Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Монотерпеноиды культивируемых в Грузии растений родов citrus и laurus: химический состав и некоторые аспекты метаболизма

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Монотерпеноиды культивируемых в Грузии растений родов citrus и laurus: химический состав и некоторые аспекты метаболизма"

АКАДЕМИЯ НАУК ГРУЗИНСКОЙ ССР ИНСТИТУТ БИОХИШИ РАСТЕШИ

На правах рукописи

КЖЕЛИДЗЕ Нугзар Александрович

УДК 547.972.581Л92

ШИОТЕРИЕНОИ.ПЦ КУЛЬТШГРЖЖ В ГРУЗИИ РАСТЕНИЙ РОДОВ CITRUS И ijlurus : ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ И НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ НЕТАБОШЗУА

(специальность 03.00.04 - Б::о:;:::лл)

к ß- ъ>

2l.xii.S9r.

А а г о р о ф а р а диссертации на сонскаипо ученой отепсшт доктора сЗиологпчеоких наук

Тбилиси - 1989

Работа выполнена в лаборатории терпенов Института биохимии раотений АН Грузинской ССР.

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор М.Н.ЗАПРОМЕТОВ доктор биологических наук В.А.ПАСЕШНИЧЕНКО доктор биологических наук Л.Г.ШАЛАИШШ

Ведущая организация - Институт экспериментальной биологии АН Эстонской ССР

Защита состоится " " 1990 года в " "

часов на заседании Специализированного совета Д.007.04.99 в Институте биохиши растений АН Грузинской ССР, 380031, Тбилиси, Военно-грузинская дорога, 10-нй км.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института биохимии растений АН Грузинской ССР.

Автореферат разослан "_"_^990 г.

Ученый секретарь • Специализированного совета,

кандидат биологических наук Н.В.БЩШШШДЕШШ

ОБИ'ЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Среди субтропических растений цитрусовые и лавр благородный играют важную роль в экономике Грузинской ССР. Наряду с огромным значением цитрусовых, как плодовых деревьев и лавра благородного, как пряного растения, они такав используются для полу :лия ценных эфирных га сел.

Эфирные масла цитрусовых и благородного лавра, представленные в основном нонотарпеновдами, определяет арошт тег органов растений, которые их продуцируют. Широкое применение :шхо-дят эфирные масла цитрусовых и лавра в парфшерно-косиотглескоП, пищевой, фармацевтической, химической и в другпх отрасл/г.: промышленности.

Актуальность исследования эфярнкх гясел отвечает рассугг.--иу спросу прошиленности на наядада лио эфдршв касла. В ехоп отношении цатрусогно лаво обладают большдт.г; ео-->

тонциальшет во змо;лм с тя-Сл,

Потребности л офиршк гаслах штарусовах удовлетворяется з нашей стране» главшш образом, за счет импорта. Наряду о о®;-? не уделялось дояагоо вшэгэюю эфярш<( ¡»-вслам из плодов, лье-:/ • ; а цветов прошшленннх сортов я грорцдов цитрусовых, нропзргс--таадпх л Грузия, Но изучалась возмоглость производства лаврот-з-го эфирного масла из большого количества стеблей, а такав йс;> тих, опавших, логгашшх листьев, которые при заготовка и пороге— ботке листьев лавра попадают в отходи.

До начала наших исследований эфирные масла, произрастающих в Грузии анодов цитрусовых и листьев лавра благородного, характеризовали лишь по физико-хиническим показателям и по содержанию основных цоиотерпеноидов. Данные о монотерпеноидазг листьев культурных видов цитрусовых, стеблей лавра благородного, листьев & плодов гибридов цитрусовых, нх диких сородичей вообще отсутствовали. Недостаточно били изучены вопросы метаболизма эндогенных ыоно- и сосквитэрпеноидов в листьях п плодах в онтогенезе цитрусовых растений я благородного лавра, влияние различных физиологических и технологических процессов на содержание в состав эфирных ьгасел.

Исследование эфирных насел лавра благородного а цитрусовых, помимо биохишгчэского, генетического а хецотаксономичоаш-

го интереса, имеет практическую направленность. Выяснение путей метаболизма ыонотерпеновдов у цитрусовых и благородного лавра, необходимого для познания регуляции их накопления в растительных клетках и тканях, весьма важно для практики.

Цель и задачи исследования. Изучение состава монотерпенои-дов цитрусовых и (благородного лавра направлено на комплексное решение следующих задач:

- исследование состава ыонотерпеноидов листьев, стеблей и плодов разных видов и сортов цитрусовых и благородного лавра;

- изучение динамики накопления и сформирования состава ыонотерпеноидов в листьях и плодах мандарина У шину, лимона Мейера и в лавре благородном в онтогенезе;

- изучение метаболических превращений эндогенных ыонотерпеноидов в листьях мандарина и благородного лавра;

- исследование состава ыонотерпеновдов в межвидовых и мак-род о вше гибридах померанцевых. Изучение изменчивости содержания и состава ыонотерпеноидов в привоях мандарина и апельсинов в зависимости от применяемого подвоя;

- шявлэнио ношх неиспользованных источников эфирных масел на основе знаний свойств и химического состава эфирных масел раэннх органов цитрусовых и благородного лавра.

Научная новизна исследования связана с изучением ыонотерпеновдов листьев, плодов и стеблей благородного лавра и цитрусовых. Из изучениях растений наделено 25 соединений, -четыре из них - 1 -са^инен, | -терпинен-4-ол, Р-элеыен, р-кариофиллен, впервые обнаружены в благородном лавре. Исследована динамика накоплена! коне- г сесквятерлеиовдов в листьях и плодах мандарина Уншяу, лимона Мейера а в благородном лавре в онтогенезе. Показано, что ыонотерпеноидц активно метаболизируются как в молодых, так и в зрелых листьях и плодах этих растений. Установлено, что на биосинтезе лшонена в плодах мандарина и лимона Мейера процесс созревания плодов не оказывает влияния. Показано, что в зрелых листьях лавра благородного эндогенные ыонотер-певовды претерпевают метаболические" превращения. Период полураспада 1,8-цинеола и а -терпинилацетата составляет 45 и 36 ч соответственно. Установлено, что бесклеточная система, наделенная из листьев мандарина Уншиу, способна окислять у -тершшен в п -цимол.

Практическая ценность работы. Исследование химического сос-

тава эфирных масел разных органов лавра благородного дает возможность использовать большое количество стеблей и нестандартных листьев, являющихся отходами при заготовка и производства лаврового листа. Разработаны технологические инструкции и отраслевые стандарты на лавровые пищевые препараты и лавровое эфирное масло. Эфирномасличными заводами "Грузэсфиромаслопромма осуществляется получение эфирного масла из отходов производства лаврового листа.

Шявлены морозостойкие гибрида цитрусовых, содорнащие в листьях и плодах высококачественные эфирные масла. При культивировании указанных гибридов промышленность будет тлеть стабиль-нув сырьевую базу для производства ценных цитрусовых эфиршх масел.

Спиртовый настой из отходов переработки плодов мандарина рекомендован для использования в парфюмерно-косметической промышленности.

Различие в состава и количественном содержания ионо- п сесквитерпеноидов в разных видах» гдажидовых я mspодошх гибридах цитрусовых позволит использовать эти соединения в качестве биохимических ьгзркеров в сатекцЕонно-генвтических исследованиях.

Апробации работы. Материалы работы докладывались: на 17 (г.Тбилиси, 1963) и Л (Сан-Францкско, 1974) Мовдународгшх конгрессах по эфирный !'лслан, на Шддународном симпозиума "Изучение генов полезных растений тропиков п субтропиков" (Прага, 1981), на УП Советско-Индийском симпозиуме по химии природных соединений (Тбилиси, 1983), на Всесоюзной конференции "Экстрактивные вещества древесных растений" (Красноярск, 1986), на У съезде Всесоюзного общества генетиков и селекционеров им. Н.И. Вавилова (Москва, 1987).

Основные результаты исследования опубликованы в 3-1 печатных работах.

Структура и объем работы. Работа состоит иа введения, обзора литературы, экспериментальной части (включавдей описание методов исследования, результаты к их обсуждение), выводов я списка цитированной литературы. Работа включает 77 рисунков, 43 таблицы. Список литературы включает 341 источник, в том числе 202 иностранных.

СОДЕРШМЕ РАБОТЫ I. Обьокги и метод« исследования

Объектом исследования служили плода и листья культивируемых в Грузинской ССР мандарина С Citrus unshiu Marc, ), лимона (Citrus limon Ijuí-I.i. ), апельсина ( Citrus ainensi.j Osbeck), три^олката (ïoncirus triíoliola Raí. ), Вилъсоний (Citrus Wilson ii}» Юнос-йзу (Ci trus JUMOS Síejj), межвидовых и межродовых гибридов цитрусовых, листья, плоды и стебли лавра благородного (iaurua nobi-î is L. ). Образца растительного материала собирали на Сухумской опытной станции субтропических культур Всесоюзного ШМ растениеводства им.Н.И.Вавилова, Сухумской опытной станции Ефярнс/.а сливших культур, Батумского ботанического сада, Грузинского института субтропического хозяйства, а такие на приусадебных участках.

Эфирные масла из растительного гатор ¡ила выделяли методом гддродистилляции. Из дистиллята масла отделяли экстракцией ые-тилекхлоридом и концентрировали до полного удаления экстраген-та. Б промышленных условиях эфирные масла получали путем перегонки с водшвш паром.

Эфирные масла анализировались с использованием метода га-яоздцкостной хроматографии, ректификации в вакууме, хроматогра-фировандя на окиси алшиния, ИК-спектроскопии и хромато-масс-спектроматрии.

Посла удаления свободных кислот и фенолов эфирные гамо нодвзргали вакуумной разгонке на ректификационной колонке на две фракции, в первую из которых входили в основном монотерде-новые углеводорода. Васококипяшую часть разделяли катодом ад-сорбционда-гддкостиой хроматографии на окиси алгминия (П-Ш степень активности). Сесквйтерпеновые углеводороды, карбонильные соединения а терданошэ спирты выделялись последовательным элхь ированием летролейнкм н дяэгиловнм эфиром. Процесс хроыатогра-фяроЕанм контролировали при помощи газо-кидкостной и тонкослойной хроматографии. Сходило по составу фракции объединяли.

Препаративное выделение соединений осуществляли на хроматографе "Варнак аэрограф 1860й (США) с автоьатнческим устройством для сбора фракций " Autoprsp

Инфракрасные спектры сшаидн на приборах ИКС-14, UÄ-I0, speûord -1Л75, Sgecord -¡¿30 (ГДР).

Хрошто-ггасс-спэктромотрический анализ осуществляла на при-

боре ШЬйгтоа PI0-I0B (Франция).

Идентификации осуществляли сопоставлением инфракрасных я масс-спектров, плотностей, показателей преломления, углов вращения компонентов, шдолетшх в индивидуальном состоянии, с лате-рагурии:.:л данными. Шторные компоненты идентифицировала методом газо-яцдкостной хроматографии, сравнивая их время удерживания с таковым для известных моно- и сосквитерпеновдов на колонках с зддкиш фззами различной полярности.

Количественное содержание компонентов-определяли методом внутренней нормализации площадей пяков и методом внутреннего стандарта.

При изучении динамки накопления моно- и сезквитерпзноидов в листьях и плодах мандарина Уншду, лимона Мейера я благородной лавре пробы отбирались ежемесячно из одновозрастннх, xoprwio iwa-витых растений со средних по шеоте частей кроны, со всех сторон. Наделение эфирных ыасол проводили не позднее 30-^40 мин. после сбора образцов.

Бссклеточшй экстракт из листьев мандарина получали по описанной методике /Шишлова, Корецкая, -Запрометов, 1978/. _

С целью установления ферментативной природы окисления v-терцине на использовали метод селективного ннгкбяровашш. При зтои в качестве ингибиторов применяли дпэтилдитиокарбашт (ДДТК), "ñi-• хлордаркурибензоат ( п-хыб), азид натрия.

Меченые 1,8-цинеол и ¿-терпинилацетат получали путем с-кс-понирования 3-х годичных саженцев лавра благородного в атмосфере 14С02. которую генерировали из BaI4C0g. Саяенцы экспонировали в течение I ч в камере из оргстекла, а затеи в течение 96 ч в условиях естественного фотопериода. После окончания экспозиции в атмосфере ^COg через определенные интервалы времена отбирали пробы листьев и эфирные масла выделяли гпдродистилляцией.

Радиоактивность лаврового эфирного масла, I,8-цяонола и а-терпинилацетата определяли в сцинтшшщнонном-счетчике SL-30 (Франция) с эффективностью счета 95%, употребляя при этом сцин-тялляциояную жидкость, приготовленную на диоксане. В работе использовали также и некоторые другие метода.

Результаты экспериментов обрабатывали статистически. Определяли доверительный интервал экспериментальных данных, используя коэффициент Стьвдента ( t ) при вероятности Р ± 0,05 в числа параллельных определений п « 5.

2. Монотерпбноидн культивируемых в Грузии цитру-.совых растений и лавра благородного

2.1. Монотерпеноиды листьев и плодов мандарина Уншиу

Иэ всех видов рода цитрус, ингродуцированных на Черноморском побережье Кавказа, наиболее приспособленными л лестным климатическим условиям оказались мандарины группы Уншиу. Под названием "Уншду" объединяется большое количество сортов, различающихся по биологическим особенностям, морфологически» признакам и хозяйственным свойствам.

Мы провели сравнительное исследование эфирных масел кожуры спелых плодов и листьев иэ группы мандарина Уншиу-обыкновенного, широколистного типа Овари и карликовых типа Васе-КоЕзно-Васе и Миагава-Васе. Последние представляют собой раннеспелые и крупноплодные растения. Моно- и сесквитерпеновды листьев и плодов сортов Коваио-Васе и Миагава-Васе наш изучены впервые.

Гаэо-жидкостная хроыатограмма эфирного масла листьев мандарина сорта Миагава-Васе представлена на рис,1.

Количественное содержание отдельных компонентов в эфирных маслах листьев я плодов разных сортов мандарина представлено в табл.1.

Время в мин

Рио.1. Газо-зздкосткая хрхатограьыа эфирного ta ела листьев мандарина сорта Миагава-Васо. Х_ 'u-туйек, 3~ а-шшен, 4- кладок, 5- 0-пинан, 6- сабянон, 7- кирцен, 8~ u-феллзндрш, Э- а -торпи-нвн, 10-ЛЕианон, И- V -торпюшк, 12- п -цж.:ол, 19- ли-налоол, 22- (1-алсдгои, 24- -кг;?:;;;Ь;и!лок, 2G- иораль, 27- а-горсз:оол. 23- цйтропеллол, 7í'¿~ fi-ccr.ZíQU, 30-гараггл^л".

Таблица I

Состав эфирных масел зрелых листьев и кожуры спелых плодов разных сортов мандарина Уншиу

■Сорт мандарина

Компоненты .'Ковано-Васо { Миагава-Васе { Широколистный

> ? уншиу

¡Плоды { Листья|]1лоды Листья |Плоды } Листья

а-ТуЙен - 0,6 - 0,9 - 1Д

а-Пянен 0,4 2,3 од 0,6 0,7 2.1

Камден сл. од сл. од сл. од

Сабинен ОД од сл. сл. од 0.4

р-Пинен 0,3 0,6 од 3,4 0.4 6,0

и-Феллаццрен - од - од - од

а-Терпинен - од - од - 0,2

Ыирцен М од 1,3 1,9 1.5 0,7

Лимонен 77,9 4Д 81,8 4,6 82,3 3,9

V -Тершшен 5,3 27,2 3,9 39,1 5,3 19,4

п-Цимол од 10,3 0,3 19,3 0,2 14,4

Терпинолен ОД - ОД ' - од -

Линалоол 3,3 1,4 2,7 7,6 1,3 II. 2

Декаиаль од - од - од -

и -Копаен од - од - 0,2 -

0 -Злд:ден 3,4 30,5 2,2 9,8 0,9 16,0

(3 -Кариофшшен 1,2 7,9 0,8 1.7 0.4 •7,8

у -Кадинен ОД - од - 0,2 -

Нераль - 0,5 - 0,7 - 0,9

а -Терпинеол 0,2 0,5 0,8 0,8 0,1 0,3

Цмронеллол од 0,9 ОД 0,3 0,2 0,3

0 -Селинен - 0,9 - 0,4 - 0,3

Гераниол сл. 1.6 сл. 0,2 ол. 0,4

Поглощение.% о 8 в 8

Поглощение.^

«С1 вв о

о о 5

Moho- и сесквитерпенсиды кожуры плодов мандарина в основном представлены <J -лимоненом, тогда как в листьях всех сортов превалируют v -тершшен, n-цтлол я р -элемен. В плодах цитрусовых лимонен всегда встречается в ввде правовращаицего изомера. Нами установлено, что в листьях мандарина Уншу лимонен имеет противоположный знак вращения (~I25°,5l'), что свидетельствует, по-видимому, об' ином пути биосинтеза лимонена в листьях мандарина.

Инфракрасные спектры основных соединений эфирных масел листьев и кодури плодов í/.aвдарина представлены на рис,2.

Плоди всех сортов мавдаринов по качественному составу ионо-и сесквитерпеноидов не отличаются друг от друга. В количественном содержании компонентов наблюдается определенная разница, в частности, эфирные масла раннеспелых сортов по сравнению с ии-рокшшстныы Ушиу характеризуется более высоким содержанием сесквятврпеновнх углеводородов и торпеновых спиртов. Сортовые различая по ион о- а сесквитерпенондному составу в большей шро проявляются в листьях.

2.2. Монотерпеноиды листьев л плодов обыкновен-

HUX лимонов •

В нашей стране промышленное значение имеют сорта обшшог.:;-ных лшлонов - Грузинский а Ударник. Однако на плантациях встрэ-чаются и другие сорта лшлонов: Вилла-Фраяка, Даеноа, Кошуно, Лисбон, Лунарио, лдмоя без колючек.

Сорта лшлонов Грузинский, Ударник и лимон баз колючек цветного происхождения выведены путем клоповой селекции. Остальные сорта лимонов интродуцированы из США я Италии /Самоладас,1978/.

Содержание ыоно- я сесквитерпеноидов в эфирных ыаслах спелых плодов разных сортов лимонов приводится в табл.2.

Эфирные fía ела листьев обыкновенных лшлонов характеризуются приятным, специфическим ароматом. В связи с этим масла широко применяются в парфюмерно-косметической промышленности.

Эфирные масла листьев обыкновенных лимонов отличаются от эфирных масел других видов цитрусовых высоким содержаниец нора-ля и гераниаля (табл.2), которые я определяют ароматические свойства листьев.

Как вздцо из приведенных данных, эфирные шела плодов и

Таблица 2

Состав эфирных масел зрелых листьев и кожуры спелых плодов разных сортов обыкновенных лимонов, %

Компоненты

|Сортлимона ; Грузинский | Ударник

!Плплн!Лигтт,(1|Шгпш1 ¡Лло.т

______| Лисбон | Дкеноа"

|Плоды|Дистья|11дода|Листья|^о|^-|11)1оды|Дистья

а -Оинен 1.5 0.7 0,5 0,3 0,3 0,3 1.7 0,5

Э-Пинен 13,7 14,0 11,9 14,5 8,4 11,0 10,5 13,8

Сабинен 2,3 4,2 0,5 0,3 1.6 0,9 0,5 3,6

Ыярцен 1,2 4,8 2,0 5,5 3,0 зд IД 4.1

Оцимен - 0.4 - 0,2 - 0,9 - 0,2

Лимонен 61,9 30,2 61,0 25,2 63,5 34,6 69,6 27,6

у -Тершшен 5,3 2.4 8,0 3,4 3,0 3,3 7,5 2,3

п -Цимол 3,2 0,2 2,9 0,8 '4.8 0,3 од од

Терпинолен 0,1 0,2 0,1 0,2 од од од ОД

Деканаль 0,2 0,2 0,1 0,8 0,2 0,8 од 0,3

Цнтронеллаль 0,2 0,2 0.1 0,8 од 0,8 од од

Метилгептанон 0,3 - 0,2 - од - од -

Лнналоол 0,7 1.8 0,6 3,4 0.7 3,4 0,8 1.5

Лпналилацетат 0,2 - од - од - 0,2

Тершшен-4-ол 1.3 1.1 0.7 од 0,8 0,9 0,9 0,9

Р-Кариофиллен 0,1 0,3 0,6 0,2 0,2 од од ОД

и-Терпилаол 0,2 0.7 од 0,8 0,8 1.4 0,2 0,5

Нераль 0,6 6,0 1.3 7.0 1.3 6,4 1,3 7Д

Геранааль 1.2 18,3 1.5 25,2 3,4 22,0 1.3 18,6

Р-Бисаболен 0,6 - од - од - 0,9 -

р-Селинен - 0,3 - од - од - 0,2

Бергаыотен 0,2 - од - 0,2 - од -

Цатронеллсл - 0,-6 - 0,2 - 0.2 - 0,3

Нерилацэтат 0,2 1,2 0,6 0,4 0,6 0,4 од 1.0

Горашлацегат 0,2 4Д 0,9 0,3 0,9 0,3 0,6 3,6

Нерол ОД 2,0 0,2 2,5 0,2 2,8 0,6 1.5

Гераниол 0,1 1.2 од 0,5 од 0,9 0,5 1.6

лястьвв разных сортов обыкновенных лимонов отличаются друг от друга в основном по соотиошенгго компонентов. Мы провели сравнительное исследование эфирных масел коаура плодов обыкновенных лимонов , произрастающих в Греции и Грузии. В результате проведенных исследований установлено, что в плодах лимонов, произрастающих в Греции значительно выше содержание нералья и гера-ниаля и сравнительно ниже содорташю d-лимонена и особенно (1-пинена. Качествашшй состав эфирных масел плодов лимона,произрастающего в Грузия и Греция, одинаков.

Сравнением моно- и сесквитерпеноидов обыкновенных лимонов, произрастающих в условиях менее благоприятных для этой культуры и типичном лимоноводческом районе мира, показывай, что влияние географических мест произрастания отражается в основном на количественном соотношении моно- и сесквитерпеноидов.

2.3. ;«1онотерпеноидн листьев апельсина

Среди интродуцированных в Грузинской ССР сортов апельсина широко распространен сорт Вашингтон Нэвел. В плантациях встречается также сорт Местный, известный на Черноморском побережье Кавказа еще 200-300 лет тому назад /Леквеиавшш,1978/. Ш исследовали моно- и сасквитерпеноиды листьев этих сортов. Эфирные масла получали из свежих листьев в период цветения. Количественное содержание основных компонентов эфирных масел сортов апельсина Вашингтон Нэвел и Местный соответственно таково {%) к целому маслу: а -пинен - 4,4 и 2,8; р -пинен - 2,3; 4,8; саби-нен - 38,3; 51,3; а -фелландрен - 0,8; - ; а-терпинен - 0,7; 1,2; 1 -лимонен - 5,0; 2,7; р -фелландрен - -; 0,3; оцимен 1,3; 1,4; Д3 -карен - 1,1; 1,6; Y -терпинен - 9,6; 5,6; п-ци-мол - 0,ó; 0,4; цатроиэллаль - 1,4; - ; линалоол - 6,0; 9,5; тершшен-4-ол - 15,5; 6,0; а-терпннеол - 0,2; -; цитронеллол--; 0,5; нерол - 0,7; 0,2; гераниол - 0,4; 0,2; р -элемен -0,8; р -кариофиллен - 0,4; 0,2. Эфирные масла незначительно различаются по качественному составу минорных соединений. Сортовое различие в основном обнаруживается в различном количественном содержании основных компонентов, в частности, свбинена, Y -терпанена, териишн-4-ола и линалоола.

2.4. Ыоногэрпеноиды диких сородичей цитрусовых растений

Дикие сородичи цитрусовых - трифолиата, Вильсоний и Юнос-Юзу широко используются в качестве морозостойких компонентов в гибридизации с культурными видами цитрусовых. Они являются также Ы0р080ст0йкима подвоями для цитрусовых растений.

Состав ¡эфирных масел листьев Вильсоний и ¡taoc-Юзу нами изучен впервые. Количественное содержание основных соединений эфирных масел зрелых листьев трифолиаты, Вильсоний и Юиос-Юзу соответственно таково {.%)■: а-шшен - 0,5; 3,6; 3,6; 0-пинен —; I; 12,1; 12,1; сабинен - -; 2,4; 2,7; мирцен - 8,4; 0,6; 0,3; лимонен - 0,6; 7,6; 8,8; оцямон -.-; 3,5; 2,8; V -тгэршшен -65,8; 43,5; 38,6; п -циыол - 0,3; 2,7; 1,4; линалоол - 0,1; 6,3; 7,8; тершшен-4-ол - -; ол; 6,2; нонанол - 10,4; ОД; -; цатронеллэль - 0,3; 0,3; 2,1; нерол - 0,1; 0,5; 1,0; иланген -0,3; 0,2; 2,2; (3-кариофиллен —; 0,1; 1,2; гераниол - 0,1; 0,3; 0,6.

Характерной^особенностыэ этих растений является высокое содержание в листьях V -тершшена. Растения Вильсоии, Юнос-Юзу и особенно трифолиата характеризуются высокой морозоустойчивостью. Критический минимум этих растений -13-22°С. Сравнительно повышенной морозоустойчивостью характеризуются такге мандарин Уншяу, Ыатсушкан н другие цитрусовые в эфирных ¡.иолах листьев которых У-Т0ршП!ЗЫ содержится в большой количество / Kaniyama , 1967,1270/. Вез copra обыкновенных лимонов, апельсинов, грейпфрутов отличаются от вышеуказанных растений значительно низким содврааниеы в листьях Y -терпинена и пониженной морозостойкостью. Как бедно, существует опродоленная взаимосвязь мегду содержанием у-торпшгано и морозоустойчивостью растений, т.е. чем большо содор^нш у-горпинена в летучей части листьев растений, тем Eu-Jie морозоустойчивость цитрусовых растений. А!н предполагали использог-ать эту взаимосвязь в селекцконно-голегичес-ких нсследованпш:, з чаогхюстл, для ранкой диагностики морозоустойчивости саявдов гдбрдйсэ. Однако исследование эфиркых масел листьев гибридов j;:~:oí:oi;, ьа&гп-саиов грейпфрутов с трпфо-дяатой, ВияьсокгЛ, ítenrcinsíícoM показало, что содор-

э у -торлипал;! г. r.v,o':í:ú vcüt^: коррелирует с морозо-ci-oíir.oc'i'j.-:-,- гп^ита г-г;:брг:д с трггТ-о-

Таблица 3

Состав эфирных насел зрелых лястьав и кожуры спелых плодсв некоторых гибридов померанцевых, %

Компоненты

ИЗ!

«СО о

В*

со л

м §

Я

Эфирное масло листьев -Г~-Г

о

о «

о

М

ш

Ни

и01 ко*

м«

ф Э о й о И О о

и

(<!

шг--

II

о

ф >1 •О СП

И5?

В °

3 о

а

03 «

3

Эфирное масло кояу-ри плодов

а

а

я о

<м

И8

«о

дсо

@о со в*

>>РЭ

а

И

о

а-Шшек 1.7 0,3 ОД 0,2 ОД 1.1 1,4 1.4

(}-Шшен 1.8 0,2 0,7 0,8 - 1.0 33,3 0,3

Сабинен 0,2 1.3 0,2 • - 0,5 0.2 - 1.8

Мярцан 1,9 0,9 0,7 0,8 1Д 0,9 9,5 0,9

Оцимен 0,3 - 0,3 0,3 - - ОД -

1,8-Цинеол - - - - 1.3 - - —

Лимонен 61,3 63,0 0,3 4,3 70,7 79,5 34,0 77,4

V -Тершшен 20,6 0,3 2,5 0,2 2,8 5,8 1.0 5,8

п-Цимол 5,0 0,6 сл. 1.0 0,9 0,6 0,6 0,5

Цитронеллаль 0,1. 5,9 17.4 56,9 3,3 0,3 ОД од

Тершшолен 0,2 од од 0,1 - 0,2 0,3 ОД

Деканаль ОД ОД ОД - - сл. од —

Линалоол 1Д 2,4 3,0 0,5 2,7 2.4 1.8 0.7

Метилгептанон од од ОД ОД- ОД сл. 0,4 —

Тершпг и-4-ол 0,2 1.4 од. сл. 0,5 од 0,3 од

а-Терпинеол 0,2 0,4 41Д 17,0 1.2 сл. • - 0,4

Нераль 0,3 2,0 10,2 .2,1 0,5 0,2 сл. од

Гераниаль 0,2 4,0 12,8 2,1 0,3 ОД 0,9 од

Нерилацетат ОД сл. - од 0,2 сл. 0,6 од

Гераншшцетат 0,4 4,6 2,1 1Д 0,3 0,3 0,5 0,4

Нерол од 0,4 0,6 0,2 2Д ОД од од

Гера ниол од 1.2 од 0,2 - 0,2 .ОД

Цитронеллол . - - сл. сл. од - 0,6 0,1

Тимол - - - - 0,7 - - 5,3

....... * -" ^ч^д »/ ХЗа^иГкШП и идс вд у — 1орШ1—

нека б листьях (табл.3), морозостойкость этого гибрида также высокая до -16°С. Гибриды лимона с Вильсоняй и Юнос-Юзу (Л 919 и И 30837) по морозоустойчивости значительно превосходит обыкновенные лимоны, тогда как в эфирных маслах листьев этих растений содерзание у -таршшена ниже чем в листьях культурного родителя (табл.2 и 3).

Сравнительный анализ химического состава эфирных масел молодых и зрелых листьев Вильсоний и Юнос-Юзу показал, что по мере развития листьев в них существенно увеличивается содержание V -тершшена л 3-шшена и снижается концентрация п-цимола.

2.5. Монотерпеноиды листьев и плодов гибридов ссмойства померанцевых

С целью выведения морозостойких цитрусовых путем межвидовой, внутривидовой и межродовой гибридизация советскими селекционерами шводены многочисленные гибриды, которые более приспособлены к наиим почвенно-климатичоским условиям. Наряду с гибридами с хорошим качеством плодов, получены гибриды, качество плодов которых в той или иной степени неудовлетворительно. Межвидовые ц ыеяродоше гибрида цитрусовых отличаются большим ыор-фо-биологическшл разнообразием. Отличительным свойством многих гибридов является высокая морозостойкость. Монотерпеноиды, определявшие ароматические свойства листьев и плодов гибридов цитрусовых, не изучались. Нам казалось целесообразным исследовать состав эфирных масел гибридов цитрусовых с целы; выявления растений с высоким содержанием и качеством ^эфирных масел.

Среди гибридов обыкновенных лимонов в Грузии широко возде-лываотся нош!!: сорт лимона Диоскурпя, который получен в результате отдаленной гибридизации лимона Грузинского с трифолиатой. Дпоскурия характеризуется сравнительно высокой морозе- к г/лль-со:а-:оустойчивостьа. По содерпгакиа эфирного масла Диоскурая уо-тупаа? лимсну Грузинскому, по значительно презосходит тркфолиа-ту. Следует отмотить, что зез исследованные нами гибрцды лгаз-ное с дика.« сородичами цитрусовых по содержанию эфирных масел уступают культур:шм родителям и превосходят дикорастущие Форш.

Количественное содержание идентифицированных компонентов в эфирных маслах листьев и плодов лимона Диоскурия и других гиб-

рядов лимона о трифолиатой приводятся в табл.З.

В листьях и плодах лимона Диоскурия по сравнении о лимоном Грузинский наблвдается гетерозисный' эффект по содержанию лимонена, цитронеллаля, тешшен-4-ола, линалоола и депрессия по содержанию р-шшена, нераля, гераниаля, нерола. В отличие от плодов трифолиаты в значительно меньшем количестве содоржит-ся мирцен, у -терплнен и ряд характерных соединений трифолиаты.

Изменение состава монотерпеноидов неблвдается я в других гибридах лило па с трифолиатой. В частности, листья и илоду гибрида й 30844 характеризуются высоким содержанием у -гаршшена. Содержание лимонена в эфирных маслах гибрида и обыкновенного лимона практически одинаково. Листья гибрвда Л 6463-2/ЗВ, в отличие от культурного родителя, характеризуются сравнительно низким содержанием нераля и гераниаля, тогда как плоды гибрида по содержанию этих соединений существенно превосходят обоих родителей.

Значительно отличаются гибрида обыкновенных лимонов о Внль-соний, Юнос-Юзу и Иченгенезисом от родительских форм по ионо-терпеноидному составу.

Как видно из представленных-данных, в листьях гибридов лимонов о Вильсоний и Юнос-Юзу общее содержание монотерпеношх углеводородов не превышает 7%, а в исходных формах их содержание составляет 50-7055. Эфирные масла этих гибридов характеризуются высоким содержанием цитронеллаля к а-терпенеола, тог- . да как в растениях родителей эти соединения содержатся в следовых количествах. Гибрид лимона о Йченгенезис содержит 6С$ р-пи-нена, тогда как в маслах лимона Грузинского его содержание составляет не более 1655, а в Йченгенезис всего 5%,

Значительные изменения в количественном содержании отдельных монотерпеноидов у гибридных растений, полученных при скрещивании разных видов рода Цитрус, а также при скрещивании кх о трифолиатой наблвдали американские исследователи /£кога «Ъ ей.., 1968, Зкога еЬ а!., 1976/.

При отборе наилучших форм гибридов лимонов большое внимание уделяется запаху листьев сеянцев. При этом предполагают, что чем сильнее выражен "лимонный" или "приятный" аромат, тем больше вероятность, что плоды будут лимонного типа /Саыоладас, 1977; Сургуладэе, 1978/. В результате проведенных исследований установлено, что у одних гибридов наблвдаетоя наследование сос-

тава эфирных масел одного из родителей, а у других состав эфирных масел отличается от родительских форм. Показано, что гибрида лимонов, у которых в листьях синтезируется эфирное масло, близкое по составу и соотношению компонентов к обыкновенным лимонам, и в плодах накапливают эфирное масло, близкое по составу культурному родителю.

При исследовании эфирных масел гибридов померанцевых выявлены гибрида, которые по морфологическим признакам не отличаются от одного родителя я в то та время синтезируют эфирные масла , сходные по составу о эфирным маслом другого родителя.

Данные о составе эфирных масел листьев гибридон цитрусовых могут быть использованы селекционерами при отборе растений на ранних стадиях развития.

В связи с высокой морозо- и мальсеккоустсйчивоотью лимон Ыейера широко распространен в СССР. Плоды считаются заменителем обыкновенного лимона /МоаЬоиав ,1972; Саыоладас,1978/.

Происхождение этого вида лимона неясно. По предположению Свилгла /Swinsie , 1967/, это - гибрид между настоящим лимоном и апельсином. В.Л..Александров (1961) считает, что лимон Шйера яаляется гибридом настоящего лимона с мандарином из группы Ун-ияу. Указывается также, что сн является продуктом народной селекции, или гибридом, шш цутантом кантонского лимона citrus linonelloidese Heyta /Самоладао, 1978/.

Эфирное масло из плодов лимона Ыейера, произрастающего в США., хорошо изучено / Xkeda et al., 1962; üoshonas , 1972/. Исследование эфирного масла плодов лимона Мейера, произрастающего в СССР, начато в 1981 году. Первые сообщения о составе масла из листьев опубликовано нами и исследователями из США одновременно /Кекеладзэ и др., 1982; Lund et el. , 1982/. В последующие годы нами продолжались исследования монотерпеноидов листьев лимона Шйера.

Количественное содераание вдентифицированных компонентов листьев и плодов приводится в табл.З.

Лимон Мейера, в отличив от всех видов и сортов цитрусовых, в листьях и плодах синтезирует практически одинаковое количество d -лимонена. Предполагаемые прародители гибрида - апельсин и мандарин Уншиу в качестве главных компонентов в листьях синтезируют сабинен, У -тершшен и n-цимол, содержание которых в листьях лимона Шйера незначительно. Наблвдается существенное

различие и в содержании других компонентов. Листья и плоди содержат фенольное соединение тимол, которого нет в настоящих ля-монах и апельсинах. В мандарине Уншиу обнаружены следовые количества тимола.

Исследование качественного состава и количественного соотношения моно- и сесквитерпеноддов в межвидовых и межродовых гибридах цитрусовых и их родительских форм показывает, что у гибридов имеются большие различия в содержании отдельных соединений. Эти различия носят в основном количественный характер. В растениях-родителях биосинтез отдельных монотерпеноидов блокируется на разных этапах, но у гибридов наблюдается комплементация и в результате они вырабатывают соединения в большем количестве, чем растения-родители.

Однако сделать однозначное заключение о причинах разного накопления моно- и сесквигерпено вдов в родительских формах и гибридах не представляется возможным в виду отсутствия данных о биохимических реакциях, приводящих к образовании этих соединений и ферментах, катализирующих отдельные этапы их биосинтеза.

2.6. Влияние различных подвоев на состав и содержание эфирных 1гасел привоев мандарина и апельсина

Исследования зарубежных и советских ученых показали, что морозоустойчивость, урожайность, скороспелость, скороплодность, химический состав листьев и плодов цитрусовых в значительной мере зависят от вида подвоя. Установлено также, что привой оказывает влияние на подвой, в частности на развитие корневой системы. Под влиянием подвоев в плодах привоя цитрусовых меняется количественное содержание эфирных масел я соотношение компонентов /бгввсИег вt а1. , 1971; Keзtвтзor^ ^ а1. , 1974; К«в*егзоп ei а1. , 1977/. Мы провели сравнительное исследование эфирных масел листьев морозоустойчивых подвоев Юнос-Юзу, Вильсоний, три-фолиатн и привитых на них апельсина сорта "Вашингтон Нэвал", мандарина Уншиу, а также корнесобственного апельсина того же 'сорта. Листья для анализа брались в период цветения из плодоносящих растений с опытного участка Багумского ботанического сада.

Исследование эфирных масел привоев и корнесобственного апельсина показало, что все соединения, содержащиеся в листьях привоев, представлены и в листьях корнесобственного апельсина.

Таблица 4

Состав эфщшых масел листьев корнесобственного апельсина, подвоев и привоев мандарина Ушиу и апельсина (%)

! ! В ! + ! +

Компоненты 1 о о а дон и 1 ° ] о а! I 1 р о,В . со о ¡¡£ ! оз 1

! § м а I а о и ¡•9« о ' ЗЯ т Манд Юное

! э I ю + I р,са В | £7н а зе®

а -Туйен — - - 1 - 1,2 0,4

Каьфен - - - - 0,1 0,2

а-Плнен 1,3 1,6' 4,4 2,5 3,8 1,7

р -Пинен 1,4 2,3 2,3 3,6 14,2 6,2

Сабинен 52,4 43,2 38,3 41,1 1.3 2,0

Мирцен 4,3 12,3 4,5 6,3 0,8 1.3

Д3 -Карен 2,8 0,7 1Д 0,6 - -

а -Феллаидрен - - V - од 0,6

Оцимен 0,6 0,4 1,3 0,5 - -

а-Тершшен 0,7 0,4 0,7 0,3 0,3 1.2

Лимонен 3,4 1.5 5,0 6,5 3,9 3,7

V-Терпинен 7,4 10,0 9,6 II.I 35,4 35,2

п -Циыол 0,1 0,2 0,6 0,8 15,2 15,9

ЦитрОЕашшль 1,8 1Д 1,4 1.6 - -

Ливалоол 7,2 6,9 6,0 8,0 6,2 3,2

Тершшен-4-од 8,0 10,1 15,5 9,0 - -

а-Терпенеол 0,5 од 0,2 0,2 2,3 2,8

Нераль - - - - 0,8 1.3

¡}-Элошн - - - - 5,3 8,1

Р-Кариофиллен 0,4 0,1 0,4 0,2 0,8 3,8

р- Селянен - , - - - 0,2 1.6

Цнтронеллол - - - - од 0,6

Нерол 0,7 0,1 0,7 0,3 - -

Геращхол 0,6 од 0,4 0,9 0,2 0,8-

Различие набдвдается в количественном содержания отдельных соединений (табл.4). Как видно из этой таблицы, в привоях значительно яиг^ содержание основного компонента сабинена, а таете

дз -карана и а-терпшгоола. Листья привоев характеризуются сравнительно высоким содержанием v -терпинена, а - и ß -пипе-нов и тэршшен-4-ола. Аналогичные изменения наблюдаются и в эфирных маслах листьев привоев мандарина.

Данные анализа показывают, что возникшие в результате прививок изменения в составе моно- и сесквдтерпенондов в листьях апельсина и иандарина носят по качественный, а количественный характер. Разница в количественном содержании отдолыгцх сседя-нений в эфирных маслах привоев мандарина и апельсина по е :ой вероятности вызвана взаимовлиянием подвоя и привоя.

2.7. Перспективы использования эфирных масел гибридов померанцевых и отходов переработки цитрусовых плодов

На основании проведенных исследований химического состава эфирных масел листьев я плодов гибридов я данных парфюмерной оценки, гибриды как сырье для эфирномасличной промышленности модно разделить на две группы: первая - гибриды, листья коториг можно использовать для получения петиграноЕых эфирных масел. К этой группе относятся гибриды лимона, ¿авдерозы и цитрона о трифолиатой, Внос-Юзу и Вильсоний. Эфирные масла листьев гкбрц-дов лимона й 919 (лимон без колючек х Вяльсоиий), & 30837'(лимон без колючек х Dioc-Юзу), й 30026 (Пандероза х Трифоляата) характеризуются своеобразным, приятным ароматом, и с успехом могут быть использованы в парфюмерной промышленности.

Ко второй группе относятся гибриды лимона, апельсина, грейпфрута с трифолиатой. Для получения эфирных масел из этой группы можно использовать кожуру плодов. Эфирные масла из кожуры плодов апельсина 511 х трифолиата (S 502), мандарин Уншиу х Наг-сумикан Fg (й 8), грейпфрут Дункан х трифолиата (Й 717) и гибрид лимона Грузинского с трифолиатой ЕГ-104, ?2 6463-2/36 получили хорошую парфюмерную оценку.

Эфирное масло побегов лимона Диоскурня, полученное в производственных условиях, имело светло-зеленый цвет и характерный приятный запах. Исследования показали, что обрезка и формирование не оказывает отрицательного влияния на урожайность и качество плодов лимона Диоскурия. При этом зеленые обрезки соотав-

ляэт примерно '/ии-хиио кг с каздого гектара. Лимон Диоскурия можно возделывать и в виде порослевой культуры для получения эфирного масла и получить более 10 т зеленой массы с гектара. Парфюмерной оценкой установлено, что эфирное масло побегов лимона Диоскурия с успехом макет использоваться в парфюмерно-косметической промышленности.

За последние годы резко возросла сырьевая база консервных предприятий, перерабатывающих цитрусовые. В связи о этим народнохозяйственное значение приобрели вопросы комплексного использования урожая плодов. Валовый сбор мандарина в ГССР составляет около от общего урожая цитрусовых шюдов. Основная часть плодов мандарина используется в свежем виде, часть перерабатывается на соки и консервы. При производстве мандаринового сова образуются отжимы, которые перерабатываются на различные кондитерские полуфабрикаты. Однако часть (5-6 тыс.тонн) отжимов совершенно не используется. Исследованиями установлено, что в отжимах плодов мандаринов остается эфирное масло, которое составляет до 50£ от его первоначального содержания в Плодах (Фишыан, 1981).

Мы считали целесообразным выделить из отжимов мандарина экстракцией этиловым спиртом эфирные масла наряду с комплексом нелетучих соединений (витамины, каротишиды, феяолыше соединения, азотистые вещества, сахара) и применять настой в косметической промышленности, остро нуждающейся в фитопрепаратах.

По данным ВНИИ синтетических и натуральных душистых веществ и Тбилисской парфюмерно-косметической фабрики "Иверия" настой имеет приятный запах и представляет интерес для косметической промышленности.

По заключению Московского НШ косметологии ЫЗ Р05СР препа- -рат из отжимов плодов мандарина не раздражает кожу, не оказывает сенсибилиаирухвдего и аллергозирупцего действия, не токсичен и оказывает положительное влияние на физиологические функции кожи при его накожном применении.

В результате проведенных опытов на Тбилисской парфюмерно-косметической фабрике "Иверия" созданы рецептуры косметических изделий с применением препарата из плодов мандарина.

2.8. Монотерпеновды лавра благородного

Ш исследовали химический состав эфирных масел, выделенных перегонкой с водяным паром из здоровых, а также желтых и опавших листьев лавра благородного.

Среди монотерленовых углеводородов в эфирных маслах листьев нами идентифицированы 1-а-пинен, кам^юн, |-р-шшен, 1 -са-бинен, р-мирцен, а - и р -фелландрены, I-лимонен, у-терпи-нен, п-цимол, терпинолен. Из легколетучей части эфирного масла выделен и идентифицирован 1,8-цинеол.

Из эфирных масел листьев лавра адсорбционной жидкостной хроматографией и препаративной ГЖ выделены 6 сесквитерпеновых углеводородов, среди которых идентифицирована р -элемен, р -кариофиллен, р-селийен, у -кадинен.

Значительная часть лаврового эфирного масла представлена эфирами терпеновых спиртов и фенолов. В составе масел идентифицированы а-терпинилацетат, метилэвгенол, ацетилэвгенол, бор-шшацетат.

Среди свободных спиртов и фенолов идентифицированы линало-ол, герпянен-4-ол, нерол, гераниол, борнеол, гексанол, эвгенол,

В составе свободных кислот идентифицированы уксусная, масляная, капроновая, энантовая, капроновая и пелоргоновая кислоты.

В результате проведенных наш исследований установлено, что по составу и соотношении моно- и сесквитарпеноидов желтые и опавшие листья практически не отличаются от здоровых листьев лавра благородного (табл.5).

До начала наших исследований эфирные масла стеблей лавра благородного не изучали. Проведение этих исследований позволяет выявить возможность использования стеблей, которые как и желтые, ломанные и нестандартные являются отходами при заготовке к переработке лаврового листа.

Данные о содержании эфирного масла в стеблях разного диаметра, коре и древесине приводятся ниже (% на сухой вес):

до 2 ш 2-4 ш 4-6 ш 6-12 1

Стебли ' 1.2 0,8 0,5 0,3

Кора ,2,0 1.9 1.5 1,4

Древесина 0,5 0,3 ОД 0,03

Как видно из приведенных данных, о увеличением диаметра, а

Таблица 5

Состав эфирных масел лавра благородного, %

Компоненты Здоровые листья Желтые и опав-} шие листья j Стебли Кора ¡стеб-рей t Древесина стеблей

а -Пянен 5,6 2,9 3,5 4,0 1,0

Камфен 0,3 од 0,2 0,3 сл.

р-Пинен 5,1 6,4 3,6 4,3 0,3

Сабинен 6,7 8,7 8,7 7.6 15,3

Мирцен 1,8 1.0 0,8 1,0 0,2

а-Фелландрен 0,2 ОД ОД 0,2 сл.

Лимонен 1,3 2,4 1.5 1,8 сл.

Р -Феллаццрен 0,5 0.2 0,4 0,6 сл.

1,8-Цинеол 36,2 38,8 32,8 37,7 7,9

у-Терпинен 0,4 0,2 0,2 0,3 сл.

п-Димол 0,3 0,2 0,4 С,5 сл.

Терпянолен 0,1 од од 0,2 сл.

Линялоол 5,6 7,8 6,6 6,6 5,2

Терпинен-4-ол 6,7 5,0 7,0 6,8 8,4

Кариофиллен 0,3 од 0,4 0,7 0,7

а-Тершшеол 0,2 0,2 0,5 ' 0,3 1.9

о-Терпякилацота г 16,5 14,3 20,5 17,3 44,8

Метилэвгенол ' 5,9 5Д 3,2 зд 3,8

Эвгенол 2,0 2,9 2,2 1,7 5,0

следовательно, возраста стеблей содерзание эфирного масла в древесине значительно уменьшается. Это характерно и для коры, хотя и в меньшей степени.

Результаты анализа химического состава эфирных масел коры Е древесшш стеблей приводятся в табл.5. Как видно из приведенных данных, эфирные масла листьев и коры стеблей при одинаковом качественном составе ьезначительно отличаются по количественному содержанию моно- и сескватерленоядов. Б отличив от них в масле древесины.превалирует «-терпишиацетаг, сравнительно больше содержание сабинена, эвгенола, а-тершшеола и существенно попилена концентрация 1,8-цшюола. Ряд монотерпоноЕых углеводородов присутствует в следовых количествах. Лекалоол, Р-ка-

риофиллен и торпинен-4-ол во всех исследуетшх частях лавра содержатся в одинаковом количество.

Существенное различие в соотношении моноторпеноидов в листьях, коре и дровосяно стоблой, в частности низкая концентрация 1,8-цинеола и рада моноторпеновых углеводородов и высокое содержание «-тершшилацотата в масло древесины наводит на мысль, что монотердоноида в древесине способны претерпевать метаболические превращения. С химической точки зрения ■ а-терпинилацо-гат является продуктом превращения как лимонена (гидратация и этерификяция), так и 1,8-цинеола (изомеризация и отарификация) /Майо, 1963/. Не исключено, что лимонен и 1,8-цинеол, образующиеся в результате биосинтетичоских процессов в листьях лавра, транслоцируются в побеги и в древесине претерпевают аналогичные вторичные превращения, или же 1,8-цинеол и другие моноторпено-вые углеводороды претерпевают катаболичоские превращения в древесине с образованием нелетучих соединений, в частности, моно-тершпимглюхо задов /СгоЬеои , 1984/. В пользу этого предположения свидетельствует исследование, подтверждающее, что катабо-лические превращения происходят в мосте, отличном от места синтеза монотерпеноцдов /Сгогеаи , 1ЭВ4/.

В стеблях диаметром до 12 мм древесина и кора составляют в среднем 70 и 20% соответственно, однако лх значимость определяется не весовым количеством, так как содержание в них эфирного масла различно. Эфирное масло в стеблях, в основном, легализовано в коре и практически определяет масличное«, химический состав и оргаиолептические свойства эфирного ¡гасла из целых стеб.тей.

Из табл.5 можно заметить, что эфирные масла стеблей по количественного содержанию компонентов несколько отличаются от эфирного гасла листьев. Однако это расхождение можно считать несуществен!™, если учесть, что даже образцы эфирного масла из взрослых листьев одного дерева или разных деревьев с одной плантации различаются между собой в не меньшей степени. •

В результате сравнительного хвшчесхсого исследования н многочисленными дегустациями доказано, что эфирное масло стеблей и отходов производства лаврового листа практически не отличается от эфирного масла здоровых, стандартных листьев. Это дает возможность применять эфирные масля стеблей и отходов производства лаврового листа наравне с эфирным маслом стандартных лис-

тьев.

В процессе заготовки, сортировки и расфасовки листьев лавра образуются до 5000 т стеблей и нестандартные листья, из которых можно получить до 30 т лаврового эфирного масла.

На основе проведенных исследований разработана технология и отраслевой.стандарт ОСТ-18-33-72 на»эфирное масло, полученное из стеблей и отходов лавра благородного.

Э$иромасличными заводами ГССР осуществляется выработка эфирного масла из отходов производства лавра благородного.

До начала наших исследований среди монотерпеноидов плодов лавра благородного били идентифицированы а - и р-пинены, 1,8-цинеол, а -тершшеол, линалоол, циграль / М1вага. , 1966/. Мы изучали химический состав эфирного масла зрелых плодов лавра благородного.

В составе эфирного ыаола идентифицированы и количественно определены следующие компоненты: а-туйея (0,3$), а-пинен (2,1%), кам£ен (0,7$), р -пинен (3,4$), сабинен (3,4$), мирцен (0.7$). лимонен (1,455), 1,&-цинеол (18,555), У -терпинен (0,8255), п -цимол (1,4?), линалоол (4,055), терпянен-4-ол (26,855), не-раль (2,6$), гараниаль (1,8$), о -терпинялацетат (18,2$), метил-эвгенол (2,155), коричная кислота (1,1$). В следввых количествах обнаружены уксусная, масляная, капроновая и ксприловая кислоты.

В отличие от листьев к стеблей в плодах содержатся нераль, гераниаль, Га-туйен, коричная кислота. Эвгенол, ос-и р-фол-ландрены, ацетилэвгенол в плодах отсутствуют. Наблгщается значительное отличив в количественном содержании 1,8-цинеола, тер-пинен-4-ола, сабинена, р-шшона, метилэвгенола.

2.9, Состав эфирных масел в листьях лавра благородного в зависимости от мест произрастания

Анализ литературных данных показал, что по соотношению компонентов эфирные масла листьев лавра благородного, произрастающего в разных регионах мира, значительно отличаются. В частности. имеются довольно большие расхождения в содержании -пинана, 1,8-цинеола, линалоола, !а-тершшилацетата, метилэвгенола. Но данным гь-иЫ® (1966) в масле из листьев лавра благородного, произрастающего в Греции, содержится 'р -пинен - 2,5$,

пом до начала созревания плодов и лишь на последних фазах развития уменьшается с 15 до 5 мкмоль на плод, тогда как в этот se пвриод абсолютное содержание лимонена увеличивается с 200 до 400 мкыолъ на плод. Практически аналогично изменяются и абсолютные количества этих соединений в плодах лимона Мейера.

Динамика накопления моно- а сесквитерпеноадов в листьях мандарина и лимона заметно отличается (рис.4 и 5). В листьях мандарина содержание всех соединений уменьшается о начала созревания плодов, тогда как в листьях лимона этот процесс начинается сравнительно позже - в период вынужденного покоя. Можно предполагать, что такое существенное уменьшение монотерпеяондов вызвано их катаболизмом шш передвижением в другие органы растения. Начиная с фазы набухания почек ыавдаряна интенсивность метаболических процеосов усаливается, в результате чего быстро увеличивается количество всех моно- и сесквитерпеноидов. В листьях лимона столь существенных увеличений в содержании мокотер-пеновдов не происходит.

1983 Дата сбора образцов

Рис.4. Динамика накопления линалоола (I), лимонена (2), а-тершшеола (3), р-элемена (4), р-кариофил-лена (5) я (3 -пилена (6) в листьях мандарина Ун~ ияу'в онтогенезе.

1983 , . 19М

Дата сбора ооразцов

Рис.5. Количественное изменение лдыонена (I), " у -тер-пинвна (2), лкналоола (3), кераля (4) и геранааля <5) в листьях лимона Мейера в онтогенезе.

В отличие от мандарина ыонотерпеноады листьев лимона, в основном, представлены d-лиыоненом, максимальное содержание которого по времени совпадает с максимумом его содержания в плодах.

IIa рис.6 графически представлены изменения содержания V-терпияена и п -цимола в процессе онтогенеза в листьях мандарина. Анализ накопления этих соединений свидетельствует о тоы, что снижение уровня v -тершшена сопровождается увеличением уровня in-циыола. Перше акстрецуш этих соединений наблодают-ся в сентябре, что иояно объяснить усилением окисления V -тершшена. В дальнейшем до конца октября наблюдается обратная картина метаболизма у-терпшона в n-цишл. С ноября характер изменения содержания этих соединений практически на отличается друг от друга. На основе полученных данных можно предполагать, что в листьях мандарина Ушлиу присутствуют ферментные системы, синтезирующие V -тердинен и п-итол.

1.VI 4VI12.VIU 5.IX 2.Х 29.X 29.XI 2I.XH20.1 2211 20.nU9.1V 1S.V 1983 1984

Дета сбора образцов

Рис.6. Изменение содержания у-торпянена (I) и п-ци-мола (2) в листьях мандарина Уншиу в онтогенезе

3.2. Превращение у-герпинепа з п-цимол в бесклеточном экстракте листьев мандарина Уншиу

Исследование метаболизма терпенов в растениях, даже провз-денное в онтогенезе, но молот дать прямых доказательств путей превращения отдельных терпенов. Большая часть достижений в области исследования биосинтеза я штаболизма терпенов основана на изучении путей их обмена в бесклеточннх системах. Дет установления природы окисления У -терпянена в листьях мандарина Уншиу мы также использовали эксперименты с бесклеточннш экстракта!®.

Контрольные опыты показали, что выделенный ферментный про-парат не содержит У -терпинен я п -цимол, у -терпинен в отсутствии босхлеточного экстракта в 0,1 М боратном буфере, рН 8,7 в течение I ч но претерпевает химических превращений.

Дзшшо но окпеленяэ у-торпинена в п-цамол в бесклеточ-ногл экстракте я влиянии ингибиторов на указанный процесс прэ.ц-ставлены на рис.7. О скорости превращения у -терпинека судили по количеству образовавшегося из него п -цимола а погребло-ни» кислорода.

Анализ полученных результатов показывает, что у -терпинен превращается в п-цямол под действием ферментного препарата, а добавление в инкубационную среду НАДФ ускоряет этот процесо.

Рис.7. Влияние ингибиторов на динамику образования п -цкмола из Y -тершшена в бесклеточном экстракте листьев мандарина (I- контроль, 2- ДДТК, 3- n-ХМБ, 4-11йН}).

V -терпинена, л -ХЫБ

зо « 60

Времи инкубации. мин

ДДТК малой степени влияет на окисление усиливает, а азид подавляет окисление.

Измерения потребления кислорода инкубационной средой показали, что л-ХМБ и ДДТК но влияет, НАДЬ в значительной степени повышает поглощение кислорода, а азид натрия угнетает данный процесс. Это указывает на участие гемосодерагаыих ферментных систем в окислонин у -терпинена.

Образование продуктов гидроксилирования п-цимола - тимол, карвакрол, р-цимол-8-ол, в инкубационной среде не производилось. На хроматограммах наряду с у -терпиненом и п -цимо-лом в малых количествах присутствовали несколько неидентифици-рованных легколетучих соединений, часть которых после внесения в инкубационную среду ингибиторов и НАДО исчезала.

К настоящему времени установлена общая особенность окислительного метаболизма циклических олефинов. Из некоторых видов растений выделены оксиредуктазы, участвувдие во вторичных превращениях терпенов /Croteau ,1984/. Аналогичные ферменты должны присутствовать и в листьях мандарина Уншиу.

Данные, полученные с применением коферментов и ингибиторов, а также контроль аа потреблением кислорода указывают на возмок-ность существования двух различпшс ферментных систем окисления . Y -терпинена в листьях мандарина Уншиу. Одна из них, более активная, по-видимому, принадлежит к оксидазам и содержит сульф-

гвдряльнне группы я гемовое железо в активном центре. При ии-гибировании указанной ферментной системы с помощью n -X!© превращение у -терштена в п -цимол происходит в оснопнсм за счет другой системы, вероятно относящейся к дегидрогеназам, ко-ферментом которой может выступать НАДЬ.

3.3. Динамика накопления моно- и свсквиторпоноадов в листьях лавра благородного в онтогонезо

На начальных фазах развития листьев лавра благородного значительно изгоняется качественный состав эфирных масел. В эфирном масло еще но сформировавшихся листьев отсутствуют о: -и р-фвлландреш, лимонен и п-цимол, которые появляются в mese. С июня качественный состав эфирных масел стабилизируется.

В результате проведенных нами исследований установлено, что на начальных фазах развития листьев лавра благородного в них интенсивно накапливаются 1,8-цинеол, а-терпшшгацегаг.тер-шшен-4-ол, линплоол, мотилэвгенол, монотерлеиовые углеводороды и существенно уменьшается содержание сосквитерпеновых углеводородов. У взрослых же листьев значительных количество1шых изменений моно- п сесквятерпеноидов не наблюдается.

Динамика накопления 1,8-цинеола, а -терпинялацетата и мэ-талэвгонола в молодых я взрослых листьях лавра благородного представлена па рис.8.

На основания данных динаиики накопления моно- и сесквятерпеноидов во взрослых листьях лавра можно судить, что процесса их биосинтеза взаимопревращения в онтогенезе значительно ослаблены.

Изменения соотношения компонентов эфирного масла в онтогенезе сказшзаотся на его запахе. Э^яряоа гасло, выделенное из 1-2 месячных листьев, характорязуогся несвойственным для лавра запахом. На третьем месяце жизни листа ароматические свойства эфирного гасла стабилизируются. Однако парфюкорная оцэнка ползала, что эфирными маслами, шдолешшми: из листьев в раз-личине периода вегетация, наблвдаится некоторые различия. Эфяр-кые гзедэ, нолученлш из ллстьоп э осенле-зз.тай период, характеризуется бохпо гирзлелним цшюолог.!::: эааахсм, что обусловлено ергезгтакю r-iccrert содор-злясч 1,8-цппссла, обладающего по ссз^от с другой ::с-аснсцггл^ лгг.рогого Мирного гнела

1982 198] 1982 1983

Дата сбора образцов

Рио.8. Количественное изменение 1,8-цинеола (I),

"а-тершшилацегата (2) и ыеталэвгенола (3) в молоди (А) и взрослых (Б) листьях лавра благородного в онтогенезе.

высокой интенсивность!) запаха.

Дта производства эфирного масла из листьев лавра благородного сбор урожая целесообразно осуществлять в осенне-зимний период. В пользу этого свидетельствует высокое содержание эфирного масла в сырье в этот период года и сравнительно высокая концентрация в масле 1,8-цшшола и метшэвганола, обладающих ценными фарщке-терапввтичвекши свойствами.

3.4. Метаболизм эндогенных 1,8-цинеола и а -терпяншь ац'отага во взрослых листьях лавра благородного

С цвлыо изучения метаболической активности основных ыоно-терпоноидов взросл их листьев лавра благородного - 1,8-цинеола я и -аерлншлацэгага, которая (особенно 1,8-цинеол) но претор-

певают значительных изменений в онтогенезе (рис.ш ш использовали технику т.н. "пульсовой метки". На основании изменения удельной и суммарной радиоактивности можно судить о метаболизме эндогенных монотерпеноидов. Существенное снижение радиоактивности эндогенных монотерпеноидов дает возможность установить, что эти соединения претерпевают метаболические превращения.

Листья лавра благородного экспонировали в атмосфере ^С02 и затем в течоняе 96 ч наблвдали за изменением радиоактивности 1,8-цинеола и а -тершшилацетат.

Из данных, приведенных на рис.9,А., следует, что содержание 1,8-цинеола в листьях лавра благородного в течение первых 6 ч экспозиция в атмосфере без *4С02 повышается, далее снижается и остается неизменным в интервале между 24 и 72 ч. К концу опыта содержание 1,8-цинеола незначительно повышается.

Рис.9. Динамика содержания

(A), суммарной (Б) я удельной

(B) радиоактивности 1,8-цинеола (I) и а-терпинияаце-тата (2) в листьях лавра благородного.

е и <з п

Зксмзчвм без "СОг.ч-

Уровень а -торпшклацетата в течение первых 6 ч экспозиции понижается, а'затеи возрастает до исходного уровня.

- за -

Ухе в начала опыта I,8-цинеол и а-терпянилацетат обладали довольно высокой радиоактивностью (рис.9,Б), Через 6 ч экспозиции в атмосфера без радиоактивность 1,8-цинеола достигает максимальной величины. В последующие 84 ч экспозиции радиоактивность 1,8-цинеола значительно снижается, что указывает на его метаболизм. Аналогичный образом изменяется и удельная радиоактивность 1,8-цшюола (рис.9,В). Период полураспада для 1,8-цинеола составляет примерно 45 ч.

Максимальной радиоактивности а -терпшшлацетат достигает через 24 ч после экспозиции с 1<!С02. В последующие 72 ч суммарная радиоактивность уменьшается. Следовательно, можно сделать вывод, что в этот промежуток времени интенсифицируется метаболизм этого соединения. Период полураспада о-тврпшшлацатата составляет примерно 36 ч.

Отрицательная корреляция между изменением содержания 1,8-цинеола с одной стороны, и а-тершщеола, а-тершшилацета-та и тершшен-4-ояа с другой стороны, свидетельствует о возможной роли 1,8-цинеола как предшественника этих соединений. Это предположение подтверждается и в опытах с учетом радиоактивности, поскольку радиоактивность в 1,8-цинеоле появляется, достигает максимальной величины и затем снижается раньые, чем таковая для а -терпинилацетата.

Крото и Карп (1976) не исключают возможность, что 1,8-ци-неол может быть предшественником других циклических монотерпенов, хотя ферментативное превращение нершширофосфата в 1,8-цинеол и а.-терпонеол в бесклеточных препаратах из шалфея показало, что эти соединения образуются независимо друг от друга. Весьма вероятно, что накопление 1,8-цинеола в листьях лавра в осенне-зимний период связано с низкой активностью фермонтных систем, принимающих участие в его катаболизме.

Такт) образом, на основе полученных данных можно заключить, что во взрослых листьях лавра благородного 1,8-цинвол и а -терпинилацетат активно матаболизируются.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Ыоноторпеноиды относятся к группе веществ специализированного обмена растений. Функция этих соединений в растениях не выяснена, Имеется много примеров, когда отдельные моноторпенои-

ды или их смеси обуславливают привлечение ошшшда и переносящих семена животных, отпугивание насекомых-вредителей и травоядных животных, стойкость к микробному поражению и подавление прорастания или роста потенциальных конкурентов. Зфи-ромаслячные железы удобно расположены для осуществления коммуникационной или защитной функции. Классическое представление о моногерпеноидах как об гаюргшгх продуктах, выделяемые особыми железистыми структурами, предполагало отсутствие метаболической н физиологической функций. Однако проведенные за последние годы исследования показали, что^моноторпеноиды но инортш, а быстро синтезируются я катаболизяруюгся.

Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что в онтогенезе растений мандарина, лимона и благородного лавра монотерпеноидц подвергаются количественным изменениям, причем эти изменения направлены не только в сторону накопления одних соединений, но я уменьшения других, что указывает на их метаболическую активность. Содержание моно- и сесквитерпеноядов по всей вероятности определяется но только реакциями циклизация предшественников, но и окиолительно-восстановителышми взаимопревращениями и катаболизмом моно- и сесквятерпеновдов.

По современном представлениям различают два основных типа обмена ыонотерпеноидов /Croteau, Loomis , 1973;Croteau , 1981; Croteau , 1984/. Першй тин обмена характерен для молодых, растущих тканей. Он определяется интенсивностью фотосинтеза в них и скоростью реакций, обусловливающих взаимопревращения в ряду монотерпеноидов. В этом случае биосинтез превалирует над катаболизмом, что приводит к увеличению содержания моно- и сесквитерпеновдов в молодых, растущих тканях.

Второй тип обмена наблюдается при старении органов и тканей. Для него характерно преобладание процессов распада над биосинтезом, что приводит к уменьшению содерканшг терпенов.

Как показывают результаты наших исследований, содержание монотерпеноидов в онтогенезе многолетних вечнозеленых расгенлй цитрусовых и у лавра благородного не всегда уменьшается в зрелых тканях. На биосинтезе лимонена, у-терпкнена, тимола н (3 -злемена не сказывайся процесс старения тканей коауры плодов мандарина и люш. С другой стороны с начала созревания, по мере старения тканей конурн плодов в них уменьшается абсолютное содерг^ние лшмлоола, а -тертшеола, п-цшола. Факт зна-

- 4U -

нагельного снижения содержания этих соединений может свидетельствовать, либо об ослаблении их образования, либо о катаболизме и транспорте этих соединений в другие органы.

Представленные данные показывают, что метаболизм монотер-певовдов со значительной интенсивностью осуществляется и во взрослых листьях мандарина е. в листьях лавра благородного.

Исследование монотерпеноидов листьев, стеблей и плодов лавра благородного, цитрусовых, их диких сородичей и гибридов цитрусовых позволило использовать полученные результаты для практических и теоретических обобщений хемотаксономического, экологического, ресурсоведческого и технологического характера. Так, проведенные нами исследования показали, что качественный состав и количественное соотношение монотерпеноидов специфичны для каждого органа цитрусовых и лавра благородного, что видимо связано с особенностями их метаболизма и той ролью, которую выполняют указанные органы в растениях. Состав и соотношение монотерпенов характерны для каждого вида цитрусовых.Сортовые различия таете прослеживаются в изменении соотношения ыонотерпеноидов.

Полученные наш: данные позволяют использовать монохерпе-ноиды в качестве биохимических шркеров в селекционно-генетн-ческих исследованиях.

По нашему мнению, данные химического анализа монотерпеноидов цитрусовых могут оказаться полезными при классификации рода citrus . Таксономия этого рода полна сложностей и противоречива . Рассмотрение монотерпеноидов в качестве вспомогательных хемотаксономических признаков при классификации рода Citrus могло бы привести к лучшему пониманию концепщш этого рода и близких ему родов. Для решения этой проблемы необходимо исследование моно- и сесквитерпеноидов всех вадов и сортов цитрусовых и родственных ему родов.

Сопоставление собственных результатов исследований с литературными данными позволяет заключить, что по содержанию основных монотерпеноидов интродуцированше в Грузии цитрусовые, несмотря на сравнительно суровые климатические условия произрастания, незначительно отличаются от цитрусовых, произрастаицих в других регионах мира.

Исследование эфирных масел листьев лавра благородного из разных мест произрастания также показали, что в зависимости от

экологических условий географических мест произрастания состав эфирных масел стабилен и концентрация отдельных соединений из- ' меняется в небольших пределах.

Исследование монотерпеноидов межвидовых и межродовых гибридов цитрусовых и их родительских форм показало, что биосинтез моногерпеновдов находится под строгим генетическим контролем. Выявлены морозостойкие гибриды, для которых характерен гетероэисный эффект в отношении многих ценных соединений, что дает возможность рекомендовать возделывание гибридов цитрусовых для производства эфирных масел из листьев и плодов. Производство эфирных масел из гибридов цитрусовых расширит ассортимент натуральных эфирных масел, в которых остро нуждается пар-фсыерно-косметическая промышленность страны.

Наши исследования позволяли внедрить в промышленность эфирные масла из отходов производства и заготовки лаврового листа.

ВЫВОДЫ

1. В результата изучения моногерпеновдов листьев и плодов мандарина, лимона, апельсина, их дшсих сородичей, межвидовых н межродовых гибридов цитрусовых выделено я идентифицировано

25 соединений. Установлено, что качественный состав и количественное соотношение моногерпеновдов специфично для каждого вида цитрусовых. Сортовые различия в основном проявляется разным соотношением монотерпеноидов.

Показано, что морозостойкие сородичи цитрусовых растений характеризуются высоким содержанием в листьях V -гврпкнонэ.

2. У межвидовых я межродовых гибридов цитрусовых наблвдаот-ся многие наследственные различия в содеркании отдельных мопо-и сесквитерпеноидов. Эти различия носят в основном количественный характер. В листьях и плодах некоторых гибридов цитрусовых с грифолиага, Влльсоняй, Юнос-Юзу, Ичангэнсисом наблюдается готерозисный эффект в отношении лимонена, а-терпинеола, линз-лоола, цитроиеллаля и р-шямна. Показано, что морфологическое сходство или различия гибридных растений о том или иным родителем не всегда коррелирует с химическим составом зфгфкых ьасол последних.

3. Исследован состав «оно- и сескзкторисноядов ллсгьов,шхо-

доб. кори и дравесшщ стеблей лавра благородного. Шдолэно в адентпфицировано 18 соединений. Впервые в лавре благородной идентифицироваш I -сабкнан, |-таршшен-4-ол, |3 -элемен,

Р -кариофиллен. Листья и кора стеблей по составу и количественному содержанию монотариеноидов практически не отличаются друг от друга, тогда как древесина стеблей и плоди существенно отличаются от них как по составу, так и соотношению компонентов. ¡Лоно- и сесквитерпеноидц в основном локализованы в коре и определяют масличвость, химический состав и органолептяческиэ свойства эфирного масла стеблей. Показано, что химический состав эфирных шсел здоровых, желтых и опавших листьев практически одинаков.

4. Исследовано влишиа на химический состав эфирных шсел листьев лавра благородцоги и плодов обыкновенных лимонов экологических и географических условий произрастания растений. Установлено, что несмотря на отличающиеся почвенно-климатичес-иы условия качественный состав не меняется, а количественное содержание ысжотерпеновдов в офирних маслах изменяется в небольших пределах.

5. Установлено, что в начальных фазах развития листьев лавра благородного в них интенсивно накапливается 1,8-цинэол, а -терпшшлацэтат, торшшен-4-ол, линалоол, матглэвгенол и терпе-новые углеводороды и уменьшается содержание сесквитарпоновых углеводородов. В онтогенезе взрослых листьев значительных количественных изменений моно- и сесквитерпеноидов не происходит. Показано, что 1,8-цннеол и ,а -тершишлацетат во взрослых листьях лавра активно метаболизируются. Период полураспада для 1,8 цинеола и а-тершшилацатата составляет, соответственно,

45 и 36 ч.

6. Исследована динамика накопления моно- и сесквитерпеноидов в листьях и плодах мандарина Унашу и лимоне Ыейера в онтогенезе. Показано, что на биосинтез у'-гершшена, р-элеыена, тимола и особенно 3-лимонена не влияет процесс созревания плодов.

7. Из_листьев мандарина получена бесклеточная система,окис-ляищая V -терпинен в п -цамсл. В присутствии ИАД5 и п -ХМБ окисление у -гершшена заметно ускоряется. Азид натрия подавляя окисление, что указывает на участие гем содержащих ферментов в превращении у-терпинека в п-цимол.

8. На основе изучения мака- я сесквитерпеноидов гяорзди» цитрусовых выявлен« морозостойкие гибриды лимона, апельсина, грейпфрута, мандарина, содержащие в листьях и плодах пзр^шорно ценные эфирные масла. При культивирования гибридов промаииэн-Носгь будет иметь стабильную сырьевую базу, для'производства цитрусов« эфирных масел. Данные проведешшх исследований легли в основу стандарта im лавровое эфирное масло. Производство лаврового afüpnoro масла яз отходов заготовки и переработка лаврового листа внедрено в промышленность.

Основное содержание диссертации опубликовано в следующих работах

1. Кокелкдзе H.A., Горяев М.И., Кротова Г.И., Прувдзе В.Г., Дембнцкий А.Д. Сообщение 24. Исследование терпеиовэй частя эфирного масла листьев и стеблей лавра благородного /ьыигия nobllis ь. / - Изв. АН КазССР, сер.хим., 1966, Я 4, с.85-91.

2. Горяев ;.!.й., Кеколадзе ILA., Кротова Г.И., Серкибаева Т.Е., Дембицкий А.Д. Сообщение 27. Исследование высокоюшядей части эфирного масло лавра благородного (baurua воЬШа lt. ).-Изв. АН КазССР, сер.хим., 1967, » 5, с.78-84.

3. Кеколадзе H.A. Сравнительное исследование химического состава эфярного тела листьев, стеблей и отходов производства лавра благородного,- Груды Грузинского НИИ лицевой промышленности, М.: Пищевая пром-сть, IS67, т.И, с.287-299.

4. Пруидзо В.Г., Кеколидзэ H.A. Исследование эфирного масла благородного лавра и его применение в пищевой промышленности. В кн. : 4-й международный конгресс по эфирным маслам,-Тбалиси, 1968, T.I.- М.: Пищевая проесть, 1971, с.272-276.

5. Kekrelidze N.A., ¡}<?гя<*ге L.V.Esaejvtiol oils оt fruits of sonô Citrus plants growirs in the Georgian SSiU-Atistr.VI int.cons^ Essential Oils (Ssn Угзnc'ixco.VSA, 7-12 Sept. 1974), Son Francisco. 1974, p. 76.

6. Кокеладзе H.A., Берадзе Л.В.» Дааникашвиля М.И. Эфирное масло плодов благородного лавра.- Шсло-аировая прошпшен-ность, 1977, Л I, с.32.

7. Кокеладзе H.A., Джапшсашвалл И. И., Фядазн Г.Li. Качественная характеристика мандариновой спиртовой настойки.- Ферментная и спиртовая промакяешгоегь, 1980, & 2, о.14-15.

8. Kefcelidze V.K. , Jojiikashvili M.J. Essential oils of limcns introduced in the Georgian SSR. - AbsIr.Symposium "The Study on Л Utilization of Genetic Resources ol Cultlvatoa Hanta of the Tropics, and Subtropics" (Praha, 1981), Praha, 1981, p. 141.

9. Кекелидзе H.A., Джаникашшли Ы.И. Потигреновое эфирное масло мандарина Уншиу,- Масло-жировая промышленность,1981, В 2, с.35-36.

10. Кекелидзе H.A., Джаникашвили М.И., Кутателадзе В.В. Эфирное масло плодов лимона сорта Новогрузинский.- Масло-жировая промшшинностъ, 1902, й 2, с.25-26.

11. Кекелидзе H.A., Джаникашвшш М.И. Пвтигреновоэ эфирное масло апельсина сорта "Вашингтон извел".- Масло-жировая промышленность, 1982, й 6, с.14.

12. Кекелидзе H.A., Дяаникашвили М.И. Эфирное масло листьев лимона G.lirionia - Химия Природ.соед. 1982, $ 4, с.523-524.

13. Кекелидзе H.A., Дяаникащвшш М.И. Эфирное масло листьев Citrus Vjisoai - Хтеш природ.соедин. 1982, & 6, с.786.

14. Кекелидзе H.A., Дшшкашвшш Ы.И. Эфирное масло листьев Citrus junos - Химия природ.соедин. 1982, & 6, с.785-786.

15. Кекелидзе H.A., Джаникаявили М.И. Эфирное масло плодов апельсинов, культивируемых в Грузинской 1С?.- Тезисы УП Советско-Индийского симпозиума по химии природных соединений. 1983, с.38. М.

16. Кекелидзе H.A., Джаникашвдпи М.И., Татаришвшш А.Н., Еагдо-швили Т.П. Эфирные масла листьев привоев мандарина c.mshiu

.- Химия природ.соедин. 1984, » 5, с.607-610.

17. Кекелидзе H.A., Джаникашвили М.И., Фипшан Г.М. Эфирное масло плодов грейпфрутов c.paradiai Racf. , произраставдих в Грузинской ССР. Химия природ.соедин. 1985, Л I, с.ПЭ-120.

18. Кекелидзе H.A., Джанякашвили М.И., Татаришвили А.Н. Распределение компонентов эфирных масел в листьях гибридов C.unshiu х с. sinensis - Известия АН ГССР, 1985, т.120, * 10, сЛ69-172.

19. Кекелидзе H.A., Дханикашвили М.И., Русадзе Л.В., Качурина А.П. Данашвд накопления монотерпеноидов Citrus lipon . -Химия природ.соедин. 1985, Я 6, с.484-487.

5Q. Кекелидзе Й.А., Джзнякашвали Ы.И. Мирные масла раннеспелых сортов мандарина citrus unahiu - Химия природ.соедян.

1985, J» 4, 0.572-573. •

21. Кекелидзе H.A. Производство лаврового эфирного масла из свежего сырья.- Масло-жировая промышленность, 1985, № 10,с.28.

22« Кекелидзе H.A., Джаникашвили М.И., Качурина А.П. Накопленна моно- и сесквитерпэноидов в листьях и плодах мандарина в онтогенезе.- Физиология и биохимия культурных раствиий,

1986, т.18, № 3, с,287-291.

23» Кекелидзе П.А., Дканикашвяля М.И., Бераиа Я.К., Хурцилава Д.И. Динамика монотерпеноидов в листьях и плодах благородного лавра в онтогенезе.- Тезисы Всесовзн.конф. "Экстрактивные вещества древесных растений. Красноярск, 1986, с. 4345.

24. Кекелидзе H.A., Домвдзе Э.Л., Дданикаиваяи U.U., Хатисашви-ли Г. О биопревращанид "У -терпинена в п -цямол в листьях мандарина c.unshiu .- Тезисы Всвсовзн.конф. "Экстрактивные вещества древесных растений". Красноярск, 1986, с.140-141.

Э5. Кекелидзе H.A., Джаникашвили Ы.И., Качурина А.П. Эфирные масла листьев я плодов гибридов померанцевых.- Масло-жировая промышленность, 1986, S 7, о.21-22.

26. Кекелидзе H.A., Ломидзв Э.П., Дканикашвяля М.И., Хатисашвя-ли Г.А. Превращение У -терпинена в n-цимол ферментной системой листьев мандарина c.unshiu , ВИНИТИ - депонированная рукопись, » 5080-В86, 1986.

27» Кекелидзе H.A., Джаникашвили М.И., Татаришвили А.Н. Влияние подвоев на эфирных маслах листьев привоев апельсина С.sinensis .- Известия АН ГССР, серия бяолог., 1987, Л 6, тДЗ, с.70-71.

28« Кеквладза H.A., Дааникашвам Ы.И., Кутатвладзе В.В. Состав водорастворимой фракции эфирного маола благородного лавра.-Масло-жировая промышленность, 1987, X 4, с.24.

29« Кекелидзе H.A., Фишыан Г.М. Цитрусовые эфирные масла. Тбилиси.: ГНИИТИТЭЙ, 1987, вып.З, с.44.

30. Кекелидзе H.A., Сургуладзе Ш.Ы., Хурцилава Д.И. Эфирное масло из листьев и кожуры плодов лимона Диосцурия. - Масло-гяровая промышленность, 1987, й 7, с.8-9.

SU. Кекелвдзе H.A. Эфирное масло коры и древесины Laurus лоМ-lifl Ь ,- Химия природ.соедин. 1987, й 3, о.458-459.

32» Кеколадзе H.A., Дганикашвили М.И., Дутателадзе В.В. Динамика накопления и формирования состава эфирного масла в листьях благородного лавра в онтогенезе.- Физиология и биохимия культурных растений. 1987, т.19, Je 6, с.606-614.

33. Кекелидзе H.A., Качурина А.П. Наследование содержания и оостава эфирных масел при межвидовой гибрвдизацин лиыона. Тезисы докл. У съезда Всесоазн.общества голетшсов и селок-цвонеров иы.Н.И.Вавило^а. Ыосква, 24-28 ноября 198?г., тЛУ, часть 3, 0.182,

34* îiekeliâsc «.A.» iLoalüs^ i.ï., Jüniliashvill U.X. Analysis of terpenc variation in leaves ünd fruito of Citrus unshiu Uaro. during cntogenesis. - Flavour und Prûgrance Journal,19G5,v.4,