Морфо-физиологические изменения у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием токсических веществ

Козлова, Наталья Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфо-физиологические изменения у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием токсических веществ
ВАК РФ 03.00.10, Ихтиология

Автореферат диссертации по теме "Морфо-физиологические изменения у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием токсических веществ"

00347 1372

На правах рукописи

КОЗЛОВА НАТАЛЬЯ ВИКТОРОВНА

МОРФО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ У ОСЕТРОВЫХ РЫБ НА РАННИХ ЭТАПАХ РАЗВИТИЯ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ТОКСИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

Специальность - 03. 00.10. - Ихтиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 2 идя 2003

Астрахань - 2009

003471372

Работа выполнена на кафедре «Зоология и ботаника» Астраханского государственного технического университета (АГТУ)

Научный руководитель: доктор биологических наук

Н.А. Каниева

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

В.Н. Крючков

доктор биологических наук, профессор

М.А. Егоров

Ведущая организация:

Московский Государственный Университет им. М.В .Ломоносова

Защита состоится «23» июня 2009 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д.307.001.05 при Астраханском государственном техническом университете по адресу: 414025, Астрахань, Татищева, 16.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного технического университета по адресу: 414025, Астрахань, Татищева, 16.

Автореферат разослан «22» мая 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

Общая характеристика работы

Актуальность темы исследования. В последнее время наибольшую опасность для рыбохозяйственных водоемов представляет нефтяное загрязнение (Касымов,1994; Патин, 1979, 2001; Иванов, Сокольский, 2000; Абдурахманов, Ахмедова, 2005; Каниева и др., 2006; Палатников, и др., 2007).

Каспийское море является местом интенсивной разведки и разработки многочисленных нефтяных месторождений. По оценкам Международного института стратегических исследований, потенциальные запасы нефти Каспия составляют 31,8 млдр.т. (Кенджигалиев, Канбетов, 2007).

Астраханская область расположена в центре Евро-Азиатского материка и тем самым определяет ведущую роль России в обеспечении транспортных связей стран, тяготеющих к Волго-Каспийскому региону (Карпов, 2007). С одной стороны река Волга с ее притоками, системой судоходных каналов является водной транспортной системой для 22 регионов России, в том числе по ней осуществляется транспортировка углеводородного сырья с месторождений Каспийского моря, с другой стороны - в реке проходит нерест осетровых рыб и их развитие на ранних этапах, наиболее уязвимых к действию различных химических соединений (Norcross at all, 1996; Чесалина, Руднева, 1998; Черкашин и др., 2004; Гайсина, 2007). Однако транспорт и планируемое строительство нефтетрубопровода, возможные аварийные ситуации могут создать угрозу запасам осетровых рыб, сохранение которых в Волго-Каспийском бассейне является не только национальной задачей, но и предметом озабоченности мировой общественности.

Высокой экологической опасностью характеризуются продукты трансформации нефти в природной среде в процессе их дальнейшего комбинированного взаимодействия с другими токсикантами (Абдурахманов, Ахмедова, 2005).

Одним из органических соединений, широко используемых в качестве ингибитора коррозии металлов при перегонке нефти по трубопроводам, является диэтаноламин (ДЭА) (Камаев и др., 2002). Кроме того, ДЭА применяется в лакокрасочной, фармацевтической, резинотехнической, парфюмерной промышленности, поступление которого в рыбохозяйственные водоемы не исключено в составе сточных вод (Грушко,1986).

В связи с этим представляется актуальным изучение влияния нефти и комбинированного воздействия нефти и ДЭА на осетровых рыб в период их раннего развития.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось выявление морфо-физиологических изменений у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием токсических веществ на примере нефти и комплекса нефти с ДЭА.

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи:

1. выявить морфо-физиологические изменения севрюги и стерляди в раннем онтогенезе и их видовые особенности под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти и ДЭА;

2. оценить влияние различных концентраций нефти и комплекса нефти с ДЭА на физиолого-биохимические и морфологические показатели молоди севрюги;

3. изучить изменения функциональных возможностей организма сеголетков стерляди под воздействием различных концентраций токсикантов и экспозиций;

4. оценить морфологическое состояние мышц и печени сеголетков стерляди под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА;

5. рассчитать промысловый возврат и ущерб воспроизводству севрюги от влияния токсических веществ.

Научная новизна. Впервые исследовано комбинированное воздействие нефти и диэтаноламина на стерлядь и севркну на ранних этапах развития. Вскрыты морфо-физиологические особенности резистентности осетровых рыб на ранних стадиях развития к различным концентрациям нефти и комплекса нефти с ДЭА, в основе которых лежит изменение ряда показателей метаболизма. Впервые изучено воздействие исследуемых веществ на анизотропные структуры гомогенатов личинок, органов и тканей молоди рыб. Разработан способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству рыбы при воздействии химических реагентов.

Практическая значимость. На основании проведенных исследований обнаружены морфо-физиологические особенности резистентности осетровых рыб на ранних этапах развития к воздействию нефти и комбинированному влиянию нефти с ДЭА, которые позволят более точно устанавливать ГТДК для химических соединений, не имеющих на сегодняшний день нормативных показателей, и будут использоваться для дальнейшей специальной разработки установления пределов физиологической . пластичности и адаптации устойчивых и малоустойчивых особей в популяции различных видов ихтиофауны.

Обнаруженные особенности морфотипов гомогенатов органов и тканей рыб на ранних этапах развития под воздействием нефти и совместным влиянием нефти с ДЭА могут быть использованы в качестве индикаторов токсического эффекта, критериев токсичности и для оценки уровня химического загрязнения водоемов Волго-Каспийского бассейна.

Полученные данные могут быть использованы в вузах для студентов биологических специальностей при изучении курсов ихтиологии, физиологии, биохимии, экологии, гидробиологии, токсикологии.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Морфо-физиологические изменения осетровых рыб (севрюга, стерлядь) в раннем онтогенезе, их видовые особенности под влиянием нефти и комплекса нефти и ДЭА.

2. Физиолого-биохимические и морфологические показатели молоди севрюги под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти и ДЭА.

3. Функциональные возможности организма сеголетков стерляди под влиянием различных концентраций токсикантов и экспозиций.

4. Морфотипы гомогенатов мышц и печени сеголетков стерляди под воздействием нефти и комплексным влиянием нефти с ДЭА.

5. Способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству севрюга под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти и ДЭА.

Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы доложены на научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава АГТУ в 2006-2009 гг., на Российских и. Международных научно-практических конференциях в Астраханском Государственном Университете (2006-2007 гг.), на IV Международной научно-практической конференции «Проблемы сохранения и рационального использования биоразнообразия Прикаспия и сопредельных регионов» (Элиста, 2006 г.), Международной научной конференции «Современные проблемы адаптации и биоразнообразия» (Махачкала, 2006 г.), III научных конференциях Российской Академии Естествознания «Природопользование и охрана окружающей среды» (Греция, Лутраки, 2006 г.) и «Экология и рациональное природопользование» (Египет, Хургада, 2007), на Международных научно-практических конференциях в Астраханском Государственном Техническом Университете (2007-2008 гг.), Международной научно-практической конференции «Состояние, охрана, воспроизводство и устойчивое использование биологических ресурсов внутренних водоемов» (Волгоград, 2007 г.), Международных научно-практических конференциях в Каспийском Научно-исследовательском Институте Рыбного Хозяйства (20072008 гг.), V Международной научно-практической конференции «Экологические проблемы. Взгляд в будущее» (Ростов-на-Дону, 2008 г.), III Всероссийской конференции по водной токсикологии, посвященной памяти Б.А. Флерова «Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы» (Борок, 2008 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 работ, из них 2 работы в изданиях, рекомендованных ВАК, имеется патент РФ № 2334230 «Способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству рыбы при воздействии химических реагентов».

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 151 страницах компьютерного текста. Состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложения. Список литературы содержит 224 источника, из них 40 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 25 рисунками и 11 таблицами.

Автор выражает свою благодарность руководителю Кизанского Осетрового рыбоводного завода за возможность сбора материала, сотрудникам лаборатории экологической физиологии и генетики КаспНИРХа, лаборатории патоморфологии ГУ НИИ по изучению Лепры за помощь в освоении методик и обработки материалов.

Глава I. Литературный обзор

Дана характеристика нефтяного загрязнения природных водоемов. Представлены литературные данные о влиянии нефтеуглеводородов на биоресурсы Волго-Каспийского бассейна. Проанализированы имеющиеся данные воздействия нефти и ДЭА на физиолого-биохимические и морфологические показатели рыб в периоды их раннего развития.

Глава II. Материал и методы исследований

Работа выполнена на кафедре «Зоология и ботаника» Астраханского государственного технического университета (АГТУ) в 2005 — 2008 гг.

Обработка материала проводилась на базе АГТУ кафедры «Зоология и ботаника», лаборатории экологической физиологии и генетики Каспийского Научно-исследовательского Института Рыбного Хозяйства и лаборатории патоморфологии ГУ НИИ по изучению Лепры Минздрава РФ.

2.1. Экспериментальные исследования

Эксперименты по изучению влияния сырой каспийской нефти и диэтаноламина (ДЭА) на осетровых рыб в периоды раннего развития проводили по общепринятым методам исследований (Строганов, 1971; Крылов, 1971; Лукьяненко, Карпович, 1989). По результатам лаборатории Астраханского газоперерабатывающего завода (АГПЗ) используемая нефть с Хвалынского месторождения Северного Каспия содержит общей серы - 1,01 % массы, меркаптановой серы - 19,84 мг/дм3. Сырая нефть также имеет в своем составе воду и другие неорганические соединения (Каниева, 2004). Диэтаноламин (ДЭА) доставлен с Астраханского газоперерабатывающего завода.

Объектом исследований были выбраны икра севрюги (Acipenser stellatus Pallas), стерляди (Acipenser ruthenus Pallas), молодь севрюги массой 2,0 г., сеголетки стерляди - 20 г. Выбор данных видов рыб обусловлен различной их чувствительностью и устойчивостью к токсикантам (Лукьяненко, 1983). Подопытный материал доставлялся с рыбоводных предприятий Астраханской области: Кизанского Осетрового Рыбоводного завода и Научно-производственного Центра «БИОС».

Опыты с развивающейся икрой, заложенной на стадии маленькой желточной пробки (стадия 17), проводили в двухлитровых кристаллизаторах при плотности посадки икры 200 экз./л., при температуре воды +23°С для севрюги, +18°С - для стерляди. Вылупившихся личинок кормили живыми кормами (Artemia salina). При этом продолжительности экспериментов, заложенных на стадии икры (как севрюги, так и стерляди) составили 7-8 суток, что совпало с переходом вылупившихся личинок на активное питание (ст.45). Эксперименты с молодью рыб проводили в 70-ти литровых аквариумах при плотности посадки молоди севрюги - 25 экз. на один аквариум, температуре воды +23° С, сеголетков стерляди - 15 экз. при температуре воды +18° С, кормлении сухими и живыми кормами (Artemia salina и Daphnia magna). Продолжительность экспериментов составила для молоди севрюги - 5 суток, стерляди - до 60 суток. Контролем служили особи в аналогичных емкостях с отстоянной и аэрированной водой без добавления токсикантов. Все эксперименты проводили в двух повторностях со сменой растворов через трое суток, при постоянной аэрации воды. Условия содержания для рыб в работе определяли исходя из литературных источников (Гинзбург, Детлаф, 1969; Пономарев и др., 2002).

Выбрана следующая шкала концентраций химических веществ:

I - нефть 1 мг/л; II - нефть 1 мг/л + ДЭА 1 мг/л; III - нефть 10 мг/л; IV -нефть 10 мг/л + ДЭА 10 мг/л; V - нефть 100 мг/л; VI - нефть 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л.

В процессе экспериментов вели регулярные наблюдения за развивающейся икрой, вылупившимися личинками, молодью рыб. Регистрировали двигательную активность, реакцию на раздражители, интенсивность дыхания, изменение массы, длины особей, время и процент выживаемости. Аномалии эмбрионов изучали по общепринятой методике (Детлаф, Гинзбург, 1954). Все морфо-физиологические изменения в крови, органах и тканях рыб сопоставляли с утратой их двигательно-пищевых и оборонительных реакций и сравнивали с контролем.

