Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Особенности взаимодействия неэлектролитов-фенозана-1, производных 5-гидроксибензимидазола, γ-карболина и жирных кислот - с эритроцитарной мембраной

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лунева, Оксана Георгиевна

I. ВВЕДЕНИЕ.

II. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1. Структура эритроцитарной мембраны и исследования ее изменений под влиянием различных факторов методом спиновых зондов.

1.1. Структурная организация плазматической мембраны эритроцита и мембранный транспорт неэлектролитов.

1.2. Исследования методом спиновых зондов изменений структуры эритроцитарной мембраны под влиянием различных факторов и при развитии патологических процессов в организме.

2. Поверхностная архитектоника эритроцитов.

2.1. Эритроциты как трехмерные образования.

2.2. Морфологические изменения эритроцитов, индуцируемые экзогенными веществами и другими воздействиями.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

1. Объекты исследований.

2. Выделение эритроцитарной массы.

3. Получение теней эритроцитов.

4. Получение липосом.

5. Приготовление образцов для ЭПР спектроскопии и анализ спектров ЭПР.

6. Приготовление и анализ образцов при использовании методов сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) и световой микроскопии (СМ).

7. Статистическая обработка результатов.

8. Использованные в работе химические соединения.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Взаимодействие гидрофобных спин-меченых неэлектролитов (ГСН) с эритроцитарной мембраной.

1.1. Распределение ГСН во внутримембранном пространстве.

1.2. Емкость эритроцитарной мембраны в отношении различных по химической структуре ГСН.

2. Влияние производных 5-гидроксибензимидазола на структуру эритроцитарной мембраны и морфологию эритроцитов.

2.1. Структурные изменения эритроцитарной мембраны, индуцируемые производными 5-ГБИ.

2.2. Модифицирующее действие производных 5-ГБИ на морфологию эритроцитов.

3. Взаимодействие фенольного антиоксиданта фенозана-1 с эритроцитарной мембраной.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности взаимодействия неэлектролитов-фенозана-1, производных 5-гидроксибензимидазола, γ-карболина и жирных кислот - с эритроцитарной мембраной"

В настоящее время в практике широко используются различные вещества являющиеся гидрофобными неэлектролитами. Среди них лекарственные препараты, антиоксиданты и другие биологически активные соединения. Кроме того, развитие сельского хозяйства и промышленности приводит к поступлению в окружающую среду вредных веществ, в том числе и гидрофобных неэлектролитов, которые воздушным, водным и другими путями, а так же с продуктами питания могут поступать в организм человека и животных.

Известно, что в кровяном русле экзогенные гидрофобные неэлектролиты способны вступать во взаимодействие с плазматическими мембранами клеток крови, в том числе и эритроцитов, и вовлекаются при этом в процессы мембранного транспорта веществ.

Одной из стадий мембранного транспорта неэлектролитов является их распределение во внутримембранном пространстве. На этой стадии проявляется избирательность мембраны в отношении тех или иных соединений, определяются топография и кинетика распределения вещества в мембране, и осуществляется его возможное биологическое действие.

Несмотря на важность и актуальность изучения проблемы мембранного транспорта органических неэлектролитов многие вопросы, связанные с особенностями распределения этих веществ в мембранных структурах всё ещё остаются открытыми.

Особый интерес представляет выяснение зависимости внутримембранного распределения неэлектролитов от их структуры и гидрофобных свойств. Исследования в этом направлении возможны с использованием различных экспериментальных подходов использование метода ЭПР, гидрофобных спин-меченых неэлектролитов и их гомологических рядов. Применение этого подхода наряду с методами спиновых меток и зондов открывает широкие возможности для исследований мембранного транспорта веществ в норме и при действии различных химических и физических факторов и развитии патологических процессов. Ценная информация об особенностях взаимодействия неэлектролитов с эритроцитарной мембраной и их распределении в ней может быть получена методом сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). Представляется перспективным комплексное применение указанных методов для изучения распределения экзогенных гидрофобных неэлектролитов в мембране эритроцитов в зависимости от структуры соединений и их физико-химических свойств. Полученная информация может быть использована для разработки новых подходов к направленному синтезу лекарств и других биологически активных веществ.

В связи с этим целью настоящей работы было изучить физико-химические особенности взаимодействия некоторых органических А неэлектролитов из разных групп химических соединении с плазматической мембраной эритроцитов для установления взаимосвязи химической структуры вещества с его распределением во внутримембранном пространстве и определения влияния гидрофобных свойств вещества на его мембранотропное действие.

И. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Лунева, Оксана Георгиевна

VI. выводы

1. Изучены особенности взаимодействия органических неэлектролитов из разных групп химических соединений (спин-меченые производные у-карболина и жирных кислот, производные 5-гидроксибензимидазола и фенозан-1) с плазматической мембраной эритроцитов методами спиновых зондов и сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). На основании анализа спектров ЭПР и электронных микрофотографий установлены взаимосвязи между мембранотропным действием соединений и их структурой и гидрофобными свойствами.

2. Методом ЭПР исследовано распределение гидрофобных спин-меченых производных у-карболина и жирных кислот в плазматической мембране эритроцитов и ее емкость в отношении этих соединений. Установлено, что:

- спин-меченые производные у-карболина распределяются в двух различных по физико-химическим свойствам (микровязкости) областях внутримембранного пространства, тогда как производные на основе жирных кислот занимают только одну область распределения; емкость плазматической мембраны эритроцита в отношении гидрофобных спин-меченых неэлектролитов ограничена и различна для разных по структуре и гидрофобным свойствам соединений.

3. Методом спиновых зондов показано, что наиболее гидрофобные производные ряда 5-гидроксибензимидазола, имеющие бензильный заместитель, оказывают структурно-модифицирующее действие на мембрану, выражающееся в изменениях кинетики встраивания спинового зонда в мембрану и емкости мембраны для этого соединения. i I

4. Методом СЭМ установлено, что производные 5- > гидроксибензимидазола в диапазоне концентраций 10" -10" М способны индуцировать переходы части клеток из дискоидной формы в эхиноциты. Эффект имеет концентрационно-зависимый характер и более выражен у гидрофобных производных, содержащих бензильный заместитель. Выявленные морфологические трансформации указывают на преимущественное распределение производных 5-гидроксибензимидазола во внешнем монослое эритроцитарной мембраны.

5. Методом СЭМ показано, что фенольный антиоксидант фенозан

1 в диапазоне низких (Ю"10 - 10"5 М) и высоких (4*10"4 - 1*10"3 М) 1 концентраций проявляет, соответственно, эхиноцитогенное и стоматоцитогенное действия, обусловленные, по-видимому, его преимущественным распределением во внешнем и/или внутреннем монослоях эритроцитарной мембраны.

В заключение приношу глубокую благодарность моему научному руководителю д.б.н. JI. Я. Генделю за постоянные внимание и поддержку, оказанные мне в работе; д.х.н. К. Е. Кругляковой за ценные советы, интерес к работе и неоценимую помощь; к.б.н. К. Н. Тимофееву за помощь в работе и научные консультации; к.б.н. В.А. Федину за помощь в работе; к.х.н. Ю. В. Кузнецову, к.х.н. А. Б. Шапиро и В.И. Сускиной за предоставленные для работы химические соединения и спиновые зонды; а также сотрудникам кафедры биофизики Биологического факультета МГУ за поддержку.

V. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время имеющиеся в научные данные свидетельствуют, что биологические мембраны, в том числе плазматические мембраны эритроцитов, имеют сложную гетерогенную структуру, разные области которой отличаются своими физико-химическими свойствами.

Биологически активные вещества - неэлектролиты, используемые, в частности, как лекарственные препараты, в соответствии со своими гидрофобными свойствами проникают и распределяются в той или иной области мембранной структуры. От места распределения активного вещества в мембране зависит реализация его биологической активности.

Закономерности распределения неэлектролитов в биомембранах в зависимости от структуры веществ и их физико-химических свойств все , еще мало изучены.

В данной работе, на примере представителей спин-меченых неэлектролитов (производных у-карболина и жирных кислот), производных ряда 5-гидроксибензимидазола и фенольного антиоксиданта фенозана-1 показано, что химическая структура и обусловленные ею гидрофобные свойства вещества являются одним из важных факторов, определяющих его взаимодействие с эритроцитарной мембраной. В результате этого взаимодействия экзогенное вещество может проникать во внутримембранное пространство эритроцитов и селективно распределяться в нем.

