Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Неспецифическая профилактика и терапия желудочно-кишечных стронгилятозов овец

ВАК РФ 03.00.20, Гельминтология

Автореферат диссертации по теме "Неспецифическая профилактика и терапия желудочно-кишечных стронгилятозов овец"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЕЛЬМИНТОЛОГИИ имени К. И. СКРЯБИНА

НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА И ТЕРАПИЯ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ СТРОНГИЛЯТОЗОВ ОВЕЦ

Специальность 03.00.20 — Гельминтология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

РГ б од 2 О ИЮН 199^

На правах рукописи

СЕЙСЕНОВ Болат Секенович

Москва — 1994

Работа выполнена в лаборатории иммунологии и генетики ВИГИС, в Карагандинской научно-исследовательской ветеринарной станции, Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте и ряде хозяйств Центрального Казахстана.

Научный руководитель — доктор ветеринарных наук, профессор Э. X. Даугалиева

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук И. А. Архипов (ВИГИС),

доктор биологических наук О. Г. Полетаева (ИМПиТМ)

Ведущая организация — Московская ветеринарная ака-демня. ^^

Защита состоится « » ¿//-¿Э^Я 1994 г. в /У часов на заседании специализированного совета Д-020.04 при Всероссийском научно-исследовательском институте гельминтологии имени К. И. Скрябина (ВИГИС).

Адрес: 117259, Москва, Б. Черемушкинская, 28.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИГИС.

Автореферат разослан » 1994 г

Ученый секретарь специализированного совета, доктор ветеринарных наук

С. В. Березкина

_ ._______ ВВЕДЕНИЕ

- - Актуальность проблемы. Как известно, стронгилятоэы желудочно-кишечного тракта овец имеют широкое распространение и наносят значительный экономический ущерб народному хозяйству. Основными мероприятиями в системе мер борьбы с ними остается этиотропная терапия. Проблемам терапии и ■ профилактики желудочно-кишечных стронгилятозов" посвящено'мн ого'научннх работ (Н.В. Демидов, 1972, 1982, 1987; Е.И. Малахова, 1973, 1975; М.А. Попов, 1989; C.B. Березки-на, 1992; В.И. Колесников, 1992; V.Kamath et al. , 1985; J-.Euse-Ъу ' , 1986; M.Katrinka , M. Poro vie , 1986; C.Barta et a^.J986 И другие); - Основной акцент при этом делается на дегельминтизацию яивотннх и, как правило, не учитывается их иммунобиологическая реактивность.

■ Вместе о тот известно, что гельминты являются мощным фактором вторичной'иммунологической'недостаточности и'иммунодефицвтов (Е.С; Лейкина, 1976, ~1983гЭ.Х. ' Даугалиева, 1981, 1984, 1986, 1991; О.Г.-Полетаева, 1983; Н.И;1^мольская, М.В. Якубовский,' 1983, 1987; O.Barriga , 1984 и др. , И.А. Гадаиева. 1986, И.С. Ка-ныгина, 1989, С.И. Пономарь, 1990). Поэтому актуальным становится решение проблем изыскания средств и разработка методов коррекции иммунного ответа организма животных на внедрение возбудителей болезней вообще и гельминтозов в частности.

Одним из средств коррекции иммунного ответа являются иммуностимулятора, такие, как левамизол, дибазол/ метилурацил и др., применение"которых совместно с антгельмингиками значительно повышает эффективность противогельминтозных мероприятий (А. В. йвтина с соавт.; 1983; А;В; Максимов;'Б.Н.-Сафронов,"Iá86; Э.Х. Даугалие-ва, 1984, 1986; И.А. Гадаиева, 1986; К.С: Балаян, 1987; А.Ь.Ш. , 1976; М.БэИ. et al. , 1979; H.ITogami , 1980; ' J.Ottemes et ' al., 1981; Ы.Gordon ,1981; S.Cartner , 1981; M.Sohnaper, T.Atine , 1986; и другие).

Поэтому для дальнейшего соверэенствования профилактики и-терапии желудочно-кишечных стронгилятозов овец все болылую значимость приобретает изучение возможности ювшения лечебного эффекта о помощью иммуностимулирующих препаратов и повышение резистентности организма ягнят как фактора профилактики стронгилятозов.

Цель работы - определить влияние иммуностимуляторов полиокс"-дония, градекса и вегетана на естественную резистентность ягнят и

взрослых овец; изучить возможность использования этих иммуностимуляторов для повышения терапевтической эффективности вематоцид-ных препарагов-и с целью профилактики.

Задачи'исследований: • • провести комплексное динамическое изучение естественной резистентности животных (определение фагоцитарной активности нейтрофилов, комплементарной активности сыворотки'крови, титров естественных антител) интактных, спонтанно и экспериментально зараженных желудочно-кишечными строгилятами ягнят;

■ - изыскать пути повышения естественной резистентности организма ягнят и взрослого поголовья с целью профилактики стронги-лятозов и для повышения эффективности дегельминтизации и продуктивности -животных"

• Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение естественной резистентности интактных,"экспериментально и спонтанно зараженных ж/к стронгилятами ягнят; исследована естественная резистентность овец в динамике развития нематодозного процесса в условиях эксперимента и на спонтанно зараженных животных; определена возможность использования иммуностимуляторов полионоидония, градекса, вегетака в качестве средств, повышающих резистентность организш'и ■ эффективность • дегельминтизации овец.;

Практическая ценность работы/ Результаты исследований вошли во "Временное наставление по применению полиоксидоняя для профилактики и лечения болезней о/х животных", утвержденное ГУБ РФ от 01.10.91, Я 044-3, г. Москва. •

Положения, выносимые на защиту:.....

I. Естественная резистентность интактных и спонтанно зара--генных желудочно-кишечными"стронтилятами ягнят; - "

2. Естественная резистентность взрослых овец, эксперимен тально и сп онтанно заракеншг желудочно-кишечными' стронтилятами;

3. Иммунокоррегирующая'терапия-овец при дегельминтизации ну--беном, ■ как фактор ■профилактики желудочно-кишечных стронгилятозов.

Апробация результатов. Материалы диссертации доложены: ■I. На заседаниях Ученого Совета КазНИВИ и ВИГИС (1991, 1992,

1993).' ..................

' 2. На конференции"по применению иммуномодуляторов в ветеринарии- (Санкт-Петербург, 1994);-'.....

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на

сграниц ах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований,"обсуждения результатов, выводов,-практического использования результатов, списка'литература, -содержащего отечественных/'^? и иностранных источников. Работа иллюстрироваьа ^^ таблицами и ¿gfj.рисунками.

' СОБСТВЕКНЫЕ ИССЯВДОВАШИ

I. Материалы и метода . .

— Настоящая работа выполнена в период с 1990 по 1994 г.г. в лаборатории иммунологии и генетики ВИГИС, в Карагандинской научно-исследовательской ветеринарной станции, Казахском НИВИ и ряде хозяйств Центрального Казахстана. "'.■,.' -"- Материалом дал диссертации послужили 9 опытов, проведенных на 1020 гол. интактных и спонтанно зараженных желудочно-кишечными стронгилятами ягнятах 2-3,5-месячного возраста и годовалых валухах тяутонкорунной породы. Производственный опыт 'проведен на 800 валухах I,5-годовалого возраста.

Перед началом опытов асех подопытных животных исследовали копрологячески на наличие яиц гельминтов по методу Я-кшлеборна с применением счетной камеры, модернизированной в ВИГИС'(авторы Ми-гачева Л.Х,' Котельников Г. А. , Балаян К. С., 1986 ). Взтествен-ную резистентность животных изучали по фагоцитарной активности нейтрофилов по методу Е.Ф. Чернушенко и Л.С. Когосовой (1981).

Гетерофильные агглютинины определяли по методу Шис^а (I9S2). ■ Реакций комплементарной активности сыворотки крови ставили по методу Г.Ф; Вагнера (1963). - -

Полное гельминтологическое вскрытие желудочно-кишечного тракта овец проводили поК.И. Скрябину (1925). *

• Вое числовые материалы обработаны статистическим методом с определением коэффициента"достовэрнооти по И.А. Ойвину (I960).

В опыта* по"иалунокорекции' -били" использованы иммуностимулятора -- полаалектролвтн полноксидокиС градекс»' вегетан.Препаратн• вводились двукратно,' с интерваломв 21 день, внутримышечно, в дозе: волвонсвдоний 10-20 мгйа голову, градеко - 10 мг на голову, . Ебгетав - 100 ыкг.ва голову. .■...'•...'

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Резистентность интактных и спонтанно зараженных желудочно-нппечными стронгилятами ягнят в динамике их роста и развития

В опыт I было взято 20 ягнят в возрасте 2-2,5 месяцев. Живот-

ных" разделили на 2 группы по принципу аналогов. Животные 1-й группы находились на пастбище в период с апреля по сентябрь месяцы, 2-я группа (контрольная) находилась в стационаре, не выпасалась. .....

Гематологический пройиль крови ягнят. Установлено, что изменения в динамике эритритов и лейкоцитов происходили в течение всего периода исследований (6 месяцев) у ягнят контрольной группы. У подопытных жизоткчх, спонтанно зараженных во сравнению с* контрольными наблвдали постепенное снижение количества эритроцитов, лейкоцитов. Изменения, отмеченные нами в гемограмме крови подопытных ягнят, указывают на лекоцитоз, приходящийся на июнь, ишь, август месяцы - период наиболее активного заражения животных. Следует отметить, что лейкоцитоз сопровождался эозинофили-ей, достигшей пика в июле-августе месяце до 5,6*0,4 - 8,3-^0,7$, лимфоцитоз достигал максимума в июне месяце - 73,3^4,2$. Общее килчество моноцитов было увеличено в мае месяце до 8,0*0,4$.

Динамика Фагоцитарной активности нейтрофилов. Уровень клеточных факторов естественной резистентности и иммунологической реактивности организма овец определяли в динамике по фагоцитарной активности нейтрофялов. Установлено, что у животных контрольной группы она с возрастом увеличивалась и к koiot ощиа достигала 42,4±2,4%. 7 подопытных животных также каблюдашоь фагоцитарной активности нейтрофилов, но оно было значительно ниже, чем у контрольных ягнят. Однако, в ше у животных поддаютой группы ■ активность нейтрофилов снизилась до 28,4±4,4л против 36,8*3,4^ в контроле.' Динамика комплементарной активности .У животных контрольной группы о возростом происходило увеличение комплементарной активности до' 9,8-0,8%. У ягняа зараженного контроля наблвдали снижение комплементарной активности; особенно через ,3 месяца после выгона животных на пастбище до 3,4*1,2$. •• ;

Динамика гетерофильных агглютининов. Через 2 месяца с начала выпаса ягнят (ишь) отмечено снижение титра гемагглютвшшов до 2,4*1,6 log2 у-подопытных ягнят. Однако, чзрез 4 месяца (в сентябре) титр антител увеличился у эгих животных и достиг 4,0*2,2 logg, но по-прежнему оставался нижз, чем в контрольной незараг. женной"группе до конца исследований.

Результаты копрологических исследований. Через месяц после выгона животных на пастбище все они заразились желудочно-квшечны-

шгстронгилятами иг количество яиц в I г фекалиЯ составило 27* до ивля месяца. Затем количество яиц снизилась, однако в сентябре- вновь "набладали увеличение до"127-4,б яиц в' I г фекалий.

Результата полного гельминтологического вскрытия. Через 6 месяцев (в сентябре) оыл проведен убой всех подопытных и контрольных ягнят. При полном гельминтологическом вскрытш желудочно-ки-иечного тракта были найдены гемонхи, трихостронгилы, нематодиры, хабертии, моняезии. В среднем было найдено по 37,8*1,2 гемонхов, 458,2-6,4 нематодиров, 916,2*13,4 трихостронгилов и 32,1-4,8 ха-бертий в■подопытной группе и от 3*0,1 до 21,25*2,4 у контрольных животных.

Тахим образом, заражение ягнят желудочно-кишечными стронгилятами вызывало снижение естественной резистентности организма животных, что выражалось в замедленном росте ягнят, интенсивном их заражении стронгилятами желудочно-кишечного тракта и снижением иммунного статуса.

2.2.2. Изыскание средств и разработка методов неспецифвческой профилактики желудочко--кишечных стронгилятозов ягнят

Широкое распространение в последние годы приобретает неспе-цяфаческая профилактика гельминтозов путем повышения естественной резистентности и иммунного статуса организма животных.

В институте иммунологии (Москва) разработаны оригинальные высокоэффективные иммуностимуляторы полимерной природы: полиок-сидолий,- градекс и вегетан. Указанные препараты используются в 3:качествах: а) как иммуностимуляторы широкого спектра действия; б) как иммуноадызванты; в)' как иммуностимулирующие носители для антигенов в-структуре коныогированных вакцин, представляющих собой ковалентные яоньюгатн "антиген-полимер"........

ПолиоксидониЯ позволяет осуществлять профилактику бактериальных инфекций л-некоторых-гельминтозов. Совместное введение пслиоксидонея'С различными антигенами позволяет увеличить в не-, сколько раз продукции специфических'антител.' фи этом не образуется антител к самому пштохсвдонию. Градекс эффективно стимулирует иммунитет против бактериальных инфекций а-обладает выраженными иммуноадьювантшкя свойствами. Вегетаном можно лечить тяжелив формы парвовирусного витерита, бактериальные пиогенные ин- -фекции, профилактировать герпес, некробациллез и использовать в

качестве кмцуноадьюванта, что позволяет значительно усиливать ; гуморальный и клеточный иммунный ответы на различные антигены: чужеродные бзлки, простейшие, гельминты, микробные клетки и антигены выделенные из них. - - • ;-'■ ,

Учитывая это, нами было проведено три опыта по изучению дей- • ствия иммуностимуляторов, как средств профи лакирующих стронги- ... лятозы желудочно-кишечного тракта овец. Под опыт 2 <5ыло взято -50 ягнят 2,5-3-месячного возраста, которых по принципу аналогов разделили на 2 группы. Ягнятам 1-й группы (25 голов) двавды с интервалом в 21 день вводили полиоксидоний первый раз в дозе 10 мг/гол., затем 20 мг/гол.,2-ан группа (25 голов) служила контролем. Всех'ягнят через 15 дней после введения препарата выгнали ' на пастбище.

При копрологическом исследовании фекалий установлено, что ■ : у 4 ягнят контрольной группы яйца сгронгилят обнаружены через .

дней после выгона их на пастбище, через I месяц 66% ягнят были заражены стронгилятами, интенсивность инвазии у них увеличи- ,. валаоь и достигала пика к августу месяцу - 290*25 яиц в I гр фекалий. , . . г.■ ,

У ягнят, получавших полиоксидоний, яйца стронгилят впервые обнаружены через 2 месяца у 4 из 25; через 2,5 месяца отронгиля-ты были найдены у 50$ ягнят, однако интенсивность ивааии была слабой 1-2 яйца в пробе. К концу эксперимента (август) у 28$ ягнят интенсивность инвазии достигала 90*25 яиц в I г фекалий, а'. у 32$ - 30*15 яиц в I г фекалий. ' - !

• Таким образом, нами установлено, что полиоксидоний ирофвлак-тирует стронгилятозы желудочно-кишечного тракта в течение 2-х месяцев.':" """ • ' ............. ...

Опыт- № 3 проведен' на 40 ягнятах 2,5-месячного воараота, разделенных до выгона на пастбище на 2 группы: животным I группы ' , (20 голов) вводили градекс по 10 мг/гол дваяци о интервалом в 21 день-.-Ягнята 2-й группы служили контролем. ; - ; -

• Зараженность 3-х ягняг в'одопытной гр}ипы бш£а"зафиксирована через во дней: у них обнаружены единичные "яйца стронгилят, . через 70 дней уже у ягнят найдены яйца стронгилят. У 5$ контрольных животных яйца стронгилят были обнаружены через месяц. В последующие дни исследований (60-75) интенсивность инвазии нарастала и достигала 150*25 - 220*44 яиц в I гр фекалий. Опыт пре!фа-

щен и проведена дегельминтизация всего поголовья.

