Особенности функционирования физико-химической системы регуляции перекисного окисления липидов в биологических объектах разной степени сложности в норме и при действии повреждающих факторов

Шишкина, Людмила Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Особенности функционирования физико-химической системы регуляции перекисного окисления липидов в биологических объектах разной степени сложности в норме и при действии повреждающих факторов
ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Автореферат диссертации по теме "Особенности функционирования физико-химической системы регуляции перекисного окисления липидов в биологических объектах разной степени сложности в норме и при действии повреждающих факторов"

На правах рукописи

Шишкина Людмила Николаевна Особенности функционирования физико-химической

системы регуляции перекисного окисления липидов в биологических объектах разной степени сложности в норме и при действии повреждающих факторов

03.00.02 - биофизика

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук

Москва -

2003

Работа выполнена в Институте биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор

Бурлакова Елена Борисовна

Официальные оппоненты:

доктор химических наук Сапежинский Игорь Иванович

доктор биологических наук, Коломийцева Искра Константиновна

профессор

доктор химических наук Ревина Александра Анатольевна

Ведущая организация Биологический факультет

Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Защита состоится « 10 » июня 2003 года в 11 часов на заседании Диссертационного Совета Д 002.039.01 при Институте биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН по адресу: 119991, Москва, ул. Косыгина, 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института химической физики им. H.H. Семенова РАН

Автореферат разослан « » 2003 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат химических наук М.А. Смотряева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. В начале 70-х годов началось активное изучение регуляторной роли липидов мембран в норме и при развитии многих патологий. Фосфолипиды (ФЛ), одни из основных структурных элементов мембранной системы клетки, выполняют не только структурные и барьерные функции, но и участвуют в проведении биопотенциала, регуляции иммунологических реакций и других важнейших метаболических процессов (Farias et al., 1975; Крепе, 1981; Бурлакова и др., 1982; Степанов, Краснопольский, 1991; Болдырев, 1992; Алесенко, 1995; Климов, Никульчева, 1995; Ткачук, 1998; Мартынова, 1998). Неудивительно, что рядом авторов мембрана, наряду с ДНК, начала рассматриваться как одна из мишеней действия облучения на клетку (Alper, 1971, 1974; Singh, 1974). Изменения состава ФЛ, их упорядоченности и упаковки в бислое играют существенную роль в процессах адаптации клеток к окружающим условиям (Крепе, 1981; Балли и др., 1989, Антонов и др., 1992). Процесс перекисного окисления липидов (ПОЛ) протекает во всех типах мембран высших эукариот и участвует в регуляции клеточного метаболизма как в норме, так и при развитии патологических процессов. Стационарность ПОЛ в норме обеспечивается физико-химической системой регуляции окислительных реакций в липидах мембран, параметрами которой являются антиокислительная активность (АОА) и состав липидов, способность их к окислению, структурные переходы в компонентах мембран (Аристархова и др., 1976; Burlakova et al., 1979,1991). Было показано также, что эта система играет существенную роль в процессе опухолевого роста, нейродегенеративных, кардиоваскулярных и других патологиях (Пальмина, 1985; Осипов и др., 1990; Burlakova et al., 1991, Markesbeiy, 1997).

К началу наших исследований практически отсутствовали данные о кинетических свойствах липидов в реакциях автоокисления, единичные работы были посвящены изучению процессов ПОЛ в клетках прокариот и грибов (Богословская и др., 1987 Феофилова и др., 1987), не была ясна роль перечисленных выше параметров физико-химической системы регуляции и взаимосвязь между ними в биологических объектах разной степени сложности в норме, не изучен вклад параметров этой системы в обеспечение устойчивости биологических объектов к действию повреждающих и экологически неблагоприятных факторов, практически отсутствовали сведения о состоянии процессов ПОЛ в тканях мышевидных грызунов, обитающих в разных радиоэкологических условиях (техногенное радиоактивное загрязнение, повышенный естественный радиационный фон). Актуальность и важность исследований в этом направлении обусловлены поиском подходов к систематическому анализу механизма регуляции процессов ПОЛ в разных биологических объектах, необходимостью детального изучения биофизических механизмов взаимодействия клеток со средой, исследования взаимосвязей в тканях и баланса функций в организме для оценки биологических последствий воздействия повреждающих факторов в малых дозах и при низких интенсивностях, выработки страте ических

средств при действии ионизирующего излучения с низкой мощностью дозы и потребностей биотехнологии.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы явилось изучение особенностей функционирования физико-химической системы регуляции процессов ПОЛ в норме и при действии повреждающих факторов в биологических объектах разной степени сложности: клетки микроорганизмов (прокариоты, дрожжи, мицелий базидиомицетов), ткани лабораторных грызунов и животных из природных популяций.

В соответствии с этим задачами работы являлись:

• разработать модель и изучить кинетические характеристики липидов, выделенных из разных биологических объектов, обусловливающих их участие в реакциях низкотемпературного автоокисления;

• исследовать взаимосвязь между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках грамотрицательных бактерий, дрожжей и мицелия ксилотрофных базидиомицетов разных таксономических групп и выявить их роль в процессах взаимодействия клеток микроорганизмов со средой культивирования;

• исследовать вклад параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в обеспечение природной радиорезистентности животных разных видов и линий в широком диапазоне доз облучения и их роль в репарации мембран после действия ионизирующего излучения в минимально летальных дозах;

• изучить чувствительность и способность к нормализации параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях животных, различающихся обеспеченностью антиоксидантами (АО), в отдаленные сроки после воздействия ионизирующего излучения в широком диапазоне доз и интенсивности, а также после воздействия химических токсикантов;

• провести сравнительное исследование взаимосвязей между параметрами системы антиоксидантной (АО) защиты, относящимися к разным субклеточным компартментам, изучить взаимосвязи между обобщенными показателями состава ФЛ в клетках и тканях выше перечисленных биологических объектов в норме и после действия повреждающих и экологически неблагоприятных факторов.

• сопоставить функционирование физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях лабораторных грызунов и животных, обитающих в природной среде.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Способность липидов из клеток микроорганизмов и тканей животных участвовать в реакциях низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи обусловлена кинетическими характеристиками липидов: АОА липидов; степень торможения окисления (СТО) липидами метилолеата; количество пероксидов в липидах; антипероксидная активность (АПА), т.е. способность разлагать пероксиды на молекулярные продукты без образования свободных радикалов.

2. Наличие физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках грамотрицательных бактерий, дрожжей разных таксономических групп и штаммов и мицелия дереворазрушающих грибов разных таксономических групп; влияние процессов ПОЛ на регуляцию метаболизма клеток микроорганизмов в норме и при повреждающих воздействиях, а также в процессах «общения» клеток со средой культивирования.

3. Существование взаимосвязи между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях в биологических системах разной степени сложности.

4. Вклад параметра физико-химической системы регуляции ПОЛ, являющегося ведущим в обеспечении функционирования сложной биологической системы в норме и при действии повреждающих факторов, обусловлен обеспеченностью липидов АО, степенью их ненасыщенности и интенсивностью процессов ПОЛ в системе.

5. Однотипность кинетических свойств липидов и взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции в органах лабораторных грызунов и животных из природных популяций. Определяющая роль мембран как координатора регуляции ПОЛ при воздействии слабых повреждающих и экологически неблагоприятных факторов на лабораторных животных и на животных, обитающих в природной среде.

Научная новизна: Впервые показано, что участие липидов в реакциях низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи обусловлено кинетическими характеристиками липидов (АОА и АПА, СТО метилолеата, количеством пероксидов в липидах) и зависит от интенсивности процесса окисления.

Экспериментально установлено наличие физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов: грамотрицательные бактерии, дрожжи разных родов и рас, мицелий ксилотрофных базидиомицетов. Обнаружена обратная корреляционная зависимость между величинами ЛДю и соотношениями сумм более легкоокисляемых и более трудноокисляемым фракций фосфолипидов при облучении разных штаммов грамотрицательных бактерий.

ненасыщенности. В печени животных, липиды которой обладают преимущественно высокой АОА и характеризуются наиболее низкой интенсивностью ПОЛ среди исследованных биологических объектов, ведущим звеном системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим функционирование в норме и при действии неблагоприятных экологических факторов, является АОА липидов.

Впервые показана ¡n vivo нелинейность изменения параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях животных как при радиационных воздействиях в малых дозах в зависимости от дозы облучения и ее мощности, так и при наличии химических токсикантов в низких дозах в питьевой воде животных в зависимости от их суммарной концентрации. Установлена высокая чувствительность параметров системы регуляции ПОЛ к действию низкоинтенсивного облучения и химических токсикантов в малых дозах. Это свидетельствует об определяющей роли мембран как координатора регуляции окислительных реакций при воздействии слабых повреждающих факторов.

Впервые установлены скоординированные изменения параметров системы АО защиты, относящихся к разным субклеточным компартментам, в клетках микроорганизмов и тканях животных, обнаружена взаимосвязанность АОА липидов с биофизическими характеристиками, отражающими структурное и физиологическое состояние органов, показано наличие корреляционных взаимосвязей между обобщенными показателями состава ФЛ, отражающими окисляемость липидов и структурное состояние мембранной системы клетки или тканей, масштаб и направленность которых обусловлены кинетическими свойствами липидов и обеспеченности их АО. Совокупность экспериментальных данных и анализ литературы позволили сформулировать положение о функционировании процессов ПОЛ мембранной системы клетки и органа как единого целого и сделать вывод как об общности механизма регуляции клеточного метаболизма окислительными реакциями в липидах независимо от сложности биологического объекта, так и о существовании физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях. Предложена схема взаимосвязей между параметрами этой системы.

Показана важная роль АО статуса в определении устойчивости как к действию повреждающих факторов, так и в формировании биологических последствий низкоинтенсивного облучения в малой дозе. Высокая чувствительность показателей липидного обмена эритроцитов крови к слабым воздействиям позволяет прогнозировать возможность их использования для оценки биологических последствий воздействия неблагоприятных экологических факторов физической и химической природы (низкоинтенсивное облучение в малой дозе, наличие химических токсикантов в питьевой воде в низких концентрациях).

Установлена общность функционирования физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях лабораторных животных и животных, обитающих в

природной среде.

Совокупность проведенных исследований позволяет сформулировать создание нового научного направления "физико-химическая экология" (оценка биологических последствий воздействия неблагоприятных экологических факторов на биоту по состоянию системы регуляции ПОЛ тест-объектов).

Научно-практическая значимость. Данная работа является фундаментальным научным исследованием, в котором экспериментально доказано существование физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях в биологических объектах разной степени сложности и выявлены особенности взаимосвязей между параметрами данной системы в зависимости от обеспеченности липидов АО и интенсивности процессов ПОЛ в системе. Проведенное комплексное исследование состояния параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов, тканях лабораторных грызунов и животных природных популяций позволило оценить вклад параметров этой системы в обеспечение ее функционирования в зависимости от кинетических свойств липидов, обеспеченности их АО и интенсивности процесса окисления.

Проведенное исследование состояния физико-химической системы регуляции ПОЛ в биологических объектах разной степени сложности вносит существенный вклад в физико-химическую биологию, углубляя понимание биофизических механизмов функционирования биообъектов в норме и при воздействии повреждающих и экологически неблагоприятных факторов в зависимости от тяжести поражения и природы воздействия.

Экспериментально доказанная нелинейность изменения параметров системы регуляции ПОЛ при воздействии неблагоприятных экологических факторов химической и радиационной природы, существенное изменение характера распределения диких мышевидных грызунов по величинам АОА липидов их печени и мозга в зависимости от радиорезистентности вида, степени радиоактивной загрязненности участка отлова и времени действия радиационного фактора позволяют прогнозировать возможность ревизии таких понятий в нормировании, как "предельно допустимая концентрация" и оценка риска от экологических загрязнений.

Экспериментально показанная взаимосвязь между АО свойствами и составом липидов в клетках микроорганизмов и среде культивирования позволила объяснить появление эффекта неспецифической токсигенизации липидсодержащих сред при росте на них условно-патогенной микрофлоры и обнаружить стимулирующее действие АО в определенных концентрациях на процессы клеточной пролиферации дрожжей рода Candida (Авторское свидетельство № 1306111 от 22 декабря 1986 г.). Установление взаимосвязей между интенсивностью

ПОЛ и биодеградацией древесины представляет интерес в связи с поиском экологически чистых и менее энергоемких способов разложения компонентов древесины.

Диссертационная работа выполнена в Институте биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН в соответствии с планами научно-исследовательских работ Института, в рамках Союзно-республиканской программы неотложных мер по ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС, грантов РФФИ № 94-04-12494а и № 96-04-48728 и МНТЦ № 547-98. Методы анализа параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ внедрены в практику плановых научно-исследовательских радиоэкологических работ Института биологии Коми НЦ УрО РАН.

Вклад автора. Личный вклад диссертанта состоял в выборе направления исследований, определении задач и выборе методов их решения, проведении экспериментов, обобщении и трактовке полученного экспериментального материала, формулировании положений и выводов работы. В работах, выполненных в соавторстве, соискатель либо участвовал на всех этапах исследования от постановки задач и эксперимента до обсуждения и оформления результатов, либо являлся научным руководителем 6 диссертационных работ, представленных или подготавливаемых к защите.

Апробация диссертации и публикации.

Основные результаты исследований по теме диссертации представлены в 74 печатных работах.

Материалы диссертации докладывались и обсуждались на различных Международных, Всесоюзных, Всероссийских симпозиумах, конференциях, съездах: IV Международном Биофизическом конгрессе (Москва, 1972 г.), IX Ежегодном собрании Европейского общества радиобиологов (Италия, Рим, 1972 г.), Всесоюзном совещании «Радиочувствительность нормальной и опухолевой ткани» (Алма-Ата, 1974 г.), Ш Международном симпозиуме «Первичные и начальные механизмы лучевого поражения» (Ереван, 1975 г.), Всесоюзных симпозиумах по биохимии липи-дов (Ленинград, 1975, 1978 гг., Киев, 1983 г., Санкт-Петербург, 1994 г.), «Роль ли-пидов мембран в лучевом поражении» (Москва, 1975 г.), «Влияние радиации на регуляторные процессы в клетке» (Пущино, 1976 г.), «Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии» (Москва, 1976 г.), Всесоюзных конференциях «Радиочувствительность и лучевая терапия опухолей» (Ленинград, 1976 г.), «Радиоэкология животных» (Москва, 1977 г.), «Теоретические основы противолучевой защиты и принципы изыскания новых радиопротекторов» (Свердловск, 1980 г.), II Радиобиологической конференции социалистических стран (НРБ, Варна, 1978 г.), Международной конференции «Ренгенова диагностика нуклеарна медицина» (НРБ, Пловдив, 1980 г.), IV и V Всесоюзных биохимических съездах (Ленинград, 1979 г., Киев, 1986 г.), Всесоюзном симпозиуме «Магнитный резонанс в биологии и медицине» (Москва, 1981 г.), I Всесоюзном биофизическом съезде (Москва, 1982 г.),

Всесоюзных и Международных конференциях «Биоантиоксидант» (Москва, 1983, 1986,1992, 1998, 2002 гг.), Ш Всесоюзном симпозиуме с Международным участием «Структура и функции лизосом» (Тбилиси, 1986 г), II Всесоюзном координационном совещании «Эколого-генетические последствия воздействия на окружающую среду» (Сыктывкар, 1989 г.), I - IV Съездах по радиационным исследованиям (Москва, 1989 г., Киев, 1993 г., Москва, 1997, 2001 гг.), Всесоюзных совещаниях и Международных конференциях по ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС (Чернобыль, 1988 г., Зеленый мыс, 1990, 1994, 1996 гг., Киев, 1991 г., Брянск, 1991 г., Минск, 1991,1995 гг.), I Всесоюзном симпозиуме «Молекулярно-клеточные механизмы хронического (внешнего и внутреннего) действия ионизирующих излучений на биологические системы» (Пущино, 1990 г.), Второй Международной конференции «Radiobiological consequences of nuclear accident» (Москва, 1994), Международных конференциях «Магнитный резонанс в химии и биологии» (Звенигород, 1996 г., Суздаль, 1998 г.), Всероссийской конференции «Действие ионизирующей радиации на иммунную и кроветворную системы» (Москва, 1995г.), Международном симпозиуме «Механизмы действия сверхмалых доз» (Москва, 1995 г.), Международных научно-технических семинарах «Проблемы питьевого водоснабжения и пути их решения (Швеция, Стокгольм, 1996 г.), «Проблемы водоподготовки и водоотвода» (Франция, Париж, 1997 г.), Всероссийской конференции с международным участием «Проблемы противолучевой защиты» (Москва, 1998 г.), X Международной конференции по химии органических и элементоорганических перок-сидов (Москва, 1998 г.), Международном экологическом конгрессе «Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности» (Санкт-Петербург, 2000 г.), Международном симпозиуме «Химическая безопасность на пороге XXI века» (Санкт-Петербург, 2000 г.), Международных конференциях « Проблемы радиационной генетики на рубеже веков» (Москва, 2000 г.), «Биохимическая физика на рубеже столетий» (Москва, 2000 г.), «Биологические эффекты малых доз ионизирующей радиации и радиоактивное загрязнение среды» (Сыктывкар, 2001 г.), XI Международном симпозиуме по биоиндикаторам (Сыктывкар, 2001 г.), XI и XII Симпозиумах «Современная химическая физика» (Туапсе, 2000, 2001 г.), Международном симпозиуме «Radioprotectors for Human Health» (Япония, Киото, 2001 г.), Первом симпозиуме «Биологически активные добавки и продукты для оздоровления людей в условиях мегаполиса» (Москва, 2001 г.), Первом съезде микологов России (Москва, 2002 г.).

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 404 стр., включая 139 рис., 35 таблиц и список литературы. Диссертация состоит из введения, описания объектов, материалов и методов исследования (глава «Материалы и методы»), 4-х глав, заключения, выводов и библиографического указателя (708 источников, из них 272 опубликованы в зарубежных изданиях).

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Объекты, материалы и методы исследования

Основным предметом исследования являлись липиды, выделенные из следующих биологических объектов:

1. олиготрофные и евтрофные бактерии Renobacter vacuolatum, Flectobacillus major WKM-859, Pseudomonas fluorescens, Methylobacterium organophilum 220, Ar-cocella aquatica 502, Deinococcus radiodurans 1422; клетки бактерий были предоставлены для исследований сотрудниками ИНМИ РАН (зав. лаб. д.б.н., проф. Д.И. Никитин);

2. среды после роста условно-патогенных штаммов бактерий Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Citrobacter freundii 1922; культивирование бактерий проводилось аспиранткой МГУПП Лысюк О.Г. и инженером Идрисовой Е.В. в Институте эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи (зав. лаб. к.м.н. И.И. Самойленко);

3. штаммы дрожжевых клеток Saccharomyces cerevisiae (дикий тип, гаплоидные и диплоидные), Pichia guillermondii (гаплоидные и диплоидные), Pichia pinus (гаплоидные и диплоидные), (предоставлены для исследований сотрудниками лаборатории радиационной биофизики Биологического факультета МГУ им. Ломоносова; зав. лаб. д.б.н., проф. Ю.Б. Кудряшов); «Виерул» (Shizosaccharomyces pombe), КП-1 (Sizosaccharomyces acidodevoratus), Шампанская-21 и сухие шампанские дрожжи СШД (обе расы Saccharomyces oviformis), пленочные дрожжи Х-96К и X-41В (Saccharomyces oviform. cheres), дрожжи Т-198, Т-197, 32, Т-8 (Saccharomyces vini) (коллекция кафедры «Технология продуктов переработки винограда МГУПП); Candida maltosa (культивирование клеток проводили аспиранты КХТИ им. С.М. Кирова З.Ш. Мингалеева и С.Е. Сметанина во ВНИИсинтезбелок);

4. мицелий ксилотрофных базидиомицетов: Panus tigrinus ИБК-13, Gloeophyl-lum sepiarium BMK F 708, Fomes fomentarius M71, Ganoderma lucidium M148, Laeti-porus sulphureus M131, Piptoporus betulinus M60, Shizophyllum commune M14, Ser-pula sclerotiorum Ml 8 (выращивание мицелия проведено г.н.с., д.б.н. А.Н. Капичем, Институт микробиологии АН Беларуси);

5. клеточные органеллы (ядра и митохондрии) печени и селезенки мышей SHK и линии Balb/c; органы и кровь лабораторных животных разных видов и линий: мыши SHK и линий CBA/J, Balb/c; крысы беспородные, Сибсы и линий Wistar и Август; золотистые хомяки и морские свинки;

6. печень катрана (предоставлена для исследований сотрудниками Объединения «Грузбиохимфармпрепараты» Минмедбиопрома СССР, зав. лаб. к.б.н. A.B. Клочко); ткани и кровь мышевидных грызунов, обитающих в природных условиях (совместные исследования в рамках договора о научно-техническом содружестве с Институтом биологии Коми НЦ УрО РАН).

Биофизические и биохимические методы. Липиды из исследуемых объектов выделяли по методу Блая и Дайера в модификации Кейтса (Кейтс, 1975). В некоторых экспериментах экстракцию липидов осуществляли смесью хлоро-форм:эфир (1:1, по объему). Качественный и количественный состав фосфолипидов (ФЛ) определяли методом ТСХ на силикагеле типа G или Н (фирма Sigma), используя системы растворителей хлороформ/метанол/ледяная уксусная кислота/вода

в соотношениях 50:30:8:4 или 60:50:1:4 (Биологические мембраны, 1990). Проявление хроматограмм проводили в парах йода. О количестве неорганического фосфата судили по интенсивности образования фосфорномолибденового комплекса в присутствии аскорбиновой кислоты спектрофотометрически при 810 нм на спектрофотометре DU-50 (фирма «Beckman», США). Для построения калибровочных прямых использовали калий фосфорнокислый однозамещенный марки ос.ч. Оценивали также обобщенные показатели состава липидов: содержание ФЛ в составе общих липидов (% ФЛ); отношение фосфатидилхолин/фосфатидилэтаноламин (ФХ/ФЭ) и соотношение сумм более легко (ЛО)- к более трудноокисляемым (ТО) фракциям ФЛ (1ЛОФЛ/1ТОФЛ). Последнее вычисляли по формуле: ХЛОФЛ/1ТОФЛ = (ФИ + ФС + ФЭ + КЛ + ФК)/(ЛФХ +СМ + ФХ), где ФИ - фосфатидилинозит, ФС - фос-фатидилсерин, КЛ - кардиолипин, ФК - фосфатидная кислота, ЛФХ - лизоформы ФЛ, СМ - сфингомиелин.

Содержание стеринов (ХС) определяли спектрофотометрически при 625 нм по методу (Sperry, Webb, 1950). Содержание а-токоферола (ТФ) в липидах определяли спектрофлуориметрически по методу (Duggan, 1959) на спектрофлуоримет-ре SP-850 фирмы Hitachi (Япония) при X возбуждения 323 нм и X испускания 295 нм. Для построения соответствующих калибровочных прямых использовали холестерин и ТФ фирмы «Serva» (ФРГ). Суммарную ненасыщенность липидов тканей определяли методом озонирования (Разумовский, Заиков, 1975) с помощью анализатора двойных связей DBA (фирма «АММО», ИХФ РАН) при длине волны 254 нм в инертных по отношению к озону растворителях (CCI4, CHCI3). В качестве стандарта использовали сцинтилляционный стильбен. Количество белка в плазме крови и гомогенатах тканей определяли с помощью модифицированного биуретового метода (Itzaki, Gill, 1964). Содержание продуктов, взаимодействующих с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активные продукты, ТБК-АП), анализировали по методу (Стальная, Гаришвили, 1977) с добавлением в среду инкубации 10 мкл 0,01%-ного спиртового раствора ионола (Asakawa, Mitsushita, 1980). Уровень сульфгидрильных групп в тканях определяли по методу (Sedlak, Lindsay, 1968). Гидролазную активность Mg2+ -зависимой АТФазы определяли рН-метрическим методом (Skou, 1973).

Величину АОА липидов определяли на метилолеатной окислительной модели (Бурлакова и др., 1975) по способности липидов тормозить термическое автоокисление метилолеата при 37,0° ± 0,1° С. Количество пероксидов определяли йодомет-рически (Березин, 1953; ГОСТ 26593). Модельный субстрат окисления - метилолеат - предварительно очищали перегонкой в вакууме. Все полученные результаты приведены к стандартным значениям. В качестве стандарта выбран метилолеат, скорость зарождения которого равна 2,91хЮ'10 М.с"1, а период индукции окисления 20 час. Для определения скорости зарождения цепей в разных партиях метилолеата использовали метод ингибиторов. Величину АОА вычисляли по формуле:

АОА = [(т0ПЫТ - т0)/С] х Wo/Wo стаШ1, гДе хопыт - период индукции окисления растворов липидов в метилолеате, т„ - период индукции окисления чистого метилолеата, Wo станд. - скорость зарождения цепей стандартного метилолеата, a Wo - скорость зарождения цепей в опытной партии

субстрата.

Разделение тканей на органеллы осуществляли методом дифференциального центрифугирования. Выделение ядер проводили по методу (Chauveau et al., 1956). Чистоту ядерной фракции контролировали микроскопически, окрашивая мазки метиловым зеленым пиронином. Количество клеток печени, синтезирующих ДНК, определяли методом радиоавтографии (Епифанова, Терских, 1969). Кровь отбирали в пробирки, обработанные 5%-ным раствором цитрата натрия, и разделяли на компоненты центрифугированием (Boyum, 1968).

Структурное состояние разных областей мембран оценивали методом слабосвязанного парамагнитного зонда (Кузнецов, 1976), используя стабильные нитро-ксильные радикалы, локализующиеся в различных областях мембран: 2,2,6,6-тетраметил-4-каприлоилоксипиперидин-1-оксил (зонд 1); 5,6-бензо-2,2,6,6-тетраметил-1,2,3,4-тетрагидро-у-карболин-3-оксил (зонд 2); 2,2,4,5,5-пентаметил-1-гидрокси-З-имидазолин-З-оксид (зонд 3). Работа с зондами осуществлялась в соответствии с разработанным для клеточных органелл методом (Голощапов, Бурлако-ва, 1975). Зонды для исследования были предоставлены с.н.с. ИБХФ РАН, к.б.н. А.Н. Голощаповым. Регистрацию спектров ЭПР проводили на радиоспектрометрах ЭПР Е4 (Varían), (фирма Brucker, ФРГ) и Radiopan Sex-2544 (Польша). Времена вращательной корреляции зондов рассчитывали по общепринятой для быстро вращающихся зондов формуле (Кузнецов, 1976).

Состояние тканей мышей оценивали с помощью метода ПМР (Мурза и др., 1980) на импульсном ЯМР-релаксомеггре «Minispec рс-120» (фирма «Brucker», ФРГ) при частоте 20 мгц и температуре 30° С. Измерения проведены сотрудниками группы с.н.с. ИХФ РАН, к.физ.-мат.н. Л.И. Мурзы. Электронные спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре «Specord UV-VIS» (фирма «Karl Zeiss», ГДР).

Работа с животными. Острое рентгеновское облучение мышей проводили на установке РУТ-200-20-3. Режим работы: 210 кв, 15 мА. фильтр Си-0.5 мм, мощность дозы 44 - 47 Р/мин. Острое рентгеновское облучение крыс, золотистых хомяков и морских свинок проводили на установке РУП-1 в ИЭМЭЖ им. А.Н. Северцо-ва РАН. Режим работы: 190 кВ, 15 мА, фильтр Си 0,5 мм + Al 0,75 мм, мощность дозы 52,5 Р/мин. Крыс в дозе 500 Гр подвергали воздействию электронов высоких энергий на линейном ускорителе ЛУЭ-8 при мощности дозы 50 Гр/с в ГНЦ Институт биофизики МЗ РФ. Мышей в дозе 15 сГр с разной мощностью у-излучения облучали на установке ГУТ-Со-60. Мощность дозы 0,01 сГр/мин (продолжительность облучения 25 час), 0,25 сГр/мин (продолжительность облучения 1 час) и 9 сГр/мин (продолжительность облучения 1 мин 40 сек). Мышей опытных и контрольных групп при забое либо разбивали на подгруппы, либо анализировали показатели у индивидуальных животных.

Беспородным крысам экспериментальный термический ожог III - IV степени наносили кипятком (площадь ожога 8 - 12 % поверхности тела) или пламенем спиртовой горелки (площадь ожога 10-20 % поверхности тела).

Добавление черного щелока (отходы целлюлозного производства) в питьевую воду мышам SHK (самки) проводили ежедневно в концентрациях 0,005 %; 0,015 %

и 0,05 %.

Общее количество животных в экспериментах 10 000 шт.

Статистическая обработка результатов. Статистическую обработку результатов проводили общепринятыми методами вариационной статистики (Бейли, 1964; Лакин, 1990) и с помощью пакета компьютерных программ KINS (Брин, Травин, 1991). Данные представлены в виде средних арифметических с указанием средних квадратичных ошибок среднего арифметического. Вариабельность показателя оценивали как отношение средней квадратичной ошибки среднего арифметического к величине среднеарифметического значения показателя для анализируемой группы и выражали в процентах (Лакин, 1990). Оценка степени воздействия хронического низкоинтенсивного излучения на природные популяции мышевидных грызунов проведена с помощью биометрических методов анализа.

2. Кинетические характеристики липидов в реакциях автоокисления

Для оценки АО свойств сложных многокомпонентных систем часто используют различные варианты хемилюминесцентных и фотохемилюминесцентных методов и модельные системы с использованием инициаторов (Шляпинтох и др., 1966; Эмануэль, Гал, 1984; Сапежинский, 1988; Храпова, 1988; Цепалов, 1992; Popov et al, 1994 и др.). Однако суммарная антирадикальная активность изучаемых систем не всегда пропорциональна величине их АОА (Бурлакова и др., 1975). Поэтому использование модельных реакций автоокисления жирных кислот и их эфи-ров, позволяющих определять истинные значения АОА, не утратили своей актуальности.

Детальный анализ кинетики низкотемпературного термического автоокисления метилолеата и его растворов с липидами с помощью пакета программ KINS показал, что во всех случаях (общее количество проанализированных кинетических кривых более 1300) накопление пероксидов подчиняется экспоненциальному закону [ROOH], = а.ехр (kt) с коэффициентами корреляции 0,95 - 1,0. Это свидетельствует о бимолекулярном характере реакции вырожденного разветвления при окислении как самого метилолеата, так и его растворов с липидами.

Различия в скорости зарождения радикалов в модельной системе оказывают влияние на величины параметров а и к экспоненциальной кривой. При этом для конкретной партии метилолеата найдены прямые корреляционные зависимости между величиной предъэкспоненциального множителя а и скоростью зарождения Wo с коэффициентами корреляции 0,95 - 0,99, что соответствует данным об определяющей роли скорости образования свободных радикалов в кинетике автоокисления углеводородов (Гагарина и др., 1983). На начальных стадиях процесса окисления, когда расходом субстрата окисления можно пренебречь, величина показателя экспоненты к пропорциональна общей скорости процесса окисления (к2Л/кб)хрШ] и обусловлена окисляемостью субстрата (Рубайло, Маслов, 1989). Энергия активации, вычисленная на основании значений к при окислении метило-

леата при 37°, 60° и 80° С, оказалась равной 29,3 ± 1,2 ккал/моль, что согласуется с величинами энергии активации распада органических гидропероксидов в белом медицинском масле (Emanuel et al., 1984).

При изучении АОА липидов, выделенных из биологических объектов разной степени сложности (грамотрицательные бактерии, дрожжи, мицелий дереворазру-шающих грибов, органы и эритроциты крови животных), на метилолеатной окислительной модели было обнаружено, что в зависимости от источника выделения липиды могут как ингибировать (АО эффект), так и ускорять окисление модельного субстрата (прооксидантный эффект). При этом последний наблюдался при наличии в липидах ТФ, что было подтверждено экспериментально. Существенное влияние окисляемости субстрата на величину периода индукции автоокисления углеводородов и эффективность ингибиторов (Некипелова, Гагарина, 1982; Гагарина и др., 1983) позволяют предположить, что прооксидантная активность липидов обусловлена как обеднением АО, так и высокой степенью их ненасыщенности.

Анализ экспериментальных данных показал, что липиды грамотрицательных бактерий, мицелия дереворазрушающих грибов белой гнили, эритроцитов крови и головного мозга животных проявляют только прооксидантные свойства на метилолеатной окислительной модели независимо от вида и скорости зарождения радикалов в модельной системе; липиды дрожжевых клеток, мицелия дереворазрушающих грибов бурой гнили и селезенки животных могут обладать как антиоксидант-ными, так и прооксидантными свойствами в зависимости от вида и условий эксперимента; липиды печени лабораторных животных обладают преимущественно АО свойствами и отличаются высокой вариабельностью величины АОА как у отдельных особей, так и между группами животных.

Поскольку липиды оказывают влияние не только на величину периода индукции окисления метилолеата, но и на общую скорость окисления, а также на начальную концентрацию пероксидов в системе, то для количественной оценки кинетических характеристик липидов, помимо АОА, нами предложены следующие параметры:

1. степень торможения окисления (СТО) - отношение периодов индукции окисления опытного образца и соответствующего метилолеата, отнесенное к концентрации липидов в метилолеате;

2. начальное количество пероксидов ([ROOH]o) в липидах, которое можно оценить по разности концентраций пероксидов в растворах липидов в метилолеате и самом метилолеате, отнесенной к количеству липидов и измеренной до начала окисления;

3. антипероксидная активность (АПА), т.е. способность липидов разлагать пероксиды на молекулярные продукты без образования свободных радикалов, которую можно оценить по разности концентраций пероксидов в метилолеате и в растворе липидов в метилолеате до начала окисления, отнесенной к 1 г липидов. Способность природных компонент клетки к прямому взаимодействию с перокси-

дами экспериментально подтверждена в реакции пероксида метилолеата с ТФ, 20-гидроксиэкдизоном, витамин-А-пальмитатом, холинхлоридом и ß-каротином.

Взаимосвязь между АОА липидов и СТО липидами метилолеата определяется соотношением:

АОА = СТО х (Wo/Wo станл) х т0- (Wo/Wo тт) х xj[LH] (1).

Прямая зависимость (коэффициенты корреляции R практически равны 1,0) между АОА липидов и СТО при постоянной концентрации липидов и равенстве скорости зарождения радикалов в модельной системе экспериментально подтверждена для липидов, выделенных из всех исследованных нами биологических объектов. В соответствии с уравнением (1) величина коэффициента линейной регрессии b данной зависимости должна уменьшаться с ростом скорости зарождения радикалов, что действительно найдено при анализе экспериментальных данных (рис. 1). Масштаб взаимосвязи между АОА липидов и СТО ими метилолеата (величина Ь) будет обусловлен только значением Wo лишь при условии, что сами липиды не являются субстратами окисления. Достоверные различия величин b в зависимости от источника выделения липидов (рис. 1) подтверждают, что они принимают участие в реакциях низкотемпературного автоокисления. Масштаб и направленность воздействия липидов на параметры а и к кинетических кривых накопления перок-сидов определяется интенсивностью процесса окисления и кинетическими характеристиками липидов: их обеспеченность АО, АПА липидов и степень их ненасыщенности. Показано, что величины параметра а уменьшаются с возрастанием АОА и АПА липидов и СТО ими метилолеата и увеличиваются с ростом количества пе-роксидов в липидах (рис. 2, 3). Величина показателя экспоненты уменьшается с ростом скорости зарождения радикалов в системе. Обнаруженные закономерности свидетельствуют об участии липидов в реакциях низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи вследствие их воздействия на общую скорость окисления и величину эффективной окисляемости в системе.

Высокая вариабельность величины АОА липидов, их участие в реакциях автоокисления и зависимость направленности эффекта от АОА и АПА липидов, степени их окисленности и скорости зарождения радикалов свидетельствуют о существовании особенностей в функционировании физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях в биологических объектах, различающихся интенсивностью окислительных процессов. Это позволяет прогнозировать влияние физико-химических свойств липидов на координацию взаимосвязей и баланс биохимических функций в биологических объектах разной степени сложности в норме и дает возможность предположить важную роль параметров АО статуса в формировании биологических последствий воздействия таких повреждающих факторов, как ионизирующая радиация, термический ожог и химические токсиканты, оказывающих сильное модифицирующее влияние на интенсивность окислительных процессов.

40-

XI 30-

10-

Рис. 1. Зависимость величины коэффициента линейной регрессии прямой корреляции между АОА липидов эритроцитов крови мышей ЭНК (1), селезенки крыс беспородных и №Ьшг (2) или клеток винных дрожжей и клеточных оболочек дрожжей (3) и степенью торможения липидами окисления метилолеата от скорости зарождения радикалов.

1.0

1,5 2.0 2.5 3,0

5.5

УУдХЮ .М.с1

4.0 3,5 3,0 2.5

Рис.2. Вчияние АОА липидов ([ЬН]= 20мг/мл)

печени беспородных крыс самцов (1) и самок 2.0

(2), мышей 5НК самцов (3) и самок (4) и ^

мышей СВА самок (5) на величину 1.5 предъэкспоненциального множителя кинетических кривых накопления пероксидов.

0.5

о.о

го

Я,=-0.915+/-0.095 Я=-0.96+/-0.03 В,=-0.91+/-0.095 Я4=-0.98+/-0.02

1000 госта зооо

—г-

4000

АОА, час.мл/г

20 40

[ЯООН]0

60 80 100 тМ/д Ш

Рис.3 Зависимость величины предъэкспоненциального множителя кинетических кривых накопления пероксидов при окислении растворов липидов селезенки в метилолеате от начального количества пероксидов влипидах селезенки беспородных крыс (1), мышей линии СВА (2), мышей 8НК > при \У =1,57x10 ">М.с' (3) и при Пг0=(1,18±0,015)хШ'°М.с' (4).

3. Роль АО статуса в формировании радиобиологических последствий облучения млекопитающих в зависимости от тяжести лучевого поражения

Уже в работах 50-х - 60-х годов (Тарусов, 1954; Эмануэль, 1963; Бурлакова и др., 1957, 1965; Bacq, Alexander, 1964) было найдено, что антирадикальные свойства биохимических компонент клетки могут играть важную роль в обеспечении природной и модифицированной радиорезистентности. Затем установили, что радиочувствительность клетки, ткани, организма необходимо рассматривать как сложное многофакторное явление (Кузин, 1980). Существование физико-химической системы регуляции клеточного метаболизма окислительными реакциями в липидах мембран (Аристрахова и др., 1976; Burlakova et al., 1979, 1991) делает необходимым при анализе последствий воздействия различных повреждающих агентов на сложные биологические объекты учитывать следующие факторы:

1. однотипность в изменении показателей состояния и функционировании мембран при различных воздействиях на организм;

2. невозможность, особенно в условиях in vivo, произвольно изменить любой из параметров системы, не затронув остальные (Бурлакова и др., 1982);

3. необходимость учета временных факторов при рассмотрении изменения параметров системы после повреждающего воздействия (Шишкина и др., 1974; Бурлакова и др., 1975; Kolomiytseva et al., 1999).

Поскольку при действии ионизирующих излучений наблюдаются повреждения как в отдельных компонентах мембраны, так и в структурной организации мембраны в целом, то, с нашей точки зрения, необходимо рассматривать и два различных уровня репарации мембран: репарацию отдельных молекул, входящих в состав мембран и измененных вследствие облучения, и репарацию мембраны как целостной структуры за счет обмена поврежденных компонентов мембран на вновь синтезированные. Поскольку мембрана представляет собой гетерогенную самообновляющуюся структуру, то скорость репарации по разным путям, очевидно, будет неодинаковой.

Совокупность полученных нами экспериментальных данных (стадийные изменения АОА липидов и микровязкости разных областей мембран как ядер печени мышей SHK, так и АОА липидов клеточных органелл печени и селезенки, дыхательного контроля, гидролазной активности Mg^-зависимой АТФазы и текучести липидного компонента мембран митохондрий печени мышей линии Balb/c в зависимости от времени после рентгеновского облучения животных в дозе 6,5 Гр; восстановление дыхательного контроля митохондрий, выделенных из печени облученных мышей линии Balb/c, добавлением коэнзима Q9) и анализ литературы позволили сформулировать положение о важной роли физико-химической системы регуляции ПОЛ в репарации мембран после радиационного воздействия.

В норме обнаружены стадийные изменения величина АОА липидов в зависимости от сезона и времени суток как на уровне органов (селезенка, печень), так и

клеточных органелл (ядра, митохондрии). Времена появления экстремумов в разных органеллах и в разных органах в зависимости от сезона исследования и времени суток не совпадают. Однако выбор дозы и времени введения радиозащитных препаратов необходимо делать на основании изменения АОА липидов органа, который является критическим при определенном повреждающем воздействии (Шишкина и др., 1974; Бурлакова и др., 1975). Это потребовало детального изучения вклада исходного АО статуса тканей животных в обеспечение их резистентности как при остром облучении в диапазонах доз, вызывающих костномозговую, кишечную или церебральную форму гибели, так и в формировании биологических последствий воздействия радиации в малых дозах.

3.1. Вклад антиоксидантов в обеспечение резистентности млекопитающих при остром лучевом поражении

Систематическое изучение влияния различных факторов, модифицирующих лучевое воздействие (время года, время суток, диета, различные виды и линии животных), на изменение уровня АОА липидов органов и радиочувствительность животных показало наличие положительной корреляции резистентности животных с величиной АОА липидов селезенки, которая является одним из критических органов при остром облучении животных в диапазоне доз 4 - 8 Гр, вызывающих преимущественно костномозговую форму их гибели: величины коэффициентов корреляции лежат в пределах от 0,75 до 0,96.

При рентгеновском облучении мышей SHK (самки) в дозе 20 Гр не найдено взаимосвязи между величинами АОА липидов селезенки, печени или головного мозга и средней продолжительностью жизни облученных животных. Это соответствует данным о поражении кишечника как главной мишени острого радиационного воздействия в диапазоне доз от 12 до 150 Гр (Раевский, 1956; Бак, Александер, 1963; Костеша, Даренская, 1990).

При облучении животных в сверхвысоких дозах с большой мощностью в ранние сроки после воздействия возникают различные неврологические расстройства (ЦНС-синдром) и выявляется период ранней преходящей недееспособности (РПН), проявления которого видоспецифичны (Casareft, Comar, 1973; Давыдов, Ушаков, 1991; Даренская и др., 1997). При изучении вклада состояния параметров системы регуляции ПОЛ в возникновение РПН у крыс линии Wistar и беспородных, облученных потоком быстрых электронов в дозе 500 Гр, найдена обратная корреляция между % крыс, у которых были отмечены проявления синдрома РПН через 10 мин после воздействия, и |АОА| липидов головного мозга и его отделов у контрольных крыс (рис. 4). Обнаружена лишь частичная корреляция между отношением [ХС]/[ФЛ], играющем существенную роль в модуляции синаптической передачи в ЦНС млекопитающих (Молочкина и др., 1992) и являющегося наиболее вариабельным среди обобщенных показателей состава липидов в головном мозге и его отделах (табл.), и разностью в уровнях АОА липидов мозга крыс, у которых отмечены

или отсутствовали признаки РПН. Это позволяет полагать, что при остром облучении беспородных крыс и крыс линии \Vistar в дозе, вызывающей церебральную форму их гибели, одним из наиболее существенных факторов, определяющих их радиорезистентность, является величина АОА липидов головного мозга - критического органа при остром облучении животных в сверхлетальных дозах.

Таблица. АОА и обобщенные показатели состава липидов головного мозга и его отделов в группах контрольных крыс.

Номер опы- АОА [ХС]/[ФЛ], ФХУФЭ 1ЛОФЛ/

та, липидов, м/м Ггофл

Линия крыс Час.мл/г

ГОМОГЕНАТ МОЗГА

№ 2, \Vistar - 805 ± 125 1,20 + 0,12 1,14 ±0,03 0,940 ±0,041

№ 4, беспо- -2420 + 5 0,34 1,09 ±0,02 0,844 ±0,027

родные

МОЗЖЕЧОК

№2*, \Vistar - 865 + 20 2,39 ±1,52 1,49 ±0,02 0,686 ±0,019

№4*, беспо- -2455 0,45 2,70 ±0,11 0,513 ±0,029

родные

КОРА

№ 2, \Vistar - 505 ± 50 0,84 ± 0,09 1,41 ±0,02 0,709 ± 0,020

№ 4, беспо- -2355 ±60 0,295 1,09± 0,035 0,879 ±0,031

родные

СТВОЛ

№ 2, \Vistar - 865 ± 95 1,57 ±0,46 1,36 ±0,03 0,968 ± 0,048

№ 4, беспо- -2085 0,62 1,37 ±0,04 0,676 ±0,023

родные

* % крыс, у которых отмечены признаки РПН, в опыте № 2 равен 17,6%, в опыте №4 - 31,3%.

Наличие положительной корреляции между величиной АОА липидов и радиорезистентностью животных позволяет предположить и возможность влияния исходного АО уровня липидов тканей на динамику и масштаб изменения различных показателей после воздействия. Показано, что динамика и масштаб изменения АОА липидов как в органах (селезенка, печень, головной мозг), так и клеточных органеллах (ядра, митохондрии) облученных животных зависят от качества излучения, дозы острого облучения и исследуемого вида. Найдены симбатные изменения отношения 1ЛОФЛ/1ТОФЛ в печени и в головном мозге мышей в ранние сроки после облучения животных в дозе 20 Гр, тогда как динамика изменения со-

держания ФЛ в составе общих липидов и отношения ФХ/ФЭ, отражающего структурное состояние мембранной системы органа, в исследованных тканях различна. Связь АОА липидов с содержанием воды и структурным состоянием тканей подтверждается и анализом величин спин-решеточной Tj и спин-спиновой релаксации Т2 протонов в печени и мозге мышей SHK (самки) в контрольных и опытных группах в ранние сроки после рентгеновского облучения животных в дозе 20 Гр.

Анализ параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в печени, селезенке и эритроцитах крови через 1 месяц после острого рентгеновского облучения в дозах 4,5 Гр (беспородные крысы-самцы и мыши линии СВА-самки) и 5 Гр (мыши SHK-самки) выявил взаимосвязь природной радиочувствительности животных к острому облучению и обеспеченности липидов тканей АО с масштабом изменения АОА и состава липидов в изученных тканях. Однако при сопоставлении % выживаемости животных в разных экспериментах с уровнем АОА липидов органов облученных мышей прямая корреляция (R = 0,99 ± 0,01) обнаружена только для печени мышей SHK.

Определенная нормализация состава липидов печени у выживших после острого облучения некоторых групп более резистентных мышей SHK и беспородных крыс наблюдается при достоверных различиях величин АОА липидов печени у возрастного контроля и облученных животных. У мышей линии СВА значительное снижение АОА липидов печени спустя месяц после воздействия сопровождалось увеличением соотношения [ХС]/[ФЛ] (R = - 0,87 ± 0,10), обогащением липидной компоненты ФЛ (R = - 0,74 + 0,18) и уменьшением отношения ФХ/ФЭ (R = - 0,80 ± 0,15). Только в липидах печени мышей этой линии после облучения отмечено достоверное увеличение относительного содержания лизоформ ФЛ.

При отсутствии достоверных различий в величинах АОА липидов селезенки у контрольных и облученных животных через месяц после острого облучения в сублетальной дозе выявлены значительная вариабельность относительного содержания отдельных фракций ФЛ и отсутствие единой ответной реакции на воздействие у исследованных видов животных. Наиболее же значительные изменения состава липидов обнаружены в эритроцитах крови облученных животных. При этом масштаб изменения содержания практически всех фракций в ФЛ эритроцитов крови облученных мышей SHK ниже, чем в группах беспородных крыс и мышей линии СВА, что, возможно, обусловлено достоверным ростом АОА липидов эритроцитов крови у выживших после облучения мышей SHK (Д АОА = 3950 ± 925 час.мл/г).

Таким образом, в отдаленные сроки после острого радиационного воздействия в сублетальных дозах выявлены неодинаковая чувствительность и возможность нормализации параметров системы регуляции ПОЛ в тканях мышей SHK и линии СВА и беспородных крыс в зависимости от их обеспеченности АО. Наиболее вариабельным показателем в печени, липиды которой характеризуются высоким АО статусом, является величина АОА. В селезенке, липиды которой обладают в большинстве случаев прооксидантной активностью, наиболее чувствительным параметром является способность липидов образовывать пероксиды, максимально выраженная у радиочувствительных мышей линии СВА, и состав липидов. В эрит-

роцитах крови, липиды которых обладают прооксидаитиой активностью, самые значительные изменения найдены в составе липидов.

Поскольку вклад поражения (восстановления) ДНК и мембраны в обеспечение природной радиорезистентности организма может быть различным, то был рассмотрен вопрос о роли АОА липидов и эндогенных тиолов, играющих важную роль в пострадиационной репарации разрывов ДНК и ингибировании окислительных процессов (Бурлакова, Эмануэль, 1960; Wills, Wilkinson, 1967; Chapman et al., 1975; Ho S., Ho Y., 1976; Меныцикова, Зенков, 1996), в определении резистентности животных к действию острого облучения в зависимости от тяжести лучевого поражения. Установлено, что в норме у индивидуальных животных разных видов (крысы Сибсы, золотистые хомяки, морские свинки) уровни эндогенных тиолов и величина АОА липидов органов являются независимыми параметрами и обеспечивают устойчивость организма к острому облучению по разным метаболическим путям. Корреляционный анализ между величинами ЛДц/зо, определенных из экспериментальных пробит-прямых для групп животных 11 видов и линий (мыши SHK и линий Balb/c, CBA/J; крысы линий Wistar, Август, Сибсы; золотистые хомяки, морские свинки) при остром рентгеновском облучении в диапазоне доз 2,5 - 8 Гр, и содержанием общих, небелковых SH-групп или уровнями АОА липидов селезенки и печени животных (определение всех параметров у контрольной группы животных проводили непосредственно перед облучением) позволил сделать ряд выводов. Во-первых, величина коэффициента корреляции зависит от природы параметра и тяжести лучевого поражения (уровня доз облучения). Во-вторых, величины коэффициентов корреляции, особенно при анализе взаимосвязи между АОА липидов и радиорезистентностью животных, существенно выше в селезенке, чем в печени.

Таким образом, обнаруженные высокие коэффициенты корреляции между уровнем АОА липидов, выделенных из целого органа, и устойчивостью животных к действию ионизирующей радиации, взаимосвязанность уровня АОА липидов с биофизическими характеристиками тканей, отражающими их структурное и физиологическое состояние, позволяют сделать заключение об АОА липидов критических органов как ведущем звене физико-химической системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим природную резистентность животных к действию острого облучения в диапазонах доз, вызывающих костномозговую, кишечную или церебральную форму гибели. При низких дозах острого облучения радиорезистентность животных коррелирует с высокой АОА липидов селезенки и, возможно, высоким уровнем небелковых SH-групп, а при минимально летальных дозах облучения - с высоким уровнем общих (белковых) тиолов в тканях.

3.2. Роль антиоксидантного статуса в формировании последствий биологического действия излучения в малых дозах

Поскольку при низких дозах облучения основной вклад в обеспечение радиорезистентности организма вносят показатели, отражающие состояние мембранных структур, то изучение роли процессов ПОЛ в формировании последствий воздействия

радиации в малых дозах или с низкой мощностью дозы нам представлялось обоснованным. Это соответствует и результатам экспериментов in vitro, в которых обнаружено увеличение интенсивности ПОЛ с уменьшением как мощности, так и самой дозы облучения (Бурлакова и др., 1961, 1975; Petkau, Chelack, 1976; Kale, Satisawad, 1991; Stark, 1991).

Динамику изменения AOA и состава липидов, количества ТБК-активных продуктов в тканях мышей SHK (самцы), содержания лейкоцитов в периферической крови исследовали в течение месяца после у-облучения мышей в дозе 15 сГр при мощностях дозы 0,01; 0,25 и 9 сГр/мин. Как и при остром облучении животных в сублетальных и летальных дозах, выявлены стадийные изменения АОА липидов печени, головного мозга и эритроцитов крови мышей в зависимости от времени после облучения, масштаб и динамика изменения которых существенно различаются в интервале исследованных мощностей доз. Динамика изменения АОА липидов селезенки после у-облучения в дозе 15 сГр практически не зависит от мощности дозы, а масштаб изменения существенно ниже, чем в печени и эритроцитах крови. Максимальный рост количества пероксидов в липидах селезенки облученных мышей SHK найден на 32-е сутки после воздействия. Количество пероксидов в липидах селезенки грызунов из зоны аварии на Чернобыльской АЭС также значительно превышало аналогичный показатель у грызунов, отловленных на территориях с нормальным радиационным фоном. Возрастание данного показателя в липидах эритроцитов крови относительно контрольных значений отмечено только при низкоинтенсивном у-облучении мышей SHK на 1-е и 32-е сут после воздействия. В липидах печени во всех контрольных и опытных группах выявлены либо незначительные количества пероксидов (на 1-2 порядка меньше, чем в липидах селезенки), либо они обладали АПА. Липиды головного мозга контрольных мышей во все сроки анализа обладали только АПА (0,74 ± 0,22 ммоль/г), которая обнаружена и у липидов головного мозга большинства опытных мышей.

Изучение динамики состава липидов тканей после облучения мышей в малой дозе позволило обнаружить различия в зависимости от вида ткани, мощности дозы и времени после воздействия (рис. 5, 6). Резкое снижение содержания общих липидов найдено в эритроцитах крови через 1 месяц после у-облучения мышей при мощности дозы 0,01 сГр/мин и в селезенке через 1 сут после воздействия при мощности 0,25 сГр/мин.

Масштаб и направленность изменения относительного содержания отдельных фракций ФЛ также обусловлены видом ткани и мощностью дозы. Так, в ФЛ селезенки на 7-е сут после воздействия найдено снижение доли ФХ в 1,2-1,3 раза при мощностях дозы 0,25 и 9 сГр/мин и увеличение относительного содержания ФЭ в 3,6-3,7 раза при всех исследованных мощностях доз относительно контрольных значений. В составе ФЛ головного мозга увеличение доли ФХ в 1,4 раза и снижение ФЭ на 20% при мощности дозы 9 сГр/мин обнаружено спустя сут после у-облучения в дозе 15 сГр. Наиболее существенные отличия в относительном содержании отдельных фракций ФЛ в печени опытных животных по сравнению с их долей в составе ФЛ печени соответствующих интактных мышей найдены преимущественно при облучении с мощностями доз 0,01 и 9, а в ФЛ эритроцитов крови - с мощностями доз 0,01 и 0,25 сГр/мин.

-2500

—I-

-1000

-500

.2000 -1500

АОА, час.мл/г

Рис. 4. Зависимость % крыс, впавших в коматозное состояние после облучения, от уровня АОА липидов головного мозга и его отделов в группе контрольных животных.

1.0-

? 0,8-

? о.в-

о 0,4-

с в 0,2-

гя 0,0-1

1,0-

г 0,8-

£ 0,6-

с; 0.4-1

в 0,2-1

г? 0,0 н

2,0-

9 1,6-

6 1.2-

с: 0,6-

0,4-

0,0-

!? 5-

X 4-

О 3-

п;

в 2-

гг 1 -

I 10.01 сГр/мин ■■10,25 сГр/мин У777Л 9 сГр/мин

ДжЛ

1-е

7-е Рис. 5.

32-е

1.5-

с; в з: 2

1,0-

0.5 -

0,0'

5>- 1.5

1.0

0.1

С 5.0

1.5-

о. 1.0-1 и

О 0.50.0

С1 2.0 -4>

? »4

I I 0,01 сГр/мин М 0.25 сГр/мин 9 сГр/мин

1-е

7-е

32-е

П1Й, (!■

I 1 0,01 сГр/мин ■Ш 0,25 сГр/мин 9 сГр/мин

1-е

7-е Рис. б.

32-е

Динамика изменения относительного содержания фосфопипидов в составе общих липидов и отношения [стерины]/[фосфолипиды] в печени (А), головном мозге (Б), эритроцитах крови (В) и селезенке (Г) мышей БНК (самцы), облученных в дозе 15 сГр, в зависимости от мощности дозы

На 4-х группах мышей SHK (самцы) показано, что неоднозначность направленности и масштаба изменения показателей в тканях в ответ на воздействие слабого радиационного фактора определяется как величинами параметров исходного АО статуса у интактных животных, так и их соотношениями в разных тканях. Наиболее значительные изменения состава ФЛ, величины АОА липидов и количества ТБК-активных продуктов спустя сутки после у-облучения в дозе 15 сГр с мощностью дозы 0,01 сГр/мин обнаружены в эритроцитах крови, имеющих самый низкий уровень АОА липидов у контрольных мышей. Изменение порядка расположения тканей по уровню АОА липидов и по масштабу его изменения после низкоинтенсивного у-облучения в малой дозе свидетельствуют о нарушении взаимосвязей и дисбалансе биохимических функций в организме. Это обусловливает гибель 30 ± 14,5 % мышей SHK (самцы), имеющих низкий АО статус тканей (п = 30 шт.), спустя месяц после воздействия при 100% выживаемости в контрольной группе (п = 30 шт.). Существенные различия АОА и состава липидов тканей мышей спустя месяц после воздействия подтверждают отсутствие нормализации параметров системы регуляции ПОЛ и сохранение нарушений в ее функционировании в отдаленные сроки после облучения. Если спустя месяц после острого облучения животных в сублетальных дозах изменения доли основных фракций ФЛ выявлены только в тканях с низким АО статусом, то при воздействии ионизирующей радиации в малых дозах изменения этих фракций обнаружены во всех исследованных тканях как лабораторных животных, так и мышевидных грызунов из зоны аварии на Чернобыльской АЭС.

Отсутствие единообразного ответа на воздействие, огромная чувствительность параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ к облучения в малой дозе, отсутствие монотонных их изменений в зависимости от мощности дозы как в лабораторных экспериментах, так и в тканях грызунов, отловленных в зоне аварии на Чернобыльской АЭС, свидетельствуют о нелинейности процессов ПОЛ и большей поражаемости мембран при низкоинтенсивном облучении in vivo, усилении роли процессов ПОЛ в формировании биологических последствий действия ионизирующих излучений в малых дозах и определяющей роли мембран как координатора клеточного метаболизма в области слабых воздействий.

4. Физико-химическая система регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов

Несмотря на то, что клеточные регуляторные механизмы у микроорганизмов играют существенно большую роль и проявляются отчетливее, чем у более сложных биологических организмов, именно на уровне микробных клеток процессы ПОЛ наименее изучены. Однако воздействие на микроорганизмы различных неблагоприятных факторов окружающей среды во многих случаях создает предпосылки для активации в них процессов ПОЛ (Богословская и др., 1987; Абдрашитова и др., 1988, 1990; Steels et al., 1994; Howlett, Avery, 1997). Это обусловливает необходимость изучения физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках разных

групп микроорганизмов и позволяет прогнозировать важность параметров этой системы как в изменении свойств среды культивирования, так и в обеспечении устойчивости микроорганизмов к действию повреждающих факторов.

4.1. Роль процессов ПОЛ в жизнедеятельности прокариот

Проведено сравнительное изучение АО свойств и состава липидов разных штаммов грамотрицательных бактерий в стационарной фазе роста в зависимости от сезона культивирования и отдаленных последствий у-облучения на состав липидов олиготрофных бактерий; изучены изменения АО свойств, состава и структурного состояния липидов на разных стадиях роста 3-х штаммов грамотрицательных бактерий, существенно различающихся по своей устойчивости к действию повреждающих факторов; исследована роль параметров системы регуляции ПОЛ при культивировании штаммов условно-патогенных бактерий на липидсодержащей среде в токсигенизации последней.

Величина прооксидантной активности липидов всех исследованных штаммов грамотрицательных бактерий зависит от вида и сезона культивирования (эксперименты проводились в весенний и летний период). По ее уменьшению исследованные штаммы олиготрофных бактерий располагаются в следующий ряд: R. vacuola-tum > М. organophilum > A. aquatica = F. major, который не совпадает ни с уменьшением степени ненасыщенности жирных кислот липидов (Rezanka et al., 1991), ни с устойчивостью данных штаммов к у-облучению (Никитин и др., 1993). Липиды D. radiodurans обладают чрезвычайно высокой АОА (> 24000 час.мл/г), что находится в соответствии с представлением об исключительно высокой резистентности данной бактерии к повреждающим воздействиям.

При анализе состава липидов обнаружена высокая доля более легкоокисляе-мых фракций в ФЛ большинства исследованных штаммов. Так, основным ФЛ штамма A. aquatica является ФИ, в ФЛ бактерий F. major доля ФС и ФЭ составляет около 45%, а в ФЛ P. fluorescens доминируют ФЭ, КЛ и ФК. Однако относительное содержание фракций ФЛ у штаммов R. vacuolatum и М. organophilum аналогично характерному для эукариот: основными фракциям в ФЛ этих штаммов являются ФХ и ФЭ.

Показана огромная лабильность состава липидов грамотрицательных бактерий в зависимости от сезона культивирования и штамма. Соотношение 1ЛОФЛ/ЕТОФЛ возрастает в летний период относительно величины показателя весной в 5,3 и 4,3 раза в ФЛ A. aquatica и P. fluorescens, соответственно, а % ФЛ уменьшается в 3-3,1 раза в липидах F. major и М. organophilum.

Исследование структурного состояния, АОА и состава липидов R. vacuolatum, F. major и P. fluorescens в процессе роста проведены в весенний сезон при культивировании штаммов на жидкой среде (Сахаровский и др., 1999). АОА липидов F. major в стационарной фазе роста выше, чем в экспоненциальной, а P. fluorescens существенно снижается при сохранении количества пероксидов в процессе роста, равным 0,57 ± 0.09 ммоль/r (п = 3). Основными фракциями ФЛ P. fluorescens были

— 23 —

Рис. 7. Взаимосвязь времени вращатечьной корреляции зонда 2 и соотношения 1ЛОФЛ/2ТОФЛ (А) и зонда ] и доли ФЛ (Б, В) в составе общих липидов клеток R. vacuolatum (1), F. major (2) и P. fluorescens (3).

6 5 4

V t 2 1

R1= 0,92 +/- 0.09 R2 = 0,94 +/- 0,07 R3 =0,85 +/- 0.06

10 15 20 ВЮФЛ/ЕГОФЛ

35000 -

ö 1

Rt= - 0,90+/- 0,11 R3=-0,89+/-0,12

20 40

%®n

о &

R2«0,998+/-0,002

О 15000-<

10000-

R2=-0.76+/-0.17 R,=-0.996+/-0.003

1.0

1,5 2,0 2,5

ГЛ0ФЛ/5Т0ФЛ

3.0

Рис. 8 Зависимость величины АОА липидов от соотношения сумм более легко- и более трудноокисляемых фракций фосфолипидов в исходной АЛС 0(1) ив среде после роста Citrobacter freundii (2), токсичность среды 4 балла.

ФЭ (56,2 - 65,1% на разных стадиях роста), KJ1, ФК и ФГ. Их суммарная доля выше 91,5% и практически неизменна в процессе роста. Состав ФЛ F. major представлен преимущественно ФС (42,2 - 56,1% в зависимости от стадии роста), ФЭ и ЛФХ. Их суммарная доля максимальна в экспоненциальной стадии (91,25%). Для ФЛ R. vacuolatum самой высокое относительное содержание в лаг-фазе найдено для фракций КЛ и ФК (22,5%), в экспоненциальной фазе - ФГ (23,3%), а в стационарной фазе ФХ (29,2%) и ФЭ (25,5%).

Значительные изменения структуры всей мембранной системы бактерий в процессе роста подтверждают достоверные изменения мольного отношения [стери-ны]/[ФЛ] и времен вращательной корреляции зондов. Наблюдаются симбатные изменения времен вращательной корреляции зонда 2 и величин £ЛОФЛ/ЦТОФЛ (рис. 7,А). Уменьшение времени вращательной корреляции зонда 1 с увеличением доли ФЛ в составе общих липидов найдено для R. vacuolatum и P. fluorescens (рис. 7,Б), в то время как для клеток F. major (ФС доминирует в ФЛ на всех стадиях роста) выявлена прямая зависимость между данными параметрами (рис.7,В).

АО свойства, %ФЛ и содержание общих липидов исследованных штаммов не коррелируют с величинами доз у-радиации, вызывающих гибель определенной части клеток (величины ЛД„ взяты из работы Никитина и др., 1993). Нами обнаружена обратная корреляционная зависимость между соотношениями елофл/1тофл и величинами лдщ бактерий A. aquatica, P. fluorescens, F. major, М. organophilum при их у-облучении (R = - 0,98 ± 0,015).

Анализ литературы (Абдрашитова и др, 1986, 1988; Григорян и др, 1984; Григорьева и др., 1990; Шенкман, 1991) позволяет предположить участие процессов ПОЛ в токсигенизации среды при росте условно-патогенных бактерий (Е. coli, Р. vulgaris, Р. aeruginosa, К. pneumonia, С. freundii). Патогенность данных штаммов бактерий в лабораторных условиях проявляется при культивировании на богатых липидами средах, например, арахисовой питательной среде (АПС) (Лысюк, 1989). Нами показано, что липиды АПС обладают высокой АОА (12000 ± 1550 час.мл/г); доля ФЛ составляет 5,4 ± 1,35%, а отношением ФХ/ФЭ варьирует в разных партиях от 1,03 ± 0,04 до 3,58 ± 0,36. Наличие обратной корреляции между АОА липидов АПС и соотношением ЕЛОФЛ/ЕТОФЛ (рис. 8) свидетельствует о взаимосвязанности этих параметров в исходной среде.

Несмотря на то, что исследованные штаммы бактерий характеризуются неодинаковой чувствительностью к действию различных агентов (Barta et al., 1983; Szumala, Pernak, 1988) и патогенное действие этих бактерий обусловлено, как предполагают, разными факторами (Пхакадзе, 1987; Monville, 1987; Рожавин, 1988; Ко-вальчук и др., 1991), после их роста наблюдаются общие закономерности в изменении АОА липидов и обобщенных показателей состава ФЛ в среде культивирования: возрастание АОА липидов в 1,2 - 5,3 раза, резкое снижение отношения ФХ/ФЭ в 1,85 - 31,7 раза и рост £ЛОФЛ/£ТОФЛ в 1,2-6 раза по сравнению с соответст-

— 25 —

вующими величинами в исходной ЛПС. При этом вид зависимости между степенью токсичности среды (данные взяты из работы Лысюк, 1989) и величинами АОА липидов, ФХ/ФЭ или £ЛОФЛ/£ТОФЛ идентичен. После культивирования С. freundii для липидов среды (токсичность 4 балла) сохраняется обратная взаимосвязь между АОА липидов и соотношением £ЛОФЛ/£ТОФЛ (рис. 8), однако коэффициент линейной регрессии на порядок меньше, чем для липидов самой АПС.

Неспецифическая токсигенизация среды после роста условно-патогенной микрофлоры свидетельствует об участии липидов в процессах «общения» клеток микроорганизмов со средой, связи в которой обеспечивают функционирование физико-химической системы регуляции ПОЛ и зависящего от него метаболизма микробной клетки.

4.2. Регуляция процессов ПОЛ в дрожжевых клетках

Проверка предположения о существовании связи между процессами метаболизма АО и состава липидов в клетках дрожжей в зависимости от наличия АО в питательной среде проводилась на клетках дрожжей разных рас и таксономических групп: Candida maltosa при наличии в среде культивирования синтетических АО в разных концентрациях и 8 штаммов винных дрожжей, выращиваемых либо на АПС, либо на виноградном вакуум-сусле. Одним из главных различий сред культивирования являлось высокая АОА липидов АПС и прооксидантные свойства липидов вакуум-сусла.

При выращивании дрожжей Candida maltosa на н-алканах в присутствии широко используемых в промышленности АО-1 и АО-2 было обнаружено, что масштаб стимулирующего эффекта обоих синтетических АО экстремально зависит от концентрации: максимальный стимулирующий эффект оказывала концентрация 0,025 г/л. При этой концентрации АО обнаружены максимальные значения АОА, минимальный уровень пероксидов в липидах дрожжей и наиболее выраженное воздействие на отношение сумм насыщенных и ненасыщенных ЖК на всех стадиях роста дрожжей.

При выращивании 8 штаммов винных дрожжей на АПС или виноградном вакуум-сусле (начальный титр дрожжевых клеток одинаков) отмечено значительное снижение их количества при культивировании всех исследованных штаммов именно на АПС с высокой АОА липидов, что, возможно, обусловлено антимикробной активностью АО в концентрациях выше 10*3 моль/л (Raccach, 1984). Суммарное доля КЛ+ФК в дрожжах после культивирования на сусле всегда выше, чем в клетках, выращенных на АПС. %ФЛ в составе общих липидов дрожжей, выращенных на АПС, на 15-20% выше, чем в клетках, выращенных на сусле. Отношение ФХ/ФЭ у дрожжей рас Х-96К, Виерул и Ш-21 достоверно ниже при культивировании на АПС, преимущественно из-за повышения доли ФЭ. Однако статистически достоверные различия соотношения £ЛОФЛ/£ТОФЛ при культивировании на разных средах обнаружены только для расы Ш-21.

При культивировании всех штаммов дрожжей на сусле содержание в нем ФЛ снизилось с 11,0 ± 0,6 % до следовых количеств. Найдено значительное снижение соотношения ЕЛОФЛ/ЦТОФЛ в фл АПС после роста дрожжевых клеток, что, очевидно, обусловлено, преимущественной утилизацией клетками дрожжей более лег-коокисляемых фракций ФЛ.

Величина АОА липидов АПС существенно снижается, а виноградного сусла увеличивается после культивирования всех изученных штаммов дрожжей. Наличие обратной корреляции между величинами множителя а и АОА липидов винных дрожжей разных рас (Л = - 0,88 ± 0,07) и прямой между значениями а и количеством пероксидов в липидах дрожжевых клеток (И = 0,95 ± 0,035) подтверждают участие липидов дрожжей в процессах автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи. Масштаб изменения АОА липидов среды в процессе культивирования возрастает с ростом суммарной доли ФИ+ФС и уменьшается с ростом отношения ФХ/ФЭ и количества лизоформ ФЛ в составе ФЛ дрожжевых клеток, относительное содержание которых взаимосвязано с долей лизоформ ФЛ в АПС после роста дрожжей (Я = 0,98 ± 0,02).

Микровязкость более гидрофобных областей ФЛ бислоя мембран клеток дрожжей рас Ш-21, СШД, Х-41В/1/ и Х-41В/2/ существенно выше, чем его более гидрофильных участков. Наблюдается тенденция увеличения скорости вращения зондов при уменьшении соотношения £ЛОФЛ/£ТОФЛ, снижении уровня АОА липидов и возрастании индекса ригидности. Обнаружена корреляция скорости вращения зонда 3 с содержанием ФЛ в составе общих липидов клеточных оболочек дрожжей и рост времен вращательной корреляции зонда 1 с увеличением доли ЛФХ в составе ФЛ дрожжевых клеток.

Таким образом, в зависимости от АО свойств и состава липидов среды культивирования клетки дрожжей разных таксономических групп характеризуются неодинаковой интенсивностью протекания в них процессов ПОЛ, что

взаимосвязано с изменением состава и свойств среды культивирования.

4.3. Регуляция процессов ПОЛ в мицелии ксилотрофных базидиомицетов

Данные о липидах мицелия ксилотрофных базидиомицетов (КБ), обеспечивающих разрушение древесины, немногочисленны. Нами проведено комплексное исследование АО свойств и состава липидов мицелия как разных культур грибов белой и бурой гнили в конце фазы замедления роста (максимальное накопление биомассы), так и в процессе роста грибов белой (Рапш ^п'пш) и бурой (Р1р1ороги8 ЬеШПпив) гнили, а также изучены взаимосвязи между структурой и биохимическими свойствами липидов их мицелия. Поскольку в липидах мицелия КБ преобладают ненасыщенные жирные кислоты (Капич и др., 1990), а доля более легкоокис-ляемых фракций в 2 - 12 раз превышает суммарное содержание более трудноокис-

ляемых фракций ФЛ, то несмотря на наличие ТФ и низкомолекулярных 8Н- и Присоединений липиды мицелия всех изученных видов КБ участвуют в реакциях автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи. Рост величин предъэкспоненциапьного множителя а и показателя экспоненты к найден только в присутствии липидов мицелия грибов белой гнили. Поскольку интенсивность инициированного ферментами ПОЛ у грибов этой физиологической группы также выше, чем у грибов бурой гнили (Капич, 1993), то была предложена гипотеза об участии процессов ПОЛ в биодеградации лигнина вследствие усиления иницииро- • ванного лигнинолитическими ферментами его свободнорадикального окисления пероксидными радикалами липидов. При этом по всем исследованным параметрам (АОА липидов, содержание в них пероксидов, состав липидов) наибольшие разли- \ чия в зависимости от вида грибов обнаружены в липидах мицелия грибов бурой ' гнили.

По увеличению времен вращательной корреляции в суспензии мицелия Р. й-§гшиз ИБК-131, Р. ГотепШпиз М71, Ь. хифИигеив М131 и Р. ЬеШНпив М60 зонды располагаются в ряд: зонд 3 < зонд 1 < зонд 2. Симбатные изменения скорости вращения зондов 2 и 3 позволяют предположить основную роль более гидрофильных областей липидного компонента в обеспечении текучести всего липидного слоя мицелия. Скорость вращения обоих зондов растет с ростом доли ФЛ в составе общих липидов мицелия Р. й{ггиш, Р. £этеп1агшз и Р. ЬеШПпш, липиды которых обладают прооксидантной активностью. Найдена прямая корреляция между временами вращательной корреляции зонда 3 и соотношением £ЛОФЛ/£ТОФЛ (И = 0,91 ± 0,09). Увеличение содержания ФЭ, являющегося одним из основных ФЛ КБ, в общих липидах этих штаммов грибов сопровождается ростом времени вращательной корреляции зонда 2 (И = 0,86 ± 0,13).

При сравнительном изучении АО свойств и состава липидов мицелия Р. и§п-тш ИБК-131и Р. ЬеПдНпив М60 на разных стадиях роста в глубинной культуре достоверные изменения АОА липидов обнаружены только у Р. ЬеШНпив. Максимальные величины коэффициентов корреляции между масштабом изменения параметра а кинетических кривых окисления и величиной АОА липидов выявлены в фазах отмирания для обоих видов грибов. Коэффициент линейной регрессии указанной выше зависимости для липидов Р. ^ппив в 6 раз выше, чем для липидов Р. ^

Ье(и1ти5. Количественный состав ФЛ, величины отношений ФХ/ФЭ, ЦЛОФЛ/ЦТОФЛ и [стерины]/[ФЛ] у грибов разных физиологических групп в начале экспоненциальной фазы роста исключительно близки: 43,4-44% составляет суммарное содержание ФГ+КЛ+ФК; 28,2-30,5% приходится на долю ФЭ; 10,3-13,5% - * относительное содержание ФХ и 11% - суммарная доля ФИ+ФС от общего количества ФЛ. Однако динамики показателей липидного обмена в процессе их роста существенно различается. Более того, между величиной АОА липидов мицелия Р. ^пти и соотношением ЦЛОФЛ/ЕТОФЛ в процессе роста найдена обратная зависимость (Я = - 0,994 ± 0,007), а для липидов мицелия Р. ЬеШИтк между этими показателями обнаружена прямая корреляция (И = 0,985 ± 0,015).

***

Таким образом, анализ АОА и состава липидов, их структурного состояния в клетках различных групп микроорганизмов (грамотрицательные бактерии разных штаммов, клетки дрожжей разных таксономических групп и штаммов, мицелии ксилотрофных базидиомицетов разных физиологических групп), свидетельствует о существовании в клетках микроорганизмов физико-химической системы регуляции ПОЛ, обусловливающей их функционирование. Высокая лабильность АО свойств и состава липидов микроорганизмов от сезона и среды культивирования, экспериментально обнаруженное существование взаимосвязи между физико-химическими характеристиками и составом липидов в клетках микроорганизмов и в среде культивирования обусловливают неспецифическую токсигенизацию среды при росте условно-патогенной микрофлоры на липидсодержащих средах. Наличие корреляционных взаимосвязей между структурным состоянием липидного компонента клеток грамотрицательных бактерий, винных дрожжей и ксилотрофных базидиомицетов и количеством ФЛ в составе общих липидов, содержанием отдельных фракций ФЛ или соотношением сумм более легко- и более трудноокисляемых фракций ФЛ, обратная корреляционная зависимость между устойчивостью грамотрицательных бактерий к у-облучению и соотношением ЕЛОФЛ/ЦТОФЛ, выявление лишь частичных корреляций между АОА липидов и резистентностью клеток дрожжей к действию повреждающих факторов позволяют утверждать, что ведущим звеном физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов, обеспечивающим их функционирование в норме и при стрессорных воздействиях, является состав липидов.

5. Взаимосвязь между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ в норме и при действии повреждающих факторов

Обнаруженные в работе корреляционные взаимосвязи между величиной АОА критических органов и устойчивостью животных разных видов и линий к острому облучению в сублетальных и летальных дозах; различия в динамике АОА липидов в органах и в выделенных из них клеточных органеллах в ходе суточного ритма и в ранние сроки после облучения животных; наличие коррелятивных взаимосвязей между величинами спин-спиновой или спин-решеточной релаксации протонов и уровнем АОА липидов головного мозга и печени мышей; общность кинетических свойств липидов, выделенных из биологических объектов разной степени сложности, обусловленная их участием в процессах автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи в зависимости от величины АОА липидов, позволяют предположить существование физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях, обеспечивающей функционирование ПОЛ мембранной системы микробной клетки или органа животного как единого целого.

Это предположение подтверждает и количественный анализ взаимосвязей между различными биофизическими и биохимическими параметрами липидов,

выделенных из разных по обеспеченности АО и интенсивности ПОЛ биологических объектов, а также анализ масштаба и направленности изменения этих взаимосвязей при воздействии различных повреждающих факторов на организм. Обратная корреляция между уровнем АОА липидов и количеством в них пероксидов найдена для липидов клеток винных дрожжей (R = - 0,82 ± 0,12), эритроцитов крови и селезенки мышей, мицелия грибов белой гнили (R = - 0,91 ± 0,05), т.е. для липидов клеток и тканей, характеризующихся более высокой интенсивностью процессов *

ПОЛ. Для липидов мицелия грибов бурой гнили, проявляющих как АО, так и про-оксидантные свойства в реакциях автоокисления, обнаружены как обратная (S. scie-rotiorum, G. sepiarium), так и прямая (P. betulinus, L. sulphureus) взаимосвязь между |

данными показателями. Обнаружены обратные корреляционные зависимости между АОА липидов и содержанием ТБК-активных продуктов в гомогенате печени мышей SHK, а в ряде случаев - обратные корреляции между величинами АПА липидов печени и содержанием продуктов ПОЛ в гомогенате ткани.

О способности липидов к окислению можно судить по соотношению ХЛОФЛ/ЦОФЛ, в то время как отношение ФХ/ФЭ в ФЛ клеток или тканей или отношение [стерины]/[ФЛ], очевидно отражают структурное состояние их мембранной системы. Коррелятивные взаимосвязи между отношениями 1ЛОФЛ/1ТОФЛ и ФХ/ФЭ обнаружены для всех исследованных в работе биологических объектов, что свидетельствует о существовании взаимосвязи между окис-ляемостью липидов и структурным состоянием мембранной системы на клеточном и органном уровнях. Масштаб и направленность этой взаимосвязи обусловлены кинетическими характеристиками липидов и интенсивностью окисления. Так, величины коэффициентов линейной регрессии b обратной корреляции (|R| > 0,95) между данными показателями в липидах эритроцитов крови мышей SHK существенно выше, если липиды обладают АПА, и гораздо ниже, если в липидах эритроцитов найдены пероксиды. В липидах селезенки беспородных крыс и мышей SHK обратная корреляционная зависимость между окисляемостью липидов и структурным состоянием мембранной системы органа найдена лишь при более низких значениях скорости зарождения радикалов. Для липидов печени беспородных крыс характерна более высокая вариабельность значения b данной корреляционной закономерности у разных групп животных, чем для липидов печени мышей SHK. « Кроме того, обратные корреляции между отношениями £ЛОФЛ/£ТОФЛ и ФХ/ФЭ обнаружены у групп беспородных крыс, в липидах печени которых выявлено наличие пероксидов, и прямая корреляция между данными показателями у групп крыс, ^ липиды печени которых обладали АПА.

Вариабельность коэффициента линейной регрессии взаимосвязи между 1ЛОФЛ/ЕТОФЛ и ФХ/ФЭ в ФЛ грибов бурой гнили выше, чем в липидах грибов белой гнили и у грибов разных видов, и в процессе культивирования. В липидах исследованных штаммов грамотрицательных бактерий обнаружены единые корреляционные зависимости между данными параметрами для каждого штамма, независимо от состава среды культивирования и доли ФХ в ФЛ клеток, а для ФЛ

клеток P. fluorescens и F. major не только от состава среды культивирования, но и на всех стадиях роста культур.

Взаимосвязи между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях представлены на схеме.

Схема взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ на кчеточном и органном уровнях

5.1. Влияние мощности и дозы ионизирующего излучения на взаимосвязь между параметрами системы регуляции ПОЛ

Корреляционный анализ взаимосвязей между параметрами системы регуляции ПОЛ в тканях животных, различающихся по своей природной радиорезистентности, в зависимости от мощности и дозы облучения позволил сделать следующие заключения.

Чрезвычайно устойчивым является масштаб взаимосвязи между АОА липидов и СТО ими метилолеата в тканях животных к острому рентгеновскому облучению в малой (16 сГр, мыши БНК) и в сублетальных (4,5 и 5 Гр, мыши БНК и линии СВА, беспородные крысы) дозах в ранние и отдаленные сроки после воздействия. Достоверные изменения величин Ь данной взаимосвязи найдены для липидов селезенки с высокой прооксидантной активностью и головного мозга с менее выраженными прооксидантными свойствами в ранние сроки после облучения мышей БНК в дозе 20 Гр ив липидах эритроцитов крови и печени

мышей БНК спустя месяц после у-облучения животных в дозе 15 сГр с мощностью дозы 0,01 сГр/мин.

Одной из наиболее чувствительных стадий процесса ПОЛ в липидах селезенки к действию излучения в малых дозах и в отдаленные сроки после острого облучения в сублетальных дозах является способность к образованию пероксидов. В соответствии с кинетическими свойствами липидов селезенки (рис. 3), это обусловливает возрастание скорости зарождения радикалов и, следовательно, высокую скорость расходования АО. Способность к образованию пероксидов является одним из наиболее чувствительных параметров к действию низкоинтенсивного у-облучении животных в малой дозе и для липидов эритроцитов. Острое рентгеновское облучение и в малой, и в сублетальных дозах вызывает изменение масштаба и направленности взаимосвязи между АОА липидов и содержанием ТБК-активных продуктов в гомогенате печени мышей.

О разной чувствительности окисляемости липидов и структурного состояния мембранной системы ткани к повреждающим воздействиям в зависимости от кинетических свойств липидов, дозы и мощности ионизирующей радиации и времени после воздействия свидетельствуют и результаты анализа взаимосвязей между соотношениями ЦЛОФЛ/ЦТОФЛ и отношением ФХ/ФЭ в ФЛ селезенки, эритроцитов крови, головного мозга и печени животных. Спустя месяц после острого рентгеновского облучения в сублетальной дозе величина коэффициента линейной регрессии между указанными параметрами в ФЛ эритроцитов крови мышей 8НК и линии СВА в 4.1-4,2 раза и беспородных крыс в 2,45 раза ниже, чем в группах возрастного контроля, т.е. структурное состояние мембран эритроцитов изменяется более существенно, чем способность липидов к окислению. Низкоинтенсивное облучение в малой дозе вызывает напротив возрастание величины Ь в 4,6 раза через 1 сут после воздействия в ФЛ эритроцитов крови мышей 8НК (самцы).

Противоположный эффект на взаимосвязанность между отношениями ЕЛОФЛ/1ТОФЛ и ФХ/ФЭ оказывает острое рентгеновское облучение в дозе 20 Гр и у-облучение в дозе 15 сГр с мощностью дозы 0,01 сГр/мин и в ФЛ головного мозга мышей 8НК: в течение первых 2-х часов после облучения мышей в дозе 20 Гр величина Ь обратной корреляции между данными показателями увеличена в 2,3 раза, а спустя 1 месяц после низкоинтенсивного у-облучения величина Ь данной корреляции (И = - 0,96 ± 0,03) уменьшается в 6,2 раза в группе облученных мышей относительно контрольной.

Результат воздействия и острого ионизирующего излучения в сублетальных дозах, и низкоинтенсивное у-облучение в малой дозе на масштаб взаимосвязи между 1ЛОФЛ/ЕТОФЛ и ФХ/ФЭ в ФЛ печени животных обусловлен величиной АОА липидов этой ткани. Через 1 сут после у-облучения мышей 8НК в дозе 15 сГр с мощностью дозы 0,01 сГр/мин в группах животных с более высокой АОА липидов печени у контрольных мышей отмечено падение коэффициента линейной

регрессии обратной корреляции между данными параметрами в 2,6 раза, а в группах мышей с более низкой АОА липидов органа найдено увеличение значения Ь в 1,6 раза через 1 сут и в 1,4 раза спустя месяц после воздействия по сравнению с соответствующим значением у возрастного контроля.

5.2. Воздействие химического токсиканта на состояние процессов ПОЛ в

Отсутствие линейной зависимости ответа сложного организма от концентрации черного щелока в питьевой воде мышей ЭНК (самки) найдено уже на физиологическом уровне: относительное изменение массы тела мышей в группе II (концентрация щелока 0,015%) через месяц после воздействия было существенно ниже, чем в контрольной группе при отсутствии достоверных различий в других группах.

Степень выраженности изменения интенсивности ПОЛ неодинакова в разных тканях и зависит как от концентрации щелока, так и от продолжительности эксперимента. Так, наиболее значительное увеличение количества ТБК-активных продуктов в плазме крови мышей по сравнению с соответствующими показателями у контрольных животных найдено в группах I (0.005%) и II в течение всего эксперимента. При этом более выраженное относительное увеличение продуктов ПОЛ в печени мышей обнаружено в группе I через 5 и 12 сут, через 12 дней в группе Ш (0.05%) и спустя месяц в группе II. Величина АОА липидов печени через месяц после начала эксперимента в 1,65 раза выше в группе I, снижена на 40% в группе II и достоверно не отличается от величины показателя в печени интактных мышей в группе Ш. Степень ненасыщенности липидов (концентрация двойных связей в липидах) во всех опытных группах в 1,6-1,75 раза выше, чем в липидах печени контрольных мышей. Несмотря на отсутствие корреляции между АОА липидов и степенью их ненасыщенности в опытных группах мышей, масштаб взаимосвязи между АОА и СТО липидами метилолеата во всех опытных и контрольной группах одинаков.

Присутствие черного щелока в течение месяца в питьевой воде мышей оказывает более существенное влияние на состав липидов эритроцитов крови, а состав липидов печени не претерпевает столь значительных изменений. В ФЛ эритроцитов крови мышей доля лизоформ ФЛ увеличилась, а доля ФХ уменьшилась в 2 раза по сравнению с контролем в группе I. Суммарная доля ФИ+ФС в группах I и Ш в ФЛ эритроцитов возросла в 2,5 раза, а в группе II снизилась в 5,2 раза по сравнению с аналогичным показателем в контрольной группе. Снижение доли ФЭ и КЛ+ФК найдено в ФЛ эритроцитов крови мышей группы Ш. В составе ФЛ печени мышей в опытных группах можно отметить рост в 1,5 раза доли лизоформ в группе II и уменьшение в 2-2,3 раза доли КЛ+ФК в группах II и Ш по сравнению с их содержанием в ФЛ печени мышей в контрольной группе. В целом, наиболее существенные изменения обобщешшх-дсдаазателей

тканях мышей

Г рос. НАЦИОНАЛЬНАЯ !

. НАЦИОНАЛ о! БИБЛИОТЕКА г П»Т>П(1упг

состава липидов эритроцитов крови мышей найдены при самой низкой суммарной концентрации химических токсикантов (0,005%), а в печени при их концентрации 0,015% в питьевой воде мышей.

Присутствие черного щелока в питьевой воде снижает величины коэффициентов обратной корреляции между отношениями ХЛОФЛ/ЦТОФЛ и ФХ/ФЭ в ФЛ эритроцитов крови мышей до значений - 0,82 ±0,13 (группа I); - 0,73 •

±0,19 (группа И) и - 0,80 ±0,15 (группа Ш) по сравнению с II = - 0,95 ± 0,04 в ФЛ эритроцитов крови контрольной группы мышей. Величины Ь данных корреляционных зависимостей также снижены почти в 2 раза при добавлении ** 1

черного щелока в концентрациях 0,015% и 0,05%. При ежедневном добавлении черного щелока в питьевую воду мышей в концентрации 0,005% корреляция между |

отношениями £ЛОФЛ/£ТОФЛ и ФХ/ФЭ в ФЛ печени отсутствует, взаимосвязанность между ними снижена в группе Ш и достоверно не отличается от контрольного значения в группе II. Следовательно, спустя месяц после начала эксперимента структурное состояние мембранной системы печени мышей всех опытных групп и эритроцитов крови мышей, получавших черный щелок в концентрациях 0,015% и 0,05%, претерпевает более существенные изменения по сравнению со способностью липидов к окислению.

Таким образом, и при добавлении в питьевую воду мышей суммы химических веществ выявлена высокая чувствительность параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях мышей к действию экологически неблагоприятного фактора, особенно в малых дозах (0,005% и 0,015%) и найдено отсутствие линейной зависимости от концентрации, как и при воздействии индивидуальных БАВ на биологические объекты. Огромная чувствительность I

показателей липидного обмена эритроцитов крови к действию химических токсикантов особенно в малой дозе (0,005%) позволяет предположить целесообразность их использования как комплексных тестов для оценки степени воздействия слабых экологически неблагоприятных факторов на организм.

Заключение

Существование физико-химической системой регуляции ПОЛ на клеточном и ^

органном уровнях обусловливает, с одной стороны, общность в функционировании системы регуляции ПОЛ в биологических объектах разной степени сложности, с другой, - наличие однотипных корреляционных закономерностей в органах лабораторных животных и животных из природных популяций. Так, при окислении »

растворов липидов печени катрана в метилолеате обнаружены изменения величин а и к кинетических кривых накопления пероксидов. Величина Ь прямой корреляции между АОА липидов и СТО ими метилолеата уменьшается с ростом скорости зарождения радикалов в реакции автоокисления для липидов печени и головного мозга диких мышевидных грызунов (полевки-экономки, полевые мыши, рыжие полевки, желтогорлые мыши), как и для липидов из других биообъектов (рис. 1). Обнаружены изменения АОА липидов печени и головного мозга полевок-экономок

в зависимости от возраста, а липидов печени катрана от сезона отлова. Выявлены обратные коррелятивные взаимосвязи между отношениями £ЛОФЛ/£ТОФЛ и ФХ/ФЭ в ФЛ органов и полевок-экономок, и печени катрана.

Однако нами обнаружены и определенные различия показателей системы регуляции ПОЛ в тканях животных из природных популяций по сравнению с аналогичными показателями у лабораторных грызунов. Так, показатели АО статуса тканей у отдельных особей животных из природных популяций обладают большой вариабельностью, чем их индивидуальные различия у лабораторных животных. Пики и депрессии численности популяций, характеризующиеся различиями половозрастной структуры и физиологического состояния животных, также оказывают влияние на АОА и состав липидов органов диких мышевидных грызунов. Однако необходимо отметить общую особенность АО статуса липидов печени природных популяций животных: относительно низкие величины АОА липидов и наличие у них преимущественно прооксидантных свойств, что, очевидно, обусловлено большей ненасыщенностью липидов печени диких животных. Содержание ТБК-активных продуктов в головном мозге и активность СОД эритроцитов крови диких мышевидных грызунов существенно выше, чем аналогичные показатели у лабораторных животных. Кроме того, половой диморфизм параметров системы регуляции ПОЛ в органах диких мышевидных грызунов выражен более значительно, чем у лабораторных мышей.

Взаимосвязь между величинами АОА и составом липидов на клеточном и органном уровнях обнаружена у всех исследованных биологических объектов. Однако направленность данных корреляционных зависимостей определяется как кинетическими свойствами липидов, так и биологическими особенностями вида. Так, в липидах клеток винных дрожжей разных рас и мицелия грибов бурой гнили Р. ЬеЩНпш в процессе роста найдены прямые корреляционные взаимосвязи между АОА липидов и соотношением £ЛОФЛ/£ТОФЛ, в то время как в липидах АПС (рис. 8), мицелии гриба белой гнили Р. %ппиз в процессе роста и печени полевых мышей, отловленных в окрестностях г. Киева, корреляция между данными показателями является обратной. Обнаружены прямая корреляция между АОА липидов и отношением ФХ/ФЭ в ФЛ печени полевых мышей южной популяции и обратная - в липидах клеток винных дрожжей.

Общность кинетических свойств липидов и взаимосвязанность различных параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов, в органах и лабораторных животных, и животных из природных популяций позволяют предположить, что система АО защиты достаточно устойчива и способна сохранять видовую специфичность биофизических и биохимических параметров на уровне клеток и органов для осуществления регуляции процессов ПОЛ в тканях животных из природных популяций. Большая вариабельность АОА липидов и относительно низкие значения этого показателя в печени вследствие высокой степени ненасыщенности липидов, очевидно, являются

необходимым условием для поддержания гомеостаза и нормального функционирования клеточных систем в органах диких животных в среде обитания.

Вклад показателей физико-химической системы регуляции ПОЛ в обеспечение жизнедеятельности клетки или органа взаимосвязан с кинетическими характеристиками липидов. Для биологических систем, липиды которых обладают преимущественно прооксидантными свойствами и характеризуются относительно •

высокой интенсивностью процессов ПОЛ (клетки грамотрицательных бактерий, дрожжей и мицелия дереворазрушающих грибов; селезенка, эритроциты крови и головной мозг лабораторных животных), ведущим звеном системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим функционирование их в норме и в ответ на повреждающие '

воздействия, является состав липидов и степень их ненасыщенности. Это подтверждается и снижением вклада АО свойств липидов в регуляцию окислительных реакций с увеличением скорости процесса окисления (рис. 1). Для печени животных, липиды которой обладают преимущественно достаточно высокой АОА и характеризуются наиболее низкой интенсивностью ПОЛ среди всех изученных объектов, именно величина АОА является ведущим звеном физико-химической системы регуляции, обеспечивающей функционирование органа в норме и при действии повреждающих факторов.

Биологические последствия модификации ПОЛ для сложных биологических систем обусловлены как масштабом воздействия различных факторов на состояние параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ, так и природой самого воздействия. Кроме того, для развития процессов ПОЛ существенное значение имеет структурированность клетки и гетерогенность ее мембранной системы, 1

влияние которых на кинетические закономерности окислительных процессов in vitro в настоящее время общепризнано (Pryor et al. 1988; Suarna et al., 1993; Barclay qt al. 1995, 1997; Mukai et al., 1997). Важность степени окисленности липидов (содержания в них пероксидов) или наличия у липидов АПА для определения масштаба и взаимосвязанности показателей системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях обусловлена соотношением скоростей образования и утилизации пероксидов в биологической системе. Мицелообразование оказывает влияние и на химическое строение пероксидов, образование которых индуцировано радиацией (Hauville et al., 1998; Hindo et al., 2000). Это позволяет понять роль f

исходного АО статуса клетки или органа как для определения устойчивости к действию острого облучения, так и для формирования биологических последствий воздействия ионизирующей радиации, особенно в малых дозах. Вследствие ,j

функционирования физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях, стадийность изменения ее параметров выявляются после действия повреждающих факторов" разной природы (ионизирующая радиация, химические токсиканты, термический ожог) не только в тканях, непосредственно затронутых воздействием.

Изменения состава ФЛ при действии различных повреждающих факторов на

биологические объекты модифицируют метаболические реакции по разным направлениям: за счет изменения ригидности мембранной системы клетки или органа (рис. 7); вследствие локальных мицелярных преобразований мембранных липидов при возрастании лизоформ ФЛ (Грибанов, 1991); за счет влияния на интенсивность ПОЛ, поскольку скорость инициирования свободных радикалов и кинетика ингибирования процессов окисления в присутствии катионных и анионных ПАВ значительно различаются из-за различий в механизме их влияния на процессы образования и разложения пероксидов (Сирота и др., 1996; Карташева и др., 1997, 2001). Это подтверждают как результаты наших экспериментов по исследованию состояния параметров системы регуляции ПОЛ в крови и печени мышей БНК спустя месяц после сочетанного действия твина-80 и однократного рентгеновского облучения в дозе 16 Р, так и существенное возрастание степени биодеградации модельного лигнин-подобного соединения и лигнина, инициированного Мп-пероксидазой, именно в присутствии твина-80 (КарюИ е! а1., 1999). Ключевая роль в поддержании структуры микродоменов в клеточной мембране, которые обогащены специфическими белками и липидами и обеспечивают различные сигнальные и метаболические функции, отводится СМ и ХС (Рис1<1еу, 1996; Шс^ау, 2000). Возможно, именно высокая вариабельность отношения ФХ/ФЭ, отражающего структурное состояние мембранной системы, и особенно [ХС]/[ФЛ], которое, как полагают (Климов, Никульчева, 1995), позволяет мембране находится в промежуточном состоянии геля, обеспечивают адаптационные возможности эритроцитов в процессе жизнедеятельности. О высокой чувствительности параметров системы регуляции ПОЛ в крови свидетельствует и рост в 4,6 раза величины Ь обратной корреляции между ЕЛОФЛ/ЕТОФЛ и ФХ/ФЭ в ФЛ эритроцитов крови мышей БНК через 1 сут после низкоинтенсивного у-облучения в дозе 15 сГр относительно контроля. При этом взаимосвязанность между содержанием пероксидов в липидах эритроцитов и содержанием ТБК-активных продуктов в плазме крови мышей через 1 сут после этого воздействия ниже, чем у контрольных животных, а величина коэффициента линейной регрессии уменьшается в 5,7 раза.

Обитание природных популяций грызунов на территориях, подверженных хроническому действию ионизирующей радиации, также вызывает существенные нарушения связей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ в органах. Длительность сохранения измененного АО статуса в тканях природных популяций животных и их потомков при радиационных воздействиях в малых дозах подтверждена как прямым анализом АОА липидов и продуктов ПОЛ в тканях полевок-экономок (первое поколение), так и изменением характера распределения мышевидных грызунов по величинам АОА липидов печени и головного мозга, отловленных на участках с разным уровнем внешнего у-фона в среднетаежной зоне республики Коми и в зоне аварии на Чернобыльской АЭС. Необходимо отметить, что в условиях радиоактивного загрязнения среды обитания глубина нарушений липидного обмена, обеспеченности тканей энергией (Кудяшева и др., 1997) и генетические последствия для природных популяций грызунов

(Гилева, 1997; Гончарова, Рябоконь, 1998; Башлыкова, 2000) оказались значительно больше, чем в лабораторных экспериментах с хроническим внешним у-облучением животных.

Возможность оценки биологических последствий воздействия факторов разной мощности и природы по изменению масштаба и направленности взаимосвязанных в норме показателей физико-химической регуляции ПОЛ, на наш *

взгляд, обусловлена способностью этих параметров выполнять в биологических объектах роль информационной системы. Это предположение основано как на наличии у ФЛ и продуктов их окисления сигнальных функций (Burlakova et al. 1979; Nishizuka, 1986, 1995; Алесенко, 1998; Проказова и др., 1998; Leonarduzzi et al., 2000; Kagan et al, 2000), так и на полученных в работе данных о '

скоординированных изменениях параметров системы АО защиты, относящихся к разным субклеточным компартментам или между клетками микроорганизмов и средой культивирования. Изменение масштаба и направленности взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ, возможно, и является информационным сигналом, определяющим выбор адаптационной стратегии в зависимости от интенсивности внешнего воздействия. Экспериментально доказанное in vivo отсутствие линейной зависимости масштаба изменения параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ и переход ее на другой уровень функционирования при воздействии неблагоприятных экологических факторов химической и физической природы свидетельствуют как о необходимости острожного подхода при экстраполяции данных, полученных в экспериментальных исследованиях в сублетальных и летальных дозах, для прогнозирования последствий их воздействия и оценки риска от экологических загрязнений, так и возможности ревизии самого понятия «предельно допустимая концентрация».

ВЫВОДЫ

1. С помощью разработанной модели показано, что кинетические характеристики липидов (АОА и АПА липидов, степень торможениям окисления ими мети-лолеата, начальное количество пероксидов) обусловливают их участие в процессах низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи. Установлено, что липиды грамотрицательных бактерий, мицелия дере-воразрушающих грибов белой гнили, эритроцитов крови и головного мозга животных проявляют только прооксидантные свойства на метилолеатной окислительной i модели независимо от вида и скорости зарождения радикалов в модельной системе; липиды дрожжевых клеток, мицелия дереворазрушающих грибов бурой гнили и селезенки животных могут обладать как АО, так и прооксидантными свойствами в зависимости от вида и условий эксперимента; липиды печени лабораторных животных обладают преимущественно АО свойствами и отличаются высокой вариабельностью величины АОА как у отдельных особей, так и между группами животных.

2. Экспериментально доказано наличие физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов: грамотрицательные бактерии, дрожжи разных таксономических групп и штаммов, мицелий ксилотрофных базидиомицетов разных таксономических групп. Обнаружена высокая лабильность АО свойств и состава липидов микроорганизмов в зависимости от сезона и среды культивирования. Установлены взаимосвязанные изменения АО свойств и состава липидов в клетках грамотрицательных бактерий или дрожжей и в среде культивирования, что обусловливает появление неспецифической токсигенизации липидсодержащих сред при росте на них условно-патогенной микрофлоры и свидетельствует о важной роли процессов ПОЛ в обеспечении функционирования клеток микроорганизмов.

3. Впервые обнаружены скоординированные изменения параметров системы АО защиты, относящихся к разным субклеточным компартментам, в клетках микроорганизмов и тканях животных, показано наличие корреляционных взаимосвязей между обобщенными показателями состава фосфолипидов, характеризующими окисляемость липидов и отражающими структурное состояние мембранной системы клетки или ткани, обнаружена существенная зависимость масштаба и направленности этих корреляционных взаимосвязей от кинетических свойств липидов и обеспеченности их АО. Совокупность экспериментальных и литературных данных позволяют сформулировать положение о функционировании процессов ПОЛ мембранной системы клетки и органа как единого целого. Это обусловливает общность механизма регуляции клеточного метаболизма окислительными реакциями в липи-дах биологических объектов разной степени сложности и свидетельствует о существовании физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях. Предложена схема взаимосвязей между параметрами этой системы.

4. Установлена общность кинетических свойств липидов и однотипность взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ в органах лабораторных животных и животных природных популяций (дикие мышевидные грызуны, катран). Это позволяет предположить, что система антиоксидант-ной защиты достаточно устойчива и способна сохранять видовую специфичность биофизических и биохимических параметров на клеточном и органном уровнях для осуществления регуляции ПОЛ в тканях животных природных популяций. Более высокая вариабельность АОА липидов органов и относительно низкие значение этого показателя в печени вследствие высокой степени ненасыщенности липидов, очевидно, являются необходимым условием для поддержания гомеосгаза и нормального функционирования клеточных систем в органах диких животных в среде обитания.

сов ПОЛ (клетки грамотрицательных бактерий, дрожжей и мицелия дереворазру-шающих грибов; селезенка, эритроциты крови и головной мозг лабораторных животных) ведущим звеном физико-химической системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим их функционирование в норме и при действии повреждающих факторов, является состав липидов и степень их ненасыщенности. Для липидов печени животных, обладающих достаточно высокой АОА и характеризующихся наиболее низкой интенсивностью ПОЛ среди всех исследованных биологических объектов, ведущим звеном системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим функционирование в норме и при действии неблагоприятных экологических факторов, является АОА липидов.

6. Экспериментально показаны прямые корреляционные взаимосвязи между резистентностью 11 видов и линий лабораторных животных и величиной АОА липидов органа, являющегося критическим при действию острого облучения в диапазонах доз, вызывающих костномозговую, кишечную или церебральную форму гибели. Показана важная роль физико-химической системы регуляции ПОЛ в репарации мембран после острого облучения животных в минимально летальных дозах. Вклад АОА липидов и эндогенных тиолов в обеспечении радиорезистентности организма зависит от тяжести лучевого поражения: исходный уровень АОА липидов является основным фактором в обеспечении радиорезистентности животных при низких дозах острого облучения и играет существенную роль в формировании биологических последствий низкоинтенсивного облучения в малой дозе.

7. Установлено, что в отдаленные сроки после облучения в сублетальных и малых дозах одним из наиболее чувствительных параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в липидах селезенки мышей является их способность к образованию пероксидов и состав липидов, а в эритроцитах крови - состав липидов. Спустя месяц после острого лучевого воздействия в сублетальных дозах наиболее вариабельным показателем системы регуляции ПОЛ в печени животных является величина АОА липидов. Острое рентгеновское облучение и в малой, и в сублетальной дозах вызывает нарушение взаимосвязи между величиной АОА липидов печени и количеством ТБК-активных продуктов в гомогенате ткани.

8. Впервые показано, что изменения относительного содержания не только минорных, но и основных фракций фосфолипидов в отдаленные сроки после облучения животных в сублетальных дозах происходят в тканях с низким АО статусом (селезенка, эритроциты крови), а при воздействии ионизирующей радиации в малых дозах изменение доли основных фракций фосфолипидов обнаружены во всех исследованных тканях (печень, селезенка, эритроциты крови, головной мозг) и лабораторных животных, и мышевидных грызунов, отловленных в зоне аварии на Чернобыльской АЭС.

9. Впервые показана in vivo нелинейность изменения параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ (АОА липидов, содержание ТБК-активных

продуктов, соотношение фракций фосфолипидов) в тканях животных как при радиационных воздействиях в малых дозах в зависимости от дозы облучения и ее мощности, так и при наличии химических токсикантов в питьевой воде животных в зависимости от их суммарной концентрации. Обнаружены существенные изменения вида распределения мышевидных грызунов, отловленных в зоне аварии на Чернобыльской АЭС, по величинам АОА липидов их печени и головного мозга в зависимости от радиорезистентности вида, степени радиоактивного загрязнения участка отлова и времени действия радиационного фактора. Высокая чувствительность параметров системы регуляции ПОЛ к действию низкоинтенсивного облучения в малых дозах и наличию химических токсикантов в питьевой воде свидетельствует об определяющей роли мембран как координатора регуляции окислительных реакций в липидах при воздействии слабых повреждающих факторов.

10. Предположено, что изменение направленности и масштаба взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ при действии повреждающих факторов является информационным сигналом, определяющим выбор адаптационной стратегии организма в неблагоприятных условиях обитания. Обнаруженная высокая чувствительность показателей липидного обмена эритроцитов крови животных к слабым воздействиям позволяет прогнозировать их использование в качестве тестов для оценки биологических последствий воздействия неблагоприятных экологических факторов (низкоинтенсивное облучение, наличие химических токсикантов в питьевой воде в низких концентрациях).

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шишкина JI.H., Бурлакова Е.Б., Дзюба Н.М., Гаинцева В.Д., Молочкина Е.М., Пальмина Н.П. «Антиокислительная активность липидов и радиочувствительность. Сооб. 1» // Радиобиология. 1974. Т. 14. Вып. 1. С. 34 - 38.

2. Шишкина JI.H., Пальмина Н.П., Бурлакова Е.Б. «Физико-химические свойства липидов и радиочувствительность» // Радиочувствительность нормальной и опухолевой ткани. Алма-Ата: Наука Каз ССР, 1974. С. 78 - 82.

3. Алесенко A.B., Бурлакова Е.Б., Шишкина JI.H. «К вопросу о связи интенсивности синтеза ДНК и изменения АОА липидов в облученных клетках» // Инф. бюлл. «Радиобиология». 1974. № 16. С. 39-43.

4. Алесенко A.B., Бурлакова Е.Б., Пальмина Н.П., Шишкина JI.H. «Связь изменения АОА липидов с синтезом ДНК в клетках млекопитающих» // Биофизика. 1974. Т. 19. № 5. С. 941 -942.

5. Burlakova Е.В., Arkhypova G.V., Shishkina L.N., Goloschapov A.N., Zaslavsky Yu A. Influence of ionizing radiation on the regulatory function of biomembranes II Studia biophys. 1975. V. 53. P. 67-71.

6. Шишкина JI.H., Алесенко A.B., Пальмина Н.П., Бурлакова Е.Б. «Антиокислительная активность липидов и радиочувствительность. Сооб. 2» // Радиобиология. 1976. Т. 16. № 1. С. 39 -43.

7. Шишкина JI.H., Пальмина Н.П., Бурлакова Е.Б. «Антиокислительная активность липидов и радиочувствительность. Сооб. 3.» Н Радиобиология. 1976. Т. 16. № . С. 230 - 233.

8. Бурлакова Е.Б., Иваненко Г.Ф., Лебенгарц Я.З., Шишкина JI.H. «Антиокислительная активность липидов и радиочувствительность. Сооб. 4.» // Радиобиология. 1977. Т. 17. № 2. С. 216

9. Бурлакова Е.Б., Граевская Б.М., Иваненко Г.Ф., Шишкина JI.H. «Связь между изменениями уровней эндогенных тиолов и антиокислительной активности липидов и радиочувствительностью животных разных видов» //Радиобиология. 1978. Т. 18. № 5. С. 655 - 660.

10. Заславский Ю.А., Шишкина JT.H. «Влияние убихинона на функциональное состояние митохондрий после облучения» // Инф. бюдц. «Радиобиология». 1979. № 22. С. 48 - 49.

11. Заславский Ю.А., Шишкина Л.Н., Кожокару А.Ф., Акоев И.Г. «Модификация радиационного поражения коэнзимом Q9» //Радиобиология. 1981. Т. 21. № 4. С. 609 - 611.

12. Бурлакова Е.Б., Иваненко Г.Ф., Конрадов A.A., Максимов В.М., Шишкина Л.Н. «Исследование связи между количеством сульфгидрильных групп и уровнем антиокислительной активности липидов органов у индивидуальных животных разных видов» // Радиобиология. 1982. Т. 22. № 3. С. 301 - 306.

13. Шишкина JI.H., Смолева O.A. «Влияние а-токоферола на уровень АОА липидов в органах облученных животных и их выживаемость» // Биологические системы в разных условиях. М: Труды МОИП, 1982. С. 94 - 99.

14. Иваненко Г.Ф., Шишкина JI.H. «Исследование связи между составом фосфолипидов и антиокислительной активностью липидов в органах животных разных видов» // 1У Всесоюз. Симп. по биохимии липидов. 14-16 июня 1983, Киев. Тез. докл. Киев, 1983. С. 53.

15. Бурлакова Е.Б., Иваненко Г.Ф., Шишкина Л.Н. «Роль эндогенных тиолов и антиокислительной активности липидов в определении радиорезистентности организма» // Проблемы природной и модифицированной радиочувствительности. М.: Наука, 1983. С. 21 - 29.

16. Бурлакова Е.Б, Шишкина Л.Н. «Репарация клеточных мембран и ее значение в лучевом поражении» // Проблемы природной и модифицированной радиочувствительности. М.: Наука, 1983. С. 29-43.

17. Бурлакова Е.Б., Заславский Ю.А., Шишкина Л.Н. «Влияние изменений в липидах мембран митохондрий на активность М^-зависимой АТФазы» // Радиобиология. 1984. № 4. С. 505 -508.

18. Гудзь Т.И., Гончаренко E.H., Ковалева З.А., Зубкова С.М., Шишкина Л.Н. «Механизмы регуляции уровня липидных радиосенсибилизатов в клетках дрожжей с различной радиорезистентностью» // Биол. науки. 1985. № 1. С. 25 - 32.

19. Бурлакова Е.Б., Иваненко Г.Ф., Шишкина Л.Н. «Вклад антиоксидантов и эндогенных тиолов в обеспечение радиорезистентности организма» // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1985. № 4. С. 588 - 593.

20. Шишкина Л.Н., Шелудченко Н.И., Мучаидзе Д.А., Клочко A.B. «Сезонные изменения биофизических и биохимических параметров липидов печени катрана» // Труды V Всесоюз. ме-жуниверсит. конференции «Биология клетки». Тбилиси. 1987. Т. 2. С. 1029 - 1031.

21. Победимский Д.Г., Решетник O.A., Бурлакова Е.Б., Шишкина Л.Н., Винаров А.Ю., Кирпичников П.А. «Влияние антиоксидантов на рост дрожжей - продуцентов кормового белка» // Докл. АН СССР. 1988. Т. 303. № 4. С. 1000 - 1003.

22. Победимский Д.Г., Винаров Ю.А., Решетник O.A., Мингалеева 3.III., Гутман А.Ш., Шишкина Л.Н. «Влияние антиоксидантов на получение микробной биомассы» // Acta Biotechnol. 1988. V.8.N1.P. 55-69.

23. Решетник O.A., Победимский Д.Г., Бурлакова Е.Б., Шишкина Л.Н., Винаров Ю.А., Мингалеева З.Ш., Анцыгина Л.Л. «Биотехнологические и физико-химические особенности использования антиоксидантов в процессах получения микробной биомассы» // Биотехнология. 1989. Т. 5. №3. С. 358 -362.

24. Кудяшева А.Г., Таскаев А.И., Загорская Н.Г., Шишкина Л.Н. «Влияние комплексного радиоактивного загрязнения на параметры систем регуляции метаболизма клетки» // Чернобыль' 88. Докл. 1 Всесоюз. научно-технич. Совещания на Чернобыльской АЭС. Т.З. Прогнозы изменения радиационной обстановки и дозовых нагрузок в зоне аварии. Ч. 2. Чернобыль, 1989. С. 124-141.

25. Кудяшева А.Г., Шишкина J1.H., Загорская Н.Г., Таскаев А.И. «Влияние техногенного загрязнения на регуляторные системы клетки» (Препринт). 1990. Сыктывкар. 40 с.

26. Бурлакова Е.Б., Аристархова С.А., Федорова Л.В., Шелудченко Н.И., Шишкина Л.Н. «Особенности влияния дипальмитоилфосфатидилхолина и его структурных фрагментов на пере-кисное окисление липидов биологических мембран» // Биол. науки. 1991. № 9. С. 21 - 27.

27. Шишкина Л.Н., Смирнов В.Н., Сметанина С.Е., Решетник O.A., Анцыгина Л.Л., Пытляк O.A., Победимский Д.Г. «Феноменологические характеристики действия экзогенных антиок-сидантов на рост дрожжей» // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1991. Ха 4. С. 517 - 521.

28. Шишкина Л.Н., Сметанина С.Е., Решетник O.A., Победимский Д.Г. «Влияние антиоксиданта на изменение антиоксидантных свойств и жирнокислотного состава липидов дрожжей на разных стадиях роста» // Изв. АН СССР. 1991. № 4. С. 614 - 618.

29. Шишкина Л.Н., Материй Л.Д., Кудяшева А.Г., Загорская Н.Г., Таскаев А.И. «Структурно-функциональные нарушения в печени диких грызунов из районов аварии на Чернобыльской АЭС»//Радиобиология. 1992. Т. 32. Вып. 1. С. 19 -29.

30. Шишкина Л.Н., Самойленко И.И., Лысюк О.Г., Меньшов В.А., Идрисова Е.В., Слуянова Н.В. «Роль параметров системы регуляции перекисного окисления липидов в токсигенизации среды условно-патогенной микрофлорой» И Тез. докл. 1У конф. «Биоантиоксидант». 2-4 июня 1992 г. (г. Москва). 1992. M. Т.1. С. 67 - 68.

31. Шишкина Л.Н., Таран Ю.П., Елисеева C.B., Булгаков В.Г. «Влияние 6-метилурацила на окислительные реакции в модельных системах различной степени сложности» // Изв. АН СССР. 1992. № з. с. 350 - 357.

32. Капич А.Н., Шишкина Л.Н. «Изменение содержания и состава липидов дереворазрушающих базидиомицетов в процессе роста» // Биол. науки. 1992. № 6. С. 89 - 95.

33. Таран Ю.П., Шишкина Л.Н. «Исследование противолучевого действия 6-метилурацила» // Радиобиология. 1993. Т. 33. Вып. 2. С. 285 - 290.

34. Капич А.Н., Шишкина Л.Н. «Антиоксидантные свойства дереворазрушающих базидиомицетов» // Микология и фитопатология». 1992. Т. 26. № 6. С. 486 - 492.

35. Меньшов В.А., Шишкина Л.Н., Бурлакова Е.Б., Кишковский З.Н., Самойленко И.И., Идрисова Е.В. «Влияние центрифугирования на биохимические и физико-химические параметры липидов арахисовой питательной среды». // Приклад, биохимия и микробиол. 1993. Т. 29. Вып. 3. С. 442 - 448.

36. Меньшов В.А., Шишкина Л Н., Кишковский З.Н. «Состав фосфолипидов мембран винных дрожжей как фактор, определяющий содержание и антиоксидантные свойства липидов среды» // Микробиология. 1993. Т. 62. Вып. 4. С. 663 - 672.

37. Капич А.Н., Шишкина Л.Н. «Фосфолипиды мицелия дереворазрушающих базидиомицетов» // Микология и фитопатология. 1993. Т. 27. № 3. С. 32 - 37.

38. Меньшов В.А., Шишкина Л.Н., Кишковский З.Н. «Липиды биосорбентов: состав, структура и стабильность при хранении» // Прикл. биохимия и Микробиол. 1993. Т. 29. Вып. 6. С. 900 -910

39. Шарыгин В.Л., Шишкина Л.Н., Рождественский Л.М., Кормер З.С., Пулатова М.К. «Быстрые метаболические изменения в крови и органах крыс под влиянием импульсного излучения электронов в сверхвысоких дозах» // Изв. РАН. Сер. биол. 1994. № 2. С. 254 - 270.

40. Шишкина Л.Н., Полякова Н.В., Таран Ю.П. «Анализ параметров системы регуляции перекисного окисления в органах мышей в отдаленные сроки после острого облучения» // Радиац. биология. Радиоэкология. 1994. Т. 34. Вып. 3. С. 362 - 367.

41. Меньшов В.А., Шишкина Л.Н., Кишковский З.Н. «Метилолеатная окислителдьная модель в исследовании механизма регуляторных взаимодействий липидов природных сорбентов и среды» // Прикл. биохимия и микробиол. 1994. Т. 30. Вып. 4-5. С. 632 - 640.

42. Кудяшева А.Г., Шишкина Л.Н., Загорская Н.Г. «Видовые особенности в повреждении регуляторных систем клеток печени мышевидных грызунов в условиях слабого радиоактивного загрязнения» // Экология. 1994. № 6. С. 48 -53.

43. Полякова Н.В., Шишкина JI.H. «Воздействие у-радиации разной мощности на процессы пе-рекисного окисления липидов в тканях мышей» // Радиац. биология. Радиоэкология. 1995. Т. 35. Вып. 2. С. 181 -188.

44. Шишкина Л.Н., Полякова Н.В., Меньшов В.А., Таран Ю.П., Сухова О.И., Железовская С.Е., Аносова М.В. «Взаимосвязь состава липидов и их антиоксидантных свойств в зависимости от интенсивности окислительных процессов» // Тез. докл. У1 Симпоз. по биохимии липидов. М., 1995. С. 118.

45. Капич А.Н., Шишкина Л.Н. «Перекисное окисление липидов и его регуляция в мицелии ксилотрофных базидиомицетов» // Микробиология. 1995. Т. 64. № 3. С. 320 - 326.

46. Бурлакова Е.Б., Мазалецкая Л.И., Шелудченко Н.И., Шишкина Л.Н. «Ингибирующее действие смесей фенольных антиоксидантов и фосфатидилхолина» // Изв. РАН. Сер. химич. 1995. № 6. С. 1053 - 1059.

47. Капич А.Н., Шишкина Л.Н. «Сопряжение перекисного окисления липидов мицелия ксилотрофных базидиомицетов с деградацией лигнина (гипотеза)» // Докл. АН Беларуси. 1995. Т. 39. № 5. С. 63 - 68.

48. Таран Ю.П., Шишкина Л.Н., Евсеенко Л.С., Кукушкина Г.В. «Влияние 6-метилурацила на параметры системы регуляции пероксидного окисления липидов при термическом ожоге» // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1995. № 1. С. 40 - 43.

49. Шишкина Л.Н., Бурлакова Е.Б. «Природные и синтетические антиоксиданты как радиопротекторы» //Хим. физика. 1996. Т. 15. № 1. С. 43 - 53.

50. Смотряева М.А., Круглякова К.Е., Шишкина Л.Н., Блюхтерова Н.В., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б. «Структурные и биохимические показатели элементов крови мышей после гамма-облучения в малых дозах разной интенсивности» // Радиац. биология. Радиоэкология. 1996. Т. 36. Вып. 1 С. 21 - 29.

51. Меньшов В.А., Шишкина Л.Н., Бурлакова Е.Б., Кишковский З.Н. «Биофизические и биохимические аспекты регуляции перекисного окисления липидов клеток винных дрожжей» // Биофизика. 1996. Т. 41. Вып. 6. С. 1239 -1246.

52. Shishkina L.N., Kushnireva E,V., Volodin V.V. «The study of the 20-hydroxyecdizone antioxidant properties in the model system» // Workshop on phytoecdysteroids. September 2 - 6 1996. Abstracts. Syktyvkar, 1996. P. 125 -126.

53. Шишкина Л.Н., Меньшов B.A., Брин Э.Ф. Перспективы использования модельной реакции окисления метилолеата для исследования кинетических свойств липидов // Изв. РАН. Сер. биол. 1996. № 3. С. 292 - 297.

54. Штамм Е.В., Шишкина Л.Н., Козлова Н.Б., Павловская H.H., Юров К.А., Смотряева М.А., Скурлатов Ю.И. «Анализ методов биотестирования в оценке качества воды» // Водоснабжение и санитарная техника. 1997. № 10. С. 18 - 21.

55. Кудяшева А.Г., Шишкина Л.Н., Загорская Н.Г., Таскаев А.И. «Биохимические механизмы радиационного поражения природных популяций мышевидных грызунов». СПб: Наука, 1997. 156 с.

56. Сахаровский В.В., Шишкина Л.Н., Меньшов В.А., Никитин Д.И. «Изменение состава липидов некоторых грамотрицательных бактерий в процессе роста» // Прикл. биохимия и микро-биол. 1997. Т. 33. № 4. С. 415 -418.

57. Shishkina L.N., Sakharovsky V.V., Men'shov V.A., Baider L.M., Nikitin D.I. «Changes of the structure and composition of lipids of gram-negative bacteria during growth» // X-th International Conference «Magnetic Resonance in Chemistry and Biology». Suzdal'98, Russia. Суздаль, 1998. С. 80-81.

58. Shishkina L.N., Kapich A.N., Goioshchapov A.N. «Interactions between the structural and biochemical properties of lipids in mycelium of xylotrophic basidiomycetes».// Там же. С. 181 -182.

59. Шишкина Л.Н., Кушнирева Е.В., Шелудченко Н.И., Джапябова М.И. «Антипероксидные свойства природных компонент клетки» // Тезисы X Междунар. конф. по химии органических и элементоорганических пероксидов. 16-18 июня 1998. М. С. В5.

60. Шишкина Л.Н., Кудяшева А.Г., Загорская Н.Г., Таскаев А.И. «Влияние радиоактивного загрязнения на характер распределения диких мышевидных грызунов по величинам антиокислительной активности липидов органов» // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38. Вып. 6. С. 924 - 935.

61. Шишкина Л.Н., Полякова Н.В., Мазалецкая Л.И., Беспалько О.Ф., Кушнирева Е.В. «Противолучевые свойства феноксана при низкоинтенсивном у-облучении в малой дозе» // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. № 2-3. С. 322 - 328.

62. Траубенберг С.Е., Шишкина Л.Н., Дремучева Г.Ф., Климова М.А. «Влияние веторона на антиоксидантный статус липидов сухих смесей для пончиков в процессе хранения» // Изв. ВУЗОВ. Пищевая технология. 1999. № 2-3. С. 37 -40.

63. Шевченко О.Г., Загорская Н.Г., Кудяшева А.Г., Шишкина Л.Н. «О некоторых особенностях регуляции антиоксидантной системы у диких видов мышевидных грызунов» // Экология. 1999. № 1.С. 73-76.

64. Шишкина Л.Н., Кушнирева Е.В., Беспалько О.Ф., Полякова Н.В. «Роль антиоксидантного статуса в формировании последствий биологического действия низкоинтенсивного излучения в малой дозе» II Радиац. биология. Радиоэкология. 2000. Т. 40. № 2. С. 162 -167.

65. Кудяшева А.Г., Шишкина Л.Н., Загорская Н.Г., Шевченко О.Г., Ивашевская Е.В. «Состав фосфолипидов печени полевок-экономок, обитающих в разных радиоэкологических условиях» // Радиац. биология. Радиоэкология. 2000. Т. 40. № 3. С. 327 - 333.

66. Шишкина Л.Н., Кушнирева Е.В., Смотряева М.А. «Использование параметров системы регуляции перекисного окисления липидов для оценки биологических последствий сочетанного действия облучения в малой дозе и твина-80» // Международ, экологич. конгресс «Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности». Санкт-Петербург, 14-16 июня 2000. БГТУ. СПб, 2000. Доклады. Т. 2. С. 500 - 504.

67. Шишкина Л.Н., Смотряева М.А. «Связь повреждения мембраны и ДНК с процессом перекисного окисления липидов при слабых воздействиях» // Биофизика. 2000. Т. 45. Вып. 5. С. 844 - 852.

68. Шишкина Л.Н., Кушнирева Е.В., Смотряева М.А. «Использование параметров системы регуляции перекисного окисления липидов для оценки биологических последствий сочетанного действия твина-80 и рентгеновского излучения в малой дозе» II Радиац. биология. Радиоэкология. 2001. Т. 41. № 3. С. 301 - 306.

69. Shishkina L.N., Kushnireva Ye.V., Smotryaeva М.А. «The combined effect of surfactant and acute irradiation at low dose on the lipid peroxidation process in tissues and DNA content in blood plasma of mice» //Oxidation communications. 2001. V. 24. N 2. P. 276 - 286.

70. Traubenberg S., Shishkina L., Glazunova M. «The Influence of Vetoron Bioadditive on the Antioxidant Status of Doughnut Dry Mixes During Storage» //Genie des Produits et Formulation, Recents of Progres en Genie des Procedes. 2001. V. 15(84). P. 127 - 133.

71. Шишкина Л.Н., Хрустова H.B. «Кинетические свойства липидов в реакциях автоокисления» // Тез. докл. ХШ Симпоз. «Современная химическая физика». Туапсе, 2001. С. 66.

72. Шишкина Л.Н., Капич А.Н. «Регуляция процессов перекисного окисления липидов в мицелии дереворазрушающих грибов белой и бурой гнили» // Современная микология в России. Тез. докл. Первого съезда микологов. М.: Национ. академия микологии, 2002. С. 157.

73. Шевченко О.Г. Шишкина Л.Н., Кудяшева А.Г. Влияние популяционных факторов на состав фосфолипидов различных тканей полевок-экономок (Microtus oeconomus) природных популяций // Ж. эволюц. биохимии и физиологии. 2002. Т. 38. № 2. С. 169 - 175.

74. Урнышева В.В., Гуляева О.Н., Кушнирева Е.В., Шишкина Л.Н. Влияние антиоксидантного статуса на характеристики липидов в тканях животных после острого облучения в сублетальных дозах // Радиац. биология. Радиоэкология. 2002. Т. 42. № 5. С. 481 - 487.

»-7574

Подписано в печать 24 С(ЖчЖ£003 г. Формат 60x84/16. Заказ № У.?Гираж/$0вкз. П.л '¿. '7Ь Отпечатано в РИИС ФИАН с оригинал-макета заказчика. 119991 Москва, Ленинский проспект, 53. Тел. 13251 28

Содержание диссертации, доктора химических наук, Шишкина, Людмила Николаевна

Список сокращений

Введение

Материалы и методы

Глава 1. Кинетические характеристики липидов тканей животных в реакциях автоокисления

Глава 2. Роль антиоксидантного статуса в формировании радиобиологических последствий облучения млекопитающих в зависимости от тяжести лучевого поражения

2.1. Вклад антиоксидантов в обеспечение радиорезистентности млекопитающих при остром лучевом поражении

2.2. Роль антиоксидантного статуса в формировании последствий биологического действия излучения в малых дозах

Глава 3. Физико-химическая системы регуляции перекисного окисления липидов в клетках микроорганизмов

3.1. Роль процессов перекисного окисления липидов в жизнедеятельности прокариот

3.2. Роль параметров системы регуляции перекисного окисления липидов в токсигенизации среды условно-патогенной микрофлорой

3.3 Регуляция процессов перекисного окисления липидов в дрожжевых клетках

3.4 Перекисное окисление липидов и его регуляция в мицелии ксилотрофных базидиомицетов

Глава 4. Взаимосвязь между параметрами системы регуляции перекисного окисления липидов в норме и при действии повреждающих факторов

4.1 Влияние интенсивности окислительных процессов и обеспеченности клеток микроорганизмов и тканей животных антиоксидантами на взаимосвязь между параметрами системы регуляции перекисного окисления липидов

4.2. Влияние мощности и дозы ионизирующего излучения на взаимосвязь между параметрами системы регуляции перекисного окисления липидов

4.3. Воздействие химического токсиканта на состояние процессов перекисного окисления липидов в тканях мышей 277 Заключение 291 Выводы 327 Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ АО - антиоксидант, антиоксидантный АОА - антиокислительная активность АЛА - антипероксидная активность АПС - арахисовая питательная среда АСД - абсолютно сухие дрожжи KJI - кардиолипин

ЛВС - лиофильно-высушенная среда

ЕЛОФЛ - сумма более легкоокисляемых фракций фосфолипидов ЛФХ - лизоформы фосфолипидов ОЛ - общие липиды

ПАВ - поверхностно-активные вещества ПОЛ - перекисное окисление липидов РПН - ранняя преходящая недееспособность СВ - сухое вещество СМ - сфингомиелин СОД - супероксидоксидаза

ТБК-АП (ТБК-активные продукты) - продукты, реагирующие тиобарбитуровой кислотой

ЕТОФЛ - сумма более трудноокисляемых фракций фосфолипидов

ТФ - токоферол

ФГ - фосфатидилглицерин

ФИ - фосфатидилинозит

ФК - фосфатидная кислота

ФЛ - фосфолипиды

ФС - фосфатидилсерин

ФХ - фосфатидилхолин

ФЭ - фосфатидилэтаноламин

ХС - холестерин

ЦНС - центральная нервная система

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности функционирования физико-химической системы регуляции перекисного окисления липидов в биологических объектах разной степени сложности в норме и при действии повреждающих факторов"

В связи с развитием мембранологии в начале 70-х годов началось активное изучение регуляторной роли липидов в норме и при развитии многих патологий. Общепризнано, что липиды выполняют не только структурные и барьерные функции, но и являются специфическими регуляторами внутриклеточных процессов [72, 202, 226, 371, 515]. Фосфолипиды (ФЛ), одни их важнейших структурных элементов мембранной системы клетки, участвуют в проведении биопотенциала, регуляции иммунологических реакций и других важнейших метаболических процессов [51, 52, 159, 202, 266, 371, 387]. Было установлено, что мембрана является плейотроп-ной, кооперативной системой, изменения в которой следует рассматривать в терминах теории слабых взаимодействий. Неудивительно, что рядом авторов мембрана, наряду с ДНК, начала рассматриваться как одна из мишеней действия облучения на клетку [437, 438, 667]. Изменения состава ФЛ, их упорядоченности и упаковки в бислое играют существенную роль в процессах адаптации клеток к окружающим условиям [21, » 226, 386].

Уже в 50-х годах появилась гипотеза о важности окислительных реакций в липидах для развития лучевого поражения и злокачественного роста [370, 426]. Позже было установлено, что процесс перекисного окисления липидов (ПОЛ) протекает во всех типах мембран высших эукариот и участвует в регуляции клеточного метаболизма как в норме, так и при развитии патологических процессов. Стационарность ПОЛ в интактной мембране обеспечивается физико-химической системой регуляции окислительных реакций в липидах, параметрами которой являются антиокислительная активность (АОА) и состав липидов, способность их к окислению, структурные переходы в компонентах мембран [22, 468, 470]. Было показано также, что эта система играет существенную роль в процессах опухолевого роста, нейродегенеративных, кардиоваскулярных и других патологиях [302,305,470, 601].

К началу наших исследований практически отсутствовали данные о кинетических свойствах липидов в реакциях автоокисления, единичные работы были посвящены изучению процессов ПОЛ в клетках прокариот и грибов [46, 397], не была ясна роль перечисленных выше параметров физико-химической системы регуляции и взаимосвязь между ними в биологических объектах разной степени сложности в норме, не изучен вклад параметров этой системы в обеспечение устойчивости биологических объектов к действию повреждающих и экологически неблагоприятных факторов, практически отсутствовали сведения о состоянии процессов ПОЛ в тканях мышевидных грызунов, обитающих в разных радиоэкологических условиях (техногенное радиоактивное загрязнение, повышенный естественный радиационный фон). Актуальность и важность исследований в этом направлении обусловлены поиском подходов к систематическому анализу механизма регуляции процессов ПОЛ в разных биологических объектах, необходимостью детального изучения биофизических механизмов взаимодействия клеток со средой, исследования взаимосвязей в тканях и баланса функций в организме для оценки биологических последствий воздействия повреждающих факторов в малых дозах и при низких интенсивностях, выработки стратегии и поиска терапевтических средств при действии ионизирующего излучения с низкой мощностью дозы и потребностей биотехнологии.

В связи с изложенным целью данной работы явилось изучение особенностей функционирования физико-химической системы регуляции процессов ПОЛ в норме и при действии повреждающих факторов в биологических объектах разной степени сложности: клетки микроорганизмов (прокариоты, дрожжи, мицелий базидиомицетов), ткани лабораторных грызунов и животных из природных популяций.

В соответствии с этим задачами работы являлись: разработать модель и изучить кинетические характеристики липидов, выделенных из разных биологических объектов, обусловливающих их участие в реакциях низкотемпературного автоокисления; исследовать взаимосвязь между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках грамотрицательных бактерий, дрожжей и мицелия ксилотрофных базидиомицетов разных таксономических групп и выявить их роль в процессах взаимодействия клеток микроорганизмов со средой культивирования; исследовать вклад параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в обеспечение природной радиорезистентности животных разных видов и линий в широком диапазоне доз облучения и их роль в репарации мембран после действия ионизирующего излучения в минимально летальных дозах; изучить чувствительность и способность к нормализации параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях животных, различающихся обеспеченностью антиоксидантами (АО), в отдаленные сроки после воздействия ионизирующего излучения в широком диапазоне доз и интенсивности, а также после воздействия химических токсикантов; провести сравнительное исследование взаимосвязей между параметрами системы антиоксидантной (АО) защиты, относящимися к разным субклеточным компартментам, изучить взаимосвязи между обобщенными показателями состава ФЛ в клетках и тканях выше перечисленных биологических объектов в норме и после действия повреждающих и экологически неблагоприятных факторов. сопоставить функционирование физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях лабораторных грызунов и животных, обитающих в природной среде.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Способность липидов из клеток микроорганизмов и тканей животных участвовать в реакциях низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи обусловлена кинетическими характеристиками липидов: АОА липидов; степень торможения окисления (СТО) липидами метилолеата; количество пероксидов в липидах; антипероксидная активность (АПА), т.е. способность разлагать перок-сиды на молекулярные продукты без образования свободных радикалов.

Научная новизна: Впервые показано, что участие липидов в реакциях низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи обусловлено кинетическими характеристиками липидов (АОА и АЛА, СТО метилолеата, количеством пероксидов в липидах) и зависит от интенсивности процесса окисления.

Экспериментально доказано, что в биологических системах, липиды которых проявляют преимущественно прооксидантные свойства в реакциях низкотемпературного автоокисления и характеризуются относительно высокой интенсивностью процессов ПОЛ (клетки грамотрицательных бактерий, дрожжей и мицелия дереворазрушающих грибов; селезенка, эритроциты крови и головной мозг лабораторных животных) ведущим звеном физико-химической системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим их функционирование в норме и в ответ на повреждающее воздействие, является состав липидов и степень их ненасыщенности. В печени животных, липиды которой обладают преимущественно высокой АОА и характеризуются наиболее низкой интенсивностью ПОЛ среди исследованных биологических объектов, ведущим звеном системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим функционирование в норме и при действии неблагоприятных экологических факторов, является АОА липидов.

Впервые показана in vivo нелинейность изменения параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях животных как при радиационных воздействиях в малых дозах в зависимости от дозы облучения и ее мощности, так и при наличии химических токсикантов в низких дозах в питьевой воде животных в зависимости от их суммарной концентрации. Установлена высокая чувствительность параметров системы регуляции ПОЛ к действию низкоинтенсивного облучения и химических токсикантов в малых дозах. Это свидетельствует об определяющей роли мембран как координатора регуляции окислительных реакций при воздействии слабых повреждающих факторов.

Впервые установлены скоординированные изменения параметров системы АО защиты, относящихся к разным субклеточным компарт-ментам, в клетках микроорганизмов и тканях животных; обнаружена взаимосвязанность АОА липидов с биофизическими характеристиками, отражающими структурное и физиологическое состояние органов; показано наличие корреляционных взаимосвязей между обобщенными показателями состава ФЛ, отражающими окисляемость липидов и структурное состояние мембранной системы клетки или тканей, масштаб и направленность которых обусловлены кинетическими свойствами липидов и обеспеченности их АО. Совокупность экспериментальных данных и анализ литературы позволили сформулировать положение о функционировании процессов ПОЛ мембранной системы клетки и органа как единого целого и сделать вывод как об общности механизма регуляции клеточного метаболизма окислительными реакциями в липидах независимо от сложности биологического объекта, так и о существовании физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях. Предложена схема взаимосвязей между параметрами этой системы.

Установлена общность функционирования физико-химической системы регуляции ПОЛ в тканях лабораторных животных и животных, обитающих в природной среде.

Экспериментально доказанная нелинейность изменения параметров системы регуляции ПОЛ при воздействии неблагоприятных экологических факторов химической и радиационной природы; существенное изменение характера распределения диких мышевидных грызунов по величинам АОА липидов их печени и мозга в зависимости от радиорезистентности вида, степени радиоактивной загрязненности участка отлова и времени действия радиационного фактора позволяют прогнозировать возможность ревизии таких понятий в нормировании, как "предельно допустимая концентрация" и оценка риска от экологических загрязнений.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Объекты исследования

Основным предметом исследования являлись липиды, выделенные из следующих биологических объектов:

1. олиготрофные и евтрофные бактерии Renobacter vacuolatum, Flectobacillus major WKM-859, Pseudomonas fluorescens, Methylobacterium organophilum 220, Arcocella aquatica 502, Deinococcus radiodurans 1422; клетки бактерий были предоставлены для исследований сотрудниками ИНМИ РАН (зав. лаб. д.б.н., проф. Д.И. Никитин);

2. среды после роста условно-патогенных штаммов бактерий Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Citrobacter freundii 1922; культивирование бактерий проводилось аспиранткой МГУПП О.Г. Лысюк и инженером Е.В. Идрисовой в Институте эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи (зав. лаб. к.м.н. И.И. Самойленко);

3. штаммы дрожжевых клеток Saccharomyces cerevisiae (дикий тип, гаплоидные и диплоидные), Pichia guillermondii (гаплоидные и диплоидные), Pichia pinus (гаплоидные и диплоидные) (предоставлены для исследований сотрудниками лаборатории радиационной биофизики Биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, зав. лаб. д.б.н., проф. Ю.Б. Кудряшов); «Виерул» (Shizosaccharomyces pombe), КП-1 (Sizosac-charomyces acidodevoratus), Шампанская-21 и сухие шампанские дрожжи СШД (обе расы Saccharomyces oviformis), пленочные дрожжи Х-96К и X-41В (Saccharomyces oviform, cheres), дрожжи Т-198, Т-197, 32, Т-8 (Saccharomyces vini) (коллекция кафедры «Технология продуктов переработки винограда МГУПП); Candida maltosa (культивирование клеток проводили аспиранты КХТИ им. С.М. Кирова З.Ш. Мингалеева и С.Е. Сметанина во ВНИИсинтезбелок);

4. мицелий ксилотрофных базидиомицетов: Panus tigrinus ИБК-13, Gloeophyllum sepiarium ВМК F 708, Fomes fomentarius M71, Ganoderma lucidium Ml48, Laetiporus sulphureus M131, Piptoporus betulinus M60, Shizophyllum commune Ml4, Serpula sclerotiorum Ml8 (выращивание мицелия проведено г.н.с. Института микробиологии АН Беларуси, д.б.н. А.Н. Капичем);

6. печень катрана (предоставлена для исследования сотрудниками Объединения «Грузбиохимфармпрепараты», зав. лаб. к.б.н. А.В. Клочко); ткани и кровь мышевидных грызунов, обитающих в природных условиях (совместные исследования в рамках договора о научно-техническом содружестве с Институтом биологии Коми НЦ УрО РАН).

Биофизические и биохимические методы

Липиды из исследуемых объектов выделяли по методу Блая и Дайе-ра в модификации Кейтса [196]. В некоторых экспериментах экстракцию липидов осуществляли смесью хлороформ:эфир (1:1, по объему). Качественный и количественный состав фосфолипидов (ФЛ) определяли методом ТСХ на силикагеле типа G или Н (фирма Sigma), используя системы растворителей хлороформ/метанол/ледяная уксусная кислота/вода в соотношениях 50:30:8:4 или 60:50:1:4 [42]. Проявление хроматограмм проводили в парах йода. После удаления пятен с пластинки и сжигания отдельных фракций ФЛ хлорной кислотой о количестве неорганического фосфата судили по интенсивности образования фосфорномолибденового комплекса в присутствии аскорбиновой кислоты спектрофотометрически при 810 нм на спектрофотометре DU-50 (фирма «Вескшап», США). Для построения калибровочных прямых использовали калий фосфорнокислый однозамещенный марки ос.ч. Помимо анализа доли основных фракций ФЛ, оценивали обобщенные показатели состава липидов: содержание ФЛ в составе общих липидов (%ФЛ); отношение фосфатидилхолин/фос-фатидилэтаноламин (ФХ/ФЭ) и соотношение сумм более легко (ЛО)- к более трудноокисляемым (ТО) фракциям ФЛ (ЕЛОФЛ/ХТОФЛ). Последнее вычисляли по формуле: ЕЛОФЛ/ГГОФЛ = (ФИ + ФС + ФЭ + КЛ + ФК)/(ЛФХ + СМ + ФХ), где ФИ - фосфатидилинозит, ФС - фосфатидил-серин, КЛ - кардиолипин, ФК — фосфатидная кислота, ЛФХ - лизоформы ФЛ, СМ — сфингомиелин.

Содержание стеринов определяли спектрофотометрически при 625 нм по методу [673]. Содержание а-токоферола (ТФ) в липидах определяли спектрофлуориметрически по методу [503]. Интенсивность флуоресценции измеряли на спектрофлуориметре SP-850 фирмы Hitachi (Япония) при X возбуждения 323 нм и X испускания 295 нм. Для построения соответствующих калибровочных прямых использовали холестерин и а-ТФ фирмы «Serva» (ФРГ). Суммарную ненасыщенность липидов тканей определяли методом озонирования [322] с помощью анализатора двойных связей DBA (фирма «АММО», ИХФ РАН) при длине волны 254 нм в инертных по отношению к озону растворителях (CCI4, CHCI3). В качестве стандарта использовали сцинтилляционный стильбен. Количество белка в плазме крови и гомогенатах органов определяли с помощью модифицированного биуретового метода [573]. Содержание продуктов, взаимодействующих с 2-тиобарбитуровой кислотой, анализировали по методу [370] с добавлением в среду инкубации 10 мкл 0,01%-ного спиртового раствора ионола [443]. Уровень сульфгидрильных групп в тканях определяли по методу Элмана в модификации Седлака [663]. Гидролазную активность М§2+-зависимой АТФазы определяли рН-метрическим методом [669.]

Величину АОА липидов определяли на метилолеатной окислительной модели [63] по способности липидов тормозить термическое автоокисление метилолеата при 37,0° ± 0,1° С. Процесс окисления протекал в кинетической области. За ходом окисления следили по количеству пероксидов, уровень которых определяли йодометрически по методу [39] или в соответствии со стандартной методикой ГОСТ 26593. За величину периода индукции принимали время, в течение которого концентрация пероксидов достигала значения 0,02 ммоль/г. Модельный субстрат окисления - метилолеат - предварительно очищали перегонкой в вакууме. Однако поскольку при определении уровня АОА липидов приходилось работать с разными партиями метилолеата, имеющих разную начальную скорость зарождения цепей (W0), обусловленную вариациями как содержания примесей метиллинолеата, так и начального количества пероксидов в перегнанном метилолеате, то все полученные результаты приведены к стандартным значениям. Для определения скорости зарождения цепей в разных партиях метилолеата использовали метод ингибиторов, т.е. термическое окисление метилолеата в присутствии ионола. Соответствующая калибровочная прямая приведена на рис. 1. Величину АОА вычисляли по формуле:

АОА = [(т опыт - т0)/С] х Wo/Wo станд., где Топыт - период индукции окисления растворов липидов в метилолеате, т0 - период индукции окисления чистого метилолеата, Wo ставд. - скорость зарождения цепей стандартного метилолеата, Wo - скорость зарождения цепей в опытной партии субстрата. В качестве стандарта выбран метилолеат, скорость зарождения которого равна 2,91x10'10 М.с"1 , а период индукции окисления 20 час.

Рис. 1. Калибровочная прямая для определения скорости зарождения радикалов по величине периода индукции окисления метилолеата

Т= 37° С)

Разделение тканей на органеллы осуществляли методом дифференциального центрифугирования. Выделение ядер проводили по методу [481]. Чистоту ядерной фракции контролировали микроскопически, окрашивая мазки метиловым зеленым пиронином. Количество клеток печени, синтезирующих ДНК, определяли методом радиоавтографии [163].

Кровь отбирали в пробирки, обработанные 5%-ным раствором цитрата натрия. Кровь разделяли на компоненты центрифугированием [462].

Структурное состояние разных областей мембран оценивали методом слабосвязанного парамагнитного зонда [236]. Для этих целей использовали стабильные нитроксильные радикалы, локализующиеся в различных областях мембран: 2,2,6,6-тетраметил-4-каприлоилоксипиперидин-1-оксил (зонд 1, локализуется в более гидрофобных областях ФЛ бислоя [113]); 5,6-бензо-2,2,6,6-тетраметил-1,2,3,4-тетрагидро-у-карболин-3-ок-сил (зонд 2, локализуется в более гидрофильных областях липидной компоненты мембран, т.е. в липидах, непосредственно «прилегающих» к мембранным белкам [41]); 2,2,4,5,5-пентаметил-1-гидрокси-3-имидазолин

-3-оксид (зонд 3, химические свойства которого [498] позволяют предположить локализацию по всему объему ФЛ бислоя). Работа с зондами осуществлялась в соответствии с разработанным для клеточных органелл методом [66, 116]. Зонды для исследования были предоставлены с.н.с. ИБХФ РАН, к.б.н. А.Н. Голощаповым. Регистрацию спектров ЭПР проводили на радиоспектрометрах ЭПР Е4 (Varian), (фирма Brucker, ФРГ) и Radiopan Sex-2544 (Польша). Времена вращательной корреляции зондов рассчитывали по общепринятой для быстро вращающихся зондов формуле [236]. Структурные формулы зондов, типичный спектр ЭПР и формула для расчета времен вращательной корреляции приведены на рис. 2.

Состояние тканей мышей оценивали с помощью метода ПМР [286] на импульсном ЯМР-релаксометре «Minispec рс-120» (фирма «Brucker», ФРГ) при частоте 20 мгц и температуре 30°С. Измерения проведены сотрудниками группы с.н.с. ИХФ РАН, к.физ.-мат.н. Л.И. Мурзы. Электронные спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре «Specord UV-VIS» (фирма «Karl Zeiss», ГДР).

Работа с животными

Острое рентгеновское облучение мышей проводили на установке РУТ-200-20-3. Режим работы: 210 кв, 15 мА. фильтр Си-0.5 мм, мощность дозы 44 - 47 Р/мин. Острое рентгеновское облучение крыс, золотистых хомяков и морских свинок проводили на установке РУП-1 в ИПЭ им. А.Н. Северцова РАН. Режим работы: 190 кВ, 15 мА, фильтр Си 0,5 мм + А1 0,75 мм, мощность дозы 52,5 Р/мин. Крыс в дозе 500 Гр подвергали воздействию электронов высоких энергий на линейном ускорителе ЛУЭ-8 при мощности дозы 50 Гр/с в ГНЦ Институт биофизики МЗ РФ. Мышей в дозе 15 сГр с разной мощностью у-излучения облучали на установке ГУТ-Со-60. Мощность дозы 0,01 сГр/мин (продолжительность облучения 25 час), 0,25 сГр/мин (продолжительность облучения 1 час) и 9 сГр/мин

C7K,5-cdck >Q

N-Q'

ЗондЗ о

Тс = 6,5 ЛН (■ vr

-i о

If-i - 1)10 сек

Рис.2. Структурные формулы и типичный спектр ЭПР использованных в работе спиновых зондов и формула для расчета их времен вращательной корреляции продолжительность облучения 1 мин 40 сек). Мышей облучали в клетках при сохранении корма и питья при мощности дозы 0,01 сГр/мин и только питья - при 0,25 сГр/мин. Мышей опытных и контрольных групп при забое либо разбивали на подгруппы по 2 - 4 животных в каждой, либо анализировали показатели у индивидуальных животных.

Добавление черного щелока (отходы целлюлозного производства) в питьевую воду мышам SHK (самки) проводили ежедневно в концентрациях 0,005 %; 0,015 % и 0,05 %.

Общее количество животных в экспериментах 10 000 шт.

Статистическая обработка результатов

Статистическую обработку результатов проводили общепринятыми методами вариационной статистики [37, 251] и с помощью пакета компьютерных программ KINS [55]. На рисунках и в таблицах экспериментальные данные представлены в виде средних арифметических с указанием средних квадратичных ошибок среднего арифметического. Вариабельность показателя оценивали как отношение средней квадратичной ошибки среднего арифметического к величине среднеарифметического значения показателя для анализируемой группы и выражали в процентах [251]. Для оценки степени воздействия хронического низкоинтенсивного излучения на состояние природных популяций мышевидных грызунов использовали биометрические методы анализа, поскольку характерным свойством биологических признаков является вариабельность их величины в определенных пределах [591].

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Шишкина, Людмила Николаевна

выводы

1. С помощью разработанной модели показано, что кинетические характеристики липидов (ЛОА и АПА липидов, степень торможения окисления ими метилолеата, начальное количество пероксидов) обусловливают их участие в процессах низкотемпературного автоокисления на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи. Установлено, что липиды грамотрицательных бактерий, мицелия дереворазрушающих грибов белой гнили, эритроцитов крови и головного мозга животных проявляют только прооксидантные свойства на метилолеатной окислительной модели независимо от вида и скорости зарождения радикалов в модельной системе; липиды дрожжевых клеток, мицелия дереворазрушающих грибов бурой гнили и селезенки животных могут обладать как антиокси-дантными, так и прооксидантными свойствами в зависимости от вида и условий эксперимента; липиды печени лабораторных животных обладают преимущественно антиоксидантными свойствами и отличаются высокой вариабельностью величины АОА как у отдельных особей, так и между группами животных.

2. Экспериментально доказано наличие физико-химической системы регуляции ПОЛ в клетках микроорганизмов: грамотрицательные бактерии, дрожжи разных таксономических групп и штаммов, мицелий ксилотрофных базидиомицетов разных таксономических групп. Обнаружена высокая лабильность антиоксидантных свойств и состава липидов микроорганизмов в зависимости от сезона и среды культивирования. Установлены взаимосвязанные изменения антиоксидантных свойств и состава липидов в клетках грамотрицательных бактерий и дрожжей и в среде культивирования, что обусловливает появление неспецифической токсигенизации липидсодержащих сред при росте на них условнопатогенной микрофлоры и свидетельствует о важной роли процессов ПОЛ в обеспечении функционирования клеток микроорганизмов.

3. Впервые обнаружены скоординированные изменения параметров системы антиоксидантной защиты, относящихся к разным субклеточным компартментам, в клетках микроорганизмов и тканях животных, показано наличие корреляционных взаимосвязей между обобщенными показателями состава фосфолипидов, характеризующими окисляемость липидов и отражающими структурное состояние мембранной системы клетки или ткани, обнаружена существенная зависимость масштаба и направленности этих корреляционных взаимосвязей от кинетических свойств липидов и обеспеченности их АО. Совокупность экспериментальных и литературных данных позволяют сформулировать положение о функционировании процессов ПОЛ мембранной системы клетки и органа как единого целого. Это обусловливает общность механизма регуляции клеточного метаболизма окислительными реакциями в липидах биологических объектов разной степени сложности и свидетельствует о существовании физико-химической системы регуляции ПОЛ на клеточном и органном уровнях. Предложена схъма взаимосвязей между параметрами этой X системы.

4. Установлена общность кинетических свойств липидов и однотипность взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ в органах лабораторных животных и животных природных популяций (дикие мышевидные грызуны, катран). Это позволяет предположить, что система антиоксидантной защиты достаточно устойчива и способна сохранять видовую специфичность биофизических и биохимических параметров на клеточном и органном уровнях для осуществления регуляции ПОЛ в тканях животных природных популяций. Более высокая вариабельность АОА липидов органов и относительно низкие значение этого показателя в печени вследствие высокой степени ненасыщенности липидов, очевидно, являются необходимым условием для поддержания гомеостаза и нормального функционирования клеточных систем в органах диких животных в среде обитания.

5. Впервые показано, что в биологических системах, липиды которых проявляют преимущественно прооксидантные свойства в условиях низкотемпературного автоокисления и характеризуются относительно высокой интенсивностью процессов ПОЛ (клетки грамотрицательных бактерий, дрожжей и мицелия дереворазрушающих грибов; селезенка, эритроциты крови и головной мозг лабораторных животных) ведущим звеном физико-химической системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим их функционирование в норме и при действии повреждающих факторов, является состав липидов и степень их ненасыщенности. Для липидов печени животных, обладающих достаточно высокой АОА и характеризующихся наиболее низкой интенсивностью ПОЛ среди всех исследованных биологических объектов, ведущим звеном системы регуляции ПОЛ, обеспечивающим функционирование в норме и при действии неблагоприятных экологических факторов, является АОА липидов.

6. Экспериментально показаны прямые корреляционные взаимосвязи между резистентностью 11 видов и линий животных и величиной АОА липидов органа, являющегося критическим при действии острого облучения в диапазонах доз, вызывающих костномозговую, кишечную или церебральную форму гибели. Показана важная роль физико-химической системы регуляции ПОЛ в репарации мембран после острого облучения животных в минимально летальных дозах. Вклад АОА липидов и эндогенных тиолов в обеспечении радиорезистентности организма зависит от тяжести лучевого поражения: исходный уровень АОА липидов является основным фактором в обеспечении радиорезистентности животных при низких дозах острого облучения и играет существенную роль в формировании биологических последствий низкоинтенсивного облучения в малой дозе.

9. Впервые показана in vivo нелинейность изменения параметров физико-химической системы регуляции ПОЛ (АОА липидов, содержание ТБК-активных продуктов, соотношение фракций фосфолипидов) в тканях животных как при радиационных воздействиях в малых дозах в зависимости от дозы облучения и ее мощности, так и при наличии химических токсикантов в питьевой воде животных в зависимости от их суммарной концентрации. Обнаружены существенные изменения вида распределения мышевидных грызунов, отловленных в зоне аварии на Чернобыльской АЭС, по величинам АОА липидов их печени и головного мозга в зависимости от радиорезистентности вида, степени радиоактивного загрязнения участка отлова и времени действия радиационного фактора. Высокая чувствительность параметров системы регуляции ПОЛ к действию низкоинтенсивного облучения в малых дозах и наличию химических токсикантов в питьевой воде свидетельствует об определяющей роли мембран как координатора регуляции окислительных реакций в липидах при воздействии слабых повреждающих факторов.

10. Предположено, что изменение направленности и масштаба взаимосвязей между параметрами физико-химической системы регуляции ПОЛ при действии повреждающих факторов является информационным сигналом, определяющим выбор адаптационной стратегии организма в неблагоприятных условиях обитания. Обнаруженная высокая чувствительность показателей липидного обмена эритроцитов крови животных к слабым воздействиям позволяет прогнозировать возможность их использования в качестве тестов для оценки биологических последствий воздействия неблагоприятных экологических факторов (низкоинтенсивное облучение, наличие химических токсикантов в питьевой воде в низких концентрациях).

Библиография Диссертация по биологии, доктора химических наук, Шишкина, Людмила Николаевна, Москва

1. Абдвахитова А.К., Пархоменко И.М., Соколова Т.Н. Исследование изменений клеточных мембран фибробластов китайского хомячка при лазерном и рентгеновском облучении с помощью флуоресцентного зонда //Радиобиология. 1982.№2. С. 155 159.

2. Абдрашитова С.А., Абдуллина Г.Г., Илялетдинов А.Н. Роль арсени-тов в перекисном окислении липидов в клетках Pseudomonas putida, окисляющих арсенит // Микробиология. 1986. Т. 55. Вып. 2. С. 212 216.

3. Абдрашитова С.А., Абдуллина Г.Г., Илялетдинов А.Н., Орлов В.К. Влияние арсенита на перекисное окисление липидов и жирнокислотный состав клеток Algaligenes eutrophus II Микробиология. 1988. Т. 57. Вып. 2. С. 231 -235.

4. Абдрашитова С.А., Мынбаева Б.Н., Абдуллина Г.Г., Айдарханов Б.Б., Илялетдинов А.Н. Взаимосвязь между окислением арсенита и липидов при развитии арсенитокисляющих микроорганизмов // Докл. АН СССР. 1990. Т. N 3. С. 737 740.

5. Абдрашитова С.А., Мынбаева Б.Н., Айдарханов Б.Б., Илялетдинов А.Н. Действие арсенита на перекисное окисление липидов и активность антиоксидантных ферментов у арсенитокисляющих бактерий // Микробиология. 1990. Т. 59. Вып. 2. С. 234 239.

6. Адамович В.Л., Меркушина О.С. Влияние малых доз радиации на биологические изменения в популяционных группировках мышевидных грызунов // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37. Вып. 3. С. 303 -311.

7. Алавердиева С., Кривова А. Антиоксидантный баланс в косметических средствах // Косметика & медицина. 1999. 1. N С. 11 15.

8. Алесенко А.В. Роль липидов в передаче информационных сигналов клеточной пролиферации и экспрессии онкогенов // Биоантиоксиданты: теоретические и прикладные аспекты / Под ред. У.К. Ибрагимова, Е.Б. Бурлаковой. Ташкент: ФАН, 1995. С. 83 112.

9. Алесенко А.В. Роль фосфолипидов в функциональной активности клеточного ядра. Автореф. дис. д-ра биол. наук. Черноголовка, 1987.49 с.

10. Алесенко А.В. Функциональная роль сфингозина в индукции пролиферации и гибели клеток // Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 1. С. 75 82.

11. Алесенко А.В., Бурлакова Е.Б. Роль фосфолипидов в синтезе ДНК в клетках млекопитающих // Докл. АН СССР. 1976. Т. 229. N 1. С. 199 202.

12. Алесенко А.В., Бурлакова Е.Б., Пантаз Э.А. Влияние сфингомие-лина на активность РНК-полимераз в ядрах нормальной и регенерирующей печени крыс // Биохимия. 1984. Т. 49. вып. 4. С. 621 628.

13. Алесенко А.В., Дубинская Н.И., Бурлакова Е.Б. Суточные колебания антиокислительной активности липидов и суточный ритм митозов в органах интактных мышей // Биофизика. 1971. Т. 16. N 3. С. 476 481.

14. Алесенко А.В., Красильников В.А., Бойков П.Я. Участие сфинго-миелина в образовании связи ДНК с ядерным матриксом // Докл. АН СССР. 1983. Т. 273. N 1. С. 231 234.

15. Алесенко А.В., Пальмина Н.П. Роль липидов в функциональной активности и биосинтезе ДНК в нормальных и опухолевых клетках // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М: Наука, 1982. С. 84- 100.

16. Алесенко А.В., Соловьев А.С., Терентьев А.А., Хренов А.В. Роль продуктов сфингомиелипового цикла в развитии апоптоза, индуцированного через рецепторы Fas, и фактора некроза опухоли альфа // Изв. РАН. Сер. биол. 1998. N2. С. 157 166.

17. Алешина Н.П., Бурлакова Е.Б., Терехова С.Ф. Влияние фосфолипидов на окисление метилового эфира олеиновой кислоты // Биофизика. 1976. Т. XXI. N 5. С. 944 946.

18. Алмагамбетов К.Х., Горская Е.М., Бондаренко В.М. Транслокация кишечной микрофлоры и ее механизмы // Ж. микробиол., эпидемиол., иммунолог. 1991. N 10. С. 74 79.

19. Антонов В.Ф., Смирнова Е.Ю., Шевченко Е.В. Липидные мембраны при фазовых превращениях. М.: Наука, 1992. 136 с.

20. Аристархова С.А., Архипова Г.В., Бурлакова Е.Б., Гвахария В.О., Глущенко Н.Н., Храпова Н.Г. Регуляторная роль взаимосвязи изменений в концентрации антиоксидантов и составе липидов клеточных мембран // Докл. АН СССР, 1976. Т. 228. N 1. С. 215-218.

21. Аристархова С.А., Бурлакова Е.Б., Заяц Т.Л. Перекисное окисление липидов в субклеточных органеллах печени при термическом ожоге // Вопр. мед. химии. 1983. Т. 29. Вып. 4. С. 102 106.

22. Аристархова С.А., Бурлакова Е.Б., Храпова Н.Г. К вопросу о взаимосвязи природных антиоксидантов в липидах // Биофизика. 1974. Т. 19. N. 4. С. 688-691.

23. Архипова Г.В. Исследование состава липидов различных по радиочувствительности органов и клеточных органелл на ранних стадиях лучевого поражения. Автореф. дис. канд. биол. наук. Пущино., 1975. 29 с.

24. Архипова Г.В., Бурлакова Е.Б. О роли изменений состава липидов при лучевом поражении и действии радиопротекторов // Радиобиология. 1974. Т. 14. N6. С. 828-832.

25. Атлас патоморфологических изменений у полевок-экономок из очагов локального радиоактивного загрязнения / К.И. Маслова, Л.Д. Материй, О.В. Ермакова, А.И. Таскаев. СПб: Наука, 1994. 192 с.

26. Ахрем А.А., Едимичева И.П., Зайцев А.А., Кисель М.А., Тимощук В.А., Шадыро О.И. Элиминирование ациламидов при радиационно-инициированной свободнорадикальной фрагментации сфингомиелина // Докл. АН СССР. 1991. Т. 316. N 4. С. 919 921.

27. Ахрем А.А., Кисель М.А., Шадыро О.И., Юркова И. JI. Радиа-ционно-индуцированная свободнорадикальная фрагментация биологически активных глицеридов//Докл. РАН. 1993. Т. 330. N 6. С. 716 718.

28. Бак 3., Александер П. Основы радиобиологии. М.: Изд-во иностр. лит., 1963. 500 с.

29. Барабой В.А., Орел В.Э., Карнаух И.М. Перекисное окисление и радиация / Отв. ред. Д.М. Гродзинского. Киев: Наук, думка, 1991. 256 с.

30. Батраков С.Г. Липиды стрептомицетов // Успехи соврем, биологии. 1983. Т. 96. Вып. 3(6). С, 366 381.

31. Башлыкова Л.А. Эколого-генетические процессы в популяциях мышевидных грызунов, обитающих в условиях радиоактивных загрязнений. Автореф. дис. канд. биол. наук. Сыктывкар, 2000. 20 с.

32. Безлепкин В.Г., Газиев А.И. ДНК-мембранные взаимодействия в клетках бактерий после у-облучения // Радиобиология. 1983. Т. ХХШ. Вып. 1. С. 3 -8.

33. Бейли Н. Статистические методы в биологии. М., Мир, 1964. 256 с.

34. Белони Ж., Авилов И.А., Громов Б.В. Hyphomicrobiumll Биол. науки. 1984. №6. С. 71 -75.

35. Березин И.В. Кинетика и химизм жидкофазного окисления цикло-гексана и н-гептана кислород воздуха под давлением: Автореф. дис. . канд. хим. наук. М.: Изд-во МГУ, 1953. 19 с.

36. Берри Д. Биология дрожжей. М.: Мир, 1985. 96 с.

37. Бинюков В.И. Исследование состояния и пространственной структуры компонентов бактериальных мембран методами инфракрасной и радиоспектроскопии: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1974. 28 с.

38. Биологические мембраны. Методы / Под ред. Дж. Б. Финдлея, У. Г. Эванза. М.: Мир, 1990. 424 с.

39. Богословская О.А., Андреев Л.В., Бурлакова Е.Б., Глущенко Н.Н., Конюхов В.Ф. Жирнокислотный состав клеток Escherichia coli и их выживаемость в воздухе // Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1984. № 12. С. 65 68.

40. Богословская О.А., Бурлакова Е.Б., Глущенко Н.Н., Конюхов В.Ф. Взаимосвязь устойчивости микробных клеток в воздухе с их фосфолипид-ным составом //Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1987. № 1. С. 6 8.

41. Богословская О.А., Бурлакова Е.Б., Глущенко Н.Н., Конюхов В.Ф., Скрыпин В.И. Роль системы перекисного окисления липидов Escherichiacoli в обеспечении их жизнеспособности в воздухе // Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1987. № 6. С. 22 25.

42. Богословская О.А., Бурлакова Е.Б., Глущенко Н.Н., Конюхов В.Ф., Храпова Н.Г. Роль антиокислителыюй активности липидов в обеспечении жизнедеятельности микробной клетки // Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1984. № 10. С. 24 26.

43. Богуславская JI.B., Бурлакова Е.Б., Кольцова Е.А., Максимов О.Б., Храпова Н.Г. Синергическое влияние фосфолипидов на антиоксидантную активность природных полигидроксинафтахинонов // Биофизика. 1990. Т. 35. С. 928 932.

44. Богуславская JI.B., Мищенко Н.П. Взаимодействие природного антиоксиданта эхинохрома с гидропероксидами в анаэробных условиях // Изв. АН СССР. Сер. хим. 1991. N 2. С. 329 333.

45. Богуславская Л.В., Храпова Н.Г., Максимов О.Б. Полигидрокси-нафтохиноны новый класс природных антиоксидантов // Изв. АН СССР Сер. хим. 1985. N 7. С. 1471 - 1476.

46. Болдырев А.А. Функциональная активность №,К-АТФазы тканей в норме и при патологиях // Укр. биохим. журн. 1992. Т. 64. N 5. С. 3 10.

47. Болдырев А.А., Лопина О.Д., Прокопьева В.Д. Мембранные липиды как регуляторы межбелковых взаимодействий // Нейрохимия. 1985. Т. 4. N 1. С. 80-95.

48. Большакова И.В., Лозовская Е.Л., Сапежинский И.И. Антиокси-дантные свойства ряда экстрактов лекарственных растений // Биофизика. 1997. Т. 42. Вып. 2. С. 480 483.

49. Бондарцев А.С. Трутовые грибы Европейской части СССР и Кавказа. М., Л.: Академия наук СССР, 1953. 1106 с.

50. Брин Э.Ф., Травин С. О. Моделирование механизмов химических реакций //Хим. физика. 1991. Т. 10. N 6. С. 830 837.

51. Броксрхоф X., Дженсен Р. Липолитические ферменты. М.: Мир, 1978. 280 с.

52. Бугаенко Л.Т. Химия высоких энергий // Росс. хим. ж. (Ж. Росс, хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 2000. Т. 44. № 4. С. 40-43.

53. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты и синтетические ингибиторы радикальных процессов//Успехи химии. 1975. Т. 44. Вып. 10. С. 1871 1886.

54. Бурлакова Е.Б. Молекулярные механизмы действия антиоксидантов при лечении сердечно-сосудистых заболеваний // Кардиология. 1980. Т. XX. N 8. С. 48 52.

55. Бурлакова Е.Б. О возможной роли свободнорадикального механизма в регуляции размножения клеток // Биофизика. 1967. Т. 12. № 1. С. 82 88.

56. Бурлакова Е.Б. Эффект сверхмалых доз // Вест. РАН. 1994. Т. 64. № 5. С. 425 -431.

57. Бурлакова Е.Б., Алесенко А.В., Молочкина Е.М., Пальмина Н.П., Храпова Н.Г. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. М.: Наука, 1975. 211 с.

58. Бурлакова Е.Б., Бурлакова Е.В., Джалябова М.И., Молочкина Е.М. Антиокислительная активность липидов как физико-химический показатель состояния мембранных систем клетки // Биол. науки. 1976. № 6. С. 51 54.

59. Бурлакова Е.Б., Буробина С.А., Храпова Н.Г., Ядыкин Г.И. Хемилю-минесцентный метод изучения природных антиоксидантов в липидах // Биофизика. 1971. Т. XVI. Вып. 1. С. 39 43.

60. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н. Спиновые зонды в изучении мембран нормальных и раковых клеток // Метод спиновых зондов и меток / Под ред. Р.И. Жданова. М.: Наука, 1986. С. 212 225.

61. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н., Жижина Г.П., Конрадов А.А. Новые аспекты закономерностей действия низкоинтенсивного облучения в малых дозах // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. № 1. С. 26 34.

62. Бурлакова Е.Б., Горбань Н.И., Дзантиев Б.Г., Сергеев Г.Б., Эмануэль Н.М. Действие у-излучения на процесс окисления метилолеата в присутствии ингибиторов свободнорадикальных процессов // Изв. вузов. Химия и хим. технология. 1961. N 5. С. 751 754.

63. Бурлакова Е.Б., Греченко Т.Н., Соколов Е.Н., Терехова С.Ф. Влияние ингибиторов радикальных реакций окисления липидов на электрическую активность нейрона виноградной улитки // Биофизика. 1986. Т. 31. N5. С. 921-923.

64. Бурлакова Е.Б., Губарева А.Е., Архипова Г.В., Рогинский В.А. Модуляция перекисного окисления липидов биогенными аминами в модельных системах // Вопр. мед. химии. 1992. Т. 38. N 1. С. 17 20.

65. Бурлакова Е.Б., Джалябова М.И., Гвахария В.О., Глущенко Н.Н., Молочкина Е.М., Штолько В.Н. Влияние липидов мембран на активность ферментов // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: Наука, 1982. С. 113-140.

66. Бурлакова Е.Б., Джалябова М.И., Молочкина Е.М. Регуляция активности микросомального фермента фосфолипидами in vivo И Докл. АН СССР. 1976. Т. 227. N 4. С. 991 994.

67. Бурлакова Е.Б., Дзантиев Б.Г., Зефирова А.К., Сергеев Г.Б., Эмануэль Н.М. Термическое и радиолитическое окисление метилолеата // Изв. вузов. Химия и хим. технология. 1960. Т. III. N 2. С. 265 271.

68. Бурлакова Е.Б., Дзюба Н.М. Синтетические ингибиторы и природные антиоксиданты. Антиокислительная активность липидов печени мышей при облучении и радиозащитное действие ингибиторов свободно-радикальных процессов // Биофизика. 1966. Т. 11. N 1. С. 54 57.

69. Бурлакова Е.Б., Дзюба Н.М., Пальмина Н.П. Синтетические ингибиторы и природные антиоксиданты. I. Действие ингибиторов свободнора-дикальных процессов на антиокислительную активность липидов печени мышей // Биофизика. 1965. Т. XL N 5. С. 766 769.

70. Бурлакова Е.Б., Дзюба Н.М., Пальмина Н.П., Эмануэль Н.М. Антиокислительная активность липидов печение мышей при лучевой болезни и перевивном лейкозе и действие ингибиторов свободноради-кальных процессов//Докл. АН СССР. 1965. Т. 163. N 5. С. 1278 1281.

71. Бурлакова Е.Б., Конрадов А.А., Худяков И.В. Воздействие химических агентов в сверхмалых дозах на биологические объекты // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1990. N2. С. 184-193.

72. Бурлакова Е.Б., Крашаков С.А., Храпова Н.Г. Кинетические особенности токоферолов как антиоксидантов // Хим. физика. 1995. Т. 14. № 10. С. 151 182.

73. Бурлакова Е.Б., Кухтина Е.Н., Храпова Н.Г., Аристархова С.А. Взаимосвязь между количеством природных антиоксидантов и окисляемостью липидов печени мышей в норме и при введении а-токоферола // Биохимия. 1982. Т. 47. № 5. С. 822 826.

74. Бурлакова Е.Б., Мазалецкая Л.И., Шелудченко Н.И., Шишкина Л.Н. Ингибирующее действие смесей фенольных антиоксидантов и фосфатидилхолина // Изв. РАН. Сер. химич. 1995. № 6. С. 1053 1059.

75. Бурлакова Е.Б., Сторожок Н.М., Храпова Н.Г. Исследование роли функциональных групп в действии фосфолипидов как синергистов окисления // Биол. мембраны. 1990. Т. 7. N 6. С. 612 618.

76. Бурлакова Е.Б., Сторожок Н.М., Храпова Н.Г. О взаимосвязи активности антиоксидантов и окисляемости субстратов в липидах природного происхождения // Биофизика. 1988. Т. XXXIII. N 5. С. 781 786.

77. Бурлакова Е.Б., Сторожок Н.М., Храпова Н.Г., Наумов В.В., Кухтина Е.Н. Изучение аддитивного антиокислительного действия суммы природных антиоксидантов липидов // Вопр. мед. химии. 1990. Т. 36. Вып. 4. С. 72 74.

78. Бурлакова Е.Б., Храпова Н.Г. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты // Успехи химии. 1985. Т. 54. Вып. 9. С. 1540- 1558.

79. Бурлакова Е.Б., Эмануэль Н.М. Особенности действия меркамина и ингибиторов радикально-цепных процессов в реакциях, моделирующих окисление липидов // Докл. АН СССР. 1960. Т. 135. N 3. С. 599 602.

80. Бюллетень экологического состояния зоны отчуждения за первое полугодие 1995 г. / отв. ред. Н.П. Архипов. Чернобыль. 1995. 40 с.

81. Векслер B.C. Протонная магнитная релаксация тканей при ожоговом поражении в эксперименте и клинике. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 1985.24 с.

82. Векслер B.C., Найдич В.И. Влияние антиоксидантов на магнито-релаксационные характеристики тканей при экспериментальной ожоговой болезни//Докл. АН СССР. 1983. Т. 269. № 5. С. 1215-1217.

83. Векслер B.C., Найдич В.И., Втюрин Б.В., Туманов В.П., Каем Р.И. Исследование динамики развития отека в органах при экспериментальной ожоговой травме // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1983. № 4. С. 39 42.

84. Векслер B.C., Найдич В.И., Каем Р.И., Втюрин Б.В. Магнитная релаксация протонов неводных компонент ткани печени при экспериментальном термическом ожоге // Докл. АН СССР. 1983. Т. 268. № 6. С. 1486 1487.

85. Виноградов А.Д. Митохондриальная АТР-синтезирующая машина: пятнадцать лет спустя // Биохимия. 1999. Т. 64. Вып. 11. С. 1443 1456.

86. Винь Т.Д., Сваровская Л.И., Алтунина Л.К., Доан Ф.В., Шон Ч.Т., Хыонг М.Х. Деградация высоковязких нефтей месторождения Белый Тигр пластовой микрофлорой // Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности. СПб., 2000. Т. 2. С. 147 150.

87. Владимиров В.Г., Васильева И.Н., Шарова Л.А. Внеклеточная ДНК и ее значение для современной медицины // Клин, медицина и пато-физиол. 1998. № 1-2. С. 110-119.

88. Владимиров В.Г., Забелинский С.А., Михайличенко П.П. Фосфо-липиды головного мозга после облучения животных в высокой дозе // Радиобиология. 1990. Т. 30. Вып.1. С. 40-45.

89. Владимиров В.Г., Шарова JI.A. Содержание циклических нуклео-тидов и продуктов перекисного окисления липидов в головном мозге облученных мышей // Радиобиология. 1987. Т. 27. N 6. С. 786 789

90. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252 с.

91. Власов А.П., Кисель М.А., Шадыро О.И. Влияние продуктов радиационно-индуцированной свободнорадикальной фрагментации фосфолипидов и температуры на липидные мембраны // Биофизика. 2000. Т. 45. вып. 4. С. 666 670.

92. Войницкий В.М., Степанов Ю.В., Цудзевич Б.А., Кучеренко Н.Е. Содержание фосфолипидов и свободных жирных кислот в мембранах саркоплазматического ретикулума на раннем этапе поражения рентгеновским излучением//Радиобиология. 1989. Т. 29. N2. С. 151 153.

93. Воронина О.Ю., Семин Ю.А., Конев В.В., Дубовик Б.В. Физико-химические исследования состояния белковой и липидной фаз в мембранах синаптосом после облучения быстрыми нейтронами // Радиобиология. 1986. Т. 26. N 1.С. 17-21.

94. Воскресенский О.Н., Девяткина Т.А. // Вопр. питания. 1978. N 6. С. 30-35.

95. Габриэлян Э.С., Баджинян С.А., Петросян А.И., Вартанян Г.С., Погосян А.Г., Акопов С.Э. Исследование упругомеханических свойств эритроцитов и механизмов их изменений при облучении // Радиобиология. 1987. Т. 27. N 1. С. 78 81.

96. Гагарина А.Б., Некипелова Т.Д., Эмануэль Н.М. Кинетика ингибированного окисления и время достижения заданной глубиныпревращения углеводородов в области больших торможений // Хим. физика. 1983. N11. С. 1541 1547.

97. Гагарина А.Б., Некипелова Т.Д., Эмануэль Н.М. Кинетика ингибированного окисления в условиях автоускоренного протекания реакции // Хим. физика. 1983. N 12. С. 1666 1673.

98. Гагарина А.Б., Некипелова Т.Д., Эмануэль Н.М. О принципиально достижимой длительности торможения процессов автоокисления // Докл. АН СССР. 1982. Т. 264. N 6. С. 1412 1417.

99. Газиев А.И. ДНК-лигазы // Успехи соврем, биологии. 1974. Т. 78. N. 2(5). С. 171-187.

100. Гераськин С.А., Дикарев В.Г., Удалова А.А., Дикарева Н.С. Закономерности индукции малыми дозами ионизирующего излучения цитогенетических повреждений в корневой системе проростков ячменя // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. № 4. С. 373 383.

101. Гилева Э.А. Эколого-генетический мониторинг с помощью грызунов (Уральский опыт). Екатеринбург: Изд-во Уральского университета, 1997. 105 с.

102. Глущенко Н.Н., Образцов В.В., Орлов С.Н., Данилов B.C. Свободнорадикальное окисление липидов биологических мембран. II. К механизму регуляции автоокисления линолевой кислоты восстановленным глутатионом //Биофизика. 1974. Т. XIX. 193 196.

103. Голдфельд М.Г. Исследование биологических мембран и модельных систем с помощью иминоксильных стабильных радикалов: Автореф. дис. канд. хим. наук. М., 1970. 24 с.

104. Головастов В.В., Михалева Н.И., Кадырова Л.Ю., Несмеянова М.А. Основной фосфолипид Escherichia coli фосфатидилэтаноламин -необходим для продукции и секреции щелочной фосфатазы // Биохимия. 2000. Т. 65. Вып. 9. С. 1295 - 1304.

105. Головлева Л.А., Леонтьевский А.А. Биодеградация лигнина // Успехи микробиологии. 1990. Т. 24. Вып. 9. С. 128 155.

106. Гончаренко Е.Н. О биохимическом фоне радиорезистентности // Радиобиология. 1971. Т. 11. N 6. С. 811 824.

107. Гончаренко Е.Н., Джанумова Т., Жатькова Г.С., Кудрящов Ю.Б. Роль эндогенного дофамина в радиозащитном действии радиопротекторов // Докл. АН СССР. 1972. Т. 205. N 2. С. 465 468.

108. Гончаренко Е.Н., Кудрящов Ю.Б. Гипотеза эндогенного фона радиорезистентности. М.: МГУ, 1980. 176 с.

109. Гончаренко Е.Н., Орловский А.А., Антонова С.В., Рождественский Л.М. Влияние ионизирующего облучения в сверхвысокой дозе на содержание катехоламиновых медиаторов в различных отделах головного мозга крыс //Радиобиология. 1989. Т. 29. N 5. С. 709 711.

110. Граевская Б.М., Золотарева Н.Н. Исследование природы корреляций некоторых биохимических показателей тканей с радиочувствительностью животных // Радиочувствительность нормальной и опухолевой ткани. Алма-Ата: КазССР Наука, 1974. С. 149 153.

111. Граевская Б.М., Золотарева Н.Н. О механизмах, определяющих течение и исход воздействия ионизирующей радиации на организм // Радиобиология. 1991. Т. 31. N 5. С. 747 753.

112. Граевский Э.Я. Сульфгидрильные группы и радиочувствительность. М.: Атомиздат, 1969. 144 с.

113. Граевский Э.Я., Тарасенко А.Г. Тиольная концепция радиочувствительности // Радиобиология. 1972. Т. 12. N. С. 483 492.

114. Грибанов Г.А. Особенности структуры и биологическая роль лизофосфолипидов // Вопр. мед. химии. 1991. Т. 37. № 4. С. 2 10.

115. Григорьев АЛО. Индивидуальная радиочувствительность. М.: Энергоатомиздат, 1991. 80 с.

116. Григорьева JT.B., Малахова J1.A., Колесников В.Г. Выявление факторов патогенности эшерихий на питательных средах // Микробиол. ж. 1990. Т. 52. N7. С. 65-69.

117. Григорян К.М., Эллер К.И., Максименко JT.B., Осипян Л.Л., Тутельян В.А. Способность токсинообразования у видов рода Aspergillus, выделенных из сливочного масла // Микология и фитопат. 1984. Т. 18. N 6. С. 470 474.

118. Гудзь Т.И., Гончаренко Е.Н., Ковалева З.А., Зубкова С.М., Шишкина Л.Н. Механизм регуляции уровня липидных радиосенсибилизаторов в клетках дрожжей с различной радиорезистентностью // Биол. науки. 1985. N 1. С. 25 32.

119. Гуляева Н.В. Перекисное окисление липидов в мозге в механизмах адаптации к стрессу. // Нарушение высшей нервной деятельности (патогенез и нейропептидная коррекция). М.: 1992. С.

120. Гуляева Н.В. Перекисное окисления липидов в мозге при адаптации к стрессу. Автореф. дис. д-ра биол. наук. М., 1989. 52 с.

121. Гуляева Н.В. Ингибирование свободнорадикального окисления липидов в механизмах срочной и долговременной адаптации к стрессу // Биол. науки. 1989. N 4. С. 5 14.

122. Гуриков Ю.В., Бондаренко Н.Ф. Природная вода как окислительная среда //Ж. физ. химии. 2001. Т. 75. № 7. С. 1221 1224.

123. Давыдов Б.И., Ушаков И.Б., Федоров В.П. Радиационное поражение головного мозга. М.: Энергоатомиздат, 1991. 240 с.

124. Даниляк Н.И., Семичаевский В.Д., Дудченко Л.Г., Трутнева И.А. Ферментные системы высших базидиомицетов. Киев: Наук, думка, 1989.280 с.

125. Даренская Н.Г. Индивидуальная радиочувствительность и возможные пути ее предвидения // Радиационное поражение организма. М.: Атомиздат, 1976. Т. 5. С. 138 162.

126. Даренская Н.Г., Кузнецова С.С., Лебенгарц Я.З., Ильин В.В. Влияние различных пищевых рационов на радиочувствительность морских свинок //Радиобиология. 1975. Т. 15. N 4. С. 627 630.

127. Дворецкий А.И., Анненкова С.В., Егорова Е.Г. Эндогенный фосфолипазный гидролиз при лучевом поражении животных // Радиобиология. 1987. Т. 27. N 1. С. 97 100.

128. Дедюхина Э.Г., Дудина Л.П., Ерошин В.К. Влияние концентрации кислорода в среде на состав липидов у Hansenula Polymorpha И Микробиология. 1981. Т. 50. N 6. С. 1080 1083.

129. Деев А.И., Осис Ю.Г., Формазюк В.Е., Владимиров Ю.А., Ланкин В.З. Увеличение содержания воды в липидной фазе липопротеидов при перекисном окислении //Биофизика. 1983. Т. XXVIII Вып. 4. С. 629 631.

130. Дембицкий В.М., Дор И., Шкроб И. Вариабельность липидных компонентов почвенных цианобактерий Microcoleus vaginatus из бассейна Мертвого моря и пустыни Негев // Биохимия. 2000. Т. 65. Вып. 12. С. 1666 1672.

131. Дембицкий В.М., Рябинин В.Е. Влияние иммобилизационного стресса на диацильные и плазмогенные формы фосфолипидов в различных органах крыс // Вопр. мед. химии. 1981. Т. 27. № 5. С. 698 701.

132. Демидова Г.Г. Ультраструктурные изменения мембранных компонентов нервных клеток звездчатого узла, вызванные облучением // Действие ионизирующего излучения на клеточные мембраны. М.: Атомиздат, 1973. С. 98-101.

133. Денисов Е.Т. Механизмы гемолитического распада молекул в жидкой фазе. Итоги науки и техники. Сер. Кинетика и катализ. М.: ВИНИТИ, 1981. Т. 9. 158 с.

134. Денисов Е.Т., Азатян В.В. Ингибирование цепных реакций. Черноголовка, 1997. 268 с.

135. Довгий И.Е., Фоменко Б.С., Акоев И.Г. Пострадиационное снижение экранируемости фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов // Радиобиология. 1977. Т. 17. N 6. С. 901 902.

136. Древаль В.И., Сичевская Л.В., Дорошенко А.О., Рошаль А.Д. Радиационно-индуцируемые изменения структуры белков эритроцитар-ных мембран //Биофизика. 2000. Т. 45. Вып. 5. С. 836 838.

137. Дудник Л.Б. Интенсификация перекисного окисления липидов и его роль в изменении физико-химических свойств и структурной организации мембран при ишемии печени. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 1981.24 с.

138. Дудник Л.Б., Биленко М.В., Алесенко А.В., Могилевская М.П., Бурлакова Е.Б. Роль перекисного окисления липидов в повреждении мембран при ишемии печени //Вопр. мед. химии. 1981. Т. 27. N 3. С. 380 383.

139. Дудник Л.Б., Биленко М.В., Алесенко А.В., Слесарева Л.Д., Бурлакова Е.Б. // Интенсификация перекисного окисления липидов в гомогенате и субклеточных фракциях ишемизированной печени // Бюл. экспер. биол. мед. 1980. Т. 89. N 4. С. 556 558.

140. Дуженкова Н.А. Действие излучения на аминокислоты и белки // Первичные радиобиологические процессы / Под ред. Н.В. Тимофеева-Ресовского. М.: Атомиздат, 1973. С. 101 168.

141. Дятловицкая Э.В., Безуглов В.В. Липиды как биоэффекторы. Введение // Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 1. С. 3 5.

142. Евсеева Т.И., Гераськин С.А. Сочетанное действие факторов радиационной и нерадиационной природы на традесканцию // Екатеринбург: УрО РАН, 2001. 156 с.

143. Евтеева Н.М., Гагарина А.Б. Особенности обрыва цепей в процессе окисления Р-ионимиденацетата // Докл. АН СССР. 1979. Т. 249. N 3. С. 637 642.

144. Елисеева Л.Г., Гололобов А.Д., Грачева И.М. Влияние источника углерода на биосинтез липидов дрожжей Candida guilliermondii // Микробиология. 1977. Т. 16. N 2. С. 263 269.

145. Епифанова О.И., Терских В.В. Метод радиоавтографии в изучении клеточных циклов. М.: Наука, 1969. 118 с.

146. Жижина Г.П., Скалацкая С.И., Бурлакова Е.Б. Влияние малых доз ионизирующей радиации на ДНК селезенки при облучении мышей // Радиац. биология. Радиоэкология. 1994. Т. 34. N 6. С. 759-762.

147. Жукова А.А., Гогвадзе В.Г. Влияние сверхвысоких доз у-радиации на энергетику митохондрий печени крыс // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37. Вып. 3. С. 382 386.

148. Завалишин И.А., Захарова М.Н. Оксидантный стресс общий механизм повреждения при заболеваниях центральной нервной системы // Ж. неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1996. N 2. С. 111 - 114.

149. Залашко М. В. Биосинтез липидов дрожжами. Минск: Наука и техника, 1971.216 с.

150. Залашко М.В., Королева И.Ф., Салохина Г.А. Влияние температуры культивирования и аэрации среды на развитие процессов перекисного окисления липидов у дрожжей // Весщ НАН Беларуси. Сер. б1ял. н. 1999. N2. С. 57-59.

151. Залашко М.В., Салохина Г.А., Королева И.Ф. Влияние стрессовых воздействий на состав липидов дрожжей // Прикл. биохимия и микробиология. 2000. Т. 36. N 1. С. 37 40.

152. Зенин С.В. Исследование структуры воды методом протонного магнитного резонанса // Докл. АН. 1993. Т. 332. Вып. 3. С. 328 329.

153. Зенков Н.К., Панкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: биохимические и патофизиологические аспекты. М.: МАИК Наука/Интерпериодика, 2001. 340 с.

154. Иваненко Г.Ф. Роль антиокислительной активности липидов и эндогенных тиолов в обеспечении радиорезистентности организма. Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1985. 29 с.

155. Иванова Р.А., Пименова Н.С., Ильина О.Г., Козлов Э.И., Обольни-кова Е.А., Козлова И.В., Самохвалов Г.И., Цепалов В.Ф. Ингибирующие свойства монометиловых эфиров убихинолов и их смесей с токоферолами // Хим.-фарм. журн. 1989. N 1. С. 17 20.

156. Источники, эффекты и опасность ионизирующей радиации // Докл. Научного Комитета ООН по действию атомной радиации Генеральной Ассамблее за 1988. Т.2. М.: Мир, 1993. С. 425.

157. Каган В.Е., Орлов О.Н., Прилипко JI.JI. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов // Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР. Биофизика. М., 1986. Т. 18. 136 с.

158. Каган В.Е., Шведова А.А., Новиков К.Н. Об участии фосфолипаз в «репарации» фоторецепторных мембран, подвергшихся перекисному окислению // Биофизика. 1978. Т. 23. N 2. С. 279 284.

159. Казначеев Ю.С., Коломийцева И.К., Кулагина Т.П., Маркевич Л.Н. Обновление хроматинсвязанных и мембранных липидов печени и тимуса у-облученных крыс // Биохимия. 1984. Т. 49. вып. 12. С. 2008 2011.

160. Кайране Ч.Б. Роль изменений физико-химических свойств и состава липидов наружной митохондриальной мембраны в модификации активности моноаминоксидазы различными агентами. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М.: ИХФ РАН, 1983. 25 с.

161. Калмыкова В.И. Перекиси липидов и антиоксиданты в патогенезе и терапии атеросклероза. Автореф. дис. д-ра мед. наук. М. 1978.

162. Капич А.Н. Биосинтетическая активность ксилотрофных базидиомицетов: основные особенности и их адаптационная значимость. Автореф. дис. докт. биол. наук. М., 1993. 35 с.

163. Капич А.Н., Романовец Е.С., Войт С.П. Содержание липидов в мицелии дереворазрушающих базидиомицетов и их жирнокислотный состав // Микол. и фитопатол. 1990. Т. 24. N 1. С. 51 56.

164. Капич А.Н., Шишкина JI.H. Перекисное окисления липидов и его регуляция в мицелии ксилотрофных базидиомицетов // Микробиология. 1995. Т. 64. N3. С. 120- 126.

165. Капич А.Н., Шишкина JI.H. Сопряжение перекисного окисления липидов мицелия ксилотрофных базидиомицетов с деградацией лигнина (гипотеза) // Докл. АН Беларуси. 1995. Т. 39. № 5. С. 63 68.

166. Карташева З.С., Касаикина О.Т. Кинетика распада инициаторов свободных радикалов в мицелярных растворах // Изв. РАН. Сер. химическая. 1994. N 10. С. 1752 1757.

167. Карташева З.С., Коверзанова Е.В., Кашкай A.M., Касаикина О.Т. Влиние поверхностно-активных веществ на распад кумилгидропероксида // Нефтехимия. 2001. Т. 41. № 3. С. 222 227.

168. Карташева З.С., Максимова Т.В., Коверзанова Е.В., Касаикина О.Т. Влияние поверхностно-активных веществ на окисление этилбензола. Ингибирование окисления этилбензола додецилсульфатом натрия // Нефтехимия. 1997. Т. 37. № 2. С. 153 159.

169. Карташева З.С., Максимова Т.В., Сирота Т.В., Коверзанова Е.В., Касаикина О.Т. Влияние поверхностно-активных веществ на окисление этилбензола. Действие цетилтриметиламмоний бромида // Нефтехимия. 1997. Т. 37. № 3. С. 249 253.

170. Касаикина О.Т. Окисление пол неновых углеводородов // Хим. физика. 1995. Т. 14. N 10. С. 72 85.

171. Кашкай A.M., Касаикина О.Т., Гагарина Л.Б., Фарзалиев В.М., Кулиев Ф.А. Ингибирующее действие серосодержащих полифенолов и аминофенолов в процессах окисления углеводородов // Нефтехимия. 1982. Т. XXII. № 4. С. 497 500.

172. Кашкай A.M., Касаикина О.Т., Шмырева Ж.В. Влияние серосодержащих фенолов и аминов на распад гидропероксидов // Кинетика и катализ. 2000. Т. 41. № 5. С. 674 681.

173. Кейтс М. Техника липидологии. М.: Мир, 1975. 322 с.

174. Кения М.В., Лукаш А.И., Гуськов Е.П. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе // Успехи соврем, биологии. 1993. Т. 113. Вып. 4. С. 456 470.

175. Кеэп Т.В. Исследование с помощью флуоресцентных зондов перестроек в структуре мембран клеточных ядер при перекисном окислении липидов, вызванном у-облучением // Радиобиология. 1980. Т. XX. Вып. 5. С. 648 653.

176. Кимельдорф Д., Хант Э. Действие ионизирующей радиации на функции нервной системы. М.: Атомиздат, 1969. 376 с.

177. Кисель М.А., Литвинко Н.М., Наубатова М.К., Шадыро О.И. Гидролиз фосфолипазой Аг облученных липидных мембран // Радиац. биология. Радиоэкология. 1995. Т. 25. № 6. С. 873 879.

178. Кисель М.А., Шадыро О.И., Юркова И.Л. Радиационно-индуци-рованная свободнорадикальная фрагментация биологически активных глицеридов // Химия высоких энергий. 1997. Т. 31. N 2. С. 99 103.

179. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. СПб, 1995. 304 с.

180. Клипсон Н.А., Мамедов Т.Г., Тарусов Б.Н. Люминесцентный метод исследования свободнорадикальных состояний // Биолюминесценция. Труды МОИП. М.: Наука, 1965. Т. 21. С. 107 111.

181. Ковальчук В.К., Пархоменко Л.В., Сельникова О.П., Сопиль А.В. Особенности контакта протеолитических штаммов Proteus mirabilis и Klebsiella pneumonia с энтероцитами in vivo // Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1991. N 10. С. 2 5.

182. Ковальчук Л.П., Перепелица Э.Д., Бурцева С.А. Антибиотические свойства фосфолипидов дрожжей пекарских // Биосинтез и метаболизм липидов у микроорганизмов. Тез. докл. и стенд, сообщ. 11-й Всесоюз. конф. 12-14 ноября 1979. М. 1979. С.177 179.

183. Козлов Ю.П., Данилов B.C., Каган В.Е., Ситковский М.В. Свобод-норадикальное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Изд-воМГУ, 1972. 88 с.

184. Козлова Н.М., Слобожанина Е.И., Антонович А.Н., Лукьяненко Л.М., Черницкий Е.А. Влияние восстановленного и окисленного глутатиона на физико-химическое состояние мембран эритроцитов // Биофизика. 2001. Т. 46. Вып. 3. С. 467-470.

185. Козубов Г.М., Таскаев А.И. Радиобиологические и радиоэкологические исследования древесных растений. СПб.: Наука, 1994. 256с.

186. Коломийцева И.К. Радиационная биохимия мембранных липидов. М.: Наука, 1989. 182 с.

187. Коломийцева И.К. Регуляция обмена холестерина при повреждении организма ионизирующей радиацией и другими агентами // Успехи соврем, биологии. 1983. Т. 96. N 3 (6). С. 381 393.

188. Коломийцева И.К., Маркевич Л.Н., Вакулова Л.А., Кузин А.М. Влияние Р-каротина на липиды ядер печени крыс в норме и при действии у-излу-чения с низкой мощностью дозы // Докл. РАН. 1998. Т. 363. N 4. С. 549 551.

189. Кондакова Н.В., Рипа Н.В., Сахарова В.В., Сергунина О.Н., Амирагова М.И. О продуктах радиационно-химических превращений сывороточного альбумина человека в водном растворе // Химия высоких энергий. 1996. Т. 30. N 4. С. 329 335.

190. Константинова М.М., Минин А.А., Некрасова И.В. Роль эндогенного глютатиона в радиозащитном эффекте аноксии // Радиобиология. 1981. Т. 21. N2. С. 277-280.

191. Константинова М.М., Минин А.А., Некрасова И.В., Донцова Г.В., Смирнова И.Б. Роль глютатиона в модификации радиочувствительности клеток асцитной карциномы Эрлиха // Проблемы природной и модифицированной радиочувствительности. М., 1983. С. 108 114.

192. Корогодин В.И., Близник К.М., Капульцевич Ю.Г., Петин В.Г., Савченко Г.В., Толсторуков И.И. Роль плоидности в радиочувствительности клеток (эксперименты на дрожжевых организмах разных видов и генотипов) // Радиобиология. 1977. Т. 17. N 5. С. 700 710.

193. Корогодин В.И., Граевский ЭЛ., Корогодина Ю.В., Некрасова И.В., Петин В.Г. Радиочувствительность и содержание сульфгидрильных групп у дрожжей разных генотипов // Радиобиология. 1977. Т. 17. N 5. С. 834-838.

194. Короткина Р.Н., Папин А.А., Молочкина Е.М., Каипова Г.Д.,

195. Бурлакова Е.Б., Воронина Т.А. Влияние транквилизаторов 1,4-бензодиазепинового ряда на некоторые метаболические показатели мозга и печени //

196. Биохимические проблемы .хирургии /ред. В.Д. Федоров, А.А. Карелин.

197. М.: Ин-т хирургии им. А.А. Вишневского АМН СССР, 1991. С. 164 194.

198. Костеша Н.Я., Даренская Н.Г. Кишечная форма лучевой болезни и роль поражения желудка в ее развитии. Томск: Изд-во Том. ун-та. 1990.124 с.

199. Костюк В.А. Возможные пути восстановления перекисей липидов в печени и их внутриклеточная локализация // Биохимия. 1986. Т. 51. Вып. 7. С. 1059 1065.

200. Костюк В.А. Устойчивость продуктов окисления липидов в печени крыс и пути их утилизации // Биохимия. 1986. Т. 51. Вып. 8. С. 1392 1397.

201. Котлова Е.Р. Антиокислительные системы лишайников. Автореф. дис. канд. биол. наук. СПб, 2000. 35 с.

202. Красичкова З.И., Стражевская Н.Б. Изменение состава фосфолипидов, связанных с надмолекулярной ДНК тимуса и печени у-облученных крыс // Радиобиология. 1984. Т. 24. N 4. С. 451 455.

203. Крепе Е.М. Липиды клеточных мембран. Л.: Наука, 1981. 340 с.

204. Круглова Н.Л., Стражевская Н.Б. О механизме радиационного эффекта на уровне надмолекулярных структур ДНК эукариот // Радиобиология. 1987. Т. 27. N 1. С. 24 29.

205. Крутецкая З.И., Лебедев О.Е. Структурно-функциональная организация сигнальных систем в клетках // Цитология. 2000. Т. 42. N. С. 844 874.

206. Кувичкин В.В. ДНК-липидные взаимодействия in vitro и in vivo II Успехи соврем, биологии. 2000. Т. 120. N 5. С. 466 476.

207. Кудяшева А.Г. Роль тиолов и дегидрогеназ в радиочувствительности Microtus oeconomus Pall. // Радиочувствительность растений и животных биоценозов с повышенным естественным фоном радиации. Сыктывкар, 1988. С. 33 42.

208. Кудяшева А.Г., Шишкина Л.Н., Загорская Н.Г., Таскаев А.И. Биохимические механизмы радиационного поражения природных популяций мышевидных грызунов. СПб: Наука, 1997. 156 С.

209. Кузин A.M. Актуальные проблемы радиобиологии // Современные вопросы радиобиологии. М., 1980. С. 3 12.

210. Кузин A.M. О различиях ведущих молекулярных механизмов при действии радиации на организм в больших и малых дозах // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1980. N 6. С. 212 220.

211. Кузин A.M. Проблема малых доз и идеи гормезиса в радиобиологии // Радиобиология. 1991. Т. 31. N 1. С. 16 21.

212. Кузнецов А.Н. Метод спинового зонда. М.: Наука, 1976. 210 с.

213. Кулагина Т.П., Шурута С.А., Коломийцева И.К., Вакулова Л.А. Влияние длительного у-облучения с низкой мощностью дозы и Р-кароти-на на метаболизм липидов ядер тимоцитов крыс // Бюл. экспер. биол. мед. 1998. Т. 126. № 9. С. 311 —313.

214. Кулинский В.И. Исследование механизмов радиозащитного эффекта экзо- и эндогенных биогенных моноаминов // Проблемы природной и модифицированной радиочувствительности / Отв. ред. М.М. Константинова, A.M. Кузин. М.: Наука, 1983. С. 120 134.

215. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глута-тиона// Успехи соврем, биологии. 1990. Т. 110. Вып. 1(4). С. 20 34.

216. Курбанова М.Е. Физико-химические особенности дрожжевых клеток, выращенных на углеводородах. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М.: Изд-во МГУ, 1972. 16 с.

217. Курганов Б.И. Аллостерические ферменты. М.: Наука, 1978. 248 с.

218. Куриц Т.С., Месянжинов В.В. ДНК-лигазы эукариот, их свойства и функции // Успехи соврем, биологии. 1983. Т. 95. Вып. 1. С. 3 15.

219. Курляндский Б.А. Концептуальные основы химической безопасности в XXI веке // Здоровье и химическая безопасность на пороге XXI века. Материалы междунар. симп. СПбМАПО. 2000. С. 7.

220. Кухтина Е. Н. Особенности действия природных антиоксидантов в системах in vitro и in vivo и их роль в регуляции процессов перекисного окисления липидов. Автореф. дис. канд. хим. наук. М., 1982. 24 с.

221. Лав Р.М. Химическая биология рыб. М.: Пищевая пром-сть, 1976.350 с.

222. Лаврова Г.А., Пушкарева Т.В., Никанорова Н.Г., Свердлов А.Г. К исследованию механизмов действия высоких и сверхвысоких доз у-кван-тов и нейтронов на центральную нервную систему // Радиобиология. 1984. Т 24. N5. С. 616-619.

223. Лаврова Г.А., Свердлов А.Г. Действие высоких и сверхвысоких доз нейтронов деления и у-квантов на центральное норадренергическое образование головного мозга Locus coruleus (голубое пятно) // Радиобиология. 1987. Т. 27. N 2. С. 238 - 241.

224. Ладыгин Б.Я., Ревина А.А. О взаимодействии углеводородных радикалов циклического и нормального строения с антрахиноном // Изв. АН СССР. Сер.хим. 1985. N 10. С. 2180 2186.

225. Ладыгин Б.Я., Ревина А.А., Ванников А.В. Об участии хинонов в окислении углеводородных радикалов // Хим. высоких энергий. 1985. Т. 19. N 5. С. 412 417.

226. Ладыгин Б.Я., Сараева В.В., Ревина А.А. Зимина Г.М. Вклад радиационно-химических исследований в общую теорию жидкофазного окисления органических соединений // Росс. хим. ж. (Ж. Росс. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 1996. Т. 40. N 6. С. 78 89.

227. Лакин Г.Ф. Биометрия. 3-е изд. М.: Высшая школа, 1990. 203 с.

228. Ланкин В.З., Вихерт A.M., Тихазе А.К., Согоян С.М., Бондарь Т.Н. Роль перекисного окисления липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза// Вопр. мед. химии. 1989. Т. 35. Вып. 3. С. 18 24.

229. Легеза В.И., Камынина М.Ф., Марковская И.В., Шагоян М.Г. Влияние облучения на содержание и обмен дофамина в головном мозге крыс // Радиобиология. 1986. Т. 26. N. С. 262 264.

230. Лейко В., Пухала М., Шведа-Левандовска 3., Сапежинский И.И., Донцова Е.Г. О влиянии спиртов на радиационные превращения гемоглобина и сывороточного альбумина человека // Радиобиология. 1980. Т. 20. N 6. С. 654 657.

231. Лысюк О.Г. Исследование бактериальной биоконверсии питательного субстрата и деградации токсичных метаболитов дрожжами. Авто-реф. дис. канд. биол. наук. М. 1989. 25 с.

232. Лычкова А.Е., Смирнов В.М. К вопросу о влиянии фосфолипид-ного состава тканей на реализацию синергизма между отделами вегетативной нервной системы // Бюл. Экспер. биол. мед. 2002. Т. 133. № 4. С. 364-366.

233. Магин Д.В., Измайлов Д.Ю., Попов И.Н., Левин Г., Владимиров Ю.А. Фотохемилюминесценция как метод изучения антиоксидантой активности в биологических системах. Математическое моделирование// Вопр. мед. химии. 2000. Т. 64. N 4. С. 419 425.

234. Магнитный резонанс в медицине/ Джонс Р.А., Квернесс Й., Ринк П.А., Сатон Т.Е. /Под ред. П.А. Ринке. Oxford: Blackwell Sci. Publications, 1992.228 p.

235. Максимова Н.П., Доброжинецкая E.B., Фомичев Ю.К. Регуляция биосинтеза аминокислот у облигатных метилотрофных бактерий Methylo-bacillus mucogenes М75 II Изв. РАН. Сер. биол. 2000. N 4. С. 428 436.

236. Маленченко А.Ф., Сушко С.Н., Плотникова С.И., Савченко В.К. Хромосомные аберрации в семенниках мышей при сочетанном действии нитрита натрия и излучения // Докл. АН БССР. 1989. Т. 33. N 11. С. 1043-1045.

237. Маркевич Л.Н. Метаболизм жирных кислот в печени крыс при действии у-радиации в сверхлетальных дозах // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38. N 4. С. 540 546.

238. Маркевич Л.Н., Казначеев Ю.С., Коломийцева И.К. Влияние сверхлетальных доз у-радиации на синтез холестерина в печени крыс // Докл. АН СССР. 1986. Т. 288. N 3. С. 744 747.

239. Маркевич Л.Н., Коломийцева И.К. Липиды микросом и митохондрий печени при остром и хроническом у-облучении // Биохимия. 1994. Т. 59. N7. С. 1027- 1033.

240. Мартынова Е.А. Влияние сфинголипидов на активацию Т-лимфо-цитов (обзор)//Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 1. С. 122 132.

241. Маслова К.И., Кудяшева А.Г. К вопросу о радиочувствительности мелких грызунов, обитающих в разных радиоэкологических условиях // Тез. докл. II радиобиол. конф. соц. стран (Варна). София. 1978. С. 190.

242. Медведев Б.И., Евтодиенко Ю.В., Ягужинский JI,C., Кузин A.M. Роль липидов митохондриалыюй мембраны в радиационном нарушении транспорта ионов // Радиобиология. Информ. бюл. 1975. Вып. 18. С. 93 98.

243. Медведев Б.И., Мошков Д.А., Боровягин В.Л. Роль липидов в стабилизации структуры мембран эритроцитов // Действие ионизирующего излучения на клеточные мембраны. М.: Атомиздат, 1973. С. 101 -109.

244. Медведева Т.Н., Матяшова Р.Н., Ленских Г.В., Романова И.Б. Образование внеклеточных высших жирных кислот дрожжами при росте на гексадекане//Микробиология. 1985. Т. 54. Вып. 1.С. 17-21.

245. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс, профилактика. М.: Наука, 1981.278 с.

246. Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов // Успехи соврем, биологии. 1993. Т. 13. N4. С. 442-455.

247. Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен)/Под ред. М.И. Прохоровой. Л.: Изд-во ЛГУ, 1982. 272 с.

248. Мид Дж. Свободнорадикальные механизмы повреждения липидов и их значение для клеточных мембран // Свободные радикалы в биологии. М.: Мир, 1979. Т. 1. С. 68-87.

249. Михайлов В.Ф., Водолазская Н.А., Ракова И.А. Ранние изменения мембран клеточной поверхности лимфоцитов у крыс после общего воздействия нейтронов и у-излучения // Радиобиология. 1986. Т. 26. N 2. С. 253 256.

250. Михеев Ю.А., Гусева Л.Н., Заиков Г.Е. О структурных эффектах и энтропийном факторе совмещения некристаллических полимеров и жидкостей // Хим. физика. 1996. Т. 15. № 1. С. 7 15.

251. Михеев Ю.А., Заиков Г.Е. Абсорбция и сольватация воды полимерами // Росс. хим. ж. (Ж. Росс. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 1999. Т. 43. №2. С. 67-73.

252. Молочкина Е.М., Боровок Н.В., Каипова Г.Д., Бурлакова Е.Б. Нейромодуляторная роль липидной компоненты нейрональных мембран (in vivo) // Клеточная сигнализация/ Под ред. П.Г. Костюка. М.: Наука, 1992. С. 103-115.

253. Молочкина Е.М., Джаман У.М., Озерова И.Б., Бурлакова Е.Б., Шишкина Л.Н. Биохимические изменения в синаптосомах головного мозга при у-облучении мышей малой дозой с разной интенсивностью // Радиац. биология. Радиоэкология. 1995. Т. 35. N 6. С. 860 868.

254. Мочалина А.С. Действие излучения на высшие жирные кислоты и фосфолипиды // Первичные радиобиологические процессы /Под ред. Н.В. Тимофеева-Рессовского. М.: Атомиздат, 1973. С. 52 100.

255. Мочалина А.С. Радиационно-химические изменения фосфолипидов на молекулярном и субклеточном уровнях // Радиобиология. Информ. бюл. 1979. Вып. 22. С. 17 20.

256. Мочалина А.С., Климова Т.П. Радиационно-химические изменения фосфатидилхолина // Радиобиология. 1977. Т. 17. N5. С. 711-715.

257. Мурза Л.И., Сергеев А.И., Найдич В.И., Евсеенко Л.С., Дисветова В.В. Протонная магнитная релаксации в изучении ожоговой болезни // Докл. АН СССР. 1980. Т. 254. С. 763 764.

258. Некипелова Т.Д., Брин Э.Ф. Конкуренция линейного и квадратичного обрывов цепей при окислении фенилацетилена // Кинетика и катализ 1990. Т. 31. N. 5. С. 1092 1098.

259. Некипелова Т.Д., Гагарина А.Б. Избирательное действие антиоксидантов в процессах окисления органических соединений // Нефтехимия. 1982. Т. XXII.N 2. С. 278 284.

260. Нечаев И.А. Значение генотипического и фенотипического факторов в общей радиочувствительности мышей // Радиобиология. Информ. бюл. 1967. Вып. 10. С. 73 75.

261. Никитин Д.И., Никитина Э.С. Процессы самоочищения окружающей среды и паразиты бактерий (род Bdellovibrio). М.: Наука, 1978. 205 с.

262. Никитин Д.И., Таштемирова М.А., Питрюк И.А., Сорокин В.В., Оранская М.С., Никитин JI.E. Высокая устойчивость к ионизирующей радиации некоторых олиготрофных бактерий // Микробиология. 1993. Т. 62. Вып. 6. С. 1064- 1071.

263. Никитин Д.И., Циренина М.Л., Чумаков К.М. Филогенетическое положение олиготрофных бактерий Н Изв. АН СССР. Сер. биолог. 1986. № 1.С. 125-131.

264. Новикова Т.В. Роль информации в биологической системе // Изв. РАН. Сер. биол. 1999. № 1. С. 98 104.

265. Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности. Сб. докл. международного экологического конгресса. В 2-х томах. 14-16 июня 2000 г. Спб / Под ред. Н.И. Иванова; Балт. гос. техн. ун-т, СПб., 2000.

266. Новоселова Е.Г., Кулагина Т.П., Коломийцева И.К., Кузин A.M. Синтез липидов в тимоцитах облученных крыс // Радиобиология. 1986. Т. 26. N2. С. 171-174.

267. Оленев С.Н. Конструкция мозга. Л.: Медицина, 1987. 208 с.

268. Ольсинская H.JL, Романов В.И., Воробьева Л.И. Парафинокисля-ющая система дрожжей Candida guilliermondii II Прикл. биохимия и микробиол. 1979. Т. 15. Вып. 6. С. 805 809.

269. Осипов А.Н., Григорьев М.В., Сыпин В.Д., Померанцева М.Д., Рамайя Л.К., Шевченко В.А. Влияние хронического воздействия кадмия и у-излучения в малых дозах на генетические структуры мышей // Радиац. биология. Радиоэкология. 2000. Т. 40. № 4. С. 373 377.

270. Осипов, Азизова О.А., Владимиров Ю.А. // Успехи биологии, химии. 1990. Т. 31. С. 180-208.

271. Павлюкова Е.Б., Белозерский М.А., Дунаевский Я.Е. Внеклеточные протеолитические ферменты мицелиальных грибов // Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 8. С. 1059 1089.

272. Пальмина Н.П. Изучение изменения антиокислители юй активности липидов некоторых органов мышей в ранние сроки после их облучения и действие ингибиторов радикальных процессов // Радиобиология. 1972. Т. 12. N 5. С, 737 742.

273. Пальмина Н.П. Система регуляции уровня антиокислительной активности липидов клеточных органелл при опухолевом росте. Автореф. дис. докт. биол. наук. М., 1985. 51 с.

274. Пальмина Н.П., Мальцева Е.Л., Бурлакова Е.Б. О липидзависи-мости ядерной глюкозо-6-фосфатазы в процессе опухолевого роста и изменении ее характера после облучения опухоленосителей // Докл. АН СССР. 1982. Т. 265. N 4. С. 986 989.

275. Пальмина Н.П., Мальцева E.JL, Бурлакова Е.Б. Протеинкиназа С -пероксилипидзависимый фермент // Хим. физика. 1995. Т. 14. N 11. С. 47 60.

276. Паньков В.Н., Ворончихина Л.Д., Демьянова В.Т., Рябова Т.И. Биохимические маркеры опухолевой трансформации при лимфопролифе-ративных заболеваниях. М., 1990. 11 с. Деп. в ВИНИТИ. Д. 20087.

277. Перелыгин В.В., Красильников В.А., Евдокимова О.А., Минаева Л.А., Борзенкова Т.Х. Физико-химические свойства липидов бактерий Е. coli в экстремальных условиях // Биосинтез и метаболизм липидов у микроорганизмов. М., 1979. С. 168 170

278. Пстин В.Г., Жураковская Г.П., Пантюхина А.Г., Рассохина А.В. Малые дозы и проблемы синергического взаимодействия факторов окружающей среды // Радиац. биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. Вып. 1. С. 113 126.

279. Петин В.Г., Комаров В.П. Количественное описание модификации радиочувствительности. М.: Энергоатомиздат, 1989. 192 с.

280. Плеханов С.Е. Накопление жирных кислот в культуральной среде водорослей Scenedesmus quadricauda при действии фенолов // Изв. РАН. Сер. биол. 1998. N 2. С. 277 282.

281. Победимский Д.Г., Винаров Ю.А., Решетник О.А., Мингалеева З.Ш., Гутман А.Ш., Шишкина Л.Н. Влияние антиоксидантов на получение микробной биомассы // Acta Biotechnol. 1988. V 8. N 1. С. 55 69.

282. Поливода Б.И., Конев В.В., Попов Г.А. Биофизические аспекты радиационного поражения биомембран. М.: Энергоатомиздат, 1990. 160 с.

283. Попов Д.М., Иванов С.К., Механизм действия ингибиторов-разрушителей пероксидов. София. Изд-во БАН, 1988. 188 с.

284. Последствия ядерной войны. Воздействие на экологию и сельское хозяйство / Харуэлл М., Хатчинсон Т. при участии Кроппера-младшего У., Харуэлл К. и Гровера Г. М.: Мир, 1988. 551 с.

285. Прист Ф. Внеклеточные ферменты микроорганизмов. М.: Мир, 1987. 117 с.

286. Проказова Н.В., Звездина Н.Д., Коротаева А.А. Влияние лизофос-фатидилхолина на передачу трансмембранного сигнала внурь клетки // Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 1. С. 38-46.

287. Пхакадзе Т.Я. Неферментирующие грамотрицательные бактерии как этиологический фактор внутрибольничных инфекций // Лабор. дело. 1987. N3. С. 164- 167.

288. Раевский Б.Н. Лучевая смерть млекопитающих // Вопросы радиобиологии. Пер. с англ. М.: ИЛ, 1956. С. 249 275.

289. Разумовский С.Д., Заиков Г.Е. Озон и его реакции с органическими соединениями. М.: Наука, 1975. 365 с.

290. Рафикова B.C., Скибида И.П., Майзус З.К. Кинетические особенности сопряженных реакций окисления парафиновых и ароматических углеводородов // Нефтехимия. 1970. Т. X. N 5. С. 672 676.

291. Ревина А.А. Радиационно-химическое моделирование быстропроте-кающих процессов с участием промежуточных кислородсодержащих реакционных центров в различных системах. Автореф. дисс. . докт. хим. н. М. 1995.57 с.

292. Решетник О.А., Ежкова Г.О., Каневская Е.Г., Кирпичников П.А. Регуляция антиоксидантом роста, состава и физико-химических свойств липидов Saccharomyces cerevisiae И Докл. РАН. 1996. Т. 346. N 5. С. 705 707.

293. Решетник О.А., Мингалеева З.Ш., Победимский Д.Г. Влияние антиоксиданта на рост дрожжей рода Candida при различных способах культивирования // Биотехнология. 1986. N 2. С. 60-63.

294. Решетникова И.А. Деструкция лигнина ксилотрофными макроми-цетами. Накопление селена и фракционирование его изотопов микроорганизмами. М., 1997. 197 с.

295. Ржавская Ф.М. Липиды рыб и морских млекопитающих. М.: Пищепромиздат, 1976. 470 с.

296. Рипачек В. Биология дереворазрушающих грибов. М.: Лесная пром-сть, 1967. 276 с.

297. Рогинский В.А. К кинетической модели перекисного окисления в липидном бислое // Мол. биология. 1990. Т. 24. N 6. С. 1582 1589.

298. Рогинский В.А. Фенольные антиоксиданты. Эффективность и реакционная способность. М.: Наука, 1988. 248 с.

299. Рогожин С.В., Лозинский В.И., Вайнерман Е.С., Мамцис А.М., Никитин Д.И., Саввичев А.С. Ускорение реакции радикальной полимеризации в присутствии микроорганизмов // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1989. N 4. С. 502-506.

300. Рожавин М.А. Исследование патогенности Pseudomonas aeruginosa II Ж. микробиол., эпидемиол., иммунол. 1988. N 3. С. 106 112.

301. Росивал Л., Энгст Р., Соколай А. Посторонние вещества и пищевые добавки в продуктах. М.: Легкая и пищ. пром-сть., 1982. 264 с.

302. Российский химический журнал. Журнал Росс. хим. об-ва им. Д,И, Менделеева. 1999. Т. XLIII. N 5. Эффекты сверхмалых доз биологически активных веществ. 118 с. 1

303. Рощупкин Д.И. Молекулярные механизмы повреждения биомембран, липидов и белков при действии ультрафиолетового облучения. Автореф. дис. докт. биол. наук. М., 1979. 53с.

304. Рощупкин Д.И., Мурина М.А. Свободнорадикальное и циклоокси-геназное окисление липидов в мембранах клеток крови при УФ-облуче-нии // Биол. мембраны. 1998. Т. 15. № 2. С. 221 226.

305. Рубайло BJL, Гагарина А.Б., Эмануэль Н.М. Влияние сопряжения ненасыщенной связи с фенильной группой на реакционную способность 1-фенилциклогексена в процессе окисления // Докл. АН СССР. 1975. Т. 224. N3. С. 642-645.

306. Рубайло В.Л., Гагарина А.Б., Эмануэль Н.М. Константы скорости реакции продолжения и обрыва цепи при жидкофазном окислении 1-фенилциклогексена // Докл. АН СССР. 1975. Т. 224. N 4. С. 883 886.

307. Рубайло В.Л., Маслов С.А. Жидкофазное окисление непредельных соединений. М.: Химия, 1989. 224 с.

308. Рубан Е.Л. Микробные липиды и липазы. М.: Наука, 1977. 218 с.

309. Руда В.П., Кузин A.M. Влияние хронического облучения в малых дозах на активность аденилатциклазы плазматических мембран легочной ткани крыс // Радиобиология. 1991. Т. 31. N 5. С. 743 746.

310. Русанов А.А. Коллоидная химия на рубеже столетий // Росс. хим. ж. (Ж. Росс. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 2000. Т. 44. № 4. С. 66 69.

311. Рыскулова С.Т., Цветкова Т.В., Балахчи Т.А. Антиокислительная активность липидов плазматических мембран клеток печени и ее изменение после облучения // Радиобиология. 1985. Т. 25. N 1. С. 87 88.

312. Рязанов В.М., Ширяев В.Г., Пархоменко И.М., Кудряшов Ю.Б. О роли фосфолипидов в лучевом поражении млекопитающих, обладающихразличной радиочувствительностью // Вест. МГУ, Сер. биолог. 1973. N 3. С. 36-41.

313. Саенко Н.Ф., Козуб Г.И., Авербух Б.Я., Шур И.М. Вино херес и технология его производства. Кишинев: Картя Молдавеняско, 1975. 160 с.

314. Сапежинский И.И. Биополимеры: кинетика радиационных и фотохимических превращений. М.: Наука, 1988. 216 с.

315. Сапежинский И.И. Роль свободнорадикальных состояний белков в радиационном повреждении их структуры // Радиобиология. Информ. бюл. 1979. Вып. 22. С. 67-71.

316. Сапежинский И.И., Лозовская Е.Л. Радиационная и фотохемилю-минесценция в растворах триптофансодержащих пептидов и белков // Хим. физика. 1995. Т. 14. № 10. С. 126 150.

317. Сараева В.В. Окисление органических соединений под действием ионизирующих излучений. М.: Изд-во МГУ, 1991. 264 с.

318. Сахаровский В.В., Никитин Д.И., Сахаровский В.Г. Физиологические особенности выживания некоторых грамотрицательных бактерий в условиях углеродного голодания // Прикл. биохимия и микробиол. 1999. Т. 35. №4. С. 422-431.

319. Селищева А.А., Козлов Ю.П. Метаболизм фосфолипидов и биологические мембраны . Иркутск, 1988. 88 с.

320. Семин Б.К., Новакова А.А., Сидорова Г.В., Александров А.Ю. Иванов И.И. Исследование методом мессбауэровской спектроскопии действия образующегося комплекса Fe3+ -лецитин на окисление Fe2+ // Биол. науки. 1981. N 9. С. 45 50.

321. Семин Ю.А., Шевчук А.С., Дубовик Б.В. Состояние Р-адренер-гических и ГАМК-ергических рецепторов мозга крыс после воздействия высоких доз ионизирующей радиации // Радиобиология. 1984. Т. 24. N 4. С. 476 480.

322. Серая И.П., Нарциссов Я.Р. Современные представления о биологической роли оксида азота // Успехи соврем, биологии. 2002. Т. 129. № 3. С. 249 258.

323. Силина А.Г., Свердлов А.Г. Влияние сверхвысоких доз у-радиации на содержание и обмен серотонина в головном мозге крыс // Радиобиология. 1987. Т. 27. N 4. С. 556 557.

324. Симонов П.В. (ред.) Индивидуальный мозг: Структурные основы индивидуальных особенностей. М.: Наука, 1993. 127 с.

325. Синицына О.О. Роль пути поступления веществ в организм в комплексной оценке химической безопасности // Здоровье и химическая безопасность на пороге XXI века. Материалы междунар. симп. СПбМАПО. 2000. С. 35-36.

326. Сирота Т.В., Евтеева Н.М., Касаикина О.Т. Влияние ПАВ на распад гидропероксидов углеводородов // Нефтехимия. 1996. Т. 36. № 2. С. 169 174.

327. Слабова О.И., Оранская М.С., Никитин Д.И. Развитие олиготро-фов при низких температурах // Микробиология. 1993. Т. 62. Вып. 6. С. 1072- 1078.

328. Смирнов А.Н. Генерация акустических колебаний в химических реакциях и физико-химических процессах // Росс. хим. ж. (Ж. Росс. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 2001. Т. 45. № 1. С. 29 34.

329. Сорокин Ю.И. Роль микрогетеротрофов в функционировании морских экосистем // Успехи соврем, биологии. 1982. Т. 93. Вып. 2. С. 236 252.

330. Спитковский Д.М. Концепция действия малых доз ионизирующей радиации на клетки и ее возможные приложения к трактовке медико-биологических последствий // Радиобиология. 1992. Т. 32. N 3. С. 382-400.

331. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Наука, 1977. С. 63 64.

332. Степанов А.Е., Краснопольский Ю.М., Швец В.И. Физиологически активные липиды. М.: Наука, 1991. 136 с.

333. Степанова Н.Т., Мухин В.А. Основы экологии деревообразующих грибов. М.: Наука, 1979. 100 с.

334. Сторожок Н.М. Роль взаимодействия антиоксидантов и фосфолипидов в окислении многокомпонентных липидных систем природного происхождения. Автореф. дисс. канд. хим. н. М., 1987. 27 с.

335. Сторожок Н.М., Храпова Н.Г., Бурлакова Е.Б. Исследование межмолекулярных взаимодействий компонентов природных липидов в процессе окисления // Хим. физика. 1995. Т. 14. N 11. С. 29 46.

336. Сторожок С.А., Санников А.Г., Захаров Ю.М. Молекулярная структура мембран эритроцитов и их механические свойства. Изд-во Тюменского госуниверситета, 1997. 140 с.

337. Стражевская Н.Б., Стручков В.А. Организация надмолекулярных комплексов ДНК хроматина эукариот и их роль в радиационном эффекте //Радиобиология. 1977. Т. 17. N. С. 163 177.

338. Стручков В.А., Стражевская Н.Б. Структурные и функциональные аспекты ядерных липидов нормальных и опухолевых клеток // Биохимия. 2000. Т. 65. Вып. 5. .С. 620 643.

339. Стручков В.А., Стражевская Н.Б. ДНК-связанные липиды: состав и возможные функции // Биохимия. 1993. Т. 58. Вып. 8. С. 1154 1175.ь л

340. Судакова Р.Н., Иыка У.Л., Петер И.В. и др. О выделении энтеро-бактерий из пищевых продуктов // Вопр. питания. 1987. N 1. С. 64 65.

341. Сыскин Г. А. Исследование устойчивости липидов морских организмов к процессам окисления: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Купавна, 1985. 25 с.

342. Тарасов В.А., Тарасов А.В., Любимова И.К., Асланян М.М. Проблема количественной оценки опасности химических соединений в генетической токсикологии // Успехи соврем, биологии. 2002. Т. 122. № 2. С. 136- 147.

343. Тараховский Ю.С., Деев А.А., Масулис И.С., Иваницкий Г.Р. Структурная организация и фазовое поведение комплекса ДНК-кальций-дипальми-тоилфосфатидилхолин // Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 10. С. 1325 -1331.

344. Тарусов Б.Н. Основы биологического действия радиоактивных излучений. М.: Медгиз, 1954. 140 с.

345. Тафельштейн Э.Е., Владимиров Ю.А., Козлов Ю.П. // Сверхслабое свечение в биологии. М.: Наука, 1972. С. 147

346. Текучесть мембраны в биологии: концепции мембранной структуры / Балли М.Б., Бестерлинг Б., Брейлсфорд Дж.Д. и др. Под ред. Р. Элойза. Киев: Наук, думка, 1989. 313 с.

347. О 4387. Ткачук В.А. Фосфоинозитидный обмен и осцилляция ионов Саобзор) // Биохимия. 1998. Т. 63. Вып. 1. С. 47 56.

348. Тонгур A.M., Павловская Т.Е., Губина Н.Б. Действие рентгеновых лучей на тени эритроцитов // Радиобиология. 1983. Т. 23. N 1. С. 35 38.

349. Трещенкова Ю.А., Бурлакова Е.Б. Изменение кинетических свойств альдолазы и лактатдегидрогеназы цитоплазмы мозга мышей после хронического у-облучения в малых дозах // Радиац. биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37. N. 1. С. 3 12.

350. Трофимов С.С., Воронина Т.А., Островская Р.У. Вариабельность последствий перинатального патогенного фактора у крыс // Успехи соврем, биологии. 1999. Т. 119. № 3. С. 285 290.

351. Тяжелые естественные радионуклиды в биосфере: миграция и биологическое действие на популяции и биоценозы / P.M. Алексахин, Н.П. Архипов, P.M. Бардухаров и др. М.: Наука, 1990. 368 с.

352. Ушаков И.Б., Карпов В.Н. Мозг и радиация. М.: Изд-во ГНИИИ авиацион. и космич. медицины, 1997. 76 с.

353. Ушкалова В.Н., Сторожок Н.М. Исследование механизма антиоксидантной активности липидов // Бюл. экспер. биол. мед. 1984. Т. 8. С. 179-181.

354. Федоров Н.А., Янева И.С. Экскреция ДНК лимфоцитами человека //Успехи соврем, биологии. 1982. Т. 93. Вып. 2. С. 171 182.

355. Федоров Н.А., Янева И.С., Скотникова О.И., Паньков В.Н. Определение концентрации ДНК в плазме крови человека // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1986. Т. 100. N 9. С. 281-283.

356. Феофилова Е.П. Липиды мицелиальных грибов и перспективы развития микробной олеобиотехнологии. 1. Липиды мицелиальных грибов// Биол. науки. 1990. N 11. С. 5 25.

357. Феофилова Е.П., Бурлакова Е.Б., Кузнецова Л.С. Значение реакций свободнорадикального окисления в регуляции роста и липидообразовании эукариотных и прокариотных организмов // Прикл. биохимия и микробиология. 1987. Т. 23. N 1. С. 3 13.

358. Феофилова Е.П., Бурлакова Е.Б., Кузнецова Л.С., Полетебнова М.В., Розанцев Э.Г. Влияние синтетического антиоксиданта на образование липидов и их состав у Cuninghamella japonica II Прикл. биохимия и микробиология. 1986. Т. 22. N 2. С. 248 253.

359. Физиологическая регуляция метаболизма дрожжей / Под ред. М.В. Залашко. Мн., 1991.

360. Фоменко Б.С., Акоев И.Г. Радиационное повреждение мембран и летальное действие радиации на клетки // Успехи соврем, биологии. 1984. Т. 97. Вып. 1.С. 146- 158.

361. Фоменко Б.С., Акоев И.Г. Структурные изменения плазматической мембраны под действием ионизирующей радиации // Успехи соврем, биологии. 1982. Т. 93. Вып. 2. С. 183 196.

362. Фоменко Л.А., Васильева Г.В., Безлепкин В.Г. В эритроцитах костного мозга потомства самцов мышей, подвергнутых хроническомугамма-облучению с малых дозах, повышена частота микроядер // Изв. РАН. Сер. биол. 2001. № 4. С. 419 423.

363. Химический состав пищевых продуктов/ Под ред И.М. Скурихина, М.Н. Волгарева. М.: Агропромиздат, 1987. Кн. 2. 360 с.

364. Храпова Н.Г. Система природных антиоксидантов и возможность направленного воздействия на нее синтетическими ингибиторами. Автореф. дисс. докт. хим. н. М. 1988. 49 с.

365. Цепалов В.Ф. Метод количественного анализа антиоксидантов с помощью модельной реакции инициированного окисления II Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo. М.: Наука, 1992. С. 16-26.

366. Цепалов В.Ф., Аскинази А.И., Радченко JI.M. Экспрессная оценка окислительной стабильности масел // Пищев. пром-сть. 1990. N 1. С. 42 44.

367. Цепалов В.Ф., Харитонова А.А., Зейналов Э.Б., Гладышев Г.П. Исследования антиоксидантов в композициях сложного состава II Азер. хим. журн. 1981. N 4. С. 113 116.

368. Циперсон В.П. Реакция мелких млекопитающих на воздействие малых доз хронического радиоактивного облучения (на примере Брянской области). Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1999. 25 с.

369. Частухин В .Я., Николаевская М.А. Биологический распад и ресинтез органических веществ в природе. JL: Наука, 1969. 323 с.

370. Чеботарев Е.Е., Барабой В.А., Дружина Н.А., Серкиз Я.И. Окислительные процессы при гамма-нейтронном облучении организма. Киев: Наук, думка, 1986. 216 с.

371. Чеботарева Э.Г., Победимский Д.Г., Колюбакина Н.С., Мукменева Н.А., Кирпичников П.А., Ахмадуллина А.Г. Кинетика взаимодействия фосфитов с гидроперекисью кумола // Кинетика и катализ. 1973. Т. XIV. N4. С. 891 -895.

372. Чернявская Л.И. Роль липидов и их физико-химических характеристик в регуляции активности холинергической системы. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 1990. 24 с.

373. Черток В.М., Ботвич Т.А., Артюкова О.А. Изменение показателей липидного обмена в семенниках крыс при воздействии жира печени минтая//Бюл. экспер. биол. мед. 2001. Т. 131. N 2. С. 144 147.

374. Шарпатый В.А. Проблемы радиационной химии белковых молекул (обзор) // Химия высоких энергий. 1995. Т. 29. № 2. С. 85 100.

375. Шарыгин В.Л., Шишкина Л.Н., Рождественский Л.М., Кормер З.С., Пулатова М.К. Быстрые метаболические изменения в крови и органах крыс под влиянием импульсного излучения электронов в сверхвысоких дозах // Изв. РАН. Сер. биолог. 1994. N 2. С. 254 270.

376. Шашков А.С., Тоукач Ф.В., Парамонов Н.А., Сенченкова С.Н., Каца В., Кпирель Ю.А. Структура нового лизин-содержащего О-специ-фического полисахарида бактерий Proteus Mirabilis 026 // Биохимия. 1996. Т. 61. Вып. 1.С. 24-33.

377. Швец В.И., Степанов А.И., Крылова В.Н., Гулак П.В. М/о-инозит и фосфоинозитиды. М.: Наука, 1987. 248 с.

378. Шевченко О.Г. Состояние процессов перекисного окисления липидов в тканях мышевидных грызунов из районов с повышенной естественной радиоактивностью. Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 2001.24 с.

379. Шенкман Б.З. Бактериальные эндотоксины и медиаторные системы макроорганизма // Успехи соврем, биологии. 1991. Т. 111. Вып. 3. С. 400-415.

380. Шишкина Л.Н., Березин И.В., Быковченко В.Г., Захаркин В.И., Корнева В.В. Способ получения гидроперекиси циклододецила. А.с. СССР. № 157347 от 27.06.1963.

381. Шишкина JI.H., Пальмина Н.П., Бурлакова Е.Б. Физико-химические свойства липидов и радиочувствительность // Радиочувствительность нормальной и опухолевой ткани. Алма-Ата: Наука КазССР, 1974. С. 78-82.

382. Шляпинтох В.Я., Карпухин О.Н., Постников Л.М., Захаров И.В., Вичутинский А.А., Цепалов В.Ф. Хемилюминесцентные методы исследования медленных химических процессов. М.: Наука, 1966. 300 с.

383. Штамм Е.В., Пурмаль А.П., Скурлатов Ю.И. Роль пероксида водорода в природной водной среде // Успехи химии. 1991. Т. 60. Вып. 11. С. 2373-2411.

384. Эйдус Л.Х. О едином механизме инициации различных эффектов малых доз ионизирующих излучений // Радиац. биология. Радиоэкология. 1996. Т. 35. N. С. 874-882.

385. Эмануэль Н.М. О свободнорадикальном механизме превращения нормальных клеток в опухолевые // Узловые проблемы цитологии. Тез. докл. Л.: АН СССР, 1959. С. 192 193.

386. Эмануэль Н.М., Гагарина А.Б. Критические явления в цепных вырожденно-разветвленных реакциях // Успехи химии. 1966. Т. 35. N 4. С. 619-656.

387. Эмануэль Н.М., Гал Д. Окисление этилбензола (модельная реакция) / Отв. ред. И.В. Березин. М.: Наука, 1984. 376 с.

388. Эмануэль Н.М., Денисов Е.Т., Майзус З.Л. Цепные реакции окисления жидких углеводородов. М.: Наука, 1965. 270 с.

389. Эмануэль Н.М., Лясковская Ю.Н. Торможение процессов окисления жиров. М.: Пищепромиздат, 1961. 355 с.

390. Юрченко Н.И., Гольденберг В.И. Влияние среды на кинетические параметры инициированного окисления и антиоксидантную активность ингибиторов в жирах // Кинетика и катализ. 1980. Т. XXI. N 3. С. 606 -611.

391. Ямскова В.П., Ямсков И.А. Механизм биологического действия физико-химических факторов в сверхмалых дозах // Росс. хим. ж. (Ж. Росс. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 1999. Т. 43. № 2. С. 74 79.

392. Янишлиева Н., Скибида И., Майзус 3., Попов А. О скорости и механизме зарождения церей при окислении метиловых эфиров олеиновой, линолевой и линоленовой кислот // Изв. Отд. хим. наук. Б АН. 1971. Т. IY, N. С. 1-9.

393. Alper Т. Cell Death and It's Modification: The Roles of Primary Lesions in Membranes and DNA // Biophysical Aspects of Radiation Qualities. Vienna: IAEA, 1971. P. 171 194.

394. Alper T. Observation on Relevant to the Mechanism of RBE effects in the Killing of Cells // Biological Effects of Neutron Irradiation upon Cell Function. IAEA Symp. Vienna: IAEA, 1974. P. 133 152.

395. Ames B.N., Cathcart R., Schwies E., Hochstein P. Uric acid provides an antioxidant defense in humans against oxidant- and radical-caused aging andcancer: A hypothesis // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1981. V. 78. N 11. P. 6858 -6862.

396. Anker P., Strain M., Maurice P.A. Spontaneous Release of DNA by Human Blood Lymphocytes as shown in an vitro system // Canser Res. 1975. V. 35. N 9. P. 2375-2382.

397. Aoshima H., Kadoya K., Taniguchi H., Satoh Т., Hatanaka H. Generation of free radicals during the death of Saccharomyces cerevisiae caused by lipid hydroperoxide // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1999. V. 63. N 6. P. 1025 1031.

398. Arefjev D.V., Domnina N.S., Komarova E.A., Bilibin A.Y. Sterically hindered phenol-dextran conjugates: synthesis and radical scavenging activity // Eur. Polymer J. 1999. V. 35. N 2. P. 279 284.

399. Asakawa Т., Matsushita S. Coloring Conditions of Thiobarbituric Acid Test for Detecting Lipid Hydroperoxides // Lipids. 1980. V. 15. N 3. P. 137 140.

400. Asaoka Y., Yoshida К., Oka M., Shinomura Т., Mishima H., Matsushima S., Nishizuka Y. The signal-induced phospholipid degradation cascade and protein kinase С activation // Ciba Found Symp. 1992. V. 164. P. 50 59.

401. Atmospheric Oxidation and Antioxidants./ Ed. Scott G. Amsterdam- L.-N.Y.- Tokyo: Elsevier , 1993. V. III. 528 p.

402. Auroma O.I., Halliwell В., Gajewski E., Dizdaroglu M. Copper-ion-dependent damage to the bases in DNA in the presence of hydrogen peroxide // Biochem. J. 1991. V. 273. P. 601 604.

403. Avila M.A., Otero G., Cansado J., Dritschilo A., Velasco J.A., Notario V. Activation of phospholipase D participates in signal transduction pathways responsive to gamma-radiation // Canser Res. 1993. V. 53 (19). P. 4474 4476.

404. Bacq Z., Alexander P. Importance for radioprotection of the reactions of cells to sulphydryl and disuphide compounds //Nature. 1964. V.203. P. 162 164.

405. Bao W., Fukushima Y., Jensen K.A., Moen M.A., Hammel K.E. Oxidative degradation of non-phenolic lignin during lipid peroxidation by fungal manganese peroxidase // FEBS Lett. 1994. V. 354. P. 297 300.

406. Barclay L.R.C., MacNeil J.M., VanKessel J.A., Forrest B.J., Porter N.A., Lehman L.S., Smith K.J., Ellington Jr. J.C. Auoxidation and Aggregation of Phospholipids in Organic Solvents // J. Am. Chem. Soc. 1984. V. 106. P. 6740 6747.

407. Barclay R.L.C., Vinqvist M.R., Antunes F., Pinto R.E. Antioxidant Activity of Vitamin E Determined in a Phospholipid Membrane by Product Studies: Avoiding Chain Transfer Reactions by Vitamin E Radicals // J. Am. Chem. Soc. 1997. V. 119. P. 5764 5765.

408. Barta A., Mehta B.K., Bokadia M.M. Centratherum anthelminticum -Identification of the Fatty Acid Composition and Antimicrobial Activity of Oil // Fette. Seifen. Anstrichmittel. 1983. 85 Jahrgang. N 6. S. 230 232.

409. Batrakov S.G., Nikitin D.I. Lipid composition of the phosphatidyl-choline-producing bacterium Hyphomicrobium vulgare NP-160 // Biochim. Biophys. Acta. 1996. V: 1302. P. 129 137.

410. Batrakov S.G., Nikitin D.I., Pitryuk I.A. A novel glycolipid, 1,2-diacyl-3-a-D-glucuronopyranosyl-sw-glycerol taurineamide, from budding seawater bacterium Hyphomonas jannoschiana II Biochim. Biophys. Acta. 1996. V. 1302. P. 167- 176.

411. Batrakov S.G., Nikitin D.I., Pitryuk I.A. Lipid composition of gram-negative, budding, seawater bacterium Hyphomonas jannaschiana lacking in phospholipids //Biochim. Biophys. Acta. 1996. V. 1303. P. 39 46.

412. Batrakov S.G., Nikitin D.I., Sheichenko V.I., Ruzhitsky A.O. Unusual lipid composition of the gram-negetive, freshwater, stalked bacterium Caulobacter bacteroides NP-105 // Biochim. Biophys. Acta. 1997. V. 1347. P. 127 139.

413. Berger H. Jr., Huang R.C.C., Irvin J.L. Purification and Characterization of a Deoxyribonucleic Acid Polymerase from Rat Liver // J. Biol. Chem. 1971. V. 246. N 23. P. 7275 7283.

414. Bowry V.W., Stocker R. Tocopherol-Mediated Peroxidation. The Pro-oxidant Effect of Vitamin E on the Radical-Initiated Oxidation of Human Low-Density Lipoprotein // J. Am. Chem. Soc. 1993. V. 115. P, 6029 6044.

415. Boyum A. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1968. V. 21. Suppl. 97. P. 28-33.

416. Braun P., Gerritse G., van Dijl J.M., Quax W.J. Improving protein secretion by engineering components of the bacterial translocation machinery // Curr. Opin. Biotechnol. 1999. V. 10. N 4. P. 376 381.

417. Bruszewski Т.Е., Fergus S.L., Mumma R.O. // Lipids. 1972. V. 7. P. 695-703.

418. Budker V.G., Godovikov A.A., Naumova L.P., Slepneva I.A. // Nucl. Acids Res. 1980. V. 8.N 11. P. 249^-2515.

419. Burlakova E.B. Consequences of Low Level Radiation A review // Low level Radiation and Living State / Eds. N.G. Huigol, D.V. Gopinath, B.B. Singh. New Deli, Madras, Bombey, Calcutta: Narosa Publ. House, 1994. P. 57 - 62.

420. Burlakova E.B. Effect of oxidative reactions in membrane lipids on1. Ilipid-dependent Mg "ATPase and glucose-6-phosphatase activity // Membrane Transport Process. N.Y.: Raven Press, 1978. V. 2. P. 31 38.

421. Burlakova E.B., Archipova G.V., Djalyabova M.I., Molochkina E.M., Khokhlov A.P. Membrane Lipids as Information Carriers // Biophysical and Biochemical Information Transfer in Aging and Recognition. N.Y.: Plenum Press, 1979. P. 583-594.

422. Burlakova E.B., Archipova G.V., Shishkina L.N., Goloshchapov A.N., Zaslavsky Yu.A. Influence of ionizing radiation on the regulatory function of biomembranes // Studia Biophys. 1975. V. 53. P. 67-71.

423. Burton G.W., Ingold K.U. Vitamin E as an in vitro and in vivo antioxidant. Review. // Ann. NY Acad. Sci. 1989. V. 570. P. 7 22.

424. Bystritsky V. // Biologiya. 1954. V. 9. N 2. P. 566 569.

425. Callerio D., Gadliardi R., Chersicla M., Callerio C. // Instituto Sieroterapico Nilanese Bolletino. 1983. V. 62. N 1. P. 251 256.

426. Capitani S., Mazzotti G., Jovine R., Papa S., Maraldi N.M., Manzoli F.A. Effect of phosphatidylcholine vesicles on the activity of DNA polymerase //J. Mol. and Cell Biochem. 1979. V. 27. N3. P. 135 138.

427. Capitani S., Mazzotti G., Para S. et al. Effects of phospholipid vesicles on the activity of terminal transferase // Biochem. Biophys. Res. Communs. 1979. V. 89. N4. P. 1206- 1211.

428. Casareft A.P., Comar C.L. // Radiat. Res. 1973. V. 53. N 3. P. 455 461.

429. Cash G.A., George G.A., Bartley J.P. A chemiluminescence Study of the Oxidation of Vegetable Oils and Model Compounds and the Effects of Antioxidants // J. Sci. Food Agr. 1988. V. 43. P. 277 287.

430. Cerveny T.Y., Hampton J.D. Postradiation regional cerebral blood flow in primats // Aviat Space and Environ. Med. 1986. V. 57. N 6. P. 578 582.

431. Chance В., Sies H., Boveris A. Hydroperoxide Metabolism in Mammalian Organs // Physiol. Rev. 1979. V. 59. N 4. P. 304 308.

432. Chapman J.D., Gillespie C.J., Revers A.P., Dugle D.L. Radioprotectors, radiosensitiser and the shape mammalian cell survival curve // Cell Survival Low Doses Radiat. Theoret. and Clin Implicat. Ргос.6л L.H. Gray Conf. L, 1975. P. 135.

433. Chauveau J., Moule Y., Roniller C.M. Isolation of pure and unaltered liver nuclei morphology and biochemical composition // Exp. Cell Res. 1956. V. 11. P. 317-321.

434. Cocharane C.G. Mechanisms of oxidant injury of cells // Molec. Aspects Med. 1991. V. 12. P, 137- 147.

435. Cole A., Meyn R.E., Chen R., Corry P.M., Hittelman W. Mechanism of Cell Injury // Radiation Biology in Cancer Research / ed. R.E. Meyn. N.Y.: Raven Press, 1980. P. 33 58.

436. Copper Proteins and Copper Enzymes / Ed. Loutie R. USA: CRC Press, 1984.V. 1 -3.380 p.

437. Cowan S.W., Schirmer Т., Rummel G., Steiert M., Ghosh R., Pauptit R.A., Jansonius J.N., Rosenbusch J.P. Crystal structures explain functional properties of two E. coli porins // Nature. 1992. V. 358. P. 727 733.

438. Cross A.R., Jones O.T.G. Enzymic mechanisms of superoxide production//Biochim. Biophys. Acta. 1991. V 1057. P. 281 298.

439. Cuvelier M.-E., Richard H., Berset C. Comparison of the Antioxidative Activity of Some Acid-phenols: Structure Activity Relationship // Biosci. Biotech. Biochem. 1992. V. 56. N 2. P. 324 - 325.

440. Dardalhon-Samsonoff M., Averback D. DNA-membrane Complex Restoration in Micrococcus Radiodurans after X-Irradiation: Relation to Repair, DNA-systhesis and DNA-degradation // Intern. J. Radiat. Biol. 1980. V. 38. N1. P. 31-52.

441. Dart R.K., Stretton R.J. // Microbiol. Lett. 1976. V. 3. P. 31 36.

442. Davies M J. Applications of Electron Spin Resonance Spectroscopy to the Identification of Radicals Produced During Lipid Peroxidation // Chem. Phys. Lipids. 1987. V. 44. N 2-4. P. 149 173.

443. Davis J.M., Svendsgaard D.J. // J. Toxic. Env. Helth. 1990. V. 30. P. 71 -83.

444. Davy C.A., Tesfay Z., Jones J., McCarthy C., Ostrand-Rosenberg S., Rosenberg R.C. Endogenous superoxide dismutase and catalase activities and radiation resistance in mouse cell lines // Int. J. Radiat. Biol. 1988. V. 53. N 2. P. 283 289.

445. De Vrije Т., de Swat R.L., Downah W., Tommassen J., de Kruijff B. Phosphatidylglycerol is involved in protein translocation across Escherichia coli inner membranes // Nature. 1988. V. 334 (6178). P. 173 175.

446. Dean C.J., Feldschreiber P., Burrel A.P. Repair of double Strand Breaks in X-Irradiated Micrococcus Radiodurans // Proc. of First Europ. Biophys. Congr. Vienna, 1971. V. II. P. 197 201.

447. Delikonstantinos G., Kopeikina-Tsiboukidon L., Villitonou V. Evaluation of membrane fluidity effects and enzyme activities in adriamicin neurotoxity//Biochem. Pharmacol. 1987. V. 36. P. 1153-1158.

448. Denisov E.T., Denisova T.G. Handbook of Antioxidants. Bond Dissocoition Energy, Rate Constants, Activation Energy and Enthalpies of Reactions (2nd ed.) // Boca Raton, London, New York, Washington: CRC Press, 2000. 290 p.

449. Di Monte D., Smith M.T. Free Radicals, Lipid Peroxidation and 1-Methyl-4-Phenyl-l,2,3,6-Tetrahydropyridine (MPTP) Induced Parkinsonism // Revs, in the Neurosciences. 1988. V. 2. N 1. P. 67 - 81.

450. Dikalov S., Kirilyuk I., Grigor'ev I. Spin Trapping of О-, C- and S-Centered Radicals and Peroxynitrite by 2H-imidazole-l-oxides // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1996. V. 218. N 2. P. 616 622.

451. Dizdaroglu M., Aruoma A.I., Halliwell 'B. Modification of Bases in DNA by Copper Ion-l,10-Phenanthroline Complexes // Biochemistry. 1990. V. 29. P. 8447-8451.

452. Dowhan W. Molecular basis for membrane phospholipid diversity: why are there so many lipids? // Annu. Rev. Biochem. 1997. V. 66. P. 199 232.

453. Dowhan W. Genetic analysis of lipid-protein interactions in Escherichia coli membranes // Biochim. Biophys. Acta. 1998. V. 1376. P. 455 466.

454. Duca G. Advances and Prospects of Ecological Chemistry // Mediul Ambiant. 2002. N 3(3). P. 4 9.

455. Duggan D.E. Spectrofluorometric Determination of Tocopherol // Arch. Biochem. Biophys. 1959. V. 84. P. 116 122.

456. Dygas A., Baranska J. Lipids and signal transductions in the nucleus // Acta Biochim. Pol. 2001. V. 48. N 2. P. 541- 549.

457. Edimecheva I.P., Kisel M.A., Shadyro O.I., Vlasov A.P., Yurkova I.L. The Damage to Phospholipids caused by free radical attack on glycerol and sphingosine backbone // Intern. J. Radiat. Biol. 1997. V. 71. N 5. P. 555 560.

458. Eerola E., Lehtonen O.-P. Optimal Data Processing Procedure for Automatic Bacterial Identification by Gas-Liquid Chromatography of Cellular Fatty Acids // J. Chem. Microbiol. 1988. V. 26. N 9. P. 1745 1753.

459. Eguchi M., Ishida T. // Mem. Natl. Inst. Polar Rec. Spec. Issue. 1986. V. 40. N2. P. 413-414.

460. Elbash P., Weiss J. Phagocytosis of bacteria and phospholipid degradation // Biochim. Biophys. Acta. 1988. V. 947. P. 29 52.

461. Emanuel N.M., Zaikov G.E., Maizus Z.K. Oxidation of Organic Compounds. Effect of Medium. // Oxford: Percamon Press, 1984. 650 p.

462. English D. Phosphatide acid: a lipid messenger involed in intracellular and extracellular signalling // Cell Signal. 1996. V. 8. N 5. P. 341 347.

463. Eriksson K.-E. L., Blanchette R.A., Ander P. Microbial and Enzymatic Degradation of Wood and Wood Components. Berlin: Springier, 1990. 87 p.

464. Eskelinen S., Saukko P. Effect of lysophosphatidylcholine (LPC) on the size and shape of erythrocytes in iso- and hypertonic solutions. A scanning electron microscope study // Stud, biophys. 1982. V. 90. P. 151 152.

465. Esterbauer H., Rotheneder M., Striegl G., Waeg G., Ashy A., Sattler W., Jurgens G. Vitamin E and other Lipophilic Antioxidants Protect LDL against Oxidation II Fat Sci. Technol. 1989.91 Jahrgang. N 8. S. 316 324.

466. Fairbairn D.J., Law B.A. The effect of nitrogen and carbon sources on proteinase production by Pseudomonas fluorescens II J. Appl. Bacterid. 1987. V. 62. N2. P. 105-114.

467. Farias R.N., Morero R.D., Sineriz F., Frucco R.E. Regulation of allosteric membrane-bound enzymes through changes in membrane lipid composition//Biochim. Biophys. Acta. 1975. V. 415. N2. P. 231 251.

468. Faroogui A.A., Horrocks L.A. Exicitotoxicity and neuronal disorders: involvement of membrane phospholipids // Int. Rev. Neurobiol. 1994. V. 36. P. 267-323.

469. Ferber E., Munder P., Kohlshutter A., Fischer H. Lysolecithin-Stoffweghsel in Erithrocyten membranen.Lysolecithin-Acylierung and Lyso-phospholipase in alternen Erythrocyten // Europ. J. Biochem. 1968. V. 5. N 4. P. 395 402.

470. Finean J.B. Interaction between cholesterol and phospholipid in hydrated bilayers // Chem. Phys. Lipids. 1990. V. 54. N 1. P. 147 156.

471. Fisher A.B., Dodia С., Manevich Y., Chen J.W., Feinstein S.I. Phospholipid hydroperoxides are substrates for non-selenium glutathione peroxidase // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. N 30. P. 21346 21334.

472. Floyd R.A., Schneider J.E. Hydroxyl free radical damage to DNA // Membrane Lipid Oxidation / Ed. Vigo-Pelfrey C. Boca Raton Ann Arbor Boston: CRC Press, 1991. V. III. P. 69-85.

473. Foti M., Ingold K.U., Lusztyk J. The Surprisingly High Reactivity of Phenoxyl Radicals // J. Am. Chem. Soc. 1994.V. 116. P. 9440 9447.

474. Frankel E.N. Lipid Oxidation // Prog. Lipid Res. 1980. V. 19. P. 1 22.

475. Frankel E.N. Secondary products of lipid oxidation // Chemistry and Physics of Lipids. 1987. V. 44. N 2-4. P. 73 85.

476. Frimer A.A. Photosensitized Oxygenation of Small Ring Olefins // The Spectrum. 2000. V.13. Issue 2. P. 9 16.

477. Fukami K., Simidu U., Taga N. Distribution of heterotrophic bacteria in relation of the concentration of particulate organic matter in seawater // Can. J. Microbiology. 1983. V. 29. N 5. P. 570 575.

478. Gang M.C., Ojha S., Bansal D.D. Antioxidant status of streptozotocin diabetic rats // Indian J. Exp. Biol. 1996. V. 34. P. 264 266.

479. Gavrilova N.G., Petkova D.H. Role of rat liver plasma membrane phospholipids in regulation of protein kinase activities // J. Lipid Mediat. Cell Signal. 1995. V. 11.N3.P. 241-252.

480. George A.M., Cramp W.A., Yatvin M.B. The influence of membrane fluidity on radiation induced changes in the DNA of E.coli К 1060 // Intern. J. Radiat. Biol. 1980. V. 38. N 4. P. 427 438.

481. Ghosh S., Strum J.C., Bell R.M. Lipid biochemistry: functions of glyce-rolipids and sphingolipids in cellular signaling // FASEB J. 1997. V. 11. N 1. P. 45 50.

482. Gille J.J., Joenje H. Biological significance of oxygen toxicity: an introduction // Membrane Lipid Oxidation / Ed. Vigo-Pelfrey C. Boca Raton Ann Arbor Boston: CRC Press, 1991. V. Ш. P. 1 32.

483. Giulivi C., Hochstein P., Davies K.J.A. Hydrogen peroxide production by red blood cells// Free Radic. Biol. & Med. 1993. V. 16. P. 123 129.

484. Gofman J.W. Radiation-induced cancer from low dose exposure: an independent analysis / Ed. O'Connor. San Francisco, California, 1990. 455 p.

485. Goldstein S., Czapskj G. The role and mechanism of metal ions and their complexes in enhancing damage in biological system or in protecting these systems from the toxicity of 02*// J. Free Radic. Biol. & Med. 1986. V. 2. P.3-11.

486. Goloshchapov A.N., Burlakova E.B. Spin probes for Study of Intact and Cancer Cell Membranes // Bioactive Spin Labels / Ed. R.I. Zdanov. Berlin: Springer-Verlag, 1992. P. 509 526.

487. Goni F.M., Alonso A. Structure and functional properties of diacyl-glycerols in membranes // Prog. Lipid Res. 1999. V. 38. N 1. P. 1-48.

488. Graber R., Sumida C., Nunez E.A. Fatty acids and cell signal transduction // J. Lipid Mediat. Cell Signal. 1994. V. 9. N 2. P. 91 116.

489. Grzelinska E., Bartosz G., Gwozdzinski K., Leyko W. A spin-label Study of the Effect of Gamma-Radiation on Erythrocyte Membrane: Influence of Lipid Peroxidation on Membrane Structure // Intern. J. Radiat. Biol. 1979. V.36.N4. P. 325-334.

490. Guerzoni M.E., Ferruzzi M., Sinigaglia M., Criscuoli G.C. Increased cellular fatty acid desaturation as a possible key factor in thermotolerance in Saccharomyces cerevisiae II Can. J. Microbiol. 1997. V. 43. N 26. P. 569 576.

491. Guerzoni M.E., Lanciotti R., Cocconcelli P.S. Alteration in cellular fatty acid composition as a response to salt, acid, oxidative and thermal stresses in Lactobacillus helveticus И Microbiology. 2001. V. 147. Pt.8. P. 2255 2264.

492. Gupta M.S., Devi P.U. Formation of Giant Hepatocytes in Response to Radiation // Current Sci. 1981. V. 50. N 14. P. 637 638.

493. Gutierrez A., del Rio J.C., Martinez-Inigo M.J., Martinez M.J., Marti-nez A.T. Production of New Unsaturated Lipids during Wood Decay by Ligni-nolitic Basidiomycetes // Appl. Environ. Microbiol. 2002. V.68. N 3. P. 1344 -1350.

494. Hammel K.E. Extracellular free radical biochemistry of ligninolytic fungi // New J. Chem. 1996. V. 20. N 2. P. 195 198.

495. Hammel K.E., Gai W.Z., Green В., Moen M.A. Oxidative degradation of phenanthrene by the ligninolytic fungus Phanerochaete chrysosporium II Appl. Environ. Microbiol. 1992. V. 58. P. 1832 1838.

496. Hammel K.E., Kapich A.N., Jensen K.A., Ryan Z.C. Reactive oxygen species as agents of wood decay by fungi // Enzyme and Microbial Technology. 2002. V. 30. P. 445 453.

497. Hammer C.T., Wills E.D. The effect of ionizing radiation on the fatty acid composition of natural fats and on lipid peroxide formation // Intern. J. Radiat. Biol. 1979. V. 35. N 4. P. 323 332.

498. Harada K., Moriwaki M., Oda S. Arrhenius Plot Analysis of the Mechanism of Thermotolerance Induction in the Radioresistant Bacterium Deino-coccus Radiodurans II J. Gen. Appl. Microbiol. 1988. V. 34. № 2. P. 209 212.

499. Harvey P.J., Palmer J.M. Oxidation of phenolic compounds by ligninase // J. Biotechnol. 1990. V. 13. N 2-3. P. 169 179.

500. Hatakka A. Biodegradation of Lignin // Biopolymers. Lignin, humic substances and coal / Ed. Hofrichter M. and Steinbuchel A. Wiley-VCH: Verlag GmbH, 2001. V. 1. P. 129 180.

501. Heitzmann M., Wilson R. Low Dose Linearity: The Rule of the Exception? // BELLE Newslettr. 1997. V. 6. N 1. P. 1-10.

502. Hensley K., Robinson K.A., Gabbita P., Salsman S., Floyd R.A. Reactive Oxygen Species, Cell Signaling, and Cell Injury // Free Radic. Biology & Med. 2000. V. 28. N 10. P. 1456 1462.

503. Higgins J.A. Heterogeneity of Phospholipid Synthesis // J. Molec. Biol. 1976. V.34.N1.P. 177- 197.

504. Hirano S., Miyashita K., Ota Т., Nishikawa M., Maruyama K., Nakaya-ma S. Aqueous Oxidation of Ethyl Linoleate, Ethyl Linolenate, and Ethyl Docosahexaenoate//Biosci. Biotech. Biochem. 1997. V. 61.N. 2. P. 281 285.

505. Hirsch P. Budding bacteria // Ann. Rev. Microbiol. 1974. V. 28. P. 391 -444.

506. Hirsch P., Conti S.F. Biology of budding bacteria. Enrichment, isolation and morphology of Hyphomicrobium spp // Arch. Microbiol. 1964. V. 48. P. 339-357.

507. Ho S.K., Но Y.L. The role of Hydroxyl Radicals in Radiation-Induced Single-Strand Breaks of Bacterial DNA Sensitized by Parachloromercuri-benzoate // Radiat. Res. 1976. V. 67. N 2. P. 277 285.

508. Hofer K.G., van Loon N., Schneiderman M.H., Charlton D.E. The Paradoxal Nature of DNA Damage and Cell Death Induced by 125 I Decay // Radiat. Res. 1992. V. 130. P. 121 124.

509. Hofrichter M. Review: lignin conversion by manganese peroxidase (MnP) // Enzyme and Microbial Technology. 2002. V. 30. P. 454 466.

510. Holtsberg F.W., Steiner M.R., Keller J.N., Mattson M.P., Steiner S.M. Lysophosphatidic acid induces necrosis and apoptosis in hippocampal neurons //J. Neurochem. 1998. V. 70. N 1. P. 66 76.

511. Horowitz A., Krichevsky M.I., Atlas R.M. Characteristics and diversity of subaretic marine oligotrophic, stenoheteroterophic and euryhetrophic bacterial populations // Can. J. Microbiol. 1983. V. 29. N. 5. P. 527 535.

512. Houwink A.L. // Experientia. 1983. V. 8. N 4. P. 385

513. Howlett N.G., Avery S.V. Induction of Lipid Peroxidation during Heavy Metal Stress in Saccharomyces cerevisiae and Influence of Plasma Membrane Fatty Acid Unsaturation // Appl. Environ. Microbiol. 1997. V. 63. N. 8.P. 2971 -2976.

514. Howlett N.G., Avery S.V. Relationship between cadmium sensitivity and degree of plasma membrane fatty acid unsaturation in Saccharomyces cerevisiae //Appl. Microbiol. & Biothech. 1997. V. 48. N 4. P. 539 545.

515. Hudson B.J.F., Mahgoub S.E. O. Synergism between phospholipids and naturally-occuring antioxidants in leaf lipids // J. Sci. Food and Agr. 1981. V. 32. N2. P. 208-210.

516. Huijbregts R.P., de Kroon A.I., de Kruijff B. Topology and transport of membrane lipids in bacteria // Biochim. Biophys. Acta. 2000.V. 1469. N 1. P. 43-61.

517. Hunter К., Rose A. The Yeasts. London, Cambrige Univ. Press. 1971. V. 2. D. 211 -273.

518. Ishida T, Eguchi M., Kadota H. // J. Marine Ecology. 1986. V. 30. N. 2. 197-203.

519. Ishikawa Y., Sugiyama K., Nakabayashi K. Stabilization of tocopherol by three components synergism involving tocopherol, phospholipid and amino compound//J. Am. Oil Chem. Soc. 1984. V. 61. N 5. P. 950 954.

520. Itzhaki R., Gill D.M. A micro-biuretic method for estimating proteins // Anal. Biochem. 1964. V. 9. P. 401 410.

521. Jacobson A.F., Yatvin M.B. Changes in phospholipid composition of Escherichia coli following gamma- and UV-irradiation // Radiat. Res. 1976. V. 66. N2. P. 247-266.

522. Jensen K.E., Bao W., Kawai S., Srebotnik E., Hammel K.E. Manganese-Dependent Cleavage of Nonphenolic Lignin Structure by Ceriporiopsis subvermispora in the Absence of Lignin Peroxidase // Appl. Environ. Microbiol. 1996. V. 62. N 10. P. 3679 3686.

523. Joshi S., Mathur J.M.S. Effect of Growth Temperature on the Physico-chemical Characteristics of Fungal Oil // Fat. Sci. Technol. 1987. 89 Jahrgang. N8. S.311 -313.

524. Kagan V.E., Fabisiak J.P., Shvedova A.A., Tyurina Y.Y., Tyurin V.A., Schor N.F., Kawai K. Oxidative signaling pathway externalization of plasma membrane phosphatidylserine during apoptosis // FEBS Lett. 2000. V. 477. P.

525. Kale R.K., Sitasawad S.L. Non-linear pattern of radiation induces lipid peroxidation is not affected by vitamin E, Fe ions and molecular oxygen // Indian J. Experimental Biol. 1991. V. 29. P. 778 781.

526. Kalo P., Huotari H., Antila M. Pseudomonas fluorescens Lipase-catalysed Intersterification of Butter Fat I I Fat. Science. Technology. 1989. 91 Jahrgang. N 7. S. 276-281.

527. Kandler 0., Zehender C., Huber O. // Arch. Microbiol. 1954. V. 21. N 3.P. 57-59.

528. Kapich A., Hofrichter M., Vares Т., Hatakka A. Coupling of Manganese Peroxidase-Mediated Lipid Peroxidation with Destruction of Nonphenolic Lignin Model Compounds and 14C-Labeled Lignins // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1999. V. 259. N 1. P. 212 219.

529. Kapich A.N., Jensen K.A., Hammel K.E. Peroxyl radicals are potential agents of lignin biodegradation // FEBS Lett. 1999. V. 461. P. 115 119.

530. Kato F., Nakazkto Y., Shirashi Т., Hayashi K., Murata A., Yone Y. Screening for Antioxidative Activity in Microorganisms (Utilization of Waste Fish Treated with Microorganisms. Part I. // Nippon Nogeikagaku Kaishi. 1985. V. 59. N9. P. 901 -907.

531. Kheiralla Z.H., Mostafa S.A., Ashour S.M. // Egypt J. Microbiol. 1987. V. 22. N 1. P. 151

532. Kirk Т.К., Farrell R.L. Enzymatic «combustion»: the microbial degradation of lignin// Annu. Rev. Microbiol. 1987. V. 41. P. 465 505.

533. Klema E., Shihab-Eldin A., Wilson R. Some claims of unusually large effects of radiation// Veritas. 1989. July 16. 124 p.

534. Kohn K.W. Assessment of DNA damage by Filter Elution Assays // Base LifeSci. 1986. V. 38. P. 101 118.

535. Kolomiytseva I.K., Slozhenikina L.V., Fialkovskaya L.A., Kulagina T.P., Markevich L.N., Potekhina N.I. Nonmonotonous Changes in Metabolic

536. Parameters of Tissues and Cells under Action of Ionizing Radiation on Animals // J. Biol. Phys. 1999. V. 2$. P. 325 338.

537. Kono Y. Apparent antibacterial activity of catalase: role of lipid hydroperoxide contamination. J. Biochem. (Tokyo). 1995. V. 117. N 1. P. 42 46.

538. Koteles G.Y. New Aspects of Cell Membrane Radiobiology and their Impact on Radiation Protection // Atomic Energy Review. 1979. V. 17. N 1. P. 3-30.

539. Kreeb K.H., Schwegler H., Muller J. et al. Zur Anwendung der «Katastrophenteorie» fur die Modelbindung in Bereich der Bioindikation. Vergleich der Organizationsebenen «Vegetation» und «Chloroplasten» // Angew. Bot. 1981. V. 55. P. 149 167.

540. Kumar V., Misra U.K. Hepatic plasma membrane fluidity and dietary proteins // Ind. J. Biochem. Biophys. 1991. V. 28. August. P. 301 306.

541. Kusters R., de Vrije Т., Breukink E., de Kruijff B. SecB Protein Stabilizes a Translocation-competent State of Purified prePhoE Protein // J. Biol. Chem. 1989. V. 264. N 35. P. 20827 20830.

542. Lang S., Kasiwela E., Wagner F. Antimicrobial Effect of Biosurfactants // Fat. Sci. Technol. 1989. 91 Jahrgang. N 9. S. 363 366.

543. Leibovitz В., Smith-Sonneborn J. A method of lipid peroxidation in Paramecium tetraurelia II Age. 1988. V. 11. P. 128 134.

544. Leonarduzzi G., Arkan M.C., Basaca H., Chirpotto E., Sevenain A., Poli G. Lipid Oxidation Products in Cell Signaling // Free Radic. Biol. & Med. 2000. V. 28.N 2. P. 1370 1378.

545. Maeba R., Maruyama A., Tarutani O., Ueta N., Shimasaki H. Oxidized low-density lipoprotein induces the production of superoxide by neutrophils //FEBS Lett. 1995. V. 337. N 3. P. 309 312.

546. Mansurova S.E., Kulaev I.S., Dukhovich V.F., Khokhlov A.P., Burlakova E.B. // Biochem. Intern. 1982. V. 5. N 4. P. 457 462.

547. Marcon J.L., Filho D.W. Antioxidant processes of the wild tambaqui, Colossoma macropomum (Osteichthyes, Serrasalmidae) from the Amazon // Сотр. Biochem. Physiol. Part C. 1999. V. 123. P. 257 263.

548. Markesbery W.R. Oxidative Stress Hypothesis in Alzheimer's Disease //Free Radic. Biol. & Med. 1997. V. 23. N 1. P. 134 147.

549. McMillin J.B., Dowhan W. Cardiolipin and apoptosis // Biochim. Biophys. Acta. 2002. V. 1585. N 2-3. P. 97 107.

550. Membrane Lipid Oxidation / Ed. Carmen Vigo-Pelfrey. Boca Raton, Ann Arbor, Boston: CRC Press, 1991. V. III. 300 p.

551. Michiels C., Remacle J. Cytotoxicity of linoleic acid peroxide, malon-dialdehyde and 4-hydroxynonenaI towards human fibroblasts // Toxicology. 1991. V. 66. P. 225 234.

552. Miller//J. Bacteriol. 1985. V. 162. N 1. P. 263 270.

553. Moen M.A., Hammel K.E. Lipid Peroxidation by the Manganese Peroxidase of Phanerochaete chrysporium is the Basis for Phenanthrene Oxidation by the Intact Fungus // Appl. Environ. Microbiol. 1994. V. 60. N 6. P. 1956- 1961.

554. Montandon D., Carbonneau M.-A., Melin A.-M., Rebeyrotte N. Lipid composition, lipid fluidity and radioresistence of Deinococcus radiodurans and two mutant strains // Biochemie. 1987. V. 69. N 11-12. P. 1243 1250.

555. Montville T.J. Food microbiology. Boca Raton /Fla/: CRC Press, 1987. V.l. Concepts in physiology and metabolism. 79 p.

556. Morelle J. Peroxydes lipideques radicaux libres vieillissement et lipoaminoacides. 2 partie // Partums, cosmetique, aromes. 1988. N 80. April -Mai. P. 91 104.

557. Mukai K., Oka W., Watanabe K., Egawa Y., Nagaoka S.-i. Kinetic Study of Free-Radical-Scavenging Action of Flavonoids in Homogenous and Aqueous Triton X-100 Micellar Solutions // J. Phys. Chem. A 1997. V. 101. P. 3746-3753.

558. Munnik T. Phosphatidic acid: an emerging plant lipid second messenger // Trends Plant Sci. 2001. V. 6. N 5. P. 227 233.

559. Nakamura S. Phosphatidylcholine hydrolysis and protein kinase С activation for intracellular signaling network // J. Lipid Mediat. Cell Signal. 1996. V. 14. N 1-3. P. 197-202.

560. Nakazawa Т., Nagatsuka S. Radiation-induced lipid peroxidation and membrane permiability in liposomes // Intern. J. Radiat. Biol. 1980. V. 18. N 5. P. 537 544.

561. Nesmeyanova M.A., Bogdanov M.V. Participation of acid phospholipids in protein translocation across the bacterial cytoplasmic membrane // FEBS Lett. 1989. V. 257. N 2. P. 203 207.

562. Niki E. Antioxidants in relation to lipid peroxidation // Chem. Phys. Lipids. 1987. V. 44. P. 227 253.

563. Niki E. Lipid antioxidants: How they may act in biological system // 1987. P. 155- 157.

564. Niki E., Yamamoto Ya., Takahashi M., Yamamoto K., Yamamoto Yu., Komuro E., Miki M., Yashuda H., Mino M. Free Radical-Mediated Damage of Blood and Its Inhibition by Antioxidants // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 1988. V. 34. P. 507-512.

565. Nikitin D., Zlatkin I. Oligotrophic Microorganisms as a Special Evolutionary Group of Procariotes //Recent Advances in Microbial Ecology. Tokyo, 1989. P. 94 99.

566. Nishizuka Y. Intracellular signaling by hydrolysis of phospholipids and activation of protein kinase С // Science. 1992. V. 258. N 5082. P. 607 614.

567. Nishizuka Y. Protein kinase С and lipid signaling for sustained cellular responses // FASEB J. 1995. V. 9. P. 484 496.

568. Nishizuka Y. Turnover of inositol phospholipids and signal transduction//Science. 1986. V. 233. P. 305 312.

569. Nomura K., Imai H., Koumura Т., Arai M., Nakagawa Y. Mitochondrial phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase suppresses apoptosis mediated by a mitochondrial death pathway // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. N 41. P. 29294 29302.

570. Ohta H., Hattori T. //Soil Sci. Plant Nutr. 1980. V. 26. N 1. P. 245 265.

571. Ohvo-Rekila H., Ramstedt В., Leppimaki P., Slotte J.P. Cholesterol interactions with phospholipids in membranes // Prog. Lipid Res. 2002. V. 41. N l.P. 66-97.

572. Oxidative Stress / Ed. H. Sies. L.: Acad. Press, 1985. 507 p.

573. Patil K.B., Shivamurthy S.C., Badami R.C. Effect of Fungi on the Lipid Composition of Soybean during Storage at Different Levels of Humidity // Fette. Seifen. Anstrichmittel. 1986. 88 Jahrgang. N 1. S. 18 19.

574. Paukau A., Morgan A.R. Role of DNA-Polymerase // Nature. New Biol. 1971. V. 234. N45. P. 36.

575. Peter H.W., Wiese F., Graszynsky G. // J. Dev. Biol. 1975. V. 46. N 2. P. 439 447.

576. Petkau A., Chelack W.S. Radioprotective effect of superoxide dismutase on model phospholipid membranes // Biochim. Biophys. Acta. 1976. V. 433. N3. P. 445-456.

577. Popov I., Blumstein A., Lewin G. // Arzneimittelforschung. 1994. B. 44. S. 277 282.

578. Popov I.N., Lewin G. Photochemiluminescent detection of antiradical activity. II. Testing of nonenzymic water-soluble antioxidants // Free Radic. Biol. Med. 1994. V. 17. P. 267 271.

579. Popov I.N., Lewin G. Photoluminescent detection of antiradical activity; IV: testing of lipid-soluble antioxidants // J. Biochem. Biophys. Methods. 1996. V. 31. P. 1 -8.

580. Porter J.W., Swenson T.L. Induction of fatty acid synthetase and acetyl-CoA-cadboxylase by isolated rat liver cells // Mol. and Cell Biochem. 1983. V. 53/54. N 1/2. P. 307-325.

581. Pryor W.A., Strickland Т., Curch D.F. Comparison of the Efficiencies of Several Natural and Synthetic Antioxidants in Aqueous Sodium Dodecyl Sulfate Micelle Solutions // J. Am. Chem. Soc. 1988. V. 110. P. 2224 2229.

582. Puddey I.B. Low serum cholesterol and the risk of cerebral haemorrhage//Atherosclerosis. 1996. V. 119. P. 1 6.

583. Raccach M. The antimicrobial activity of phenolic antioxidants in food: a review // J. Food Safety. 1984. N 6. N 3. P. 141 170.

584. Ramos J.L., Gallegos M.T., Godoy P., Ramos-Gonzales M.I., Rojas A., Teran W., Segura A. Mechanisms of solvent tolerance in gram-negative bacteria // Annu. Rev. Microbiol. 2002. V. 56. P. 743 768.

585. Ramos J.L., Gallegos M.T., Marques S., Ramos-Gonzales M.I., Espinosa-Urgel M., Segura A. Responses of Gram-negative bacteria to certain environmental stressors // Curr. Opin. Microbiol. 2001. V.4. N 2. P. 166-171.

586. Ratledge C., Evans C. Lipids and their metabolism // The Yeast / Ed. A.H. Rose and J.S. Harrisson. N.Y.: Academic Press, 1989. V. 3 P. 367 455.

587. Ratledge C., Wilkinson S.G. Microbial Lipids. 1988. V. 1. Academic Press: London.

588. Rezanka Т., Zlatkin I.V., Viden I., Slabova O.L., Nikitin D.I. Capillary gas chromatography-mass spectrometry of unusual and long-chain fatty acids from soil oligoprophic bacteria // J. Chromatogr. 1991. V. 558. P. 215 221.

589. Richter C. Biological Consequences of Lipid Peroxidation in Membranes // Chem. Phys. Lipids. 1987. V. 44. P. 175 189.

590. Ridgway N.D. Interactions between metabolism and intracellular distribution of cholesterol and sphingomyelin // Biochim. Biophys. Acta. 2000. V. 1484. P. 129-141.

591. Robertson A.D., Grutsch I.F. Biphasic responses, quantal signals and cellular behaviour //J. Theor. Biol. 1987. V. 25. N 1. P. 41-47.

592. Roelofsen В., van Deenen L.L.M. Lipid requirement of membrane-bound ATPase. Studies of human erythrocyte ghosts // Europ. J. Biochem. 1973. V. 40. P. 245 -257.

593. Rose В., Agarwal S., Chatterjee S.N. Membrane Lipid Peroxidation by UV-A: Mechanism and Implications // Biotechn. and Appl. Biochem. 1990. V. 12. P. 557-561.

594. Rosenberg B. Possible Mechanisms for Antitumor Activity of PlatinumУ

595. Coordination Complexes // Canser Chemotherapy Rept. 1975. V. 59. N 3. P. 589-598.

596. Ruel K., Joseleau J.P. // Food Hydrocolloids. 1987. V. 1. N 5-6. P. 515 -519.

597. Saadan В., Le Tutour D., Quemeneur F. Oxidation properties of phospholipids: mechanistic studies // New J. Chem. 1998. V. 22. N 8. P. 801 807.

598. Sagan L. A Brief History and Critique of the Low Dose Effects Paradigm // BELLE Newsletter. 1993. V. 2. N 2. P. 1-7.

599. Saier M.H., Wu Jr. L-F., Reizer J. Regulation of bacterial physiological processes by three types of protein phosphorylating systems // Trends Biochem. Sci. 1990. V. 15. P. 391 -395.

600. Sambuichi E.J., Shizuka F., Kishi K. The influence of dietary protein on lipid peroxide formation in old, Food restricted rats // Nutr. Res. 1991. V. 11. P. 1415- 1426.

601. Sandy M.S., Di Monte D., Smith M.T. Relationships between Intracellular Vitamin E, Lipid Peroxidation and Chemical Toxicity in Hepatocytes // Toxicology and Appl. Pharmacology. 1988. V. 93. N 2. P. 288 297.

602. Sanner Т., Pihl A. Sulfhydryl Groups in Radiation Damage // Scand. J. Lab. Clin. Invest. 1968. V.22. Suppl. N 106. P. 53 63.

603. Santiago E., Lopez-Moratalla N., Segovia J.L. Correlation between losses of mitochondrial ATPase activity and cardiolipin degradation // Biochem. Biophys. Res. Commun 1973. V. 53. N 2. P. 439 445.

604. Schafer F.Q., Buettner G.R. Redox environment of the cell as viewed through the redox state of the glutathione disulfide/glutathione couple // Free Radic. Biol. & Med. 2001. V. 30. N 11. P. 1191 1212.

605. Schoemaker H.E., Harvey P.J., Bowen R.M., Palmer J.M. // FEBS Lett. 1985. V. 183. N1. P. 7- 12.

606. Schwenke К., Coslan S., Muhlensiepen H., Altman K.I., Feinendegen L.E. Lipid peroxidation in microsomes of murine bone marrow after low-dose gamma-irradiation//Radiat. Environ. Biophys.1994. V. 33. N. 4. P. 315 323.

607. Sedlak J., Lindsay R.H. Estimation of Total, Protein-bound and Nonprotein Sulphydryl Groups in Tissue with Ellman's Reagent // Anal. Biochem. 1968. V. 25. P. 192-205.

608. Shashkov A.S., Toukach F.V., Paramonov N.A., Ziolkowski A., Senchenkova S.N., Kaca W., Knirel Y.A. Structures of new acidic O-specific polysaccharides of the bacterium Proteus mirabilis serogroups 026 and 030 // FEBS Lett. 1996. V. 386. P. 247 251.

609. Shibuya I. Metabolic regulations and biological functions of phospholipids in Escherichia coli И Prog. Lipid Res. 1992. V. 31. N 3. P. 245 299.

610. Singh B.B. The Role of Membranes in Radiation Damage // Bio-membranes: Architecture, Biogenesis, Bioenergetics and Differentiation. N.Y. etc.: Acad. Press, 1974. P. 313 318.

611. Sipione S., Lupo G., Anfuso S.D., Albanese V., Alberghina M. Phosphatidylcholine synthesis-relared enzyme activities of bovine brain micro-vessels exhibit suspectibility to peroxidation // FEBS Lett. 1996. V. 384. N 1. P. 19-24.

612. Skou I.C. // Bioenegetics. 1973. V. 4. N 1. P. 35 46.

613. Skurlatov Yu.I. Ecological Chemistry of Aquatic Environment Past, Present and Future // Mediul Ambiant. 2002. N 3(3). P. 11 - 16.

614. Soderhall S., Lindahl T. DNA-ligases of eukaryotes // FEBS Lett. 1976. V. 67. N 1. P. 1-8.

615. Sparrow A.H., Underbrink A.G., Sparrow R.C. Chromosomes and cellular radiosensitivity 1. The relationship of D to chromosome volume and complexity in seventy-nine different organisms // Radiat. Res. 1967. V. 5. P. 915-945.

616. Sperry W.M., Webb M. A revision of the schoenheimer-sperry method for cholesterol determination // J. Biol. Chem. 1950. V. 187. N 1. P. 97 106.

617. Srebotnik E., Jensen K.A., Kawai S., Hammel K.E. Evidence That Ceriporiopsis subvermispora Degrades Nonphenolic Lignin Structures by a One-Electron-Oxidation Mechanism // Appl. Environ. Microbiol. 1997. V. 63. N11. P. 4435-4440.

618. Stark G. The effect of ionizing radiation on lipid membranes // Biochim. Biophys. Acta. 1991. V. 1071. P. 103 122.

619. Steels E.L., Learmonth R.P., Watson K. Stress tolerance and membrane lipid unsaturation in Saccharomyces cerevisiae grown aerobically or0 anaerobically // Microbiol. 1994. V. 140. P. 569 -^576.

620. Steinberg D., Parharasarathy S., Carwe Т.Е., Khoo J.D., Witztum J.L. Beyond cholesterol: modifications of low density lipoprotein that increase its atherogenicity//N. Engl. J. Med. 1989. V. 320. P. 915 924.

621. Sungurov A.Yu., Sharlaeva T.M. Thymocyte membrane changes and modification of interphase death // Int. J. Radiat. Biol. 1988. V. 53. N 3. P. 501 506.

622. Sungurov A.Yu., Tokalov S.V., Mazhul V.M., Resunkova O.P., Sharlaeva T.M. Biophysical Studies of irradiated Thymocytes. II. Membrane Changes // Stud. Biophys. 1985. V. 107. N 2. P. 133 139.

623. Sungurov A.Yu., Tokalov S.V., Petrov Yu.P., Sharlaeva T.M. Biophysical Studies of irradiated Thymocytes. I. Surface Changes // Stud. Biophys. 1985. V. 107. N2. P. 127 132.

624. Suzuki S., Akamatsu Y. Involvement of membrane lipids in radiation damage to potassium-ion permiability of Escherichia coli II Int. J. Radiat. Biol. 1978. V. 33. N2. P. 185- 190.

625. Swern D., Coleman G. // J. Amer. Oil Chem. Soc. 1955. V. 32. P. 700 -707.

626. Szumala A., Pernak J. The Natural and Laboratory Resistance of Gram-negative Rods to (Alkylthio)Methyl.Pyridinium Chlorides // Fat. Sci. Technol. 1988. 90 Jahrgang. N 8. S. 319 322.

627. Takai Y., Kishimoto A., Kikkawa U. et al. Unsaturated diacylglycerol as a possible messenger for the activation of calcium activated phospholipid-dependent protein kinase system // Biochem. Biophys. Res. Communs. 1979. V. 91. N4. P. 1218- 1224.

628. Tarahovsky Y.S., Khusainova R.S., Gorelov A.V., Nicolaeva T.I., Deev A.A., Dawson A.K., Ivanitsky G.R. DNA initiates polymorphic structural transitions in lecithin // FEBS Lett. 1996. V. 390. N 2. P. 133 136.

629. Tomassen J., de Vrije Т., de Cock H., Bosch D., de Kruijff B. Involvement of membrane lipids in protein export in Escherichia coli II J. Cell Sci. Suppl. 1989. V. 11. P. 73-83.

630. Topchieva I.N., Erokhin V.N., Osipova S.V., Khrutskaya M.M., Kupriyanova T.A. Block copolymers of ethylene oxide and propylene oxide (pluronics) as immunomodulators and antitumour agents // Biomedical Science. 1991. V. 2. N 1. P.38-44.

631. Touati D. Iron and Oxidative Stress in Bacteria // Arch. Biochem. Biophys. 2000. V. 373. N 1. P. 1 6.

632. Tsevegsuren N., Ochir G., Otgonbajar Tsch., Dorshderem P., Tsend-Ajusch A., Badgaa D. Lipidchemical Investigation of Some Oilplants for

633. Edible Oil Production Cultivated in Mongolia // Fat. Sci. Technol. 1994. 96 Jahrgang. N 10. S. 397-398.

634. Ultra Low Doses / Ed. C. Doutremepuich. London-Washington DC:Naylor& Francis. 1991. 162 p.

635. Van Klompenburg W., Nillson I., von Heijne G., de Kruijff B. Anionic phospholipids are determinants of membrane protein topology // EMBO J. 1997. V. 16. N 14. P. 4261 4266.

636. Van Voorst F., De Kruijff B. Role of lipids in the translocation of protein across membranes // Biochem. J. 2000. V. 347. Pt. 3. P. 601 612.

637. Veness R.G., Evans C.S. The Role of Hydrogen Peroxide in the Degradation of Crystalline Cellulose by Basidiomycete Fungi // J. Gen. Microbiol. 1989. V. 135. N 11. P. 2799 2806.

638. Vokt J.P., Brody S. The kinetics of changes in the fatty acid composition of Neurospora crassa lipids after a temperature increase // Biochim. Biophys. Acta. 1985. V. 835. N2. P. 176 182.

639. Wallach D.F.H. Radiation Effects on Biomembranes // Biomembranes. N.Y., L.: Plenum Press, 1975. V. 5. P. 213 249.

640. Walling C., Rabinowitz R. The Reaction of Trialkyl Phosphites with Thiyl and Alkoxy Radicals // J. Am. Chem. Soc. 1959. V. 81. N 5. P. 1243 1251.

641. Weete J.D. Lipid Biochemistry of Fungi and Other Organisms. N.Y.; L: Plenum Press, 1980. 388 p.

642. Whang К., Hattory Т. Oligotrophic bacteria from renzina forest soil // Antony van Leewenhock. 1988. V. 54. N. 2. P. 19 36.

643. Wills E.D., Wilkinson A.E. The Effect of Irradiation on Sub-cellular particles destruction of Sulphydryl-groups // Intern. J. Radiat. Biol. 1967. V. 13. N1. P. 45-55.

644. Yanishlieva N.V., Rafikova V.S., Skibida I.P. Etude de la Cinetique de L'Oxidation competitive de L'Oleate et du Linoleate de Methyle // Cinetique de L'Oxidation. 1970. N 12. P. 741 746.

645. Yatvin M.B. Evidence that survival of y-irradiated Escherichia coli is influenced by membranes fluidity // Int. J. Radiat. Biol. 1976. V. 30. N 6. P. 571 -575.

646. Yatvin M.B. Influence of membrane-lipid composition on translocation of nascent proteins in heated Escherichia coli II Biochim. Biophys. Acta. 1987. V. 901. N 1. P. 147- 156.

647. Yonei S., Kato M. X-ray -induced structural changes in erythrocytes membranes studied by use of fluorescent probes // Radiat. Res. 1978. V. 75. N 1. P. 31 -45.

648. Yoshida S., Unger G., Rosenberg B.H. DNA swivel enzyme activity in a nuclear membrane fraction // Nucl. Acids Res. 1978. V. 4. N 1. P. 223 228.

Информация о работе

Шишкина, Людмила Николаевна
доктора химических наук
Москва, 2003
ВАК 03.00.02

Диссертация

Особенности функционирования физико-химической системы регуляции перекисного окисления липидов в биологических объектах разной степени сложности в норме и при действии повреждающих факторов - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы