Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Обоснование применения препарата седимин коровам при стрессе

ВАК РФ 06.02.03, Звероводство и охотоведение

Автореферат диссертации по теме "Обоснование применения препарата седимин коровам при стрессе"

ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯПРЕПАРА ТА СЕДИМИН КОРОВАМ ПРИ СТРЕССЕ

06.02.03-ветеринарная фармакология с токсикологией

12 дек гт

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Троицк-2013

005543984

цины, слушателей курсов ФПК, а также при написании учебных пособий и методических рекомендаций.

Практическая значимость работы. Предлагается наиболее эффективная схема использования седимина при стрессовом воздействии на организм коров: по 5мл за 24 часа и через 2 часа после действия стресс-фактора для профилактики и реабилитации организма коров при стрессовых ситуациях. Доказано, что введение седимина по вышеуказанной схеме нормализует морфологический, биохимический статус крови, процессы ПОЛ, позволяет сохранить молочную продуктивность и профилактировать изменения состава молока.

Практические предложения по применению комплексного препарата седи-мин дойным коровам при спланированных стрессовых воздействиях используются в практике зоо-ветеринарной службы молочного комплекса ООО «Ясные поляны» Троицкого района, Челябинской области, для предотвращения потерь продуктивности, о чем свидетельствует акт внедрения, который прилагается к диссертационной работе.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Область диссертационных исследований соответствует формуле специальности 06.02.03 - ветеринарная фармакология с токсикологией в плане разработки показаний и способов применения лекарственных веществ для лечения и профилактики заболеваний, стимуляции продуктивности и воспроизводительной способности сельскохозяйственных животных, а именно следующим пунктам шифра специальности: п.1 «Механизм действия лекарственных веществ на организм животных, его отдельные системы и функции»; п.З «Взаимосвязь между химической структурой лекарственных веществ и характером их фармакологического действия»; п.6 «Зависимость фармакологического действия лекарственных средств от их дозы, формы применения, метода введения с учетом видовых особенностей животных, их возраста, пола, физиологического состояния, условий содержания и кормления».

Апробация результатов исследований. Материалы диссертации доложены на Международной научно-практической конференции, посвященной 80 -летию УГАВМ «Инновационные подходы в ветеринарии, биологии и экологии» (г.Троицк, 2009); на международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения П.Г. Петского «Современные научные тенденции в животноводстве» (г.Киров, 2009); на международной научно-практической конференции «Современные аспекты товароведения и экспертизы потребительских товаров. Экономика АПК» (г.Троицк, 2011); на международной научно- практической конференции молодых специалистов «Молодые ученые в решении актуальных проблем науки» (г.Троицк, 2012).

Реализация результатов исследований. Практические рекомендации по применению седимина при стрессовых состояниях, используются в технологическом процессе содержания коров в молочном комплексе ООО «Ясные Поляны», что подтверждено актом внедрения научных разработок.

Публикация результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ, в том числе 3 в рецензируемых научных жур-

налах, рекомендуемых ВАК (Вестник НГАУ, Аграрный вестник Урала), в которых отражены основные результаты экспериментальных исследований.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Наиболее оптимальной схемой применения препарата седимин коровам при стрессовой ситуации является его дробное внутримышечное введение по 5 мл за 24 часа до и через 2 часа после действия стресс-раздражителя.

2. Через сутки после смоделированной стрессовой ситуации наблюдаются изменения морфологической структуры внутренних органов белых мышей. Введение седимина по предложенной схеме предупреждает появление деструктивных изменений в печени и сердце.

3. Введение седимина коровам на фоне действия дозированного раздражителя по предложенной нами схеме:

- предупреждает в 2,2 раза снижение количества эритроцитов, в 1,5 раза концентрации гемоглобина в крови, нормализует картину белой крови; купирует повышение общего белка, у-глобулинов, ПВК и снижение альбуминов, глобулинов, глюкозы;

- повышает в крови в 1,3 раза активность супероксиддисмутазы; снижает уровень токсических продуктов перекисного окисления липидов;

- стабилизирует в крови содержание кальция, фосфора, повышает концентрацию йода, железа, селена по сравнению с контрольными данными;

- повышает содержание кальция, фосфора в молоке по сравнению с 1-ой группой, а также концентрацию йода, железа, селена по сравнению с данными в контроле.

4. Применение седимина на фоне действия стресс-фактора предупреждает понижение среднесуточного удоя коров на 17,14% и снижение содержания жира в молоке на 16,36%; повышает уровень белка и COMO; сохраняет аминокислотный спектр белков молока.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждения результатов собственных исследований, выводы, предложения для производства, список использованной литературы, приложения. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 24 рисунками. Список литературы включает 222, в том числе 33 зарубежных авторов.

2.Собственные исследования их результаты 2.1 Материалы и методы исследований

Работа была выполнена в 2007-2013 годах в ФГБОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины». Тема диссертации является разделом темы научных исследований кафедры товароведения продовольственных товаров и ветеринарно-санитарной экспертизы «Изыскание и внедре-

ние новых современных методов повышения качества животноводческой продукции», номер государственной регистрации 0120.0510102.

Исследования были проведены в 2 этапа. На первом этапе были изучены антистрессактивные свойства седимина на белых мышах. Из 24 белых мышей со средней массой 25-28 граммов, были сформированы 4 группы. У всех мышей стрессовую ситуацию моделировали путем подкожного введения 70%-ного скипидара на вазелиновом масле в дозе 0,001мл. Во 2 группе вводили седимин в дозе 0,01мл внутримышечно за 24 часа до введения скипидара, в 3-ей группе через 2 часа и 4-ой группе вводили седимин за 24 часа до и через 2 часа после введения стрессового раздражителя. В первой группе седимин не применяли. Спустя сутки мышей усыпляли эфиром и отбирали пробы тканей внутренних органов, которые фиксировали в 12% растворе нейтрального формалина. Пробы печени для выявления гликогена фиксировали в 95% этиловом спирте. Затем материал проводили по спиртам восходящей концентрации по общепринятым методикам и заливали в парафин. Срезы окрашивали реактивом Шиффа на гликоген; суданом-III на свободные липиды; реактивом ГОФПК (гематоксилин-основной фуксин-пикриновая кислота) для выявления очагов метаболических повреждений кардиомиоцитов.

На втором этапе опыты были проведены на стресс-чувствительных коровах черно-пестрой породы 4-5 летнего возраста со средней живой массой 450500кг. У всех опытных коров моделировали стрессовую ситуацию, путем введения дозированного стресс - раздражителя (по 0,1 мл скипидара подкожно). На этом фоне препарат седимин был испытан: с профилактической целью (его вводили внутримышечно в дозе 10 мл за 24 часа до моделирования стрессовой ситуации); с лечебной целью (препарат вводили в дозе 10 мл через 2 часа после действия дозированного стресс-раздражителя) и дробно с профилактической и лечебной целью (препарат вводили по 5 мл за 24 часа до и через 2 часа после введения скипидара). В 1 группе седимин не применяли, 5-ая группа коров служила контролем, препараты коровам не применяли.

Для определения морфобиохимического статуса крови у коров брали кровь через 2 и 24 часа после последнего введения препаратов.

В цельной крови определяли содержание гемоглобина, количество эритроцитов и лейкоцитов, лейкограмму; в сыворотке крови: общий белок, белковые фракции, общий кальций и неорганический фосфор, глюкозу-общепринятыми в ветеринарии методами; пировиноградную кислоту-модифицированным методом Умбрайта.

Уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по содержанию малонового деальдегида (МДА) в сыворотке крови модифицированным методом Э.Н. Коробейниковой (2002); диеновых коныогатов и кетодиенов в плазме крови-спектрофотометрическим методом В.П. Гаврилова с соавт. в модификации Э.Н. Коробейниковой (2002); соединений типа оснований Шиффа (по A.B. Архиповой (2004)); активности супероксиддисмутазы (СОД) по С. Че-вари с соавт. (1985). Содержание селена в крови и молоке определяли флуори-метрическим методом; содержание йода-по методу Акланда в модификации

C.B. Силаевой,(1981); содержание железа-по методу Сенделу в модификации С.Г. Кузнецова.

Удой, содержание жира, белка в молоке контролировали в день введения препаратов и через сутки после введения. Молоко для исследований отбирали по ГОСТ 26809 - 86, в молоке исследовали физико-химические и санитарно-гигиенические показатели: жирность, плотность, COMO, белок на молочном анализаторе «Клевер М-1»; кислотность, бактериальную обсемененность, содержание ингибиругощих веществ по ГОСТ-3624-92; 9225-84; 23454-79, аминокислотный состав белков молока исследовали на аминокислотном анализаторе Т-339.

Количество общего кальция в молоке определяли комплексонометриче-ским методом по Вичеву и Каракашеву; неорганического фосфора по восстановлению фосфорно-молибденовой кислоты; селена-флуориметрическим методом; йода-титрометрическим методом; железа-методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии по методу Г.А. Смирновой и Н.П. Иванова (1977). Для сравнения использовали фоновые и контрольные показатели крови и молока животных.

Статистическую обработку полученных результатов с вычислением биометрических констант проводили по общепринятой методике В.А. Середина (2001). Достоверную вероятность (Р) находили с учетом числа имеющих наблюдений по таблице Стьюдента. Для определения степени влияния препарата на отдельные показатели использовали однофакторный дисперсионный анализ (И.И. Елисеева, М.М. Юзбашев, 2002; И.Г. Переяслова, Е.Б. Колбачев, 1999).

Экономическую эффективность применения препарата седимин рассчитывали на основании учета всех затрат и стоимости дополнительно полученной продукции.

2.2 Влияние препарата седимин на фоне действия стресс-раздражителя на морфологическую структуру внутренних органов белых ¡мышей. При гистологическом исследовании печени мышей, которым вводили дозированный раздражитель, через 24 часа были выявлены венозная герипере-мия, умеренная дискомплексация балок за счет расширения перикапиллярных пространств, очаги зернистой дистрофии гепатоцитов, при этом их ядра были различной величины и интенсивности окраски-наряду с гиперхромными, встречались бледно окрашенные ядра. В некоторых полях зрения определялись цен-тролобулярные очаги некробиозов и тяжелой зернистой дистрофии гепатоцитов. В селезенке отмечали полнокровие сосудистой сети и пульпы. Фолликулы белой пульпы были с довольно четкими границами и занимали обширную площадь. Клетки фолликулов белой пульпы были плотно расположены, однородные по размерам и восприятию основных красителей. В сердце было установлено неравномерное кровенаполнение миокарда в виде венозного полнокровия с картиной эритростазов сосудов мелкого калибра, плазматическое пропитывание и набухание стенок артериол, умеренный отек межуточной ткани в субэн-докардиалыюй зоне. Во всех полях зрения выявлялись множественные мелкие диффузно-рассеянные очаги дегенерации кардиомиоцитов с потерей попереч-

Гематокритная величина в крови коров опытных групп оставалась ниже контрольных данных в среднем на 18,74-24,33%, но была выше показателей 1-ой опытной группы на 4,18-11,88%, и весь период эксперимента находилась ниже нормативных показателей. Наибольшая и достоверная доля влияния препарата седимин на изменения уровня гематокритной величины была выражена в 4-ой группе и составила 91,75% (Бр > Р1:).

Введение седимина вызвало понижение числа лейкоцитов в крови коров 2-ой и 3-ей опытных групп на 1,66-5,93% по сравнению с показателями 1-ой группы. При применении седимина с профилактической и лечебной целью в 4-ой группе содержание числа лейкоцитов в крови коров составило 7,37±0,28,10 /л, что выше показателей 1-ой группы на 1,66% при 69,65%-ной достоверной доли влияния. В крови коров 2-ой,3-ей и 4-ой групп число лимфоцитов было меньше, чем в контрольной группе на 5,86-7,83%, но их количество было в пределах физиологической нормы.

Содержание числа моноцитов в крови коров 1-ой группы составило 2,97±0,25%. Введение препарата седимин позволило повысить число моноцитов в крови коров опытных групп в среднем на 5,05-61,95 и снизить число эозино-филов по сравнению с 1-ой группой, а также наблюдали увеличение юных нейтрофилов до 0,76± 0,02%, палочкоядерных на 31,57% и снижение на 19,76% числа сегментоядерных нейтрофилов. При применении седимина в крови коров 2-ой, 3-ей и 4-ой опытных групп число юных нейтрофилов снижалось на 7,89 -14,47%, содержание палочкоядерных нейтрофилов по сравнению с предыдущим исследованием изменялось незначительно, а содержание сегментоядерных нейтрофилов в крови увеличилось на 13,51-14,29% по отношению к контрольным данным. Наибольшая и достоверная доля влияния факторного признака на изменения числа сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов наблюдалась в 4-ой опытной группе и составила 46,40% и 38,19% (Ир > Не) соответственно.

2.4 Влияние препарата седимин на изменение некоторых показателей белкового и углеводного обменов в крови коров. Изменения белкового спектра крови у всех опытных коров было однонаправленным. У животных 1-ой группы содержание альбуминов достоверно снижалось на 37,13%, увеличение у-глобулинов составило 60,64%. У животных 2-4 групп снижение альбуминов было менее выраженным, чем у коров 1-ой группы, повышение у-глобулинов составило 9,32-48,54%; на 2,4-27,76 % снижалась концентрация а-глобулинов.

Результаты повторного исследования показали, что в 1-ой группе исследуемых животных по сравнению с контрольной группой остается высоким уровень общего белка и особенно у-глобулинов при одновременном снижении альбуминов на 28,68%, а-глобулинов на 24,01%, р-глобулинов на 10,12%. Во 2-4 группах в сыворотке крови животных концентрация общего белка оставалась на 8,38-28,60% выше в основном за счет увеличения у-глобулинов на 7,54-49,84% по сравнению с данными в контрольной группе, но по сравнению с 1 группой, где седимин не применяли концентрация общего белка и у-глобулинов была на 2,04-32,55% ниже.