Особенности физиологической и репаративной регенерации печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой

Калинская, Наталия Сергеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Особенности физиологической и репаративной регенерации печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой
ВАК РФ 03.00.30, Биология развития, эмбриология

Автореферат диссертации по теме "Особенности физиологической и репаративной регенерации печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой"

На правах рукописи

КАЛИНСКАЯ Наталия Сергеевна

003470061

ОСОБЕННОСТИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ

И РЕПАРАТИВНОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ ПЕЧЕНИ КРЫС В РЕПРОДУКТИВНОМ ПЕРИОДЕ ОНТОГЕНЕЗА ПОД ВЛИЯНИЕМ БИОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ КАЛЛИЗИИ ДУШИСТОЙ

03.00.30 - биология развития, эмбриология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ставрополь - 2009

1 А \!Ш «

003470061

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Ставропольский государственный университет» и Южном научном центре Российской академии наук.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Тимченко Людмила Дмитриевна.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, доцент

Джандарова Тамара Исмаиловна;

кандидат биологических наук Арешидзе Давид Александрович.

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Ставропольская

государственная медицинская академия»

Защита диссертации состоится , $ _ 2009 г.

в ¡X часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.256.09 в Ставропольском государственном университете по адресу: 355009, г. Ставрополь, ул. Пушкина, 1, корп. 2, комн. 506.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ставропольского государственного университета.

Автореферат разослан _ а^^иоЯ__2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета ^¡-ЪГ( ^^¿ХЛЛС^д} Ржепаковский И.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Регенерация представляет собой приспособительный процесс, выработанный в ходе эволюции и присущий всему живому (Струков Л.И., Серов В.В., 1985). На протяжении онтогенеза регенерация не остается неизменной и ее интенсивность с возрастом и под влиянием внецшей среды изменяется (Сидорова В.Ф., 1976; Данилов Р.К., Григорян Б.Л., 1996; Деев Р.В., 2007). Особый интерес вызывает интенсивность регенера-ционного процесса в репродуктивном периоде онтогенеза, когда органы и системы органов не только наиболее зрелые для реализации их онтогенетически предусмотренных функций, но и должны быть подготовлены к выполнению эксклюзивной для организма роли — воспроизводству потомства (Торчинов A.M., Ханукоева А.К., 2000; Илющешсо В.Г, 2003). Именно в этот период особое значение придается морфофункциональной полноценности и высокой регенерациопной способности внутренних органов организма матери (Николина О.В., 2004; Chronos G.P., Gold P.W., 1992), тем более что многочисленные сведения по этому вопросу очень разноречивы. Большое число исследований в этом смысле, отводят важную роль печени, которая является полифункциональиым органом (Подымова С.Д., 1993; Афанасьев Ю.И., Юрина H.A., Котовский Е.Ф., 1999; Михайлов И.В., 2002). Заболевания печени стоят на восьмом месте среди причин смертности населения репродуктивного возраста в разных странах, что связано с усилением физиологически обусловленной нагрузки на нее, как на жизненно важного органа, связанного с интенсивными процессами метаболизма на фоне повышения, гормональной активности (Николаев A.B., Рожило Я.А., Старожилова Т.К., Сарнацкая В.В., 2005).

В связи с этим в настоящее время остается высокой потребность в ге-патопротекторных средствах, повышающих резистентность печени к действию повреждающих агентов и нормализующих ее метаболизм в условиях напряжения детоксицирующей ■ функции. Большим потенциалом в этом смысле обладают растения, в том числе ранее не применявшиеся в научной, но получившие широкое распространение в народной медицине (11ващкин ВТ., 2002; Крылова С.Г., Ефимова Л.А., Вямятина З.К., Зуева Е.П., 2006; Новомлинс-кий В.В., 2007; Bai S., Asiya В., Fa L., 1995). К таким растениям относится калли-зия душистая (лат. Callisia Fragrans), единичные препараты из которой (капли, настойка), в том числе для применения per os, уже появились на отечественном фармацевтическом рынке. Однако отсутствуют научно-экспериментальные данные о гепагопротективном действии, специфике влияния на механизмы физиологической и репаративной регенерации, а также гепатотоксичности, что позволило бы рекомендовать применение препаратов на основе каллизии душистой в качестве регенеринстимулирующих средств в репродуктивный, период жизни.

Современные взгляды на сущность регенерации требуют ее оценки с позиций комплекса показателей, отражающих не только интенсивность про-

лиферативных процессов, но и с учетом уровня повреждения ткани (Цып-ленкова В.Г., Бескровнова H.H., 1996; Казначеев К.С., 1999; Жижина Г.П., 2002; Цейликман О.Б., 2005; Schulze-Osthoff К., Ferrari D., Los М. et al„ 1998). Однако в доступной литературе отсутствует информация не только о зависимости друг от друга значений этих критериев, но и об их взаимосвязи с другими показателями морфофункциональной полноценности печени в тот или иной период онтогенеза или под действием тех или иных повреждающих факторов.

В целом вышеизложенное обусловило актуальность выбранной темы по изучению влияния комплекса биологически активных веществ каллизии душистой па морфофункциональные показатели печени и ее регенераторный потенциал в репродуктивном периоде онтогенеза в норме и с токсическим повреждением.

Целью исследования явилась комплексная оценка морфофункциональ-ных показателей и интенсивности регенерационных процессов печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза в норме, с токсическим повреждением и под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой.

В соответствии с этим были определены следующие задачи:

1) изучить регенерационную способность и выявить критерии морфофункциональной полноценности печени у крыс репродуктивного периода онтогенеза;

2) исследовать морфологические показатели печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биологически активных веществ каллизии душистой в норме и при токсическом повреждении;

3) изучить динамику гематологических и биохимических показателей у крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биологически активных веществ каллизии душистой в норме и при токсическом повреждении печени;

4) исследовать регенерационную способность печени крыс репродуктивного периода онтогенеза под влиянием биологически активных веществ каллизии душистой в норме и при токсическом повреждении;

5) изучить влияние новой комплексной биологически активной добавки «Комбад» на основе эмбриональных и растительных субстратов на показатели физиологической и репаративной регенерации и морфофункциональной полноценности печени в репродуктивном периоде онтогенеза.

Научная новизна исследования. Установлены критерии и степень коррелятивной зависимости показателей морфофункциональной полноценности, регуляторных механизмов регенерации (гистологические, гематологические, биохимические) с непосредственными критериями регенераторной активности печени (митотическая активность, скорость пролиферации и апоптоз) у крыс репродуктивного периода онтогенеза.

Модифицирован и впервые применен колхициновый метод для оценки в сравнительном аспекте скорости пролиферации гепатоцитов.

Установлены показатели соотношения апоптоза, митогической активности и некроза для печени крыс линии Вистар репродуктивного периода в норме.

Впервые с учетом комплекса показателей (гематологических, биохимических, гистологических, уровня апоптоза и некроза, митотической активности) изучено и подтверждено положительное влияние биологически активных веществ настоя каллизии душистой иа интенсивность регенерации печени при токсической дистрофии у крыс репродуктивного периода онтогенеза.

Доказана регенеринстимулирующая эффективность комплексного фито-эмбрионального препарата «Комбад» и подтверждены преимущества его применения по сравнению с настоем каллизии душистой для усиления репаративной регенерации печени.

Теоретическая и практическая значимость исследования. Полученные сведения об уровне апоптоза, некроза, митотической активности и скорости пролиферации, а также установленная коррелятивная зависимость этих критериев с показателями регуляторных механизмов регенерации печени крыс, углубляют и расширяют представление о морфофункциональ-ньтх особенностях и регенераторном потенциале этого органа в репродуктивном периоде онтогенеза.

Результаты исследования позволяют судить о повышении регенераторной способности печени крыс под влиянием биологически активных веществ каллизии душистой в норме и при экспериментальном повреждении, что может представлять интерес для биотехнологов при получении биологически активных и лекарственных препаратов на ее основе.

Приоритетность выполненных исследований подтверждена патентом № 2320197 на способ приготовления комплексной биологически активной добавки «Комбад» для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов.

Результаты исследования используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторных занятий по биологии развития и размножения, гистологии, эмбриологии и физиологии на медико-биолого-химическом факультете в Ставропольском государственном университете, Ставропольском филиале Московского государственного гуманитарного университета им. М.А. Шолохова, Самарской государственной сельскохозяйственной академии, Северо-Осетинском государственном университете им. К.Л. Хетагурова.

Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на первой, третьей и четвертой ежегодной научной конференции студентов и аспирантов базовых кафедр Южного научного центра РАН (Ростов-на-Дону, 2005, 2007, 2008), где доклады автора отмечены двумя почетными грамотами; на Всероссийской научно-практической конференции (Архангельск, 2006); на Международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006); на научной конференции «Университетская наука - региону» (Ставропольский государственный университет, 2006, 2007); на научной конференции «Физиологические проблемы адатггации» (Ставропольский государственный университет, 2008).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Комплекс изученных морфофункциональных показателей и характер коррелятивной зависимости между ними объективно отражают особенности мор-фофункционального статуса и регенеративного потенциала печени белых крыс в репродуктивном периоде онтогенеза. Установленные соотношения параметров интенсивности гибели и пролиферации клеток печени крыс можно использовать в качестве прямых критериев оценки регенеративного потенциала органа.

2. Биологически активные вещества растения каллизий душистой оказывают в разной степени выраженное стимулирующее действие на физиологическую и репаративную регенерацию печени и могут быть использованы для этой цели как в виде монофитосубстанции, так и в составе сложного комплексного препарата «Комбад», при применении которого репаратив-ные процессы наиболее выражены.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 работ, в том числе две из них опубликованы в периодических изданиях из перечня ведущих рецензируемых научных журналов, утвержденных ВАК Министерства образования и науки России и рекомендованных для публикации основных научных результатов диссертации на соискание ученой степени.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 151 странице компьютерного набора и состоит из содержания, введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, включающего 273 источника, в том числе 77 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 11 таблицами, 23 микро- и макрофотографиями, 3 диаграммами.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводили на кафедре общей биологии, в проблемной научно-исследовательской лаборатории экспериментальной иммуноморфологии, иммунопатологии иммунобиотехнологии Ставропольского государственного университета, а также в лаборатории биологически активных веществ и новых материалов Южного научного центра Российской академии наук.

Объектом исследования были 160 крыс линии Вистар в возрасте шести месяцев с исходной массой тела 180-230 г.

В соответствии с первой задачей была создана группа животных в количестве 30 крыс репродуктивного периода онтогенеза (шесть месяцев). Животных поделили на две рабочие подгруппы по 15 крыс в каждой. У крыс первой подгруппы изучали гематологические, биохимические, патологоанатомичес-кие, морфометрические, гистологические показатели, а также уровень апоп-тоза, некроза и их индексы. У крыс второй подгруппы определяли показатели митотического индекса и скорости пролиферации гепатоцитов с помощью колхицинового метода. Показатели группы принимали за контроль.

Для формирования экспериментальной группы крыс с однотипным токсическим повреждением печени средней тяжести (токсическая дистрофия), животных разбивали натри подгруппы, и воздействовали различное время четыреххлористым углеродом (СС14) воздушно-капельным методом, путем помещения их в закрытый эксикатор.

На основе гематологических, биохимических, гтатологоанатомических и гистологических показателей устанавливали критерии модельного повреждения печени при влиянии (СС14) по три минуты в течение 6 дней. Крыс, подготовленных данным способом, на второй день после окончания воздействия СС14 использовали на различных этапах основного эксперимента.

Настой каллизии душистой готовили в соответствии с рекомендациями (Огарков В.Н., 2004; Неумывакин И.Н, 2005). Способ приготовления и доза применения отработаны экспериментально. Препарат «Комбад» применялся в соответствии с рекомендациями авторов препарата (Тимченко Л.Д., Ржепаковс-кий И.В., Вакулин В.Н., Каузова A.C., Калинская Н.С.).

Исследования на содержание биологически активных веществ в каллизии душистой проводили на базе Пятигорской государственной фармацевтической академии.

В соответствии со второй, третьей и четвертой задачами были сформированы три группы животных по двадцать крыс в каждой. Животные первой группы - с модельным токсическим повреждением печени, второй группы - крысы с модельным токсическим повреждением печени, которых в течение 10 дней выпаивали настой каллизии душистой в дозе 0,1 мл на 1 кг живого веса, и животные третьей группы - условно здоровые, которым выпаивали настой каллизии душистой по схеме второй группы.

В соответствии с задачей пять были созданы две группы животных крыс в каждой. Четвертая — животные с модельным токсическим повреждением печени, которых в течение 10 дней выпаивали комплексной биологически активной добавкой «Комбад» в дозе 0,1 мл на 1 кг живого веса. Пятая группа - условно здоровые животные, которым в течение 10 дней выпаивали комплексную биологическую активную добавку «Комбад», по схеме четвертой группы.

Измерение массы органа и тела крыс проводили с помощью электронных весов ВЛТЭ-150. Относительную массу печени определяли по формуле, предложенной И.И. Шмальгаузеном (1984).

Гемоглобин исследовали гематиновым методом Сали. Число эритроцитов и лейкоцитов подсчитывали в сетке камеры Горяева. Общий белок определяли рефрактометрическим методом на приборе УРЛ-1. Концентрации общего и связанного билирубина в сыворотке крови определяли унифицированным методом Ендрашика-Грофа на фотоколориметре ФЭК-56. Активность ферментов крови (АлАТ, АсАТ) осуществляли при помощи комплексной бихромати-ческой фотометрической системы Stat fax 1904+R.

Гистологическое исследование проводили по общепринятой технологии с окраской гематоксилин-эозином и суданом-Ш (Сулейманов С.М., Паршин П.А., Жарова Ю.П. и др., 2000).

Количество апоптических и некротических клеток в печени определяли по методике A.A. Абдувалиева и М.С. Гильдиевой (2006) с помощью трипаново-го синего в'собственной модификации с использованием элементов методики трипсинйзации и подсчета живых и мертвых клеток (Дьяконов Л.П., 2000). Апоптозный индекс считали по формуле, рекомендованной M.D. Logsdon, R.E. Meyn, P.C. Besa et al. (1999). Некротический индекс считали по формуле, рекомендованной Е.Ф. Лушниковым, А.Ю. Абросимовым (2001).

Митотический индекс определяли по формуле, предложенной Б.Л. Астау-ровым (1974). Скорость пролиферации у десяти животных в каждой группе вычисляли по методике, предложенной A. Carnie (1965), в собственной модификации с использованием колхицина. Метод позволяет учитывать интенсивность митозов с единой точки отчета—метафазы.

Статистическую обработку результатов исследования и установления коррелятивной зависимости между изучаемыми показателями проводили на компьютере с использованием программы Primer of Biostatistics (Version 4.03).

Микрофотографирование осуществлялось при помощи комплекса визуализации изображения, состоящего из микроскопа «Микмед-2» и цифровой фотокамеры «Olympus-5060».

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Морфофункциональный и регенеративный потенциал печени крыс репродуктивного периода жизни

Изучение морфофункциональных показателей и интенсивности реге-нерационных процессов печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза являются весьма актуальными, так как этот период онтогенеза связан с повышением физиологически обусловленной нагрузки на печень. Количество гемоглобина у шестимесячных крыс в среднем составило 145,20±1,66 г/л, эритроцитов — 4,41±0,01х10'2/л, лейкоцитов — 5,20±0,03*10®/л содержание общего белка - 71,02±0,23 г/л, уровень свободного билирубина - 4,03±0,05 мкмоль/л, связанного — 1,70±0,05 мкмоль/л, активность аминотрансфераз: АлАТ - 1,}4±0,06 мкмоль/ч.л., а АсАТ - 1,21±0,03 мкмоль/чл.

Привес живой массы тела крыс к концу эксперимента в среднем составило 8,24±1,70 г. Макро- и микрокартина печени крыс полностью соответствует гистологической норме, установленной для взрослых животных. Масса печени шестимесячных крыс в среднем составила 6,56±0,15 г, относительная масса печени 2,63±0,07%. Соотношение одноядерных клеток к двуядерным в поле зрения составляет 14:1.

В среднем количество апоптических клеток в печени шестимесячных крыс составило 114,0±7,50 (рис. 1), апоптозный индекс 0,24±0,02%, среднее количество некротических клеток 1,20±0,33 и некротический индекс 0,03±0,07%.

Рис. 1. А готические клетки (указаны стрелками) печен» крыс контрольной группы. Дифференциальное окрашиватаетрипановым синим, х 200.

У животных репродуктивного периода жизни митотический индекс составил в среднем.0,28±0,08%, скорость пролиферации - 5,60±0,16%.

В целом у здоровых крыс на фоне сохранения морфофункциональной полноценности печени, показатели уровня пролиферативной активности гепатоцитов (соотношение числа двуядерных клеток к одноядерным, скорость пролиферации и митотический индекс) превышают показатели интенсивности гибели клеток (число некротических и апонтических клеток и их индексы). При этом различия между значением апотического и митоти-ческого индексов менее выражены, чем между остальными показателями, а интенсивность апоптоза в 95 раз выше уровня некроза.

У здоровых шестимесячных животных выявлены наиболее тесные корреляции апоптического индекса с АлАТ, АсАТ, свободным, связанным билирубином и со скоростью пролиферации гепатоцитов, а митотического индекса — с общим белком, АлАТ и АсАТ. С другими показателями установлены менее тесные коррелятивные взаимосвязи.

Таким образом, комплексная оценка всех вышеперечисленных показателей печени крыс в шестимесячном возрасте позволяет нам судить не только о морфофункциональной зрелости органа, но и о довольно высокой ее регенераторной способности.

Экспериментальное моделирование дозированного повреждения печени крыс для изучения регенеративных особенностей

Установленные изменения гематологических, биохимических, патоло-гоанатомических и гистологических показателей у крыс всех подгрупп, по сравнению с контрольной группой животных, свидетельствуют, на наш взгляд, о выраженном токсическом действии четыреххлористого углерода.

У крыс первой подгруппы констатированы признаки зернистой дистрофии, расцениваемой как неспецифический адаптационный клеточный синдром с переходом у некоторых животных в мелкоочаговую гидропическую дистрофию. Установлено, что подобное состояние является обратимым, и уже через семь дней после прекращения действия повреждающего фактора отмечены признаки восстановления структуры печени без дополнительной коррекции. Поэтому постановка эксперимента на животных с такой степенью повреждения печени, по нашему мнению, не целесообразна.

—-о О

—О

в .

-»-о

т о-«— • —••"О "

¡> : - ■ . О

У животных третьей подгруппы отмечена картина острого (альтератив-ного) токсического гепатита или гепатоза с выраженным некротическим компонентом, прогрессирующих на протяжении семи дней после окончания действия С-С14, свидетельствует о необратимости патологического процесса. Поэтому постановка опыта на таких животных также не целесообразна.

У крыс второй подгруппы обнаруженные изменения свидетельствуют о развитии у 100% животных типичной токсической дистрофии печени (гид-ропической, жировой или смешанной), а у некоторых из них установленная микрокартина свидетельствует о развитии очагового воспаления. Указанные изменения сохраняются в течение недели после прекращения влияния СС14 без признаков прогрессирования. Поэтому для проведения основного эксперимента по изучению регенеринстимулирующего влияния БАВ каллизии душистой на печень, наиболее предпочтительно использовать животных второй подгруппы.

Характеристика биологически активных веществ каллизии и новых препаратов на ее основе

Анализ литературы и результаты собственных исследований (табл. 1) подтверждают наличие в каллизии душистой комплекса биологически активных веществ, потенциально обладающих гепатопротективным и регенераторным действием.

Таблица 1

Содержание биологически активных веществ в соке каллизии душистой по данным Пятигорской государственной фармацевтической академии, п=10

Экстрактивные вещества, % Полисахариды, % Алкалоиды, % Сапонины, % Дубильные вещества, % Органические кислоты, % Аскорбиновая кислота, % Флавонои-ды,%

34,0±1,40 2,70±0,06 1,20±0,09 17.15±1,0 0,89±0,04 0.64±0,07 0,02±1,20 0,50±0,02

В последние несколько лет на отечественном фармацевтическом рынке появились препаративные формы на основе каллизии душистой. Используется каллизия душистая преимущественно в виде традиционных лекарственных форм: сок, сироп, капли, настой, отвар, чай, настойка, вытяжка. При этом все указанные формы рекомендуются для лечения и профилактики заболеваний желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы, что предполагает отсутствие отрицательного влияния на ткани печени.

Однако ни в одной из инструктивных рекомендаций к препаратам не представлены конкретные сведения о влиянии этого растения непосредственно на регенеративный потенциал печени, обеспечивающий морфофун-кциональную полноценность этого органа. Приведенные данные послужили основанием для изучения влияния биологически активных веществ каллизии душистой на регенерацию печени в норме и с токсическим повреждением. Половозрелым крысам применяли per os монофитосубстанцию

d виде настоя н поликомпопетпый препарат «Комбад» па основе растительного и животного сырья, разработанный с нашим участием.

Предлагаемая нами биологически активная добавка «Комбад» представляет собой тканевой препарат, приготовленный но модифицированной методике В.П. Филатова, обеспечивающей сохранение натпвиых биологически активных веществ используемого сырья, а также значительное накопление биогенных стимуляторов. Он изготовлен из экологически чистого растительного и животного сырья, в частности из усов и листьев растения каллизии душистой п эмбрионально-яичной массы куриного яйца. Подобное сочетание позволяет дополнить и сбалансировать высокоактивные компоненты взятых отдельно субстратов. Потенциальные возможности препарата позволили нам приступить к целенаправленному изучению его влиянии на регенераторный потенциал печени.

Результаты влнинпп монофитосубстапцпи па морфофупкцпопальпые показатели п регенерацию печени крыс при экспериментальном повреждении

Из результатов, отраженных в таблице 2, видно, что у здоровых животных первой группы после применения настоя каллизии душистой, но сравнению с контрольной группой крыс, количество эритроцитов увеличилось на 12,2% (Р<0,0005), лейкоцитов па 10% и гемоглобина на 2,0%. Уровень общего белка, свободного и связанного билирубина, активность АлАТ и АсАТ оставались на уровне показателей крыс контрольной группы. Это подтверждает отсутствие негативного воздействия БАВ каллизии на печень и стимулирующее влияние па гематологические показатели крыс. Это обусловило целесообразность использования испытуемой мопофп-тосубстанции при токсической дистрофии. Вследствие токсического воздействия СС14 количество эритроцитов в крови стало ниже на 13,0%, гемоглобина ниже на 3,5%) (Р<0,05), лейкоцитов на 61% выше (Р<0,0005) показателей контрольной группы крыс. Уровень общего белка снизился на 18,7% (Р<0,0005). Содержание свободного билирубина достоверно выше на 74,2%, связанного на 79,0%, активность АлАТ в сыворотке крови выше на 22,0% (Р<0,005), АсАТ на 20,0% (Р<0,05), по сравнению с показателями контрольной группы животных. К концу эксперимента живая масса тела у животных, по сравнению с контролем снизилась на 41,8%. Все это свидетельствует о значительном напряжении компенсаторно-приспособительных реакций организма, а также о функциональном нарушении печени.

У животных третьей группы на фоне токсической дистрофии под влиянием настоя каллизии душистой, количество эритроцитов стало выше на 19,3%, гемоглобина - на 19,5% (Р<0,0005), количество лейкоцитов снизилось на 34,2% (Р<0,0005), по сравнению с животными с токсической дистрофией без применения настоя каллизии. Заметно улучшилось функциональное состояние печени, это отразилось в увеличении общего белка на 15,3% (Р<0,0005), уровень свободного билирубина стал достоверно ниже на 51,6%(Р<0,0005), а связанного -66,2% (Р<0,0005), достоверно снизилась активность аминотрансфераз: АлАТ па

14,0%, АсАТ на 11,0%, по сравнению с показателями животных второй группы. К концу эксперимента масса тела у животных в среднем составила - 2,64±0,81 г. Вышеописанные результаты исследований гематологических и метаболических характеристик организма, на наш взгляд, свидетельствуют о положительном влиянии на печень крыс БАВ каллизии душистой, что подтверждено в процессе патологоанатомического и гистологического исследований.

Так, у здоровых крыс, которым выпаивали настой каллизии душистой (первая группа), печень темно-вишневого цвета, окраска гомогенная, края острые, упругая, на разрезе кровь обильно стекает, желчный пузырь пустой. Абсолютная масса печени выше контрольной группы на 6,6%, что, по нашему мнению, обусловлено кровенаполнением сосудов, а относительная масса печени у этих крыс выше, чем масса печени у контрольных животных в 1,6 раза. Прирост массы тела, по сравнению с контрольной группой, выше на 42,0%. При исследовании гистосрезов печени крыс структурных нарушений, по сравнению с контролем, не обнаружено. Соотношение одноядерных клеток к двуядерным в поле зрения составило 13:1, что на 8% выше контроля.

У крыс с токсическим повреждением без применения настоя (вторая группа) печень рыхлая, легко рвется, на разрезе сочится кровь, в отдельных случаях с уплотненными участками, желчный пузырь пустой. Цвет различный: у пяти крыс - красная с легким сероватым оттенком, у восьми - светло-коричневая с мелкоточечными кровоизлияниями, а у семи крыс - светло-серые участки чередуются с темно-красными. Абсолютная масса печени на 12,6% выше контроля. Относительная масса печени в 1,5 раза выше контроля (табл. 2). Гистологически, при окраске гематоксилин-эозином и суданом-Ш у большинства крыс второй группы установлены признаки обширной жировой (рис. 2) или смешанной (белково-жировой) дистрофии, характеризующейся выраженным нарушением клеточного и балочного строения, неравномерным набуханием гепатоцитов, расплывчатостью их границ и исчезновением четких очертаний ядер, наличием многочисленных вакуолей, различных размеров или/и наличием достаточно крупных плотных (очевидно) белковых капель (рис. 3).

Шт

&& Ч <7 V :

ШЯГЦ________

• чУ . •/.«

№ * ч

-Л1. V '•-.у- ••

У: г•

Г ' - < '

Р4

Рис. 2. Жировая дистрофия печени у крыс третьей подгруппы. Окраска суданом-Ш, х 200.

Рис. 3. Обширные очаги вакуолизации гепатоцитов при смешенной белково-жировой дистрофии у крыс с модельным токсическим повреждением печени СС1,. Окраска гематоксилин-эозином, х 200.

У семи крыс - моноцеллюлярные некрозы в различных отделах долек, со скоплением вокруг них лимфоидно-клеточных элементов. Перива-суклярно - скопление лимфоцитов, нейтрофилов и макрофагов, в том числе гистиоцитов (полиморфно-клеточные инфильтраты различных размеров, вплоть до обширных), а также эритроцитов с признаками гемолиза и наличием гемосидерина. У шести крыс признаки адгезии эритроцитов и внутрисосудистого гемолиза (рис 4.). Отмечается расширение портальных трактов (рис. 5). У двух крыс отмечали наличие единичных милиарных некрозов. У восьми крыс - выраженная гиперемия, отек, в отдельных полях зрения отмечены кровоизлияния различных размеров (рис. 6). Соотношение одноядерных клеток к двуя-дерным в поле зрения составило 17:1, что на 17,6% ниже контрольной группы животных.

Рис. 4. Выраженные признаки внутрисосудистого гемолиза в печени у крыс с модельным токсическим повреждением СС14. Окраска гематоксилин-эозином, х 200.

Рис. 5. Расширение портальных трактов в печени крыс с модельным токсическим повреждением СС14. Окраска гематоксилин-эозином, х 400.

Рис. 6. Гиперемия кровеносных сосудов и кровоизлияния у крыс с модельным токсическим повреждением СС14. Окраска гематоксилин-эозином, х 200.

Гистологически у крыс третьей группы отмечены признаки восстановления балочного и дольчатого строения, часть клеток неравномерно набухшие, со стертыми границами и слабо контурируемыми ядрами. Однако среди них появляется значительное количество клеток с двумя интенсивно базофильно окрашенными ядрами. Третий вид клеток - достаточно крупные, со слабо выраженными границами, с крупными четкими светло-ба-зофильными ядрами и обильной эозинофильной зернистостью (признаки зернистой дистрофии). Такие клетки отмечены у половины животных. Наряду с ними, у другой половины крыс отмечены и клетки с наличием мелкой пылевидной базофильной зернистости, что свидетельствует о повышении белок-синтетической активности. При окраске суданом-Ш признаки диффузной жировой дистрофии установлены лишь у трех крыс. У четырех крыс очаговая или мелкоочаговая дистрофия смешанного характера (белково-жировая) (рис. 7). При этом очаги дистрофии чередуются с участками, представленными неповрежденными и двуядерными гепато-цитами (признаки регенерации) или гепатоцитами в состоянии зернистой дистрофии. Преобладают восстановившиеся гепатоциты, чередующиеся с гепатоцитами в состоянии зернистой дистрофии. У трех крыс отмечаются признаки адгезии и наличие гемосидерина. Лишь у двух крыс отмечали наличие моноцеллюлярных некрозов в различных отделах долек.

Межбалочные капилляры неравномерно умеренно гиперемированы. Однако интенсивность сосудистой реакции ниже, чем до применения настоя каллизии душистой. В области триад - сосуды также умеренно расширены с признаками незначительной лериартериальной мезенхималь-но-клеточной реакции, которая намного слабее, чем у крыс с токсическим повреждением без применения настоя. При этом в клеточном инфильтрате преобладают клеточные элементы соединительной ткани, клетки крови - единичные. Соотношение одноядерных клеток к двуядерным составило 15:1, что на 13,3% выше животных второй группы.

По сравнению с контролем, скорость пролиферации в первой экспериментальной группе выше в 1,1 раза (Р<0,0005), во второй - ниже в 1,3 раза (Р<0,005). В третьей группе на фоне токсической дистрофии под влиянием

Рис. 7. Смешанная дистрофия печени крыс с токсическим повреждением СС14 под влиянием БАВ каллизии душистой. Окраска гематоксилин-эозином, х 200.

монофитосубстанции, скорость пролиферации выше в 1,25 раза (Р<0,0005), по сравнению со второй экспериментальной группой крыс без применения настоя (табл. 3). Число апоптических клеток в первой группе ниже на 4,0%, во второй экспериментальной группе при токсическом повреждении в 2,8 раза выше. В третьей группе крыс число апоптических клеток ниже в 1,7 раза, в сравнении с показателями второй группы без применения монофитосубстанции. Число некротических клеток в ткани печени в первой группе находилось на уровне контрольной группы, а во второй группе (при токсическом повреждении) выше в 2,9 раза (Р< 0,05), по сравнению с показателями в контроле. В третьей группе под влиянием БАВ каллизии при токсической дистрофии число некротических клеток ниже в 1,4 раза показателей второй группы.

Таким образом, морфологические исследования, проведенные у здоровых животных, получавших настой каллизии душистой, установлено наличие активизирующего действия БАВ каллизии душистой на физиологическую регенерацию печени.

Настой каллизии душистой у животных с токсическим повреждением изменяет течение и характер дистрофических процессов в сторону преобладания обратимых (зернистой дистрофии над жировой), уменьшает гиперемию и проницаемость сосудистой стенки, снижает интенсивность мезенхимально-клеточной и сосудистой реакции органа. Кроме того, изменяет динамику митоза, апоптоза и некроза, по сравнению с животными с токсической дистрофией без применения монофитосубстанции, тем самым ускоряет процессы адаптации и репаративной регенерации гепатоцитов и способствует уменьшению зоны поражения печеночной ткани.

Результаты изучения влияния препарата «Комбад» на морфофункциональные показатели и регенерацию печени в норме и при экспериментальном повреждении

Для исключения токсического действия, а также для уточнения выявления вероятных альтернативных свойств по отношению к настою каллизии душистой проводили сравнение морфофункциональных показателей условно здоровых животных, получавших комплексную биологически активную добавку «Комбад», с контролем (животные, с которыми не осуществляли никаких манипуляций) и с показателями здоровых животных, получавших монофитосубстанцию (настой каллизии душистой).

Из результатов, представленных в таблице 2, следует, что исследуемые показатели условно здоровых животных, получавших препарат «Комбад», в сравнении с показателями контрольных крыс, изменились: увеличилось содержание эритроцитов на 9,0% (Р<0,0005), гемоглобина на 3,3% (Р<0,05), лейкоцитов на 7,8% (Р<0,005). Отмечено увеличение концентрации общего белка на 9,5% (Р<0,0005), по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует об усилении белок-синтетической функции печени под воздействием препарата «Комбад». Увеличивается прирост живой массы на 50,4% (Р<0,005), по срав-

Изменение показателей жизнедеятельности шестимесячных крыс под влиянием настоя кя душистой и препарата «Комбад» в норме и на фоне воздействия четыреххлористого углеро.

Показатели Контроль, п=20 Первая группа. Настой калли-зии душистой, 5 П=20 Вторая группа. СС14, п=20 Третья группа. ССГ+настой 4 каллизии душистой, п=20 Четвертая группа. Препарат «Комбад», п=20 Г15 сс

Эритроциты, 1012/л 10 4,41±0,01 5,02±б,10*** ,'■ 3,90±0,64 4,83±0,63 4,81±0,07*** 5,02

Лейкоциты, 109/л 5,20±0,03 5,80±0,36 13,31±0,16*** 9,92±0,43*** 5,64±0,15** 7,81

Гемоглобин, г/л 145,20±1,66 148,30±0,77 140,30±1,31* 174,32±1,13*** 150,21±1,59* 167,

Общий белок, г/л 71,02±0,23 71,04±0,31 59,82±0,63*** 70,61±0,18 78,42±0,34*** 71,2

Свободный билирубин, мкмоль/л 4,03; 0,05 4,06±0,08 15,6±0,09*** 6,20±1,05* 3,82±0,07* 5,81

Связанный билирубин, мкмоль/л 1,70±0,05 1,69±0,19 8,13±0,04*** 2,22±0,07*** 2,03±0,48 2,01

АлАТ, мкмоль/л 1,14±0,06 1,14±0,10 1,46±0,07** 1,28±0,18 1,14±0,19 1,24

АсАТ, мкмоль/л 1,21±0,03 1,22±0,02 1,51±0,1Г 1,36£0,01*** 1,20±0,06 1,32

Прирост массы тела, г 8,24±1,70 14,23±2,71* -5,8Ш,22*** 2,64±0,81** 1б,61±2,01** 4,24

Масса печени, г 6,56±0,15 7,02±0,30 7,5]±0,22*** 7,03±0,25. 7,08±0,33 6,94

Относительная масса печени, % 2,63±0,07 4,10±0,12*** 3,90±0,10*** 4,41±0,29" 3,24±1,12 4,03

*(Р<0,05); **(Р<0,005); ***(Р<0,0005) - в сравнении с контрольной группой.

Степень достоверности при сопоставлении показателей различных групп между собой отражена по тексту.

Динамика содержания апоптических и некротических клеток печени. Скорость пролиферации, митотический, апоптическнй и некротический индексы под влияш каллизии душистой и препарата «Комбад» в норме и на фоне воздействия четыреххлористогс

п-60

Показатели Контроль Первая фуппа. Настой каллизии душистой, п=10 Вторая группа. СС14, п=10 Третья группа. СС1.+настой калли- 4 зии душистой, п=10 Четвертая группа. Препарат «Комбад», п=10 Г С(

Митотический индекс, % 0,28±0,08 0,32±0,14 0,24±0,03 0,30±1,20 0,33±0,21

Скорость пролиферации, % 5,60±0,16 6,40±0,06*** 4,80±0Д4** 6,00±0,19 6,60±0,11***

Количество апоптических клеток 114,0±7,50 110,0±1,95 323,02±0,60*** 184,01±3,20*** 109,04±1,60

Апоптическнй индекс, % 0,24±0,02 0,21±0,13 0,62±0,14* 0,41±0,10 0,21±0,21

Количество некротических клеток 1,20±0,33 1,21±0,27 3,52±1,26 2,42±0,36* 1,20±0,38

Некротический индекс, % 0,03±0,07 0,03±0,04 0,07±0,06 0,05±0,19 0,03±0,12

*(Р<0,05); **(Р<0,005); ***(Р<0,0005) - в сравнении с контрольной группой.

Степень достоверности при сопоставлении показателей различных групп между собой отражена по тексту.

нению с контролем. Результаты гистологических исследований печени здоровых крыс, которым применили Комбад, по сравнению с результатами контрольных животных, свидетельствуют об отсутствие существенных различий. Обнаруживается увеличение числа гепатоцитов с признаками усиления белок-синтетической функции. Число двуядерных клеток при использовании препарата «Комбад» превышало показатели контрольной группы крыс на 21,4%, и на 15,4% —у здоровых животных, получавших настой каллизии душистой. Абсолютная масса печени, по сравнению с контрольной группой, выше на 7,4%. При этом относительная масса печени достоверно выше контроля в 1,3 раза.

Результаты, представленные в таблице 3, свидетельствуют, что применение препарата «Комбад» условно здоровым животным способствовало увеличению скорости пролиферации гепатоцитов в 1,3 раза (Р<0,0005), по сравнению с контролем, и на 3,0% относительно группы крыс, получавших настой каллизии душистой. Митотический индекс составил 0,33±0,02%. Заметной разницы количества некротических клеток в печени крыс, получавших комплексную биологически активную добавку «Комбад» профилактическим курсом, по сравнению с контролем, не обнаружено, при этом число апоптических клеток ниже контроля на 5,0%.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют, что препарат «Комбад» в дозе 1 мл/кг не оказывает отрицательного действия на печень условно здоровых животных. Препарат стимулирует регенеративную активность и, как следствие, функциональную активность печени. Это позволило предположить наличие гепатопротективного эффекта и приступить к изучению влияния препарата на патологически измененную печень.

При действии препарата «Комбад» в условиях токсической дистрофии все исследуемые гематологические и биохимические параметры, отражающие функциональную активность гепатоцитов, изменились в сторону нормы. У этих животных, по сравнению с животными, получавшими при токсическом повреждении настой каллизии душистой, количество эритроцитов выше на 4,0%, число лейкоцитов ниже на 27,0% (Р<0,0005), гемоглобина ниже на 4,0% (Р<0,05). Активность аминотрансфераз и уровень билирубина в сыворотке крови ниже: АлАТ — на 3,2%, АсАТ - на 3,0%; свободного билирубина — на 6,7%, связанного билирубина - на 10,0% (Р<0,0005) (табл. 2). При исследовании микрокартины печени крыс, получавших комплексную биологически активную добавку на фоне токсической дистрофии, отмечены признаки восстановления дольчатого и балочного строения. Однако признаки вакуолизации выражены слабее, чем у животных, получавших монофитосубстанцию (настой каллизии душистой). При окраске суданом-Ш признаки жировой дистрофии не установлены. У всех крыс отмечали в разной степени выраженную гидро-пическую или белковую дистрофию, с преобладанием зернистой. Признаки некроза не наблюдаются. По сравнению с группой крыс, получавших настой каллизии душистой, проницаемость сосудистых стенок значительно снижена, признаки адгезии отсутствуют, практически отсутствуют и скопления клеток

крови в периваскуляных зонах. Признаками повышения интенсивности регенерации является увеличение количества двуядерных клеток, по сравнению с группой крыс при токсической дистрофии без применения препарата - на 17,6%, и на 6,7%, в сравнении с животными, которые получали настой кал-лизии душистой. В целом у подавляющего большинства крыс отмечены признаки восстановления тканей органа. Абсолютная масса печени, по сравнению с животными с токсической дистрофией без применения препарата, ниже на 8,2%, а относительная масса печени выше на 3,3% (табл. 2).

При определении скорости пролиферации на основе митотического индекса с помощью колхицинового метода выявлено достоверное повышение скорости пролиферации в 1,3 раза относительно группы животных без применения препарата, и на 3,2%, по сравнению с показателями, животных получавших настой каллизии душистой. Митотический индекс составил 0,31±0,09%.В печени крыс с модельным токсическим повреждением СС14 под влиянием комплексной биологически активной добавки «Комбад» число некротических клеток (рис. 8) снизилось в 1,7 раза, по сравнению с группой животных с токсической дистрофией без применения препарата, и в 1,2 раза относительно аналогичной группы животных, получавших настой каллизии душистой. Некротический индекс составил 0,04±0,26%. Происходит достоверное снижение количества апоптических клеток в данной группе в 1,9 раза без применения комплексной биологически активной добавки, и в 1,1 раза при выпаивании животным моно-фитосубстанции. Апоптический индекс составил 0,30±0,23% (табл. 3).

Рис. 8. Некротические клетки (указаны стрелками) в печени крыс с токсическим повреждением СС14 под влиянием препарата «Комбад». Дифференциальное окрашивание трипано-вым синим, х200.

Таким образом, комплекс критериев (апоптоз, некроз и митоз), отражающих уровень регенерации также свидетельствует о выраженном регене-ринстимулирующем влиянии препарата на репаративные процессы в большей степени, чем БАВ монофитосубстанции.

ВЫВОДЫ

1. Для здоровых крыс репродуктивного периода онтогенеза выявлены критерии морфофункциональной полноценности печени. При этом показатели уровня пролиферативной активности гепатоцитов (скорость пролиферации и митотический индекс) существенно превышают показатели интенсивности гибели клеток (некротический и апоптический индексы).

' 1 ■ ■___; - ■ 'У

2. Абсолютные и относительные показатели уровня апоптоза, митоза и некроза, находящиеся в коррелятивной зависимости с изучаемыми параметрами гомеостаза и морфофункциональной полноценности печени, можно считать объективными прямыми критериями оценки регенеративной активности ее ткани.

3. Использование настоя каллизии душистой здоровым крысам способствует увеличению абсолютной массы печени в среднем на 6,6%, относительной массы печени в 1,6 раза выше, что на фоне пропорционального прироста массы тела можно расценивать как эффект физиологической стимуляции. Абсолютная масса печени у крыс, получавших настой каллизии душистой, по сравнению с животными с токсическим повреждением без применения монофитосубстан-ции, ниже на 6,8%, а относительная масса органа выше в 1,1 раза, что связано с характером соотношения патологических и регенёрационных процессов.

4. Применение настоя каллизии душистой у здоровых крыс активизирует гемопоэз. У крыс с токсической дистрофией печени уровень общего белка повысился на 15,3%, снизилась активность АлАТ — на 14,0%, АсАТ - на 11,0%, а содержание свободного и связанного билирубина стало достоверно ниже на 74,8% и на 66,2% соответственно. В целом это свидетельствует об активизации адаптационных механизмов на различном уровне, обеспечивающих морфо-функциональную полноценность печени.

5. Физиологическая регенерация печени повышается под влиянием настоя каллизии душистой у животных, что заключается в увеличении скорости пролиферации гепатоцитов в 1,1 раза и снижении числа апоптических клеток на 4,0%.

6. Особенности репаративной регенерации под влиянием настоя каллизии душистой заключаются в снижении числа животных с диффузной жировой дистрофией на 20%, и на 15% - с наличием моноцеллюлярных некрозов, уменьшении признаков внутрисосудистого гемолиза, исчезновении кровоизлияний и гемосидероза. Преобладают гепатоциты в состоянии зернистой дистрофии. Увеличивается скорость пролиферации гепатоцитов в 1,25 раз, число апоптических клеток ниже в 1,8 раза, некротических клеток ниже в 1,4 раза, по сравнению с животными с токсической дистрофией без применения настоя.

7. Применение препарата «Комбад» здоровым животным способствует увеличению скорости пролиферации гепатоцитов на 2,0% и числа двуядерных клеток на 15,4%, усилению белок-синтетической активности гепатоцитов, по сравнению с группой крыс, получавших настой каллизии душистой, при сохранении показателей апоптоза и некроза на уровне животных, которые получали настой. Это свидетельствует о повышении физиологической регенерации в большей степени, чем при использовании монофитосубстанции.

ни, снижении проницаемости сосудистой стенки. По сравнению с животными с токсической дистрофией без применения препарата, снижаются апоптический и некротический индексы в 2 раза и в 1,8 раза соответственно, достоверно увеличивается скорость пролиферации и митотичсский индекс в 1,3 раза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Соотношения комплекса показателей митоза, апоптоза и некроза могут быть использованы в качестве адекватного критерия оценки уровня физиологической и репаративпой регенерации печени.

2. Количественные показатели апоптоза, некроза и пролиферативной активности, отражающие уровень физиологической регенерации у здоровых крыс могут быть использованы в качестве исходных критериев для оценки и прогнозирования морфогенеза печени под влиянием различных внешних факторов в репродуктивный период онтогенеза.

3. Полученные сведения об особенностях влияния биологически активных препаратов на основе каллизии душистой на репаративный потенциал печени крыс, могут быть использованы специалистами биологического и медицинского профиля для разработки новых гепатопротективных средств по их применению.

4. Материалы диссертационной работы могут использоваться в научных целях, при составлении учебных и справочных пособий, чтении лекций, ведении лабораторно-практических занятий по биологии развития и размножения, гистологии, физиологии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Тимченко, Л.Д. Характеристика и свойства биологически активных препаратов каллизии душистой / Л.Д. Тимченко, Н.С. Калинская // Первая ежегодная научная конференция студентов и аспирантов базовых кафедр Южного научного центра РАН: Тезисы докладов. - Росгов-на-Дону: Изд-во ЮНЦ РАН, 2005. - С. 314-316.

2. Калинская, Н.С. Морфологические особенности печени крыс в норме и при экспериментальном повреждении четырёххлористым углеродом / Н.С. Калинская // Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Мат-лы научи, конф. / СГУ - Ставрополь, 2006. - С. 95-96.

3. Тимченко, Л.Д. Технологическое обоснование получения нового комплексного биологически активного препарата на основе эмбриональных и растительных субстратов/Л.Д. Тимченко, И.В. Ржепаковский, В.Н. Вакулин, A.C. Каузова, Н.С. Калинская //Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Мат-лы научн. конф. / СГУ — Ставрополь, 2006. — С. 211-213.

4. Тимченко, Л.Д. Влияние различных доз четырёххлористого углерода на биохимические и гематологические показатели крови крыс / Л.Д. Тимченко, Н.С. Калинская, С.П. Дьякова // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных: Международная научно-производственная конф. - Воронеж, 2006. - С. 784-786.

5. Тимченко, Л.Д. Взаимосвязь циркулирующих в крови ß- адренореиеп-торов с некоторыми параметрами жизнедеятельности крыс с токсическим повреждением печени под влиянием биологически активных веществ растения каллизии душистой / Л.Д. Тимченко, С.П. Дьякова, Н.С. Калинская // Экология человека. - Архангельск. — 2006. - Приложение 4/1. - С. 156-158.

6. Калинская, Н.С. Влияние сублимационного высушивания на биологическую активность препарата «КОМБАД» / Н.С. Калинская, A.C. Каузова // Третья ежегодная научная конференция студентов и аспирантов базовых кафедр Южного научного центра РАН: Тезисы докладов. - Ростов-на-Дону: Изд-во ЮНЦ РАН, 2007.-С. 22-23.

7. Тимченко, Л.Д. Дифференциальное окрашивание паренхиматозных клеток печени трипановым синим для определения апоптоза/ Л.Д. Тимченко, Н.С. Калинская // Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Мат-лы научи, конф. / СГУ - Ставрополь, 2007. - С.234-236.

8. Волкова, Н.Ю. Методика изучения прижизненной активности регепераци-онной способности клеток внутренних органов / Н.Ю. Волкова, Н.С. Калинская, И.В. Ржепаковский // Вестник Московского государственного областного университета. Серия «Естественные науки». — 2008. — № 1С. 40-42.

9. Дьякова, С.П. Динамика циркулирующих в крови ß-адренорецепто-ров и их взаимосвязь с гематологическими и биохимическими показателями у крыс с токсическим повреждением печени под влиянием биологически активных веществ каллизии душистой / С.П. Дьякова, Н.С. Калинская // Вестник Московского государственного областного университета. Серия «Естественные науки». - 2008. — № 1. - С. 43-45.

10. Калинская, Н.С. Апоптоз печени крыс при повреждении и под влиянием настоя каллизии душистой / Четвертая ежегодная научная конференция студентов и аспирантов базовых кафедр Южного научного центра РАН: Тезисы докладов. — Ростов-на-Дону: Изд-во ЮНЦ РАН, 2008. - С. 14-15.

11. Тимченко, Л.Д. Влияние БАД «Комбад» па гистологические показатели печени крыс при токсическом повреждении / Л.Д. Тимченко, Н.С. Калинская // Физиологические проблемы адаптации: Сб. научных статей. / СГУ. - Ставрополь, 2008. - С. 176-177.

12. Патент № 2320197 РФ Способ приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов / Л.Д. Тимченко, И.В. Ржепаковский, В.Н. Вакулин, A.C. Каузова, НС. Калинская. - Приоритет от 23.12.2004; Опубл. 27.03.2008.-Бюл. № 9.6

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Калинская, Наталия Сергеевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.:.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О СУЩНОСТИ РЕГЕНЕРАЦИИ И МЕХАНИЗМАХ ЕЕ РЕГУЛЯЦИИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Особенности регенерации в онтогенезе.

1.2. Морфогенез и особенности физиологической и репаративной регенерации в печени при различных ее повреждениях.

1.3. Пути и средства стимуляции регенерационных процессов в печени.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. морфофункциональный и регенеративный потенциал печени крыс репродуктивного периода жизни.

3.2. Экспериментальное моделирование дозированного повреждения печени крыс для изучения регенеративных особенностей.

3.3. Результаты изучения влияния фитопрепаратов из каллизии душистой на морфогенез и регенерацию печени половозрелых крыс в норме и при экспериментальном повреждении.

3.3. L Биологически активные вещества каллизии душистой и характеристика новых препаратов на ее основе.

3.3.2. Результаты влияния монофитосубстанции на морфофункционалъные показатели и регенерацию печени крыс при экспериментальном повреждении.

3.3.3. Результаты изучения влияния препарата «Комбад» на морфофункционалъные показатели и регенерацию печени в норме и при экспериментальном повреждении.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности физиологической и репаративной регенерации печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой"

Актуальность исследования.

Регенерация представляет собой приспособительный процесс, выработанный в ходе эволюции и присущий всему живому (Струков А.И., Серов В.В., 1985). На протяжении онтогенеза регенерация не остается неизменной ее интенсивность с возрастом и под влиянием внешней среды изменяется (Сидорова В.Ф., 1976; Данилов Р.К., Григорян Б.А., 1996; Де-ев Р.В., 2007). Особый интерес вызывает интенсивность регенерационно-го процесса в репродуктивном периоде онтогенеза, когда органы и системы органов не только наиболее зрелые для реализации их онтогенетически предусмотренных функций, но и должны быть подготовлены к выполнению эксклюзивной для организма роли - воспроизводству потомства (Торчинов A.M., Ханукоева А.К., 2000; Илющенко В.Г., 2003). Именно в этот период особое значение придается морфофункциональной полноценности и высокой регенерационной способности внутренних органов организма матери (Николина О.В., 2004; Chronos G.P., Gold P.W., 1992), тем более что многочисленные сведения по этому вопросу очень разноречивы. Большое число исследований в этом смысле, отводят важную роль печени, которая является поли функциональным органом (Подымова С.Д., 1993; Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А., Котовский Е.Ф., 1999; Михайлов И.В., 2002). Заболевания печени стоят на восьмом месте среди причин смертности населения репродуктивного возраста в разных странах, что связано с усилением физиологически обусловленной нагрузки на нее, как на жизненно важного органа, связанного с интенсивными процессами метаболизма на фоне повышения гормональной активности (Николаев А.В., Рожило Я.А., Старожилова Т.К., Сарнацкая В.В., 2005).

В связи с этим в настоящее время остается высокой потребность в гепатопротекторных средствах, повышающих резистентность печени к действию повреждающих агентов и нормализующих ее метаболизм в условиях напряжения детоксицирующей функции. Большим потенциалом в этом смысле обладают растения, в том числе ранее не применявшиеся в научной, но получившие широкое распространение в народной медицине (Ивашкин В.Т., 2002; Крылова С.Г., Ефимова Л.А., Вямятина З.К., Зуева Е.П., 2006; Новомлинский В.В., 2007; Bai S., Asiya В., Fa L., 1995). К таким растениям относится каллизия душистая (лат. Callisia Fragrans), единичные препараты из которой (капли, настойка), в том числе для применения per os, уже появились на отечественном фармацевтическом рынке. Однако отсутствуют научно-экспериментальные данные о гепатопро-тективном действии, специфике влияния на механизмы физиологической и репаративной регенерации, а также гепатотоксичности, что позволило бы рекомендовать применение препаратов на основе каллизии душистой в качестве регенеринстимулирующих средств в репродуктивный период жизни.

Современные взгляды на сущность регенерации требуют ее оценки с позиций комплекса показателей, отражающих не только интенсивность пролиферативных процессов, но и с учетом уровня повреждения ткани (Цыпленкова В.Г., Бескровнова Н.Н., 1996; Казначеев К.С., 1999; Жижи-наГ.П., 2002; Цейликман О.Б., 2005; Schulze-Osthoff К., Ferrari D., Los М. et al., 1998). Однако в доступной литературе отсутствует информация не только о зависимости друг от друга значений этих критериев, но и об их взаимосвязи с другими показателями морфофункциональной полноценности печени в тот или иной период онтогенеза или под действием тех или иных повреждающих факторов.

В целом вышеизложенное обусловило актуальность выбранной темы по изучению влияния комплекса биологически активных веществ каллизии душистой на морфофункциональные показатели печени и ее регенераторный потенциал в репродуктивном периоде онтогенеза в норме и с токсическим повреждением.

Целью исследования явилась комплексная оценка морфофункцио-нальных показателей и интенсивности регенерационных процессов печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза в норме, с токсическим повреждением и под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой.

В соответствии с этим были определены следующие задачи:

1) изучить регенерационную способность и выявить критерии мор-фофункциональной полноценности печени у крыс репродуктивного периода онтогенеза;

5) изучить влияние новой комплексной биологически активной добавки «Комбад» на основе эмбриональных и растительных субстратов на показатели физиологической и репаративной регенерации и морфофунк-циональной полноценности печени в репродуктивном периоде онтогенеза.

Установлены показатели соотношения апоптоза, митотической активности и некроза для печени крыс линии Вистар репродуктивного периода в норме.

Впервые с учетом комплекса показателей (гематологических, биохимических, гистологических, уровня апоптоза и некроза, митотической активности) изучено и подтверждено положительное влияние биологически активных веществ настоя каллизии душистой на интенсивность регенерации печени при токсической дистрофии у крыс репродуктивного периода онтогенеза.

Теоретическая и практическая значимость исследования. Полученные сведения об уровне апоптоза, некроза, митотической активности и скорости пролиферации, а также установленная коррелятивная зависимость этих критериев с показателями регуляторных механизмов регенерации печени крыс, углубляют и расширяют представление о морфо-функциональных особенностях и регенераторном потенциале этого органа в репродуктивном периоде онтогенеза.

Приоритетность выполненных исследований подтверждена патентом №2320197 на способ приготовления комплексной биологически активной добавки «Комбад» для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов.

Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на первой, третьей и четвертой ежегодной научной конференции студентов и аспирантов базовых кафедр Южного научного центра РАН (Ростов-на-Дону, 2005, 2007, 2008), где доклады автора отмечены двумя почетными грамотами; на Всероссийской научно-практической конференции (Архангельск, 2006); на Международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006); на научной конференции «Университетская наука - региону» (Ставропольский государственный университет, 2006, 2007); на научной конференции «Физиологические проблемы адаптации» (Ставропольский государственный университет, 2008).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Комплекс изученных морфофункциональных показателей и характер коррелятивной зависимости между ними объективно отражают особенности морфофункционального статуса и регенеративного потенциала печени белых крыс в репродуктивном периоде онтогенеза. Установленные соотношения параметров интенсивности гибели и пролиферации клеток печени крыс можно использовать в качестве прямых критериев оценки регенеративного потенциала органа.

2. Биологически активные вещества растения каллизии душистой оказывают в разной степени выраженное стимулирующее действие на физиологическую и репаративную регенерацию печени и могут быть использованы для этой цели как в виде монофитосубстанции, так и в составе сложного комплексного препарата «Комбад», при применении которого репаративные процессы наиболее выражены.

Заключение Диссертация по теме "Биология развития, эмбриология", Калинская, Наталия Сергеевна

ВЫВОДЫ

3. Использование настоя каллизии душистой здоровым крысам способствует увеличению абсолютной массы печени в среднем на 6,6%, относительной массы печени в 1,6 раза выше, что на фоне пропорционального прироста массы тела можно расценивать как эффект физиологической стимуляции. Абсолютная масса печени у крыс, получавших настой каллизии душистой, по сравнению с животными с токсическим повреждением без применения монофитосубстанции, ниже на 6,8%, а относительная масса органа выше в 1,1 раза, что связано с характером соотношения патологических и регенерационных процессов.

4. Применение настоя каллизии душистой у здоровых крыс активизирует гемопоэз. У крыс с токсической дистрофией печени уровень общего белка повысился на 15,3%, снизилась активность АлАТ — на 14,0%, АсАТ — на 11,0%, а содержание свободного и связанного билирубина стало достоверно ниже на 74,8% и на 66,2% соответственно. В целом это свидетельствует об активизации адаптационных механизмов на различном уровне, обеспечивающих морфофункциональную полноценность печени.

7. Применение препарата «Комбад» здоровым животным способствует увеличению скорости пролиферации гепатоцитов на 2,0% и числа дву-ядерных клеток на 15,4%, усилению белок-синтетической активности гепатоцитов, по сравнению с группой крыс, получавших настой каллизии душистой, при сохранении показателей апоптоза и некроза на уровне животных, которые получали настой. Это свидетельствует о повышении физиологической регенерации в большей степени, чем при использовании монофитосубстанции.

8. В условиях токсической дистрофии препарат «Комбад» снижает степень дистрофических процессов в печени, в большей степени, чем настой каллизии душистой, что выражается в отсутствие жировой дистрофии, некроза и признаков адгезии эритроцитов, исчезновении застойной гиперемии и отечности ткани, снижении проницаемости сосудистой стенки. По сравнению с животными с токсической дистрофией без применения препарата, снижаются апоптический и некротический индексы в 2 раза и в 1,8 раза соответственно, достоверно увеличивается скорость пролиферации и митотический индекс в 1,3 раза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Соотношения комплекса показателей митоза, апоптоза и некроза могут быть использованы в качестве адекватного критерия оценки уровня физиологической и репаративной регенерации печени.

3. Полученные сведения об особенностях влияния биологически активных препаратов на основе каллизии душистой на репаративный потенциал печени крыс, могут быть использованы специалистами биологического и медицинского профиля для разработки новых гепатопротектив-ных средств по их применению.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Калинская, Наталия Сергеевна, Ставрополь

1. Абдувалиев, А.А. Дифференциальное окрашивание опухолевых клеток трипановым синим для определения апоптоза / А.А. Абдувалиев, М.С. Гильдиева // Клиническая лабораторная диагностика. 2006. -№2.-С. 36-38.

2. Абраменков, И.В. Оценка параметров апоптоза в диагностике онкологических заболеваний, их прогнозе и оптимизации схем терапии / И.В. Абраменков, А.А. Фильченков // Вопросы онкологии. 2003. — № 1.-С. 21-30.

3. Авдеева, М.Г. Патогенетические механизмы инициации синдрома системного воспалительного ответа / М.Г. Авдеева, М.Г. Шубич // Клиническая лабораторная диагностика. — 2003. № 6. - С. 3-6.

4. Арешидзе, Д.А. Морфологические и гистохимические показатели адаптации обменных процессов у крыс с экспериментальным гипер- и гипопаратиреозом при инверсии светового режима: Дисс. . канд. биол. наук / Д.А. Арешидзе. Ставрополь, 2002. - 27 с.

5. Арешидзе, Д.А. Частотное распределение гепатоцитов у крыс с экспериментальным гиперпаратиреозом при смещении светового режима / Д.А. Арешидзе // Материалы 10 итоговой научной конференции молодых ученых и студентов. Ставрополь: СГМА, 2002. - С. 23-24.

6. Арешидзе, Д.А. Методы статистической обработки данных в биологии. Учебное пособие / Д.А. Арешидзе. Ставрополь: РИО филиал МГОПУ, 2003.-36 с.

7. Аруин, Л.И. Апоптоз при патологических процессах в органах пищеварения / Л.И. Аруин // Клиническая медицина. 2000. - № 1. - С. 5-10.

8. Асамов, Д.К. Актуальные вопросы физиологии, биохимии и биотехнологии / Д.К. Асамов, С.Т. Рахимова. Ташкент: 1ГУ, 1991. - С. 122-126.

9. Астауров, Б.Л. Методы биологии развитии / Б.Л. Астауров. М.: Медицина, 1974. - 590 с.

10. Афанасьев, Ю.И. Гистология / Ю.И. Афанасьев, Н.А. Юрина, Е.Ф. Котовский. -М.: Медицина, 1999. 744 с.

11. Бабаева, А.Г. Регенерация и система иммуногенеза / А.Г.Бабаева. -М.: Медицина, 1970. 354 с.

12. Базарнова, Ю.Г. Исследование содержания некоторых биологически активных веществ, обладающих антиоксидантной активностью, в дикорастущих плодах и травах / Ю.Г. Базарнова // Вопросы питания. — 2007. Т. 76. - № 1. - С. 22-26.

13. Белоусов, Л.В. Проблема эмбрионального формообразования / Л.В. Белоусов. -М.: Наука, 1971.-283 с.

14. Белоусова, А.К. Молекулярные основы специфического взаимодействия сигнальных белков / А.К. Белоусова // Успехи современной биологии. 2000. - Т. 119. - Вып. 2. - С. 345-358.

15. Белушкина, Н.Н. Молекулярные основы патологии апоптоза / Н.Н. Белушкина, С.Е. Северин // Архив патологии. — 2001. Т. 63. — № 1.-С. 53-60.

16. Белякова, Г.И. Функциональное состояние печени у беременных с гистозом: Автореф. дисс. . канд. мед. наук / Г.И. Белякова. М.,1998.-40 с.

17. Бенюш, В.А. Размеры полиплоидных клеток в изолированных клетках печени / В.А. Бенюш // Цитология. 1997. -№ 7. - С. 1115-1121.

18. Блюгер, А.Ф. Практическая гепатология / А.Ф. Блюгер, И.Н. Новицкий. Рига, 1984. - 426 с.

19. Бондаренко, Ф.Л. Иммунотропные средства и их применение при лечении вирусных гепатитов / Ф.Л. Бондаренко // Рос. мед. журнал. —1999. -№ 4. -С. 52-55.

20. Борисов, И.Н. Филогенетические основы тканевой организации животных / И.Н. Борисов, П.В. Дунаев, А.Н. Бажанов. Новосибирск: Наука, 1986.-237 с.

21. Бреинг, Ф. Клиника и терапия повреждений мембран печени / Ф. Бре-инг. Кельн, 1998. - 198 с.

22. Брюхин, Г.В. АКТГ продуцирующая функция аденогипофиза и вес надпочечника у потомства самок крыс с хроническим поражением печени в период постнатального онтогенеза / Г.В. Брюхин, Н.В. Пивельл

23. Морфология. 2002. - Т. 123. -№ 3. - С. 63-67.

24. Брюхин, Г.В. Влияние хронических холестатических поражений печени матери на потомство в условиях эксперимента / Г.В. Брюхин // Морфология. 1994. - Т. 127. - № 2. - С. 18-21.

25. Брюхин, Г.В. Функциональное состояние элементов СМФ у потомства матерей с хроническим поражением печени различной этологии / Г.В. Брюхин // Иммунология. 1993. - № 4. - С. 63-64.

26. Величко, М.А. Биологически активные пищевые добавки / М.А. Величко, В.П. Шевченко // Военно-медицинский журнал. 1998. - № 7. -С. 24-27.

27. Венгеровский, А.И. Гепатозащитное действие препаратов растительного происхождения / А.И. Венгеровский, Т.Ф. Марина, П.А. Бова. -Томск, 1990.-154 с.

28. Веревкина, М.Н. Стимуляторы в макромире и микромире / М.Н. Ве-ревкина, А.Ф. Дмитриев. Ставрополь, 2004. - 47 с.

29. Владимирская, Е.Г. Апоптоз и его роль в регуляции клеточного равновесия / Е.Г. Владимирская // Клиническая лабораторная диагностика.-2002.-№ 11.-С. 25-32

30. Волкова, О.В. Эмбриогенез и возрастная гистология внутренних органов человека / О.В. Волкова. -М.: Медицина, 1976. 148 с.

31. Волчек, И.В. Возможности использования неовира в программе индивидуальной терапии вирусных гепатитов С и В / И.В. Волчек, Т.В. Сологуб // Terra medica. 2000. - № 1. - С. 7-10.

32. Воронцова, М.А. Восстановление утраченных органов у животных и человека / М.А. Воронцова. М.: Сов. наука, 1953. - 245 с.

33. Вторушин, Е.В. Становление фолликулогенеза в яичниках у потомства крыс с хроническим поражением гепатобилиарной системы / Е.В. Вторушин, Г.В. Брюхин // Проблемы репродукции. 2005. - № 2. - С. 23-26.

34. Гамбарян, П.П. Крыса / П.П. Гамбарян, Н.М. Дукельская. М.: Советская наука, 1955. - 386 с.

35. Гарбузенко, Д.В. Механизмы регуляции печени / Д.В. Гарбузенко, Т.К. Попов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, ко-лопроктологии. — 2001. № 1. - С. 21-23.

36. Головнев, В.А. Особенности заживления экспериментальной раны печени у крыс в условиях применения ангиогениа / В.А. Головнев, А.А. Бейсембаев, Э.Х. Акрамов // Морфология. 2005. - Т. 128. - № 4. -С. 98-100.

37. Гололобов, В.Г. Регенерация костной ткани при заживлении огнестрельных переломов / В.Г. Гололобов. СПб.: 21 век, 1997. - 112 с.

38. Гонский, Я.И. Влияние ацетилцистеина на антиоксидантную систему при экспериментальном токсическом поражении печени / Я.И. Гонский, М.М. Корда, И.Н. Клищ // Фармакология и токсикология. -1991. Т. 54. - № 5. - С. 44-48.

39. Горелова, Ж.Ю. Биологически активные добавки к пище: характеристика и перспективы использования / Ж.Ю. Горелова // Вопросы современной педиатрии. — 2002. Т. 1. — № 1. — С. 87-89.

40. Горелова, Ж.Ю. Характеристика и перспективы использования биологически активных добавок пище / Ж.Ю. Горелова // Медицинская помощь. 2002. - № 5. - С. 46-50.

41. Гринкевич, Н.И. Лекарственные растения: Справочное пособие / Н.И. Гринкевич. М.: Наука, 1991. - 258 с.

42. Гумерова, А.А. Клеточные источники соединительной ткани в печени при хронических заболеваниях / А.А. Гумерова // Тезисы докладов четвертой международной ассоциации морфологов. — Уфа, 2002. С. 44.

43. Данилов, Р.К. Гистогенез и регенерация тканей / Р.К. Данилов, Б.А. Григорян // Морфология. 1996. - № 1. - С. 110-111.

44. Данилов, Р.К. Экспериментально-гистологический анализ гистогенеза и регенерации тканей (некоторые итоги 20 века и перспективы дальнейший исследований) / Р.К. Данилов, Т.Г. Боровая, Н.Д. Клочков // Морфология. 2002. - Т. 118. - № 4. - С. 7-16.

45. Данилова, J1.A. Получение антиоксидантов окисления жиров из растительного сырья / JI.A. Данилова // Тезисы докл. конференции «Химре-актор-92».-Харьков, 1992.-С. 128-130.

46. Деев, Р.В. Анализ репаративной регенерации костей крыши черепа / Р.В. Деев // Морфология. 2007. - Т. 121. - № 6. - С. 64-69.

47. Денисов, А.Б. Анализ течения регенерации подчелюстной слюнной железы крысы методом кластеризации при воздействии на акупунк-турные точки / А.Б. Денисов, С.А. Панфилов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1995. - Т. 120. - С. 659-662.

48. Епишин, А.В. Применение иммуномодулирующих препаратов в комплексном лечении идиопатического гипотиреоза / А.В. Епишин, Н.А. Хабарова // Эксперим. онкол. 1993. - № 10. - С.32-35.

49. Ермаков, А.И. Методы биохимического исследования растений /

50. A.И. Ермаков, В.В. Арасимович. Калининград, 1981. - С.23-26.

51. Жижина, Г.П. Роль апоптоза в нормальном онтогенезе, патогенезе и старении / Г.П. Жижина // Клиническая геронтология. — 2002. Т. 8. — №4.-С. 4-10.

52. Заводник, Л.Б. Стабилизация диэтилникотинамидом гидроксилирую-щей функции печени кроликов при отравлении четыреххлористого углерода / Л.Б. Заводник, М.И. Бушма // Фармакологии и токсикологии. 1991. - Т. 54. - № 4. - С. 69-71.

53. Ивашкин, В.Т. Болезни печени и желчевыводящих путей / В.Т. Ивашкин. -М.: Вести, 2002. 146 с.

54. Ивашкин, В.Т. Настоящее и бедующее клинической гепатологии /

55. B.Т. Ивашкин // Болезни органов пищеварения. 2002. — Т. 4. - № 1.1. C. 13-16.

56. Илющенко, В.Г. Современные подходы к оценке биологического возраста человека / В.Г. Илющенко // Валеология. 2003. - № 3. - С. 11-19.

57. Исаев, В.А. Консервативное лечение язвы желудка и двенадцати пер-стной кишки с использованием БАД / В.А. Исаев // Лечащий врач. — 2002.-№6.-С. 33.

58. Ищенко, Ю.И. Тканевой микрорайон печени крыс Вистар с хроническим токсическим гепатитом после коррекции сорбентом «энтера-стель» / Ю.И. Ищенко, С.В. Мичурина // Тезисы докладов четвертой международной ассоциации морфологов. — Уфа, 2002. — С. 61.

59. Казначеев, К.С. Механизмы развития цитокиндуцированного апоптоза / К.С. Казначеев // Гематология и трансфузиология. — 1999. — Т. 44. — № 1. — С. 40-44.

60. Карлсон, Б.М. Проблемы биологии развития. Регенерация / Б.М. Карлсон. М.: Просвещение, 1986. - 259 с.

61. Кенжаев, Ф.Р. Современные аспекты репаративной регенерации и методы стимуляции / Ф.Р. Кенжаев, М.С. Асамов // Проблемы биологии и медицины. 1997. - № 2. -С. 65-68.

62. Климнюк, Е.В. Экспериментальная фармакотерапия растительными флавоноидами поражений печени, вызванные индометацином / Е.В. Климнюк // Фармакология и токсикология. — Киев, 1991. — Вып. 26. С. 94-97.

63. Клишов, А.А. Гистогенез и регенерация тканей / А.А. Клишов. — JL: Медицина, 1984. 232 с.

64. Клишов, А.А. Реактивность и регенерация тканей / А.А. Клишов, И.А. Одинцова // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. — 1991. — Т. 100. -№3.- С. 95-97.

65. Князева, JI.C. Морфологические особенности постнатального развития печени при искусственном вскармливании / JI.C. Князева, С.Т. Азубаева // Морфология. 2002. - № 2. - С. 72.

66. Князкькин, И.В. Апоптоз в онкоурологии / И.В. Князкькин, В.Н. Цыган. СПб.: Наука, 2007. - 240 с.

67. Козинец, Г.И. Кровь и инфекция / Г.И. Козинец, В.В. Высоцкий, В.М. Погорелов, А.А. Еровиченков и др. М.: Триада-фарм, 2001. -456 с.

68. Кондрахин, И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / И.П. Кондрахин, Н.В. Курилов, А.Г. Малахов. М.: Агропром-издат, 1985.-288 с.

69. Константинова, И.С. Морфологические исследования клеток синусо-идных капилляров печени / И.С. Константинова // Морфология. -2004. Т. 126. - № 4. - С. 61-62.

70. Конышев, В.А. Лекарства и пища / В.А. Конышев // Медицинская помощь. 2002. - № 4. - С. 41-44.

71. Корзунова, А.Н. «Золотой ус» или лекарство от всех болезней / А.Н. Корзунова. -М.: Эксмо, 2004. 128 с.

72. Корнев, М.А. Анатомия человека от эмбриогенеза до зрелости / М.А. Корнев. СПб.: Медицина, 2002. - 483 с.

73. Кородецкий, А.Д. Золотой ус против ста болезней / А.Д. Кородецкий. СПб.: Питер, 2004. - 182 с.

74. Королева, JI.P. Современные гепатопротекторы / JI.P. Королева // Российский медицинский журнал. 2005. - №. 2. - С. 35-37.

75. Корыстов, Ю.Н. Физиология и репаративная регенерация тканей, основной фактор онтогенеза / Ю.Н. Корыстов // Успехи современной биологии. 1994. - Т. 114. - Вып. 5. - С. 606-616.

76. Крутских, Е.В. Дифференциальная диагностика хронических заболеваний печени / Е.В. Крутских. Д.: Медицина, 1990. - 198 с.

77. Крылов, А.А. Фитотерапия в комплексном лечении комплексных заболеваний внутренних органов / А.А. Крылов, В.А. Марченко, Н.П. Максютина. Киев: Здоровье, 1991.-448 с.

78. Кубраков, Д.Н. Золотой ус: Модная панацея или реальная помощь? / Д.Н. Кубраков // Жизнь. 2006. - № 10. - С. 23.

79. Кульмагамбетова, Э.А. Биологические аспекты изучения лекарственных растений / Э.А. Кульмагамбетова, JI.H. Прйбыткова, А.В. Душкин

80. Физиолого-биохимические аспекты изучения лекарственных растений. Материалы конференции. Новосибирск, 1998. - С. 35

81. Кушнерова, Н.Ф. Эффективность применения растительного препарата Диприм для восстановления функционального состояния печени после поражения этиловым спиртом / Н.Ф. Кушнерова, В.Г. Спрыгин, С.Е. Фоменко // Гигиена и санитария. — 2002. — № 1. С. 56-60.

82. Лазебник, Л.Б. Клинико-морфологические изменения печени при ате-рогенной дислипидемиии и при лечении статинамина / Л.Б. Лазебник, Л.А. Звенигородская, И.А. Морозов, С.Д. Щепелова // Терапевтический архив. 2003. - Т. 75. - № 8. - С. 51-55.

83. Левачев, М.М. Новые биомедицинские технологии с использованием биологически активных добавок / М.М. Левачев, С.Н. Кулакова, З.В. Карагодина // Материалы Российской научной конференции. -Владивосток, 1998. С. 3-9.

84. Лиознер, Л.Д. О различных способах регенерации / Л.Д. Лиознер // Онтогенез. 1972. - № 1. - С. 3-9.

85. Лиознер, Л.Д. Регенерация и развитие / Л.Д. Лиознер. М.: Наука, 1982.-162 с.

86. Лиознер, Л.Д. Регенерационные процессы и их изучение в СССР / Л.Д. Лиознер, А.Г. Бабаева, И.В. Маркелова. М.: МГУ, 1990. - 106 с.

87. Лоранская, Т.М. Биологически активные добавки к пище, их применение в клинике внутренних болезней / Т.М. Лоранская // Клиническая медицина. 1997. - № 7. - С. 18-21.

88. Луняк, Н.К. Биофармацевтические аспекты создания и применения препаратов / Н.К. Луняк, Ю.С. Луняк // Журнал Международной академии наук о природе и обществе. М, 1999. - С. 48.

89. Лушников, Е.Ф. Гибель клетки / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов. — М.: Медицина, 2001. 160 с.

90. Майбордин, И.В. Образование рубца в печени после воздействия различных повреждающих факторов / И.В. Майбордин, Д.А. Ильин, Т.В. Михеева, В.В. Нимаев и др. // Тезисы докл. четвертой международной ассоциации морфологов. Уфа, 2002. - С. - 95.

91. Максимов, С.Л. Эссенциальные фосфолипиды и алкогольный стеатоз печени / С.Л. Максимов, А.В. Змызгова, И.М. Рослый // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. — №5.-С. 89-91.

92. Максютина, Н.П. Изучение иммуностимулирующей активности фла-воноидов / Н.П. Максютина, А.П. Дуплищева, Г.Н. Синилова // Фармацевтический журнал. 1987. - № 5. - С. 67-69.

93. Мальцев, Г.Ю. Адаптация обновления белков печени крыс к пищевому белку / Г.Ю. Мальцев // Вопросы медицинской химии. 1995. - Т. 41.-Вып. 2.-С. 29-32.

94. Манухин, И.Б. Норма беременности / И.Б. Манухин, С.А. Маркин. -М.: ММСИ, 1990.- 125 с.

95. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. М.: Медицина, 1997. -189 с.

96. Меерсон, Ф.З. Физиология адаптивных процессов / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшенникова. М.: Наука, 1986. - 640 с.

97. Минаев, Н.Н. Патология репродуктивной функции женщин при воздействии неблагоприятных факторов окружающей среды / Н.Н. Минаев // Прикладные информационные аспекты медицины. 1999. - Т. 2. — С. 62-66.

98. Минушкин, О.Н. Некоторые гепатопротекторы в лечении заболеваний печени / О.Н. Минушкин // Лечащий врач. 2002. Т. 140. - № 9. - С. 352-356.

99. Минушкин, О.Н. Гепатопротекторы в лечении хронический заболеваний печени различной этиологии / О.Н. Минушкин, Л.В. Масловский // Болезни органов пищеварения. 2003. - Т. 5. - № 1. - С. 8-10.

100. Мироджоев, Г.К. Синусоидальные клетки печени: природа, функциональная характеристика и коопиротивная взаимосвязь / Г.К. Миро-джов, В.Л. Павлов // Морфология. 1991. - № 2. - С. 72-78.

101. Михайлов, И.В. Вместе с природой / И.В. Михайлов // Медицинская помощь. 2002. - № 2. - С. 48-52.

102. Молодых, О.П. Структурная реорганизация печени крыс при цитоток-сическом действии доксорубицина / О.П. Молодых, Е.Л. Лушникова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2007. — Т. 141 -№ 5. С. 579-585.

103. Мулдашев, Э.Р. Регенеративная хирургия на основе трансплантационных технологий Аллоплант / Э.Р. Мулдашев, С.А. Муслимов // Морфология. 2002. - Т. 121. - Вып. 2-3. - С. 109.

104. Мэттсон, П. Регенерация настоящее и будущее / П. Мэттсон. - М.: Мир, 1992. - 176 с.

105. Неумывакин, И:П. Золотой ус: мифы и реальность / И.П. Неумывакин. СПб.: Диль, 2004. - 96 с.

106. Никитин, А.И. Гистогенетический анализ изменчивости и регенерации тканей: Материалы научного совещания посвященного 100-летию со дня рождения Н.Г. Хлопина / А.И. Никитин. СПб.: ВМА, 1997. -С. 14-15.

107. Никитин, А.И. Факторы среды и репродуктивная система человека / А.И. Никитин // Морфология. 1998. - Т. 114. - Вып. 6. - С. 7-16.

108. Николаев, А.В. Математическая модель связывания альбумин-билирубинового комплекса на поверхности угольного пирополимера /

109. A.В. Николаев, Я.А. Рожило, Т.К. Старожилова, В.В. Сарнацкая // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2005. — № 6. — С. 55-60.

110. Новиков, B.C. Физиологические аспекты апоптоза / B.C. Новиков,

111. B.Н. Цыган // Рос. Физиологический журнал им. И.М. Сеченова. — 1997. Т. 83. - № 4. - С. 13-23.

112. Новомлинский, В.В. Диагностика и лечение очаговой патологии печени. Современная технология и решения / В.В. Новомлинский. Воронеж: Медицина, 2007. — 68 с.

113. Огарков, В.Н. Золотой ус в лечении болезней века / В.Н. Огарков. -СПб.: Весь, 2004.-128 с.

114. Оковитый, С.В. Гепатопротекторный эффект бемитила у больных с хроническими алкогольными поражениями печени / С.В. Оковитый, О.В. Иванова // Наркология. 2002. - № 3. - С, 19-23.

115. Орлова, С.В. Энциклопедия биологически активных добавок к пище /

116. C.В. Орлова.-М, 1998.-Т.1.-С.З-16.

117. Павлов, В.А. Нейротрофический фактор и процессы репаративной регенерации / В.А. Павлов, С.Ю. Родионов // Вестник академии медицинских наук СССР. 1990. - № 8. - С. 60-63.

118. Павлов, Ч.С. Современные методы ранней диагностики фиброза печени / Ч.С. Павлов, В.Б. Золотаревский, Ю.О. Шульпекова, Е.А. Коган, В.Т. Ивашкин // Клиническая медицина. 2005. - №. 12. — С. 59-62.

119. Панфилов, С.А. Диагностика заболеваний печени, биллиарного тракта с курсом патологической анатомии / С.А. Панфилов, Е.В. Панфилова. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 289 с.

120. Пастушенков, Л.В. Фармакотерапия с основами фитотерапии / Л.В. Пастушенков, Е.Е. Лесиовская. СПб.: СПбХФИ, 1995. - 169 с.

121. Пашук, Л.К. Препараты ДНК как потенциальные терапевтические средства / Л.К. Пашук, Г.Н. Апрышко, Е.М. Трещалина // Хим.-фарм. журнал. 1995. - № 6. - С. 61-64.

122. Подвысоцкий, В.В. Возрождение печеночной ткани у млекопитающих животных / В.В. Подвысоцкий. Киев: Медицина, 1986. — 237 с.

123. Подымова, С.Д. Болезни печени / С.Д. Подымова. М.: Медицина, 1993.-544 с.

124. Пожарский, И.Ф. Регенерация и гипертрофия / И.Ф. Пожарский. — Одесса: Медицина, 1970. 269 с.

125. Полежаев, Л.В. Закономерность изменения регенерационной способности органов у животных / Л.В. Полежаев // Арх. анат., гистол. и эм-бриол. 1968. -№ 2. - 326 с.

126. Полежаев, Л.В. Регенерация / Л.В. Полежаев. -М.: Знание, 1977. 64 с.

127. Проскурякова, И.С. Морфофункциональные аспекты регенерации печени при экспериментальной коррекции токсического гепатита / И.С. Проскурякова // Бюл. эксперим. биологии и медицины — 1995. — Т. 120.-№6.-С. 656-659.

128. Рекомендации Комитетам по этике, проводящим экспертизу биомедицинских исследований. Женева, 2000.

129. Ржепаковский, И.В. Разработка биостимулятора эмбрионального и оценка его эффективности при иммунодефицитных состояниях у животных раннего возраста: Автореф. дисс. . канд. биол. наук / И.В. Ржепаковский. Ставрополь, 2003. — 18 с.

130. Родионов, С.Ю. Нейротрофический фактор и процессы репаративной регенерации / С.Ю. Родионов, В.А. Павлов // Вестник АМН СССР. -1990.-№ 8.-С. 60-63.

131. Руководства и рекомендации для европейских независимых комитетов по вопросам этики // Европейский форум по качественной клинической практике. — Брюссель, 1995, 1997.

132. Рябинина, З.А. Изменение печени крыс на поздних сроках регенерации // З.А. Рябинина // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1961. — №4.-С. 114-118.

133. Рябинина, З.А. Размеры одноядерных печеночных клеток и содержание гликогена в нормальной регенерирующей печени крыс / З.А. Рябинина // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1964. Т. 53. - № 2. -С. 101-108.

134. Рябинина, З.А. Определение содержания ДНК в ядрах гепатоцитов нормальной и регенерирующей печени крыс / З.А. Рябинина, В.А. Бе-нюш // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1968. - № 1. — С. 100.

135. Рябинина, З.А. Полиплоидия и гипертрофия клеток в процессах роста и восстановления / З.А. Рябинина, В.А. Бенюш. — М.: Медицина, 1973. -207 с.

136. Рябков, А.Н. Изучение антиоксидантных свойств пармидина в условиях токсического поражения печени / А.Н. Рябков, Г.Б. Артемьева, А.А. Никулин // Фармакология и токсикология. 1991. - Т. 54. - № 6. -С. 35-37.

137. Саркисов, Д.С. Регенерация и ее клиническое значение / Д.С. Сарки-сов. М.: Медицина, 1970. - 311 с.

138. Саркисов, Д.С. Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций / Д.С. Саркисов М.: Медицина, 1987. - 287 с.

139. Саркисов, Д.С. Очерки истории общей патологии / Д.С. Саркисов. -М.: Медицина, 1993. 498 с.

140. Северин, М.В. Регенерация при экспериментальных воздействиях на организм / М.В. Северин. Екатеринбург: УМИ, 1993. - 185 с.

141. Селевич, М.И. Влияние салкокоялина на метаболические показатели печени после введения этанола и его отмены / М.И. Селевич, В.В.Лелевич, А.Г. Винницкая // Патол. физиология и экспериментальная терапия.-2001.-№. З.-С. 26-28.

142. Семенова, А.Н. «Золотой ус» на подоконнике / А.Н. Семенова. - М.: Невский проспект, 2004. - 126 с.

143. Серов, В.В. Обще-патологические подходы к познанию болезни / В.В. Серов. М.: Медицина, 1999 - 282 с.

144. Сидорова, В.Ф. Регенерация печени у млекопитающих / В.Ф.Сидорова, З.А. Рябинина, Е.М. Лейкина. -М.: Медицина, 1966. -206 с.

145. Сидорова, В.Ф. Возраст и восстановительная способность органов у млекопитающих / В.Ф. Сидорова. — М.: Медицина, 1976. — 196 с.

146. Слепушкин, В.Д. Уровни регуляции регенерации / В.Д. Слепушкин, В.А. Павлов, С.Ю. Родионов // Тезисы докладов. 7 Всесоюзная секция. Иркутск, 1988. - С.28-33.

147. Слободяник, B.C. Морфология печени поросят при гепатодистрофии, ее профилактике и терапии препаратами пантотеновой кислоты и кар-нитина: Автореф. дисс. . доктора биол. наук / B.C. Слободяник. -Уфа, 2007. 34 с.

148. Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям / С.Я. Соколов, И.П. Замотаев. М.: Наука, 2000. - 464 с.

149. Соловьева, В.А. Все о «золотом усе» / В.А. Соловьева. — СПб.: Нева, 2005.-320 с.

150. Солопаев, Б.П. Прикладные аспекты морфогенеза и регенерации в онтогенезе. Регенерация, адаптация, гомеостаз / Б.П. Солопаев. Сборник научных трудов. — Горький: ГМИ, 1990. — 163 с.

151. Спиричев, В.Б. Тринадцать витаминов в жизни женщины / В.Б. Спи-ричев. М.: Медицина, 1999. - С. 7-13.

152. Струков, А.И. Общая патология человека. Руководство для врачей / А.И. Струкова, В.В. Серова, Д.С. Саркисова. -М.: Медицина, 1990. 416 с.

153. Струков, А.И. Патологическая анатомия / А.И. Струков, В.В. Серов. -М.: Медицина, 1985. 655 с.

154. Сулейманов, С.М. Методы морфологических исследований (методическое пособие) / С.М. Сулейманов, П.А. Паршин, Ю.П. Жарова. -Воронеж, 2000. 64 с.

155. Суханова, Г.А. Апоптоз. Учебное пособие / Г.А. Суханова, Е.Г. Владимирская. М.: Медицина, 2002. - 172 с.

156. Тейлор, Б.С. Индуцибельная синтаза оксида азота в печени, регуляция и функции / Б.С. Тейлор, JI.X. Аларсон // Биохимия. — 1998. Т. 63. -№7.-С. 905-923.

157. Темирбулатова, A.M. Разработка состава для БАД адаптогенного действия с экстрактом родиолы розовой / A.M. Темирбулатова. Пятигорск, 2007.-С. 28-31.

158. Тимченко, Л.Д. Перспективы использования каллизии душистой в биотехнологии / Л.Д. Тимченко, И.В. Ржепаковский, В.В. Макеева //

159. Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Материалы научной конференции «Университетская наука — региону». — Ставрополь, 2004.-С. 171-173.

160. Тимченко, Л.Д. Перспективные направления биотехнологии растительных иммуномодуляторов / Тимченко Л.Д // Мат-лы Третьего съезда Общества биотехнологов России им. Ю.А. Овчинникова (25-27 октября 2005 г.). М.: МАКС Пресс, 2005. - С.83-84.

161. Тимченко, Л.Д. Содержание альфа-фетопротеина (АФП) в эмбрионах кур на ранних стадиях эмбриогенеза / Л.Д. Тимченко, А.П. Трунова,

162. B.Н. Стрекалова, С.В. Черников // Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Мат-лы 52 научно-метод. конф. «Университетская наука — региону». Ставрополь: Изд-во СГУ, 2007. - С. 245-246.

163. Тимченко, Л.Д. Содержание альфа-фетопротеина в гомогенате куриного эмбриона в процессе развития / Л.Д. Тимченко, А.П. Трунова.,

164. C.В. Черников, Р.В. Горбовский и др. // Астраханский медицинский журнал (приложение): Мат-лы 6-й междунар. научно-практ. конф.

165. Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». 2008. - № 3. - С. 44-47.

166. Ткаченко, К.Г. «Золотой ус» или каллизия душистая панацея? За и против / К.Г. Ткаченко. - СПб.: Нева, 2004. - 96 с.

167. Торчинов, A.M. Возможные факторы риска холестеринового холеци-столитиаза у женщин репродуктивного возраста и перинатологии /

168. A.M. Торчинов, А.К. Ханукоева // Акушерство и гинекология. 2000. -№ 6.-С. 37-39.

169. Торчинов, A.M. Динамические изменения функции печени при физиологически протекающей беременности и гистозе / A.M. Торчинов,

170. B.А. Кахраманова // Вопросы гинекологии, акушерства и перинтало-гиии. 2006. - Т. 5. - № 6. - С. 49-53.

171. Тронов, В.А. Репарация ДНК и апоптоз / В.А. Тронов // Цитология. — 1999. Т. 41 - Вып. 5. - С. 405-411.

172. Турищев, С.В. Лекарственные растения при заболеваниях печени /

173. C.В. Турищев//Врач.-2003.-№ 12.-С. 58-60.

174. Турова, Н.Д. Лекарственные растения и их применение / Н.Д. Турова, Э.Н. Сапожникова. М.: Медицина, 1983. - 288 с.

175. Тюкавкина, Н.А. Природные флавоноиды как пищевые антиоксидан-ты и БАД / Н.А. Тюкавкина, И.А. Руленко, Ю.А. Колесник // Вопросы питания. 1996. - № 2. - С.33-38.

176. Филатов, В.П. Основные вопросы тканевой терапии (лечение биогенными стимуляторами) / В.П. Филатов // Хирургия. — 1949. № 7. - С. 3-11.

177. Филатов, В.П. Тканевая терапия / В.П. Филатов. — М.: Знание, 1955. — 180 с.

178. Фильченков, А.А. Апоптоз и рак / А.А. Фильченков, Р.С. Стойка. — Киев: МОРИОН, 1999. 182 с.

179. Хазанов А.И. Функциональная диагностика заболеваний печени / А.И. Хазанов. М.: Медицина, 1992. - 301 с.

180. Хасанов, P.P. Морфофункциональные изменения печени и селезенки при действии гепатотропных ядов / P.P. Хасанов, Г.Р. Валеева, Д.В. Плечева // Тезисы докл. 4 международной ассоциации морфологов. Уфа, 2002. - С. 166.

181. Цейликман, О.Б. Активация апоптоза как механизм развития инволюции вилочковой железы при повторных иммобилизациях // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2005. Т. 139. — № 1. — С. 38-39.

182. Цыпленкова, В.Г. Апоптоз / В.Г. Цыпленкова, Н.Н. Бескровнова // Архив патологию. 1996. - Т. 58. -№ 5. - С. 71-73.

183. Ченцов, Ю.С. Общая цитология/Ю.С. Ченцов.-М.: МГУ, 1995.-383 с.

184. Черешнев, В.А. Алфа-фетопротеин / В.А. Черешнев, С.Ю. Родионов, В.А. Черкасов. Екатеринбург, 2004. - 357 с.

185. Черников, В.А. Патофизиология / В.А. Черников, Б.Г. Юшков. М.: Вече, 2001.-700 с.

186. Чудных, С.М. Антиаксидантная терапия печеночной недостаточности при механической желтухе неопухолевого генеза / С.М. Чудных,

187. A.M. Шулутко, Г.Ю. Анчиков // Российский медицинский журнал. -2005. -№ 1.-С. 14-17.

188. Швембергер, И.Н. Апоптоз: Роль в нормальном онтогенезе и патологии / И.Н. Швембергер, Л.Б. Гинкул // Вопросы онкологии. 2002. -Т. 48. -№ 2. - С. 153-158.

189. Шейбак, В.М. Морфологические изменения в печени, в тимусе, селезенке и тонком кишечнике животных после введения лейцина /

190. B.М. Шейбак, Р.И. Кравчук, Я.Р. Мацкж // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. - Т. 143. - № 2. - С. 231-235.

191. Шерлок, Ш. Заболевания печени и желчных путей / Ш. Шерлок, Дж. Дули. М.: Ботар, 1999. - 568 с.

192. Шехтер, А.Б. Грануляционная ткань: Воспаление и регенерация / А.Б. Шехтер, Г.Н. Берченко, А.В. Николаев // Архив патологии. -1994. Т. 46. - Вып. 2. - С. 20-29.

193. Шехтман, М.М. Заболевание внутренних органов и беременность / М.М. Шехтман, Т.П. Бархатова. М.: Медицина, 1982. - 272 с.

194. Шульпекова, Ю.О. Эссенциальные фосфолипиды в лечении заболеваний печени / Ю.О. Шульпекова // Человек и лекарство. — Российский медицинский журнал. — 2003. № 5. — С. 300-303.

195. Шульпекова, Ю.О. Флавоноиды расторопши пятнистой в лечении заболеваний печени / Ю.О. Шульпекова // Русский медицинский журнал. 2004. - Т. 12.-№5.-С. 248-250.

196. Шутова, Н.Т. Патологическая физиология развивающегося организма / Н.Т. Шутова, Е.Д. Черникова. -М.: Медицина, 1974. 150 с.

197. Юшков, Б.Г. Влияние иммуномодуляторов на регенерацию печени / Б.Г. Юшков, И.Г. Данилова, Ю.С. Храмцова // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2006. - Т. 69. — № 1. — С. 53-55.

198. Якушина, JT.M. Определение витаминов в биологически активных добавках к пище / Л.М. Якушина, Е.Д. Бендер, Л.А. Харитончик // Вопросы питания. 1993. — № 1. - С. 43-47.

199. Ярилин, А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме / А.А. Ярилин // Пат. физиол. 1998. - Т. 57. -Вып. 6. - С. 39-44.

200. Alberti, A. Viral Hepatitis and Liver Disease / A. Alberti, F. Chemello et al.-Tokyo, 1994.-604 p.

201. Arora, A. Arch Biochemist Biopsy's / A. Arora, T.M. Byrem et al. // Morphology. -2000. -V. 373. -№ 1. P. 102-109.

202. Backmund, M. Parameter for evaluating liver regeneration after partial hepatectomy / M. Backmund, R. Meyer, M. Zielonka // Hepatology. -2001.-V. 34.-№7.-P. 188-193.

203. Bai, S. Pharmacol. Hangzhou / S. Bai, B. Asiya, L. Fa // Biochem. 1995. -№ l.-P. 88.

204. Ballantine, E.E. Regeneration in animal and related problems / E.E. Ballantine. Amsterdam, 1965 368 p.

205. Barry M.F. Activation of programmed cell death (apoptosis) by cipletin, other anticancer drugs, toxins and hypertomia / M.F. Barry // Biochem. Pharm. 1990. - V. 40. - P. 2353-2362.

206. Bjornson, C.R. Turning brain into blood: a hematopoitic fait adopted by about neural stem cells in vivo / C.R. Bjornson, R.L. Rietze // Science. — 1999.-V. 283.-P. 534-537.

207. Carrsco, M.P. Biochemist pharmacologic / M.P. Carrsco, J.L. Segovia, C. Marco // Biochem. 1998. - V. 56. - № 2. - P. 639-644.

208. Chang, J. Food supplementing / J. Chang // Biochem Pharmacol. 2000. -V. 59.-P. 211-219.

209. Chanson, M. Gap junction communication in tissue inflammation and repair / M. Chanson // Bone. 2004. - V. 34. - P. 402-411.

210. Chaudary, L.R. Differential growth factor control of bone formation though osteoprogenitor differrentior / L.R. Chaudary, K.A. Hruska // Bone. 2004. -V. 34.-P. 402-411.

211. Chronos, G.P. Concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis / G.P. Chronos, P.W. Gold // JAMA. -1992. V. 26. - № 9. - P. 1244.

212. Coffey, R.N. Signaling for the caspases: their role in prostate cell apoptosis / R.N. Coffey, R.W. Waston // J.Urol. 2001. - V. 165. - № 1. - P. 5-14.

213. Cupp, M.J. Medicine and food / M.J. Cupp, T.S. Tracy // Am. Fam. Physician. 1998. - V. 57. - № 1. - P. 107-116.

214. De Jong, K.P. Liver cell proliferation after partial hepatectomy in rats with liver metastasis / K.P. De Jong, M.A. Brouwers // Anal Quant Cytol Histol. 1998. - V. 20. - № 1. - P. 59-68.

215. Dilman, V.M. Stady of the antitumor effect of polileptide pineal extract / V.M Dilman, V.N. Anisimov, M.N. Ostroumova // Oncology. 1979. - V. 36.-№6.-P. 274-280.

216. Elias, D. Long-term oncological results of hepatectomy performed after selective portal embolization / D. Elias, A. Cavalcanty // Ann Chir. 1999. -V. 53.-№7.-P. 559-564.

217. Fbakumova, Olu. Stimulation of regenerative processes and correction of the functional activity of the liver in its partial resection and toxic lesions / Olu Fbakumova, N.G. Kutsenko // Vest Ross Akad Med Nauk. 1996. -V. 213. -№ 3. -P. 36-41.

218. Frago, L.M. Pattern of methionine adenosyltransferase is enzyme expressions during rat liver regeneration after partial hepatectomy / L.M. Frago, A. gimmenez // FEBS Left. 1998. - V. 24. - № 3. - P. 305-308.

219. Fugh-berman, A. Biological active addition / A. Fugh-berman // Br. J. Clin. Pharmacol. 2001.-V. 52.-P. 587-595.

220. Fugh-berman, A. Extracts and plant / A. Fugh-berman // Lancet. 2000. -V. 355.-P. 134-137.

221. Geerts, A. The right blend of traditional oriental medicine and liver cell biology / A. Geerts, V. Rogiers // Hepatology. 1999. - V. 29. - P. 12821284.

222. Geller, S.A. Hepatitis В and hepatitis С / S.A. Geller // Clin. Liver Dis. -2002.-№6.-P. 317-334.

223. Greco, O. Mechanisms of cytotoxciti induced by horseradish peroxidase / O. Greco, G.U. Dachs // J. Cell Biochem. 2002. - V. 87. - № 2. - P. 221-223.

224. Hashimoto, M. Treatment of cirrhotic rats with epidermal growth factor and insulin accelerates liver DNA synthesis after partial hepatectomy /

225. M. Hashimoto, Р.С. Kothary // Gastroenerol Hepatol. 1998. - V. 13. - № 12.-P. 1259-1265.

226. Hortelano, S. Nitric oxide is released in regenerating liver after partial hepatectomy / S. Hortelano // Hepatology. 1995. - V. 21. - № 3. - P. 776-786.

227. Hwang, T.L. Augmentation of liver regeneration with glucagons after partial hepatectomy in rats / T.L. Hwang, M.F. Chen, T. Chen // Form Med Ass. 1993. - V. 92. - № 8. - P. 725-728.

228. Igney, F.H. Death and anti-death: tumor resistance apoptosis / F.H. Igney // Nat. Rev. Cancer. 2002. - № 2. - P. 277-288.

229. Ishak, K.G. Cronic hepatitis morphology and nomenclature / K.G. Ishak // Mod. Pathol. 1994. -№ 7. - P. 690-713.

230. Jain, S.K. Archives of Internal medicine / S.K. Jain // Journal of the American College of nutrition. 1996. - V. 15. - P. 458-461.

231. Jiyuan, Ma. Agric food chemo / Ma Jiyuan, Li Ging // Biochem. -2000. -V. 34.-P. 5220-5225.

232. Jones, P.H. Epithelial stem cells / P.H. Jones // Bioassay. 1997. - V. 19. -№8.-P. 683-690.

233. Kaneko, A. Changes in serum human hepatocyte growth factor levels after Tran catheter arterial embolization and partial hepatectomy / A. Kaneko, N. Hayashy // Am J gastroenterol. 1992. - V. 87. - № 8. - P. 1014-1017.

234. Kerr, J.F.R. Apoptosis: its significance in cancer and cancer therapy / J.F.R. Kerr // Cancer. 1994. - V. 73. - P. 2013-2026.

235. Kinsella, J.E. Food technology / J.E. Kinsella, B. Lokesh // Nutrition. -1990.-V. 6.-P. 24-27.

236. Kiso, S. Role of heparin-binding epidermal growth factor in rat liver regeneration after partial hepatectomy / S. Kiso, S. Kavwata // Hepatology. 1995. - V. 22. - № 5. - P. 1584-1590.

237. Kitamura, Y. Endothelin in liver cell injury and regeneration after 70% hepatectomy with portal ischemia / Y. Kitamura, M. Usami // Cardiovasc Pharmacol. 1998. - V. 31. - № 1. - P. 480-481.

238. Knoudell, R.G. Formulation and application of a numerical scoring system for assessing histological activity in asymptomatic chronic active hepatitis / R.G. Knoudell, K.G. Ishak, W.C. et al. // Hepatology 1998. - № 1. - P. 431-435.

239. Kogut, K.A. Hepatic insulin extraction after major hepatectomy / K.A. Kogut, L.W. Nifong // Surgery. 1998. - V. 123. - № 4. - P. 415-420.

240. Kudryavtseva, M.V. Glycogen-forming function of hepatocytes in the rat regeneration cirrhotic liver after a partial hepatectomy / M.V. Kudryavtseva // Tissue Cell. 1998. - V. 30. - № 2. - P. 261-267.

241. Kuklinski, B. Biological active addition of synthesis and degradation during liver regeneration after partial hepatectomy / B. Kuklinski, M. Buchner // Z. Gess. Inn. Med. 1992. - V. 47. - № 6. - P. 239-245.

242. Lai, H.S. Changas of serum and urinary neopterin concentrations in rats after partial hepatectomy / H.S. Lai, W.J. Chen // Eurj Surg. 1999. - V. 165. -№ 6. - P. 604-608.

243. Lee, J. Gene therapy for therapeutic myocardial angiogenesis: a promising syntesis of two emerging technologies / J. Lee, A.M. Feldman // Nature Med.-1998.-V. 4.-№ l.-P. 739-742.

244. Logsdon, M.D. Apoptosis and the Bel 2 gene family - patterns of expression and prognostic value in stage I and II follicular center lymphoma / M.D. Logsdon, R.E. Meyn, P.C. Besa et al // Int О Radiat Oncol Biol Phys. - 1999 - V. 44. - P. 19-29.

245. Maruyama, H. Duration of liver ischemia and hepatic regeneration after hepatectomy in rats / H. Maruyama, A. Harada // J Surge Res. 1995. - V. 58. -№ 3. - P. 290-294.

246. Masson, S. Differential regenerative response and expression of growth factors following hepactomy of variable extents in rats / S. Masson, M. Devesua // Liver. 1999. - Vol. 19. - № 4. - P. 312-317.

247. Matsuda, M. Effect of RES on liver regeneration and survival after 90% partial hepatectomy / M. Matsuda, K. Rfto // Nippon. 1996. - V. 95. - № 9.-P. 662-668.

248. Mazzota, M. Nutrition and cancer / M. Mazzota // Journal of the American Podiatric medical association. 1998. - V. 84. - P. 456-462.

249. Meadows, T.N. Effect of weight-barring on healing of cjrtical defects in the canine tibia / T.N. Meadows, J.T. Bronk / Clin. Orthop. 1990 - V. 143. -P. 227-244.

250. Morris, A.J. Physiological regulation of G- protein linked signaling Rev // A.J. Morris, C.C. Malbon // Physiol. - 1999. - V. 79. - № 4. - P. 1373-1430.

251. Nagino, M. Serum alkaline phosphtase after extensive liver resection: a study in patients with biliary tract carcinoma / M. Nagino, Y. Nimura // Hepatogastroenterology. 1999. - V. 46. - № 26. - P. 766-770.

252. Nikolaev, V.G. Artif. Organs / V.G. Nikolaev, V.V. Sarnatskaya, V.L. Sigal etal.//Cell.-1991.-V. 14.-№3.-P. 179-185.

253. Ogata, T. Serum hyaluronanasa predictor of hepatic regeneration after hepatectomy in humans / T.Ogata, K. Okuda // Eur J Chin Invest. 1999. -V. 29.-№9.-P. 780-785.

254. Osigo, S. The role of polyamines in liver regeneration after hepatectomy with ischemic injury / S. Osigo // Sung Today. 1997. - V. 27. - № 9. - P. 833-839.

255. Panagiotis, A. Tsonis Regenerative biology: the emerging field of tissue repair and restoration / A. Panagiotis // Differentation. 2002. - № 70. - P. 331-334.

256. Panusz, N.T. Analysis of orthophosphate-pyrophosphate, mixtures resulting prom weak, pyrophosphates activities / N.T. Panusz, G. Graczyk // Analyt. Biochem. 2002. - V. 35. - № 2. - P. 494-504.145 1I

257. Patricolo, M. Hepatic resection in the fetal rabbit. Histological comparison of tissue regeneration in the fetus versus the about / M. Patricolo, N. Paolocci // Minerva Chir. 1996. - V. 51. - № 2. - P. 971-977.

258. Pinnock, C.B. Post grad med / C.B. Pinnock, N. Graham, M. Doulas // Am. Agric. Food. Chem. 1990. -V. 141. - P. 352-356.

259. Raper, S.E. Hepatectomy impairs hepatic progressing of somatostatin / \ S.E. Raper, H.C. Kothary // Am J Sung. 1993. - V. 165. - № 1. - P. 91-94.

260. Rouach, H. Reconstructs Cells / H. Rouach, V. Fataccoli, M. Gentil // Hepatology. 1997. - V. 25. - P. 351-355.

261. Sanjose, S. Morphologic features and the genesis of incomplete septal cirrhosis / S. Sanjose, A. Nieters, S. Geodertis et al. // Int. S. Cancer. -2005.- V. 11.-№ l.-P. 81-85.

262. Sato, Y. Acute portal hypertension reflecting shear stress as a trigger о liver regeneration following partial hepatectomy / Y. Sato, S. Koyama // Sung Today. 1997. - V. 27. - № 6. - P. 518-526.

263. Sato, Y. Role of shear stress and immune responses in liver regeneration after a partial hepatectomy / Y. Sato, K. Tsukada // Sung Today. 1999. -V. 29.-№ l.-P. 1-9.

264. Schulze-Osthoff, K. Apoptosis signaling by death receptors Europ // K. Schulze-Osthoff, D. Ferrari, M. Los et al. // Biochem. 1998. - V. 254. -№3.-P. 439-459.

265. Schwarz, U.I. Environmental Health Criteria // U.I. Schwarz, B. Bueschel, W. Kirch // Eur. J. Clin. Pharmacol. 2001. - V. 78. - P. 291-298.

266. Shamberger, R.C. Long-term hepatic regeneration and children following liver resection / R.C. Shamberger, M.M. Jonas // Am Coll Sung. 1996. -V. 83.-№4.-P. 482-485.

267. Shimada, M. Hepatic regeneration following right lobectomy: estimation of regeneration capacity / M. Shimada, T. Maeda // Sung Today. 1994. — V. 24. -№ l.-P. 44-48.

268. Tamir, S. Food supplementing / S. Tamir, M. Eizenberg, D. Sojmen // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2001. - V. 57. - P. 299-302.

269. Tanaka, H. Two-stage hepatectomy with preoperative portal vein embolizetion in rats / H. Tanaka // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 1994. -V. 95.-№2.-P. 102-108.

270. Tomiya, T. Serum transforming growth factor-alpha level can be a parameter for evaluating liver regeneration after partial hepatectomy in patients with liver cancer / T. Tomiya, S. Hayashi // Semin Oncol. 1997. -V. 24.-№6.-P. 6-17.

271. Touw, D.J. Extracts and plant / D.J. Touw // Drug. Metab. and Drug Interact. 1997. - V. 14. - № 2. - P. 66-69.

272. Usami, M. Effect of repeated portal-triad crosclaming during partial hepatectomy on hepatic regeneration in normal and cirrhotic rats / M. Usami, K. Furuchi // J Sung Res. 1994. - V. 57. - № 5. - P. 541-548.

273. Wanless, I.R. Regression of human cirrhosis. Morphology features and genesis incomplete septal cirrhosis // Arch. Pathol. Lab. 2000. - № 124. -P. 1599-1607.

274. Wasserman, H.M. Mammalian Fertilization: Molecular Aspects of Gamete. Adhesion, Exocytosis and Fusion / H.M. Wasserman // Cell. — 1999. V. 97.-№2, P. 175-183.

275. Yamamoto, H. Hepatic collagen synthesis and degradation during liver regeneration after partial hepatectomy / H. Yamamoto, H. Kawasaki // Hepatology. 1995. - V. 21. - № 1. - P. 155 -161.

276. Yu, D.S. The expression of oncoproteins in transitional cell carcinoma: its correlation with pathological behavior, cell cycle and drug resistance / D.S. Yu // Urol. Int. 2002. - V. 69. - № 1. - P. 46-50.

277. Zhang, X. Increased resistance of tumor cells to hyperthermia mediated by inegrin-linred kinase / X. Zhang // Clin. Cancer Res. 2003. - V. 9. - № 3. -P. 1150-1160.

Информация о работе

Калинская, Наталия Сергеевна
кандидата биологических наук
Ставрополь, 2009
ВАК 03.00.30

Диссертация

Особенности физиологической и репаративной регенерации печени крыс в репродуктивном периоде онтогенеза под влиянием биопрепаратов на основе каллизии душистой - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы