Особенности углеводно-энергетического обмена костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте

Чудинов, Александр Николаевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Особенности углеводно-энергетического обмена костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Особенности углеводно-энергетического обмена костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте"

На правах рукописи

ЧУДИНОВ АЛЕКСАНДР НИКСМ

ОСОБЕННОСТИ УГЛЕВОДНО-ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО

ОБМЕНА КОСТНЫХ ТРАНСПЛАНТАТОВ ПРИ ЗАМЕЩЕНИИ ДЕФЕКТОВ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

03.00.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Махачкала - 2006

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Дагестанская государственная медицинская академия» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации.

Научный руководитель: доктор медицинских наук,

профессор Нагнев Э.Р.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор ,

Исмаилов Э.Ш.

доктор биологических наук, доцент Клнчханов Н.К.

Ведущая организация: Государственное образовательное

учреждение высшего профессионального образования «Дагестанский государственный педагогический университет»

Защита диссертации состоится «27» декабря 2006 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета К 212.053.12 в Дагестанском государственном университете, на биологическом факультете по адресу: 367000, г. Махачкала, ул. Батырая, 4.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Дагестанского государственного университета (367000, г. Махачкала, ул. Батырая, 1).

Автореферат разослан «17» ноября 2006 г.

Отзыв, заверенный печатью, просим направить по адресу: 367025,

г. Махачкала, ул. Гаджиева, 43а, Дагестанский государственный университет, биологический факультет.

Учеьый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук,

профессор Г ' Магомедоза М.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Выяснение биохимических механизмов резистентности организма к критическим состояниям представляет собой важную медико-биологическую проблему, К таким состояниям, в частности, относится и трансплантация органов и тканей, которая является актуальной проблемой современной биологии и медицины (Касавина и др., 1992; Ильин, 1994; Петров, 2006; Komerik et al., 2005; Ioannidou, 2006).

Остается дискуссионным и вопрос о способности костных трансплантатов стимулировать репарагшвные процессы, что имеет важнейшее значение для прогнозирования, а также разработки эффективных мер устранения различных дефектов, в том числе часто встречающихся дефектов нижней челюсти (Радкевич и др., 2001; Кузнецова, 2004; Kudoetal, 1996; Leroukel et al., 2004).

Следует отметить, что о состоянии трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в основном судили путем клинических наблюдений, рентгенологических и морфологических исследований репа-ративных процессов костной ткани (Плотников, 1986; Bloometdi, 1995; Joshi, 2004). Что же касается метаболизма в самом трансплантате, биохимических превращений, лежащих в основе морфологических и функциональных процессов, протекающих в пересаженной костной ткани, то эти вопросы до настоящего времени исследованы недостаточно. Вместе с тем, состояние обмена самого трансплантата, его энергетические ресурсы и ферментные системы, во многом определяющие его жизнеспособность и обеспечивающие сложный процесс приживления и перестройки пересаженной кости, сказываются на конечном результате трансплантации и позволяют судить об ее эффективности (Лаврищева и др., 1992; Ткачук и др., 2002; Lansi et al., 2005).

Знание ключевых биохимических реакций, обеспечивающих протекание в костной ткани нормальных физиологических процессов, дает значительные преимущества при оценке жизнеспособности трансплантатов. Они позволяют в полной мере охарактеризовать степень приживления или гибели и вскрыть механизмы перестройки трансплантата (Петрович и др., 1994; Ермакова и др., 2004; Prats et al., 2005). ' Углеводно-энергетический обмен занимает центральное место в клеточном метаболизме живого организма Любой биосинтетаческий и ка-таболический процесс сопровождается, соответственно, затратой и выработкой энергии.

Гликоген н глюкоза являются одними из основньех источников энергии, необходимых тканям для осуществления их жизненных функций. При их аэробном и анаэробном превращении образуются макроэргиче-ские соединения, обеспечивающие энергетические и пластические потребности клетки (Северин, 2003; Rake et al., 2006). Поэтому весьма важно изучение динамики содержания гликогена и глюкозы, активности ферментов их превращений в регенерирующих тканях в условиях трансплантации. Интерес к этой проблеме еще более усиливается при трансплантации костной ткани, так как при этом нарушается углеводный обмен, создаются неблагоприятные условия для использования и утилизации гликогена и глюкозы, как для энергетических, так и пластических целей (Строев, 2002; Пронченко и др., 2005; Koike et al., 2005).

Исходя из изложенного, изучение ключевых показателей углеводного обмена в сочетании с важнейшими макроэргическими фосфатами (АТФ, креатинфосфат) представляется весьма актуальным при трансплантации костной ткани. Вместе с тем, в доступной литературе мы не обнаружили работ, посвященных комплексному исследованию изученных показателей углеводно-энергетического обмена в различных по виду костных трансплантатах.

Цель исследования. Изучить особенности биохимических механизмов жизнеобеспечения репаративной регенерации в различные сроки после трансплантации костной ткани на основе анализа комплекса показателей углеводно-энергетического обмена.

Задачи исследования.

1. Определить содержание гликогена, глюкозы, креашнфосфагга, АТФ, АДФ, АМФ, неорганического фосфата, молочной кислоты в динамике после трансплантации губчатой костной ткани.

2. Изучить активность ключевых ферментов обмена углеводов (амилазы, фосфорилазы, гексокиназы) в динамике после трансплантации губчатой костной ткани.

3. При модельных условиях эксперимента исследовать комплекс показателей углеводно-энергетического метаболизма в различные сроки после трансплантации компактной костной ткани.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Процесс перестройки костных трансплантатов приводит к значительным изменениям исследуемых биохимических показателей в зависимости от вида пересаженной кости (губчатая или компактная). При этом нарушения в трансплантате из компактной кости наиболее резко выражены.

2. В костных трансплантатах независимо от их вида в течение первого месяца повышается содержание глюкозы и гликогена; резко снижается активность пусковых ферментов нх превращений — гексокина-зы и амилазы. В отличие от компактной, в губчатой кости к 60 суткам содержание гликогена и глюкозы, а также активность исследуемых ферментов нормализуются и достигают контрольных величин.

3. В тканях трансплантатов из губчатой и компактной костной ткани происходит существенное снижение количества креатинфосфата, неорганического фосфата, молочной кислоты, причем оно наиболее резко выражено спустя 30 суток после операции пересадки.

Научная новизна. В работе впервые изучены особенности углеводно-энергетического метаболизма, происходящие в различных по характеру и виду костных трансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти.

Получены новые данные о содержании гликогена, глюкозы, креатинфосфата, неорганического фосфата, молочной кислоты в интактной кости и при трансплантации губчатой и компактной костной ткани в различные сроки после пересадки, имеющие существенное значение для определения жизнеобеспечения репаративных процессов в пересаженной костной ткани.

Обнаружены специфические особенности изменения активности гек-сокиназы и амилазы в компактной и губчатой костной ткани животных в процессе трансплантации.

Теоретическая и практическая значимость. Полученные данные расширяют наши представления о биохимии трансплантологии. Разработан и обоснован комплекс биохимических показателей, который может бьпъ использован как эффективный тест-критерий состояния энергетических систем жизнеобеспечения костных трансплантатов и оценки жизнеспособности пересаженной костной ткани в динамике трансплантации. Впервые изучены и установлены параллели между биохимическими показателями и рентгенологическими и морфологическими изменениями в эксперименте, свидетельствующие о том, что исход трансплантации зависит от вида и характера трансплантата.

Полученные в диссертации результаты используются в учебном процессе Дагестанской медицинской академии при чтении лекций по клинической биохимии и хирургической стоматологии. Результаты работы вошли в учебное пособие Э.Р. Нагиева «Биохимия тканей полости рта» (утверждено УМО РФ, Москва, 2005 г), которым студенты пользуются на практических занятиях по одноименному спецкурсу.

Апробация работы. Результаты работы докладывались и обсуждались на: международной научной конференции «Биохимия-Медицине» (Махачкала, 2002); Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии» (Томск, 2004); 3-й Республиканской научно-практической конференции «Новые технологии в медицине» (Махачкала, 2005); научной конференции Российского государственного медицинского университета (Москва, 2006); международной научной конференции «Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы» (Махачкала, 2006); международной научной конференции «Современные проблемы адаптации и биоразнообразия» (Махачкала, 2006).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 работ, две статьи находятся в печати.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, разделов: обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения и выводов. Библиографический указатель литературы содержит 216 источников, в том числе 117 авторов из стран СНГ и 99 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 123 страницах, содержит 17 таблиц и 22 рисунка.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования проводили на 84 половозрелых беспородных собаках в возрасте 5-6 лег, массой 10-15 кг- В искусственно созданный дефект в области тела нижней челюсти пересаживался аутотрансплантант из компактной или губчатой костной ткани.

В качестве трансплантата компактной кости использовали кортикальную пластинку тела нижней челюсти, взятую во время создания искусственного дефекта, а в качестве губчатого трансплантата - гребень подвздошной кости.

Операцию пересадки костной ткани проводили с соблюдением всех основных правил асептики и антисептики (Робустова, 2001).

Содержание гликогена и глюкозы определяли в безбелковом фильтрате колориметрическим методом (Вилкова, 1985). Содержание гликогена определяли по количеству образующейся после его гидролиза глюкозы и выражали в мг%. Количество глюкозы определяли по кривой, построенной на основании данных фотометрирования стандартных растворов глюкозы, и также выражали в мг%.

Креатинфосфат определяли по нарастанию неорганического фосфата в кислой среде в присутствии молибдата аммония и выражали в мкмоль на 1 г псани (Алейникова и др., 2000). Содержание неорганического фосфата определяли по Фиске-Суббароу, с заменой эйконогена аскорбиновой кислотой (Скулачев, 1962) и выражали в мкмоль на 1 г ткани.

Содержание молочной кислоты определяли в лактатдегирогеназной реакции по образованию НДДН2 и выражали в мкмоль на 1 г ткани (Ещенко, 1988).

Активность амилазы определяли, как описано у Березова и соавт. (1976) и выражали в мг гидролизованного крахмала на 1 г ткани/час (общая активность) и на I мг белка/час (удельная активность). Активность фосфо-рилазы определяли в фильтрате по убыли неорганического фосфата (Скулачев, 1962). Фосфорилазную активность выражали до количеству связываемого при расщеплении гликогена неорганического фосфора в мкг на 1 г ткани и на 1 мг белка за 1 час инкубации. Активность гексокнназы определяли по Лонгу (Шпигель, 1975) и выражали в мкг фосфорилированной за 20 мин инкубации глюкозы на 1 г ткани и на 1 мг белка.

Содержание АТФ и других адениловых нуклеотидов определяли методом хроматографии на бумаге (Сытинский, 1956) в модификации кафедры биохимии животных Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова. Количество отдельных нуклеотидов рассчитывали в мкмоль на 1 г ткани, используя молярные коэффициенты экстинции.

Белок определяли по Лоури и микробиуретовым методом (Кочетов, 1980). Статистическую обработку проводили с использованием базовой компьютерной программы «Вюкгайэика» и методом малой выборки по Меритерию Стьюдеита. Корреляционный анализ проводили при помощи коэффициента корреляции - г (Гланц, 1999; Реброва, 2002).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1, Биохимические изменения в трансплантате из губчатой костной ткани

Проведенные исследования показали, что максимальное повышение содержания гликогена отмечается через 30 суток после трансплантации, . составляя более 160% от контроля (табл.' 1).

Однако в последующем повышение количества гликогена прекращается и отмечается тенденция к его снижению. Так, к 45 суткам после трансплантации количество гликогена составляет 121% от контроля, а через 60 суток практически не отличается от контрольных показателей.

Динамика содержания глюкозы в трансплантате из губчатой кости характеризуется принципиально теми же закономерностями, какие характерны для изменений содержания гликогена. Как видно из данных табл.1, волна резкого повышения содержания глюкозы спустя 30 суток после трансплантации (172% от контроля) сменяется снижением ее количества в последующие сроки наблюдений и постепенным возвращением к величинам, характерным для контроля (60 суток).

Таблица 1

Изменения содержания (мг %) гликогена и глюкозы в трансплантате из губчатой костной ткани (М±т;п= 10-15)

№ Состояние животных Гликоген Глюкоза

1 Контроль 0,34 ±0,02 0,118*0,007

2 Сутки после трансплантации 30 суток 0,55±0,04** 0,203«,007**

3 45 суток 0,41 ±0,02* 0.143±0.012

4 60 суток 0,35±0,02 0,129±0,009

Примечание. Здесь и далее р - достоверность различий; - *р <0,05; **р < 0,01; *** р< 0,001 по отношению к контролю. В контролях п = 15, в остальных случаях п — 10.

Таким образом, сложный процесс приживления трансплантата губчатой костной ткани характеризуется значительным накоплением в его тканях углеводных энергетических ресурсов - гликогена и глюкозы. Лишь в более поздний период трансплантации наблюдается интенсивная тенденция к нормализации этих показателей, завершающаяся полностью к 60 суткам после пересадки.

Для оценки эффективности трансплантации важно исследование активности ферментов превращения гликогена и глюкозы - амилазы и фосфорилазы для гликогена и гексокиназы для глюкозы.

При модельных условиях эксперимента мы определяли активность фосфорилазы, как в интактной костной ткани, так и в различные сроки после ее пересадки в дефект тела нижней челюсти.

, Ни в одном из этих случаев не удалось обнаружить с достаточной степенью достоверности активность фосфорилазы в трансплантатах из губчатой и компактной кости условиях аутопластики.

Вероятно, это связано либо малым содержанием фермента в исследуемых тканях, либо трудностью её извлечения из костной ткани, или наличием веществ, тормозящих активность фермента. Последнее обстоятельство следует постоянно принимать во внимание, ибо в экстремальных условиях пересадки ткани, такое ингибирование приобретает особое значение. Несомненно, эти вопросы требуют своего дальнейшего разрешения. Во всяком случае, полученные нами данные позволяют заключить, что при перестройке костных тканей в условиях их трансплантации, основное внимание для расшифровки судьбы гликогена следует обратить на амилопитический путь его распада, катализируемый ферментом амилазой. Это согласуется с мнением и ряда других авторов ("Горбенко, 1987;Con et al., 1983; Prats et al., 2005), указывающих на эту особенность обмена костной ткани.

Таблица 2

Изменения активности амилазы (в мг гидролизованного крахмала) в трансплантате из губчатой костной ткани (M±m;n= 10-15)

№ Состояние животных Ферментативная активность

па 1 г ткани на 1 мг белка

1 Контроль 7,20*0,28 0,28640,019

2 Сутки после трансплантации 30 суток 4,92±0,16*** 0,223±0Г017*

3 45 суток 5,70±0.19+* 0,264±0t018

4 60 суток 6,55±0ДЗ 0,284±0,019

Согласно полученным данным (табл. 2), в трансплантате из губчатой кости через 30 суток общая активность амилазы достоверно снижается и составляет примерно 68% от контроля. В последующие сроки наблюдений наступает постепенная нормализация ферментативной активности, которая спустя 60 суток после трансплантации достигает величин, характерных для контрольной труппы животных.

Аналогичная картина имеет место и в отношении удельной активности фермента, рассчитанной на 1 мг белка в час. Правда, здесь динамика несколько сглажена по сравнению с изменениями общей активности, ко описанная выше тенденция закономерна.

При анализе активности амилазы и её сопоставлении с изменениями содержания гликогена обращает внимание следующая закономерность.

К-ль

30 с

45 с

60 с

□ Гликоген ВАМ на 1 мг белка ШАМ на 1 г ткани

Сутки после трансплантации

Рис. 1. Изменения (в % к контролю) содержания гликогена и активности амилазы (АМ) в трансплантате губчатой костной ткани.

К-ЛЬ

30 С

45 с

60 с;

10Глюкоза ВГК на 1 мг белка ПГК на 1 г ткани □ Пактах

■■1

' Сутки после трансплантации

Рис. 2. Изменения (в % к контролю) содержания глюкозы, лактата и активности гексокиназы (ГК) в трансплантате губчатой костной ткани

Изменения активности фермента и содержания его субстрата - гликогена обратно зависимы (рис. 1), отмечается сильно выраженная обратная корреляция (г = -0,96). В сроки повышенного содержания в тканях гликогена активность фермента угнетена и наоборот - высокая активность фермента сопровождается снижением уровня полисахарида в трансплан-таге. Причем исходное содержание гликогена в трансплантате наблюдается лишь тогда, когда устанавливается и исходная активность фермента.

В связи с этим, представлял интерес и судьба второго, взаимосвязанного с гликогеном углеводного ресурса костной ткани, - глюкозы. Здесь ключевые механизмы ее использования осуществляет фермент гексокиназа, роль которого тем более возрастает, что амилолитичес-кий распад гликогена приводит к высвобождению глюкозы, нуждающейся в фосфорилировании для дальнейшего вовлечения её в метаболические процессы (Ткачук и др., 2002; Robert! et al., 2003).

Из данных таблицы 3 следует, что через 30 суток после трансплантации общая активность гексокиназы (на 1 г ткани) достоверно снижается, составляя всего лишь 56% от контроля. Через 45 суток после трансплантации активность фермента возрастает по сравнению с предыдущим сроком исследования, составляя 76% от контрольных данных. К 60 суткам после трансплантации гексокиназная активность полностью восстанавливается, существенно не отличаясь от активности фермента в интакг-ной губчатой костной ткани.

Таблица 3

Изменения активности гексокиназы (мкг фосфорилированной глюкозы) в трансплантате из губчатой костной ткани (М±т;п = 10-15)

№ Состояние животных Ферментативная активность

на 1 гткани на 1 мг белка

1 Контроль 153,3*9,68 7,73±0,27

2 Сутки после трансплантации 30 суток 85,1 ±5.90*** 5,29*0,22***

3 45 суток 11б,03±11,46* 7,04±(Ш

4 60 суток 152,9 ±9,12 7,65±0Д5

Подобная же закономерность, но несколько менее выраженная обнаруживается и при расчете активности гексокиназы на 1 мг белка.

Таким образом, и в отношении глюкозы, как и в отношении гликогена, отмечается выраженная обратная корреляция динамики её содержания и пускового фермента метаболических превращений гексокиназы (г = -0,93).

В обоих случаях накопление энергетических субстратов объясняется резким угнетением ферментативных систем трансплантата, обеспечивающих превращение и использование этих важнейших энергетических и пластических ресурсов и, вследствие этого, резким угнетением жизнеспособности пересаженной ткани.

Вместе с тем в условиях аутопластики губчатой кости такое угнетение сравнительно непродолжительно и спустя 45 суток наступает восстановление нарушенных систем, активирование процессов использования энергетических углеводных ресурсов с восстановлением активности соответствующих ферментов и нормализацией фермент-субстратных отношений. При транс плантации губчатой кости к 60 суткам эти взаимоотношения полностью восстанавливаются, углеводные субстраты, и активность ключевых ([)ерментов их превращений нормализуются, свидетельствуя о восстановлении жизнеспособности перестроенной ткани и являясь критерием такого восстановления.

Окисление гликогена и глюкозы в анаэробных условиях ведут к образованию молочной кислоты. Результаты исследований содержания молочной кислоты в процессе перестройки трансплантата (табл. 4), свидетельствуют, что спустя 30 суток после трансплантации ее уровень достоверно снижается до 78% по отношению к контролю. В дальнейшем содержание лактата повышается по сравнению с предыдущим сроком исследования и к концу 60 суток практически мало отличается от контроля.

Таблица 4

Изменения содержания лактата (мкмоль на 1 г ткани) в трансплантате из губчатой костной ткани в динамике после пересадки (М±ш;п= 10-15)

№ Состояние животных Молочная кислота (лактат)

1 Контроль 4,51 ±0,22

2 Сутки после -трансплантации 30 суток 3,53 ±0,14**

3 45 суток 3,99 ±0,17

4 60 суток 4,46 ±0,20

Следует отметить, что четкие и закономерные изменения в трансплантате из губчатой костной ткани наблюдаются в отношении всех исследуемых компонентов анаэробного гликолиза - глюкозы, гексокина-зы.и молочной кислоты (рис. 2). Так, в частности, повышение содержания глюкозы коррелируют с угнетением гексокиназной активности (г = -0,93) и снижением количества молочной кислоты (г = -0,94).

В то же время между активностью гексокиназы и содержанием лак-тата наблюдается сильно выраженная прямая корреляция (г = 0,99).

Наряду с проведенными исследованиями, представлял существенный интерес, как указанные изменения сказываются на содержании и образовании универсальных источников энергии в тканях - АТФ и креа-тинфосфата, тем более что описанные выше превращения имеют прямое отношение к продукции высокоэнергетических лабильных фосфатов в тканях (Скулачев, 1999; Laver el al., 2001).

Как известно, энергия, освобождающаяся на промежуточных этапах окисления углеводов, аккумулируется в макроэргических связях молекул АТФ и некоторых других соединений и при посредстве аденило-вой системы переключается на нужды пластического и функционального обменов (Ленинджер, 1985; Schräm, 1994).

Содержание АТФ и её аналогов определяли как в интактной костной ткани, так и после трансплантации. Следует отметить, что ни в одном из этих случаев использованными нами методами нам не удалось обнаружить с достаточной степенью достоверности ни АТФ, ни её аналогов. Кроме того, для уточнения этого факта были проведены дополнительные контрольные исследования. В гомогенат костной ткани добавляли стандартные препараты АТФ, АДФ и АМФ фирмы Теанал" из расчета 2-3 мг на 100 г ткани и затем по указанным выше методикам проводили биохимические исследования. Во всех случаях использованными методами в костных гомогекатах были обнаружены АТФ и другие адениннуклеотиды в соответствующих количествах. Эти данные согласуются с данными литературы (Шварц и др., 1992; Rodwell, 2003) в которых так же не обнаружены адениловые нуклеотиды ни в здоровой костной ткани, ни при ее патологическом состоянии.

В связи с этим, мы пришли к выводу, что в костной ткани, в отличие от других тканей организма, функцию хранения и универсального поставщика энергии выполняет не столько АТФ, сколько креатинфосфат. Тем более, как это вытекает из полученных нами данных и данных литературы, содержание креатинфосфата в костной ткани (и компактной и губчатой) существенно превышает его содержание в других органах и тканях (Потапенко, 1983; Васильева и др., 2004; Laver et al., 2001; Нал Bao et al., 2002).

В процессе перестройки трансплантата содержание креатинфосфа- ■ та претерпевает существенные изменения (табл. 5). Достоверное снижение содержания КФ до 61% от контроля происходит через 30 суток после трансплантации.

Таблица 5

Изменения содержания (мкмоль на 1 г ткани) креатинфосфата (КФ) и неорганического фосфата (Рн) в трансплантате из губчатой кости (М±т; п = 10-15)

№ Состояние животных КФ Рн

1 Контроль 31,08±1,30 2б2б±55,79

2 Сутки после трансплантации 30 суток 18,93±0,57*** 1991±34154***

3 45 суток 27,95*0,85 2442*48,71*

4 60 суток 30,73±0,66 2607±45,0б

В последующие сроки исследования количество КФ повышается по сравнению с предыдущим сроком, а спустя 60 суток полностью нормализуется и практически не отличается от показателей контрольной группы животных.

Динамика содержания креатинфосфата в тканях трансплантата из губчатой кости в процессе её перестройки свидетельствует, что снижение активности ферментов использования углеводных энергетических ресурсов с накоплением в тканях кости гликогена и глюкозы приводит к дефициту источников энергии, в частности креатинфосфата, а, следовательно, к ограничению возможностей жизнеобеспечения и перестройки трансплантата. Такое нарушение в энергетических системах жизнеобеспечения губчатой кости при трансплантации оказывается временным и непродолжительным, в дальнейшие сроки наблюдений происходит постепенное восстановление содержания креатинфосфата, которое к концу второго месяца полностью завершается, достигая контрольных значений.

В период снижения энергообеспечения костного трансплантата и инактивации пусковых ферментов превращения гликогена и глюкозы, а также угнетения гликолиза в пересаженных тканях, имеет место и сопряженное угнетение процессов минерализации костной ткани, о чем судили по содержанию в них неорганического фосфата.

Содержание неорганического фосфата в динамике после трансплантации претерпевает значительные изменения (табл. 5). Так, спустя 30 суток после пересадки оно снижается до 76% от контроля. В последующие сроки наблюдений (45 и 60 суток после трансплантации) параллельно повышению активности ключевых ферментов утилизации гликогена и глюкозы, нормализации высокого содержания в тканях трансплантата гликогена и глюкозы, повышается и накопление неорганического фосфата.

Все это свидетельствует об усилении интенсивности минерализации перестроечного трансплантата, что является одним из важнейших условий обеспечения его жизнеспособности.

Этот факт подтверждает существующее в литературе мнение о тесном участии гликогена и ферментов гликолиза в процессах минерализации костной ткани, как одном из основных процессов её нормальной жизнедеятельности (Рапопорт, 1976; "Горбенко, 1987; Matin et al., 2003; Cusso et al., 2006).

Полученные данные по содержанию основных энергетических ресурсов (гликогена и глюкозы), динамики активности пусковых ферментов их утилизации; состоянию гликолиза, уровню макроэргических фосфорных соединений и, наконец, минерализации пересаженной кости свидетельствуют, что в процессе перестройки трансплантата губчатой кости восстанавливаются важнейшие углеводно-энергетические параметры жизнеобеспечения вновь восстановленной кости. Это подтверждается и его рентгенологической и морфологической характеристикой в период соответствующих наблюдений.

1. Биохимические изменения в трансплантате из комиактной костной ткаии

Сравнительный анализ показал, что содержание гликогена в компактной кости интактных животных составляет примерно 73%, а глюкозы 75% от его содержания в губчатой костной ткани.

Таблица 6

Изменения содержания (мг%) гликогена и глюкозы в трансплантате из компактной костной ткани (М ±ш; п= 10-15)

№ Состояние животных Гликоген Глюкоза

1 Контроль ОД5±0,02 0,089*0,011

2 Сутки после трансплантации 30 суток 0,45±0,04** 0,175*0,030*

3 45 суток озадоз** ■ 0,143±0,019*

4 60 суток 0,33*0,02* 0,127±0,013*

Содержание гликогена в трансплантате компактной кости спустя 30 суток после пересадки резко возрастает, превышая контроль почти на 80% (табл. 6). В дальнейшем наступает волна снижения содержания гликогена, составляя через 45 и 60 суток после трансплантации соответственно 156% и 132% от содержания гликогена в контрольной группе животных.

Такая характерная динамика содержания гликогена в компактной кости находит объяснение в изменениях активности амилазы в различные сроки после трансплантации (рис. 3).

Сравнительный анализ полученных результатов показал, что общая активность амилазы в компактной кости составляет примерно 40%, а удельная активность около 55% от ферментативной активности в губчатой костной ткани.

Как следует из данных табл. 7, общая активность амилазы после пересадки резко снижается. Так, на 30 сутки она составляет всего 67% от контроля. Через 45 суток после трансплантации активность фермента, хотя и возрастает по сравнению с предыдущим сроком исследований, остается достоверно низкой (71%) по отношению к контролю. По мере увеличения сроков, прошедших после трансплантации, активность амилазы продолжает повышаться, составляя к исходу 60 суток около 87% от контроля.

Принципиально аналогичная закономерность была обнаружена и при расчете удельной активности амилазы на 1 мг белка, но только в этом случае изменения проявлялись менее отчетливо.

Результаты исследований содержания глюкозы в компактной костной ткани в различные сроки после ее трансплантации свидетельствуют (табл. 6), что через 30 суток после пересадки количество глюкозы повышается до 196% от контроля. В дальнейшем происходит существенное снижение ее содержания по сравнению с предыдущим сроком, составляя через 45 и 60 суток после трансплантации соответственно 160% и 142% от показателей контрольной группы животных. Как и содержание гликогена, так и содержание глюкозы в трансплантате из компактной кости не достигают контрольных показателей к завершению экспериментов и остаются достоверно низкими по отношению к контролю даже спустя два месяца после трансплантации.

При сравнении активности гексокиназы отмечается, что она в ин-тактной компактной кости составляет 58% и 53% от ферментативной активности в губчатой кости (при расчете на 1 г ткани и на 1 мг белка соответственно). Общая активность гексокиназы спустя 30 суток после трансплантации достоверно снижается и составляет 47% по отношению к контролю (табл. 7).

Сутки после трансплантации

Рис. 3. Изменения (в % к контролю) активности амилазы (АМ) и гексоки-назы (ГК) в трансплантате компактной костной ткани.

30 45 60

Сутки после трансплантации

В лактат ■ КФ □ Рн

Рис. 4. Изменения содержания (в % к контролю) лактата, креатинфосфата (КФ) и неорганического фосфата (Рн) в трансплантате компактной кости.

Таблица 7

Изменения активности амилазы и гексокиназы в трансплантате из компактной костной ткани

(M±m;n= 10-15)

№ Состояние Амилаза Гексокиназа

животного на 1 г на 1 мг на 1 г на 1 мг

ткани белка ткани белка

1 Контроль 2,8б±0,31 0,156=10,012 88,7±5,66 4,12±0ДЗ

2 Сутки после трансплантации 30 суток 1,91±0,12* 0,Ш±0,007* 41,8*2^5*** 2¿0±0,10***

3 45 суток 2,03±0,14* 0,139*0,008 573±3,58" 3,30*0,17*

4 60 суток 2¿0±0,27 0,147±0,009 69,7±4,14* 3,79*0,19

Затем наступает постепенное нарастание ферментативной активности по сравнению с предыдущим сроком исследования (30 суток). Так, через 45 н 60 суток после трансплантации активность гексокиназы составляет соответственно 60% и 78% от показателей контроля. Подобная тенденция, но сравнительно менее выраженная, отмечается и при расчете активности гексокиназы на 1 мг белка (рис. 4).

Прогрессирующее снижение утилизации гликогена и глюкозы пересаженной костной тканью приводит к заметному снижению в ней лактата как конечного продукта их анаэробных превращений (Северин, 2003; Николаев, 2004; Rogéis et al., 2006).

Количество лактата в интактной компактной кости равно 5,99±0,37 мкмоль г/ткани, превышая на 25% его содержание в губчатой кости. Максимальное снижение уровня лактата после трансплантации компактной кости наблюдается через 30 суток (3,65±0,18 мкмоль/г ткани, или 61 % от контроля). В дальнейшем наступает постепенное повышение содержания молочной кислоты до 4,07±0,23 мкмоль (45 суток) и 4,58*0,29 мкмоль (60 суток), приближаясь к показателям контроля. Однако содержание лактата в трансплантате из компактной кости, в отличие от губчатой, остается достоверно низкой даже спустя два месяца после трансплантации.

Количество креатинфосфата в компактной кости в норме составляет 23,83 ±0,75 мкмоль/г ткани или 77% от его содержания в губчатой кости. В процессе перестройки трансплантата из компактной кости содержание в нем КФ существенно меняется. Так, спустя 30 суток после трансплантации содержание КФ значительно снижается и составляет 54% от контроля.

В дальнейшем снижение количества КФ прекращается и через 45 суток после трансплантации оно повышается до 70% от контроля. Через 60 суток содержание креатинфосфата продолжает приближаться к показателям контрольной группы животных, однако остается достоверно сниженной по отношению к контролю и составляет 19,24±0,71 мкмоль/г ткани.

Количество неорганического фосфата в компактной кости в норме составляет 3192±51,93 мкмоль/г ткани и на 18% превышает его количество в интактной губчатой кости. Спустя 30 суток после пересадки наблюдается достоверное снижение количества Рн в трансплантате компактной кости до 67% от контроля. В более отдаленные сроки исследований (45 и 60 суток после трансплантации) наблюдается тенденция к повышению содержания Рн по сравнению с предыдущим сроком (30 суток). Так, в частости, спустя 45 суток его количество увеличивается до 2330±48,34 мкмоль, а через 60 суток после трансплантации достигает до 2554*51,07 мкмоль, оставаясь, тем не менее, достоверно низкой по отношению к показателям контроля.

Таким образом, весь комплекс изученных биохимических показателей - и содержание основных биоэнергетических субстратов (гликогена и глюкозы), и динамика активности ключевых ферментов их метаболизма, и состояние гликолиза, и уровень макроэргических фосфатов, и, наконец, минерализация пересаженной костной ткани свидетельствует, что в процессе перестройки трансплантата из компактной кости в течении 30 суток наблюдается резкое снижение ее жизнеспособности, а затем наступает постепенная нормализация морфологических и функциональных показателей. Однако, к концу срока наблюдения, через 60 суток после трансплантации компактной костной ткани, в отличие от губчатой, многие биохимические показатели восстановленной кости полностью не нормализуются, что находит подтверждение и в данных рентгенологического и морфологического исследований.

Следовательно, трансплантация из губчатой кости во всех анализированных случаях эксперимента имеет существенные биохимические преимущества по жизнеспособности в сравнении с компактной костной тканью, что следует иметь в виду при выборе материала для трансплантации.

выводы

1. При трансплантации губчатой кости в течение первого месяца в тканях трансплантата происходит накопление гликогена и глюкозы, а в последующие сроки исследований наступает быстрое и интенсивное снижение их содержания, завершающееся нормализацией к 60 суткам.

2. Обнаружено, что в трансплантате компактной кости резко повышено содержание гликогена и глюкозы спустя 30 суток после пересадки, причем более существенно по сравнению с губчатой костной тканью. В отличие от губчатой кости в трансплантате компактной кости нормализации содержания гликогена и глюкозы не происходит даже спустя два месяца после пересадки.

3. Установлено, что в трансплантатах независимо от их вида в течение первого месяца наблюдается резкое угнетение активности пусковых ферментов превращения гликогена и глюкозы - амилазы и гек-сокиназы, причем наиболее выраженное в трансплантате компактной костной ткани.

4. В костных трансплантатах обнаружено существенное снижение содержания молочной кислоты — конечного продукта анаэробного окисления гликогена и глюкозы. В отличие от компактной кости, в трансплантате из губчатой костной ткани содержание молочной кислоты в последующие сроки наблюдений постепенно восстанавливается, достигая к 60 суткам контрольных показателей.

5. В трансплантатах как губчатой, так и компактной кости, имеет место достоверное снижение количества креатинфосфага (30 суток). Причем наименее выражено оно при трансплантации губчатой кости и наиболее резко - при трансплантации компактной костной ткани.

6. Процесс перестройки костных трансплантатов характеризуется резким снижением содержания в них неорганического фосфата. При трансплантации губчатой кости его содержание в более поздние сроки наблюдений (45-60 суток) постепенно нормализуется и через два месяца практически не отличается от контроля. При аутопластике компактной кости падение содержания Рн выражено в большей степени и спустя 60 суток оно не нормализуется.

7. Комплекс изученных биохимических показателей можно использовать как информативный тест-критерий состояния углеводно-энергетических систем жизнеобеспечения костных трансплантатов и для оценки их жизнеспособности на практике.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Чудинов А.Н. Биохимические исследования компактной костной ткани в эксперименте // Сб. научных трудов «Актуальные вопросы здоровья населения Дагестана. — Махачкала: 1995.-С. 130-132.

2. Чудинов А.Н., Гаджиев А.Р. Исследование гексокиназной активности в костных трансплантатах у животных Н Сб. научных трудов «Актуальные вопросы здоровья населения Дагестана. - Махачкала: 1995.-С. 133-136.

3. Чудинов А.Н. Активность амилазы в трансплантате из компактной костной ткани у собак // Материалы межд. научи, конф. «Биохимия -медицине»,- Махачкала: ИПЦ «Полиграф-сервис», 2002. - С. 220-223.

4. Нагиев Э.Р., Чудинов А.Н. Содержание глюкозы и гексокиназная активность костных трансплантатов у собак // Сб. научных трудов ДГМА. -Т. 1, Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2003. - С. 118-120.

5. Нагиев Э.Р., Чудинов А.Н., Сейфадинова М.С, Некоторые биохимические критерии резистентности организма к экстремальным факторам окружающей среды // Сб. научных работ «Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии». - Т.З, № 1, Томск,-2004.-С. 96 - 97.

6. Чудинов А.Н. Содержание макроэргических фосфатов в трансплантате из губчатой костной ткани в различные сроки после пересадки // Материалы Ш-й Республ. научно-практ. конф. «Новые технологии в медицине». - Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2005. - С. 406-407.

7. Чудинов А.Н. Содержание гликогена и активность амилазы в костном трансплантате при замещении дефекта нижней челюсти у собак / «Вестник РГМУ», периодический медицинский журнал. - Москва: ГОУ ВПО РГМУ Росздрава. -2006, № 2 (49). - С. 438.

8. Чудинов А.Н. Исследование некоторых показателей углеводного обмена в костных трансплантатах у собак II Сб. научных трудов респ. научной конф., поев. 90-летию проф. Максудова. - Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2006.-С. 125-129.

9. Нагаев Э.Р., Чудинов А.Н., Дадашев М.Н. Энергетический обмен при критических состояниях организма и его коррекция перфгораном / Периодический журнал «Экология промышленного производства».— Москва: 2006. - вып. 1. - С. 58-61.

10. Чудинов А.Н. Некоторые подходы к медикаментозной коррекции критических состояний // Труды межд. научно-практ. конф. «Фармакология и фармакотерапия». - Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2006. - С. 256-259.

11. Чудинов А.Н. Перспективы трансплантологии костной ткани в медицине // Труды межд. научно-практ, конф. «Фармакология и фармакотерапия. - Махачкала: ИПЦ ДГМА,- 2006. - С. 254-256.

12. Чудинов А.Н, Нагиев Э.Р. Исследование содержания нуклеотидов как важнейшее звено биоэнергетики организма // Труды межд. научн. конф. «Современные проблемы адаптации и биоразнообразия».- Махачкала: Издательский дом «Наука плюс», 2006. - С. 158-160.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АТФ —аденозинтрифосфорная кислота

АДФ - аденозиндифосфорная кислота

АМФ — аденозинмонофосфорная кислота

АТФ-аза - аденозинтрифосфатаза

НАД - окисленный никотинамидадениндинуклеотид

НАДН2 - восстановленный никотинамидадениндинуклеотид

Рн, (НФ) - неорганический фосфат

КФ — креатинфосфат

ЛДГ - лактатдегидрогеназа

АМ - амилаза

ГК - гексокиназа

г - Коэффициент корреляции

Сдано в набор 10.11.06. Подписано в печать 13.11.06. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Печ. л.1,5 Тираж 100. Заказ №146.

Издатсльско-полиграфический центр ДГМА

г. Махачкала, ул. Ш. Алиева,!.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Чудинов, Александр Николаевич

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Особенности строения и состава костной ткани

1.2. Биохимические механизмы минерализации костей

1.3. Регуляция минерализации костной ткани витаминами и гормонами

1.4. Механизм перестройки костной ткани при трансплантации и факторы, влияющие на этот процесс

1.5. Биохимические изменения в костных трансплантатах в различные сроки после их пересадки

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Техника взятия костных трансплантатов и проведение операции их пересадки. Рентгенологические и морфологические исследования.

2.2. Методы биохимических исследований

2.2.1. Определение содержания глюкозы

2.2.2. Определение содержания гликогена

2.2.3. Определение содержания адениловых нуклеотидов

2.2.4. Определение содержания креатинфосфата, неорганического фосфата и молочной кислоты

2.2.5. Определение активности амилазы

2.2.6. Определение активности фосфорилазы

2.2.7. Определение активности гексокиназы

2.3. Статистическая обработка результатов исследований

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1. Изменения в трансплантате губчатой кости в динамике после пересадки

3.1.1. Рентгенологические изменения в трансплантате губчатой кости

3.1.2. Морфологические изменения в трансплантате губчатой кости

3.1.3. Биохимические показатели в трансплантате из губчатой костной ткани в различные сроки после пересадки

3.1.3.1. Изменения содержания гликогена в трансплантате из губчатой кости

3.1.3.2. Изменения содержания глюкозы в трансплантате из губчатой кости

3.1.3.3. Исследование активности фосфорилазы в костных трансплантатах

3.1.3.4. Исследование активности амилазы в трансплантате губчатой кости

3.1.3.5. Изменения активности гексокиназы в трансплантате губчатой кости

3.1.3.6. Определение содержания лактата в губчатом костном трансплантате в норме и динамике после трансплантации

3.1.3.7. Изменения содержания нуклеотидов и креатинфосфата в трансплантате губчатой кости в динамике после пересадки

3.1.3.8. Изменения содержание неорганического фосфата в губчатом костном трансплантате в динамике после трансплантации 77 3.2. Изменения в трансплантате компактной костной ткани в динамике после пересадки

3.2.1. Рентгенологические изменения в трансплантате компактной кости

3.2.2. Морфологические изменения в трансплантате компактной кости

3.2.3. Изменения биохимических показателей в трансплантате компактной костной ткани в динамике после операции пересадки

3.2.3.1. Изменения содержания гликогена и активности амилазы

3.2.3.2. Изменения содержания глюкозы и активности гексокиназы

3.2.3.3. Изменения содержания молочной кислоты

3.2.3.4. Изменения содержания креатинфосфата

3.2.3.5. Изменения содержания неорганического фосфата в динамике после пересадки

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности углеводно-энергетического обмена костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте"

Актуальность проблемы. Выяснение биохимических механизмов резистентности организма к критическим состояниям представляет собой важную медико-биологическую проблему. К таким состояниям, в частности, относится и трансплантация органов и тканей, которая является актуальной проблемой современной биологии и медицины (Касавина и др., 1992; Ильин, 1994; Петров, 2006; Komerik et al., 2005; Ioannidou, 2006). Остается дискуссионным и вопрос о способности костных трансплантатов стимулировать репаративные процессы, что имеет важнейшее значение для прогнозирования, а также разработки эффективных мер устранения различных дефектов, в том числе часто встречающихся дефектов нижней челюсти (Радкевич и др., 2001; Кузнецова, 2004; Kudoetal, 1996; Leroukel et al., 2004). Следует отметить, что о состоянии трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в основном судили путем клинических наблюдений, рентгенологических и морфологических исследований репаративных процессов костной ткани (Плотников, 1986; Bloometdi, 1995; Joshi, 2004). Что же касается метаболизма в самом трансплантате, биохимических превращений, лежащих в основе морфологических и функциональных процессов, протекающих в пересаженной костной ткани, то эти вопросы до настоящего времени исследованы недостаточно. Вместе с тем, состояние обмена самого трансплантата, его энергетические ресурсы и ферментные системы, во многом определяющие его жизнеспособность и обеспечивающие сложный процесс приживления и перестройки пересаженной кости, сказываются на конечном результате трансплантации и позволяют судить об ее эффективности (Лаврищева и др., 1992; Ткачук и др., 2002; Lansi et al., 2005).

Углеводно-энергетический обмен занимает центральное место в клеточном метаболизме живого организма. Любой биосинтетический и катаболический процесс сопровождается, соответственно, затратой и выработкой энергии. Гликоген и глюкоза являются одними из основных источников энергии, необходимых тканям для осуществления их жизненных функций. При их аэробном и анаэробном превращении образуются макроэргические соединения, обеспечивающие энергетические и пластические потребности клетки (Северин, 2003; Rake et al., 2006). Поэтому весьма важно изучение динамики содержания гликогена и глюкозы, активности ферментов их превращений в регенерирующих тканях в условиях трансплантации. Интерес к этой проблеме еще более усиливается при трансплантации костной ткани, так как при этом нарушается углеводный обмен, создаются неблагоприятные условия для использования и утилизации гликогена и глюкозы, как для энергетических, так и пластических целей (Строев, 2002; Пронченко и др., 2005; Koike et al., 2005).

Задачи исследования.

1. Определить содержание гликогена, глюкозы, креатинфосфата, АТФ, АДФ, АМФ, неорганического фосфата, молочной кислоты в динамике после трансплантации губчатой костной ткани.

Основные положения, выносимые на защиту:

2. В костных трансплантатах независимо от их вида в течение первого месяца повышается содержание глюкозы и гликогена; резко снижается активность пусковых ферментов их превращений - гексокиназы и амилазы. В отличие от компактной, в губчатой кости к 60 суткам содержание гликогена и глюкозы, а также активность исследуемых ферментов нормализуются и достигают контрольных величин.

Обнаружены специфические особенности изменения активности гексокиназы и амилазы в компактной и губчатой костной ткани животных в процессе трансплантации.

Впервые изучены и установлены параллели между биохимическими показателями и рентгенологическими и морфологическими изменениями в эксперименте, свидетельствующие о том, что исход трансплантации зависит от вида и характера трансплантата. Полученные в диссертации результаты используются в учебном процессе Дагестанской медицинской академии при чтении лекций по клинической биохимии.

Результаты работы вошли в учебное пособие Э.Р. Нагиева «Биохимия тканей полости рта» (утверждено УМО РФ, Москва, 2005 г), которым студенты пользуются на практических занятиях по одноименному спецкурсу.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Чудинов, Александр Николаевич

ВЫВОДЫ

3. Установлено, что в трансплантатах независимо от их вида в течение первого месяца наблюдается резкое угнетение активности пусковых ферментов превращения гликогена и глюкозы - амилазы и гексокиназы, причем наиболее выражено в трансплантате компактной костной ткани.

4. В костных трансплантатах обнаружено существенное снижение содержания молочной кислоты - конечного продукта анаэробного окисления гликогена и глюкозы. В отличие от компактной кости, в трансплантате из губчатой костной ткани содержание молочной кислоты в последующие сроки наблюдений постепенно восстанавливается, достигая к 60 суткам контрольных показателей.

5. В трансплантатах как губчатой, так и компактной кости, имеет место достоверное снижение количества креатинфосфата (30 суток). Причем наименее выражено оно при трансплантации губчатой кости и наиболее резко - при трансплантации компактной костной ткани.

6. Процесс перестройки костных трансплантатов характеризуется резким снижением содержания в них неорганического фосфата. При трансплантации губчатой кости его содержание в более поздние сроки наблюдений (45-60 суток) постепенно нормализуется и через два месяца практически не отличается от контроля. При аутопластике компактной кости падение содержания неорганического фосфата выражено в большей степени и спустя 60 суток оно не нормализуется.

104

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Как уже указывалось выше, состояние обмена костных трансплантатов, во многом определяющие жизнеспособность и обеспечивающие сложный процесс приживления и перестройки пересаженной кости, сказывается на конечном результате трансплантации и позволяет судить об ее эффективности (Лаврищева и др., 1992; Ткачук и др., 2002; Lansi et al., 2005).

Как известно, углеводно-энергетический обмен занимает центральное место в клеточном метаболизме живого организма. Любой биосинтетический и катаболический процесс сопровождается, соответственно, затратой и выработкой энергии. Гликоген и глюкоза являются одними из основных источников энергии, необходимых тканям для осуществления их жизненных функций. При их аэробном и анаэробном превращении образуются макроэргические соединения, обеспечивающие энергетические и пластические потребности клетки (Северин, 2003; Rake et al., 2006). Поэтому весьма важно изучение динамики содержания гликогена и глюкозы, активности ферментов их превращений в регенерирующих тканях в условиях трансплантации. Интерес к этой проблеме еще более усиливается при трансплантации костной ткани, так как при этом нарушается углеводный обмен, создаются неблагоприятные условия для использования и утилизации гликогена и глюкозы, как для энергетических, так и пластических целей (Строев, 2002; Пронченко и др., 2005; Koike et al., 2005).

Анализ полученных результатов проведенных экспериментальных исследований свидетельствует о том, что аутотрансплантация костной ткани, как губчатой, так и компактной, сопровождается существенными биохимическими, рентгенологическими и морфологическими изменениями в процессе регенерации.

Характерной и закономерной особенностью наблюдающихся посттрансплантационных изменений является прогрессирующее накопление углеводных биоэнергетических субстратов - содержания гликогена, глюкозы, а также, в противовес им, снижение содержания молочной кислоты, креатинфосфата и неорганического фосфата в исследуемых трансплантатах как из губчатой, так и компактной костной ткани.

Вместе с тем следует отметить, что одновременно происходит существенное угнетение активности ключевых ферментов, причем важнейших биокаталитических систем углеводного обмена - амилазы и гексокиназы на первом этапе трансплантации (через 30 суток после операции пересадки), некоторая, но закономерная тенденция к приближению к показателям контрольной группы животных всех исследуемых показателей на втором этапе трансплантации (45 суток после трансплантации) и практически нормализация и возврат к контрольным значениям всех исследуемых биохимических показателей на третьем этапе трансплантации (спустя 60 суток после операции пересадки). Причем достоверная нормализация большинства исследуемых биохимических показателей углеводно-энергетического метаболизма в основном и исключительно характерна для трансплантатов из губчатой костной ткани (рис. 19, 20, 21) по сравнению с биохимическими показателями в трансплантатах из компактной костной ткани в динамике регенерации костных трансплантатов.

Следует отметить, что содержание гликогена и глюкозы в различные сроки после трансплантации подвергаются обратным изменениям по сравнению с активностью ключевых ферментов их метаболических превращений -амилазы и гексокиназы. Так, в частности, спустя 30 суток после пересадки количество гликогена и глюкозы резко повышается по сравнению с контролем, свидетельствуя об ограниченных возможностях костных трансплантатов утилизировать важнейшие энергетические субстраты углеводного обмена вначале после пересадки. В последующие сроки исследования, а именно спустя 45 суток после операции трансплантации намечается тенденция снижения их содержания и, наконец, через 60 суток после пересадки костной ткани количество указанных биосубстратов продолжает снижаться по сравнению с предыдущими периодами наблюдений и практически достигают контрольных значений.

Гликоген -»- AM на 1 мл белка

AM на 1 г ткани

Рис. 19. Изменения содержания гликогена и активности амилазы (AM) в трансплантате из губчатой костной ткани в динамике регенерации (в % к контролю).

Следует подчеркнуть, что обнаруженные биохимические изменения в показателях углеводного метаболизма, а именно глюкозы и гликогена, во многих случаях коррелируют с выявленными изменениями активности пусковых ферментов внутриклеточного метаболизма глюкозы и гликогена -гексокиназы и амилазы (рис. 21).

100 80 60 40 20 0 -20 -40

Гликоген AM на 1 мг белка

AM на 1 г ткани

Рис. 20. Изменения содержания гликогена и активности амилазы (AM) в трансплантате из компактной костной ткани (в % к контролю).

К-ль

30 сут 45 сут 60 сут

ГК на 1 мг белка AM на 1 мг белка

AM на 1 мг белка ВАМ на г ткани

ГК на 1 мг белка ШГКна1гткани

Рис. 21. Изменения активности амилазы (AM) и гексокиназы (ГК) в трансплантате губчатой кости в динамике (в % к контролю). . : " ;."" ' • • •. - : --п.

К-ль 30 сут 45 сут 60 сут Губч.кость КФ —■— Губч.кость НФ Комп.кость КФ Комп.кость НФ

Рис. 22. Изменения содержания креатинфосфата (КФ) и неорганического фосфата (НФ) в костных трансплантатах в динамике (в % к контролю).

Так, в частности, изменения активности фермента амилазы и содержания его субстрата - гликогена обратно зависимы, отмечается сильно выраженная обратная корреляция (г = - 0,96). В сроки повышенного содержания в тканях гликогена активность фермента угнетена и наоборот - высокая ферментативная активность сопровождается снижением уровня полисахарида в трансплантате. Причем исходное содержание гликогена в трансплантате наблюдается лишь тогда, когда устанавливается и исходная активность амилазы.

Вместе с тем хочется отметить, что и в отношении глюкозы, как в отношении гликогена, отмечается выраженная обратная корреляция динамики ее содержания и пускового фермента метаболических превращений глюкозы - гексокиназы. Коэффициент корреляции при этом составляет (г = -0,93). Интересным и закономерным представляется факт, что четкие и принципиальные изменения в костных трансплантатах наблюдаются в отношении всех исследуемых компонентов анаэробного гликолиза - глюкозы, гексокиназы и молочной кислоты (рис.22). Так, например, в трансплантате из губчатой костной ткани повышение содержания глюкозы коррелирует с угнетением гексокиназной активности (г = -0,93) и снижением количества молочной кислоты (г = -0,94).

В то же время между активностью гексокиназы и содержанием лактата наблюдается сильно выраженная прямая корреляция (г = 0,99).

Принципиальным и закономерным является то, что нарушения определяемых показателей углеводно-энергетического метаболизма в компактной костной ткани носят более резко выраженный характер и многие показатели в трансплантате из компактной костной ткани, в отличие от губчатой кости, не достигают контрольных значений даже спустя два месяца после проведения операции трансплантации.

Активность ферментов обмена гликогена и глюкозы претерпевают фазные изменения в зависимости от срока прошедшего после трансплантации, но существенной является тенденция к нормализации амилазной и гексокиназной активности в костных трансплантатах спустя 60 суток после операции пересадки (рис. 21) параллельно с нормализацией содержания гликогена и глюкозы, а также некоторых других исследуемых показателей к этому же сроку наблюдений (рис. 22).

Полученные результаты рентгенологических и морфологических изменений в динамике аутотрансплантации, практически полностью согласуются с изменениями показателей углеводно-энергетического метаболизма в процессе трансплантации. Сравнение, сопоставление и анализ полученных результатов с различных позиций позволяет сделать полезные выводы для практического здравоохранения в плане выработки тактики и стратегии при выборе того или иного вида трансплантационного материала, в частности, при замещениях дефектов нижней челюсти.

Анализ полученных результатов позволяет заключить, что быстрее и совершеннее происходит процесс регенерации при трансплантации губчатой кости в виде костной щебенки.

Таким образом, весь комплекс изученных биохимических показателей - и содержание основных биоэнергетических субстратов (гликогена и глюкозы), и динамика активности пусковых ферментных систем их метаболизма, и состояние гликолиза, и уровень макроэргических фосфорных соединений, и, наконец, минерализация пересаженной костной ткани свидетельствует, что в процессе перестройки трансплантата из компактной костной ткани при замещении дефекта тела нижней челюсти в течение 30 суток наблюдается снижение ее жизнеспособности, а затем наступает постепенная нормализация морфологических и функциональных показателей. Вместе с тем, к концу сроков наблюдений - через 60 суток после трансплантации компактной костной ткани, в отличие от губчатой кости, параметры восстановленной кости полностью не нормализуются, что находит подтверждение и в данных рентгенологического и морфологического исследований. Проведенные исследования показали, что рентгенологические процессы перестройки и замещения пересаженной костной ткани как в условиях трансплантации губчатой, так и компактной костной ткани, протекают принципиально однотипно, в определенной последовательности, независимо от вида и характера трансплантата. Однако в то же время сроки регенерации дефекта существенно зависят от вида и характера трансплантата (губчатая или компактная кость). Морфологические исследования показали, что во всех сериях экспериментов конечным результатом пересадок различных по характеру и виду трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти является резорбция костных осколков и замещение их вновь образованной костной тканью. Однако при пересадках компактной костной щебенки срок регенерации костных дефектов удлиняется по сравнению с аналогичными пересадками при трансплантации губчатой костной ткани.

Следовательно, трансплантация губчатой костной тканью во всех анализированных случаях эксперимента, имеет существенные биохимические преимущества по жизнеспособности и исследованным углеводно-энергетическим показателям, по сравнению с компактной костной тканью, что следует иметь в виду при выборе материала для трансплантации.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Чудинов, Александр Николаевич, Махачкала

1. Аврунин, А.С. Уровни организации минерального матрикса костной ткани и механизмы, определяющие параметры их формирования / А.С. Аврунин, P.M. Тихилов //Морфология. - 2005. - №2. - С. 78-82.

2. Алейникова, Т.Л. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии / Т.Л. Алейникова, Г.В. Рубцова. М.: «Высшая школа». - 2002. - 238 с.

3. Арбуханова, М.С. Исследование содержания креатинфосфата и креатинкиназной активности в тканях животных при тяжелой физической нагрузке //Материалы межд. научной конф. «Биохимия -медицине». Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2002. - С. 17-20.

4. Ашмарин, И.П. Элементы патологической физиологии и биохимии. -М.: Изд-во МГУ, 1992. 192 с.

5. Балаба, Т.Я. Ферментный спектр костной ткани норме и при посттравматической регенерации / Т.Я. Балаба, В.П. Торбенко //Вопросы медицинской химии.- 1979. Т. 16, Вып. 4. - С. 372-376.

6. Бажанов, Н.Н. Костная пластика дефектов нижней челюсти формалинизированными гомотрансплантатами / Н.Н. Бажанов, В. Ф. Парфентьева, Г.П. Тер-Асатуров, A.M. Сигал //Стоматология. 1972. -№6.-С. 37-41.

7. Бажанов, Н.Н. Способ соединения костных фрагментов нижней челюсти и фиксация трансплантатов при восполнении её дефектов / Н.Н. Бажанов, Г.П. Тер-Асатуров //Стоматология. 1982. - № 3. - С. 73-77.

8. Баранова, Е. Н. Ингибирование адениновыми нуклеотидами ДНФ-индуцированного транспорта калия в митохондриях / Е. Н. Баранова, 10.

9. Ю. Скарга, А. Е. Негода, Г. О. Миронова //Биохимия. 2000. - Т. 65, Вып. 2. - С.262-267.

10. Белоус, A.M. Некоторые итоги исследований по репаративной регенерации кости / A.M. Белоус, A.M. Белоус, Е.Я. Панков //Механизмы регенерации костной ткани. М.: Медицина, 1992.- С. 284-294.

11. Березов, Т. Т. Биологическая химия / Т. Т. Березов, Б. Ф. Коровкин. -М.: Медицина, 2002. 704 с.

12. Березов, Т.Т. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. М.: Медицина, 1976. -294 с.

13. Билалова, Т. А. Влияние экзогенного АТФ на сердечную деятельность крыс / Т. А. Билалова, Т. А. Аникина, Ф.Г. Ситдиков, Р. А. Гиниатуллин //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. - Т. 129, № 4.-С. 377-380.

14. Бессонова, С. С. Влияние ретаболила и тиреокалъцитонина на белковый и минеральный обмен костей скелета при переломе нижней челюсти / С.С. Бессонова, Ю.А. Петрович //Стоматология. 1986. -№ I. -С. 8-11.

15. Боровский, Е.В. Терапевтическая стоматология /Е.В. Боровский, B.C. Иванов, Ю.М. Максимовский. М.: «Медицина», - 2001. - 736 с.

16. Бохински, Р. Современные воззрения в биохимии.- М.: «Мир», 1987. -544 с.

17. Бригаднова, J1.J1. Комбинированная вторичная костная ауто- и аллопластика нижней челюсти // Вопросы аллотрансплантации в стоматологии. 1979. - Вып. 11.- С. 101-104.

18. Бышевский, А.Ш. Биохимия для врача / А.Ш. Бышевский, О.А. Терсенов Екатеринбург: ИПП «Уральский рабочий», 1994. - 384 с.

19. Васильева, А.Г., Содержание креатинфосфата и других фосфорорганических соединений в органах и тканях животных /А.Г. Васильева, В.В. Цыбульский. Одесса: ИПЦ ОГМУ. - 2004. - 129 с.

20. Векслер, Я. И. Динамика фосфорсодержащих макроэргических соединений мозга при гипотермии // Вопросы биохимии нервной системы. Киев, 1982.-С. 268-269.

21. Вилкова, В.А. Определение содержания и интенсивности обмена глюкозы и гликогена в тканях. //В кн. Методы биохимических исследований. Л.: Изд-во ЛГУ. - 1988. - С. 234 - 241.

22. Винникова, Н.И. Использование декальцинированного костного матрикса для стимуляции костеобразования после удаления одонтогенных кист / Н.И. Винникова, А.И. Куралесова, Г.Б. Мельникова, Н.С. Филякина //Стоматология. 1991. - № 4. - С. 30-31.

23. Виноградова, Т.Ц. Регенерация и пересадка костей / Т. Ц. Виноградова, Г. И. Лавришева. -М.: Медицина, 1994. 213 с.

24. Воложин, А.И. Исследование свойств биомембран, применяемых в остеопластике с целью направленной регенерации ткани, на модели длительных культур костного мозга /А.И. Воложин, Г.М. Барер, О.О. Янушевич //Стоматология. 2002, № 6. - С. 12-15.

25. Генкин, A.M. О содержании свободного и связанного гликогена в органах животного организма //Биохимия. 1994. - Т. II, Вып. 2. - С. 155167.

26. Гланц Стентон. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. - М., Практика, 1999.-459 с.

27. Грунтовский, Г.Х. Керамопластика дефектов костей / Г.Х. Грунтовский, Н.А. Корж //Ортопедия, травматология и протезирование. 1991. - №12. -С. 38-40.

28. Гулый, М.Ф. К вопросу о характере взаимодействия между ферментом и полисахаридом в фосфорилазной реакции / М.Ф. Гулый, М.К. Коломийченко //Украинский биохимический журнал. 1988. - № 21. - С. 221 -225.

29. Диксон, М. Ферменты: Пер. с англ.- В 3-х т.т. / М. Диксон, Э. Уэбб-М.: Мир.-1982.

30. Дмитренко, Н.П. Внеклеточный аденозинтрифосфат, его источники и влияние на функции клеток животных //Украинский биохимический журнал-1990- Т. 62, № 2. С. 3-12.

31. Евстафьева, Е. В. Методические подходы к изучению адаптации человека в условиях окружающей среды / Е. В. Евстафьева, В. Н. Башкин, Д. Б. Орлинский//Физиология человека.- 1995.-Т. 21, № 1.-С. 135-143.

32. Ермакова, И.П. Остеопороз и остеопатии / И.П. Ермакова, И.А. Пронченко, В.П. Бузулина. М., 2004. - С. 2-5.

33. Ещенко, Н.Д. Определение содержания молочной кислоты в тканях и активности лактатдегидрогеназы в тканях. //В кн. Методы биохимических исследований. Д.: Изд-во ЛГУ. - 1988. - С. 222 - 233.

34. Забродин, B.C. Способ реконструкции просвета полых и трубчатых анатомических структур костной ткани //Морфология. 2003. - Т. 12, № З.-С. 89-90.

35. Загубелюк, Н.К. Отдаленные результаты остеопластики послеоперационных полостей челюсти // Вопросы аллотрансплантации в стоматологии. М.,1979. - С. 50-56.

36. Залозный, Ю.Г. Тканевое дыхание кости в норме // Вопросы ортопедии и травматологии. Киев, 1976. - С. 249-253.

37. Западнюк, И.П. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария, Б.В. Западнюк. Киев: Вища школа, 1983. - 383 с.

38. Зенкевич, Т.Д. Состав кислых мукополисахаридов кости и тканей костной мозоли в процессе регенерации / Т.Д. Зенкевич, Б.С. Касавина //Биохимия. 1982. - Т. 27, № 2. - С. 279-285.

39. Ильин, Л.А. Реалии и мифы Чернобыля. М.: ГЭОТАР - МЕД., 1994. -400 с.

40. Кабаков, Б. Д. Костная пластика нижней челюсти-Л.: Медгиз, 1983.-264 с.

41. Караян, А.С. Одномоментная реконструкция скулоносоглазничного комплекса с использованием свободных костных и хрящевыхаутотрансплантатов /А.А. Караян, Е.С. Кудинова, Н.А. Рабухина //Стоматология. 2003, № 5. - С. 39-43.

42. Касавина, Б.С. Жизнь костной ткани / Б.С. Касавина, В.П. Торбенко.-М.: Наука, 1992.

43. Касавина, Б.С. Минеральные ресурсы организма/ Б.С. Касавина, В.П. Торбенко М.: Наука, 1975. - 284 с.

44. Киреев, М.М. Полумикрометод определения кислотоэкстрагируемых нуклеотидов в органах лабораторных животных/ М.М. Киреев, В.Д. Конвай //Вопросы медицинской химии. 1979. - Т. 25. - № 3. - С. 352-354.

45. Киченко, С. М. АТФ, дегидрогеназы и гексокиназа в слизистой оболочке полости рта и нижней челюсти при её переломе и нарушении иннервации / С. М. Киченко, Ю.А. Петрович //Стоматология. 1986. - № 5.-С. 112-114.

46. Киченко, С. М. Биохимические изменения при регенерации нижней челюсти, нарушении её иннервации и при введении тиреокальцитонина (экспериментальное исследование): автореф. дисс.канд. биол. наук М., 1982.- 24 с.

47. Киян, Ю. А. О биосинтезе пуринов de novo в сетчатке быка: очистка и характеристика амидофосфорибозилтранферазы и фосфорибозилпиро-фосфатсинтетазы / Ю. А. Киян, Р. Н. Этингофф /Биохимия. 1999.- Т. 64, Вып.б.-с. 777-781.

48. Копылов, A.M. Еще один шаг к «миру РЖ» //Биохимия. 1995. - Т. 60, Вып. 1.-С. 159-161.

49. Кочетов, Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: «Высшая школа», 1980. - 272 с.

50. Красовская, Г.П. Дальнейшее изучение вопросов обмена костной ткани после операции гомопластики у животных перенесших лучевую болезнь // Вопросы травматологии и ортопедии Донецк, 1995.- С. 103-106.

51. Красовская, Г.П. Динамика некоторых показателей обмена веществ костной ткани при приживлении костных трансплантатов // Пластическиеоперации в травматологии и ортопедической практике Донецк, 1997. - С. 202-209.

52. Кругляков, П.В. Влияние мезенхемальных стволовых клеток на восстановление косного трансплантата у крыс при трансплантации деминерализованного костного матрикса / П.В. Кругляков, А.В. Соколова //Цитология. 2005.- № 4. - С. 466-477.

53. Крупко, И.Л. Костная гомопластика в клинике и эксперименте / И.Л. Крупко, С.С. Ткаченко //Тезисы докладов 2-й Всесоюзной конференции по проблеме тканевой несовместимости, консервированию и трансплантации органов и тканей. Одесса, 1991. - С. 171-173.

54. Крупко, И.Л. Костная гомопластика в клинике и эксперименте / И.Л. Крупко, С.С. Ткаченко // Проблемы гомопластики и аллопластики.- Киев: Здоров'я, 1997.-С. 401-403.

55. Крюкова, Г.Н., Цыбульский В.В. Биохимия соединительной и костной тканей. Одесса: ИПЦ ОГМУ. - 2003. - 143 с.

56. Кузнецова, Г.И. Факторы риска снижения минеральной плотности костной ткани //Вопросы современной педиатрии. 2004. - Т. 3, № 3. - С. 97-99.

57. Кузьмина Э.М. Профилактика стоматологических заболеваний. М.: Изд-во «Поли Медиа Пресс», 2001.-216 с.

58. Курочкин, А.П. Планирование окклюзии зубных протезов на имплантантах в зависимости от коэффициента плотности костной ткани //Стоматология. 2005. - № 3. - С. 51-53.

59. Лаврищева Г.И. О морфологических критериях жизни и смерти костной ткани. /В кн.: Вопросы патологии костной системы. М.: 1992. -С. 67-78.

60. Ларионов, А.А. О перестройке свободного костного трансплантата в дефекте длинной кости //Ортопедия, травматология и протезирование. -1989.-№7.-С. 17-21.

61. Ленинджер, А. Основы биохимии: Пер. с англ.- В 3-х т.: М.: Мир, 1985. - Т. 1. - 367 с. - Т. 2. - 368 с. - Т. 3 - 320 с.

62. Литвинов, С.Д. Коллаген-апатитовый материал при замещении дефектов костной ткани челюсти /С.Д. Литвинов, С.И. Буланов //Стоматология. 2001, № 3. - С. 7-12.

63. Лукьянова, Л.Д. Параметры аденилатного пула как предикторы нарушений энергетического обмена в гепатоцитах при гипоксии / Л.Д. Лукьянова, A.M. Дудченко //Бюллетень экспериментальной терапии и медицины.-2003.-Т. 136, № 1.-С.41-45.

64. Лущак, В.И. Исследование способности нуклеозидтрифосфатовIобеспечить транспорт Са фрагментами саркоплазматического ретикулума //Украинский биохимический журнал. 1990. - Т.62, № 2. - С. 64-68.

65. Маршалл В. Дж. Клиническая биохимия. /Пер. с англ.: М. - СПб.: «Изд-во БИНОМ» - «Невский Диалект». - 2003. - 368 с.

66. Меерсон, Ф.З. Физиология адаптационных процессов. М.: Наука, 1986.-639 с.

67. Миннебаев, М.М. Активность ферментов, уровень глюкозы, лактата и пирувата в лимфе и крови в раннем постреанимационном периоде / М.М. Миннебаев, В.Ф. Бахтиозин, М.С. Мусин, Л.Г. Попова //Анестезиология и реаниматология. 1995. - № 4. - С. 42-45.

68. Мусил, Я. Современная биохимия в схемах /Я. Мусил, О. Новакова, К. Кунц. Пер. с англ.- 2-е изд., исправл. - М.: Мир. - 1992. - 226 с.

69. Нагиев, Э.Р. Хроматографическое разделение нуклеотидов в тонкослойном варианте на ДЭАЭ-целлюлозе и определение активности нуклеозидфосфаткиназ //Журнал «Оборонный комплекс научно-техническому прогрессу России». - М., 2001. - С.75-78.

70. Нагиев, Э.Р. Биохимия тканей полости рта Утв. УМО РФ. - М.: 24.05.05. - Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2006. - 128 с.

71. Нагиев, Э.Р. Воздействие экстремальных факторов на метаболизм и некоторые пути направленной коррекции / Э.Р. Нагиев, С.А. Дадашева, С.Н. Евсеева //Экология промышленного производства: Межотраслевой научно-практический журнал. -Вып. 1. 2005. - С. 49-51.

72. Наумов, П.В. Применение костных аллотрансллантатов при замещении изъянов нижней челюсти / П.В. Наумов, A.JL Величко, К.К. Замятин, Г.Д. Соколова //Вопросы аллотрансплантации в стоматологии. М., 1979. - С. 60-66.

73. Николаев, А.Я. Биологическая химия. -3-е изд., перераб. и доп. М.: «Медицинское информационное агентство»,2004. - 566 е.: илл.

74. Номенклатура ферментов /Под ред. А.Е. Браунштейна. М.: ВИНИТИ, 1979 - 321 с.

75. Османов, Р.С. Хирургическая инфекция, асептика и антисептика/ Р.С. Османов, С.Ю. Сафаров. Махачкала: Изд-во «Юпитер», 2006. - 162 с.

76. Панин, JL Е. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: «Наука», 1983.-206 с.

77. Пелевина, И.И. Последствия Чернобыльской катастрофы: Здоровье человека/ И.И. Пелевина, Г.Г. Афанасьев, В.Я. Готлиб. М.,1996. - С. 229244.

78. Петрова, A. JI. О методе выделения трансгликозидазы из печени и определение ее активности //Биохимия. 1979. - Т. 24. - С. 228-233.

79. Петров, В.П. Поражающие факторы при чрезвычайных ситуациях и модели их формирования /Военно-медицинский журнал. 2006. - № 10. -С. 29-33.

80. Петрович, Ю.А. Биохимические методы исследования в клинической и экспериментальной стоматологии /Ю.А. Петрович, В.К. Леонтьев. Омск: ИПЦ ОГМИ. - 1994. - 89 с.

81. Петрович, Ю.А. Слюна. Большая медицинская энциклопедия /Ю.А. Петрович, В.В. Тамилин. -М.: 1988.-Т. 23.-С. 703-719.

82. Плотников, Н.А. Проблемы костной пластики нижней челюсти83. //Стоматология. 1993. - № 3. - С. 7-9.

83. Плотников, Н.А. Костная пластика нижней челюсти. М.: "Медицина",- 1986.- 136 с.

84. Погосян, Ю.М. Экспериментально-клиническое обоснование применения аллогенного кортикального костного матрикса для леченияпациентов с привычным вывихом нижней челюсти /Ю.М. Погосян, А.Д. Енокян //Стоматология. 2005, № 5. - С. 44-47.

85. Потапенко, Р. И. Макроэргические фосфорные соединения и АТФазная активность митохондрий в головном мозгу крыс разного возраста //Украинский биохимический журнал. 1983.-Т.55, № 3. - С. 563-565.

86. Пронченко, И.А. Биохимические маркеры костного метаболизма и потерь костной ткани после аллотрансплантации трупной почки / И.А. Пронченко, В.П. Бузулина //Клиническая лабораторная диагностика. -2005. -№ 11.-С. 3-8.

87. Радкевич, А.А. Опыт использования остеогенной ткани в хирургическом лечении генерализованного пародонтита/ А.А. Радкевич, П.Г. Сысолятин, В.И. Гюнтер //Пародонтология. 2001. - №1-2. - С. 63-67.

88. Реброва, О.Ю. Статистический анализ биомедицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М., Медиа Сфера, 2002.-312 с.

89. Робустова, Т.Г. Хирургическая стоматология. М.: Медицина, - 2001. -688 с.

90. Северин, С.Е. Роль фосфорилирования в регуляции клеточной активности/ С.Е. Северин, М.Н. Кочеткова. М.: Наука,1985. - 285 с.

91. Силуянова, С.Н. Печень. Обезвреживание токсических веществ / С.Н. Силуянова, JI.E. Адриянова, С.А. Лесничук //Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2002. - № 3. - С. 50-56.

92. Скоблин, А.П. Содержание титана, кремния, ванадия в костной системе после костной аутопластики / Скоблин, А.П., Белоус A.M. // Ортопедия, травматология и протезирование. М., 1992. - С. 232-234.

93. Скулачев, В.П. Соотношение окисления и фосфорилирования в дыхательной цепи. -М.: Изд. АН СССР, 1962. 152 с.

94. Скулачев, В.П. Биоэнергетика. Мембранные преобразователи энергии. М.: Высшая школа, 1989. - 271 с.

95. Слуцкий, Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. М.: Медицина, 1989. - 375 с.

96. Страйер, Jl. Биохимия.: Пер. с англ. -М.: Мир,1985.- Т. 2. 400 с.

97. Строев, Е. А. Биологическая химия. М.: «Высшая школа»,- 2002. —479 с.

98. Сысолятин П.Г. Костная пластика дефектов нижней челюсти «кильскими» трансплантатами /Стоматология. 1985. - № 1. - С. 6-8.

99. Сытинский, И.В. Изменение систем аденозинтрифосфорной кислоты в ткани головного мозга при различных функциональных состояниях центральной нервной системы /Биохимия. 1956.- Т. 21, № 3. - С. 359-367.

100. Тимашкевич, К.Д. Некоторые особенности регенерации при гомотрансплантации трубчатых фрагментов костной ткани в эксперименте // Условия регенерации органов и тканей. М., 1996. - С. 291-294.

101. Тихонов, Ю.В. Метаболизм пуриновых и пиримидиновых соединений и опухолевый рост: автореф. дис. докт. биол. наук. М.: Университет дружбы народов им. П. Лумумбы, 1991. - 34 с.

102. Томилина, Н.А. Биохимические маркеры костного метаболизма / Н.А. Томилина, Р.Н. Ведерникова, И.П. Ермакова //Биохимия. Клиническая лабораторная диагностика. № 12. - 2005. - С. 12-16.

103. Трифонова, В. П. Применение радиоактивных изотопов в изучении минерального и белкового обмена скелета при ауто- и гомотрансплантации кости / В. П. Трифонова, Ю. А. Петрович // Условия регенерации органов и тканей. М., 1996.-С. 265-289.

104. Ю5.Ткачук, В. А. Клиническая биохимия/ В. А. Ткачук, А.Б. Добровольский, В.Л. Доценко- М.: ГЭОТАР-МЕД., 2002. 360 с.

105. Торбенко, В.П. Биохимические процессы обызвествления костной ткани //Ортопедия, травматология. 1993. - № 7. - С. 76-82.

106. Торбенко, В.П. Углеводный обмен костной ткани в норме при переломах и лучевой болезни // Переломы костей и повреждения суставов при лучевой болезни.-М.: Медицина, 1987. С. 169-186.

107. Торбенко, В.П. Функциональная биохимия костной ткани/ В.П. Торбенко, B.C. Касавина. М.: Медицина, 1977. - 137 с.

108. Фатхудинов, Т.К. Особенности репаративного остеогенеза при трансплантации мезенхемальных стволовых клеток / Т.К. Фатхудинов, Д.В. Гольдштейн //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2005.-№1.-С. 53-56.

109. Федоровская, JI.H. Сравнительный анализ процесса заживления костных дефектов челюсти под воздействием различных пластических материалов /JI.H. Федоровская, А.С. Григорьян, А.А. Кулаков //Стоматология. 2001, № 6. - С. 4-7.

110. Филиппович, Ю.Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993-496с.

111. Филов, В.А. Разработка и методика трансплантата с культивированными фибробластами для повышения эффективности хирургического лечения пародонтита (экспериментально-клиническое): автореф. дис. канд. мед. наук. М., 2004. -27 с.

112. Френкель, JI.A. Возрастные особенности обмена гликогена костной ткани крыс в условиях острого лучевого поражения //Экспериментальная и клиническая радиобиология: Республиканский межведомственный сборник.-Киев: Здоров'я, 1983.-№9.-С. 150-153.

113. Хмелевский, Ю.В. Витамины и возраст человека. Киев: «Наукова думка», 1999. - 163 с.

114. Хмелевский, Ю.В., Губский Ю.И. Биологическая химия. Практикум /Ю.В. Хмелевский, Ю.И. Губский. Киев: «Вища школа». Головное изд-во, 1995.-207 с.

115. Ходжаев, Т.Б. Применение нового вида костных трансплантатов в микрохирургии //Казанский медицинский журнал. 1991. - Т. 72, № 6. -С. 420-423.

116. Хочачка, П. Биохимическая адаптация// П. Хочачка, Дж. Самеро. М.: Мир, 1988.-568 с.

117. Чекман, И.С. Биохимическая фармакодинамика.- Киев: Здоров'я, 2004. -200 с.

118. Цыбульский В.В. Механизмы регуляция минерализации костей и зубов. Роль витаминов и гормонов. ( Историческая справка). Одесса: ИПЦОГМУ.- 1993. - 144 с.

119. Цыбульский В.В., Нагиев Э.Р. Биохимия зубов и слюны. Одесса: ИПЦОГМУ.-2001.-93 с.

120. Шамсудинов, А.Х. Сравнительная биохимическая и морфологическая оценка свойств деминерализованных в различных растворах костного матрикса и его применение для костной пластики: автореф. дисс.канд. биол. наук. -М., 1984. 22 с.

121. Шамсудинов, А.Х. Особенности созревания фосфорно-кальциевых соединений при трансплантации костей, обработанных различными способами / А.Х. Шамсудинов, Ю.А. Петрович, Д.Д. Сумароков, М. Б. Швырков //Стоматология. 1994. - № 5. - С. 12-15.

122. Шварц, В.В. Сравнительная характеристика энергетического обмена костных трансплантантов при ауто- и аллопластике /В.В. Шварц, А.Р. Гаджиев //В кн.: «Трансплантация органов и тканей». Тбилиси: - 1992.-С.178-183.

123. Шпигель, А.С. Гексокиназа тканей при атеросклерозе. Дисс. канд. мед. наук. - Куйбышев: - 1975. - 237 с.

124. Anderson К.J., Le Goeg J.F., Dingwal J.A. Processed geterogenous bone a basic scientific study with preliminary clinical trials in humans. JAMA.- 1985, 193,374-300.

125. Armiger L. C., Hollia L.G., Sellye R.N. Regional variation in the adenine oxypurine pool of the heart in normoxia and oxygen deficiency // Exp.Pathol.-1996.- V.30, № 1.-p. 33-38.

126. Barber R., Plumb M.A., БоиДоп E. et a/. Elevated mutation rates in thegerm line of first- and second-generation offspring of irradiated male mice // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, -2002, -99, -№ 10, -P. 6877-6882.

127. Barrker S.B., Summerson W. The colorimetric determination of lactic acid in biological material //J.Biol.Chem. -1981.- Vol. 138 (2). P. 586-594.

128. Bauss 0., Schwestka-Polly R., Schilke R., Kiliaridis S. Effect of different splinting methods and fixation periods on root development of autotransplanted immature third molars //J. Oral Maxillofac Surg. 2005. - Vol. 63 (3). - P. 304310.

129. Bauss O., Fenske C., Schilke R., Schwestka-Polly R. Autotransplantation of immature third molare into edentulous and atrophied jam sections /Ant. J. Oral Maxillofac Surg. 2004. - Vol. 33 (6). - P. 558-563.

130. Boabaid F., Berry J.E., Koh A.J. et al. The role of parathyroid hormone related protein in the regulation of osteoclastogenesis by cementoblaste //J. Periodontol. 2004. - Vol. - 75 (9). - P. 1247-1254.

131. Bloometdi C., Cauco A.V., Simpson C.J. // Transplantation 1995. - Vol. 59,N7.-P. 982-986.

132. Brandenburg V.M. //Transplantation. 2004. - Vol. 77, N. 10. - P. 15661571.

133. Gordon E.J. Extracellular ATP: effects, sources and fate // Biochem. J. -1996. V.233, №2. - p. 309 - 319.

134. Calabrese EJ., Baldwin L.A. Radiation Hormesis and Cancer // Human and Ecological Risk Assessment, -2002, -8, -№ 2, -P. 327-353.

135. Cori C.F., Cori C.T. The kinetics of the Enzymatic Synthesis of Glycogen from Glycogose-i-Phosphate

136. Crystalling Muscle Phosphorylase in Kinetice //J.Biol.Chem. 1983.-Vol. 151 (39).-P. 1014-1033.

137. Creen A.A., Eastoe J.E. The chemical composition of Bone In: Biochemists handbook. Eds. King E. J.I Sperry W.M. London.-1986. P. 715720.

138. Cusso R., Ovortrup K., Nielsen J.N. Translocation of glycogen synthase to a novel structure during glycogen resynthesis //J. Biol. Chem. 2006. - Vol. 298 (37).-P. 3156-3167.

139. Daryl K. Granner. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. - New Delhi. - 2003. - P. 329-347.

140. Degidi M., Scarano A., Piattelli A. Regeneration of the alveolar crest using titanium micromesh with autologous bone and a resorbable membrane //J. Oral Implantol. 2003. - Vol. 29 (2). - P. 86-90.

141. Dische S., Sounders M., Barrett A. et al. A randomized multicenter trial of CHART versus conventional radiotherapy in head and neck cancer //Radiother. Oncol.,-1997, -44,-P. 123-136.

142. Duarte P.M., de Assis D.R., Casati M.Z., Sallum A.W. Alendronate may protect aqainst increased periodontitis-related bone loss in estrogen-deficients rats //J. Periodontol. 2004. - Vol. 75 (9). - P. 1196-1202.

143. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. Москва: "Практика". - 1998. - 459 с.

144. Enacar A., Keser E.I., Mavili Е., Giray В. Facial asymmetry case with multiple missing teeth treated by molar autotransplantation and orthognathic surgery //Angle Orthod. 2005. - Vol. 74 (1). - P. 137-144.

145. Han Bao Fen., Zhang Ce, Qi Jin-Shun. ATP sensitive potassium channels and endoginius adenosine are involved in spinae antinociception produced by locus coeruleus stimulation //Acts phisiol. sin. - 2002. - V.54, №2. -p. 139-144

146. John V., Gossweiler M. Implant treatment planning and rehabilitation of the anterior maxilla, Part 2: The role of autogenous grafts //J. Indians Dent Assoc. 2002. - Vol. 81 (1). - P. 33-38.

147. Joshi A. An investigation of post-operative morbidity following chin graft surgery //Br. Dent J. 2004. - Vol. 196 (4). - P. 215-218.

148. Imasato S., Fukunishi K. Potentialefficacy of GTR and autogenous bone grafts for autotransplantation to recipient sites with osseous defects: evaluation by re-entry procedure // Dent Traumatol., 2006. Vol. - 20 (1). - P. 42-47.

149. Fox I.N., Burk L., Planet G. et al. Pyrimidine nucleotide biosynthesis. A study of normal and purine enzymedeficient ells //J. Biol. Chem. 1998. - V. 253,N. 19.-P. 6794-6800.

