Морфофункциональные критерии толерантности рыб при кумулятивном токсикозе

Земков, Герман Вениаминович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфофункциональные критерии толерантности рыб при кумулятивном токсикозе
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональные критерии толерантности рыб при кумулятивном токсикозе"

На правах рукописи

ЗЕМКОВ Герман Вениаминович

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ КРИТЕРИИ ТОЛЕРАНТНОСТИ РЫБ ПРИ КУМУЛЯТИВНОМ ТОКСИКОЗЕ

11.00.11 - охрана окружающей среды и рациональное использование природных ресурсов

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Астрахань - 2000

Диссертация выполнена в Астраханском государственном техническом университете

Научный консультант:

доктор медицинских наук, член-корр. Российской Академии Естествознания (РАЕ) Г.Ф.Журавлева

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Ю.Г.Юровицкий доктор биологических наук, профессор В.И.Воробьев доктор медицинских наук, профессор Н.Н.Федорова

Ведущее учреждение - Краснодарский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства (КрасНИРХ).

Зашита диссертации состоится «25» июля 2000 года в 1400 часов на заседании Диссертационного Совета Д. 117.07.02 при Астраханском государственном университете (414025, Астрахань, ул. Татищева, д.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного технического университета.

Автореферат разослан «25» июня 2000 г.

16).

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Агооо 79Ж

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Проблема загрязнения природных поверхностных вод химическими веществами приобрела наиболее острый характер примерно в 50-ые годы текущего столетия, что, в первую очередь, связано с ростом промышленного производства, повлекшего за собой резкое увеличение объема сточных вод и их компонентов, включая ксенобиотики, поступающих в открытые водоемы. В странах с высоким уровнем развития производства это вскоре привело к потере ры-бохозяйственного и санитарно-гигиенического значения многих рек, озер, а масштабы загрязнения распространились и на мировой океан.

Негативные последствия загрязнения рыбохозяйственных водоемов, как известно, проявляются в виде массовой гибели, избирательной смертности, заболеваемости рыб, а также снижения плодовитости, промвозврата, что в итоге приводит к резкому снижению численности видов промысловой ихтиофауны. Наиболее скрытой и сложной для регистрации является избирательная смертность, которая может прогрессировать в течение нескольких лет. В связи с этим актуальное значение приобретает разработка критериев диагностики кумулятивного токсикоза у рыб

В экспериментальной токсикологии рыб критерии токсичности конкретного вещества разрабатываются на основе физиологических, биохимических иммунологических методов анализа (Лукьяненко, 1967; Косинова, 1979; Строганов, 1979; Брагинский с соавт., 1979; Микряков с соавт., 1997). Токсичность сточных вод и их поллютантов оценивают также на основе патоморфологических методов анализа паренхиматозных органов, головного и спинного мозга (Краснов, 1970; Грищенко, 1970; Попова, 1971; Мазманиди, 1973; Попова, 1973;

РОС 1:'ОНЛЛЬНАЯ 3 ЬИ .¡ОТЕКА

С ,;-тербу|»г О >

Кокуричева, 1974; Лизина с соавт., 1975; Бурковский, 1977; Щербаков, 1983). Авторы этих работ убедительно доказали значение патологических изменений в микроструктуре органов и тканей рыб для оценки степени токсичности различных по своей химической природе веществ. Вместе с тем остаются мало изученными вопросы морфофунк-циональных нарушений, отражающих принцип единства структуры и функции, за исключением некоторых работ (Попова, 1973; Сидоров, 1983).

Особое внимание привлекают к себе результаты исследований упомянутых выше авторов по изучению нарушений в микроструктуре спинного и головного мозга. Однако до настоящего времени в современной научной литературе нет сведений о связи внешних симптомов интоксикации с патоморфологическими нарушениями в отделах ЦНС.

На современном этапе экотоксикологических исследований все большее значение приобретают методы биотестирования (Патин, 1981). В этой связи целый ряд физиолого-биохимических и патомор-фологических критериев токсичности веществ, апробированных в экспериментальной токсикологии рыб, могут с успехом использованы в натурных исследованиях.

Вместе с тем в природных условиях необходимы критерии, соответствующие всем уровням организации от молекулярного до попу-ляционного. Данный аспект согласуется с концепцией, выдвинутой Н.С.Строгановым (1978), сущность которой заключается в сохранении вида, что прямо связано с функциональными нарушениями на уровне органов, тканей и клетки в организме гидробионтов, имеющих прежде всего хозяйственное значение.

В этом отношении рыбы наиболее приемлемый объект изучения кумулятивного токсикоза, который, как правило, проявляется в виде

материального накопления стабильных токсикантов и функционального накопления (Лукьяненко, 1967), отражающего степень повреждающего действия токсических веществ в организме.

В исследованиях Каспийских осетровых, начиная с середины 80-х годов, изучали микроструктурные изменения в печени, скелетной мускулатуре и гонадах без регистрации уровня накопления токсикантов (Алтуфьев, 1984; Дубовская с соавт.. 1987; Романов, 1990; Акимова, 1991). Аналогичные исследования проводились с 1982 года на примере сиговых и карповых видов Обь-Иртышского бассейна (Селюков, 1994; 1997). В зарубежной литературе работы посвящаются патологическим нарушениям в печени рыб без сопоставления с гаметогенезом (Mallins et al., 1984;Mallins et al., 1984; Krahn et al., 1984; Podovvski et al„ 1991; Gronlund etal., 1991).

Таким образом, нарушения на основе целостности структуры печени и других органов рыб в естественных условиях часто изучаются вне зависимости от материальной кумуляции токсикантов и функциональной характеристики. Недостаток сведений по этим вопросам существенно затрудняет прогноз дальнейшей судьбы особей с патологическими нарушениями во внутренних органах, что связано с численностью рыб.

Мало изучены вопросы о суммационном воздействии на организм экзо-, и эндотоксикантов при нарушении метаболических процессов в организме. В патоморфологии рыб пока отсутствует классификация структурных нарушений, основанных на новых достижениях теории общей патологии (Саркисов, 1997). Мало изучены морфофунк-циональные аспекты токсикоза, что на современном этапе затрудняет выявить и определить приспособительное значение и вектор развития компенсаторных признаков и регенерации в организме рыб. Исходя из

всего сказанного выше, в настоящей работе были поставлены следующие цели и задачи исследований.

Цель исследований. В экспериментальных условиях установить критерии толерантности рыб при токсикозе с помощью морфо-функциональных методов анализа важнейших симптомов интоксикации на примере карпов и молоди белуги; в натурных условиях выявить закономерности патологических нарушений на основе морфофунк-циональной оценки кумулятивного токсикоза в организме Каспийских осетровых.

Задачи исследований:

-Экспериментальными методами исследований выявить функциональное значение биохимических показателей метаболизма в скелетной мускулатуре и микроструктурных нарушений в различных отделах ЦНС в процессе угасания двигательно-пищевых реакций у рыб под влиянием гербицида ялана.

-В направлении унификации и совершенствования принципов диагностики экзотоксикозов у рыб выявить характер кинетики показателей дыхательной функции крови на фоне патоморфогенеза в двигательных центрах нервной системы в различные периоды интоксикации. Классифицировать патоморфологические нарушения в отделах ЦНС в связи с физиологической и репарационной регенерацией у рыб после прекращения интоксикации.

-На основе выборочных и типологических наблюдений установить пределы колебания экстенсивно-структурного показателя числа случаев патоморфологических нарушений во внутренних органах осетровых в различные годы исследований. Выявить характер и силу связи патоморфофункциональных показателей от уровня накопления ХОП и металлов во внутренних органах рыб.

-Систематизировать патоморфофункциональные критерии нарушения детоксикационной функции печени и определить их значение в развитии половых желез осетровых, включая овуляцию. Сопоставить характер кинетики активности оксидоредуктаз с тяжестью патомор-флогических нарушений во внутренних органах осетровых.

-Теоретически обосновать данные патоморфогенеза как показателя толерантности осетровых в современных экотоксикологических условиях Волго-Каспия.

Научная новизна. Впервые доказана необратимость и разработана классификация патоморфологических нарушений всех отделов ЦНС у рыб, адекватных динамике угнетения двигательно-пищевых реакций под влиянием тиокарбаматных соединений. Нарушение стереотипа поведения рыб также вызвано накоплением в скелетной мышце гидроперекисей экстрактивных веществ, аммиака, мочевины, что может служить импульсом развития аутотоксикоза.

Общеизвестное депонирование гидрофобных ХОП в жире и в тканях, богатых жиром у рыб, дополнено новыми фактами зависимости уровня кумуляции ДЦТ с количеством отдельных липидов. По сравнению с самцами корреляция токсикантов с активными метаболитами чаще наблюдалась в органах самок, в организме которых, как известно, уровень энергетического и пластического обмена выше, чем у самцов.

Доказана функциональная связь гаметогенеза у осетровых с детоксикационной ролью печени, одним из критериев которой является белокобразование. В природных условиях на примере осетровых впервые установлен общий характер анаэробиоза в организме с использованием гистоэнзимохимических методов определения активности ок-

сидоредуктаз. Снижение уровня аэробного дыхания при кумулятивном токсикозе происходит по мере развития тяжести патоморфогенеза и сохраняется в процессе регрессии.

Практическое значение работы прежде всего выражается в рекомендации более широкого применения патоморфологических методов анализа внутренних органов рыб, физиологическое состояние которых отражает экотоксикологическую обстановку в природных водоемах, и в системе биомониторинга могут служить надежным биотестом качества водной среды.

В анализе микроструктуры внутренних органов рыб для биотестирования качества природных и сточных вод существенное значение имеет целенаправленный анализ мотонейронов сегментарных отделов ЦНС, реакция которых прямо связана с двигательно-пищевыми реакциями Надежным биотестом служит сопоставительный анализ патоморфологических, регенерационных и метаболических признаков в печени, в значительной степени определяющих ее полифункциональную роль в гомеостазе организма при кумулятивном токсикозе.

Не оставляет сомнений применение патогистологии в рыбоводстве, технологические .процессы которого прямо связаны с качеством природных вод, а также при экспертизе с целью определения возможности интродукции новых видов рыб в конкретных водоемах.

Исследования проводились в соответствии с комплексными программами КаспНИРХ и АГТУ по следующим темам:

«Изучение влияния пестицидов на экосистемы морей, водохранилищ и прудовых хозяйств» - № гос. регистрации 78030894.

«Содержание и влияние на биопродуктивность нефтепродуктов солей тяжелых металлов, пестицидов в Каспийском море и дельте р. Волги, возможная динамика их в перспективе. Процессы самоочище-

ния в дельте реки Волги. Мероприятия по снижению загрязненности водоемов (без переброски стока северных рек) - № гос. ресгитрации 0182.804327!.

«Оценка влияния газоконденсатного комплекса на экосистемы рыбохозяйствепных водоемов» № гос. регистрации 0188.0034762

На защиту выдвигаются следующие положения: 1. Баланс тяжелых металлов и ХОП в отдельных органах осетровых в значительной степени зависит от функциональной активности всех систем организма, что подтверждается результатами корреляционного анализа. В исследованиях по изучению динамики уровня кумуляции ксенобиотиков и металлов в рыбе, рекомендуется правило функционального распределения экзотоксикантов, которое предусматривает анализ на их содержание во всех органах, включая скелет и кровь. Выявленная корреляция накопления ХОП и тяжелых металлов с количеством фосфолипидов, холестерина и эфиров холестерина позволяет осуществлять целенаправленный анализ процессов синтеза гормонов и резистентности биомембран при кумулятивном токсикозе. 2 Патоморфогенез в печени осетровых усугубляется снижением уровня РНП и ДНП, что свидетельствует о нарушении синтеза белка и об истощении генетической информации. Вместе с тем, активизируется роль макрофагов и лимфоцитов, участвующих в процессе утилизации разрушенных клеток и тем самым обеспечивающих условия для регенерации. 3. На фоне регрессивных процессов в печени осетровых в 90-е годы, мышце и гонадах наблюдается снижение уровня активности энзимов аэробного дыхания. Инверсия окислительно-восстановительных реакций в печени приводит к дефекту ее детоксикационной

функции. Снижение аэробного дыхания в мышце и гонадах следует признать одним из показателей гипоксии организма в ответ на действие кумулятивного токсикоза. 4 На основе альтернативного анализа в популяции осетровых выявлено две группы рыб, различающихся по степени толерантности при кумулятивном токсикозе Первая группа особей, обладающая новой нормой реакции, сформировалась на основе адаптационной модификации и под влиянием естественного отбора сохраняется как наиболее совершенная и устойчивая. Вторая группа рыб с па-томорфологическими и функциональными нарушениями, которые создают определенный риск для поддержания общего гомеостаза и для репродуктивной системы организма.

Апробация работы. Материалы доложены и обсуждены на: Научно-практической конференции (Волгоград, 1977), IV Всесоюзной конференции по экологической физиологии и биохимии рыб (Астрахань, 1979), IV Всесоюзной конференции по раннему онтогенезу рыб (Мурманск, 1988), Всесоюзном совещании «Поведение рыб» (Москва, 1989), Всесоюзном совещании «Осетровое хозяйство водоемов СССР» (Астрахань, 1989), Региональной конференции «Экологические проблемы Волги» (Саратов, 1989), Симпозиуме, посвященному 90-летию со дня рождения проф. Н.Л.Гербильского (Ленинград, 1990), Второй Всесоюзной конференции по рыбохозяйственной токсикологии (С.Петербург, 1991), Всероссийской конференции «Экосистемы морей России в условиях антропогенного пресса» (Астрахань, 1994), Совещании «Многолетние гидробиологические наблюдения во внутренних водах: современная ситуация и перспективы» (С.-Петербург 1994), IV Всероссийской конференции «Нейроэндокринология - 95» (С.Петербург, 1995), Международной конференции «Каспий - настоящее

и будущее» (Астрахань, 1995), Первом Конгрессе ихтиологов России (Астрахань, 1997), 3-rd International symposium on sturgeon. (Piacenza. -Italy, 1997), Российской научной конференции «Эколого-биологические проблемы Волжского региона и Северного Прикаспия» (Астрахань, 1998), V Всероссийская конференция «Нейроэндокрино-логия - 2000» (С.-Петербург, 2000).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 49 научных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 220 страницах текста, содержит введение, 5 глав, включающие 14 под-глав, заключение, выводы, практические рекомендации, 55 рисунков, 20 таблиц и указатель литературы (327 источников, из них 90 работ иностранных авторов).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Натурные наблюдения.

Начиная с 1982 по 1995 годы систематические исследования проводили в соответствии с утвержденными научными программами КаспНИРХ и АГТУ. Тест-объектами биомониторинга служили белуга, осетр и сверюга. Лов рыбы в реке осуществляли плавными сетями, в море способом траления. Часть материала собирали выборочно на тонях «Чкаловская» и «Мужичья».

Химические методы анализа использовали с целью определения тяжелых металлов и хлорорганических пестицидов (ДДТ, его метаболитов ДДЕ, ДЦД, изомеры ГХЦГ) во внутренних органах обследованных рыб (осетр, севрюга). Металлы определяли методом эмиссионного спектрального анализа на спектрографе PYS-2 с решеткой 651 шт/мм (Еременко, 1969).

Качественный и количественный анализ ХОП определяли мето-

дом газовой хроматографии на приборе японской фирмы «Yanaco». Подготовку и анализ проб осуществляли по методике, разработанной коллективом авторов (Пивоваров с соавт., 1974).

Обследовано 116 экз. рыб. Всего обработано 575 проб биоматериала, из них 295 проб на металлы и 279 проб на пестициды.

Биохимический анализ. Влагу определяли весовым способом, общее количество белка общеизвестным методом Лоури (Филипович с соавт., 1982), липиды получали по методике Фолча (Folch, 1957). После взвешивания липиды хроматографировали на отдельные фракции в тонком слое силикагеля на пластинках «Sylufol» по методу Кейтса (Кейтс 1979).

Гистологические методы анализа. Гистосрезы печени, мышц и гонад толщиной 7-10 микрон окрашивали гематоксилином и эозином, срезы спинного и головного мозга по Нисслю (Ромейс,1953; Меркулов, 1969). Активность ферментов определяли по методикам Пирса (1962), Лилли (1969). Все препараты микроскопировали и фотографировали на микроскопе фирмы «Olimpus».

Всего обследовано 686 экземпляров осетровых видов рыб, приготовлено и исследовано 10724 гистопрепарата, из них на морфологический анализ 1942, на гистохимический 4222 и на гистоэнзимохими-ческий 4560. Для математической обработки данных исследований использован альтернативный анализ, методом парной корреляции определяли связь физиолого-биохимических показателей с уровнем накопления ХОП и металлов (Сепетлиев, 1968; Плохинский, 1970).

Экспериментальные исследования. Изучали степень метаболических нарушений в скелетной мышце карпов (двухлеток) и микроструктурных нарушений в двигательных нервных центрах сеголетков

белуги и карпа под влиянием гербицидов ялана и «сатурна». Испытывали подострые и хронические концентрации гербицидов в пределах от 0,001 до 4,5 мг/л в пересчете по действующему веществу (ДВ). Все изменения метаболизма в мышце и патоморфологические нарушения в отделах ЦНС сопоставляли с утратой двигательно-пищевых и оборонительных реакций у рыб в сравнении с контролем.

Количество эритроцитов в крови рыб подсчитывали в камере Горяева (Кудрявцев с соавт., 1969), содержание гемоглобина измеряли методом колориметрирования на аппарате ФЭК-М (Дервиз, Воробьева, 1959). Количество глюкозы в крови определяли тест-методом на основе орто-толу иди новой реакции. В сыворотке крови определяли общий белок на рефрактометре марки РДУ (Сб. «Лабораторные исследования в ветеринарии», 1971) липиды по сульфофосфорнованилино-вой реакции (Барышков с соавт., 1966), фосфолипиды определяли по фосфору (Замычкина с соавт., 1962), активность БН-групп методом амперометрического титрования (Соколовский, 1962).

Количество продуктов перекисного окисления липидов мышц измеряли двумя методами: полярографически на полярографе ОН-104 и иодометрическим титрованием. Результаты амперметрического титрования выражали в Н.моль /экв/ мг липида (Владимиров и др., 1972; Бурлакова и соавт., 1965; Алесенко с соавт., 1966). Содержание свободных аминокислот в мышцах карпа определяли на анализаторе типа 602 ОА Чехословацкого производства (Шпакман, Штейн, Мур, 1952).

Объем и методики исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1

Материалы и методика исследований

№ п/п

Методики исследований 2

Морфофункциональ-ные и химические показатели 3

Количество рыб

Авторы методик

2 з"_____ 4 5

Химиче- Количество элементов 116 Еременко, 1969

ские Количество ХОП 116 Пивоваров с со-

авт, 1974

Количество белков 126 Филипович с

соавт., 1982

Количество липидов к " Folch, 1957

Хроматография 116 Кейтс, 1979

Количество 20 Барышников с

фосфолипидов соавт., 1966

Биохими Количество 20 Владимиров с

гидроперекисей, АОА соавт., 1972;

ческие Бурлакова с со-

авт., 1966;

Количество глюкозы 20 Тест-метод по

ортолуидиновой

реакции

Количество аминокис- 20 Шпакман с со-

лот авт, 1952

Количество БН-групп 20 " Соколовский,

1962

Гематоло- Количество гемоглоби- ".....50............. Кудрявцев с со-

гические на авт., 1969

Количество эритроци- (4 Дервиз с соавт.,

тов 1959

Гистоло- Морфология клеток и 749 Ромейс, 1993

гические тканей - Меркулов, 1969

Гистохи- Липиды, фосфолипиды, 686 Л и лл и, 1969

мические РНП, ДНП

Гистоэн- Сукцинат-, изоцитрат-, 414 Пирс, 1962

зимохи- малат-, лактат-, глюко-

мические зо-6-фосфатдегидроге-

назы, цитохромоксидаза

Микро- патоморфологические - 749 Световой микро-

скопия гистохимические - 686 скоп «Olimpus»

_____ гистоэнзимохимические 414

Статисти- Вариационная статисти- "845 Плохинский,

ческие ка ; корреляция; альтер- 1970

нативный анализ. Сепетлиев, 1968

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

/. Экспериментальные данные изучения двигательной активности рыб под действием гербицидов ялана и «сатурна»

В соответствии с угнетением плавательной способности у рыб в мышце уровень АОА составил 2670, количество гидроперекисей 1,5-10"9, в контроле 3300 мг/час на 1 г липидов; 0,8-10"9 моль экв/мг.

Количественное изменение АОА в любую сторону нарушает гомеостаз (Журавлев, 1975). Экспериментально установлено, что сокращение мышц восстанавливалось после добавок антиоксидантов (Козлов, 1977). Видимо, ялан блокирует активность антиоксидантов, нарушая тем самым процессы оксидации липидов с последующим накоплением перекисных соединений и приводит к угнетению сократительной функции скелетной мускулатуры. Если этот механизм является общим для различных мышц, включая сердечную, то открывается перспектива в установлении причин массовой гибели рыб, в этиологии заболеваний и т.д. Результаты по обсуждаемым материалам согласуются с опубликованными в современной литературе, отражающими динамику АОА в организме рыб под влиянием различных токсикантов (Пашошкин с соавт., 1968, 1971; Якубов с соавт., 1971; Козлов с со-авт., 1970; Магомедов с соавт., 1973; Чернышев с соавт., 1973; Голь-дин, 1976).

Утрата плавательной способности карпа под влиянием ялана находит свое объяснение в накоплении экстрактивных метаболитов в мышце подопытных рыб. Например, снижение количества глутамино-вой кислоты и орнитина, привело к увеличению аммиака и мочевины соответственно. Существенное место занимают показатели аммино-кислотного состава, прямо связанного с процессами фосфолирирова-ния. Это касается валина, изолейцина+лейцина, количество которых в

мышце подопытных карпов по сравнению с контролем заметно ниже (табл. 2).

Таблица 2

Содержание свободных аминокислот в ммоль/г в мышце карпа в условиях сублетальной интоксикации яланом

Аминокислоты Контроль Опыт

Цистеиновая кислота следы 75,7±2,01

Серин 19,17±1,5 25,5±2,08

Глутаминовая кислота 52,75±5,9 50,02±5,1

Валин 3,1 ±0,08 2,0±0,01

Цистеин 4,25+0,5 3,28+0,04

Изолейцин+лейцин 8,5±1,2 7,08±0,8

Орнитин 0,1 ±0,008 0,75±0,1

Аммиак 18,7±2,1 20,7±1,9

Мочевина следы 3,5±0,2

У зимующих карпов снижение энергетических трат наблюдали именно за счет снижения количества указанных аминокислот (Сорвачев, 1982). Известные в научной литературе факты об участии цистеиновой кислоты и серина в метаболизме серосодержащих соединения (Касида, 1979), видимо, прямо связано с трансформацией ялана, на что указывают данные об увеличении количества этих кислот в мышце карпа. Многие аминокислоты активно участвуют в обеззараживании ксенобиотиков (Д.Парк, 1973). Под влиянием гербицида в крови карпа наблюдалось снижение глюкозы, среднее количество которой составляло 26, в контроле 32 мг%. В сыворотке крови у рыб в опыте зарегистрировано достоверное увеличение количества белка 2,4, липидов - 533, фосфолипидов - 13, по сравнению с контролем 2,1%; 428 мг/кг; 9 мг% соответственно. Достоверные различия отмечены и по количеству БН-групп, уровень которых в опыте составил 137, в контроле - 100%.

Угнетение двигательной активности соответствовало уменьше-

нию уровня глюкозы в крови карпов. Известно, что у малоподвижных видов рыб количество глюкозы в крови заметно меньше, чем у подвижных видов (Плисецкая, 1975). Материальная кумуляция и трансформация ялана в организме рыб (Слынько, 1981; Земков, 1990) являются основанием говорить о прямом влиянии гербицида на количественную динамику протеинов и сульфогрупп, активность которых зависит не только от общего количества белков, но и от конформации их молекул (Торчинский, 1977). В целом молекулярное взаимодействие ялана и белков можно рассматривать в качестве критерия амплификации организма при токсикозе. Подтверждением тому могут служить сведения о повышении чувствительности эмбрионов рыб к повреждающим факторам на фоне уменьшения количества сульфогрупп (Рапьникова, 1964).

Следующим показателем защитной реакции карпа в ответ на воздействие яланом следует отнести увеличение общих липидов и фосфолипидов в сыворотке крови. Липиды по сравнению с глюкозой используются в организме рыб при длительных энергетических тратах (Шульман, 1972; Шатуновский, 1979; Сидоров, 1983). Такое переключение обменных процессов, очевидно, и происходит в результате интоксикации карпа для поддержания общего гомеостаза.

Подытоживая результаты физиолого-бохимического анализа все измеряемые показатели по количественным характеристикам необходимо разделить на две группы. Первая группа отражает метаболизм в виде нарушения азотистого обмена, фосфорилирования, переоксидации липидов в мышце спины, изменения гликолиза в виде снижения глюкозы в крови. Во второй группе количественные характеристики показателей у подопытных рыб выше, чем в контроле и свидетельствует о мобилизации резервов на поддержание гомеостаза организма.

Дальнейшие исследования были направлены на изучение изменений структуры различных отделов ЦНС и прежде всего двигательных центров. Параллельно наблюдали за количественной динамикой некоторых гематологических показателей, предполагая о фазном характере изменений, что имеет большое значение в диагностике экзо-токсикозов особенно в природных условиях.

Через 15 дней величина гемоглобина по мере увеличения концентраций гербицида снижалась и составляла 6,5;3,8;2,5;2,8; , в контроле 3,3 процента. Число эритроцитов уменьшалось в том же направлении, 690;630;600;610, а в контроле 730 - тыс/мл. Соответственно изменялся и цветной показатель-5,2;3,5;2,8;2,7; против контроля 2.7.

Во второй период (экспозиция 36 дней) при концентрациях яла-на 0,1 и 0,45 мг/л величина гемоглобина составила 3,9; 5,12% соответственно. При концентрации ялана 2,2 мг/л уровень дыхательного пигмента по сравнению с первым периодом почти не изменился и равен-2,6%. При максимальной концентрации гербицида 4,5 мг/л все рыбы погибли на 25-ый день опыта.

Таким образом, динамика гематологических показателей носит фазный характер и зависит от концентрации ялана и экспозиции интоксикации. Полученные данные имеют большое значение в диагностике экзотоксикозов. Например, в научной литературе опубликованы результаты экспериментальных работ, в которых испытывали действие ялана на дыхательную функцию крови молоди белуги. Так, под влиянием летальных и сублетальных концентраций ялана в крови рыб при разовой регистрации наблюдали снижение гемоглобина на- 14-19% (Лукьяненко с соавт., 1975; Кокоза с соавт., 1975). На этом основании авторы неизбежно приходят к однозначному выводу о гипоксии под влиянием ялана. С точки зрения общей оценки увеличение гемоглоби-

на рассматривается как начало воспалительного процесса в организме рыб (Кудрявцев с соавт., 1969).

Наиболее отчетливо согласованность стереотипа поведения рыб проявилась с данными патогистофизиологического анализа отделов ЦНС молоди белуги.

Спинной мозг. Цитоплазма большинства мотонейронов передних рогов мозга гипохромна, тигроид пылевидный, отростки далеко и сильно прокрашены.

Продолговатый мозг. В клетках двигательных ядер блуждающего иерва и вентрамедиальной группы отмечено набухание цитоплазмы, хромофобия, утолщение отростков. Ядра нейронов вытянуты, окраска перинуклеолярной зоны усилена. Другие нейроны вытянуты, отростки резко базофильны, размеры ядер уменьшены, а ядрышек - увеличены, глыбки тифоида различались с трудом.

Средний мозг. Как правило, нейроны слабо контурированы, набухшие, ядро сморщено, цитоплазма гипо-, или гиперхромна, ядрышко мутноватое, базофильное, единичные нейроны в состоянии некробиоза.

Промежуточный мозг. Вентральнее октавогипоталамического тракта контуры нейронов и их ядра просматривались с трудом, ядрышко мутноватое, сморщенное. Цитоплазма базофильна, глыбки Ниссля не контурированы, в отдельных клетках наблюдали мелкие вакуоли.

При хронических концентрациях ялана 0,001 ;0,002;0,02 мг/л длительность опыта составляла 60 дней. Первые признаки изменений стереотипа поведения у подопыных рыб отмечены, спустя 45 дней, далее потеря плавательной способности рыб развивалась также, как и в подострых концентрациях. Наблюдения показали, что при концентра-

ции гербицида 0,001 мг/л внешние признаки поведения и гистострук-тура изучаемых отделов ЦНС не отличается от контроля, следовательно, данная концентрация является максимально переносимой.

При остальных концентрациях ялана стереотип поведения подопытных рыб не отличался от такового при подостром воздействии гербицида, но гистоструктурные нарушения более выраженные. В спинном мозге наряду, с описанными выше морфологическими изменениями, наблюдали явления деструкции мотонейронов, в продолговатом мозге нейроны сильно сморщенные с эктопией ядра. В среднем и промежуточном мозге отмечены явления периферического тигролиза и вакуольного перерождения нейронов с фрагментацией отростков.

Опираясь на современные представления функциональной роли отделов ЦНС рыб (Карамян, 1970) и существующей классификации гистопатологических нарушений в различных отделах ЦНС гомотер-ных животных (Жаботинский, 1965; Ярыгин с соавт., 1973), следует выделить условно три степени тяжести этих нарушений, возникающих в мозге молоди белуги под влиянием гербицида ялана.

К первой фуппе нарушений относятся гипохромность, базофи-лия, набухание цитоплазмы и распыление тигроида; прокрашивае-мость отростков нейронов; изменение размеров, сморщивание клеток их ядер и ядрышек; отдельные случаи некробиоза нейронов, сопровождающегося сателлитарной реакцией. Двигательная активность у таких рыб отличалась от контрольных несколько пониженным уровнем при сохранении реакции на корм.

Ко второй группе принадлежат дистрофические явления с дезинтеграцией тифоидных глыбок, хромофобией, деформацией нейронов, пикнозом ядра и кариолизисом, нередко отсутствием ядрышка. Аксоны таких нейронов прокрашены, утолщены и фрагментированы.

имеет место выраженный сателлитоз и нейронофагия. Продолжалось снижение плавательной способности рыб в опыте с частичным отказом от корма.

К третьей группе относятся изменения, которые существенно не отличались от таковых, описанных в предшествующей группе, но носили более выраженный характер, имели значительную протяженность. При этом у рыб наблюдалась полная утрата двигательно-пищевых реакций.

Выявленные патогистологические нарушения в ЦНС молоди белуги под влиянием ялана имеют большое значение с точки зрения возможной обратимости этих нарушений. Эта задача была решена на примере другого гербицида «сатурна», который также относится к нейротропным ядам карбаматного ряда.

До прекращения интоксикации ежедневно регистрировали гибель подопытных рыб от одного до двух экземпляров при максимальной концентрации гербицида 0,1 мг/л. Менее выраженные изменения были при концентрации «сатурна» 0,01 мг/л стереотипа поведения рыб. Соответственно внешним симптомам интоксикации изменилась и тяжесть структурных нарушений в отделах ЦНС подопытных рыб. В спинном, продолговатом и среднем мозге нейроны вытянутой формы, цитоплазма гипохромна с исчезновением тигроидного вещества, контуры ядер смазаны. Наблюдалась саттелитарная реакция, а на отдельных участках нейронофагия. Встречались случаи эктопии ядра и «клетки-тени». Такие явления сопровождались разрушением цито-плазматической оболочки.

На втором этапе опыта, после перенесения рыб в чистую воду, понизился темп гибели подопытных карпов, но полного восстановления плавательной способности не наблюдалось. Анализ полученных

данных показал, что дистрофические и некробиотические явления зарегистрированные в различных отделах ЦНС рыб под влиянием ялана являются адекватными критериями необратимости токсикоза, в связи с отсутствием репарационной и физиологической регенерации.

Таким образом, внешние симптомы отравления не дают полной картины токсикоза, ограничиваясь только биохимическими и гематологическими данными без описания структурных нарушений, как морфологической основы биохимических изменений.

2 Морфофункциональные изменения в печени и гонадах осетровых

По данным наблюдений 1982-86 годов в печени осетровых, выловленных в средней зоне дельты реки Волги, были обнаружены патологические изменения в виде дискомплексации печеночных долек, исчезновения балочной структуры, очаговой и диффузной вакуольной инфильтрации гепатоцитов. Около сосудов и портальных трактов имели место скопления клеток лимфоидного и гистиоцитарного типа с примесью полинуклеарных и эозинофильных лейкоцитов. Местами отмечали отсутствие ядер, изредка встречались очаги некроза и обширные инфильтраты. Огрубление портальных трактов сочеталось с фибриноидным набуханием стенок сосудов. Некоторые крупновакуо-лизированные гепатоциты выглядели как баллонные клетки. На отдельных участках наблюдали выраженное полнокровие и стаз в кровеносных сосудах. Описание степени патологии печени согласно собственной классификации по пятибалльной системе, представлены в таблице 3.

Существенным дополнением описанных морфологических нарушений являются данные гистохимически выявленных липидов и рибонуклеопротеидов (РНП), количество которых не всегда изменя-

лось в строгом соответствии с тяжестью патоморфологических изменений. Липиды обнаружены в виде суданофильных включений преимущественно в большом (4-5 баллов) и умеренном (3 балла) количествах. Содержание РНП в виде пиронинофильных включений в клетках печени ниже, чем в клетках перипортальных инфильтратов и эндотелии кровеносных сосудов. Такое распределение РНП свидетельствует о снижении белоксинтезирующей способности клеток паренхимы печени, а скопление их в эндотелии сосудов связано с увеличением проницаемости сосудов, что морфологически проявляется клеточной инфильтрацией.

Таблица 3

Результаты гистоморфологического анализа печени осетровых по данным 1983 - 1986 г.г.

Характер морфологических ; Степень

изменении

Дискомплексация печеночных балок. Обширные 1 клеточные инфильтраты вокруг портальных трактов ; и сосудов. Фибриноидное набухание стенок сосудов | Крупновакуолизированные гепатоциты, выраженные инфильтраты вокруг сосудов и портальных трактов. [ Полнокровие, стазы, утолщение и гиалиноз сосудистых стенок.

изменении в баллах

4,5 - 5,0

Вакуольная дистрофия печеночных клеток. Наибольшие периваскулярные и перипортальные ин-, фильтраты. Утолщение стенок сосудов. , Мелковакуолизированные гепатоциты, небольшие I островки пигмента, сосуды без изменений | Отсутствие изменений _

4,0

3,0-3,5

2,0 - 2,5 1,0

Все перечисленные изменения классифицируются как гепатоз (жировая и белковая дистрофия печени) и как гепатит (периваскулярные клеточные воспалительные процессы) с нарушением обмена ли-

пидов и белков, и характерны для хронической интоксикации.

В гонадах почти всех обследованных самок осетра ооциты находились на различных стадиях зрелости (II; III; IV; IV-V) без видимых нарушений. Оболочки яйцеклеток, на что обычно и в первую очередь обращали внимание, нормальной толщины и формы, ядра с множеством различных ядрышек с большим содержанием липидов и РНП в ооцитах. Лишь в одном случае обнаружено утолщение желточной оболочки с подкортикальными пигментными гранулами, ядро при этом было с растворенной кариоплазмой.

Таким образом, отмеченные в печени признаки васкулита, пери-васкулярных и перипортальных инфильтратов с присутствием эозино-фильных и полинуклеарных лейкоцитов с высоким содержанием РНП свидетельствуют об аллергизации воспалительного процесса и могут рассматриваться в качестве биотеста при хронической интоксикации.

Важно отметить, что у всех обследованных рыб не было отклонений от обычного стереотипа поведения. Не зарегистрировано также язв, опухолей, следов повреждения кожного покрова. Следовательно, особи не исчерпали потенциала компенсаторно-защитной функции и это не позволяет однозначно толковать о дальнейшей судьбе вида.

Несмотря на более высокий уровень метаболитов, особенно, липидов в органах самок по сравнению с самцами, половые различия по количественному содержанию ХОП незначительные или в других случаях отсутствуют. По результатам биохимического анализа печени, гонад и скелетной мышцы спины обнаружены половые различия, которые наиболее ярко проявлялись у севрюги. Уровень почти всех показателей в печени, гонадах и мышце самок севрюги заметно выше, чем у самцов (табл. 4). В тех же органах осетра различия стертые. Особое внимание на себя обращает низкое, на уровне чувствительности

Таблица 4

Результаты статистического анализа физиолого-биохимических показателей у самок и самцов севрюги (1982 - 1984 г.г.)

Показатель Севрюга самка ! | Севрюга - самец

и единицы Печень Гонады Мышца I Печень Гонады Мышца !

измерения М±ш С ; М±ш С , М±гп С 1 М±ш С М±ш С М±ш С i

Влага % 76±1,3 8 59±2,2 19 1 77±1,4 8,7; 64±1,8 | 12 72±1,4 8, 5 76±0,9 5 , f

Белок г/100 г 2±0,2 47 ; 2±0,3 ' 56 ; 1,9±0,15 30 , 1,6±0,17 1 i 43 ; 1,б±о,з 99 1,4±0,2 57 .

Липиды г/100 г 11±1,1 51 15±1,3 44 5,8±0,8 56 , 10,2±1,3 1 ' ! 63 1 10±1,6 1 ! 70 3,6±0,6 63 i

Фосфолипиды % 21+2,3 24 25+3,1 36 - - ! i,5±i,7 : 34 ' 2,6±4,3 58 - -

Холестерин % 9,7±2,1 62 6±0,9 42 • 1 - - 7,4±1,7 72 ■ 11+2,4 j 73 - -

Глицериды % 48±5 29 ■ 58±3,7 19 ' - - ; 65±4,7 22 51 ±6,7 1 43 - -

Жир. кислоты % 11±1,2 23 ; 9±1,4 35 | - - следы - следы ■ " - i

Эфиры хол. % 7±1,1 44 3,8±0,6 50 ■ - - 8,8±2,05 | 69 6,5±1,3 | 64 - - ;

метода, количество жирных кислот (ЖК) у самцов севрюги. В доступной для анализа научной литературе имеются данные не по общему количеству, а по качественному составу ЖК печени, гонад и мышц морских и пресноводных видов рыб (Крепе, 1981; Сидоров, 1983).

В связи с накоплением ХОП во внутренних органах осетровых представляют интерес данные по количеству и фракционному составу липидов. Содержание общих липидов наибольшего уровня достигало в гонадах самок севрюги - 15, на втором месте печень - 11 и наименьшее количество в мышце - 5,8 г/ЮОг сырого веса. Как видно из таблицы, уровень общих липидов в органах самок заметно выше, чем у самцов, особенно это касается гонад и мышцы спины. В соответствии с биохимическими показателями более выраженные различия между самками и самцами осетра и севрюги отмечены по количественному содержанию почти всех определяемых элементов, что, вероятно, связано с высокой активностью металлов и более высоким уровнем метаболических процессов у самок, чем у самцов. Количественное содержание отдельных липидов в гонадах и печени соответствовало их обычному соотношению. В сторону количественного убывания липиды распределялись в ряд - триглицериды, фосфолипиды, жирные кислоты, холестерин, эфиры холестерина.

По изучению динамики количества тяжелых металлов в мышце спины, печени и гонадах осетровых не по всем элементам можно установить какие-то закономерности. По убыванию количественного содержания металлы располагались в следующий ряд: железо, цинк, медь, ванадий, свинец, никель, титан, марганец, молибден. Такой порядок относительно стабильно сохранялся по железу, цинку и меди независимо от типа органа. Остальные элементы во всех органах в данном ряду меняли свои места. Наиболее четко прослеживается ди-

намика железа, меди, никеля и марганца в печени и в гонадах. С 1982 по 1984 год включительно максимальное количество железа, равное 309 мг/кг сырой ткани отмечено в печени, взятой от рыб, выловленных в 1982 году, наименьшее количество обнаружено в гонадах по наблюдениям 1983 года. В остальные годы количество железа колебалось незначительно. Количество меди, никеля, марганца с небольшими изменениями имело четко выраженный характер снижения (табл. 5). Во всех анализируемых пробах кадмий и олово не были обнаружены.

Таблица 5

Динамика тяжелых металлов в тканях рыб

Наз ва ние органа §

3 3 2

<о Г V

в отдельные годы (мг/кг)

Годы

иссле-

дования N1 Си Мп Мо

1982 9,98 8,74 _

1983 " "2,14 3,31 - -

1984 2,82 12,7 "0,2 0,1"

1985 - - - -

1982 3,5..... 4,6" - -

~ 1983 " 5,1 20,1 1,9 0,5

1984 6,6 30,0 2,3 0,54

1985 " 8,6 72,0 2>4 1,7.....

"1982 3,8 "з,"з 1,2 0,64

1983 3,1 " 12,0 1,5 0,13

1984 6,3 22,0 1,2 0,26 "

1985 2,5" 32,0" 1,9 2,5

РЬ

0,1 0,2

0,2 0,58 9,5

0,3 3,1

77,25

31,46 0,3

Т1

67,2

309,0

157,0

278,0

706,0

74,0

36,0

54,0

16,73

10,0 25,0 7,3

0,2 1,4

3,3 3,6 18,0

Ъх\

14,56 9,29

36,2 45,8

4,6 Г 142,0; 7,3

65,3 I

2.2 ¡49,14'

2.4 ; - ;

2.3 I - I

Прослеживая изменения количественного содержания ХОП, зарегистрировано весьма заметное снижение уровня пестицидов в 1983 году по сравнению с предыдущим 1982 годом. В последующие годы количество ХОП оставалось относительно стабильным (табл. 6). Такая динамика ХОП в корне отличалась от кинетики накопления некоторых металлов. Полученные данные об уровне накопления элементов и

ХОП важно рассмотреть в связи с биохимическими показателями, отражающими различные метаболические реакции в организме рыб.

Таблица 6

Динамика ХОП в тканях рыб в отдельные годы исследований (1982 - 1985 г.г.)

Годы исследований

1982

1983 "

1984 ^ "1985

МЫШЦА

0,7566 " 0,2985" 0,038402

ПЕЧЕНЬ

0,6312 0,2628

.....0,13349

0,2653

ГОНАДЫ

0,8974 " 0,4323 0,10936 0,2847

Некоторое представление такой зависимости были получены на основе данных парной корреляции (табл. 7).

Таблица 7

Результаты корреляционного анализа морфофункциональных __показателей и уровня экзотокс и кантов в печени

ПОКАЗАТЕЛИ

Влага - ХОП Влага - N1 Влага - Си Влага - РЬ Влага - V Влага - Ре Влага - Мп Белок - ХОП Белок-N1 Липиж1г/х - Мп Липиды г/х - РЬ

Липиды г/х - Ре

РИД-Ре

■ТГ

РНП-

РНП -Ъ\ >НП~

Фосфолипиды - Ъъ Фосфолипиды - Ре Холестерин - РЬ__

Холестерин - Ре

ОСЕТР

самка 2

ЫА.

0,54 0,62 0,64 0,89" 0,64

-0,75

-0,95 0,81

самец 3

СЕВРЮГА

самка

" 0,44

0,52

самец 5

-0,70

0,84

-0,76

-0,63

-0,80 0,64

„ 1.

0,42

-0,79 ' -0,77^

' 0,57""

-0,71 -0,48" 0,66 0,64

-0,65

Г ~2 3 4 5

Холестерин - Мп - - -0,69

Холестерин - V - - 0,82

Холестерин - ХОП " 0,60 - - -

Холестерин - Мо 0,68 - _

Холестерин - Ъп - 0,78 -

Глицериды - Мо 0,79 - - :

Глицериды - РЬ "-0,74 - - -

Эфиры холестерина - ХОП - - 0,48 0,91

Эфиры холестерина - Мп 0,99 - - -

Эфиры холестерина - Ре - 0,67 -

рнп-v -0,77 0,71 -

РНП - ХОП" ~~ - ~ 0,70 - 0,73

РНП - - 0,70 - _

рнп - гп 0,65

Сравнивая результаты корреляционного анализа между самками и самцами осетра и севрюги, по всем коррелятам обнаружились различия. Например, в печени тесная положительная связь влаги и металлов обнаружена у самок осетра при отсутствии таковой у самцов, а у севрюги прямая зависимость влаги с никелем в печени самок, но обратная связь у самцов. Чаще всего отмечалась связь РНП, холестерина и эфи-ров холестерина с никелем, цинком, марганцем, молибденом. Но как и в случае с влагой, нет совпадения зависимости для самок и самцов ни по одной паре коррелятов. Так, количество эфиров холестерина и титана очень тесно коррелируют (г=-0,99) у самцов осетра при одновременном отсутствии связи с другими элементами. В печени самцов севрюги столь же тесная зависимость установлена с никелем, медью, молибденом, свинцом, ванадием и цинком. Ни с одним элементом нет зависимости с патогистологическими изменениями в печени. Наибольшое количество случаев корреляции, как видно по данным в табл. 7, наблюдалось в печени самок, обоих видов и во всех анализируемых органах.

В зависимости от количества ХОП в печени изменялось количе-

ство влаги, общего белка, холестерина, триглицеридов, а также степень патогистологических изменений. Характер и сила корреляции, как и в случае с металлами, изменялись в связи с половой и видовой принадлежностью рыб. Положительная корреляция влаги и ХОП отмечена у самок при отсутствии у самцов обоих видов. Аналогичные различия по виду и полу наблюдались и по другим показателям.

Несмотря на все разнообразие характера и силы связи, в свою очередь зависящих от пола и вида осетровых, полученные данные позволяют выделить по крайней мере несколько показателей, количественная динамика которых находится в зависимости от динамики токсикантов. К таким показателям относятся: влага, РНП, холестерин, эфиры холестерина и глицериды.

Обобщая данные зависимости уровня накопления металлов и ХОП с физиолого-биохимическими показателями, совершенно очевидна довольно высокая лабильность метаболических реакций, что в итоге сказывается на подвижности характера и силы корреляции. Сопоставляя результаты анализа по отдельным органам, по крайней мере можно выделить два аспекта сопряженных процессов в организме осетровых при кумулятивном токсикозе.

Во-первых, известная полифункциональная роль печени явно прослеживается при токсикозе, возникшим в результате накопления в органах осетровых, металлов и ХОП, вступающих во взаимодействие с различными метаболитами и в основном липидами.

Во-вторых, корреляция чаще наблюдается у самок, чем у самцов, что, по-видимому, связано с более высоким уровнем пластического и энергетического обмена у самок осетра и севрюги.

3 Количественная динамика активных метаболитов и патоморфогенез во внутренних органах рыб при дистрофии скелетной мышцы спины

В 1989 году изучение экзотоксикоза в организме осетровых выявило распространение патологии и в других органах. В процессе промышленной переработки осетровой продукции резко ухудшилось качество балычных изделий из-за расслоения мышц.

По данным 1989 года у рыб, выловленных в дельте реки Волги, тяжесть патологии на уровне 4-5 баллов в печени достигала встречаемости, равной 27%. К этим изменениям относились: нарушение балочной структуры, зернистая, вакуольная и мелкокапельная дистрофия печеночных клеток, внутри вакуолей - белковый коллоид. Вместе с тем, наблюдались набухание гепатоцитов, смещение ядер к периферии, фрагментация ядер, указывающие на их разрушение. В незначительном количестве встречались двуядерные гепатоциты, полнокровие паренхимы, фиброз портальных трактов и стенок сосудов. Гистохими-чески в цитоплазме печеночных клеток выявлено небольшое содержание липидов и фосфолипидов.

В гонадах самок обнаружены: отслоение, отечность и утолщение фолликулярного эпителия, уменьшение толщины и разрывы оболочек. Встречались участки с фрагментацией оболочек ооцитов. Под оболочкой множественные пигментные гранулы, а также неравномерное окрашивание и разрежение белковых гранул цитоплазмы половых клеток, которые находились в III; III-IV стадиях развития. Гистохими-чески распределение липидов и фосфолипидов без особенностей. Встречаемость рыб с такими изменениями в гонадах составляли 23% У остальных особей (77%) гонады без нарушений. Мышечные волокна различались по своей толщине, отмечены дистрофия, извитость, раз-

волокнение, местами их продольное расщепление и разрывы. Инфильтраты представлены лимфоцитами, полиморфоядерными лейкоцитами, гистиоцитами, фибробластами. Наблюдалось замещение мио-цитов жировыми клетками. Встречались гомогенизированные участки безъядерных миофибрилл. Такие изменения оцениваются как жировая дистрофия и деструкция. Встречаемость рыб с нарушениями в мышце достигала 30%. Гистохимически в мышцах спины рыб при окраске Суданом определялось небольшое и умеренное содержание общих ли-пидов. Фосфолипиды выявлены тоже в небольшом и умеренном количествах.

По общепринятой классификации, патологические изменения, обнаруженные в мышце спины осетровых, относятся к дистрофии с признаками жирового перерождения, лизисом миофибрилл с появлением гипертрофических и регенеративных признаков.

Гистоэнзимохимический анализ показал различную степень активности ферментов в зависимости от их класса и типа ткани. Так, в печени с небольшими изменениями в гепатоцитах отмечена высокая активность дегидрогеназ аэробного окисления сукцинат-,изоцитрат и умеренная активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, участвующей в анаэробном окислении. Имеет место умеренная или чаще низкая активность ряда окислительных ферментов в гепатоцитах, а именно ма-лат-, альфа-глицерофосфат-, лактатдегидрогеназ и цитохромоксидазы. У рыб с более выраженными нарушениями в печени активность ферментов цикла Кребса, петозного цикла, анаэробного гликолиза и цитохромоксидазы снижена по сравнению с условной нормой. В ряде случаев активность ферментов в гистиоцитах, макрофагах и лимфоидных клетках инфильтратов выше, чем в гепатоцитах и оценивается в качестве компенсаторной реакции при токсикозе.

У рыб условно здоровых в ооцитах под оболочкой и в цитоплазме определялась высокая активность сукцинат-,изоцитрат- глю-таматдегидрогеназ, умеренная - альфа-глицерофосфатдегидрогеназы, умеренная и низкая активность малат-, глюкозо-6-фосфат-, лактатде-гидрогеназ и цитохромоксидазы. У рыб с нарушениями в гонадах активность окислительно-восстановительных ферментов низкая.

Таким образом, тенденция к регрессии патогистологических изменений во всех исследуемых органах, наметившаяся по результатам наблюдений в 1990 году, по всей вероятности, объясняется снижением прессинга внешнего токсикологического фактора и мобилизацией внутренних резервов самого организма. В последующие годы до 1995 года включительно сохранялась умеренная тяжесть патологических нарушений.

Принимая во внимание материалы исследований 1990-1995 г. г. среди осетровых в речной период жизни, следует выделить три группы из числа обследованных рыб. К первой группе относятся 20% рыб с относительной физиологической нормой, во второй группе 50% с небольшими отклонениями и в третьей группе 30% особей с наиболее выраженными микроструктурными нарушениями. На этом основании первую группу рыб следует относить к той части популяции осетровых, которая обладает наибольшей толерантностью.

Действительные пределы колебания процента рыб каждый группы в отдельные периоды наблюдений отражают результаты альтернативного анализа, представленные в таблице 8. Рассматривая эти данные в динамике видно, что начиная с 1982 по 1995 годы исследований возрастает число рыб с условной нормой и снижается до нуля число рыб с локальным некробиозом и некрозом в печени. В таком же соотношении изменяется число рыб с умеренными и ниже умеренных

нарушений.

Таблица 8

Пределы действительного процента случаев патологических нарушений в печени осетровых при Р(,)=0,95 и 1=2

Периоды ' Объем Степень морфологических нарушений

наблюде- | выбор- 16(14) 26 36 4-56

ний | ки Пределы действительного процента нарушений

(годы) ! Р+Д Р±Д Р±Д Р+Д

1982-1986* | 100 4-16 2,6-13,4 " 50-60 ~ 12,6-29,4

1988; 1989 [ ________

1990 1 24,6-33,4 4,8-17,2 45-65 -

1991-1992* | _ « _ ~ 7,8-22,2 28,6-39,4 41-61 -

1993 и 40 - 60" 22,8-41,2 10-26 -

1994-1995* ' (с 25-44 39-59 7,4-22,6 -

* - комплектация выборки до 100 случаев по годам.

Подытоживая результаты анализа кинетики развития патомор-фогенеза на завершающем этапе исследований, прослеживается явная регрессия патологических нарушений в печени в виде заметного снижения процента случаев демонстративных признаков дистрофии и усиления репарационной регенерации. Однако, инверсия окислительно-восстановительных реакций в печени расценивается, как лимитирующий фактор развития регенерации, которая требует дополнительных энергетических затрат, и в период анадромной миграции в организме осетровых эти затраты могут достигнуть сверх критического уровня. Основанием такого прогноза является распространение устойчивой гипоксии в мышце и в гонадах, что, безусловно, снижает сопротивляемость организма, ограничивает его приспособительные способности к факторам внешней среды и создает предпосылки дальнейших нарушений в репродуктивной системе осетровых.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты экспериментальных исследований толерантности рыб при кумулятивном токсикозе под влиянием тиокарбаматных гербицидов «сатурна» и ялана прежде всего свидетельствуют о необратимости микроструктурных нарушений нейронов в двигательных центрах нервной системы и это в итоге приводит к утрате их эффекторной роли в двигательно-пищевых реакциях.

Кроме того двигательная активность рыб снижается в результате накопления эндотоксикозов в скелетной мышце спины карпа под влиянием ялана, что, безусловно, негативно отражается на толерантности рыб в процессе кумулятивного токсикоза.

Повышенный уровень некоторых метаболитов в мышце рыб и в сыворотке крови расценивается в виде компенсаторных реакций, но утративших свое значение для поддержания гомеостаза в связи с необратимыми процессами в ЦНС под влиянием тоикарбаматных гербицидов. Такое объяснение не оставляет сомнений в том, что повышение уровня активных метаболитов нельзя рассматривать однозначно. Подтверждением тому, служат также данные настоящей работы о биофазном характере динамики уровня гемоглобина в крови молоди белуги под влиянием ялана.

Таким образом, наиболее полная оценка толерантности рыб при кумулятивном токсикозе возможна на основе комплексного морфо-функционального анализа с учетом данных физиологической и репа-ративной регенрации.

В природных условиях целенаправленный морфофункционапь-ный анализ тем более важен, что подтверждается данными настоящей работы.

На примере осетровых, используемых в качестве объекта мони-

торинга, доказано, что заметные, и длительные во времени дистрофические изменения печени в определенные периоды кумулятивного токсикоза вызывают нарушения в скелетных мышцах и гонадах. Такая же зависимость прослеживается и в процессе регенерации печени. В соответствии с патоморфогенезом изменялась и динамика гистохими-чески выявляемых метаболитов. Это выражалось увеличением содержания липидов, фосфолипидов на фоне снижения РНП и ДНП в процессе прогрессирующей дистрофии и восстановлением прежнего уровня метаболитов в ходе регрессии структурных нарушений в печени. Полученные данные согласуются с опубликованными в литературе результатами о периодичности репарации и патологии митохондрий в печени трески после прекращения интоксикации рыб кепоном (Филимонова с соавт., 1978). Как видно, даже в относительно стабильных аквариальных условиях, усиление патоморфогенеза при кумулятивном токсикозе в печени трески сменяется регрессией и, наоборот, репарация митохондрий печени ослабляется и вновь усиливается их набухание, которое в итоге может привести к разрушению мембран.

По сравнению с другими метаболитами регрессивные процессы в печени осетровых, отмеченные по наблюдениям 1990-1995 г.г., протекали на фоне снижения активности оксидоредуктаз аэробного дыхания, что служит критерием внутритканевой гипоксии. Такая форма гипоксии зарегистрированная в гонадах во время анадромной миграции осетровых однозначно характеризуется как неблагоприятное состояние репродуктивной системы и расценивается в качестве критерия вероятной стерильности гонад осетровых. Подобные явления описаны в современной литературе у Азовских осетровых (Корниенко с соавт., 1996).

Исходя из специфических особенностей прямого и опосредо-

ванного воздействия эколого-токсикологического фактора на ихтиофауну, данные, представленные в настоящей работе, убедительно показывают на необходимость биотестирования, с использованием пато-морфофункциональной характеристики состояния осетровых и других видов рыб, что отвечает принципу единства структуры и функции.

На основании известных теоретических положений биологии группа особей осетровых без патологических нарушений (условная норма), в результате адаптивной модификации, обладает относительной толерантностью при кумулятивном токсикозе. Вторая группа особей с явными признаками патологических изменений находится в состоянии функционального напряжения, но обладает компенсаторно-защитными резервами, лежащими в основе регенерации.

Такая дифференциация осетровых на современном этапе является основным показателем их общего функционального состояния, которое в зависимости от внешних и внутренних факторов будет сказываться на численности популяции. В свою очередь на толерантность рыб негативно может отражаться резкое падение их запасов, о чем свидетельствуют данные опубликованные в литературе (Ходоревская, 1997; Иванов, 2000).

Изложенные выше аспекты морфофункциональных критериев толерантности рыб при кумулятивном токсикозе можно сформулировать в следующих выводах.

ВЫВОДЫ

ресурсы в организме. Вместе с тем, накопление гидроперекисей в мышце спины в суммации с другими факторами приводит в итоге к утрате плавательной способности карпов

При всей тяжести внешних симптомов интоксикаци в мышце рыб происходят реакции, направленные на обеззараживание гербицида ялана в виде увеличения цистеиновой кислоты и серина, участвующих в обмене серусодержащих соединений, к которым можно отнести и тиокарбаматные пестициды.

2. Биохимические показатели крови отчетливо отражают компенсаторно-защитную реакцию организма в момент угнетения двигательной активности. Сущность этой реакции заключается в повышении роли липидов и сульфогидрильных групп белковых соединений на фоне снижения уровня глюкозы, значение которой в углеводном обмене отодвигается на второе место, что в итоге обеспечивает сопротивляемость организма за счет увеличения роли липидов.

3. Экспериментальные исследования по изучению патоморфо-генеза отделов ЦНС у молоди белуги вскрыли цитогистологические нарушения, адекватно отражающие утрату двигательно-пищевой реакции рыб в условиях сублетального и хронического действия ялана. Наиболее демонстративные патологические нарушения зарегистрированы в мотонейронах спинного и двигательных ядрах продолговатого и среднего мозга, начиная от дистрофических изменений до деструктивных явлений в нейронах.

4. Наблюдения, проведенные в естественных условиях на примере осетровых, подтвердили гипотезу об индуцирующей роли печени в гаметогенезе при кумулятивном токсикозе. Длительные и наиболее выраженные патоморфологические изменения в печени индуцировали усиление аномалий в половых клетках и в скелетной мышце осетро-

вых, в период 1987-1989 г.г. Прогрессирующий характер структурных нарушений происходил на фоне снижения уровня тяжелых металлов и ХОП в печени, мышце и в гонадах, что свидетельствует о гетерохронии морфогенеза и количественного содержания токсикантов. Несмотря на широкое варьирование характера и силы корреляции морфо-функциональных показателей с уровнем ХОП и металлов, выявлены половые различия.

5. В период наблюдений с 1982 по 1989 годы прогрессирующие нарушения в печени выражались в виде белковой и жировой дистрофии, увеличения общих липидов, фосфолипидов, снижения РНП и ДНП. Признаки репарационной регенерации слабо проявлялись фиброзом, митозом гепатоцитов, незначительным представительством фагоцитов. Нарушения портальных и капиллярных сосудов в виде инфильтрации форменными элементами крови, застойных явлений внутри сосудов усиливались в соответствии с изменениями в паренхиме печени.

6. В период с 1990 по 1995 годы резко снизилось количество случаев с тяжелыми нарушениями в печени (некроз и некробиоз) с преобладанием дистрофии и признаков репарационной регенерации, что позитивно отразилось на структуре скелетных мышц и половых клеток. На данном этапе исследований в печени происходит снижение активности ферментов аэробного дыхания и увеличение активности анаэробного гликолиза по сравнению с группой особей без патологических нарушений (условная норма). Кроме того, по отношению к другим тканям и органам печень в процессе регенерации оказывает модулирующий эффект, на другие органы.

7. Доказано, что патоморфогенез в печени при кумулятивном токсикозе существенно отражается на репродуктивной системе осет-

ровых. Увеличение аномальных половых клеток, безусловно, снижает воспроизводительную способность осетровых, а предрезорбтивные явления следует рассматривать как предпосылкку стерильности гонад в перспективе.

8. Установлен широкий предел колебаний индивидуальной толерантности современных осетровых при кумулятивном токсикозе. Группа особей без патологических нарушений в печени сформировалась в процессе адаптационной модификации. Есть основания полагать, что модификационные явления будут закрепляться в популяции иод влиянием естественного отбора при условии снижения или, по крайней мере, стабилизации уровня загрязнения водоемов Волго-Каспийского бассейна.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты собственных исследований и материалы, опубликованные в современной литературе, указывают на необходимость широкого применения методов патоморфологического анализа внутренних органов рыб с целью выявления более конкретных форм кумулятивного токсикоза. В связи с этим характер и степень тяжести пато-морфогенеза признаки репарации, изменения метаболизма в печени осетровых представляют собой комплексный морфофункциональный критерий ее детоксикационной функции при кумулятивном токсикозе у рыб. В зависимости от цели исследований патоморфологцческий анализ используют в комплексе с биохимическими и традиционными ихтиологическими методами.

и во внутренних органах, что особенно важно для объективной оценки динамики их в длительных наблюдениях и позволяет оценить истинный уровень их накопления.

3.Исходя из общей оценки напряженного морфофункциональ-ного состояния организма Каспийских осетровых, рекомендуются следующие мероприятия по предотвращению и снижению уровня загрязнения:

- сократить объем сброса промышленных сточных вод, в состав которых входят металлы, детергенты, фенолы, нефть, нефтепродукты, ПХБ, диоксины и другие наиболее опасные вещества;

- для существенного снижения уровня поллютантов в природных водоемах Волго-Каспийского бассейна необходимо постоянное совершенствование методов очистки сточных вод, а также внедрение привентивной технологии особенно в производстве чужеродных соединений. При проектировании новых промышленных объектов исключить возможность миграции чужеродных соединений в природные водотоки.

4. Общим требованием в программе по предотвращению загрязнения природных водоемов должно быть сокращение объема сточных вод действующих предприятий и других водопотребителей, соизмеримого с объемом сточных вод новых объектов, вводимых в эксплуатацию. Такой подход позволит стабилизировать уровень загрязнения на текущий момент времени. Особое значение данное требование приобретает в связи с расширением масштаба нефтедобычи в Каспийском море.

Предложенные рекомендации необходимо осуществлять по всему Волго-Каспийскому бассейну, а не только в пределах Астраханской области и должны быть рассмотрены в Комитете по рыболовству

Российской Федерации.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Эпизоотическое состояние водоемов Волго-Каспийского района //Труды ВНИРО. Т. XXXIX. - Биологические ресурсы рыболовства и их использование М., - 1972. - С. 5-17. (соавт.: Астахова Т.В.).

2. Остаточные количества и метаболизм ялана в воде, данных отложениях и рыбе в условиях его производственного применения // Проблема водной токсикологии. - Тез. докл. III Всесоюз. конф. по водной токсикологии. - Т. II, Петрозаводск. - 1975. - С. 87-88.

3. Токсикорезистентность молоди белуги и сазана в момент острой интоксикации яланом //Сб.Рыбохозяйственные иссл. КаспНИРХа - Астрахань. - 1976. - С. 103-105.

4. Устойчивость белуги на ранних этапах онтогенеза при интоксикации яланом. Сб.: Состояние и охрана биологических ресурсов Волгоградской области. - Волгоград - 1977,- с. 120-122.

5. Гигиенические исследования ялана в природных условиях //Ж.Гигиена и санитария. - М., 1977. «Медицина» № I. - С. 98101. (соавт.: Врочинский К.К.)

6. Сравнительная токсикорезистентность гидробионтов к различным компонентам промышленных сточных вод //Воспроизводство рыб Азовского и Каспийского морей. Труды ВНИРО. Т. 131 - М. -1978. - С. 122-128. (соавт.: Бесчетнова Э.И.).

7. Физиолого-биохимические данные об экспериментальной интоксикации рыб яланом. //Ж.Вопросы ихтиологии» № 6 - М. - 1978. -С. 1128-1133. (соавт.: Врочинский К.К.)

8. Гистоструктура центральной нервной системы у молоди белуги при хроническом отравлении яланом // Тез. докл. IV Всесоюзн. конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. - ч. II. - Астрахань, 1979. - С. 99-100. (соавт.: Теплый Д.Л.).

9. Токсическое действие хромового ангидрида на молодь осетра (Acipenser güldenstädti В.) Сб. научн. тр. Вопросы методик в водной токсикологии.-Л., 1979.-С. 122-125.

10. Сравнительная токсикорезистентность гидробионтов при пести-цидном отравлении //Экспериментальные исследования влияния загрязнителей на водные организмы - Апатиты - 1979 —С. 19-23. (соавт. Э.И.Бесчетнова).

11. Определение гербицида ялана в воде методом тонкослойной хроматографии // В кн.: Методы определения пестицидов в воде. -Вып. 4. - Гидрометеоиздат., Л., 1980. - С. 116-126 (соавт. Врочинский К.К.).

12. Устойчивость гидробионтов разных трофических уровней к действию прометрина // Тез. докл. И межотраслевой научно-практической конференции «Состояние и охрана биол. ресурсов Волгогр. обл.» - Волгоград, 1981. - С. 43-45. (соавт. Бесчетнова Э.И.).

13. К изучению обратимости морфофункциональных нарушений двигательных центров нервной системы карпа под влиянием гербицида «сатурн» // Экспериментальная водная токсикология. - Рига «Зинантне», 1986.-Вып. II, С. 187-191. (соавт.: Журавлева Г.Ф.).

14. Микроструктурные изменения в мозге молоди белуги при интоксикации яланом //Ж.Вопросы ихтиологии. - № 6. - М. - 1983. - С. 1020-1026.

15. Морфофункциональная оценка детоксикационной функции печени и воспроизводительной системы рыб в период нерестового хода (на примере осетровых) //Сб.:Методы ихтиотоксикологических исследований. JI., 1987, С. 40-41.

16. Гистохимическое определение динамики активных метаболинтов в гонадах рыб в эколого-токсикологических исследованиях //С..: Методы ихтиотоксикологических исследований. - JI., 1987. - С. 36-37. (соавт.: Журавлева Г.Ф.).

17. Методика гистопатологического анализа состояния отделов центральной нервной системы у рыб под влиянием нейротропных токсикантов //Сб.: Методы ихтиотоксикологических исследований. - JI., - 1987. - С. 39-40. (соавт.: Журавлева Г.Ф.)

18. Результаты дифференциальной диагностики экзотоксикоза у рыб // Тез докл. «Первая Всесоюзная конференция по рыбохозяйствен-ной токсикологии (Юрмала, декабрь, 1988). - Ч. I. - Рига, 1988. -с. 141. (соавт. Журавлева Г.Ф., Бурякова Г.М.).

19. Степень морфологических нарушений эпителия внешних тканей личинок севрюги под влиянием взвешенного вещества при различных экспозициях // Тез. докл. Всес. конф. по раннему онтогенезу рыб. - Мурманск, 28 сентября 1988, ч. II., с. 114-116. (соавт.: Антонова JI.A., Федорова H.H.).

20. Характер и степень сопряженности морфофункциональных изменений в организме осетровых с количеством экзотоксикантов в их внутренних органах //Сб. Осетровое хозяйство водоемов СССР». Астрахань, 1989. - Ч. II. - С. 6-8. (соавт.: Журавлева Г.Ф., Кокуш-кина И.В.).

21. Развитие морфофункциональных нарушений в печени карпа под влиянием возрастающих сублетальных концентраций меди // Сб." Экологические проблемы Волги. - Саратов, ч.Н. - 1989. - С. 258-

260. (соавт.: Федорова H.H.).

22. Динамика морфофункциональных нарушений в организме карпа под влиянием сульфата меди // Тез. докл. Всесоюзной конф. «Экологические проблемы охраны живой природы» - М., 1990. - ч. 2. -С. 115-116 (соавт.: Журавлева Г.Ф., Федорова H.H.).

23. Морфофункциональный нарушения в организме промысловых видов как возможные последствия загрязнения дельты р.Волги // Тез. докл. региональной конф. ч. II Медико-биологические проблемы. Саратов. - 1989. С. 179. (соавт.: Журавлева Г.Ф.).

24. Гистохимические исследования органов и тканей осетровых рыб в процессе расслоения мышц и ослабление икры // Тезисы симпозиума по экологической обстановке Волго-Каспийского бассейна. - Волгоград, 1989, 4-6 апреля, (соавт.: Журавлева Г.Ф.).

25 Изменение характера поведенческих реакций у рыб при морфофункциональных нарушениях в центральной неврной системе // Тезисы докладов Всесоюзного совещания «Поведение рыб». 20-24 ноября. 1989. М., 1989.-с. 129 (соавт.: Журавлева Г.Ф.)

26. Применение методов биоиндикации в изучении влияния гербци-дов на рыб. //Научные труды ГосНИОРХ. - Л. - 1990-вып. 313, - С. 169-177. (соавт.: Журавлева Г.Ф., Лялькин B.C.).

27. Физиолого-биохимические показатели осетровых рыб в зависимости от уровня накопления экзотоксикантов во внутренних органах //Научные труды ГОСНИОРХ-Л., 1990 - вып. 313. - С. 178-182.

28. Итоги изучения зависимости рыбоводных показателей от уровня содержания хлорорганических пестицидов в организме севрюги и белорыбицы //Научные труды госНИОРХ - Л. - 1990 - вып. 313. -С. 217-226. (соавт.: Журавлева Г.Ф.. Кокушкина И.В.).

29. Некоторые адаптационные закономерности перераспределения элементов в теле волсжкого осетра при миграции из моря в реку // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гид-робионтов // Тез. докл. симп. поев. 90-летию со дня рождения проф. Н.А.Гербильского. - Л., 1990. С. 7-8. (соавт.: Андреев В,В.).

30. Морфофункциональные аспекты адаптации организма рыб к современным экологическим условиям Волго-Каспийского бассейна // Тез. докл. симп. поев. 90-летию со дня рождения проф. Н.Л.Гербильского. - Л., 1990. - С. 114-116 (соавт.: Журавлева Г.Ф , Федорова H.H., Парицкий Ю.А.).

31. Морфофункциональные изменения во внутренних органах и тканях Каспийского тюленя в зависимости от уровня накопления тяжелых металлов // Сб. тез. докл. X Всес. совещания по изучению и охране и рациональному использованию морских млекопитаю-

щих. - M., 1990. _ с. 321-322. (соавт.: Хураськин Л.С., Журавлева Г.Ф., Федорова H.H., Валедская О.М., Андреев В.В., Крючков В.Н.).

32. Патологические изменения тканей промысловых видов рыб как последствия загрязнения волжской воды // Краткие результаты научной деятельности института. - Астрахань, 1990. - С. 228-229. (соавт.: Рылина О.Н., Бедрицкая И.Н., Федорова H.H.).

33. Межвидовая устойчивость к антропогенным химическим факторам среды на основе патогистологического анализа внутренних органов рыб // Вторая Всес. конф. по рыбох. токсикол. Тез. докл. Т. 1. АН СССР. С.-Петербург, 1991.-С. 212-213.

34. Изменения клеточного фактора иммунитета в зависимости от морфофункциональных нарушений в печени и почках под влиянием промышленных сточных вод // Сб. научных трудов «Вопросы экологии гидробионтов», ВНИПРХ. - М., 1991, Вып. 64. - С. 124126. (соавт.: Крючков В.Н., Акберова Т.В.).

35. Морфофункциональные изменения в органах и тканях рыб в процессе онтогенеза при кумуляции токсикантов // Материалы Всероссийской конф. Мин. здравоохранения РСФСР, Астрахань, -1991.-С. 153-155.

36. Характер и степень патоморфологических изменений в организме леща и густеры при современных экологических условиях в дельте р.Волги // Сб. II Всес. конф. по рыбохоз. токсикологии. - СПб., 1991, с. 212-213. (соавт.: Бедрицкая И.Н., Рылина О.Н., Федорова H.H.).

37. Морфофункциональные аспекты адаптации жабр телятий к изменениям солености озер Бенина // Сб. Тр. II Всес. конф. по рыбохоз. токсикологии. - Спб., 1991. - с. 13-15. (соавт.: Зайцев В.Ф., д'Альмейда, Федорова H.H.).

38. Комплексные исследования патологии каспийского тюленя // Биол. ресурсы Каспийского моря. Сб. тез. докл. I Международной конф. - Астрахань, 1992. - С. 451-459. (соавт.: Хураскин J1.C., Коганов В.М., Курочкин Ю.В., Крючков В.Н., Федорова H.H.).

39. Характер и степень патологических изменений в крови и внутренних органах судака. // Материалы VIII конференции по экологической физиологии и биохимии рыб. - Петрозаводск, 1992. - С. 4041.

40. Эколого-токсикологические факторы, влияющие на состояние популяции осетровых Волго-Каспия. // Материалы Всерос. научн. конф. «Экосистемы морей России в условиях антропгенного пресса (включая промысел) - Астрахань, сентябрь, 1994. - С. 88-89.

(соавт.: Журавлева Г.Ф.).

41. Патологические изменения внутренних органов тюленя на фоне накопления хлорорганических соединений // Вестник Астр. гос. техн. университета. - М., ТОО ВНИРО, 1994, вып. 2, С. 52-55. (соавт.: Крючков В.Н., Антонова JI.A., Федорова H.H.).

42. Патоморфологические изменения в организме промысловых видов интиохфауны как представителей конечного звена гидробиоценоза // Материалы совещания «Многолетние гидробиологические наблюдения во внутренних водах: Современная ситуация и перспективы» // С.-Петербург, - 1994., С. 72-73.

43. Изменение гематологических показателей молоди русского осетра в зависимости от двигательной активности // Тез. докл. Междун. конф. «Каспий - настоящее и будущее» - Астрахань, 1995. - С. 168-169. (соавт.: Филина C.B.).

44. Морфологическая характеристика двигательных центров нервной системы на ранних стадиях онтогенеза русского осетра в норме и патологии // Тез. докл. Междунар. конф. «Каспий - настоящее и будущее» - Астрахань, 1995. - С. 169-170. (соавт.: Ложниченко О.В.)

45. Гонадогенез у осетровых в зависимости от степени функциональных нарушений щитовидной железы и печени при современных эколого-токсикологических воздействиях // Тез. докл. IV Всерос. конф. «Нейроэндокринология» - 95, С.-Петербург, 1995, С. 48-49 (соавт.: Журавлева Г.Ф., Мухамбеталиева А.Ж.).

46. Dynamcs of metabolic and histofiinctional disturbances in the organism of the Caspian sturgeon under conditions of antropogenic doad // 3td International symposium on sturgeon. - Piacenza. - Italy. - 1997. - P. 147-148. (with Zhuravleva G.F., Fyadorova N.N.).

47. Критерии товарного качества и состояние запасов осетровых Вол-го-Каспиймского бассейна в современных условиях загрязнения природных вод // Проблемы развития рыбного хозяйства на внутренних водоемах в условиях перехода к рыночным отношениям: Мат. научн-практ. конф.. Минск, 15-16 окт. 1998. - С. 403-407. (соавт.: Журавлева Г.Ф.).

48. Общие и частные вопросы экологии в проблеме товарного осетроводства // тез. докл. Первой научно-практической конф. «Проблемы современного товарного осетроводства». - Астрахань. - 1999. -С. 112-114.

49. Патоморфокинез нарушений в организме осетровых Волго-Каспия // Тез докл. V Всеросс. конф. «Нейроэндокринология-2000». - С.Петербург. - 2000. - С. 53-54. (соавт.: Журавлева Г.Ф.).

1г. 7 9 63)

Ьгооо_

Тираж 100 экз. Подписано в печать 22.06.2000 г. Заказ № 361

Издательство АГМА, 414000. г.Астрахань, ул. Бакинская 121

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Земков, Герман Вениаминович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ПРОБЛЕМА КОЛИЧЕСТВЕННОЙ И КАЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ ВЛИЯНИЯ ОСНОВНЫХ АНТРОПОГЕННЫХ ФАКТОРОВ НА РЫБ.

1.1. Современное состояние запасов осетровых Волго-Каспийского бассейна.:.

1.2. Основные факторы антропогенной деятельности и последствия их влияния на ихтиофауну.

1.3. Морфологические аспекты повреждающего действия токсикантов на рыб.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Химические, биохимические, гистологические и гистохимические методы анализа в натурных наблюдениях.

2.2. Методы экспериментальных исследований.

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ УГНЕТЕНИЯ ДВИГАТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ РЫБ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ КАРБАМАТ-НЫХ ГЕРБИЦИДОВ ЯЛАНА И «САТУРНА».

3.1. Изменение физиолого-биохимических показателей в организме карпа в условиях подострой интоксикации яланом.

3.2. Бифазный характер количественной динамики гематологических показателей по мере усиления тяжести деструкции в двигательных центрах нервной системы молоди белуги под влиянием гербицида ялана.

3.3 Изучение вероятности репарации патологических нарушений в. ЦНС после прекращения действия гербицида «сатурна» на карпов.

ГЛАВА 4. СТЕПЕНЬ И ФОРМЫ ПРОЯВЛЕНИЯ МОРФОФУНКЦИО-НАЛЬНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ В ОРГАНИЗМЕ ОСЕТРОВЫХ ПРИ КУМУЛЯТИВНОМ ТОКСИКОЗЕ.

4.1. Морфофункциональные изменения в печени и в гонадах осетровых.

4.2. Биохимические показатели метаболизма в организме осетровых в зависимости от вида и пола.

4.3. Корреляция морфофункциональных показателей с количественной динамикой накопления стабильных экзотоксикантов во внутренних органах рыб.

4.4. Зависимость овариального цикла у самок севрюги от морфофункциональных нарушений и количественного содержания ХОП и металлов во внутренних органах.:.

ГЛАВА 5. ФЕНОМЕН РАССЛОЕНИЯ СКЕЛЕТНОЙ ДОРЗАЛЬНОЙ МЫШЦЫ ОСЕТРОВЫХ НА ФОНЕ ПАТОГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ В ПЕЧЕНИ.

5.1. Количественная динамика активных метаболитов на фоне структурных нарушений во внутренних органах рыб при дистрофии скелетной дорзальной мышцы.

5.2. Экстенсивные показатели динамики патоморфологических нарушений в печени осетровых в различные периоды исследований.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональные критерии толерантности рыб при кумулятивном токсикозе"

Актуальность. Проблема загрязнения природных поверхностных вод химическими веществами приобрела наиболее острый характер примерно в 50-ые годы прошлого столетия, что в первую очередь былс5 связано с ростом промышленного производства, повлекшего за собой резкое увеличение объема сточных вод и их компонентов, включая ксенобиотики, поступающих в открытые водоемы. В странах с высоким уровнем развития производства это вскоре привело к потере рыбохозяйственного и санитарно-гигиенического значения многих рек, озер, а затем масштабы загрязнения распространились и на мировой океан.

В нормировании качественного состава и объема сброса промышленных и других сточных вод в естественные водоемы количественной мерой является предельно-допустимая концентрация (ПДК) вредного вещества, имеющая юридическое значение в системе защиты природных вод от загрязнения.

В действительности ПДК отражает реакцию тест-организма на воздействие одного конкретного вещества и поэтому не может служить для оценки сложнейших взаимосвязей биотических и абиотических факторов, которые играют определяющую роль в формировании качества природных водоемов и в процессах самоочищения их от загрязнения (Федоров, 1980). На этом основании некоторые исследователи считают необходимым поиск альтернативных критериев и подходов (Степанов, 1989). Но в области санитарной и общей гидробиологии такие критерии существуют с прошлого века (Зернов, 1934; Долгов с со-авт., 1927), которые в настоящее время представляют собой систему сапробно-сти и ее различные модификации (Жукинский с соавт., 1927).

Также разработаны оригинальные методы математического моделирования экосистем (Федоров В. Д. с соавт., 1980), методы биотестирования природных и сточных вод (Патин, 1981), система экологической модуляции, прогресса и регресса, происходящих на уровне биоценоза (Абакумов, 1991). Общим для всех систем биологической оценки степени загрязнения и водоемов является определение видового разнообразия и численного состава планктонных и бен-тосных организмов, что и служит критерием уровня загрязнения и процессов самоочищения водоемов. При отмирании планктонные организмы удаляют из фотического слоя значительную часть загрязняющих веществ, которые в процессе биоседиментации депонируются в донных осадках. Скорость самоочищения существенно зависит от географического расположения водоемов и сезонных колебаний численности планктонных организмов. Например, в зимний период зона действия сульфат-целлюлоизных сточных вод больше, чем осенью (Hassel-brot, 1964). Качество природных вод обычно рассматриваются в отрыве от рыб, хотя видовая структура ихтиофауны, безусловно, зависит и от прямого влияния загрязнения и опосредованно связана с гидробиологическими процессами.

В условиях загрязнения наблюдали существенное изменение видового состава ихтиофауны и снижение продуктивности ценных видов рыб (Федий, 1964; 1984) . Автор пришел к выводу о необходимости регистрации видового разнообразия ихтиофауны с применением гистологических и физиолого-биохимических методов анализа. Данный вывод очень важен и не потерял своей актуальности в настоящее время, т.к. утрата рыбохозяйственного значения проявляется прежде всего в виде увеличения численности малоценных и снижения запасов ценных видов рыб. Аналогичный подход в оценке последствий загрязнения предложен и другими специалистами за рубежом (Bechtel Т, 1970) . В этой связи следует учитывать предложенную A.M. Бейм с соавт. (1984) классификацию видов-индикаторов и видов-мониторов. В перспективе исследований необходимы критерии, соответствующие всем уровням организации от молекулярного до популяционного, что согласуется с концепцией, выдвинутой Н.С.Строгановым (1978), сущность которой заключается в сохранении вида, что прямо связано с функциональными нарушениями на уровне тканей и клетки в организме гидробионтов, имеющих хозяйственное значение. Придерживаясь данной концепции, основным объектом изучения является репродуктивная система в организме рыб как показателя благополучного состояния популяции. Кроме этого, необходимы средства ранней диагностики токсикоза в организме тех органов, которые играют первостепенную роль в детоксикации организма. Именно эта функция, как известно, принадлежит печени, в которой синтезируются белки, неоходимые для созревания гонад. В опубликованных материалах известны данные о гепатозависимости мейоза у рыб, в частности, образование в печени вителлогенина, необходимого в процессе созревания ооцитов (Шату-новский,1967; Кривобок с соавт., 1970; Айзенштадт, 1979). Впервые в экспериментальных водоемах (пруды) у карпа с патологическими структурными изменениями в печени были зарегистрированы случаи резорбции ооцитов под влиянием гербицидов (Попова, 1973). В естественных условиях предрезорбцинные признаки в ооцитах зарегистрированы у осетровых в р. Волге (Алтуфьев с соат., 1984) в связи с вводом в эксплуатацию Нижневолжского вододелителя. По данным Н.В. Акимовой (1991) у сибирского осетра отмечена массовая деструкция половых клеток, а у волжских осетровых предрезорбтивные признаки ооцитов. Опубликованные данные свидетельствуют о широком географическом распространении микроструктурных нарушений в половых клетках рыб, а у осетровых Волго-Каспия эти нарушения сопровождаются нарушениями в печени, в скелетной мускулатуре и в жабрах (Дубовская с соавт., 1987; Романов, 1990; Алтуфьев, 1990) . Проведенные в том же направлении систематические исследования в Обь-Иртышском бассейне, позволили установить нарастающие изменения в гонадах сиговых, карповых и окуневых рыб в виде цитолиза и атрезии пре-, и вителлогенных ооцитов, резорбции клонов сперматоцитов, микроструктурные нарушения спермиев на фоне деструкции гепатоцитов (Селюков, 1997). В зарубежной литературе материалы также посвящаются вопросам микроструктурных нарушений и нообразований в печени и гонадах (Mallins et. al.,1984; Mallins et al., 1984; Baumann, 1984; Krahn et. al.,1984; Podowcki et.al., 1991; Gronlund et al., 1991).

В экспериментальной токсикологии рыб под влиянием пестицидов описаны структурные нарушения в паренхиматозных органах, в жабрах, в спинном и в головном мозге (Краснов, 1970; Мазманиди, 1973; Кокуричева, 1974; Лизина с соавт., 1975; Щербаков с соавт., 1975; Бурковский, 1977; Бур-ковский с соавт., 1977). Под влиянием гербицидов из группы эфиров феноксиуксусной кислоты в головном и в спинном мозге карпов были зарегистрированы и описаны структурные изменения (Щербаков 1983), а также изменения в сосудистой системе, что по оценке автора свидетельствует об истощении функции нейронов с последующей гибелью рыб. Во всех перечисленных работах структурные нарушения представлены без дифференциации ЦНС на отделы и описания внешних симптомов токсикоза. Между тем внешние проявления двигательных актов изучены в достаточной степени в области физиологии всех отделов ЦНС рыб (Кара-мян, 1970). Которые безусловно, не всегда могут быть связаны с нарушениями в ЦНС, но при этом нарушения микроструктуры различных отделов нервной системы отвечают на вопросы о вероятности физиологической регенерации. С другой стороны данные биохимического анализа, как правило, не подкрепляются анализом микроструктурных нарушений в органах и тканях рыб (Лукья-ненко, 1975; Косинова, 1978; Мапяревская, 1979). Морфо-функциональным аспектам посвящена незначительная часть исследований на субклеточном (Сидоров, 1983) и на клеточном уровне (Попова, 1973) .

Таким образом, нарушения целостности структуры печени и других органов рыб в естественных условиях часто изучаются вне зависимости от материальной кумуляции токсикантов и функциональной характеристики. Недостаток сведений по этим вопросам существенно затрудняет прогноз дальнейшей судьбы особей с патологическими нарушениями во внутренних органах, что прямо связано с формированием численности рыб.

Мало изучены вопросы о суммационном воздействии на организм экзо-, и эндотоксикантов при нарушении метаболических процессов в организме. В па-томорфологии рыб пока отсутствует классификация структурных нарушений, в свете новых достижений в теории общей патологии (Саркисов, 1997) . Отсутствие морфофункциональных оценок токсикоза на современном этапе затрудняет выявление приспособительных компенсаторных признаков и регенерации в организме рыб. Исходя из всего сказанного выше, в настоящей работе были поставлены следующие цели и задачи исследований.

Цель исследований. В экспериментальных условиях установить критерии толерантности рыб при токсикозе с помощью морфофункциональных методов анализа важнейших систем организма и внешних симптомов интоксикации на примере карпа и молоди белуги; в натурных наблюдениях выявить закономерности патологических морфофункциональных нарушений и определить критерии кумулятивного токсикоза в организме каспийских осетровых.

Задачи исследований:

-В направлении унификации и совершенствования принципов диагностики экзотоксикозов у рыб выявить характер кинетики показателей дыхательной функции крови в связи с патоморфологическими нарушениями в двигательных центрах нервной системы в процессе интоксикации. Классифицировать пато-морфологические нарушения в отделах ЦНС в связи с физиологической и репарационной регенерацией у рыб после прекращения интоксикации.

-На основе выборочных и типологических наблюдений установить пределы колебания экстенсивно-структурного показателя числа случаев патоморфо-логических нарушений во внутренних органах осетровых в различные годы исследований. Выявить характер и силу связи патоморфофункциональных показателей от уровня накопления ХОП и металлов во внутренних органах рыб.

-Систематизировать патоморфофункциональные критерии нарушения де-токсикационной функции печени и определить их значение в развитии половых желез осетровых, включая овуляцию. Сопоставить характер кинетики активности оксидоредуктаз с тяжестью патоморфологических нарушений во внутренних органах осетровых.

-Теоретически обосновать данные кинетики патоморфологических изменений во внутренних органах как показателя толерантности и модификацион-ной изменчивости в популяции каспийских осетровых при современных экологических условиях Волго-Каспия.

Научная новизна. Впервые доказана необратимость и разработана классификация патоморфологических нарушений всех отделов ЦНС у рыб, адекватно возникающих в процессе угнетения двигательно-пищевых реакций под влиянием тиокарбаматных соединений. Нарушение стереотипа поведения рыб также вызвано накоплением в скелетной мышце гидроперекисей и экстрактивных веществ, аммиака, мочевины, что может служить критерием развития ауто-токсикоза.

Общеизвестное депонирование гидрофобных ХОП в жире и в тканях, богатых жиром у рыб, дополнено новыми фактами зависимости уровня кумуляции ДДТ с количеством отдельных липидов. По сравнению с самцами корреляция токсикантов с активными метаболитами чаще наблюдалась в органах самок, в организме которых, как известно, уровень энергетического и пластического обмена выше, чем у самцов.

Доказана функциональная связь гаметогенеза у осетровых с детоксикаци-онной ролью печени, сущность которой заключается в синтезе белков, вступающих во взаимодействие с токсикантами, что оценивается по количественному уровню ДНП и РНП.

Также установлена зависимость морфофункционального состояния дор-зальной мышцы от детоксикационной способности печени. В природных условиях на примере осетровых впервые дана характеристика анаэробиоза в организме с помощью гистоэнзимохимических методов анализа.

Впервые получены результаты сопоставительного анализа, отражающие несоответствие развития во времени деструктивных и функциональных изменений. Гетерохрония также отмечена при изучении связи гистопатологических нарушений с уровнем накопления токсикантов.

Практическое значение работы прежде всего выражается в рекомендации более широкого применения патоморфологических методов анализа внутренних органов рыб, состояние которых отражает экологическую обстановку в природных водоемах, и значительно расширяет возможности биотестирования качества воды.

В ихтиологии дополнительным критерием состояния популяции рыб рекомендуется применение сопоставительного анализа патоморфологических, реге-нерационных и метаболических показателей в печени,сопряженных с развитием гамет, что в итоге дает более полное представление о качестве репродуктивной системы при кумулятивном токсикозе.

Не оставляет сомнений применение методов патогистологии в рыбоводстве, технологические процессы которого прямо связаны с качеством природных вод, а также при экспертизе с целью определения возможности интродукции новых видов рыб в конкретных водоемах .

Исследования проводились в соответствии с комплексными программами КаспНИРХ и АГТУ по следующим темам:

Изучение влияния пестицидов на экосистемы морей, водохранилищ и прудовых хозяйств» - № гос. регистрации 78030894.

Содержание и влияние на биопродуктивность нефтепродуктов солей тяжелых металлов, пестицидов в Каспийском море и дельте р. Волги, возможная динамика их в перспективе. Процессы самоочищения в дельте реки Волги. Meроприятия по снижению загрязненности водоемов (без переброски стока северных рек) - № гос. регистрации 0182.8043271.

Оценка влияния газоконденсатного комплекса на экосистемы рыбохозяй-ственных водоемов» № гос. регистрации 0188.0034762.

На защиту выдвигаются следующие положения:

1. Баланс тяжелых металлов и ХОП в отдельных органах осетровых в значительной степени зависит от функциональной активности всех систем организма, что подтверждается результатами корреляционного анализа. В исследованиях по изучению динамики уровня кумуляции ксенобиотиков и металлов в рыбе, рекомендуется правило функционального распределения экзотоксикан-тов, которое предусматривает анализ на их содержание всех органов, включая скелет и кровь. Выявленная корреляция накопления ХОП и тяжелых металлов с количеством фосфолипидов, холестерина и эфиров холестерина позволяет осуществлять целенаправленный анализ эндокринной системы и резистентности биомембран при кумулятивном токсикозе.

2. Деструктивные изменения в печени осетровых усугубляются снижением уровня РНП и ДНП, что является критерием кумулятивного токсикоза и предпосылкой дальнейшего изучения синтеза белков на уровне генома в ходе транскрипции и трансляции генетической информации. Значительную роль в регенерации выполняют макрофаги и лимфоциты, повышение активности которых в тканях, наряду с увеличением синтеза белков в печени, отражает сущность регрессии.

3. На фоне регрессивных процессов в печени осетровых в мышце и гонадах наблюдается снижение уровня активности энзимов аэробного дыхания. Инверсия окислительно-восстановительных реакций в печени также приводит к дефекту ее детоксикационной функции. Снижение аэробного дыхания в мышце и гонадах следует признать одним из показателей гипоксии в организме и рассматривается в качестве одного из важнейших критериев отдаленныыых последствий кумулятивного токсикоза.

4. На основе альтернативного анализа в популяции осетровых выявлено две группы рыб, различающихся по степени толерантности при кумулятивном токсикозе. Первая группа особей, численность ккоторых возрастает в последние 10 лет, сфформировалась в результате адаптивной модификации, возможно, в пределах новой нормы и под влиянием естественного отбора сохраняется в настоящее время как наиболее совершенная и устойчивая к негативному влиянию внешних факторов.

Во второй группе рыб патоморфологические и функциональные нарушения создают определенный риск в поддержании общего гомеостаза и репродуктивной системы организма.

Апробация работы. Материалы доложены и обсуждены на: Научно-практической конференции (Волгоград, 1977), IV Всесоюзной конференции по экологической физиологии и биохимии рыб (Астрахань, 1979), IV Всесоюзной конференции по раннему онтогенезу рыб (Мурманск, 1988), Всесоюзном совещании «Поведение рыб» (Москва, 1989), Всесоюзном совещании «Осетровое хозяйство водоемов СССР» (Астрахань, 1989), Региональной конференции «Экологические проблемы Волги» (Саратов, 1989), Симпозиуме, посвященному 90-летию со дня рождения проф. H.JI. Гербильского (Ленинград, 1990), Второй Всесоюзной конференции по рыбохозяйственной токсикологии (С.Петербург, 1991), Всероссийской конференции «Экосистемы морей России в условиях антропогенного пресса» (Астрахань, 1994), Совещании .«Многолетние гидробиологические наблюдения во внутренних водах: современная ситуация и перспективы» (С.-Петербург 1994), IV Всероссийской конференции «Нейроэн-докринология-95» (С.-Петербург, 1995), Международной конференции «Каспий - настоящее и будущее» (Астрахань, 1995), Первом Конгрессе ихтиологов России (Астрахань, 1997), 3-rd International symposium on sturgeon. (Piacenza. - Italy, 1997), Российской научной конференции «Эколого-биологические проблемы Волжского региона и Северного Прикаспия» (Астрахань, 1998), V Всероссийская конференция «Нейроэндокринология 2000» (С.-Петербург, 2000); 4th International sumposium of sturgeon, Oshkosh, Wisconsin, USA, 2001; Общероссийская конференция «Проблемы морфологии» Сочи, 2002.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 56 научных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 199 страницах текста, содержит введение, 5 глав, включающие 14 подглав, заключение, выводы, практические рекомендации, 56 рисунков, 20 таблиц и указатель литературы (327 источников, из них 89 работ иностранных авторов).

Заключение Диссертация по теме "Экология", Земков, Герман Вениаминович

ВЫВОДЫ

1. Внешние признаки токсикоза у рыб под влиянием ялана проявляются в угнетении двигательной и пищевой активности в результате накопления в скелетной мышце аммиака, мочевины, .что происходит в результате снижения количества глутаминовой кислоты и орнитина, а также изолетина + лецитина, ва-лина, отвечающих за энергетические ресурсы в организме. Вместе с тем, накопление гидроперекисей в мышце спины в суммации с другими факторами приводит в итоге к утрате плавательной способности карпов. При всей тяжести внешних симптомов интоксикаци в мышце рыб происходят реакции, направленные на обеззараживание гербицида ялана в виде увеличения цистеиновой кислоты и серина, участвующих в обмене серусодержа-щих соединений, к которым можно отнести и тиокарбаматные пестициды.

2. Биохимические показатели крови отчетливо отражают компенсаторно-защитную реакцию организма в момент угнетения двигательной активности. Сущность этой-реакции-заключается в' повышении роли липидов и сульфогид-рильных групп белковых соединений на фоне снижения уровня глюкозы, значение которой в углеводном обмене отодвигается на второе место,'.что в .итоге обеспечивает сопротивляемость организма за счет увеличения роли липидов.

- 3. Экспериментальные исследования по изучению патоморфогенеза отделов ЦНС у молоди белуги вскрыли цитогистологические нарушения, адекватно отражающие утрату двигательно-пищевой реакции рыб в условиях сублетального и хронического действия ялана. (Наиболее демонстративные патологические нарушения зарегистрированы в мотонейронах спинного и двигательных j ядрах продолговатого и среднего мозга, начиная от дистрофических изменений л- • • ^ до деструктивных явлений в нейронах.

J 4. Наблюдения, проведенные в естественных условиях на при мере осетровых, подтвердили гипотезу об индуцирующей роли печени в гаме-тогенезе при кумулятивном токсикозе. Длительные и наиболее выраженные па | томорфологические изменения в печени индуцировали усиление аномалий в Уполовых клетках и в скелетной мышце осетровых, в период 1987-1989 г.г. Про-■ грессирующий характер структурных нарушений происходил на фоне снижения уровня тяжелых металлов и ХОП в печени, мышце и в гонадах, что свидетельствует о гетерохронии морфогенеза и количественного содержания токсикантов. Несмотря на широкое варьирование характера и силы корреляции морфофункциональных показателей с уровнем ХОП и металлов, выявлены половые различия.

• пиллярных сосудов в виде инфильтрации форменными элементами крови, за. стойных явлений внутри сосудов усиливались в соответствии с изменениями в паренхиме печени. 5

6. В период с 1990 по 1995 годы резко снизилось количество случаев с тяжелыми нарушениями в печени (некроз и некробиоз) с преобладанием дистрофии и признаков репарационной регенерации, что. позитивно отразилось на структуре скелетных мышц и половых клеток. На данном этапе исследований в печени происходит снижение активности ферментов аэробного дыхания и увеличение активности анаэробного гликолиза по сравнению с группой особей без патологических нарушений (условная норма). Кроме того,,по отношению к другим тканям и органам печень в процессе регенерации оказывает модулирующий эффект, на другие органы.

7. Доказано, что патоморфогенез в печени при кумулятивном токсикозе существенно отражается на репродуктивной системе осетровых. Увеличение аномальных половых клеток, безусловно, снижает воспроизводительную способность осетровых, а предрезорбтивные явления следует рассматривать как предпосылку стерильности гонад в перспективе.

С 8. Установлен широкий предел колебаний индивидуальной толерантности современных осетровых при кумулятивном токсикозе. Группа особей без патологических нарушении в печени сформировалась в процессе адаптационной модификации. Есть основания полагать, что модификационные явления будут закрепляться в популяции под влиянием естественного отбора при условии снижения или, по крайней мере, стабилизации уровня загрязнения водоемов Волго-Каспийского бассейна.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты собственных исследований и материалы, опубликованные в современной литературе, указывают на необходимость широкого применения методов патоморфологического анализа внутренних органов рыб с целью выявления более конкретных форм кумулятивного токсикоза. В связи с этим характер и степень тяжести патоморфогенеза признаки репарации, изменения метаболизма в печени осетровых представляют собой комплексный морфофунк-циональный критерий ее детоксикационнои функции при кумулятивном токсикозе у рыб. В зависимости от цели исследований патоморфологический анализ используют в комплексе с биохимическими и традиционными ихтиологическими методами.

2. В изучении динамики кумуляции чужеродных соединений и металлов необходимо учитывать правило функционального распределения (баланса) их в организме. Практическое применение данного правила заключается в анализе токсикантов во всех покровных тканях и во внутренних органах, что особенно важно для объективной оценки динамики их в длительных наблюдениях и позволяет оценить истинный уровень их накопления.

3. Исходя из общей оценки напряженного морфофункционального состояния организма Каспийских осетровых, рекомендуются следующие мероприятия по предотвращению и снижению уровня загрязнения:

- для существенного снижения уровня поллютантов в природных водоемах Волго-Каспийского бассейна необходимо постоянное совершенствование методов очистки сточных вод, а также внедрение превентивной технологии особенно в производстве чужеродных соединений. При проектировании новых промышленных объектов исключить возможность миграции чужеродных соединений в природные водотоки.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Земков, Герман Вениаминович, Астрахань

1. Абакумов В.А. Экологические модификации и развитие биоценозов // Труды Международного симпозиума. - СССР, - Нальчик, 1-12 июня 1990r.-J1. «Гидрометеоиздат.-1991.-С.18-37

2. Айзенштадт Т.Б. Цитология оогенеза // -М. «Наука».-247 с.

3. Акимова Н.В. Репродукция осетровых в водоемах с изменившимися экологическими условиями // Тез. докл. Всесоюз. совещания. Минск 15-17 октября 1991г. Минск.-1991.-С.8-9.

4. Алекперов Н.П. Гистофизиологические исследования печени куринского осетра разного периода хода в реке // Материалы научной сессии ЦНИ-ОРХ. Баку. Азерб. гос. из-во. 1968.-С.

5. Алесенко А.В. Роль липидов и продуктов перекисного окисления в биосинтезе и функциональной активности ДНК // Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. М.»Наука». -1981.-С.З-16.

6. Алтуфьев Ю.В., Шевелева Н.Н. Сравнительная характеристика нейрогипофиза севрюги и осетра в преднерестовый и нерестовый периоды // Репродуктивная физиология, рыб. Тез. докл. Всесоюз. совещ. -Минск, 15-17 октября 1991. Минск.-1991.-С.9-12.

7. Алтуфьев Ю.В. Адаптационные процессы в воспроизводстве каспийских осетровых // Диссертация в виде научного доклада насоискание уч. ст. д.б.н. С.-Петербург. - Пушкин. - 1999. - 74 с.

8. Алтуфьев Ю.В. Печень каспийских осетровых в условиях антропогенного загрязнения среды // Тез. докл. Симпоз.- «Экологические и морфофунк-циональные основы адаптации гидробионтов». Jl.-1990.-C.3-5

9. Алтуфьев Ю.В., Шевелева Н.Н., Романов А.А. К вопросу о гистопатологии мышечной ткани некоторых рыб Каспийского бассейна // Тез. докл. Симпоз., «Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов».-Л.-1990.-С.5-7.

10. Алтухов Ю.П., Салменкова Е.А. Трансплантации, системная организация и рациональное использование популяций рыб // Популяционная генетика и управление рыбным хозяйством. Москва, ВО «Агропромиздат». -1991.-С.15-36.

11. Андреев В.В. Минеральный обмен у русского осетра в период нерестовой миграции и ската в море после нереста // Тез. докл. Всесоюзн. конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. Вильнюс. 1985. С. 5-6.

12. Андроникова И.Н. Количественная оценка участия зоопланктона в процессах самоочищения (на примере оз. Красного) // Гидробиологические основы самоочищения вод. JI. - 1976. С. 30-35.

13. Анохин П.К . Узловые вопросы теории функциональной системы. -Наука. М-1980,- 195с.

14. Аршаница Н.М., Перевозников М.А. Ихтиотоксикологический мониторинг водоемов //Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России, (сентябрь, Астрахань, 1997). -М., ВНИРО. 1997. С.140.

15. Астахова Т.В., Зубкова JI.A., и др. Болезни основных промысловых видов рыб и раков Каспия //Фонды КаспНИРХ, Астрахань, 1971. - 89 с.

16. Ашмарин И.П. Молекулярная биология // Д.- «Ленинградский университет».-1977.-366 с.

17. Баранникова И.А. О миграционном импульсе у осетровых // Вопросы ихтиологии Т.4. -Вып.4(38).-1964.- С.1123-1127.

18. Баранникова И.А. Функциональные основы миграции осетровых. // Осетровые и проблемы осетрового хозяйства. М.,- «Пищевая промышленность»-1972.-С. 180-204.

19. Барышков Ю.А., Вельтищев Ю.Е., Фомина З.Н. Кремлева И.Н., Мамонова Л.Г. Определение общих липидов в сыворотке с помощью сульфофосфова-нилиновой реакции // Лабораторное дело. М.,- 1966. №6. С. 10-12.

20. Бафингтон Д., Миласк Л., Грейве, Фулетон С. Использование данных мониторинга качества речных вод для анализа тяжелых металлов в морскую среду // Труды Междун. симпоз. СССР, Рига 12-15 декабря, 1978г. Л. «Гидрометеоиздат» -1980.-С.53-58.

21. Бейм A.M., Красовский Г.И., Сутокская И.В., Васюкович Л.Я. Экологогигиенический подход к биоиндикации качества воды // Самоочищение воды и миграция загрязнений по трофической цепи. М., 1984. Наука. С. 16-21.

22. Беляева Е.С. К вопросу о типичности развития предличинок осетровых // Кр. тез. докл. к Всес. совещ. «Осетровое хозяйство водоемов СССР» -Астрахань-1984.- С. 101-102.

23. Бесчетнова Э.И. Минерализация воды в дельте Волги и ее изменение в результате антропогенного воздействия // Краткие тез. докл. « Обл. научи, конф. октябрь 1981 года». Астрахань. - 1981. -С.53-55

24. Бесчетнова Э.И., Деревягина Н.Г., Земков Г.В., Красавкина В.Н. Сравнительная токсикорезистентность гидробионтов при пестицидном отравлении //В кн.: Экспериментальные исследования влияния загрязнителей на водные организмы. Апатиты, 1979. -с. 19-23.

25. Биргер Т.Н. Метаболизм водных беспозвоночных в токсической среде -Киев «Наукова думка» - 1979. - 189с.

26. Богдан В.В. Влияние токсикантов на липидный состав молоди осетра // Тез. докл. 1 Конгресса ихтиологов России (Астрахань, сентябрь 1997 г.) -Москва -, ВНИРО -1997.- С.248.

27. Борисюк А.Б. Динамика накопления органами и тканями рыб некоторых микро, и макроэлементов в зависимости от экспозиции и их концентрации в воде // Тез. докл. Всес. конф. По экологической физиологии и биохимии рыб. Вильнюс.-1985.-С.31-35.

28. Брагинский JI. П. Пестициды новый токсический фактор водной среды // Гидробилог. ж. Т.4 -№1 -1968.- С.78-82.

29. Брагинский Л.П., Комаровский Ф.Я., Мережко А.И. Персистентные пестициды в экологии пресных вод // Киев.- Наукова думка -1979.- 143 с.

30. Бреховских В.Ф., Катунин Д.Н., Островская Е.А., Перекольский В.М., Попова О.В. Процессы переноса и накопления тяжелых металлов на Нижней Волге // Водные ресурсы.-1999 -I,-26,-N4.-c.451-461.

31. Бульон В.В. Роль фитопланктона в процессе самоочищения в водотоках // Гидробиологические основы самоочищения вод. Л.-1976.-е. 15-25.

32. Бурлакова Е.Б. Роль липидов в процессе передачи информации в клетке // Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. М. «Наука», - 1981. -С.З-16.

33. Бурлакова Е.Б., Дзюба Н.М., Пальмина Н.П. Синтетические ингибиторы и природные антиоксиданты. Сообщение I. Действие ингибиторов свобод-норадикальных реакций на окислительную активность липидов печени мышей // Биофизика. 1965. 10. -Вып. 5. - с.

34. Васильева Л.М., Попова О.В., Хорошко В.И. Состояние загрязнения водной среды, донных отложений и гидробионтов в Волго-Каспийском районе // Биологические ресурсы Каспийского моря и пути рационального их использования. Астрахань.-1993.- С.43-46.

35. Винберг Г.Г., Сивков Г.Н. Фитопланктон как агент самоочищения загрязненных вод//Тр. Всес. гидробиол. общества. М., -1956.- Т.7. С. 155-158.

36. Витвицкая Л.В., Никоноров С.И. Содержание нуклеиновых кислот в мышцах русского осетра, пораженного миопатией // Кр. тез. научн. докл. чЛ-Астрахань.-1989 -с.51-52.

37. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.- 1972. - «Наука» -182с.

38. Власенко А.Д. Оценка запасов промысловых рыб в Каспийском бассейне // Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России (Астрахань, сентябрь 1997). «ВНИРО» -1997.- С.411.

39. Воробьев В. И. Динамика микроэлементов в органах и тканях некоторых промысловых рыб дельты р. Волги // Гидробиол. ж. 1972. 8, № 4. С. 55-59.

40. Воробьев В.И. Микроэлементы и их применение в рыбоводстве // М.-«Пищевая промышленность».-1979.-182с.

41. Воробьева Э.И., Медведева И.М. К вопросу об эволюции онтогенеза и роли изменчивости. //Сб. Внутривидовая изменчивость в онтогенезе животных. -Наука-.М.-1980,-С.5-19.

42. Воробьева Э.И., Сытина JI.A., Рубцов В.В. Некоторые аспекты эколого-морфологического анализа раннего онтогенеза рыб // Эколого-морфологические исследования раннего онтогенеза позвоночных. -М, «Наука».-1984. С.40-61.

43. Врочинский К.К., Земков Г.В. Гигиенические исследования ялана в природных условиях // В сб. «Гигиена и санитария» М.-«Медицина».-1977. С.100-101.

44. Гапочка Л.Д., Ваттах М.,Дрожжина Т.С., Карауш Г.А., Шавырина О.Б., Белая Т.И. Популяционные аспекты адаптации гидробионтов к токсическим веществам // Вестник МГУ Серия 16, Биология N4, -1991.- С.34-41.

45. Гербильский Н.Л. Гистологический анализ переходов между ранними этапами онтогенеза у рыб // Тр. совещания эмбриологов. «Проблемы эмбриологии». Л., -1956-С.8-12.

46. Гербильский Н.Л. Эколого-гистофизиологическое направление в ихтиологических исследованиях // Биологические основы рыбного хозяйства. Изtво Томского университета. Томск,-1959.- С.83-87.

47. Головлева Л.А., Головлева Е.Л., Зякун A.M., Шурухин Ю.В., Фикель-штейн З.И. Метаболизм ордрама гербицида из группы тиокрбаматов микроорганизмами // Изв. АН СССР. Серия биологическая, I. -М.-1978.1. С.648-753.

48. Голубев А.А., Люблина Е.И., Толоконцев Н.А., Филов В.А. Количественная токсикология Л.-1973. «Медицина». -286 С.

49. Гольдин В.М. Изменение некоторых физиолого-биохимических показателей рыб Камского водохранилища в условиях загрязнения // Экологическая физиология рыб.- Киев. «Наукова думка». -1976.- С.78-79.

50. Горкин И.Н., Петухов С.А., Широкова Е.Н. Изучение накопления кадмия-109 компонентами морской модельной экосистемы // Физиология морских рыб. М.-1980. «Пищевая промышленность» С. 47-52.

51. Горышина Е.Н., Чага О.Ю. Сравнительная гистология тканей внутренней среды с основами иммунологии. Л., 1990. Изд-во Ленинградского университета. - 318 с.

52. Грищенко Л.И. Клинические и патоморфологические изменения при экспериментальном отравлениии карпов пестицидами // Экспериментальная водная токсикология. Рига. «Зинатне». -1972. -Вып. 3.- С.25-33

53. Грищенко Л.И. Патоморфологическе изменения при отравлении рыб пестицидами //Ветеринария,-1970.-N12.-С.62-64.

54. Данилов Р.К. Закономерные процессы патогенеза и регенерации тканей // Сб. тез. «Проблемы экологии в медицине».- Астрахань. -1996:- С.33-34.

55. Деннис В. Биохимия чужеродных соединений М. «Медицина» - 1973.286 с.

56. Дервиз Г.В., Воробьев А.И. Количественное определение гемоглобина крови посредством аппарата ФЭК-М // Лаб. дело.- №3.-1953.-С.8-10.

57. Деревягина Н.Г., Поленов А.Л. Функциональная морфология нейрогипофиза белуги при действии гербицида ялана // Тез. I Всес. конф. «Эндокринная система организма и токсичкские факторы внешней среды». J1. -1979.- С.53-54.

58. Долгов Г.И., Никитинский Я. Я. Стандартные методы исследования питьевых и сточных вод М. -1927.-252 с.

59. Дубинин Н.П. Мутагены среды и наследственность человека // Генетические последствия загрязнения окружающей среды. -М. «Наука». 1977.-С.3-20.

60. Дубовская А.В., Шевелева Н.Н., Романов А.А. Морфофункциональные изменения жаберного эпителия и половых желез у каспийских осетровых //Тез. докл. 1 кконгресс ихтиологов России. (Астрахань, сентябрь 1997). -М., ВНИРО- 1997.-С.416-417.

61. Евгеньва Т.П. Патология мышечной ткани осетровых рыб.-РАН.-М,-2000.-102 с.

62. Евтушенко Н.Ю. Весельский С.П. Роль неорганических соединений водной среды в регуляции метаболических процессов у рыб / Тез. докл. Всес. конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. Вильнюс.-1985.-С.73-74.

63. Евтушенко Н.Ю. Физиологическое значение отдельных микроэлементов в механизмах липидного обмена у рыб // Тез. докл. Всес. конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. Вильнюс.- 1983,- С.73-74.

64. Ежегодный экологический бюллетень // Под редакцией Г.А. Циха. 1991. -Астрахань.-57 с.

65. Елисеева Е.И., Воронина Э.А. Динамика физиолого-биохимических показателей печени ставриды в связи с годовым репродуктивным циклом // Тез. докл. Всес. конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. -Вильнюс.- 1985.-С.302-303

66. Еременко В.Я. Спектрографическое определение микроэлементов (тяжелых металлов) в природных водах. 2-е изд. JT. 1969. «Гидрометеоиздат».1. С. 14-70.

67. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология нейрона // JT.,-Медицина,- Ленингр. отд-ие,-1965.- 322 с.

68. Жукинский В.Н., Оксиюк Г.Н. Критерии комплексной оценки качества поверхностных пресных вод // Самоочищение и биоиндикация загрязненных вод. М.- «Наука».-1980.-С.-57-63.

69. Журавлев А.И. Биоантиокислители в животном организме // М. -Наука.-1975 273 с.

70. Заботкина Е.А., Микряков В.Р. Реакция иммунокомпентентных органов карпа на присутствие в воде карбофоса //Итоги научн.-практ. работ в их-тиопатол.-М.,-1997.- с.52-54.

71. Замычкина К.С.,Гродзенский Д.Е. К методике колометрического определения фосфора // Бюл. Экспериментальной биологии и медицины.-9,-1953.-С.37-39.

72. Земков Г.В. Эколого-токсикологические особенности влияния гербицида ялана на рыб // Дисс. на степень канд. биол. наук. Астрахань.-1990.-23 с.

73. Земков Г.В., Журавлева Г.Ф., Федорова Н.Н. Развитие морфо-функциональных нарушений в печени карпа под влиянием возрастающих концентраций меди // Тез. докл. регион, конф. «Экологические проблемы Волги». ч. II. - Саратов. 1989. С. 115-116.

74. Зернов С.А. Общая гидробиология -М., -1934. Л.-501 С.

75. Иванов В.П. Биологические ресурсы Каспийского моря Астрахань,-2000.-196 С.

76. Иванов В.П., Мажник А.Ю. Рыбное хозяйство Каспийского бассейна -М.-1997.-39 с.

77. Ильичов В.Г. Об адаптации популяции к периодически изменяющимся факторам среды. Результаты машинных экспериментов // Ж. Общая биология. -1992.-53.-№2.-С.202-210.

78. Инге Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции. "Высшая школа".1. М,- 1989.-592 с.

79. Капков В.И., Павлов М.С., Паракецова Н.КХ, Шидловская Н.А. Распределение тяжелых металлов в абиотической и биотической компонентах экспериментального водоема // Самоочищение воды и миграция загрязнений по трофической цепи. М. «Наука».-1984 .-с.46-51.

80. Карамян А.И. Функциональная эволюция мозга позвоночных. JT., 1970. «Наука». 302 с.

81. Каруш Ф. Сродство антител: пределы, изменчивость, роль поливалентности В кн. Иммуноглобулины. - М. «1Мир».-1981.- с.121-163.

82. Кассида Д.Е. Cassida J.E. Метаболизм перетроидных исек-тицидов и тио-карбаматных гербицидов в окружающей среде // Труды Советско-американского симпозиума. - М.-1979.- «Гидрометеоиздат». - С. 101-109

83. Кейтс М. Техника липидологии.-М.-1979.-272 с.

84. Кириллов О.И. Процессы клеточного обновления и роста в условиях стресса -М., «Наука» -1977.-117 с.

85. Кисели Д. Практическая микротехника и гистохимия. Будапешт. АН Венгрия.-1962.-399 с.

86. Ю1.Клисенко М.А. Основные закономерности накопления и распределения пестицидов и клиника отравлений // Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев.-1970.- «ВНИИГИНТОКС». -Вып.-8.-С.54-57.

87. Коблицкая А.Ф. Естественное размножение рыб в дельте Волги в условиях зарегулированного стока // Материалы Первой конф. по изучению водоемов бассейна Волги. Куйбышев.-1971.-С.286-293.

88. Ковальский В.В. Современные направления и задачи биогеохимии // Биологическая роль микроэлементов. М. «Наука».-1983.-c.3-15.

89. Козлов Ю.П. Структурно- функциональные аспекты перекисного окисления липидов в биологических мембранах // Липиды, структура, биосинтез, превращения и функции. М. «Наука».-1977. - С. 80-93.

90. Козлов Ю.П., Тарусов Б.Н. Изменение физико-химических свойств эндогенных липидов при инфекционном заболевании рыб // Вопросы ихтиологии.- 1970.-Т. 10.-Вып.5.-С. 1401-1408.

91. Юб.Кокоза А.А., Захаров А.Б. Влияние пропанида и ялана на основные элементы реакции оседания эритроцитов у молоди белуги // Тез. докл. III Всесоз. науч. конф. по водной токсикологии. Петрозаводск.-1975.-Ч. 1.-С.169-170.

92. Кокуричева М.П. О применении гистологического изучения органов и тканей рыб в водной токсикологии //- Изв. ГосНИОРХ.- «Влияние пестицидов и нефтепродуктов на водные организмы».-Т.98.-Л.-1974.-С.112-120.

93. Комаровский Ф.Я.,Порохонская Е.М., Пищолка Ю.К. Эксперимнтальная модель токсикоза пресноводных рыб // Экспериментальные исследования влияния загрязнителей на водные организма. Апатиты.-1979.-е. 10-14.

94. Коновалов Ю.Д., Местечкина А.Я. Динамика сульфогидрильных и ди-сульфидных групп белковых и небелковых соединений в раннем онтогенезе карпа//Гидробиол. ж. -1973.-9.-№3.-С.45-51.

95. Ю.Корниенко Г.Г., Дудкин С.И., Ложичевская Т.В. Оценка изменения функционального статуса азовских рыб в современных условиях обитания //Сб. тез. докл. Междун. конгресса «ЭКВАТЭК-96»,-М.-1996.-с.56-57.

96. Ш.Косинова Н.Р. Влияние фосфорорганических пестицидов на уровень метаболизма некоторых видов рыб // Автореферат дисс. на степень канд. биол. наук Севастополь,-1978. 24 С.

97. Косицкий Г.И., Ревич Г.Г. Креаторная связь и ее роль в организации многоклеточных систем.-Наука.-М.-1977.-177с.

98. Костров В.П., Панарин А.П. Загрязнение металлами вод и рыбы Северного Каспия //Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России (Астрахань, сентябрь 1997). -М. «ВНИРО». -1997.- С.430-431

99. Кошелев В.В. Изменение нормы реакции при адаптации рыб к новым условиям существования // «Реакция гидробионтов на загрязнение».-М.1983.-С.74-81.

100. Коштоянц Х.С. Основы сравнительной физиологии. М.-1957.-Т. 21.-«АН СССР».-63-0 с.

101. Красиков Е.В. Состояние запасов Каспийских осетровых (по материалам летних траловых съемок 1991 и 1994гг.) // Тез докл. I Конгресса ихтиологов России (Астрахань, 1997). М. -«ВНИРО».-1997.-С.432.

102. Краснов С.К. Влияние элементарного фосфора на рыб (патофизиологические исследования) // Вопросы водной токсикологии . -М. -1970 .- «Наука».^. 125-128.

103. Кривобок М.Н. О роли печени в процессе созревания яичников салаки (Clupea harengus membras L. // Вопросы ихтиологии. Т.4,-вып.З,-1964.-С.483.

104. Кривобок М.Н., Тарковская О.И. Жировой и белковый обмен у Волго-Каспийского осетра и севрюги при созреваниии половых желез // Тр. ВНИРО. «Вопросы физиологии рыб» Т. 69-, вып. 2.-М.- «Пищевая промышленность». -1970.- С. 109-132.

105. Кудрявцев А.А., Кудрявцева JI.A., Привольнее Т.И. Гематология животных и рыб. М.- «Колос».-1969.- 283 с.

106. Кузник Б.И., Васильев Н.В., Цыбиков Н.Н. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма. М.1989. «Медицина» - 319 с.

107. Кустанович И.М. Спектральный анализ. М., 1962. - «Высшая школа». -С. 32-201.

108. Кушнер В.П. Конформационная изменчивость и денатурация биополимеров. -Наука-JI.-1977.-273с.

109. Лабораторные исследования в ветеринарии. М. «Колос» 1971. - 647 с.126Ландау М.А. Молекулярные механизмы действия физиологически активных соединений. М. - 1981. - «Наука». С.261.

110. Лизина А.Н., Чемова Н.Г., Щербаков Ю.М. Патогистологические изменения в органах карпа при действии карбомола. // В кн.: Влияние вредных веществ на водную среду и водные организмы. Саратов. «Приволжское книжное издательство».- 1975.-С.46-47.

111. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М., 1969.-Мир.-621 с.

112. Ложичевская Т.В., Дрошева Н.Г., Ружинская Л.П., Ковальчук Л.И. Особенности функционального состояния нерестового стада азовского осетра // Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России (Астрахань, сентябрь 1997). -М.«ВНИРО». 1997.-С.228.

113. Лукьяненко В.И. Иммунобиология рыб. М.-1971. «Пищевая промышленность». -215 с.

114. Лукьяненко В.И. Общая ихтиотоксикология.-М.-1975,- «Легкая и пищевая промышленность» -317 с.

115. Лукьяненко В.И., Кокоза А.А., Захаров А.Б. Влияние некоторых пестицидов на физиологическую систему обеспечения рыб кислородом // Тез. докл. Всесоюзн. конф. Петрозаводск. 1975. С. 65-67.

116. Лукьяненко В.И., Попов А.В. Внутривидовая изменчивость фракционного состава сывороточных белков севрюги Acipenser stelatus // Ж. эвол. биохимии и физиологии. -1975.- 11.-№2. -С.191-193.

117. Магомедов С.К., Чернышев В.И. Изменение антиокислительной активности липидов приадаптации рыб к осмотическим перепадам // Биофизические аспекты загрязнения биосферы. М.-1973.- «Наука».-С. 48-53.

118. Мазманиди Н.Д. К патоморфологии отравления рыб фосфором // Вопросы водной токсикологии.-М.- 1973.- «Наука».- С. 123-136

119. Максимова М.П. Антропогенные изменения ионного стока крупных рек Советского Союза.// Водные ресурсы. -1991.-№5.-С.65-69.

120. Маляревская А.Я. Обмен веществ у рыб в условиях антропогенного ев-трофирования водоемов // Киев.-1979.- «Наук, думка».- 186 с.

121. Маляревская А.Я. Специфические и неспецифические изменения при действии различных токсикантов как показатели патологического состояния организма рыб // Теоретичекие проблемы водной токсикологии.-М.-1983.-С.12-15.

122. Марти Ю.Ю. Вопросы развития осетрового хозяйства в Каспийском море // Осетровые и проблемы осетрового хозяйства . -М . -1 972 .- «Пищевая промышленность» -С. 124-151.

123. МО.Маршин В.Г. Наследование общей двигательной активности у реципрок-ных гибридов осетра и стерляди // В кн.: Генетика поведения. 1969. С. 155-160.

124. Матей В.Е. Гипоталамо-гипофизарная неироспекторнаяь система группы Lebistes retikulatus при хроническом отравлении фенолом // Ж. Эволюционной физиологии и биохимии. Т. I? № 5. JL, 1973. Наука. С. 43-46.

125. Материалы к гос. докладу о состоянии Окружающей среды РФ за 1996 по Астраханской области // Под редакцией Ю.С. Чуйкова. Астрахань.-1998.-148 с.

126. Матюхин В.А., Халкин В.В. Стандартный обмен у некоторых видов пресноводных рыб //Материалы 4-ой науч. конф. физиологов, биохимиков и фармакологов. Красноярск,- Зап.-Сиб. отд.-1969.-Т.1.-С.284-285.

127. Матюхин В.А., Хаскин В.В., Шошенко К.А. Исследование энергетики движения рыб.-Новосибирск. «Наука». 1984.-134с.

128. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. М.- 1969.- «Меди-цина».-422 с.

129. Металлов Г.Ф., Аксенов В.П. Динамика ключевых ферментов энергетического обмена у русского осетра в условиях Волго-Каспийского бассейна // Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России (Астрахань, сентябрь 1997). М. «ВНИРО». 1997. - С.422.

130. Микряков В.Р., Половков Д.В. Экспериментальное исследование некоторых гербицидов на гуморальные факторы иммунитета карпа // Итоги на-учн.-практ. работ в ихтиопатол. М.-1997.-С.78-79.

131. Микряков В.Р., Попов А.В. Влияние карбофоса на некоторые показателинеспецифического иммунитета карпа // Итоги научн.-практ. работ в ихтиопатол.-М. -1997.-С.74-76.

132. Милыитейн В.В., Пашкин JI.M., Шилов В.И. Воспроизводство осетровых в зарегулированной Волге // Материалы Первой конф. по изучению водоемов бассейна Волги. Куйбышев,- 1971.-С.233-237.

133. Миронов О.Г. Развитие некоторых рыб в морской воде, загрязненной нефтепродуктами // Вопросы ихтиологии. -1969.-9.-№26.-С.1136-1139.

134. Миронов О.Г., Щекатурина T.JI. К вопросу о метаболизме углеводородов у морских гидробионтов // Экспериментальные исследования влияния загрязнителей на водные организмы.- Апатиты.-1979.-С. 128-132.

135. Мохамед Ахмед С.А. Степень сопряженности морфофункциональных нарушений в жабрах и в паренхиматозных органах карпа (Ciprinus carpio L.) под влиянием солей ртути и меди // Автореферат. М.-1994.-23 С.

136. Нахишина Е.П. Микроэлементы в водохранилищах Днепра. Киев.- «НауIкова думка»,-1983.-158 с.

137. Нахишина Е.П., Белоконь В.Н. Распределение тяжелых металлов в донных отложениях водохранилища Днепра // Водные ресурсы. -1991.-№5.-С.86-93.

138. Нумагомедов Г.Н., Морозов Н.П. Миграция тяжелых переходных металлов по компонентам экосистемы Каспийского моря // Биологические ресурсы Даг. побережья Касп. моря. Вып. 1.-Махачкала.-1982.-С.24-30157.0дум Ю. Экология. Т.1 .-М.- «Мир». -1986.-328 с.

139. Панюшкин Ю.А. Влияние солености воды на состояние антиокислительных систем в тканях непроходных рыб // Вопросы ихтиологии. 1971. Т. 11, №5. С. 943.

140. Панюшкин Ю.А., Тарусов Б.Н. О роли липидных антиоксидантов в адаптации рыб к различным осмотическим условиям // Вопросы ИХТОЛО-ГИИ.-1968.-Т.88.-ВЫП.5.-(52)-С. 1012-1018.

141. Патин С.А. Биотестирование как метод изучения и предотвращения загрязнения водоемов //Сб. науч. трудов. «Биотестирование природных и сточных вод». М.- «Легкая промышленность». -1981.-С.7-1 б.

142. Патин С.А. Влияние загрязненя на биологические ресурсы и продуктивность мирового океана// М. «Пищевая промышленность» . -1979 .-185 с.

143. Патин С.А. Экологические проблемы освоения ресурсов морского шельфа. М. «ВНИРО».-1997.-346 с.

144. Патин С.А., Морозов Н.П., Никоненко Е.М. Микроэлементный состав ихтиофауны Каспийского бассейна // Тр. ВНИРО.-М.- 1974.-С.40-44.

145. Петров B.C., Серова И. П. Влияние нефтяного загрязнения Каспийского моря // Мурманский морской биологический институт Кольского научного центра, РАН Мурманск, 1992. 14.-Деп. ВИНИТИ 26.392 №1052-В92.

146. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. М. «ИЛ».- 1962.-962 с.

147. Плисецкая Э.М. Гуморальная регуляция углеводного обмена у низших позвоночных -Л. -1975. «Наука». -216 с.

148. Плисе Г.Б., Худолей В.В. Онкогенез и канцерогенные факторы у низших позвоночных и беспозвоночных животных // Экологическое прогнозирование.^. «Наука» -1979.-279 С.

149. Ш.Плохинский Н.А. Биометрия М.- 1970.- «МГУ» - 302 с.

150. Поленов А.Л. Гипоталамическая нейросекреция Л. «Наука» - 1971.-158 С.

151. Поликарпов Г.Г., Зесенко А.Я., Егоров В.Н. Функционирование морских экосистем и процессы самоочищения поверхностных вод от загрязнения // Самоочищение воды и миграция загрязнений по трофической цепи. -М.-«Наука» -с.5-9.

152. Попова Г.В. Биофизиологические реакции рыб на пестицидное загрязнение водной среды //Тез. докл. IV Вс. конф. «Экологическая физиология и биохимия рыб». Астрахань.-1979.-С. 194.

153. Попова Г.В. Влияние диурона на воспроизводительную систему рыб // Экспериментальная водная токсикология. Рига. «Зинатне». 1973. Вып. 5. С. 152-160.

154. Попова Г. в. Особенности действия гербицида ялана на рыб // Экспериментальная водная токсикология. Рига. 197.1. Вып. 2. Зинатне. - С. 65-76.

155. Ральникова Е.С. Сульфогидрильные группы и реактивность эмбрионов рыб // Проблемы современной эмбриологии. М.- МГУ,-1964- с.2258-263.

156. Распопов В.М., Новикова А.С., Вещев П.А. Оценка эффективности естественного воспроизводства осетровых в р. Волге // В кн. «Биологические ресурсы Каспийского моря и пути рационального их использования». -Астрахань. 1993. С. 12-16.

157. Романов А.А. Нарушения морфогенеза половых желез, половых клеток, печени осетровых Каспия в морской период жизни // Тез. докл. Симп. «Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробио-нтов».-Л.-1990.-С.83-85.

158. Романов А.А., Алтуфьев Ю.В. Новообразования в половых железах и печени осетровых рыб (Acipenseridae) Каспийского моря // Вопросы ихтиологии. М. -1990.- Т. 30, 6.-С. 1040-1044.

159. Романов А.А., Федорова Н.Н., Дубовская А.В. Морфофункциональные нарушенияя жаберного эпителия осетровых Волго-Каспия в природных условиях//Цитология.-1998.-40,-М6.-С.529-535.

160. Ромейс Б. Микроскопическая техника -М. «Ил.» -1962. 711 с.

161. Рылина О.Н. Влияние кадмия на рыб при различных путях, сроках и количествах его поступления в организм // Автореферат дисс. на степень канд. биол. наук.-С. Петербург . -1998 . -22 с.

162. Салманов М.А. Экологическая и биологическаяя продуктивность Каспий-скрго моря Баку.-1999.-399 с.

163. Саркисов Д.С. Очерки истории общей патологии. М. 1997. Медицина. 510с.

164. Саркисов Д.С., Пальцев М.А., Хитров Н.К. Общая патология человека -М. «Медицина». -1995.-269 с.

165. Северцов С.А. Проблемы экологии животных. T.I «АН СССР».-М.1951.-169 с.

166. Селюков А. Г. Состояние репродуктивной системы и печени рыб в условиях загрязнения Обь-Иртышского бассейна // Тез. докл. I Конгресса ихтиологов России. Астрахань. 1997. С. 130.

167. Сергеев Б.Л., Боговский С.П. Изменение активности монооксигеназной ферментной системы печени речной камбалы как показатель загрязнения Балтийского моря // 15-ый Менделеевский съезд по общ. и прикл. химии. Минск,-1993.-с. 184-185.

168. Сидоров B.C. Экологическаяя биохимия рыб -Л. «Наука».- 1983.-238 С.

169. Сиренко Л. А. Цветение воды и евтрофирование. Киев. «Наукова думка».-1978.- 230 с.

170. Скопцова Г.Н. Роль зообентоса в самоочищении воды водохранилища // Самоочищение и миграция загрязнений по трофической цепи. М. «Наука».-1984.-С.81-85.

171. Слынько Л.И. Влияние на рыб гербицидов (2М-4Х, ялана, сатурна) и передача их по трофической цепи // Автореферат дис. канд. биол. наук.-1981.-С.25.

172. Соколовский В. В. Определение содержания сульфогидрильных групп в крови амперометрическим титрованием // Лаб. дело.- 1962.-8 (3) .-С. 15

173. Сорвачев К.Ф. Основы биохимии рыб (Эколого-биохимические аспекты) // М.-1982.- «Легкая и пищевая помышленность». 246 с.

174. Степанов A.M. Концепция ПДК: за и против //Биол. науки.- 1989.-№9. -С.61-68.

175. Сторожук А .Я., Сторожук Н.Г., Петухов С. А. Динамика микроэлементного состава личинок кижуча в норме и под действием ртути // Тез. докл. IV Всес. конф. Экологической физиологии и биохимии рыб. Астрахань.-1979.-С.174-175.

176. Стоянов А., Димитров Д. Мониторинг динамики растворенной и взвешенной форм некоторых металлов в водах болгарской шельфовой зоны // Пробл. фон. мониторинга состояния природной среды,-1990.-N8.-C. 167177.

177. Строганов Н.С. Актуальные задачи водной токсикологии в связи с охраной водоемов от загрязнения токсическими веществами // Элементы водных экосистем. -М. «Наука».-1978,- С. 150-173.

178. Струков А.И. Патологическая анатомия. М., 1971. - Медицина. 600 с.

179. Теплый Д.Л., Зумеров Р.А., Бекчанов А.Н. Гистологические изменения в мотонейронах пояснично-крестцового отдела спинного мозга кошек при экспериментальном ботулизме и столбняке // Тез. 48-ой сессии Гос. мед. института. Астрахань.-1965.-С.37-38.

180. Теплый Д.Л. Исследование влияния витамина Е на функциональные системы организма. //Автореф. докт. дис.-Л.-1984.-39с.

181. Торчинский Ю.М. Сера в белках//-М.-1977. «Наука».-301 с.

182. Федий С.П. Значение ихтиофауны в биоиндикации качества воды водоемов степной зоны Украины // Самоочищение воды и миграция загрязнений по трофической цепи. М., 1984. Наука. С. 102-106.

183. Федоров В.Д., Гильманов Т.Г. Экология.-М.- «МГУ».-1980.- 462 с.

184. Фетисов А.Н., Пешков С.П., Смагин А.И., Теткин Г.А. Стабильность по-пупуляций рыб, обитающих в радиоактивно загрязненных водоемах // Вопросы ихтиологии. -1992.-32.-№1.-С.79-87.

185. Филимонова Г.Ф., Токин И.Б. Цитологический анализ влияния кепона на печень трески // Экспериментальные исследования влияния загрязнителей на водные организмы. Апатиты.- 1979.-С.65-68

186. Филипович О.В., Егорова Т.А., Севастьянова Г.А., Практикум по общей биохимии. М. - 1982. - «Просвещение». 310 с.

187. Фортунатов М.А. О некоторых проблемах изучения Волги и водоемов волжского бассейна // Материалы Первой конф. по изучению водоемов бассейна Волги. Куйбышев.-1971.-С .6-11.

188. Хачатурова Т.А. Взвешенные вещества Каспийского моря и их биохимический состав// Океанология.-1981. -Том XXI.-Вып. 1.-С.70-77.

189. Хлебович В.В. Акклимация животных организмов JI. «Наука». -1981.-132 с.

190. Ходоревская Р.П. Влияние антропогенных факторов на разнообразие животного населения // Динамика биоразнообразия животного мира. Сб. докл. совещ., Москва, ИПЭЭ РАН. М., 1997. С. 63-66.

191. Холикова Н.И. Патогистологические изменнения некоторых органов леша (Abramis brama L.) под влиянием 2-метил-5-этилпиридина (НЭП) и 2-метил-5-винилпиридина (МВП) // Инф. бюл. «Биол. вн. вод». Рыбинск.-1970.-№5 ,-С.З 9-42

192. Холодов В.Н., Хрусталев Ю.П., Лубченко И.Ю., Ковалев В.В., Туровский Д.С. Каспийское море: Проблемы сендиментогенеза. М., «Наука». -1989.-184 с.

193. Шарова Л.В. Гидроэкологические исследования воздействия рисосеяния на экосистемы малых водотоков дельты Волги // Автореферат дисс. на степень канд. биол. наук. Астрахань.-1998.-24 с.

194. Шатуновский М.И. Роль исследований обмена веществ в решении некоторых вопросов динамики численности рыб // Современные вопросы экологической физиологии рыб. М.- 1979.- «Наука».-С.34-43.

195. Шатуновский М.И., Вартонь А. Некоторые изменения биохимического состава печени и крови в связи с созреванием яичников полярной Камбалы (Jiohsotta glacialis Pall.) Белого моря // Науч. докл. высш. школы. «Биологические науки».- №5.-1967.

196. Шварц С.С. Эволюционная экология животных // Труды института экологии растений и животных. Свердловск. «АН СССР». -1969.- Вып.65. -С. 12-18.

197. Шевелева Н.Н. О нарушении гематогенеза Каспийских осетровых в современных условиях // Тез. докл. «Экологические и морфофункциональ-ные основы адаптации гидробионтов». JI. 1990. С. 107-108.

198. Шелухин Г.К. О сопряженности гистоморфологических и биохимических показателей при оценке современного состояния осетровых в Каспийском море // Тез. докл. «Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов». JI.- 1990.-С. 108-110.

199. Шерстнева Т.А., Шабалина А.А. Некоторые стороны углеводно-жирового обмена у радужной форели Salmo irideus Gibb. при длительном голодании //Вопросы ихтиологии. 1973,13,N4. -С.692-698.

200. Шмальгаузен И.И. Избранные труды. -М.-1983.- «Наука».-359 с.

201. Шпакман Д.Н., Штейн В.Н., Мур С. Аминокислоты и белки // М.-1952.-«Ин. лит.» 143 с.

202. Шульман Г.Е. Физиологе биохимические особенности годовых циклов рыб. - М.- 1978. - «Пищевая промышленность». 186 с.

203. Щербаков Ю.А. Морфологические изменения, развивающиеся в органах рыб при привыкании к токсическим веществам // Реакция гидробионтов на загрязнение. М.-1983.- «Наука». - С.114-116.

204. Щербаков Ю.А. Патоморфологические изменения в органах карпа при действии ПВАЭ //Труды Саратовского отделения ГосНИОРХ. Саратов.-1975.-С.95-97.

205. Якубов С.М., Чернышев В.И., Козлов Ю.П., Тарусов Б.Н. О некоторых физико-химических свойствах липидов органов карпа при-воспалении плавательного пузыря //Вопросы ихтиологии, -1971 . T.l 1, вып. 4(69). С. 356-360.

206. Ярыгин Н.Е., Ярыгин В.Н. Патологические и приспособительные изменения нейрона. М.-1973.- «Наука».-189 с.

207. Allism D., Соре О.В. Insecticides effects in cutthroat trout of nepedted to DDT // Science. 1963. -142. №3594.- p.958-961.

208. Balaz S., Wiese M., Seide J. A kinetic discription of the fate of chemials inbiosystems: Pap. 4lh Jat. Workshop QSAR Environ. Toxicol., Veldhoven, 1620 Sept., 1990. Sci.Total Environ. 1991. 109-110. p.357-375.

209. Barber Т., Whaling P.J., Cohen D.M. Mercury in resent and century-old deep-sea fish. // Environ. Sci. and Technol., 1984, 18, №7,- p. 552-555.

210. Bartok I. A. Endoplasmus retikulum detoxicalo funkcioja a majlan (Magy tud akad bid). // Tred tud oszt. Rozl. 1970. 13, №3. p. 259-271.

211. Baumann P.C. Cancer in wild freshwater fish populations with emphasis on the Great Lakes. // J. Great Lakes Res., 1984, 10, №3, p. 251-253.

212. Bechtel T.J. Fish species diversity indecs as indicators of pollution in Calveston bay Texas // Contrebr. Marine. Sci. 1970, 15, p. 103-132.

213. Bennodorf Z. Belastung stehnder Gewassee: Workungen urid Steuermoglichkoiten // Wiss. Beitr. M., Zeiber-Univ., Halle-Witten-berg. 1988. -№34. p. 104-114.

214. Bentzen E., Lean Dawid R.S., Taylor W.D., Macray D. Rjle of food web struchture on lipid and bioakkumulation of organic contaminants dy lake tront (Salvelinus namaycush) // Can. Y. Fish and Aguat. Sci -1966/-53, Nll-p.2397-2407.

215. Beyrbach M., Bute A., Heidman W.A. Metabolisiereeng von polychloristen Bichnenylen in Kustenvilgen// Seevogel. 1990. -11, №1.- p. 13-16.

216. Bihari N., Vukmirovic M., Batel R., Zahn R.K. Application of the SOS umu-test in detection of pollution using fish liver S9 fraction // Сотр. Biochem. And Phisiol. C. 1990. 95, №1. p. 15-18.

217. Bizuik M., Gzerwinski J. Zanieszezenil wod powerzchniowych i uzytkowych zwiazkami chlorowcoorganicznyii / Inz mor i gedeehn 1991. 12, № p.7-13.3.

218. Blak J.J., Baumann P.C. Cancirogens and cancers in fresh water ines.: Pap. Chem. Contam., Aqut. Food Resour. And Hum. Cancer Rick, Research Triangle Park, N.C. Sent. 29- 30, 1991. // Environ.Health Perspect. 1991. -№90. p. 27-33.

219. Boyd C.E., Feryuson D.E. Suscentility and resistance of mosguito fish toseveral insecticides //J. Ecol. Entjmol. -1964-/ 57, N4.-p. 430-431.

220. Calamari D., Calassi S., Setti F. EcotoxicoL and Environ. Safety. 1982, 6, №4,- p.3669-3780.

221. Caspers H., Heckman C. W. The biota of a small studing waber ecosystem in the Elbe Hood plain. The role of districts free from pesticide spraysas hawens for endangered aquatic species.// Arch Hydrobiol., 1982., 61, №3, p. 227-316.

222. Cherrington A.D., Paim U., Page O.T. In vitro degradation of DDT by intestinal contents of Atlantic salmon (Salmo salar)// J. Fish Board Canada, 26, №1,-1969.-p. 47-54.

223. Christensen N.O. Front farming and trout diseases in Denmark // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1965. 126, N 1. p. 420-421.

224. Cope O.B. The retention of DDt by trout and whitefish. U.S. Pullic Health Serrice, Robert A., Taft Sanitaruy Engineering Center, Onhio. 1959.

225. Curtis C.E. Protecting the oceans // Oclanus. 1990. 33, №2. 19-22.

226. De Witt. Chromic toxicity to quoril an pheasants of some chlorinated insecticides. // J. Agricul. and Chem, 4, 1956.

227. Depinto Y.V., Young T.C., Booty W.G., J. Water Pollut. Aquatic Sediments. // Contr.Fed., 1984, 56, №6, 780-787.

228. Donazzolo R., Hicke Marlin 0., Menegazzo Vitturi Z., Pavoni B. Heavy metals content and lithological properties of recent sediments in the Northern Adriatic. //Mar. Pollu. Bull., 1984, 15, №3, 93-101.

229. Drewa G., Chesy M. Morphological changes of Gasterosteus acculeatus L. exposed to pollutants // Pol. arch, hydrobiol.-1994, 41,N4.-h.507-516.

230. Folch J., Lees M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for isolation and purification of total lipids from animal tissue (for brain, liver and muscle). // J. Biol. Chem., -1957,-vol., 266, №1, p. 497-509.

231. Freemann H.C., Sangalans G.B., Uthia J.F., Garside E.T., Daye P.G. A histopathological examination of and analysis for polichlorinated hydrocarbons in inshore Athlatic Cod (Gadus morhua)// Arch. Environ. Contam. and Toxicol.,- 1983,- 12,№6,-р.627-632.

232. Fujiva Masaru. Physiological effects of pollutants on aquatic organisms // J.Water Pollut. Control. Federat. 1964. 36, №3, Part 1, p. 330.

233. Galagani F., Bolguene G., Jucon M., Grzebyk D., Letrout F., Clase D. EROD measurements in fish from the northwest part of France // Mar.Pollut.Bull. 1991. 22, №10. 494-500.

234. George John J. Effects in fish and wilflife of chemical treatments of lage areas.// Forestery, 7, №4. 1953.

235. Gomez P.A., Establier R., Escolar D. Heavy metals in recent sediments from the bay of Cadiz, Spain. // Mar.Poilut.Bull., 1984, 15, №8, p.307-310.

236. Gorbz W., Maasfeld W. Untersuchngen iiber den Einflus' sauser Deposition auf Metallaus trag in Fliepgewassern "Wasser und Boden", 1984, 36, №11,- s. 538-543.

237. Grader M., Gann A. The effect natural ligantson trace metal partionning // Chemosphere. 1989. 19, №8-8. p.1251-1559.

238. Graig P.J., Moreton P.A. Total mercury, methyl mercury and sielchide in River Carron sediments. // Mar. Poilut. Bull., 1983, 14, №11, p.408-411.

239. Grimas U., Gothberg A., Notter M., Olsson M., Renterdn Z. Fat amount a factor to consider in monitoring studies of heavy metals in cool liver. AMBIO, 1985.-№14,- p.175-178.

240. Gronlund W.D., Chan S., Melain B.B., Clark P.C., Myers M.S., Stein J.F., Brown D.W. et al. Varanasi Unsa. Multidisciplinary assesment of pollution of three sites in Long Island Sound // Estuaries. 1991. 14, №3, p. 299-306.

241. Hall Lincoln A. A prelimminary investigation into the speciation of frace metals in sediments from the Gult of paria of the coast of Trinidad / Environ. Int. 1991. 17, №5. p.437-447.

242. Hashimoto Y. Effects of pesticides on aquatic organisms and their environment. // J.Testic.Sci., 1982, 7 №3.-p. 281-287 .

243. Hasselbrot Forsten B. Investigations with caged fish as an indicationofpollution from kraft pulp mills. Washington.-1964,- 20, №2,- p. 74-83.

244. Hill D.W. Me. Carty P.Z. Anaerobic degradation of selected chlorinated hydrocarbon pesticides // J. Water. Poilut. Control. Federat., 1967, 35, №8, 1259-1277.

245. Kammerad B. Die mittlete Elbe in Zand Sachen-Anhalt. Ein verglicich: Fischarter und Fischere neute und vorehundert Jahren // Ficher und Feichwirt. 1995.-46, №8 p. 300-303.

246. Kooijman S.A. Ecotoxicoligische effeten of populatie nivau. Vakbl. Biol. 1985, 65, №13-14. Ecotoxocologic, p.39-42, Discuss.

247. Krahn M.M., Myer M.S., Burrows D.G., Malins D.C. Determation of metabolics of xenobiotics the bile fish from polluted waterways. Xenobiotica, 1984, 14, Ecotoxicol. And Environ. Safety., 1983, 7, №2, 229-241.8, p. 633646.

248. Kramer V.J., Nevman M.C., Mulvey M., Ultsch G.R. Cyclysis and treb cyclic metabolites in mosquito fish. Gambik Nolbrook. Girard, exposed to mercuric chloride: Aebosime genotype effects.-1959.

249. Laworowski Z., Babalat F., Blain L., Peyre E. Heavy metals in human andanimal bones from ansient and contemorary franee.// Sci. Total. Environ., 1985, 43, №1-2, 103-126.

250. Lindestrom Z., Grahn 0. AMBIO, 1982, 11, №6.

251. Lowe-Linde Z., Niimu A.J. Short-term and long-term effects of cadmium on geycogen reserves and liver size in rainbow trout (Salmo gaineri Richardson). Environ. Contarn, and Toxicol., 1984, 13, №6, p.759-764.

252. Mallins D.C., Melaln B.B., Brown D.W. et al. Chemical pollutants in sediments and diseases of bottom-dwelling fish in puget sound, Washington // Environ. Contam. and Toxicol., 1984, 18, №9, p.705-713

253. Mallins D.C., Myers M.S., Roubal W.T. Organic free radicals associated with idiopathic liver lesions of english sole (Paropfrys vetulus) from polluted marine environments. // Environ. Sci. And Technol, 1984, 17, №11, p.679-685.

254. Mathur D.S. Histopathological changes in the liver of certain fishes as, induced by ВНЕ and Indian // Proc. Nat. Acad. Sci. India. 1962. -B-32, №4.-429-434.

255. Mathur D.S. Histopathological changes in the liver of certain fishes induced by dilidrin. // Sci. and Cult. 1965. 31, №5. p.258-259.

256. Me Elroy A.E., Cahill J.M., Sesson J.D., Klinow K.M. Relative bioairlability and DNA addust formation on benzo a. nyrene and metabolitics in the diet of the winter flounder // Compar. Biochem. and Physiol. C. 1991- 100, № 1-2. p.29-32.

257. Mearans A.J., Young D.R. The manner in which organisms concentrate pollutants. // Proc. ОСЕ ANC'83, San Francisco, 29 Aug. 1 Sept. 1983. Vd.2. New York, №1, 1983, 1927-1931.

258. Moore James W., Ramamoozthy S. Heavy metals in natural waters: Applied monitoring and impact assessment. New York e.a.: Springer, 1984, kii, 268pp., ill. ISBN -387-90885-4 Us.

259. Mursa O.P., Sxena V.P. Effects of environmental pollution on the growth and stability analisis // Indian J. Pure and Appl. Math 1991. 22, №10, p.805-817.

260. Nelson A., Donkin P. Processes of bioaccumulation: the importance of chemical speciation.//Mar.Pollut.BulI., 1985, 16, N 4.-p. 164-169.

261. Nemesok J., Orban., Aszalts В., Buzas Z., Nemeth A., Boross Z. Investigations of paraquat toxicity in fishes // Water Int., 1985, 10, № 2, p.79-81.

262. Niwochurch E.J., Kahwa J.A. Heavy metals in the lower Missisippi river // J. Environ. Sci. and Health, 1984, №8, p.978-988.

263. Podowski A.K., Sclove S.Z., Philipowicz A. Khan M.M.Q. Biotransformation and disposition of heckochlorcyclopentadiene in fish // Arch. Environ. Contam. and Toxicol. 1991. 20, №4. p.488-496.

264. Portmann J.E. The level of certain metals in fish coastal waters around England and Wales. 7 Aquaculture, 1972, 1, №1, p.91-96.

265. Pritehard P.H. Fate of environmental polutants // J.Water Pollut.Contr. Fed., 1984, 56, №6, p.718-725.

266. Ramotsa I., Szakolezal Z., Kovacz. Klorozolr szenhidrogenkel valo szennyezettseg vizsgalata balatoni halakban // Magy. Motoru.lapia. 1990. 45, 36. p.359-361.

267. Rana S.V.S., Sharma Rekha. Co-enzyme effects of inorganic mercury in theliver of freshwater fish Channe punctacus. // J.Appl. Toxicol. 1992, 2, №6, p.275-277.

268. Rapin F. , Nembrini B.P., Forsther U., Garcia J.J. Hecloy metals in marine sediment phases determined by sequntal chemical extraction and thier interaction with interstitial water // Environ.Technol.Zett. 1983, 4, №8-9, p.387-396.

269. Sabtik AC. Efect zagadenia voola na citogeticu ribe (Kromosomske aberacija) // Ribar Jugosl, 1983, 38, №5, p. 109-110.

270. Saltes J.G., Bailey G.C. 1984. Use of fish gill and liver tissue to monitor zinc poluution. "Bull Environ. Contain. And Toxicol", 32, №2, p.233-237.

271. Schnytema G.S., Nelson P.O., Malueg K.W., Nebeker R.V., Krawezyk D.F., Ratelyff A.K., Yaksatter J.H. Toxity of cadmium in water and sediment slurries of daphnia magnic // Environ. Toxicol, and Chem.", 1984, 3, №2, p.293-308.

272. Schoor W. P., David E., Takaheshi N. The induction of cytochrome P-450-IAL in juvenile fish by creostecontaminated sediment // Arch. Environ. Contam. and Toxicoi. 1991. 20, №4. p.497-504.

273. Sikka H.C., Steward R.A., Kahdaswami C., Rutkowsky J.P. Metabolism of benzo pyrene and persistence of DNA adducts on the brown bulinead (Istalurus nobalosus) // Compar, Biochem. and Physiol. 1991.- 100, № 1-2, p. 25-28.

274. Singh H., Singh T.P. Effects of organochloride pesticides on gonadotropic poteney and ovarion activity of the catfish. Colloj TNRA: 1982, №8, p.275-248.

275. Stegeman J.G. Metabolisme oxydantion de "composes etrangers" relies a'la pollution. // Wie mar., 1985. №6, 29 p.

276. Stein J.E., Horn Т., Collier Т.К., Brown D.W., Varaci U. // Environ. Toxilcol. and Chem. 1995. 14, № 6, p.1019-1029.

277. Stumm W. Metall pollutants in waters thier effect, controlling factors and ultimate fate. // Heavy Metals Environ. Int. Conf. Heidelberg.Sept., 1983. Vol.Iй Edinburgh, s.a.,p. 1-8 .

278. Tiedemann G., Kublibeek M., Rosmanik J. Die gegenseitige Beeinflussung von Cadmium und Beil in Tischorganismus. //.Wiss. Und Umwelt", 1984, №3, p.145-154.

279. Totaro E.A., Pisanti F.A., Glees P. The role of copper lever in the formation of neuronal lipofuscin in the Spinae ganglia of torpedo m. // Mar.Enwiron.Res", 1985, 15, №3, p. 153-163.

280. Turgeon D.D., O'Connor T.P. Long Sound: distributors, trends and effects of chemical contamination // Estnaries 1991. 14, №3, p.279-289.

281. Vymazal J. Short-term uptake of heavy metals by neriphyton algal. // Hydrobiologia. 1984. 119,№3. 171-179.

282. Waldichuk M. Biological awailability of metals to marine organisms. // Mar. Pollut Bull, 1985, 16, №1, p.7-11.

283. Willford, Wayne A., Sills J.B., Wealdon E.W. Chlorinated hydrocarbons in the young of Lake Michigan coho salmon // Progress. Fisch-Culturist, 1969, 31, №4.

284. Wilken R.D., Hintelmann H. Analysis of mercury-species in sediments / GKSS. Rent. 1990.E5. p.339-359.

285. Wrembel H.L. Zaganienie rteci w mozzu: sposoby oznaazania i skutki skanzenif s1 rodowiska przyrodniczego // Post, fiz -1991/-42, №4. -p.347-422.

286. Wright D.A., Welbiurn C.M. Cadmian in the aquatic environment. A review of ecological, physiological and toxi-cological effects on biota // Environ Rev. 1994. 2, №2. p. 187-214.

287. Yongs W.D., Gutchmann W.H., Zisk D.J. Residues of DDT in lake trout as a function of age // Environ Sci. and Tech-nol., 1972, 6, №5, p.451-452.

288. Yonng, Parke A. Some effects of sewer effluent on marine life "Calif Fish -und

289. Gama", 1964. 50, №1,33-41. 327.Yull W.Y., Tonillin A.D. DDT in forest streams // Bull. Environ. Contain, and Toxicol." 1970. 5, N 6, p.479-488 .

Информация о работе

Земков, Герман Вениаминович
доктора биологических наук
Астрахань, 2003
ВАК 03.00.16

Диссертация

Морфофункциональные критерии толерантности рыб при кумулятивном токсикозе - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы