Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Образование биотина различными группами микроорганизмов и некоторые аспекты его регуляции

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Наумова, Елена Сергеевна

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. СТРОЕНИЕ МОЛЕКУЛЫ БИОТИНА.

2.2. РАСПРОСТРАНЕНИЕ БИОТИНА В ПРИРОДЕ.

2.3. БИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ БИОТИНА.

2.4. БИОСИНТЕЗ ШОТИНА У МИКРООРГАНИЗМОВ.

2.5. ТРАНСПОРТ БИОТИНА КЛЕТКАМИ МИКРООРГАНИЗМОВ.

2.5.1. Транспортные системы ауксотрофных организмов

2.5.2. Поглощение биотина прототрофами.3X

2.6. ПЕРСПЕКТИВЫ ПРОМЫШЛЕННОГО ПОЛУЧЕНИЯ ШОТИНА С ПОЮ- ' ЩЬЮ МИКРООРГАНИЗМОВ.

2.6.1. Трансформация естественных и химически синтезированных аналогов биотина в биотин.

2.6.2. Способы полного мивфобного синтеза биотина

2.6.3. Антиметаболиты биотина и их действие на его биосинтез

Введение Диссертация по биологии, на тему "Образование биотина различными группами микроорганизмов и некоторые аспекты его регуляции"

Биотин является витамином, необходимым для функционирования любой живой клетки. Это соединение, обладающее высокой физиологической активностью, действует в качестве кофермента в реакциях карбоксилирования, декарбоксилирования и транскарбоксилирования. Чрезвычайно малые его количества оказывают ярко-выраженный стимулирующий эффект на жизнедеятельность животных, растений и мшфо-организмов.

С момента выделения биотина в качестве компонента "биоса" дрожжей прошло более полувека. За это время были проведены фундаментальные исследования витамина. Установлено его химическое строение и изучена биологическая роль в клетке. Оцределен механизм функционирования биотина как кофактора многих ключевых ферментов, выделенных в чистом виде и детально изученных.

Интенсивно исследовалось распространение витамина в природе. Выявлены ауксотрофные штаммы, и штаммы, способные к самостоятельному синтезу; проведено сравнительное изучение биосинтетических способностей ми!фоорганизмов, относящихся к разным группам.

В результате систематических биохимических и генетических исследований, проведенных преимущественно на бактериальных штаммах, установлена общая последовательность реакций биосинтеза биотина, признанная универсальной для мшфоорганизмов. Проведено изучение этих реакций на ферментативном уровне. Для Escherichia coli выявлены генетические детерминанты, контролирующие биосинтез и составлена карта биотинового оперона.

У ряда бактериальных и дрожжевых штаммов исследованы основные характеристики процесса проникновения биотина в клетки.

Однако, исследование синтеза и функций проводилось на ограниченном числе объектов. Так биосинтез биотина детально изучен у бактерий, и лишь отдельные исследования выполнены с использовани

- 5 ем представителей других групп мшфоорганизмов.

Отсутствуют работы, посвященные регуляции процесса биосинтеза биотина и путям проникновения биотина в клетки у плесневых грибов, стрептомицетов и большинства групп дрожжей. В то же время эти группы являются интересными в практическом отношении, так как именно среди них находится большинство видов, у которых уровень синтеза витамина сравнительно выше, чем у остальных.

Пристальное внимание к биотину вызвано той большой ролью,которую он играет в метаболизме любой живой клетки.

Благодаря своей высокой активности биостимулятора биотин имеет широкое поле применения в медицине, сельском хозяйстве и биотехнологических отраслях промышленности. Однако практическое применение биотина в народном хозяйстве ограничено высокой стоимостью препарата на мировом рынке и отсутствием в нашей стране промышленного способа его получения.

Известные способы химического синтеза биотина сложны, многоступенчаты и приводят к образованию смеси 1 и а. -изомеров, а биологической активностью обладает только а -биотин. Источником витамина может быть микробиологический синтез, однако общий уровень синтеза биотина у прототрофных организмов весьма невысок и находится под строгим контролем со стороны конечного продукта.

В настоящее время идет поиск путей для получения биотина микробным синтезом: вьщеление природных штаммов с повышенным уровнем синтеза биотина; получение мутантов с нарушенной регуляцией; микробная трансформация более простых естественных или искусственных аналогов биотина в нативный витамин. В этом отношении изучение биосинтеза биотина и его регуляции у разных групп ми!фоорганизмов может открыть новые подходы к использованию ми!фобов в качестве источника витамина.

В соответствии с этим нами была поставлена цель работы: изучение биосинтеза биотина представителями различных групп микроорганизмов, а также трансформация дестиобиотина и других биотиновых аналогов в биотин.

Для решения указанной цели были поставленные следующие конкретные задачи исследования:

- изучить способность к биосинтезу и экскреции биотина штаммами различных групп дрожжей, плесневых грибов и стрептомицетов;

- выяснить как осуществляется регуляция биосинтеза биотина и его транспорт у представителей различных групп микроорганизмов;

- определить трансформирующую способность микроорганизмов в отношении дестиобиотина и ряда синтетических соединений, сходных с биотином по химической структуре.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Наумова, Елена Сергеевна

6. выводы

1. Изучена способность представителей различных видов плесневых грибов, дрожжей и стрептомицетов к биосинтезу биотина. Максимальное количество биотина образуют представители низших грибов -фикомицетов порядка Mueorales.

2. У изученных штаммов плесневых грибов и дрожжей не обнаружено прямой корреляции между липидообразованием и количеством образуемого биотина.

3. Впервые показано отсутствие транспорта биотина в клетки му-коровых грибов, синтезирующих высокие количества биотина, а также у исследованных стрептомицетов. У таких штаммов репрессия синтеза биотина конечным продуктом не проявлялась.

4. У штаммов плесневых грибов и дрожжей, поглощающих биотин, показана регуляция его синтеза путем репрессии.

5. Установлена возможность трансформации дестиобиотина в биотин растущей, покоящейся свободной и иммобилизованной культурой гриба Rhizopus delemar 1428 и изучены условия трансформации.

6. Разработан и оформлен в виде изобретения способ микробиологического получения препарата биотина. Препарат, полученный на основе этого метода, прошел испытание во Всаоюзном научно-исследовательском и технологическом институте птицеводства (ВНИТИП) с положительным результатом.

- 128

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проделанной работы нами изучена способность к образованию биотина в пределах большой коллекции различных групп микроорганизмов: плесневых грибов, дрожжей и стрептомицетов. Обнаружено, что наибольшее количество биотина синтезируют представители плесневых грибов, а именно, виды порядка Mucorales относящиеся к низшим грибам - фикомицетам. У многих штаммов этой групг-пы значительная часть синтезированного биотина выделяется в среду. Мукоровые головчатые плесени в природных условиях - обитатели мест, богатых органическим субстратом и витаминами (перегной, гумус, плоды растений, органические остатки).

Представители же родов Aspergillus u Penicillium , относящиеся к высшим грибам аскомицетам, а также дрожжи образуют мало биотина. То же можно сказать и о штаммах грибов, выделенных из почв Пермской области. Доля экскретированного биотина у большинства этих микроорганизмов ничтожна.

Изученные актиномицеты, большинство из которых также были выделены из почвы, характеризуются низким количеством синтезируемого и экскретируемого биотина.

Характер распределения способности к повышенному синтезу биотина среди изученных групп наводит на мысль о существовании некоторой экологической закономерности проявления этого признака. Снижение экономичности биотинового обмена может быть связано со спецификой естественных мест обитания штаммов сверхсинтетиков, нарушающей регуляцию синтеза витамина.

Условия, богатые органическим субстратом и ростовыми факторами, допускают выживание штаммов, теряющих при экскреции большую часть витамина.

В процессе исследования биосинтетических способностей разных штаммов нами также была установлена следующая закономерность: величина внутриклеточного пула является относительно стабильной для каждого штамма, в меньшей степени зависящей от условий культивирования, чем количество экскретируемого биотина, которое варьирует в зависимости от условий, причем тем сильнее, чем больше биотина данный штамм вообще способен выделять в среду.

При изучении возможных причин физиологического характера, объясняющих различную способность к синтезу биотина у разных видов нами был исследован процесс, участие в котором является одной из важнейших функций биотина в животных, растительных и микробных клетках - синтез жирных кислот при липидоообразовании.

В качестве модельного организма был выбран плесневый гриб Rhizopus delemar 1428 » отличающийся повышенным синтезом биотина, значительную часть которого он выделяет в среду.

При изучении динамики образования липидов и синтеза биотина в периодической культуре этого гриба не было обнаружено четкой коррелятивной связи между этими двумя процессами.

Подобные результаты получены и при изучении липидообразования у большого количества других штаммов плесневых грибов и дрожжей: содержание в культуре биотина не зависело от количества синтезируемых ею липидов.

Совокупность этих данных свидетельствует в пользу того, что интенсивное образование биотина не является следствием повышенной потребности в нем, как кофакторе ферментов синтеза жирных кислот, а скорее обусловлен нарушением регуляции своего собственного синтеза.

Известно, что регуляция биосинтеза биотина у изученных представителей эубактерий осуществляется посредством репрессии конечным продуктом. Биотин координированно репрессирует все ферменты своего биосинтеза, за исключением первого - пимелил-КоА синтетазы.

Регуляция биосинтеза биотина у плесневых грибов и дрожжей, составляющих объекты нашего исследования, ранее была совершенно не изучена. При исследовании влияния экзогенного биотина на синтез витамина у ряда плесневых грибов и дрожжей среди них были выявлены принципиальные отличия в регуляции процесса. Оказалось, что виды с различными биосинтетическими способностями различаются по своей реакции на экзогенный биотин. Виды плесневых грибов, принадлежащих к родам Aspergillus И Penicillium , а также дрожжи, синтезирующие самостоятельно небольшие количества биотина, оказавшись в присутствии высоких концентраций экзогенного биотина, активно аккумулируют его в процессе роста, значительно увеличивая пул внутриклеточного биотина. Их собственный синтез биотина в таких условиях полностью репрессирован. Таким образом, эта часть изученных нами видов продемонстрировала регуляцию биосинтеза биотина, подобную той, которая была установлена рядом исследователей для представителей Эубактерий: Е.coli, Bacillus megaterium, B.sphaericus и частично: ауксотрофных дрожжей - Saccharomyces cerevisiae.

Иная картина обнаружена нами при изучении процесса у некоторых представителей порядка Mucorales . Виды с повышенным уровнем биосинтеза биотина: Rhizopus delemar 1428,Mucor sp.344, R.son^ii 1403 не реагировали на присутствие в ростовой среде высоких концентраций экзогенного биотина. Он не обнаруживал репрессии собственного синтеза витамина, поскольку выделялся в среду в неизменном количестве. Величина внутриклеточного пула биотина у этих штаммов также оставалась неизменной.

Это поставило вопрос о причинах нарушения у таких микроорганизмов проявления репрессии биотинового оперона. Как наиболее вероятная изпричин нами была исследована возможность нарушения способности к транспорту и аккумуляции биотина.

Транспорт меченного биотина был изучен в пределах большой коллекции биотиновых прототрофов,"принадлежащих к разным таксономическим группам: плесневым грибам, дрожжам и стрептомицетам, и сильно различающимся в отношении биотин-синтезирующей способности.

Установлено, что у ряда штаммов, отличающихся повышенным уровнем синтеза и экскреции витамина, не происходит проникновения меченного экзогенного биотина в клетку. Такие штаммы обнаружены среди представителей порядка Mucorales.

Представители аспдтиллов и пенициллов, образующие мало биотина, активно поглощают меченный витамин.

Подобная картина обнаружена и при изучении транспорта биотина в клетках дрожжей - организмов, синтезирующих небольшие количества биотина.

Таким образом, невозможность проникновения биотина внутрь клеток представителей порядка Mucoraies может служить объяснением отсутствия проявления репрессии биотинового оперона высокими концентрациями экзогенного биотина.

При изучении поглощения биотина у тех из биотиновых прототрофов, которые способны к аккумуляции меченного биотина, нами были выявлены также некоторые особенности, отличающие их от изученных в этом отношении ауксотрофов. У L.plantarum, L.arabinosus, S.cerevisiae активный транспорт биотина - процесс, строго зависимый от экзогенного источника энергии. В нашей работе мы обнаружили, что у грибов и дрожжей транспорт, происходящий против концентрационного градиента и приводящий к аккумуляции больших количеств биотина внутри клеток, проявляет разную степень зависимости от глюкозы у разных видов. У одних видов процесс стимулируется глюкозой, тогда как у других аккумуляция оказывается не зависящей от присутствия экзогенного источника энергии (в этом отношении они сходны с некоторыми штаммами Е. coli ).

Обращает на себя внимание, что и в этом случае зависимость процесса от глюкозы значительно ниже, чем было определено для аук-сотрофного организма L.plantarum.

Если расположить микроорганизмы по мере возрастания их автономности от экзогенного источника биотина, лактобациллы займут место в самом начале ряда. Этот микроб совершенно не способен к самостоятельному синтезу биотина и полностью зависит от экзогенного его источника. Показательно, что именно у лактобацилл обнаруживается обязательная система активного, энергозависимого, концентрирующего транспорта с очень высоким сродством к субстрату.

Транспортная система представителя дрожжей s.cerevisiae »растущего как в присутствии биотина, так и в присутствии ДТБ, имеет сродство к субстрату на порядок ниже, чем у лактобацилл.

У E.coli - организма, имеющего полный набор ферментов биосинтеза биотина, но предпочтительно использующего его в готовом виде, появляются штаммовые различия в отношении транспорта витамина, одни штаммы имеют систему активного транспорта, тогда как другие - лишены ее, хотя и сохраняют способность к аккумуляции биотина путем связывания его специальными связывающими центрами ограниченной емкости.

На противоположном по отношению к лактобациллам конце этого ряда можно расположить те плесневые грибы, которые имеют повышенный уровень синтеза биотина и значительную часть его выделяют в среду. Как следует из наших данных, такие штаммы лишены способности к поглощению экзогенного витамина. Характерно, что плесневые грибы с невысоким уровнем биосинтеза активно аккумулируют экзогенный биотин.

Своеобразную картину представило изучение транспорта биотина в клетках нескольких штаммов стрептомицетов: при очень невысоком уровне собственного синтеза биотина подавляющее большинство изученных штаммов оказалось неспособными аккумулировать экзогенный биотин.

Этот факт отличает стрептомицеты от других изученных микроорганизмов и согласуется с появившимся недавно сообщением Акиши-ной с сотрудниками (1982) об отсутствии проявления репрессии биосинтеза биотина у Actinomyces sp. 313-152.

Таким образом, изучение проницаемости для экзогенного биотина мембран плесневых грибов с повышенным уровнем биосинтеза витамина позволило установить, что перемещение биотина имеет однонаправленный характер - из клетки. Обратного проникновения биотина не происходит, что делает невозможным репрессию биотинового оперо-на возрастающей концентрацией биотина среды.

Была предпринята попытка получить гриб с искусственно нарушенной мембраной. Растущий мицелий гриба обрабатывали полиеновыми антибиотиками. При выраженном ингибировании роста, которое согласно механизму действия полиеновых антибиотинов осуществляется за счет повреждения мембранных структур, нами не было получено увеличения проницаемости клеточной мембраны в отношении экзогенного биотина. Меченный биотин инкубационной жидкости не аккумулировался клетками, не происходило также обмена между внутри- и внеклеточным биотином.

Биотин является одним из тех немногих витаминов, промышленное получение которых еще не налажено в нашей стране.

Микробиологический синтез биотина представляется одним из наиболее перспективных возможных способов получения этого витамина. Микроорганизмы способны осуществлять как полный синтез биотина из элементов среды, так и трансформацию некоторых естественных и синтетических аналогов биотина в нативный витамин. Интересным в этом отношении является также способность некоторых веществ с биотино-подобной структурой выступать в качестве антиметаболитов биотина, нарушая его синтез на разных этапах. Это приводит к выделению в среду значительных количеств биосинтетических предшественников витамина.

В рамках изучения возможности получения биотина нами была исследована биологическая активность восьми химически синтезированных соединений (биотиновых аналогов), имеющих структуру, сходную со структурой биотина или его естественных биосинтетических предшественников. Вещества синтезированы проф. С.И.Завьяловым с сотрудниками в Институте Органичесчкой Химии АН СССР им. Д.И.Зелинского и являются побочными продуктами различных способов химического синтеза биотина.

Исследуемые соединения продемонстрировали очень низкий уровень биотиновой активности. Ее величина у наиболее активного из аналогов была в 100 раз ниже, чем у нативного препарата. Частьша-логов была полностью лишена биотиновой активности. На основании проявления биотиновой активности у соединений с различной степенью структурного сходства с биотином можно заключить, что наиболее значимой для сохранения физиологической активности является интакт-ность тиофенового кольца структуры биотина.

Поскольку изучение синтетических аналогов биотина не дало нам конструктивных подходов к решению проблемы увеличения синтеза биотина, мы обратились к его естественным витамерам.

Наиболее интересным в этом отношении является дестиобиотин -непосредственный биосинтетический предшественник биотина.

Известно, что многие микроорганизмы способны осуществлять трансформацию дестиобиотина в нативный витамин.

Нами для детального изучения этого процесса был выбран плесневый гриб и.¿1е1етаг 1428 как один из наиболее продуктивных в отношении биотина штаммов.

Оказалось, что гриб активно трансформирует дестиобиотин как в растущей, так и в покоящейся культурах.

Изучение динамики процесса в растущей культуре гриба показало, что трансформация дестиобиотина осуществляется практически с самого начала роста гриба и протекает параллельно с синтезом биотина de novo . Активность трансформации возрастает параллельно с развитием мицелия. Образовавшийся витамин экскретируется в среду. Интенсификация синтеза за счет трансформации ДТБ не влияет на величину внутриклеточного пула биотина, которая остается примерно постоянной на протяжении всего жизненного цикла и равной обычной конт рольной величине пула.

Нерастущая культура гриба R.delemar 1428 , помещенная в инкубационную жидкость с дестиобиотином, также активно осуществляет его трансформацию. Определены оптимальные условия протекания процесса: возраст культуры - конец логарифмической и начало стационарной фазы роста, экзогенный источник энергии для трансформации -глюкоза в концентрации 0,5%, источник серы - метионин 1 мг/мл, оптимальная плотность клеточной суспензии - 400 мг/50 мл.

Изучена зависимость стимулирующего эффекта дестиобиотина от его концентрации в инкубационной жидкости. Насыщающая концентрация ДТБ определена равной 25 мкг/мл.

Изучены потенциальные доноры серы для трансформации: эффективными для нерастущего мицелия R.delemar 1428 оказались метионин и сульфит натрия, сульфат натрия был менее эффективен. Цисте-ин, цистин и элементарная сера не были способны утилизироваться в качестве доноров серы для трансформации.

Продолжительность сохранения нерастущим мицелием постоянной трансформационной активности при ежедневной смене инкубационной жидкости составляла 7 суток, после чего начинался автолиз мицелия. Способность синтезировать биотин de novo из веществ, содержащихся в инкубационной жидкости за 7 суток, снизилась почти вдвое.

С целью увеличения срока сохранения активности гриба R.delemar

1428 его мицелий был иммобилизован на поролоне и в агаровом геле. Гифы гриба прорастают в поролоне, занимая его внутренние полости или обрастают гранулы агарового геля. Хотя поставленный нами эксперимент не позволил за счет иммобилизации увеличить длительность сохранения мицелием активности свыше 7 суток, все же есть основания полагать, что иммобилизация мицелия при дальнейшем изучении может оказаться эффективной.

Полученные данные свидетельствуют о принципиальной возможности получения биотина путем трансформации грибным мицелием его биосинтетического предшественника - дестиобиотина.

Нами разработан также способ микробиологического получения биотина (Воробьева, Шелокова, Наумова, авторское свидетельство № 34.39977/28-13/083675, 1982) с помощью культивирования гриба-продуцента R.delemar 1428.

Взятый за прототип метод (iwahara et al., 1966) отличается длительностью, неэкономичностью!для приготовлены среды используется большое число дорогостоящих компонентов) и невысоким уровнем выхода целевого продукта.

Предлагаемый нами способ позволяет более, чем в два раза, увеличить выход биотина, удешевить процесс его получения за счет использования более дешевой малокомпонентной среды, при этом также значительно сократить время культивирования.

С использованием некоторой модификации этого метода нами была получена опытная партия препарата, обогащенного витамином на основе культивирования гриба-продуцента. Препарат был передан на испытание во Всесоюзный научно-исследовательский и технологический инсти тут птицеводства (ВНИТИП) и успешно прошел испытание на Братцевской птицефабрике (приложение2).

Для приготовления препарата, обогащенного биотином, необходимой добавки в корма, был также предложен метод поверхностного ку

- 126 льтивирования гриба И.с1е1етаг 1428 на пшеничных отрубях. Использование такой методики позволит достигнуть необходимого уровня обо-гащенности кормов биотином без дополнительного использования питательных веществ и привести к значительному удешевлению витаминной добавки кормов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Наумова, Елена Сергеевна, Москва

1. Акишина Р.И., Боронкова В.В., Поморцева Н.В. Влияние состава питательной среды на биосинтез биотина культурой Actinomyces species • Прикладная биохимия и микробиология, 1982, № 3, стр.

2. Амирханова Ji.M., Мазунина В.И., Тулемисова К.А. Витаминобразую-щая способность грибов и актиномицетов, выделенных из ризосферы пшеницы. Тр. Ин-та микробиологии и вирусолог. АН КазССЕ, 1982, т.27, стр.133-138.

3. Березовский В.М. Химия витаминов. 2-е изд. М.:Пищевая промышленность, 1973, 599 стр.

4. Блиева Р.К. Полунепрерывное культивирование иммобилизованных клеток плесневых грибов продуцентов гидролитических ферментов. -Тезисы докладов Ш Всесоюзной конференции микробиологов. Киев.1981.

5. Воробьева JI.И. Микробиологический синтез витаминов. М.: Изд-во Моск.ун-та, 1982, 167 стр.

6. Гальцова Р.Д. Влияние полиеновых антибиотиков на стеринообра-зование у дрожжевых организмов. Микробиология, 1968, т.37, вып.1, стр.57-60.

7. Грачева И.М., Гаврилова Н.Н., Иванова Л.А.,Технология микробных белковых препаратов, аминокислот и жиров. М.: Пищевая промышленность, 1980, 448 стр.

8. Диканская Э.М. Биосинтез флавинов микроорганизмами. В кн.Итоги науки. Вирусология и микробиология, т.З, М.: ВИНИТИ, 1972, стр.556.

9. Диканская Э.М. Биотин, его биосинтез и участие в метаболизме микроорганизмов. Успехи микробиологии, 1980, т.15, стр.68-83.

10. Диканская Э.М., Робышева З.Н., Горобцова Т.А., Долгая М.Б. Методы определения витаминов в дрожжах. М.: ОПТИТЭИ микробиопром.,1974, 88 стр.

11. Завьялов С.И., Родионова H.A., Грачева Е.П. Синтез дестиобиотина. Изв. АН СССР, Сер.хим., 1972, стр.2025-2028.

12. Завьялов С.И., Рубцов А.И., Железная JI.JI., Павлов А.Б., Родионова H.A. Синтез 2,3,4,5тетрагидробиотина. Изв. АН СССР, Сер. хим., 1973 г., стрЛ679-1682.

13. Завьялов С.И., Родионова H.A., Дорофеева О.В., Железная Л.Л. Синтез эфиров 2,3,4,5тетрагидробиотина. -Изв. АН СССР. Сер.хим.,1975, стр.2829-2831.я

14. Иерусалимский Н.Д.Азотное и витаминное питание микробов.' М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1949, 165 стр.

15. Карасевич Ю.Н. О витаминном питании некоторых производственных рас кормовых дрожжей. Микробиология, 1957, т.26, стр.105108.

16. Каталог культур Всесоюзной коллекции непатогенных микроорганизмов. М.: Наука, 1976, 238 стр.

17. Коле М.М. Образование биотина микроорганизмами. Автореферат диссертации канд.биолог.наук. М.: Изд-во Moскв.ун-та,1979,23 стр.

18. Коле М., Кривова А.Ю., Воробьева Л.И., Бабьева Pi.П., Воронко-ва В.В. Оптимизация среды для образования биотина дрожжами. -Приклад, биохим.микробиол., 1979, т.15, стр.660-664.

19. Милько A.A. Определитель мукоральных грибов. Киев: Наукова думка, 1974, 303 стр.

20. Михайлова Е.К. Кучкарева М.А., Абдубекова Д.Н. Способность азотфиксирующих сине-зеленых водорослей образовывать биотин и тиамин. В сборн. "Водоросли и грибы Средней Азии", вып.2., Ташкент: Изд-во ФАН, 1975.

21. Мейсель М.Н. Функциональная морфология дрожжевых организмов. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1950, 367 стр.

22. Одинцова E.H. Микробиологические методы определения витаминов.- 130

23. M.: Изд-во АН СССР, 1959, 379 стр.

24. Сибирный А.А., Шавловский Г.М. Транспорт коферментных витаминов у дрожжей. Успехи совр.биологии, 1981, т.92, стр.354-365.

25. Филиппов В.Б. Биотин в растительном и животном организмах. М.: Изд-во АН СССР, 1962, 231 стр.

26. Шавловский Г.М. Регуляция биосинтеза витаминных коферментов у микроорганизмов. Успехи совр.биологии, 1974, т.78, стр.273-294.

27. Bachmann B.J., L0w К.В., Taylor A.L. Recalibrated linkage map of Escherichia côli k-12. Bacteriol.Rev.,1976, v.40,PP.116-167.

28. Baggaley K.H., Blessington В., Falshaw G.P., Ollis W.D. Constitution of stravidin a novel microbiological product. J.Chem. Soc. - Chem Common., 1969, p.101.

29. Barker D.F., Campbell A.M. Use of bio-lac fusion strains to study regulation of biotin biosynthesis in Escherichia coli. -J.Bacteriol., 1980, v.143, pp.789-800.

30. Bayer E.A., Viswanatha T., Wilchek M.Use of a homologus series of affinity labeling in study of biotin transport-system in yeast-cells.-FEBS letter, 1975, v.60, pp.309-312.

31. Bayer E.A., Wilchek M., Skytelsky E. Use of affinity techniques in study of biotin transport-system in Saccharomyces cere-visiae.-Isr.J. of Med. Sci.,1976, v.12, pp.1361-1369.

32. Bayer E.A., Skytelsky E., Viswanatha T., Wilchek M. Specific localisation and quantification of biotin-transport components in yeast by use of biotin-conjugated, impermeant, electron-dense label. Mol.Cell Bioch.,1978, v.19, pp.23-29.

33. Baugh C.M., Maione J.H., Butterworth C.E. Human biotin deficiency.- Amer.J.Nutr.,1968, v.21, pp.173-197.

34. Becker J.M., V/ilchek M., Katchalski E. Irreversible inhibition of biotin-transport in yeast by biotinyl-p-nitrophenyl ester.-Proc.Nat.Asad.Sci. USA, 1971, v.68, рр.2б04-2б07,

35. Becker J.M., Lichstein'II.C. Transport overshoot during biotinfeiochiuptake by Saccharomyces cerevisiae. -Biophys. Acta, 1972, v.282, pp.409-420.

36. Campbell A., del Campillo-Campbell A., Chang R. A mutant of Escherichia coli that requires high concentrations of biotin. -Proc. Hat. Acad. Sci. USA, 1972, v.69, pp.676-680.

37. Campbell A., Chang R., Barker D., Ketner G. Biotin regulatory (bir) mutants of Escherichia coli. J.Bacteriol, 1980, v.142, pp.1025-1028.

38. Chenouda M.S., EI-Awamry Z.A. Biosynthesis of biotin by microorganisms. I.Bi<tin-vitamers accumulated in the time cource of synthesis in relation to metabolic activities. J.Gen.Appl.Microbiol., 1971a, y.17, pp.335-343.

39. Chenouda M.S., EI-Awamry Z.A. Biosynthesis of biotin by microorganisms. 3. Mechanism of biotin-vitamer biosynthesis in Phycomyces blakesleanus. J.Gen.Appl. Microbiol., 1971b, v.17, pp.353-362.

40. Cicmanec J.F., Lichstein H.C. Biotin uptake by cold-shocked cells, spheroplasts, and repressed cells of Saccharomyces cerevisiae: lack of back control. J.Bacteriol., 1974, Vv119, pp.718725.

41. Cicmanec J.P., Lichstein H.C. Uptake of extracellular biotin by Escherichia coli biotin-prototrophs. J.Bacteriol., 1978,v. 133, pp.270-278.

42. Cirillo V.P., Harsh M., Lampen J.O. Action of the polyene antibiotics filipin, nystatin and N-acetyl-candidin on the yeast cell membrane. J.Gen Microbiol., 1964, v.35, pp.249-259.

43. Detitta G.T., Edmonds J.W., Stallinese W., Donohue J. Molecular structure of biotin, result of two independent crystal structure investigations. J. Am. Chem. Soc., 1976,v.98, pp.1920-1926.

44. Du Vigneaud V. The structure of biotin. Science, 1942,v.96,pp.455-460.

45. Du Vigneand V., Hofmann K., Melville D.B. Structure of biotin. -J.Amer.Chem.Soc., 1942, v.64, pp.188-192.

46. Eu Vigneaud V., Melville D., Polkers K., Wolf D., Mozingo R.,

47. Kereszetesy J.C., Harris S.A. The structure of biotin: a study ofdestiobiotin. J.Biol. Chem., 1942, v.146, pp.475-485.14

48. Eisenberg M.A.The incorporation of 1-7-C pimelic acid into biotin vitamers. Biochem.Res. Common., 1962, v.8, pp.437-441.

49. Eisenberg M.A. Biotin biosynthesis. 1.Biotin yelds and biotin-vitamers in ciltures Phycomjrces blakesleanus. J.Bacterid., 1963, v.86, pp.673-680.

50. Eisenberg M.A. Biotin: biogenesis, transport and their regulation. Adv. Enzymol.,1973, v.38, pp.317-372.

51. Eisenberg M.A., Maseda R. An early intermediate in the biosyn14tresis of biotin: incorporation studies with (1,7- C) pimelic acid. Biochem. J, 1966, v.101, pp.601-606.

52. Eisenberg M.A., Maseda R. The isolation and identification of 7-oxo-8aminopelargonic acid, a biotin intermediate. Biochemistry, 1970, v\9, pp.108-113.

53. Eisenberg M.A., Mee B., Prakash 0., Eisenberg M.R. Properties of ¿.-dehydrobiotin-resistant mutants of Escherichia coli K-12. -J.Bacterid., 1975, v. 122, pp.66-72.14

54. Elford H.L., V/right L.D. The incorporation of pimelic acid-C as a unit in the biosynthesis of biotin. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1963, v.10, pp.373-378.

55. Emmerger T.-Dtsch. National bibliogr., 1955, B. №17, 1223 ( no J^iKaHCKOM , 1972).

56. Polch J., Lees M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues. J.Biol. Chom., .1957, v.226, pp.497-503.

57. Frappier F., Guillerm'G., Salib A.G., Marquet A. On the mechanism of conversion of dethiobiotin in Escherichia coli. Discussion of the occurence of an intermediate hydroxylation. Biochem. Bio-phys. Res. Commun., 1979, v.91, pp.521-527.

58. Hanka L.J., Bergy M.E., Kelly R.B. Naturally occuring antimetabolite related to biotin. Sciens, 1966, v.154» pp.1667-1668.

59. Hanka L.J., Reineke L.M., Martin D.G. Biological studies with ¿-dehydrobiotin. J. Bacteriol., 1969, v.100, pp.42-46.

60. Hanka L.J., Martin D.G., Reineke L.M. Two new antometabolites of biotin; oi.-methyldethiobiotin and oL-methylbiotin. Antimic-rob. Agents Chemother., 1972, v^J., pp.135-138.

61. Harris S.A., Wolf D.E., Mozingo R., Folkers K. Synthetic biotin. Science, 1943, v.97, pp.447-^450.

62. Harris S.A., Wolf D.E., Mozingo R., Anderson R.C., Arth G.E., Easton U.R., Heyl D., Wilson A.N., Folkers K. Biotin. 2. Synthesis of biotin. J.Am. Chem. Soc., 1944, v.66, pp.1756-1757.

63. Harries S.A., Easton U.R., Heyl D., Wilson A.N., Folker.sK. Biotin 4. Synthesis of 4-benzamido-3-keto-tetrahydrothiothe-phene. J. Am.Chem. Soc., 1944,b, v.66, pp.1757-1759.

64. Harris S.A., Wolf E., Mozingo R., Arth G.H., Anderson R.C., Easton U.R., Folkers K. Biotin. 5. Synthesis of dl-biotin, dl-allobiotin and dl-epiallobiotin. J.Am. Chem. Soc., 1945, v.67, pp. 2096-3009.

65. Hertz R. Modification of yeast-growth assay method for biotin.-Proc. Soc. Exptl,Biol.Med., 1943, v.52, pp.15-17.

66. Hodson A.Z. The nicotic acid, pantothenic acid, choline and biotin contents of fresh, irradiated evaporated and dry milk. -J.Nutrition, 1945, V.29, pp.137-143.

67. Hofmann K., Kilmer G.W., Melville D.B., du Vigneaud V., Darby N.N. The condensation of phenenthenequinone with the diaminocarboxylic acid derived from-biotin. J.Biol. Chem., 1942, v.145, pp.503-509.

68. Horowitz N.H., Beadle G.W. A microbiological method for determination of choline by use of a mutant of Heurospora. J.Biol. Chem., 1943, v.150, pp.325-333.

69. Goldberg M.W., Sternbach L.H. US Patents. 2,489,232-2,489,239, 1949 (cited from Gyordy P., Langer B.W. 1968).

70. Grundy W.E., Whitman A.L., Rdzok E.G., Rdzok E.J., Hanes M.E., Sylvester J.G. Antibiot. Ghemoth., 1952, vj?, p.339 (cited from Izumi Y., Ogata K. 1977).

71. Gulia A., Saturen Y., Szybalski W. Divergent orientation of transcription from the biotin locus of Escherichia coli. J. Mol. Biol., 1971, v.56, pp. 53-62.

72. Guillerm G., Frappier P., Gandry M., Marquet A. On the mechanism of conversion of dethiobiotin to biotin in Escherichia coli.-Biochimie, 1977, v.59, pp.119-121.

73. Gyody P., Langer B.W. Biotin. Industrial preparation. In

74. The vitamins", v„2/ ed. Sebrell and Harris. New York: Acad, Press, 1968, pp. 278-280.

75. Iwahara S., Takasawa S., Tochikura T., Ogata K. Studies on biosynthesis of biotin by microorganisms. 4. Conversion of desthio-biotin to biotin by various kinds of microorganisms. Agr, Biol. Chem, 1966, v.30, pp.385-392.

76. Iwahara S., Yoshikawa J. Studies on the bacterial production of biotin vitamers. Part 4. Effect of adenine and adenosine onthe biotin production and growth of a biotin-producting bacterium.-Nippon Nogei. Kagaku Kaishi., 1974, v.48, pp.155-163.

77. Iwahara S., Kanemura Y. Studies on the bacterial production of biotin-vitamers. Part 5. Effect of adenine and metal ions on the production of biotin-vitamers by a biotin-producing bacterium. Nippon ITogei. Kagaku Kaishi., 1974, v.48, pp.591-598.

78. Isumi Y., Morita H., Sato K., Tani Y., Ogata K. Synthesis of biotin-vitamers from pimelic acid and coenzyme A by cellfree extracts of various bacteria. Biochim. et biophys. act?., 1972, v.264, pp.210-213.

79. Izumi Y., Morita H., Tani Y., Ogata K. Partial purification and same properties of 7keto-8aminopelargonic asid synthetase, an enzyme involved in biotin biosynthesis. Agr. Biol. Ghem.,1972b, v.36, pp.519-520.

80. Izumi Y., Sugasaki K., TaniY.?0gata K. Incorporation of sulp35her of L- ^S methionine into the biotin molecules by intact cells of Rhodotorula glutinis. Biochim. Biophys. Acta, 1973 a,v.304, pp.887-893.

81. IZumi Y., Sato K., Tani Y., Ogata K. Distribution of 7keto-8aminopelargonic acid synthetase in bacteria and the control mechanism of the enzyme activity. Agr. Biol. Ghem., 1973 b, v.37, PP. 1335-1340.

82. Izumi Y., Morita H., Tani Y., Ogata K. Partial purification and some properties of 7keto-8aminopelarginic acid synthetase, an enzyme involved in biotin biosynthesis. Agr. Biol. Chem., 1973 c, v.37, pp.1327-1333.

83. Izumi Y., Tani Y., Ogata K. The conversion of bisnorbiotin and bisnordethibiotin to biotin and dethiobiotin, respectively , by microorganisms. Biochim. Biophys. Acta, 1973 d, v.326, pp. 485488.

84. Izumi Y., Ogata K. Some aspects of the microbial production of biotin. Adv. Appl. Microbiol., 1977, v.22, pp.145-176.

85. Kawachima M., Miyake A., Hemmi T., Fujii S. Prarm. Bull®., 1956, vv4, p.53 (cited from Izumi Y., Ogata K., 1977).

86. Kaziro Y., Ochoa S. Mechanism of propionyl-carboxylase reaction. 1. Carboxylation and decarboxylation of the enzyme. J. Biol. Chem., 1961, v.236, pp. 3131-3136.

87. Kinsky S.C. Alterations in the permeability of ITeurospora crassa due to polyene antibiotics. J. Bacteriol., 1961,v.37, pp. 889- 897.

88. Kinsky S.C. Effect of polyene antibiotics on protoplast of Heurospora crassa. J. Bacteriol., 1962, v.38, pp.351-360.

89. Kitahara T., Hotta K., Yoshida M., Okami Y. Biological stydies of amoclenomycin. J.Antibiot., 1975, v.28, pp.215-219.

90. Kilappe J. Mechanism of biotin action. Ann. Rev. Biochem., 1970, v.39, pp.757-771.

91. Khappe J., Ringelmann E., Lynen P. Zur biochemischen Punktion des Biotins. 3. Die chemische Konctitution des enzymatish gebildeten carboxy-biotins. Biochem. Z., 1961, v.335, pp.168-176.

92. Khappe J., Biederbick K., Brummer W. Zur Struktor der CO2-Biotinenzyme. Angew.Chem., 1962, v.74, pp.432-440.

93. Kogel P., Tonnis B. Über das Bios-Problem Darstellung vom Kristallisiertem Biotin aus Eigelb. 1936, Bd.242, S.43.

94. Krell K., Eisenberg M.A.The purification and properties of desthiobiotin synthetasa. J. Biol. Chem., 1970, y.245, pp.65586566.

95. Lampen J.O., Bahler G.P., Peterson W.H . The occurence of the free and bound biotin. J.Nutrition,1942, v.23, pp.11-17.

96. Lampen J.O. Intermediary metabolism of fungi as revealed by drug reaction. in "Fungi and fungus diseases", lev/ York: Acad. Med., 1962, p.102.

97. Lampen J.O., Arnow P.M., Safferman A. Mechanism of protection by sterols against polyene antibiotics. J. Bacteriol., 1960,v.80, pp.200-208.

98. Lampen J.O., Arnov; P.M., Borowska Z., Laskin A.I. Locationand role of sterol at nystatin-binding sites. J.Bacteriol., 1962, v.84. pp.1152-1156.

99. Lampen J.O., Arnow P.M. Differences in action of large and small polyene antibiotics. Bull. Res. Counc. Israel., 1963, v.11, A4, pp.286-291.

100. Li H.C., Mc Cormick D.B., Wright L.D. Conversion of desthio-biotin in Aspergillus niger. J.Biol. Chem, 1968, v.243, pp.64426445.

101. Lichstein H.C. The biotin requirments of the genus Propionibacterium. Arch. Biochem. Biophys., 1955, v.58, pp.423-430.

102. Lictstein H.C., Waller J.R. Factors affecting the accumulation of biotin by Lactobacillus arabinosus. J.Bacteriol.,1961, v.81, pp.65-69.

103. Luckey T.D., Moore P.R., Elvehjem C.A. A differential, mic-robiologial assay for O-heterobiotin. -Proc.Soc.Exptl. Biol Med., 1946, v.61, pp.97-103.

104. Lynen F., Knappe J., Lorch E., Jutting G., Ringelmann E., Lachance J-P. Zur biochemischen Funktion des Biotins. 2. Reinigung und Wirkungsweise der js-Methyl-crotonyl-Carboxylase. -Biochem. Z., 1961, v.335, pp.123-167.

105. Maddox I.S., Dunnill P., Lilly M.D. Use of immobilized cellsof Rhizopus nigricans for the 11 jL-hydroxylation of progesterone.-Biotechnol. Bioeng., 1981, v.23, pp.345-354.

106. Maeda K. , Okami Y., Ko-eaka H., Taya 0., Umezawa H. J.Antibiotics, v«5, p.572, 1952 (cited from Izumi Y., Ogata K., 1977).

107. Mc Lamore Y/.M. , Celmer V/.D., Bogert V.V., Pennington P.O., Solomons I.A. The structure and synthesis of. a new tbiazolido-ne antibiotic. J. Am. Chem Soc., 1952, v.74, pp.2946-2947.

108. Melamed M.D., Green N.M. Avidin. 2. Purification and composition. Biochem. J., 1963, v.89, pp.591-599.

109. Melville DTB., Moyer A.Y/., Hofmann K. , du Vigneaud V. The structure of biotin: the formation of thiophenevaleric acid from biotin. J.Biol.Chem., 1942, v.146, pp.487-492.

110. Mistry S.P., Dakshinamurti K. Biochemistry of biotin. -Vitam. and Horm., 1964, v.22, p.1.

111. Niimura T., Suzuki T., Sahachi Y. Studies of the formation of biotin from desthiobiotin and sulphate. 1. On biotin formation from desthiobiotin by washed cell suspension of yeast. J.Vita-mi no 1. , 1964,a, v.10, pp.218-224.

112. Niimura T., Suzuki T., Sahashi Y. Studies of the formationof biotin from desthiobiotin and sulphate in Saccharomuces cerevisia« 2. On sulpher sources of biotin formation by washed cell suspension of yeast. J. Vitamino1., 1964, v.10, pp.224-231.

113. Ogata K., Igarachi S. J.Takeda Res,Lab., 1954, v.13, p.78, (cited from Izumi Y., Ogata K., 1977).

114. Ogata K., Izumi Y. Studies on the metabolism of biotin by microorganisms. Vitamines, 1974, v.48, pp.159-172.

115. Ogata K., Tochikura S., Takasawa S., Ikushima K., Kikuchi M.

116. Studies on biosynthesis on biotin by microorganisms. 1. Accumulation of biotin-vitamers by microorganisms. Agr. Biol. Chem.,1965, v.29, pp.889-894.

117. Ogata K. , Izumi Y., 'Tani Y. Control action of actithiazic acid on the biosynthesis of biotin-vitamers by microorganisms. Agr. Biol. Chem., 1970, v.34, pp.1872-1874.

118. Ogata K., Izumi Y. Studies on the biosynthesis of biotin by microorganisms. 8. The controlling action of actithiazic acid on the biosynthesis of biotin-vitamers by various microorganisms. Agr. Biol. Chem., 1973, V-.37, pp. 1079-1085.

119. Ogino S., Fujimoto S., Aoki Y. Microbial production of biotinT Part 1. Co-oxidation of dl-cis-tetrahydro-2-oxo-4n-pentyl-thieno-(3,4-d)-imidozoline (dl-TOPTI) by soil isolates of the genus Co-rynebacterium. Agr. Biol. Chem,, 1974a, v.38, pp.275-278.

120. Ogino S., Fujimoto S., Aoki Y. Microbial production of biotin. Part 2. Production of bioyin by microbial transformation of dl-cis-tetrahydro-2-oxo-4n-pentyl-thieno(3,4-d)-imidazoline. -Agr. Biol. Chem., 1974 b, y,38, pp.707-712.

121. Ohrui H., Emoto S. Stereospecific synthesis of (+)-biotin. -Terahedron Lett., 1975, n.32, pp.2765-2766.

122. Ohsugi M., Nakazawa M., Ogata K. Biotin-vitamers formation from salicylic acid by Pseudomonas sp. Agr. Biol. Chem., 1972, v.36, pp.1293-1294.

123. Okami Y., Kitahara T., Hamada M., Naganawa H., Kondo S., Mae-da K., Takeuchi T., Umezawa S. Studies on a new amino acid antibioctic amiclenomycin, Jr Antibio$., 1974, v.27, pp.656-660.

124. Pai C.H. Biosynthesis of desthiobiotin in cell-free extracrs of Escherichia coli. J. Bacterid., 1969, v.99, pp.696-701.

125. Pai C.H. Biosynthesis of biotin: synthesis of 7,8-diamino-pelargonik acid in cell-free extracts of Escherichia coli. J. Bacteriol., 1971, v.105, pp.793-800.

126. Pai C.H. Mutant of Escherichia coli with derepressed levels of the bitin biosynthe&ic enzymes. J. Bacteriol., 1972, v.112, pp.1280-1287.

127. Pai C.H. Biotin uptake in regulatory mutant of Escherichia coli. J. Bacterid., 1973, v.116, pp.494-496.

128. Pai C.H. Biochemical and genetic characterisation of dehydmutantsrobiotin resistant of Escherichia coli. Mol. Gen. Cenet., 1974, v.134, pp.345-357.o

129. Pai C.H., Lichstein H.C. Control of bitin synthesis in Escherichia coli by exogenus biotin. Biochim. Biophys. Acta, 1962, v.65, pp.159-160.

130. Parry R.J., Kunitani M.G. Synthesis and use o£ specifically tritiated desthiobiotin in the study of biotin biosynthesis by Aspergillus niger. Methods in ensymology. Vitamins and coenzymes, 1979, v.62, pp.352-371.

131. Pichappa C.V., Raman T.S., Shanmugasundram E.R.B. Experen-ta, 1962, v. 18, p. 269 (no TajIblieBOfl, 1968).

132. Pontecorvo G. The genetics of Aspergillus nidulans. Adv. Genet., 1953, Vi5> pp. 141-238.1A

133. Prakash 0., Eisenberg M.A. Activ transport of C biotin in Escherichia coli K-12. J. Bacteriol., 1974, v.120, pp.785-791.

134. Rogers T.O., Lichstein H.C. Characterization of the biotin transport system in Saccharomyces cerevisiae. J. Bacterid., 1969, v.100, pp.557-564.

135. Rogers T.O., Lichstein H.C.Regulation of biotin transportin Saccharomyces cerevisiae. J.Bacteriol., 1969, v.100, p.565-572.

136. Rolf B., Eisenberg M.A. Genetic and biochemical analysis of the biotin loci of Escherichia coli K-12. J.Bacteriol., 1968, v.96, pp.515-524.

137. Ryan P.J. Japan J. Genet., 1953, v.31, p.265 (cited from Pontecorvo, 1953).

138. Salib A.G., Prappier P., Gullerm G., Marquet A. On the mechanism of conversion of dethiobiotin to biotin in Escherichia coli.

139. Isolation of dethiobiotin intermediate in the biosyntesis of biotin from dethiobiotin. Biochem. Biophys. Res., Common, 1979, v. 88, pp.312-321.

140. Scheiner J., Extraction of added biotin from animal feed pre-mixes. J. Assoc. offic. Anatyt. Chem., 1966, v.49, pp.882-883.

141. Shull G.M., Peterson B.H. Improvements in the Lactobacillus casei assay for biotin. J. Biol. Chem, 1943, v.151, pp.201-210.

142. Shell E.E., Eakin R.E., Williams R.J. A quantitative test for biotin and observations regarding its occurence and properties. J. Amer. Chem. Soc., 1940, v.62, pp.175-180.

143. Shell E.E., Eakin R.E.Williams R.J. Assay method for biotin.-Univ. Texac Public., 1941, n.4137, p.18.

144. Sobin B.A. A new streptomyces antibiotic. ¿.Am, Chem. Soc., 1952, v.74, pp.2947-2948.

145. Stalling W.C. The carboxylation of biotin. Arch. Biocem. Biophys., 1977, v.183, pp.189-199.

146. Stokes J.L., Gunnes M. The microbiological activity of synthetic biotin, its optical isomers and related compaunds. J.Biol, Chem., 1945, v.157, pp.121-125.

147. Taylor A.L. Currient linkage map of Escherichia coli. Bacteriol Rev., 1970, v.34, PP'.155-175.

148. Taylor A.L., Trotter C.D. Linkage map of Escherichia coli strain K-12. Bacterid Rev., 1972, v.38, pp.504-556.

149. Tat urn E.L. Desthiobiotin in the biosynthesis of biotin. -J. Biol., v.160, pp.455-459.

150. Tejera E., Backus E.J., Dann M., Ervin C.D., Shakofski A.J., Thomas S.O., Bohonos IT., Wiiliams J.H. Antibiot. Chemoth., 1952, vj2, p.333 (cited from Izumi Y, Ogata K., 1977).

151. Tepper J.P., Mc Cormick M.B., Wrigth L.D. Direct evidence for the conversion of destiobiotin in Aspergillus niger. J. Biol., Chem., 1966, v.241, pp.5734-5740.

152. Tsuboi T., Sekijo C., Shoji 0. Studies on production of biotin by microorganisms. 1. Screening of hydrocarbon-utilizing bacteria wich produce biotin and studies on cultural condition. -Agr. Biol. Chem., 1966 a, v.30, pp.1238-1242.

153. Tsuboi T., Sekijo C., Shoji 0. Studies on production of biotin by microorganisms. 2. Production of biotin-vitamers from hydrocarbon. Agr. Biol. Chem., 1966 b., v.30, pp.1234-1246.

154. Tsuboi T., Sekijo C., Yoshimura Y., Shoji 0. Studies on production of biotin by microorganisms. Part 3. Effect of adenine on sccumulation of biotin-vitamers. Agr. Biol. Chem., 1967, v. 31., pp.1135-1142.

155. Ulmer D.C., Waller J.R. Evidence for a biphasic biotin uptake system in Bacillus coagulans. Abstrs Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol., Atlantic City. N.Y., 1976, p.169.

156. Umezawa H., Oikawa K., Okami Y., Maeda K. Thiazolidone antibiotic as an antimetabolite to biotin. J. Bacterid., 1953,v. 66, pp.118-119.

157. Uzuka Y., Haganuva T., Tanaka K. General properties of the biotin transport system in Lipomyces starkeyi. J. Gen. Appl.

158. Microbiol., 1975, v.21, pp.1-12.

159. Viswanatha T.,Bayer E.A., Wilchek M. Reversibility of the affinity-labelled biotin transport system in yeast cells. Bioc-him. Biophys.Acta, 1975, v.401, pp.152-156.

160. Waller J.R., Lichstein H.C. Biotin transport and accumulation by cells of Lactobacillus plantarum. 1. General properties of the system. J.Bacterid. , 1965 a, v.90, pp.843-852.

161. Waller J.R., Licl^bein H.C. Biotin transport and accumulation by cells of Lactobacillus plantarum. 2. Kinetic of the system. -J. Bacterid., 1965 b, v.90, pp.855-856.

162. Wood H.J. The reactive group of biotin in catalysis by biotin enzymes. Trends Biochem, Stud., 1976, v.1, pp.4-9.

163. Wright L.D., Skeggs II.R. Determination of biotin with Lactobacillus arabinosus. Proc. Soc. Exptl. Biol. Med., 1944, v.56, pp.95-98.

164. Wright L.D., Cresson E.L., Skeggs H.R., Wood T.R., Reck R.L., Wolf E., Folkers K. Isolation of crystalline biocytin from yeast extract. J. Am.Chem.Soc., 1952, v.74, pp.1996-1999.

165. Wright L.D., Cresson E.L. Biotin-l-sulfoxide. 1. The occurence of a previusly unrecognized form of biotin in certain fermentation sources. J. Am.Chem.Soc., 1954a, v.76, pp.4156-4160.

166. Wright L.D., Cresson E.L., Valiant J., Wolf D.E., Folkers K. Biotin-l-sulfoxide. 2. The isolation of a crystaline factor with biotin activity from Aspergillis niger culture filtrate. J. Am. Chem Soc., 1954 b, v.76, pp.4161-4163.

167. Wright L.D., Cresson E.L., Valiant J., Wolf D.E., Folkers K. Biotin-l-sulfoxide. 3. The characterization of biotin-l-sulfoxide from a microbiological source. J. Am Chem. Soc., 1954 c, v.76, pp.4163-4170.

168. Wright L.D., Driscoll C.A. Desthiobiotin in the biosynthesisof biotin. J. Am. Chem.Soc., 1954 d, v.76, pp.4999-5006.

169. Y/right L.D., Gresson E.L., Driscoll C.A. Biological precursors of biotin and/or biotin-l-sulfoxide. Proc.Sec.Exptl. Biol. Med., 1955, v.89, pp.234-236.

170. Wu H.C.P., Boos V/., Ealckar H.M. Role of the galactose transport system in the retention of intracellular galactose in Escherichia coli. J.Mol. Biol., 1969, v.41, pp.109-120.

171. Yang H.C., Ohsugi M., Ogata K. Transformation of biotin-car-boxyl acid in biotin and bisnorbiotin by resting cell-system of microorganisms. Agr. Biol. Ghem., 1969, v.33, pp.1104-1106.

172. Yang H.C., Tani Y., Ogata K. Synthesis of biotin vitamers from biotin diaminocarboxylic acid or 7,8-diaminopelargonic acid by a purifed enzyme of Pseudomonas graveolens. Agr. Biol. Ghem., v.34, pp.1748-1750.

173. Yang H.C., Tani Y., Ogata K. Studies on metabolism of biotin vitamers by microorganisms. 3. Purification and characterization of an enzyme synthesing ureido ring of biotin vitamers. Agr. Biol. Chem., 1971, v.35, pp.1346-1352.

174. Yazawa K., Nakamura H., Shibamura S., Tamura Z. Properties of the biotin transport system in Bifidobacterium breve n.4. -Microbiol. Immunol., 1981, v.25, pp.627-637.