150. Kawakami M., Kuroda S., Takada K., Yoshida C.A. Dental follicle cell-conditioned medium enhances the formation of osteoclast-like multinucleated cells //Eur. J. Orthod. 2006. - Vol. 22 (6). - P. 675-682.

151. Kawasaki N., Hamamoto Y., Nakajama T. Periodontal regeneration of transplanted rat molare after cryopreservation //Arch. Oral Biol. 2004. - Vol. 49(1).-P. 59-69.

152. Kerr S.E. Studies on phosphorus compounds of brain phosphocreatine.// J. Biol. Chem.- 1985,153, 625-635.

153. Kerr S.E. The carbohydrate metabolism of brain I, The determination of glucogan in nerve tissue. //J. Biol. Chem., 1986, 154,1, 1-7.

154. Kitahara Y., Suda N., Terashima T. et al. Accelerated bone formation and increased osteoblast number contribute to the abnormal tooth gern development in parathyroid hormone-related protein knockout mice //Bone. 2004. - Vol. -35 (5).-P. 1100-1106.

155. Koike H., Uzawa K., Grzesik W.J., Kasamatsu A. Gluti is highly expressed in cementoblaste but not in osteoblasts //Connekt Tissue Res. 2005. -Vol.46 (3).-P. 117-124.

156. Komerik N., Akkaya A., Yildiz M. Oral health in patients on inhaled corticosteroid treatment //Oral Dis. 2005. - Vol. 11 (5). - P.303-308.

157. Koshy S., Love R.M. Endodontic retreatment of an autotransplanted lover first premolar: a case report //Dent Traumatol. 2003. - Vol. - 19 (4). - P. 228232.

158. Krebs E.G., Pischer W.H. Phosphorylase Activity of Skeletal Muscie.Exts. //Bioch. Biophys. Acta, 1986,20,150.-161.

159. Kudoetal J., Carlini R.G. //Am. J. Kidney Dis. 1996. - Vol. 36. - N 1. -P. 160-166.

160. Lascu J. Nucleoside diphosphate kinase new functions for and old enzyme //Rev. roum biochim. - 1991. - V. 28, N 3-4. - P. 143-147.

161. Laver Drek R. Lenz Gerlinde K.E., Lamb Graham D. Regulation of the calcium release channel rabbit skeletal muscle by nucleotides ATP, AMP, IMP and adenosine //J. Phisiol. 2001. - V.537, №3. - p. 763 - 778.

162. Leroukel E., Libouban H., Basle M.F., Audran M. Mandibular bone loss in an animal model of male osteoporosis: a radiographic and densitometric study //Osteoporos Int.-2000.-Vol. 15 (10).-P. 814-819.

163. Lin J., Krishnara J., Kemp R.G. Exogenous ATP enhances calcium in flux intact thymocytes // J. Immunol. 1995. - V.135, №5. - p.3404 - 3411.

164. Linton J.L., Sohn B.W. Effecte of calcium phosphate ceramic bone graft materials on permanent teeth eruption in beagles //Cleft Palate Craniofac J.-2002.-39 (2).-P. 197-207.

165. Malhier H. Pyrimidin Nucleotide and Leitunoyrbegrenrung der ZNS //Med. actuell. - 1980. - T. 6, N 5. - S. 232-235.

166. Matin K., Nakamura H., Osawa H. Impact of recombinant human bone morphogenetic protein-2 on residual ridge resorption after tooth extraction anexperimental studi in the rat //Int. J. Oral Maxillofac Implants. 2003.- 16 (3). -P. 400-411.

167. Meyer R.,Daidson В., Binker A.Hoffman P. The acid mucopolysaccharides of connective tissue. //Biochem. Biophys acta, 1986, 21, 506-518.

168. Michel Patrick P., Marien Marc, Ruberg Merle, Colpaert Francis, Agid Yves. Adenosine prevents the death of mesencephalic dofaminergic neurous by a mechanism that involves astrocites //J. Neurochem. 1999. - V.72 №5. -p.2074-2082.

169. Malhier H. Pyrimidin Nucleotide and Leitunoyrbegrenrung der ZNS //Med. actuell. - 1998. - T. 6, N 5. - S. 232-235.

170. Moyad M.A. Osteoporosis. Part 111-Not just for bone loss: potential benefits of calcium and vitamin D for overall general health //Urol Nurs. 2003. -Vol. 23(1).-P. 69-74.

171. Nair P.R., Schug J. Observatione on healing of human tooth extraction sockets implanted with bioabsorbable polylactic-poliqlicolic acids (PLGA) copolymer root replicas //Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. -2004, 97(5): P. 559-569.

172. Natin K., Senpuku H., Hanada N., Ozawa H., Ejiri S. Bone regeneration by recombinant human bone morphogenetic protein-2 around immediate implants: a study in rats //Int J Oral Maxillofac Implants.- 2002, 18(2).- P. 211-217.

173. Nelson M.A. Photometric adaptation of the Somogyi method for the Determination of Glucose //J.Biol.Chem. 1985,153, 375-380.

174. Nethander G. Autogenous free toth transplantation with a two-stage operation technique //Swed. Dent J. Suppl. 2006. - Vol. 161. - P. 1 - 51.

175. Neuberger A., Perrone J. C., Slack H. G. The relative metabolic inertia of tendon collagen in the rat. Biochim. J., 1981,49,199-204.

176. Neuhard J. Nygaard P. Purines and Pyrimidines // Cell, and Mol. Biol. -1997. -V. l.-P. 445-473.

177. Ninomiya M., Kamata N., Nagata T. et al. Application of enamel matrix derivative in autotransplantation of an impacted maxillary premolar: a case report //J. Periodontol. 2002. - Vol. 73 (9). - P. 346-351.

178. Oba Toshiharu, Murayana Takashi, Ogawa Yasuo. Redox states of type 1 ryanodine receptor alter Ca release channel response to modulators // Amer. J. Physiol. 2002. - V.282, №4. - p. 684 - 692.

179. Osawa H., Irie K. Periodontal regeneration of transplanted rat molare after cryopreservation P. 11 //Arch. Oral Biol. - 2006. - Vol. 51 (4). - P. 195-209.

180. Pappalardo S., Baglio O.A., Frasca M., Grassi F.R. Alveolar ridge augmentation by means of onlay grafts harvested from mandibular symphysis //Minerva Stomatol. 2004. - Vol. 52 (4). - P. 143-150.

181. Pechan I., Halcakl, Liska Branislav. Syntera adeninovych a uridinovych nukleotidov a RNA morgonej kore morciat. Bratisl., Lek. Listy, -1994. -V. 74,-N1,-P. 30-36.

182. Penttinen R. Metabolism of fracture callus on, rat .In vitro. I. oxygen consumption and lactic acid production// Acta phisiol. Scand., 1983, 87,1,133137.

183. Pereira da Silva S.L., Sallum A.W. Comparison of bioabsorbable and non resorbable membranes in the treatment of dehiscence-type defects. A histomorphometric studi in dogs // J. Periodontol. 2000.- 71 (8). - P. 13061314.

184. Peter A. Mayes. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. -Boston. - 2003.-P. 102-160.

185. Peter A.M., de Servaux R.G., van Hoof H.J. et al. //Nephron Clin. Prakt. -2003.-Vol. 93, N l.-P. 121-128.

186. Prats C., Cadefau J.A., Cusso R. et al. Phosphorylation-dependent translocation of glycogen synthase to a novel structure during glycogen resynthesis //J. Biol. Chem. 2005. - Vol. 280 (24). - P. 23165-23172.

187. Rahnama M., Bloniars J., Zabera S. et al. Study of estrogen deficiency impact on manganese levels in teeth and mandible of rate after ovariectomyl //Roce Panstw Zaki Hig. 2003. - Vol. 54 (1). - P. 33-38.

188. Rake J.P., Visser G., Piers D.A. Bone mineral density in children, adolescents and adults with glycogen storage disease type la: a cross-sectional and longitudinal study. //Triherit Metab Dis. -2006 Vol. 27 (9). - P. 415-428.

189. Rapoport J. Drung J., Rapoport S.M. Catabolism adenine nucleotides in rabbit blood cells // Biomed. Biochem. Acta. 1990. - V.49, №1. - p. 11 - 16.

190. Рапопорт C.M. Медицинская биохимия. Пер. с нем. М.: «Медицина». - 1979. - 892 с.

191. Rix М., Levin Е., Olgaard К. //Transplantation Rev. 2003. - Vol. 17, N. 4.-P. 176-186.

192. Robert К. Murray. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. - Toronto. 2003. - P. 495-542.

193. Roberti K.M., Wolczynski S., Malyszko J.S. et al. // Transplantation Proc. -2005.-Vol. 35, N4.P. 1351-1354.

194. Robison B.R. The possible significance of hexose-phosphoric esters in ossification.//Biochem J., 1973, 17,286-293.

195. Rodwell V.W. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. - New York. - 2003. - P. 343-388.

196. Rogers J.D., Palmer R.J., Kolenbrander P.E. Role of Streptococcus gordonii amylase-binding protein A in adhesion to hydroxyapatite, starch metabolism, and biofilm formation. //Infect Immun. 2006. - Vol. 69 (11). - P. 7046-7056.

197. Roe S.D., Porter C.J., Godber I.M. //Osteoporos Int. 2005. - Vol. 16, N. 2.-P. 142-148.

198. Schram K.N. Purines and pyrimidines //Mass Spectrometry. Berlin, New York.- 1994.- S. 507-570.

199. Shibata D., Peinado M.A., lonov Y. et al. Genomic instability in repeated sequences is an early somatic event in colorectal tumorigenesis that persists after transformation // Nat. Genet., -2004. Vol. 6, -№ 3, -P. 273-281.

200. Seifert J., Buchar E. The biosynthesis of cytidine nucleotides in rat liver after administration of D. galacto somine //Biochem. Soc. Trans. -2001. -V. 9. -N. 2, -p. 314-318.

201. Smith B.W., Roe J.K. A. photometric method for the Determination of amylase in Blood and Urine with use of the Starch-Jodino Color //J.Biol.Chem., 1989,179,1,53-59.

202. Stewart G., Hansen B.F., Ploug T. Glycogen synthase to a novel structure during //J.Biol.Chem.-2005.-Vol. 281 (28).-P. 2316-2327.

203. Стентон Гланц. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. -М., Практика, 1999. - 459 с.

204. Tanser J.M., Grant L. Amilase-binding proteins A and В differentially affect colonization of rate teeth by Streptococcus gordonii //Microbiology. -2003. Vol. 149 (Pt 9). - P. 2653-2660.

205. Tanu D., van der Veer E., Smit G.P. Bone mineral density in children, adolescents and adults with glycogen storage disease type la: a cross-sectional and longitudinal study. //Triherit Metab Dis. 2005. - Vol. 26 (4). - P. 371-384.

206. Thone M., Reychler H. Auto-transplantation of an impacted or retained maxillary canine (Article in French) //Rev. Stomatol Chir. Maxillofac. 2002. -Vol. 103 (5).-P. 288-293.

207. Van Den Berghe G., Vincent M.F., Bontemps F. Pathways and control of adenine nucleotide catabolism in anoxic rat hepatocytes // Biomed. Biochem. Acta. 1989. - V.48, №2/3. - p. 510.

208. Van Den Berghe G., Bontemps F. Adenine nucleotide catabolism in human erythrocytes: Pathways and Regulation //Biomed. Biochem. Acta. 1990. -V.49, №2/3. - p. 117-122.

209. Velich N., Hrabak K., Nemeth Z., Barabas J., Szabo G. Correction of maxillary atrophy with onlayzplastyl (Article in Hungarian) //Fogorv Sz. -2006. Vol. 95 (6). - P. 245-248.

210. Victor W. R. Harpers Illustrated Biochemistry //International Edition. -London.-2003.-P. 603-641.

Информация о работе

Чудинов, Александр Николаевич
кандидата биологических наук
Махачкала, 2006
ВАК 03.00.04

Диссертация

Особенности углеводно-энергетического обмена костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Особенности углеводно-энергетического обмена костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы