Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Нейроэндокринные механизмы модификации циркадного ритма адренокортикальной функции у взрослых крыс после нарушения глюкокортикоидного баланса в раннем онтогенезе

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Нейроэндокринные механизмы модификации циркадного ритма адренокортикальной функции у взрослых крыс после нарушения глюкокортикоидного баланса в раннем онтогенезе"

АКАДЕМИЯ НАУК СССР

ИНСТИТУТ ЭВОЛЮЦИОННОЙ ФИЗИОЛОГИИ И БИОХИМИИ имени И. М. СЕЧЕНОВА

На правах рукописи

ЗЛОБИНА Надежда Афанасьевна

УДК 591.35+612.453:57.034

НЕЙРОЭНДОКРИННЫЕ МЕХАНИЗЛ\Ы МОДИФИКАЦИИ ЦИРКАДНОГО РИТМА

АД Р Е Н О КО РТ И К Л Л ЫIО Й ФУНКЦИИ У ВЗРОСЛЫХ КРЫС ПОСЛЕ НАРУШЕНИЯ ГЛЮКОКОРТИкоИДНОГО БАЛАНСА В РАННЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ

Специальность: 03.00.13 — Физиология человека и животных 03.00.11 — эмбриология, гистология и цитология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ЛЕНИНГРАД 1991

Работа выполнена на кафедре физиологии человека и животных Кемеровского государственного университета.

Научный руководитель — кандидат биологических наук С. Б. Лурье.

Научный консультант — доктор биологических наук О. А. Данилова.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор В. Г Шаляпина; доктор биологических наук С. П. Гамбарян.

Ведущая организация — Институт клинической и экспериментальной медицины СО АМН СССР.

Защита диссертации состоится «/¿^Л//**^ 1991 г. в час. на заседании Специализированного совета "К 002.89.01 при Институте эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова АН СССР по адресу: 194223, Ленинград, пр. М. Тореза, 44.

С дисчш>Щ1^ей можно ознакомиться в библиотеке Института.

«У» О-ки/Л^иЯ^ 1991 г.

■ КандиАг '' " п|

^ш^фидл^иууьшиеча, //С/) --тА

¿ат ■ бйодопИе^фР Наук к^у/ч/б ) Зуева

' ч ' „ >7

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Реализация генетически детерминирован-Ü программа развития во шюгом 'зависит от условий среды в кото-1 происходит формирование организма. Исследование закономернос-5 взаимодействия растущего организма с факторами внешней среда ляется одной из актуальных проблем современной биологии развития, ганизм особенно чувствителен к влиянию среды на ранних этапах гогб'неза, когда происходит становление осноеных физиологических [гкций, их интеграция и синхронизация' с внешними условиями (Мкц--вич, 1978). Существенное значение в синхронизации деятельности ганизма с факторам! среды имеет формирование в онтогенезе цир-дной организации гипофизарно-адренокортикальной системы (ГАНС), ьясняется это тем,что через эту эндокринную систему.в значитель-й мере происходит адаптация организма к изменяющимся условиям виней среды; более того, ТАКС обеспечивает временное согласова-s многих периодических внутриклеточных процессов, что позволяет итать эту систему одной из главных, которые регулируют биологи-ские ритмы в организме (Хальберг,1964; Dunn, Sheving, 1970; Колков и др., 1972; 1976).

Анализ литературных данных показывает,что в ходе формирования ркадной организации ГАНС, которое заканчивается у крысят к концу рйого месяца жизни, имеются такие критические периода, когда из-нение гормонального баланса, в результате введения глюкокортико-кых гормонов, АКТГ или стрессорной стимуляции, .вызывает у взрос-х животных модификацию циркадного ритма адренокортикальной функ-и, вплоть до его полного подавления (Lorenz et al.,I974; Turner, ylqr, I976; Taylor, lengvari, 1977; Лурье, 1981). Вместе с тем, настоящего времени мало что известно о механизмах подобных-на-щений.

Не. ясно,связаны ли эти нарушения с изменением активности пеп-дергической пшоталэмо-гилофизарной системы, играющей существен-то роль в регуляции ГАКС7 В то же время, показано, что глюкокор-коидаые гормоны в раннем онтогенезе влияют на метаболизм серото-I в мозге (Науменко, 1990), которому приписывается большое значе-:е в обеспечении циркадной активности ГАНС (Scapagnini et al., i7I; Van Delft et al.,I973; Ssafarczyk et al.,1981; Banky et al., ©4). Принимая это во внимание

целью настоящей работы явилось исследование серотонинергичес-ж и ггептидергических гипоталамо-гипофизарных механизмов . модифи-|цип ниркадаого ритма эдренокортикэльной. активности у взрослых

крыс после нарушения глкжокортикоидного.баланса в раннем пост* тальном онтогенезе. В связи с этим были поставлены следующие

задачи исследования:

1. Изучить Елияние нарушения глюкокортикоидного баланса третьей неделе постнатального онтогенеза на морфо-функционалы показатели активности адренокортикальной и кортиколиберинвргиче кой систем у взрослых крыс.

2. Исследовать циркадную активность нейросекреторных клеч (НСК) паравентрикулярного (ПВЯ), супраоптического (СОЯ) и нейро! супрахиазматического (СХЯ) ядер гипоталамуса у взрослых кивотнш нарушенным в раннем онтогенезе глюкокортикоидным балансом.

3. Выяснить связано ли подавление циркадной ритмики ГАКС, результате изменения глюкокортикоидного баланса в раннем онтот зе, с изменением серотонинергической системы мозга.

4. Изучить влияние нарушения обмена серотонина в раннем ош генезе на циркадные ритмы активности ГАКС; НСК ПВЯ и СОЯ; нейро! СХЯ гипоталамуса, а также на изменение уровня серотонина в мозге течение суток у взрослых крыс.

Основные положения! выносимые на защиту:

1. Подавление циркадного ритма адренокортикальной активное! вызванное изменением глюкокортикоидного баланса на третьей неде постнатального онтогенеза сопровождается нарушением механизк циклического высвобождения нейрогормонов из НСК ПВЯ и СОЯ, а та! амплитудно-фазовой перестройкой суточной активности нейронов С гипоталамуса.

2. В'нарушении циркадной активности НСК ПВЯ и СОЯ, нейро! СХЯ гипоталамуса после инъекции глюкокортикоидов в раннем оцтм незе принимает участие серотошшергическая система мoзгaí у взре лых животных наблюдается снижение уровня серотонина в среднем мс ге и подавление циркадного ритма его содержания.в гипоталамусе.

