Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Особенности получения пектинового препарата и функциональная характеристика его влияния на организм цыплят-бройлеров
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Особенности получения пектинового препарата и функциональная характеристика его влияния на организм цыплят-бройлеров"
На правахрукописи
БЕЛЯЕВ Алексей Геннадьевич
ОСОБЕННОСТИ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕКТИНОВОГО ПРЕПАРАТА И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЕГО ВЛИЯНИЯ НА ОРГАНИЗМ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ
03.00.13 -физиология 03.00.04-биохимия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Курск - 2005
Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии ФГОУ ВПО "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова"
Научные руководители: доктор биологических наук, профессор Фурман Юрий Васильевич
кандидат биологических наук, доцент Битюков Евгений Ильич
Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Кибкало Леонид Ильич
доктор биологических наук, профессор Шапошников Андрей Александрович
Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»
Щ)
Защита состоится " 2005 г. в " часов на
заседании диссертационного совета Д 220.040.03 при ФГОУ ВПО "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова" по адрес): 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70, КГСХА.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Курской Государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова.
Автореферат разослан
Ученый секретарь диссертационного совета
Рыжкова Г.Ф.
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Среди глобальных проблем современности экологические аспекты занимают особое положение. Антропогенное загрязнение окружающей среды имеет негативное воздействие на полноценный рост и развитие организма сельскохозяйственных животных и птиц. В результате снижается сохранность и продуктивность выращиваемого поголовья, особенно мясного направления, ухудшается качество и экологическая безопасность получаемой продукции, увеличиваются затраты на выращивание птицы.
Значительная роль в снижении токсической нагрузки на организм может принадлежать различным биологически активным соединениям растительного происхождения и, в частности, пектиновым веществам, которые пока еще недостаточно изучены как в химическом, так и в биологическом отношении.
В отличие от многих сорбционно-активных препаратов минерального происхождения, обладающих преимущественно сорбирующими свойствами, пектиновые вещества имеют гораздо больший спектр действия.
Пектины и их производные используют для лечения диспепсий, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, колитов, в качестве антикоагулянта, гемостатиче-ского и гепатозащитного средства, для снижения в крови уровня холестерина и глюкозы у больных сахарным диабетом. Выявлена их противоопухолевая и антимикробная активность (Л.В. Донченко, 2000; Ю.С. Хотимченко и др., 2000; Н.П. Шелухина и др, 1989; Э.Г. Потиевский, 2003; Н. Yamada, 1996, и др). Однако в выяснении механизмов биологического действия пектинов часто возникают разногласия среди исследователей. Пектины эффективно связывают и выводят из организма токсины, тяжелые металлы, радионуклиды (В.В. Стрельников, 1996; В.В. Ковалев и др., 1989; Н.Ш Кайшева и др., 1992; Н.С. Карпович и др., 1989), пролонгируют действие, повышают биодоступность и снижают токсичность различных лекарственных средств (З.Д. Ашубаева и др., 1982). В литературе упоминается о возможности приготовления на основе пектиновых веществ заменителей кровяной плазмы (М.Б. Аймухомедова и др., 1977), а данных о воздействии растворов яблочных пектинов на клеточную стенку эритроцитов не имеется. Некоторые авторы (СВ. Москаленко, 1995, Г.Н. Войтенко, 1992) указывают на способность свекловичного пектина связывать эндогенные вещества, в том числе и ферментный белок трипсин, информация о подобном влиянии яблочных пектинов отсутствует.
Обладая перечисленными качествами, пектины постепенно находят свое применение в медицине, вместе с тем сведения о комплексном их влиянии на организм сельскохозяйственных животных и птиц отсутствуют. Поэтому актуальным является поиск новых эффективных и недорогих способов получения пектинов, обладающих высоким лечебно-профилактическим действием, а также изучение их свойств и влияния на организм сельскохозяйственных животных и птиц.
Цель и задачи исследований. Основной целью работы являлось совершенствование способа получения экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье, способа получения пектинов, а также изучение биологических свойств пектинов, физиологического состояния и гематологических показателей цыплят-бройлеров, при включении пектиновых веществ в рацион их кормления. Для достижения основной цели были определены следующие задачи:
1. Изучить эффективность различных методов обработки растительного сырья, разработать способ получения пектиновых экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье.
2. Изыскать оптимальный способ получения пектинов.
3. Изучить физико-химические и качественные показатели исследуемых пектинов.
4. Определить адгезивную активность, связывающую способность 1%-ных водных растворов по отношению к ферментному белку трипсину, нами полученного и коммерческого яблочных пектинов, изучить действие водных растворов дополнительно очищенного полученного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов.
5. Испытать влияние яблочных пектинов на цыплят-бройлеров на основании: контроля физиологического состояния, анализа биохимических и морфологических показателей крови с учетом дозировки и физико-химических свойств пектинов, определения в мясе концентрации кальция, фосфора, тяжелых металлов, нитрат ионов.
6. Определить экономическую эффективность производственного испытания пектинов на цыплятах-бройлерах.
Научная новизна. Впервые использована обработка растительного сырья водными растворами натрия двууглекислого, с целью: более полного извлечения пектинов в экстракт и определения количественного содержания пектина в растительном сырье. Найден способ получения пектинов, обладающих повышенной комплексообразующей способностью, изучены физико-химические свойства и качественные показатели полученных пектинов.
Впервые исследована адгезия яблочных пектинов, их связывающая способность по отношению к ферментному белку трипсину, определено влияние полученного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов.
С учетом результатов научного эксперимента дано обоснование эффективности использования яблочных пектинов при выращивании цыплят-бройлеров. Изучено их влияние на физиологическое состояние, биохимические и морфологические показатели крови цыплят, выяснена эффективность выведения тяжелых металлов и нитрат ионов при биохимическом анализе мышц.
Практическая значимость работы. На основании полученных результатов производству предложен способ получения пектиновых экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье.
Результаты проведенных экспериментов позволяют предложить способ получения пектинов с более низкой себестоимостью изготовления для дальнейших исследований при получении эффективных комплексообразоватслей, плазмозаменителей и детоксикан-тов. Научно обосновано применение высокометоксилированных и низкометоксилирован-ных яблочных пектинов при выращивании цыплят-бройлеров.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Эффективность различных методов обработки растительного сырья и разработанного способа получения пектиновых экстрактов для определения количественного содержания пектина в растительном сырье.
2. Новый способ получения пектиновых веществ и его оптимизация.
3. Физико-химические показатели и качество пектиновых веществ.
4. Активность адгезии, связывающая способность яблочных пектинов по отношению к ферментному белку трипсину, влияние водных растворов очищенного полученного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов.
5. Сравнительные результаты практического применения полученного и коммерческого яблочных пектинов при выращивании цыплят-бройлеров в условиях промышленного птицеводства.
Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на: - международной научно-практической конференции «Использование достижений современной биологической науки при разработке технологий в агрономии, зоотехнии и ветеринарии» (Брянск, 2002 г.);
-научно-практических конференциях Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 2002-2004 гг.).
Публикация материалов. По теме диссертации опубликовано пять научных работ.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 129 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов исследования и их обсуждения, выводов, практических предложений, технического решения, списка литературы и приложения. Текст иллюстрирован 21 таблицей и 13 рисунками. Список использованной литературы включает 256 источников, в том числе 105 иностранных авторов.
2 . МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнена в период с 2001 по 2004 гг. в лаборатории кафедры физиологии и биохимии Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова, испытательном центре пищевой и фармацевтической продукции Курского государственного медицинского университета, в условиях производства ОАО "Птицефабрика Курская", лаборатории Курской городской поликлиники №6.
В качестве исследуемых веществ использовались пектин яблочный и свекловичный, коммерческий яблочный пектин и пектиносодержащее растительное сырье. Пектины из выжимок яблок сорта "Антоновское" и из отходов производства Золотухинского сахарного завода - свекловичного жома получены в лаборатории кафедры физиологии и биохимии КГСХА по разработанному способу. Коммерческий пектин предоставлен Курской кондитерской фабрикой ЗАО "Кондитер-Курск".
Объектом исследований являлись выращиваемые цыплята-бройлеры кросса "Смена-4" и эритроциты здоровых коров черно-пестрой породы. Экспериментальная часть работы состояла из трех этапов и проводилась по схеме, представленной на рис. 1.
На первом этапе изучали эффективность обработки растительного сырья различными методами с учетом определения концентрации пектинов в пектиновых экстрактах, полученных по общепринятому способу (Л.В. Донченко, 2000). Концентрацию пектинов в экстрактах вычисляли объемным методом (Д.Ш. Шамшибаева и др., 1980).
Проверку результативности разработанного способа получения пектиновых экстрактов проводили в лаборатории кафедры физиологии и биохимии КГСХА. Результаты учитывали по изменению концентрации пектинов в экстрактах объемным методом и сравнивали их с показателями, полученными с использованием общепринятого способа.
В качестве сырья, которое предварительно консервировали сушкой до влажности 8%, использовали выжимки яблок ранних и среднеспелых сортов и свекловичный жом, полученный из свежих корней сахарной свеклы. Масса навески растительного материала составляла 10 г. Влажность сырья определяли электронно-цифровым влагомером электроника ВЛК-01. Оптимальные режимы обработки сырья при получении пектинов новым способом находили, используя статистический метод оптимизации химических процессов Бокса-Уилсона (Л.П. Рузинов, 1972).
Изучение качества полученных пектинов проводили в испытательном центре пищевой и фармацевтической продукции КГМУ, физико-химических показателей в лаборатории кафедры физиологии и биохимии КГСХА.
¡Этап
II Этап
III Этап
Рис. 1. Общая схема исследований
Качество пектинов определяли методами, установленными нормативными документами, с учетом санитарных правил и норм 2.3.2.560 - 96. Уровень рН определяли рН потенциометром ЛПУ-01, массовую долю свободных и метоксилированных карбоксильных групп - методом титрования 1 %■ нога раствора пектина 0,1н раствором №ОН с индикатором Хинтона, массовую долю балластных веществ - промыванием, подкисленным и чистым спиртом с последующим высушиванием до постоянной массы (Л.В. Донченко, 2000). Комплексообразующую способность пектина в экстрактах - по методу В.Л. Компанцева. Комплексообразующую способность сухих пектинов находили методом комплексонометрического титрования. Молекулярную массу пектинов устанавливали вискозиметрически.
Следующий этап работы включал в себя исследование свойств коммерческого и выделенного из яблочных выжимок пектинового вещества.
Активность адгезии пектиновых водных растворов определяли по методике измерения краевых углов, значения поверхностного натяжения - методом счета капель (О.Н.
Григоров и др., 1964).
Влияние пектинов на клеточную стенку эритроцитов оценивали по изменению осмотической и кислотной резистентности эритроцитов, при добавлении пектинов в гипотонические растворы хлорида натрия и растворы стандартного гемолитика.
Объектом исследований являлись эритроциты здоровых коров черно-пестрой породы, содержавшихся в типовом коровнике, параметры микроклимата которого соответствовали зоогигиеническим нормам, в условиях СХПК им. Черняховского, Курского района, животных в количестве 7 голов подбирали по принципу аналогов с учетом кормления, содержания, живой массы, возраста и физиологического состояния. Подсчет общего количества эритроцитов осуществлялся по общепринятой методике. Осмотическую резистентность эритроцитов определяли микроскопическим способом по Яновскому (A.A. Кудрявцев и др., 1974). Кислотную резистентность эритроцитов определяли по общепринятой методике (И.П. Битюков и др., 1990). Для проведения опытов полученный яблочный пектин подвергался дополнительной очистке КУ-2 катеонитом, AB-17 анио-нитом и трехкратной промывке 96%-ным этанолом.
Связывающую способность яблочных пектинов по отношению к ферментному белку трипсину определяли экспресс - методом определения ингибиторов трипсина в сыворотке крови человека Данный метод также позволяет определять количество связавшегося или ингибированного трипсина веществами различной природы (К.Н. Веремеенко и др., 1986).
Третий этап работы был посвящен комплексной оценке влияния полученного и коммерческого яблочных пектинов на организм цыплят-бройлеров.
Опыты проводились в условиях производства ОАО "Птицефабрика Курская" на цыплятах-бройлерах мясного кросса "Смена-4", которых выращивали до 43-дневного возраста в одинаковых условиях содержания и кормления в соответствии с установленным на птицефабрике технологическим режимом. Поголовье птицы на период выращивания содержалось в двухъярусных клеточных батареях КБР-2.
Цыплята первой (контрольной) группы получали только основной рацион (ОР), птицам опытных групп дополнительно с 5-го дня скармливали испытуемые пектины. Схема опыта, доза и режим дозирования пектинов представлены в табл. 1.
В ходе опыта учитывали поедаемость корма, сохранность и клиническое состояние поголовья, массу тела по результатам индивидуальных контрольных взвешиваний.
По окончании опытов был проведен анализ хозяйственно-экономических показателей и расчет экономической эффективности использования пектинов по методике предусмотренной специалистами птицефабрики и методике расчета экономической эффективности ветеринарных мероприятий (A.A. Кунаков, 1996) в ценах 2004 года.
Исследования мышц и крови, проводили в лаборатории кафедры физиологии и биохимии КГСХА, в лаборатории Курской городской поликлиники №6. Материал для лабораторных исследований отбирали при убое цыплят в возрасте 43 суток по 7 голов из каждой группы.
В крови определяли количество эритроцитов и лейкоцитов методом подсчета в камере Горяева. Концентрацию гемоглобина вычисляли с помощью фотометрического гемоглобинометра "МиниГем 540". Осмотическую резистентность эритроцитов определяли микроскопическим способом по Яновскому. Скорость оседания эритроцитов находили с помощью аппарата Панченкова. Уровень общего белка определяли рефрактометрическим методом на рефрактометре ИРФ-22. Для определения белковых фракций применяли не-фелометрический метод. Глюкозу в крови определяли по цветной реакции с ортото-толуидином в растворе уксусной кислоты, неорганический фосфор в безбелковом
фильтрате крови - с вандат-молибденовым реактивом по Полсу в модификации В.Ф.Коромыслова и Л.А. Кудрявцевой.
Таблица 1
Схема научно-производственного опыта по использованию полученного и коммерческого яблочных пектинов в рационах цыплят-бройлеров
Магний в безбелковом фильтрате крови находили по цветной реакции с титановым желтым по Кункелю, Пирсону, Швейгерту в модификации И.П. Петрухина. Холестерол в сыворотке крови определяли по реакции Либермана - Бурхарда в модификации Илька. Железо и медь в крови находили по Сенделу в модификации С.Г. Кузнецова. Определение общего кальция в сыворотке крови проводили методом комплексонометрического титрования трилоном Б с индикатором флуорексоном по Вичеву, Каракашеву (И.П. Кон-драхин и др., 1985).
В мышцах определяли: кальций методом титрования трилоном Б, с индикатором мурексидом, фосфор - на ФЭК с применением аскорбиновой кислоты и молибдата аммония по Лоури и Лопесу в модификации Скулачева, медь - на ФЭК в растворах полученных путем мокрой минерализации проб с диэтилдитиокарбаматом натрия, ртуть - методом визуального колоримстрирования с йодидом меди в деструктированной пробе, свинец на ФЭК в растворе минерализованной пробы с хроматом калия, цинк - на ФЭК с ди-тизоном в растворе минерализованной пробы. Концентрацию нитрат ионов - на микропроцессорном измерителе нитратов "Микон".
Полученный цифровой материал обработан статистически с вычислением средней арифметической (X), среднего квадратичного отклонения (8), степени достоверности различий средних (Р) по критерию Стьюдента (1), с использованием ПЭВМ. Результаты рассматривали как достоверные начиная со значения Р<0,05 (Г.Ф. Лакин, 1980).
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Эффективность различных методов обработки растительного сырья и разработанного способа получения пектиновых экстрактов
Пектиновые вещества составляют вместе с белками около 30% сухой массы растительной клетки, белковые соединения препятствуют полноценному извлечению пектинов в экстракты. С целью повышения эффективности извлечения пектинов из растительного сырья был рассмотрен ряд солей в 5-10% концентрации, и 30%-ная водно-эфирная смесь способные связывать и осаждать белки из растительной клетки (Ю.Б. Филипо-вич,1993). Для обработки использовали соли наиболее доступные и безопасные в пищевом отношении. Результаты исследований по эффективности обработки растительного материала водными растворами хлорида натрия, хлорида калия, гидрокарбоната натрия и водно-эфирной смеси представлены в табл. 2. Применение водного раствора гидрокарбоната натрия в качестве обрабатывающего агента увеличивало эффективность извлечения
пектиновых веществ из свекловичного жома и яблочных выжимок в экстракты по сравнению с контролем на 82% и 72% соответственно.
Таблица2
Массовая доля содержания пектиновых веществ в экстрактах при использовании различных методов предварительной обработки сырья п=7
Способ обработки Массовая доля содержания пектиновых веществ в экстрактах, %
I (Свекловичный) П (Яблочный)
I (контроль) без обработки 0,034*0,012 0,061*0,009
II 8%-ный водный раствор №С1 0,041±0,006 0,064*0,004
III 8%-ный водный раствор КС1 0,043*0,004 0,051*0,007
IV 8%-ный водный раствор ЫаНСОз 0,062*0,011** 0,108*0,008**
V 30%-ная водно-эфирная смесь 0,046±0,008 0,041±0,005
Примечание: Р<0,05 *; Р<0,01 * *
Таблица 3
Эффективность извлечения пектинов из растительного сырья по общепринятому и предложенному способам
Показатели, ед. изм. Определение содержания пектина в яблочных выжимках
I (контроль) общепринятый способ II (опыт) предлагаемый способ
Содержание гидратопектинов в сырье, % на сухую массу ио±о,оз 1,30*0,03
Содержание протопектинов в сырье, % на сухую массу 3,30*0,05 7,18*0,07**
Общее содержание пектинов в сырье, % на сухую массу 4,60*0,04 8,48*0,05**
Показатели, ед. изм. Определение содержания пектина в свекловичном жоме
I(контроль) общепринятый способ П (опыт) предлагаемый способ
Содержание гидратопектинов в сырье, % на сухую массу 0,65*0,04 0,65*0,04
Содержание протопектинов в сырье, % на сухую массу 1,90*0,03 4,30*0,06**
Общее содержание пектинов в сырье, % на сухую массу 2,55*0,04 4,95*0,05**
Примечание: Р<0,01**
Основываясь на полученных результатах, нами был разработан новый способ, позволяющий наиболее результативно извлекать пектиновые вещества из растительного материала. Данный способ включал в себя предварительную обработку исследуемого материала - растительного сырья, с помощью механической мешалки при 100 об/мин, 9,7 %- ным водным раствором гидрокарбоната натрия, при комнатной температуре, в течение 183 мин, при соотношении сырья и раствора 1:10. После обработки сырье промывали
от избытка гидрокарбоната натрия дистиллированной водой в соотношении 1:10. Из подготовленного таким способом сырья извлекались сначала гидратопектины, путем 3-х кратного экстрагирования водой при 40 °С, а затем протопектины, последовательной обработкой сначала 0,3 н. водным раствором соляной кислоты при 100 °С, а потом 1%-ным водным раствором цитрата аммония.
Увеличение концентрации пектинов в экстрактах, полученных по предложенному способу, относительно контроля, составило 94% и 84% для свекловичного жома и яблочных выжимок соответственно. Результаты сравнения отражены в табл. 3.
3.2. Способ получения пектиновых веществ и его оптимизация
Учитывая целесообразность предварительной обработки сырья гидрокарбонатом натрия, предшествующей процессам гидролиза и экстрагирования, был найден способ получения пектинов, схема которого представлена на рис.2.
[ Измельчение свежего или сухого растительного сырья
Г
Предварительная обработка сырья 9,7%-ным водным раствором гидрокарбоната натрия в течение 182 мин, в соотношении сырье-раствор 1:10, при комнатной температуре
I
Промывка обработанного сырья водой в соотношении 1:10
Двукратное экстрагирование сырья водой при температуре 65°С, в соотношении 1:10, в течение 40 мин.
_*_
Отделение экстракта от сырья центрифугированием или фильтрацией через плотную ткань
__I_
Выделение пектинов из полученных экстрактов путем осаждения 96%-ным этанолом или безводным ацетоном, подкисленным до рН 2 соляной кислотой, в соотношении 1:1с последующей двукратной промывкой этанолом или ацетоном и сушкой на воздухе или сушильном шкафу при 45°С, и измельчением
Рис. 2. Общая схема разработанного способа получения пектиновых экстрактов, для определения концентрации пектинов в растительном сырье
Для созданного способа получения пектинов были найдены оптимальные режимы предварительной обработки, которые позволили максимально увеличить выход готового продукта. Процесс обработки описывался нелинейным ^уравнением регрессии второй степени: у=11,025-0,245XJ-H),0125x2-0,989xi2- 0,1875х|-хг-0,302х22, которое адекватно отражало опытные данные. При исследовании поверхности отклика изучаемого процесса уравнение регрессии было приведено к канонической форме: Y - 11,042 = 0Д9Х| -Хг , и представляло собой гиперболический параболоид. Максимальный теоретически вычисленный выход продукта составлял 11,067%±0,27%, ему соответствовали следующие параметры обработки: 9,8%-ная концентрация раствора гидрокарбоната натрия при продолжительности обработки 182 минуты. Практическая проверка найденных режимов подтвердила теоретический расчет, выход продукта при использовании найденных оп-
тимальных параметров составлял 11,1%±0,2%. Двумерное сечение поверхности отклика для выхода яблочного пектина, составляющего 11%, представлено на рис.3.
1 - найденная методом "ридж анализ" точка оптимального режима.
2 -двумерное сечение поверхности отклика, для выхода продукта 11%.
3 - область изученного факторного пространства.
Рис. 3. Двумерное сечение поверхности отклика для выхода яблочного пектина, составляющего 11%
3.3. Физико-химические свойства и качество пектиновых веществ
Полученные пектины подвергались исследованиям, с целью определения их физико-химических свойств и качества, табл.4, табл 5. Полученные пектины не содержали пестицидов: гексахлоргексана, ДДТ и его метаболитов. Обладая ионной селективностью, свободные карбоксильные группы пектинов проявляют сродство ко многим металлам. Присутствие малого количества тяжелых металлов в анализируемых образцах объясняется неполной деминерализацией пектинов в процессе их осаждения из экстрактов. При исследовании микробиологических показателей выяснено отсутствие патогенных форм и кишечной палочки. Содержание мезофильных аэробных и факультативных анаэробных микроорганизмов оказалось в 500 раз ниже допустимых значений. Таким образом, выдеченные пектиновые вещества соответствовали установленным санитарным правилам и нормам 2.3.2.560 - 96 и могли использоваться как безопасные кормовые добавки.
Полученные пектины обладали высокой способностью к образованию комплексов с тяжелыми металлами. Комплексообразующая способность свекловичного и яблочного пектина составила 181,ЗмгРЬ2+/г и 394,65мгРЬ2+/г соответственно, для коммерческого пектина она была менее выраженной и равнялась 129,5 мгРЬ2+/г На данную способность пектинов кроме количества свободных карбоксильных групп влияет рН среды и степень этерификации молекулы. Оптимальное значение среды для комплексо-образования наблюдается при рН 5-11. Значения рН анализируемых объектов составили 6,25 и 6,93 для свекловичного и яблочного пектинов соответственно, а показатель рН коммерческого пектина был равен 2,0. Высокая комплексообразующая способность изучаемых веществ также обусловливалась малым содержанием метоксилированных карбоксильных групп, которые влияют на степень этерификации пектинов, и в конечном итоге на уровень насыщения пектиновой макромолекулы двухвалентным катионом металла (Н П. Шелухина и др., 1970). Процентное содержание таких групп свекловичного пектина составило 2,4%, яблочного - 0,59%, коммерческого - 6,4%.
Таблица 4
Результаты проверки качества полученных пектинов
Показатели, ед. изм. Нормы на продукцию поСанПиН Полученный свекловичный пектин Полученный яблочный пектин
Гексахлорциклогексан, мг/кг Не более 0,05 Не обнаружено Не обнаружено
ДДТ и его метаболиты, мг/кг Не более 0,1 Не обнаружено Не обнаружено
Свинец, мг/кг 0,4 0,08 0,12
Мышьяк, мг/кг 0,2 0,05 0,07
Кадмий, мг/кг 0,03 0,005 0,002
Ртуть, мг/кг 0,02 0,005 0,004
Медь, мг/кг 5,0 2,0 1,1
Цинк, мг/кг 10,0 4,9 2,7
Мезофильные аэробные и факультативные анаэробные микроорганизмы, КОЕ в 1г. Не более 50000 Не превышает (227) Не превышает (156)
Патогенные, в т.ч. сальмонеллы Не допускается в25 г Не обнаружено Не обнаружено
БГКП (коли-формы) Не допускается в 0,1 г Не обнаружено Не обнаружено
Таблица 5
Физико-химические показатели пектинов
Показатели, ед. изм. Полученный свекловичный пектин Полученный яблочный пектин Коммерческий яблочный пстин
Кс пектиновых экстрактов, мгРЬ^/мл 6,84 10,1 -
Кс сухих пектинов, мгРЬ*7г 181,3 394,65 129,5
Свободные карбоксильные группы, % 1,7 2,2 3,8
Метоксил ированные карбоксильные группы, % 2,4 0,59 6,4
рН1%-ных водных пектиновых растворов 6,25 6,93 2,00
Массовая доля балластных веществ, % 25,8 193 -
Выход пектинов на сухую массу сырья, % 8,7 11,1 -
Выход пектинов от теоретически возможного, % 87,5 91,2
Молекулярная масса - 7631 22544
Относительна вязкость 1%-ных водных пектиновых растворов V- 7,7
Количество свободных карбоксильных групп в пектиновой молекуле влияет на проявление сорбционной активности пектинов к токсинам, нитрат и нитрит ионам, веществам белковой природы, некоторым ферментам - трипсину, желчными кислотами (СВ. Москаленко, 1996). Содержание свободных карбоксильных групп у полученных пектинов было несколько меньшим по сравнению с коммерческим препаратом, и составляло 1,7% для свекловичного образца, 2,2% - яблочного и 3,8% - коммерческого.
Полученный яблочный пектин содержал в своем составе меньшее количество балластных веществ 19,3% по сравнению со свекловичным пектином 25,8%. Выход для свекловичного продукта на сухую массу используемого сырья составил 8,7% и 87,5% от теоретически возможного выхода, для яблочного -11,1% и 91,2% соответственно.
Полученный яблочный пектин обладал малым молекулярным весом 7631 и относительной вязкостью 2,2 по отношению к коммерческому яблочному пектину, молекулярная масса и относительная вязкость которого составила 22544 и 7,7.
При сопоставлении полученных веществ видно, что яблочный пектин по многим показателям превосходил свекловичный. В связи с этим для дальнейших исследований было решено использовать пектиновое вещество, выделенное из яблочных выжимок.
3.4. Влияние полученного дополнительно очищенного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов
Дня выявления возможности применения полученного пектина в приготовлении плазмозамещающих растворов и понимания механизма его действия на мембрану эритроцитов нами было изучено влияние его растворов на резистентность эритроцитов, при изменении осмотического давления и присутствии гемолитических агентов в исследуемой системе.
Таблица 6
Влияние 1%-ных водных пектиновых растворов на резистентность эритроцитов крупного рогатого скота (п=7) при изменении осмотического давления
Концентрация растворов хлорида натрия, % Количество сохранившихся эритроцитов, 1012/л Гемолиз эритроцитов, %
I (контроль) гипотонические растворы №С1 II (опыт) гипотонические растворы №С1, с 1%-ным содержни-ем пектинов I (контроль) гипотонические растворы ИаС1 11 (опыт) гипотонические растворы КаС1, с 1%-ным содержанием пектинов •
0,8 6,52*0,17 6,76*0,25 5,8 2,3
0,7 5,65*0,14 6,40*0,16** 18,3 7,5
0,6 2,22*0,19 3,59*0,17** 67,9 48,1
0,5 0,74*0,31 1,97*0,26** 89,2 71,6
0,4 0 0,53*0,18 100 92,4
0,3 0 0 100 100
Содержание эритроцитов в крови 6,92*0,28-1012/л
Примечание: Р<0,01**
Экспериментальный пектин подвергался дополнительной очистке катеонитом, анионитом, и 96%-ным этанолом с целью максимально возможного удаления нежелательных примесей. Результаты влияния 1%-ных водных пектиновых растворов на резистентность эритроцитов крупного рогатого скота при изменении осмотического давления представлены в табл.6.
Таблица 7
Влияние водных пектиновых растворов различной концентрации на резистентность эритроцитов крупного рогатого скота (п=7) в присутствии стандартного гемолитика (0,004 н. НС1, приготовленный на физиологическом растворе)
Концентрация пектинов в стандартном гемолитическом растворе, % Количество сохранившихся эритроцитов,1012/л Гемолиз эритроцитов, %
I(контроль) стандартный гемолитический раствор II (опыт) стандартный гемолитический раствор с содержанием пектинов I(контроль) стандартный гемолитический раствор II (опыт) стандартный гемолитический раствор с содержанием пектинов
1 0 1,24±0,12 100 82,1
0,9 0 0,45±0,22 100 93,5
0,8 0 0,19±0,11 100 97,3
0,7 0 0 100 100
Содержание эритроцитов в крови 6,92±0,28- 10|2/л
В процессе исследования было обнаружено защитное действие 1%-ных водных пектиновых растворов на мембрану эритроцитов.
В гипотонических растворах натрия хлорида содержащих пектин количество сохранившихся эритроцитов было достоверно выше по сравнению с контролем. Достоверное уменьшение процента гемолиза на 10,8, 19,2, 17,6% наблюдалось в 0,7, 0,6, 0,5%-ных пектиносодержащих растворах. В 0,8%-ных растворах достоверных различий при сравнении средних не наблюдалось. Добавление пектинов к гипотоническим растворам увеличивало ширину осмотической резистентности эритроцитов: в контроле максимальная граница резистентности составляла 0,4%, в то время как в опыте она равнялась 0,3%. Пектины не оказывали негативного влияния на эритроциты, это проявлялось отсутствием агломерации и седиментации красных клеток крови в опытных растворах. Защитное действие пектинов в основном было обусловлено повышением осмотического давления гипотонических растворов хлорида натрия, содержащих в своем составе пектиновое вещество. Полученный пектин в концентрациях 1, 0,9, 0,8% уменьшал активность кислотного гемолиза на 17,9, 6,5, 2,7% соответственно, в концентрации 0,7% защитное действие пектина исчезало, в контрольном растворе стандартного гемолитика наблюдался 100%-ный гемолиз эритроцитов (табл. 7.).
Обладая низкой молекулярной массой 7631, небольшой относительной вязкостью 1%-ных растворов 2,2 и значением pH близким к нейтральному 6,92, хорошей растворимостью в воде, полученные дополнительно очищенные яблочные пектины могут рассматриваться при разработке плазмозаменителей детоксицирующего и гемодинамиче-ского действия.
3.5. Связывающая способность 1%-ных водных растворов яблочных пектинов по отношению к ферментному белку трипсину, активность адгезии водных растворов
яблочных пектинов
Наличие в пектиновой молекуле свободных карбоксильных групп во многом обуславливает связывающую способность пектинов. Для исследования данной способности к ферментным белкам нами в условиях in vitro были проведены испытания полученного и коммерческого яблочного пектинов, результаты которых представлены на рис.4.
В контрольной группе наблюдался полный лизис желатиновой поверхности рентгеновской пленки при всех используемых концентрациях трипсина. Во второй опытной группе, где к реакционной среде был добавлен 1%-ный водный раствор полученного яблочного пектина просветление пленки не наблюдалось при концентрации трипсина 0,125 мг/мл, лизис происходил, начиная с концентрации трипсина в растворе 0,250 мг/мл, среднее арифметическое из этих результатов позволяло определить ферментосвязываюшую способность полученного пектина. При пересчете на сухое вещество она составила 18,5 мг трипсина на 1 г сухого пектинового вещества (18,5мг/г). Коммерческий яблочный пектин обладал более выраженными связывающими свойствами в отношении трипсина. Добавление его 1%-ного раствора к разведениям трипсина приводило к отсутствию просветления желатиновой поверхности при концентрации трипсина 0,250 мг/мл, и началу лизиса при 0,375 мг/г. Связывающая способность коммерческого яблочного пектина при пересчете на сухое вещество составила 31,25 мг трипсина на 1г пектина (31,25мг/г), что на 12,75 мг больше, чем у полученного пектина.
1
2
3
0,000 0,125 0,250 0,375 0,500 0,625 0,750 0,875 1,000
концентрация трипсина, мг/мл
1 -(контроль) разведения трипсина с добавлением дистиллированной воды
2 - (опыт) разведения трипсина с добавлением 1%-ного раствора полученного яблочного пектина
3 - (опыт) разведения трипсина с добавлением 1%-ного раствора коммерческого яблочного пектина
Рис.4. Результаты изучения связывающей способности водных 1%-ных пектиновых растворов
При изучении биологического действия пектинов на живой организм большое значение отводится их адгезивным свойствам, принимающим участие в механизме противоопухолевой, антиаллергической, антибактериальной активности, протекторном действии на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта (Е.Б. Лазарева и др., 1999; W. Scheppach, 1994).
Водные растворы пектинов проявляли адгезивные свойства, при этом активность адгезии находилась в прямо пропорциональной зависимости от их концентрации в растворах. Полученный яблочный пектин обладал более выраженной способностью к адгезии, по сравнению с коммерческим препаратом. Возможно, такая неравнозначность обусловлена низкой степенью метоксилирования полученного вещества, определяющей способность к смачиванию и, в конечном итоге адгезивные свойства.
Наибольшей смачивающей способностью обладал полученный яблочный пектин, и она уменьшалась с увеличением концентрации пектинов в растворе.
Активность адгезии 0,5%-ных растворов составила 143,00 и 126,22 Дж/м2 соответственно для полученного и коммерческого пектинов, а для 3%-ных растворов она равнялась 163,59 и 139,21 Дж/м2. Данные результаты дают основание полагать, что исследуе-
мые яблочные пектины, при приеме внутрь могут образовывать на поверхности слизистой желудочно-кишечного тракта своеобразную защитную пленку, и благодаря этому оказывать протекторное действие при различных нарушениях его функций.
3.6. Влияние яблочных пектинов на картину крови цыплят-бройлеров
Гематологические показатели цыплят-бройлеров опытных и контрольной групп находились в пределах физиологической нормы, вместе с тем под влиянием пектинов в картине крови наблюдались некоторые изменения (табл. 8.).
Применение пектинов в рационе птиц содействовало увеличению числа эритроцитов и содержания гемоглобина в крови подопытных цыплят. Так, количество эритроцитов во второй и третьей опытных группах оказалось на 16,11% и 19,43% (Р<0,01), в четвертой и пятой группах на 15,17% и 17,06% (Р<0,01), выше чем в контрольной, а уровень гемоглобина увеличивался соответственно на 27,44%, 29,37%, 25,16%, 21,82% (Р<0,01). Повышение образования эритроцитов являлось компенсаторным физиологическим процессом в ответ на увеличение количества гемоглобина Данное предположение обосновывают значения цветного показателя, во второй, третьей и четвертой опытных группах цыплят он оказался выше на 9,9%, 8,4%, 8,4% (Р<0,05), в пятой группе увеличение цветного показателя оказалось не достоверным. Большая насыщенность красных клеток крови гемоглобином экспериментальных цыплят также подтверждается увеличением среднего содержания гемоглобина в одном эритроците (СГЭ). Использование пектина при выращивании цыплят способствовало достоверному увеличению показателя СГЭ во второй, третьей, четвертой группе, в то время как в пятой группе он не изменялся.
Наибольшее образование гемоглобина происходило у бройлеров, получавших разработанный нами яблочный пектин, при скармливании коммерческого пектина в дозе 100 мг/гол через сутки, гемоглобинообразование было менее интенсивным, что подтверждается недостоверным увеличением цветного показателя и СГЭ в крови птицы.
Эритроциты цыплят подопытных групп были более устойчивы к гипотоническим растворам хлористого натрия. Однако достоверные различия между числом эритроцитов, не подвергшихся гемолитическому воздействию, наблюдалось во второй, третьей и четвертой опытных группах по сравнению с контролем и только в растворе с концентрацией хлорида натрия 0,5% (Р<0,05), это может свидетельствовать о незначительном увеличении в крови опытных птиц физиологически зрелых и полноценных форм эритроцитов. Ширина осмотической резистентности не различалась во всех группах экспериментальных бройлеров и была в пределах физиологической нормы.
Полученные результаты могут служить дополнительным доказательством тому факту, что пектиновые вещества не оказывали прямого влияния на активацию или угнетение функций костного мозга, а увеличение количества эритроцитов являлось компенсаторным механизмом в ответ на прирост концентрации гемоглобина.
Поступление пектинов в изучаемых дозах в организм физиологически здоровых цыплят не вызывало достоверных изменений количества лейкоцитов, и показателей лейкоцитарной формулы.
Биохимические исследования крови цыплят показали, что пектиновые вещества не вызывали нарушений в обмене веществ, поскольку величины изученных биохимических показателей крови находились в пределах физиологической нормы. В качестве тенденции наблюдалось незначительное увеличение количества общего белка в опытных группах. Пектины не влияли на уровень холестерола во второй третьей и пятой опытной группах, в четвертой опытной группе, получавшей коммерческий
Таблица 8
Гематологические показатели цыплят-бройлеров
Показатели, ед. изм. Группа, доза и режим дозирования пектинов
I(контроль) II (ежесуточно) 200 мг/гол III ( через сутки) 100 мг/гол IV (ежесуточно) 200 мг/гол V (через сутки) 100 мг/гол
Полученный пектин Коммерческий пектин
Эритроциты, Ю'^/л 2,11±0,11 2,45±0,28** 2,52±0,22** 2,43±0,20** 2,47±0,28**
Гемоглобин, г/л 92,15±0,44 117,44±0,76*« 119,21±0,55** 115,33±0,71** 112,26±0,59**
Цветной показатель 1,31±0,04 1,44±0,06* 1,42±0,04* 1,42±0,05* 1,36±0,08
СГЭ,М0"'2г 43,67±1,43 47,94±1,18* 47,31±1,04* 47,46±1,26* 45,45±1,40
СОЭ, мм/час 2,2±0,03 2,2±0,07 2,1±0,05 2,2±0,08 2,1 ±0,04
Лейкоциты, 107л 41,32±0,57 43,38±0,74 42,09±0,45 41,57±0,28 42,05±0,55
Общий белок, г/л 39,28±1,01 4,14±1,07 4,17±0,92 4,08±0,86 39,95±1,10
Фракции белка, % альбумины а — глобулины Р — глобулины у - глобулины 33,10±1,01 23,10±0,55 24,80±0,63 19,00±0,72 35,23±1,83 23,00±0,61 23,12±1,72 18,65±1,05 34,08±0,96 22,85±0,73 24,54±0,51 18,53±0,84 34,68±1,24 23,17±0,37 23,34±1,56 18,81±0,92 35,06±1,75 22,81±0,71 23,78±0,46 18,35±1,32
Глюкоза, ммоль/л 132,50±1,23 134,11±0,93 131,17±0,82 133,42±0,76 132,91±0,51
Холестерол, ммоль/л 4,35±0,02 4,31 ±0,07 4,40±0,09 4,04±0,03* 4,26±0,08
Железо, ммоль/л 5,51±0,06 5,88±0,16* 5,94±0,08* 5,83±0,10* 5,б1±0,22
Медь, мкмоль/л 9,15±0,09 9,18±0,06 9,21±0,07 9,12±0,06 9,24±0,08
Магний, ммоль/л 2,37±0,24 2,38±0,36 2,36±0,27 2,35±0,42 2,39±0,52
Кальций общий, ммоль/л 3,87±0,10 3,94±0,16 3,89±0,12 3,91±0,14 3,86±0,08
Фосфор неорганический, ммоль/л 2,36±0,07 2,40±0,08 2,38±0,09 2,39±0,09 2,34±0,0,06
Примечание: Р<0,0 5 *; Р<0,01 * *
препарат ежесуточно в дозе 200 мг/гол, уровень холестерола снижался на 7,12% (Р<0,05). Общее содержание железа в крови возрастало во второй третьей и четвертой группе цыплят на 6,7%, 7,8% и 5,8% (Р<0,05), в пятой группе увеличение железа было недостоверным. Количество меди в цельной крови опытных цыплят достоверно не изменялось. Данные результаты подтверждают влияние пектинов на усиление процесса гемо-глобинообразования.
3.7. Сохранность, продуктивность цыплят-бройлеров и эффективность использования яблочных пектинов
При изучении минерального состава мышц, и содержания в них нитрат ионов было вьиснено, что полученный пектин в дозе 200 мг/гол ежесуточно, снижает концентрацию меди и свинца на44,6%, 41,4% (Р<0,01)„ ртути и цинка на 27,3%, 6% (Р<0,05), нитрат ионов на 13,54% (Р<0,05), не влияя на концентрацию кальция и фосфора.
В третьей опытной группе с применением полученного пектина в дозе 100 мг/гол через сутки отмечалось достоверное снижение меди, свинца на 42,8%, 40,5% (Р<0,01), ртути на 18,2%(Р<0,05), нитрат ионов на 8,5%(Р<0,05) и отсутствие его влияния на изменение концентрации цинка, фосфора, кальция.
Таблица 9
Концентрация кальция, фосфора, нитрат ионов и тяжелых металлов в мышцах цыплят-бройлеров
Показатели, ед. изм. Группа, доза и режим дозирования пектинов
I (контроль) II (ежесуточно) 200 мг/гол Ш (через сутки) 100 мг/гол IV (ежесуточно) 200 мг/гол V (через сутки) 100 мг/гол
Полученный пектин Коммерческий пектин
Медь, мг/кг 2,300 ±0,047 1,274 ±0,012** 1,316 ±0,018** 1,639 ±0,056** 1,691 ±0,035**
Свинец, мг/кг 0,390 ±0,024 0,229 ±0,060** 0,232 ±0,035** 0,290 ±0,045** 0,298 ±0,021**
Ртуть, мг/кг 0,011 ±0,001 0,008 ±0,002* 0,009 ±0,001* 0,010 ±0,003 0,012 ±0,001
Цинк, мг/кг 18,50 ±1,06 17,39 ±0,82* 18,36 ±1,12 18,5 ±1,25 18,39 ±0,99
Кальций, % 0,130 ±0,024 0,132 ±0,065 0,128 ±0,041 0,130 ±0,038 0,131 ±0,043
Фосфор, % 0,090 ±0,023 0,089 ±0,025 0,091 ±0,015 0,094 ±0,012 0,090 ±0,020
Нитрат ионы, мг/кг 16,17 ±0,45 13,98 ±1,09* 14,79 ±1,12* 11,917 ±0,62** 13,179 ±0,37**
Примечание: Р<0,05*; Р<0,01**
Под влиянием коммерческого пектина в дозе 200 мг/гол ежесуточно также происходило снижение концентрации меди и свинца на 28,7%, 25,6% (Р<0,01), нитрат ионов на 26,3% (Р<0,01), а в дозе 100 мг/гол через сутки на 26,5%, 23,9% (Р<0,01) и 18,5% (Р0,01) соответственно. Следует отметить, что полученный пектин в силу высокой комплексооб-разующей способности 394,65 мгРЬ2+/г более эффективно связывали соли тяжелых металлов, но менее эффективно нитрат ионы, вследствие меньшего содержания свободных
карбоксильных групп, по сравнению с коммерческим пектином. Минеральный состав и концентрация нитрат ионов в мясе птиц представлена в табл. 9.
Таблица 10
Хозяйственно-экономические показатели, полученные при использовании яблочных пектинов в рационах цыплят-бройлеров
Показатели, ед. изм. I (контроль) II (ежесуточно) 200 мг/гол, III (через сутки) 100 мг/гол, IV (ежесуточно) 200 мг/гол, V (через сутки) 100 мг/гол,
Полученный Коммерческий
Средняя постановочная масса цыпленка, г 37,5 37,2 37,3 37,8 37,4
Сохранность поголовья, % 94 97,39 98,26 98,26 97,39
Среднесуточный привес 1 гол, г 38,7 39,4 39,5 39,4 38,9
Живая средняя масса одной головы, г 1662 1693 1696 1694 1675
Затрачено к.ед. на выращивание 1 кг живой массы 2,17 2,05 2,03 2,04 2,08
Экономическая эффективность при выращивании 1 кг живой массы, руб 0,83 1,37 0,52 0,71
Общая экономическая эффективность эксперимента в опытных группах при выращивании 1 кг живой массы, составила 0,86 руб
Пектины положительно влияли на рост, развитие и физиологическое состояние бройлеров. Падеж в группах птиц, получавших пектиновые вещества, был меньше, чем в контрольных группах: сохранность увеличивалась на 3,39 и 4,23% (табл.10.). Во второй, третьей и четвертой подопытных группах масса тела 43- суточных цыплят оказалась выше по сопоставлению с контролем на 1,8 -1,9%. Увеличение сохранности и прирост живой массы цыплят позволили снизить затраты корма на выращивание единицы живой массы
Экономическая эффективность при выращивании 1 кг живой массы с применением полученного пектина в дозе 200 мг/гол ежесуточно составляла 0,83 руб., в дозе 100 мг/гол через сутки - 1,37 руб. С использованием коммерческого пектина в дозе 200 мг/гол ежесуточно она оказалась равной 0,53 руб., в дозе 100 мг/гол через сутки - 0,71 руб. Общая экономическая эффективность проведенного эксперимента во всех опытных группах составила 0,86 руб. при выращивании 1 кг живого веса.
4. ВЫВОДЫ
1. Биологическое действие пектиновых веществ, зависит от вида растительного сырья способа их получения и физико-химических свойств.
2. Предварительная обработка пектиносодержащих растительных материалов водным раствором гидрокарбоната натрия способствует повышению эффективности извлечения пектинов в экстракты, на 84-94%
3. Предварительная обработка пектиносодержащих растительных материалов раствором гидрокарбоната натрия способствует получению пектинов с повышенной комплексо-образующей способностью, оптимальные режимы обработки сырья при этом составляют: концентрация водного раствора гидрокарбоната натрия - 9,8%; время обра-ботки-182 мин.
4. Количество свободных и метоксилированных групп полученного свекловичного пектина составляет 1,7% и 2,4% соответственно, комплексообразующая способность 1813 мгРЪ2+/г, полученного яблочного пектина - 2,2% и 0,56%, комплексообразующая способность 394,65. ; полученные пектины соответствуют санитарным правилам и нормам 2.3.2.56.-96. и могут использоваться в качестве кормовой добавки.
6. Водные растворы пектинов проявляют адгезивные свойства, которые возрастают с увеличением концентрации пектинов в растворах в ряду 0,5%; 1%; 1,5%; 2%; 2,5%; 3%, связывающая способность пектинов к ферментному белку трипсину зависит от степени содержания в пектинах свободных и метоксилированных карбоксильных групп и возрастает с увеличением их содержания в пектинах и составляет 18,5 мг трипсина на 1грамм пектина (18,5мг/г) для полученного яблочного пектина и 31,25мг/г для коммерческого яблочного пектина.
7. Полученный дополнительно очищенный яблочный пектин, входящий в состав 0,7,0,6,0,5%-ных гипотонических растворов натрия хлорида в концентрации 1%, уменьшает процент гемолиза эритроцитов на 10,8,19,2,17,6% соответственно; входящий в состав раствора стандартного гемолитика в концентрациях 1,0,9,08% уменьшает активность кислотного гемолиза на 17,9, 6,5,2,7%.
8. Использование полученного яблочного пектина в рационах цыплят-бройлеров:
а) не оказывает отрицательного воздействия на физиологическое состояние цыплят, способствует увеличению живой массы птицы на 1,8 и 1,9%, повышению сохранности поголовья на 3,39 и 4,23%.
б) положительно влияет на гемоглобинобразование: повышается количество гемоглобина на 27,44-29,37%, эритроцитов в крови на 16,11 -19,43% , увеличивается насыщенность клеток гемоглобином.
в) улучшает экологическую чистоту продукции, в мышцах цыплят понижается содержание нитрат ионов на 8,50-13,54%, ионов меди на 42,8-44,6%, ионов свинца на 40,5-41,4%, ионов ртути на 18,2- 27,2%, ионов цинка на 6% (при использовании в дозе 200мг/гол ежесуточно), концентрация кальция и фосфора не изменяется.
9. Использование коммерческого яблочного пектина в рационах цыплят бройлеров:
а) не оказывает отрицательного воздействия на физиологическое состояние цыплят, способствует увеличению сохранности поголовья на 3,39 и 4,23%, в дозе 200мг/гол ежесуточно - увеличению живой массы птицы на 1,9%.
б) положительно влияет на гемоглобинобразование: повышается количество гемоглобина на 21,82-25,16%, эритроцитов в крови на 15,17-17,06%, увеличивается насыщенность клеток гемоглобином.
в) в дозе 200мг/гол ежесуточно, снижает содержание холестерола в сыворотке крови на 7,1%
г) улучшает экологическую чистоту продукции: в мышцах цыплят понижается содержание нитрат ионов на 26,3 -18,4%, ионов меди на 26,5-28,7 %, ионов свища на
23,9-25,6%, концентрация кальция и фосфора не изменяется. 10. Экономическая эффективность проведенных экспериментов с применением полученного и коммерческого яблочных пектинов в дозах200 мг/гол ежесуточно и 100 мг/гол через сутки, при выращивании 1 кг живой массы составляет 0,86 рубля (в ценах 2004 года).
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Яблочные пектины целесообразно скармливать в качестве растительной добавки к сбалансированным рационам, при выращивании цыплят-бройлеров мясного направления в дозах 100 мг/гол через сутки для низкометоксилированного пектина, 200 мг/гол ежесуточно для высокометоксилированного пектина, с целью улучшения физиологического состояния, экологической чистоты продукции и повышения сохранности поголовья.
2. Разработанный способ получения пектинового экстракта, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье, можно использовать в промышленном производстве пектина, в научно-исследовательской работе.
6. ТЕХНИЧЕСКОЕ РЕШЕНИЕ
Способ получения пектинового экстракта, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье (решение от 14 января 2005г. о выдаче патента на изобретение по заявке № 2003123709/04).
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Повышение эффективности извлечения пектина из пектинсодержащего сырья / А.Г. Беляев, И.П. Битюков, Е.И. Битюков, Ю.В. Фурман // Использование достижений современной биологической науки при разработке технологий в агрономии, зоотехнии и ветеринарии: Материалы международной научно-практической конференции.- Брянск, 2002.-С.110-112.
2. Беляев А.Г. Лечение поросят, больных диспепсией, препаратами "Дизпаркол" и пектин /В.В. Эсауленко, А.Г. Беляев // Улучшение продуктивных качеств, профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных: Материалы научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов.- Курск, 2003.- С. 16-17.
3. Беляев А.Г. Изучение бактериостатической активности биополимеров пектин и хитозан / А.Г. Беляев, В.В. Эсауленко // Улучшение продуктивных качеств, профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных: Материалы научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов.-Курск, 2003.- С. 19-20.
4. Повышение эффективности извлечения пектина из пектинсодержащего сырья / А.Г. Беляев, П.П. Редькин, ИЛ. Битюков, Е.И. Битюков и др// Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии: Материалы второго международного симпозиума.- Санкт-Петербург, 2003.-С. 142-144.
5. Решение государственной научно-технической экспертизы от 14 января 2005 г. о выдаче патента на изобретение по заявке № 2003123709/04. Способ получения пектинового экстракта, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье / А.Г. Беляев, Е.И. Битюков, П.П. Редькин.
Сдано в набор 28 01.2005 г. Подписано в печать 28.01.2005 г. Формат 60x84 1/16. Бумага Айсберг. Объем 1,0 усл. печ. л. Гарнитура Тайме. Тираж 100 экз. Заказ № 25.
Издательство КГСХА им. проф. И.И. Иванова 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70
Отпечатано в множительном цешре ВНИИЗиЗПЭ 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70-6
15 Ш 2005
ч - »
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Беляев, Алексей Геннадьевич
ВВЕДЕНИЕ.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1 .Структура, физико-химические свойства и методы выделения пектиновых веществ из растительного сырья.
1.2. Механизм биологического действия пектинов на функции организма.
1.3. Влияние физико-химических свойств пектинов на проявление их сорбционной и комплексообразующей активности.
1.4. Гематологические особенности птиц.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности получения пектинового препарата и функциональная характеристика его влияния на организм цыплят-бройлеров"
Актуальность темы. Среди глобальных проблем современности экологические аспекты занимают особое положение. Антропогенное загрязнение окружающей среды имеет негативное воздействие на полноценный рост и развитие организма сельскохозяйственных животных и птиц. В результате снижается сохранность и продуктивность выращиваемого поголовья, особенно мясного направления, ухудшается качество и экологическая безопасность получаемой продукции, увеличиваются затраты на выращивание птицы.
Значительная роль в снижении токсической нагрузки на организм может принадлежать различным биологически активным соединениям растительного происхождения и, в частности, пектиновым веществам, которые пока еще недостаточно изучены как в химическом, так и в биологическом отношении.
В отличие от многих сорбционно-активных препаратов минерального происхождения, обладающих преимущественно сорбирующими свойствами, пектиновые вещества имеют гораздо больший спектр действия.
Пектины и их производные используют для лечения диспепсий, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, колитов, в качестве антикоагулянта, гемостатического и гепатозащитного средства, для снижения в крови уровня холестерина и глюкозы у больных сахарным диабетом. Выявлена их противоопухолевая и антимикробная активность (JI.B. Донченко, 2000; Ю.С. Хотимченко и др., 2000; Н.П. Шелухина и др, 1989; Э.Г. Потиевский, 2003; Н. Yamada, 1996, и др). Однако в выяснении механизмов биологического действия пектинов часто возникают разногласия среди исследователей. Пектины эффективно связывают и выводят из организма токсины, тяжелые металлы, радионуклиды (В.В. Стрельников, 1996; В.В. Ковалев и др., 1989; Н.Ш. Кайшева и др., 1992; Н.С. Карпович и др., 1989), пролонгируют действие, повышают биодоступность и снижают токсичность различных лекарственных средств (З.Д. Ашубаева и др., 1982). В литературе упоминается о возможности приготовления на основе пектиновых веществ заменителей кровяной плазмы (М.Б. Аймухомедова и др., 1977), а данных о воздействии растворов яблочных пектинов на клеточную стенку эритроцитов не имеется. Некоторые авторы
С.В. Москаленко, 1995, Г.Н. Войтенко, 1992) указывают на способность свекловичного пектина связывать эндогенные вещества, в том числе и ферментный белок трипсин, информация о подобном влиянии яблочных пектинов отсутствует.
Обладая перечисленными качествами, пектины постепенно находят свое применение в медицине, вместе с тем сведения о комплексном их влиянии на организм сельскохозяйственных животных и птиц отсутствуют.
Лечебно-профилактическая эффективность пектинов зависит от разнообразия их строения и свойств и определяется видом растительного сырья и методами получения, которые часто бывают дорогостоящими. Поэтому актуальным является поиск новых эффективных и недорогих способов получения пектинов, обладающих высоким лечебно-профилактическим действием, а также изучение их свойств и влияния на организм сельскохозяйственных животных и птиц.
Цель и задачи исследования. Основной целью работы являлось совершенствование способа получения экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье, способа получения пектинов, а также изучение биологических свойств пектинов, физиологического состояния и гематологических показателей цыплят-бройлеров, при включении пектиновых веществ в рацион их кормления. Для достижения основной цели были определены следующие задачи:
1. Изучить эффективность различных методов обработки растительного сырья, разработать способ получения пектиновых экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье.
2. Изыскать оптимальный способ получения пектинов.
3. Изучить физико-химические и качественные показатели исследуемых пектинов.
4. Определить адгезивную активность, связывающую способность 1%-ных водных растворов по отношению к ферментному белку трипсину, нами полученного и коммерческого яблочных пектинов, изучить действие водных растворов дополнительно очищенного полученного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов.
5. Испытать влияние яблочных пектинов на цыплят-бройлеров на основании: контроля физиологического состояния, анализа биохимических и морфологических показателей крови с учетом дозировки и физико-химических свойств пектинов, определения в мясе концентрации кальция, фосфора, тяжелых металлов, нитрат ионов.
6. Определить экономическую эффективность производственного испытания пектинов на цыплятах-бройлерах.
Научная новизна. Впервые использована обработка растительного сырья водными растворами натрия двууглекислого, с целью: более полного извлечения пектинов в экстракт и определения количественного содержания пектина в растительном сырье. Найден способ получения пектинов, обладающих повышенной комплексообразующей способностью, изучены физико-химические свойства и качественные показатели полученных пектинов.
Впервые исследована адгезия яблочных пектинов, их связывающая способность по отношению к ферментному белку трипсину, определено влияние полученного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов.
С учетом результатов научного эксперимента дано обоснование эффективности использования яблочных пектинов при выращиваний цыплят-бройлеров. Изучено их влияние на физиологическое состояние, биохимические и морфологические показатели крови цыплят, выяснена эффективность выведения тяжелых металлов и нитрат ионов при биохимическом анализе мышц.
Практическая значимость работы. На основании полученных результатов производству предложен способ получения пектиновых экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье.
Результаты проведенных экспериментов позволяют предложить способ получения пектинов с более низкой себестоимостью изготовления для дальнейших исследований при получении эффективных комплексообразователей, плаз-мозаменителей и детоксикантов.
Научно обосновано применение высокометоксилированных и низкометок-силированных яблочных пектинов при выращивании цыплят-бройлеров.
Основные положения, выносимые на чяттшту:
1. Эффективность различных методов обработки растительного сырья и модифицированного способа получения пектиновых экстрактов, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье.
2. Новый способ получения пектиновых веществ и его оптимизация.
3. Физико-химические показатели и качество пектиновых веществ.
4. Активность адгезии, связывающая способность яблочных пектинов по отношению к ферментному белку трипсину, влияние водных растворов очищенного полученного яблочного пектина на клеточную стенку эритроцитов.
5. Сравнительные результаты практического применения полученного и щ коммерческого яблочных пектинов при выращивании цыплят-бройлеров в условиях промышленного птицеводства.
Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на:
-международной научно-практической конференции «Использование достижений современной биологической науки при разработке технологий в агрономии, зоотехнии и ветеринарии» (Брянск, 2002 г.); -научно-практических конференциях Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 2002-2004 гг.).
Публикация материалов. По теме диссертации опубликовано пять научных работ.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 129 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов исследования и их обсуждения, выводов, практических предложений, технического решения, списка литературы и приложения. Текст иллюстрирован 21 таблицей и 13 рисунками. Список использованной литературы включает 256 источников, в том числе 105 иностранных авторов.
Заключение Диссертация по теме "Физиология", Беляев, Алексей Геннадьевич
100 выводы л 1. Биологическое действие пектиновых веществ, зависит от вида растительного сырья способа их получения и физико-химических свойств.
2. Предварительная обработка пектиносодержащих растительных материалов водным раствором гидрокарбоната натрия способствует повышению эффективности извлечения пектинов в экстракты, на 84-94%
3. Предварительная обработка пектиносодержащих растительных материалов раствором гидрокарбоната натрия способствует получению пектинов с повышенной комплексообразующей способностью, оптимальные режимы обработки сырья при этом составляют: концентрация водного раствора гидрокарбоната натрия - 9,8%; время обработки - 182 мин.
4. Количество свободных и метоксилированных групп полученного свекловичного пектина составляет 1,7% и 2,4% соответственно, комплексообра-зующая способность 181,3 мгРЬ /г, полученного яблочного пектина - 2,2% л | и 0,56%, комплексообразующая способность 394,65 мгРЬ /г; полученные пектины соответствуют санитарным правилам и нормам 2.3.2.56.-96. и могут использоваться в качестве кормовой добавки.
6. Водные растворы пектинов проявляют адгезивные свойства, которые возрастают с увеличением концентрации пектинов в растворах в ряду 0,5%;
• 1%; 1,5%; 2%; 2,5%; 3%, связывающая способность пектинов к ферментному белку трипсину зависит от степени содержания в пектинах свободных и метоксилированных карбоксильных групп и возрастает с увеличением их содержания в пектинах и составляет 18,5 мг трипсина на 1 грамм пектина (18,5мг/г) для полученного яблочного пектина и 31,25мг/г для коммерческого яблочного пектина.
7. Полученный дополнительно очищенный яблочный пектин, входящий в состав 0,7, 0,6,0,5%-ных гипотонических растворов натрия хлорида в концентрации 1%, уменьшает процент гемолиза эритроцитов на 10,8; 19,2; 17,6% соответственно; входящий в состав раствора стандартного гемолитика в концентрациях 1; 0,9; 08% уменьшает активность кислотного гемолиза на 17,9; 6,5; 2,7%.
8. Использование полученного яблочного пектина в рационах цыплят-бройлеров: а) не оказывает отрицательного воздействия на физиологическое состояние цыплят, способствует увеличению живой массы птицы на 1,8 и 1,9%, повышению сохранности поголовья на 3,39 и 4,23%. б) положительно влияет на гемоглобинобразование: повышается количество гемоглобина на 27,44-29,37%, эритроцитов в крови на 16,11 -19,43% , увеличивается насыщенность клеток гемоглобином. в) улучшает экологическую чистоту продукции, в мышцах цыплят понижается содержание нитрат ионов на 8,50-13,54%, ионов меди на 42,8-44,6%, ионов свинца на 40,5-41,4%, ионов ртути на 18,2- 27,2%, ионов цинка на 6% (при использовании в дозе 200мг/гол ежесуточно), концентрация кальция и фосфора не изменяется.
9. Использование коммерческого яблочного пектина в рационах цыплят бройлеров: а) не оказывает отрицательного воздействия на физиологическое состояние цыплят, способствует увеличению сохранности поголовья на 3,39 и 4,23%, в дозе 200мг/гол ежесуточно - увеличению живой массы птицы на 1,9%. б) положительно влияет на гемоглобинобразование: повышается количество гемоглобина на 21,82-25,16%, эритроцитов в крови на 15,17-17,06%, увеличивается насыщенность клеток гемоглобином. в) в дозе 200мг/гол ежесуточно, снижает содержание холестерола в сыворотке крови на 7,1% г) улучшает экологическую чистоту продукции: в мышцах цыплят понижается содержание нитрат ионов на 26,3 -18,4%, ионов меди на 26,5-28,7 %, ионов свинца на 23,9-25,6%, концентрация кальция и фосфора не изменяется.
10. Экономическая эффективность проведенных экспериментов с применением полученного и коммерческого яблочных пектинов в дозах200 мг/гол ежесуточно и 100 мг/гол через сутки, при выращивании 1 кг живой массы составляет 0,86 рубля (в ценах 2004 года).
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Яблочные пектины целесообразно скармливать в качестве растительной добавки к сбалансированным рационам, при выращивании цыплят-бройлеров мясного направления в дозах 100 мг/гол через сутки для низкометоксилированного пектина, 200 мг/гол ежесуточно для высокометоксилированного пектина, с целью улучшения физиологического состояния, экологической чистоты продукции и повышения сохранности поголовья.
2. Разработанный способ получения пектинового экстракта, для определения количественного содержания пектина в растительном сырье, можно использовать в промышленном производстве пектина, в научно-исследовательской работе.
ТЕХНИЧЕСКОЕ РЕШЕНИЕ
Способ получения пектинового экстракта, для определения количествен ного содержания пектина в растительном сырье (решение от 14 января 2005 г. выдаче патента на изобретение по заявке № 2003123709/04).
104
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Беляев, Алексей Геннадьевич, Курск
1. А. с. 1027171 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / И.И. Турдакова, Г.Б. Аймухомедова, М.А. Мусабаев, Б.Э. Урисова (СССР). № 3408805/23-05; Заявл. 18.03.82; Опубл. 07.07.83, Бюл. № 25. - 4 с.
2. А. с. 1165684 СССР: МКИ4 С
3. В 37/06. Способ получения пектата натрия или калия / Д.Э. Алиева, Г.Б. Аймухомедова, Н.П. Шелухина и др. (СССР). -№ 3453561/31-05; Заявл. 14.06.82; Опубл. 07.07.85, Бюл. № 25. 6 с.
4. А. с. 1171461 СССР: МКИ4 С 08 В 37/06. Пектат гексаметилдиамина, стимулирующий рост растений, и способ его получения / Н.П. Шелухина, К.С. Са-матова, Л.Г. Шапанова и др. (СССР). № 3694693/23-05; Заявл. 27.01.84;щ Опубл. 07.08.85, Бюл. № 29.-10 е.: ил.
5. А. с. 1186619 СССР: МКИ4 С 08 В 37/06. Способ получения пектина из растительного сырья / З.Д. Ашубаева, Д.Ш. Чолбаева (СССР). № 3723605/2305; Заявл. 13.02.84; Опубл. 23.10.85, Бюл. № 39. - 8 с.
6. А. с. 1399303 СССР: МКИ4 С 08 В 37/06, А 23 L 1/04. Способ получения ^ яблочного пектина из яблочных выжимок / В.Л. Погребная, М.К. Алтуньян,
7. О.А. Улитин, В.Г. Моисеева (СССР). № 4108413/30-13; Заявл. 12.06.86; Опубл. 30.05.88, Бюл. № 20. - 4 с.
8. А. с. 1512975 СССР: МКИ4 С 08 В 37/06, А 61 К 9/08, 31/75. Способ получения водного раствора пектина / Л.И. Флейдерман, Э.З. Рабинович (СССР). -№ 4129720/28-05; Заявл. 17.07.86; Опубл. 07.10.89, Бюл. № 37. 6 с.
9. А. с. 1615168 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектовой кислоты / З.Д. Ашубаева, Д.В. Тюребаева (СССР). № 4411539/23-05; Заявл. 01.03.88; Опубл. 23.12.90, Бюл. № 47. - 6 с.
10. Ш 9. А. с. 1620444 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / В.Н.
11. Голубев, С.Н. Губанов, О.Г. Микеладзе (СССР). № 4602481/31-05; Заявл. 20.09.88; Опубл. 15.01.91, Бюл. №2.-4 с.
12. А. с. 1666458 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / Р.Ю. Нехай, Б.И. Гонтарь, JI.B. Донченко, Б.М. Бжемутов (СССР). №4655353/05; Заявл. 27.02.89; Опубл. 30.07.91, Бюл. № 28. 4 с.
13. А. с. 1675303 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / В.А. Васькина, Н.И. Ширин, JI.B. Кузнецова и др. (СССР). № 4749758/05; Заявл. 16.10.89; Опубл. 07.09.91, Бюл. № 12. - 4 с.
14. А. с. 1684288 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения сорбентов / Е.П. Кухта, В .Я. Чирва, А.В. Суслов, В.Я. Руденко (СССР). № 4644800/05; Заявл. 13.12.88; Опубл. 15.10.91, Бюл. № 38. - 4 с.
15. А. с. 1689378 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / В.А. Компанцев , Н.Ш. Кайшева, В.В. Писарев и др. (СССР). № 4735576/05; Заявл. 03.07.89; Опубл. 07.11.91, Бюл. № 41. - 8 с.
16. А. с. 1713249 СССР: МКИ6 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / Т.В. Мгебришвили, O.K. Медведев, Р.Ф. Скаковский, Е.П. Кошевой и др. (СССР). № 4498265/05; Заявл. 15.08.89; Опубл. 19.06.95, Бюл. № 17. - 8 с.
17. А. с. 1776656 СССР: МКИ5 С 08 В 37/06. Способ получения пектинатов, обладающих антимикробным действием / В.А. Компанцев, Е.С. Уткина, Н.Ш. Кайшева и др. (СССР). № 4788377/05; Заявл. 09.11.89; Опубл. 23.11.92, Бюл. №43.- Юс.
18. А. с. 539040 СССР: МКИ2 С 08 В 37/06. Способ получения плазмозамени-теля / Г.Б. Аймухомедова, Н.П. Шелухина, Р.Ш. Абаева и др. (СССР). № 2187141/05; Заявл. 13.10.75; Опубл. 15.12.76, Бюл. № 46. - 4 с.
19. А. с. 577212 СССР: МКИ2 С 08 В 37/06, А 23 L 1/04. Способ получения пектина из яблочных выжимок / В.Г. Моисеева, Г.М. Зайко, Ю.М. Шапиро (СССР). № 2376126/13; Заявл. 15.06.76; Опубл. 25.10.77, Бюл. № 39. - 8 с.
20. А. с. 584012 СССР: МКИ2 С 08 В 37/06. Способ получения пектата глицерина / М.Б. Аймухомедова, Н.П. Шелухина, Д.Э. Алиев (СССР). № 2320795/04; Заявл. 05.02.76; Опубл. 15.12.77, Бюл. № 46. - 4 с.
21. А. с. 648564СССР: МКИ2 С 08 В 37/06. Способ получения меламиновогопектина, содержащего молекулярный йод / З.Д. Ашубаева, Б.М. Манаев, М.М.
22. Мусульманова (СССР). № 2430757/23-04; Заявл. 13.12.76; Опубл. 25.02.79, Бюл. №7.-4 с.
23. А. с. 664967 СССР, МКИ2 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / Н.П. Шелухина, Ш.В. Цель, М.Б. Аймухомедова и др. (СССР). № 2539855/23-13; Заявл. 31.10.77; Опубл. 30.05.79, Бюл. № 12. - 4 с.
24. А. с. 757541 СССР: МКИ3 С 08 В 37/06, С 08 В 37/00. Способ получения пектиновых веществ и целлюлозы / А.А. Баранчиков, Н.П. Шелухина, М.Б. Аймухомедова (СССР). № 2634527/23-05; Заявл. 15.06.78; Опубл. 23.08.80, Бюл № 31. - 6 с.
25. А. с. 763355 СССР: МКИ3 С 08 В 37/06. Способ определения концентрации пектиновых веществ / Д.Ш. Шамшибиева, Г.Б. Аймухомедова, Н.П. Шелухина (СССР). № 2644230/23-05; Заявл. 17.07.78; Опубл. 15.09.80, Бюл. № 34. - 8 е.: ил.
26. А. с. 914566 СССР: МКИ3 С 08 В 37/06. Способ получения производных пектина / З.Д. Ашубаева, Д.В. Тюребаева (СССР). № 2922379/23-05; Заявл. 30.04.80; Опубл. 23.03.82, Бюл. № 11. - 6 е.: ил.
27. Агапов, Ю.А. Кислотно-щелочной баланс / Ю.А. Агапов. М., 1968. - 184 с.
28. Азарян, JI.T. Клинико-гематологические показатели крови коров в условиях комплекса / JI.T. Азарян, А.А. Бокун // Гигиена промышленного производства. Новочеркасск, 1978. - С. 51-54.
29. Аймухомедова, С.Х. Пектиновые вещества и методы их определения / Г.Б. Аймухомедова, Н.П. Шелухина. Фрунзе: ИЛИМ, 1964. - 120 с.
30. Антибактериальная и терапевтическая эффективность пектина из морской травы zostera / Т.С. Запорожец, Н.Н. Беседнова, Г.П. Лямкин и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1991. - Т. 36. - № 4. - С. 24-26.
31. Антимикробные свойства пектинов и их влияние на активность антибиотиков / Д.Д. Меньшиков, Е.Б. Лазарева, Т.С. Попова и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1997. - Т. 42. - № 12. - С. 10-15.
32. Антипова, Л.В. Методы исследования мяса и мясных продуктов / Л.В. Антипова, И.А. Глотова, И.А. Рогов. М.: Колос, 2001. - 376 с.
33. Архипова, О.Г. Связывание и выведение свинца из организма под влиянием пектина / О.Г. Архипова, А.Д. Беззубов, А.И. Хатина // Токсикология новых промышленных химических веществ. М., 1961. - Вып. 2. - С. 148-165.
34. Беззубов, А.Д. Исследование возможности использования пищевого пектина в качестве комплексона при интоксикации кобальтом / А.Д. Беззубов,
35. A.И. Хатина // Гигиена и санитария. 1959. - № 11. - С. 32-36.
36. Биологически активные олигосахариды из пектинов проростков Pisum sativum L., влияющие на процесс корнеобразования / О.А. Заботина, Н.Н. Ибрагимова, А.И. Заботин и др. // Биохимия. 2002. - Т. 67 - Вып. 2. - С. 271-277.
37. Биохимия животных / А.В. Чечеткин, И.Д. Головацкий, П.А. Калиман,
38. B.И. Воронянский. М., 1982. - 511 с.
39. Битюков, И.П. Изменения количества эритроцитов и гемоглобина крови в разные периоды воспроизводительной функции коров / И.П. Битюков // Науч. тр. Воронежского с.-х. института. Воронеж, 1979. - Вып. 105. - С. 19-22.
40. Битюков, И.П. Практикум по физиологии сельскохозяйственных животных / И.П. Битюков, В.Ф. Лысов, Н.А. Сафонов. М.: Агропромиздат, 1990. -256 с.
41. Бландова, З.К. Белки и белковые фракции сыворотки крови кур в связи с их возрастом и продуктивностью / З.К. Бландова // Доклады ТСХА. 1961. -Вып. 69. - С. 227-233.
42. Болотников, И.А. Гематология птиц / И.А. Болотников, Ю.В. Соловьев. -Л.: Наука, 1980. 170 с.
43. Болотников, И.А. Практическая иммунология сельскохозяйственной птицы / И.А. Болотников, Ю.В. Конопатов. СПб.: Наука, 1993. - 204 с.
44. Бузина, Г.В. Некоторые особенности технологии производства свекловичного пектина / Г.В. Бузина, В.В. Парфененко // Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1974. - № 6. - С. 23-24.
45. Булдаков, А.С. Пищевые добавки: Справочник / А.С. Булдаков. СПб.: Ut, 1996. - 240 с.
46. Ванштейн, С.Г. Пищевые волокна в профилактической и лечебной медицине /С.Г. Ванштейн, A.M. Масик // ВНИИМИ. 1985. - Вып. 3. - С. 1-81.
47. Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных / Е.А. Васильева. М.: Россельхозиздат, 1974. - 192 с.
48. Вискозиметрический метод определения общей эндодеполимеразной активности пектиназ / А.В. Гусаков, А.В. Марков, С.Г. Гришутин и др. // Биохимия. 2002. - Т. 67 - Вып. 6. - С. 815-822.
49. Войтенко, Г.Н. Панкреатопротекторное действие растительных полифенолов и их композиций с пектином / Г.Н. Войтенко // Третья Украинская конф. по мед. ботанике: Тез. докл. Киев, 1992. - Ч. 1. - С. 34-35.
50. Гигиеническая характеристика пектолитического ферментного препарата из гриба aspergillus niger штамм эу 119/ Б.К. Скирко, Н.В. Клейменова, В.Я. Виссарионова и др.// Гигиена и санитария. - 1971. - № 6. - С. 102-103.
51. Гиполипидэмические свойства растворимых пищевых волокон (пектина) у больных ишемической болезнью сердца / С.В. Шалаев, Л.И. Алманова, И.В. Медведева и др. // Кардиология. 1998. - Т. 38. - № 3. - С. 26-29.
52. Гительзон, И.И. Эритрограммы как метод клинического исследования крови / И.И. Гительзон, И.А. Терсков. Красноярск: СО АН СССР, 1959. -247 с.
53. Грудева-Попова, Ж.Г. Экспериментальное изучение влияния пектиновых веществ на неспецифическую защиту организма / Ж.Г. Грудева-Попова, Т.З. Цветкова // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - № 3. - С. 15-17.
54. Грысс, 3. Использование отходов плодоовощной и консервной промышленности / 3. Грысс. М.: Пищевая промышленность, 1974. - 278 с.
55. Донченко, Л.В. Производство пектина / Л.В. Донченко, Н.С. Карпович, Е.Г. Симхович. Кишинев, 1994. - 182 с.
56. Донченко, Л.В. Технология пектина и пектинопродуктов / Л.В. Донченко. М.: ДеЛи, 2000. - 255 с.
57. Задарновская, Г.Ф. Сравнительные данные по регенерации крови у птиц / Г.Ф. Задарновская: Автореф. дис. канд. биолог, наук. Казань, 1950. - 16 с.
58. Зеленин, К.Н. Комплексоны в медицине // К.Н. Зеленин // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 7. - № 1. - С. 45-50.
59. Иваницкий, A.M. Об оценке содержания в некоторых напитках метанола, образующегося при ферментативном гидролизе пектина / A.M. Иваницкий // Вопросы питания. 1974. - № 1. - С. 74-71.
60. Изменение механизма инактивации генома эритроцитов птиц. Характеристика дифференцирующейся системы эритроидных клеток / К.М. Газарян, А.С. Кульминская, Т.Г. Ананьянц, Г.И. Кирьянов // Онтогенез. 1971. - Т. 2. -№ 3. - С. 263-276.
61. Изучение взаимодействия пектинов с металлами с целью исследования их детоксицирующих свойств / Н.Ш. Кайшева, В.А. Компанцев, С.Н. Щербак, Н.И. Крикова // Фармация. 1992. - Т. 41. - № 2. - С. 45-49.
62. Изучение влияния пектиновых веществ в условиях нарушения онтогенеза комплексом химических факторов / С.Н. Селютина, В.В. Бебешко, А.А. Кожин, А.А. Афонин // Вопросы питания. 2000. - № 1-2. - С. 60-62.
63. Использование морской травы зоостеры для получения низкоэтерифици-рованного пектина / В.В. Ковалев, А.А. Артюхов, Ю.Н. Лоенко и др. // Регион. конф. Сибири и Дал. Вост. «Перспективы развития малотоннажной химии»: Тез. докл. Красноярск, 1989. - С. 143.
64. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И. Ко-зинца. М.: Триада-Х, 1997. - 480 с.
65. Истманова, Т.С. Очерки функциональной гематологии / Т.С. Истманова. -Л.: Медгиз, 1963.-231 с.
66. Истманова, Т.С. Функциональная гематология / Т.С. Истманова, В.А. Алмазов. Л.: Медицина, 1973. - 311 с.
67. Ииргенсонс, Б. Природные органические макромолекулы / Б. Йиргенсонс. М.: Мир, 1965. - 554 с.
68. К вопросу о механизме действия продуктов гемолиза на гемопоэз / Н.А. Федоров, Г.Л. Москалева, В.И. Гудим, B.C. Иванова // Проблемы гематологии. 1975. - № 12. - С. 36-39.
69. К вопросу о применении водного экстракта пектина яблочного в целях детоксикации при некоторых заболеваниях человека / Б.Д. Левченко, Л.М. Тимонова, Е.А. Белоусова и др. // Сб. научн.-практ. работ врачей. Краснодар, 1992. - С. 3-7.
70. К дальнейшему совершенствованию применения пектина как профилактического средства при поступлении радионуклидов в организм человека / А.Е. Романенко, И.Б. Деревяго, В.А. Литенко, А.Н. Ободович // Гигиена труда.- 1991.-№ 12.-С. 8-10.
71. Калайциди, Л.Ю. Биохимическое обоснование и разработка технологии пектиновых веществ с заданными комплексообразующими свойствами из различных видов сырья / Л.Ю. Калайциди: Автореф. дис. канд. тех. наук. -Краснодар, 1995. 19 с.
72. Кармолиев, Р.Х. Физико-химические свойства и функции белков крови / Р.Х. Кармолиев: Автореф. дис. докт. биолог, наук. Алма-Ата, 1984. - 39 с.
73. Карпович, Н.С. Определение коэффициента диффузии пектиновых веществ в растительной ткани / Н.С. Карпович, В.М. Лысянский, Л.В. Донченко // Пищевая промышленность. 1982. -№3.-С.35-37.
74. Кассирский, И.А. Клиническая гематология / И.А. Кассирский, Г.А. Алексеев. М., 1970. - 800 с.
75. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / И.П. Кондрахин, Н.В. Курилов, А.Г. Малахов и др. М.: Агропромиздат, 1985. - 287 с.
76. Клиорин, А.И. Функциональная неравнозначность эритроцитов / А.И. Клиорин, JI.A. Титунов. JI.: Наука, 1974. - 148 с.
77. Корзун, В.Н. Чернобыль: радиация и питание / В.Н. Корзун, И.П. Лось, О.П. Честов. Киев, 1994. - 64 с.
78. Кудрявцев, А.А. Клиническая гематология животных / А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. М.: Колос, 1974. - 399 с.
79. Кулаченко, В.П. О функциональном состоянии эритроцитов крови сельскохозяйственных животных / В.П. Кулаченко // Сельскохозяйственная биология. 1991.-№ 2. - С. 115-119.
80. Кулаченко, В.П. Породные различия функциональных свойств эритроцитов / В.П. Кулаченко // Болезни сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ними: Межвуз. сборн. науч. тр. Белгород, 1992. - С. 128-135.
81. Кухта, В.К. Белки плазмы крови: Патохимия и клиническое значение / В.К. Кухта. Минск: Беларусь, 1986. - 80 с.
82. Лабораторные исследования в ветеринарии / Б.И. Антонов, Т.Ф. Яковлева, В.И. Дерябина и др. М.: Агропромиздат, 1991. - 287 с.
83. Лабораторные исследования в клинике. Справочник. / Под ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 368 с.
84. Лазарева, Е.Б Опыт и перспективы использования пектинов в лечебной практике / Е.Б. Лазарева, Д.Д. Меньшиков // Антибиотики и химиотерапия. -1999.-Т. 44.-№2. С. 37-40.
85. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1980. - 293 с.
86. Лескова, Г.Е. Исследование защитных свойств пектина при экспериментальной ртутной интоксикации / Г.Е. Лескова, М.Н. Коршун, И.И. Швайко // Рациональное питание (Киев). 1971. - Вып. 9. - С. 101-103.
87. Лоранская, Т.И. Изучение влияния пектинсодержащей БАД на состояние гастродуоденальной моторики у больных с функциональной диспепсией / Т.И. Лоранская, И.Н. Кабанова, Е.В. Клыкова // Вопросы питания. 2002. - № 2.-С. 31-33.
88. Малахов, А.Г. Биохимия сельскохозяйственных животных / А.Г. Малахов, С.И. Вишняков. М.: Колос, 1984. - 336 с.
89. Марцишевская, Р.Л. Математические методы в лабораторной диагностике / Р.Л. Марцишевская // Лабораторное дело. 1975. - № 7. - С. 428-430.
90. Методы биохимического исследования растений / А.И. Ермаков, В.В. Арасимович, Н.П. Ярош и др.- Л.: Агропромиздат, 1987. 430 с.
91. Моисеева, В.Г. Влияние чистоты пектинового препарата на физико-химические и комплексообразующие свойства пектина / В.Г. Моисеева, Г.М. Зайко // Пищевая технология. 1976. - № 3. - С. 27-30.
92. Москаленко, С.В. Влияние пектиновых веществ на биохимические процессы детоксикации при химической патологии печени /С.В. Москаленко: Автореф. дис. канд. фарм. наук. Пятигорск, 1995. - 19 с.
93. Недужий, А.А. Исследование структурной вязкости в растворах, содержащих пектиновые вещества / А.А. Недужий, О.Д. Куриленко // Тр. Киевск. технол. института пищ. промышленности. 1953. - № 13. - С. 111-116.
94. Немчинская, В.П. Некоторые особенности энергетического метаболизма эритроцитов голубей и их ядер / В.П. Немчинская, Т.П. Моженок, А.Д. Браун // Цитология. 1974. - № 10. - С. 32-39.
95. Нилов, В.И. Химия виноделия / В.И. Нилов, И.М. Скурихин. М.: Пищевая промышленность, 1967. - 422 с.
96. Оксенгендлер, Г.И. Яды и противоядия / Г.И. Оксенгендлер. Л.: Наука, 1982. - 192 с.
97. Осенова, Е.Х. Субтропические и тропические плоды / Е.Х. Осенова, И.М. Лемешко. М.: Экономика, 1978 . - 95 с.
98. Оценка эффективности адсорбции меди, цинка и хрома из щелочных растворов пектиновыми веществами / Н.И. Сухарева, Т.В. Павлова, В.А. Вась-кина, В.А. Остапенко // Эфферентная терапия. 1998. - Т. 4. - № 3. - С. 67-68.
99. Парфененко, В.В. Получение студнеобразующего свекловичного пектина в условиях 1,1 % соляной кислоты / В.В. Парфененко, Г.В. Бузина, O.K. Лу-ценко // Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1974. - № 10. - С. 20-22.
100. Пат.2004549, МПК5 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / Кайшева Н.Ш.; Компанцев В.А.; Цербак С.Н. и др.(Яи); Пятигорский фармацевтический институт. № 5018700/05; Заявл. 22.07.91; Опубл. 15.12.93, Бюл. № 4546. - 16 с.
101. Пат.2034850, МПК6 С 08 В 37/06. Способ получения пектина / Карашарлы А.С.; Мухина Л.Б. (RU); Гос. науч.-исслед. и проект.-конструкт. институт по развитию и эксплуатации флота. № 4901373/05; Заявл. 09.01.91; Опубл. 10.05.95, Бюл. № 13.-8 с.
102. Пектин. Производство и применение / Под ред. Н.С. Карповича. К.: Урожай, 1989. - 88 с.
103. Перспективы использования пектиновых веществ и их производных в медицине / Н.П. Шелухина, Д.Э. Алиева, М.Б. Аймухомедова и др. // 14 Менделеев. съезд по общ. и прикл. химии: Реф. докл. и сообщ. М., 1989. - Т. 1. -С. 513.
104. Плешанов, Н.Н. К методике взятия крови у птиц / Н.Н. Плешанов // Тр. Моск. Ветакадемии. 1967. - Вып. 5. - С. 196.
105. Получение и изучение физико-химических и гепатопротекторных свойств пектиновых веществ / Ю.К. Василенко, С.В. Москаленко, Н.Ш. Кайшева и др. // Химико-фармакологический журнал. 1997. - Т. 31. - № 6. - С. 28-29.
106. Потиевский, Э.Г. Антибактериальное действие пектина в эксперименте и клинике / Э.Г. Потиевский, В.Н. Дроздов. Омск: Издательство Омской гос. мед. академии, 1997. - 96 с.
107. Потиевский, Э.Г. Применение пектина у детей, больных острыми кишечными инфекциями / Э.Г. Потиевский, Е.Ф. Шендяпина // Педиатрия. 2000. -№ 6. - С. 66-68.
108. Применение пектинового гидрогеля в терапии острого послелучевого эпителита и трофических расстройств / С.А. Шалимов, J1.A. Тверской, Л.П. Киндзельский и др. // Клиническая хирургия. 1995. - № 3. - С. 26-27.
109. Проблема выведения из организма долгоживущих радиоактивных изотопов / B.C. Балабуха, Л.М. Разбитная, Н.О. Разумовский и др. М.: Госатомиз-дат, 1962. - 167 с.
110. Проссер, Л. Сравнительная физиология животных / Л. Проссер. М.: Мир, 1977.-Т. 2.-571с.
111. Пятчина, О.В. Клинико-лабораторная оценка эффективности использования пектина у больных с хронической почечной недостаточностью / О.В. Пятчина, М.В. Одинцова, Ю.С. Хотимченко // Вопросы питания. 2003. - № 2.-С. 43-45.
112. Разуваев, Н.И. Комплексная переработка вторичных продуктов виноделия / Н.И. Разуваев. М.: Пищевая промышленность, 1975. - 168 с.
113. Рузинов, Л.П. Статистические методы оптимизации химических процессов / Л.П. Рузинов. М.: Химия, 1972. - 200 с.
114. Руководство к практическим работам по коллоидной химии / О.Н. Григоров, И.Ф. Карпова, З.П. Козьмина и др. М.: Химия, 1964. - 332 с.
115. Руководство по клиническим лабораторным исследованиям / Под ред. Л.Г. Смирновой. М.: Медгиз, 1960. - 964 с.
116. Сапожникова, Е.П. Пектиновые вещества плодов / Е.П. Сапожникова. -М.: Наука, 1965.- 182 с.
117. Семенов, Х.Х. Изменение содержания общего белка сыворотки крови в связи с ростом цыплят / Х.Х. Семенов // Докл. ТСХА. 1970. - Вып. 157. - С. 195.
118. Соболев, М.В. Энтеросорбция некрахмальными полисахаридами как метод лечения детей с меркуриализмом / М.В. Соболев, С.Б. Хацкель, А.Ю. Мурадов // Вопросы питания. 1999. - Т. 68. - № 1. - С. 28-30.
119. Сорбционные свойства пектиновых препаратов / Ю.К. Василенко, Н.Ш. Кайшева, В.А. Компанцев и др. // Химико-фармакологический журнал. 1993. -Т. 27.-№ 11.-С. 44-46.
120. Сосновский, Л.Б. Исследование процесса гидролиза-экстрагирования пектина из свекловичного жома / Л.Б. Сосновский, Г.В. Бузина, О.Ф. Иванова // Тр. Всес. НИИ конд. промышленности. 1966. - Вып. 17. - С. 100-103.
121. Справочник ветеринарного врача / Сост. А.А. Кунаков. -2-е изд., пере-раб. и доп. М.: Колос, 1996. - 623 с.
122. Справочник специалиста ветеринарной лаборатории / Под ред. Ю.П. Смияна. К.: Урожай, 1987. - 368 с.
123. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды) / Б.Н. Степаненко. М.: Высшая школа, 1978. - 256 с.
124. Степовик, Л.Н. Особенности физиологических свойств эритроцитов некоторых видов млекопитающих / Л.Н. Степовик: Автореф. дис. канд. биолог, наук. Оренбург, 1985. - 16 с.
125. Стрельников, В.В. Влияние нитратов на организм цыплят-бройлеров и получение экологически чистой продукции мясного птицеводства / В.В. Стрельников. Краснодар: КГАУ, 1996. - 30 с.
126. Стрельников, В.В. Использование пектина и лигнина в рационах цыплят-бройлеров, как факторов нивелирующих негативное действие нитратов на организм человека/В.В. Стрельников. Краснодар: КГАУ, 1996. - 56 с.
127. Технологические схемы производства пектина из свекловичного жома / Н.С. Карпович, JI.B. Донченко, Е.Н. Киореску и др. // Пищевая промышленность. 1985. - Вып. 31. - С. 17-27.
128. Филиппович, Ю.Б. Основы биохимии / Ю.Б. Филиппович. М.: Высшая школа, 1993.-496 с.
129. Хамидов, Д.Х. Кровь и кроветворение у позвоночных животных / Д.Х. Хамидов, А.Т. Акилов, А.А. Турдыев. Ташкент: Фан, 1978. - 168 с.
130. Хатко, З.Н. Биохимическое обоснование и разработка способов получения высокоочищенного свекловичного пектина / З.Н. Хатко: Автореф. дис. канд. тех. наук. Краснодар, 1997. - 21 с.
131. Хенглейн, Н.Ф. Пектины / Н.Ф. Хенглейн // Биохимические методы анализа растений. М.: Иностранная литература, 1960. - С. 280-323.
132. Хотимченко, Ю.С. Фармакологические свойства пектинов / Ю.С. Хотимченко, А.В. Кропотов, М.Ю. Хотимченко // Эфферентная терапия. 2001. - Т. 7. - № 4. - С. 22-36.
133. Хочачка, П. Стратегия биохимических адаптаций / П. Хочачка, Дж. Со-меро. М.: Мир, 1977. - 380 с.
134. Шабалин, В.Н. Клиническая иммунология / В.Н. Шабалин, Л.Д. Серова. -Л., 1988.-310 с.
135. Шелухина, Н.П. Научные основы технологии пектина / Н.П. Шелухина. -Фрунзе: Илим, 1988. 168 с.
136. Шелухина, Н.П. Пектиновые вещества, их некоторые свойства и производные / Н.П. Шелухина, З.Д. Ашубаева, Г.Б. Аймухомедова. Фрунзе: Илим, 1970. - 73 с.
137. Шотова, В.Е. Влияние свекловичного пектина на качество хлеба / В.Е. Шотова // Улучшители качества пищевых продуктов. М.: Пищевая промышленность, 1977.- С. 103-107.
138. Шотова, В.Е. Изменение содержания пектина в муке при хранении и ее хлебопекарные свойства / В.Е. Шотова, А.А. Жолнерчик // Хлебопекарная и кондитерская промышленность. 1986. - № 3. - С. 32-34.
139. Эколого-биологические основы производства нормативно чистой продукции / Л.Н. Гамко, Т.Л. Талызина, Е.В. Крапивина и др. Брянск: Издательство Брянской ГСХА, 2000. - 232 с.
140. Экспериментальное и клиническое изучение влияния пектина на возбудителей острых кишечных инфекций / Э.Г. Потиевский, Ш.Ш. Шавахабов, В.М. Бондаренко, З.Д. Ашубаева // Журнал микробиологии. 1994. - Приложение. -С. 106-109.
141. Экспресс-метод определения ингибиторов трипсина в сыворотке крови человека / К.Н. Веремеенко, Л.И. Волохонская, С.И. Ханюченко и др. // Лабораторное дело. 1986. - № 9. - С. 531-533.
142. Эффективность местного применения пектинов в лечении ожоговых ран / Е.Б. Лазарева, Т.Г. Спиридонова, Е.Н. Чернега и др. // Антибиотики и химиотерапия. 2002. - № 9. - С. 9-13.
143. Эффективность пищевых некрахмальных полисахаридов при экспериментальном токсическом гепатите / Ю.С. Хотимченко, Э.И. Хасина, В.В. Ковалев и др. // Вопросы питания. 2000. - Т. 69. - № 1-2. - С. 22-26.
144. Эффективность применения пектина в комплексе с антибиотиками в лечении острых кишечных инфекций / З.К. Мухиддинов, Д.Х. Халиков, Х.Х.
145. Авлоев и др. // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. 2003.- № 2. - С. 41-43.
146. Эффективность яблочного пектина медетопекта для профилактики инкорпорации свинца в организме рабочих / В.А. Остапенко, А.И. Тепляков, А.С. Прокопович, Т.И. Чегерова // Медицина труда и промышленная экология. 2001.-№ 5. - С. 44-47.
147. Яровая, Е.В. Разработка способов интенсификации процессов извлечения пектиновых веществ из свекловичного жома / Е.В. Яровая: Автореф. дис. канд. тех. наук. Краснодар, 1991. - 23 с.
148. A case control study of diet and rectal cancer in western New York / J.L. Freu-denheim, S. Graham, J.R. Marshall et al. // Amer. J. Epidemiol. 1990. - Vol. 131. -№ 4.-P. 612-624.
149. Agents diminishing skeletal accumulation of lead / N. S. Mac Donald, F. Eznurlian, P. Spain, D.E. Rounds // Arch. Indust. Hyg. Occup. Med. 1953. - Vol. 7. -№3.- P. 217-220.
150. Anderson, J.W. Ten different dietary fibers have significantly different T effects on serum and liver lipids of cholesterol-fed rats / J.W. Anderson, A.E. Jones, S. Riddell-Mason. // J. Nutr. 1994. - Vol. 124. - № 1. - p. 78-83.
151. Andoh, A. Physiological and anti-inflammatory roles of dietary fiber and bu-tyrate in intestinal functions /А. Andoh, T. Bamba, M. Sasaki // J. Parenter. Enteral Nutr. 1999. - Vol. 23 - № 5 (Suppl.). - P. S70-S73.
152. Apoptosis in colorectal tumor-cells. Induction by the short-chain fatty-acids butyrate, propionate and acetate and by the bile-salt deoxycholate / A. Hague,
153. D.J.E. Elder, D.J. Hicks, L.H. Paraskeva // Int. J. Cancer. 1995. - Vol. 60. - № 3.- P. 400-406.
154. Bagheri, S. Effect of wheat bran and.pectin on the absorption and retention of phosphorus, calcium, magnesium and zinc by the growing pig / S. Bagheri, L. Gueguen // Reprod. Nutr. Dev. 1985. - Vol. 25. - № 4A. - P. 705-716.
155. Barbolt, T.A. Dose-response, sex difference, and the effect of bran in di-methylhydrazine-induced intestinal tumorigenesis in rats / T.A. Barbolt, R. Abraham // Toxicol, appl. Pharmacol. 1980. - Vol. 55. - № 3. - P. 417-422.
156. Binding capacity of various fibre to pesticide residues under simulated gastrointestinal conditions / C.A. Та, J.A. Zee, T. Desrosiers et al. // Food Chem. Toxicol.- 1999.-Vol. 37.-№ 12.-P. 1147-1151.
157. Bishop, C.I. The red blood cell / C.I. Bishop, D.M. Surgenor. New York., 1964. - 148 p.
158. Black Sharon, A. The effect of demethylation procedures on the quality of low ester pectins / A. Black Sharon, C.J.B. Smit // J. Food Sci. 1972. - Vol. 37. - № 5.- P. 730-732.
159. Cell free synthsis of the pectic polysaccharide homohalacturonan / D. Mohnen, R.L. Doong, L. Liljebjelkek et al. // Pectins and Pectinases: Proceedings of an International Symposium. Wageningen, Nertherlands, 1996. - P. 109-125.
160. Chen, W.J.L. Propionate may mediate the hypocholesterolemic effects of certain soluble plant fibers in cholesterol fed rats / W.J.L. Chen, J.W. Anderson, D. Jennings // Proc. Soc. exp. Biol. 1984. - Vol. 175. - № 2. - P. 215-218.
161. Christensen, S.H. Pectin a natural hydrocolloid for confectionery products / S.H. Christensen// Confect. Production. 1977. - Vol. 43 - № 9. - P. 378-381.
162. Clausen, M.R. Kinetic-studies on the metabolism of short-chain fatty-acids and glucose by isolated rat colonocytes / M.R. Clausen, P.B. Mortensen // Gastroenterology. 1994. - Vol. 106. - № 2. - P. 423-432.
163. Coleman, R. Membrane-bound enzymes and membrane ultra structure / R. Coleman // Biochim. Biophys. Acta. 1973. - Vol. 300. - P. 1-30.
164. Colloidal bismuth J pectin: an alternative to bismuth subcitrate for the treatment of Helicobacter pylori-positive duodenal ulcer / Y. Nie, Y. Li, H. Wu et al. // Helicobacter. 1999. - Vol. 4. - № 2. - P. 128-134.
165. Cultivar location and processing methods affect yield and quality of sunflower pectin / K.C. Chang, V. Dhurandhar, X.You, A.Miyamoto // J. Food Sci. 1994. -Vol. 59. - P. 602.
166. Dietary fibers modulate indices of intestinal immune function in rats / B.O. Lim, K. Yamada, M. Nonaka et al. // J. Nutr. 1998. - Vol. 127. - № 5. p. 663667.
167. Dietary guar gum and pectin stimulate intestinal microbialj polyamine synthesis in rats / J. Noack, B. Kleessen, J. Proll et al. // J. Nutr. 1998. - Vol. 128. - № 8. -P. 1385-1391.
168. Doherty, J. The effect of dietary pectin on rapid catch-up weight gain and urea kinetics in children recovering from severe undernutrition / J. Doherty, A.A. Jackson // Acta Paediatr. 1992. - Vol. 81. - № 6-7. - P. 514-517.
169. Dongowski, G. Influence of pectin structure on the interaction with bile acids under in vitro conditions / G. Dongowski // Z. Lebensm. Unters Forsch. 1995. -Bd. 201 - № 4. - S. 390-398.
170. Effect of dietary cellulose on cell proliferation and progression of 1,2-dimet-hylhydrazine-induce'd colon carcinogenesis in rat / D.W. Heitman, V.A. Ord, K.E. Hunter, I.L. Cameron // Cancer Res. 1989. - Vol. 49. - № 20. - P. 5581-5585.
171. Effect of dietary cereal bran's on the metabolism of trace elements in a long-term rat study / D.G. Shah, S. Malcolm, B. Belonje et al. // Cereal Chem. Vol. 68.- № 2. P. 190-194.
172. Effect of different sources of fibre on growth performance, intesyinal morphology and ceacal carbohydrases of domestic geese / B. Yu, C.C. Tsai, J.C. Hsu, P.W. Chiou // Brit. Poult. Sci. 1998. - Vol. 39. - № 4. - P. 560-567.
173. Effect of meat protein and dietary fiber on colonic function and metabolism. 2. Bacterial metabolites in feces and urine / J.H. Cummingis, M.J. Hill, E.S. Bone et al. // Amer. J. clin. Nutr. 1979. - Vol. 32. - № 10. - P. 2094-2101.
174. Effect of orange and apple pectin on cholesterol concentration Г in serum, liver and faeces / M. Gonzalez, C. Rivas, B. Caride et al // J. Physiol. Biochem. 1998. -Vol. 54. - № 2. - P. 99-104.
175. Effect of two kinds of pectin and guar gum on dimethylhydrazine initiation of colon tumors and fecal в-glucuronidase activity in the rat / H.G. Bauer, N.-G. Asp, A. Dahlqvist et al. // Cancer Res. 1981. - Vol. 41. - № 6. - P. 2518-2523.
176. Effect of viscous indigestible polysaccharides on pancreatic biliary secretion and digestive organs in rats / S. Ikegami, F. Tsuchihashi, H. Harada et al. // J. Nutr.- 1990. Vol. 120. - № 4. - P. 353-360.
177. Effects of calcium and pH on the mucosal damage produced by deoxycholic acid in the rat colon / J.J. Rafter, V.W.S. Eng, R. Furrer et al. // Gut. 1986. - Vol. 27.- № 11.-P. 1320-1329.
178. Effects of polysaccharides from Silene vulgaris on phagocytes / S.V. Popov, G.Y. Popova, RG. Ovodova et al. // Int. J. Immunopharmacol. 1999. - Vol. 21 -№ 9. - P. 617-624.
179. Effects of soluble fibers on lipid metabolism and activities of intestinal disac-charidases in rats / Y. Choi, S.H. Cho, H.J. Kim, H.J. Lee // J. Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokyo). 1998. - Vol. 44. - № 5. - P. 591-600.
180. Fernandez, M.L. Distinct mechanisms of plasma LDL lowering by dietary fiber in the guinea pig: specific effects of pectin, guar gum, and psyllium / M.L. Fernandez // J. Lipid Res. 1995. - Vol. 36. - № 11. - P. 2394-2404.
181. Fernandez, R. Components of fiber bind iron in vitro / R. Fernandez, S.F. Phillips // Amer. J. din. Nutr. 1982. - Vol. 35. - № 1. - P. 100-106.
182. Finean, J.B. Membranes and Cellular Functions / J.B. Finean, R. Coleman, R.H. Michell. Oxford, London, Edinburgh, Melbourne., 1974. - 196 p.
183. Freeman, H.J. A double blind study on the effect of different purified cellulose and pectin fiber on 1, 2-dimethylhydrazine-induced rat colonic neoplasia / H.J. Freeman Y.S. Kim, G.A. Spider // Cancer Res. 1980. - Vol. 40. - № 8. - P. 26612665.
184. Giersher, K. Pectin and pectic enzymes in fruit and vegetable technology / K. Giersher // Gordian. 1981. - Vol. 81 - № 7-8. - P. 171-176.
185. Grudeva-Popova, J. Effect of pectin on some electrolytes and trace elements in patients with hyperlipoproteinemia / J. Grudeva-Popova, I. Sirakova // Folia Med. (Plovdiv). 1998. Vol. 40. - № 1. - P. 41-45.
186. Harris, P.J. Dietary fibers may protect or enhance carcinogenesis / P.J. Harris, L.R. Ferguson // Mutat. Res. 1999. - Vol. 443. - № 1-2. - P. 95-110.
187. Heerdt, B.G. Potentiation by specific short-hain fatty-acids of differentiation and apoptosis in human colonic carcinoma cell fines / B.G. Heerdt, M.A. Houston, L.H. Augenlicht // Cancer Res. 1994. - Vol. 54. - № 12. - P. 3288-3294.
188. Hegsted, D.M. Dietary standards — guidelines for prevention of deficiency or prescription for total health / D.M Hegsted // J. Nutr. 1986. - Vol. 116. - № 3. - P. 478-481.
189. Heitman, D.W. Dietary supplementation with pectin and guar gum on 1, 2-dimethylhydrazme-induced colon carcino-genesis in rat / D.W. Heitman, W.E. Hardman, I.L Cameron // Carcinogenesis. 1992. - Vol. 13. - № 5. - P. 815-818.
190. Hennink, H. Production, characterization and Application of Rhamnogalactu-ronase / H. Hennink, H. Stam, M.G. Oort // Pectins and Pectinases: Proceeding of an International Symposium. Wageningen, Netherlands, 1996. - P. 485-494.
191. Hensel, A. Pectins and xyloglucans exhibit antimutagenic activities against ni-troaromatic compounds /А. Hensel, K. Meier // Planta Med. 1999. - Vol. 65. - №5. P. 395-399.
192. Influence of certain fibers on serum and tissue cholesterol levels in rats / A.C. Tsai, J. Elias, J.J. Kelley et al. // J. Nutr. 1976. - Vol. 106. - № 1. - P. 118-123.
193. Influence of indigestible fibers on glucose tolerance / L. Monnier, T.C. Pham, L. Aguirre et al. //Diabetes Care. 1978. - Vol. 1. - № 2. - P. 83-88.
194. Intermolecular association in pectin solutions / M.A.F. Davies, M.J. Gidley, E.R. Morris et al. // Int. J. Biol. Macromolec. 1980. - Vol. 2. - P. 330.
195. Jacobs, L.R., Relationship between colonic luminal pH, cell proliferaion, and colon carcinogenesis in 1,2-dimethylhydrazine-treated rats fed high fiber diets / L.R. Jacobs, J.R. Lupton // Cancer Res. 1986. - Vol. 46. - № 4. - P. 1727-1734.
196. Jiang, Y.H. Dietary fat and fiber modulate the effect of carcinogen on colonic protein kinase С lambda expression in rats / Y.H. Jiang, J.R. Lupton, R.S. Chapkin //J. Nutr. 1997.-Vol. 127. № 10.-P. 1938-1943.
197. Kamath, P.S. Short chain fatty-acids stimulate ilea motility in humans / P.S. Kamath, S.F. Phillips, A.R. Zinsmeister // Gastroenterology. 1988. - Vol. 95. - №6.-P. 1496-1502.
198. Kay, R.M. Effect of citrus pectin on blood lipids and fecal steroid excretion in man / R.M. Kay, A. S. Truswell // Amer. J. clin. Nutr. 1977. Vol. 30. - № 2. - P. 171-175.
199. Kelley, J.J. Effect of pectin, gum arabic and agar on cholesterol absorption, synthesis, and turnover in rats / J J. Kelley, A.C. Tsai // J. Nutr. 1978. - Vol. 108.- № 4. P. 630-639.
200. Kertesz, L.I. The pectin substances / L.I. Kertesz. New York: Interscience Publishers, 1951.-628 p.
201. Kishimoto, Y. Hypocholesterolemic effect of dietary fiber: relation to intestinal fermentation and bile acid excretion / Y. Kishimoto, S. Wakabayashi, H. Takeda // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 1995. - Vol. 41. - № l. - P. 151-161.
202. Klingenberg, M. Metabolic transport in mitochondria: an example at intracellular membrane function / M. Klingenberg // Essays in Biochemistry. 6. - P. 119160.
203. Kohn, R. Binding of divalent cations to oligomeric fragments of pectin / R. Kohn // Carbohydr. Res. 1987. - Vol. 160. - P. 343.
204. Kohnova, L. Funkcne a fiziologicke vlastnosti pektinu vo vyzive / L. Kohnova, R. Kohn // Chemicke listy. 1981. - T. 75. - № 2. - C. 109-119.
205. Kozakiewicz, T. Vitamin С from beet pulp / T. Kozakiewicz // Gaz. Cukrown.- 1949.-№89.-P. 394-396.
206. Kritchevsky, D. In vitro binding properties of dietary fiber / D. Kritchevsky // Europ. J. clin. Nutr. 1995. - Vol. 49. - № 3 (Suppl.). - P. SI 13-S115.
207. Крачанов, X. Повърхностно-активни производни на пектина / X. Крача-нов, Т. Панчева // Научн. тр. на высшия ин-т по хранителна и вкусова про-мишленост. Пловдив, 1982. - Т. 29. - № 2. - С. 127-137.
208. Leveille, G.A. Mechanism off the cholesterol-depressing effect of pectin in the cholesterol-fed rat / G.A. Leveille, H.E. Sauberlich // J. Nutr. 1966. - Vol. 88. - № 2.-P. 209-214.
209. McCann, M.C. Plant cell wall architecture: the role of pectins / M.C. McCann, K. Roberts // Pectins and Pectinases: Proceedings of an International Symposium. Wageningen, Netherlands, 1996. - P. 91-107.
210. Methods in Enzymology / Z.I. Kertesz, S.P. Colowick, N.O. Kaplan et al. -New York: Academic Press, 1955. Vol. I. - 158 p.
211. Methyl-etherification, de-etherification and gelation of pectins in the primary cell wall / R. Goldberg, C. Morvan, A. Jauneau et al. // Pectins and Pectinases: Proceedings of an International Symposium. Wageningen, Netherlands, 1996. - P. 151-172.
212. Muralikrishna, G. Characterization of pectin polysaccharides from pulse husks / G. Muralikrishna, R.N. Taranathan // Food Chem. 1994. - Vol. 50. - P. 87.
213. Oakenfull, R.C. Hydrophobicinteraction in the gelation of high methoxyl pectins / R.C. Oakenfull, A. Scott // J. Food. Sci. 1984. - Vol. 49. - P. 1093.
214. Pectin feeding influences fecal bile acid excretion, hepatic bile acid and cholesterol synthesis and serum cholesterol in rats / F. Garcia-Diez, V. Garcia-Mediavilla, J.E. Bayon, J. Gonzalez-Gallego // J. Nutr. 1996. - Vol. 126. - № 7. - P. 17661771.
215. Pienta, K.J. Inhibition of spontaneous metastasis in a rat prostate cancer model
216. Pilnik, W. Polysaccharides and food processing / W. Pilnik F.M. Rombouts // Carbohydr. Res. 1985. - Vol. 142 - № 1. - P. 93-105.
217. Plaami, S.P. Content of dietary fiber in foods and its physiological effects / S.P. Plaami // Food Rev. Int. 1997. - Vol. 13 - № 1. - P. 305.
218. Piatt, D. Modulation of the lung colonization of B16:fl melanoma cell by (modified) citrus pectin / D. Piatt //1. Natl. Cancer Inst. 1992. - 84(6). - P.438-442.
219. Prevention of colonic aberrant crypt foci and modulation of large J bowel microbial activity by dietary coffee fiber, inulinf and pectin / C.V. Rao, D. Chou, B. Simi et al. // Carcinogenesis. 1998. - Vol. 19. - № ю. - P. 1815-1819.
220. Raloff, J. Pectin helps fight cancer's spread / J. Raloff // Science news. 1992. -Vol. 141.-№ 12.-P. 180.
221. Relationship between molecular weights.of pectin and hypocholesterolemic effects in rats / F. Yamaguchi, S. Uchida, S. Watabe et al. // Biosci. Biotech. Bio-chem. 1995. -Vol. 59.-№ 11. - P. 2130-2131.
222. Rinaudo, M. Physicochemical properties of pectins in solution and gel states / M. Rinaudo // Pectins and Pectinases: Proceedings of an International Symposium. -Wageningen, Netherlands, 1996. P. 21-34.
223. Scheppach, W. Effects of short-chain fatty-acids on gut morphology and function / W. Scheppach // Gut. 1994. - Vol. 35. - № 1 (Suppl.). - P. S35-S38.
224. Schwartz, R. Apparent absorption and retention of Ca, Cu, Mg, Mn and Zn from a diet containing bran / R. Schwartz, B. Apgar, E. Wien // Amer. J. clin. Nutr. 1986. -Vol. 43.- №3.- P. 444-455.
225. Scols, H.A. Complex pectins: Structure elucidation using enzymes / H.A. Scols, A.G.J. Voragen // Pectines and Pectinases: Proceedings of an International Symposium. Wageningen, Netherlands, 1996. - P. 3-19.
226. Short-chain fatty-acid content and pH in cecum of rats given various sources of J carbohydrates / A. M. Berggren, I.M.E. Bjorck, E.M.G.L. Nyman, B.O. Eggum // J. Sci. Food Agric. 1993. - Vol. 63. - № 4. - P. 397-406.
227. Simpson, B.K. Extraction, purification and determination of pectin in tropical fruits / B.K. Simpson, K.B. Egyankor, A.M. Martin // J. Food Process Preserv. -1984.-Vol. 2.-P. 63.
228. Sriamornsak, P. Effect of calcium concentration, hardening agent drying condition on release characteristics of oral proteins from calcium pectinate gel beads / P. Sriamornsak // Europ. J. Pharmacol. Sci. 1999. - Vol. 8. - № 3. - P. 221-227.
229. Stampfli, G. Einflluss des Laktatoinsstadiums und der Trachtigkeitauf hamatologische und Klinische-chemische Werte bei der Milckkuhe // Schweiz. Arch. Ticrhalk. -1981. Bd. 123. - № 34. - S. 189-205.
230. Stark, A. Metabolic and morphometric changes in small and large intestine in rats fed high-fiber diets / A. Stark, A. Nyska, Z. Madar // Toxicol. Pathol. 1996. -Vol. 24.-№2.-P. 166-171.
231. Studies of pectin HM/Eudragit(R) RL/ Eudragit(R) NE film-coatiing formulations intended for colonic drug delivery / R. Semde, A. Amighi, M.J. Dev-leeschouwer, A.J. Aloes // Int. J. Pharmacol. 2000. - Vol. 197. - № 1-2. - P. 181192.
232. Tamura, M. Effects of pectin en jejunal and ileal morphology and ultrastructure in aduit mice / M. Tamura, H. Suzuki // Ann. Nutr. Metab. 1997. - Vol. 41. - № 4- P. 255-259.
233. Taper, H.S. Influence of inulin and oligofructose on breast cancer and tumor growth / H.S. Taper, M. Roberfroid // J. Nutr. 1999. - Vol. 129. - № 7 (Suppl.). -P. S1488-S1491.
234. The cholesterol-lowering effect of steroid sequestrants is modulated by large-intestine fermentations / C. Moundras, C. Demigne, A. Mazur, D. Remesy // J. Nutr. Biochem. 1995. - Vol. 6. - № 3. - P. 158-162.
235. Thornton, F.J. Healing in the gastrointestinal tract / F.J. Thornton, A. Barbul // Gastroenterology Clin. 1996. - Vol. 25. - № 4. - P. 717.
236. Topping, D. Hydroxypropylmethylcellulose, viscosity, and plasma-cholesterol control / D. Topping // Nutr. Rev. 1994. - Vol. 52. - № 5. - P. 176-178.
237. Trock, B. Dietary fiber, vegetables, and colon cancer. Critical review and metaanalyses of the epidemiologic evidence / B. Trock, E. Lanza, P. Greenwald // J. nat. Cancer Inst. 1990. - Vol. 82. - № 8. - P. 650-661.
238. Tung-Shan, C. The effect of sugars on viscosity of pectin solution. Comparison of Dextrose, Maltose and Dextrins / C. Tung-Shan, M.A. Yoslyn // J. of Coll. and. Interface Sci. 1967. - Vol. 25. - P. 346-352.
239. Venner, M. Treatment of gastric lesions in horses with pectin-lecithin complex / M. Venner, S. Lauffs, E. Deegen // Equine Vet. J. 1999. - Vol. 29 (Suppl.). - P. S91-S96.
240. Walkinshaw, M.D. Conformations and interactions of pectin. II. Models for junctions zones in pectinic acid and calcium pectate gels / M.D. Walkinshaw, S. Arnott //1, molec. Biol. 1981. - Vol. 53. - P. 1075.
241. Wang, J. Short-chain fatty acids induced cell cycle inhibitors in colonocytes/ J. Wang, E.A. Friedman // Gastroenterology. 1998. - Vol. 114. - № 5. - P. 940946.
242. Yamada, H. Contribution of pectins on health care / H. Yamada // Pectins and Pectinases Proceedings of an International Symposium. Wageningen, Nether' lands. 1996.-P. 173-190.
- Беляев, Алексей Геннадьевич
- кандидата биологических наук
- Курск, 2005
- ВАК 03.00.13
- Ветеринарно-санитарная оценка продуктов убоя цыплят-бройлеров при использовании в рационе янтарной кислоты и эмицидина
- Эффективность комплексного использования лактоамиловорина и иодида калия в кормлении цыплят-бройлеров
- Эффективность использования тыквенного жмыха и фуза в кормлении цыплят-бройлеров
- Биологические особенности и мясные качества цыплят-бройлеров при использовании пробиотической кормовой добавки "Ветоспорин-актив"
- Влияние пробиотических препаратов на продуктивность цыплят-бройлеров