Опит № 4 был проведен на 40 ягнятах 2-2,5-месячного возраста. Животных перед началом опыта разбили на 2 группы: ягнятам 1-й группы вводили вегетан по 100 мкг/гол, 2-я группа служила контролем. Через 14 дней всех жиеотннх выгнали на пастбище.

Нами установлено, что у 5СЙ .подопытных ягнят яйца стронгялят появились лишь на 75-й день, к концу эксперимента 6С$ животных подопытной группы были заражены с интенсивностью инвазии от 15^ -0,25 до 27-0,33 яиц в I гр фекалий. Ягнята контрольной группы были заражены с 15 дня после выгона на пастбище, и к концу эксперимента интенсинвазирование (Ш) составило от 270^23,4 до 420^50,2 яиц в I гр фекалий при экстенсинвазировании (ЭИ) 70$.

З&ким образом проведенные исследования позволяют оделать' • вывод: иммуностимуляторы - полиэлектролиты обладают выраженным профилактическим действием в отношении желудочно-кишечных строн-гилят в чечение 2 месяцев с момента выгона животных на пастбища (май-июнь); дальнейшие исследования (июль-август) - сроки наиболее сильного заражения ягшхТ - показали, что интенсивность инвазии- у подопытных ягнят была ниже, чем у контрольных. В связи о этим перед нами встал вопрос, за счет чего происходит профилактика стронгилятозов? Дяя выяснения этого вопроса был проведен в условиях эксперимента опыт с использованием методов, позволяющих оценить уровень.клеточного и гуморального факторов иммунитета.

2.2.3. Влияние полиоксидония, градекса и ...... .вегетана на резистентность ягяят.

Опыт й 5 проведен на 25 ягнятах 3-3,5 месячного возраста, разделенных "по принципу аналогов на 5 групп: йгнятам 1-й группы вводили полиоксддоний внутримышечно дважды с интервалом в 21 день в доза-^20 мг/гол, ягнятам 2 группы - градексв дозе Ю мг/гол внутримышечно," дважды с интервалом в 21 день; ягнятам 3-ей груп- ■ пн - вегетан в "дозе" 100 мкг/гол - вц, гримышечно, дважды с интер--валом в 2Хдень; ягнята 4-й группы служили зараженным контролем; . ягнята 5-й группы - чистым контролем, их содержали в стационаре Карагандинской НИВС, в условиях исключи чих заражение. Остальных ягнят после введения препаратов выгнали на пастбище. Исследования проводили в течение 3-х месяцев.

Динамика эритроцитов. На протяжении всего периода всследова-' ний мы наблюдали вполне закономерное повышение количества эригро-

цитов у ягнят"I, 2, 3 и 5 групп. У ягнят "вдетой" контрольной группы (5-ой), концентрация эритроцитов существенно не изменялась и находилось в пределах 6,2*0,12 - 9,0*0,16 млн/мкл крови. В течение всего периода исследований (90 дней) у ягнят контрольной зараженной группы (4-ой) отмечали два пика снижения концентрации эритроцитов: на 26 и 85 дни опыта до 7,8*0,14 и 7,0*0,17 млв/мкл крови. У ягнят подопытных групп концентрация эритроцитов постепенно повышалась и достигала пика 9,8*0,16 млн/мкл в 3-й группе животных на 14-й день опыта, а в группах I и 2-й -- на 47-2 и 64-й дни после выгона яшвотнгх на пастбище.

Динамика лейкоцитов.. Концентрация лейкоцитов у ягнят контрольной группы» свободных от гельминтов, существенно не изменялась и'находилась в пределах возрастной физиологической н^тмы (6,8*0,2 - 9,5*0,14 тыс/мкл крови). В течение всего периода исследований у ягнят контрольной зараженной группы (4-ой) наблвдал-ся лейкоцитоз сдосговерным повышением уровня лейкоцитов, от 7,2* *0,14 до 13,3*0,67 тыс/мкл крови. У ягкят 1-й, 2-й и 3-й подопытных групп концентрация лейкоцитов находилась в пределах возрастной физиологической нормы (7,5*0,26 - 9,1*0,23 тыс/мкл) в течение всего периода исследований.

Динамика эозинофилоь. У ягнят контрольной зараженной группы (4-ой) наблвдали стойкую эозинофшзш с пиком (6,6*0,42 - 8,3* *0,2$) на 47-64-ые дни исследований. К концу наблодений эозино-фшшя у этой группы животных достигала 6,8$. У ягнят I, 2, 3-Й опытных групп я 5-й контрольной незаряженной количество эозино-филов'бнло'В-пределах физиологической нормы (1,3*0,22 - 4,0*0,31$).

Динамика лимфоцитов. У животных незараженного контроля количество -лимфоцитов на протяжении-всего периода исследований было в пределах 58,0*3,2 -'62,0*2,8$, в то время как в группе зараженного контроля (4-я гр. ) отмечали увеличение их количества'до" ■ 73,3*4,2$ на 26-е сутки с момента выпаса животных, и затем снижение до 54,0*2,9$ к концу исследований (85-й день). 7 животных других-подопытных .-групп количество лимфоцитов было в пределах 60,0*0,9 - 65,3*2,4$.

Динамика моноцитов. Количество моноцитов у незараженного контроля колебалось в пределах физиологической нормы в зависимости от возраста ягнят. Так, в 3-х месячном возрасте общее количество моноцитов находилось в пределах 2,3*0,16 - 4,0*0,18$ у всех подопытных и контрольных ягнят. На 14-й день после выгона живот-

ннх на пастбище мы отмечали повышение уровня моноцитов в крови от 71,0*0,14 до 22,0*0,17$ у-животных I, 2, З-fl подопытных групп, дет 8,0*0,4$ у животных незаряженной контрольной группы,до 6,0* *012$ у ягнят зараженной группы. В последующие сроки исследований отмечали снижение количества моноцитов у ягнят зараженной контрольной группы, а у животных подопытных групп их количество составляло 8,3*0,22 - 12,9*0,4$, в группе "чистого" контроля-оно соответствовало физиологической норме - 3,0*0,13 - 5,0*0,17$.

• ^намика нейтрофилов. В динамике нейтрофилов нами не отмечено резких колебаний. У животных контрольной зараженной группы процент нейтрофилов бнл ниже, чем у других животных и составлял .от 19,0*4,2 до 23,0*3,7$ с момента выгона на пастбище, в то время как у подопытных ягнят и животных контрольной незараженной группы их-было 24,0*2,2 - 32,0*3,7$.

Динамита фагоцитарной активности нейтрофилов. Фагоцитарная активность у ягнят "чистого" контроля была в течение всего опыта на уровне 30,2*1,4 - 35,0*4,4$. У ягнят контрольной зараженной группы на'блвдали ее постепенное снижение, если до заражения она составляла 30,4*1,8$, то к концу опыта (85-й день) - 26,4*0,8$. У ягнят, получавших иммуностимуляторы, уровень фагоцитирующих клеток был значительно выше контрольных незараженных и состоял из двух пиков на-47-й и 64-й дни исследования, колебания которых составили 40,0*2,4 - 46,5*4,6$ и 48,4*3,9 - 50,2*4,9$ соответственно:.................. .......■ ....................

Динамика комплементарной активности сыворотки крови. У ягнят контрольной незараженной группы были зафиксированы незначительные ее колебания на протяжении всего периода исследований от 8,0*1,4 до 9,4*1,4; у зараженных контрольных ягнят отмечали снижение комплементарной активности, которая была наиболее низкой, па 64-й день исследований (2,8*0,9$). У животных, получавших иммуностимуляторы, наиболее высокая комплементарная активность зафиксирована на 47-е сутки опыта (от ¿4,5*1,1 до 16,2*1,2$).

Динамика гетерофильных агглютининов. Цри изучении динамики-гетерофильных агглютининов у контрольных незараженных ягнят резких изменений в титрах антител мы не гаопщали (предел колебаний 3,0*0,4 - 4,0*1,6. logg). У животных контрольной зараженной группа титр антител на протяжении всего периода исследований снижался . л если в первые дни опыта составлял 3,0*1,1 log,,, то на 64-й день исследований составил 1,8*0,4 logg«

Динамика живой массы. Взвешивание подопытных и контрольных животных показало, что введение иммуностимуляторов положительно влияет и на привесы ягнят. Так, к концу исследований вес ягнят подопытных групп был выше в среднем на'2 кг против незараженных и на 2,5^3 кг - контрольных зараженных.

■ Цаоттаг шерсти. Учет настрига шерсти проводили на 85-й день исследования (перед убоем). Наилучшие данные получены в группа ягнят, получавших иммуностимуляторы, т.е. вес шерсти у ягнят I, 2,"3-й групп составил от 1520*0,2 г до 1540*1,2 г, против ГШ* *0,32 г в 4-ой группе (зараженного контроля) и в 5 группе (чистого контроля) - 1481*0,4 г.

Результата копрологичеоких исследований. Применение иммуностимуляторов профилактиро.тало заражение ягнят огронгиля'" чии желудочно-кишечного тракта в течение 26 дней. На 47 день находили у подопытных ягнят от 8,0*0,9 до 12,0*0,4 яиц в Г г фекалий, а У контрольных до 130*7,2 яиц в I г фекалий. У ягнят контрольной группы (4-ой) интенсивнооть инвазии к концу опыта достигала 164* *9,2 яиц в I г фекалий, а у подопытных находили от 27,2*5,0 до 28,0*4,6 яиц в I г фекалий.

Гельминтологическое вскрытие животных. При подсчете гельминтов наиболее заражены были животные контрольной зараженной группы. У них было найдено в среднем по 915 - остертагии, 1140 - не-матодир,■1135 - трихостронгилид. Наименее зараженными оказались животные, получавшие поликсидоний и вегетан (24, 26, 15 гельминта в I группе и 14, 36, 19-в третьей группе).

Таким образом, введение препаратов полиоксидония, градекса и вегетана до выгона животных на пастбище повышает резистентнооть животных,' что способствует более'низкому заражении последних стронгилятами желудочно-кишечного тракта, повышает привесы и несколько увеличивает настриг шерсти. • ' -

Получив положительные результаты, мы решили испытать иммуностимуляторы на взрослых животных:.- С "этой целью были проведены два опыта на спонтанно зараженных взрослых, овцах.

Опыт № 6. Под опыт были взяты 2Q спонтанно зараженных животных, которых разделили по принципу аналогов на 4 группы по 5 голов в каждой. Овцам 1-й группы вводили полиоксидоний'В дозе 20 _ ыг/гол. внутримышечно, дважды с интервалом в 14 дней; овцам 2-й группы - градеко в дозе 10 мг/гол. внутримышечно, дважды с интервалом в 14 дней; овцам 3-й группы вегетан - в дозе 100 мкг на го-

лову; овин -4-й группы служили контролем. Через 7 дней после второго введения препаратов"по результатам копрологических исследований было установлено, что интенсивность инвазии животных не снижалась. Однако, при исследовании фекалий через 15 дней нами зарегистрировано снижежз интенсинвазированности подопытных овец.

В последующем удвоив дозу препаратов мы провели опыт на 20 спонтанно зараженных овцематках, которых разделили на 4труппн: овцам 1-й группы вводили полиоксидоний в дозе 40 мг/гол; овцам 2-й группы - градекс в дозе 20 мг/гол; овцам 3-й группы - веге-тан в дозе- 200 мкг/гол; 4-я группа животных служила контролем. Препарат вводили дважды с интервалом в 14 дней. Цри этом получаны результаты аналогичные данным предыдущего опыта, то есть с увеличением дозы и сокращением повторной инъекций стимуляторов интенсивность инвазии снижалась незначительно.

Полученные результаты побудили нас провести опыты по изучению профилактики сгронгялятозов взрослых овец путем дегельминтизации и дачи стимуляторов. С этой целью был поставлен следующий опыт.

Опыт № 7. Под опыт взято 20 валухов прошлого года рождения, интенсивно зараженных стронгилятами желудочно-кишечного тракта. Предварительно животных продегельминтизировали кубеном в дозе 50 мг/кр по АДВ, что позволило их освободить от гельминтов. Затем животные были разделены на 4 группы по 5 голов в каждой. Овцам 1-ой, 2-ой и 3-ей группы были введены иммуностимуляторы в той же дозе, что и в опыте У» 6, 4-я группа служила контролем. Через-10 дней животных выгнали на-пастбище.

Результаты копрологичесгчх исследований. В контрольной группе наблвдали увеличение количества сгронгилят в I г фекалий через "месяц до 60,0*9,9 яиц в I г фекалий, через 2 месяца - 115,0* ¿28,4 с акстевсинвазированностыо 55$. Через 3 месяца интенсинва-зированность в этой группе превысила первоначальные показатели, а зксенсинвазированность составила 65-72$. В группах овец, получавших иммуностимуляторы, ИИ и ЭИ были на довольно низком уровне в течение 2,5 месяцев (3,8*0,2 - 14,0*0,4 яиц) и только через 3 месяца интенсивность инвазии увеличилась до 26,4*19,4 - 44,2* -16,8 яиц в I г фекалий. Таким образом, введение иммуностимуляторов после дегельминтизации спонтанно зараженных животных про-филактврует стронгилятозы и снимает одну дегельминтизацию.

Опыт № 8. Вало взято 12 валухов, которых после двукратной дегельмигтлзации разделили на 4 группы по 3 животных в каждой. Овцам 1-й группы вводили полиоксидошй в дозе 20 мг/гол; овцам 22-й группы - градекс в дозе 10 мг/гол, овцам 3-й'группы - веге-тан в дозе 100 мкг/гол; 4-ая группа служила контролем. Препараты вводили двазды с интервалом в 14 дней. Через 2 недвли животных заражали перманентно по 500-1000 яиц стронгилят в течение 50 дш й.

Динамита эритроцитов. Количество эритроцитов у овец контрольной группы после дегельминтизации составило 5,5*0,6 млн/мкл. Перманентное зара^зтие контрольных животных сказалось на динамике эритроцитов, т.е. мы практически не наблхдали увеличения числа, эритроцитов, а на 45-й день регистрировали даже снижение до 5,4*0,2 млн/мкл. У овец, получавших иммуностимуляторы, количество эритроцитов было значительно вьпие в течение всего периода наблюдений и составляло от 8,8*0,9 до 12,2*0,4 млн/мкл. .

Динамита лейкоцитов. У овец контрольной группы количество лейкоцитоЕ увеличивалось о 7,0*0,4 тыс/мкл до 11,2*0,4 тыс/мкл на 45 день исследований. У овец подопытных групп лейкоцитоз не наблюдался, количество лейкоцитов было достоверно ниже, чем у животных в контроле и составляло от 4,4*0,4 до 7,0*0,9 тыс/мкл.

Фагоцитарная активность нейттюс&илов. У овец контрольной группы фагоцитарная активность нейтрофилов была на довольно низком , уровне и составляла 26,4*0,8 - 29,6*1,4$ на протяжении всего периода исследований.' У овец, получавших иммуностимуляторы, зарегистрировано увеличение фагоцитарной активности'нейтрофилов по сравнению с'контролем-в течение всего опыта от 34,1*4,1$ до 51,2*5,3$.

Комплементарная активность. Комплементарная активность сыворотки крови у овец контрольной группы постепенно снижалась и к 60-к дню исследований составила 5,8*1,1 против 9,6*1,2$ в кача- . ле эксперимента. У подопытных овец 1-ой, 2-ой, 3-ей групп наблюдали увеличение комплементарной активности с 10,2*1,4$ до 14,2* . *0,6$. Комплементарная активность сыворотки крови была выше на 45 день у животных 3-ей группы, получавших-после дегельшнтизации вегетан. С16,4± 1,1$).

Динамика гетерофильных агглютининов. Титр геторофилышх агглютининов на протяжении всего периода исследований у контрольная овец находился в пределах физиологической нормы в составляя от '2,6-1,1 до 3,0*0,9 1ое2. У подопытных овец он резко возрос, -особенно на 45-й день исследований и составил 9,0*1,2 - 10,0*1,4 1ое2. « '

Дрлное гельминтологическое вскрытие. У овец контрольной зараженной группы в среднем найдено по 651 гельминту, из них ге~ монхов- - 149*36, трихостронгил- 794*34, нематодир - по 1283*25 и хабертий - 25*4: У подопытных ягнят интенсивность инвазии .было в 5-6 раз ниже, чем у контрольных.

• Т&кшч образом, разработал методов неспецифической терапии и профилактики стронгилятозов желудочно-кишечного тракта овец необходима, несмотря на наличие высокоэффективных нематоцидных антгельминтиков, так как многие антгельминтики вызывают иммуно-' сулресию, в результате которой возникает реинзазия, особенно желудочно-кишечными сгронгйлятами.

Полученные в эксперименте данные апробированы в производственных условиях.

Опыт № 9. Проведен на 800 валухах, которых перед-выгоном на пастбище продегельминтизировали кубеном из расчета 50 мг/кг по А,1"]. Животных разделили на 4 группы: овцам 1-ой, 2-ой и 3-ей групп вводили полиоксидоний, градекс и вегетан в дозах, отработанных в эксперименте и через 2 недели животных выгнали на пастбище. Овцы 4-й группы служили контролем. Периодически проводили копрологаческие исследования. Установлено, что единичные яйца стронгилят у животных 1-ой, 2-ой и 3-ей групп появились с 45-го по 60-е дни, на 75-й день интенсивность инвазии составила у подопытных ягнят по 25*6,0 -65,0*1,3 яиц з I г фекалий и по 170* *28 яиц у контрольных овец. На 90-е сутки по 3 овцы из подопытных групп были убиты и проведено,полное гельминтологическое вскрытие желудочно-кишечного тракта овец. Анализ вскрытия показал, что интенсивность заражения у подопытных животных была ниже, чем у контрольных в 3-4 раза.

- . ..... . ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

В результате изучения естественной резистентности ягнят и ■ взрослых овец экспериментально и спонтанно зараженных желудочяо--кишечнымя стронгялятами установлено, что клеточные и гумораль-реакции организма животных имеют различную степень выраженности.

Анализ изменений в гематологическом профиле зараженных животных требует 'дифференцированного подхода вследствие различной по степени выраженности реакции со стороны ягнят и взрослых животных. Наиболее существенные сдвиги отмечены у ягнят в динамике эритроцитов и лейкоцитов. Так, у ягнят мы отмечали более мед-

- к -

ленное увеличение количества эритроцитов с момента заражения животных, чем у контрольных зараженных того же возраста. Кроме того; зритропения приходилась на 60-й день после выгона на пастбище: У взрослых спонтанно зараженных овец эритропения наблюдалась через 1,5 месяца после заражения, а лейкоцитоз с 30-го дня (у ягнят - через 90 дней). В динамике эозлнофилов получены также разные результаты. У взрослых спонтанно зараженных овец эозинофилия приходилась на 47-й - 64-е дни, а у ягнят с 60 по 120-е дни о момента выгона животных на пастбище (практически с 45-50-го дня после заражения).

• ■ При сравнительном анализе данных, полученных при изучении фагоцитарной активности нейтрофилов у контрольных незараженных ягнят, отмечали рост активности нейтрофилов до 7-месячного возраста (предел наблюдений), и если в 2-х месячном возрасте фагоцитарная активность нейтрофилов составляла 30,4-1,2$, то к 7-месячному возрасту - 42,4*2,4$, что соответствует физиологической норме (А. Игнатьев, 1969), у зараженных ягнят аналогичная картина, но к концу наблюдения разница в числовых показателях составила 8,2$. Такая закономерность установлена и по показаниям комплементарной активности и титру антител. У взрослых животныхэкспериментально и спонтанно зараженных также отметили разницу в зсте-ственной реактивности, выражающуюся в более резком изменения показателей у овец экспериментально зараженных, чем у спонтанно зараженных. Так, фагоцитарная активность у экспериментально перманентно зараженных животных имела тенденцию к- постоянному снижению, а у сполтайно зараженных отмечалось"ее снижение на 47-й день после выгона на пастбище до 27,2*1,2$, затем ало медленное повышение ее активности"В"к концу исследований (85-й день) фагоциту лая активность' нейтрофилов"у 'зараженных животных составила 26,4*2,8$, а у контрольных - 25,0*4,4%. В динамике комплементарной активности и титрах антител констатировалось одинаковая тенденция к снижению как у спонтанно, так и у экспериментально зараженных животных.

Па изменениям комплементарной активности, можно судить о выраженности патологического процесса. Учитывая, что мобилизация комплемента на защиту от гельминтов довольно широко варьирует, она происходит на иммуноглобулинах, структура которых изменена ■яе только в результате взаимодействия с антигеном молекула шцу-ноглобулиаа, но наблюдается и на неопецифическвх иммуноглвбули-

нах." Обычно на ранних этапах инвазионного процесса гельминты лизируются благодаря активации комплемента. Активность системы комплемента в организме регулируется не только лабильностью образующих комплексов, но и синтезом в разных органах. '; В защите животных от чужеродных агентов огромное значение , имеют'клетки, способные к фагоцитозу. Фагоцитоз в филогенезе -- наиболее ранняя форма защиты, обусловленная активностью внут-.ри клеточных систем фагоцитов и действием гуморальных факторов ( ей аХ., 1974). Реакция фагоцитоза о учетом пе-

реваривающей способности фагоцитов - достоверный тест, отражающий состояние иммунной системы ыакроорганизма при различных заболеваниях (Л.Б. Юшкевич, 1973 и другие). Сведения о состоянии фагоцитирующей защиты при гельминтозах очень немногочислены. Это ' работы м.1.Бепп , тму.ашв! (1974, 1975). Авторы считают резкое снижение активности фагоцитов проявлением морфологической и хишг )ской аяаплазии, углубляющейся по мере перехода острой стадии болезни в хроническую. А. Я. Янченко (1985), Э.Х. Даугалиева (1981, 1983), С. И. Пономарь (1990) отмечали при гельминтозах изменения фагоцитарной активнооти нейтрофйлов и считают, что по данному теоту можно судить о стадии развития болезни при гельминтозах. Шпш данные об угнетении естественной резистентности при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта согласуются о результатами других авторов (Б.К. Серякбаева, 1982; Д.Ф. Плецитый, 1972; И.А. ГадЕлева, 1986; К.С. Балаян, 1987; С.И. Пономарь, 1990 И'другие). Однако цолученнне нами данные расширяют и углубляют познания в~механизме развития естественной резистентности при спонтанном'я экспериментальном заражении стронгилятами желудочно-кишечного'тракта овец.

,-Введеша-животным иммуностимуляторов - полиоксидония, гра-декса- ивегетана активизируют систему комлемента и уже на 14- 2647-3 дни исследований мн находилиувеличение комплементарной активности в 1,5-2 раза и до конца исследований (85 дней, предел наблюдений) активность комплемента у подопытных ягнят превышала

показатели контрольных в 3 раза (0,6*1,:$ против 3,6±1,1$). Как мы уже отмечали, введение иммуностимуляторов, регулирующих акти-■ вацию Т- и В- лимфоцитов в макрофагов, приводит в первую очередь, к способности системы комплемента и фагоцитоза участвовать в иммунитете путем их активации. Суть его заключается в том, что комп-

лемент Сд и С^, обладая хечотаксической активностью в отношении полиморфнонуклеарных лейкоцитов, в частности, нейтрофилов и эозянофилов, стимулирует дегрануляцию тучных клеток, лейкоцитов и тромбоцитов ( Р.НепБоп , 1977) при этом актзвизирует АТ.

У животных, получавших иммуностимулятора, наблвдали увеличение титров, и максимальное их значение, зарегистрированное нами на 47 день опыта, составило 68*1,4 - 7,8*0,9 1о£2- Наиболее показательные результаты после введения иммуностимуляторов получены при изучении динамики зараженности животных. Так, введение иммуностимуляторов ягнятам способствовало повышению резистентности животных и профилактировало заражение до 60-70 дней. Кроме того, у животных, получавших эти препараты, при вскрытии количество гельминтов было кике в 4-5 раз. У овец, продегельмигазированных и получивших иммуностимуляторы, таете отмечали снижение заражения на протяжении 60-75 дней.

ВЫВОДЫ

I. Заражение ягнят желудочно-кишечными стронгилятами в течение пастбищного периода приводит к снижению естественной резистентности организма, что подтверждается уменьшением фагоцитарной активности нейтрофилов на 8$, комплементарной активности . на 5$, титра гемагглютининов на 2 ед Хо^ по сравнению с незаряженными животными.

■■. 2. Снижение естественной резистентности ягнят приводит к снижению веса животных на 1,2-2 кг, настрига шерсти'на 350-400 грамм а резкому' увеличения приживаемости гельминтоз.

"3. При экспериментальном перманентном заражении овец желудочно-кишечными сгронгилятаки в. течение 50 дней нами выявлено они: 'ние иммунобиологической реактивности организка животных.

' 4. Введение ишуносчимуляторсо волиоксидония, градэкоа или вегетана' ягнятам' до шгона' на пастбище профилактируе? огренгиля-тозы в течение 2-х месяцев.

5. Введение иммуностимуляторов спонтанно зараженный овцам после дегельминтизация профилактарует реинвазию в течение .60 дней и повышает естественную резистентность животных.

6. С целью повшешя эффективности протЕвогелшиЕтозшх мероприятий необходимо использовать иммуностимулятора: волиоксидо-

, лий, градекс, вегетан.

Предложения для практики -

1. Материалы работы вошли во: "Временное наставление по применению полиоксидония для профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных". Утвержденное ГУВ РФ от 01.10.91,

Л> 044^-3,. г. Москва.

2. С цель® повышения общей резистентности организма ягнят и профилактики желудочно-кишечных стронгилятозов рекомендуем применение. иммуностимуляторов полиоксидония, градекса и вегетана.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации

1. Сейсенов Б.С. Профилактика желудочно-кишечных строителя- . тозов овец'в Центральном Казахстане. //Инф. листок Л 235-93., Карагандинский ЦНТИ, Караганда, 1993. 2 с.

2. Сейсенсв Б.С. Кубен - новое лекарственное.средство при гельминтозах овец //Ииф. листок Л 234-93 Карагандинский ЦНТИ, Караганда, 1993. - 2 о.

о. Сейсенов Б. С. Профилактика стронгилятозов пищеварительного тракта овец. //Ветеринария. - Москва, 1994, С. 35-36

4. Сейсенов Б.С. Иладнопрофилактика стронгилятозов ягнят //Тезисы докл. научн. практ. конф. "Новые фармакологические средства в ветеринарии". - Санкт-Петербург, 1994. - С. 20-21.

Подписано в печать. Хд.Сб". 1Э9^г. Формат 60X84/16 Буи. офс. Печать офс.

Тираж -/ОО Заказ 34 <5 МП «ПЕТИТ» 107564, Москва, Богатырский пост, 17, корп. 5