Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Очистка, физико-химические и регуляторные свойства изоформ аконитатгидратазы из гепатоцитов голодающих крыс

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Семенова, Елена Васильевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Физиологическая роль, субклеточная локализация и изоферментный состав аконитатгидратазы.

1.1.1. Физиологическая роль аконитатгидратазы в обеспечении функционирования различных физиолого-биохимических процессов в живых организмах.

1.1.2. Внутритканевая локализация и изоферментный состав аконитатгидратазы.

1.2. Очистка и каталитические свойства аконитатгидратазы.

1.2.1. Очистка аконитатгидратазы.

1.2.2. Физико-химические и каталитические свойства.

1.2.3. Регуляция и экспрессия аконитазной активности под влиянием различных факторов.

1.3. Особенности метаболизма в живых организмах при пищевой депривации.

1.3.1. Гормональная регуляция энергетического метаболизма в организме.

1.3.2. Метаболические особенности различных органов в условиях продолжительного голодания.

1.3.3. Изменение окислительных процессов в печени животных при голодании.

1.3.4. Протекание глюконеогенеза в организме млекопитающих в условиях пищевой депривации.

1.3.5. Связь глюконеогенеза с окислением жирных кислот в печени крыс при голодании.

ГЛАВА 2. Экспериментальная часть.

2.1. Цель и задачи исследования. ^

2.2. Объекты и методы исследования.

2.2.1. Объекты исследования.

2.2.2. Методы исследования.

2.2.2.1. Создание условий пищевой депривации.

2.2.2.2. Выделение изоформ аконитатгидратазы из тканей животных . ^

2.2.2.3. Методы ^чистки изоформ аконитатгидратазы. ^

2.2.2.3.1. Фракционирование животного экстракта сульфатом аммония. ^

2.2.2.3.2. Гель-фильтрация на сефадексе G-25.

2.2.2.3.3. Ионообменная хроматография через ДЭАЭ-Toyopearl.

2.2.2.3.4. Гель-фильтрация на Toyopearl HW-65.

2.2.2.4. Определение количества белка.

2.2.2.5. Определение активности ферментов.

2.2.2.6. Определение молекулярной массы и субъединичного строения изоформ аконитатгидратазы.

2.2.2.7. Электрофоретические исследования. ,,

2.2.2.7.1. Определение гомогенности очищенной аконитатгидратазы

2.2.2.7.2. Специфическое окрашивание аконитатгидратазы.

2.2.2.7.3. Изоферментный состав аконитатгидратазы. ^

2.2.2.1 А. Электрофорез в присутствии додецилсульфата натрия. ^

2.2.2.8. Исследование кинетических характеристик фермента.

2.2.3. Статистическая обработка результатов.

2.3. Полученные результаты и их обсуждение. ^

2.3.1. Внутритканевое распространение аконитагидратазы.

2.3.2. Субклеточная локализация и изоферментный состав фермента в различных органах крыс. ^

2.3.3. Динамика, субклеточная локализация и изоферментный состав аконитатгидратазы в гепатоцитах крыс. ^

2.3.3.1. Динамика активности аконитатгидратазы в гепатоцитах крыс в условиях пищевой депривации.

2.3.3.2. Субклеточная локализация фермента.

2.3.3.3. Множественные молекулярные формы аконитатгидратазы в гепатоцитах крыс.

2.3.4. Очистка изоформ аконитатгидратазы.

2.3.5. Разработка условий хранения фермента.

2.3.6. Электрофоретические исследования гомогенности полученных ферментных препаратов аконитатгидратазы.

2.3.7. Физико-химические и каталитические свойства аконитатгидратазы.

2.3.7.1. Определение молекулярной массы и субъединичного строения аконититгидратазы.

2.3.7.1.1. Гель-фильтрация на Toyopearl HW-65.

2.3.7.1.2. Электрофорез в присутствии Ds-Na.

2.3.7.2. Определение Кт.

2.3.7.3. Влияние рН среды на активность изоформ фермента.

2.3.8. Метаболитная регуляция.

2.3.8.1. Влияние различных интермедиатов клеточного метаболизма на активность фермента.

2.3.8.2. Влияние перекиси водорода на работу изоформ аконитатгидратазы.

2.3.8.3. Роль железа в каталитическом действии фермента.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Очистка, физико-химические и регуляторные свойства изоформ аконитатгидратазы из гепатоцитов голодающих крыс"

Актуальность проблемы. Важнейшим направлением современной биохимии является изучение механизмов метаболических процессов, протекающих в живом организме. Воздействие экстремальных условий внешней среды нередко приводит к серьезному нарушению физиологических и метаболических функций организма, что и ведет к возникновению состояния стресса. Пищевая депривация является одним из стрессовых факторов, существенно • меняющих энергетический статус клетки. Уменьшение поступления питательных веществ в организм приводит к мобилизации запасных веществ, и в этой связи важное значение приобретает проблема межорганной кооперации для решении энергетических задач на уровне целостного организма. Особую роль с точки зрения межсистемной кооперации выполняет такой важнейший орган как печень. Здесь протекают глюконеогенетические процессы, в результате чего синтезируется глюкоза, формируются кетоновые тела, а также активная транспортная форма жира, т.е. важнейшие энергетические субстраты организма, используемые другими органами (Лебкова, 2000). При изучении пищевой депривации была показана мобилизация всех ресурсов организма, направленных на поддержание энергетического баланса клеток, и в первую очередь наблюдается расходование наиболее доступных резервов, в частности, запасов глюкозы, а затем и гликогена, расход которого приводит к переключению на метаболизацию жирных кислот (Лебкова, Бондаренко, 1980). Еще одним из энергетических субстратов при голодании являются такие аминокислоты, как аспартат и глутамат, переаминирование которых приводит к образованию субстратов цикла Кребса. Цикл трикарбоновых кислот играет ключевую роль в мобилизации запасных питательных веществ, а также в обеспечении протекания процесса глюконеогенеза из жирных кислот, наблюдаемого на 34 сутки голодания. Данный процесс, по-видимому, поддерживает постоянство концентрации глюкозы в крови при ее лимитированном поступлении из вне и может обеспечивать наблюдавшийся ранее феномен ресинтеза гликогена на 4 день пищевой депривации (Лебкова, 1981, 1991).

Несмотря на огромную важность вопроса о воздействии стрессовых факторов на функционирование живых организмов, как для теории, так и для практики, физиолого-биохимические аспекты многих ферментов в стрессовых условиях либо не исследовались, либо были недостаточно изучены. Лишь в 1996 году на нашей кафедре было установлено, что биохимическим механизмом синтеза углеводов их запасных липидов при голодании являемся индукция ферментов глиоксилатного цикла, таких как -изоцитратлиаза и малатсинтаза (Popov et al., 1996). Позднее установлена индукция малатдегидрогеназной активности в гепатоцитах крыс при пищевой депривации, связанная с индукцией глиоксисомальной изоформы фермента (Попов и др., 2001). Одним из ферментов, участвующих в функционировании как цикла Кребса, так и глиоксилатного цикла является аконитатгидратаза (аконитаза, АГ, КФ 4.2.1.3). Рядом авторов было показано вероятное существование двух изоферментых форм растительной аконитатгидратазы в цитоплазме и глиоксисомах, с одной стороны, и в митохондриях - с другой (Епринцев и др., 1995). В работах по исследованию животных изоформ аконитатгидратазы демонстрируется аналогичное распределение активности фермента в различных компартментах клетки (Villafranca, 1974, Agrawal et al., 1976, Sholze, 1983, Kennedy et al., 1992, Konstantinova et al., 2000). В частности, она обнаружена в таких органах высших животных, как легкие, сердце, печень, скелетные мышцы крыс (Konstantinova, Russanov, 1996, Anderson et al., 1998, Evelson et al., 2000). Что же касается изучения различно локализованных изоформ животной аконитазы в стрессовых условиях, а именно при пищевой депривации, то достоверных данных нами не обнаружено. В связи с этим, интересно исследование множественных молекулярных форм аконитатгтдратазы у животных при голодании, а также изучение механизмов их регуляции.

Цель и задачи исследования. Целью работы было изучение индукции и регуляторной роли различно локализованных изоформ аконитатгидратазы в гепатоцитах голодающих крыс.

Исходя из цели работы были поставлены следующие задачи:

1. Изучить возможность индукции АГ в тканях крыс при пищевой депривации

2. Исследовать распространение и субклеточную локализацию АГ у крыс в норме и при голодании

3. Выявить вликние пищевой депривации на изоферментный состав фермента в различных тканях изучаемых животных

4. Выделить и очистить до электрофоретически гомогенного состояния различно локализованные изоформы АГ из гепатоцитов крыс

5. Разработать условия длительного хранения ферментного препарата

6. Изучить и сравнить физико-химические, кинетические характеристики и механизмы регуляции цитоплазматической и митохондриальной АГ в норме и при голодании

7. Разработать гипотетическую модель регуляции метаболизма на уровне аконитатгидратазной реакции в гепатоцитах крыс при пищевой депривации.

Научная новизна работы. В данной работе представлены результаты физиолого-биохимического исследования фермента аконитатгидратазы из гепатоцитов крыс в условиях пищевой депривации. С помощью современных методов исследования таких, как гель-фильтрация, ионообменная хроматография и ряда других была получена в гомогенном состоянии аконитатгидратаза из гепатоцитов голодающих крыс, а также изучены ее основные свойства и механизмы регуляции. Установлено наличие множественных молекулярных форм этого фермента, отличающихся по субклеточной локализации, физико-химическим свойствам и регуляции метаболитами, что связано с участием данных изоформ в обеспечении протекания различных физиолого-биохимических процессов.

Результаты проведенного исследования показали полифункциональность действия АГ в условиях пищевой депривации. Важное значение в понимании регуляторных механизмов метаболических процессов в животной клетке при голодании имеют данные исследования индуцированного синтеза аконитатгидратазы, т.к. проблема регуляции поступления в организм пищевых веществ интересна для многих отраслей знаний, поскольку питание определяет само существование организма.

Практическая значимость. Научные положения диссертационной работы помогаю^ глубже понять современные представления об организации и механизмах сопряжения анаболических и катаболических процессов при патологических состояниях в клетках животных, а именно в гепатоцитах крыс в условиях пищевой депривации. Практическая значимость настоящей работы состоит в расширении и углублении знаний о роли различно локализованных изоформ аконитатгидратазы в приспособлении животных к изменяющимся факторам среды. Модифицированные способы выделения и получения высокоочищенных, электрофоретически гомогенных препаратов аконитатгидратазы из гепатоцитов крыс при пищевой депривации могут быть широко использованы для получения ферментных препаратов в производственных и лабораторных условиях, а также в научно-исследовательских работах, связанных с моделированием сопряженных ферментных систем в данных стрессовых воздействиях на организм. В работе разработан способ стабилизации фермента, позволяющий сохранить его активность в течение длительного времени, что обеспечивает возможность применения препарата для биохимических анализов в лабораторной практике.

Материалы работы используются в учебном процессе на биолого-почвенном факультете Воронежского государственного университета, при чтении лекций по биохимии, а также в спецкурсах по энзимологии, кроме того, они используются при проведении практикумов и выполнении курсовых и дипломных работ. 9

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на региональных и университетских конференциях. Они были представлены на VII международной конференции по химии и физико-химии олигомеров «Олигомеры - 2000» (Пермь, 2000), межрегиональных конференциях, посвященных памяти А.А. Землянухина «Организация и регуляция физиолого-биохимических процессов» (Воронеж, 2000, 2001), межрегиональной конференции «Физиология и психофизиология мотиваций» (Воронеж, 2000), международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Молодая наука - XXI веку» (Иваново, 2001), 5й Пущинской конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (2001), международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам «Ломоносов» (Москва, 2001), ежегодной научной секции отчетной конференции преподавателей и сотрудников Воронежского государственного университета (2000, 2001).

Публикации. Основные результаты настоящей диссертационной работы изложены в 13 публикациях - 9 статьях и 4 тезисах.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 142 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения результатов, заключения, выводов, списка литературы (262 источников). Иллюстрационный материал включает 19 рисунков, 11 таблиц.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Семенова, Елена Васильевна

ВЫВОДЫ

Пищевая депривация индуцирует активность аконитатгидратазы в исследуемых органах в 2-3 раза, причем, наибольшее увеличение активности фермента обнаружено в сердце (0,042 ФЕ/мг белка), почках (0,032 ФЕ/мг белка) и печени (0,048 ФЕ/мг белка). Показано, что в клетках изучаемых органов существуют два основных пула аконитазной активности. Голодание приводит к увеличению активности как цитоплазматической, так и митохондриальной изоформ и индукции новой формы аконитатгидратазы в ряде органов. Так, установлено трехкратное увеличение активности цитоплазматической и двукратное -митохондриальной изоформы аконитатгидратазы из гепатоцитов крыс в условиях пищевой депривации, при этом максимальное значение активности наблюдалось на четвертый день голодания и сопровождалось синтезом дополнительной изоформы аконитазы с Rf 0,84.

С помощью пятистадийной очистки из гепатоцитов контрольных крыс получены препараты аконитатгидратазы цитоплазматической изоформы с удельной активностью 1,6 ФЕ/мг белка, что соответствует очистке в 114,6 раза и выходу 5% и митохондриальной - с удельной активностью 1,24 ФЕ/мг белка, очисткой - в 77,5 раза и выходом 6%.

По разработанной схеме очищены до электрофоретически гомогенного состояния препараты цитозольной аконитатгидратазы из гепатоцитов при голодании с удельной активностью 11,1 ФЕ/мг белка, что соответствует очистке в 231,5 раза и выходу 10% и митохондриальной - с удельной активностью 6,13 ФЕ/мг белка, очисткой - в 122,6 раза и выходом 15%.

Разработаны условия длительного хранения высокоочищенного препарата аконитатгидратазы (низкая температура и специфические стабилизаторы), при которых активность исследуемого фермента могла сохраняться в течение продолжительного периода.

6. Молекулярная масса аконитатгидратазы, определенная методом гель-фильтрации на сефадексе G-150 и Toyopearl HW-65, составляет для цитоплазматической изоформы 96±4,8 кДа (опыт) и 91 ±5,2 кДа (контроль) и для митохондриальной - 80±3,9 кДа и 84±4,1 кДа, соответственно. С помощью электрофореза в присутствии Ds-Na было установлено, что данные изоформы фермента состоят из двух одинаковых субъединиц, то есть представляют собой изологические димеры. Молекулярная масса субъединицы цитоплазматической аконитазы составила 45 кДа, а митохондриальной - 41 кДа.

7. Определенные значения Кт для всех субстратов свидетельствуют об увеличении сродства аконитазы в ряду цитрат —► изоцитрат —* цис-аконитат. Оптимум рН цитоплазматической аконитазы сдвинут в щелочную область по сравнению с митохондриальной изоформой.

8. Исследования особенностей метаболической регуляции различно локализованных форм аконитатгидратазы показало, что малат, сукцинат, глиоксилат, оксалоацетат, фумарат, транс-аконитат, глюкозо-1-фосфат и глюкозо-6-фосфат ингибируют по конкурентному типу обе изучаемые изоформы. Однако, устойчивость цитоплазматической формы фермента к исследованным интермедиатам выше в условиях пищевой депривации. При использовании малоната и 2-оксоглутарата не было обнаружено ингибирующего действия аконитазной активности во всех экспериментальных экспозициях.

9. Установленное активирующее влияние FeCl2 (0,1-1мМ) совместно с цистеином (0,05-0,5мМ) на активность обеих изоформ аконитатгидратазы и выявленное ингибирующее действие перекиси водорода свидетельствует о важной роли Fe2+ в каталитической акте и регуляции активности фермента.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные данные по увеличению активности цитоплазматической и митохондриальной изоформ аконитатгидратазы у крыс в условиях пищевой депривации свидетельствуют об ускорении метаболических процессов, связанных с этим ферментом, который обеспечивает функционирование цикла Кребса, глиоксилатного цикла, а также участвует в регуляции обмена железа путем превращения аконитазы в фактор транскрипции и в других процессах (Emptage et al., 1993, Philpott et al., 1994, Beinert et al., 1996, Eisenstein et al., 1997).

Митохондриальная форма аконитазы преимущественно обеспечивает функционирование цикла Кребса, катализируя метаболизм трикарбоновых кислот. Активация митохондриальных окислительных процесов, по-видимому, играет решающую роль в энергообеспечении клетки в стрессовых условиях, когда затраты организма на биосинтез и поддержание гомеостаза испытывают напряжение (Ленинджер, 1985). Цитоплазматическая аконитатгидратаза может играть полифункциональную роль. Во-первых, она обеспечивает анаплеротические реакции цикла трикарбоновых кислот, то есть синтез аминокислот из 2-оксоглутарата, во-вторых, в глюконеогенезе осуществляет функционирование глиоксилатного цикла. Было показано, что в данных условиях максимальная активность цитоплазматической фракции, наблюдаемая на четвертый день экспозиции, сопровождалась синтезом дополнительной изоформы фермента. Появляющаяся индуцированная цитоплазматическая форма аконитатгидратазы может обеспечивать работу глиоксилатного цикла, возникающего в гепатоцитах при пищевой депривации. Ранее было установлено появление активности изоцитратлиазы и малатсинтазы, а также увеличение активности пероксисомальной малатдегидрогеназы и синтез de novo ее изофермента в гепатоцитах голодающих крыс и при экспериментально индуцированном диабете (Popov et al., 1998, Попов и др., 2001). Получение в электрофоретически гомогенном состоянии препаратов митохондриальной и цитоплазматической аконитатгидратазы из опытных и контрольных крыс позволило провести сравнительные исследования их кинетических и регуляторных свойств. По уровню удельной активности, величине кинетических характеристик, рН-оптимуму и ряду других параметров выявлены определенные отличия. Так, митохондриальная изоформа обладает гораздо большим сродством ко всем субстратам фермента. Установлено, что аконитаза из гепатоцитов голодающих крыс может ингибироваться органическими кислотами, такими как малат, сукцинат, глиоксилат, оксалоацетат, транс-аконитат, фумарат. Причем, устойчивость к этим интермедиатам значительно выше у цитозольной формы фермента. Наиболее эффективными ингибиторами митохондриального фермента были глиоксилат, сукцинат и фумарат. Накопление двух последних интермедиатов цикла Кребса может обуславливаться как торможение сукцинатдегидрогеназы и фумаратгидратазы, так и активацией дикарбоксильного переносчика, транспортирующего сукцинат, образующийся в пероксисомах в глиоксилатном цикле (Popov et al., 1996). В этом случае ингибирование аконитазы позволяет использовать дикарбоновые кислоты на глюконеогенетические процессы. Цитозольная форма фермента была также более устойчива при хранении и при воздействии перекиси водорода, разрушающей железо-серные кластеры фермента, что приводило к ингибированию аконитазной активности (Kim et al., 1996, Konstantinova et al., 2000).

На основании полученных данных предлагается гипотетическая модель регуляции метаболизма на уровне аконитатгидратазной реакции (рис. 19). I jp-окисление Ацетил CoA 1

OAA

О О S о * о

Рч 8 I малат глиоксилат

8 « малат. цитрат

-» цитрат с*»*"

ГЦ изоцитрат, изоцитрат NADP'

NADPH аминокислоты сукцинат фумарат? / изоцитрат

I г**°1р*г

A J' цитрат

ОАА обращенный гликолиз |

Рис. 19. Гипотетическая модель регуляции метаболизма углеводов в животной клетке в условиях пищевой депривации: 1 - слабое ингибирование; 2 - слабое активирование; 3 - сильное ингибирование; 4 - сильное активирование

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Семенова, Елена Васильевна, Воронеж

1. Анохин П.К., Судаков К.В. Нейрофизиологическая теория голода, аппетита и насыщения //Успехи физиол. наук. 1971. - Т. 2, № 1. - С. 3-41.

2. Васильева Е.Д. Особенности обмена жиров у млекопитающих при голодании // Усп. физиол. наук. 1997. - Т. 8, № 3. - С. 97-127.

3. Волвенкин С.В., Попов В.Н., Епринцев А.Т. Субклеточная локализация и свойства ферментов глиоксилатного цикла в печени крыс с аллоксановым диабетом // Бидхимия. 1999. - Т. 64, вып. 9. - С. 1185-1191.

4. Гааль Э., Медьсши Г., Верецкин Л. Электрофорез в разделении биологических молекул. М.: Мир, 1982. - 283 с.

5. Горбач З.В., Коноваленко О.В. Гетерогенность L-пируваткиназы печени, выявляемая при голодании животных // Вопросы питания. 1993. - № 3. -С. 36-39.

6. Горизонтов П.Д., Сиротин Н.Н. Патологическая физиология экспериментальных состояний. М.: Медицина, 1973. - 383 с.

7. Гродзинский A.M., Гродзинский Д.М. Краткий справочник по физиологии растений. Киев: Наукова думка, 1985. - 273 с.

8. Громашевская Л.Л. Клинические и экспериментальные аспекты исследования ферментов и изоферментов в гепатологии // Вопр. экспер. и клинич. гепатологии. Тернополь, 1976. - С. 31-32.

9. Детерман Г. Гель-хроматография. М.: Мир, 1970. - 352 с.

10. Ю.Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. -М.: Наука, 1982. 478 с.

11. Довганский А.П., Курцер Б.М., Зорькина Т.А. Печень при экстремальных состояниях. Кишинев: Штиинца, 1989. - 136 с.

12. Догаева Л.Н. Ультраструктурные особенности миокарда собак при сахарном диабете // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1960. -№ 4. -С. 53-55.

13. Дынник В.В., Сельков Е.Е. Регуляция энергетического обмена и физиологическое состояние организма М.: Наука, 1978. - С. 51-66.

14. Епринцев А.Т. Малатдегидрогеназная и аконитазная системы высших растений. Дис. д-ра биол. наук. Воронеж, 1995. - 457 с.

15. Епринцев А.Т., Землянухин JT.A., Алексюк М.П. Очистка и некоторые свойства аконитатгидратазы из щитков кукурузы // Биохимия. 1995. - Т. 80, №8.-С. 1244-1250.

16. Епринцев А.Т., Землянухин JI.A., Суворова И.М. Новый метод определения активности аконитатгидратазы в растениях. В кн.: Регуляция физиологических-процессов растений. - Воронеж, 1982. - С. 5156. ^

17. Епринцев А.Т., Попов В.Н. Ферментативная регуляция метаболизма дикарбоновых и трикарбоновых кислот. Воронеж: Изд-во ВГУ, 1999. -192 с.

18. Ермолаева Л.П. Факторы регуляции глюконеогенеза в печени куриных эмбрионов // Биохимия. 1978. - Т. 43., вып. 7. - С. 1335-1341.

19. Землянухин А.А., Землянухин Л.А. Большой практикум по физиологии и биохимии растений. Воронеж: ВГУ, 1996. - 188 с.

20. Землянухин А.А., Землянухин Л.А., Епринцев А. Т., Игамбердиев А.У. Глиоксилатный цикл растений. Воронеж: Изд-во ВГУ, 1986. - 148 с.

21. Игамбердиев А.У. Микротельца в метаболизме растений. Воронеж: ВГУ, 1990.-148 с.

22. Игамбердиев А.У. Логика организации живых систем. Воронеж: ВГУ, 1995.- 152 с.

23. Кендыш И.Н. Субстратная регуляция глюконеогенеза // Успехи соврем, биологии. 1978. - Т. 86., вып. 2. - С. 192-205.

24. Кендыш И.Н. Ингибиторы глюконеогенеза (обзор) // Вопр. мед. химии. -1984.-Т. 30, вып. 4.-С. 2-12.

25. Кириллов О.И. Клеточные механизмы стресса. Владивосток: Дальневост. книжное изд-во. - 1973. - 155 с.

26. Коваленко Н.Я. Функциональный элемент печени в норме и патологии // Пат. физиол. 1984. - №1. - С. 83-88.

27. Козырева Т.В., Верхогляд Л.А. Адаптация к холоду и структура терморегуляционного ответа при медленном и быстром охлаждении // Российский физиол. журнал. 1997. - № 14. - С. 135-141.

28. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Наука, 1980.-272 с.

29. Курцер Б.М., Зорькина Т.А, Бурлаку В.З. Активность дыхательных ферментов в печени при экстремальных воздействиях на организм // Механизмы патологических реакций при экстремальных воздействиях на организм. Кишинев: Штиинца, 1986.- С. 41-45.

30. Лайтс С.М, Лаптева Н.Н. Очерки по патофизиологии обмена веществ и эндокринной системы. М.: Медицина, 1987. - 424 с.

31. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

32. Лебкова Н.П. Трансформация липидов в гликоген в клетках животных и человека // Архив патологии. 1981. - № 2. - С. 72 -77.

33. Лебкова Н.П. Субклеточная локализация карнитинацилтрансферазы в клетках различных органов интактных и голодающих крыс // Бюл. экспер. биол. и мед. 1983. - № 7. - С. 32-35.

34. Лебкова Н.П. Изучение субклеточной локализации гликоген-УДФ-глюкозилтрансферазы в печени голодающих крыс // Цитология. 1985. -t. 27, №2.-С. 35-40.

35. Лебкова Н.П. Субстратное обеспечение энергетического гомеостаза при голодании // Бюл.экспер.биол. и мед. 1991. - № 11. - С. 475-479.

36. Лебкова Н.П. Современные представления о внутриклеточных механизмах обеспечения энергетического гомеостаза в норме и при патологии // Вестник РАМН. 2000. - № 9. - С. 3-12.

37. Лебкова Н.П., Бондаренко М.Ф. Особенности липидного обмена в период голодания // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1980. -№5.-С. 614-617.

38. Лебкова Н.П., Бондаренко М.Ф., Колесова О.Е., Азарян Г.Н. Ультраструктурные проявления ранних метаболических нарушений в миокарде собак при аллоксановом диабете // Бюл. экспер. биол. и мед. 1980. - № 6. - С. 614-617.

39. Лебкова Н.П., Чижов А .Я. Ультраструктурные и цитохимические изменения в печени крыс при тренировке к гипоксии // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1992. - № 6. - С. 663-666.

40. Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т. М.:Мир, 1985.- 975с.

41. Мак-Мюррей У. Обмен веществ у человека.-М.:Мир, 1980. 368 с.

42. Мариц A.M. Влияние голода и насыщения на биоэлектрическую активность регуляторной формации и коры больших полушарий головного мозга // Физиол. журнал СССР. 1962. - Т. 42, N 8. - С. 889.

43. Матюхин В.А., Нешумова Т.В., Черепанова В.А. Энергетика мышечной деятельности млекопитающих. Новосибирск: Наука, 1988. - 158 с.

44. Мауэр Г. Диск-электрофорез. М.:Мир. - 1971. - 222 с.

45. Меерсон Ф.З. Адаптация к стрессовым условиям и стресс-лимитирующие системы организма // Руководство по физиологии адаптационных процессов.-М.: Наука, 1986.-640 с.

46. Меерсон Ф.З. Защитные эффекты адаптации и некоторые перспективы развития адаптационной медицины // Успехи физиол. наук. -1991. Т. 22. -С. 52-89.

47. Меерсон Ф.З., Малышев И.Ю. Феномен адаптационной стабилизации структур и защита сердца. М.: Наука, 1993. - 160 с.

48. Меерсон Ф.З., Миняйленко Т.Г., Пожаров В.П. Развитие суперрезистентности к гипоксической гипоксии под влиянием адаптации к кратковременным стрессовым воздействиям // Бюл. экспер. биол. и мед. -1993.-№3.-0.45-47. •

49. Мецлер Д.Е. Биохимия. М.: Мир, 1987. - 358 с.

50. Мешкова Н.П., Северин С.Е. Практикум по биохимии. М.: МГУ, 1979. -430 с.

51. Панин JI.E. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: Наука, 1983.-233 с.

52. Панин Л.Е., Колосова И.Е. Изучение активности ключевых ферментов глюконеогенеза в печени и почках крыс при действии на организм субэкстремальных и экстремальных факторов // Бюл. экспер. биол. и мед. -1979.-Т. 87.-С. 544-547.

53. Пантилеев П.А. Биоэнергетика мелких млекопитающих. М.: Наука, 1983. - 271 с.

54. Пинейру де Карвалью М. А. А., Землянухин А. А., Епринцев А. Т. Малатдегидрогеназа высших растений. Воронеж: ВГУ, 1991. - 214 с.

55. Покровский А.А., Панченко Л.Ф., Шпаков А.А., Ивлов Н.Н. Изучение активности ферментов митохондрий печени белых крыс при полном голодании // Вопр. мед. химии. 1968. - Т. 15, № 4. - С. 421-424.

56. Попов В.Н., Волвенкин С.В., Епринцев А.Т., Игамбердиев А.У. Индукция ферментов глиоксилатного цикла в различных тканях голодающих крыс // Изв. акад. наук, сер. биологическая. 2000. - № 6. - С. 672-678.

57. Попов В.Н., Волвенкин С.В., Косматых Т.А., Суад А., Шнарренбергер К., Епринцев А.Т. Индукция пероксисомальной изоформы малатдегидрогеназы в печени крыс при пищевой депривации // Биохимия.- 2001. Т. 66, вып. 5. - С. 617 - 623.

58. Попов В.Н., Игамбердиев А.У., Волвенкин С.В. Очистка и свойства изоцитратлиазь\ и малатсинтазы из печени голодающих крыс // Биохимия.- 1996. Т. 61, вып. 10. - С. 1898 - 1903.

59. Рахманов А.Х. Морфобиохимические изменения в печени при частичном голодании крыс в онтогенезе // Структурные изменения печени и поджелудочной железы в норме и экстремальных условиях. Сб. научн. тр., Ташкент. - 1987. - С. 12-14.

60. Робу А.И. Взаимоотношения эндокринных комплексов при стрессе. -Кишинев: Штиинца, 1982. 208 с.

61. Роговин В.В. Роль микротелец в расщиплении липидов // Известия РАН СССР. 1979. - № 1. - С. 21-32.

62. Самарцев В.Н. Жирные кислоты как разобщители окислительного фосфорилирования // Биохимия. 2000. - Т. 65, вып. 9. - С. 1173-1189.

63. Селье Г. На уровне целого организма. М.: Мир, 1972. - 68 с.

64. Скулачев В.П. Понижение внутриклеточной концентрации 02 является специфической функцией дыхательной системы клетки // Биохимия. -1994. Т. 59, № 12. - С. 1910-1912.

65. Смирнов К.В. Физиология пищеварения // Успехи физиол. наук. 1994. -Т. 25,№12.-С. 69-75.

66. Спиридонов В.Н., Воробьева М.Ф. Влияние стимуляции и повреждения афферентных нервов на содержаще глюкозы и свободных жирных кислот в крови крыс при изменении гликемии // Российский физиол. журнал. -1998. Т. 83, № 12. - С. 1433-1439.

67. Страйер Jl. Биохимия, М.: Мир, 1985. Т. 2. - 312 с.

68. Ткачев А.В., Клярина И.М., Исаев А.И. Влияние гормональной активности щитовидной железы и инсулярного аппарата на уровень глюкозы у человека // Российский физиол. журнал. 1998. - Т. 84, № 5. - С. 521-527.

69. Хочачка П., Сомеро Дж. Биохимическая адаптация. М.: Мир, 1988. - 567 с.

70. Чернышев Г.А., Стариков В.Н. Вероятность и статистика в биологии и химии. Воронеж: ВГУ, 1998. - 270 с.

71. Шапот B.C., Блинов В.А. Глюконеогенез в животном организме // Усп. биол. химии. 1975. - № 12. - С. 196-213.

72. Шидловская Т.Е. Интенсивность перекисного окисления липидов в тканях крыс при гипокинезии // Косм. биол. 1985. - № 4. - С. 45-48.

73. Шилов И.А. Стресс как экологическое явление // Зоол. журнал. 1984. - Т. 63, вып. 6.-С. 805-812.

74. Шольц К.Ф., Мамаев Д.В., Бондаренко Д.И., Лагутина Л.С. Особенности взаимодействия 2-алкилмалонатов с центром связывания субстратов дикарбоксилатного переносчика митохондрий печени крыс // Биохимия. -1990. Т. 55, № 10. - С. 1832-1840.

75. Шустов Е.Б. Физиология экстремальных состояний. М.: Наука, 1998. -247 с.

76. Agrawal Р.К., Garg G.K., Gollakota K.G. Studies on two isozymes from Bacillus cereus. Enzymatic properties // Biochem. Biophys. Res. Communs. -1976. V. 70 - № 3. - P. 987-996.

77. Alen C., Sonenshein AL. Bacillus subtilis aconitase is an RNA-binding protein // Proc. of the Nation, acad. of sci. of the USA. 1999. - T. 96, № 18. - P. 10412-10417.

78. Allen C.B., Guo X.L., White C.W. Changes in pulmonary expression of hexokinase and glucose transporter mRNAs in rats adapted to hyperoxia // Am. J. Physiol. 1998. - V. 274, № 3. - P. 320-329.

79. Arinze I.J, Garber A.J, Hanson R.W. The regulation of gluconeogenesis in mammalian liver: The role of mitochondrial phosphoenolpyruvate carboxykinase // J. Biol. Chem. 1973. - V. 248, № 7. - P. 2266-2274.

80. Bajpai M, Gupta G, Setty B.S. Changes in carbohydrate metabolism of testicular germ dells during-meiosis in the rat // Eur. J. Endocrinol. 1998. - V. 138, №3.-P. 322-327.

81. Ballard F. J. The development of gluconeogenesis in rat liver. Controlling factors in the newborn // Biochem. J. -1971. V. 124, № 2. - P. 265-274.

82. Basilion J.P, Rouault T.A, Massinople C.M. The iron-responsive element-binding protein: Localization of the RNA-binding site to the aconitase active cleft // Proc. Natl. Acad. Sci. 1994. - V. 91, № 1. - P. 574 -578.

83. Beinert H, Kennedy M.C. Engineering of protein bound iron-sulfur clusters. A tool for the study of protein and cluster chemistry and mechanism of iron-sulfur enzymes // Eur. J. Biochem. 1989. - V. 186. - P.5-15.

84. Beinert H, Kennedy M.C. Aconitase, a two-faced protein: enzyme and iron regulatory factor // FASEB Lett. 1993. - V. 7, № 12. - P. 1442 - 1449.

85. Beinert H, Kilcy P. Redox control of gene expression involving iron-sulfur proteins. Change of oxidation state or assembly/ disassembly of Fe-S cluster // FEBS Lett. - 1986. - V. 382. - P. 218-219.

86. Beinert H, Kennedy M.C, Stout C.D. Aconitase as iron-sulfur protein, enzyme, and iron-regulatory protein // Chem. Rev. 1996. - V. 96. - P. 2335 - 2373.

87. Beinert H, Thomson A.S. Three-iron cluster in iron-sulfur protein, enzymes, and iron-regulatory protein // Chem. Rev. 1983. - V. 96. - P. 2335-2373.

88. Bobyleva V, Kneer N, Bellei M, Battelli D, Lardy H.A. Concerning the mechanism of increased thermogenesis in rats treated withdehydroepiandrosterone // J. Bioenerg. Biomembr. 1993. - V. 25, № 3. - P. 313-321.

89. Bohme H.J., Sparmann G., Hofmann E. Biochemistry of liver development in the perinatal period // Experientia. 1983. - V. 39. - P. 473-483.

90. Bontemps F., Hue L., Hers H.G. Phosphorylation of glucose in isolated rat hepatocytes. Sigmoidal kinetacs explained by the activity if glucokinase alone // Biochem. J. 1978. - V. 174, № 2. - P. 603-611.

91. Bradbury A.J., Gruer M.J., Rudd K.E., Guest J.R. The second aconitase (AcnB) of Escherichia coli II Microbiol. UK. 1996. - V. 142. - P. 389-400.

92. Brittenham G.M. New advances in iron metabolism, iron deficiency, and iron overload // Curr.opin.Hematol. 1994. - № 1. - p. 101-106.

93. Bryant B.J., Jokinen M.P., Eustis S.L., Thompson M.B., Abdo K.M. Toxicity of monochloroacetip acid administered by gavage to F344 rats and B6C3F1 mice for up to 13 weeks // Toxicology. 1992. - V. 72, № 1. - P. 77-87.

94. Chen O.S., Blemings K.P., Schalinske K.L., Eisenstein R.S. Dietary iron intake rapidly influences iron regulatory proteins, ferritin subunits and mitochondrial aconitase in rat liver // J. Nutr. 1998. - V. 128, № 3. P. 525-535.

95. Chen O.S., Schalinske K.L., Eisenstein R.S. Dietary iron intake modulates the activity of iron regulatory proteins and the abundance of ferritin and mitochondrial aconitase in rat liver // J. Nutr. 1997. - V. 127, № 2. - P. 238248.

96. Cheung P.Y., Danial H., Jong J., Schulz R. Thiols protect the inhibition of myocardial aconitase by peroxynitrite // Arch. Biochem. Biophys. 1998. - V. 350, № l.-p. 104-108.

97. Costello L.C., Franklin R.B. Novel role of zinc in the regulation of prostate citrate metabolism and its implications in prostate cancer // Prostate. 1998. - V. 35, № 4. - P. 285-296.

98. Costello L.C., Franklin R.B., Liu Y., Kennedy M.C. Zinc causes a shift toward citrate at equilibrium of the m-aconitase reaction of prostate mitochondria // J. Inorg. Biochem. 2000A. - V. 78, № 2. - P. 161-165.

99. Costello L.C., Liu Y., Franklin R.B. Testosterone stimulates the biosynthesis rfjOfft^aconitase and citrate oxidation in prostate epithelial cells // FEBS Lett. -1995. V. 374, № 2. - P. 228-232.

100. Costello L.C., Liu Y., Franklin R.B., Kennedy M.C. Zinc inhibition of mitochondrial aconitase and its importance in citrate metabolism of prostate epithelial cells // J. Biol. Chem. 1997. - V. 272, № 46. - P. 28875-28881.

101. Costello L.C., Liu Y., Zou J., Franklin R.B. Mitochondrial aconitase gene expression is regulated by testosterone and prolactin in prostate epithelial cells // Prostate. 2000B. - V. 42, № 3. - P. 196-202.

102. Costello L.C., Liu Y., Zou J., Franklin R.B. The pyruvate dehydrogenase El alpha gene is testosterone and prolactin regulated in prostate epithelial cells // Endocr. Res. 2000C. - V. 26, № 1. - P. 23-39.

103. Courtois-Verniquet F., Douce R. Lack of aconitase in glyoxysomes and peroxisomes // Biochem. J. 1993. - № 294. - P. 103-107.

104. Cunningham J.M., Green I.C. Cytokines, nitric oxide and insulin secreting cells // Growth Regul. 1994. - V. 4, № 4. - P. 173-180.

105. Davis W.L. Hibernation activates glyoxylate cycle and gluconeogenesis in black bear brown adipose tissue // Biochim. Biophys. Acta. 1990. - V. 1051.-P. 276-278.

106. Davis B.J., Jones R.G., Farmer G.R. Disk Electrophoresis // Method and application to human surum proteins // Ann. N.Y. acad. sci. 1964. - V. 121. - P. 404-427.

