Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Очистка почв от нефтезагрязнений с использованием ассоциаций микроорганизмов-алканотрофов

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кхариф Мохаммед

Введение.

ГЛАВА 1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Влияние нефтезагрязнений на физико-химические и агрофизические свойства почвы.

1.2. Влияние нефтезагрязнений на микробиоценозы почв.

1.3. Микроорганизмы деструкторы углеводородов нефти.

1.4. Факторы, влияющие на деструкцию нефти в почве.

1.5. Пути биодеградации углеводородов нефти.

1.6. Рекультивация нефтезагрязненных почв.

1.6.1.Естественная биодеградация нефти в почве и факторы её обуславливающие.

1.6.2. Способы активации естественной биодеградации углеводородов нефти в почве.

1.6.3.Биотехнологические методы очистки от нефтезагрязнений.

1.7. Стратегия реку л ьтивационны х мероприятий на нефтезагрязненных почвах.

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследован».

2.1. Материалы.

2.2. Методы исследования.

ГЛАВА 3 .Результаты и обсуждение

3.1.Влияние загрязнения сырой нефтью и нефтепродуктами на микрофлору подзолистой почвы Ленинградской области.

3.2 Выделение ассоциаций микроорганизмов, эффективно разрушающих сырую нефть в почве.6В

3.3. Изучение динамики роста бактериальных культур нефтедеструкторов на жидких питательных средах.

3.4. Выбор оптимальных биоорганических добавок для ускорения нефтедеструкции.

3.5. Влияние "Бамила" на рост, развитие и нефтедеструктирующую активность микроорганизмов.

3.6. Проведение таксономического анализа эффективных культур- алканотрофов.

3.6.1. Идентификация микромицетов и бактерий, выделенных из нефтезагрязнённых почв.

3.6.1.1. Морфологические характеристики микромицета шт М12-1 рода Aspergillus.

3.6.1.2. Морфологические характеристики микромицета шт Ml 2-2 рода Pénicillium.

3.6.2. Идентификация бактерий, выделенных из нефтезагрязнённых почв.

3.6.2.1. Морфологическая характеристика бактериальных клеток.

3.6.3. Оценка нефтедеструктирующей активности исследуемых Культур.

3 .7.Фитотоксическая активность микроорганизмов-алканотрофов

3.8. Характеристика антибиотической активности микроорганизмов- алканотрофов.

3.9. Изучение нефтедеструктирующей активности микроорганизмов алканотрофов в почве в микровегетационных условиях.

3.10. Исследование влияния микроорганизмов - алканотрофов на восстановление цефтезагрязненных почв, в полевых условиях

Выводы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Очистка почв от нефтезагрязнений с использованием ассоциаций микроорганизмов-алканотрофов"

Окружающая нас природная среда продолжает подвергаться всё возрастающему антропогенному воздействию, негативные последствия которого приобрели глобальный характер.

Из трёх основных составляющих природных сред-почв ы, воды и воздуха, сложнее всего подвергаются восстановлению нарушенные загрязнённые почвы, поскольку они способны аккумулировать и закреплять токсические вещества. Естественное восстановление почв, загрязнённых нефтью, тяжёлыми металлами и другими токсичными агентами чрезвычайно медленный процесс, в котором огромную роль играют ассоциации микроорганизмов.

Нефть и нефтепродукты признаны главными загрязнителями окружающей среды. В настоящее время на долю нефти приходится более половины потребляемого топливно-энергетического сырья, и ее добыча приближается к 3 млрд. тонн в год. Потребность в нефтепродуктах увеличивается в среднем на 5,5% в год /1/.

В России выявлено около 800 тысяч гектаров нефтезагрязненных земель, официально нуждающихся в очистке. Площадей, находящихся под угрозой такого загрязнения, несравненно больше /2/. Санирование загрязненных нефтью и нефтепродуктами почв с помощью добавок удобрений, поверхностно активных и других веществ, влияющих на биохимическую активность почвенного биоценоза, мало эффективно и требует затрат. Поэтому для биоремидиации все чаще используют биотехнологические методы, основанные на применении микроорганизмов алканотрофов и их природных ассоциаций /3/.

В настоящее время создано около 30 комплексных биопрепаратов для очистки почв и вод от загрязнений нефтью и нефтепродуктами, но каждый из них эффективно работает лишь при наличии определенного комплекса внешних условий (почвенно-климатических факторов, концентрации нефти.) /4/. Особенно остро проблема очистки почв и вод от загрязнений нефтью и нефтепродуктами стоит для северных и умеренных широт, где из-за пониженных температур естественное разрушение нефти происходит очень медленно 151.

Хронические разливы нефти приводят к быстрой потере продуктивности земель или полной деградации ландшафтов. Проблема защиты и восстановления таких земель весьма актуальна, но до сих пор научно обоснованные методы ликвидации последствий загрязнения отсутствуют /6,7/.

Нефтяное загрязнение отличается от других антропогенных воздействий тем, что оно дает не постоянную, а "залповую" нагрузку на среду, вызывая быструю ответную реакцию. При оценке последствий такого загрязнения не всегда можно однозначно судить о возможности возврата экосистемы к ее устойчивому состоянию. Во всех мероприятиях, связанных с ликвидацией последствий загрязнения, с восстановлением нарушенных земель, необходимо исходить из главного принципа: не нанести экосистеме больший вред, чем тот, который уже нанесен при загрязнении /6/. Суть восстановления загрязненных экосистем-максимальная мобилизация внутренних ресурсов экосистемы на восстановление своих первоначальных функций. Самовосстановление и рекультивация представляют собой неразрывный биогеохимический процесс /8/.

Рекультивация нефтезагрязненных земель-это ускорение процесса самоочищения, при котором используются все природные резервы экосистемы: климатические, ландшафтно-геохимические и микробиологические /6/.

Значительную роль в процессе самоочищения почв от нефти и нефтепродуктов играют микроорганизмы. Поэтому методы рекультивации загрязненных почв в большинстве основаны на использовании чистых или смешанных культур микроорганизмов-нефтедеструкторов, в сочетании с различными веществами, стимулирующими их активность (внесение минеральных удобрений, навоза и др.).

Необходима разработка новых подходов к рекультивации загрязненных почв, основанных на активизации микробоценозов, с учетом специфики почвенно климатических условий.

Для интенсификации процесса минерализации нефти и нефтепродуктов в почве необходимо учитывать степень деградации нефти и изменение свойств собственно почвы, загрязненной нефтью.

Итак, план рекультивационных работ требует значительного сбора информации о нефтяном загрязнении (доза - время - природные условия -экономические возможности) и сопровождается контролем за эффективностью каждого воздействия \9\.

Цель и задачи исследования.

Настоящее исследование посвящено выделению и изучению ассоциаций микроорганизмов - алканотрофов и разработке способов их использования для деструкции нефтезагрязнений в подзолистых почвах Северо - Западного региона России.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

-Выделить и идентифицировать микроорганизмы почвы, обладающие наибольшей нефтедеструктирующей активностью.

-Изучить влияние биогенных и минеральных добавок, активирующих процессы очищения почвы от нефтезагрязнений.

-Провести испытания по очистке подзолистой почвы от нефтезагрязнений ассоциациями -нефтедеструкторами в модельных полевых опытах.

-Разработать способ хранения микроорганизмов - нефтедеструкторов, позволяющий сохранять их высокую активность.

Научная новизна работы.

Впервые изолированы эффективные ассоциации микроорганизмов-нефтедеструкторов, представленные ассоциациами микромицетов М-12: Aspergillus fumigatus Fresenius, и Pénicillium notatum Westling; и бактериальной ассоциацией В-15: Bacillus sp. штамм 15-1 и грамотрицательные кокки штамм 15-2;

Исследованы пути биодеструкции углеводородов нефти ассоциациями микроорганизмов - алканотрофов.

Научно обоснованны рекомендации по использованию ассоциаций микроорганизмов алканотрофов М-12: Aspergillus fumigatus Fres. и Pénicillium notatum West, для биодеградации нефти в почве.

Найдена новая биоорганическая добавка: Бамил, активирующая процессы нефтедеструкции микроорганизмов-ажанотрофов в почве.

Разработан метод хранения микроорганизмов-алканотрофов на стерильной почве с нефтью, позволяющий сохранять на 100% нефтедеструктирующую активность микроорганизмов в течение 1 года.

Практическая значимость.

Результаты проведенных исследований являются основой для разработки технологии получения биопрепаратов нефтедеструкторов для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов на основе эффективных ассоциаций микроорганизмов М-12: (Aspergillus fumigatus Fres. и Pénicillium notatum West), бактериальной ассоциации В-15: (Bacillus sp. штамм 15-1 и грамотрицательных кокки штамм 15-2), и биоорганического удобрения Бамил в качестве биогенной добавки и носителя.

Проведены натурные испытания опытных партий биопрепаратов для очистки нефтезагрязненных дерново-подзолистых почв на территории агрофизического института. Натурные испытания по очистке подзолистой почвы от нефтезагрязнений показали высокую эффективность предложенного метода (деструкция нефтяных углеводородов в нефтезагрязненных почвах достигает 96% в течение 50 дней).

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были представлены на научной конференции " Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств", Санкт-Петербург, 1996г.; на Ш Междунородного конгресса, "Окружающая среда для нас и будущих поколений: экология, бизнес и экологическое образование. "Самара-Астрахань", 1998г; на Заочной научно-практической конференции "Биотехнология в ФЦП "Интеграция Санкт-Петербург, 1999г; на Международное совещание "Микробная экотехнология в переработке органических и селькохозяйственных отходов", Санкт-Петербург, Пушкин, 2000.

Публикации, По материалам диссертации опубликовано 6 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения результатов исследования, выводов, приложений и списка литературы, содержащего 167 литературных источников. Диссертация изложена на 162 страниц машинописного текста, содержит 30 таблиц и 48 рисунков.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Кхариф Мохаммед

Выводы

1. Выделены и идентифицированы микроорганизмы-алканотрофы из техногенной почвы Северо-Заподного региона, представляющие собой ассоциацию микромицетов М-12: Aspergillus fumigatus Fresenius, и Penicillium notatum Westling, ассоциацию бактерий В-15: Bacillus sp. штамм 15-1 и грамотрицательные кокки штамм 15-2.

2. Степень деструкции углеводородов нефти выделенными ассоциациями составляет 75-90%, причем биодеградация нефтяных углеводородов ассоциациями М12 и В15 на 18-30% выше, чем входящими в них монокультурами.

3. Установлено, что продолжительность загрязнения почвы нефтью и нефтепродуктами влияет на количество и разнообразие микроорганизмов-нефтедестру кторов: максимальное накопление микроорганизмов-нефтедеструкторов (8*106 клеток бактерий / г почвы и 6*105 микромицетов/ г почвы) обнаружено в техногенной почве, подвергавшейся загрязнению дизельным топливом в течение 35 лет.

4. В качестве адаптагенной добавки к ассоциации микроорганизмов выбран Бамил органоминеральное удобрение, присутствие которого в почве повышает нефтедеструктирующую активность микроорганизмов-алканотрофов на 10-15%.

5. Результаты модельного полевого опыта с применением выделеных микроорганизмов-алканогрофов совместно с органоминеральным удобрением Бамил, показали что деструкция нефтяных углеводородов достигает 96% в течение 50 суток, причем происходит частичное восстановление агрохимических свойств почвы; что дает основание рекомендовать этот способ для биоремедиации нефтезагрязненных почв. б.Разработан способ хранения культур микроорганизмов-нефтедеструкторов на стерильной почве с добавкой органоминерального удобрения Бамил и 1% нефти, позволяющий сохранять эффективность культур в течение года.

148

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Кхариф Мохаммед, Санкт-Петербург

1.Абдуев М.Р., Аскеров А.О. Рекультивация нефтезагрязненных земель в Азербайджане//УВестник сельскохоз. Науки . Баку. 1979.-Ш,- С. 57-61.

2. Некоторые новые методы количественного учета почвенных микроорганизмов и изучения их свойств: Метод, указания/ Сост. Ю.М.Возняковская; ВНИИСХМ.- Л., 1987.- 53 с.

3. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Под ред. Егорова Н.С.- М.: Изд-во МГУ, 1983.- 220 с.

4. Вельков Д.В. Биодеградация нефти в условиях Северо-Западного региона России//Биотехнология.- 1995.- №3.- С. 18-22.

5. Рубанова Т.А., Полякова И.Н., Герасимова Т.В. Биодеградация нефти психрофильными микроорганизмами// Тез.докл. 5-ой конференции РФ «Новые направления биотехнологии», Пущино 18-22 мая 1992 г.- Пущино, 1992.- С. 146.

6. Исмаилов Н.М., Пиковский Ю.И. Современное состояние методов рекультивации нефтезагрязненных земель//Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.- С. 222-230.

7. Pita F.Spilled Petroleum in the Subsoil Problems, Remediation and Costs//Bull.Amer.Railwaylihg Assoc., 1987.- V. 88.- № 711.- P. 134-158.

8. Киреева H.A. Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах // 03.00.23: биотехнология. Диссетация на соискание ученой степени доктора биологических наук.- Уфа.-1996.- С. 3-36.

9. Oil degradation and micribiological change in soils deliberately contaminated with peroleum // Instr. Petrol. Techn. pap., 1977.- №5.- P. 1-11.

10. Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы. М. изд-во МГУ.-1987.- 256 с.

11. Грузе А. Вильям, Стивене Р. Дональд. Технология переработки нефти (Теоретичские основы).- Л: Химия, 1964.- 680 с.

12. Oil degradation and micribiological change in soils deliberately contaminated with peroleum // Instr. Petrol. Techn. pap., 1977.- №5,- P. 1-11.

13. Исмаилов H.M. Разложение ароматических углеводородов дрожжами Candida и Topulopsis / Автореферат Дисс. докт. биол. наук.- М.: ИНМИ, 1986.-50с.

14. Киреева Н.А. Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах // 03.00.23: биотехнология. Диссетация на соискание ученой степени доктора биологических наук.- Уфа.-1996.- С. 3-36.

15. Mihelicic J.R., Luthy R.G. Degradation of policiclic aromatic hydrocarbon compounds under varios redox consistions in Soil-Water systems // Appl. and Environ. Microbiol.- 1988.-V. 54,- №5.- P. 1182-1187.

16. Распространение углеводородокисляющих / М.Я. Андрусенко, Т.Д. Бильмас, Т.Д. Джамалов // Микробиология.- 1969.- Т. 32.- №5.- С. 873-877.

17. Song H.G., Bartha R. Effects of jet fuel spills on the microbiol community of Soil // Appl. and Environ. Microbiol., 1990,- V. 56,- №3,- P. 646-651.

18. Leahy J.G.,Cornell R.R. Microbial degradation of hydrocarbons in the environment//Microbial.Rev.-1990.-Vol.54.-N 3.-P.305-315.

19. Song H.,Bartha R. Effect ofjet fuel spills on the microbial comvynity of soil.//Appi.Environ.Microbiol.-1990.-Vol.56.-N3.-P.646-651.

20. Song H.G.,Pedersen T.A.,Bartha R. Hydrocarbon mineralization in soi!:relative bacterial and fungal contribution.//Soil.Biol.Biochem.- 1986.-Vol. 18.-P. 109-111.

21. Degradation of,bacteria and fungi isolated from soil contaminated by fuel/J.Oudot,P.Fusey,D.E.Abdelouahid et.al.//Can.J.Microbiol.-1987.-Vol.33.-N 3.-P.232-243.

22. Petroleum-degrading achlorophyllous alga Prototheca zopfi/ J.D.Walker, R.R.Colwell, Z.Vaituzis, S,A.Meyer//Nature.-1975.- Vol.254.-P.423-424.

