Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Образование органических кислот, нуклеотидов и их производных иммобилизованными клетками Propionibacterium Shermanii

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Иконников, Николай Павлович

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. ЖИВЫЕ ИММОБИЛИЗОВАННЫЕ КЛЕТКИ КАК ПОШФЕИШТНЫЕ ЕИОКАТМИЗАТОРЫ ТРАНСФОРМАЦИИ И БИОСИНТЕЗА ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ

1.1. Методы иммобилизации клеток микроорганизмов

1.1.1. Адсорбция.

1.1.2. Ковалентное и поперечное связывание

1.1.3. Включение и инкапсулирование.

1.2. Преимущества использования иммобилизованных клеток

ГЛАВА 2. БИОСИНТЕТИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ, ОСУЩЕСТВЛЯЕМЫЕ ЖИВЫМИ

МИКРООЕГАНИашШ, ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ ВКЛЮЧЕНИЕМ.

2.1. Использование иммобилизации клеток для стабилизации активности ферментов.

2.2. Иммобилизованные клетки, осуществляющие реакции биосинтеза в полноценных питательных средах.

2.3. Процессы, осуществляемые живыми иммобилизованными включением клетками микроорганизмов в средах, лишенных азота.

2.4. Получение органических кислот с помощью иммобилизованных клеток микроорганизмов.

ГЛАВА 3. ЭНДОГЕННЫЙ МЕТАБОЛИЗМ И ФИЗИОЛОГИЯ ГОЛОДАЮЩИХ

БАКТЕРИЙ

3.1. Особенности инкубирования живых иммобилизованных клеток бактерий

3.2. Эндогенный метаболизм и выживание толодаодих бактерий

3.3. Эксяфецш внутриклеточных метаболитов микроорганизмами при стрессовых воздействиях

ГЛАВА 4. ПУТИ ПОВЫШЕНИЯ АКТИВНОСТИ И СТАБИЛЬНОСТИ РАБОТЫ

БИОКАТАЛИЗАТОРОВ.

4.1. Повышение активности и стабильности иммобилизованных клеток путем изменения условий инкубирования

4.2. Возможные пути реактивации биокатализаторов с живыми иммобилизованными клетками.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА 6. УСЛОВИЯ ОБРАЗОВАНИЯ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ КЛЕТКАМИ.

6.1. Динамика кислотообразования иммобилизованными в

ПААГ клетками Propionibacterium shermanii

6.2. Влияние компонентов иммобилизирукяцей смеси на активность биокатализатора.

6.3. Значение функциональной целостности иммобилизованных клеток для осуществления ими полиферментативного процесса

ГЛАВА 7. ОПТИМИЗАЦИЯ РАБОТЫ БИОКАТАЛИЗАТОРА. УВЕЛИЧЕНИЕ

СТАБИЛЬНОСТИ И АКТИВНОСТИ.

7.1. Оптимизация основных условий работы иммобилизованных клеток Propionibacterium shermanii ♦

7.2. Влияние факторов инкубирования на активность и стабильность биокатализатора.

7.2.1. Влияние частоты смены инкубационного раствора на стабильность кислотообразования

7.2.2. Влияние температуры на стабильность биокатализатора.

7.2.3. Влияние концентрации K/Nar-фосфатного буфера на стабильность работы биокатализатора

7.2.4. Влияние ионов железа на стабильность работы иммобилизованных клеток Pr.shermanii.

7.2.5. Влияние источника углерода и энергии на стабильность и активность работы биокатализатора

7.3. Возможности регуляции с&гношения кислот (пропионо-вая: уксусная) в получаемом продукте.

7.3.1. Влияние температуры на соотношение кислот

7.3.2. Влияние углеродных субстратов на соотношение кислот в получаемом продукте.

7.4. Образование органических кислот иммобилизованными в ПААГ клетками Pr.shermanii при проточном инкубировании

ГЛАВА 8. РЕАКТИВАЦИЯ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ КЛЕТОК Pr.shermanii

ГЛАВА 9. ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕОТИДОВ И ИХ ПРОИЗВОДНЫХ ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ В ПААГ КЛЕТКАМИ БАКТЕРИИ.

9.1. Состав и динамика выделения дериватов нуклеиновых кислот иммобилизованными в ПААГ клетками Pr.shermanii

9.2. Условия выделения дериватов нуклеиновых кислот и белков иммобилизованными клетками Pr.shermanii

9.3. Рибосомальная РНК - основной источник выделяемых нуклеотидов и их производных.

ГЛАВА 10. ЭЛЖТРОННОМИКРООКОПИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОКАТАЛИЗАТОРА В ПРОЦЕССЕ ЕГО ДЛИТЕЛЬНОГО ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ И РЕАКТИВАЦИИ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Образование органических кислот, нуклеотидов и их производных иммобилизованными клетками Propionibacterium Shermanii"

Новым направлением в биотехнологии является использование иммобилизованных клеток микроорганизмов как биокатализаторов различных реакций трансформации и биосинтеза органических веществ, необходимых человеку. Иммобилизованные клетки мищюорга-низмов применяют для получения в промышленном масштабе аминокислот, углеводов, стероидов, антибиотиков, кофакторов. Их применяют также для очистки сточных вод и в аналитических целях. В ближайшей перспективе возможно промышленное применение десятков процессов на основе таких биокатализаторов. Интерес к иммобилизованным клеткам определяется их технологическими и биологическими преимуществами: легкостью автоматизации процессов, возможностью регуляции активности биокатализаторов, большей стабильностью и удешевлением производства.

Активность и стабильность биокатализаторов на основе живых иммобилизованных клеток является самым существенным вопросом их практического применения. Поэтому разработка методов стабилизации и увеличения активности биокатализаторов является важной задачей в этой области. Решение этих задач невозможно без изучения основных физиолого-биохимических и популяционных особенностей живых микробных клеток в иммобилизованном состоянии.

Органические кислоты широко используют в производстве полимеров, в фармацевтике, текстильной промышленности и в других областях народного хозяйства. Большую часть органических кислот в настоящее время получают путем органического синтеза. Однако для пищевой и фармацевтической промышленности их получают микробиологическим путем. Пропионовая кислота находит применение как консервант влажного зерна (witting, 1981), пищевых продуктов, в силосовании кормов, обогащении соков растений (Рамниеце и др., 1981). Ею можно пропитывать упаковочные материалы с целью предотвращения развития микрофлоры на пищевых продуктах при хранении.

Большое значение приобретает использование в пищевой и фармацевтической промышленности различных 5 * -мононуклеотидов, нук-леозидов и их производных (Федоров, 1979). Они усиливают аромат и вкус пищевых продуктов и используются как антиоксиданты. Наряду с собственно мшфобиологическим синтезом нуклеотидов и их производных, важное значение при их получении могут иметь микробиологические трансформации нуклеотидов и энзиматическое расщепление нуклеиновых кислот с последующим фракционированием полученных продуктов гидролиза (Безбородов, 1982). Поэтому внутриклеточная деградация нуклеиновых кислот и условия ее проведения представляют большой интерес.

Настоящая работа посвящена изучению физиолого-биохимических особенностей живых иммобилизованных в полиакриламидный гель (ПААГ) клеток Propionibacterium shermanii С целью ВОЗМОЖНОГО получения с помощью биокатализатора органических кислот, нуклеотидов и их производных.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Иконников, Николай Павлович

выводы

1. Показана возможность получения органических кислот и производных нуклеотидов с помощью иммобилизованных клеток пропионо-вокислых бактерий.

2. Изучены закономерности функционирования живых иммобилизованных В полиакриламидный гель клеток Pr , sbermanii и установлено, что активность и стабильность биокатализатора определяется их структурной и функциональной целостностью, а также активностью эндогенного метаболизма.

3. Показано, что процесс образования кислот происходит как при периодическом, так и проточном инкубировании биокатализатора. Установлено, что условия оптимальные для активности биокатализатора не являются таковыми в отношении его стабильности, поэтому промежуточные значения величин некоторых факторов являются более лучшими для работы биокатализатора.

4. Предложено два пути повышения активности и стабильности биокатализатора, основанных на поддержании эндогенного метаболизма иммобилизованных клеток и размножении клеток в гранулах геля в результате периодической реактивации биокатализатора.

5. Примененный метод реактивации продлевает время функционирования биокатализатора в 5-6 раз с сохранением 100 % активности в течение 40 суток непрерывного функционирования.

6. Показано, что образование и экскрекция нуклеотидов и их производных иммобилизованными клетками является следствием деградации преимущественно рибосомальной РНК.

7. В результате проведенного электронномикроскопического исследования изучена структура иммобилизованных клеток и их распределение в гранулах геля. Иммобилизованные клетки Pr.shermanii сохраняют свою морфологию и структурную целостность. В процессе длительного инкубирования и периодической реактивации биокатализатора клетки распределены по всей глубине гранул геля.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Используя иммобилизованные клетки Pr.shermanii как модель иммобилизованной полиферментной системы пропионовокислого брожения выяснили некоторые закономерности и особенности функционирования, оптимизации и повышения активности такого рода биокатализаторов.

После иммобилизации клеток Pr.shermanii в ПААГ они остаются живыми и способны осуществлять полиферментативный процесс пропионовокислого брожения в безазотистой среде. Иммобилизация клеток пропионовокислых бактерий позволяет многократно использовать биомассу для получения пропионовой и уксусной кислот. Эти кислоты используют как консервант влажного зерна, некоторых пищевых продуктов, кормов. Кислотообразующая активность в результате иммобилизации снижается на 20-30 % от таковой у свободных клеток. В цроцессе длительного функционирования на глюкозе биокатализатор теряет активность медленнее, чем свободные клетки и его активность коррелирует с количеством живых клеток. Установлено, что снижение активности в результате иммобилизации связано с отравлением некоторого количества живых клеток и не зависит от массо-обменных затруднений, создаваемых гранулами геля.

Для поддержания активного функционирования иммобилизованных клеток важен эндогенный метаболизм. Ингибирование кругооборота белков хлорамфениколом приводит к более быстрому снижению жизнеспособности и, соответственно, кислотообразующей активности клеток Pr.shermanii при длительном инкубировании их в голодной по азоту среде. Исходя из этого, а также учитывая способность иммобилизованных клеток размножаться в гранулах геля возможным способом стабилизации живых иммобилизованных клеток может быть поддержание эндогенного метаболизма и частичного размножения клеток в гранулах геля. Структурная и функциональная целостность живых иммобилизованных клеток является необходимым условием осуществления ими многоступенчатого полиферментативного процесса.

Путем повышения активности биокатализатора является оптимизация условий его работы. Установлено, что оптимальными условиями кислотообразования являются рН 7,0, температура 42°, количество сырой биомассы в 10 мл геля 1,75-2 г, инкубационный раствор состоит из 0,05 М K/Ueu-фосфатного буфера (рН 7,0) с 0,1 % Mgso^ и 2 % глюкозы в присутствии ионов двухвалентного железа. Однако нами было обнаружено, что условия, оптимальные для активности биокатализатора не являются оптимальными в отношении его стабильности. При более частой смене инкубационного раствора или увеличении скорости протока цроисходит более быстрая инактивация биокатализатора, вероятно, вследствие более быстрого вымывания автоли-зата клеток из гранул и потери клетками низкомолекулярных компонентов. Это приводит к более глубокому азотному голоданию, дестабилизации эндогенного метаболизма и отмиранию клеток. В процессе длительного инкубирования биокатализатора при оптимальной в отношении активности температуре 42° цроисходит более быстрое снижение кислотообразующей активности, чем при 37° и 30°. Мы связываем это с более быстрой деструкцией внутриклеточных компонентов, а не с термоинактивацией, так как установлено, что иммобилизованные клетки Pr.shermanii более термостабильны. Оптимальной температурой для длительной работы исследуемого биокатализатора является 37°. Эта температура обеспечивает достаточную стабильность и более высокую активность, чем при 30°. Уменьшение стабильности и увеличение активности при повышении температуры является интересной особенностью голодающих по азоту иммобилизованных клеток Pr.shermanii, так как другие авторы отмечают отрицательное влияние повышенных температур на активность клеток (Егоров и др.,

1978). Кроме этого, стабильность биокатализатора зависит от ионной силы инкубационного раствора. Таким образом, живые иммобилизованные клетки, осуществляющие полиферментативные процессы необходимо оптимизировать не только в отношении активности, но и в отношении стабильности биокатализатора при длительном функционировании.

Активность и стабильность иммобилизованных клеток Pr.shermanii значительно изменялась при использовании различных субстратов. Наибольшее количество кислот образуется при использовании лактата, наименьшее при использовании глицерина. Стабильность при длительном инкубировании, наоборот, была наименьшей на лактате и максимальной на глицерине. Глюкоза занимает промежуточное положение по этим параметрам.

Изменяя природу субстрата, удалось изменять соотношение кислот цропионовая:уксусная в продукте. При использовании лактата соотношение кислот цропионовая: уксусная сдвинуто в сторону уксусной кислоты, так как путь образования уксусной кислоты из лактата в 3 раза короче (по числу ферментов), чем путь образования пропио-ната. Это объясняет также увеличение суммарного выхода органических кислот в этих условиях. Меньшая стабильность связана по-видимому с энергетическими затруднениями, испытываемыми иммобилизованными клетками Pr.shermanii при использовании лактата. Меньшее образование органических кислот биокатализатором при использовании глицерина определяется, видимо тем, что он в гораздо большей степени, чем лактат включается в конструктивный обмен пропионовокислых бактерий, ибо конструктивный метаболизм в ослабленном виде продолжает функционировать у голодающих клеток (Воробьева, 1976) и труднее окисляется. Состав получаемого продукта можно менять, если использовать для сбраживания разные субстраты. На глюкозе количество образуемой цропионовой кислоты в 2,5 раза больше, чем уксусной в первое время работы биокатализатора. При использовании лактата образуется больше уксусной кислоты. Принципиальная возможность регуляции состава продуктов биокатализатора субстратом представляется нам перспективной для иммобилизованных клеток, осуществляющих различные типы брожений.

Одним из преимуществ иммобилизованных клеток является возможность создания цростых автоматизированных способов их использования. Оптимальные условия инкубирования гранул в протоке субстрата в термостатируемой колонке лишь незначительно отличаются от таковых для гранул в полунепрерывных условиях инкубирования. Так для более полного использования субстрата при оптимальной скорости протока потребовалось снизить его содержание с 2 % до I Основным параметром, определяющим стабильность биокатализатора при проточном инкубировании была линейная скорость протока. Динамика кислотообразующей активности в колонке почти не отличалась от таковой в полунепрерывных условиях инкубирования. Установлена возможность использования молочной сыворотки, являющейся отходами молочной промышленности в качестве субстрата для иммобилизованных клеток, инкубируемых в протоке. Выход кислот при использовании 10$ молочной сыворотки при этом был сравним с таковым на глюкозе.

Известно, что голодание по азоту вызывает у микроорганизмов перестройку метаболизма для более экономичного использования азота (Dawes, 1976). Функционирующий в голодных условиях эндогенный метаболизм осуществляет в первую очередь деградацию запасных веществ, РНК и белка, которые могут использоваться клеткой, способствуя лучшей их выживаемости в неблагоприятных условиях. Иммобилизованные клетки Pr.shermanii, голодая по азоту, осуществляют деградацию РНК в присутствии источника энергии. В результате деградации биокатализатор выделяет в инкубационный раствор различные дериваты нуклеиновых кислот: основания, нуклеозиды и нуклеотиды. Процесс выделения замедляется в црисутствии ионов магния. Преимущественно деградируется РНК рибосомальной фракции. Отметим, что деградация рибосомальной РНК Pr.shermanii происходит медленнее, чем у Arthrobacter citreus, также экскретирующего близкие количества дериватов нуклеиновых кислот. Все это свидетельствует о менее активном эндогенном метаболизме анаэробной, точнее микроаэрофильной Pr.shermanii, что возможно, способствует ей эффективно функционировать в иммобилизованном состоянии в условиях азотного голодания.

Другим путем повышения активности и стабильности биокатализатора (кроме оптимизации) является его реактивация питательными веществами. Иммобилизованные клетки Pr.shermanii, выполняя технологическую функцию биокатализатора, лишены полноценной питательной среды и сохранение их активности обусловлено основным обменом. Стабильность и активность биокатализатора зависит от жизнеспособности, структурной и функциональной целостности клеток. Учитывая вышеназванные особенности иммобилизованных, голодающих по азоту клеток Pr.shermanii можно считать, что реактивация биокатализатора связана как с поддержанием основного обмена иммобилизованных клеток без интенсивного их размножения, так и с активным размножением клеток внутри гранул геля, пропорциональным или несколько меньшим, чем отмирание старых клеток. Соответственно этому биокатализатор подвергали периодическим экспозициям с компонентами питательной среды в лимитированных концентрациях и полноценной средой. Во всех случаях наблюдается увеличение стабильности кислотообразования. Максимальный эффект оказывает ростовая среда и сульфат аммония. В этом случае увеличение активности было следствием размножения клеток внутри гранул геля. О размножении клеток свидетельствовало увеличение содержания ДНК, РНК и белка в единице геля после реактивации и электронно-микроскопические наблюдения. Повышение активности биокатализатора до бесконечности невозможно вследствие ингибирования клеток продуктами брожения. Поэтому активность биокатализатора снижается через некоторое время после реактивации и остается постоянной на более низком уровне или осцилирует. Ингибирование продуктами брожения происходит видимо, вследствие накопления их непосредственно в мшфоо!фу-жении иммобилизованных клеток, так как высока плотность клеток в гранулах. Ингибирующее действие образуемых кислот цри инкубировании в протоке не снимается цри установленной оптимальной скорости протока 10 мл/час. Обеспечение периодического размножения клеток в гранулах геля легко осуществимо. А подобрать режим реактивации для конкретного биокатализатора не составляет особого труда. Поэтому этот метод реактивации представляется нам наиболее перспективным. Реактивация компонентами питательной среды для поддержания эндогенного метаболизма целесообразна в случае необходимости сохранения однородного состава продуктов и в некоторых других.

Электронномикроскопическим методом установили, что клетки в результате иммобилизации равномерно распределены в гранулах геля. Иммобилизованные клетки сохраняют характерную для интактных клеток размеры, морфологию и структуру. В процессе длительного инкубирования в безазотистой среде часть клеток лизируется, некоторые удлиняются. После реактивации полноценной средой значительно увеличивается количество клеток на поверхности гранул и в меньшей степени внутри их. При длительном инкубировании биокатализатора без реактивации происходит постепенный лизис клеток. Они исчезают с поверхности гранул, увеличивается количество поврежденных клеток. При периодической реактивации биокатализатора полноценной для роста питательной средой клетки не изменяли своих размеров и морфологию, сохранялись как на поверхности, так и внутри гранул геля. На поверхности гранул появляются разрывы, в которых видны скопления клеток. Таким образом, структура клеток Pr.shermanii в иммобилизованном состоянии весьма стабильна.

В результатепцоведенного исследования показана возможность длительного, непрерывного образования летучих органических кислот с помощью иммобилизованных в ПААГ клеток Propionibacterium shermanii. Примененный, метод реактивации позволяет цродлить время функционирования биокатализатора в 5-6 раз с сохранением 100 % активности и соотношением кислот пропионовая:уксусная близким 2:1. Производительность биокатализатора при инкубировании в протоке в оптимизированных условиях составила около 3400 мкмолей пропионо-вой и 1700 мкмолей уксусной кислоты в 100 мл переработанного двумя граммами иммобилизованных клеток инкубационного раствора (I % глюкозы в к/иа-фосфатном буфере). Пропионовую и уксусную кислоты можно получать с помощью исследуемого биокатализатора на отходах сыроваренного производства - молочной сыворотке с хорошим выходом.

Кроме возможного практического применения полученные результаты мо1ут иметь научно-прикладную и теоретическую ценность. Исследованный биокатализатор является хорошей моделью полиферментативного цроцесса, осуществляемого иммобилизованными анаэробными микроорганизмами и могут быть положены в основу разработки других биокаталитических систем на основе живых иммобилизованных клеток. Принципы выбора объекта и оптимизации процесса могут найти применение в лабораторной и производственной практике. Исследования физиолого-биохимических особенностей иммобилизованных клеток Рг. shermanii в условиях азотного голодания важны в теоретическом плане исследования голодающих клеток. Выделение дериватов нуклеиновых кислот является следствием деградации рибосом в условиях азотного голодания. Исследованиями популяционных закономерностей иммобилизованных анаэробных клеток установлены некоторые отличия от таковых у иммобилизованных аэробных микроорганизмов.

133

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Иконников, Николай Павлович, Москва

1. Аринбасарова А.Ю., Кощеенко К. А. Трансформация стероидов адсорбированными на целлюлозе клетками Mycobacterium globiforme 193. В кн.: Иммобилизованные клетки микроорганизмов. Теория и практика. Цущино, 1978, с.101-112.

2. Аринбасарова А.Ю., Кощеенко К.А. Ковалентное связывание клеток с активированным силикагелем. Прикл. биохим. и микробиол., 1980, т.16, J& 6, с.854-861.

3. Баранова И.П., Козлова Ю.Н., Егоров Н.С. К воцросу об иммобилизации ферментов и клеток микроорганизмов. Вест. Моск. Ун-та, серия 16 биология, 1981, & 3, с.72-78.

4. Барышникова Л.М., Сандашов Ч.М., Монахова Е.В., Голов-лев Е.А. Дифференциация родов коринеподобных бактерий, синтезирующих аминокислоты и нуклеотиды. Микробиология, 1982, т.51, $ I, с.125-129.

5. Безбородов A.M. Микробиологический синтез нуклеотидов и их цроизводных. Журнал BI0 им. Д.И.Менделеева, 1982, т.27, Л 6, с.652-657.

6. Борман Е.А., Туркина М.В. Изучение особенностей иммобилизации и трансформации стеринов включенными в ПААГ клетками Mycobacterium phlei 1026. Прикл. биохим. и микробиол., 1983, т.19, 3, с.372-377.

7. Васильев Р.А., Цыренов В.Ж., Жданова Е.А. Изменение свободных мононуклеотидов цри созревании российского сыра. Прикл. биохим. и микробиол., 1979, т.15, Л 3, с.439-443.

8. Васильев Р.А., Цыренов В.Ж., Жданова Е.А. Экскреция нуклеотидов у молочнокислых бактерий. В кн.: Биол. микроорганизмов и их использование в нар. х-ве. Иркутск, 1977, с.122-130.

9. Венкстерн Т.В., Баев А.А. Спектры поглощения минорныхоснований их нуклеотидов и некоторых олигорибонуклеотидов. -М.: Наука, 1965, 79 с.

10. Воробьева Л.И. Пропионовокислые бактерии и образование витамина В12. М.: МГУ, 1976, - 264 с.

11. Воробьева Л.И., Алексеева М.А., Суркова И.Г., Гайтан В.И. Образование летучих кислот иммобилизованными клетками про-пионовокислых бактерий. Дрикл. биохим. и микробиол., 1977, т.13, Jfc 4, с.531-538.

12. Гавриленко В.Ф., Ладыгина М.Е., Хандобина Л.М. Большой практикум по физиологии растений. М.: Высш. школа, 1975, - 392 а

13. Долобовская А.С. Роль иммобилизованных клеток в процессах биологической очистки сточных вод. В кн.: Биотехнологияи биоинженерия: Тез. докл. симп., Рига, 1978, т.2, с.63.

14. Дубицкая С.Д., Мамонова Л.П. Использование эндогенных субстратов дрожжами Candida tropicalis Л-2 в отсутствие: внешних источников питания. Тр. Ин-та микробиол. и вирусол. АН Каз.ССР, 1982, т.27, с.10-20.

15. Егоров Н.С., Баранова И.П., Козлова Ю.И. Образование низина иммобилизованными клетками молочнокислой бактерии strep tococcus lactis. Антибиотики, 1978, т.23, Л 10, с.872-874.

16. Жарова В.В., Иванова Л.А., Грачев Ю.П. Влияние микроэлементов на образование кислот и этилового спирта Saccharomyces cerevisiae. Микробиология, 1977, т.46, Л 3, с.423-427.

17. Зуева Н.Н., Яковлева В.И., Авсюк И.В., Арене А.К., Фечина В.А., Березин И.В. Стабильность биокатализаторов синтеза 1-аспарагиновой кислоты на основе иммобилизованных клеток Escherichia coli . Дрикл. биохим. и микробиол., 1982, т.18, № 5,с.681-687.

18. Ибрагимова С.И., Неронова И.М., Работнова И.Л. Влияние ИОНОВ водорода на некоторые свойства Propionibacterium shermanii. Микробиология, 1971, т.40, & 5, C.&33-837.

19. Иммобилизованные ферменты. /Под ред. Березина И.В., Антонова В.К., Мартинека К. М., МГУ, 1976. - 296 с.

20. Кислухина О.В., Шевчук М.П. Изучение автолиза клеток Bacillus subtilis. Микробиол. промышл., 1976, $ 9, с.14-16.

21. Козлова Ю.И., Баранова И.П., Егоров Н.С. Физиологические особенности иммобилизованных клеток streptococcus lactis штамм МГУ. Антибиотики, 1980, т.25, Ш II, с.870-874.

22. Коротяев А.И. Рибосомальный аппарат бактериальной клетки. Науч. Тр. Кубан. мед. ин-та, 1978, т.63, с.196-198.

23. Кощеенко К.А. Иммобилизованные клетки. В кн.: Итоги науки и техники. ВИНИТИ АН СССР. Серия микробиология, 1981а, т.II, с.55-117.

24. Кощеенко К.А. Живые иммобилизованные клетки как биокатализаторы процессов трансформации и биосинтеза органических соединений. Прикл. биохим. и микробиол., I98I6, т.17, № 4, с.477-493.

25. Кулис Ю.Ю., Швирмицкас Г.-Ю.С., Антановичгос B.C., Войт-кявичюс Р.К. Ингибирование цитохрома Bg акриламидом. Биохимия, 1982, т.47, J& 4, с.582-586.

26. Лищенко Н.Н. Закономерности деградации и ресинтеза рибосом у бактерий при экстремальных воздействиях. Научн. тр. Кубан. мед. ин-та, 1978, т.63, с.209-211.

27. Луста К.А., Краснова Л.А., Кощеенко К.А., Фихте Б.А., Скрябин Г.К. Ультраструктурные изменения клеток Bacillus megate-rium, иммобилизованных в полиакриламидном геле. Докл. АН СССР, 1976, т.227, Jfi 2, с.469-475.

28. Луста К.А., Старостина Н.Г., Фихте Б.А. Действие акрил-амида на клетки Escherichia coli. Микробиология, 1982, т.51,1. J& 6, с.937-940.

29. Миронова Г.Н., Петухова Н.И., Максименко В.Н., Николаев П.И. Способ получения диоксиацетона. А.С. (СССР), кл. CI2P7/26, В 857264, 1981.

30. Никулина Г.Н. Методы определения нуклеотидов в растениях. Л.: Наука,. 1980. - 88 с.

31. Переверзева А.Л., Воробьева Л.И. Продуцирование органических кислот свободными и иммобилизованными клетками цропионово-кислых бактерий. Изв. Тимирязев, с.-х. акад., 1982, № 3, с.23-26,

32. Перт С.Дж. Основы культивирования мшфоорганизмов и клеток. М.: Мир, 1978. - 333 с.

33. Пинуев И.О. Микробиологический синтез АТФ.: Автореф. Дис. . канд. биол. наук. МТИПП, 1978. - 24 с.

34. Практикум по микробиологии /Под ред. Егорова Н.С. -М.: МГУ, 1976. 307 с.

35. Практикум по физико-химическим методам в биологии /Под ред. Литвина Ф.Ф. М.: МГУ, 1981. - 240 с.

36. Работнова И.Л., Позмогова Й.Н. Хемостатное культивирование и ингибирование роста микроорганизмов. М.: Наука, 1979, -208 с.

37. Рамниеце В.Э., Марауска М.К., Бекер М.Е. Пропионовокис-лые бактерии и перспективы их использования цри сбраживании растительных соков. Изв. АН Латв. ССР, 1981, # 2, с.96-104,

38. Сборник методических разработок к спецпрактикуму по химии белка и нуклеиновых кислот /Под ред. Прокофьева М.А. и Богданова А.А. М.: МГУ, 1971, - 174 с.

39. Сиушева А.Г., Давидова Е.Г., Рачинский В.В. Обновление углерода у дрожжей в условиях азотного голодания. Изв. Тимирязев. с.-х. акад., 1983, $ I, с.121-125.

40. Скрябин Г.К., Суходольская Г.В., Кощеенко К.А. Особенности трансформации гидрокортизона клетками, включенными в ПААГ.- Изв. АН СССР, Сер. биол., 1979, 3 2, с.165-172.

41. Современные методы в биохимии /Под ред. Ореховича В.Н.- М.: Медицина, 1964. 348 с.

42. Старостина Н.Г., Дуста К.А., Фихте Б.А. Влияние некоторых факторов иммобилизации в полиакриламидном геле на жизнеспособность популяции клеток Escherichia coli Вт Прикл. биохим. и микробиол., 1982, т.18, В 2, с.255-230.

43. Суходольская Г.В. Трансформация стероидных соединений клетками Arthrobacter globiformis 193, иммобилизованными в поли-акриламидный гель.: Автореф. Дис. . канд. биол. наук. ИБФМ*1981. 24 с.

44. Федоров Н.А. Биологическое и клиническое значение циклических нуклеотидов. М.: Медицина, 1979. - 184 с.

45. Филиппов С.А., Авакяну С.П., Бартенев Ю.С. Условия иммобилизации клеток микроскопических грибов и их применение для ферментативного гидролиза крахмала. Фермент, и спирт, пром-сть,1982, № 2, с.30-31.

46. Хроматография на бумаге /Под ред. Хайса И.М. и Мацека К.М. М.: Иностр. литер., 1962, - 851 с.

47. Яковлева В.И. Получение природных аминокислот при помощи биоорганических катализаторов. В кн.: Итоги науки и техники. ВИНИТИ АН СССР. Сер. биологич. химии, 1978, т.12, с.140-152.

48. Abbot B.J. Preparation of pharmaceutical compounds by immobilized enzymes and cells. Adv. in Appl. Microbiol., 1976, v.20, p.203-257.

49. Adlercreutz P., Hoist 0., Mattiasson Bo. Oxygen supply to immobilized cells; 2. Studies on a coimmobilized algae bacteria preparation with in situ oxygen generation. - Enzyme and

50. Microbiol. Technol., 1982, v.4, Ho.6, p.395-400.

51. Akinyanju I.I., Smith R.J. Accumulation of pp Gpp and PPP GPP during nitrogen starvation of cyanophyte Anabaena cylind-rica. FEBS, betters, 1979, v.107, He.1, p.173-176.

52. Albrecht I.E., Tatini S.R. A method to measure piruvate in Milk. J. Milk Pood Technol., 1976, v.39, So.11, p.776-777.

53. Amin G., Verachtert H. Comparative study of ethanol production by immobilized cell systems using Zymomonas mobilis or Saccharomyces bayanus. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.14, Ho.2, p.59-63.

54. Boylen C.W., Ensign I.S. Long-term starvation survival. . .of rod and spherical cells of Arthrobacter crystallopoietes* -J. of Bacteriol., 1970, v.103, Ho.2, p.569-577.

55. Boylen C.W., Gordon C.R. Effects of transient inhibition of protein -synthesis on-survival during-starvation in Arthrobacter crystallopoientes. In.: Abstr. Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol., Washington, D.C., 1980, 93 p.

56. Boylen C.W., Mulks M.H. The survival of coryneform bacteria during periods of prolonged nutrient starvation. J. of Gen, Microbiol., 1978, v.105, Ho.2, p.329-334.

57. Briffand I., Engasser IJM. Citric acid production by free and immobilized yeast. Kinetic effects of oxygen diffusional limitations. In.: 1-st Eur. Congr. Biotechnol., Interlaken, 1978, Prepr., Part 2. P/M, 1978, p.133-134.

58. Bridger W.A., Paranchych W. Gyanosine thetraphosphate: coordinater of metabolic response to nitrogen starvation in enter-bacteria. Trends Biochem.,Sci., 1979, v»4, Ho.8, p.176-179.

59. Brodelius P. Industrial application of immobilized bioca-talysts. Adv. Biochem. Eng., 1978, v.10, p.75-129.

60. Brodelius P., Mosbach K. Immobilized enzyme cell systemfor the production of L-ke to acids, Patent PCT, IPC1. C12 P 7/50; C12 E 11/00, 1980.

61. Chibata I. Development of enzyme engineering-application of immobilized cell system. In.: Pood Process Eng. Prog. 2 nd Int. Congr. Eng. and Pood 8 th Eur. Pood Symp. Helsinki, 1979, London, 1980, v.2, p.1-26.

62. Chibata I., Tosa T. Transformation of organic compounds by immobilized microbial cells. Advances in Appleid Microbiology, 1977, v.22, p.1-27.

63. Chibata I., Tosa T. Use of immobilized cells. Annu. Rev. Biophys. and Bioeng. Palo Alto, Calif., 1981, v.10, p.197-216.

64. Couders R., Baratti J. Immobilized yeast cells with methanol oxidase activity preparation and enzymatic properties. -Biotechnol» and Bioeng., 1980, v.22, No.6, p.1155-1174.

65. Dawes E.A. The endogenous metabolism and the survival of starved procurictes. In.: The survival of vegetative microbes: 26 Symp. of the society for gen. microb. Cambridce Univ. press, 1976, p.19-53.

66. Dawes E.A., Ribbons D.W. The endogenous metabolism of microorganisms. Annual review of microbiology, 1962, v.16, p.241-264.

67. Divies С., Siess М.Н. Study of L-malic acid catabolism by Lactobacillus casei cells immobilized into PAAG latlice. -Ann. Microbiol., ser.B, 1976, v.127, Ho.4, p.525-539»

68. Forberg C., Enfors S.-O., Haggstrom L. Control of immobilized, non-growing cell for continuous production of metabolites, Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1983, v.17, Ho.3, p.143-147.

69. Freeman A., Aharonowitz У. Immobilization of microbial cells in crosslinked, prepolymerized, linear polyacrylamide gels: antibiotic production by immobilized Streptomyces clavuligerus cells. Biotechnol. and Bioeng., 1981, v.23, Ho.12, p.2747-2759.

70. Fukui S., Tanaka A. Immobilized microbial cells.- Annu. Rev. Microbiol, Palo Alto, Calif., 1982, v.36, p.145-172.

71. Gainer I.L., Kirwan D.I., Poster I.A., Seyhan E. Use of- . t . ^adsorbed and covalently bound microbes in reactors. Biotechnol. and Bioeng. Symp., 1980, Ho.10, p.35-42.

72. Ghommlich C., Havarro J.M., Messing R.A. U study of acetic acid production by immobilized Acetobacter cells: Product inhibition effects. Biotechnol. and Bioeng., 1982, v.24, Ho.2, p.1991-1999.

73. Ghose Т.К., Bandyopandhyey K. Rapid ethanol fermentation in immobilized yeast cell reactor. Biotechnol. and Bioeng., 1980, v.22, Ho.7, p.1489-1496.

74. Hattori R., Growth Escherichia coli on the surface of an anion-exchange resin in continuous flow system. J. of Gen. Appl.

75. Microbiol., 1972, v.18, Ко.5, p.319-330.

76. Hattori R., Hattori Т., Furusaka C. Growth of bacteria on the surface of anionexchage resin. I. Experiment with bath culture. J. Gen. Appl. Microbiol., 1972, v.18, Ко.4, p.271-283.

77. Hatcher D.W., Goldstein G, Improved methods for determination of RKA and DM. Analyt. Biochem., 1969, v.31, Ко.1-3, p.42-50.

78. Johston G.C., Singer R.A., Mc Farlane S.E. Growth and cell division during nitrogen starvation of the yeast Saccharo-myces cerevisiae. J. Bacterid., 1977, v. 132, Ко.2, p.723-730.

79. Microbiol, technol., 1981, v.3, Ко.4, p.309-312.

80. Karube I., Susuki S., Okada T., Hikuma M. Microbial sensors for volatile compouds. Biochemie, 1980, v.62, Ho.8-9, p.567-573.

81. Karube I., Urano П., Matsunaga Т., Suzuki S. Hydrogen production from glucose by immobilized growing cells of Clostridium butyricum. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.16, Ho.1, p.5-9.

82. Kennedy J.F., Barker S.A., Humphreys J.D. Microbial cells living immobilized on metal hydroxides, Nature, 1976, v.261, Ho. 5557, p.242-244.

83. Kim H.S., Ryu D.Y. Continuous glutamate production using an immobilized whole cell system» - Biotechnol. and Bioeng.,1982, v.24, Mo.10, . p.2167-2174.■ • ' .

84. Klein Wagner P. Immobilized whole cells. Dechema Monogr., 1978, v.82, Ho.1693-1703, p.142-164.

85. Klibanov A.M. Review enzyme stabilization by immobilization. Anal. Biochem., 1979, v.93, Ho#1, p.1-25*

86. Kolot F.B. Hew trends in yeast technology immobilized cells. Process Biochem., 1980, v.15, Ho.7, p.2-4,6-8.

87. Komel R. Immobilizirane mikrobne celice. Vestn. Slov. kem. drust, 1982, v.29, Ho.1, p.57-72.

88. Koshcheenko K.A., Turkina M.V., Skryabin G.K. Immobilization of living microbial cells and their application for steroid transformations. Enzyme and Microbial Techolol., 1983, v.5, Ho.1, p.14-21.

89. Krouwel P.G., Groot W.I., Kossen H.W.F., Van der Laan W.P.M. Continuous isopropanol-butanol-ethanol fermentation by immobilized Clostridium beijerinckii cells in a packed bed fer-menter. Enzyme and Microbial Technol., 1983, v.5, No.1, p.46-54*

90. Kumakura M., Kaetsu I. Immobilization of Trichoderma ree-sei cells by radiation polymerization. Eur. J. Appl. Microbiol. and Biotechnol., 1983, v.17, Ho.3, p.197-198.

91. Lee Т.Н., Ahn J.C., Ryu D.D.Y. Perfomance of an immobilized yeast reactor system for ethanol production. Enzyme and Microbiol Technol., 1983, v.5, No.1, p.41-45,

92. Ledoy M.D., Gellf G,, Ergan P., Cocquempot M.F., Garde V.L., Thomas D. Immobilized multienzyme systems and organelles. J. Chem. Technol. and Biotechnol., 1982, v.32, No.1, p.170-178,

93. Lester D.E. Method of oxidising hidrocarbon using immobilized urable microbial cells,, Pat, No, 1545490, GB, 1975.

94. Loper S,, Goncedo J.M, Effects of metabolic conditions on protein turnover in yeast. Biochem. J., 1979, v.178, No.3, p.769-776,

95. Lowry 0,H,, Rosebrough N,J,, Parr A,L., Randal R.J. Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem,, 1951, v.193, No,1-2, p.265-275.

96. Maddox I.S., Dunnill P., Lilly M,D. Use of immobilized cells of Rhizopus nigricans for the 11СХГ-hydroxylation of progesterone. Biotechnol. and Bioeng,, 1981, v,23, No,2, p.345-354.

97. Manecke G., Beier W, Immobilisierung von corynebacteri-um simplex in thioliertem polyvinylalkohol zur mikrobiologischen steroidumwandlung. Angew. Makromol. Chem., 1982, v,104, N0,1613, Р.39-58,

98. Mattiasson В», Hahn-Hagerdal В. Microenvironmentae effects on metabolic toehaviour of immobilized cells, a hypothesis» Eur, J, Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.16, Ho.1, p.52-55.

99. Matin A., Veldhuis C., Stegeman V., Veenhuis M. Selective advantage of a Spirillum sp. in a carbonlimited enviroment. Accumulation of poly-^-hydroxybutyric acid and its role in starvation. J. Gen. Microbiol., 1979, v.112, Ho.2, p.349-355.

100. McGhee J.E., Jullian G., Detroy R.W. Continious and static fermentation of glucose to ethanol by immobilized Saccha-romyces cerevisiae cells of different ages. Appl. and Environ Microbiol., 1982a, v.44, Ho.1, p.19-22.

101. McGhee J.E., Jullian G#, Detroy R.W., Bothast R.I. Ethanol production by immobilized Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces uvarum and Zymomonas mobilis. Biotechnol. and Bioeng., 19826, v.24, Ho.5, p.1155-1163.

102. Meganthan R., Ensign I.C. Stability of Enzymes in starving Arthrobacter crystallopoietes. J. of Gen. Microbiol., 1976, v.49, Ho.1, p.90-96.

103. Mejbaum W. Uber die Bestimmung kleiner pentosemengen ins derivaten der Adenglsaure. Z. Physical. Chem., 1939, Bd 258, Ho. , s.265-271.

104. Messing R.A. Carriers for immobilized biologicaliy actives systems. Adv. Biochem. Eng., 1978, v.10, p.54-73.

105. Messing R.A. Immobilized microbes and a high-rate, continuous waste processer for the production of high btu gas and the reduction of pollutans. Biotechnol. and Bioeng., 1982, v.24, Ho.5, p.1115-1123.

106. Mink R.W., Hespell R.B, Starvation and survival of Selenomonas ruminantium. In.: Abstr. Annu. Meet. Amer. Soc*148• * ' *

107. Microbiol. Washington, D.C., 1980, p.86.133. ffiorikawa Y., Karube I., Suzuki S. Enhancement of penicillin acylase activity by cultivating immobilized Kluyvera cito-philla. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1980a, v.10, Ко.1-2, p.23-30.

108. Morikawa Y., Karube I., Suzuki S. Continuous production of bacitracin by immobilized living whole cells of Bacillus sp. Biotechnol. and Bioeng,, 19806, v.22, Ко.5, p.1015-1023.

109. Mosbach K., Birnbaum S., Hardy K., Davies J., Bulow L. Formation of proinsulin by immobilized Bacillus subtilis, -Kature, 1983, v.302, Ко.5908, p.543-545.

110. Murata K., Tani K., Kato I., Chibata I. Continuous production of glutathione by immobilized Saccharomyces cerevisiae cells. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1978, v.6, Ko.1, p.23-27.

111. Murata K., Tani K., Kato I., Chibata I. Glutatione production coupled with an ATP Regeneration system. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1980, v.10, Ко.1-2, p.11-21.

112. Murata K., Tani K., Kato I., Chibata I. Glutathione production by immobilized Saccharomyces cerevisiae cells containing an ATP Regeneration system. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1981, v.11, Ко.2, p.72-77.

113. Kavarro J.M., Durand G. Modification of yeast metabolism by immobilization onto porous glass. Eur. J. Appl. Microbiol., 1977, v.4, Ко.4, p.243-254.

114. Kavarro J.M., Durand G. Synchronisation de la croissan-ce de microorganismes immobilises sur des supports solides. -Ann. microbiol., 1981, 132, Ко.2, p.241-255.

115. Kavarro A.R., Rubio M.C., Callieri D,A,S. Productionof ethanol by .yeast immobilized in pectin, Eur, J, Appl. Microbiol. and Biotechnol., 1983, v.17, Ho.3, p.148-151.

116. Hazly H., Carter I.S., Knowles C.J. Adenine nucleotide pools during starvation of Beneckea natriegens. - J. Gen. Microbiol., 1980, v.116, Ho.2, p.295-303.

117. Hilson I., Ohlson S. Columnar denitrification of water by immobilized Pseudomonas denitriphicans cells. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.14, Ho.2, p.89-90.

118. Hiwa H., Yamadewa Y., Kuwajima Y. Leakade of cell components of Bordetella pertussis. J. of Bacterid., 1964, v.88, Ho.3, p.809-810.

119. Ohlson S., Larsson P.O., Mosbach K. Steroid transformation by activated living immobilized Arthrobacter simplex cells. Biotechnol. and Bioeng., 1978, v.20, Ho.8, p.1267-1284.

120. Ohlson S., Larsson P.O., Mosbach K. Steroid transformation by living cells immobilized in calcium alginate. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1979, v.7, Ho.2, p.103-110.

121. Okabayoshi Т., Yoshimoto A., Ide M. Occurence of nucleotides in culture fluids of microorganisms. V. Excretion of adenosine cyclic 3',5' phosphate by Brevibacterium liquefaciens sp. n. J. Bacteriol., 1963, v.86, Ho.5, p.930-936.

122. Okada T., Karube I., Suzuki S. Hibrid|urea sensor using nitrifying bacteria. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.14, Ho.3, p.149-154.

123. Ownby I.D., Shannahan M., Hood E. Protein syntesis and degradation in Anabaena during nitrogen starvation. J. Gen.

124. Microbiol., 1979, v.110, Ко.2, p.255-261.

125. Pelade G.E. A study of fixation for electron microscopy . J. Exp. Med., 1962, v.95, p.285-298.

126. Pines G., Preeman A. Immobilization and characterization of Saccharomyces cerevisiae in crosslinked, prepolymerized polyacrylamidehidrazide. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.16, Ho.2-3, p.75-80.

127. Pirt S.J. The maintenance energy of bacteria growing cultures. Proced. of the Royal Soc., 1965, Series. В., v.163, p.224-231.

128. Postgate I.R., Hunter I.R. The survival of starved bacteria. J. Gen. Microbiol., 1962, v.29, Ho.2, p.233-263.

129. Reynolds E.C. The use of leade citrate at high pH as. ' ■ -' - ' ' ian electronpaque strain in electron microscopy. J. of Cell.

130. Biology, 1963, v.17, Ho.2, p.208-212.t " / * ~ . ■ - " . ^ .

131. Rouxhet P.G., Yan Haect I.L., Didelez I., Gerard P., Briquet M. Immobilization of yeast cells by entrapment and adhesion using siliceous materials, Enzyme and Microbial. Technol., 1981, v.3, Mo.1, p.49-54.

132. Sarkar I.M., Mayandon I. Alanine synthesis by immobilized Corynebacterium dismutans cells. Biotechnol. Lett., 1983, v.5, Ho.3, p.201-206.

133. Sato Т., Tosa Т,, Chibata I. Continuous productionof 6-aminopenicillanic acid from penicillin by immobilized microbial cells. Eur. J. Appl. Microbiol., 1976, v,2, No.3, p.153-156.

134. Sawada H., Kinoshita S., Yoshida T,, Taguchi H. Continuous production of 12-ketochenodeoxycholic acid in a column reactor, containing immobilized living cells of Brevibacterium fuscum. J. Ferment Technol., 1981, v.59, No.2, p.111-114.

135. Shibai H., Enei H., Hirose G. Purine nucleosides fermentations. Process Biochem., 1978, v.13, No.11, p.6-8,32.

136. Siess M., Divies G. Behaviour of Saccharomyces cerevi-siae cells entrapped in a polyacrylamide gel and performing alcoholic fermentation. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1981, v.12, No.1, p.10-15.

137. Sitton O.C., Gaddy J.-I. Ethanol production in an inmio-bilized-cell reactor. Biotechnol. and Bioeng., 1980, v.22, N0.8, p.1735-1748.

138. Somerville H.I., Mason I.R., Ruffel R.N. Benzen degradation by bacterial cells immobilized in polyacrylamide gel. -Eur, J. Appl. Microbiol., 1977, v.4, No.2, p.75-85.

139. Somerville H.J., Mason I.R. The phisiology of aerobic bacteria in immobilized system. Biochem. Soc. Trans,, 1979, v.7, No,1, p.85-88.

140. Sturgeon G.M., Kennedy I.P, A quick-reference summary of recent literature on molecular immobilization and bioaffinity phenomena: Survey no. 16, Enzyme and Microbial Technol,, 1982, v,4, Eo.4, p.276-279.

141. Szwajcer E., Brodelius P., Mosbach K. Production of OC-keto acids: 2, Immobilized whole cells of Providencia sp,

142. PCM 1298 containing 1-amino acid oxidase, Enzyme and Microbial.

143. Technol., 1982, v.4, Ко.6, p.409-413.

144. Takata I., Yamamoto K., Tosa Т., Chibata I. Screening of microorganisms having high fumarase activiti and their immobilization with carrageenan. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1979, v.7, Ко.2, p.161-172.

145. Takata I., Yamamoto K., Tosa Т., Chibata I. Immobilization of Brevibacterium flavum with carrageenan and its applica• . , . * - - ' ' >tion for continiaus production of 1-malic acid. Enzyme Microb. Technol., 1980, v.2, Ko.1, p.30-36.

146. Theodorou M.K., Bazin M.I., Trinci A.P.I. Growth of Trichoderma reesei and the production of cellulolytic enzymesa continuous-flow column. Arch. Microbiol., 1981, v.130, Ко.5, p.372-380.

147. Tisher W., Tiemeyer W., Simon H. Stereospecific hidro-genatious immobilized microbial cells or enzymes. Biochemie, 1980, v.62, Ko.5-6, p.331-339.

148. Tomita м. Выделение и идентификация соединений нуклео-тидной природы, высвобождаемых клетками Saccharomyces rouxii при размножении на гипертонической среде. Хакко когаку кайси. Hakko kogaku kaishi, 1979, v.57, № 4, p.195-200 (перевод).

149. Tosa Т., Sato Т., Mori Т., Chibata I. Basic stadies for continuous production of 1-aspurtic acis vby immobilized E.coli cells. Appl. Microbiol., 1974, v.27, Ко.5, p.886-889.

150. Toshinori K., Isao K., Shuichi S.CC-amilase productions by immobilized whole cells of Bacillus subtilig. Eur.

151. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1978, v.5, Ко.4, p.233-240.

152. Tramper J., Luyber K.Ch.A.M., Tweel W.J.J, van den. Kinetic aspects of glucose oxidation by Gluconobacter oxydans cells immobilized in calcium alginate. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1983, v.17, Ho.3, p.13-18.

153. Tyagi R.D., Ghose Т.К. Studies of immobilized Saccharomyces cerevisiae. I. Analysis of continuous rapid ethanol fermentation in immobilized cell reactor. Biotechnol. and Bioeng., 1982, v.24, Ко.4, p.781-795.

154. Vandamme E.I. Microbiole reacts in de chemische industrie. Ghem. mag., 1979, v.5, Ko.3, p.11-14.

155. Veelken M., Pape H. Production of tylosin and nikkomy-cin by immobilized Streptomyces cells. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.15, Ко.4, p.206-210.

156. Vieth W.R., Kenkatasubramanian K. Immobilisation cell systems. In.: Enzyme Eng. vol. 4/Eds, G.В .Broun, G.Maneki, L,B.Wingard. Plenum Press, K.-Y.-London, 1978, p.307-308.

157. Vieth W.R., Tenkatasubramanian K. Immobilized microbial cells in complex biocatalists. In.: Immobilized microbiol cells/Eds. K.Venkatasubramanian. Washington, 1979» p.1-12.л 4 < 4 . , . ,

158. Villet R., Dillon I., Manderson G. Pellets of immobili. ,. » * tzed yeast cells as biocatalysts for transforming biomasa. In.: San II: Prog. Int. Solar Energy Soc. Silver Jubilee Congr., Atbanta, Ga, 1979, Ko.1, Kew York e.a., 1979, p.79-82.

159. Vorobyova L.I., Kraeva K.I. Superoxide radicals and an-tiradical defence of propionic acid bacteria. Archives of Microbiology, 1982, v.133, Ко.2, p.110-113.

160. Wada M., Kato I., Chibata I. A now immobilization of microbial cells. Immobilized growing cells using carrageenan gel and their properties. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol.,1979, v.8, Жо.4, p.241-247.

161. Wada M.f Kato I., Chibata I. Continuous production of ethanol using immobilized growing yeast cells. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1980a, v.10, Ho.4, p.275-284.

162. Wada M,, Kato I., Chibata I. Electron microscopic obк Jservation on immobilized growing yeast cells. J. Ferment. Technol., 19806, v.58, Ho.4, p.327-331.

163. Wada M., Kato I., Chibata I. Continuous production of ethanol in high concentration using immobilized growing yeast cell. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1981, v,11, Ho.2, p.67-71.

164. Wada M., Uchida Т., Kato I., Chibata I. Continuous production of 1-isoleucine using immobilized growing Sen&tia mar-cences cells. Biotechnol. and Bioeng., 1980, v.22, Ho.6,p.1175-1188.

165. Weetal H.H., Krampitz L.O. Production of hydrogen from water using biophotolytic methods Analystis nidulans (biophoto-lysis) Phodospirillum rubrum (HADP) immobilized microorganisms. J. of Solid-Phase Biochem., 1980, v.5, Ho.2, p.115-124.

166. Willson R», McLeod B.I., Cooper R. The influence of conditions of growth on the endogenous metabolism of Saccharomy-ces cerevisiae effect on respiratory activity. Antonie Leeuwen-hock. J. Microbiol, and Serol., 1977, v.43, Ho.3-4, p.233-244.

167. Witting R. Feuchtgetreide-konservierung mit Propiosa-re (Luprosil). Schweinwelt, 1981, v.6, Ho,8, p.273-274.

168. Yamamoto K., Tosa Т., Yamashita К», Chibata I. Continuous production of 1-malic acid by immobilized Brevibacterium ammoniagenes cells. Eur, J. Appl. Microbiol., 1976, v.3, Ho.3, p.169-183.

169. Yamamoto K., Tosa Т., Yamashita K,, Chibata I. Kineticsand decay od fumarase activity of immobilized Brevibacterium ammoniagenes cells for continuous production of 1-malic acid, Biotechnol» and Bioeng., 1977, v.19, JTo.8, p.1101-1114.

170. Yi Zu-Hua, Rehm H.I. Formation of 0£,и/ -dodecanedioic acid andOC,C^-tridecanedioic acid from different substrates by immobilized cells of a mutant of Candida tropicalis. Eur, J, Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.16, Жо.1, p.1-4.

171. Yongsmith B#, Sonomoto К., Шапака A., Fukui S. Production of vitamin by immobilized cells of a propionic acid bacterium. Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol., 1982, v.16, Ho.2-3, p.70-74.