Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Особенности промежуточного метаболизма Pseudomonas aeruginosa, деградирующих чужеродные соединения

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мальцева, Ольга Васильевна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА I. Основные черты периферийного метаболизма ксенобиотиков у псевдомонад

1.1. Пути периферийного метаболизма ароматических углеводородов

1.2. Основные особенности окисления метилбензолов

1.3. Особенности периферийного метаболизма галогенированных соединений

ГЛАВА 2. Пути и механизмы микробной адаптации к чужеродным соединениям

2.1. Неспецифическое действие ферментов.

2.2. Переключение путей метаболизма в процессе адаптации к чужеродному субстрату

2.3. Кометаболизм

2.4. Генетические механизмы адаптации микроорганизмов к использованию ксенобиотиков

ГЛАВА 3. Основные черты центрального метаболизма псевдомонад.

3.1. Цикл трикарбоновых кислот

3.2. Анаплеротические пути

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 4. Методы и материалы.

4.1. Организмы, методы их культивирования.

4.2. Приготовление бесклеточных экстрактов и определение активности ферментов

4.3. Определение поступления "^С-ацетата и ^С-пирувата в клетку

4.4. Методы определения концентрации ацетата, пропионата и пирувата в культуральной жидкости и бесклеточном экстракте

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА 5. Изучение центрального метаболизма культур

P. aeruginosa, растущих на п-ксилоле

5.1. Рост культур p.aeruginosa на различных субстратах.

5.2. Динамика потребления пирувата, пропионата и ацетата и поступление их в клетку

5.3. Особенности промежуточного обмена штаммов

P.aeruginosa при росте на п-ксилоле

5.4. Сравнительный энзиматический анализ культур р.aeruginosa, растущих на п-ксилоле, с культурами, не способными к использованию ксенобиотиков

5.5. Регуляция ферментов пируватного шунта

ГЛАВА 6. Особенности центрального метаболизма культуры P.aeruginosa 640x , кометаболизирующей

6.1. Рост культуры на различных субстратах

6.2. Изучение центрального метаболизма культуры.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности промежуточного метаболизма Pseudomonas aeruginosa, деградирующих чужеродные соединения"

Актуальность проблемы. Огромный метаболический потенциал бактерий рода pseudomonas привлек к ним большое внимание микробиологов, биохимиков и генетиков. Биохимическая лабильность, свойственная этим организмам, наличие внехромосомных элементов наследственности, способных к легкому переносу между штаммами псевдомонад, позволяют этим бактериям утилизировать широкий набор соединений, в том числе и чужеродных для микробной клетки. Способность использовать в качестве ростовых субстратов н-алканы, ароматические углеводороды, галогенсодержащие соединения, а также широкий спектр обычных микробиологических субстратов указывает на большую гибкость метаболизма псевдомонац. Однако, практически ничего не известно о масштабе перестроек энзиматического аппарата клетки в процессе адаптации микроорганизмов к использованию ксенобиотиков. Остается неясным очень важный вопрос - связано ли появление способности к разложению чужеродных веществ только с особенностями периферийного обмена или в процессе длительной адаптации культуры к использованию ксенобиотика происходят более глубокие перестройки ферментативного аппарата, затрагивающие и центральный метаболизм бактерий.

Состояние вопроса, цель и задачи исследования. Вопрос о функционировании ферментных систем центрального метаболизма у микроорганизмов, способных к деградации труднодоступных соединений до сих пор, практически, не изучен. Лишь в последние годы были предприняты первые попытки выяснения взаимосвязи процессов периферийного и центрального метаболизма у микроорганизмов, способных к росту на окисленных ароматических соединениях. Изучение данного вопроса представляет особый интерес потому, что детальное понимание процессов взаимодействия микробной клетки и ксенобиотика очень важно для интенсификации микробиологической деградации трудноразлагаемых соединений.

Основной целью настоящей работы было на примере культуры Pseudomonas aeruginosa 640х, способной К ПОЛНОЙ деградации ДЦТ, И культур Pseudomona aeruginosa 2х И 7, использующих П-КСИЛОЛ в качестве ростового субстрата, выявить особенности функционирования ферментных систем центрального метаболизма, позволяющие данным штаммам активно разлагать ксенобиотики. В задачи данного исследования входило:

1) выявление особенностей метаболизма культур P.aeruginosa 640х, 2х, 2x79 и 7, связанных с длительным контактом данных штаммов с ксенобиотиками;

2) сравнительное изучение центрального метаболизма и его регуляции у культур, разлагающих чужеродные соединения, с другими штаммами псевдомонад, неспособными к деградации ксенобиотиков;

3) изучение взаимосвязи мевду метаболизмом косубстратов культурой p.aeruginosa 640х и интенсивностью кометаболизма ДЦТ данным штаммом.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Мальцева, Ольга Васильевна

выводы

1. Изучение четырех штаммов Pseudomonas aeruginosa, способных разлагать ароматические углеводороды и ДДТ, показало изменение физиолого-биохимических свойств этих культур, в частности, слабый рост на пирувате и ацетате, по сравнению с типичными р.aeruginosa f хороший рост которых на ацетате и пирувате является одним из характерных таксономических признаков.

2. У данных культур исследовано функционирование ферментов катаболизма глюкозы, глюконеогенеза, цикла трикарбоновых кислот, глиоксилатного пути, Сд-карбоксилаз. Показано, что при росте штаммов P.aeruginosa2x и 7 на п-ксилоле в их центральном метаболизме происходят изменения, проявляющиеся в низкой активности мембрано-связанной малатдегидрогеназы и одновременном функционировании кар-боксилаз пирувата и фосфоенолпирувата, обеспечивающих дополнительное образование оксалоацетата из малата. Аналогичные перестройки центрального метаболизма обнаружены и при росте культур, разлагающих чужеродные соединения, на обычных субстратах.

3. Сравнительный энзиматический анализ культур, деградирующих ксенобиотики, с коллекционным штаммом P.aeruginosa РАО, не обладающим этой способностью, показал наличие у первых более высокой активности малик-фермента, карбоксилаз пирувата, фосфоенолпирувата и ФЕП-синтазы и, напротив, более низкий уровень активности мембраносвязанной малатдегидрогеназы. Сравниваемые культуры различались и по составу ферментов глюконеогенеза, что проявлялось в функционировании у штамма РАО ФЕП-карбоксикиназы, отсутствующей у других культур.

4. Обнаружены различия в регуляции малик-фермента (НАД) и Сд-карбоксилаз у штаммов-деструкторов и коллекционной культуры РАО. Установлено, что ацетил-КоА не влиял на активность маликфермента у P.aeruginosa 2х, но ингибировал данный фермент у коллекционного штамма РАО; АТФ сильно ингибировала ФЕП-карбоксилазу у культур, разлагающих чужеродные соединения, и практически не оказывала влияния на этот фермент у коллекционной культуры.

5. У культуры P.aeruginosa 640х, кометаболизирующей ДЦТ, обнаружена высокая активность ферментов (глюкозо-6-фосфатдегицро-геназы, изоцитратцегидрогеназы, малик-фермента, алкогольцегицро-геназы и ацил-КоА-дегицрогеназы), генерирующих восстановленные кофакторы при росте на косубстратах, стимулирующих разложение ДЩГ, что указывает на генерацию восстановленных коферментов как возможный механизм кометаболизма ДЦТ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, на примере четырех штаммов псевдомонад было показано, что способность данной группы микроорганизмов разлагать чужеродные соединения связана не только с особенностями периферийного, но и центрального метаболизма псевдомонад. На основании изучения активностей ферментов катаболизма глюкозы, глюконеоге-неза, цикла трикарбоновых кислот, глиоксилатного пути, карбоксилаз пирувата,фосфоенолпирувата и пропионил-КоА у культур, длительное время контактировавших с ксенобиотиками, выявлен, ряд • изменений в энзиматическом аппарате центрального метаболизма. Так у штаммов-деструкторов обнаружена низкая активность мембраносвязанной малатдегидрогеназы и одновременное функционирование малик-фермента и Cg-карбоксилаз, составляющих пируватный шунт. Метаболическая роль такого шунта, по-видимому, двояка: с одной стороны, эта роль заключается в компенсации недостаточной активности мембраносвязанной малатдегидрогеназы; с другой стороны - в регулировании потока Сд/С^-соединений в клетке. Вторая функция, вероятно, является более важной, так как при адаптации к использованию ароматических углеводородов встает задача регулирования внутриклеточной концентрации соединений с различным числом атомов углерода, образующихся при расщеплении ароматического кольца.

При росте культур микроорганизмов на средах,содержащих несколько субстратов,существует возможность регуляции на уровне поступления веществ в клетку. Этот механизм используется и псевдомонадами. Например, при росте на средах,содержащих глюкозу и цитрат, наблюдается предпочтительное использование цитрата, который репрессирует и ингибирует систему транспорта глюкозы наряду с репрессией ферментов её катаболизма (Midgley a. Daves, 1973; Mukkada е.a., 1973). При этом после исчерпания цитрата осуществляется индукция систем транспорта и катаболизма глюкозы и наблюдается диауксия (Hamilton a. Dawes, 1959).

При использовании же ароматических соединений,в процессе расщепления ароматического кольца происходит внутриклеточное образование соединений с различным числом атомов углерода, вступающих в центральный метаболизм. Так, при действии ферментов расщепления ароматического кольца могут образовываться следующие пары соединений, вступающих в ЦТК: сукцинат и ацетил-КоА; фумарат и ацетат; пируват и ацетальдегид; пируват и пропионовый альдегид, фумарат и пируват. Необходимость особой лабильности систем центрального метаболизма обусловлена и тем, что у отдельных штаммов псевдомонад возможно одновременное функционирование нескольких ферментов расщепления ароматического кольца. Так, у культуры Р. aeruginosa 2х, например, обнаружены две метапирокатехазы, пирока-техаза и протокатехоат-3,4-диоксигеназа 1Чече с соавт., 1983; Головлева с соавт., 1983).

Очевидно, одним из механизмов, обеспечивающих нормальное функционирование систем центрального метаболизма, может быть выведение одного из образующихся продуктов в культуральную среду, как это было показано нами при росте культуры P.aeruginosa 2х на п-ксилоле, у которой было обнаружено временное накопление в куль-туральной жидкости ацетата. Но, данный механизм не является, очевидно, основным, так как при росте псевдомонад на ароматических соединениях не наблюдается диауксии, что является косвенным доказательством одновременного использования продуктов расщепления ароматического кольца с различным числом атомов углерода.

Функционирование у культур, разлагающих чужеродные соединения, пируватного шунта и особенности его регуляции позволяют данным микроорганизмам легко осуществлять взаимопревращения С3/С4-СОединений.

Культуры P.aeruginosa 2x, 2x79 и 7 имеют более высокую активность ферментов пируватного шунта, чем P.aeruginosa РАО. Кроме того, обнаружены различия в регуляции малик-фермента (НАД) у культур, адаптированных к использованию ксенобиотиков по сравнению с P.aeruginosa РАО. Так, малик-фермент (НАД) у P.aeruginosa 2х, 2x79 и 7 в меньшей степени репрессировался при росте на ацетате и пирувате -и ацетил-КоА не ингибировал данный фермент в отличие от P.aeruginosa РАО. Это, очевидно, связано с тем, что при расщеплении ароматического кольца, с одной стороны, образуются четырех-углеродные соединения - сукцинат, малат, фумарат, а с другой -происходит образование Cg- или Сд-соединений - ацетил-КоА, пирувата, ацетальдегида, оказывающих обычно сильное репрессирующее влияние на синтез малик-фермента (Jacobson е.а., 1966) или ингибирую-щих ее активность (Murray е.а., 1972). Уменьшение репрессирующего влияния ацетата и пирувата на синтез малик-фермента и отсутствие ингибирования ацетилкоэнзимом А, по-видимому, позволяют культурам, адаптированным к использованию ксенобиотиков с большей эффективностью использовать продукты расщепления ароматического кольца и регулировать поток Сд/С^-соединений в клетке. Фенотипичеокое выражение такой тип регуляции находит в слабом росте данных культур на ацетате и пирувате, что связано с активным функционированием малик-фермента, приводящем к возникновению дефицита (^-соединений.

Исследованные культуры различаются и по регуляции еще одного фермента пируватного шунта - ФЕП-карбоксилазы. Так, АТФ значительно ингибирует данный фермент у культур, разлагающих ксенобиотики, и практически не влияет на активность ФЕП-карбоксилазы у P.aeruginosa РАО. По-Еидимому, при хорошей энергообеспеченности клетки преимущественно функционирует ПВК-карбоксилаза, для действия которой необходим АТФ, и ингибируется ФЕП-карбоксилаза, при более низкой концентрации АТФ. может действовать,ФЕП-карбоксилаза.

Сравниваемые культуры различались, кроме того, по составу ферментов глюконеогенеза и уровню их активности. Синтез ФЕП у P.aeruginosa 2х, 2x79 и 7 осуществляется исключительно при действии ФЕП-синтазы, активность которой у данных штаммов выше, чем у P.aeruginosa РАО. Однако, у P.aeruginosa РАО наряду с ФЕП-син-тазой функционирует ФЕП-карбоксикиназа.

Спонтанный п-ксилол/негативный мутант p.aeruginosa 2x79 не отличается от культур P.aeruginosa 2х и 7 по активности ферментов центрального метаболизма. Очевидно, потеря способности к использованию п-ксилола не обусловлена изменениями в центральном метаболизме культуры, а связана с перестройкой систем периферийного метаболизма.

Культура P.aeruginosa РАО, не контактировавшая с ксенобиотиками, была выделена более 10 лет назад и с тех пор поддерживалась на богатых средах (Hoiloway, 1969). Другой тип регуляции центрального метаболизма выражается в хорошем росте данной культуры на ацетате и пирувате и напротив в более слабом по сравнению с P.aeruginosa 2х, 2x79 и 7 росте на бензоате.

Другие группы микроорганизмов, характеризующиеся высокой активностью в отношении чужеродных соединений, например, нокар-дии, осуществляют, в основном, процессы микробиологической трансформации (Скрябин и Головлева, 1976). Это может быть связано как с более слабой скоорцинированностыо периферийного метаболизма данной группы микроорганизмов, так и с отсутствием достаточной гибкости систем центрального метаболизма, проявляющемся в наличии, конститутивных ферментов ряда путей (Санцанов с соавт., 1983).

К сожалению, вопрос о функционировании ферментных систем центрального метаболизма у микроорганизмов, проявляющих высокую активность в отношении ксенобиотиков, цо сих пор, практически не изучен. По существу, единственной работой, которую можно рассматривать в плане адаптации центрального метаболизма к чужеродным соединениям является исследование, проведенное с дрожжами Tricho-sporon cutaneum (shoda a. Udaka, 1980). Данная культура использовала фенол в предпочтение глюкозе. Было показано, что даже достаточно низкие концентрации фенола репрессировали систему транспорта глюкозы. По-видимому, такая регуляция могла появиться при длительной адаптации культуры к использованию фенола.

Таким образом, детальное изучение путей центрального метаболизма у^^культур P.aeruginosa, длительное время контактировавших с ксенобиотиками, показало, что способность псевдомонад к разложению чужеродных соединений связана не только с особенностями их периферийного метаболизма, но в процессе длительной адаптации к чужеродным соединениям происходят более глубокие перестройки, затрагивающие и центральный метаболизм данных микроорганизмов. Они проявляются в низкой активности мембраносвязанной малатцегицрогеназы, одновременном функционировании малик-фермента (НАД) и карбоксилаз пирувата и ФЕП, в своеобразной регуляции данных ферментов, позволяющей данным штаммам более эффективно использовать продукты разложения ароматических углевоцороцов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мальцева, Ольга Васильевна, Пущино

1. Адлер ■ Ю.П., Маркова Е.В., Грановский Ю.В. Планирование эксперимента при поиске оптимальных условий.-М.: Наука, 1976, стр. 1.I-I55.

2. Волкова М.В., Хускивадзе Б.К., Гололобов А.Д. Действие некоторых метаболитов на активность изоцитрат-лиазы и изоцитрат-дегидрогеназы у дрожжей при культивировании на среде с углеводородами. -Пршсл. биохим. и микробиол., 1974, т. 10, 15 6, стр. 837-840.

3. Глазунова Л.М., Финогенова Т.В. Активность ферментов цитрат-ного, глиоксилатного и пентозофосфатного циклов при синтезе лимонных кислот Candida lipoiytica. Микробиология, 1976, т. 45, 3, стр. 444-449.

4. Головлев Е.Л., Головлева Л.А., Ананьин В.М., Скрябин Г.К. Соотношение процессов роста и трансформации при превращении 3-метилпиридина культурами iiocardia. Изв. АН СССР, сер.биол., 1976, J& 6, стр. 834-839.

5. Головлева Л.А., Головлев Е.Л. Микробиологическая деградация пестицидов. Успехи микробиологии, М.: Наука, 1980, т. 15, стр. 137-179.

6. Головлева Л.А., Перцова Р.Н., Воронин A.M., Грищенков В.Г., Баскунов Б.П., Полякова А.В. Деградация полихлорароматических инсектицидов Pseudomonas aeruginosa, содержащих плазмиды биодеградации. Микробиология, 1982, т. 51, $ 6, стр. 973-978.

7. Головлева Л.А., Ганбаров Х.Г., Аданин В.М., Сахаровский В.Г., Скрябин Г.К. Микробиологическое окисление мезитилена.- Докл. АН СССР, 1977, т. 234, 3, стр. 706-708.

8. Головлева Л.А., Головлев Е.Л., Ганбаров Х.Г., Скрябин Г.К. Роль косубстратов при микробиологическом окислении изомерныхксилолов культурой pseudomonas aeruginosa. Микробиология,1977, т. 46, № I, стр. 5-9.

9. Головлева Л.А., Головлев Е.Л., Ганбаров Х.Г., Скрябин Г.К. Регуляция периферийного метаболизма п-ксилола. Изв. АН СССР, сер. биол., 1978, il 2, стр. 186-194.

10. Головлева Л.А., Головлев ЕЛ., Зякун A.M., Шурухин 10.В., Финкельштейн З.И. Метаболизм ордрама гербицида из группы тиокарбаматов микроорганизмами.- Изв. АН СССР, сер. биол.,1978, J5 I, стр. 44-51.

11. Головлева Л.А., Зякун A.M., Баскунов Б.П., Перцова Р.Н., Скрябин Г.К. Условия разложения ДДТ и его аналогов культурой Pseudomonas aeruginosa 640х.- Изв. АН СССР, сер. биол., 1980, }Ь 2, стр. 243-253.

12. Головлева Л.А., Катаева И.А., Ильченко В.Я., Беляева Р.Х. Диоксигеназы пирокатехина у Pseudomonas aeruginosa 2х: обнаружение изофункциональных белков.- Биохимия, 1983.

13. Головлева Л.А., Черевин И.И., Ганбаров Х.Г., Исмаилов Н.М., Скрябин Г.К. Особенности первичного окисления псевдокумола микроорганизмами Pseudomonas aeruginosa.- Докл. АН СССР, 1975, т. 222, А- 6, стр. 1448-1449.

14. Горлатова Н.В. Регуляция окисления п-ксилола культурой Pseudomonas aeruginosa.- Диссертация на соискание уч. степени канд. биол. наук. Пущино, 1983, Институт биохимии и физиол. микроорганизмов.

15. Горлатова Н.В., Головлева Л.А. Особенности регуляции ключевых ферментов периферийного метаболизма п-ксилола у Pseudomonas aeruginosa Микробиология, 1982, т. 50, J,? 6, стр.1002-1007.

16. Давидова Е.Г., Рачинский В.В., Кретова Л.Г. Сравнительное исследование динамики углеродного обмена при росте дрожжей Сапdida tropicalis на н-октадекане и глюкозе.- Микробиология, 1978, т. 47, В. 5, стр. 799-804.

17. Ерошин В.К., Перцовская А.Ф., Скрябин Г.К. 0 росте грибов Mucorales на парафине. Микробиология, 1965, т. 34, № 3, стр. 883-887.

18. Ильченко А.П. Сравнительное изучение митохондрий дрожжей Toruiopsis Candida, выращенных на глюкозе и на гексадекане.-Микробиология, 1976, т. 45, JS 6, стр. 1028-1034.

19. Карасевич Ю.Н. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения.-М.: Наука, 1982, стр. 125-132.

20. Логинова Н.В., Троценко Ю.А. Метаболизм углерода у метило-трофных бактерий, выделенных из активных илов.- Микробиология, 1978, т. 47, В 5, стр. 939-946.

21. Логинова Н.В., Троценко Ю.А. Карбоксилазы пирувата и фосфо-енолпирувата у метилотрофов.- Микробиология, 1979, т. 48,гё 2, стр. 202-207.

22. Лозинов А.Б., Глазунова Л.М., Ермакова И.Т. Активность ферментов цитратного глиоксилатного и пентозофосфатного циклов при росте дрожжей на гексадекане и на глюкозе,- Микробиология, 1976, т. 45, № I, стр. 33-40.

23. Митрука Б.М. Применение газовой хроматографии в микробиологии и медицине,- М.: Медицина, 1978, стр. 287.

24. Перцова Р.Н. Деградация ДЦТ и его аналогов культурой Pseudo-monas aeruginosa 640х.- Диссертация на соискание уч. степени канд. биол. наук. Пущино, 1981, Институт биохим. и физиол. микроорганизмов.

25. Перцова Р.Н., Баскунов Б.П., Головлева Л.А. Особенности окисления ароматических кислот, образующихся при разложении ДЦТкультурой Pseudomonas aeruginosa 640x.- Микробиология,1982, т. 51, № 2, стр. 275-280.

26. Санданов Ч.М., Ерошина Н.В., Цыренов B.S., Головлёв Е.Л. Особенности центрального метаболизма у коринеподобных бактерий,- Микробиология, 1983, т. 52, № I, стр.

27. Сапожникова Г.П., Краузова В.И. Активность и субстратная специфичность алкоголь^егидрогеназ дрожжей, окисляющих н-ал-каны.- Микробиология,"^. 48, jfc 5, стр. 793-797.

28. Скрябин Г.К., Головлева Л.А. Использование микроорганизмов в органическом синтезе.- М.: Наука, .1976, стр. 96-III.

29. Скрябин Г.К., Ганбаров Х.Г., Головлева Л.А., Аданин В.М., Червин И.И., Нефедова М.Ю., Исмаилов Н.М. Периферийный метаболизм изомерных ксилолов культурой Pseudomonas aeruginosa.-Микробиология, 1976, т. 45, № 6, стр. 951-954.

30. Скрябин Г.К., Головлева JI.A., Головлев Е.Л., Зякун A.M., Ганбаров Х.Г., Шурухин Ю.В.- Докл. АН СССР, 1977, т.236, JS 5, стр.1239-1242.

31. Скрябин Г.К., Головлёва Л.А., Головлёв Е.Л., Перцова Р.Н., Зякун A.M., Шурухин Ю.В., Стрекозов Б.П. Разложение ДЦТ и1. W(его аналогов почвенной микрофлорой.- Изв. АН СССР, сер. биол.р JS 3, стр. 352-365.

32. Скрябин Г.К., Головлева Л.А., Зякун A.M., Перцова Р.Н., Шурухин Ю.В. Деградация ДЦТ в фенилуксусную кислоту культурой197Р

33. Pseudomonas aeruginosa.- Докл. АН СССР,""It. 237, J£ 5, с.1212-1215.

34. Софронова М.Ю., Глазунова JI.M., Мунтян Л.Н., Финогенова Т.В., Лозинов А.Б. Активность пируват- и ^ -кетоглутаратдегидро-геназы при росте дрожжевых организмов на глюкозе и гексадекане.- Микробиология, 1976, т. 45, В 2, стр. 266-268.

35. Финкелыдтейн З.И., Головлёва Л.А., Головлев Е.Л., Скрябин Г.К.

36. Деградация гербицида ал/В исон-8 микроорганизмами. Г/шкр о биология, 1876, т. 45, 5, стр. 879-883.

37. Amarasingham C.R., Davis B.D. Regulation of oC -ketogluta-rate dehydrogenase formation in Escherichia coli.- J.Biol. Chem., 1965, v. 240, IT 9, p. 3664-3668.

38. Atkinson D.E. The energy charge of the adenylate pool as a regulatory parameter. Interaction with feedback modifiers.-Biochemistry, 1969, v. 7, I И , p. 4030-4034.

39. Axell B.C., Geary P.J. Purification and some properties of a soluble benzene-oxidizing system from a strain of Pseudomonas, Biochem.J., 1975, v. 146, N 1, p.173-183.

40. Azugena J.M., Milrad de Forchetti S.R., Cazzulo J.J. COg-fixing enzymes in Pseudomonas fluorescens.- J.Gen.Microbiol., 1976, v. 93, N 1, p. 69-74.

41. Babel W., Loffhagen H.Carboxylierung von Phosphoenolpyruvat and Pyruvate durch das obligat methylotrophe Bacterium Pseudomonas W.6.- Z.Allgem. Microbiol., B. 17, N 1, s. 75-79.

42. Beam H.\"., Perry J.J. Co-metabolism as a factor in microbial degradation of cycloparafinic hydrocarbons.-Arch.Microbiol., 1973, v. 91, IT 1, p. 87-90.

43. BeamH.W., Perry J.J. Microbial degradation of cycloparaffi-nic hydrocarbons via co-metabolism and commensalism.-J.Gen. Microbiol., 1977, v. 82, Ш 1, p. 163-169.

44. Blake J., Kaufman D.D. Characterization of acylonilide-hydro-lyzing enzyme(s) from Fusarium oxysporum $chlecht.- Pesticide

45. Biochem. and Physiol., 1975, v. 5, p. 305-313.

46. Brammar W.J., Clark P.H. Induction and repression of Pseudomonas aeruginosa amidase.-J. Gen.Microbiol., 1964, v. 37, N 3» p. 307-319.

47. Brammar W.J., Clark P.H., Skinner A.J. Biochemical and genetic studies with regulator mutants of the Pseudomonas aeruginosa 8602 amidase system.- J.Gen.Microbiol., 1967,v. 47, IT 1, p. 87-102.

48. Bridgeland E.S.,Jones K.M . Formation of dicarboxylic acids and phosphoenolpyruvate in Arthrobacter globiformis.-Biochem. J., 1967, v. 104, IT 1, p. 9-Ю.

49. Brown J.E., Clark P.H. Mutations in regulator gene allowing Pseudomonas aeruginosa 8602 to grow on butiramide.- J.Gen. Microbiol.,1970, v. 64, N 3, p. 329-342.

50. Brown P.R., Clark P.H. Amino acid substitution in an amidase produced by an acetanilide utilizing mutant of Pseudomonasmaeruginosa.- J.Gen.Microbiol., v. 70, IT 2, p. 287-298.

51. Buchanan R.E., Gibbons N.E. Bergey's manual of determinativethbacteriology.- 8 edition the Williams and Wilkins Сотр. Baltimore, 1974, p. 217-222.

52. Campbell J.J.R., Smith R.A., Eagles В.A. A deviation from the conventional tricarboxylic acid cycle in Pseudomonas aeruginosa.- Bfgcfn.rn.Biophys.Acta, 1953, v. 11, p 594.

53. Cazzulo J.J., Massarini E. Inhibition of NADP-linked malic enzime by glyoxylate.- PEBS Letters, 1972, v. 22, IT 1 ,p. 76-79.

54. Chapman P.J., Duggleby R.G. Dicarboxylic acid catabolism by bacteria.- Biochem. J., 1967, v.103, p. 7-9.

55. Chatterjee D.K., Kellogg S.T., Hamada S., Chakrabarty A.M. Plasmid specifying total degradation of 3-chlorobenzoate by a modified ortho pathway.- J .Bacterid,, 1981, v. 146, И 2, p. 639-646.

56. Clark P.H., Wright S.J.L. Detoxication of isopropi/1 N-phefrl-carbamate (JPC) and isopropyl-U-3-chlorphenyl-carbamate (CJPC) in soil, and isolation of JPC metabolizing bacteria.- Soil Biol.Biochem., 1970, v.2, p.19-26, N 2.

57. Colby J., Zatman L.J. Enzymological aspects of the pathways for trimethylamine oxidation in obligate methylotrophs and restricted facultative methylotrophs.- Biochem. J., 1975, v. 148, N 3, P. 513-520.

58. Cooper R.A., Kornberg H.L. The direct synthesis of phospho-enolpyruvate from pyruvate by Escherichia coli.- Proc.Roy. Soc. Ser. В., 1967, v. 168, N1012, p.263-280.

59. Crutcher S.E., Geary P.J. Properties of the ironsulfur proteins of the benzene dioxygenase system from Pseudomonas pu-tida.- Biochem.J., 1979, v. 177, N 1 ,p. 393-400.

60. Dagley S. Catabolism of aromatic compounds by microorganisms.-Advances in microbiol. physiol., 1971, v.6, N1, p.1-42.

61. Dagley S., Tr.udgill P.W. The metabolism of galactarate,

62. D-glucarate and various pentoses by species of Pseudomonas.-frochem J., <9 6 5, v.9%, м 1, phB-SS.

63. Davey J.P., Gibson D.T. Bacterial metabolism of para- andmeta-xylene: oxidation of a methyl substituent.- J .Bacterid.,1974, v. 119, N 3, p. 923-929.

64. Davidson В., Schulz Н. Separation, properties and regulation of acyl coenzyme A dehydrogenases from bovine heart and liver.-Arch.Biochem.Biophys., 1982, v. 213, N 1, p. 155-162.

65. Davis R.S., Hossler P.E., Stone R.W. Metabolism of p- and m-xylene by a species of Pseudomonas.- Can. J. Microbiol., 1968, v. 14, N 9, P. 1005-Ю09.

66. DeKlerk H., Van der Linden A.C. Bacterial degradation of cyc-lohexane participation of a co-oxidation reaction.-Ant. van Leeuwenhoek, 1974, v. 40, N 1, p. 7-15.

67. Dhawale M.R., Creaser E.H. Analysis of an L-histidinol utilizing mutant of Pseudomonas aeruginosa.-J.Gen.Microbiol.,1975, v. 91, N 2, p. 241-248.

68. Diesterhaft M.D., Frees E. Role of pyvuvate carboxylase phosphoenolpyruvate carboxykinase and malic enzyme duringgrowth and sporulation of Bacillus subtilis.- J. Biol. Chem., 1973, v. 248, N 17, p.6062-6070.

69. Dorn E., Knackmuss H.- J. Chemicaljstructure and biodegradabili ty of halogenated aromatic compounds. Substituent effects on1,2-dioxygenation of catechol.- Biochem. J., 1978a, v. 174, N 1, p.85-94.

70. Dorn E., Knackmuss H.-J. Chemical structure and biodegrada-bility of halogenated aromatic compounds. Two catechol 1,2-dioxygenases from a 3-chlorobenzoate grown pseudomonas.-Biochem. J., 1978 , v. 174, N 1, p. 73-84.

71. Dorn E., Hellwing M., Reineke W., Knakmuss H.-J. Isolation and characterization of a 3-chlorobenzoate degrading pseudomonas.-Arch. Microbiol., 1974, v. 99, IT 1, p. 61-70.

72. Evans W.C., Smith B.W.-S., Moss P., Pernley H.N. Bacterial metabolism of 4-chlorophenox-yacetateBiochem. J., 1971,-141v. 122, N 4, p. 509-517.

73. Engelhardt G., Wallnofer P.R., Plapp R. Degradation of linu-ron and some other herbicides by a linuron inducible enzyme obtained from Bacillus sphaericus.- Appl.Microbiol., 1971, v. 22, N 3, p. 284-288.

74. Engelhardt G., Wallnofer P.R., Plapp R. Purification and properties of an aryl acylamidase of Bacillus sphaericus, catalyzing the hydrolysis of various phenylamide herbicides and fungicides.- Appl. Microbiol., 1973, v.26, N 5, p.709-718.

75. Engesser K.H., Schmidt E., Knackmuss H.-J. Adaptation of Al-caligenes eutrophus B9 and Pseudomonas sp. В 13 to 2-fluoro-benzoate as growth substrate.-Appl. Environ. Microbiol.,1980, v. 39, N 1, p. 68-73.

76. Eyzaguirre J., Cornwell E., Borie G., Ramirez B. Two malic enzymes in Pseudomonas aeruginosa.- J.Bacteriol., 1973, v.116, N 1, p. 215-221.

77. Focht D.D., Alexander M. Bacterial degradation of diphenyl-methane a DDT model substrate.- Appl. Microbiol., 1979,v. 20, Я 4, p. 608-611.

78. Q0. Focht D.D., Alexander M. Aerobic cometabolism of DDT analogues by Hydrogenomonas sp.-J.Agric. Food.Chem., 1971, v. 19, IT 1 , p. 20-22.

79. Francis M.J.O., Hughes D.E., Kornberg H.L., Phisackerley P.J.R. The oxidation of L-mdate by Pseudomonas sp.- Biochem. J.,1^63, v. 89, IT 3, p. 430-438.

80. Franci3 A.J., Spanggord R.J., Ouchi G.J., Bramhall R., Boho-nos IT. Metabolism of DDT analogues by a Pseudomonas sp.- Appl. Environ. Microbiol., 1976, v. 32, IT 2, p. 213-216.

81. Francis A.J., Spangg^d R.J., Otichi G.J., Bohonos N. Cometabo-lism of DDT analogues by a Pseudomonas.- Appl. Environ.Microbiol., 1978, v. 35, N 2, p. 364-367.

82. Francis M.J.O., Hughes D.E., Kornberg H.L., Phizackerley P.J.R. The oxidation of L-malate by Pseudomonas sp. Biochem. J., 1963, v. 89, N 3, p. 430-438.

83. Friello D.A., Mylroie J.R., Gibson D.T., Rogers J.E., Chak-rabarty A.M. XYL, a nonconjugative xylene-degradative plasmid in Pseudomonas PXY.- J .Bacterid., 1976, v. 127, IT 3,p.1217-122

84. Gailiusis J., Rinne R.Y/., Benedict C.R. Pytuvate-oxaloacetate exchange reaction in baker's yeast.- Biochim.Biophys.Acta,1964, v. 92, N 3, p. 595-601.

85. Gall E.P. The chemical activities of bacteria. AP. N.Y, 1952.

86. Geary P.J., Dickson D.P.E. Mossebauer spectroscopic studies of the terminal dioxygena3e protein of benzene dioxygenase from Pseudomonas putida.- Biochem.J., 1981,v.195,N1,p.199-203.

87. Gibson D.T., Henseley M., Yoshioka H., Marby T.J. Formation of (+)-cis-2,3-dihydroxy-1-methylcyclohexa-4,6-diene from toluene by Pseudomonas putida.- Biochemistry, 1970, v. 9, IT 7, p. 1626-1630.

88. Gibson D.T., Gschwendt В., Yell W.-K., Kobal V.H. Initial reactions in the oxidation of ethylbenzene by Pseudomonas putida;

89. Biochemistry, 1973, v. 12, Ж 8, p. 1520-1528.

90. Gibson D.T., Mahadevan V., Davey J.P. Bacterial metabolism of p- and m-xylene: oxidation of the aromatic ring.-J.Bacterid., 1974, v. 119, N 3, p. 930-936.

91. Gibson D.T., Yeh W.-K., Lin T.-A., Subramanian V. in: Oxige-nases and oxygen metabolism. A.P., 1982, p. 51-62.

92. Golman P. The enzymatic cleavage of the carbon fluorine bond in fluoroacetate.- J.Biol. Chem., 1965, v. 240Д 8,p.3434-3438,

93. Goldman P., Milne G.W. Carbon-fluorine bond cleavage.II.Studies of the mechaniom of the defluorination of fluoroacetate.-J.Biol.Chem., 1966, v.241, II 23, p. 5557-5559.

94. Goldman P., Milne W.A., Keister D.B. Carbonhalogen bond cleavage. III.Studies on bacterial halidohydrolases.- J.Biol. Chem., 1968, v. 243, H 2, p. 428-434.

95. Halenz D.K., Peng J.-Y., Hegre C.S., Lane D. Some properties of mitochondrial propionyl carboxylase.- J.Biol.Chem., 1962, v. 237, N 7, p. 2140-2147.

96. Hamilton W.A., Dawes E.A. A diauxi^effect with Pseudomonas aeruginosa. -Biochem.J., 1959, v. 71, N 1, p. 25-26.

97. Res. Comm., 1975, v. 65, N 2, p. 559-566.

98. Hardman D.J., Slater J.H. Dehalogenases in soil bacteria.-J.Gen.Microbiol., 1981 a, v.123, IT 1, p. 117-128.

99. Hardman D.J., Slater J.H. The dehalogenase complement of a soil Pseudomonas grown in closed and open cultures on haloalka-noic acid.- J.Gen.Microbiol., 1981 , v.127,N2, p.399-405.

100. Hardline R.A., Gunsalus J.C., Induction specificity and cata-bolite repression of the early enzymes in camphor degradation by Pseudomonas putida.-J.Bacterid., 1971, v. 106,112,p.468-478,

101. Hartmann J., Reineke W., Kviackmuss HtJ. chetabolism of 3-chlo-ro , 4-cloro, and 3,5-dichlorenzoate by a pseudomonad.-Appl.Environ. Microbiol.,1979,v.37,N 3,p.421-428.

102. Hassal K.A., Forrest T.Y. Reductive dechlorination of DDT by heated liver.- Nature.New.Biol., 1972,v.236,U68,p.215-216.

103. Heath H.E. ,'Gauxdy E.T. Relationship between catabolism of glycerol and metabolism of hexosephosphate derivatives by Pseudomonas aeruginosa.- J.Bacterid., 1978, v. 136, N 2,p.638-646.

104. Hermann N.J., Bell E.J. Metabolic control in Acinetobacter sp. I. Effect of C^ versus С2 and C^ substrates on isocitrate lyase synthesis.- Can.J.Microbiol,, 1970,v. 16,N 8, p.769-774.

105. Higa A.J., Milrad de Forchetti S.R., Cazzulo J.J. COg-fixing enzymes in Pseudomonas fluorescens.- J.Gen.Microbiol., 1976, v. 93, N 1, p. 69-74.

106. Hilderbrandt W., Waide H. Isocitratlyase von Candida guilli-ermondii Stamm M 17. III. Regulung durch Intermediate des Al-kanabbaus and allgemeines Regulationamodell.- Z. Allg.Microb., 1974, B. 14, N 1, s. 47-52.

107. Hirai M., Shiofani Т., Tanaka A., Fukui S. Effect of carbon and nitrogen sources on the levels of several NADP- and 1TAD1inked dehydrogenase activities of hydrocarbon-utilizable

108. Candida yeasts.- Agric. Biol. Chera. ,1976,v.40,N9,p.1819-1827.

109. Hoet P.P, Stanier R.Y. The dissimilation of higher dicarboxy-lic acids by Pseudomonas fluorescens.- Eur.J.Biochem., 1970, v. 13, N 1, p. 65-70.

110. Holloway B.W. Geneties of Pseudomonas. Bacteriol. Rev., 1969, v. 33, N 3 , p. 419-443.

111. Hopper D.J., Chapman P.J., Dagley S. Metabolism of L-malate and D-malate by a species of pseudomonas.- J.Bacteriol.,1970, v. 104, N 3, p. 1197-1202.

112. Horvath R.S. Microbial cometabolism of 2,4,5-trichloropheno-xyacitic acid.- Bull. Environ. Contain. Toxicology, 1970 a, v. 5, IT 5, p. 534-541 .

113. Horvath R.S. Cometabolism of the herbicide 2,3,6-trichloro-benzoate .- Agric . Food.Chem., 1971 6,v.19, IT Z , p.291-293.

114. Horvath R.S., Microbial co-metabolism and the degradation of organic compounds in nature,- Bacteriol. Rev., 1972, v. 36, F 2, p. 146-155.

115. Horvath R.S. Enhacement of co-metabolism of chlorobenzoates by the co-substrate enrichment technique.- Appl.Microbiol., 1973 v. 25, IT 6, p. 961-963.

116. Horvath R.S., Alexander M. Cometabolism of m- chlorobenzoate by an Arthrobacter.- Appl.Microbiol., 1970a,v.20,N2,p.254-258.

117. Horvath R.S., Alexander M. Cometabolism: a technique for the accumulation of biochemical products.- Can.J.Microbiol., 19706, v. 16, IT 11, p. 1131-1132.

118. Horvath R.S., Koft B.W. Degradation of alkyl benzene sulfonate by Pseudomonas species.- Appl.Microbiol., 1972, v. 23, IT A , p.407-414.

119. Irschik H., Oelze J. The effect of traster from low to high light insity on electron transport in Rhodospirillum rubrummembranes.- Arch. Microbiol., 1976,v. 109, N 3, p.307-313.

120. Jo.cobson L.A., Bartholomaus R.C., Gunsalus J.C. Repression of malic enzyme by acetate in Pseudomonas.- Biochem.Biophys. Res.Comm., 1966, v. 24, N 6, p. 955-960.

121. Jeensen D.J., Reineke W., Knackmuss^H.-J., Williams P.A. TOL-plasmid pWWO in constructed halobenzoate-degrading Pseudomonas strains: enzyme regulation and ША structure.- J.Bacte-riol., 1982, v. 150, Ж 1, p. 180-187.

122. Johnson H.W., Briggs G.G., Alexander M. Metabolism of 3-chlo-robenzoate by a pseudomonad.-Soil. Biol. Biochem. , 1972 ,v. 4 , IT 2, p. 187-190.

123. Jones M.E., Lipmann P. Aceto-CoA-kinase. In: Methods enzymol., 1955, v. 1, A.P. H.Y., p. 585-591.

124. Kaufman D.D., Kearney P.C., von Endt D.W., Miller D.E. Methjjb-carbamate inhibition of phenylcarbamate metabolism in soil.-Agric. Pood.Chem., 1970, v. 18, N 3 , p. 513-519.

125. Kearney P.C., Kaufman D. Enzyme from soil bacterium hydroly-sez phenylcarbamate pesticides.- Science, 1965, v. 147,1. N 3659, p. 740-741.

126. Keat M.J., Hopper D.J. The aromatic alcohol dehydrogenases in Pseudomonas putida UCIB 9869 grown on 3,5-xylenol and p-cresol Biochem.J., 1978, v. 175, N Z , p. 659-667.

127. Kellog S.T., Chatterjee D.K.,Chakrabarty A.M. Plasmid-assisted molecular*, breeding: new technique for enhanced biodegradation of persistent toxic chemicals.- Science, 1981, v. 214, MA5ZS, p. 1133-1135.

128. Kemp M.B., Hegeman G.D. Genetic control of the ,^-ketoadi-pate pathway in Pseudomonas aeruginosa.- J.Bactoriol., 1968, v. 96, N 5, p. 1488-1499.

129. Kilbane J.J., Chatterjee D.K., Karns J.S., Kellogg S.T., Chak-rabarty A.M. Biodegradation of 2,4,5-trichlorophenoxyacetic acid by a pure culture of Pseudomonas cepacia.- Appl. Environm.Microbiol., 1982, v. 44, N 1, p. 72-78.

130. Kitagawa M. Studieojbn the oxidation mechanism of methyl group.-J.Biol.Chem., 1956, v. 43, IT 4 , p. 553-563.

131. Klages U. Markus A., Lingens P. Degradation of 4-chlorophenyl-acetic acid by a Pseudomonas species.- J.Bacterid., 1981,v. 146, IT 1, p. 64-68.

132. Knichel V/., Radler P. D-Malic enzyme of Pseudomonas fluoresces.- Eur J. Biochem., 1982, v. I2.2> , N Ъ , p. 547-552.

133. Kornberg II.L. Rate and control of the glyoxylate cycle in Eschericia coli.- Biochem. J., 1966, v.99, N 1, p. 1-11.

134. Kunc P., Kotyk A. Effect of glucose on vanillic acid oxidation in Cellulomonas sp,- Polia microbiol., 1974, v. 19, 1T1,p. 29-37.

135. Kunz D.A., Chapman P.J. Catabolism of pseudocumene and 3-ethy-ltoluene by Pseudomonas putida (arvilla) mt-2: evidence for new function of the TOL (рШ'О) plasmid.- J .Bacterid., 1981, v. 146, IT 1 , p. 179-191.

136. Lanzilotta R.P., Pramer D. Herbicide fransformation. II. Studies with on acylamidase of Fusarium solani.- Appl.Microbiol., 1970, v. 19, IT 2, p. 307-313.141. Lessie Т.,

137. Neidhardt P.С. Adenosine trihosphate linked control of Pseudomonas aeruginosa glueone-6-phosphate dehygrogenaseJ.Bac-teriol., 1967, v. 93, N 4, p. 1337-1345.

138. LosadaM., Canovas J.L., Ruiz-Amil M. Oxaloacetate, citrama-late and glutamate formation from pyruvate in baker's yeast.-Biochem. Z., Li. 340, IT 1 , s. 60-74.

139. Matsumura P., Bonezet H.J., Patil K.C. Factors affecting microbial metabolism of j-BHC. J.Pesticide Sci., 1976, v. 1,1. 1 , p. 3-8.

140. Matula T.J., McDonald L.J., Martin S.M. COg-fixation by malic enzyme in a species of Micrococcus.- Biochem. Biophys. Res. Comm., 1969, v. 34, IT 6, p. 795-802.

141. McPadden B.A., Pu±ohit S. Jtaconate, an isocitrate lyase-di-rected inhibitor in Pseudomonas indigotera.- J.Bacterid., 1977, v. 131, IT 1, p. 136-144.

142. Midgley M., Dawes E.A. The regulation of transport of glucose and methyl- cL -glueоside in Pseudomonas fluorescens.-Biochem. J., 1973, v. 132, IT 2, p. 141-154.

143. Minoda Y., Omori T. Microbial degradation of toxic aromatic compounds.- Microbiol. Environ. Cleaning Pablished under the support of the ministry of education Japan., 1978, p.385-390.

144. Motosugi K., Esaki N., Soda K. Purification and properties of a new enzyme, DL-2-haloacid dehalogenase, from Pseudomonas sp.- J.Bacterid., 1982, v.150, N 2, p. 522-527.

145. Mukkada A.J., Long G.L., Komano A.M. The uptake of 2-deoxy-D-glucose by Pseudomonas and its regulation.- Biochem. J., 1973, v. 132, N 2, p. 155-162.

146. Murai K., Duggleby C.J., Sala-Yrepat .Т.Ы., Viilliams Р.Л. The metabolism of benzoate and methylbensoates via the me-ta-cleavage pathway by Pseudomonas arvilla mt-2.- Eur. J. Biochem., 1972, IT 2, p. 301-310.

147. Hurray K., Williams P.A. Role of catechol and methylcate-chols as inducers of aromatic metabolism in Pseudomonas putida.- J .Bacterid., v. 117, N Ь , p. 1153-1157.

148. Murray Т., Tokushige M., Nagai J., Katsuki H. Studies of regulatory functions of malic enzymes. I. Metabolic fmotion of HAD- and НАДФ-linked malic enzymes in Erhericia coll.- Biochem. J., 1972, v. 71, N6, p. 1015-1028.

149. Nakazav/a J., Kojima, Tanuchi H. Purification and properties of pyrocatechase from Pseudomonas fluorescens.- Bio-chim.Biophys. Acta, 1967, v. 142, IT 2, p. 189-199.

150. Nakazawa Т., Nozaki M., Hayaishi 0. Studies on pyrocate-chase. II. Electron spin resonance and other properties of iron in active center.- J.Biol.Chem., 1969,v.244,N1,p.119-125.

151. ITg F.M.-W., Dawes E.A. Regulation of enzymas of glucose metabolism by citrate in Pseudomonas aeruginosa.- Biochem. J., 1967, v. 104, N 2> , p. 48.

152. Ng F.M.-W.,Chemostat studies on the regulation of glucose metabolism in Pseudomonas aeruginosa by citrate.- Biochem. J., 1973, v. 132, IT 2, p. 129-140.

153. Hozaka J., Kusunose M. Metabolism of hydrocarbons in microorganisms. I. Oxidation of p-xylene and toluene by cell-free enzyme preparations of Pseudomonas aeruginosa.- Agr.Biol. Chem., 1968, v. 32, IT 8, p. 1033-1039.

154. Hozaka J., Kusunose M. Metabolism of hydrocarbons in microorganisms. II. Degratadion of toluene by cell-free extracts of Pseudomonas mildenbergii,- Agric.Biol.Chem., 1969, v.33,1. 6, p. 962-964.

155. ITozaki M., Kagamiyama H., Havaishi 0. Metapyrocatechase.

156. Purification, crystalization and some properties.- Biochem. Z., 1963, B. 338, N 3 , s. 582-590.

157. O'Brien R.Y/., Chuang D.T., Taylor B.L., Utter M.P. Novel enzymie machinery for the metabolism of oxaloacetate,phos-phoenolpyruvate and pyruvate in Pseudomonas citronellolis.-J.Biol.Chem., 1977, v. 252, IT 4, p. 1257-1263.

158. Omori T,, Yamada K. Studies on the utilization of hydrocarbons by microorganisms. XIII. Oxidation of m-xylene and ps?',".:'ocumene by Pseudomonas aeruginosa.- Agr. Biol, Chem., 1969, v. 33, IT 7, p. 979-985.

159. Omori Т., Yamada К. Studies on the utilization of hydrocarbons by microorganisms. XVI. Detection of metabolic intermediates of xylene and pseudocumene.- Agr. Biol.Chem. 1970 a, v. 34, N 5, p. 659-663.

160. Omori Т., Yamada K. Studies on the utilization of hydrocarbons by microorganisms. XVII. Metabolism of p-xylene and related compounds.- Agr .Biol.Chem., 1970 6 » v. 34, N 5» p. 664-669.

161. Omori Т., Alexander M. Bacterial dehalosenation of haloge-nated alkanes and faffy acids.- Appl. Environ. Microbiol., 1978, v. 35, N 5, p. 867-871.

162. Ornston L.H. Enzymes of the protocatechuale pathway.- J. Biol. Chem., 1966, v. 241, NI* , p. 3784-3794.

163. Ornston L.H. The conversion of catechol and protocatechu-ate to fb -ketoadipate by Pseudomonas putida. IV. Regulation.- J.Biol.Chem., 1966, v. 241, Ж 16 , p. 3800-3810.

164. Ornston L.N., Ornston M.K. Regulation of glyoxylate metabolism in Escherichia coli.- J.Bacteriol., 1969, v. 98, N 3, p. 1098-1108.

165. Phibbs P.V., Peary T.W., Blevins W.T. Pyruvate carboxylase deficiency in pleiotropic carbohydrate negative mutant strains of Pseudomonas aeruginosa.- J.Bacteriol., 1974, v. 118, N 3, p. 999-1009.

166. Phizackerley P.J.R., Francis M.J.O. Cofactor requirements of the L-malate dehydrogenase of Pseudomonas Chester.- Biochem. J., 1966, v. 106, II Z , p. 524-535.

167. Poh C.L., Bayly R.С. Evidence for isofunctional enzymes used in m-cresol and 2,5-xylenol degradation via genticate pathway in Pseudomonas alcaligenes.- J.Bacteriol., 19S0, v. 143, H 1, p. 52-69.

168. Reanny D. Extrachromosomal element an possible agent of adaptation and development.- Bacteriol. Rew., 1976,v.40, И 3, p. 552-590.

169. Reeves H.C., Rabin R., Y/egener W.S., Ajl S.J. Assay of enzymes of the tricarboxylic acid and glyoxylate cycles. In: Methods in microbiology, 1971, v. 6 A, p. 425-462. A.P. London.

170. Reineke W., Knackmuss H.-J. Chemical structure and biodeg-radability of halogenated aromatic compounds. Substituent effect on 1,2-dioxygenation.- Biochim. Biophys. Acta.,1978, v. 542, IT Ь , p. 412-423.

171. Reineke W., Knackmuss M.-J. Construction of haloaromatic utilizing bacteria.- Nature (London),1979, v.277,p.385-386.

172. Reineke W., Knackmuss H.-J. Hybrid pathway for chlorobenzo-ate metabolism in Pseudomonas ср. B13 derivatives.- J.Bacteriol., v. 142, N 2, p. 467-473.

173. Renner E.D., Berholhr R.W. Characterization of pyruvate carboxylase of Bacillus licheniformis.- J.Bacteriol., 1972,v. 190, 11 Z , p. 764-772.

174. Richmond M.H. Enzymie adaptation in bacteria: its biochemical and genetic basis.- Essays Biochem., 1968, v. 4,p. 105- I54

175. RiS"by P.W.J., Burlegh B.D., Hartley B.S. Gene duplication in experimental evolution.- Nature (London), 1974, v. 251, N5h?lt p. 200-204.

176. Roche Т.Е., Williams J.O., McFadden B.A. Effect of pH and butter upon Km and inhibition by phosphoenolpyruvate of iso-citrate lyase from Pseudomonas indxgofera.- Biochim.Biophys. Acta, 1970, v. 206,N 1, p. 193-195.

177. Schacterle J.R., Pollack J.G. A simplified method for the Quantitative assay of small amotats of protein in biological material.- Anal. Biochem., 1973, v. 51, U 2,p. 654-655.

178. Schreiber A., Hellwig M., Dcrn E., Keineke V/., Knackmuss H.-J. Critical reaction in fluorobenzoic acid degradation by Pseudomonas sp. В 13.- Appl. Environ.Microbiol., 1980, v. 39, N 1, p. 58-67.

179. Schwartz E.R., Reed L.J. Regulation of the activity of the pyruvate dehydrogenase complex of Escherichia coli.- Biochemistry, 1970, v. 9, N 6, p. 1434-1439.

180. Scrutton M.C., Yong M.K. Pyruvate carboxylase. In: The En-r-ymes., 1972, v. 6, p. 1-35. A.P.N.Y.

181. Seubert Y/., Remberger U. Reinigung und Y/irkungsweise der Pyruvatecarboxylase aus Pseudomonas citronellolis.-Biochem. Z.,B,334, N 5 , p. 401-414.

182. Slater J.H., Lovatt D., Y/eightman A.J., Senior E., Bull A.T. The growth of Pseudomonas putida on chlori-nated aliphatic acids and its dehalogenase activity.- J.Gen.Microbiol.,1979,v. 114, N 1, p. 125-136.

183. Smith P.P., Clark P.H. Catabolite repression of Pseudomonas aeruginosa amidase: the effect of carbon source on amidasesynthesis.- J.Gen.Microbiol., 1975 a, v.90,N1,p.81-90.

184. Smith P.P., Clark P.H. Catabolitc repression of Pseudomonas aeruginosa amidase: isolation of promo tor mutants.-J.Gen.Microbiol., 1975 6 , v. 90, IT 1, p. 91-99.

185. Stanier R.Y., Gunsalus J.C., Gunsalus C.T. The enzyme con-vertion of maldelic acid to benzoic acid. II. Properties of the particulate fraction.- J.Bacterid., 1953, v. 66,1. N 5 , p. 543-547.

186. Subba-Rao R.V., Alexander M. Products formed from analogues DDT metabolites by Pseudomonas putida.- Appl. Environ. Microbiol., 1977, v. 33, И 1, p. 101-108.

187. Subba-Rao R. V., Alexander M. Effect of DDT metabolites on soil respiration and on an aquatic alga.- Bull. Environ. Contam. Toxicol., 1980, v. 25, Ж I , p. 215-220.

188. Subramanian V., Liu T.-1T., Yeh Vj'.K., Gibson D.T. Toluene dioxygenase: purification ofjan iron-sulfur protein by affinity chrO'matography.- Biochem. Biophys.Res.Comm., 1979, v. 91, iT 3, p. 1131-1139.

189. Taylor B.L., Barden R.E., Utter M.P. Identification of the reacting form of pyruvate carboxylase.- J.Biol.Chem., 1972, v. 247, IT 22, p. 7383-7390.

190. Taylor B.L., Routman S., Utter M.P. The control of the synthesis of pyruvate carboxylase in Pseudomonas citronello-lis.- J. Biol. Chem., 1975, v. 250, IT 6, p. 2376-2382.

191. Tiwari IT.P., Campbell J.J.R. Enzymatic control of the metabolic activity of Pseudomonas aeruginosa grown in glucose or succinate media.- Biochim.Biophys.Acta, 1969, v. 192,1. N 3, P. 395-401.

192. Tiwari IT.P., Campbell J.J.R. Utilization of dicarboxylic acid by Pseudomonas aeruginosa.- Can.J.Microbiol., 1969,v.15, Н 9, р. 1095-1Ю0.

193. Utter M.F., Keecb D.B. Formation of Oxaloacetate from Pyruvate and 002.-J.Biol.Cheili?|Pv. 235, H 5, pc 17-19.

194. Van Dijken J.P., Quaylc J.R. Fructose metabolism in four Pseudomonas species.- Arch. Microbiol., 1977, v. 114,N 3, p. 281-286.

195. Von Tigerstrom II., Campbell J.J.R. The tricarboxylic acid cycle, the glyoxylate cycle, and the enzymes of glucose oxidation in Pseudomonas aeruginosa.- Can.J.Microbiol., 1966, v. 12, U 5, p. 1015-1022.

196. Watson B.F., Dworkin M. Comparative intermediary metabolism of vegetative cells and microcysts of Mixococcus xan-thus.- J.Bacteriol., 1968, v.96, IT 5, p. 1465-1473.

197. Wedemeyer G. Dechlorination of 1,1,1-tr±chloro-2,2-bis(p-chlorophenyl)ethane by Aerobacter aerogenes.- Appl.Microbiol., 1967, v. 15, N 3, p. 569-574.

198. Weightman A.J., Slater J.H. Selection of Pseudomonas puti-da strains with elevated dehalogenase activities by conti-nuons culture growth on chlorinated alkonoic acids.- J.Gen. Microbiol., 1980, v. 121, IT 1, p. 187-193.

199. Weightman A.J., Slater J.H., Bull A.T. Cleavage of the carbon-chlorine bond by Pseudomonas putida.- Soc.Gen.Microb. Quarterly, 1979, v. 6, p. 76-77.

200. V/eimberg R. Pentose oxidation by Pseudomonas fragi.- J.Biol. Chem., 1961, v. 263, IT 3, p. 629-635.

201. Weitzman P.D.J., Dunmore QP. Fed. Eur.Biochem.Soc.Letters, 1969, v. 3, p. 265.

202. V/eitzmmi P.D.J., Jones D. Regulation of citrate synthaseand microbial taxonomy.-Nature, 1968, v. 219,115151,p.270-272.

203. Williams P.A., Murray K. Metabolism of benzoate and the methylbenzoates by Pseudomonas putida (arvilla) mt-2:evi-dence for the existence of a TOL-plasmid.- J.Bacteriol, 1974, v. 120, N l, p. 416-423.

204. Williams P.A., Worsey M.J. Ubiquity of plasmids for toluene and xylene metabolism, in soil bacteria: evidence for existence of new TOL plasmids.- J.Bacteriol., 1976, v. 125, N 3, p. 818-828.

205. Wong D.T.O., A;jl S.J. Convers-dLon of acetate and glyoxyla-te to malate.- J.Amer.Chem.Soc., 1956, v.78,H 13,p.3230-3231 .

206. Worsey M.J., Williams P.A. Metabolism of toluene and the xylenes by Pseudomonas putida (arvilla) mt-2; evidence for a new function of the TOL plasmid.- J.Bacteriol., 1975,v. 124, I 1, p. 7-13.

207. Worsey M.J., \7illiams P.A. Characterization of a spontaneously occurring mutant of the TOL 20 plasmid in Pseudomonas putida MT 20: possible regulatory implications.- J.Bacteriol., 1977, v. 130, N 3, p. 1148-1158.

208. Wright S.J.J., Porey A. Metabolism of the herbicide basban by a soil Penicillium.- Soil.Biol.Biochem., 1972, v.4, 112, p.207-213.

209. Yano K., Uishi T. pKJ1, a naturally occurring conjugative plasmid coding for the toluene degradation and resistance to streptomycin and sulfonamides.- J.Bacteriol., 1980,v. 143, К 2, p. 552-560.

210. Yeh Y.K., Gibson D.T., Lin T.-1T. Toluene-dioxygenase: a multicomponent enzyme system.- Biochem.Biophys.Res.Comm., 1974, v. 78, H 1, p. 401-407.

211. Ziffer H., Jerina D.H., Gibson D.T., Kobal V.M. Absolutestereochemistry of the (+)-cis-1,2-d±hydroxy-3-methyl-cyc-lohexa-3} 5-diene produced from toluene by Pseudomonas putida.- J.Amer.Chem.Soc., 1973, v. 95, И 12,p. 4048-4049.

212. Выражаю искреннюю благодарность моим научным руководителям академику Георгию Константиновичу Скрябину и доктору биологических наук Людмиле Алексеевне Головлёвой за постоянное внимание, ценные советы и критические замечания при выполнении данной работы.

213. Благодарю всех сотрудников лаборатории энзиматической деградации органических соединений, оказавших помощь при выполнении и оформлении работы.