23. Isolation and characterization of thermophilic, alkaliphilic. cellulose-degrading Bacillus thermoalcaliphilus sp. nov. From termite(Odontotermes obesus) mound soil of a semiarid area/ Sarkar Adit //Geomicrobiol. J. -1991. 9, N 4.- P.- 225-232.

24. Soli J. Benz E.M. Selective substrate utilization by marine Hydrocarlonodactic bacteria. Biotechnol. andBioeng. 1973, 15 N2. P. 285.

25. Solans A.M., Pares R. Degradetion of aromatic petroleum hydrocarbons by pure microbial cultures // Chemoshera, -1984. -V. 13. N 5. -P. 593-601.

26. Spain J.C.,Pritchard P.H.,Bourquin A.W. Effect of adaptation on bidegradation rates in sediment/water cores from estuarine and fresh water nvironment.//Appi.Environ.Microbiol.-1980.-Vol.40.-P.726-73A

27. Atlas R.M. Microbial degradation of petroleum hydrocarbons:an environmental perspective.//Microbiol.Rev.-1981.-Vol.45.-N 2.-P. 180-209.

28. Resnick S.M.,Brawn E.F. Mineralization of n-hexadecane:a measure of hydrocarbon-degrading ability of bacteria from oiled beaches in Prince William Sound. //Abstr Gen. Meet. Am. Soc. Microbiol.-1991.- 91 Meet.-P.310.

29. Atlas R.M. Microbial hydrocarbon degradation -bioremediation of oil spills.//J.Chem.Tech.Biotechnol.-1991 .-Vol.52.-P. 149-156.

30. Walker J.D.,Corwell R.R. Microbial degradation of model petroleum at low temperatures.//Microb.Ecol.-1974.-Vol.l.-P.63-95.

31. Bauer J.E./Capone D.G. Effects of co-occurring aromatic hydrocarbons on degradation of individual polycicl-aromatic hydrocarbons in marine sediment slurries. //Appl. Environ.Microbiol. -1988. Vol. 54. -P. 1649-165°

32. Sherrill T.W.,Sayler G.S. Phenanthere biodegradatic in freshwater enviroruttents.//Appi.Environ.Microbiol. -1980, -Vol. 3 9. -N1. -P. 172-178

33. Shiaris M.B. Seasonal biotransformation of naphtalene, phenantrene and benzoa.pyrene in surficial estuarine sediments.//Appi.Environ. Microbiol.-1989.-Vol.55 P. 1391-1399.

34. Jobson A.,Cook F.D.,Westlake D.W.S. Microbial utilization of crude oil.//Appi.Microbiol.-1972.-Vol.23.-P. 1082-1089.

35. Perry J.J. Microbial cooxidations involving hydrocarbons.//Microbiol.Rev.-1979.-Vol.43.-N 1.-P.59-72.

36. Petroleum-degrading achlorophyllous alga Prototheca zopfi/ J.D.Walker, R.R.Colwell, Z.Vaituzis, S.A.Meyer//Nature.-1975.- Vol.254.-P.423-424.

37. Cooney J.J.,Silver S.A.,Beck E.A. Factors influencinc hydrocarbon degradation in three freshwater lakes.//Microb.Ecol.-1985.-Vol. 1 l.-P. 127-137.

38. Fedorak P.M.,Westlake D.W.S. Microbial degradation o. aromatics and saturates in Prudhoe Bay crude oil asdetermined by glass capillary gas chromatography.//Can.J.Microbiol.-198l.-Vol.27.-P.432-443.

39. Heitkamp M.A.,Freeman J. P.,Cerniglia C.E. Naphtalene biodégradation in environmental microcosms.//Appl. Environ.Microbiol.-1987.-Vol.53.-N l.-P. 129-136.

40. Microbial degradation of crude oil in sea water in continuous culture/J.C.Bertrand,E.Rambeloarisoa, J.F.Rontani et. al.//Biotectnol.Lett.-l983.-Vol.5 .-N 8.-P.567-572.

41. The recognition of biodegraded petroleum-derived aromatic hydrocarbons in recent marine sediments/ D. M, Jones A. G. Douglas,R. J.Parkes et.al.//Mar.Pollut.Bull.-1983.-Vol. 14.-P. 103-108.

42. Cerniglia C.E. Biodégradation of organic contaminants: overview and examples with polycyclic aromatichydrbcarbons.//Abstr.Pap.Am.Chem.Soc.-1990.-199 Meet.-Pt.l.-ENVR 136.

43. Perry J.J. Microbial cooxidations involving hydrocarbons.//Microbiol.Rev.-1979.-Vol.43.-N 1.-P.59-72.

44. Cerniglia C.E. Biodégradation of polycyclic aromatic hydrocarbons.//Biodegrad.-1992.-Vol.3.-N2-3.-P.351-368.

45. Evidence for-cooxidation of polynuclear aromatic hydrocarbons in soil/J.Keck,R.S.Sims,M.Coover et.al.//Water Res.-1989.-Vol. 23.-P. 1467-1476.

46. Коронелли T.B.,Комарова Т.И.,Игнатченко A.B. Роль эмульгирования в процессе поглощения углеводородов клетками Pseudomonas aerudenosa.// Микробиолог. -1983. -Т.52. 1. -С.94-97.

47. Petroleum bioremediation-multiphas problem/E.Rosenberg,RXegmann, A.Kushmara et.al.//Biodegradation.-I992.-VoL3.-№ 2-3.-P.337-350.

48. Baker C.,Kulpa C. Biosurfactant production by manufactured gas plant soil microflora and its potential forenhancement of naphtalenemetabolism.//Abstr. GenMeet. Am. Soc.Microbiol. -1991.Meet.P.216.

49. Falatko D.M.,Novak J.T.Effects of biologically produced surfactants on the mobility and biodtgradation of petrolium hydrocarbons.//Water Environ.Res.-1992.-Vol.64.-N2.-P. 163-169.

50. Atlas R.M.,Bartha R. Biodégradation of petroleum in sea water at low temperamres.//Can.J.Microbiol.-1972.-Vol.l8.-N10.-P.1851-1855

51. Batylinski D.A.,Wirsen C.O.,Jannasch H.W. Microbial utilization of naturally occurring hydrocarbons at the Guaymas basin hydrothermal vent. site.//Appi.Environ.Microbiol.-1989.-Vol.55.-P.2832-2836.1. Vol.l.-P.63-95.

52. Perry J.J. Isolation and characterization of the thermophilic hydro carbon-utilizing bacteria.//Adv. Aquat.Microbiol. -1985. -Vol. 37- P. 109-139.

53. Colwell R. R. Walker J.D. Ecological aspects of microbial degradation of petroleum in the marine environment.//Crit.Rev.Microbiol.-1977.-Vol.5.-P.423-445.

54. Jamison V.M., Raymond R.L., Hudson J. Biodégradation ofhidh-octane gasoline in groundwater.//Dev.Ind.Microbiol.-1975.-Vol. 16. P.305-312.

55. Мосичев M.C. Складнев А. А. Дотов В.Б. Обшая технология микробиолоических производств.-MЛегкая и пит промышл., 1982.-264 с.

56. Aelion C.M.,Widdowson М.А. Numerical modeling and fild application to the in situ bioremediation of subsurface contamination at a JP-4 jet fuel spill.//Abstr.Gen.Meet. Am.Soc.Microbiol.-1991.-91 Meet.-P.312.

57. Jamison V.M., Raymond R.L., Hudson J. Biodégradation of hidh-octane gasoline in groundwater.//Dev.Ind.Microbiol.-1975.-Vol.l6. P.305-312.

58. Atlas R.M.,Bartha R. Stimylated biodégradation of oil slicks using oleophilic feitiliztrs.//Environ.Sci.Technol. -1973.-N7. -P.538-541,

59. Effect of amendments on the microbial utilization of oil applied to soil/A.Jobson, M.Mclaughlin, F.D.Cook, D.W.S. Westlake//Appl.Microbiol.-1974.-Vol.27.-N 1.-P.166-171

60. Manilal V.B.,Alexander M. Factors affecting the microbial degradation of phenantrene in soil. //Appl. M-icrobiol. Biotechnol.-1991.-Vol.35.-N" 3.-P.401-405.

61. Hinchee R. Arthur M. Bench scale stadies of the soil aeration process for bioremediation of petroleum hydrocarbons.//Appl.Biochem.Biotechol.-1991 .-Vol.28-29.-P.901-906.

62. Шлыгин И.А. Нефтяные углеводороды в морских донных отложениях: химические и биологические процессы./Обзор.Сер.87.Мониторинг состояния окружающей природной среды.-Обнинск: ВНИИГМУ-МУД.-1986.- 47с.

63. Cemiglia С.Е.,Gibson D.T.,van Baalen С. Oxidation of naphtalene bycyanobacteria and microalgae.//J.Gen.Microbiol.-1980.-Vol. 116.-P.495-500.

64. Dart R.K.,Stretton R.J. Microbiological aspects of pollution control.-Amsterdam-Oxford-New York:Elsevier scientific publishing company, 1980.-257 p.

65. Пальгунов П.П.,Сумароков М.В. Утилизация промышленных отходов.-М.: Стройиздат, 1990.-352с.

66. Химия нефти и газа :учеб. Пособие для вузов /А. И. Богомолов, А.А. Гайле и др. / Под ред . В. А. Проскурякова, А. Е. Драбкина-2-e изд., перераб.-л.:Химия ,-1989. -424 с.

67. A1-Bashir B.,Cseh T.,Leoluc R.,Samson R. Effect of soil/contaminant interaction on the biodégradation of naphtalene in flooded soil under denitrifying condition. //Appi.Microbiol.Biotechnol.-1990.-Vol.34.-N3.-P.414-419.

68. Cemiglia C.E. Biodégradation of polycyclic aromatic hydrocarbons.//Biodegrad.-1992.-Vol.3.-N2-3.-P.351-368.

69. Aust S.D. Degradation of environmental pollutants by Phanerochaete chrysosporium.//Microb.Ecol.-1990.-Vol.20. -P. 197-209.

70. Biological treatment of hazardous wastes by Phanerochaete chrysosporium,/J.A.BumpusA T.Fernando,MJurek et.al.//Biotechnol.Appi.Hazardous Waste Treatment.-1989.-P.167-182.

71. Cerniglia C.E.,White G.L-.Heflich R.L. Fungal metabolism and detoxification of polycyclic aromatic hydrocarbons.//Arch.Microbiol.-1985.-Vol.143.-P. 105-110.

72. Bauer J.E./Capone D.G. Effects of co-occurring aromatic hydrocarbons on degradation of individual polycicl-aromatic hydrocarbons in marine sediment slurries.//Appl.Environ.Microbiol.-1988.-Vol.54.-P. 164-165.

73. Young L.Y.,Haggblom M.M. The anaerobic microbiology and biodégradation of aromatic compounds.//Advan. Appl.Biotechnol.-Ser.Biotechnol.Biodegradation. -1990.-P. 3-19.

74. Stanier R. Y., Ornston L. N., Adv. Microbial physiol.-1973.-P. 9,89.

75. Масливец Т.П. Опыт математического описания трансформации ароматических углеводородов в почвах, загрязненных нефтью // Бактериальный фильтр Земли. Тез. докл. семинара, 30-31 мая 1985, Пермь.-1985.-С. 35-37.

76. Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы. М. изд-во МГУ.-1987.- 256 с.

77. Артемьева Т.И. Комплексы почвенных территорий. М.: Наука.- 1985.-111с.

78. Lehtomaki M., Niemela S. Improving microbial degradation of oil in soil // AMBIO.-1971.-V.4.-№3.-P. 126-129.

79. Atlas R.M. Microbial degradation of hydrocarbons on land and sea I I Rapp. Ingenjorsvetchs Kapskad.- 1983.-№278.-P. 11-28.

80. Пиковский Ю.И., Солнцева Н.П. Геохимическая трансформация,дерново-подзолистых почв под влиянием потоков нефти/Лехногенные потоки вещевства в ландшафтах и состояние экосистем. М.: Наука, 1981.- С. 149-154.

81. Исмаилов Н.М., Пиковекий Ю.И. Современное состояние методов рекультивации нефтезагрязненных земель//Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.- С. 222-230.

82. Foght J.M.,Westlake D.W.S. Biomediation of oil spills//Spill Technol. Newstlett, 1992.-V. 17.-№3.-P. 1-10.

83. Гилязов М.Ю. Изменение некоторых агрохимических свойств выщелоченного чернозема при загрязнении его нефтыо/УАгрохимия, 1980.-Ж2.-С. 72-75.

84. Мукатанов А.Х., Ривкин П.Р. Влияние нефти на свойства почв //Нефтяное хозяйство, 1980. -№4.-С. 43-54.

85. Байрамов 3.P., Оруджалиев Ф.С., Мегреба P.А. Рекультивация нефтезагрязненных земель/УЗемледелие, 1990.- № 2.- С. 35-36.

86. Holtweische В., Goede H.J., Hansen £)., Hankel K.G. Verbesserte Nahrstoffgemische fur die Bioremediation verschmutzer Boden und Gewasser// Pat.N413 17 14 Germany. 24.09.91. № 4131714. Publ. 19.05.93 МКИ C12 №l/26C12Nl/20.

87. Venkateswaran К., Iwabuchi Т., Matsui Y., Toki H., Hamada E., TanakaBvalution of varions media with reference to the growth and biodegradationaitial of oil degradation micro-organisms//Biomed Lett., 1993.- V. 48 №189,- P. 43-50.

88. Hildebrandt W.W., Wilson SB. On-site bioremediation systems reduce crude oil contamination/Я. Petrol TechnoL, 1991,- V. 43,- № 1,- P. 18-22.

89. Jorgenson T.M. Bioremediation and tundre resterdion after an oil spill in the Kuparuk oilfied, Alaska, 1990//14th Acrt. and Mar. Oilspill. Program. Techn.Semin.Proc.-Vancouver. 1991.-P. 149-154,

90. Губайдуллина T.C. Дыхательный газообмен почвы, загрязненной нефтью//Казан. ин-т биологии Казан, фил. АН СССР, рук. деп. в ВИНИТИ1511.83,№6074-83Деп.-1бс.

91. Усачева Г.М., Фильченкова В.И., Петрова Л.М. и др. Эффективность некоторых приемов рекультивации почв после нефтяных загрязнений//Ин-т орг. и физ. химии Казан, филиала АН СССР, Казань, рук. деп. в ВИНИТИ1904.84, №247б-84Деп.-18 с.

92. Гайнутдинов М.З., Самосова С.М., Артемьева Т.Н. и др. Рекультивация нефтезагрязненных земель лесостепной зоны Татарии//Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.- С. 177-197.

93. Loynachan Т.Е. Low-Temperature Mineralization of crude oil in soil//J. Environ. Qual., 1978.-V. 7.-№4.-P. 494-500.

94. Базенкова Е.И., Колесникова H.M. Альтернативные пути использования традиционных методов в рекультивации техногенных почвенных экосистем //Гажа Нечерноземн. зоны СССР. Пермь, 1989.- С. 107-114.

95. Казакова Е.Н., Оборин А.А. Поиски методов стимуляции биодеградации нефти в почве/Юсвоение Севера и проблема рекультивации. СыктывкарД994.С.214-217.

96. Piwowarczyk J., Demezak М. Usuwanie zanieczyszczen ropopochodnych z gleby metoda s orpcji na wedu//Nafta-Gaz, 1992.- V. 42.- № 11-12,- P. 299-304.

97. Madras G., Erkey C., Akgerman A. Supercritical extraction of organic contaminats from soil combined with adsorption onto activated carbon//Environ.Progr.,1994.- V. 13.-№ l.-P. 45-50.