Установлено, что изученные гидрофобные неэлектролиты могут 1 иметь несколько, отличающихся по физико-химическим свойствам, областей распределения в мембране эритроцитов. Методом ЭПР показано, что нитроксильные производные у-карболина имеют две области распределения во внутримембранном пространстве эритроцитов, в то время как спин-меченые производные жирных кислот только одну. С использованием метода сканирующей электронной микроскопии установлено, что в одном и том же концентрационном диапазоне производные 5-гидроксибензимидазола преимущественно ; распределяются во внешнем монослое эритроцитарной мембраны, а, ' отличающийся от них по химической структуре синтетический антиоксидант фенозан-1, имеет две области распределения - во внешнем и внутреннем монослоях.

Показано, что важным фактором, влияющим на распределение веществ в мембране, является ее ограниченная емкость для вещества, определяющая действующие дозы биологически активных соединений -органических неэлектролитов во внутримембранном пространстве. В работе показано, что емкость мембраны зависит от гидрофобных свойств соединений. Изменять емкость мембраны для биологически активного вещества - неэлектролита, интеркалирующего в биомембрану, можно, по-видимому, варьируя гидрофобность интеркалирующих соединений путем введения заместителей.

Химическая структура вещества, его гидрофобные свойства и ограниченная емкость биомембраны являются факторами, существенными для реализации биологической активности мембранотропных соединений - неэлектролитов, к числу которых относятся различные лекарства, антиоксиданты и другие ксенобиотики.

Удобным способом изучения особенностей взаимодействия неэлектролитов с плазматическими мембранами эритроцитов является комплексное использование методов спиновых зондов и сканирующей электронной микроскопии.

Выявленные в работе взаимосвязи химической структуры и гидрофобных свойств вещества с его распределением в эритроцитарной

93 мембране, влиянием на ее структуру и морфологию эритроцитов могут быть полезны при выработке подходов к направленному синтезу лекарств и биологически активных соединений.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лунева, Оксана Георгиевна, Москва

1. Анциферова Л.И., Вассерман A.M., Иванова А.Н., Лившиц В.А., Наземец Н.С. Атлас спектров электронного парамагнитного резонанса спиновых меток и зондов. М.: Наука, 1977, 160 с.

2. Азизова О.А., Горховская Т.И., Лопухин Ю.М. Структурно-функциональное исследование мембран клеток крови при атеросклерозе. В кн.: Метод спиновых меток и зондов. М.: Наука, 1986, с. 239-250.

3. Альберт Э. Избирательная токсичность. М.: Наука, 1971, 431с.

4. Архипова Г.В., Бурлакова Е.Б., Федотова И.Б. Липиды нейрональных мембран в моделях памяти и обучения у крыс линии КМ, сверхчувствительных к звуковому раздражению. Сенсорные системы, 1992, 6(4), с. 66.

5. Бурлакова Е.Б., Мальцева Е.А., Голощапов А.Н., Пальмина Н.П. Биофизика, 1980, 25, с.859-864.

6. Бурлакова Е.Б., Заец Т.А., Дубинская Н.И., Молочкина Е.М. Влияние антиоксидантов на изменение состава липидов лизосом печени крыс после термического ожога. Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1984, вып. 5, с.13-17.

7. Бурлакова Е.Б., Хохлов А.П. Изменение структуры и состава ' липидной фазы биомембран при действии синтетических антиоксидантов. Влияние на передачу информационного сигнала на клеточном уровне. Биологические мембраны, 1985, 2(6).

8. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н. Спиновые зонды в изучении мембран нормальных и раковых клеток. В кн.: Метод спиновых меток и зондов, М.: Наука, 1986, с. 212-223.

9. Бучаченко А.Л., Вассерман A.M. Стабильные радикалы. М., 1973

10. Ведение в биомембранологию. Учеб. пособие/ Под ред. А.А. Болдырева. М.: Изд-во МГУ, 1990, 208 с.

11. Гендель Л.Я., Гольдфельд М.Г., Кольтовер В.К., Розанцев Э.Г., Сускина В.И. Исследование конформационных переходов в биомембранах методом связанного парамагнитного зонда. Биофизика, 1968, 13, с.1114-1116.

12. Гендель Л.Я., Панасенко О.М., Круглякова К.Е. Изучение влияния пестицидов на структуру эритроцитарной мембраны методом спинового зонда. В сб.: Магнитный резонанс в биологии и медицине: Тез. докл. Всесоюз. симпоз., Москва, 1981, с. 231-232.

13. Гендель Л.Я., Круглякова К.Е., Панасенко О.М. Селективное распределение спиновых зондов ряда бензо-у-карболина в эритроцитарной мембране. Докл. АН СССР, 1981, 257, с. 1014-1019.

14. Гендель Л.Я., Лихачева Н.И., Богонатов Б.Н., Панасенко О.М., Круглякова К.Е. Изменения формы эритроцитов под влиянием пестицида пентахлорфенолята натрия (метод СЭМ) Докл. АН СССР 1984 т.277 с.493-496.

15. Гендель Л.Я., Круглякова К.Е. Структурно-функциональные взаимодействия физиологически активных соединений с биомембранами. В кн.: Метод спиновых меток и зондов, М.: Наука, 1986, с.163-194.

16. Гендель Л.Я., Яковлева Н.Е., Лелекова Т.В., Федин В.А., Яковлев Е.И. Влияние тиролиберина на структурные особенности эритроцитов крысы. Изв. РАН. сер. биол., 1997,1, с. 103-106.

17. Геннис Р. Биомембраны. Молекулярная структура и функции. М.: Мир, 1997, 624 с.

18. Ершов В.В., Никифоров Г.А., Володькин А.А. Пространственно-затрудненные фенолы. М.: Химия, 1972, 351 с.

19. Жданов Р.И., Комаров A.M. Модельные и биологические мембраны в методе спиновых меток и зондов. Итоги науки и техники. Биофизика мембран, т.6,1989.

20. Заец T.JL, Бурлакова Е.Б., Музыкант Л.И. Влияние водорастворимых антиоксидантов на проницаемость лизосомальных мембран и наIструктуру печени крыс при термическом ожоге. Бюллетень экспериментальной биологии, 1983, 10, с. 29-32.

21. Казенов A.M., Маслова М.Н. Структурно-биохимические свойства мембраны безъядерных эритроцитов. Физиологический журнал СССР 1987,73(12), с.1587-1598.

22. Клесов А.А., Березин И.В. Ферментативный катализ. М.: Изд-во МГУ, 1980.

23. Козинец Г.И., Симоварт Ю.А. Поверхностная архитектоника клеток периферической крови в норме и при заболеваниях системы крови. Таллин, Вал. 1984 115с.

24. Котык А., Яначек К. Мембранный транспорт. М.: Мир, 1980, 341с. ,

25. Кузнецов А.Н. Метод спинового зонда. М.: Наука, 1976, 210 с.

26. Кузнецов Ю.В., Столярова Л.Г., Лезина В.П., Смирнов Л.Д. Исследование электрофильного замещения алкил-, арил- и арилкилпроизводных 5(6)-гидроксибензимидазола. Изв. АН СССР, сер. хим., 1990, №8, с. 1888-1892.

27. Лихтенштейн Г.И. Метод спиновых меток в молекулярной биологии. М.: Наука, 1974, 255 с.

28. Максина А.Г., Микаэлян Н.П., Князев Ю.А., Дайняк Б.А. Исследование с помощью спин-меченых жирных кислот структурных изменений в мембранах эритроцитов при сахарном диабете. ' Биофизика, 1992, 37(2), с.306-309.

29. М.С. Малиновский, Г.Е. Батрак и др., Ах.СССР №535301.

30. Мальцева E.JI., Бурлакова Е.Б. Различия в ответе мембранных клеток мозга и печени при действии in vitro антиоксиданта и жирной кислоты (по изменению активности циклаз и вязкости). Биологические мембраны, 1986, 3(8), с. 773-779.

31. Озерецковская O.JI. Индуцирование устойчивости растений. Аграрная Россия, 1999, 1(2), с. 4.

32. Панасенко О.М., Гендель Л.Я., Сускина В.И., Изучение поведения новых нитроксильных радикалов производных бензо-у-карболина и у-карболина в суспензии эритроцитарных мембран. Изв. АН СССР, сер. биол., 1980, № 8, с. 854-864.

33. Панасенко О.М., Зорина О.М., Гендель Л.Я., Круглякова К.Е. Действие синтетических антиоксидантов гетероциклического ряда на структурно-функциональную организацию эритроцитарной мембраны. Доклады АН СССР, 259 (3), 1981, с.727-731.

34. Розанцев Э.Г., Сускина В.И. Синтез новых стабильных свободных радикалов в ряду 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила. Изв. АН СССР, сер. хим., 1969, №5, с. 1191-1193.

35. Рубин А.Б. Биофизика в 2 т., том. 2: Биофизика клеточных процессов: Учебник для вузов., М.: Книжный дом «Университет», 2000, 468с.

36. Современные методы биофизических исследований. Практикум по биофизике. Под ред. Рубина А.Б., М.: Высшая школа, 1988, 359 с.

37. Федотова И.Б., Семиохина А.Ф., Архипова Г.В., Бурлакова Е.Б. Возможности коррекции некоторых сложных периферических реакций крыс КМ с помощью антиоксиданта. Журнал высшей нервной деятельности, 1990, 40(2), с. 318-325.

38. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитарных мембран. М.:Наука и техника, 1981,216 с.

39. Adams К.Н., Korpman R.A., Bull B.S. A theory for the shape of red blood cell. Biophys. J. 1973 v. 13 p. 1049-1053.

40. Allen J.E., Valeri C.R. Prostaglandins in hematology. Arch. Int. Med., 1974, 133, p.86-96.

41. Anim H.M., Kaniewski W.S., Cohen D., Camporesi E.M., Hakim T.S. Effects of acute exposure to hyperbaric oxygen on the rheology and morphology of the red blood cells in the rat. Microvasc. Res., 1995, 50(3), p. 417-428.

42. Ayala S., Besson I., Aymerich M., Berga L., Vives Corrons J.R. Abnormal changes in erythrocyte membrane protein in hereditary spherocytosis and their relation to clinical and biologycal aspects of the disease. Med. Clin. (Bare), 1995,105(2), p. 45-49.

43. Baerlocher G.M., Beer J.H., Owen G.R., Meiselman H.J., Reinhart W.H. The anti-neoplastic drug 5-fluorouracil produces echinocytosis and affects blood rheology. Br. J. Haematol., 1997, 99(2), p. 426-432. ;

44. Barratt M.D., Rayner L. Lysolecithin-casein interaction. I. Nuclear i magnetic resonance and spin label studies. BBA, 255(3), 1972, p.974-980.

45. Beaven G.H., Parmar J., Nash G.B., Bennet B.M., Gratzer W.B. Effect of magnesium ions on red cell membrane properties. J. Membr. Biol., 1990, 118(3), p. 251-257.

46. Bessis M. In: Red Cell Shape. Physiology. Phatology. Ultrastructure. (Bessis M., Weed R.I., Leblond P.F., ets.) Springer-Verlag, Heidelberg, 1973, p. 1-23.

47. Bergmann W.L., Dressier V., Haest C.W.M., Deuticke B. Reorientation rates and asymmetry of distribution of lysophospholipids between the inner and outer leaflet of the erythrocyte membrane. BBA, 1984, 772, p. 328336.

48. Bessis M. Corpuscles: Atlas of red blood cell shape. Berlin ect. 1974.

49. Brailsford J.D., Korpman R.A., Bull B.S. The red cell shape mathematical delineation bassed on a uniform shell hypothesis J. Theor. Biol. 1976 v.60 p.131-145.

50. Brites D., Silva R., Brito A., Effect of bilirubin on erythrocyte shape and haemolysis, under hypotonic, aggregating or non-aggregating conditions, and correlation with cell age. Scand. J. Clin. Lab. Invest., 1997, 57(4), p. 337-349.

51. Brito M.A., Silva R.M., Matos D.S., da Silva A.T., Brites D.T. Alteration of erythrocyte morphology and lipid composition by hyperbilirubinemia. Clin. Chim. Acta., 1996, 249(1-2), p. 149-165.

52. Brunauer L.S., Moxness M.S., Huestis W.H. Hydrogen peroxide oxidation induces the transfer of phospholipids from the membrane into the cytosol of human erythrocytes. Biochemistry, 1994, 33, p. 4527-4532.

53. Bull B.S., Brailsford J.D. The biconcavity of the red cell: an analysis of several hypotheses. Blood. 1973 v.41 p.833-844.

54. Butikofer P., Brodbeck U., Ott P. Modulation of erythrocyte vesiculation by amphiphilic drugs. BBA, 1987, 901, p. 291 -295.

55. Butterfield D.A., Ordaz F.E., Marksbery W.R. Spin label studies of human ' erythrocyte membrane in aging. J. Gerontol., 1982, 37(5), p.535-539.

56. Butterfield D.A. The relationship of membrane fluidity to degenerative muscular diseases. Membrane Fluidity in Biology, 3,1985, p.161-255.