2.2. Гидрохимические исследования. Температуру, активную реакцию среды (рН), окисляемость (перманганатный метод), растворенный кислород (по Винклеру) определяли по общепринятым, методам исследований (Привезенцев, 1973; Лурье, 1973).

2.3. Физиологические исследования. Гематологические показатели -содержание гемоглобина в крови определяли гемиглобинцианидным методом (Меньшиков, 1987). Морфологический анализ клеток белой крови проводили по общепринятым методикам (Иванов, 1983; Житенева и др., 1989).

2.4. Биохимические исследования. Концентрацию общего белка в сыворотке крови, мышцах определяли биуретовым методом (Дарбре, 1989). Показатель коллоидоустойчивости сывороточных белков (КСБ) в сыворотке крови (лента Вельтмана) определяли по методике Салменкова, Малининой (1976) в модификации Кычанова (2003). Для выявления скорости спонтанного (ферментативного) перекисного окисления липидов (СпПОЛ), аскорбат зависимого перекисного окисления липидов (АсПОЛ), количества малонового диальдегида (МДА) использовали микрометод (Строев, Макарова, 1986).

2.5. Морфологические исследования. Для анализа структур гомогенатов применяли способ оценки токсического действия химических веществ на органы и ткани рыб (Шабалин, Шатохина, 2001; Каниева, Аюпова, 2004). Изучение структур твердой фазы гомогенатов органов и тканей проводили методом краевой дегидратации в аналитических ячейках, представлявших собой пространство между предметным и покровным стеклами, в которое помещали 0,02 мл исследуемой жидкостной фазы гомогенатов. Просмотр структур, образовавшихся при медленном (в течение 48-72 часов) высушивании, производился в поляризованном свете. Наблюдаемые текстуры оценивали в соответствии с методическими рекомендациями МЗ РФ № 96/165 «Формообразование кристаллических структур биологических жидкостей при различных видах патологию) (Шатохина, Шабалин, 1997), согласно которым выделяли:

> базисные морфотипы (Б) - текстуры компенсированного гомеостаза (состояние нормы): нитевидные («миелиновые бороздки») и шаровидные;

> вторичные морфотипы (В) - текстуры адаптационного гомеостаза: веерные, полиморфные, дендритные, игольчатые, спутанно-волокнистые конгломераты;

> атипичные морфотипы (А) - текстуры декомпенсированного гомеостаза, имеющие дефектность формы, отличающиеся от монохромных вторичных и базисных форм цветовой гаммой.

> состояние аморфизации - изотропные структуры, характеризующие выраженные нарушения механизмов гомеостаза.

Выявление образованных анизотропных (способных к двулучепреломлению) и изотропных структур (аморфных), в поляризованном свете осуществляли с использованием стереомикроскопа фирмы «Leica - MZ 12,5», оснащенного насадкой и телевизионной камерой «Picxera».

При гистологических исследованиях использовали общепринятую методику (Волкова, Елецкий, 1989), окрашивание гистосрезов печени, мышц сеголетков стерляди толщиной 7-10 микрон проводили гематоксилином -эозином. Анализ и фотографирование микропрепаратов осуществляли на микроскопе фирмы «Olimpus ВН-2». Тяжесть патологии мышц и печени оценивали по бальной системе (Алтуфьев и др., 1989,1992).

2.6. Рыбоводные исследования. На основании процента выживаемости рыб в экспериментальных условиях и данных по воспроизводству рыб в естественных условиях (пропуск производителей на нерест, процент самок в стаде, средняя плодовитость самок, коэффициент промвозврата от икры) рассчитывали возможный промвозврат и ущерб рыб в условиях загрязнения водоема химическими реагентами (Каниева и др., 2008).

2.7. Статистические исследования. Материалы исследований обработаны статистически (Лакин,1973) с использованием компьютерной программы «Microsoft Excel». Достоверность различий сравниваемых показателей оценивали по t - критерию Стьюдента.

Всего обследовано 5600 экземпляров икры севрюги, 5600 экземпляров икры стерляди, 450 экземпляров молоди севрюги, 430 экземпляров сеголетков стерляди.

Результаты собственных исследований и их обсуждение

Глава 1П. Особенности развития осетровых рыб в раннем онтогенезе под влиянием нефти и комбинированным воздействием

нефти с диэтаноламином

3.1. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на морфо-физиологические показатели развивающейся севрюги

Результаты экспериментов с икрой севрюги, заложенной на стадии маленькой желточной пробки, показали, что вылупившиеся личинки в растворах токсикантов в сравнении с контрольными характеризовались слабой пигментацией, изменением частоты сердечных сокращений, и в итоге -снижением массы (на 0,2-2,7 мг), длины тела (на 0,8-4,1 мм) и выживаемости. Результаты наших исследований аналогичны литературным данным влияния нефтяного загрязнения на другие виды рыб (Чесалина, Руднева, 1998).

С целью ранней диагностики и оценки физиологического состояния в настоящее время в биологии разработаны методы, позволяющие оценивать гомеостаз организма, устанавливать ассоциативные связи особенностей кристаллизации в биологических жидкостях и гомогенатах органов и тканей с определенными патологическими состояниями (Чистяков и др., 1976; Минц,

Кононенко, 1981; Савина и др., 1986; Шабалин, Шатохина,1997,2000; Аюпова, 2001; Каниева, 2004; Тризно и др., 2005).

В нашем эксперименте результаты изучения гомогенатов контрольных личинок севрюги выявили отсутствие цветных кристаллов, морфологическая картина соответствовала нормативным показателям. Анализ кристаллизации гомогенатов опытных личинок, показал, что более угнетающее воздействие на организм рыб оказывали концентрации нефти 10 мг/л + ДЭА 10 мг/л и нефти 100 мг/л, что характеризовалось присутствием наибольшего количества цветных морфотипов в исследуемых образцах, превышающих до 2 и 6 раз соответственно, относительно остальных вариантов опытов. Наиболее выраженные изменения кристаллизации гомогенатов личинок севрюги отмечены при воздействии 100 мг/л нефти, где регистрировались одиночные анизотропные структуры, 30 % которых обладали цветностью (рис. 1а).

Таким образом, исследования кристаллов в гомогенатах вылупившихся личинок севрюги, подвергшихся воздействию химических соединений на стадии оплодотворенной икры (стадия 17), показали значительные молекулярные изменения в их организме, что проявлялось в уменьшении анизотропии, появлении изотропных и цветных атипичных текстур. Изменение морфологической картины кристаллов в органах и тканях личинок подтверждалось внешними морфометрическими и физиологическими показателями, как по динамике частоты сердечных сокращений, так и выживаемости особей.

3.2. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на морфо-физиологические показатели развивающейся стерляди

Результаты экспериментов с икрой стерляди, заложенной на стадии маленькой желточной пробки, выявили, что в отличие от контрольных особей, у подопытных вылупившихся личинок отмечали изменение частоты сердечных сокращений, снижение массы (на 2,4 - 5,8 мг) и длины (на 0,2-2,6 мм) тела, слабую двигательную активность, отсутствие реакций на внешние раздражители и корм, депигментацию тела, увеличение количества аномально развивающихся эмбрионов, что в конечном итоге привело к снижению процента выживаемости. Данные наших исследований согласуются с результатами других авторов (Михайлова, 1991).

Морфологическая картина контрольных личинок стерляди выявила отсутствие цветных структур, что соответствовало нормативным показателям. В отличие от икры севрюги в организме развивающейся стерляди обнаружены адаптивные перестройки при воздействии концентрации нефти 10 мг/л, о чем свидетельствовало отсутствие атипичных цветных текстур в гомогенатах личинок, где регистрировались нитевидные, мелкие веерные, полиморфные кристаллы и единичные сферолиты (рис. 1 б).

а) б)

Рис. 1. Морфотипы гомогенатов личинок осетровых рыб при интоксикации:

а) севрюга, нефть 100 мг/л. Кристалл с цветной вставкой. Ув.хЮО б) стерлядь, нефть 10 мг/л. Веерные текстуры. Ув.хШО

При оценке количественного состава цветных морфотипов, установлено, что степень негативного воздействия на организм развивающейся стерляди зависит от концентрации и состава растворов токсикантов.

Результаты сравнительной характеристики метаболизма в организме личинок севрюги и стерляди под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА выявили, что их видовые особенности явно отмечаются на фоне четко выраженного снижения двигательно-пищевых реакций. Важно заметить, что по результатам структурирования кристаллов в гомогенатах личинок, стерлядь в раннем онтогенезе более подвержена токсическому воздействию, чем севрюга. Комбинированное влияние нефти 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л выявило широкую гамму цветности в гомогенатах как севрюги, так и стерляди, но процент атипичных текстур у двух исследованных видов рыб был ниже, чем при воздействии аналогичной концентраций нефти 100 мг/л, что служило доказательством проявления адсорбирующих свойств ДЭА в максимальной дозе по отношению к нефти.

Глава IV. Влияние нефти и комбинированное воздействие нефти с ДЭА на молодь севрюги

4.1. Изменение физиологических показателей севрюги под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА

В дальнейшем, для более глубокого изучения воздействия нефти и комплекса нефти с ДЭА на осетровых рыб в период их раннего развития был проведен эксперимент с молодью севрюги массой 2,0 г.

Наблюдения за молодью севрюги, показали, что частота дыхания у опытных рыб нарастала по мере увеличения концентраций химических

веществ в первые сутки эксперимента (до 80 раз/мин.) относительно контроля и значительно снизилась к концу опыта (на 22-82 раз/мин.) относительно начала эксперимента, что в итоге привело к гибели значительной части особей. Анализ морфометрических показателей опытного материала к концу эксперимента выявил отставание в массе (до 0,38 мг.) и длине тела (до 0,29 мм.) по сравнению с контролем.

Концентрация гемоглобина в крови особей, содержавшихся в растворах сырой нефти 1 мг/л, 10 мг/л и 100 мг/л снизилась на 20,94 %; 28,44 % и 35,06 % соответственно, относительно контроля. Анализ результатов комбинированного воздействия нефти и ДЭА в аналогичных концентрациях выявил снижение уровня гемоглобина в крови молоди на 27,76 %; 28,47 % и 43,53 % соответственно, по отношению к контролю. Статистический анализ позволил выявить достоверные различия (р<0,05) между контролем и опытными вариантами.

Под воздействием нефти и комплекса нефти и ДЭА на молодь севрюги происходило перераспределение форменных элементов белой крови. Так, у рыб из опытных групп на фоне повышения процентного соотношения лимфоцитов, происходило снижение общего числа нейтрофилов относительно контрольных особей, что свидетельствовало о явных иммунологических нарушениях в организме рыб. Исключения составили показатели крови севрюги из концентрации нефти 1 мг/л, у которых отмечали понижение количества лимфоцитов на 3,4 % и повышение нейтрофилов на 8,0 % относительно контроля, что возможно, связано с усилением защитных сил организма от внешних воздействий. Процентное соотношение моноцитов в крови рыб по отношению к контролю возрастало, что подтверждало мобилизацию защитных сил организма, однако данный показатель у рыб из максимальных концентраций нефти 100 мг/л и нефти 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л был на 36,1 % и 21,7 % соответственно ниже контроля. Количество эозинофилов в периферической крови в сравнении с контролем в вариантах опыта нефти 1 мг/л и 10 нефти мг/л + ДЭА 10 мг/л увеличилось на 7,5 % и 15,5 % соответственно. В других концентрациях отмечали эозинофилопению (р<0,05). Полученные нами данные согласуются с результатами исследований ряда других авторов (Шлейфер и др., 1989; Федорова и др., 1998; Каниева, 2002,2004).

Таким образом, на фоне снижения частоты дыхания, уровня гемоглобина и процента нейтрофилов зафиксировано повышение числа агранулоцитов - лимфоцитов и моноцитов, за исключением некоторых вариантов опыта, что, вероятно, явилось показателями сопротивляемости организма к сложившимся условиям среды.

4.2. Влияние нефти н комплекса нефти с ДЭА на биохимические показатели рыб

Под воздействием нефти (1; 10; 100 мг/л) обнаружено снижение общего белка в сыворотке крови молоди севрюги на 12,60 %; 27,59 %; 52,05 % соответственно по отношению к контролю. Комплексное влияние на молодь нефти и ДЭА в вышеуказанных концентрациях приводило также к уменьшению концентраций общего сывороточного белка на 39,27 %; 38,79 %; 58,14 % соответственно по сравнению с контрольными вариантами. При этом во всех вариантах опыта относительно контроля различия статистически достоверны (р<0,05). При сравнении влияния растворов нефти и комбинированного действия нефти с ДЭА в одинаковых концентрациях (I и II; III и IV) установлено, что более угнетающее воздействие на организм севрюги оказывают последние, о чем свидетельствует снижение уровня белка в сыворотке крови на 30,51 %; 15,48 % соответственно. Сильная отрицательная корреляция (г=-0,81) между показателями гемоглобина и общего сывороточного белка крови молоди севрюги, подвергшейся влиянию раствора нефти 10 мг/л, возможно, свидетельствовала о проявлении резистентности рыб к влиянию данной концентрации.

С понижением содержания общего сывороточного белка уменьшался и уровень КСБ, что служило доказательством истощения белковых ресурсов в организме рыб под влиянием токсикантов. Значение КСБ у рыб, подвергшихся влиянию нефти 100 мг/л, было на одном уровне с контролем, что, возможно, явилось реакцией биохимической резистентности организма рыб к максимальной концентрации токсиканта.

При воздействии токсических веществ на севрюгу содержание общего белка в мышцах опытных рыб снизилось от 29,87 % до 51,29 % по отношению к контролю (р<0,05). При этом значительные изменения зафиксированы у молоди, подвергшейся влиянию нефти 10 мг/л и 100 мг/л (рис.2).

Таким образом, уровень общего белка сыворотки крови молоди севрюги находился в прямой зависимости от концентрации и от совместного воздействия токсикантов. Установлено, мышечные белки рыб более стабильны, чем сывороточные, но и они претерпевали количественные изменения при нарушении условий их обитания. Полученные результаты согласуются с литературными данными других исследователей (Курбанова и др., 2003; Каниева, 2004).

4.3. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на морфотипы гомогенатов мышечной ткани севрюги

Изменения уровня общего белка в организме рыб непосредственно связаны с отклонениями кристаллизации гомогенатов их органов и тканей (Каниева, 2004).

Анализ состояния гомогенатов мышц молоди севрюги показал, что с увеличением концентрации нефти повышался процент цветных текстур, и только при воздействии 10 мг/л на рыб наблюдалась обратная картина, что возможно, свидетельствовало о степени резистентности организма к данной концентрации токсиканта. При этом отмечена зависимость проявления цветности в гомогенатах мышц рыб, подвергшихся влиянию нефти, и аморфизация текстур - комбинированному воздействию нефти и ДЭА (рис.2).

50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 - Ь

1 |

| I И

вШ

ш Ш

Контроль В о нефть 1 мг/л к< о» ф о нефть 1 мг/л + ь ДЭА 1 мг/л нефть 10 мг/л □ Л нефть 10 мг/л 5 + Г ДЭА 10 мг/л 5 г 0 тэ 1 ¡Й нефть 100 мг/л 0" * I нефть 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л

Рис. 2. Концентрация общего белка и количество цветных структур в мышечной ткани молоди севрюги под воздействием токсикантов

Таким образом, под влиянием различных концентраций нефти и комплекса нефти с ДЭА характер физиолого-биохимических и морфологических показателей организма молоди севрюги неоднозначный. На фоне снижения концентрации гемоглобина происходило уменьшение уровня общего белка в сыворотке крови у опытных рыб по отношению к контролю. Влияние нефти и комбинированное воздействие нефти с ДЭА на севрюгу приводило к процентному изменению клеток белой крови, что выражалось в виде увеличения лимфоцитов и снижения нейтрофилов. На фоне уменьшения уровня общего белка в мышцах усиливались цветность и аморфизация структур в их гомогенатах. Несомненно, влияние исследуемых токсикантов на молодь севрюги в зависимости от концентрации приводило к расходу всех компенсаторных резервов и возможностей организма, что явилось одной из причин замедления роста, развития и гибели рыб.

Глава V. Морфо-физиологические особенности сеголетков стерляди под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти с ДЭА

5.1. Влияние нефти и комбинированное воздействие нефти с ДЭА на физиологические показатели сеголетков стерляди

В настоящей главе представлен анализ влияния нефти и комплекса нефти с ДЭА на более старшие возрастные группы рыб - сеголетков стерляди.

Все показатели отбирались на 30 и 60 сутки эксперимента, однако результаты исследований во II и V вариантах опыта к 60-ти суткам отсутствовали, т.к. отход посадочного материала был зарегистрирован еще до 30-ти суток. Полученные результаты выживаемости сеголетков стерляди в II и V вариантах вызывали некоторые сомнения, эксперименты с данными концентрациями проводили в течение трех лет (2005-2007 гг.). Результаты выживаемости рыб повторных опытов были схожи, как во временных рамках, так и в процентном отношении. В остальных вариантах опыта гибель особей была зарегистрирована на 60-е сутки.

В опытных вариантах к концу эксперимента отмечено снижение массы стерляди (0+) в среднем до 11 г. и отставание в росте до 3,4 см по сравнению с контрольными рыбами.

Уровень гемоглобина в крови рыб, содержавшихся в течение 30 суток в растворах как нефти, так и комплекса нефти и ДЭА в концентрациях 1 мг/л, 10 мг/л и 100 мг/л снизился на 13,0 %; 68,0 % и 71,7 % и на 75,3 %; 10,6 % и 71,2 % относительно контроля соответственно (р< 0,05). Концентрация гемоглобина в крови опытных рыб после 60-ти суточной экспозиции как по отношению к контролю, так и относительно 30-ти суток опыта имела однонаправленный характер — к снижению (табл. 1).

Микроскопические исследования мазков крови позволили установить у рыб из опытных групп на фоне повышения лимфоцитов и моноцитов снижение общего количества нейтрофилов, эозинофилов.

5.2. Изменение биохимических показателей сеголетков стерляди под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА

Воздействие нефти (1; 10; 100 мг/л) на стерлядь после 30-ти суточной экспозиции выявило снижение среднего уровня общего сывороточного белка на 31,0 %; 50,4 %; 55,9 % относительно контроля соответственно. Комплексное влияние на молодь нефти и ДЭА в аналогичных концентрациях вызвало также уменьшение содержания белка в сыворотке крови на 50,4 %; 30,39 %; 52,2 % соответственно, по отношению к контролю. В конце эксперимента (60 суток) выявлена разнонаправленность характера данного показателя относительно первой экспозиции. Так у рыб, содержавшихся в комплексных растворах нефти с ДЭА, наблюдалась тенденция к снижению, а в растворах нефти - к повышению. По отношению к контролю при 60-ти суточной экспозиции концентрация сывороточного белка также снижалась, и была в прямой

зависимости от дозы токсикантов как в растворах нефти, так и в комплексах нефти с ДЭА. Во всех вариантах опыта по отношению к контролю, как на 30-е, так и на 60-е сутки эксперимента различия статистически достоверны (р< 0,05) (табл.1).

Таблица 1

Изменение некоторых биохимических показателей крови сеголетков стерляди под воздействием токсикантов

Вариант опыта Показатели

Гемоглобин, г/л Общий белок в сыворотке крови, г/л

30 суток 60 суток 30 суток 60 суток

Контроль 66,0±0,58 58,00±1,52 40,90±1,57 39,60±0,82

I нефть 1 мг/л 57,3±1,45* 27,33±1,45* 28,24±4,08* 30,65±3,08*

II нефть 1 мг/л + ДЭА 1 мг/л 16,3±0,88* - 20,27±0,97* -

П1 нефть 10 мг/л 21,0±0,58* 15,67±2,03* 20,27±1,76* 29,94±0,71*

IV нефть 10 мг/л + ДЭА 10 мг/л 59,0±2,08* 25,00±1,15* 28,47±1,30* 23,10±1,15*

V нефть 100 мг/л" 18,7±0,88* - 18,02±1,27* -

VI нефть 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л 19,0±1,15* 10,0Ш:2,31* 19,55±2,38* 15,70±2,12*

Примечание:*величины, достоверно отличающиеся от соответствующих значений в контроле (р < 0,05) **20 суток эксперимента

Уровень КСБ через 60 суток во всех вариантах опыта был выше (в 1,340,0 раз), чем при 30-ти суточной экспозиции относительно контроля.

Содержание среднего уровня общего белка в мышцах сеголетков стерляди на 30-е сутки эксперимента снизилось относительно контроля на 45,7 % в варианте II и на 3,9 % и 3,5 % в вариантах I и III соответственно. Во всех остальных случаях наблюдалась обратная динамика данного показателя.

Продолжительное воздействие токсикантов (60 суток) как по отношению к контролю в данный период экспозиции, так и по отношению к 30-ти суткам вызывало снижение уровня тканевого белка у стерляди в IV, VI вариантах, и незначительное его повышение в I и III вариантах опыта. Снижение содержания общего белка в мышечной ткани молоди стерляди при хроническом загрязнении может являться следствием процессов распада и использования белков для активации защитных реакций организма, тогда как повышение данного показателя, вероятно, связано с усилением синтеза различных белков.

Результаты наших исследований показали, что на 30-е сутки эксперимента в мышцах рыб, находившихся в растворах токсикантов, уровень МДА был выше контрольного варианта от 2,6 до 4,5 раза, за исключением этого показателя в мышцах рыб из раствора нефти 10 мг/л. В прямой зависимости от концентрации токсикантов возрастало количество МДА. Совместное воздействие токсикантов оказывало более усугубляющее действие на рыб, что, вероятно, свидетельствовало о нарушении структуры мембран клеток мышц при интоксикации. На 60-е сутки эксперимента уровень МДА в мышцах рыб был выше контроля только в вариантах I и VI соответственно в 2,4 и 2,0 раза (табл.2).

Таблица 2

Изменение уровня МДА (нмоль) в мышцах сеголетков стерляди под воздействием токсикантов

Вариант опыта Экспозиция

30 суток 60 суток

Контроль 0,73±0,03 0,91±0,12

I нефть 1 мг/л 1,93±0,04* 2,22±0,18*

II нефть 1 мг/л + ДЭА 1 мг/л 2,01±0,35* -

III 10 мг/л нефти 0,68±0,06 0,10±0,01*

IV нефть 10 мг/л + ДЭА 10 мг/л 2,56±0,10* 0,71±0,02*

V нефть 100 мг/л 3,12±0,22* -

VI нефть 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л 3,31±0,12* 1,80±0,06*

5.3. Морфологические показатели сеголетков стерляди под влиянием токсикантов

В гомогенатах мышц сеголетков стерляди под влиянием токсических веществ отмечали высокий процент цветности структур, что вероятно, объяснялось аккумулирующими способностями данной ткани. В мышечной ткани сеголетков стерляди с понижением концентрации общего белка возрастал процент цветности в ее гомогенатах, что аналогично данным предыдущего эксперимента с молодью севрюги. Следует отметить, что в зависимости от длительности воздействия нефти (от 30 до 60 суток) в концентрациях 1 мг/л и 10 мг/л зарегистрировано снижение количества цветных текстур в гомогенатах мышц рыб на 14,1 % и 22,7 % и незначительное увеличение уровня общего белка соответственно, что, вероятно, свидетельствовало о проявлении адаптационных реакций данной ткани.

В печени воздействие исследуемых химических веществ на рыб выражалось не только в проявлении цветности, но также в наличии деформированных атипичных текстур гомогенатов. После 60-ти суток эксперимента отмечено появление цветных текстур в гомогенатах печени стерляди, подвергшейся влиянию нефти 1 мг/л, и значительное их увеличение (в 1,5-4 раза) у рыб в III, IV и VI вариантах относительно 30-ти суточной экспозиции. Влияние химических соединений на сеголетков выявило изменение структурирования гомогенатов печени, что сопровождалось снижением уровней общего белка и КСБ в сыворотке крови.

Гистологическое исследование мышц опытных рыб выявило истончение концевых отделов волокон, отсутствие поперечной исчерченности, диапедез, жировое замещение, некроз. Анализ печени стерляди показал нарушение балочной структуры, лизис цитоплазмы в клетках, выраженный фиброз тканей, явления воспаления, дистрофии, некроза.

Полученные данные морфологических исследований, как по особенностям кристаллизации текстур гомогенатов, так и по гистологическому строению мышц и печени, вероятно, объясняли отход сеголетков в концентрации нефти 100 мг/л и нефти 1 мг/л + ДЭА 1 мг/л, где регистрировались максимальный процент цветности морфотипов, значительная часть деформированных кристаллов и высокая степень тяжести структурных изменений, подтверждением чего были низкие уровни гемоглобина, сывороточного белка в крови, общего белка в мышечной ткани перед гибелью рыб.

Применительно к настоящей работе, динамика всех морфо-физиологических показателей у сеголетков стерляди при интоксикации завершалась расстройством двигательно-пищевых реакций, отражающих предлетальное состояние рыб, которое можно рассматривать как фазу истощения обеспечивающих гомеостаз организма.

Глава VI. Теоретические основы и способ расчета промыслового возврата и ущерба естественному воспроизводству осетровых рыб при воздействии нефти и комплекса нефти с ДЭА

В результате проведенного анализа морфо-физиологических изменений у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА в диссертационной работе был рассчитан промысловый возврат и ущерб рыбным запасам Волго-Каспийского региона от исследуемых концентраций токсикантов на примере икры севрюги.

Данный способ (Патент № 2334230, зарегистрирован в Государственном реестре изобретений РФ 2008 г. Авторы: Каниева Н.А., Иванов В.П., Козлова Н.В.) позволяет рассчитывать величину промышленного возврата в условиях загрязнения водоема химическими реагентами и определять нанесенный ущерб, когда загрязнению подвергаются рыбы на ранних стадиях развития.

Выводы

1. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА приводит к замедлению сроков вылупления, роста предличинок, угнетения сердечного ритма, ослаблению двигательно-пшцевых реакций, повышению количества уродливо развивающихся личинок и в итоге - снижению выживаемости особей. Икра осетровых рыб, заложенная в растворы токсикантов, развивается с меньшим отходом, чем вылупившиеся личинки. Наиболее чувствительны к воздействию химических веществ - личиночные стадии рыб.

2. Выявлены видовые особенности устойчивости рыб к воздействию различных концентраций нефти и совместному влиянию нефти с ДЭА. Результаты исследований кристаллизации гомогенатов личинок осетровых рыб определили видоспецифичность стерляди, что выражается в проявлении высокой степени цветности текстур. Однако при воздействии нефти в концентрации 10 мг/л у личинок стерляди выявлены резистентные возможности организма, о чем свидетельствует отсутствие цветных кристаллов в их гомогенатах. Процент атипичных цветных текстур у севрюги и стерляди под воздействием нефти 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л ниже, чем под влиянием концентраций нефти 100 мг/л, что служит доказательством проявления адсорбирующих свойств ДЭА в максимальной дозе по отношению к нефти.

особенностью влияния нефти на молодь севрюги является наличие цветных кристаллов, а совместного воздействия нефти с ДЭА - деформированных текстур в гомогенатах мышечной ткани.

4. Резистентность организма молоди севрюги выражается в коллоидоустойчивости сывороточных белков к воздействию максимальной концентрации нефти (100 мг/л), а также сильной отрицательной (-0,81) корреляции между уровнями гемоглобина и общего сывороточного белка в крови рыб к влиянию нефти в концентрации 10 мг/л.

5. Под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти с ДЭА в организме сеголетков стерляди происходит ухудшение гематологических показателей, белкового обмена. Увеличение уровня МДА в мышечной ткани рыб на 30-е сутки эксперимента относительно контроля, является доказательством угнетения антиоксидантной способности организма в ответ на стрессорное воздействие токсических веществ. Выявлены прогрессирующие морфологические изменения в мышцах и печени рыб как по сравнению с контрольными рыбами, так и в зависимости от состава, концентрации и времени воздействия токсикантов.

6. Концентрации нефти 100 мг/л и нефти 1 мг/л + ДЭА 1 мг/л являются наиболее токсичными для сеголетков стерляди, под воздействием которых происходит значительное снижение уровней гемоглобина, сывороточного белка, общего белка в мышечной ткани, а также нарушение структурной кристаллизации в гомогенатах печени и мышц с максимальным процентом цветности морфотипов, значительной деформацией текстур и их гистологического строения с высокой степенью тяжести тканевых изменений перед их гибелью.

7. Критерии физиологической толерантности сеголетков стерляди к длительному воздействию токсикантов проявляются увеличением уровня КСБ и общего количества белка в сыворотке крови, а также снижением количества МДА в мышечной ткани рыб. Резистентность сеголетков обеспечивается изменениями анизотропных структур в гомогенатах мышц и печени, проявляющихся в виде наличия вторичных морфотипов. Появление признаков регенерации в печени объясняется компенсаторными возможностями организма рыб. По морфо-физиологическим показателям установлена наиболее выраженная устойчивость сеголетков стерляди к нефти в концентрации 10 мг/л. В случаях, когда комбинированное воздействие нефти с ДЭА на рыб вызывает меньшую степень физиолого-биохимических и морфологических нарушений их организма по сравнению с влиянием аналогичных концентраций нефти, вероятно, проявляются адсорбирующие свойства ДЭА.

8. Рассчитан возможный промысловый возврат и ущерб рыбному хозяйству Волго-Каспийского бассейна от гибели икры на примере севрюги от воздействия химических реагентов.

Практические рекомендации

На основании выполненных исследований вскрыты морфо-физиологические изменения в организме осетровых рыб на ранних стадиях развития, рекомендуемые в качестве критериев токсичности и индикаторов токсического эффекта при биотестировании загрязненной естественной водной среды.

Обнаруженные физиологические особенности действия нефти и комплекса нефти с ДЭА могут быть представлены для уточнения ПДК химических веществ, не имеющих на сегодняшний день нормативных показателей в биогеохимических условиях Волго-Каспийского бассейна. Предлагаются материалы для дальнейшей специальной разработки установления пределов физиологической резистентности осетровых рыб на ранних стадиях развития.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Козлова, Н.В. Изменение морфологической картины севрюги на ранних этапах развития под действием химических веществ органического ряда [Текст] / Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Актуальные проблемы современных аграрных технологий: материалы Российской научной конф. студентов и молодых ученых с междунар. уч., г. Астрахань, Россия апрель, 2006,- Астрахань: Астраханский университет, 2006 - С.118-120.

2. Козлова, Н.В. Влияние химических соединений на гематологические показатели сеголетков стерляди [Текст] / Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Проблемы сохранения и рационального использования биоразнообразия Прикаспия и сопредельных регирнов: материалы IV Междунар. научно-практич. конф., Элиста, сентябрь, 2006. - Элиста: Калмыцкий Государственный Университет, 2006.- С.77-78.

3. Козлова, Н.В. Особенности изменения коллоидной стабильности белков рыб при интоксикации [Текст] / Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Проблемы ресурсов сберегающего производства и переработки экологически-чистой продукции сельского хозяйства: материалы Рос. научн. конф.

студентов и молодых ученых с междунар. уч., сентябрь, 2006. - Астрахань: Астраханский университет, 2006.-С.81-82.

4. Козлова, Н.В. Морфологический анализ биологических жидкостей личинок севрюги при интоксикации [Текст] / Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Современные проблемы адаптации и биоразнообразия: Тр. Междунар. научн. конф. - Махачкала: Даггосуниверситет, 2006.-C.31-33.

5. Козлова, Н.В. Перекисное окисление липидов в мышцах осетровых рыб под влиянием химических веществ [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Природопользование и охрана окружающей среды: материалы III научн. конф. Российской Академии Естествознания, Греция, Лутраки, 1-8 октября 2006. Фундаментальные исследования № 9, М: РАЕ, 2007- с.43.

6. *Козлова, Н.В. Влияние некоторых токсикантов на организм сеголетков стерляди [Текст] /Н.В.Козлова// - Вестник АГТУ № 5 (40). -Астрахань, АГТУ. - 2007.-е. 252-257. Принято к публикации 18.12.2006.

7. *Козлова, Н.В. Воздействие каспийской нефти на ранние этапы развития севрюги [Текст] / Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Вестник АГТУ № 1 (36). - Астрахань: АГТУ. - 2007. - с. 174-177. Принято к публикации 19.12.2006.

8. Козлова, Н.В. Характеристика биологической жидкости личинок севрюги под воздействием некоторых химических реагентов [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева И Экология и рациональное природопользование: материалы III научн. конф. Российской Академии, Египет, Хургада, 21-28 февраля, 2007 г. Естествознания. Успехи современного естествознания № 2. -М: РАЕ, 2007 - с.73.

9. Козлова, Н.В. Морфологические изменения в печени сеголетков стерляди под влиянием токсикантов. [Электронный ресурс] / Н.В. Козлова // Международный научно-практический семинар молодых ученых и студентов (27-30 марта 2007 г.) «Природные ресурсы Каспийского моря и устойчивое развитие прибрежных территорий»: тез. докл. / Астрахань: Изд-во АГТУ, 2007. С.0-0. Режим доступа: 1 CD-диск. - № гос. регистрации 0320701607 от 08.08.2007 г.

10. Козлова, Н.В. Биохимическая характеристика некоторых показателей белкового обмена на ранних этапах онтогенеза русского осетра в искусственных условиях [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата: материалы и доклады Междунар. симпозиума, г. Астрахань, 16-18 апреля 2007 г.- Астрахань: АГТУ, 2007. - с. 469-470.

11. Козлова, Н.В. Оценка качества потомства русского осетра по некоторым биохимическим показателям [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Актуальные проблемы современных аграрных технологий: материалы Второй Всерос. научн. конф. студентов и молодых ученых с междунар. участием, г.

Астрахань, 24-25 апреля, 2007. - Астрахань: ООО КПЦ «ПолиграфКом», 2007.- с.206-209.

12. Козлова, Н.В. Информативность морфологического анализа биологических жидкостей осетровых рыб при оценке уровня химического загрязнения водной среды [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Экология биосистем: проблемы изучения, индикации и прогнозирования: материалы Международной научн. - практич. конф., посвящ. 75-летию АТУ, 20-25 августа 2007 г. ч. 2-Астрахань: Астраханский университет, 2007- с. 146-147.

13. Козлова, Н.В. Структурно-функциональная организация осетровых рыб под воздействием каспийской нефти [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Состояние, охрана, воспроизводство и устойчивое использование биологических ресурсов внутренних водоемов: материалы Междунар. научно-практич. конф., г. Волгоград, 13-17 августа 2007 г. - Волгоград: Волгоградское отделение ФГНУ ГосНИОРХ». - 2007. - с.157-159.

14. Козлова, Н.В. Морфоструктура скелетных мышц стерляди под влиянием токсикантов [Текст] / Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Проблемы изучения, сохранения и восстановления водных биологических ресурсов в XXI веке: Материалы докл. межд. научно-практич. конф., г. Астрахань, Россия 16-18 октября 2007 г.-Астрахань: КаспНИРХ, 2007. - С. 304-306.

15. Козлова, Н.В. Воздействие токсикантов на функциональное состояние молоди стерляди [Текст] /Н.В. Козлова// Экологические проблемы. Взгляд в будущее: сб. тр.У междунар. науч. - практич. конф., 7-10 сентября 2008 г., -Ростов-на-Дону, 2008. С. 241-245.

16. Каниева, H.A. Экологические особенности гидробионтов Каспийского моря в связи с освоением нефтегазовых месторождений [Текст] / H.A. Каниева, Н.В.Козлова, Д.Р. Дубина// Биогеохимия в народном хозяйстве: Фундаментальные основы ноосферных технологий: Тезисы VI Междунар. биогеохимической школе, г. Астрахань, 22-25 сентября 2008 г. - Астрахань: АГТУ, 2008. - С.58.