98. Ю2.Суржко Л.Ф., Финкелыотейн З.И., Баскунов Б.П., Янкевич М.И., Яковлев В.И., Головлева JI.A. Утилизация нефти в почве и воде микробными клетками/УМикробиология, 1995.- Т. 64.- № з,- С. 393-398,

99. ЮЗ.Финкельштейн З.И., Баскунов Б.П., Алиева Р.М., Головлев Е.Л., Го-влева Л.А. Микробная деградация нефти и нгефтепродуктов//Биотехнол. защиты окруж. среды. Пушино, 1994.- С. 5-6.

100. Atlas R.M. Microbial degradation of organic compounds within coplexeffluents/ZEnviron. Hazard Asses. Effluents. N.-Y., 1986.- P. 163-171.

101. Sveum P., Faksness L.-G. Enhaneed biological degradation of crude oil in a Spitsbergen tundra site//Proc. 16th Arct. and Mar. Oilspill Programm Techn. Semin.,Calgary, June 7-9,1993. V. 1.- Ottawa. 1993,- P. 377-391.

102. Abbott F.S. Guidelines on the use and acceptability of oil spill dispersats secondedition//Slipp Technol. News lett, 1984, v. 9, №1, p. 6-10.

103. Chapman D. Oil concentrations in seawater followig dispersion with and without the use of chemical dispersants: a review of published data//Spec. Rept., 1985.-N2.-P. 1-23.

104. Sprenger C., Harborth P., Hanert H. Untersuchungen zur Erhoung derBioverfugbarkeit von adsorbierten RAK in Boden von Ehemaligen Gaswerks-Gelandeny/Bioengineering, 1994.-V. 10.- №4.- P. 16-22.

105. Bertrand J.C., Rambeloarisoa E., Rontani J.F. Microbial degradation of crude oil in sea water in continuous culture//Biotechnol. Lett., 1983.- V. 5.- №8.-P.567-572.

106. Guillot G. Pollution marine: des bacteries contre les hydrocarbures//Sci. et techn.,1983.- №94,- P. 35-36.

107. ПЗ.Опгимальная среда для углеводородокисляющих бактерий Acinetobacter/Г.Н. Морщакова, М.Б. Биттеева, Л.И. Капотина, Б.Г. Мурзаков// Биотехнология.-! 991 .-№ 6.-С.67-69.

108. Использование микроорганизмов при ликвидации нефтяные загрязнений почв /И.А. Борзенков, P.p. Ибатулин/ Е.И. Милехина и Др.//Интродукция микроорганизмов в окружающую среду: Тез. Докл., Москва, 17-19 мая1994. -С. 14-15.

109. Восстановление нефтезагрязненных почвенных' экосистем //Под ред, М.Й.Глазовской. М.: Наука, 1988. - 254 с.

110. Исмаилов Н.М.Биодеградация нефтяных углеводородов в почве, иннокуллированной дродяами // Микробиология. 1985. -54, N 5. -С. 835 -841.

111. Пиковский Ю.И. //Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.:Наука, 1988. - С.7.

112. Патент N 2019527 (51 )С 02F 3/34.Е 02 В15/04 Новый способ очистки почв от нефтяных загрязнений// Изобретения, -1994, С.51.

113. Davies J.M., Addy J.M. Blackman R.A .Blanchard J.R., Ferbrache Moore D.C. at all EnviroBninental effects of the use of oil-based drilling Buds in the North sea. Marine pollution bulletin, 15 october 1984. p. 363 -370.

114. Кисин Д.В. Колосов и.И. Препараты серии Биодеструктор"-эффективные средства для ликвидации нефтяных загрязнений //Нефтяное хоз-во. 1995.-N5-6. с. 83-85.

115. Патент РПС РФ N 93/00045 Новый биопрепарат "Девороил" для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов// Изобретения,-1991. С. 45.

116. Санитарно-токсил огический паспорт на бактериальный биопрепарат "Динал-В" Башкирский Институт экологии человека, Уфа.-1995.

117. Патент РФ N1805097 МКИ5 C02F3/34 Е 02815/04. Штамм бактерий Rhodococcus erythropolis, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов / Г.Г.Ягафарова. И.Н. Скворцова. А.П. Зиновьев. И.Р. Ягафаров (СССР)//Изобретения, -1993. С.52.

118. Техническое условие 64-92-12-95 "Родотрин"(опытная партия)

119. Карасевич Й.Н. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические и органические соединения. М: Наука. 1982. -189 с.

120. Schussler Н. Scanierimg kontaminieten boden durch mikroorganismen defudenes gressen // Emsorga, 1986.- V.5.- №4.- P. 10-13.

121. Buday F., Gergely Z., Oscenyli A. Microbiological degradation of oil puilution in soil// Soil and Conserv. Boishere. Budapest-1984.- V.l.-P. 307-315.

122. Staff C.P. Mutant bacteria decotaminates spilled crude oil site // Chem. process.- 1982.- V. 45.- №14.- P. 96.

123. Lehtomaki M., Niemela S. Improving microbial degradation of oil in soil // AMBIO.-1971.-V.4.-№3.-P. 126-129.

124. Cook J. Refininy from the microbes point ojview // Petrol. Rev.- 1982.-V.36.- №423.- P. 15-17.

125. Головлева JI.П. Микробные методы деконтоминации почв и грунтовых вод // Биотехнология, 1992.- №5.- С. 60-64.

126. Ильин Н.П. Наблюдения за самоочищением почв от нефти в средней и южной тайге // Добыча полезных ископаемых и геохимия природных экосистем. М.: Наука, 1982.- С. 245-258.

127. Солнцева Н.П. Проблемы загрязненных почв нефтью и нефтепродуктами: геохимия, экология, рекультивация // VII делегатск. съезд ВОП, Ташкент.- 1985,- ч.б.- С. 246-254.

128. Исмаилов Н.М. Разложение ароматических углеводородов дрожжами Candida и Topulopsis / Автореферат Дисс. докт. биол. наук.- М.: ИНМИ, 1986.-50с.

129. Санитарные нормы предельно допустимого содержания вредных веществ в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования (Сан.-ПИН 42-121-4130-86) -М.: изд-во Минздрава СССР, 1986.- 16с.

130. Звягинцева Д.Г. Микроорганизмы и охрана почв. М.: изд-во МГУ, 1989,- С. 148-206.

131. Гусев М.В., Коронелли Т.В. Микробиологическое разрушение нефтяного загрязнения // 436 АН СССР сер. биол., 1981.- №6,- С. 835-844.

132. Рекомендации по использованию биоудобрения "Бамил" и биокомпостов для повышения урожая сельскохозяйственных культур. СПб, 1995.- С. 3-8.

133. Руководство к практическим занятиям по микробиологии: Практ. пособие//Под ред. Н. С. Егорова. —2-е изд. —М: Изд-во Моск. ун-та, 1983, -215с.

134. Сеги И. Методы почвенной микробиологии.- М.: колос, 1983.- 293 с.

135. Унифицированные методы исследования качества вод. Ч. 1. Методы химического анализа вод. М.: 3-е изд-во СЭВ, 1977.- 830 с.

136. Vo-Dinh Т. Multicomponent analysis by synchronous luminescence spectrometry // Anal. Chem.- 1978,- V.50.- P. 396-401.

137. Гюнтер. X. Введение в курс спектроскопии ЯМР// Москва.-1984.-С.6366.

138. Кхариф М., Шошина O.A., Зольникова Н.В. Яковлев В.И. Характеристика и типирование микромицетов-алканотрофов //Тез.докл. Заочной научно-практической конференции. Биотехнология в ФЦП ' 'Интеграция''. -СПб., 1999. -С 112-114.

139. Агрохимические методы исследования почв//Под ред. А.В.Соколова.~ М.: Агрохимиздат, 1975. 602 с.

140. Основные микробиологические и биохимические методы исследования почвы/Метод, рекомендации.- JL: ВНИИСХМ, 1987.- 15-17 с.

141. Keneth В. Raper and Fenell. The genus Aspergillia.- Baltimore, 1965.-P.604.

142. Билай В. И. , Коваль Э. 3. Аспергиллы. Киев: Наукова думка, 1988. -204 с.

143. Keneth В. Raper anl Charles Thorn. A manual of the Penicillia.- Baltimore, 1949.-P.692.

144. Пидопличко H.M. Пенипилии.- Киев Наукова думка, 1972.-152 с,

145. Методы выделения и идентификации почвенных микромицетов биодесгрукгоров //Под. ред.А.Ю.Лугаускас. —Вильнюс.: Изд-во Института ботаника академии наук Литовской ССР, 1982.-131с.

146. Определитель бактерий Берджи// Под ред. Дж. Хоулта. 9-е Изд-во. -М: Мир,1997.-393с

147. Бациллы. Генетика и биотехнология// Под ред. К. Харвуда.-М.: Мир, 1992 .-571 с.

148. Лабинская А. С- Микробиология с техникой микробиологических исследований.М.: Медицина, 19 78.-394 с.

149. Brenner S., Hornef W. A negative staininy method for high resolution electron micriscopy of viruses // Biochem. at biophys. acta.- 1959.- V.34.- №1.- P. 103-110.

150. Reynolds B.S. The use of lead citrate of ligh pie as an electronopaque stain in electron microscopy // J. Cell Biolog.- 1963.- V.17.- №1.- P. 208-212.

151. Spurr A.R. Alow viscosity epoxy resinenbedding medium for electron microscopy // J. Ultra Structure. Res.- 1969,- V.26.- №1,- P. 31-43.

152. Black I.T. Principles and techniques of scanniny electron micriscopy biological applications // New York: Ven, Nos. Trend Reinhold C.c.- 1974.- V.I.-Ш.-Р. 1-43.

153. Марфенина О.Е. Микробиологические аспекты охраны почв.- М.: Наука, 1991,- 117 с.

154. Olson В.Н., Thornton J.N. The resistance patterns to metals of bacterial population in contaminated land//J. Soil Sci.- V.33, N 2.-1982.- P. 271-277.

155. Летунова C.B., Ковальский B.B. Геохимическая экология микроорганизмов.- М.: Наука, 1978.- 126 с.

156. Виленский Д. Г. Почвоведение.-Учпедгиз.: 1954.-С.251

157. Заварзин Г. Микробные сообщества объект фундаментальных исследований// Биоценозы в природе и промышленных условиях.- Пущино, 1987.- 104 с.

158. Vo-Dinn Т. Multicomponent analysis by synchronous luminescence spectrometry//Anal.Chem.- 1978.- V.50, N3,- P. 146-159.

159. Immobilised microbial cells//ACS series.- 1979.- N104.- P.287.

160. Кхариф M.„Зольникова Н.В.Интенсификация активности почвенных микроорганизмов-нефтедеструкторов биоудобрением Бамил //Доклады Россельхозакадемии,№ 6.-1998г.С.22-24.