107. Delaney C.A., Eizirik D.L. Intracellular targets for nitric oxide toxicity to pancreatic beta-cells // Braz. J. med. biol. res. 1996. - V. 29, № 5. - P. 569-579.

108. Dickman S. R., Speyer J. Factors affecting the activite of mitochondrial and soluble aconitase // J. Biochem. 1964. - V. 206, № 1, P. 67-75.

109. Dietzen D.J., Davis E.J. Oxidation of pyruvate, malate, citrate, and cytosolic reducing equivalents by AS-30D hepatoma mitochondria // Arch. Biochem. Biophys. 1993. - V. 305, № 1. - P. 91-102.

110. Diez-Fernandez C., Sanz N., Bosca L., Hortelano S., Cascales M. Involvement of nitric oxide synthesis in hepatic perturbations induced in rats by a necrogenic dose of thioacetamide // Br. J. Pharmacol. 1997. - V. 121, № 4. - P. 820-826.

111. Eanes R.Z., Kun E. Separetion and characterization of aconitase hydratase isoenzymes from pig tissues // Biochim. Biophis. Acta. 1971. - V. 227. - P. 204-210.

112. Eanes R.Z., Кип E. Inhibition of liver aconitase isoenzymes by (-)-erythro-Fluorocitrate // Mol. Pharmacol. 1974. - V. 10. - P. 130-139.

113. Eisenstein R.S., Barton H.A., Pettingell WH. Jr., Bomford A.B. Isolation, characterization, and functional studies of rat liver iron regulatory protein 1 // Arch. Biochem. Biophys. 1997. - V. 343, № 1. - P. 81-91.

114. Emptage M.H., Dreyer J.L., Kennedy M.C., Beinert H. Optical and EPR characterization of different species of active and inactivate aconitase // J.Biol.Chem. 1983. - V. 258. - P. 11106-11111.

115. Escher C.L., Widmer F. Lipid mobilization and gluconeogenesis in plants: do glyoxylate cycle enzyme activities conctitute a real cycle? A hypothesis // Biol. Chem. 1997. - V. 378, № 8. - P. 803-813.

116. Evelson P., Gonzalez-Flecha B. Time course and quantitative analysis of the adaptive responses to 85% oxygen in the rat lung and heart // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - V. 1523, № 1-2. - P. 209-216.

117. Fast В., Kremp K., Boshart M., Steverding D. Iron-dependent regulation of transferrin receptor expression in Trypanosoma brucei II Biochem. J. 1999. -V. 342, №3.-P. 691-696.

118. Ferre P., Pegorier J.P., Williamson DH., Girard J. Interactions in vivo between oxidation of non-esterified fatty acids and gluconeogenesis in the newborn rat // Biochem. J. 1979. - V. 182, № 2. - P. 593-598.

119. Ferre P, Pegorier J.P, Girard J, Marliss E.B. Evidence that fatty acid oxidation stimulates gluconeogenesis in the newborn rat // Biochem. soc. trans. 1977.-V. 5, №4.-P. 982-983.

120. Festa M, Colonna A, Pietropaolo C, Ruffo A. Oxalomalate, a competitive inhibitor of aconitase, modulates the RNA-binding activity of iron- regulatory proteins // Biochem J. 2000. - V. 348 - P. 315-320.

121. Foury F. Low iron concentration and aconitase deficiency in a yeast frataxin homologue deficient strain // FEBS Lett. 1999. - V. 456 - P. 281-284.

122. Frishman D, Hentse M.W. Conservation of aconitase residues revealed by multiple sequence analysis. Implications for structure/function relationships // Eur.J. of Biochem. 1996. - V. 239, № 1. - P. 197-200.

123. Gardner P.R, Costantino G, Salzman A.L. Constitutive and adaptive detoxification of nitric oxide in Escherichia coll Role of nitric-oxide dioxygenase in the protection of aconitase // J. of Biol. Chem. 1998. - V. 273, №41.-P. 26528-26533.

124. Gardner P. R, Nguyen D. H, White C.W. Aconitase is a sensitive and critical target of oxygen poisoning in cultured mammalian cells and in rat lungs // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - V. 91, № 12. - P. 12248 - 12252.

125. Gardner P.R, Raineri I, Epstein L.B, White C.W. Superoxide radical and iron modulate aconitase activity in mammalian cells // J. Biol. Chem. 1995. -V. 270, № 22. - P. 13399-13405.

126. Gawron О., Jones L. Structural basis for aconitase activity. Inactivation by butanedione and binding of substrates and inhibitors // Biochim. Biophys. Acta.- 1977.- V. 484, № 2. P. 453-464.

127. Gawron O., Kennedy M., Rauner R. Properties of pig heart aconitase // Biochem. J. 1974. - Vol. 143, № 3. - P. 717-722.

128. Gehring N.H., Hentze M.W., Pantopoulos K. Inactivation of both RNA binding and aconitase activities of iron regulatory protein-1 by quinone-induced oxidative stress // J. of Biol. Chem. 1999. - V. 274, № 10. - P. 6219-6225.

129. Girard J. R., Ferre P., Pegorier J. P. Glucose metabolism in the newborn rat // Biochem. soc. trans. 1981. - V. 9, № 5. - P. 369-370.151 .Glusker J.P. Aconitase // Enzymes. New York London. - 1971. - V. 5. - P. 413-439.

130. Graham R.M., Morgan E.H., Baker E. Characterisation of citrate and iron citrate uptake by cultured rat hepatocytes // J. Hepatol. 1998. - V. 29, № 4. - P. 603-613.

131. Gruer M.J., Artymiuk PJ., Guest J.R. The aconitase family: Three structural variations on a common theme // Trends in biochem. sci. 1997. - V. 22, № 1.- P. 3-6.

132. Grune Т., Blasig I.E., Sitte N., Roloff В., Haseloff R., Davies KJ.A. Peroxynitite increases the degradation of aconitase and other cellular proteins by proteasome //J. of Biol. Chem. 1998. -V. 273, № 18. - P. 10857-10862.

133. Guarriero-Bobyleva W., Masini A., Volpi-Becchi M.A., Annamo C. Kinetic studies of cytoplasmic and mitochondrial aconitase hydratases from rat liver // Ital. J. Biochem. 1978. - V. 27, № 5. - P. 287 - 299.

134. Guo В., Yu Y., Leibold E.A. Iron regulates cytoplasmic levels of a novel iron-responsive element-binding protein without aconitase activity // J. Biol. Chem. -1994. V. 269, № 39. - P. 24252-24260.

135. Gutteridge J.M.C., Mumby S., Koizumi M., Taniguchi N. «Free» iron in neonatal plasma activities aconitase: Evidence for biologically reactive iron // Biochem. and Biophys. Res. Comm. 1996. - V. 229, № 3. - P. 806-809.

136. Hahm K.S., Gavron O., Piszhiewies D. Amino acid siquence of a peptide containing an essential cysteine residue of pig heart aconitase //Biochem. et Biophis. Acta. 1981. V.- 667, № 2. - P. 457-461.

137. Hashemi A., Estilai A., Ehdaie B. Inheritance of aconitase, shikimate dehydrogenase, and phosphoglucose isomerase in guayule // J. of the Amer. Society for Hort. Sci. 1991. - V. 116, № 4. - P. 737-739.

138. Hayashi M., De Bellis L., Nishimura M. Cytosolic aconitase participates in the glyoxylate cycle in etiolated pumpkin cotyledons // Plant Cell Physiol. 1995. -V. 36, №4.-P. 669-680.

139. Henson C.P., Clenand W.W. Purification and kinetic studies of beef liver cytoplasmic aconitase // J. Biol. Chem. 1967. - V. 258. - P. 3833-3838.

140. Herr H.G. The control of glycogen metabolism in the liver // Ann. Rev. Biochem. 1976. - V. 45 - P. 167-190.

141. Jaffrey S.R., Cohen N. A., Rouault T.A., Klausner R.D., Snyder S.H. The iron-responsive element binding protein: a target for synaptic actions of nitric oxide // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - V. 91, № 26. - P. 12994-12998.

142. Janero D.R., Hreniuk D. Suppression of TCA cycle activity in the cardiac muscle cell by hydroperoxide-induced oxidant stress // Am. J. Physiol. 1996. -V. 270,№6.-P. 1735-1742.

143. Kaptain S., Downey W.E., Tang C., Philpott C., Haile D., Orloff D.G., Harford J.B., Ronault T.A., Klausner R.D. A ragulated RNA binding protein also possesses aconitase activity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. -V. 22, №88.-P. 10109-10113.

144. Kelleher J.A., Chan T.Y., Chan P.H., Gregory G.A. Protection of astrocytes by fructose 1,6-bisphosphate and citrate ameliorates neuronal injury under hypoxic conditions // Brain Res. 1996. - V. 726, № 1-2. - P. 167- 173.

145. Khandelwal R. L. Glycogen metabolizing enzyme activities in the developing rat liver // Intern. J. Biochem. 1982. - V. 14, № 12. - P. 1067-1073.

146. Kohler S.A., Menotti E., Kuhn L.C. Molecular cloning of mouse glycolate oxidase. High evolutionary conservation and presence of an iron-responsive element-like sequence in the mRNA // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274, № 4. - P. 2401-2407.

147. Konorev E.A., Zhang H., Joseph J., Kennedy M.C., Kalyanaraman B. Bicarbonate exacerbates oxidative injury induced by antitumor antibiotic doxorubicin in cardiomyocytes // Am. J. physiol. heart, circ. physiol. 2000. -V. 279, № 5. - P. 2424-2430.

148. Konstantinova S.G., Russanov E.M. Aconitase activity in rat liver // Сотр. Biochem. Phisiol. 1996. - V. 113B, № 1. - P. 125-130.

149. Konstantinova S.G., Russanov E.M. Studies on paraquat-induced oxidative stress in rat liver // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. 1999. - V. 24, № 4. - P. 107-111.

150. Laemmli U.K. SDS-electrophoresis //Nature. 1970. - V. 227. - P. 680-685.

151. Lauble H., Kennedy M.C., Beinert H., Stout C.D. Crystal structure of aconitase with isocitrate and nitoisocitrate bound // Biochemistry. 1992. - V. 31.-P. 2735-2748.

152. Lauble H., Kennedy M.C., Emptage M.H., Beinert H., Stout C.D. The reaction of fluorocitrate with aconitase and the crystal structure of the enzyme-inhibitorcomplex // Proc. of the nation, acad. of sci. of the USA. 1996. - V. 93, № 24. -P. 13699-13703.

153. Lenzen S., Mirzaie-Petri M. Inhibition of aconitase by alloxan and the differential modes of protection of glucose, 3-O-methylglucose, and mannoheptulose // Naunyn. Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1992. - V. 346, №5.-P. 532-536.

154. Liang L.P., Ho Y.S., Patel M. Mitochondrial superoxide production in kainate-induced hippocampal damage // Neuroscience. 2000. - V. 101, № 3. - P. 563570. \

155. Liu Y., Costello L.C., Franklin R.B. Prolactin specifically regulates citrate oxidation and m-aconitase of rat prostate epithelial cells // Metabolism. 1996. -V. 45, № 4. - P. 442-449.

156. Liu Y., Franklin R.B., Costello L.C. Prolactin and testosterone regulation of mitochondrial zinc in prostate epithelial cells // Prostate. 1997. - V. 30, № 1. -P. 26-32.

157. Lock L., Barnett C.A. Electrophoretic variation of aconitase and phosphoglucomutase detected in Microts califonicus // Biochem. et Biophys. Acta. 1979. - V. 580, № 2. - P. 298-231.

158. Longo V.D., Viola K.L., Klein W.L., Finch C.E. Reversible inactivation of superoxide-sensitive aconitase in Abetal-42-treated neuronal cell lines // J. Neurochem. 2000. - V. 75, № 5. - P. 1977-1985.

159. Lowry O., Rosenbrough N., Farr A. Protein measurement with the Folinphenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V. 194. - P. 265-275.

160. Maletic S.D., Kostic M.M. Effects of nitroglycerin on energy metabolism of rat reticulocytes // J. Physiol. Pharmacol. 1999. - V. 50, № 1. - P. 75-87.

161. McGarry J.D., Fosters D.W. Regulation of hepatic fatty acid oxidation and ketone body production // Ann. Rev. Biochem. 1976. - V. 49 - P. 395-420.

162. Melnick J.Z, Preisig P.A, Alpern R.J, Baum M. Renal citrate metabolism and urinary citrate excretion in the infant rat // Kidney Int. 2000. - V. 57, № 3. -P. 891-897.

163. Melnick J.Z, Preisig P.А, Мое O.W, Srere P, Alpern R.J. Renal cortical mitochondrial aconitase is regulated in hypo- and hypercitraturia // Kidney Int. -1998. V. 54, №1.-P. 160-165.

164. Mirei D.B, Marder К,- Graziano J, Freyer G, Zhao Q.Q, Mayeux R, Wilhelmsen КС. Characterization of the human mitochondrial aconitase gene (AC02) // Gene. 1998. - V. 213, № 1-2. - P. 205-218.

165. Moore R.E, Hansel J.B, Lardy H.A, Veneziale C.M. The development and application of a radioimmunoassay for rat phosphoenolpyruvate carboxykinase // J. Biol. Chem. 1982. - V. 257, № 21. - P. 12546-12552.

166. Morrison J.F. The kinetics of the reaction catalysed by aconitase // Austral. J. exper. biol. and med. sci. 1955. - V. 32, № 6. - P. 867-876.

167. Mukherjee R, Jow L, Strasser J, Syka P, Rosen J, Heyman R. Synergistic activation of the hydratase but not the ApoAl gene by gemfibrozil and retinoids // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1996. - V. 804. - P. 734-735.

168. Mumby S, Koizumi M, Taniguchi N, Gutteridge J.M.C. Reactive iron species in biological fluids activate the iron-sulphur cluster of aconitase // Bioch. et bioph. Acta-Gen. subj. 1998. - V. 1380, № 1. - P. 102-108.

169. Narahari J, Ma R, Wang M, Walden W.E. The aconitase function of iron regulatory protein 1- Genetic studies in yeast implicate its role in iron-mediated redox regulation // J. Biol. Chem. 2000. - V. 275, № 21, - P. 16227-16234.

170. Navarre D.A, Wendehenne D, Durner J, Noad R, Klessig D.F. Nitric oxide modulates the activity of tobacco aconitase // Plant physiology. 2000. - V. 122,№2.-P. 573-582.

171. Nulton-Persson A.C, Szweda L.I. Modulation of mitochondrial function by hydrogen peroxide // J. B;ol. Chem. 2001. - V. 270, № 30. - P. 20501-20506.

172. Papaccio G., Pisanti F.A., Latronico M.V., Ammendola E., Galdieri M. Multiple low-dose and single high-dose treatments with streptozotocin do not generate nitric oxide // J. Cell. Biochem. 2000. - V. 77, № 1. - P. 82-91.

173. Pascal N., Douce R. Effect of iron-deficeincy on the respiration of Sycamore {acer-pseudoplatanus L.) cells // Plant Physiol. 1993. V. 103, № 4. - P. 1329-1338.

174. Patel M., Day B.J., Crapo J.D., Fridovich I., McNamara J.O. Requirement for superoxide in excitotoxic cell death // Neuron. 1996. - V. 16, № 2. - P. 345355.

175. Phillips J.D., Guo В., Yu Y., Brown F.M., Leibold E.A. Expression and biochemical characterization of iron regulatory proteins 1 and 2 in Saccharomyces cerevisiae II Biochemistry. 1996A. - V. 35, № 49. - P. 1570415714.

176. Peyre P., Perez P., Alric M. Structure, genomic organization, and expression of the Arabidopsis thaliana aconitase gene // J. Biol. Chem. 1995. - V. 270, № 4.-P. 8131-8137.

177. Popov V.N., Igamberdiev A.U., Schnarenberger C., Volvenkin S.V. Induction of the Glyoxylate Cycle Enzymes in rat liver upon food starvation // FEBS Lett. 1996.- V. 390. - P. 258-260.

178. Popov, S.V. Volvenkin, A.T. Eprintsev, A.U. Igamberdiev. Glioxilate cycle enzymes are present in liver peroxisomes of alloxan-treated rats // FEBS Lett. 1998.-V. 440. i P. 55-58. •

179. Rabie A., Simpson RJ., Bomford A., Cunninhame Graham D., Peters TJ. Relationship between duodenal cytosolic aconitase activity and iron status in the mouse // Biochem. et Biophys. Acta-Gener.subj. 1995. - V. 1245, № 3. - P. 414-420.

180. Rist R.J., Romero I. A., Chan M.W., Abbott N.J. Effects of energy deprivation induced by fluorocitrate in immortalised rat brain microvessel endothelial cells // Brain Res. 1996. - V. 730, № 1-2. - P. 87-94.

181. Robbins A.H. and Stout C.D. Structure of activated aconitase: formation of the 4Fe-4S. cluster in the crystal // Proc. natl. acad. sci. USA. 1989. - V. 86 - P. 3639-3643.

182. Sadka A., Dahan E., Cohen L., Marsh K.B. Aconitase activity and expression during the development of lemon fruit // Phys. Plantarum 2000. - V. 108, № 3.- P. 255-262.

183. Shevchenko A., Wilm M., Vorm O., Mann M. Mass spectrometric sequncing of proteins frorri silver-stained polyacrylamide gels // Anal. Chem. 1996. - V. 68. - P. 850-858.

184. Shinoda K., Mitsumori K., Uneyama C., Uehara M. Induction and inhibition of testicular germ cell apoptosis by fluoroacetate in rats // Arch. Toxicol. 2000. - V. 74, №1.-P. 33-39.

185. Singh S.P., Katiyar J.C., Srivastava V.M. Enzymes of the tricarboxylic acid cycle in Ancylostoma ceylanicum and Nippostrongylus brasiliensis // J. Parasitol. 1992. - V. 78, № 1. - P. 24-29.

186. Somerville G., Mikoryak CA., Reitzer L. Physiological characterization of Pseudomonas aeruginosa during exotoxin A synthesis: Glutamate, iron limitation, and aconitase activity // J. of Bacteriol. 1999. - V. 181, № 4. - P. 1072-1078.

187. Slaughter C. The distribution and properties of aconitase isozymes in man // J. Biol. Chem. 1977. - V. 10, № 2. - P. 287-292.

188. Styivaert J., Lieberg C., Bbaeg L.M. The two forms of aconitase in Bacillus subtilis II Chem. Abstr. 1965. - V. 63. - P. 2098-3004.

189. Suh Y.A., Arnold R.S., Lassegue В., Shi J., Xu X., Sorescu D., Chung A.B., Griendling K.K., Lambeth J.D. Cell transformation by the superoxide-generating oxidase Moxl // Nature. 1999. - V. 401, № 6. - P. 79-82.

190. Suzuki Т., Yamazaki O., Nara E., Akiyama S., Nakao J., Fukuda N. Crystallization and reconstitution of yeast aconitase // J. Biochem. 1975. - V. 77, №2.-P. 249-264.241 .Swisspot (база данных). регистрационный № 362812.

191. Thompson J.F., Schaefer S.C., Madison J.T. Determination of aconitate isomerase in platots // Anal. Biochem. 1990. - V. 184, № 1. - P. 39-47.

192. Toth I., Yuan L., Rogers J.T., Boyce H., Bridges K.R. Hypoxia alters iron-regulatory protein-1 binding capacity and modulates cellular iron homeostasis in human hepatoma and erythroleukemia cells // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274, № 7. p. 4467-4473.

193. Turk J., Corbett J.A., Ramanadham S., Bohrer A., McDaniel M.L. Biochemical evidence for nitric oxide formation from streptozotocin in isolated pancreatic islets // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - V. 197, № 3. - P. 1458-1464.

194. Vasquez-Vivar J., Kalyanaraman В., Kennedy MC. Mitochondrial aconitase is a source of hydroxyl radical-An electron spin resonance investigation // J. Biol. Chem. 2000. - V. 275, № 19. - P. 14064-14069.

195. Verniquet F., Gaillard J., Neuburger M., Douce R. Rapid inactivation of plant aconitase by hydrogen peroxide // Biochem. J. 1991. - V. 276, № 6. - P. 643648.

196. Villafranca J. The mechanism of aconitase action. Evidence for an enzyme isomerisation by studies of inhibition by tricarboxylis acids // J. Biol. Chem. -1974. V. 249, № 19 - P. 6149-6155.

197. Villafranca J., Mildvan A. The mechanism of aconitase action. Magnetic resonance studies of the complex of enzyme, manganese, iron and substrates // J. Biol. Chem. 1971. - V. 246, № 18. - P. 5791-5798.

198. Vogel R, Wiesinger H, Hamprecht B, Dringen R. The regeneration of reduced glutathione in rat forebrain mitochondria identifies metabolic pathways providing the NADPH required // Neurosci Lett. 1999. - V. 275, № 2. - P. 97100.

199. Ward R.J, Kuhn L.C, Kaldy P, Florence A., Peters T.J, Crichton R.R. Control of cellular iron homeostasis by iron-responsive elements in vivo // Eur. J. Biochem. 1994. - V. 220, № 3. - P. 927-931.

200. Welsh N, Sandler S. Protective action by hemin against interleukin-1 beta induced inhibition of rat pancreatic islet function // Mol. cell, endocrinol. 1994. -V. 103, №1-2. -P. 109-114.

201. Wilson T.J, Bertrand N, Tang J.L. The rpfA gene of Xanthomonas campestris pathovar campestris, which is involved in the regulation of pathogenicity factor production, encodes an aconitase // Mol. Microbiol. 1998. -V. 28, №6.-P. 961-970.

202. Yamada K, Senzaki K, Komori Y, Nikai T, Sugihara H, Nabeshima T. Changes in extracellular nitrite and nitrate levels after inhibition of glial metabolism with fluorocitrate // Brain Res. 1997. - V. 762, № 1-2. - P. 72-78.

203. Yan L.J, Levine R.L, Sohal R.S. Oxidative damage during aging targets mitochondrial aconitase // Proc. of the nation, acad. of sci. of the USA. 1997. -V. 94, №21.-P. 11168-11172.

204. Yeung D, Oliver I.T. Gluconeogenesis from amino acids in neonatal rat liver // Biochem. J. 1967. - V. 103, № 3. - P. 744-748.

205. Zatta P, Lain E, Cagnolini C. Effects of aluminum on activity of krebs cycle enzymes and glutamate dehydrogenase in rat brain homogenate // Eur. J. Biochem. 2000. - V. 267, № 10. - P. 3049-3055.142

206. Zheng L., Andrews P.C., Hermodson M.A., Dixon J.E., Zalkin H. Cloning and structural characterization of porcine heart aconitase // J.Biol.Chem. 1990. -V. 265, №5-P. 2814-2821.

207. Zheng L., Kennedy M.C., Beirnet H., Zalkin H. Mutational analysis of active site residues in pig hearts aconitase // J. Biol. Chem. 1992. - № 267. - P. 78957903.

208. Zheng W., Ren S., Graziano J.H. Manganese inhibits mitochondrial aconitase: a mechanism of manganese neurotoxicity // Brain Res. 1998. - V. 799, № 2. -P. 334-342. \

209. Zheng W., Zhao Q., Slavkovich V., Aschner M., Graziano J.H. Alteration of iron homeostasis following chronic exposure to manganese in rats // Brain Res. -1999. V. 833, № 1. - P. 125-132.

210. Zhuang H.Y., Varey Y.E., Faridon K.J. Kinetics of activation of aconitase and related studies // J. Inorg. Biochem. 1992. - V. 43, № 2-3. - P. 254 -255.