57. Butterfield D.A., Sun В., Bellary S., Arden W.A., Anderson K.W. Effect of endotoxin on lipid order and motion in erythrocyte memmbranes. BBA, 1994, 1225(2), p.231-234.

58. Cahham P.B. The minimum energy of binding as a possible explanation of the reconcave shape of the human red blood cell. J. Theor. Biol. 1970 v.26 p.61.

59. Corbett J.D., Mickols W.E., Maestre M.F. Effect of hemoglobinIconcentration on nucleation and polymer formation in sickle blood cells. J. Biol. Chem., 1995, 270(6), p. 2708-2715.

60. Dejter-Juszynski M., Harpaz N., Flowers H.M., Sharon N. Blood group ABH-specific macroglycolipids of human erythrocytes: isolation in high yield from a grude membrane glycoprotein fraction. Eur. J. Bioch., 1978, 83, p. 363-378.

61. Delaunay J., Stewart G., Iolascon A. Hereditary dehydrated and overhydrated stomatocytosis: recent advances. Curr. Opin. Hematol., 1999, 6(2), p. 110-114.

62. Devaux P.F., Seigneuret M. Specificity of lipid-protein interaction as , determined by spectroscopic techniques. BBA, 1985, 822, p. 63-125.

63. Dressier V„ Haest C.W.M., Plasa G., Deuticke В., Erusalimsky J.D. Stabilizing factors of phospholipid asymmetry in the erythrocyte membrane. BBA, 1984, 775, p. 189-196.

64. Garcia D.A., Quiroga S., Perillo M.A. Flunitrazepam partitioning into natural membranes increases surface curvature and alters cellular morphology. Chem. Biol. Interact., 2000,129(3), p. 263-277.

65. Gedde M., Yang E., Huestis W. Shape response of human erythrocytes to altered cell pH. Blood, 1995,86(4), p. 1595-1599.

66. Gedde M., Huestis W. Membrane potential and human erythrocyte shape. Biophys. J., 1997, 72(3), p. 1220-1233.

67. Gedde M., Davis D., Huestis W. Cytoplasmic pH and human erythrocyte shape. Biophys. J., 1997, 72(3), p. 1234-1246.

68. Gisma J., Ried C. Do band 3 protein conformational changes mediated shape changes of human erythrocytes? Mol. Membr. Biol., 1995, 12(3), p. 247-254.

69. Hanch C., Fujita T. J. Am. Chem. Soc., 1964, 86, p.1616.

70. Hanch C., Leo A. Fundamentals and applications in chemistry and biology. American Chemical Soc.,DSc, 1995, 557p.

71. Hasler C.R., Owen G.R., Brunner W., Reinhart W.H. Echinocytosis induced by haemodialysis. Nephrol. Dial. Transplant., 1998, 13(12), p. 3132-3137.

72. Hensley K., Howard B.J., Carney J.M., Butterfield D.A. Membrane protein alteration in rodent erythrocytes and synaptosomes due to aging and hyperoxia. BBA, 1270(2-3), 1995, p.203-206.

73. Hochman Y., Zakim D. Evidence that UDP-glucuronyl-transferase in liver microsomes at 37°C is in a gel phase lipid environment. J. Biol. Chem., 1983, 258, p. 11758-11762.

74. Isomaa В., Paatero G. Shape and volume changes in rat erythrocytes induced by surfaca-active alldltrimethylammonium salts and sodium dodecyl sulphate. BBA, 647,1981, p.211-222.

75. Isomaa В., Hagerstrand H., Paatero G. Shape transformation induced by amphiphiles in erythrocytes. BBA, 899,1987, p.93-103.

76. Karnovsky M.J., Kleinfeld R.L., Hoover R.L., Klausner R.D. The concept of lipid domains in membranes. J. Cell Biol., 1982, 94, p. 1-6.

77. Katoch R., Trivedi G.K., Phadke R.S. l-2-hydroxy-3-octadecan-l'-oate.propyl-2",2",5",5"-tetramethylpyrolidine-N-oxyl-3"-carboxylate as a potential spin probe for membrane structure studies. Bioorg. Med. Chem., 1999,12,p.2753-2758.

78. Katoch R., Trivedi G.K., Phadke R.S. A novel steroidal spin label forimembrane structure studies: synthesis and applications. Steroids, 1999, 64(12), p.849-855.