3. Блокада синтеза серотонина на третьей неделе постнаталы го онтогенеза приводит (как и при изменении глюкокортикоидного С ланса) к аналогичным нарушениям циркадного ритма адренокортш^

'ной функции и динашпш содержания серотонина в мозге, и более I раженному нарушению циркадной .активности НСК ПВЯ и СОЯ, нейро! СХЯ гипоталамуса у взрослых животных. '

Научная новизна.В работе получены новые факты о связи гипог ламической нейросекреции с регуляцией циркадного ритма активное ГАКС. Впервые с помощью гистохимического, иммуногистохимическоп морфометрического анализа- у взрослых крыс, с нарушении™ в раш

расте гормональным балансом или обменом серотонина, прослежены кциональные изменения циркадной активности НСК ПВЯ и СОЯ, ней-ов СХЯ гипоталамуса, а также активности средгашого возвышения и ней доли гипофиза у взрослых крыс. Установлено, что эффект от действий в раннем постнатальном онтогенезе на формирование цир-Ной организации ГАНС опосредуется через влияние на серотонинер-ескую систему мозга.

Теоретическая и практическая значимость. Полученные результа-развивзют теоретические представления о роли серотонинергичес-: и пептидергической гиготаламо-гипофизарной систем мозга -в ре-[яции циркадной организации ГАНС, механизмах ее формирования и можных нарушений при действии.неблагоприятных факторов в раннем 'огенезе, что позволит на практике корригировать аномалии разви-[ ГАНС еще на ранних этапах постнатальной жизни.

Материалы данного исследования используются в курсе лекций гх спецкурсов "Нейроэндокринология" и "Поведение животных" на редре физиологии человека и животных КемГУ.

Апробация работы. Основные результаты- настоящего исследования юкены и обсуждены на научных конференциях молодых ученых г.Ке->ова (1985, 1986); на городских семинарах по нейроэндокринологии 1енинграда (1987, 1990); на III Всесоюзной конференции по нейро-1С(Яринологии (Харьков, 1988); на VII Всесоюзной конференции по ¡логической физиологии (Ашхабад, 1989);, на Международном симпо-те "Физиология гипофизарно-адренокортикальной системы" (Ленин-ад, 1990).

Структура и объеы работы. Диссертация состоит из введения, об-эа литературы, описания материала и методов, результатов собст-юых исследований, обсуждения и выводов.

Общий объем диссертации - 193 страницы с 33 рисунками и 24 5лицами. Список литературы включает 398 источников, из них 345 эстрэнных.

МАТЕРИАЛЫ И -МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проведено на белых беспородных крысах-самцах,ро-вшихся в виварии КемГУ. Животных содержали при естественном ос-щении при температуре воздуха 22-24°С, ьоду и пишу даЕали ad litt im. Все эксперименты выполнены в вегаше-летний сезон года. Поты новорождённых крысят выравнивали по fi-8 животных.

Первая группа опытов (I3Q животных).. Было проведено 4 экспе риментальные серии. В контрольной серии крисят не подвергали ks ким-либо воздействиям и оставляли интактными. Крысятам 2-ой серк с 17 по 19 дни жизни ежедневно внутрибрюшшшо вводили по 0.5 и преднизолон гидрохлорида ("G.Richter", Венгрия), растворенного 0.1 мл воды. Киеотным 3-ей серии на 15 и 17 дни жизни ввода внутрибршинно Еодную суспензию парахлорфеьилаланина (ПХФА, "Serva ФРГ) в дозе 300 мг на кг веса тела в 0.1 мл еоды. На 18 и 1Э да жизни этим животным вводили по 0.1 мл воды. Крысятам 4-ой серп вводили растворитель по той же схеме, чтобы нивелировать влияет самой процедуры введения. Все инъекции проводили в утренние час суток с 9 до 10 часов.(Поскольку не было обнаружено различий в da зальном ритме секреции кортикостероидов и относительной площад пучково-сетчатой зоны коры надпочечников между интактными и полу чавшими инъекцию воды животными, в настоящей работе использовал только интактный контроль). •

Вторая группа опытов (130 животных),Исследовали влияние нару шения глюкокортикоидного баланса или обмена серотонина в ранне онтогенезе на циркадный ритм содержания серотонина в гипотамусе среднем мозге у взрослых крыс. Были использованы те же экоперимен тальныв серии животных, что и в первой груше' опытов.

В Еозрасте II0-I20 дней крысят Есех серий обеих эксиеримен талышх гругш разделяли на 4 примерно равные части, каждую из ко торых декапитировали в различное время суток - в 3, 9, 15 и 21 ча После декапитации кровь собирали для определения кортикостерона. крыс немедленно извлекали средний мозг, гсшоталамйческую область гипофиз и правый надпочечник. • •'

Фиксация материала и гистологическая обработка. Для гистоло гического исследования гипоталамическую область и гипофиз фиксиро вали е смеси- пикршовая кислота - формалин (в соотношении 3:5) пр 37ЬС в течетш 7 дней (Choy et al., 1977).Последующую заливку в па рафин осуществляли обычшм способов. Срезы, изготовленные ео фрон тальной плоскости,толщиной 5-7 мкм,окрашивали ларальдегид-фуксино по Гомори-Габу с докрас.кой азан по Гейденгайну. Надпочечник фикси ровали в 10 % нейтральной формалине, парафиновые срезы толшрио 5-7 мкм окрашивали гематоксилин-эозином. Иммуноркактивний материа выявляли периксидаза-антипероксидазным методом с помощью пнтисыео роток 'и скрашивали диэминобензидином (Stembergei-, Josepn, 1979).

шi применены антисыЕоротки к вазопресскну и кортинолиберияу.

Чорфалхеяричеаюсй. анализ материала. Для оценки функциональной стивнооти гомориположительных НСК в 2-х основных неЯросекретсршх знтрах гипоталамуса - ПВЯ и СОЯ были использованы следующие кри-зрип: объем ядрышка, как показатель интенсивности белкового аш-эза в клетке (Eüatrcm,1958; 0хонскяя,19Т2; Bessone, 1585) и число фышек в ядре (полиядршковке ИСК): дополнительно - объем ядер таток и соотношение Функциональных. типов НСК (Поленов,1963). Уча-;взя,что КСК Солее ростральной вентромедаадьной части ПЗЯ (ПВЯгал) девт преимущественно сксктоцинергическуга, а каудалъной дорсолатз-зльной части (ПВЯдл) -вазопрессинергическую природу (йраснозская, ,'зик, 1985), ми оценивали состояние НСК отдельно ПВЯем и ИБЯдл.

Для полноты оценки функционального состояния нейросекр^торной !стемы гипоталамуса большее значение имеет определение нз£росек-эторного материала (НСМ) в нэйрогемальных отделах. Содержание НСМ з внутренней и наружной зонах срединного возвышения и в ЗДГ оггре-зляли визуально по 5-бальяой системе.Количество иммунореактивного. зртиколиберика в наружной зоне срединного возвышения - при помощи сулярной сетки. ' _

Активность СХЧ гипоталамуса оценивали на основании объема iep нейронов.

Состояние надпочечников характеризовали по их относительной эссе,относительной площади пучково-сетчэтой нош и по объему ядер теток нзругаей части пучковой зоны коры надпочечников (5-6 рядов теток, расположенных сразу за клубочковой.зоной, которые по мнз-яо ряда исследователей (Kirillow, Kurilenko, 1979) наиболее ярко сражают функциональное состояние клеток, синтезирующих глшкокор-

ПС0ИД1Ш9 ГОрМОНЫ ) . •

Биолагич.еасие .кеяоЗьг.Определение кортнкостерона в плазме кро-i осуществлял! с помодав флюориметрического метода (Панков, Усвз-зва, 1965), а содержание серотоикпз в среднем мозге и гштоталаму-з - по методу Guzzon, Green (1970).

-¿апехшшеская обрлбоят данных. Оценку достоверности разли-;й проводили с помощью t-критерия Стьюдента (Ллохинский, 1973) и з математической програмга "Косинор", предложенной Хальбергом [968) и модифицировашгей Кузьминовым (1975).

• РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I. Влияние нарушения глюкокортикоидного баланса в ранней онтогенезе на циркадные ритмы активности ГАНС, нейро-секреторшх клеток ГШЧ и СОЯ, нейронов СХЯ гипоталамуса, срединного возвышения и ЭДР, содервзния серото-шна в иозге у взрослых крыс.

В настоящем исоледоьании показано, что избыток глюкокорти» дон, создаваемый введением прэдаизолонь на I7-IS дни жизни, при; дит у взрослых животных к нарушению содержания и динамики корта: сторона: отмечается достоверное понижение среднесуточного уро гормона и существенное сглаживание его циркадяых колебаний в пл mo крови, прежде всего за счет достоверного понижения уровня » тккостерона в вечорние часы (рисЛ.В). Эти данные хорошо согла ются с результатами исследований тех авторов.которые пришли к з люченыо, что экзогенные глюкокортикоиды: преднизалон (Лурье,198 кортикостерон (Turner, Taylor, 1Э76),' либо АКТГ (Lorenz et a . 1974), Еводимые в указанный период онтогенеза.привадят к снике: амплитуды циркадного ритма содержания кортикост'ерона в плазме к ви у половозрелых крыс.

, . У контрольных животных были обнаружены достоверные циркад колебания относительной площади пучково-сетчатой зоны, объема я, клеток наружной части пучковой зоны кора надпочечников, максима ные значения которых приходились .на вечерние часы (рис.1. А, Б Наблюдались параллельно с повышением .уровня кортикостерона в пл мэ крови. .Изменение баланса'глюкокортикоидов на 37ей неделе ки пркЕело к подавлению циркадных колебаний относительной площ пучково-сетчатой зоны коры надпочечников.Суточные колебания обь ядер клеток наружной части пучковой зоны становились низкоамп тудшми,' вероятно ва счет достоверного уменьшения объема ядер к ток в вечернее время (рисЛ.Б).

Таким образом, модификация циркадного ритма содержания кор костерона в плазме крови у взрослых крыс, инъецированных в ран -онтогенезе проднизолоном, является результатом нарушешгя циркам активности клеток коры надпочечников, синтезирующих глшкокортл идние гормоны. .

Однако, тот ф;жт, что реакция изолированных. надпочечников ЛКТГ достоверно изменялась в течение суток, как у контрольных,. у. .у nojiyjSFïïiix кз З-зй неделе жизни инъекции преднизалона kîeoi (Лурье, 1931), убедительно показывает, что модификация циркэда ритма адречокортикальной функции кроется кэ в нарушении чувст

время суток, ч

Рис.1. Влияние введения проднизолона в раннем онтогенезе на циркадную активность ГАНС у взрослых крыс.

А - относительная площадь пучково-сетчатой зона коры надпочечников;

Б объем ядер клеток пучковой зоны коры надпочечников;

В - уровень кортиксстерона в плазме крови.

-- контрольная, ------ экспериментальная серии.

Стрелкой указана циркадная акрофаза, если выявляется достоверный ритм; * - р < 0.05; ** - р < 0.01 по сравнению с соответствующей группой контрольной серии.

аности надпочечников к AKTF. а вероятно, обусловлена изменения-з центральных регуляторных звеньях системы.

Существенное значение в регуляции ГАКС- отводится "классичос-' нейросекреторной системе гипоталамуса, которая Еключает ПВЯ и , вырабатывающие нонапептидше нейрогормоны: вазолрессин и оц-5цин. Можно считать доказанным влияние вазопрессина и окситода-на кортгасотропнуа функцию адекогипофиза и кору надпочечшжсг^

(iiu:..lnghara, 1587). В то ко время, в доступной .литературе мы н ¿егрэти рзсот, которые би прояснили роль шйросекреторшх зло ментов гипоталамуса в формировании аркадной организации ГАКС, не смотря не. то, что циркадная активность ИСК ГШ и СПИ у грызуне достаточно изучена (!iLebrou,I958; Rtnne.Sonninen, 196'-!; Armstrong batton, 1976; Зубкова-Махэйжжа.и др.,1974; 1979; Степанова и др. TS8I; Шканцева, 1982). Для того, чтобы выяснить связан?, ли моди факаддея циркадного ритма активности ГАКС,вызванная инъекцией пред .ниаодона в раннем онтогенезе с изменением нейросекреторных меха (kilWiOE мозга у Езрослых животных била исследована активность НС ПВЯ и СОЯ гипоталамуса, а также состояние нейрогемзлышх отделов.

Продукция пептидных нейрогормонов. содержащихся в нейресекре та, находит свое отражение в активации белоксгатезаруюцей систем НСК. Иор&злоптаески это выражается б увеличении объема ядра и яд риака ИСК. Однако, объем ядра является Солее лабильной величиной находится в большой зависимости от факторов на связанных с синте зом нейросекрета, например: ионного состава цитоплазмы, окружавще ядро.Поэтому увеличение ядра клетки может происходить за счет гид ропического; а не1 функционального набухания. В связи с этим,.пр анализе активности ИСК мы решающее значение придавали размерам яд рышка НСК. •

Морфометрический анализ показал> что у животных контрольно серии имеются достоверные циркадныа колебания объема ядер и/ил ядрышек НСК ПВЯем, ПВЯцл и СОЯ, с акрофазой пригсдегцейся на вечор ю;е и ночные часы (рис.2),что позволяет говорить об.активации сип теза нонапептидергичеоких нейрогормонов в это время. Торможони синтеза нейрогормонов, а также усиленное их выведение из НСК про исходит на 5-6 часов позже' и наблздается в дневное время-. Об это свидетельствуют не только самые низкие значения объема ядер и/ил ядрышек НСК,- ко и увеличение количества иолиядрыгаковых клеток, чт можно рассматривать как признак торможения синтеза нонапептидерги ческнх гормонов (КрасноЕская, 1984). К тому же, днем увеличена кс личестЕо НСК, которые в соответствии со взглядами А.Л. ПоленоЕ (I9G3)- мы считали активно секратирующимя (тип I). и снижена дол клеток находящихся в стадии депонирования нейросекрета (тип Ш).

О том, что мы имеем дело с усилением выведения нейрогормонс в дневное время свидетельствовал и онзлиз количества НСМ в кару* ной и* внутретей зонах срединного возвышения а ЭДГ, где нами бш шяълеш достоверные ниркадниэ колебания количества НСК. Минималь .ih'nj количество НСМ в этиЗс отделах "наблюдалось даем, что на не

ГОЯвм

объем ядрышек НС1С

СОЯ

объем ядрышек НС1С

СХН

объем ядер нейронов

мкм 90 •

80 ■»

---?

70 60

1--1 -И

03 .09 15 21 03 время суток, ч

03 09 . 15 21 03 время суток, ч

>ис. 2. Влияние введения йряднизолона в раннем онтогенезе на циркадную активность нейросекреторных клеток ПВЯ и СОЯ,, нейронов СХЯ гиготаламуса у Езрослых крыс.

--- контрольная, ---— - экспериментальна* серии.

Обозначения как т: рис Л.

кзгл; \ указывает на шведанив нейрогормонов в кровь. Максимальны коли -эства НСМ в срединном возвышении и в ЗДГ обнаружена в вечер нив и ночные часы суток параллельно с увеличением объема ядер и или ядрышек НСК ГШЯ и СОЯ.

Полученные данные ь целом,согласуются с исследованиями други авторов, отмечавших усиление синтеза ньйрогормоьов в НСК ПВЯ и СО гипоталамуса в период ночного бодрствования, в то время как макси мальное выводенив нейрогормоиов из нейрогемалышх отделов наблюда • ется у грызунов днем в период покоя животных (Nlebrai,I95S; Rinne Sonninen, 1964; Степанова и др., IS6I; ¡Сшканцева, 1982).

Изменение гормонального баланса на 3-ей неделе жизни, вызван нов введением преднизолона, 1гривело к долговременному нарушена циркадной активности нонапептидергической ГГПС. У половозрелых эк спериментальных крыс нами были обнаружены однонаправленные измене ■ ния активности НСК ПВЯвм и ПЕЯдл: максимальные объем ядер к ядры шек клеток наблюдались на 7-10 часов позже, чем у контрольных жи вотных и приходились на позднее утреннее и дневное время - IQ-I часов ' (рис.2). Были подавлены циркадные колебания объема ядрыше , НСК СОЯ, за-счет достоверного уменьшения их объема в утреннее вра мя. Более того, в СОЯ гипоталамуса были подавлены циркадные коле бания доли НСК, находящееся в стадии депонирования нейросекрет (тип Ш) и снижено (р < 0.05) среднесуточное количество НСК II типе

Описанные вый8 изменения активности НСК СОЯ в течение сутс рместе с увеличением (р < 0.05) средне су точного количества полияд] рышковнх НСК с 4.7 ± 0.69 % до 7.4 ± 1.13 % и пятшератным роете количества пикномррфных НСК ' свидетельствует о более выражение снижении 'функциональной активности НСК СОЯ по сравнению с обею, исследуемыми областями ПВЯ. Тот факт, что НСК СОЯ более чувств! тельны к повреждающему действию глюкокортикоидов,чем ПВЯ,вероятна ; объясняется различием в афферентащш этих гипоталамических центре

Амгслитудно- фазовая реорганизация циркадной активности НСК m и- СОЯ,вызванная нарушением глюкокортикоидного баланса в раннем oi тогенезе, привела к тону, что . у взрослых животных были подавле! циркадные ритмы содержания НСИ в наружной зоне срединного возвыше тя и в ЗДГ, т.е. к нарушению.транспорта нейрогормонов из данш нейрогемалышх отделов в гипефизарный 'порталышй кровоток.

Полученные результаты в совокупности позволяют прийти к 3ai лючению, что эф{ект от глюкокортикоидного дисбаланса в критичесга период онтогенеза, проявляющийся в нарушении циркадной организащ ТАКС,по крайней мере частично, опосредуется через изменение актга

юти нонапептидергической 1ТНС.Можно с большей вероятностью пред-•дожить, что окситоцин- и ьазоггрессинергические элементы гипзта-гоуеа вносят существенный вклад в регуляцию циркадкого ритма ак-[вностй ТАКС.'

Однако, согласно совремешшм представлениям, эффект вазопрес-ша и окситошша.в большей степени связан с потенцированием дей'с-шя кортиколиберяна (ОИИез ег а!., 1982; ВаеггясМ а1., 1983) основного кортикотропин-рилизинг фактора (КР$) определяющего ха-жтер циркадннх колебаний ТАКС. Анализ содержания иммунореаэтив-)го кортиколиберинэ в наружной зоне срединного возвышения; где РФ-активность наиболее высока (Наа1Ито1ю ег а1., 1982) и.в основ-)м связана с кортиколиберином .(Ката1а вХ а1., 1983; Ь1роз11з а! I.,1983), показал, что у контрольных животных имеются достоверные фкадные колебания нейрогормона с вкрофазой,приходящейся на 9 ча-зв утра. В литературе имеются саше противоречивые' данные по по-зду циркадной акрсфазы содержания кортиколиберинэ в гипоталамусе в срединном возвышении, однако, есо исследователи отмечают, что ад наблюдается раньше увеличения концентрации кортикостероидов в зови (Н1гозМ^е, Еакакига,1971; .ТакеЬе в г а1.,1971; Романов и др., Э75). Это подтверждают, и наши исследования. Вероятно, наблюдаемое . эмп увеличение количества кортиколибериниммунореактивных волокон наружной зоне срединного возвышения в утреннее Еремя свидетельс-вует об усиленном депонировании кортиколибериня в эти часы суток, то время как активнее выведешь нейропептида из срединного воз-швния в крозь осуществляется днем • и наблюдается параллельно с эксимальным выведением юнапептидергических нейрогормонов в тральный кровоток,когда в наружной зоне срединного возвышения выяв-яется незначительное количество волокон иммунореактивных к корти-элиберину. . . "

Инъекции преднизолона в 17-1Э-дневном Еозрасте привели к пот ввлению циркадного ритма содержания иммукореактивного корткколи-зрина в срединном возвышении у взрослых крыс и к незначительному ■ величению среднесуточного уровня нейрогормона. Подавление ритма, зроятно, является следствием нарушения синтеза нейропептида в НСК елкоклеточной части ПВЯ.где главным образом происходит-его синтез ^еге11ем1га11ег е£ а1.,1982;" 1983). Одаако, нам не удалось оценить зменештя кортшсолиборичергических НСК ПВЯ.что объясняется быстрым введением синтезированного нейропептида н:з керш'Эрконов в аксоны, ля юго, чтобы бычентъ кортико.пи^'7!г; лорикзриоиэх необходимо оиолтгро.тлов с-!».: г ;тч: О.-'чагроР'шие выведения

нейропэптдцв,например: введением в ¡кьлудочки мозга колэщина (Ва: гу, 979; Flerko, 1981). Тем нэ менее, полученные результаты да! основание говорить, чао вффект от введения предаизолона е раш онтогенезе опосредуется также и через изменение активности КС] синтезирующих коршколибери?.

В настоящее время доказано,что мелкоклеточная часть ПВН пол; чает афферентную импульсацшо из СХЯ гипоталамуса, которое являет! ъакнеЯшим аламзнтом центральных биологических часов, ответственен аа синхронизацию не йро эндокринных функций (AguJ.lar-Eoblero, Drui ker-Colln, 1987; Rle ¡¡veld, 1987; Cuglni, 1983). Это послужило толком для исследования нейроноЕ СХЯ гипоталамуса. При этом еыяси лось, что инъекции преднизалона на 3-ей недело аиггш приводят к I частому смещению акрофазы циркадных колебании объема ядер HBiipi нов СХЯ гипоталамуса у взрослых крыс с утреннего времени на вече] нав часы суток (рис.2). Обращает на себя внимание, что уэкспер] ментальных животных наблюдалось снижение (р < 0.05) объема яд< нейронов в утреннее' Еремя.как при анализе клеток независимо от i эргичносй), так и при исследовании иммуногистохишчески выявленш вазопрессинергических клеток по сравнению с таковыми у контрольш крыс. Таким образом, модификация циркадного ритма адренокортикал] ной функции у взрослых крыс, с нарушенным в раннем возрасте тлкк< кортиксидным балансом, связана также и с фазовой реорганизацш циркадной активности нейронов СХЯ гипоталамуса.

Нейроны СХЯ окружены густой сетью серотонинергичэских волок< идущих к этому пшоталамическому центру от ядер шва среднего мозз основного источника церебрального серстонина (Moore', 1Э79; 1983; Pi rent et al., 1931)'. Предполагается, что в СХЯ находятся вставочш нейроны передающие регуляторное влияние серотонинергичерких не] ронов ядер шва на гипоталамические клетки,продуцирующие аденогшк физотропные.нейрогормоны (Rletveld, 1987). Тот факт, что после m ререзкл путей, идущие от ядер шва, или после вьутрибрюшшшого вв! дения ПХФА,угнетающего синтез геротонина, нарушается циркадяая m риодичносп потребления 2 .- дезоксиглшкозы ь СХЯ (Негу et al.,I98: ' указывает на то, что серотогашергическая система мозга может и: рать ключевую pojif в передаче, циркадной информации. Соротонинерп чвекиа волокна -нейронов ядер шеь проецируются и на крупноклэточщ океитоцшюодержащие ИСК ПЕЯ (SawcheUko, Swanson, 1381) и СОЯ' (Sa1 chenko et al., 1983). .Кроме того, иммуноцитохишчески показана о, ьовремешим локализация евротонина и кортиколиберина в нейрон; мчдкоклеточной части ПВЯ чМрог.Пз et al., 1987). Нее это дает о<

^ованив полагать, что центральная серотонинергическая система мозга может елиять на функцию ГАНС не только черэз СХЛ, но и непосредственно через пептидергическив НСК ЛВЯ и СОЯ. В связи с этим определенный интерес представляли исследования циркадной ритмики содержания сератошша в мозге у взрослых крыс, с нарушенным в критический период онтогенеза глюкокортикоидным балансом.

Как показьли наши исследования, контрольные животные имели низко амплитудные', но достоверные циркадане колебания уровня евро-тонина в гипоталамусе, но не в среднем мозге. Содержание моноамкна в гипоталамусе было наибольший в ночное время (акрофаза ритма- 24ч 16мин). В литературе можно найти данные как подтвзркдвшцие (Krieger et al.,1980; Macho et al.,1986), так и противоречащие (WalKer, 1983) полученным результатам. Относительно циркадного ритма уровня серотонина в среднем мозге также нет единого мнения (Friedman,Walker,1968; Simon,George,1975).По-видимому,временная организация активности серотошшергической системы является достаточно лабильной.

Инъекции предшзолояа в раннем онтогенезе призели __ к существенному изменению содержания и динамики серотонина. Средне су точный уровень серотонина в среднем мозге был достоверно понижен с 1.2 ± 0.03 до I.I ± 0.03 мкг/г и презде всего,за счет падения (р < 0.05) содержания нейромедиатора в 21 и 3 часа. В гипоталамусе был подавлен циркадный ритм уровня серотонина.

Таким образом, снижение содержания серотонина в среднем мозге 'и подавление его динамики в пшоталамусе, может явиться одной из причин нарушения циркадного ритма активности нейронов СХЯ, НСК ПЕЯ 'и СОЯ гипоталамуса, и, в конечном счете, модификации цйркадной активности .ГАНС.

2.- Влияние блокады синтеза серотонина в ранней онтогенеза на циркадные ритиы активности ГАНС, нейросекре-. торных клеток ЛЕЯ к СОЯ, нейронов СХЯ тапоталацусь, срединного возвышения и ЗДГ, содержание серотогаша в . ыозге у взрослых крыс.

Известно,что глкгсокортикоидные гормоны способны влиять на метаболизм серотонина р мозге, активируя в качестве генетического 'индуктора 'триптофзнгидроксилазу - .ключевой фермент синтеза Сиротой нота (Tßlegöy, 1982; Glavin, 1935/ Науменко, ТЭуО) . Б селзи с этим возникает вопрос, не-связана ли модификация шгркадной активности ГАНС у ыкятних, инъецированных преднизолоном на 3-oíi неделе пост-1 нательного онтогенеза, непосредственно с нарубанием семена сьрото-шша в LTCM возраст-;.' Именно в это ,крзмд начитот' фордарсьаниэ

циркадная организация ГАКС и при активном участии серотонинерги-ческой системы мозГа происходит ее синхронизация с циркадным осциллятором - СХЯ (Вапку et а1.,1986). Для ответа на зтот вопрос т провели експериментальную серию в которой нарушали баланс серото-нина у крысят с помощью внутрибршшшшой инъекции ПХФА - ингибитора триптофангидроксилазы в 15-16 - дневном возрасте. Введение ГОСФА на 15-16 дни жизни связано с тем, что резкое понижение уровня серо'то-нина в мозге после применения ПХФА отмечается не ранее 36-42 часов с момента введения препарата (Зсара£п1п1 ел а1., 1971).

Блокада синтеза серотонин'а на 3-ей неделе жизни, привела к существенным нарушениям циркадной активности ГАКС у взрослых животных, ' характер которых бил аналогичен изменениям наблюдаемым у

I

3

время суто2:, ч

Рис. 3. Влияние введения парахлорфенилглантеа в раннем онто-

ге^сг.е кз цирчгднух; активность ГАКС у Езрос-ца крыс.

--контрольная, .1___- .•>кепбримеи*алыюя мрул.

а кчк на I

взрослых крыс, получавших в атом возрасте преднизолон: отмечалось подавление циркадных колебаний относительной площади пучково-сет-чатой зонч коры надпочечников,сильное сглаживание циркадных ритмов уровня кортикостерона в плазме крови и объема ядер клеток наружной части пучкоЕой зоны коры надпочечников (рис'.З). Подавление' ритма происходило за счет снижения уровня кортикостерона и объема ядер клеток в'вечерние часы суток.

Полученные-данные согласуются с результатами, которые свидетельствуют о том, что разрушение серотонинергических терминалей в области СХЯ с помощью нейротоксина - 5,7-диокситриптамина у 16-дневньх крысят приводит к подавлению циркадных колебаний уровня кортикостерона в крови у двухмесячных животных (ВапКу ег а1.,19в6; Яа1&эг, ВапКу,1986). Практически полное подавление циркадного рит-мц активности ГАНС в нашем опыте, по Еидимому, связано .как раз о тем, что инъекция ПЖБА в 15-16-дневном возраста препятствует появлению у них циркадного ритма содержания серотонина в гипоталамусе, что мы в дальнейшем наблюдали у взрослых животных. При этом обращает на себя внимание, что эффект действия ПХФА- в критический период онтогенеза на серотонинергическую систему мозга сходен с аффектом действия преднизолона: отмечается снижение (р 0.05) 'среднесуточного уровня серогошша в среднем мозге и исчезновение его циркадшх колебаний в гипоталамусе. ' ,

Однонаправленность полученных результатов свидетельствует о том, что гормональные воздействия ■ или нарушение нейромедиаторшх систем мозга с помощью фармакологических средств в критический для формирования циркадной организации ГАНС период могут приводить 'К отрицательным отдаленным последствиям в виде подавления цпрчадаой■ активности ТАКС через нарушение метаболизма серотонина у неполовозрелых кивотных.

' Тем не менее, последствия от введения преднизолона и ПХФА на 3-ей неделе постнатальной жизни не совсем идентичны. Блокада синтеза серотонина в раннем онтогенезе привела к более значительным нарушениям активности нсяапептидерглческой ГГОС у Езрослшс животных, чем инъекция преднизолона. У половозрелых крыс наблюдалось увеличение (р < 0.05) среднесуточного количества полиядрышкових ИСК не только в СОЯ, не и в обеих'исследуемых областях ПВЯ, как по, сравнению с контрольными, так и с получавшими предьизолон ¡кивстш-№5. Кроме того, было достоверно увеличено среднесуточное количество пикноморфшх ИСК в ПВЯ и СОЯ.Все это свидетельствует о выражэн-ном стгаеним . секре гообразовачиа в исследуемых нейросокреторшх

ЯВЯвм

объем ядрышек ИСК

пвадп.

объем ядрышек НСК

Ёремя суток, ч

СОЯ

объем ядрышек НСК

схя

объем ядер нейронов

мкм

•Рис.. 4. Влияние введения пэрахпорфенилаланина в раннем онтог генезе на циркадаую активность нейросекреторных клеток ПВЯ И' СОЯ, нейронов СХЯ гипоталамуса у взрослых крыс.

---контрольнз.1,- '.... - экспериментальная серии.

Обозначения как на рис.1.

центрах. Наконец, у акспериментельных крыс оказались подавленными нв только циркадныа колебания объема ядрышек НСК СОЯ, суточные изменения 'доли НСК с пониженной секреторной активностью (тш Ш) в СОЯ, что мы наблюдали и у животных, инъецированных продаисолоном, но такке подавлены цирквдныэ колебания объема ядрышек НСК ПВЯвм (рис.4).В ПВЯдл наблюдалось сглаживание циркадшх колебаний объема ядрышек НСК п смещение акрофазы ритма с ьочного времени (Зч 54нин) не более рг.ннке вечерние'часы суток \2?л 42мин). Интересно,что акрофазы цирнадкых колебаний объема ядзр НСК в обеих. исследуемых об-лэсчы 1ВЯ тпг-га смещалис! на вечернее время, т.е. наблюдались на 9 часоь рэнмаэ, чем у контрольных крыс, тогда как у животных,получи шкх в раннем .онтогенезе преданзолон, к,°к т у.,<э стмочзли выше,' акрофазы к-лебздкй объема ядер НСК ПВКчм и ПйЯдл гипоталамуса ап-цс-'л!'»- на время суток. Эти данные позволяют прйапологагь,

что Ш»А оказывает долгосрочный эффект на иствеиооть нейросакрэ-тс-ршх центров гипоталамуса,механизмы которого могут быть в значительной степени иные,чем при изменении глюкокортикоидного баланса.

Известно, что серотошш на определенных этапах онтогенеза может выполнять роль индуктора морфогенетических процессов и,с частности, в гшготаламической области - дифференшфавки некоторых пеп-тидергиче'ских нейронов (Угршов, 1939). Вероятно, блокада синтеза серототша в критически период онтогенеза оказывает влияние на процессы созревания ИСК ПВЯ н СОЯ гипоталамуса,которые, как спаде--тельствуют литературные данные, в этом возрасте епв не закончились (Данилова и др., 1982; Лепехина, 1984). А с другой стороны, модификация циркадного ритма активности НСК ПВЯ и СОЯ под влиянием нарушения обмена серотошша в раннем онтогенезе может осуществляться через амплитудно-фазовую перестройку активности нейронов СХЯ гипс-таламуса с которым ПВЯ и СОЯ '.зсво связаны. Это подтвердили и наши исследования. Если инъекцга преднизолона на 3-ей неделе кизш: вызвали лишь фазовув реорганизацию активности нейронов СХЯ, то в случае с инъекцией ПХФА.т наблюдали полное подавление цкркадной ритмики изменения объема ядер нейронов СХЯ гипоталамуса у взрослых крыо. Использование только группового анализа не дает полной уверенности утверждать, что мы имеем дело с действительным подавлением ритма, а не с фазовой десхшхронизацией индивидуальных ритмов■ внутри популяции. Последнее тем оолее вероятно поскольку средне-■ групповые значения объема ядер нейронов СХЯ гипоталамуса в различные часы суток имели промежуточные значения (рис:.4).

Тагам .образом, у взрослых крыс, получавших на третьей неделе ,жизни ПХФА, более выраженные нарушения циркадной активности нейронов отмечались в тех гипоталамнческих областях,- которые согласно литературным данным имеют серотошшергичежун иннервацию: окснто-цинергическ/е НСК ПВЯш (Вегк,Р1п5се].з1е1п,19б1; ВРлтеНепко.адаапзсп, 1931) и СОЯ (2а\тс11епко еъ а1., 1963), а также нейроны СХЯ гипоталамуса'.

Изменение серстонинергическсй системы мозга, ьизвашгае беодй-нием 1ВСФА в радием онтогенезе ,скззыьает специфическое шдошв и нч активность срединного возашешя у взрос.тах животных, котгрзе также богато шшершфсвано серотош;я1'ргл"вск:?.а1 ьолскигш, иг/гас«' <>■' ядер шва среднего мозга и да иег&з* е1 а1., 1 V ькспорк тальных крыо среднесуточной кол/л-гстео НСМ во внутренней и наружной ЗОНЙЛ СрЭДЮПОГО ЕОЙЕНПЮт'Л РЫЛО ДЗеТОЫирНО у1.':ЛИЧиаС , кек :п срзЕнеш» с контрольным!, так и с получаиннми г.рзд'шзэл-ь з^х.'-.т.'::;-

ми. При атом,как и у крыс,инъецированных преднизалоном, отмечалось подавление циркадннх колебаний содержания НСМ в наружной зоне срединного возвышения и в ЗДГ. Несомненно, что одной из причин нарушения транспорта нейрогормонов в кровоток портальной системы аде-ногипофиза и в систему общей циркуляции, является амплитудно-фазовая перестройка активности нейронов СХЯ, ИСК ПВЯ и СОЯ гипоталамуса. Однако, увеличение количества НСМ и подавление его суточной динамики, может явиться следствием прямого нарушения серотонкнор-гической иннервации срединного возвышения. В этой области обнаружены значительные количества серотонина (Заауебга е1; а1., 1974) и циркэдная ритмика втого моноамина (Кои1и еЪ а1., 1989).'.

Наконец, еще одним звеном на которое может оказать действие . снижения уровня серотонина в среднем мозге и подавление его цир-кадных колебаний в гипоталамусе, могут быть сосуды портальной системы гипофиза. Известно, что саротошш в наружной зоне срединного возвышения может изменять местный кровоток или оказывать влияние на эндотелий капилляров, усиливая или уменьшая поступление нейрогормонов в портальный кровоток, либо изменяя площадь поверхности соприкосновения ножек таницитов с базалькой мембраной портальных капилляров и перикапиллярным пространством (Са1аз,1977;ЗойЬотоп1ап ег а!.,1988).Поэтому,снижение серотонина в среднем мозге может вызывать значительное сужение просвета сосудов и способствовать торможению вывода нейрогормонов в кровь портальной системы гипофиза.

Таким образом,блокада синтеза серотонина в критический период ' онтогенеза, когда происходит формирование циркадной активности ГАЩ (Тау1ог,1,еп£Уагу, 1977; Ьеп^агу et а!., 1977) и ее синхронизация с ведущим осциллятором и внешней средой, вызывает нарушение активности нейронов СХЯ, НСК ПВЯ и СОЯ гипоталамуса, что в конечном счета приводит к модификации циркадного ритма адренокортикаль-ной функции, которая сохраняется у взрослых животных.

Представленные материалы в совокупности свидетельствуют о том-, что г;^вкокортикоидаше гормоны, вводимые в определенные периоды раннего постнатальйого-онтогенеза, модифицируют одну из жестко детерминированных генотипом функций т циркадную периодичность ад-ренйкортикальной функции. Изменения адренокортикзльного ритма происходят веледствии перестроек в центральных регуляторляторных звеньях, управляющих данной функцией, включая серотонинергическую систему мззга, активность нейросекреторных клеток ПВЯ и СОЯ, нейронов СХЯ гипоталамуса.

ВЫВОДЫ

1. Изменений, глюкоксртикоидного баланса с иомощьи ияьекний. преднизалона крысятам в возрасте 17-19 дней постнаталыюго онтогенеза приводит у взрослых животных к нарушении циркадной активности вдранокортикальной функции: наблюдается подавленна циркадаых колебаний относительной площади пучково-сетчатой зоны, снижение амплитуда колебакй объема ядер клеток пучковой зоны коры надпочечников и уровня кортикостерона в плазме крови.

2. Нарушение циркадной активности вдранокортикальной функции после введения преднизолона в раннем онтогенезе сопровождается подавлением циркадяого ритма содержания кортиколиберина в срединном возвышении и амплитудно - фазовой перестройкой циркадшх колебаний объема ядер нейронов СХЯ гипоталамуса.

• 3. Изменение глюкоксртикоидного баланса в раннем1 онтогенезе вызывает у взросла крыс нарушение циркадной активности нонапептид-ергической ГТНС. Об этом свидетельствует:

а) 7-10— часовой сдвиг акрофазы циркадаых колебаний объема ядер и ядрышек нейросекраторных клеток ПВЯем и ПВЯдл с вечернего ц ночного времени на поздние утренние-часы суток;

б) подавление циркадных колебаний объема ядрышек нейросекраторных клеток СОЯ гипоталамуса и. содержания нейросекреторного материала в наружной зоне срединного возвышения и в ЗДГ.

4. В механизме нарушения щгркадной активности адранокортикальной функции, а такие активности нейросзкреторных клеток ПВЯ II СОЯ,нейронов СХЯ гипоталамуса у взрослых крыо, получавших в раннем онтогенезе инъекции преднизолона, принимает участие серотоншергя-■ческая система мозга. У экспериментальных животных снижен уровень серотонинз в среднем мозге и подавлен его циркадгшй ритм в гипоталамусе . .

5Г Блокада синтеза серотошгаа с помощь» инъекций пьрахлор{ю-налалашма на 3-ей неделе постнаталъяого онтогенеза приводит к тому,что у взрослых животных наблюдаются сходнее (как и при введении предтшзолона) нарушения активности адршгакортигсэльной функции и серотогашергичеекой система мозга. ,

6. Блокада синтеза серотокинп а раннем онтогенезе ешшшт более выраженные, чем глккокортикон^шП дисбаланс, изм^пегая и:<-тивностя нонапептпдергической Г1Ч1С и нейронов ОХЯ гипоталамуса. У взрослых животных подавлены не только анркздяые колебания обт-емл ■ ядрышек нвйросекргаторних клеток СОЯ, содаржг.ннн неЯроськретч и наружной зоне срединного возвышения и б .ЭДГ, но и

з) подавлены ниркадныц колебания объема ядрышзк нейросекре-торган клеток ПВЯвм и объема ядер нейронов СХЯ гипоталамуса; ■

б) на 5-9 часов смещены ахрофазч цяркаднцх колебаний объема ддс-р и ядрышек нейросекреторнш клеток ПВЯдл гипоталамуса с вечер-наго и ночного'времени на более ранние часы суток;

в) увеличено количество полиядръпиковых и пикноморфных нейро--секреторных клеток, а tskjko клеток с пониженным выведением нейро-секрета в ПЕЧем,ПВЯдл и СОЯ гипоталамуса, свидетельствующее о значительном сшивши! синтеза иейрогормонов в 5тих центрах;

г) увеличено количество нейросекреторного материала в наружной зона средижого еозешзния, что указывает на торможение выведения нейрогормонсв в кровь портальной системы аденогипофаза.

7. Представленные материалы свидетельствуют о том,что модификация циркадксто ритма адрэнокортикэльной функции у взрослых крыс после изменения глккокортикоидного баланса в раннем онтогенезе происходит Еследствии перестроек в центральных регуляторных звеньях, управляющих данной функцией, .включая серотонинергическую систему, активность нейросекреторшх клеток ПВЯ и СОЯ, нейронов СХЯ гипоталамуса. .

Основные публикации по материалам диссертации.

1. Злобина H.A. Влияние введения преднизолона в раннем постнаталь-ном онтогенезе на циркадную периодичность коры надпочечников у взрослых крыс.// Материалы IY научной конф. молодых ученых Ленинского района г.Кемерова.-Кемерово, 1985.-С.62-63.

2. Злобина H.A.,Лурье С.Б. Морфо-функционалыше изменения суточной активности крутшоклеточных ядер гшюталамуса у взрослых крас гюсле введения преднизолона в раннем постнатальном онтоге-

■ ну:зз."// Тьбисы доклДП Всесоюзн.кснф.ио нейро эндокринологии.-Харьков, 1938.-С.102.

3. 3.iü3VM:: H.A., Лурье С.Б. Эфф&кт введения ннгкбитора синтеза се-]!От:л;;гна в раннем возрасте на суточную активность, гкпоталамо-ггаочигарюй койрзсэкрегорной системы ( ГГНС ). // Тезисы докл. VII [¡сесолвн.кэкф. по экологической физиологии.- Аихабад,1989.-С. П7-П8.

4. Äietfuwt H.A., Луръз С.Б. Исследование механизмов нарушения цир-кздной периодичности адренокортикальнэй функции взрослых крыс пос.г'е в!:ед'\'>г,м глккскортикоидов в раннем онтогенезе.Морфо-функ-циоиз.икий :пдхсд.// Тезисы дмсл, Мездунар.симпозиума "Физиолог/л гзггсцязчрт-а.тррноко;.тжальной систомы". Ленинград,1-4 окт.

5. Лурье С.Б., Решении A.M., Злобина H.A. Влияние нарушения, глм-кокортккоидного баланса в раннем онтогенезе на формирование циркадной организации гипофизарно-адренокортшсальной систем«.

, // Там ке.-С.75-76. !

6. Злобина H.A., Мурье С.Б., Даншава O.A.Влияние введения предки-золона в раннем постнатальном онтогенезе на суточную активность пшоталамо-гщофизарно-адренокортикальной системы взрослых крыс. // Проблемы .эндокринологии. -IS90.-T.36, N Б.-С.58-62.

7. Решении A.M., Лурье С.Б., Злобина H.A. Механизмы нарушение цир-кадного ритма активности и стресссрной реактивности корн надпочечников у взрослых крыс, вызванного гормональным дисбалансом в раннем онтогенезе. // Тезисы докл. Бсесоюзн. симпоз. "Стресс, адаптация и дисфункция", Кишинев, 27-28 июня I99I.-C.203.