всего эксперимента.

3. Действие шума характеризуется развитием в плазме крови убыли уровня общих липидов, незначительным ростом содержания триглицеридов и неэстерифицированных жирных кислот, холестерина

у самцов и его снижением у самок, увеличением количества липоцро-теидов низкой плотности с конечным возвращением его к норме, увеличением уровня хиломикронов и снижением количества лилопротеи-до в высокой плотности у самцов, возрастанием уровня холестерина липопротеидов низкой плотности и убылью холестерина липопротеи-дов высокой плотности в остром периоде акустического стресса у самцов и при продолжительном действии шума, независимо от половых различий экспериментальных животных.

4. о<.-токоферолацетат выполняет роль тонкого регулятора, способствует нормализации уровня -токоферола во всех изученных тканях за исключением мозга. Интенсивность течения индуцированных процессов ПОЛ в остром периоде акустического стресса при применении об-токофзролацетата находится в обратной корреляционной зависимости от тканевого уровня ос-токоферола, а при продолжительном действии стрессора - в прямой.

5. Установлена органоспецифичность и разнонаправленность изменений актигаости глутатионредуктазы и глутатионпероксидазн в печени, сердце и мозге белых крыс в зависимости от продолжительности шумового воздействия на фоне профилактического введения сС-токоферолацетата. Прямая корреляция прослеживается между выраженным повышением активности супероксиддисмутазы и уровнем сЛ -токоферола в тканях самок и обратная-у самцов.

6. Систематическое введение ы. -токоферолацетата сопровождается заметным упорядочением в МЭ суммы фосфолипидов, количественных соотношений между их индивидуальными представителями с чувствительным понижением содержания лизофосфатидилхолинов в течение

всего 'эксперимента и предотвращением развития выраженных отклонений в величине коэффициента насыщенные жирные кислоты/ненасыщенные кирше кислоты липидов при продс.литвльнои (свьше четырех недель) воздействии шума.

7. Введение, ос -токоферолацетата ссправоздается увеличением АТФазной активности в ЫЭ в основном за счет и^+-зашсшлого компонента, не достигающего однако контрольного уровня, ростом активности уабаин-ингиби^уемого компонента фермента у самцов и резким ингибированиеы Mg "+-зависимой АТОазы у самок при продолжительном действии шума.

8. Систематическое введение <*. -токоферолацетата белым крысам в условиях продолжительного шумового воздействия (91 дЕА) способствует снижению уровня холестерина как в ЫЭ и плазме крови, так и, в частности, в составе липопротеидов низкой плотности и увеличению его содержания в лшюпротеидах высокой плотности, а также общему гиполипидешческому действию, более выраженному у самцов.

9. Показано, что при систематическом введении синтетического антиоксиданта ft -пропанола (3,5-дитретбутил-4-гадроксифенил-пропанола), в условиях шумового воздействия имеет место: а) сохранение уровня и.-токоферола в мозге, печени, плазме крови в пределах нормы, его увеличение в миокарде и убыль в ЫЭ, подавление интенсивности течения индуцированных процессов НОЛ и снижение уровня фоновых лштдных перекисей в мозга, печени и сердце различной выраженности в зависимости от продолжительности шумового воздействия; б) активирование глутатнонпероксидазы и подавление активности супероксидцисыутазы и гдутатионредуктазы в мозге, печени и сердце в остром, л хроническом эксперименте наряду

с активацией глюкозо-б-фосЗатдегидрогеказы в ъсозге и сердце и подавлением его в печени; з) рост сзади фасфолипидов МЭ с изменениями в составе индивидуальных представителей различной степени в зависиыостя от продолжительности щупового воздействия; г) Еыраконкое снижение уровня холестерина е L3 при одновременном подавлении в кпх активности AT,-азы. Первоначально отмечающееся при остром акустическом стрессе пгпохолестерЕнеиическое действие f -пропанола при длительности эксперимента свше 4 недоль сменяется картиной гиперхолестерккелии.

10. При дс!:ств;п; пгуга. болзшгэ урошя СС-7 дЕА) :: аеньзей даи-тельнест;:, подобранного с уч-.-х:; рек'хгекдацп: iso 1999, осно-

ванной. на "правиле затраты энергии", сдвиги в изучениях параметрах регистрируются позже, без проявления абсолютного равенства в величинах. Применение в подобных случаях«¿-токоферолацетата оказывается более эффективным в отношении нарушенных сторон метаболизма.

11. Изучение особенностей метаболизма,связанных с характером частотного спектра воздействующих акустических колебаний, показало, что воздействия низкочастотных акустических колебаний (105 дБ) в первые 2-3 недели эксперимента характеризуются обогащением органов и тканей oc-токоферолом, динамика содержания которого при более продолжительном действии стрессора претерпевает различные по направленности сдвиги в зависимости от вида исследуемой ткани.

12. Воздействие низкочастотных акустических колебаний сопровождается подавлением интенсивности индуцированных процессов ПОЛ и снижением уровня фоновых липидных перекисей в печени, сердце, ГО и плазме различной степени в зависимости от вида изучаемой ткани и сроков исследования. Вместе с тем обнаруживается рост активности глутатионпероксидазы при^продолжительных сроках воздействия, подавление активности суперснсиддиомутазы, глутати-онредуктазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в мозге, печени и сердце. Активность супероксиддись1утагы в эритроцитах растет. Отмечается прогрессирушций рост суммы фосфолипидов !аЭ на фоне выраженных сдвигов их индивидуальных представителей, увеличение содержания общего и эстерифицированного холестерина в плазме и ЫЭ

с подавлением в них активности АТФаз в условиях хронического эксперимента.

16. У работниц ткацкого цеха обнаруживается снижение уровня ос-токоферола в плазме и МЭ, увеличение содержания уровня общих липидов и холестерина, а также уменьшение коэффициентов ос-токофе-рол/общяе литптды, ос -токоферол/холестерин в плазме крови и увеличение коэффициента холестерин/«*.-токоферол в мембранах эритроцитов с интенсификацией в них процессов перекисеобразования. Производственный шум ткацкого цеха приводит также к повышению уровня холестерина липопротеидов низкой плотности, к значительному росту коэффициента атерогенностц, изменению активности глутатионпероксидазы, супероксиддисмутазы эритроцитов.

Применение °с-токо(Т:еролацетата оназыгаег выраженное нор -

- 40 -

мализуицее воздействие на оольшинотве изученных парс-мот рои, способствует резкому снижению заболеваемости, сокращение irro-должительност-и временной нетрудоспособности и уреяениэ субъективных зкалоб работниц ткацкого цеха на неудовлетворительное самочувствие.

Список работ, опубликованных по теме дисоергащм:

1. Антиокскдантная терапия при стрессе. // Всесоюзное совещание "Биоанткоксидант". Черноголовка. - 1983. Тезлсп докладов. - C.I4I-I42. Совместно с Ъ.Г.!,Ьштаряном, 5.:.1.ь11ь:аелян, ЕЛ.Мелик-Агаевой.

2. Процесс липидной пероксидации и уровень об-токоферола

в тканях белых крыс в условиях акустического стресса. // Биологический журнал Армении. - 1983. - Т.35, Я 7. - С.582-587. Совместна с В.Г.Мхитаряном, Е.А.Мелик-Агаевой, А.А. Гухкяком.

3. Активность ферментов антирадикальной защиты клетки в условиях акустического стресса. // Биологический журнал Армении. - 1983. - Т.35, № 10. - С.818-825. Совместно с А.Г.Араке-ляном и В.Г.Мхитаряном.

4. Взаимосвязь антиоксидантов и лшшдаой пероксидации. // Журнал экспериментальной и клинической медицины. - 1983. - Т.23, й 6. - С.537-544. Совместно с Э.М.Ыикаелян, В.Г.Мхитаряном, Е.А. Ыелик-Агаевой.

5. The regulation of superoxide dismutaae and other antiradical protection enzymes Ъу antioxidants in stress conditions.//Abstracts q£ papers presented at the seventh joint symposium of the biochemical societies of the GDH and USSR. Leipzig-1983--P.57. Together with K.I.Agadjanow, E.M.Mikaelian, D.M.Gevcrkiian, V.G.Kchitarian.

6. Влияние шума на процессы липщщой пероксидации.//Биологический журнал Арыешш. - 1984. - Т.37. Га 8. - С.668-673. Совместно с Е.А.Мзлик-Агаевой, А.Г.Аракеляном, В.Г.Мхитаряном.

7. Действие оС-токоферолацетата на ферменты антирадакаль-ной загдиты клетки белых крыс при акустическом стрессе. // Биологический журнал Армении. - IS84. - Т.37, JS 7. - С.586-594. Совместно с А.Б.Африкян, А.А.Рухкяноы, В.Г.Мхитаряном.

8. Влияние шума на некоторые биохимические параметры крови саяых крыс. // Журнал экспериментальной и клинической медицины.

- TJ3L - ~.:J4, 5. - C.-124—iCS. Совместно с Л.Г.Шадджяя, В.Г.

Мхитаряно:.;.

9. llrcuecoii перекисного окисления липидов в мозге белых крыс при акустическом стрессе. // Нейрохголия. - 1984. - Т.З, Js 3. - С.331.

10. Регуляция перекисного окисления липидов при стрессе. // Всесоюзный симпозиум "Стресс, адаптация и функциональные нарушения". Тезисы докладов, Киипнсз, 1984. - С.349. Совместно с

B.Г.Мхитаряном и Э.М.Микаелян.

11. Биохимические параметры крош в условиях акустического стресса. // Гззисц докладов конференции по проблемам физ-хиш-ческой биологии и биотехнологии в медицине. Ереван, 1984. -

C.37.

12. Влияние оС -токоферолацетата на процесс лшшдной перокси-дации при акустическом стрессе. // Биологический журнал Армении.

- 1985. • Т.38, X I. - С.61-65. Совместно с А.Г.Аракеляном, А.А. Рухкяном, В.Г.Мхитаряном.

13. Влияние оС-токоферолацетата на некоторые биохимические параметры крови белых крыс в условиях акустического стресса. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1985. - Т. 100, № 9. - С.270-272.

14. Molecular mechanisms of stress and their regulation by antioxidants.// 13th International congress of Biochemistry. Amsterdam, Netherlands.Abstracts.-1985.-P.601. Together with M.I. Agadjanow, V.C Mchitarian, E.M. Mikaelian.

15. The role of antioxidants in the modulation of the brain lipid metabolism under stress. // Tanth International Meeting of the International Society for Neurochemistr-y. Riva del Cards, Italy, Abstracts. -1985.-P.24. Together with V.G.t'.chitarian, M.I.Agadjanow, E.M.Mikaelian.

16. Регуляция-Процессов перекисного окисления лшшдов синтетическим антиоксвдаитом "¿'-пропалолом". // У1 Закавказская конференция патофизиологов "Современные проблемы патологической физиологии". - 1985. - С.126-127. Совместно с В.Г.Мхитаряном.

17. Механизм активации и рзгуляции переписного окисления липидов при стрессе. // У Всесоюзшй Епохшлгческий съезд. Киев.

- 1986. - Т.З. - С.389. Совместно с В.Г.Ыхитаряном, И.И.Лгаджа-новым, Э.М.Микаелян, С.Л.Пкртчгаом.

18. Интенсивность процессов лерскюного окисления липидов

и активность ферментов в зависимости от пола в условиях стресса. // Журнал экспериментальной и клинической медицины. - 1986. -Т.26, й 4. - С.322-328. Совместно с Е.Л.У"лик-Агаевой и В.Г. ЬАхитаряном.

19. Регуляция антиоксиданташ некоторых структурных компонентов мембран эритроцитов в условиях акустического стресса. // П Всесоюзная конференция "Еиоантиоксидант". Тезисы докладов. Черноголовка. - 1986. - Т.2. - С.229. Совместно с В.Г.Мхитаря-ном.

20. Изменения содержания некоторых микроэлементов в крови и органах белых kjhc', подоергавдюсся воздействию шума различной длительности. // Сборник научных трудов, посвященных 100-летию со дня рождения проф. А.А.Акопяна. Ереван, Айастан. - 1986. -С.276-284. Совместно с Р.С.Эминян и Н.Г.Асланян.

21. Ноше аспекты механизма воздействия низкочастотных акустических колебаний на организм. // П конференция по проблемам физико-химической биологии и биотехнологии в медицине. Тезисы докладов. Ереван. - 1986. - С.40. Совместно с Е.А.Мелик-Агаевой.

22. The antioxidant regulation of lipid peroxidation in epilepsy and some pathologic state . IJ European society for Heurochemi-etry. Molecular hasia of neural function. Praga.-1986, R2.-P.369. Together with M.I.Agadjanow, V.G.Mchitarian, G.E.Badalian, E.M.Mika-elian.

23. Половые различия в динамике сдвигов некоторое биохимических параметров плазмы и эритроцитов белых крыс в условиях акустического стресса. // Журнал экспериментальной и клинической медицины. - 1987. - Т.27, й I. - С.21-29.

24. Биохимические изменения под влиянием низкочастотных акустических колебаний. // Биологический яурнал Армении. -1987. - Т.40, & 5. - С.377-382. Совместно с Г.Г.Закутошм, Е.А. Целик-Агаевой, А.Б.Африкян, В.Г.Мхитаряном.

25« Antioxidants as a membranoprotective factors under the conditions of acoustic stress and alloxan diabetes. // Ninth Joint Symposium of the biochemical Societies of the GDR and USSR. Metabolic regulation at the cellular and molecular level. АЪз1га^в. Jena, GDH.-1987.-P.48-49. Together with D.M.Gevorkian. K.G.Karageuzyan, S. S .Ho vakimiar..

- 43 -

26. Характеристика процессов иерэкисного окисления в тканях белых крыс при воздействии шума различного уровня. // 5 Рес-публиканско-областная научно-практическая школа-семинар "Механизмы адаптации растений и животных к экстремальным факторам среды". Тезисы докладов. Ростоэ-на-Дону. - 1987. - С.80-81. Совместно с В.Г.Мхитаряном.

27. Применение витамина "Е" в профилактике н лечении шумовой болезни. // Методические рекомендации (рассмотрено и одобрено Ученым медицинским Советом МЗ Арм.ССР). Ереван. - 1987. -

14 с.

28. Процессы перекисного окисления лшщдов в условиях воздействия низкочастотных акустических колебаний. // В сб.: Пере-касное окисление лнпидов в норме и патогенезе различных заболеваний. Ереван, Айастан. - 1988. - C.I09-II2. Совместно с В.Г. Мхитаряном, Е. А.Мелнк-Агаевой, А.Б.Африкян.

29. Effect of low frequency acoustic oscillation on some sides of lipid metabolism. // The 19th World congress of the International Society for fat research (YSF) and the 27th annual meeting of the Japan Oil chemist's Society (JOCS). Tokyo, Japan.-1988. Together with K.G. Karageuzyan.

Автор считает своим приятным долгом выразить глубокую благодарность члену-корреспонденту АН Армянской ССР Вагану Григорьевичу Мхитаряну, а также коллективу кафедры биохимии ЕрМИ и НИЛ. патохимии обмена веществ при кафедре биохимии за создание благоприятных условий работы, свою искреннюю признательность члену-корреспонденту АН Армянской ССР Константину Григорьевичу Kapars-зяну за ценные научные консультации в процессе выполнения настоящей работы.