79. Kaul P., Sidhu H., ThindS.K., Sharma S.K., Nath R. Vitamin B6 deficiency and galactose induced alteration in morphology and osmotic fragility of rat erythrocytes. Scanning Microsc., 1995, 9(4), p. 1127-1135.

80. Kornberg R.D., McConnell H.M. Inside-outside transition of phospholipids in visicle membranes. Biochemistry, 10(7), 1971, p. 11111120.

81. Kroes J., Ostwald R., Keith A.D. Erythrocyte membranes compression of lipid phases by increased cholestero content. BBA, 274(1), 1972, p.71-74.

82. Kury P.G., Ramwell P.W., McConnell H.M. The effect of prostaglandins El and E2 on the human erythrocyte as monitored by spin labels. BBRS, 1974, 56, p.478-483.

83. Kury P.G., McConnell H.M. Regulation of membrane flexibility in human erythrocytes. Biochemistry, 1975, 14(13), p.2798-2803.

84. Kuznetsov A.N., Wasserman A.M., Volkov A.V., Korst N.N. Chem. Phys. Letters, 1971, v. 12, p.103.

85. Lagerberg J.W., Williams M., Moor A.C., Brand A., van der Zee J., i Dubbelman T.M., van Steveninck J. The influence of merocyanine 540 and 1 protoporphyrin on physicochemical properties of the erythrocyte memebrane. BBA, 1996,1278(2). p. 247-253.

86. Lieb W.R., Stein W.D. Non-stokesian nature of transverse diffusion within human red cell membranes. J. Membrane Biol., 1986, 92, p. 11-119.

87. Liu S.-C., Derick L.H., Palek J. Visualisation of the hexagonal lattice in the erythrocyte membrane skeleton. J. Cell Biol., 1987,104, p. 527-536.

88. Lowry B.O., Rosebrough N., Farr A., Randall R. Protein measurement with the folin phenol reagent. The J. Biologycal Chemistry, 1951, 193(1), p. 265.

89. Malheiros S.V., Brito M.A., Meirelles N.C. Membrane effects ofitrifluoperazine, dibucaine and praziquantel on human erythrocytes. Chem. Biol. Interact., 2000, 126(2), p. 79-95.

90. Mark M., Walter R., Harris L.G., Reinhart W.H. Influence of parathyroid hormone, calcitonin, l,25(OH)2 cholecalciferol, calcium and calcium ionophore A23187 on erythrocyte morphology and blood viscosity. J. Lab. Clin. Med., 2000, 135(4), p. 347-352.

91. McConnell H.M. Molecular motion in biologycal membranes. "Spin label. Theory and Appl." New York e.a., 1976, p. 525-571.

92. Moore D.J., Sills R.H., Mendelsohn R. Conformational order of specific , phospholipids in human erythrocytes: correlation with ganges in cell shape. Biochemistry, 1997, 36(3), p. 660-664.

93. Morrisett J.D., Drott H.R. Oxydation of the sulfhydryl and disulfide groups by the nytroxyl radical. J. Biol. Chem., 1969, 244(18), p.5083-5084.

94. Nagasawa T. Deformation of transforming red cells in various pH solution. Experientia 1981, 37(9), p.977-978.

95. Nakao M. In: Cellular and molecular biology of erythrocytes. Tokio, 1974, p.35. (57МД)

96. Neiman M.B., Rosantsev E.G., Mamedova Yu.G. Nature, 196, 1962, p.472.

97. Penniston J.T., Beckett L., Bentley D.L., Hanch C. Passive permeation of t organic compounds through biological tissue: a non-steady-stat theory. ' Mol. Pharmacol., 1969, 5, p. 333-341.

98. Pezeshk A., Derick Dalhouse A. Vitamin E, membrane fluidity, and blood pressure in hypertensive and normotensive rats. Life Sci., 2000, 67(15), p.1881-1889.

99. Racker E. A new procedure for the reconstitution of biologicallyactive phospholipid vesicles. Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1973. -vol.55-p.224-230.

100. Reinhart W.H., Wyss E.J., Arnold D., Ott P. Hereditary spherocytosis associated with protein band 3 deffect in a Swiss kindred. Br. J. Haematol., 1994, 86, p. 147-155.

101. Rousselet A., Guthmann C., Natricon J., Bienvenue A. Study of the transverse diffusion of spin labeled phospholipids in biological membranes of human red blood cells. BBA, 426,1976, p.357-371.

102. Schrier S.L., Zachowski A., Devaux P.F. Mechanisms of amphipath -induced stomatocytosis in human erythrocytes. Blood, 1992, 79(3), p. 782786.

103. Seigneuret M., Zachowski A., HermannA., Devaux P.F. Asymmetric lipid fluidity in human erythrocyte membrane: new spin-label evidence. , Biochemistry, 1984,23, p.4271-4275.

104. Seeman P. The membrane actions of anesthetics and tranquilizers. Pharmacol. Rev., 1972, 24, p. 583-655.

105. Sheetz M., Singer S. Biologycal membranes as bilayer couple. A molecular mechanism of drug-erythrocyte interaction. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1974, v.71 p. 4457-4461.

106. Sheetz M.P., Singer S.J. Equilibrium and kinetic effects of drugs on the shape of human erythrocytes. The J. of Cell Biol., 1976, 70, p.247-251.

107. Stein W.D. Permeability for lipophylic molecules// Membrane transport. Ed. Bouting S.L., de Pont J.J.H.H.M. Elsevier. North-holland Biomedical. New-York, 1981, p. 1-28.

108. Suwalsky M., Ungerer В., Villena F., Norris В., Cardenas H., Zatta P. > Interaction of Al(acac)3 with cell membranes and model phospholipid bilayers. J. Inorg. Biochem., 1999, 75(4), p. 263-268.

109. Taylor A.M., Watts A. Spin-label studies of lipid-protein interaction with reconstituted band 3? the human erythrocyte chlorid-bicarbonate exchanger. Biochem. Cell Biol., 1998, 76(5), p.815-822.

110. Tilley L., Gribier S., Roelofsen В., Op den Kamp J.A.F., Van Deenen L.L.M. ATP-dependent translocation of aminophospholipids across the human erythrocyte membrane. FEBS Lett., 1986,194, p. 21-27.

111. Timoffeev B.P., Poluyanovsky O.L., Volkenstein M.V., Lichtenstein A.S. Mobility of the paramagnetic label bound by aspartate aminotransferase. BBA, 1970, 220, p.357-360.

112. Truong H.T., Deleke D.L., Huestis W.H. Dithiothreitol stimulates the activity of the plasma membrane aminophospholipid translocator. BBA, 1993,1150, p. 57-62.

113. Truong H.T., Deleke D.L., Huestis W.H. Human erythrocyte shape regulation: interaction of metabolic and redox status. 1993,1150, p. 51-56.

114. Turchetti V., De Matties C., Leoncini F., Trabalzini L., Guerrini M., Forconi S. Variations of erythrocyte morphology in different pathologies. Clin. Haemorheol. Microcirc., 1997, 17(3), p. 209-215.

115. Udden M.M. Rat erythrocyte morphological changes after gavage dosing with 2-butoxyethanol: a comparison with the in vitro effects of butoxyacetic acid on rat and human erythrocytes. J. Appl. Toxicol., 2000, 20(5), p. 381-387.

116. Vitala J., Jamefelt J. The red cell surface revisited. TIBS, 1985, 10, p. 392-395.

117. Verkleij A.J., Zwaal R.F.A., Roelofsen В., Comfurius P., Kastelijn D., 1 Van Deenen L.L.M. The asymmetric distribution of phospholipids in the human red cell membrane. BBA, 1973, 323, p. 178-193.

118. Williamson P., Antia R., Schlegel R.A. Maintenance of membrane phospholipid asymmetry. FEBS Lett., 1987, 219, p. 316-320.

119. Witt W., Gercken G. Modification of phospholipids in erythrocyte membranes by phospholipase D. A fluorescence and ESR spectroscopic study. BBA, 862,1986, p. 100-110.

120. Zachowski A., Favre E., Gribier S., Herve P., Devaux P.F. Outside-inside translocation of aminophospholipids in the human erythrocyte membrane is mediated by a specific enzyme. Biochemistry, 1986, 25, p. 2585-2590.

121. Zachowski A. Phospholipids in animal eukaryotic membranes: transverse asymmetry and movement. Biochem. J., 1993, 294, p. 1-14.

122. Zuvic-Butorac M., Muller P., Pomorski Т., Libera J., Herrmann A., Schara M. Lipid domains in the exoplasmic and cytoplasmic leaflet of the human erythrocyte membrane: a spin label approach. Eur. Biophys. J., 1999, 28(4), p. 302-311.

123. Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика. М.: Мир, 1991, 544с.