17. Козлова, Н.В. Морфо-физиологические особенности стерляди на ранних этапах развития под влиянием токсикантов [Текст] /Н.В.Козлова, H.A. Каниева// Комплексный подход к проблеме сохранения и восстановления биоресурсов Каспийского бассейна: материалы Междунар. научн. - практич. конф., 13-16 октября 2008. - Астрахань: КаспНИРХ, 2008. - С.227-231.

18. Козлова, Н.В. Токсическое воздействие сырой каспийской нефти и диэтаноламина на организм молоди севрюги [Текст] / Н.В. Козлова// Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы: материалы III Всерос. конф. по водной токсикологии, посвящ. памяти Б.А. Флерова. — 11-16 ноября 2008 г. Борок: Институт биологии внутренних вод РАН, 2008. - С. 6166.

19. Способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству рыбы при воздействии химических реагентов: патент РФ /H.A. Каниева, В.П. Иванов, Н.В. Козлова. - АГТУ. - .№ 2334230II Изобретение. - 2008. - 4 с. Примечание: *обозначены работы, опубликованные в журналах, рекомендуемых ВАК.

Подписано в печать «14» мая 2009 г. Тираж 100 экз. Заказ № 364. Отпечатано в типографии изд. ФГОУ ВПО «Астраханского государственного технического университета» 414025, г. Астрахань, ул. Татищева, 16

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Козлова, Наталья Викторовна

Введение

Глава I. Литературный обзор

1.1. Нефтяное загрязнение природных водоемов

1.2. Проблемы влияния нефти и нефтепродуктов на биоресурсы Каспийского моря 1 '

1.3. Экспериментальные данные изучения степени воздействия нефти и ДЭА на физиолого-биохимические и морфологические показатели рыб на ранних стадиях развития

Глава II. Материал и методы исследований

2.1. Экспериментальные исследования

2.2. Гидрохимические исследования

2.3. Физиологические исследования

2.4. Биохимические исследования

2.5. Морфологические исследования

2.6. Ихтиологические исследования

2.7. Статистические исследования 45 Результаты собственных исследований и их обсуждение

Глава III. Особенности развития осетровых рыб в раннем онтогенезе под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти с диэтаноламином

3.1. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на морфо-физиологические показатели развивающейся севрюги

3.2. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на морфо-физиологические показатели развивающейся стерляди

Глава IV. Влияние нефти и комбинированное воздействие нефти с ДЭА на молодь севрюги

4.1. Изменение физиологических показателей севрюги под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА

4.2. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на биохимические показатели рыб

4.3. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА на морфотипы гомогенатов мышечной ткани севрюги

5.2. Изменение биохимических показателей сеголетков стерляди под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА

5.3. Морфологические показатели сеголетков стерляди под влиянием токсикантов

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфо-физиологические изменения у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием токсических веществ"

Актуальность темы исследования. В последнее время наибольшую опасность для рыбохозяйственных водоемов представляет нефтяное загрязнение (Касымов,1994; Патин, 1979; 2001; Иванов, Сокольский, 2000; Абдурахманов, Ахмедова, 2005; Каниева, Воробьев, 2006; Палатников, и др., 2007).

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи:

- выявить морфо-физиологические изменения севрюги и стерляди в раннем онтогенезе и их видовые особенности под влиянием нефти и комбинированным воздействием нефти и ДЭА;

- оценить влияние различных концентраций нефти и комплекса нефти с ДЭА на физиолого-биохимические и морфологические показатели молоди севрюги;

- изучить изменения функциональных возможностей организма сеголетков стерляди под воздействием различных концентраций токсикантов и экспозиций;

- оценить морфологическое состояние мышц и печени сеголетков стерляди под воздействием нефти и комплекса нефти с ДЭА;

- рассчитать промысловый возврат и ущерб воспроизводству севрюги от влияния токсических веществ.

Научная новизна. Впервые исследовано комбинированное воздействие нефти и диэтаноламина на икру, личинки, молодь севрюги и стерляди. Вскрыты морфо-физиологические особенности резистентности осетровых рыб на ранних стадиях развития к различным концентрациям нефти и комплекса нефти с ДЭА, в основе которых лежит изменение ряда показателей метаболизма. Впервые изучено воздействие исследуемых веществ на анизотропные структуры гомогенатов личинок, органов и тканей молоди рыб. Разработан способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству рыбы при воздействии химических реагентов.

Практическая значимость. Обнаружены морфо-физиологические особенности резистентности личинок, молоди севрюги и стерляди к воздействию нефти и комбинированному влиянию нефти с ДЭА могут быть использованы для дальнейшей специальной разработки и установления пределов физиологической пластичности и адаптации устойчивых и малоустойчивых особей в популяции различных видов ихтиофауны.

Предложен способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству рыбы при воздействии химических реагентов, который может использоваться как при естественном воспроизводстве, так и при промышленном рыбоводстве. Получены (в цифровом выражении) материалы величины промыслового возврата и ущерба воспроизводству севрюги в р.Волге от влияния нефти и комбинированного воздействия нефти и ДЭА.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Установлены морфо-физиологические нарушения организма севрюги и стерляди на ранних этапах развития (икра, личинки, молодь) под влиянием нефти и комплекса нефти с ДЭА.

2. Выявлены резистентные возможности организма исследуемых осетровых рыб при воздействии химических соединений, обеспечивающиеся спектром физиолого-биохимических реакций белкового обмена, перекисного окисления липидов, морфологических изменений органов и тканей.

3. Рассчитан возможный промысловый возврат и ущерб рыбному хозяйству Волго-Каспийского бассейна от гибели икры севрюги под воздействием нефти и комбинированным влиянием нефти с ДЭА.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Российской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы современных аграрных технологий» (Астрахань, 12-13 апреля 2006 г.), на IV Международной научно-практической конференции «Проблемы сохранения и рационального использования биоразнообразия Прикаспия и сопредельных регионов» (Элиста, сентябрь 2006 г.), Российской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Проблемы ресурсов сберегающего производства и переработки экологически-чистой продукции сельского хозяйства» (Астрахань, 26-27 сентября 2006 г.), III научной конференции Российской Академии Естествознания (РАЕ) «Природопользование и охрана окружающей среды» (Греция, Лутраки, 1-8 октября 2006 г.), Международной научной конференции «Современные проблемы адаптации и биоразнообразия» (Махачкала, 24-27 сентября 2006 г.), III научной конференции РАЕ «Экология и рациональное природопользование» (Египет, Хургада, 21-28 февраля, 2007 г.), Международном научно-практическом семинаре молодых ученых и студентов «Природные ресурсы Каспийского моря и устойчивое развитие прибрежных территорий» (Астрахань, 27-30 марта 2007 г.), Международном симпозиуме «Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата» (Астрахань, 16-18 апреля 2007 г.), Второй Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы современных аграрных технологий» (Астрахань, 24-25 апреля 2007 г.), Международной научно-практической конференции «Экология биосистем: проблемы изучения, индикации и прогнозирования» (Астрахань, 20-25 августа 2007 г.), Международной научно-практической конференции «Состояние, охрана, воспроизводство и устойчивое использование биологических ресурсов внутренних водоемов» (Волгоград, 1317 августа 2007 г.), Международной научно-практической конференции «Проблемы изучения, сохранения и восстановления водных биологических ресурсов в XXI веке» (Астрахань, 16-18 октября 2007г.), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы охраны биоресурсов Волго-Каспийского бассейна: междисциплинарный подход», (Астрахань, 30-31 октября 2007 г.), V Международной научно - практической конференции «Экологические проблемы. Взгляд в будущее» (Ростов-на-Дону, 7-10 сентября 2008 г.), VI Международной биогеохимической школе «Биогеохимия в народном хозяйстве: Фундаментальные основы ноосферных технологий», (Астрахань, 22-25 сентября 2008 г.), Международной научно -практической конференции «Комплексный подход к проблеме сохранения и восстановления биоресурсов Каспийского бассейна», (Астрахань, 13-16 октября 2008 г.), III Всероссийской конференции по водной токсикологии, посвященной памяти Б.А. Флерова «Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы» (Борок, 11-16 ноября 2008 г.).

Материалы доложены и обсуждены на научно-технических конференциях профессорско-преподавательского состава АГТУ (Астрахань 2006 - 2009 гг.).

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 151 страницах. Состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложений. Список литературы содержит 224 источника, из них 40 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 25 рисунками и 11 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Ихтиология", Козлова, Наталья Викторовна

123 Выводы

1. Влияние нефти и комплекса нефти с ДЭА приводит к угнетению физиологических возможностей организма севрюги и стерляди в раннем онтогенезе, вызывая замедление сроков вылупления, роста предличинок, угнетение сердечного ритма, ослабление двигательно-пищевых реакций, повышение количества уродливо развивающихся личинок, что в итоге приводит к снижению выживаемости.

2. Выявлена видоспецифичность стерляди по результатам исследований кристаллизации гомогенатов личинок, что выражается в проявлении высокой степени цветности текстур. Отсутствие цветных кристаллов в гомогенатах личинок стерляди при воздействии нефти в концентрации 10 мг/л свидетельствует о резистентных возможностях организма. Процент атипичных цветных текстур у севрюги и стерляди под воздействием нефти 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л ниже, чем под влиянием концентраций нефти 100 мг/л, что служит доказательством проявления адсорбирующих- свойств ДЭА в максимальной дозе по отношению к нефти.

3. Воздействие нефти и комплекса нефти с ДЭА в исследуемых концентрациях приводит к выраженным изменениям физиолого-биохимических показателей молоди севрюги. На уровни гемоглобина крови и общего сывороточного белка более угнетающее влияние оказывают комплексы нефть с ДЭА в зависимости от увеличения их концентраций. Отличительной особенностью влияния нефти на молодь севрюги является наличие цветных кристаллов, а совместного воздействия нефти с ДЭА - деформированных текстур в гомогенатах мышечной ткани.

4. Резистентность организма молоди севрюги . выражается в коллоидоустойчивости сывороточных белков к воздействию максимальной концентрации нефти (100 мг/л), а также сильной отрицательной (-0,81) корреляции между уровнями гемоглобина и общего сывороточного белка в крови рыб к влиянию нефти в концентрации 10 мг/л.

1245. Под влиянием нефти и< комбинированным воздействием нефти с- ДЭА в> организме сеголетков стерляди происходит ухудшение ' гематологических показателей, белкового обмена. Увеличение уровня МДА в мышечной- ткани рыб на 30-е- сутки эксперимента относительно контроля является доказательством:угнетения* антиоксидантной- способности организма в ответ на стрессорное воздействие токсических веществ: Выявлены прогрессирующие морфологические изменения в мышцах и печени рыб как по сравнению с контрольными, рыбами; так и в- зависимости от состава; концентрации и времени воз действ иятоксикантов.

6. Концентрации, нефти 100*' мг/л и нефти I мг/л + ДЭА- 1 мг/л являются наиболее токсичными для« сеголетков, стерляди, под» воздействием которых происходит значительное снижение уровней гемоглобина; сывороточного белка,' общего* белка вг мышечной' ткани, а также нарушение- структурной кристаллизации* в' гомогенатах печени № мышц- с максимальным процентом цветности морфотипов, значительной деформацией* текстур* и их гистологического строения, с высокой- степенью« тяжести тканевых изменений перед их гибелью.

7. Критерии, физиологической- .толерантности сеголетков стерляди к длительному воздействию токсикантов проявляются-увеличением уровня КСБ и- общего количества« белка в- сыворотке крови; а также снижением-, количества МДА'- в мышечной ткани рыб: Резистентность сеголетков обеспечивается появлением" вторичных морфотипов. Наиболее выраженная, устойчивость сеголетков стерляди отмечена к нефти в концентрации 10 мг/л. В"- случаях, когда комбинированное воздействие нефти с ДЭА на'рыб* вызывает меньшую степень физиолого-биохимических и морфологических нарушений их организма относительно воздействия аналогичных концентраций нефти, проявляются адсорбирующие свойства ДЭА.

8. Установлено, что промысловый возврат и ущерб соответственно от гибели икры севрюги в результате загрязнения Волго-Каспийского бассейна могут составить под воздействием: нефти 1 мг/л - 49,910 тыс. экз. и 14,490 тыс. экз.; нефти 1 мг/л + ДЭА 1 мг/л - 51,520 тыс. экз. и 12,880 тыс. экз.; нефти 10 мг/л -47,012 тыс. экз. и 17,388 тыс. экз.; нефти 10 мг/л + ДЭА 10 мг/л - 48,622 тыс. экз. и 15,778 тыс. экз.; нефти 100 мг/л - 32,844 тыс. экз. и 31,556 тыс. экз.; нефти 100 мг/л + ДЭА 100 мг/л - 30,912 тыс. экз. и 33,488 тыс. экз.

126

Практические рекомендации

Обнаруженные физиологические особенности действия нефти и комплекса нефти с ДЭА могут быть представлены для дальнейшей специальной разработки установления пределов физиологической резистентности осетровых рыб на ранних стадиях развития в биогеохимических условиях Волго-Каспийского бассейна.

127

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Козлова, Наталья Викторовна, Астрахань

1. Агаджанов, М.И. Перекисное окисление липидов в норме и патогенезе различных заболеваний Текст. // Сб. науч. тр. Ереванского мед. ин-та. -Ереван, 1988. 141 с.

2. Алтуфьев, Ю.В. Возможности оценки степени миопатии русского осетра Текст. /Ю.В. Алтуфьев // Экологические проблемы реки Урал и пути их решения. Гурьев, 1989.-С.З-4.

3. Алтуфьев, Ю.В. Гистопатология поперечнополосатой мышечной ткани и печени каспийских осетровых Текст. / Ю.В. Алтуфьев, A.A. Романов, H.H. Шевелева// Вопросы ихтиологии. 1992.-Т.32. — Вып.2. — С. 157-171.

4. Алтуфьев, Ю.В. Гистофизиологический и токсикологический аспекты проявления миопатии русского осетра Текст. // Ю.В. Алтуфьев., П.П. Гераскин, В.А. Мумжу // Тез. докл.VII Всесоюзной конференции. -Ярославль, 1989. С.8-10.

5. Алтуфьев, Ю.В. Морфофункциональное состояние мышечной ткани и печени молоди русского осетра и белуги в экспериментах по хронической интоксикации Текст. / Ю.В.Алтуфьев // Вопросы ихтиологии. 1994. - Т.34.1. С.135-138.

6. Алтуфьев, Ю.В. Печень каспийских осетровых в условиях антропогенного загрязнения среды Текст. //Ю.В. Алтуфьев // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов: Тез. докл. симпозиума. Д., 1990. — С. 3-5.

7. Алтухов, Ю.П. Генетические процессы в популяциях Текст. / Ю.П. Алтухов. М.: Наука, 1983. - 278с.

8. Артюхова, В. И. Особенности и пороги токсического воздействия нефтепродуктов на гидробионтов Каспийского моря Текст. / В. И. Артюхова,

9. B. Н. Носов // Теоретическая экология. М.: МГУ, 1987. - С. 70-80.

10. Афанасьева, Н. А. Состояние загрязнённости Каспийского моря на современных этапах Текст. / Н. А. Афанасьева, С. В. Кирьянов // Материалы Всесоюзного совещания по проблеме Каспийского моря. Гурьев, 1991- С. 31-36.

11. Аюпова, А.К. Системная организация сыворотки крови при лепре Текст.: автореф. дис. канд. биол. наук. / Аюпова А.К. Санкт-Петербург, 2001. - 22 с.

12. Беркелиев, Т. Главные экологические проблемы Каспийского моря / Т. Беркелиев// Вести ОЭС Электронный ресурс. — 2002 №2 (21). — Режим доступа: http://www.seu/ru/vesti/2002-02/69.htm. - Дата доступа: 12.03.2009.

13. Беспамятнов, Г.П. Предельно-допустимые концентрации химических веществ в окружающей среде Текст. / Г.П. Беспамятнов, Ю.А. Кротов Л.: Химия, 1985.-200 с.

14. Беспрозванный, Б.К. Куферовские клетки печени и некоторые морфологические варианты их системных реакций Текст. / Беспрозванный, Б.К. // Успехи гепатологии. 1980. - Вып. 8. - С. 21 - 31.

15. Бигон, М., Экология. Особи, популяции и сообщества Текст. / М. Бигон, Дж. Харпер, К.Таунсенд М.: Мир, 1989. -Т. 1. - 667 с.

16. Бузоверя, М.Э. Математический анализ структур твердой фазы биологических жидкостей Текст. / М.Э. Бузоверя, Н.И. Сальченков, Ю.П. Щербак // Геронтология и гериатрия. 2001. - Вып. 1. С.55-60.

17. Бурлакова, Е.Б. Роль липидов в процессе передачи информации в клетке Текст. // Биохимия липидов и их роль в обмене веществ М.: Наука, 1981.1. C.3-16.

18. Бутаев, A.M. Кинетические закономерности нефтяной интоксикации сеголетков русского осетра Текст. / A.M. Бутаев., А.Р. Исуев, У.Г. Магомедбеков, С.К. Монахов Махачкала: Вестник ДНЦ РАН.- 2001.- №9.-С.89-93.

19. Вещев, П.В. Анализ коэффициентов промыслового возврата севрюги Acipenseridae Текст. / П.В. Вещев, А.Ф. Власенко, Г.Ф. Довгопол // Вопросы ихтиологии. 1992. - Т.32. - №5. - С.78-83.

20. Вишневская, Е.К. Клетки синусоидных сосудов печени Текст. / Е.К. Вишневская // Морфология. 1993. - Т. 104. - №. 3-4. - С. 135-143.

21. Волкова, О.В. Основы* гистологии с гистологической техникой Текст. / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий М.: Медицина, 1989. - 234 с.

22. Волькештейн, М.В. Биофизика Текст. /- М.: Наука, 1988. 125 с.

23. Воробьев, В.И. Изменение метаболических реакций в- организме карпа при интоксикации нефтью Текст. / В.И. Воробьев, H.A. Каниева Саратов: Вестник СГАУ им. Н.И.Вавилова, 2003. - №3. - С.96-103.

24. Гераскин, П.П. Нарушение обмена веществ у русского осетра в современных условиях Волго-Каспия Текст. / П.П. Гераскин //Осетровое хозяйство водоемов СССР: краткие тез. научн.докл. предстоящему Всес. Совещанию, ноябрь 1989 г. -Астрахань, 1989. С. 60-62.

25. Гербильский, H.JI. Гистологический анализ переходов между ранними этапами онтогенеза у рыб Текст. // H.JI. Гербильский // Проблемы эмбриологии: материалы совещания эмбриологов JL, 1956.-С.8-12.

26. Герлах, С. А. Загрязнение морей. Диагноз и терапия Текст. / С. А. Герлах- JL: Гидрометиздат, 1985. 269 с.

27. Гинзбург, A.C. Развитие осетровых рыб Текст. / A.C. Гинзбург, Т.А. Детлаф М.: Наука, 1969. -134с.

28. Грант, В. Эволюционный процесс Текст. / В.Грант. — М.: Мир, 1991488 с.

29. Грушко, Я. М. Вредные органические соединения в промышленных выбросах в атмосферу. Справочник Текст. / Я. М. Грушко. JL: Химия, 1986.- 207 с.

30. Гусев, А.Т. Охрана рыбохозяйственных водоемов от загрязнений Текст. / А.Т. Гусев. М.: Пищевая промышленность, 1975. - 367 с.

31. Дарбре, А. Практическая химия белка Текст. /А. Дарбре. — М.: Мир, 1989. С.290-301.

32. Детлаф, Т.А. Зародышевое развитие осетровых рыб (севрюги, осетра и белуги) в связи с вопросами их разведения Текст. / Т.А. Детлаф, A.C. Гинзбург М.: АН СССР., 1954. - 213 с.

33. Дохолян, В.К. Влияние факторов среды на содержание гликогена в раннем онтогенезе рыб Текст. / В.К. Дохолян, Т.П. Ахмедова // Экологическая физиология и биохимия рыб: тез. докл VII Всесоюзн. конф. -1989. — Т.1. -С.119.

34. Дохолян, В.К. Нефтяное загрязнение и токсикология гидробионтов Каспия. Проблемы охраны морской среды Текст. / В.К. Дохолян -Калининград, 1977. — С.265.

35. Дьячков, В.И. Санитария и гигиена Текст. / В.И. Дьячков М., 1964. - С. 25-30.

36. Житенева, Л.Д., Атлас нормальных и патологически измененных клеток крови рыб Текст. / Т.Г. Полтавцева, O.A. Рудницкая.— Ростов-на-Дону, 1989. -112 с.

37. Журавлева, Г.Ф. Морфофункциональные основы адаптивной модификации осетровых при эндоэкологическом токсикозе Текст. / Г.Ф. Журавлева. Успехи современного естествознания. - 2003. - №3. — С.68.

38. Журавлева, Г.Ф. Проблема адаптивной модификации современных Каспийских осетровых (патоморфофункциональные исследования) Текст. / Г.Ф. Журавлева, Г.В. Земков. Успехи современного естествознания. - 2002.3. — С.28.

39. Иванов, В. П. Научные основы стратегии защиты биологических ресурсов Каспийского моря от нефтяного загрязнения Текст. / В. П.Иванов, А. Ф. Сокольский. Астрахань, 2000.-181 с.

40. Иванов, В.П. Биологические ресурсы Каспийского моря Текст. / В.П. Иванов — Астрахань, 2000. 196с.

41. Иванова, Н.Т. Атлас клеток крови рыб Текст. / HIT. Иванова М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. - С. 184.

42. Исследовать гидролого-гидрохимические и эколого-токсикологические условия формирования рыбных запасов в низовьях р. Волги и Каспийском море Текст.: отчет о НИР (годовой): КаспНИРХ; рук. Катунин Д.Н.; исполн. Егоров С.Н. Астрахань, 2009. С. 121-135.

43. Камаев, Е.В. Влияние природы аминоспиртов на коррозию стали в дистиллированной воде Текст. /Е.В. Камаев, A.B. Казаков, В.И. Михайлов,f В .Г. Скворцов// Химия. 2002. - 120 с.

44. Камшилов, И.М. Функциональные характеристики гемоглобинов проходных осетровых рыб Текст. / И.М. Камшилов // Вопросы ихтиологии. -2000.-Т. 40.- С. 832-841.

45. Каниева, H.A. Влияние диэтаноламина и токсикопротекторных свойств эпина на поведенческие и морфологические показатели личинок севрюги Текст. /H.A. Каниева, A.M. Тихомиров// Вопросы рыболовства. Т.З. №3 (11).-2002.- С. 522-533.

46. Каниева, Н:А. Влияние каспийской нефти на рыб Текст. / H.A. Каниева, В.И. Воробьев //-Астрахань: АГТУ, 2006. 180 с.

47. Каниева, H.A. Изменение некоторых показателей, дыхания и гликолиза в организме осетра и карпа под влиянием нефти Текст. / H.A. Каниева // Современные проблемы водной токсикологии: материалы докл. научн.-практ. конф — Борок, 2002. — С.45

48. Каниева, H.A. Морфо-функциональные нарушения у карповых и осетровых рыб Волго-Каспийского бассейна при действии токсических агентов на примере диэтаноламина Текст.: автореф. дис. канд. биол. наук. / Каниева Н. А., МГУ. М., 1992. - 24с.

49. Каниева, H.A. Особенности изменения белкового спектра сыворотки крови и скелетных мышц карпа в процессе интоксикации нефтью Текст. / H.A. Каниева // Вестник СГАУ. 2004. - №2. - С.3-6.

50. Каниева, H.A. Физиологические механизмы адаптации рыб к влиянию каспийской нефти Текст.: автореф. дис. доктора биол. наук. / Каниева Н. А.; АТУ. Астрахань, 2004. - 48 с.

51. Карапун, М.Ю. Влияние загрязнения нефтяной индустрии на окружающую среду Электронный ресурс. / М.Ю. Карапун //

52. Касимов, Р.Ю. Влияние нефти и нефтепродуктов на осетровых и других рыб Текст. / Р.Ю. Касимов, Ш.А. Рустамова // Тр. ЦНИОРХ. 1971. -Т.З.-С. 191-195.

53. Касимов, Р.Ю. Воздействие нефтяного загрязнения на физиолого-биохимические показатели жизнедеятельности белуги Текст. / Р.Ю. Касимов, В.И. Крючков, Р.Ю. Аббасов // Осетровое хозяйство водоемов СССР: сб.докл. Астрахань, 1989.-С. 131-133.

54. Касымов Р.Ю. О влиянии нефти на донных животных Каспийского моря Текст. /Р.Ю. Касымов, С.М. Грановский // Гидробиология. 1970. - №5. -С.96-99.

55. Касымов, А. Г. Биология современного Каспия Текст./ А. Г. Касымов, Р. М. Багиров. Баку, 1983.- 154с.

56. Касымов, А. Г. Каспийское море Текст. / А. Г. Касымов — Л.: Гидрометеоиздат, 1987. — 152 с.

57. Касымов, А. Г. Экология Каспийского озера Текст. / А. Г. Касымов. — Баку, 1994.-240 с.

58. Кирпичников, B.C. Генетические основы селекции рыб Текст. / B.C. Кирпичников- JL: Наука, 1979. -391с.

59. Кодыняк, И.П. Сравнительная устойчивость легких, почек и печени к гипоксии Текст. /И.П. Кодыняк, А.И. Абрамова //Проблемы патологии в эксперименте и клинике: Тр. Львовского мединститута. Львов, 1991. — С. 18-24.

60. Козлова, Н.В. Воздействие каспийской нефти на ранние этапы развития севрюги Текст. /Н.В.Козлова, H.A. Каниева // Вестник АГТУ № 1 (36). -Астрахань, АГТУ. 2007. - с. 174-177.

61. Кокуричева, М.П. О применении гистологического изучения органов и тканей рыб в водной токсикологии Текст. /М.П.Кокуричева// Влияние пестицидов и нефтепродуктов на водные организмы: изв. ГосНИОРХ. Т. 98. -Л., 1974. -С.112-120.

62. Комарова, Г.В. Курс лекций по дисциплине «Промысловая ихтиология»/ Г.В. Комарова, Астрахань: АГТУ, 2001.- Часть 1. - 101с.

63. Коржуев, H.A. Сравнительно-физиологическая характеристика крови и кроветворных органов рыб и водных млекопитающих Текст. /H.A. Коржуев, Т.Н. Глазова // Биология моря. Вып. 15. — Киев: Наукова думка, 1968 — С.131-145.

64. Корниенко, Г.Г. Экологические аспекты биологии репродукции Текст. / Г.Г. Корниенко, A.A. Кожин, С.П.Воловик, Э.В.Макаров.- Ростов-на-Дону, 1998.-238с.

65. Крылов, О.Н. О некоторых чувствительных показателях и изменениях в системах организма рыб при отравлении Текст. /О.Н. Крылов// Методики биологических исследований по водной токсикологи. Москва: Наука ,1971. -С. 119-127.

66. Крючков, В.Н. Морфология органов и тканей водных животных Текст. /В.Н. Крючков, Г.М. Абдурахзманов, H.H. Федорова. М.: Наука, 2004. - С. 75-82.

67. Кузьмин Е.В. Сравнительный анализ фракционного состава саркоплазматических мышечных белков различных представителей семейства осетровых Текст. /Е.В. Кузьмин // Вопросы ихтиологии. — 1994. — Т.34. — №4. С. 548-556.

68. Курпатов, A.A. Охрана природной среды при освоении нефтегазовых месторождений Северного Каспия Текст.: автореф. дис. докт. биол. наук. / Курпатов A.A.; Махачкала, 2006. 48с.

69. Кычанов, В.М. Коллодоустоичивость сывороточных белков рыб /В.М. Кычанов Текст. //Вопросы ихтиологии 1984.-Т.24.-Вып.23. - С.302-306.

70. Кычанов, В.М. Взаимосвязь отдельных физиолого—биохимических параметров с фертильностью самок осетровых рыб Текст. /В.М. Кычанов, Т.А. Солохина, Т.В. Югай // Рыбохозяйственные исследования на Каспии. -Астрахань. 2000. - С. 429^135.

71. Кычанов В.М. Биологические тесты в воспроизводстве ценных видов рыб. — Астрахань, 2003. —162с.

72. Лакин, Г.Ф. Биометрия Текст. / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1973. -343с.

73. Ленинджер, А. Основы биохимии Текст. /А.Ленинджер. -М.: Мир, 1985. 1056 с.

74. Локализован разлив нефти в Каспийском море // Полит.ру. Электронный ресурс. 2008. - Режим доступа: http://www.polit.ru/news/ 2008/02/06/pazliv.html - Дата доступа: 12.03.2009.

75. Лукин, A.A. Экосистема Печоры в современных условиях Текст. /A.A. Лукин, В.А. Даувальтер, А.П. Новоселов //- Апатиты: Кольский научный центр РАН, 2000.-192с.

76. Лукъяненко, В.И. Коллоидная устойчивость сывороточных белков различных популяций волжской стерляди Текст. /В.И.Лукъяненко, П.П. Гераскин, Н.В. Баль, В.В. Лукъяненко //Тез. отчетной сессии ЦНИОРХ. -Астрахань, 1973.-С.61-62.

77. Лукъяненко, В.И. Общая ихтиотоксикология Текст. / В.И. Лукъяненко // М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. - С.320.

78. Лукъяненко, В.И. Биотестирование на рыбах: методическая рекомендация Текст. /В.И.Лукъяненко; Т. А. Карпович// Рыбинск, 1989. -С.96.

79. Лукъяненко, В.И. Влияние многофакторного антропогенного пресса на условия обитания, воспроизводство, численность и уловы осетровых рыбг

80. Текст. /В.И. Лукъяненко// Физиолого-биохимический статус Волго-Каспийских осетровых в норме и при расслоении мышечной ткани (кумулятивный политоксикоз). Москва, 1990. - С.25-44.

81. Лурье, Ю.Ю. Унифицированные методы анализа вод Текст. // Ю.Ю. Лурье, -М.: Химия. 1973—375с.

82. Магомедов, А. К. Экспериментальная оценка влияния нефти на гидробионтов Каспия Текст. /А. К. Магомедов,. В. К. Дохолян // Биологические ресурсы дагестанского прибрежья Каспийского моря. — Махачкала, 1992.-Вып. 1.-С. 31-41.

83. Мазманиди, Н.Д. Патоморфологии отравления рыб фосфором Текст. / Н.Д. Мазманиди// Вопросы водной токсикологии. — М.: Наука, 1973. С. 128— 136.

84. Мазманиди, Н.Д. Влияние дисперсантов нефти на выживаемость и некоторые физиолого-биохимические показатели черноморской смариды Текст. /Н.Д. Мазманиди, A.M. Котов// Гидробиологический журнал. —1981. — Т. 12. — №1—С.74-77.

85. Мазманиди, Н.Д. Нефтяное загрязнение и экология морских организмов Текст./ Н.Д. Мазманиди, A.M. Котов// Рыбное хозяйство. 1982. - №8.-С. 32-33.

86. Медведь, Л.И. Гигиена применения полимерных материалов и изделий из них Текст./ Л.И. Медведь. М., - 1969. - 125 с.

87. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике Текст.: / В.В. Меньшиков -М.: Медицина, 1987. С. 107-108.

88. Метелев, B.C. Водная токсикология Текст. / B.C. Метелев, А.И. Канаев, Н.Г. Дзасохова. М.: Колос, 1971. - с. 247.

89. Милыптейн, В.В. Осетроводство Текст. / В.В. Милыитейн. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982 — 152с.

90. Минц, Р.И. Жидкие кристаллы (мезофазы) в организме человека Текст. /Р.И.Минц, Е.В. Кононенко// Архив патологии 1981. —Т. XLIII. - № 7 — С.З-11.

91. Миронов О.Г. Нефтяное загрязнение и жизнь моря. Киев: Наукова думка, 1973. -86 с.

92. Миронов О.Г. Развитие некоторых рыб в морской воде, загрязненной нефтепродуктами // Вопросы ихтиологии. 1969. -№26. —С. 1136—1139.

93. Миронов, О.Г. Биологические ресурсы моря и нефтяное загрязнение Текст. /О.Г. Миронов. М.: Пищевая промышленность, 1972.-105 с.

94. Миронов, О.Г. Взаимодействие морских организмов с нефтяными углеводородами Текст. /О.Г. Миронов,-Л.: Гидрометиоиздат, 1985 127с.

95. Миронов, О.Г. К вопросу о метаболизме углеводов у морских гидробионтов Текст. / О.Г.Миронов, Т.Л. Щекатурина// Экспериментальные исследования влияния загрязнителей на водные организмы. Апатиты, 1979. -С. 128-132.

96. Михайлова, Л.В. Исследование возможности образования комплекса водорастворимой фракции нефти с белками крови и печени карпа Текст. /Л.В. Михайлова //Вопросы ихтиологии—1983.-Т.23—Вып.3. — С.519-521.

97. Михайлова, Л.В.Действие водорастворимой фракции Усть-Балыкской нефти на ранний онтогенез стерляди Текст. /Л.В. Михайлова // Гидробиол. журанал. 1991. -Т.27, №3. - С.77-86.

98. Мосевич, H.A. Загрязнение рыбохозяйственных водоемов сточными водами и нормирование сброса сточных вод как борьба с их вредным влиянием. // Вестник Ленинградского университета 1952. - №8. —209с.

99. Науменко, Л.Е. Методика подсчета ущерба, нанесенного рыбному хозяйству в результате сброса в рыбохозяйственные водоемы сточных вод и других отходов Текст./ Л.Е. Науменко. — Киев: Урожай. 1988. - С. 197 - 203.

100. Нельсон-Смит, А. Нефть и экология моря Текст. /А.Нельсон-Смит. М.: Прогресс, 1977.-С. 302.

101. Оперативный космический мониторинг разливов нефти // СканЭкс инженерно-технологический центр Электронный ресурс. — 2006. Режим доступа: http://www.scanex.ru/ru/news/ News Preview.

102. Патин, С. А. Нефть и экология континентального шельфа Текст./С. А. Патин. М.: Изд-во ВНИРО, 2001. -247 с.

103. Пестова, И.М. Морфофункциональная организация системы гемопоэза в эволюции Текст./И.М. Пестова, В.А. Четвертых // Архив анатомии; гистологии и эмбриологии. 1990. - Т. 99, №11. - G. 90-99.

104. Покровский, A.A. Ультраструктура гепатоцита Текст. /A.A.

105. Покровский// Тр. ДАН СССР. 1970. - Т. 192. - С. 58.

106. Пономарев, С.В. Технологии выращивания и кормления объектов аквакультуры на юге России* Текст./С.В.Пономарев, Е.А. Гамыгин, С.И. Никоноров, E.H. Пономарева, Ю.Н. Грозеску, A.A. Бахарева //- Астрахань: Нова плюс, 2002. 264 с.

107. Привезенцев, Ю.А. Гидрохимия пресных водоемов- Текст. / Ю.А. Привезенцев М.: Пищевая промышленность, 1973. -С.117.

108. Савина, Л.В. Структурирование морфотипов сыворотки крови здорового человека Текст. / Л.В. Савина, В.Н. Перескоков. Л.А. Тимофеева и др. // Научная конференция НИИ вакцин и сывороток: докл.- 1986. -С. 33-34.

109. Салманов, М.А. Экология и биологическая продуктивность Каспийского моря Текст. /М.А. Салманов. Баку-1999. -С.399.

110. Селье, Г. Стресс без дистресса Текст. / Г Селье. Рига: Виеда, 1992. -364 с.

111. Сергеев, П.В. Биологические мембраны Текст. /П.В.Сергеева М.: Медицина, 1979. - 247 с.

112. Сидоров, B.C. Теоретический и практический аспекты экологической биохимии рыб Текст. / B.C. Сидоров, М.И. Шатуновский // Сравнительная биохимия водных животных. Петрозаводск, 1983. - 205 с.

113. Сидоров, B.C. Экологическая биохимия рыб. Липиды Текст. /В.С.Сидоров. Л.: Наука, 1983. -240 с.

114. Способ оценки токсического действия химических веществ на органы и ткани рыб: патент РФ /H.A. Каниева, А.К. Аюпова. АГТУ. - № 2258926. // Изобретение. - 2004. — 5 с.

115. Способ расчета промыслового возврата и ущерба воспроизводству рыбы при воздействии химических реагентов: патент РФ /H.A. Каниева, В.П. Иванов, Н.В. Козлова. АГТУ. - .№ 2334230 // Изобретение. - 2008. - 4 с.

116. Строганов, Н.С. Методика определения токсичности водной среды Текст. /Н.С. Строганов. -М.: Наука, 1971. С. 14-60.

117. Строев, Е.А. Практикум по биохимической химии Текст. /Е.А.Строев, В.Г. — Макарова М.: Высшая школа, 1986. - 230 с.

118. Суслова, Т.Б. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах Текст. / Т.Б. Суслова, Ю.А. Владимиров // М.: Медицина, 1973. С75-93.

119. Таранов, М.Т. Биохимия и продуктивность животных. Текст. / М.Т. Таранов//М.: 1976.-115 с.

120. Тимошкина, Л .А. Изменение аминокислотного состава в мышцах и крови рыб при голодании Текст. / Л.А.Тимошкина // Вопросы ихтиологии—1970 — Т.Ю.-Вып.З (62) — С.480-485.

121. Тризно, H.H. серосодержащие газы, их действие на организм и пути дезотоксикации в эксперименте Текст. / H.H. Тризно, Ф.Р. Асфандияров, И.А. Беднов, А.К. Аюпова // Астрахань: АГМА, 2005. 116 с.

122. Федорова, H.H. Особенности картины крови осетровых рыб в . современных экологических условиях Волго-Каспийского бассейна Текст.

123. Н.Н.Федорова, В.Н. Кириллов, H.A. Каниева // Труды Международного форума по проблемам науки, техники и образования. — М.: АН о Земле, 1998. -С.150-151.

124. Филенко, О.Ф. Водная токсикология Текст. /О.Ф.Филенко. М.: Черноголовка, 1988. - с. 154.

125. Флеров, Б.А. Эколого-физиологические аспекты токсикологии пресноводных животных Текст. /Б.А.Флеров. — Л., 1989. -144 с.

126. Хазанов, А.И. Функциональная диагностика заболеваний печени Текст./ А.И. Хазанов. М.: Медицина, 1989. -199 с.

127. Хлебович, В.В. Уровни гомеостаза Текст. / В.В. Хлебович // Природа. 2007. №2. - С.61-65.

128. Черкашин, С.А. Использование показателей смертности предличинок морских рыб для оценки токсичности цинка и свинца Текст./ С.А. Черкашин, М.В. Никифоров, В.А. Шелехов // Биология моря. 2004. Т. 30, - № 3. - С. 247-252.

129. Черкашин, С.А. Отдельные аспекты влияния углеводородов нефти на рыб и ракообразных Текст. /С.А. Черкашин// Вестник ДВО РАН. 2005.- № 3. -С. 55-69.

130. Черных, H.A. Антропогенное воздействие нефти и нефтепродуктов на экосистему Каспийского моря Текст. / Н.А.Черных, В.П. Зволинский, В.Г. Головин// Вестник РУДН. 2005. - №8. - С55-62.

131. Черных, H.A. Проблемы сохранения биоразнообразия водных ресурсов Каспийского моря Текст. / H.A. Черных, Н.Г. Головин, A.B. Головин // Вестник РУДН. 2005. - №8. - С. 62-65.

132. Чесалина; Т.JI. Воздействие тяжелых нефтяных фракций на икру и личинок бычка-кругляка Текст./ Т.Л. Чесалина, И.И. Руднева // Вопросы ихтиологии-1998—Т.З 8.-№3. -С. 426-429.

133. Чистяков, И.Г. Жидкие кристаллы и их биологическое значение Текст. / И.Г. Чистяков, В.А. Усольцева, G.A. Селезнев // Успехи современной биологии.-1976. Т.82. - С.89-110.

134. Чуйков, Ю.С. Экологические проблемы Северного Каспия и Ирикаспия / Ю.С. Чуйков// Каспий настоящее и будущее: доклады на пленарном заседании* международной конференции. - Астрахань: ИТА «Интерпресс»,1996.-с. 30-60.

135. Шабалин, В.Н. Клиническая кристаллография: становление; проблемы, перспективы Текст. / В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина // Кристаллографические методьг исследования в медицине: Сб. науч. тр.- М.31997.- с.23-25.

136. Шабалин, В.Н! Принципы аутоволновой самоорганизации биологических жидкостей Текст. / В.Н. Шабалин, С.Н: Шатохина // Вестник РАМН: 2000. -№3. - С.45-49.

137. Шабалин, В.Н. Морфология биологических жидкостей Текст. / В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина// М.; Наука, 2001.- 340 с.

138. Шапоренко, С. И. Загрязнение прибрежных вод России Текст./ С. И. Шапоренко / Водные ресурсы. -1997. Т.24, №3. - С. 320-327.

139. Шатуновский, М:И. Экологические закономерности обмена веществ морских рыб Текст. / М.И. Шатуновский. М.: Наука, 1980. — 283 с.

140. Шварц, С.С. Экологические закономерности эволюции Текст.' / С.С. Шварц. М.: Наука, 1980.- 278 с.

141. Шлейфер, Г.С. Состояние физиолого-биохимических параметров осетра при интоксикации нефтью Текст. / Г.С. Шлейфер, В.К. Дохолян, Т.П. Ахмедова // Осетровое хозяйство водоемов СССР. Астрахань, 1989 — С.350-352

142. Юровицкий, Ю.Г. Синтез и деградация гликогена в оогенезе и раннем эмбриогенезе рыб Текст. /Ю.Г.Юровицкий, А.С.Мильман/ Экологическая физиология рыб — Киев, 1976. -С.136-138.

143. Andrulewich Е. Harmful substances // Stud.Mater.Oceanol. 1992. - No.61. -P.131-148.

144. Blackman R.A. Offshore oil impact // Mar.Pollut.Bull. 1988. - Vol. 19, No. 4.-P. 185-186.

145. Boesch D.F., Rabalais N.N. (eds.). Long-term environmental effects of offshore oil and gas developments. New-York: Elsevier Applied Science, 1987. -P. 708.

146. Cairns WJ. (ed.). North Sea oil and the environment. Developing oil and gas resources, environmental impacts and responses. London and New-York: Elseiver Applied Science, 1992. - P. 722.

147. Cardy S. Angling for oil at Wytch Farm. // Petroleum Reviews. 1993. -Vol.47. - No.561. - P.446-447.

148. Carls M.G., Marty G.D., Hose J.E. Synthesis of the toxicological impacts of the Exxon Valdez oil spill on Pacific herring (Clupea pallasi) in Prince William Sound, Alaska, U.S.A. // Can. J. Fish. Aquat. Sci. 2002.Vol. 59. P. 153.172., 90,91

149. Davis W.J. Contamination of coastal versus surface waters. A brief metaanalysis //Mar. Pollut. Bull. 1993. - Vol.26. -No.3. - P. 128-134.

150. Dicrs B. (ed.). Ecological impacts of the oil industry // Proceedings of the International Meeting, organized by Institute of Petroleum and held in London in November 1987. New York, 1989. P. 316.

151. Fowler S.W. Concentration of selected contaminants in water, sediment and living organisms // UNEP Technical annexes to the report on the state of the marine environment; UNEP Regional Sea Reports and Studies No.l 14/2. UNEP, 1990. -P 209-230.

152. Gesamp; Land/Sea boundary flux contaminants: contribution^ from rivers. // Gesamp Reports and Studies. No.32. - Paris: UNESCO, 1987. - P. 174.

153. Gourlay К. The black death: oil. // Poisoners of the seas. London; Zed Books Ltd., 1988. -P.133-188.

154. Gray J.S. Anthropocentric or ecocentric? // Mar.Pollut.Bull: 1991. - Vol.22. -Noai.-P.529.

155. Gray J.S. Environmental politics and monitoring around oiL platforms. // Mar.Pollut.Bull. 1988. - Vol. 19. - No. 11. - P.549-550.

156. Halsband E., Prochonow F. Исследование влияния кадмия на, характеристики крови, электропроводимость (тела) и скелетную» систему форелей // Veroff, Inst. Kusten und Binnefis. -1980. -P. 285.

157. Ices; Report of the Ices. Advisory Committee om the Marine Environment — Copenhagen: Ices., 1994. P. 122.

158. Knott D. More North Sea oil flowing in despite of stormy disruption. // Oil and gas Journ. 1993. - Vol.91. -No.44. -P.23-28.

159. Kuhnhold W.W. The influence of crude oils in fish fry // Marine pollution and sea life. Swiery,England: WestBuflect Surrey, U.K., 1972. P. 315.317.

160. Laane R.W.P.M. (ed.). Background concentrations of natural compounds in rivers, sea water, atmosphere and mussels. // Report DGW-92.033. The Hague, 1992. P.78.

161. Maynard1 D.J., Weber D.D. Avoidance reactions of juvenile coho salmon (Oncorhynchus kisutch) to monocyclic aromatics // Can. J. Fish. Aquat. Sci. 1981. Vol. 38, N7. P. 772.778.

162. McGunness N. Stress hyperglycemia and minimally invasive surgery // Surg. Laparose. Endocr. V. 87. 1999. P. 435 437.

163. Moore В., Hamilton T. Shallow gas hazard the HSE perspective. // Petroleum Reviews. - 1993. - Vol.47. -No.560. -P.403-407.

164. Naidu, Akhilender, Kamamurthi. Действие ртути на некоторые ферменты мозамбикской теляпии при остром отравлении //Ecotoxicol and Environ Safetg. -1984.-8p.

165. Neff J.M. Petroleum in the marine environment: regulatory strategies and fisheries impact // Battelle Ocean Sciences Laboratory. Duxbery, 1993. - P. 13.

166. Nillion H., Zaboukas N., Moraitou Apostolopouiou M. Biochemical composition, gromth and survival of the guppy, Poecilia reticulate during chronic sublethal exposure to cadmium // Arch. Environ. Contam. and Toxicol. 1998. V.35. №1, P. 58-63.

167. Parsons L.S. Management of marine fisheries in Canada. Ottawa: Nat.res.Council of Canada, 1993. -P.764.

168. Patin S.A. Global pollution and biological resources of the World ocean. // J. Environ. Zool. 1995. V.25. №5. P.78-82.

169. Pearce J.B. Collective effects of development on the marine environment // Oceanologica Acta. 1991. - Vol. SP. - No. 11. - P.287-298.

170. Rice S.D., Short J.W., Karinen J.F. Comparative oil toxicity and comparative animal sensitivity // Fate and Effects of Petroleum Hydrocarbons in Marine Ecosystems and Organisms. N. Y.: Pergamon Press, 1977. P. 78.94.

171. Shears J.R. An analysis of the frequency, location and magnitude of oil spills around the British Isles, and an evaluation of their environmental damage. — Department of geography, University of Southampton, 1989. P.47.

172. Taylor P. The state of the marine environment: a critique of the work and of the Joint Group of Experts on Scientific Aspects of Marine Pollution (Gesamp). // Mar.Pollut.Bull. 1993. - Vol.26. -No.3. - P. 120-127.

173. Tonk I. P. Биомониторинг загрязнения воды сублетальной концентрацией пестицидов. Системный подход //Acta hydrochim et hydrobiol. -1984. -12р.

174. Topping G. The role and application of quality assurance in marine environmental protection // Mar.pollut.Bull. 1992. - Vol.25. - No. 1-4. - P.61-65.

175. Warren R.P. Offshore oil and gas exploration: what are the environmental effects do to justify limitation of access to coastal waters // APEA Journ. 1989. — P.84—94.

Информация о работе

Козлова, Наталья Викторовна
кандидата биологических наук
Астрахань, 2009
ВАК 03.00.10

Диссертация

Морфо-физиологические изменения у осетровых рыб на ранних этапах развития под воздействием токсических веществ - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы