Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Молекулярные механизмы взаимодействия в организме биогенных веществ животного и растительного происхождения

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Молекулярные механизмы взаимодействия в организме биогенных веществ животного и растительного происхождения"

На правах рукописи

БАБИЧЕВ АЛЕКСАНДР ВИТАЛЬЕВИЧ

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В ОРГАНИЗМЕ БИОГЕННЫХ ВЕЩЕСТВ ЖИВОТНОГО И РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Уфа - 2005

г

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ и НИИ «Международный центр по проблемам пожилых»

Научный консультант Заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор Ф.Н.Гильмиярова Официальные оппоненты доктор медицинских наук, профессор

Валерий Евгеньевич Высокогорский доктор медицинских наук, профессор Петр Низамиевич Шараев доктор медицинских наук, профессор Александр Иванович Конопля

Ведущая организация - Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ

Защита состоится « Г » Qjtf^t^-f 2005 г. в ^ часов на заседании диссертационного совета Д 208.006.03 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ, по адресу: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ.

Автореферат разослан « ^ » 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Г.Х.Мирсаева

âooé - h л

3 ^ ? ч-зе

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АКТУАЛЬНОСТЬ. Важной особенностью экологически дестабилизированной природной среды является существование организмов в предельных режимах биологических возможностей (Лукьянова JI.E., Лукьянов О.А., 2004). Катастрофические воздействия техногенных процессов по внезапности и незакономерности сходны со стихийными природными катастрофами (Шилова С.А., 1999), когда традиционные адаптивные ответы живых организмов на изменяющиеся условия среды не успевают сформироваться, а выживание определенной части населения возможно вследствие разнокачественности по устойчивости к действию повреждающих факторов.

Условия жизни в современном мире не способствуют улучшению здоровья и демографических показателей (Бурлакова Е.Б., 2004). Воздействие различных по характеру, но повреждающих по сути факторов внешней среды -техногенной загрязненности, различных видов излучения, патогенной микрофлоры и других, вносит дисбаланс в процессы рецепции, связанных с восприятием и трансдукцией регуляторных сигналов, субстратное обеспечение органов и тканей, аккумуляцию и расходование энергии, нарушает оптимальный уровень жизнедеятельности организма (Агаджанян Н.А. с соавт., 2001).

В частности, при интенсивном воздействии на организм радикал-инициирующих факторов в условиях недостаточной эффективности функционирования антиоксидантной защитной системы происходит гиперпродукция активных форм кислорода и развитие окислительного стресса (Кравченко Л.В. с соавт., 1993; Потапович А.И., Костюк В.А., 2003), который является характерным звеном патогенеза многих заболеваний (Зиновьева В.Н., Спасов А.А., 2004; De Zwart L.L. et all., 1999; Harborne J.B., Williams С. A., 2000; Tapiero H. et ail., 2002).

Это обуславливает актуальность исследований по выявлению показателей, определяющих метаболическую основу здоровья в условиях техногенного напряжения, и поиск средств превентивного воздействия на наиболее уязвимые участки обмена веществ, оценив характер взаимодействия с эндогенными соединениями экзогенных биологически активных веществ.

Наиболее рациональным подходом в этом случае является использование в качестве основы сырья растительного происхождения (Ягудина Р.И., Тишки-на B.C., 1997; Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М., 1997; Сокольская Т.А., 1998, 2000; Chrungoo V.J. et al., 1997; Luyckx F., Scheen A.J., 1997; Nosova T. et al., 1998; Sailer R. et al., 2001), поскольку, вещества природного происхождения родственны организму и могут участвовать в обмене веществ в качестве естественных агентов (Белоногова В.Д. с соавт., 2003).

Исследование выполнено в рамках федеральных программ научно-исследовательских работ:

- «Изучение взаимодействия биогенных веществ растительного и живот-

ного происхождения с системами жизнеоб

.шиишл организма- ft учетом фер-РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ I

Ï

КИБЛИОТЕКА СП« О»

ментативных и параметаболических процессов» (№ госрегистрации -01.20.03.08339),

- «Изучение свойств, состава, биологических эффектов, регуляторного потенциала экопротекторов нового поколения и разработка мер защиты населения и профилактики заболеваний» (№ госрегистрации - 01.20.03.08340).

Цель настоящего исследования - изучить особенности межмолекулярного взаимодействия веществ эндогенного происхождения (этанол, пероксид водорода) и компонентов расторопши с системами жизнеобеспечения организма для выявления общих закономерностей метаболического ответа, раскрывающих резервы метаболизма, обеспечивающие возможность целенаправленной коррекции нарушений обменных процессов. Задачи:

1. Изучить показатели пластического, энергетического обмена и состояние окислительных процессов у жителей региона с высоким уровнем техногенного загрязнения: содержание гемоглобина, общего белка и его фракций, эффективной концентрации альбумина и его связывающей способности, фибриногена, креатинина, мочевины, билирубина, общего холестерина, p-липопротеидов, триацилглицеринов, окисленных и восстановленных форм никотинамидных коферментов, активности трансаминаз (аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы), лактатдегидро-геназы, катапазы и супероксиддисмутазы.

2. Охарактеризовать состояние метаболической основы здоровья, оценив базисные метаболические пути, ключевые регуляторные системы, интегральные показатели функционального состояния организма.

3. Обосновать целесообразность использования в качестве средства метаболической коррекции силистронга и натурсила, изучив их состав, характер общебиологического и специфического действия в острых и хронических экспериментах на разных видах животных in vivo и ex vivo

4. Исследовать влияние силистронга и его компонентов силимарина и сили-бина на фермент-субстратные системы энергетического и пластического обмена в условиях полиферментных-полисубстратных систем in vitro.

5 Изучить характер воздействия флаволигнанов силистронга, изолированных силимарина и силибина на функциональную способность и метаболические процессы эритроцитов, учитывая при этом метаболические, па-раметаболические эффекты низких доз этанола.

6. На молекулярном объекте полифункциональном ферменте глицеральде-гид-3-фосфатдегидрогеназе изучить способность силистронга, силимарина, силибина и этанола ревитализировать активность фермента, модифицированного пероксидом водорода.

7. Оценить потенциал протекторного действия флаволигнанов расторопши и препарата силистронг на клеточном, субклеточном и молекулярном уровнях, используя в качестве повреждающего фактора пероксид водорода.

8 Для максимального выяснения биологических эффектов препаратов расторопши наряду с экспериментально установленным спектром биологического действия натурсила и силистронга, используя программы PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert», оценить потенциал действия составляющих их компонентов: силибина, изосилибина, дегидросилибина, силихристина, изоси-лихристина, дегидросилихристина, силидианина на организм НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Получены новые данные, раскрывающие механизмы межмолекулярного, молекулярно-клеточного взаимодействия биогенных веществ растительного и животного происхождения. Установлен характер метаболического ферментативного и параметаболического действия флаволигна-нов расторопши в составе натурсила и силистронга, а также силимарина, силибина и этанола на объектах разного уровня структурно-функциональной организации.

Результаты проведенного исследования позволили раскрыть механизм модифицирующего действия пероксида водорода, эндогенного источника свободных радикалов, продукция и повреждающее действие которого возрастает в условиях загрязнения окружающей среды химическими и физическими факторами.

Получен блок новых данных об экологически индуцированных нарушениях процессов жизнеобеспечения. Установлено, что техногенное загрязнение среды проживания служит реальной предпосылкой и полиэтиологическим фактором, вызывающим снижение энергообеспечения и уровня пластических процессов. Определены характерные признаки метаболического дефицита по параметрам белкового и углеводно-липидного обменов. Обозначены интегральные параметры, снижение уровня которых проявляется признаками синдрома хронической усталости, третьего состояния. Выявлена зависимость между распространенностью третьего универсального преморбидного состояния со снижением гемоглобина, альбумина.

Впервые выявлено ревитализирующее действие препарата силистронг на системы жизнеобеспечения организма. В серии модельных экспериментов in vivo и in vitro установлена способность силистронга, флаволигнанов силимарина и силибина восстанавливать активность, полифункциональную деятельность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы - ключевого фермента, обеспечивающего процессы аккумуляции энергии на уровне субстратов, образование алло-стерического регулятора кислород-транспортной функции гемоглобина 2,3-дифосфоглицерата. Выявленная особенность является суммарным эффектом, вклад в реализацию которого вносит этанол в малых дозах.

Новыми являются сведения о мембранопротекторном действии силистронга и его компонентов, обеспечивающих функциональную стабильность эритроцитов при действии повреждающих факторов.

Впервые с использованием методов компьютерного прогнозирования свойств - PASS и «Pharma Expert» установлен максимально возможный спектр биологического действия флаволигнанов расторопши. Характерно, что силибин

и изосилибин в наибольшей степени обладают способностью проявлять свойства антиоксиданта, ингибировать процессы перекисного окисления липидов, оказывать иммуностимулирующее и иммуномодулирующее действие; дегидро-силибин - защищать организм от агрессивных химических соединений, поддерживать целостность мембранных структур, проявлять свойства агониста апоптоза, регулировать обмен липидов и нуклеотидов; силихристин - проявляет антитоксическое действие, в том числе защищая печень от токсических повреждений, оказывая максимальный лечебный эффект при патологии данного органа; изосилихристин - связывать свободные радикалы, оказывать противоалкогольное действие; дегидросилихристин - ингибировать проницаемость мембран; силидианин - оказывать антинеопластическое и цитостатическое действие, иммуносупрессорный эффект. Выявлены зависимости между структурными характеристиками флаволигнанов расторопши и механизмами действия отмеченных эффектов.

Установлены закономерности, раскрывающие механизмы взаимодействия биологически активных веществ растительного и животного происхождения за счет потенцирования и нивелирования метаболических и параметаболических процессов на молекулярном, субклеточном, клеточном и организменном уровнях.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Работа имеет теоретическое и практическое значение. Методология изучения межмолекулярного, молекулярно-клеточного взаимодействия, разработанная в процессе решения поставленных задач по выяснению возможности и характера межвидовых влияний на процессы жизнедеятельности организма, выявила их естественный, возможно, запрограммированный характер, сложившийся в процессе фило- и онтогенеза. Такая модель экспериментальных исследований может быть использована для изучения потенциальных свойств других биологически активных веществ растительного и животного происхождения.

Выявленные закономерности мембранопротекторного действия, восстанавливающего функциональную активность ферментов, реализуются в обеспечении сбалансированности белкового, углеводного и липидного обменов, сохранения кислородотранспортной функции гемоглобина, предупреждения развития гипоксических состояний, иммуномодулирующим, репаративным, орга-нопротекторным действием, характерным для расторопши и препаратов из нее, служат основанием для широкого применения их с лечебно-профилактической целью. Повышение силистронгом физической выносливости, устойчивости к нагрузкам на нервную систему и гипоксии, позволяют рассматривать его как средство, повышающее резервные возможности организма.

Практическое значение работы обеспечивается рядом авторских свидетельств и патентов РФ

• по выделению ферментов из животных тканей: «Способ получения обогащенных ферментами фракций миокарда» (№1515692, 1989), «Способ получения малатдегидрогеназы из сердечной и скелетной мышцы» (№1635735, 1990);

• по получению биологически активных препаратов из расторопши- «Противоязвенное средство» (№ 2051686, 1996), «Способ переработки растительного сырья» (№2112020, 1998), «Лечебно-профилактическое средство широкого спектра действия (№2175238, 2001);

• по мерам улучшения экологической обстановки: «Способ биологической защиты окружающей среды от экотоксикантов» (№2092031, 1997). ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Молекулярные механизмы интеграции биологически активных компонентов силистронга и натурсила с фермент-субстратными системами энергообеспечения, анаэробного и аэробного окисления, связывающими углеводно-белковый и углеводно-липидный обмены, обеспечения сбалансированности катаболических и анаболических процессов, структурно-функциональной полноценности мембран.

2. Результаты компьютерного прогнозирования основных и альтернативных свойств биологически активных компонентов расторопши пятнистой -силибина, изосилибина, дегидросилибина, силихристина, изосилихри-стина, дегидросилихристина, силидианина, их механизма действия.

3. Протекторная и ревитализирующая роль флаволигнанов на уровне целостного организма, клеточном, молекулярном уровне, полиферментной и полисубстратной системе.

4. Блок сведений об экологически индуцированных нарушениях в обмене веществ у жителей регионов техногенного напряжения, перспективности использования силистронга и натурсила для коррекции метаболических сдвигов.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ В ПРАКТИКУ. Результаты, полученные в ходе выполнения исследования, реализованы в авторских свидетельствах и патентах

• по применению расторопши в качестве средства массового оздоровления населения в составе хлебобулочных, кондитерских, безалкогольных и алкогольных напитков (№2099960, 1997; №2099950, 1997; №2099949, 1997; №2111237, 1998; №2113808, 1998), биологически активных добавок (№2053598, 1996; №2131672, 1999).

• по определению уровня техногенного загрязнения окружающей среды -«Способ оценки суммарной токсичности химических факторов окружающей среды» (№2083983, 1997).

Данные, полученные в ходе выполнения работы, используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой Самарского государственного медицинского университета, кафедре биохимии Кировской государственной медицинской академии, кафедре биологической химии Курского государственного медицинского университета, кафедре биохимии с лабораторной диагностикой Астраханской государственной медицинской академии и работе клинико-диагностической лаборатории клиник СамГМУ.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты диссертационной работы представлены в материалах V Всесоюзного биохимического съезда (Москва, 1986), V Всесоюзной конференции «Методы получения и анализа биохимических реактивов» (Рига, 1987), VII Всесоюзного симпозиума по химии белков и пептидов (Таллин, 1987), X объединенного симпозиума биохимических обществ СССР-ГДР (Москва, 1989), конференции «Биологически активные соединения, синтез и использование» (Пенза, 1992), Всероссийской научно-практической конференции «Интеллект и выживание. Системный подход» (Самара, 1993), Всероссийской научно-практической конференции «Экология городов. Ресурсосберегающие и экологически чистые технологии» (Самара, 1993), Всероссийской научно-практической конференции «Экология и здоровье» (Самара, 1994), конференции «Биоповреждения в промышленности» (Пенза, 1994), Первом национальном конгрессе по профилактической медицине (Санкт-Петербург, 1994), VII Международной Соловецкой конференции «Экология человека» (Архангельск, 1995), 2 симпозиуме «Неинвазивные методы диагностики» (Москва. 1995), 2-ой Международной научно-практической конференции «Экология и здоровье человека» (Самара, 1995), III Национальном конгрессе по прфилакти-ческой медицине и валеологии (Санкт-Петербург, 1996), научно-практической конференции (Челябинск, 1996), 2 Международном симпозиуме «Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище» (Москва, 1996), 5 Всероссийской научно-практической конференции серии «Экология и здоровье человека» «Здоровый образ жизни - системный подход» (Самара, 1998), 5 национальном конгрессе по профилактической медицине» (Санкт-Петербург, 1998), 2 Международном конгрессе по интегративной медицине «Синтез медицины восток-запад и современных технологий - путь в 21 век» (Кипр, 1998), 2 Международном конгрессе по валеологии (Санкт-Петербург, 2000), Всероссийской конференции «Биологический возраст» (Пермь, 2000), Первого Всероссийского съезда врачей общей практики (Самара, 2000), научно-практической конференции «Актуальные вопросы последипломной подготовки на рубеже тысячелетий» (Самара, 2001), Международной конференции «Экология и здоровье в 21 веке» (Ульяновск, 2001), конференции «Здоровое питание, образование, реклама» (Москва, 2001), Первого Губернского съезда врачей (Самара, 2001), 5 Международном семинаре по вопросам пожилых «Самарские лекции» (Самара, 2001), 2 Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в 21 веке» (Москва, 2001), Межобластной научно-практической конференции «Геронтология, гериатрия, медицинская помощь ветеранам войн» (Екатеринбург, 2001), 3 съезда биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), Межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья «Биохимия: от исследования молекулярных механизмов - до внедрения их в клиническую практику и производство» (Оренбург, 2003), Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения» (Самара, 2003), Российской научно-практической конференции «Реабилитация в геронтологии и гериатрии. Геронтология и гериатрия в семейной медицине» (Курск, 2003), 8 Международной

научно-практической конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Гоа, 2004), 2 межрегиональной научно-практической конференции «Питание здорового и больного человека» (Санкт-Петербург, 2004), IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век» (Далянь, 2005), Межрегиональной научно-практической конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья (Самара, 2005), доложены на совместном заседании кафедры фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой СамГМУ и Самарского отделения Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Самара, 2005).

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано 64 работы.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной описанию объекта и методов исследования, пяти глав собственных данных, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы.

Работа изложена на 335 страницах, иллюстрирована 43 рисунками, содержит 65 таблиц. В работе использовано 587 источников, из них 219 отечественных и 368 зарубежных авторов.

ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведение работы включало несколько блоков:

- оценка изменений процессов обмена веществ в организме человека при проживании в условиях с техногенной нагрузкой и определение показателей, отражающих состояние соматического здоровья;

- определение метаболических эффектов биологически активных соединений натурсила и силистронга, оценка выраженности воздействия их на процессы энергопластического и функциональные показатели организма экспериментальных животных;

- выявление воздействия биологически активных компонентов силистронга, а также этанола и силимарина в опытах in vitro на уровне полисубстратных и полиферментных систем тканей организма;

- определение в модельных опытах характера влияния этих соединений и пе-роксида водорода на функцию дегидрогеназ мышечной ткани и эритроцитов;

- исследование молекулярных эффектов силистронга, силимарина, силиби-нина и этанола на нативную и модифицированную пероксидом водорода глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу;

- компьютерное прогнозирование спектров биологической активности фла-волигнанов расторогппи с использованием программ PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert».

Оценка состояния метаболических процессов проведена в двух регионах с разной степенью техногенной нагрузки, которые были выбраны на основании данных Приволжского межрегионального территориального управления по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды, где были обследованы 129 человек, составивших 2 группы: сравнения (62) со средним возрастом мужчин 30,2 ± 4,4 года, женщин - 29,4 ± 3,7 года и наблюдения (67) со средним возрастом мужчин 27,7 ± 5,5 года, женщин - 30,9 ± 6,0 года. Лица, подлежавшие наблюдению, работали на предприятиях соцкультбыта, по характеру трудовой деятельности не связаны с факторами производственной вредности, и не имели на момент исследования клинических и лабораторных признаков соматических заболеваний.

В сыворотке крови определялось содержание общего белка, мочевины, креатинина, билирубина, общего холестерина, триацилглицеринов, активностей аланиновой и аспарагиновой трансаминаз, лактатдегидрогеназы проведено на биохимическом анализаторе («Hitachi-902», Япония), калия и натрия - с использованием ионселективнорго электрода к данному биохимическому анализатору, ß-липопротеинов по Бурштейну и Самай (Карпищенко А.И., 1998) на фотоэлектроколориметре (КФК-3, Россия), состав белковых фракций - на анализаторе с электрофорезом (фирма «Cormey», Польша), гемоглобина на гематологическом анализаторе («Sysmex-KX-21», Япония), фибриногена на гемоста-зиологическом анализаторе («STA-Compact», Франция). Активность каталазы оценивали спектрофотометрически по методу R.S.Holmes и C.G.Masters (1970), активность супероксиддисмутазы - по методу Е.Е.Дубининой (1985) на спектрофотометре («СФ-26», Россия). Исследование содержания окисленных нико-тинамидных коферментов проводили по методу M.Kleingenberg (1963), а восстановленных форм этих коферментов - по методу H.Bergmeyer (1962). Определение общей и эффективной концентрации альбумина (г/л)_проводили по методу Ю.А.Грызунова с соавт. (1994) на флуориметре «Квант-7». Рассчитывали резерв связывания альбумина (связывающая способность), что представляет собой отношение эффективной концентрации альбумина к его общей концентрации, выраженное в процентах.

В качестве источника биологически активных соединений экзогенного происхождения в работе использованы силистронг (настойка расторопши, ФС 42-0211070301, РУ МЗ РФ Р № 000605/01-2001) и натурсил (масло расторопши, ФС 42-3889-99, РУ МЗ РФ № 96\185\5). При проведении исследований использовались также: коммерческий препараты изолированного флаволигнана сили-бина - сшибинин (Silibinin «Sigma») и суммы флаволигнанов - силимарина (Silymarin «ICN Biomedicals»), этиловый спирт (Ethyl alcohol (Absolute) «Sigma»).

В экспериментах на животных (крысы, кролики) в крови определяли держание гемоглобина гемоглобинцианидным методом, количество эритроцитов, пейкоцитов и тромбоцитов на автоматическом счетчике крови «Пикоскель» (Венгрия); в сыворотке крови оценивали: содержание глюкозы с использовани-

ем набора реактивов фирмы «Labsystems» (Финляндия), общего белка, креати-нина, мочевины и общего билирубина, а также активности яактатдегидрогена-зы и щелочной фосфатазы - с использованием наборов фирмы «Диаком-Синтеко» (Россия); содержание общего хопестерина и триглицеридов, а также активность ферментов аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансфе-разы - с использованием наборов фирмы «Corway» (Польша) и Lachema (Словения), ß-липопротеидов по Бурштейну и Самаю (Карпищенко А.И., 1998); в экстракте - содержание лактата, пирувата, глицерол-3-фосфата, диоксиаце-тонфосфата оценивалось спектрофотометрически специфическим ферментативным методом (Bergmeyer H.U. et al., 1986). Активность лактатдегидрогена-зы исследовали методом A.Kornberg (1955), глщерофосфатдегидрогеназы - по методу G.Beisencherz et al. (1955), глицералъдегид-З-фосфатдегидрогеназы - по методу Н.К.Наградова (1958) Исследования выполнены на полуавтоматическом анализаторе ФП-901 «Labsystems» (Финляндия), фотоэлектроколориметре КФК-3 (Россия), спектрометре «Lambda 20» фирмы «Perkin Elmer» (Швейцария). Определение электродиффузионного пробоя мембран эритроцитов проводили по методу Ю.А.Владимирова с соавторами (1973) на рН-метре («Ионо-мер И-130», Россия). Определение электродиффузионного пробоя мембран эритроцитов проводили по методу Ю.А.Владимирова с соавторами (1973) на рН-метре («Иономер И-130», Россия).

Исследование влияния силистронга и его компонентов: силимарина, этанола и силибинина, на активность ферментов - лактатдегидрогеназы, глщерофосфатдегидрогеназы, глицерачьдегид-З-фосфатдегидрогеназы in vitro в условиях полиферментной и полисубстратной систем выполнено в трех сериях экспериментов: в первой - определялась фоновая активность дегидрогеназ и оценка ее после инкубации с силистронгом и его компонентами в лизате эритроцитов и гомогенате мышц; во второй - определялся характер повреждающего действия пероксида водорода на данные ферменты; в третьей - изучалась возможность протекторного влияния силистронга и его компонентов на данные дегидрогеназы от повреждающего действия пероксида водорода.

В качестве биологической модели для оценки молекулярных механизмов действия исследуемых биогенных веществ был использован изолированный фермент - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа. Фермент получали из мышц кролика по способу Ф.Н.Гильмияровой с соавторами (Панченко Л.Ф. с соавт., 1987).

Исследование спектра биологической активности флаволигнанов расто-ротии проведено нами в лаборатории структурно-функционального конструирования (под руководством профессора В.В.Поройкова) НИИ Биомедицинской химии РАМН с использованием современной версии компьютерной системы PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training), a оценка возможных эффектов и молекулярных механизмов их реализации с применением компьютерной системы «Pharma Expert». Структура вещества для последующей компьютерной обработки представляется в формате MOL

или SDF файлов, которые экспортируются программами ISIS/Draw и ISIS/Base, которые представляют собой химический редактор и систему управления химическими базами данных (Поройков В.В., 1999).

jJüLg'i

Ш <*«•»£

an 0гчгшшк>

ад » к***»

Л4 bM^nt**»

» < I- Шячрк

ft . "Ж тщап®

¿я ' Ш ЩвшФ&тШтЪт&жг*

Ш ' ri i M•мятШШФтгМ-гхЩЖ'

Ъ&'тфее&р

. <Г1

I Л . *!> С«'*

№

; г%г <*( «,аи

v'm

i 'A i "Л*

»Mm* tlsçi** %

V йаенИяа*»»«^- r v (■** УМ ft tX»««.».»* .гш. « <•»!». „<зя Ш V.»--^ ** '«-< *, i'J8» Ц Uttotr - »<«7..' • «« • /К

Ш ' - ' < » *

É- ' < •**» ' Л ''-i

t /Н*^» t 44 . >' I i'*.

S ".У 'С,'

mprzrtjp™-*»'*- , 1 ГШ

V .«â^pw • •>■ » 5ЯГ % -С ni

Л ttttmmr '*>' ! "Чт»

Kt S С £} .чу/?**

ЧЬ Mahn r 11J ' ЧИ>

1 **

S f .' Î st^^-w ".ел;- ^jf-

Рис. 1. Возможность интерпретации прогноза спектра биологической активности: от эффектов к механизмам действия.

В левой части окна - прогнозируемый PASS спектр биологической активности . В правой - результат уточнения прогноза спектра биологической активности с учетом анализа взаимосвязей «механизм-эффект» (М - механизм, Е - эффект)

Для тестируемого соединения, в соответствии с набором его дескрипторов, вычисляются вероятности принадлежности к классу соединений, проявляющих/не проявляющих определенный вид биологической активности (Лагу-нин A.A. и соават., 2001). На рисунке 1 представлен фрагмент программы исследования.

Математическая обработка полученных результатов проводилась на персональном компьютере с использованием программ: MS Office 2000; MS Excel 7.0 for Windows; S-PLUS 2000 и Statistica 5,5.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При проведении исследований по оценке состояния метаболических процессов у лиц, проживающих в разных средовых условиях, группу сравнения составили жители региона относительного экологического благополучия, у которых основные показатели обмена еще не выходили за пределы принятых в настоящее время референтных значений.

Для группы наблюдения, в которую вошли лица из региона с более высоким промышленным потенциалом, характерна диспротеинемия, проявляющаяся гипоальбуминемией (рис. 2), которая в большей степени выражена у женщин (- 13,4 %, р < 0,05). Низкое содержание альбумина обуславливает уменьшение его экранирующей способности, и тем самым, создаются предпосылки для более массивного проникновения в ткани агрессивных соединений и реализации их негативного воздействия на организм. Причем, при более высоком уровне техногенной нагрузки происходит уменьшение эффективной концентрации альбумина: у мужчин на 31,8 % (р < 0,01), а у женщин на 25,7 % (р < 0,05), что сопровождается снижением его связывающей способности, более выраженное у мужчин (- 20,4 %, р < 0,05). Кроме того, у мужчин в этих условиях на 13,8 % (р < 0,05) ниже уровень гемоглобина. Наряду с этим наблюдается: повышение Р-глобулинов (у мужчин +53,1%, р < 0,01, а у женщин +39,7 %, р < 0,05) и ги-пергаммаглобулинемия у женщин (+23,1 %, р < 0,05), что в последнем случае, может быть связано, в частности, с более высоким уровнем аллергизации среди жителей регионов экологического неблагополучия. Повышено содержание в крови мочевины, причем у женщин несколько больше, чем у мужчин ( соответственно +19,6 %, р < 0,05 и +16,7 %, р < 0,05) и креатинина (+ 12,8 %, р < 0,05 и +11,7 %, р < 0,05) соответственно у мужчин и у женщин. Это, вероятно, свидетельствует о том, что в условиях с более высоким фоном техногенного напряжения усиливаются процессы катаболизма. Кроме того, у лиц группы наблюдаются сдвиги и в липидном обмене, проявляющиеся, в частности, повышением уровня триацилглицеринов, более отчетливо выраженное у женщин (+ 35,7 %, р < 0,05), что также является отражением того, что процессы таких условиях затрагиваются в той или иной степени все процессы метаболизма. Повышение активности лактатдегидрогеназы: на 18,0% у мужчин и 19,2 % у женщин (р < 0,05), вероятно, косвенно свидетельствует о том, что в таких условиях в большей степени в качестве источника энергии используется глюкоза. Повышена активность в крови аминотрансфераз: у женщин группы наблюдения показатели активности аланинаминотрансферазы были на 54,9 % (р < 0,01) выше, чем в группе сравнения, а аспартатаминотрансферазы - на 38,9 % (р < 0,05), а мужчин активность аспартатаминотрансферазы была выше на 24,6 % (р < 0,05), что может отражать происходящие на клеточном уровне деструктивные процессы, нарушение функции печени как основного детоксикационного органа. Оценка никотинамидных коферментов показала (рис. 2), что в условиях с более

высоким уровнем техногенного напряжения у женщин превалирует присутствие восстановленной формы никотинамидадениндинуклеотида (+ 42,9 %, р < 0,05, против 37,5 %, р < 0,05), а у мужчин - восстановленной формы нико-тинамиддинуклеотидфосфата ( -"-47,1 %, р < 0,05, против + 36,4 %, р < 0,05), что служить отражением состояния процессов энергопродукции, а так же де-токсикации в микросомальной системе окисления.

Рис. 2. Отклонения в содержании метаболитов и активности ферментов в крови у лиц группы наблюдения относительно группы сравнения (в %)

Определение активности ферментов антиоксидантной системы защиты показало, что проживание в регионе с повышенной техногенной нагрузкой вызывает определенные изменения, причем, у женщин они более выражены: активность каталазы у них уменьшается на 17,2 % (р < 0,05), тогда как у мужчин - на 12,0 % (р < 0,05), а супероксиддисмутазы возрастает на 34,6 % (р < 0,01), в то время как у мужчин - на 14,7 % (р < 0,05). Несбалансированная работа ферментов, по-видимому, является результатом длительного воздействия агрессивных факторов окружающей среды. Снижение же естественной антиоксидантной защиты организма может приводить к нарушению процессов свободно-

радикального окисления -и окислительному стрессу, лежащему в основе или способствующему возникновению целого ряда патологических процессов

Совокупность метаболических изменений, которые мы отметили, на наш взгляд отражают состояние так называемого синдрома хронического утомления или третьего состояния Согласно ряду авторов его клиническими признаками являются выраженная утомляемость, снижающая работоспособность, нарушения сна, способности к концентрации внимания, головные боли и др. (Reid S. et all., 2003). В настоящее время с позиций доказательной медицины широко применяются определения синдрома хронического утомления, предложенные Центрами по контролю и профилактики заболеваний в США (Fukuda К. et all., 1994) и специалистами из Оксфорда (Великобритания) (Sharpe М. et all., 1991). Первое из них предусматривает наличие умственной усталости, второе - ряда объективных признаков, которые служат предпосылкой и основой ослабления здоровья населения. По-видимому, таковыми и являются те показатели, отражающих состояние обменных процессов, изменяющиеся у жителей региона с повышенным уровнем техногенной нагрузки.

Обращает внимание, что по уровню снижения уровня альбумина и гемоглобина в крови, можно сформировать несколько групп лиц относительно существующих референтных значений данных показателей. Как известно, возможности аэробизации организма зависит от кислород-транспортной функции гемоглобина.

Таблица 1

Система оценки уровня состояния здоровья

с учетом содержания в крови гемоглобина и альбумина

Г Уровень здоровья Гемоглобин (г/л) Альбумин (г/л) МЕТ

Низкий <100 <31 2-5

Ниже среднего 100-129 31-34 6-7

Средний 130-146 35-44 8-10

Выше среднего 147-164 45-55 11-12

На основе определения «оптимального» уровня аэробной способности по максимальному потреблению кислорода (МПК) Г.Л. Апанасенко (1992) была предложена экспресс-оценка уровня здоровья: низкий 2-5 МЕТ (16 ± 7 МПК), ниже среднего 6-7 МЕТ (23 ± 8 МПК), средний 8-10 МЕТ (29 ± 4 МПК), выше среднего 11-12 МЕТ (41 ± 3 МПК), высокий > 12 МЕТ (62 ± 6 МПК). Если принять данную систему в качестве критерия оценки уровня соматического соматического здоровья и функциональных возможностей у практически здоровых людей (табл. 1), проанализирова данные обследования 1593 юношей призывников из разных в экологическом плане городов Самарской области, то можно отметить, что в 35,6 % случаев уровень здоровья может быть расценен как по-

граничный между «средним и выше среднего» (10 -11 МЕТ), в 44,6 % - определен как «средний» (8-10 МЕТ), а состояние 19,8 % лиц, имеющих уровень здоровья в 6-7 МЕТ, может быть оценено как «ниже среднего». Пятая часть молодых мужчин имеет сниженный «уровень здоровья», что, вероятно, связано с уровнем техногенной нагрузки района их проживания. Следовательно, изменения в обменных процессах у лиц, проживающих в условиях с высоким уровнем техногенной нагрузки, являются естественным результатом генетически неза-программированного вторжения агрессивных факторов в язык межклеточных и межмолекулярных взаимодействий в организме.

Нами проведены исследования по изучению биологически активных веществ силистронга и натурсила в условиях in vitro, in vivo и ex vivo. В опытах in vitro проведенны эксперименты по оценке влияния силстронга и компонентов его состава (силимарина и этанола) на функцию дегидрогеназ до и после воздействия пероксида водорода в условиях полиферментной и полисубстратной систем мышечной ткани и эритроцитов.

Таблица 2

Активность (Е/мг) глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, глицерофосфатдегидрогеназы гомогената мышечной ткани при инкубации с

Показатели Контроль Сшистронг Этанол Сипгшарин

Активность глицералъдегид-3-фосфатдегидрогеназы

Исходные значения После инкубации 0,506±0,049 0,492±0,061 2,89±0,24 *** 0,511+0,023 2,28±0,31 *** 0,509±0,038 1,48±0,27 ***

Активность лактатдегидрогеназы

Исходные значения После инкубации 2,44+0,26 2,32+0,21 3,28±0,31 * 2,39+0.23 2,69±0,29 2,46+0,28 3,07±0,22 *

Активность глицерофосфатдегидрогеназы

Исходные значения После инкубации 0,305±0,026 0,311+0,034 0,521±0,056 ** 0,298+0,022 0,278±0,022 0,296±0,026 0,411±0,033 **

Примечание. * р < 0.05, ** р < 0,01, *** р < 0,001

Результаты показали (табл. 2), что преинкубация гомогената мышц с си-листронгом приводит к повышению скорости образования 1,3-дифосфоглицерата на 487,4% (р < 0,001). При этом активность лактатдегидрогеназы возрастает на 41,4% (р < 0,05), а глицерофосфатдегидрогеназы на 67,5% (р < 0,01). Инкубация гомогената мышечной ткани с этанолом практически не влияет на скорость процессов, катализируемых лактатдегидрогеназой и глице-

рофосфатдегидрогеназой. тогда как активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы повышается на 346,2% (р < 0,001). Подобное воздействие на глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу оказывает и силимарин (+190,8 %, р < 0,001), но степень ее активации ниже, чем при инкубации с силистронгом на 48,8% (р < 0.001) и на 35,1% (р < 0,01), чем при действии этанола Активность лактатдегидрогеназы по сравнению с контролем увеличивается на 24,8 % (р < 0,05), а глицерофосфатдегидрогеназы на 38,8% (р < 0,01).

Таблица 3

Влияние инкубации с силистронгом, этанолом и силимарином на активность (Е/мг глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы и глицерофосфатдегидрогеназы лизата эритроцитов

Показатель Контроль Силистронг Этанол Силимарин

Активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы

Исходные значения После инкубации 0.255+0.001 0,261+0,002 0,548+0,042 *** 0,251 ±0.003 0.440±0.0027 ** 0.258+0,001 0.281±0,001

Активность лактатдегидрогеназы

Исходные значения После инкубации 0.31510,004 0,321 ±0,006 0,623±0,007 »»» 0,317±0,004 0,517+0.006 ** 0,319±0,003 0,325±0,006

Активность глицерофосфатдегидрогеназы

Исходные значения После инкубации 0,20+0,003 0,209±0,006 0,373±0,005 ** 0,192±0,003 0,244±0,011 * 0.205+0,004 0.322±0,007 **

Примечание: * р < 0,05, ** р < 0,01, *** р < 0,001

Аналогичная серия экспериментов, проведенная в условиях полиферментной и полисубстратной системы лизата эритроцитов показала (табл. 3), что под действием силистронга наблюдается повышение активности глицеральде-гид-3-фосфатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы и глицерофосфатдегидрогеназы. Более выраженные изменения отмечаются у глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы: через 30 минут инкубации с силистронгом активность фермента была на 110,0% выше исходной (р < 0,001), скорость заключительного этапа гликолиза повысилась при этом на 94,1% (р < 0,001), а активность глицерофосфатдегидрогеназы на 86,5% (р < 0,01). Инкубация с этиловым спиртом также приводит к активации процессов, катализируемых данными ферментами, однако, при этом изменения носят менее выраженный характер: активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы возрастает на 75,3% (р < 0,01), лактатдегидрогеназы - на 63,1% (р < 0,01), глицерофосфатдегидрогеназы всего на 27,1% (р 0,05), что соответственно на 19,7% (р < 0,05), 17,0% (р < 0,05) и 34,6% (р <0,01) меньше, чем при инкубации с силистронгом. При добавлении раствора силимарина происходит повышение активности глицерофосфатдегид-

рогеназы в 1,57 раза (р < 0,001), тогда как скорость образования 1,3-дифосфоглицерата увеличивается незначительно, а активность лактатдегидро-геназы практически не изменяется.

Полученные в ходе экспериментов, когда воздействие пероксида водорода на мышечную ткань осуществлялось после предварительной инкубации с силистронгом, силимарином и этанолом, данные свидетельствуют о том, что силистронг способен в наибольшей степени стабилизировать функцию дегид-рогеназ, защитив их от воздействия активных форм кислорода. Так, он обеспечивал возможность глицерофосфатдегидрогеназе проявить активность, которая, хотя и снижалась под влиянием пероксида водорода, но была все же выше исходной на 29,6 % (р < 0,01), тогда как этанол обеспечивал возможность проявления лишь 79,5 % (р < 0,05) её первоначальной активности. В случае модельного опыта с использованием лизата эритроцитов применительно к глицерофосфатдегидрогеназе это выглядело следующим образом: активность ее при предварительной инкубации с силистронгом сохранялась на уровне, превышающем исходный на 45, 4 % (р < 0,001), а при преинкубации с этанолом -77,1 % (р < 0,01) от первоначальной. В отношении лактатдегидрогеназы эта особенность проявилась соответственно 28,7 % (р < 0,01) и 70,0 % (р < 0,01). Таким образом, протекторный эффект проявился в большей степени в модельных опытах с использованием лизата эритроцитов (рис. 3).

Рис. 3. Влияние воздействия пероксида водорода на активность дегидрогеназ (в % от исходной) гомогената мышечной ткани (1) и лизата эритроцитов (2) после предварительной инкубации с силистронгом, этанолом и силимарином

Как известно, пероксид водорода - естественный продукт метаболизма в организме, который может служить источником гидроксильного радикала (Lang !. et all., 1993) При умеренном уровне образования активные формы кислорода участвуют в нормальной жизнедеятельности организма - действуют как специфические сигнальные молекулы (Meerson F.Z. et all., 1982: Das D.K., Maulik N., 1994) и участвуют в регуляции иммунных процессов, работы кровеносной, эндокринной и других физиологических систем, вовлекаясь в фагоцитоз, регуляцию клеточного деления и дифференцировки клеток, синтезе биологически активных соединений и АТФ (Reiter R.J., 1995; Herdegen Т., Leah J.D., 1998; Morel Y , Barouki R., 1999; Skulachev V P, 2000; Thannickal V.J., Fanburg B.L., 2000).

При несбалансированности про- и антиоксидантных процессов высокая реакционная способность активных форм кислорода, и, в частности, гидроксильного радикала, вызывает деструкцию нуклеиновых кислот, перекисное окисление транспортных и структурных липидов, образует белковые сшивки. Окислительный стресс является характерным звеном патогенеза многих заболеваний (Зиновьева В.Н., Спасов A.A., 2004; De Zwart L.L. et all., 1999; Harbome J B., Williams C.A., 2000; Tapiero H. et all., 2002).

По-видимому, каждый из компонентов силистронга при воздействии пе-роксида водорода, моделирующего ситуацию, сходную с окислительным стрессом на клеточном уровне, выполняет свою определенную функцию- этанол может поддерживать структуру биомолекул и субклеточных органелл, выполнять антиоксидантную роль; ароматические структуры флаволигнанов стабилизируют гидрофобные домены в белках, енольные гидроксилы участвуют в донор-но-акцепторных окислительных процессах. Таким образом, как флаволигнаны, так и этанол, могут выступить в роли ловушек активных форм кислорода, включаясь в работу антиоксидантных систем. Этанол, как известно, представляет собой низкомолекулярное соединение, относящееся к разряду малых молекул, не имеющее преград для его распространения в организме за счет его высокой гидрофильности и хорошей растворимости в липидах, обладающее высоким калорическим потенциалом и реакционной способностью (Панченко Л.Ф. с соавт., 1987; Островский Ю.М. с соавт., 1988).

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что введение в систему гомогената мышечной ткани и лизата эритроцитов пероксида водорода снижает активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы до следовых значений, приводит к резкому падению лактатдегидрогеназной и в меньшей степени гли-церофосфатдегидрогеназной активности. При этом, последующая инкубация с силистронгом, этанолом и силимарином оказывает влияние на функцию данных дегидрогеназ, восстанавливая их способность к окислению соответствующих субстратов (рис. 4).

На клеточном уровне гомогената мышечной ткани силистронг способствует тому, что глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа становится способной проявить 9,8 % (р <0,01) своей активности в нативном состоянии. Этанол более

существенно восстанавливает активность глицерофосфатдегидрогеназы 70.5 % (р < 0,01), а силимарин - лактатдегидрогеназы 43,9 % (р ^0,01) На уровне полиферментной полисубстратной системы лизата эритроцитов ревитализирую-шее действие в наибольшей степени проявил силистронг - восстанавливая 86,6 % (р < 0,001) активности лактатдегидрогеназы, 63,6 % (р <0,01) глицерофосфатдегидрогеназы и 14,6 % (р < 0,01) глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы. Следует отметить, что экранирующее действие силис-тронга и его комполнентов проявляется более отчетливо, чем способность к восстановлению функции дегидрогеназ после действия пероксида водорода.

Рис. 4. Влияние на активность дегидрогеназ (в % от исходной) гомогената мышечной ткани (1) и лизата эритроцитов (2) последующей после воздействия пероксида водорода инкубации с силистронгом, этанолом и силимарином

Таким образом, силистронг и его компоненты силимарин и этанол способны активировать глицерофосфатдегидрогеназу, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу и лактатдегидрогеназу в условиях полисубстратной и полиферментной системы гомогената мышечной ткани и лизата эритроцитов, а также способствовать зашите данных дегидрогеназ от повреждающего действия пероксида водорода, оказывать ретавилизирующий эффект после угнетения им их способности к дегидрированию соответствующих субстратов.

В опытах in vivo при введении лабораторным животным натурсила и си-листронга нами получен блок данных, расширяющий представления о характере метаболического ответа организма на поступление биологически активных компонентов расторопши.

Результаты применения натурсила показали (рис 5), что под его влиянием наблюдаются следующие изменения. В частности, увеличивается количества эритроцитов, что сильнее проявилось у самцов' к концу эксперимента количество эритроцитов возросло на 19.2 % (р <" 0.05). У них же прослеживаются и более выраженная динамика увеличения содержания гемоглобина - через три месяца на 15,9 % (р < 0,05).

Рис. 5. Динамика изменения показателей при введении натурсила (в % по отношению к контролю)

В этой связи следует отметить выявленное в опытах in vitro активирующее воздействие на глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу силистронга (+36,3 %, р < 0,01), силимарина (+14,1 %, р < 0,05), и силибина (+13,7 %, р < 0,05), что снижая интенсивность образования 2,3-дифосфоглицерата, выполняющего роль аллостерического регулятора, увеличивает сродство гемоглобина к кислороду, повышает степень оксигенации тканей.

О том, что биогенные вещества в составе натурсила интенсифицирует анаболические процессы, свидетельствует также повышение белка сыворотки крови, так, у самцов - на 18,3 % (р < 0,05). Причем, это сопровождалось снижением содержания мочевины. У самцов это также было более существенно, чем у самок: через три месяца снижение составило соответственно 31,2 % и 39.3 % (р < 0,01). Кроме того, как уже отмечалось, введение натурсила приводило к снижению в крови активности аминотрансфераз.

В ходе эксперимента выявлено и гиполипидемическое действие, но в данном случае изменения были более выраженными к концу эксперимента у самок (- 35,6 %, р < 0,05). У них же отмечено и более существеннее влияние на

углеводный обмен, так, активность лактатдегидрогеназы увеличилась на 19.1 % (р < 0,05).

Эксперименты, связанные с введением силистронга показали, что хотя направленность изменений обменных процессов соответствует таковой у на-турсила, но имеет иную степень выраженности, что может быть связано с более высоким содержанием флаволигнанов, а также некоторые отличия (рис. 6). Например, к концу эксперимента уровень гемоглобина у самцов возрос на 23,4 % (р < 0,05), а содержание белка в сыворотке крови - на 21,2 % (р < 0,05). В плане воздействия на липидный обмен силистронг, как уже отмечалось, оказывает гиполипидемическое действие, проявляющееся не только эффектом снижения в сыворотке крови триацилглицеринов, но и холестерина.

Рис. 6. Динамика изменения показателей при введении силистронга (в % по отношению к контролю)

Таким образом, в сериях экспериментов in vivo нами установлено, что на-турсил и силистронг приводят к возрастанию количества эритроцитов и гемоглобина в крови, увеличению содержания в сыворотке крови общего белка, снижению уровня мочевины, триглицеридов и холестерина, уменьшению активности трансаминаз и увеличению активности лактатдегидрогеназы. Следовательно, они могут оказать нормализующее влияние на ключевые показатели метаболизма, измененные в связи с многофакторным влиянием на организм неблагоприятной среды проживания.

Для выяснения какие еще свойства могут быть присущи биологически активным соединениям, присутствующим в составе силистронга и натурсила, оценки возможного спектра биологической активности флаволигнанов расто-

ропши, а также определения специфических особенностей каждого, нами была использована версия компьютерной программы PASS С&Т, позволяющая прогнозировать спектр биологической активности низкомолекулярных органических соединений на основе их структурных формул (Poroikov V V. et all., 2000). Для тестируемого соединения, в соответствии с набором его дескрипторов, вычисляются вероятности принадлежности к классу соединений, проявляющих или не проявляющих определенный вид биологической активности

Как известно, к основным компонентам флаволигнанов расторопши относятся силибин, силидианин и силихристин, сумма которых, получила название силимарин. Диастереоизомером силибина является изосилибин, кроме того, он может в процессе дегидрирования превращаться в дегидросилибин. Изомерами силибина являются также силидинанин и силихристин. В свою очередь силихристин имеет свой изомер - изосилихристин, а при дегидрировании превращается в дегидросилихристин.

Оценивая спектры возможных биологических активностей силибина и изосилибина, определеные с помощью компьютерного моделирования (ориентируясь при этом на наиболее выраженные значения показателя Ра при минимальном Pi), определено: наиболее значимыми для них эффектами (табл. 4) по сравнению с другими флаволигнанами расторопши, является способность про-явть свойства антиоксиданта (Ра = 0,668 при Pi = 0,007), ингибировать процессы перекисного окисления липидов (Ра = 0,586 при Pi = 0,009) Это согласуется с полученными нами экспериментальными данными. Кроме того, результаты компьютерного анализа по программе PASS показали, что данным флаволигна-нам может быть присуще свойство оказывать иммуностимулирующие (Ра = 0,372 при Pi = 0,107) и иммуномодулирующее действие (Ра = 0,360 при Pi = 0,180).

Таблица 4

Наиболее ожидаемые виды биологических активностей силибина по результатам компьютерной программы PASS С&Т

> «ACTIVITY PREDICTIOH>

48 Substructure descriptors; 0 new. 154 Possible activities.

Pa Pi for Activity:

0 .946 0 .006 Membrane integrity agonist

0 .836 0 004 Sweetener

0 .827 0 .005 Topoisomerase II inhibitor

0 .808 0 .005 Hepatic disorders treatment

0. .798 0 .005 Hepatoprotectant

0 797 0 010 Vascular (periferal) disease treatsient

0 755 0. .001 Antiheipatotoxic

0. .731 0. .007 Free radical scavenger

0. .754 0. .055 Apoptosis agonist

0. 690 0 012 Antitoxic

0. 693 0 025 Membrane permeability inhibitor

0 668 0 007 Antioxidant

0 . 666 0 012 Emetic

0 666 0 030 Fibrinolytic

0 625 0 004 Capillary fragility treatment

0 664 0 050 Pulmonary hypertension treatment

0 .655 0 042 Antiviral (herpes)

0 586 0 .009 Lipid peroxidase inhibitor

0 .596 0 .039 Prostatic (benign) hyperplasia treatment

0 .574 0 .024 Histamine release stimulant

0 586 0 .039 Antineoplastic

0 .516 0 .012 Topoisomeras« inhibitor

0 .519 0 .017 Cytostatic

0 .439 0 .023 Reductant

0 513 0 .097 Chemoprotective

0 480 0 .066 Melanin inhibitor

0 .492 0 .082 Nucleotide metabolism regulator

0 .484 0 075 Membrane integrity antagonist

0 .407 0 .013 Antiviral (hepatitis)

0 474 0 08S Male reproductive disfunction treatment

0 422 0 .036 Histamine release inhibitor

0 493 0 .116 Antileishmanial

0 .392 0 .020 DNA directed RNA polymerase inhibitor

0 458 0 .102 Antiseborrheic

0 .391 0 .043 Antineoplastic enhancer

0 .353 0 .011 Estrogen antagonist

0 364 0 036 Imidazoline 11 receptor agonist

0 422 0 099 Growth factor antagonist

0 345 0 039 Selectin antagonist

0. 339 0 .035 Osmotic diuretic

0. 390 0. .094 Cyclin-dependent kinase 2 inhibitor

0. 479 0. 190 Arrhythmogenic

0. 338 0. 049 Choleretic

0. 313 0. .029 Leukotriene synthesis inhibitor

0. 362 0. 078 HesKistatic

0. 329 0. 052 Antidiabetic symptomatic

0. 281 0. 013 Tyrosine kinase inhibitor

0. 286 0. 018 Microtubule formation inhibitor

0. 372 0. 107 Immnostimulant

0. 307 0 042 RNA synthesis inhibitor

0. 293 0. 033 Expectorant

0. 389 0. 140 Immunosuppressant

0. 366 0. 119 Neurotransmitter antagonist

0. 449 0. 204 Myocardial ischemia treatment

0. 293 0. 058 Cell adhesion inhibitor

0. 356 0. 125 Adenylate cyclase inhibitor

0. 302 0. 078 Contraceptive

Компьютерное моделирование позволяет не только определить возможные биологические эффекты соединения с учетом его структуры, но и молекулярные механизмы их реализации при использовании компьютерной системы «Pharma Expert» (Поройков В.В., 2000). Компьютерная программа взаимосвязей «структура-механизм-эффект» может быть использована для интерпретации и коррекции результатов прогноза спектра биологической активности, полученных при помощи программы PASS, позволяет уточнить за счет проявления какой биологической активности может осуществляться тот или иной эффект, а также определить возможный механизм действия.

В частности, достаточно выраженное антиоксидантное действие силиби-на (Ра = 0.668 при Р1 = 0,007) появляется, в основном, за счет того, что соединение препятствует процессам перекисного окисления липидов (Ра = 0,586 при Р1 = 0,009), связывать свободные радикалы (Ра = 0,731 при Р1 - 0,007) (табл 5)

Таблица 5

Механизмы действия силибина по результатам компьютерной программы

> <МЕСН ANISMS >

Ра Pi for Activity.

0 948 0 006 Membrane integrity agonist

0 458 0 .102 Antiseborrheic

0 330 0 .157 Antiinflammatory

0 304 0 .118 Antiviral

0 731 0 .007 Free radical scavenger

0 798 0 .005 Bepatoprotectant

0 754 0 .055 Apoptosis agonist

0 588 0 039 Antineoplastic

0 693 0 025 Membrane permeability inhibitor

0 798 0 005 Bepatoprotectant

0 362 0 078 Hemostatic

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 242 0 158 Antlinfective (HIV)

0 668 0 007 Antioxidant

0 586 0 009 Lipid peroxidase inhibitor

0 668 0 007 Antioxidant

0 574 0 024 Histamine release stimulant

0 516 0 012 Topoisomerase inhibitor

0 827 0 005 Topoisomerase II inhibitor

0 588 0 039 Antineoplastic

0 513 0 097 Cheaoprotective

0 480 0 066 Melanin inhibitor

0 492 0 082 Nucleotide metabolism regulator

0 484 0 075 Membrane integrity antagonist

0 588 0 039 Antineoplastic

0 304 0 118 Antiviral

0 275 0 107 Antifungal

0 226 0 111 Contraceptive female

0 422 0 036 Histamine release inhibitor

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 392 0 020 DNA directed SNA polymerase inhibitor

0 588 0 039 Antineoplastic

0 304 0 118 Antiviral

0 391 0 043 Antineoplastic enhancer

0 422 0 099 GroMth factor antagonist

0 588 0 039 Antineoplastic

0 345 0 039 Selectin antagonist

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 339 0 035 Osmotic diuretic

0 390 0 094 Cyclm-dependent kinase 2 inhibitor

0 313 0 029 Leukotriene synthesis inhibitor

0 330 0 157 Antiinflammatory

0. 301 0. 192 Antiasthmatic

0. 362 0. 078 Hemostatic

0. 281 0. 013 Tyrosine kinase inhibitor

0. 588 0. 039 Antineoplastic

0 .389 0 140 Immunosuppressant

0 .330 0 .157 Antiinflammatory

0 246 0 119 Antiosteoporotic

0 .286 0 018 Microtubule formation inhibitor

0 .588 0 039 Antineoplastic

0 .247 0 171 Antiamebic

0 . 372 0 107 Immuno stimulant

0 .655 0 042 Antiviral (herpes)

0 .588 0 .039 Antineoplastic

0 .304 0 118 Antiviral

0 .275 0 107 Antifungal

0 .090 0 010 Antiviral (hepatitis B)

0 .307 0 .042 RNA synthesis inhibitor

0 .588 0 039 Antineoplastic

0 304 0 .118 Antiviral

0 .293 0 .033 Expectorant

0 389 0 140 Immunosuppressant

0 349 0 214 Inflammatory Bowel disease treatment

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 366 0 119 Neurotransmitter antagonist

0 212 0 141 Antitussive

0 293 0 058 Cell adhesion inhibitor

0 356 0 125 Adenylate cyclase inhibitor

0 374 0 152 Glutante release inhibitor

0 449 0 204 Myocardial ischemia treatment

0 275 0 058 RNA directed DNA polymerase inhibitor

0 304 0 118 Antiviral

0 289 0 073 Imidazoline receptor agonist

0 364 0 036 Imidazoline 11 receptor agonist

0 308 0 101 5 Hydroxytryptamine release inhibitor

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 218 0 017 Estrogen receptor modulator

0 097 0 039 Estrogen agonist

0 588 0 039 Antineoplastic

0 246 0 119 Antiosteoporotic

0 226 0 111 Contraceptive female

0 353 0 Oil Estrogen antagonist

0 588 0 039 Antineoplastic

0 230 0 044 Antineoplastic antibiotic

0 219 0 037 Inosine monophosphate dehydrogenase inhibitor

0 588 0 039 Antineoplastic

0 389 0 140 Iaminosuppressant

0 304 0 118 Antiviral

0 360 0 180 Immunomodulator

0 396 0 228 Lipid metabolism regulator

0 252 0 088 Aminoacyl-tRNA synthetase inhibitor

0 275 0 107 Antifungal

0. 353 0 195 Gonadotropin antagonist

0. 334 0 178 Arachidonic acid antagonist

0 349 0 214 Inflammatory Bowel disease treatment

0. 330 0 157 Antiinflammatory

0. 301 0 192 Antiasthmatic

0. 233 0 144 Antipruritic, non-allergic

0. 221 0 078 DNA directed DNA polymerase inhibitor

0. 304 0 118 Antiviral

0. 090 0 010 Antiviral (hepatitis B)

0. 259 0 118 Protein kinase stimulant

0. 341 0. 202 Phosphatase inhibitor

0. 588 0. 039 Antineoplastic

0. 195 0 058 Lipoxygenase inhibitor

0. 222 0. 095 5 Lipoxygenase inhibitor

0. 349 0. 214 Inflammatory Bowel disease treatment

0 330 0 157 Anti inf lammatory

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 207 0 087 DNA topoisomerase inhibitor

0 588 0 039 Antineoplastic

0 333 0 218 Platelet adhesion inhibitor

0 133 0 020 Antimitotic

0 588 0 039 Antineoplastic

0 186 0 085 MAP kinase inhibitor

0 568 0 039 Antineoplastic

0 389 0 140 Immunosuppressant

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 193 0 095 Keratolytic

0 251 0 153 DNA synthesis inhibitor

0 588 0 039 Antineoplastic

0 304 0 118 Antiviral

0 286 0 189 Prostaglandin antagonist

0 280 0 157 Prostaglandin H2 antagonist

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 294 0 178 Vasodilator, peripheral

0 164 0 071 Catechol 0 methyltransferase inhibitor

0 172 0 082 Opioid antagonist

0 276 0 127 Opioid delta receptor antagonist

0 179 0 057 Opioid kappa receptor antagonist

0 062 0 032 Opioid mu receptor antagonist

0 227 0 043 Laxative

0 227 0 043 Laxative

0 183 0 094 MAO A inhibitor

0 123 0 040 Aldose reductase inhibitor

0 329 0 052 Antidiabetic symptomatic

0 174 0 092 Alpha 2 adrenoreceptor antagonist

0 249 0 172 Vasodilator

0 305 0 229 Cannahinoid receptor antagonist

0 160 0 087 Alkylator

0 588 0 039 Antineoplastic

0 148 0 075 Hyaluronic acid agonist

0 263 0 193 Cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 099 0 030 Vitamin

0 082 0 023 Adenosylhomocysteinase inhibitor

0 304 0 118 Antiviral

0 204 0 148 Protein kinase C stimulant

0 068 0 021 Alpha glucosidase inhibitor

0 304 0 118 Antiviral

0 242 0 158 Antiinfective (8IV)

0 178 0 133 Cannabinoid receptor agonist

0 148 0 110 Leukotriene B4 antagonist

0 349 0 214 Inflammatory Bowel disease treatment

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 261 0 223 Microtubule formation stimulant

0 331 0 293 Vasodilator, renal

0 231 0 195 DNA helicase inhibitor

0 655 0 042 Antiviral (herpes)

0 304 0. 118 Antiviral

0 057 0 027 Cytidine deaminase inhibitor

0 588 0. 039 Antineoplastic

0 073 0. 049 DNA repair enzyme inhibitor

0 513 0. 097 Cheaoprotective

0. 288 0. 267 Interferon agonist

0. 588 0. 039 Antineoplastic

0 407 0 013 Antiviral (hepatitis)

0 349 0 214 Inflammatory Bowel disease treatment

0 304 0 118 Antiviral

0 119 0 100 Radical formation agonist

0 Обе 0 047 HIV integrase inhibitor

0 190 0 173 Chelator

0 152 0 136 Vanilloxd antagonist

0 154 0 139 Protein synthesis inhibitor

0 083 0 047 Protein 30S ribosomal subumt inhibitor

0 304 0 118 Antiviral

0 275 0 107 Antifungal

0 327 0 313 Oxidoreductase inhibitor

0 084 0 071 Beta 2 adrenoreceptor agonist

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 293 0 033 Expectorant

0 115 0 104 Guanylate cyclase stimulant

0 112 0 104 Beta adrenoreceptor agonist

0 084 0 071 Beta 2 adrenoreceptor agonist

0 330 0 157 Antiinflammatory

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 293 0 033 Expectorant

0 301 0 192 Antiasthmatic

0 294 0 178 Vasodilator, peripheral

0 230 0 225 Thymidine kinase inhibitor

0 655 0 042 Antiviral (herpes)

0 304 0 118 Antiviral

0 157 0 154 Sodium/bile acid cotransporter inhibitor

0 289 0 126 Antihypercholesterolemic

0. 076 0 073 Endothelin receptor antagonist

0 104 0 031 Endothelin A receptor antagonist

0. 294 0 178 Vasodilator, peripheral

0. 294 0 178 Vasodilator, peripheral

При этом, нами экспериментально было определено, что прогнозируемый антиоксидантный эффект реализуется в модельных системах в условиях in vitro на молекулярном уровне при оценке эффектов воздействия на изолированный фермент - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу. Выбор в качестве молекулярной модели глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы связан с полифункциональностью фермента, способностью наряду с дегидрогеназной и фосфорили-рующей активностью участвовать в репарации и репликации ДНК, регуляции транскрипции, апоптозе, моделировании цитоскелета и др. (Sirover М.А., 1999) Показано, что инкубация фермента с силистронгом, этанолом, силимари-ном и силибином, предшествующая действию пероксида водорода (рис. 7), сохраняла соответственно 19,7 % , 10,3 %, 14, 7 % и 11,9 % (р < 0,05) его первоначальной активности, а в случае, когда воздействие пероксида водорода предшествовало инкубации с ними, то после этого глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа сохраняла способность проявить 12,5 % (р < 0,05) активности при использовании силистронга, 11,0 % (р < 0,05) - при использовании этанола и 10,4 % (р < 0,05) - при использовании силимарина (рис. 8). При этом, вероятно, этанол может служить донором восстанавливающих эквивалентов

для флаволигнанов, создавая возможность протонирования значимых для каталитической функции фермента БН-групп, имидазольного кольца гистидина.

Рис. 7. Влияние воздействия пероксида водорода на активность глицеральдегид - 3 - фосфатдегидрогеназы (в % от исходной) после предварительной инкубации с силистнгом, этанолом, силимарином и силибином

Экранирующее и ревитализирующее действие силистронга, флаволигнанов (силимарина и силибина), этанола, вероятно, способно обеспечить возможность функционирования фермента в условиях окислительного стресса, поддерживая гликолитические процессы. Полученные данные свидетельствуют о том, что нативная композиция расторопши, извлеченная этанолом - силис-тронг, наиболее эффективна.

Рис. 8. Влияние на активность глицеральдегид - 3 - фосфатдегидрогеназы (в % от исходной)

последующей после воздействия пероксида водорода инкубации с силистнгом, этанолом, силимарином и силибином

Оценка возможных механизмов действия силибина позволяет рассматривать его как соединение, обеспечивающее стабильность мембранных структур (агонист интеграции мембран - Ра = 0,948 при P¡ = 0,006). В наших экспериментах было показано, что силистронг, силимарин и силибинин обладают в эксперименте in vitro способностью повышать электрическую стабильность мембран, о чем свидетельствует увеличение величины электродиффузионного пробоя мембран эритроцитов соответственно на 41,0 % (р < 0,01), 34,5 % и 27,4 % (р < 0,05).

Силибин на основании проведенного компьютерного моделирования может быть рассмотрен и как средство, препятствующее неопластическим процессам (Ра = 0,588 при Pi = 0,039), определяемое, в частности тем, что соединение является агонистом апоптоза (Ра = 0,754 при Pi = 0,055), антагонистом фактора роста (Ра = 0,422 при Pi = 0,099), регулирует метаболизм нуклеотидов (Ра = 0,492 при Pi = 0,082) и др. Нами экспериментально обосновано, что натур-силу присущи свойства репаранта, в частности, при повреждениях кожи различного генеза (дефектах, вызванных термическими и механическими повреждениями), превосходящие по эффекту, в частности, масло облепихи на 23,8 % (р < 0,05). Биологически активные компоненты натурсила обладают также противоязвенным действием - уменьшение количества язв на 34,2 % (р < 0,01) Свидетельством того, что соединения силибин обладает способностью регулировать процессы обмена биогенных аминов, может, в определенной степени, являться одним из составляющих, обуславливающих его общетонизирующее действие, причем комплекс биологически активных соединений, содержащихся в силистронге, повышает физическую работоспособность больше, чем сумма изолированных флаволигнанов.

Оценивая возможные эффекты действия указанных флаволигнанов рас-торопши в целом (рис. 9), можно отметить, что наибольшим гепатопротектор-ным эффектом обладает силихристин (Ра = 0,816 при Pi = 0,004), он же лучше всего защищает печень от токсических повреждений (Ра = 0,901 при Pi = 0,000), поэтому и его лечебный эффект при патологии печени максимален (Ра = 0,849 при Pi = 0,004). У него же самое выраженное антитоксическое действие (Ра = 0,904 при Pi = 0,004).

Как было установлено нами в экспериментах in vivo под влиянием биологически активных компонентов натурсила происходит снижение в крови крыс активности аминотрансфераз (рис. 5): к концу эксперимента активность алани-наминотрансферазы более выражено уменьшалась у самок (- 20,8 %, р < 0,05), а аспартатаминотрансфераза - у самцов (- 27,1 %, р < 0,01). При введении си-листронга также наблюдалось снижение трансаминазной активности (рис. 6). Активность ферментов становилась ниже более значимо у самок: аланинами-нотрансферазы на 15,3 % (р < 0,05), а аспартатаминотрансферазы на 18,3 % (р < 0,01). Данные проявления могут быть, по-видимому, также расценены и как факты, подтверждающие свойство флаволигнанов повышать стабильность клеточных мембранных структур, в том числе и гепатоцитов.

□ Агонист интеграции мембран

■ Антитоксина**

□ Ингибитор про) мембран

□ Гепатопротектор

■ Агонист апоптбаа

□ Антинеопластик В Ловушка свобод

□ Аитиоксидант

■ Ингибитор ПОП

□ Цитостатик

□ Хемопротектор

□ Регулятор обм££а>||у1(11во«$

■ Регулятор обмена Липидвв ^

■ Иммуномодулятйр

Рис. 9. Наиболее значимые биологические эффекты действия флаволигнанов расторопши: 1 - силибин и изосилибин, 2 - дегидросилибин, 3 - силихристин, 4 - изосилихристин, 5 - дегидросилихристин, 6 - силидианин (по значению показателя Ра)

Сопоставление ряда других специфических эффектов, которые присущи не всем из рассмотренных соединений, но значимых для проявления адапто-генных свойств показало, что дегидросилибину присуща более выраженная способность принимать участие в регуляции обмена нуклеотидов (Ра = 0,535 при Р1 = 0,063) Причем он же в большей степени может выступать в роли регулятора метаболизма литтидов (Ра = 0,462 при Р1 = 0,160).

Полученные нами на основании проведенных экспериментов данные (табл. 6) показали, что через 4 часа после введения кроликам в желудок натур-сила отмечается повышение содержания общих липидов на 28,3 % (р < 0,01), триацилглицеринов на 23,5 % (р < 0,05), холестерина на 17,8 % (р < 0,05) и (3-липопротеинов на 15,1 % (р < 0,05). Это, вероятно, является следствием постре-зорбтивных изменений липосинтетических и липолитических процессов. Последующее определение уровня в крови указанных показателей через 8 часов от

начала эксперимента показало их нормализацию, что свидетельствует о физиологичное™ установленных ранее сдвигов, а через сутки значения определяемых показателей липидного обмена практически соответствовали исходным. Это свидетельствует о том, при поступлении натурсила через пищеварительный тракт через сутки наступает полное окисление, использование по метаболическим путям его липидных компонентов, являющихся легко утилизируемыми субстратами.

Таблица 6

Суточная динамика содержание показателей липидного обмена

в крови кроликов после введения натурсила

N° п/ п Показатель Исходный уровень Через 4 часа Через 8 часов Через 24 часа

1 Общие липиды (г/л) 6,20±0,51 7,95±0,42 ** 6,66±0,67 6,34±0,58

2 Триацилглицерины (ммоль/л) 0,98±0,13 1,21 ±0,23 * 1,04±0,19 0,99+0,14

3 Холестерин (моль/л) 4,6+0,32 5,4+0,47 ** 4,8±0,38 4,4±0,41

4 Р-липопротеины (г/л) 3,3+0,35 3,8±0,39 * 3,4±0,31 3,2+0,28

Примечание: * р < 0,05, ** р < 0,01

Как было выявлено в наших исследованиях in vivo гиполипидемическое действие силистронга (рис. 5) проявляется не только эффектом снижения в сыворотке крови триацилглицеринов, что отмечено и применении натурсила, но и холестерина: по сравнению с контрольной у животных опытной группы происходило снижение уровня холестерина на 17,0 % (р < 0,05).

Компьютерное прогнозирование указывает, что изосилихристину присуще максимальное «противоалкогольное» действие (Ра = 0,435 при Pi = 0,059). Проведенный в ходе наших исследований in vivo сравнительный анализ влияния этилового спирта и силистронга при введении экспериментальным животным выявил весьма конкретные различия (рис. 10). Так, если в крови крыс, получавших этанол, активность лактатдегидрогеназы увеличилась на 41,9 % (р < 0,001), при этом содержание лактата и пирувата снизилось на 34,9 % и 38,0 % (р <" 0,01), то у животных, которым вводили силистронг, активность данного фермента возросла на 12,9 % (р < 0,05), а содержание пировиноградной кислоты на 26,8% (р < 0,05), в то время как уровень молочной остался практически неизмененным.

расторопши

□ Глицерофосфятдегидрогеназа

□ Лактатдегидрогеназа

■ Л астат □ Пируват

□Диоксиацетонфосфат 0 Глицерофосфат

Рис. 10. Изменение активности ферментов, содержания метаболитов в крови крыс, получавших этанол и силистронг (настойка расторопши) (за 100% приняты значения в контрольной группе животных)

Выявлена разнонаправленная тенденция изменений в активности глице-рофосфатдегидрогеназы и в содержании диоксиацетонфосфата в крови животных, получавших этанол и силистронг. Обнаружено повышение активности фермента при введении этанола на 56,6 % (р < 0,001) и снижение при введении силистронга на 46,3 % (р < 0,01). В то же время отмечается уменьшение концентрации диоксиацетонфосфата при введении этанола (- 28,0 %, р < 0,05) и увеличение его при введении силистронга. Это также свидетельствует о том, что в силистронге основным действующим началом является не спирт, входящий в его состав, а уникальный набор биологически активных веществ, в основном, флаволигнанов, оказывающих специфические метаболические эффекты и нивелирующие негативные эффекты этилового спирта на метаболические процессы. Данные факты говорят о том, что выявляемый в программе PASS С&Т биологический эффект, даже при сравнительной невысокой значимости коэффициентов, заслуживает рассмотрения» а в случае необходимости экспе-

РОС НАЦИОНАЛ«.«!** ДОВЛМОТЕКА I СПемрвууг |

1 L Ж — *

риментальной проверки.

Принимая во внимание результаты опытов in vitro по оценке характера воздействия силистронга и силимарина на ферменты углеводного и углеводно-липидного обмена активирование цитоплазматических дегидрогеназ, компонентов челночных механизмов транспорта внемитохондриального водорода, можно допустить, что флаволигнаны расторопши способствуют эффективной доставке НАД.Н в систему дыхательной цепи. Образование гликолитического пирувата, пополняя фонд ацетил-КоА, двууглеродного фрагмента цитрата, создает условия для цикличного функционирования цикла трикарбоновых кислот, при необходимости обеспечивая повышенные потребности организма в энергетическом и пластическом материале.

Таким образом, биологически активные вещества животного и растительного происхождения являются важными средствами регуляции обменных процессов в организме. От их уровня зависит гармоничность работы ферментативных систем, обеспечивающих слаженность протекания катаболических и анаболических процессов. В случае же их внутриклеточной гиперпродукции из стабилизирующего фактора они могут становиться дезорганизующим началом, ярким примером этого является пероксид водорода. Нативные биогенные соединения растительного происхождения, вступая в прямые и опосредованные взаимодействия с молекулами организма, могут способствовать оптимизации процессов обмена веществ, особенно, в случае наступившего дисбаланса метаболизма в результате различных повреждающих воздействий. Это показано на примере препаратов из расторопши - натурсила и силистронга, содержащими флаволигнаны и другие биологически активные вещества.

ВЫВОДЫ

1. В организме жителей регионов с высоким уровнем техногенного загрязнения установлены экологически индуцированные изменения в метаболизме: снижение содержания в крови гемоглобина, альбумина, в том числе его эффективной концентрации и резерва его связывающей способности; бета- и гаммаглобулинемия, повышение уровня мочевины, креати-нина, триацилглицеринов, увеличение активности аминотрансфераз и лактатдегидрогеназы, изменение соотношения окисленных и восстановленных форм никотинамидадениндинуклеотида и никотинамидаденин-динуклеотидфосфата, дисбаланс в ферментативной антиоксидантной системе.

2. У мужчин призывного возраста без признаков соматической патологии, проживающих в экологически неблагоприятном регионе, в 19,8 % случаев выявлено снижение метаболического эквивалента здоровья (6 -7 МЕТ), что может определяться не только по уровню потребления кислорода, как предлагалось ранее, но и учитывая содержание гемоглобина и альбумина в крови. Установлено, что уровень здоровья 44,6 % человек оценивается

как средний (8-10 МЕТ), а в 35,6 % случаев расценивается как пограничный между средним и выше среднего (10 -11 МЕТ) Отмечено, что силистронг и натурсил могут оказать нормализующее влияние на ключевые показатели метаболизма, измененные в связи с многофакторным влиянием на организм неблагоприятной среды проживания Установлено возрастание количества эритроцитов и гемоглобина в крови, увеличение содержания в сыворотке крови общего белка, снижение уровня мочевины, уменьшение активности трансаминаз и увеличение активности лактатдегидрогеназы, снижение содержания в сыворотке крови триглицеридов и холестерина.

В модельных экспериментах на различных видах животных изучены биологические эффекты флаволигнанов расторопши: силистронг повышает толерантность к физическим нагрузкам, оказывает стимулирующее влияние на условнорефлекторную деятельность, повышает устойчивость к гипоксии, а натурсил стимулирует репаративные процессы. Определено, что препараты оказывают иммуномодулирующее воздействие, силис-тронга способствуют оптимизации углеводного обмена, а натурсил - обмена липидов, что в целом указывает на способность флаволигнанов повышать резервные возможности организма.

Выявлено, что силистронг и его компоненты этанол и силимарин с разной степенью выраженности активируют in vitro функцию дегидрогеназ (гли-церофосфатдегидрогеназы, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы) в условиях полисубстратной и полиферментной системы гомогената мышечной ткани и лизата эритроцитов, а также способствуют защите ферментов от повреждающего действия пероксида водорода, оказывают ревитализирующий эффект после угнетения им их способности к дегидрированию соответствующих субстратов, что может способствовать сбалансированности окислительных процессов, предотвращать возникновение гипоэнергетических состояний. Определена способность силистронга и в меньшей степени изолированных флаволигнанов оказывать протекторное действие на нативную и модифицированную пероксидом водорода глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу, что раскрывает возможности использования силистронга при гипоксических состояниях в качестве средства нормализации метаболизма.

Метаболические и физиологические эффекты, установленные для биологически активных соединений силимарина и силибина, раскрывают их лечебно-профилактический потенциал, который может быть реализован при активации прооксидантных процессов и угнетении антиоксидантной ферментной системы защиты - типичного синдрома множества заболеваний.

Выявлен с помощью компьютерных программ PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert» целый ряд новых свойств флаволигнанов расторопши наряду с установлен-

ными в экспериментальных исследованиях. На основании структурных особенностей этих соединений определен механизм действия. В наибольшей степени они обладают способностью проявлять антитоксические, гепатопротекторные свойства, антиоксидантную активность, возможность ингибировать процессы перекисного окисления липидов и связывать свободные радикалы, оказывать антинеопластическое и цитоста-тическое действие, регулировать процессы обмена липидов и нуклеоти-дов.

9. Результаты проведенных острых и хронических экспериментов in vivo, ex vivo, in vitro, изучения взаимосвязи структуры и биологического действия показало, что флаволигнаны - силибин, изосилибин, дегидросилибин, си-лихристин, изосилихристин, дегидросилихристин, силидианин - естественные компоненты расторопши, за счет межмолекулярных, молекуляр-но-клеточных взаимодействий оказывают регуляторное влияние на процессы жизнеобеспечения организма.

ПРАКТИЧЕС КИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки метаболического обеспечения уровня здоровья в метаболических эквивалентах (МЕТ) целесообразно использование в качестве дополнительных критериев содержание в крови гемоглобина и альбумина.

2. Изучение специфического и неспецифического действия биологически активных веществ животного и растительного происхождения можно проводить на модельных экспериментах in vitro, применяя в качестве молекулярного объекта, в частности, полифункциональный фермент глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу.

3. Перспективным является компьютерное прогнозирование с применением программ PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert» для определения возможного спектра биологических эффектов соединений.

4. Актуально применение препаратов расторопши в качестве протекторного средства для жителей экологически неблагополучных регионов с целью профилактики нарушений здоровья.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Функциональные особенности каталитических белков, модифицированных этанолом и холестерином /Ф.Н. Гильмиярова, В.М Радомская, A.B. Бабичев и др. // Материалы V Всесоюзного биохимического съезда. - М.: Наука, 1986. - т.

2. - С. 35-36.

2. Корреляционный анализ функциональных связей между ферментами - необходимый этап в разработке критериев стандартизации ферментных препаратов

/Ф Н. Гильмиярова, В М Радомская, A.B. Бабичев и др. // Материалы V Всесоюзной конференции «Методы получения и анализа биохимических реактивов». -Рига, 1987.-С. 113.

3. Выделение, очистка белков, обладающих каталитическими свойствами, в целях применения в качестве аналитических реагентов /Ф.Н Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы VII Всесоюзного симпозиума по химии белков и пептидов. - Таллин, 1987. - С. 43.

4. Оценка сопряженности функций ряда ферментов как способ характеристики метаболизма при патологических состояниях /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Материалы X объединенного симпозиума биохимических обществ СССР - ГДР. - М., 1989. - С. 27.

5 Способ получения обогащенных ферментами фракций миокарда /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // А. с. СССР № 1515692.- 1989.

6. Бабичев, A.B. Взаимосвязь липидного обмена и фонда никотинамидных ко-ферментов в крови человека при алкогольной интоксикации /A.B. Бабичев, И.Г. Кретова, О.В. Семенова // Актулаьные вопросы теоретической и клинической медицины: сб. науч. тр. - Кишинев, 1989. - С. 449.

7. Способ получения малатдегидрогеназы из сердечной и скелетной мышцы / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др.// А с. СССР № 1635735. - 1990.

8. Комплексный подход к разработке безотходной технологии производства ферментов /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Материалы Всесоюзной конференции «Методы получения, анализа и применения ферментов». - Рига, 1990. - С. 144.

9. Безотходные экологически чистые технологии - оптимальный путь получения биологически активных препаратов / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская, и др. // Материалы конференции «Биологически активные соединения, синтез и использование». - Пенза, 1992. - С. 13-14.

10. Особенности метаболизма миокарда человека при алкогольной интоксикации /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Вопросы мед. химии, - 1993. -№6.-С. 31-34.

11. Системный подход к оценке экологической ситуации и предупреждение нарушений биогеоценоза, вызванных антропогенным воздействием / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская, и др.// Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Интеллект и выживание. Системный подход». - Самара, 1993. - С. 27-28.

12. Создание безотходных технологий - путь, обеспечивающий здоровье населения / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Экология городов. Ресурсосберегающие и экологически чистые технологии». - Самара, 1993. - С. 50-51.

13. Перспективы массовой зашиты населения от экотоксикантов- поиски и решения / Ф.Н Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Экология и здоровье». -Самара, 1994. - С. 43-44.

14. Методологические основы эффективной детекции экотоксикантов и прогнозирования последствий загрязнения окружающей среды /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская, и др. // Материалы конференции «Биоповреждения в промышленности». - Пенза, 1994. - С. 25-27.

15. Биоиндикация различных объектов окружающей среды - выбор стратегии в профилактике экологически зависимых болезней /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, И.Г. Кретова и др. // Материалы Первого национального конгресса по профилактической медицине. - Санкт-Петербург, 1994. - С. 36-37.

16. Ethanol-stimulated oxidative activity of brain as mean of correction of metabolism in aterosclerosis /F.N. Gilmiarova, V.M. Radomskaya, A.V. Babichev et all. // Material of the international symposium «Physiological basis of brain activity». -StJPetesburg, 1994. - P. 93.

17. Система двоякой экспертной оценки техногенного загрязнения северных территорий с биологических позиций / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская, и др. // Материалы VII Международной Соловецкой конференции «Экология человека». - Архангельск, 1995. - С. 36-37.

18. Доклиническая оценка влияния экотоксикантов на организм / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская, и др. // Впервые в медицине. - Санкт— Петербург, 1995. - № 2-3. - С. 41-42.

19. Новые возможности и перспективы в диагностике заболеваний и мониторинга здоровья / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, А.В.Бабичев и др. // Материалы 2 Симпозиума «Неинвазивные методы диагностики». - Москва, 1995. -С. 19.

20. Экопротекторы - необходимый компонент жизнеобеспечения человека в современных условиях / A.B. Бабичев, И.Г. Кретова, M.JI. Блок и др. // Материалы 2-ой Международной научно-практической конференции «Экология и здоровье человека». - Самара, 1995. - С. 9-10.

21. Многозвеньевая защита организма в условиях экологического неблагополучия. Новые подходы в профилактике и лечении нарушений / В.М. Радомская, A.B. Бабичев, JI.H. Виноградова и др. // Материалы 2-ой Международной научно-практической конференции «Экология и здоровье человека». - Самара, 1995.-С. 78-79.

22. Органопротектор широкого спектра действия как средство массовой защиты населения в регионах техногенного загрязнения /Ф.Н. Гильмиярова, А В. Бабичев, В.М. Радомская и др.// Материалы III Национального конгресса по профилактической медицине и валеологии. - Санкт-Петербург, 1996. - С. 41-42.

23. Патент РФ № 2051686. Противоязвенное средство /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. -Бюл. 1, опубл. 10.01.1996.

24 Бальзам «Натурсил» новый фитопрепарат для лечения ожогов / A.A. Филимонов, Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев и др. // Материалы Научно-практической конференции - Челябинск, 1996.-С. 169-170.

25. Пищевая добавка из Silibum marianum- поставщик экопротекторов и энергопластического материала /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др // Материалы 2 Международного симпозиума «Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище». - Москва, 1996. - С. 30-31.

26 Патент РФ № 2053598. Добавка из измельченных семян расторопши / Ф.Н. Гильмиярова, ,В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. - Бюл. 3, опубл. 27.01.1996.

27. Патент РФ № 2083983. Способ оценки суммарной токсичности химических факторов окружающей среды / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. -Бюл. 19, опубл. 10.07.1997.

28. Патент РФ № 2092031. Способ биологической защиты окружающей среды от экотоксикантов / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. -Бюл. №28, опубл. 10.10.1997.

29. Патент РФ № 2099960. Композиция для приготовления взбивных кондитерских изделий с анаболическими свойствами /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. -Бюл. № 36, опубл. 27.12.1997.

30. Патент РФ № 2099950. Смесь для приготовления сдобного печенья /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. - Бюл. № 36, опубл.

27.12.1997.

31. Патент РФ № 2099949. Композиция ингредиентов для производства хлеба и хлебобулочных изделий / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др.- Бюл. № 36, опубл. 27.12.1997.

32. Новые экопротекторы растительного происхождения - средство в решении валеологических проблем в экологически неблагополучных регионах /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы 5 Всероссийской научно-практической конференции серии «Экология и здоровье человека» «Здоровый образ жизни - системный подход». - Самара, 1998. - С. 108-109.

33. Биологически активная добавка из расторопши в решении проблем оздоровления населения / Ф.Н.Гильмиярова, В.М.Радомская, A.B. Бабичев и др. // Вопросы питания. - 1998. - № 3. - С. 23-35.

34. Реальные перспективы перехода из универсального преморбидного состояния в здоровье с использованием натуральных биологически активных добавок / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы 5 национального конгресса по профилактической медицине и валеологии и 3 национального конгресса по курортному делу и натуральной терапии. - Санкт-Петербург, 1998. - С. 65-66.

35. Патент РФ № 2111237. Композиция ингредиентов для горькой настойки /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. - Бюл. № 14, опулб.

20.05.1998.

36. Патент РФ № 2112020. Способ переработки растительного сырья / Ф.Н. Гильмиярова, В М. Радомская, A.B. Бабичев и др. - Бюл № 15, опубл. 24.05.1998.

37. Патент РФ № 2113808. Композиция ингредиентов «Самарянка» для изготовления безалкогольных напитков / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. - Бюл № 18, опубл. 27.06.1998

38. Концепция гармонизации процессов жизнеобеспечения организма человека в масштабе реального жизненного пространства / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы 2 Международный конгресс по инте-гративной медицине «Синтез медицины восток - запад и современных технологий - путь в 21 век. - Кипр, 1998. - С. 55-56.

39. Синдром хронического утомления объективные критерии метаболических нарушений /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 1999. - № 2. - С. 9-11.

40. Патент РФ № 2131672. Пищевое растительное масло /Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. - Бюл. № 17, 20.06.1999.

41. Объективизация критериев здоровья /Ф.Н Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы 2 Международного конгресса валеологов и 4 Всероссийской конференции «Педагогические проблемы валеологии». — Санкт-Петербург, 2000. - С. 28-29.

42. Процессы преждевременного старения: поиск адекватных критериев оценки и средств протекторного характера /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, Н.О. Захарова В.М., Е.В Царева // Материалы Всероссийской конференции «Биологический возраст». - Пермь, 2000. - С. 44-45.

43. Патент № 2175238. Лечебно-профилактическое средство широкого спектра действия /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. - Бюл. № 30, опубл. 27.10.2001.

44. Особенности метаболизма у лиц пограничных возрастных групп с учетом влияния экологических факторов /A.B. Бабичев, A.A. Девяткин, Ю.В. Вялова и др. // Материалы Первого Всероссийского съезда врачей общей практики. -Самара, 2000. ~ С. 39-40.

45. Влияние фармакотерапии на основные биохимические показатели, оцениваемые при клинико-лабораторных исследованиях / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Клиническая лабораторная диагностика. -2001,-№9.-С. 44.

46. Последствия для организма человека воздействия антропогенно измененной экологии и пути адаптации к новой среде обитания / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы Международной конференции «Экология и здоровье в 21 веке». - Ульяновск. - 2001. - С. 38-39.

47. Влияние биологически активных компонентов Натурсила на течение репа-ративных процессов в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта в эксперименте и у больных язвенной болезнью желудка и 12-перстной кишки / Ф.Н.

Гильмиярова, В.А. Тутельян, A.B. Бабичев и др. // Вопросы питания. - 2001. -№ 5. - С. 29-34.

48. Рациональное питание - основа здоровья современной семьи / Ф.Н Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская и др. // Материалы конференции «Здоровое питание: воспитание, образование, реклама». — Москва. - 2001. — С. 5354.

49. Бабичев, A.B. Отражение техногенно измененной среда проживания на эн-доэкологию человека /A.B. Бабичев, Ю.А. Косякова // Материалы Первого Губернского съезда врачей. - Самара. - 2001. - С. 40-41.

50. Antioxidation potential of flavolignanes in maintenance of nervous tissue protection / F.N. Gilmiyarova, A.V. Babichev, G.M. Baisheva et all.// Advances in Gerontology. - 2001. - Vol. 6. - P. 50-51.

51. Бабичев, AB. Влияние экологических факторов на процессы преждевременного старения организма / A.B. Бабичев, В.П.Лебедева, A.A. Девяткин // Материалы 5 Международного семинара по вопросам пожилых «Самарские лекции». - Самара. - 2001. - С. 6.

52. Метаболическая паспортизация населения - превентивное направление современной геронтологии /A.B. Бабичев, A.A. Девяткин, A.B. Радомская, Ю.А. Гергель // Материалы 2 Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в 21 веке». - Москва. - 2001. - С. 37

53. Перспективы использования препаратов из расторопши в гериатрической практике / Ф.Н. Гильмиярова, А.В Бабичев, Е.В. Царева, В.П. Лебедева // Материалы Межобластной научно-практической конференции «Геронтология, гериатрия, медицинская помощь ветеранам войн». - Екатеринбург, 2001. - С. 39.

54. Соматический статус организма в показателях ротовой жидкости / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев и др. // Материалы 3 съезда биохимического общества. - Санкт-Петербург. - 2002. - С. 148.

55. Биологическая ценность масла расторопши /Ф.Н. Гильмиярова, В.А. Тутельян, A.B. Бабичев и др. // Вопросы питания. - 2002. - № 4. - С. 32-35.

56. Бабичев, A.B. Эффект использования силистронга при астеническом синдроме / A.B. Бабичев // Материалы Межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья «Биохимия: от исследования молекулярных механизмов - до внедрения в клиническую практику и производство». -Оренбург, 2003. - С. 334-338.

57. Бабичев, A.B. Оценка показателей метаболизма ротовой жидкости при наружном применении натурсила / A.B. Бабичев, Ю.В. Мякишева, И.Е. Гильмия-. рова // Материалы Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 20-летию ИПО СамГМУ «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения». - Самара, 2003. - С. 167-169.

58. Гильмиярова, Ф.Н. Восполнение дефицита питания нативными препаратами из расторопши /Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.П Лебедева // Старшее поколение. -2003. - № 1. - с. 23.

59. Гильмиярова, Ф.Н. Перспективы лечгния полиморбидной и полифункциональной недостаточности в гериатрической практике препаратами из расто-ропши / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.П.Лебедева // Материалы Российской научно-практической конференции «Реабилитация в геронтологии и гериатрии. Геронтология и гериатрия в семейной медицине». - Курск, 2003. - С. 7576.

60. Валеологический и санологический аспекты адекватного питания / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, Н.И. Гергель и др. // Материалы 8 Международной научно-практической конференции «Здоровье семьи - 21 век». - Пермь - Гоа, 2004. - С. 63-64.

61. Лечебнооздоровительный потенциал препаратов расторопши / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, Ю.В. Первова, Г.М. Баишева // Материалы 2 Межрегиональной научно-практической конференции «Питание здорового и больного человека». - Санкт-Петербург, 2004. - С. 39-40.

62. Гильмиярова, Ф.Н. Рациональные пути предупреждения преждевременного старения / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев // Старшее поколение. -2005. - № 1. - С. 70-73.

63. Логика межмолекулярных взаимоотношений - основа жизнеобеспечения организма / Ф.Н. Гильмиярова, A.B. Бабичев, В.М. Радомская, и др.// Материалы IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век». -Пермь - Далянь, 2005. - С. 82-83

64. К поиску средств метаболической коррекции при экологически индуцированных нарушениях состояния здоровья / A.B. Бабичев, Г.М. Баишева, И.Е. Гильмиярова и др.// Материалы межрегиональной научно-практической конференции биохимиков «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины». - Самара, 2005. - С. 41-45.

БАБИЧЕВ АЛЕКСАНДР ВИТАЛЬЕВИЧ

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В ОРГАНИЗМЕ БИОГЕННЫХ ВЕЩЕСТВ ЖИВОТНОГО И РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Подписано в печать 29.08.2005.

Формат 60 х 84 1/16. Объем 2,0, усл. печ. л. Заказ № 674 Тираж 100 экз

Отпечатано в типографии издательско-полиграфического комплекса «Содружество» Адрес: г.Самара, ул. Венцека, 78. тел. (846) 310-86-30

1115 5 85

РНБ Русский фонд

2006-4 13213

Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Бабичев, Александр Витальевич

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА

ЭКЗОГЕННОГО И ЭНДОГЕННОГО ХАРАКТЕРА -ПОВРЕЖДАЮЩИЕ И ПРОТЕКТОРНЫЕ ЭФФЕКТЫ

1.1. Экологически индуцированные нарушения состояния здоровья: механизмы повреждения и системы защиты

1.2. Флавоноиды расторопши пятнистой - биомолекулы полифункционального действия

1.3. Межмолекулярные взаимодействия в обеспечении жизнедеятельности организма в ходе ферментативных и параметаболических процессов

Глава 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика натурсила и силистронга - препаратов расторопши пятнистой

2.2. Экспериментальные модели изучения метаболических и биологических эффектов натурсила и силистронга, использованные методы исследования

2.3. Характеристика обследованных лиц и методы оценки показателей метаболизма

2.4. Программы компьютерной оценки взаимосвязи структура -свойства - биологические эффекты химических соединений и обработки данных

Глава 3 ОЦЕНКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПЛАСТИЧЕСКОГО,

ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА И ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ

Страницы процессов - основы показателей здоровья жителей регионов высокого техногенного напряжения

Глава 4 влияние натурсила на энерго пластические процессы в организме, особенности биологических функций

4.1. Специфика состава натуре ила

4.2. Оценка характера воздействия натурсила на обменные процессы в условиях эксперимента

4.3. Характеристика тканей и органов животных после применения натурсила

4.4. Динамика изменений в течение суток показателей липидного обмена после введения натурсила внутрь

4.5. Иммунотропные свойства натурсила

4.6. Влияние натурсила на репаративные процессы

Глава 5. ВОЗДЕЙСТВИЕ СИЛИСТРОНГА И КОМПОНЕНТОВ его состава на обменные процессы и функциональные показатели организма экспериментальных животных

5.1. Специфика состава силистронга

5.2. Выявление характера воздействия силистронга на метаболические процессы при ведении внутрь

5.3. Состояние тканей и органов у экспериментальных животных при применении силистронга

5.4. Влияние силистронга и этанола на гликолитические процессы

5.5. Воздействие силистронга в эксперименте на показатели иммунной системы

5.6. Оценка действия силистронга на выносливость организма к нагрузкам

Глава 6. МЕХАНИЗМЫ МОЛЕКУЛЯРНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ БИОГЕННЫХ КОМПОНЕНТОВ РАСТИТЕЛЬНОГО И ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

6.1. Эффекты силистронга, силимарина и пероксида водорода 164 в системе гомогената ткани

6.2. Влияние силистронга, компонентов его состава и пероксида водорода на полисубстратную и полиферментную систему эритроцитов

6.3. Глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназа - молекулярная модель оценки действия флаволигнанов расторопши

Глава 7. КОМПЬЮТЕРНОЕ ПРОГНОЗИРОВАНИЕ СПЕКТРОВ

БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ФЛАВОЛИГНАНОВ РАСТОРОПШИ

7.1. Взаимосвязь структуры и биологического действия флаволигнанов расторопши

7.2. Биологическая активность силибина и изосилибина

7.3. Биологическая активность дегидросилибина

7.4. Биологическая активность силихристина

7.5. Биологическая активность дегидросилихристина и изосилихристина

7.6. Биологическая активность силидианина

7.7. Механизмы реализации биологических эффектов флаволигнанов

7.8. Сравнительная оценка выраженности биологической активности индивидуальных флаволигнанов расторопши

Глава 8. НАТУРСИЛ И СИЛИСТРОНГ

ФЛАВОЛИГНАНСОДЕРЖАЩИЕ ПРЕПАРАТЫ РАСТОРОПШИ, КАК СРЕДСТВА МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ОБМЕННЫХ ПРОЦЕССОВ В ОРГАНИЗМЕ, ПРОТЕКТОРНОЕ И РЕВИТАЛИЗИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРИ

ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ (Заключение) ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярные механизмы взаимодействия в организме биогенных веществ животного и растительного происхождения"

АКТУАЛЬНОСТЬ. Важной особенностью экологически дестабилизированной природной среды является существование организмов в предельных режимах биологических возможностей (Лукьянова Л.Е., Лукьянов О.А., 2004). Катастрофические воздействия техногенных процессов по внезапности и незакономерности сходны со стихийными природными катастрофами (Шилова С.А., 1999), когда традиционные адаптивные ответы живых организмов па изменяющиеся условия среды не успевают сформироваться, а выживание определенной части населения возможно вследствие разнокачественности по устойчивости к действию повреждающих факторов.

Условия жизни в современном мире не способствуют улучшению здоровья и демографических показателей (Бурлакова Е.Б., 2004). Воздействие различных по характеру, но повреждающих по сути факторов внешней среды -техногенной загрязненности, различных видов излучения, патогенной микрофлоры и других, вносит дисбаланс в процессы рецепции, связанных с восприятием и трансдукцией регуляторных сигналов, субстратное обеспечение органов и тканей, аккумуляцию и расходование энергии, нарушает оптимальный уровень жизнедеятельности организма (Агаджанян Н.А. с соавт., 2001).

В частности, при интенсивном воздействии на организм радикал-инициирующих факторов в условиях недостаточной эффективности функционирования антиоксидантной защитной системы происходит гиперпродукция активных форм кислорода и развитие окислительного стресса (Кравченко Л.В. с соавт., 1993; Потанович А.И., Костюк В.А., 2003), который является характерным звеном патогенеза многих заболеваний (Зиновьева В.Н., Снасов А.А., 2004; De Zwart L.L. et all., 1999; Harborne J.B., Williams C.A., 2000; Tapiero H. et all., 2002).

Это обуславливает актуальность исследований по выявлению показателей, определяющих метаболическую основу здоровья в условиях техногенного напряжения, и поиск средств превентивного воздействия на наиболее уязвимые участки обмена веществ, оценив характер взаимодействия с эндогенными соединениями экзогенных биологически активных веществ.

Наиболее рациональным подходом в этом случае является использование в качестве основы сырья растительного происхождения (Ягудина Р.И., Тишки-на B.C., 1997; Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М., 1997; Сокольская Т.А., 1998, 2000; Chrungoo V.J. et al., 1997; Luyckx F., Scheen A.J., 1997; Nosova T. et al., 1998; Sailer R. et al., 2001), поскольку, вещества природного происхождения родственны организму и могут участвовать в обмене веществ в качестве естественных агентов (Белоногова В.Д. с соавт., 2003).

Исследование выполнено в рамках федеральных программ научно-исследовательских работ:

- «Изучение взаимодействия биогенных веществ растительного и животного происхождения с системами жизнеобеспечения организма с учетом ферментативных и параметаболических процессов» (№ госрегистрации — 01.20.03.08339),

- «Изучение свойств, состава, биологических эффектов, регуляторного потенциала эконротекторов нового поколения и разработка мер защиты населения и профилактики заболеваний» (№ госрегистрации - 01.20.03.08340).

Цель настоящего исследования — изучить особенности межмолекулярного взаимодействия веществ эндогенного происхождения (этанол, пероксид водорода) и компонентов расторопши с системами жизнеобеспечения организма для выявления общих закономерностей метаболического ответа, раскрывающих резервы метаболизма, обеспечивающие возможность целенаправленной коррекции нарушений обменных процессов. Задачи:

1. Изучить показатели пластического, энергетического обмена и состояние окислительных процессов у жителей региона с высоким уровнем техногенного загрязнения: содержание гемоглобина, общего белка и его фракций, эффективной концентрации альбумина и его связывающей способности, фибриногена, креатинина, мочевины, билирубина, общего холестерина, Р-липопротеидов, триацилглицеринов, окисленных и восстановленных форм никотинамидных коферментов, активности трансаминаз (алашшаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы), лактатдегидро-геназы, каталазы и супероксиддисмутазы.

2. Охарактеризовать состояние метаболической основы здоровья, оценив базисные метаболические пути, ключевые регуляторные системы, интегральные показатели функционального состояния организма.

3. Обосновать целесообразность использования в качестве средства метаболической коррекции препаратов из плодов расторопши, изучив их состав, характер общебиологического и специфического действия в острых и хронических экспериментах на разных видах животных in vivo и ex vivo.

4. Исследовать влияние препарата расторопши силистронга и изолированных флаволигнанов (силимарина и силибина) на фермент-субстратные системы энергетического и пластического обмена в условиях полиферментных-полисубстратных систем in vitro.

5. Изучить характер воздействия флаволигнанов силистронга, изолированных силимарина и силибина на функциональную способность и метаболические процессы эритроцитов, учитывая при этом метаболические, па-раметаболические эффекты низких доз этанола.

6. На молекулярном объекте полифункционалыюм ферменте глицеральде-гид-3-фосфатдегидрогеназе изучить способность силистронга, силимарина, силибина и этанола ревитализировать активность фермента, модифицированного пероксидом водорода.

7. Оценить потенциал протекторного действия флаволигнанов расторопши и препарата силистронг на клеточном, субклеточном и молекулярном уровнях, используя в качестве повреждающего фактора пероксид водорода.

8. Для максимального выяснения биологических эффектов препаратов рас-торопши наряду с экспериментально установленным спектром биологического действия натурсила и силистронга, используя программы PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert», оценить потенциал действия составляющих их компоI центов: силибина, изосилибина, дсгидросилибина, силихристина, изоси-лихристина, дегидросилихристина, силидианина на организм. НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Получены новые данные, раскрывающие механизмы межмолскулярного, молекулярно-клеточного взаимодействия биогенных веществ растительного и животного происхождения. Установлен характер метаболического ферментативного и параметаболического действия флаволигна-нов расторопши в составе натурсила и силистронга, а также силимарина, силибина и этанола на объектах разного уровня структурно-функциональной организации.

Результаты проведенного исследования позволили раскрыть механизм модифицирующего действия пероксида водорода, эндогенного источника свободных радикалов, продукция и повреждающее действие которого возрастает в условиях загрязнения окружающей среды химическими и физическими факторами.

Получен блок новых данных об экологически индуцированных нарушениях процессов жизнеобеспечения. Установлено, что техногенное загрязнение среды проживания служит реальной предпосылкой и полиэтиологическим фактором, вызывающим снижение энергообеспечения и уровня пластических процессов. Определены характерные признаки метаболического дефицита по параметрам белкового и углеводно-липидного обменов. Обозначены интегральные параметры, снижение уровня которых проявляется признаками синдрома хронической усталости, третьего состояния. Выявлена зависимость между распространенностью третьего универсального преморбидного состояния со снижением гемоглобина, альбумина.

Впервые выявлено ревитапизирующее действие препарата силистронг на системы жизнеобеспечения организма. В серии модельных экспериментов in vivo и in vitro установлена способность силистронга, флаволигнанов силимари-на и силибина восстанавливать активность, полифункциональную деятельность ключевого фермента, обеспечивающего процессы аккумуляции энергии на уровне субстратов, образование аллостерического регулятора кислород-транспортной функции гемоглобина 2,3-дифосфоглицерата. Выявленная особенность является суммарным эффектом, вклад в реализацию которого вносит этанол в малых дозах.

Новыми являются сведения о мембранопротекторном действии силистронга и его компонентов, обеспечивающих функциональную стабильность эритроцитов при действии повреждающих факторов.

Впервые с использованием методов компьютерного прогнозирования свойств - PASS и «Pharma Expert» установлен максимально возможный спектр биологического действия флаволигнанов расторопши. Характерно, что силибин и изосилибин в наибольшей степени обладают способностью проявлять свойства антиоксиданта, ингибировать процессы перекисного окисления липидов, оказывать иммуностимулирующее и иммуномодулирующее действие; дегидро-силибин — защищать организм от агрессивных химических соединений, поддерживать целостность мембранных структур, проявлять свойства агоннста апоптоза, регулировать обмен липидов и нуклеотндов; силихристин — проявляет антитоксическое действие, в том числе защищая печень от токсических повреждений, оказывая максимальный лечебный эффект при патологии данного органа; изосилихристин - связывать свободные радикалы, оказывать противоалкогольное действие; дегидросилихристин — ингибировать проницаемость мембран; силидианин — оказывать антинеопластическое и цитостатическое действие, иммуносупрессорный эффект. Выявлены зависимости между структурными характеристиками флаволигнанов расторопши и механизмами действия отмеченных эффектов.

Установлены закономерности, раскрывающие механизмы взаимодействия биологически активных веществ растительного и животного происхождения за счет потенцирования и нивелирования метаболических и иараметаболических процессов на молекулярном, субклеточном, клеточном и организменном уровнях.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Работа имеет теоретическое и практическое значение. Методология изучения межмолекулярного, молекулярно-клеточного взаимодействия, разработанная в процессе решения поставленных задач по выяснению возможности и характера межвидовых влияний на процессы жизнедеятельности организма, выявила их естественный, возможно, запрограммированный характер, сложившийся в процессе фило- и онтогенеза. Такая модель экспериментальных исследований может быть использована для изучения потенциальных свойств других биологически активных веществ растительного и животного происхождения.

Выявленные закономерности мембранопротекторного действия, восстанавливающего функциональную активность ферментов, реализуются в обеспечении сбалансированности белкового, углеводного и липидного обменов, сохранения кислородотранспортной функции гемоглобина, предупреждения развития гипоксических состояний, иммуномодулирующим, репаративным, орга-нопротекторным действием, характерным для расторопши и препаратов из нее, служат основанием для широкого применения их с лечебно-профилактической целью. Повышение силистронгом физической выносливости, устойчивости к нагрузкам на нервную систему и гипоксии, позволяют рассматривать его как средство, повышающее резервные возможности организма.

Практическое значение работы обеспечивается рядом авторских свидетельств и патентов РФ

• по выделению ферментов из животных тканей: «Способ получения обогащенных ферментами фракций миокарда» (№1515692, 1989), «Способ получения малатдегидрогеназы из сердечной и скелетной мышцы» (№1635735, 1990);

• по получению биологически активных препаратов из расторопши: «Противоязвенное средство» (№ 2051686, 1996), «Способ переработки растительного сырья» (№2112020, 1998), «Лечебно-профилактическое средство широкого спектра действия (№2175238, 2001);

• по мерам улучшения экологической обстановки: «Способ биологической защиты окружающей среды от экотоксикантов» (№2092031, 1997). ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Молекулярные механизмы интеграции биологически активных компонентов силистронга и натурсила с фермент-субстратными системами энергообеспечения, анаэробного и аэробного окисления, связывающими углеводно-белковый и углеводно-липидный обмены, обеспечения сбалансированности катаболических и анаболических процессов, структурно-функциональной полноценности мембран.

2. Результаты компьютерного прогнозирования основных и альтернативных свойств биологически активных компонентов расторопши пятнистой -силибина, изосилибина, дегидросилибина, силихристина, изосилихри-стина, дегидросилихристина, силидианина, их механизма действия.

3. Протекторная и ревитализирующая роль флаволигнанов на уровне целостного организма, клеточном, молекулярном уровне, полиферментной и полисубстратной системе.

4. Блок сведений об экологически индуцированных нарушениях в обмене веществ у жителей регионов техногенного напряжения, перспективности использования силистронга и натурсила для коррекции метаболических сдвигов.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ В ПРАКТИКУ. Результаты, полученные в ходе выполнения исследования, реализованы в авторских свидетельствах и патентах

• по применению расторопши в качестве средства массового оздоровления населения в составе хлебобулочных, кондитерских, безалкогольных и * алкогольных напитков (№2099960, 1997; №2099950, 1997; №2099949, 1997; №2111237, 1998; №2113808, 1998), биологически активных добавок (№2053598, 1996; №2131672, 1999).

• по определению уровня техногенного загрязнения окружающей среды -«Способ оценки суммарной токсичности химических факторов окружающей среды» (№2083983, 1997).

Данные, полученные в ходе выполнения работы, используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой Самарского государственного медицинского университета, кафедре биохимии Кировской государственной медицинской академии, кафедре биологической химии Курского государственного медицинского университета, кафедре биохимии с лабораторной диагностикой Астраханской государственной медицинской академии и работе клинико-диагностической лаборатории клиник СамГМУ.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты диссертационной работы представлены в материалах V Всесоюзного биохимического съезда (Москва, 1986), V Всесоюзной конференции «Методы получения и анализа биохимических реактивов» (Рига, 1987), VII Всесоюзного симпозиума по химии белков и пептидов (Таллин, 1987), X объединенного симпозиума биохимических обществ СССР-ГДР (Москва, 1989), конференции «Биологически активные соединения, синтез и использование» (Пенза, 1992), Всероссийской научно-практической конференции «Интеллект и выживание. Системный подход» (Самара, 1993), Всероссийской научно-практической конференции «Экология городов. Ресурсосберегающие и экологически чистые технологии» (Самара, 1993), Всероссийской научно-практической конференции «Экология и здоровье» (Самара, 1994), конференции «Биоповреждения в промышленности» (Пенза, 1994), Первом национальном конгрессе по профилактической медицине (Санкт-Петербург, 1994),

VI1 Международной Соловецкой конференции «Экология человека» (Архангельск, 1995), 2 симпозиуме «Неинвазивные методы диагностики» (Москва. 1995), 2-ой Международной научно-практической конференции «Экология и здоровье человека» (Самара, 1995), III Национальном конгрессе но прфилакти-ческой медицине и валеологии (Санкт-Петербург, 1996), научно-практической конференции (Челябинск, 1996), 2 Международном симпозиуме «Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище» (Москва, 1996), 5 Всероссийской научно-практической конференции серии «Экология и здоровье человека» «Здоровый образ жизни - системный подход» (Самара, 1998), 5 национальном конгрессе по профилактической медицине» (Санкт-Петербург, 1998), 2 Международном конгрессе по интегративной медицине «Синтез медицины восток-запад и современных технологии — путь в 21 век» (Кипр, 1998), 2 Международном конгрессе по валеологии (Санкт-Петербург, 2000), Всероссийской конференции «Биологический возраст» (Пермь, 2000), Первого Всероссийского съезда врачей общей практики (Самара, 2000), научно-практической конференции «Актуальные вопросы последипломной подготовки на рубеже тысячелетий» (Самара, 2001), Международной конференции «Экология и здоровье в 21 веке» (Ульяновск, 2001), конференции «Здоровое питание, образование, реклама» (Москва, 2001), Первого Губернского съезда врачей (Самара, 2001), 5 Международном семинаре по вопросам пожилых «Самарские лекции» (Самара, 2001), 2 Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в 21 веке» (Москва, 2001), Межобластной научно-практической конференции «Геронтология, гериатрия, медицинская помощь ветеранам войн» (Екатеринбург, 2001), 3 съезда биохимического общества (Санкт-Петербург, 2002), Межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья «Биохимия: от исследования молекулярных механизмов - до внедрения их в клиническую практику и производство» (Оренбург, 2003), Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения» (Самара, 2003), Российской научнопрактической конференции «Реабилитация в геронтологии и гериатрии. Геронтология и гериатрия в семейной медицине» (Курск, 2003), 8 Международной научно-практической конференции «Здоровье семьи — 21 век» (Гоа, 2004), 2 межрегиональной научно-практической конференции «Питание здорового и больного человека» (Санкт-Петербург, 2004), IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век» (Далянь, 2005), Межрегиональной научно-практической конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья (Самара, 2005), доложены на совместном заседании кафедры фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой СамГМУ и Самарского отделения Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Самара, 2005).

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано 64 работы.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной описанию объекта и методов исследования, пяти глав собственных данных, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Бабичев, Александр Витальевич

262 ВЫВОДЫ

1. В организме жителей регионов с высоким уровнем техногенного загрязнения установлены экологически индуцированные изменения в метаболизме: снижение содержания в крови гемоглобина, альбумина, в том числе его эффективной концентрации и резерва его связывающей способности; бета- и гаммаглобулинемия, повышение уровня мочевины, креатинина, триацилглицеринов, увеличение активности ами-нотрансфераз и лактатдегидрогеназы, изменение соотношения окисленных и восстановленных форм никотинамидадешшдинуклеотида и никотинамидадениндинуклеотидфосфата, дисбаланс в ферментативной антиоксидантной системе.

2. У мужчин призывного возраста без признаков соматической патологии, проживающих в экологически неблагоприятном регионе, в 19,8 % случаев выявлено снижение метаболического эквивалента здоровья (6 -7 МЕТ), что может определяться не только по уровню потребления кислорода, как предлагалось ранее, но и учитывая содержание гемоглобина и альбумина в крови. Установлено, что уровень здоровья 44,6 % человек оценивается как средний (8-10 МЕТ), а в 35,6 % случаев расценивается как пограничный между средним и выше среднего (10 -11 МЕТ).

3. Отмечено нормализующее влияние силистронга и натурсила на ключевые показатели метаболизма, измененные в связи с многофакторным влиянием на организм неблагоприятной среды проживания. Установлено возрастание количества эритроцитов и гемоглобина в крови, увеличение содержания в сыворотке крови общего белка, снижение уровня мочевины, уменьшение активности трансаминаз и увеличение активности лактатдегидрогеназы, снижение содержания в сыворотке крови триглицеридов и холестерина. вышает толерантность к физическим нагрузкам, оказывает стимулирующее влияние на условнорефлекторную деятельность, повышает устойчивость к гипоксии, а натурсил стимулирует репаративиые процессы. Определено, что препараты оказывают иммуномодулирующее воздействие, силистронга способствуют оптимизации углеводного обмена, а натурсил — обмена липидов, что в целом указывает на способность флаволигнанов повышать резервные возможности организма.

5. Выявлено, что силистронг и его компоненты этанол и силимарин с разной степенью выраженности активируют in vitro функцию дегидроге-наз (глицерофосфатдегидрогеназы, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы) в условиях полисубстратной и полиферментной системы гомогената мышечной ткани и лизата эритроцитов, а также способствуют защите ферментов от повреждающего действия пероксида водорода, оказывают ревитализи-рующий эффект после угнетения им их способности к дегидрированию соответствующих субстратов, что может способствовать сбалансированности окислительных процессов, предотвращать возникновение ni-поэнергетических состояний.

6. Определена способность оказывать протекторное действие от пероксида водорода на нативную и модифицированную им глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу характерная для силистронга и в меньшей степени изолированным флаволигнанам, что раскрывает возможности использования силистронга при гипоксических состояниях в качестве средства нормализации метаболизма.

7. Метаболические и физиологические эффекты, установленные для биологически активных соединений из плодов расторопши силимарина и силибина, раскрывают их лечебно-профилактический потенциал, который может быть реализован при активации прооксидантных процессов и угнетении антиоксидантной ферментной системы защиты - типичного синдрома множества заболеваний.

8. Изучение с помощью компьютерных программ PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert» позволило установить характер возможных биологических эффектов флаволигнанов расторопши, механизмов их реализации на основе структурных особенностей этих соединений и определить, что они: в наибольшей степени обладают способностью проявлять антитоксические, гепатопротекторные свойства, антиоксидантную активность, возможность ингибировать процессы перекисного окисления липидов и связывать свободные радикалы, оказывать антинеопластическое и цитостатическое действие, регулировать процессы обмена липидов и нуклеотидов.

9. Результаты проведенных острых и хронических экспериментов in vivo, ex vivo, in vitro, изучения взаимосвязи структуры и биологического действия показало, что флаволигнаны - силибин, изосилибин, дегидросилибин, силихристин, изосилихристин, дегидросилихристин, силидианин - естественные компоненты расторопши, за счет межмолекулярных, молекулярно-клеточных взаимодействий оказывают регуля-торное влияние на процессы жизнеобеспечения организма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки метаболического обеспечения уровня здоровья в метаболических эквивалентах (МЕТ) целесообразно использование в качестве дополнительных критериев содержание в крови гемоглобина и альбумина.

2. Изучение специфического и неспецифического действия биологически активных веществ животного и растительного происхождения можно проводить на модельных экспериментах in vitro, применяя в качестве молекулярного объекта, в частности, полифункциональный фермент глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу.

3. Перспективным является компьютерное прогнозирование с применением программ PASS С&Т (Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training) и «Pharma Expert» для определения возможного спектра биологических эффектов соединений.

4. Актуально применение препаратов расторопши в качестве протекторного средства для жителей экологически неблагополучных регионов с целью профилактики нарушений здоровья.

266

Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Бабичев, Александр Витальевич, Уфа

1. Абдуллаев Р.А., Мирзоев Х.М. Влияние препарата из семян расторопши на сосуды изолированных органов // Докл. АН АзССР. 1990. - № 8-9. -С. 55-57.

2. Абдуллаев Р.А., Мирзоев Х.М. Влияние препарата расторопши из флоры Азербайджана на сосуды изолированного сердца кролика // Докл. АН АзССР.-1988. № 9 - С. 60-64.

3. Авалиани С.Л. с соавт. (1997).

4. Оценка реальной опасности химических веществ на основе анализа зависимости концентрации (доза) — статус организма / С.Л. Авалиани, ^ Е.В. Иродова, Е.В. Печникова, Т.Е. Ишмонова //Гигиена и санитария . -1997. -№2.-С. 58-60.

5. Агаджанян Н.А., Воложин А.И., Евстафьева Е.В. Экология человека и концепция выживания. М., 2001. — 240 с.

6. Азизова О. А. Роль окисленных липопротеидов в патогенезе атеросклероза // Эфферентная терапия. 2000. - Т. 6, № 1. - С. 24-31.

7. Азизова О. А. с соавт. (2002).

8. Влияние окисленных ЛПНП на гемолитическую резистентность эритроцитов / О. А. Азизова, А.П. Пирязев, Н.А. Никитина и др. //

9. Айдыралиев Р.К. с соавт. (2001).

10. Изменение заряда поверхности липопротеинов низкой плотности при перекисной модификации / Р.К. Айдыралиев, О.А. Азизова, М.М. Миррахимов, Ю.М. Лопухин // Бюллетень экспериментальной биологии медицины.-2001.-Т. 132, №8.-С. 164-166.

11. Алексеев В.П. Очерки экологии человека. М. 1993. - 192 с.

12. Алпатова Т. А. с соавт. (1994).

13. Иммунологические аспекты воздействия на организм факторов современного производства / Т.А. Алпатова, Г.А. Гаврилова, А.В.

14. Жестков и др. // Экология и здоровье человека: тез. докл. Всероссийской научно-практической конференции. Самара, 1994. — С. 4-5.

15. Апанасеко Г.Л. Эволюция биоэнергетики и здоровье человека. С-Пб: МГП «Петрополис», 1992. - 123 с.

16. Арзамасцев А.П. с соавт. (1999)

17. Оценка показателей антиоксидантной активности препаратов на основеелекарственного растительного сырья / А.П. Арзамасцев, Е.И. Шкарина, Т.В. Максимов с соавт.// хим.-фарм. Журнал. 1999. - № 11.- с. 17-20.

18. Багинская А.И. с соавт. (1995).

19. Багинская А.И. с соавт. (1994)

20. Антиангиогенные, антиоксидантные и антиканцерогенные свойства нового, богатого антоцианином препарата из экстракта ягод / Д. Багхи, К.К. Сен, М. Багхи, М. Аталай // Биохимия. 2004. - Т. 69, вып. 1. - С. 95-102.I

21. Байрамов Ш.К. Изомеризация фермента и концентрационные колебания в пятикомпонентных биохимических системах / Биохимия. — 2004. — Т. 69, вып. З.-С. 393-398.

22. Байрамов Ш.К. Простые критические схемы в неавтокаталитических схемах биохимических реакций И Биохимия. — 2002. Т. 67, вып. 7. — С.918.922.

23. Бакуридзе А.Д., Курцикидзе М.Ш., Писарев В.М. Иммуномодуляторы растительного происхождения // Хим. фарм. журн. - 1993. - № 8. - С. 43-48.

24. Бала Ю.М., Лившиц В.М. Микроэлементы в гематологии и кардиологии. Воронеж, 1965. -91 с.

25. Барабой В.А. Растительные фенолы и здоровье человека. М.: Наука, 1984.- 160 с.

26. Безель B.C., Большаков В.Н. Экологическая токсикология: проблемы, задачи, подходы // Токсикологический вестник. — 1995. № 1. - С. 2-7.

27. Беликов В.В. Оценка содержания флавенол — производных в плодах Silybum marianum // Растительные ресурсы. 1985. - Т. 21, вып. 3 - С. 350-358.

28. Белоногова В.Д. с соавт. (2003).

29. Некоторые аспекты изучения биологической активности веществ и фармакологических свойств лекарственных растений / В.Д. Белоногова, Н.С. корепанова, Г.И. Олешко и др. // Вопросы биол., мед. И фрам. Химии. 2003. - № 4. - С. 16-20.

30. Бердник О.В. Чувствительность организма к факторам окружающей среды. Индивидуальная чувствительность // Environ. And Yealth. 2000. -N 1.-С. 38-41.

31. Блинова К.Ф. с соавт. (1996).

32. Растения для нас / К.Ф. Блинова, В.В. Вандышев, М.Н. Комарова и др. — Санкт Петербург: Учебная книга, 1996. - С. 653.

33. Борисов Б.М. Неспецифическая иммунная резистентность при воздействии химических токсикантов // Проблемы окружающей среды иприрод. Ресурсов: Обзор информ. ВИНИТИ. 1998. - № 9. - С. 46-89.

34. Босняцкий Г.П., Рогальский В.М. Состояние окружающей среды и заболеваемость населения //Газов, промышл. 1994. - №4. -С. 55 - 77.

35. Браатц Р. Фармакодинамика и фармакокинетика силимарина // Клиническое значение препарата легалон: Материалы симп. (Москва, 7 апреля, 1981г.). -М.: 1981.-С. 53-57.

36. Брехман И.И. Всенародное движение за здоровый мир // Тезисы 3 Национального конгресса по профилактической медицине и валеологии. -Санкт-Петербург, 1996.-С. 1-5.

37. Броданова М. Легалон в лечении хронических заболеваний печени // Клиническое значение препарата легалон: Материалы симп. (Москва, 7 апреля, 1981г.).-М.:Би., 1981.-С. 83 -93.

38. Будагова К.Р. с соавт. (2003).

39. Флавоноид дигидрокверцетин в отличие от кверцитина не ингибирует экспрессию белка теплового шока в условиях клеточного стресса / К.Р. ! Буданова, С.В. Жмаева, А.Н. Григорьев и др. // биохимия. — 2003. — Т. 68, вып. 9.-С. 1287-1294.

40. Бунятян Н.Д. с соавт. (1999)

41. Природные антиоксиданты как гепатопротекторы / Н.Д.Бунятян, О.А.Герасимова, Т.С.Сахарова, Л.В.Яковлева // Эксперим. и клин, фармакол. - 1999. - № 2. - С. 64-67.

42. Бурбелло А. Т. с соавт. (1991).

43. Защитное действие антиоксидантов при метгемоглобинемии, вызванной нитритом натрия в эксперименте /А. Т. Бурбелло, Г.А. Баскович, Е.Г. I Доброхотова, В.И., Слесарев //Гигиена труда и профессиональных заболеваний. 1991. - №8. - С. 13-15.

44. Бурлакова Е.Б. Жизнь в атомном и химическом мире // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. 2004. - № 4. - С. 3-4.

45. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика. М.: ФАИР-ПРЕСС, 1999.-720 с.

46. Василос Л.В. Распространённость хронической неинфекционной патологии у детей в зонах интенсивной химизации сельского хозяйства

47. Регион, особен, заболев, дет. населения: Матер. Всесоюзн. научн. конф. Йошкар-Ола, 15-17 октября 1991 г. -М., 1991. - С. 92-93.

48. Василос JI.B. с соавт. (1993).

49. Состояние здоровья детей в зонах интенсивной химизации сельского хозяйства / JI.B. Василос, А.Ф. Василос, П.М. Стартулат и др. //Гигиена и санитария. 1993. - № 1. -С.49-50.

50. Венгеровский А.И. с соавт. (1987).I

51. Гепатозащитное действие силибинина при экспериментальной интоксикации ССЦ/ А.И. Венгеровский, B.C. Чучалин, Е.А. Морокова и др. // Фармакология и токсикология. — 1987. № 5. — С.65 — 69.

52. Венгеровский А.И., Саратиков А.С. Гепатозащитные фитопрепараты (силимарин, силибор, катерген) // Сиб. мед. журн. 1997. - № 3-4. — С. 59-63, 151.

53. Веселовский В.А. О роли биоантиоксидантов в устойчивости растений к неблагоприятным условиям сцществования / Биоантиокслители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: Наука, 1982. С. 24-29.

54. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И. Свободные радикалы в живых системах // Итоги науки и техники. — Биофизика. 1991. - Т. 29. -С. 252.

55. Воскресенский О.Н., Туманов В.А. Ангиопротекторы // К.: Здоровья. — 1982.- 120 с.

56. Гаммерман А.Ф., Гром И.И. Дикорастущие лекарственные растения СССР. М.: Медицина, 1976. - С. 286.

57. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования БАВ. М.: Медицина, 1974. - С. 180.f

58. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. — Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1990. С. 333.

59. Георгиевский В.П., Коммисаренко Н.Ф., Дримчук С.В. Биологическиактивные вещества лекарственных растений. — Новосибирск: Наука,1990.-333 с.

60. Гесслер Н.Н. с соавт. (2001).

61. Свободнорадикальное окисление липидов подавляет ферментативную конверсию p-каротина в витмин А / Н.Н. Гесслер, С.Б. Гомбоева, К.Б. Шумаев и др. // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. — 2001.-Т. 131, №5.-с. 532-535.

62. Гильманов А.Ж., Туйгунов М.М., Мавзютов А.Р. Гормональный тиреоидный статус жителей крупного промышленного города // Клинич. лаборатор. диагн. 2000. - №6. - С.46 - 48.I

63. Гильмиярова Ф.Н. с соавт. (1998).

64. Гильмиярова Ф.Н. с соавт. (2001).

65. Гильмиярова Ф.Н. с соавт. (1995).

66. Доклиническая оценка влияния экотоксикантов на организм человека / Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М., Блок M.JT. и др. // Впервые в медицине. Санкт-Петербург, 1995. - № 2-3. - С. 41-42.

67. Гильмиярова Ф.Н. с соавт. (2001).

68. Методология оценки резерва здоровья / Ф.Н. Гильмиярова, Р.И. Мифтяхова, В.М. Радомская и др. // Материалы 5 Международнойнаучной конференции. Пермь-Мармарис, 2001. - С. 44-45.

69. Гильмиярова Ф.Н. с соавт. (2002)

70. Мужское и женское бесплодие в условиях воздействия факторов техногенной природы / Гильмиярова Ф.Н., Сазонова О.В., Захаренкова

71. Т.Н. и др. // Материалы всероссийской конф. «Актуальные вопросы охраны репродуктивного здоровья в медицине труда». Самара, 2002. -С. 17-19.

72. Гильмиярова Ф.Н. с соавт. (2002).

73. Биологическая ценность масла расторопши / Ф.Н. Гильмиярова, В.А. Тутельян, В.М. Радомская и др. // Вопросы питания. 2002. - № 4. — с. 32-35.

74. Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М. Постижение сути. Экология, экопатология, натурсил. Самара, 1997. - 401 с.

75. Гичев Ю.П. Здоровье человека как индикатолр экологического риска индустриальных регионов // Вестник РАМН. 1995. - № 8. - С. 52-55.

76. Гичев Ю.П. К проблеме экологической обусловленности патологии и продолжительности жизни // Профилак. старения. — 2001. № 4. - С. 5664.I

77. Гичев Ю.П. Проблема охраны чистоты внутренней среды организма человека в зонах экологического неблагополучия // Сиб. Мед. журнал. — 1994.-Т. 1, № 1-2.-С. 24-27.

78. Глориозова Т.А. с соавт. (1998).

79. Тестирование компьютерной системы предстказания спектра биологической активности PASS на выборке новых химических соединений / Т.А. Глоризова, Д.А. Филимонов, А.А. Лагунин, В.В.

80. Поройков // Химико-фармацевтический журнал. 1998. - № 12. - С. 3339.

81. Голенков А.К. Влияние производственных и экологических факторов на кроветворную и иммунную систему // Гигиена и санитария. — 1991 № 1. -С. 37-39.

82. Голубев А.Г. Изнанка метаболизма // Биохимия. 1996. - Т. 61, вып. 11. -С. 2018-2039.

83. Гольдштейн Н. Активные формы кислорода как жизненно необходимые компоненты воздушной среды // Биохимия. 2002. Т. 67, вып. 2. — С. 194-204.

84. Гончаров Н.Ю., Мунтян Е.М. Роль бивалентных катионов в связывании изофермента II гексокиназы с митохондриальными мембранами // Биохимия. 1986.-Т. 251, вып. 5.-С. 801-807.

85. Гордеева А.В., Лабас Ю.А., Звягильская Р.А. Апоптоз одноклеточных организмов: механизмы и эволюция // Биохимия. 2004. - Т. 69, вып. 10. - С. 1301-1313.I

86. Гордиенко А.Д. Гепатопротекторный механизм действия флавоноидов // Фармация. 1990. - № з. с. 75 - 77.

87. Государственная Фармакопея СССР: Вып 1. Общие методы анализа / МЗ РФ СССР. 11-е изд., доп. -М.: Медицина, 1987.-336 с.

88. Государственная Фармакопея СССР: Вып 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ РФ СССР. 11-е изд., доп. — М.: Медицина, 1987. - 400 с.

89. Грановский Ю.В., Маркова Е.В. Хемометрика и экология вопросы взхаимодейсвтия // 15 Менделеевский сеъзд по общ. И прикладн. Химии: Минск, 1993.-С. 275-277.

90. Григорьев Е.И. с соавт. (2002).

91. Изучение возможного участия водной среды в дистантной передаче сигнала иммуноактивных дипептидов / Е.И. Григорьев, В.Х. Хавинсон,

92. И.Н. Кочнев и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2002. - Т. 133, № 5. - С. 525-529.

93. Григорьев Е.И. с соавт. (2003).

94. О роли водной среды в механизмах действия иммуноактивных пептидов в сверхмалых дозах / Е.И. Григрьев. В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. — Т. 136, №8.-С. 173-178.

95. Григорьев П.Я., Харьковский Н.Н., Яковенко Э.П. Об эффективности препарата легалон // Клиническое значение препарата легалон: Материалы симп. -М.: Б.и., 1981.-С. 124- 128.

96. Грызунов Ю.А., Добрецов Г.З. Методы исследования альбумина и его связывающей способности // Альбумин сыворотки крови в клинической медицине. 1994. - С. 34-51.

97. Гуревич К.Г. Дискриминация моделей кооперативного связывания // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. 1999. - № 3. — С. 31-34.

98. Гуревич К.Г., Шимановский H.JI. Закономерности действия сверхмалых доз биологически активных веществ // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. -2000. -№3.-С. 45-48.

99. Гуревич К.Г., Шимановский H.JI. Оксид азота: биосинтез, механизмы действия, функции // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. 2000. - № 4. — С. 16-22.

100. Данилов-Данильян В.И., Залиханов М.И., Лосев К.С. Экологическая безопасность. Общие принципы и российский аспект. М.: МНЭПУ, 2001 - 332 с.

101. Дас Д.К., Молик Н. Превращение сигнала гибели в сигнал выживания при редокс-сигнализации // Биохимия. 2004. - Т. 69. вып. 1. — С. 16-24.

102. Додина Л.Г. Некоторые аспекты влияния антропогенного загрязнения окружающей среды на здоровье населения (обзор) // Гигиена исанитария.- 1998.- №3.- С.48-51

103. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса // Вопр. мед. химии. 2001. - Т. 47, № 6. - С. 561-581.

104. Дубинина Е.Е. с соавт. (2001).

105. Окислительная модификация белков плазмы крови у пожилых людей сIсосудистой деменцией / Е.Е. Дубинина. П.Г. Коновалов, И.Б. Солитернова и др. //Укр. Биохим. Журн. -2001. Т. 73. - С. 125-132.

106. Дубинина Е.Е., Сальникова Л. А., Ефимова Л.Ф. Активность и изоферментный спектр супероксиддисмутазы эритроцитов в плазме крови человека // Лабораторное дело. 1983. - № 10. - С. 30-32.

107. Дугаров С.Л. Фитокоррекция гепатотоксичности при химиотерапии у больных туберкулезом легких // Тибетская медицина: традиции, перспективы, интеграция. — Улан-Удэ, 1997. — С. 74-76.

108. Дышниевич Л.З. Стресс и иммунитет. Л-д - Ростов, 1989. - 131 с.I

109. Егоров В.А. с соавт. (1998)

110. Егоров Ю.Л., Кириллов В.Ф. Экологическая значимость и гигиеническая регламентация свинца и кадмия в различных средах //Медицина труда и промышленная экология. -1996.- №10. — С.18 — 25.I

111. Еремин А.В. с соавт. (2001)

112. Влияние факторов окружающей среды на здоровье молодого поколения / А.В. Еремин, Г.А. Добровольский, И.В. Фирсова, С.С. Милованов и др. // Тез. докл. Экология и здоровье в XXI веке. Ульяновск, 2001. - С. 53.

113. Жестков А.В., Зайцев С.А. Распространенность и клинические проявления аллергической патологии в промышленном центре // Труды

114. YII Всероссийского Конгресса Экология и здоровье человека. Самара, 2001.-С. 63.

115. Запрометов В.И. Фенольные соединения. М.: Наука, 1993. - С. 272.

116. Зилов В.Г., Судаков К.В., Эпштейн О.И. Элементы информационной биологии и медицины: монография. М.: МГУЛ, 2000. - 248 с.

117. Зимин Ю.В., Сяткин С.П., Березов Т.Т. Надмолекулярная регуляция активности некоторых оксидоредуктаз клетки в норме и патологии // Вопросы медицинской химии. 2001. -№3.-- С. 24-30.I

118. Зиновьева В.Н., Спасов А.А. ДНК-протекторная активность природных и синтетических антиоксидантов // Биомедицинская химия. — 2004. — Т. 50, вып. З.-С. 231-242.

119. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология. -СПб.: Питер, 2001. 576 с.

120. Игнатова М.С. с соавт. (1996).

121. Нефропатии в регионе, загрязнённом солями тяжёлых металлов, и возможности лечебно-профилактических мероприятий / М.С. Игнатова, Е.А. Харина, В.В. Длин и др. // Терапевтический архив. 1996. — Т.8. -№96.-С. 31-35.

122. Измеров Н.Ф. Проблемы медицины труда в России: модели современной практики и стратегии //Вестник РАМН. — 1997. №4. - С. 3-11.

123. Искандерова Г.Т. Экспериментальные исследования по обоснованию ПДК в воздухе рабочей зоны производных алкилфосфатных кислот — пестицидов кампозана и зиеда //Медицина труда и просышленная экология. 1996. - № 10. - С. 41 -42.

124. Казначеев В.П. Экология человека: проблемы и перспективы // Экология человека: Основные проблемы. 1988. — С. 9-32.I

125. Карлина Л.Н. Атмосфера и здоровье человека. СПб.: Гидрометеоиздат, 1998.-235 с.98. Карпищенко А.И. (1999)

126. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии — Санкт-Петербург: ' Интермедика, 1999. 656 с.

127. Карплюк И.А., Арзамасцев Е.В., Соколова С.Я. Масла растительные // БМЭ.-З изд.-М.: Сов. энциклопедия, 1980.-Т. 13.-С. 1295

128. Келлер А.А. Медико-географическая и донозологическая диагностика // Материалы науч. конф. «Проблемы донозологической гигиенической диагностики. Л., 1989. - С. 23-25.

129. Клебанова В.А. Синдром хронического утомления (обзор) // Гигиена и санитария. 1995. -№ 1.-С. 35-37.

130. Климашок Е.В. Экспериментальная фармакотерапия растительными флавоноидами поражений печени, вызванных индометацином // Фармакология и токсикология: Респ. межвед. ст. МЗ УССР. Киев: Здоров'я. - 1991. - Вып. № 6. - С. 94 - 97.

131. Ковалев И.Е. Цитохром Р450 и охрана внутренней среды человека. — Пу щино,1985. С. 10-11.

132. Козлова Т.В. с соавт. (2002)

133. Медицинские и экологические проблемы врожденных пороков развития / Т.В. Козлова, Т.Ю. Савирова, И.Г. Козев и др. // Труды Y1II Международного конгресса «Актуальные проблемы экологии человека». -Самара.-2002.-С. 107.

134. Корзунова Н.Е., Нестерова О.В. Изучение жирно-кислотного состава липофильной фракции зародышей пшеницы // Тез. докл. науч.-практич. конф. «Современное состояние и перспективы научных исследований в области фармации». Самара, 1996. - С. 144.

135. Корнеева Е.Н. с соавт. (2002)

136. Иммунитет и экология / Е.Н. Корнеева, А.С. Курбатова, А.В. Корнеев, Н.Г. Арцимович // Труды YIII Международного конгресса Актуальные проблемы экологии человека. Самара. - 2002. - С. 113.

137. Косарев В.В. Экологические и профессиональные факторы в возникновении и течении болезней // Семейная медицина: Руководство, в 2 т. / Под ред. А.Ф. Краснова, Р.А. Галкина, Б.Л. Мовшовича. Самара, 1994.-Т. 2.-С. 317- 324.

138. Косарев В.В., Жестков А.В. Диагностика и прогнозирование течения профессиональных заболеваний лёгких с помощью иммунологических методов // Иммунология. 1999. - №6. - С. 54-56.

139. Кравченко Л.В., Морозов С.В., Тутельян В.А. Влияние флавоноидов на резистентность микросом к повреждающему действию ПОЛ in vitro и ex vivo // Бюллетень эксперим. биологии и мед. 2003. - Т. 136, № 12. — С. 648-651.

140. Кузнецова Г.В., Панюшкин С.П., Рудаков И.А. Эта чудесная расторопша // Гомеопатия и фитотерапия. 1998. - № 2. — С. 24-26.

141. Кулагин О. Л. Флюоресцентный анализ гликозилирования сывороточного альбумина человека // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. 2000. - № 3. - С. 29-32.112. КуркинВ.А. и др. (1996).

142. Методика количественного определения силибина и суммы флаволигнанов в плодах расторопши пятнистой / В.А.Куркин, М.Н.Сенцов, Е.В.Авдеева, С.В. Первушкин // Самарский медицинский архив.-Самара, 1996.— С. 71-75.

143. Куркин В.А. с соавт. (1998)

144. Новые препараты на основе плодов расторопши пятнистой / В.А.Куркин, ' А.А.Лебедев, Г.Г.Запесочная и др. // Материалы 4 Международ. Конгр. «Иммунореабилитация и реабилитация в медицине». Сочи, 1998. — С. 12.

145. Куркин В.А. с соавт. (2001)

146. Новые препараты на основе флавоноидов и фенилпропаноидов /Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Авдеева А.А. и др. // Тез. докл. 8 Рос. нац. конгр.

147. Человек и лекарство». Москва, 2001. - С. 583.

148. Куркин В. А. Фенилпропаноиды — перспективные природные биологически активные соединения. Самара: СамГМУ, 1996. - С. 80.

149. Куркин В.А., Запесочная Г.Г. Флаволигнаны и другие природные лигноиды. Проблемы структурного анализа // Химия природ, соедин. — 1987.-№ 1.-С. 11 35.

150. Кутепов Е.Н. Проблемы диагностики донозологических и преморбидных состояний в связи с воздействием факторов окружающей среды // Гигиена и санитария. 1993. - № 1. - С. 6-9.

151. Лагунин А.А. Поиск новых биологически активных веществ на основе компьютерного анализа взаимосвязей «структура механизм - эффект»: Автореф дис. . канд. биол. наук. - Москва. 2001. - 19 с.

152. Лагунин А.А., Филимонов Д.А. Поройков В.В. Компьютерный поиск потенциальных антигипертензивных соединений комбинированного действия // Химико-фармацевтический журнал.'- 2001. Т. 35, № 7. — С. 28-34.

153. Лазарев Н.В. Воспроизведение заболеваний у животных для t экспериментально-клинических исследований Л.: Медгиз, 1954.1. С.229.

154. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш.шк., 1990.-352 с.

155. Ленинджер А. Основы биохимии: в 3-х томах. Т.1. пер. с англ. М.: Мир, 1985.-367 с.

156. Леонтьев Т.П., Казаков А. Л., Рыженков В.Е. Влияние суммы флавоноидов из клевера красного и нута обукновенного на содержание липидов в крови и печени крыс. // Вопр. Мед. Химии. 1979. - № 4. — С.444 446.

157. Липовецкий Б.М. с соавт (1985).

158. Тип ответной реакции на пробу с физической нагрузкой и смертность за 6-летний период наблюдения в популяционной группе мужчин старше40 тел / Б.М. Липовецкий, Д.Б. Шестов, С.И. Плавинская и др. // Кардиология. 1985. - Т. 25, № 2. - С. 26-29.

159. Лисицын Ю.П., Петленко В.П. Философия и детерминационная теория медицины // Вестник ВАМ СССР. 1987. - № 3. - С. 9-19.

160. Литвиненко В.А. Актуальные проблемы создания и производства лекарственных средств. Москва, 1980. - С. 49-50.

161. Логинов А.С., Майоров В.М., Сперанский М.Д. Длительно незаживающие язвы желудка: Обзор литературы. // МЗЖ. 1984. - № 12. -раздел 17.-С. 26-30.

162. Лукьянова Л.Е., Лукьянов О.А. Экологически дестабилизированная среда: влияние на население мелких млекопитающих // Экология. — 2004. -№3.-С. 210-217.

163. Лущак B.I. АМФ-дезаминаза: регуляция та ф!зюлопчна роль ферменту // Укр. бюхим. журн. 2000. - Т. 72, № 1. - С. 9-20.

164. Лущак В.И. Взаимодействие гликолитических ферментов с клеточными структурами как способ регуляции их активности // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. 2002. - № 1. — С. 27-31.

165. Лущак В.И. Взаимодействие лактатдегидрогеназы со структурными компонентами клетки: возможное физиологическое значение // Биохимия. 1992. - Т. 57, № 89. - С. 1142-1154.I

166. Лущак В.И. Окислительный стресс и механизмы защиты от него у бактерий // Биохимия. -2001. Т. 66, вып. 5. - С. 592-609.

167. Лущак В.И. Функциональная роль и свойства АМР-дезаминазы // Биохимия. 1996. - Т. 61, № 2. - С. 195-211.

168. Лущак В.И. Характеристика связанной с микросомами лактатдегидргеназы из белых мышц ската // Биохимия. 1991. — Т. 56, № 12.-С. 2173-2180.

169. Любченко П.Н. Экологическая агрессия и механизмы адаптации //

170. Медицина труда и промышленная экология. 1996. - № 11. - С. 1-5.

171. Ляшенко В.И., Чекань В.П. Биотрансформация ксенобиотиков — детоксикация или усиление их токсичности //Гигиена и санитария. -1990. -№5.-С. 76-78.

172. Малахов В.П. с соавт. (1998)

173. Антиокислительная стабилизация жирного масла расторопши пятнистой / В.П.Малахов, Н.Г.Калинина, В.П.Голубев, Е.В.Осипова // Труды научно-исследовательского и учебно-методического центра биомедицинских технологий ВИЛАР. М., 1998. - С. 50-56.

174. Малышева А.Г. Закономерности трансформации органических соединений в окружающей среде //Гигиена и санитария. 1997. - №3. — С.5-10

175. Мартынова Н.А. Механизмы нарушения резистентности организма в условиях экологической нестабильности // Экология человека. — 1997. -№ 1.-С.10-16.1.40. Масла растительные. Методы определения йодного числа. ГОСТ 5475. — М.: изд-во стандартов, 1977.

176. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Ч. 1. М.: Медицина, 1993.- 736 с.

177. Машковский М.Д. Лекарственные средства: Справочник: В 2т. — Санкт — Петербург, 2000.

178. Меньшиков В.В. и др. (1997)

179. Энциклопедия клинических лабораторных тестов / В.В. Меньшиков, И.В. Меньшикова, Л.В. Меньшикова и др. Москва: Лабинформ. -• 1997.- 960 с.

180. Мошникова А.Б. с соавт. (2001).

181. Гибель трансформированных клеток под действием гомобифункциональных кросс-линкеров / А.Б. Мошникова, С.А. Мошников, В.Н. Афанасьев и др. // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. — 2001.-№ 1.-С. 32-40.

182. Муравская Е.В., Лапко А.Г., Муравский В.А. Модификация транспортной функции сывороточного альбумина при атеросклерозе и сахарном диабете // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. -2003.-Т. 135, №5.-С. 512-514.

183. Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов. Пер. с чешек. — М.: Мир, 1985.-432 с.

184. Мышкин В.А. с соавт. (1997)

185. Влияние оксиметилурацила и карсила на метаболические процессы в печени при отравлении крыс пентахлорбифенилом / В.А.Мышкин, Е.С.Волкова, Р.Ф.Зарудий, В.Е.Алехин // Материалы 4 Рос. Нац. Ко'нгр. «Человек и лекарство». Москва, 1997. - С. 278.

186. Нагорный С.В. с соавт. (1999).

187. Изучение экологически обусловленной патологии в регионах и населённых пунктах (аналитический обзор) /С.В.Нагорный, В.Г. Маймулов, Е.А. Цибульская и др. // Медицина труда и промышленная экология. 1999. - №2. - С.26-30.

188. Наградова Н.К. Белок-белковые взаимодействия в функционировании НАД+-зависимых дегидрогеназ: 44-е Баховское чтение. — М.: Наука, 1990.-56 с.

189. Наградова Н.К. К изучению свойств дегидрогеназы-3-фосфоглицеринового альдегида и растворимой L' глицерофосфатдегидрогеназы // Биохимия. — 1958. № 2. - С. 336-344.

190. Нестерин М.Ф., Скурихин И.М. Химический состав пищевых продуктов.- М.: Пищ. пром., 1979. С. 87-89.

191. Нефтепродукты. Методы испытания. Ч. 1. -М.: изд-во стандартов, 1977. -С. 281,216, 140, 155,345.

192. Никитин Н.А., Биличенко Т.Н., Чучалин А.Г. Распространённость хронических болезней органов дыхания и пневмонии среди подростков Москвы // Пульмонология. 1998. - № 1. - С.32-38.

193. Никулина Е.В., Корсун В.Ф. Расторопша неизвестное об известном // Практ. фитотерапия. - 1997. - № 2. — С. 42-45.

194. Норма в медицинской практике. Справочное пособие. — М.: МЕДпресс, 2000. 144 с.

195. Оксенгендлер Г.И. Яды и организм: Проблемы химиеской опасности. — СПб: Наука, 1991.-320 с.

196. Орлов Д.С., Садовникова JI.K., Лозановская И.Н. Экология и охрана биосферы при химическом зашрязнении. — М.: Высшая школа, 2002. — 334 с.

197. Островский Ю.М. Метаболическая концепция генеза алкоголизма // Этанол и обмен веществ. Минск: Наука и техника, 1982. — С. 6-41.

198. Островский Ю.М. с соавт. (1988).

199. Метаболические предпосылки и последствия потребления алкоголя / Ю.М. Островский, В.И. Сатановская, С.Ю. Островский и др. — Мн.: Наука и техника, 1988. — 263 с.

200. Панченко Л.Ф., Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М. Этанол и атеросклероз. М.: Медицина, 1987. — 128 с.

201. Платонов А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы. -М.: Изд-во РАМН, 2000. -52 с.

202. Плотников М.Б. с соавт. (2000).

203. Церебропротекторные эффекты смеси диквертина и аскорбиновой кислоты / М.Б. Плотников, С.В. Логвинов, Н.В. Пугаченко с соавт. //

204. Бюлл. эксперим.биол мед. 2000. — № 11. - С. 543- 547.

205. Подкользин А.А. с соавт. (2000).

206. Влияние электроактивных растворов на ферменты антиоксидантной системы / А.А. Подкользин, В.И. Донцов, В.Е. Чернилевский и др. // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. — 2000. Т. 130, № 12. -С. 66-68.

207. Подымова С.Д. Эффективность легалона при хронических заболеванияхIпечени // Клиническая фармакология и терапия. — 1996. — Т. 5, № 1. — С. 40-43.

208. Поляков А.А., Ткачук В.А. Урокиназный рецептор: межмолекулярные взаимодействия и особенности внутриклеточной сигнализации // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. 2002. - № 1. - С. 13-19.

209. Пономарев О.А. с соавт. (2002)

210. Термодинамические свойства объемных вязаных структур / Пономарев О.А., Сусак И.П., Фесенко Е.Е., Шигаев Ф.С. // Биофизика. 2002. - Т. 47, Вып. 3.-С. 395-410.I

211. Поройков В.В. Компьютерное предсказание биологической активности веществ: пределы возможного // Химия в России. — 1999. № 2. - С. 8-12.

212. Потапович А.И., Костюк В.А. Сравнительное исследование антиоксидантных свойств и цитопротекторной активности флавоноидов // Биохимия. — 2003. Т. 68, вып. 5. — С. 632-638.

213. Проскуряков С.Я., Габай В.Л., Коноплянников А.Г. Некроз активная, управляемая форма программируемой клеточной гибели // Биохимия. -2002. - Т. 67, вып. 4. - С. 467-491.

214. Радомская В.М. с соавт. (1995).

215. Ревич Б.А. с соавт. (2001).

216. Стойкие хлорорганические загрязнители в окружающей среде реальная опасность для здоровья женщины. Диоксины и рак молочной железы /Б.А. Ревич, В.Ф.Левшин, Т.И.Ушаков и др. - М., 2001. - 40 с.

217. Ревич Б.А. с соавт. (2002)

218. О влиянии диоксина на возникновение злокачественных новообразований и нарушений репродуктивного здоровья населения / Б.А. Ревич, Е.М. Аксель, Т.И. Ушакова и др. // Гигиена и сан. 2002. - № 1.-С. 8-13.176. Рейд С. с соавт. (2003)

219. Синдром хронической усталости / Рейд С., Челдер Т., Клир Э. и др. // Доказательная медицина. Часть 7. / Под общ. ред. С.Е.Бащинского — М.: Медиа Сфера.-2003.-С. 2180-2195.

220. Ройтман Е.В. с соавт (2004). Окислительно-модифицированный фибриноген влияет на реологические свойства крови / Е.В. Ройтман, О.А. Азизова, Ю.А. Морозов, А.В. Асейчев // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. — 2004. -№ 11.-С. 527-530.

221. Ройтман Е.В. с соавт. (2004).

222. Влияние окисленных форм фибриногена на свертывание крови / Е.В. Ройтман, О.А. Азизова, Ю.А. Морозов, А.В. Асейчев // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. — 2004. № 9. - С. 277-279.

223. Румянцева Ж.М. Фармакодинамика гепатопротекторов из расторопши пятнистой // Врач. дело. 1991. - № 5. - С. 15-19.

224. Рыжикова М.А. с соавт. (1998)

225. Влияние некоторых гепатотропных лекарственных растений на процессы свободнорадикального окисления в модельных системах и в экспериментах in vivo / М.А.Рыжикова, Р.Р.Фархутдинов, Ш.З.Загидуллин, С.В.Сибиряк // Эфферент. терапия. 1998. - № 2. - С. 39-42.

226. Рябинина Н.Е., Ковалев И.Е. Цитохром Р450 и охрана внутренней среды 1 человека.-Пущино, 1985.-78 с.

227. Самигуллина Л.И. Иммунная активность препаратов на основе расторопши пятнистой // Сб. трудов 4-го конгр. РААКИ «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». — Москва, 2001.-С. 292.

228. Самигуллина Л.И., Лазарева Д.Н. Иммунотропные свойства препаратов расторопши пятнистой // Тез. докл. Рос. науч.-практ. конф. «Рациональное использование лекарств». — Пермь, 2000. — С. 39.

229. Самигуллина Л.И., Лазарева Д.Н. Новые перспективы применения препаратов расторопши пятнистой // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2004. - Т.67, № 4. - С. 77-80.

230. Саратиков А.С., Венгеровский А.И. Новые гепатопротекторы природного происхождения // Экперим. и клинич. фармакология. — 1995. -Т. 58, № 1 С. 8- 11.

231. Сейфулла Р.Д. с соавт. (2001)

232. Новые препараты растительного происхождения, используемые в спортивной медицине / Сейфулла Р.Д., Кондратьева И.И., Эмирова JI.P. и др. // Тез. докл. 8 Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». Москва, 2001.-С. 448.

233. Сидоренко Г.И. Фундаментальные исследования основа научного потонциала гигиены оружающей среды //Гигиена и санитария. — 1989. -№3. — С. 4-7.

234. Сидоров П.И., Соловьёв А.Г., Кирпич И.А. Токсикологические аспекты экологической патологии //Экология человека. 1998. - №1. - С.85-87.

235. Сидоров П.И., Соловьёв А.Г., Кирпич И.А. Токсикологические аспекты экологической патологии //Экология человека. 1998. - №1. — С.85-87.

236. Скакун Н.П., Мосейчук И.П., Гиль Я.Я. Эффективность витогепата иIсирепара в сочетании с карсилом при хроническом поражении печени // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. - Т. 55, № 1. — С. 61-63.

237. Скакун Н.П., Ковальчук С.Ф. Эффективность антиоксидантов при комбинированном поражении печени четыреххлористым углеродом / Фармакология и токсикология. 1987. - № 3 - С. 97 - 99.

238. Скакун Н.П., Мосейчук И.П., Гиль Л.Я. Эффективность витосепара и сирепара в сочетании с карсилом при хроническом поражении печени // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. - Т. 55, № 1. — С.61-63.

239. Скакун Н.П., Степанова Н.Ю. Сравнительная оценка гепатопротекторной, антиоксидантной и желчегонной активности флавоноидных препаратов // Врач. дело. 1988. - № 12. - С. 52 — 54.

240. Скулачев В.Г. Кислород в живой клетке: добро и зло // Российский 1 журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. — 1999. № 1.-С. 12-18.

241. Скулачев В.П. Кислород и явления запрограммированной смерти. 2000. -48 с.

242. Смирнов Л.Д., Сускова B.C. Модуляция иммунного ответа антиоксидантами // Хим. фарм. журн. - 1989. - № 7. - С. 773-784.

243. Сокольская Т. А. Комплексная переработка плодов расторопши пятнистой // Материалы 2 Междунар. Съезда «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения».1 -Санкт-Петербург-Валаам, 1998.-С. 145-146.

244. Сокольская Т. А. Комплексная переработка плодов расторопши пятнистой и создание на ее основе препарата «Силимар» // Хим. фарм. журнал. - 2000, - Т. 34, № 9. - С. 27 - 30.

245. Сонненбихлер И. Влияние флавоноидного силибина на синтез РНК в печени крысы // Клиническое значение препарата легалон: Материалы симп.-М.: Б.и., 1981.-С. 58-62.

246. Степанов М.Г., Арутюнян А.В. Центральная регуляция репродуктивной функции в неблагоприятных экологических условиях // Экология и здоровье человека: Тез. докл. Всероссийской научно-практ. конф. — Самара, 1994.- С 172-173.

247. Сыромятников Ю.П. Оценка донозологических признаков воздействия постоянных магнитных полей на работающих // Гигиена и санитария. — 1998.-№> 1.-С. 14-15.

248. Тарасова Л.А. с соавт. (1997). Клинико-патогенетические аспекты хронического действия органических растворителей / Л.А.Тарасова, Н.С. Сорокина, Е.А. Лобанова и др. //Медицина труда и промышленная экология. 1997. -№3.-С. 6-8.

249. Телитченко М.М., Остроумов С.А. Введение в проблемы биологической экологии. М.: Наука, 1990. - С. 285.

250. Труфакин В. А., Трунова J1.A. Иммунологические показатели формирования экологически обусловленной патологии //Вестник РАМН. 1994.-№17. с. 15-18.

251. Турпаев К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов // Биохимия. 2002. - Т. 67. вып. 3. - С. 339-352.

252. Турпаев К.Т. Роль окиси азота в передаче между клетками // Молекул. Биол. 1998.-Т. 32, №4.-С. 581-591.

253. Фесенко Е.Е. с соавт. (2002)

254. Структурообразование в воде при действии слабых магнитных полей и ксенона. Электронно-микроскопический анализ / Фесенко Е.Е., Попов

255. B.И., Новиков В.В., Хуцян С.С.// Биофизика. 2002. - Т. 47, Вып. 3.1. C. 389-394

256. Фокина К.В. с соавт. (2000).

257. Участие глицеральдегид — 3 фосфатдегидрогеназы в регуляции образования 2,3 — дифосфоглицерата в эритроцитах / К.В. Фокина, М.Ю. Языкова, П.В. Данынина, Е.В. Шмальгаузен, В.И. Муронец // Биохимия -2000. - Т. 65, вып. 4. - С.83-88.

258. Хотько Н.И. с соавт. (2002)

259. Некоторые аспекты выявления экологически обусловленных заболеваний / Н.И. Хотько, А.Д. Добло, А.П. Дмитриев и др. // Труды , YIII Международного конгресса «Актуальные проблемы экологии человека». Самара, 2002. - С. 250.

260. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Фундаментальные основы биологических ритмов // Вестн. Рос. АМН. 2000. - № 8. - С. 4-7.

261. Шарипов Р.Х. Влияние экологической обстановки крупного промышленного города на течение беременности и родов у женщин и адаптационного периода у новорожденных // Российский вестникперинатологии и педиатрии. № 6. - 1995.

262. Шестаков Г.Н. с соавт. (1998)

263. Получение и экспериментальное обоснование новых лекарственных форм силибора / Г.Н.Шестаков, Ю.К.Василенко, В.А.Компанцев и др. // Фармация. 1998.-№3.-С. 15-17.

264. Шилова С.А. Состояние популяции млекопитающих в условиях критических антропогенных нагрузок // Экология популяции: структура и динамика. М., 1995. - С. 144-159.

265. Шумянцева В.В., Булко Т.В., Арчаков А.И. Электрохимическое восстановление цитохромов Р-450 — путь к созданию биосенсоров и биореакторов // Биомедицинская химия. — 2004. Т. 50, вып. 3. — С. 243259.I

266. Щедрина А.Г. Онтогенез и теория здоровья: методологические аспекты. Новосибирск: Наука Сиб. отделение, 1989. - 136 с.

267. Ягудина Р.И., Тишкин B.C. Гепатопротекторная активность некоторых комплексных препаратов растительного происхождения // Материалы 4 Рос. Нац. Конгр. «Человек и лекарство». Москва, 1997. - С. 14.

268. Янковский О.Ю. Токсичность кислорода и биологические системы: эволюционные, экологические и медико-биологические аспекты. — С-Пб, 2000.-294 с.220. AbaleaV.etal. (1999).I

269. Repair of iron-induced DNA oxidation by the flavonoid myricetin in primary rat hepatocyte cultures / V. Abalea, J. Cillard, M.P. Dubos et al. // Free Radic Biol Med. 1999. - Vol. 26, N 11-12. - P. 1457-1466.

270. Agarwal R., Mukhtar H. Chemoprevention of photocarcinogenesis // Photochem. and Photobiol. 1996. - N 4. - P. 440-444.222. Ahmad A. et al (2002).

271. Evaluation of hepatoprotective potential of jigrine post-treatment against thioacetamide induced hepatic damage / A.Ahmad, K. K.Pillai, A. K. Najmi, S. J. Ahmad, et al. // J.Ethnopharmacol. 2002. - V.79, №1. - P.35-41.223. Ahmad A. et al/(2002)

272. Evaluation of hepatoprotective potential of jigrine post-treatment against thioacetamide induced hepatic damage / A.Ahmad, K. K.Pillai, A. K. Najmi et al.//J.Ethnopharmacol.-2002. V.79, №1. - P.35-41.224. Ahmad N. et al. (1998)i

273. Ahmad N., Katiyar S. K., Mukhtar H. Antioxidants in chemoprevention of skin cancer // Curr.Probl.Dermatol. -2001. V.29. - P. 128-139.227. Ahmed B. et al. (2002)

274. Hepatoprotective activity of two plants belonging to the Apiaceae and-the Euphorbiaceae family / B. Ahmed, T.Alam, M.Varshney, S.A. Khan // J.Ethnopharmacol. 2002. - V.79, №3. - P.313-316.

275. Ahmed В., Alam Т., Khan S. A. Hepatoprotective activity of Luffa echinata fruits // J.Ethnopharmacol.- 2001. V.76. - №2. - P. 187-189.229. Ahmed M.U. et al. (1988).

276. Oxidative degradation of glucose adducts to protein. Formation of 3-(N 1 epsilon-lysino)-lactic acid from model compounds / M.U. Ahmed, J.A. Dunn, M.D. Walla et al.//J Biol Chem. 1988. -Vol. 25, N 18.-P. 8816-8821.

277. Alarcon de la Lastra A.C. et al. (1995).

278. Gastroprotection induced by silymarin the hepatoprotective principle of Silybum marianum in ischemiareperfusion mucosal injury: role of neutrophils / A.C. Alarcon de la Lastra, M.J. Martin, V. Motilva et al. // Planta Med. 1995. -Vol. 61,№2.-P. 116-119.

279. Alarcon de la Lastra, Martin M. J., Marhuenda E. Gastric anti-ulcer activity of silymarin, a lipoxygenase inhibitor, in rats // J.Pharm.Pharmacol. 1992. -V.44, №11.- P.929-931.

280. АН В. H., Bashir A. K., Rasheed R. A. Effect of the traditional medicinal plants Rhazya stricta, Balanitis aegyptiaca and Haplophylum tuberculatum on paracetamol-induced hepatotoxicity in mice // Phytother.Res. 2001. - V.15, №7. - P.598-603.

281. Alp M. H., Hickman R. The effect of prostaglandins, branched-chain amino acids and other drugs on the outcome of experimental acute porcine hepatic failure //J.Hepatol. 1987. - V.4, №1 - P.99-107.2$4. Altorjayl. etal. (1992)

282. The effect of various antioxidants and other modifying agents on oxygen, radical-generated DNA damage in human lymphocytes in the COMET assay / D.Anderson, T.W. Yu, B. J. Phillips, P.Schmezer // Mutat.Res. 1994. -V.307, №1. - P.261-271.

283. Andrade M.A., Scan I., Rost B. Adaptation of protein surfaces to subcellular location //J. Mol. Biol. 1998. - Vol. 276, N 2. - P. 517-525.

284. Andreuzzi A., Viola F. Membranotropic therapy of infantile viral hepatitis // Minerva Pediatr. 1979. - V.31, №9. - P.733-740.

285. Aruoma O.I. Nutrition and health aspects of free radicals and antioxidants // Food Chem Toxicol. 1994.-Vol. 32, N 7.-P. 671-683.I

286. Axford J.S. Glycosylation and rheumatic disease // Biochem. et biophys. Acta. Mol. Basis disease. 1999. - Vol. 1455, N 2-3. - P. 219-229.242. BagchiD. etal. (1997).

287. Oxygen free radical scavenging abilities of vitamins С and E, and a grape seed proanthocyanidin extract in vitro / D. Bagchi, A. Garg, R.L. Krohn et al. //Res Commun Mol Pathol Pharmacol. 1997. - Vol. 95, N2.-P. 179-189.

288. Barbarino F. et al. (1981)

289. Effect of silymarin on experimental liver lesions / F. Barbarino, E.Neumann, I.Deaciuc et al. // Med.Interne. 1981. V. 19, №4. - P.347-357.i

290. Bartholomaeus A.R., Bolton R., Ahokas J. T. Inhibition of rat liver cytosolic glutathione S-transferase by silybin // Xenobiotica. — 1994. V.24, №1. -P. 17-24.

291. Barton P., Krejci V., Blazek M. Possibilities of influencing the hepatotoxicity of chemotherapeutics by the use of silymarin // Cas.Lek.Cesk. 1985. -V.124, №6. - P.173-175.

292. Bartosz G. Non-specific reactions: molecular basis for ageing // J Theor Biol. -1981.-Vol. 7, N 1. P. 233-235.247. BasagaH. etal. (1997)

293. Free radical scavenging and antioxidative properties of 'silibin' complexes on microsomal lipid peroxidation / H.Basaga, G.Poli, С. Tekkaya, I. Aras // Cell Biochem.Funct. 1997. - V.15, №1. - P.27-33.

294. Bass N. M. Is there any use for nontraditional or alternative therapies in ! patients with chronic liver disease? // Curr.Gastroenterol.Rep. 1999. - V.l,1. P.50-56.

295. Baur X. Bronchopulmonale Krankheiten durch organische und anorganische Staube: Kurzer Uberblick und Moglichkeiten der Fruhdiagnostik //Arbeitsmed., Sozialmed., Umweltmed. 1994. -29,№ 10.-P. 419-128.

296. Beckmann-Knopp S. et al. (2000)1.hibitory effects of silibinin on cytochrome P-450 enzyme in human liver microsomes / S.Beckmann-Knopp, S.Rietbrock, R.Weyhenmeyer et al. // Pharmacol. Toxicol. 2000. - Vol. 86, N 6. - P. 250-256.

297. Beckmann-Knopp S. et al. (2000).1.hibitory effects of silibinin on cytochrome P-450 enzymes in human liver microsomes / S. Beckmann-Knopp, S. Rietbrock, R. Weyhenmeyer et al. // Pharmacol Toxicol. 2000. - Vol. 86, N 6. - P. 250-256.

298. Beg A.A., Baltimore D. An essential role for NF-kappaB in preventing TNF-alpha-induced cell death // Science. 1996. - Vol. 274, N 5288. - P. 782-784.

299. Behan P.O., Hannifan H. 5-HT reuptake inhnbitors in CFS // J Immunol Immunopharmacol.- 1995.-Vol. 15.-P. 66-69.

300. Beisencherz G., Bucher Th., Garbade K. a-Glycerophosphate dehydrogenaseifrom rabbit muscle // Methods in enzymology. New York: Acad. Press, 1955.-Vol. 1.-P.391.

301. Ben-Shachar D., Youdim M.B. Selectivity of melaninized nigra-striatal dopamine neurons to degeneration in Parkinson's disease may depend on iron-melanin interaction // J Neural Transm Suppl. 1990. - N 29. - P. 251-258.I

302. Berglung F. Amalgam poisoning, a medical realty //Lakartidningen. 1989. -V. 86,N 1-2.-P. 41-42.

303. Bergmeyer I I.U., Bernt E. a-oxoglutarate. In: Methods of Enzymatic analisis ed. By I I.U. Bergmeyer Ac. Press N.Y., 1963. P. 423-427.

304. Berkson B.M. A conservative triple antioxidant approach to the treatment of hepatitis C. Combination of alpha lipoic acid (thioctic acid), silymarin, and selenium: three case histories//Med.Klin. 1999. - V.94, Suppl 3,15-10. -P.84-89.

305. Bertelli A. et al. (1977).

306. Physical fitness and all-cause mortality: a prospective study of healthy men and women / S.N. Blaire, H.W. Kohl, R.S. Paffenbarger et al. // JAMA. -1989.-Vol. 262, N 17. -P. 2395-2401.

307. Bode J.C. Re: Flora et al. Silymarin for the therapy of liver disease // Am.J.Gastroenterol. 1999. - V.94, №2. - P.545-546.i

308. Bogan A.A., Thorn k.S. Anatomy of hot sporte in protein interfaces // J. Mol. Biol.-Vol. 280, N 1. P. 1-9.

309. Bohnenstengel F. et al. (1996).

310. Characterization of the cytochrome P450 involved in side-chain oxidation of cyclophosphamide in humans / F. Bohnenstengel, U. Hofmann, M. Eichelbaum, H.K. Kroemer // Eur J Clin Pharmacol. 1996.- Vol. 51, N'3-4. -P. 297-301.

311. Boissel J. P., Bunn H. F. Erythropoietin structure -fanction relationships // ' Prog. Clin. Biol. Res. 1990. - V. 352. - P. 227-232.

312. Bondy S.C. The relation of oxidative stress and hyperexcitation to neurological disease // Proc Soc Exp Biol Med. 1995. - Vol. 208, N 4. - P. 337-345.

313. Bosisio E., Benelli C., Pirola O. Effect of the flavolignans of Silybum marianum L. on Lipid peroxidation in rat liver microsomes and freshly isolated hepatocytes // Pharmacolx. Res. 1992. - Vol. 25, № 2. - P. 147 - 154.

314. Braga P. C., Cagnetta G., Copponi V. Effects of drugs on the mitochondrial fraction isolated from the liver// Clin.Ter. 1981. - V.96, №5. - P.493-501.i271. BrailskiKh. etal. (1986)

315. Effect of carsil and legalon in treating chronic liver diseases / Kh. Brailski,

316. K.Chernev, M.Eturska et al. // Vutr.Boles. 1986. - V.25, №3. - P.43-49.

317. Bravo L. Polyphenols: chemistry, dietary sources, metabolism, and nutritional significance//Nutr Rev.-1998.- Vol. 56, N 11. P. 317-333.

318. Bromme H.J., Holtz J. Apoptosis in the heart: when and why? // Mol Cell Biochem.- 1996.-Vol. 163-164.-P. 261-275.

319. Broudy V.C. et al. (1991).

320. Erythropoietin receptor characteristics on primary human erythroid cells /V.C. Broudy, N. Lin, M. Brice et all. //Blood. 1991. - 77(12). - P. 25832590.

321. Brouwer A. Healt impact of halogenated aromatic hydrocarbons in animals and man: Abstr. Pap 4 л Eur. Meet Environ. Hyg., Wageningen, Iule 9-11. 1993 //Zentralfl. Hyg. Und Umweltmed. 1994. -V. 195, N 2. - P. 140 -141.

322. Brune В., von Knethen A., Sandau K.B. Nitric oxide (NO): an effector of apoptosis // Cell Death Differ. 1999. - Vol. 6, N 10. - P. 969-975.

323. Bubb I.M., Lester I.N. Factors controlling the accumulation of metals and within fluvial systems //Envion. Monit. And Assess. — 1996. V. 41, N 1. — P. 87- 106.

324. Bunn H.F., Higgins P.J. Reaction of monosaccharides with proteins: possible evolutionary significance.

325. Science.-1981.-Vol. 10, N 4504.-P. 222-224.279. Buzzelli G. et al. (1993)

326. A pilot study on the liver protective effect of silybin- phosphatidylcholine complex (IdB1016) in chronic active hepatitis / G.Buzzelli, S.Moscarella, A.Giusti et al. // Int.J.Clin.Pharmacol.Ther.Toxicol. 1993. - V.31, №9. -P.456-460.

327. Cadenas S., Barja G. Resveratrol, melatonin, vitamin E, and PBN protect against renal oxidative DNA damage induced by the kidney carcinogen КВЮЗ //Free Radic Biol Med. 1999. - Vol 26, N 11-12. - P. 1531-1537.

328. Cai Q., Wei H. Effect of dietary genistein on antioxidant enzyme activities in SENCAR mice // Nutr Cancer. 1996. - Vol. 25, N 1. - P. 1 -7.282. Campos R. et al (1988)

329. Acetaminophen hepatotoxicity in rats is attenuated by silybin dihemisuccinate / R.Campos, A.Garrido, R.Guerra, A. Valenzuela // Prog.Clin.Biol.Res. -1988. V.280. - P.375-378.283. Campos R. et al. (1989)

330. Effect of complex polyphenols and tannins from red wine (WCPT) on chemically induced oxidative DNA damage in the rat / C. Casalini, M. Lodovici, C. Briani et al. // Eur J Nutr. 1999. - Vol. 38, N 4. - P. 190-195.286. CastigliE. etal. (1977)

331. The activity of silybin on phospholipid metabolism of normal and fatty fiver in vivo / E.Castigli, I.Montanini, R.Roberti, G. Porcellati // Pharmacol.Res.Commun. 1977. - V.9, №1. - P.59-69.287. CerkezG.F. etal. (1989)

332. Chander R., Kapoor N.K., Dhawan B.N. Hepatoprotective activity of silymarin against hepatic damage in Mastomys natalensis in fected with Plasmodium bepghei // Indian J. Med. Res. 1989. - Vol. 90. - P. 472 - 477.291. Chen H. etal. (1992).

333. Effects of silybin on acute myocardial infarction and reperfusion injury in anesthetized rats /Н. Chen, D.F. Su, Т.Н. Zhang et al. // Zhongguo Yao Li Xue Bao. 1992. - Vol. 13, N 1, - P. 69-71.292. ChoH. etal. (2001)

334. Bakuchiol: a hepatoprotective compound of Psoralea corylifolia on tacrine-induced cytotoxicity in Hep G2 cells / H.Cho, J.Y.Jun, E.K. Song et al. // Planta Med. 2001. - V.67, №8. - P.750-751.

335. Choppin J., Desplaces A. The action of silybun on the mouse in L-amanitiine poisoning // Arzneimittel Forssch. - 1979. - Bd 29. - S. 63-68.

336. Studies on the antioxidant and free radical scavenging properties of IdB 1016 a new flavanolignan complex / A.Comoglio, G. Leonarduzzi, R.Carini et al. // Free Radic.Res.Commun. 1990. - V.l 1, №1-3. - P. 109-115.

337. Conti M., Malandrino S., Magistretti M. J. Protective activity of silipide on liver damage in rodents // Jpn.J.Pharmacol. 1992. -V.60, №4. - P.315-321.

338. Conti M., Malandrino S., Magistretti M.J. Protective activity of silipide on liver damage in rodents // Jpn J Pharmacol. — 1992. Vol. 60, N 4. — P. 315, 321.300. Cos P. et al. (1998).

339. Flavonoids as inhibitors of xanthine oxidase and surepoxide scavengers / P. Cos, M. Calomme, Y. Li et al. // Rev. farm. E bioquim univ. Sao Paulo. — 1998.-Vol. 34, N1.-P. 206.

340. Cox I.M., Campbell M.J., Dowson D. Red blood cell magnesium and chronic fatigue syndrome // Lancet. -1991.- Vol. 337. P. 757-760.

341. Das-Panja K., Jonnalagadda V.S., Jonnalagadda S. Activation of enzymatic catalysis // Indian J. Biochem. And Biophis. 1998. - Vol. 35, N 5. - P. 255259.

342. De laPuertaR. etal. (1996)

343. Effect of silymarin on different acute inflammation models and on leukocyte migration / R.De la Puerta, E.Martinez, L.Bravo, M.C.Ahumada // J. Pharm. And Pharmacol. 1996. -N 9. - P. 968-970.306. DeMartiisM. et al. (1984)

344. Biomarkers of free radical damage applications in experimental animals and in humans /L.L. de Zwart, J.H. Meerman, J.N. Commandeur, N.P. Vermeulen // Free Radic Biol Med. 1999. - Vol. 26, N 1-2. - P. 202-226.

345. Deak G. Effect of two bioflavonoids on certain cellular immune reactions in vitro // Acta-Physiol-Hung. 1990. - V. 76, № 2. - P. 113-121.

346. Dehmlow C., Erhard J., de Groot H. Inhibition of Kupffer cell functions as an explanation for the hepatoprotective properties of silibinin // Hepatology. -1996. Vol. 23, № 4. - P. 749 - 754.

347. Dehmlow C., Erhard J., de Groot H. Inhibition of Kupffer cell functions as an explanation for the hepatoprotective properties of silibinin // Hepatology.1996. Vol. 23, N 4. - P. 749-754.

348. Dehmlow C., Erhard J., de Groot H. Inhibition of Kupffer cell functions as an explanation for the hepatoprotective properties of silibinin // Hepatology.1996. Vol. 23, N 4. - P. 749-754.

349. Dellvin T. Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations. — New York,1997.

350. Demacker P.N.M. Complement activation by oxidatively modified low-density lipoproteins // Eur. J. Clin. Invest. 1999. - Vol. 29, N 10. - P. 811813.

351. Demetrius L. Role of enzyme-substrate flexibility in catalytic activity: an evolutionary perspective // J. Theor. Biol. 1998. - Vol. 194, N 2. - P. 175194.315. DemitrackM. etal. (1991).

352. Evidence for impaired activation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in patients with chronic fatigue syndrome / M. Demitrack, J. Dalr, S. Straus et al. // j Clin Endocrinol Metab. 1991. - Vol. 73. - P. 1224-1234.

353. Dhanalakshimi s. et al. (2002).

354. Further studies on the hepatoprotective effects of Cochlospermum tinctorium rhizomes / B.Diallo, R.Vanhaelen-Fastre, M.Vanhaelen et al. // J.Ethnopharmaco1. 1992. - V.36, № 2. - P. 137-142.

355. Distefano M.D. et al. (1998).

356. The design of protein-based catalysts using semisynthetic methods / M.D. Distefano, H. Kuang, D. Qi, A. Mazhary // Curr. Opinion Struct. Biol. — 1998. Vol. 8, N 4. - P. 459-465.

357. Dobson C.M. Protein misfolding, evolution and disease // Trends biochem. Sci. 1999. - Vol. 24, N 9. - P. 329-332.

358. Effect of silymarin on carbon-tetrachloride- induced hepatotoxicity in rats / M.Dubin, R.J. Groszmann, D.Kravetz et al. // Medicina (B Aires). 1976. -V.36, №5. - P.437-442.I322. Duthie S.J. etal. (1997).

359. Fetoprotectivity of the flavanolignan compound siliphos against ethanol-induced toxicity / Edwards J., Grange L. L., Wang M., Reyes E.// Phytother.Res. 2000. - V. 14, №7. - P.517-521.

360. Enochs W.S. et al. (1994).

361. The roles of neuromelanin, binding of metal ions, and oxidative cytotoxicity in the pathogenesis of Parkinson's / W.S. Enochs, T. Sarna, L. Zecca et al. //J Neural Transm Park Dis Dement Sect. 1994. - Vol. 7, N 2. - P. 83-100.

362. Falchi M., Bielta G., Mazza D. Effect of situmarin on pttlatelet aggregation in hupercholesterolomased rabbis // Drungs Exp. And Clin. Res. 1983. - 9. N 6. -P. 419-422.

363. Farbarino F., Neumann E., Deainc L. Effect of silymarin on experimental liver lesions // Ree. roum. med. Ser. Med. interne. 1981. - N 4. - P. 347-357.328. Feher J. et al. (1987)

364. Effect of free radical scavengers on superoxide dismutase (SOD) enzyme in patients with alcoholic cirrhosis / J. Feher, I.Lang, K.Nekam et al. //Acta

365. Feher J., Lengyel G., Blazovics A.Oxidative stress in the liver and biliary ' tract diseases // Scand.J.Gastroenterol. 1998. - Suppl,V.228. - P.38-46.332. Ferenci P. et al. (1989).

366. Randomized controlled trial of silymarin treatment in patients with cirrhosis of the liver / P. Ferenci, B. Dragosis, H. Dittrich et al. // J. Hepatol. 1989. - Vol. 9,№ l.-P. 105-113.

367. Fiebrich F., Koch H. Silymarin, an inhibitor of prostoglandinsynthetase // Experimentia. 1979.-35.-P. 1550- 1552.334. FilipeP.M. etal. (1997)

368. Effet de la silibinine sur la lesion oxydative des constituents du sang / P.M.Filipe, A.C.Fernandes, J.N.Silva et al. // C. r. seances Soc. Boil. 1997. -N2.-P. 304.335. FloraK. etal. (1999).

369. Milk thistle (Silybum marianum) for the therapy of liver disease / K. Flora, M.Hahn, H.Rosen, K.Benner // Am. J. Gastroenterol. 1999. - Vol. 93, №2. -P. 139-143.

370. Forsyth L.M. et al. (1999).

371. Therapeutic effects of oral NADH on the symptoms of patients with chronic 1 fatigue syndrome / L.M. Forsyth, H.G. Preuss, A.L. MacDowell et al. // Ann Allergy Asthma Immunol. 1999.-Vol. 82.-P. 185-191.337. FotsisT. etal. (1997).

372. Flavonoids, dietary-derived inhibitors of cell proliferation and in vitro angiogenesis / T. Fotsis, M.S. Pepper, E. Aktas et al. // Cancer Res. 1997. —

373. Vol. 57, N 14.-P. 2916-2921.338. FukudaK. etal. (1994).

374. The chronic fatigue syndrome: a comprehensive approach to its definition and study / K. Fukuda, S. Straus, I. Hickie et al. // Ann Intern Med. 1994. - Vol. 121.-P. 953-959.

375. Fumes J.A. Chemical compjsition of semimal oil and seed meal // An. Aroc. Quim. Argent. 1979. - V. 67. - N 1. - P. 29-39.

376. Galzigna L. et al. (1999).

377. Acetaminophen does not induce oxidative stress in isolated rat hepatocytes: its probable antioxidant effect is potentiated by the flavonoid silybin / A.Garrido, C.Arancibia, R.Campos, A.Valenzuela // Pharmacol.Toxicol. 1991. - V.69, №1. - P. 9-12.

378. Gaughan D.J., Whitehesd A.S. Function and biological applications of , catalytic nucleic acids // Biochem. Et biophys. Acta Gene Struct. And

379. Express.- 1999.-Vol. 1445, N1.-P. 1-20.

380. Giese L. A. Milk thistle and the treatment of hepatitis // Gastroenterol.Nurs. -2001. V.24. - №2. - P.95-97.

381. Gilardi G., Fantuzzi A. Manipulating redox systems: application to nanotechnology // Trends Biotechnol. -2001. Vol. 19, N 1. - P. 468-476.

382. Gillette I.R. Arkansas Toxicol. Symp. "Drug Metab. Cause Drug Toxicity" Honoring Res. Contrib. Oct. 14-15,1993 //Drug Metab. Rev. 1995. - V. 27, N 1-2.-P. 1-4.

383. Giovannelli L. et al. (2000).

384. Effect of complex polyphenols and tannins from red wine on DNA oxidativedamage of rat colon mucosa in vivo / L. Giovannelli, G. Testa, C. De Filip'po et al. // Eur J Nutr. 2000. - Vol. 39, N 5. - P. 207-212.347. GotzM.E. etal. (1994).

385. Oxidative stress: free radical production in neural degeneration / M.E. Gotz, G. Kunig, P. Riederer, M.B. Youdim// Pharmacol Ther. 1994. - Vol. 63, N 1.-P. 37-122.

386. Grabski J. Problemy intoksykacji zwiazkami chemicznymi w srodowisku wielkoprzemyslowym a funkcja niektorych gruczolow dokrewnych I rozrodczych // Ann. Acad. Med. Siles. 1990. - Supl. 10. - P. 214-219.

387. Grant L.D., Davis J.M. Lead Exposure and Child Development. An International Assessment / eds. M.A. Smith, L.D. Grant, A.I. Sors. — Boston, 1989.-P. 49-115.350. GreimH. etal. (1992).

388. Cell melliated chemical reactivity: halogenated dibenzodioxins and dibenzofurans / H. Greim, K. Rozman, H. Sterzl-Eckert et al. //BGA -Schriften.- 1992, N3.-P. 61-71.

389. Grisham M.B., Jourd'Heuil D., Wink D.A. Nitric oxide. I. Physiological chemistry of nitric oxide and its metabolites:implications in inflammation // Am J Physiol. -1999. -Vol. 276, N 2 Pt 1.-P. 315-321.352. Guo F.H. etal. (1995)

390. Continuous nitric oxide synthesis by inducible nitric oxide synthase in ' normal human airway epithelium in vivo / H. R. De -Raeve, T.W. Rice et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92, N17. - P. 7809-7813.

391. Gupta O. P. et al. (2000).

392. Anti inflammatory and antiarthritic activities of silymarin acting through inhibition of 5 - lipoxygenase / О.Р. Gupta, S. Sing, S. Bani et al. // Phytomedicine. - 2000. - Vol. 7, № 11. - P. 21 - 24.354. Gupta O.P. et al. (2000).

393. Anti-inflammatory and anti-arthritic activities of silymarin acting throughinhibition of 5-lipoxygenase / O.P. Gupta, S. Sing, S. Bani et al. // Phytomedicine. -2000. Vol. 7, N 1.-P. 21-24.

394. Gylmiyarova F.N. et al. (2001)

395. Antioxidation potential of flavolignanes in maintanance of nervous tissue protection / F.N.Gylmiyarova, V.M.Radomskaya, G.M.Baisheva et al. // Advances in Gerontology". 2001. - Vol. 6. - P. 50-51.356. Gyorgy I. Et al. (1992)

396. Substituent effects in the free radical reactions of silybin: radiation- induced oxidation of the flavonoid at neutral pH / I.Gyorgy, S.Antus, A.Blazovics, G. Foldiak// Int.J.Radiat.Biol. 1992. - V.61. - №5. - P.603-609.357. Hagymasi K. et al. (2002)

397. Extrahepatic biliary obstruction: can silymarin protect liver function? / K.Hagymasi, I.Kocsis, A.Lugasi et al. // Phytother.Res. 2002. - V.16, Suppl 1. - P.78-80.

398. Hakova H., Misurova E. Therapeutical effect of silymarin on nucleic acids in the various organs of rats after radiation injury // Radix Biol. Radioecol. -1996. -N3.- P. 365-370.

399. Hakova H., Misurova E., Kropacova K. The effect of silymarin on concentration and total content of nucleic acids in tissuies of continuously irradiated rats // Vet. Med. 1996. -N 4. - P. 113-119.360. HalimA.B. etal. (1997)

400. Biochemical effect of antioxidants on lipids and liver function' in experimentally-induced liver damage / Halim А. В., el Ahmady O., Hassab-Allah S., et al.// Ann.Clin.Biochem.- 1997.- V.34 ( Pt 6). P.656-663.

401. Hancock J.T. Superoxide, hydrogen peroxide and nitric oxide as signaling molecules: their production and role in disease // Brit. J. Biomed. Sci. — 1997. -Vol. 54, N 1.-P. 38-46.

402. Harborne J.B, Williams C.A. Anthocyanins and other flavonoids // Nat Prod Rep. 2001. - Vol. 18, N 3. - P. 310-333.3(53. Harborne J.B., Williams С.A. Advances in flavonoid research since 1992. // Phytochemistry. 2000. - Vol. 55, N 6. - P.481-504.

403. Hasegawa G., Hunter A.J., Charonis A.S. Matrix nonenzymatic glycosylation leads to altered cellular phenotype and intracellular tyrosine phosphorylation // J Biol Chem. 1995. - Vol. 17, N 7. - P. 3278-3283.

404. Hastings T.G., Lewis D.A., Zigmond M.J. Role of oxidation in the neurotoxic effects of intrastriatal dopamine injections // Proc Natl Acad Sci USA. -1996.-Vol. 5, N5.-P. 1956-1961.366. HayaishiO. et al. (1977).

405. Indoleamine 2,3-dioxygenase: incorporation of 1802— and 1802 into thereaction products / O. Hayaishi, F. Hirata, T. Ohnishi et al. // J Biol Chem. — 1977. Vol. 25, N 10. - P. 3548-3550.

406. Heifenstein U. et al. (1991).

407. Air pollution and diseases of respiratory tracts in pre-school children: a transfer function model AJ. Heifenstein, U. Askermann-Liebrich, C. Braun-Fahrlander et. al. //Environ. Monit. End assessment. -1991.-17, №2-3. P. 147-156.

408. Hernandez R., Nazar E. Effect of silymarin in intrahepatic cholestasis of pregnancy (preliminary communication) // Rev.Chil.Obstet.Ginecol. 1982. -V.47, №1. - P.22-29.

409. Hickie I.B. et al. (2000).

410. A randomised, double-blind, controlled placebo-phase in trial of moclobemide in patients with chronic fatigue syndrome / I.B. Hickie, A.J. Wilson, J. Murray Wright et al. // J Clin Psychiatry. 2000. - Vol. 61. - P, 643-648.

411. Higenbottam T. Lung disease and pulmonary endothelial nitric oxide // Exp. , Physiol. 1995. - V. 80, N 5. - P. 855 - 864. Higenbottam T. Lung diseaseand pulmonary endothelial nitric oxide // Exp. Physiol. 1995. - V. 80, N 5. -P. 855-864.

412. Hoefler С., Fleurentin J., Mortier F. Comparative choleretic ,and hepatoprotective properties of young sprouts and total plant extracts of Rosmarinus officinalis in rats // J.Ethnopharmacol. 1987. - V.19, №2. -P.133-143.

413. Hogg N., Kalyanaraman B. Nitric oxide and lipid peroxidation // Biochim. Et buiphys. Acta bioeneng incl. Rev. bioenerg. 1999. - Vol. 1411, N 2-3. - P. 378-384.

414. Holmes R.S., Masters C.G. Epigenetic interconvertion of the multiple forms of mouse liver catalase // TEBS Letters. 1970. - Vol. 2, N 1. - P. 45-48.

415. Horvath M.E. et al. (2001)

416. Effect of silibinin and vitamin E on restoration of cellular immune response after partial hepatectomy / M.E.Horvath, R.Gonzalez-Cabello, A.Blazovics et ' al. // J.Ethnopharmacol. 2001. - V.77, №2-3. - P.227-232.

417. Iazykova M. I., Muronets V. I.Coimmobilization of lactate dehydrogenase and low molecular weight thiols on sepharose // Prikl.Biokhim.Mikrobiol. 2001. - V.37,№2.-P.197-201.376. loannides C. et al. (1983).

418. The effect of ozone exposure on allergen responsiveness in subjects with astma and rhinits / R. Iorres, D. Nowak, H. Maymassen et al. // Amer. J. Resp.Crit. Care med. 1996. - V.l 52. - P. 64 - 66.

419. IPCS CEC (International Programme on Chemical Safety). Environmental Health Criteria 119 Principles and Methods for the Assessment of Nephrotoxicity Associated with Exposure to Chemicals (EUR 13222 EN), WHO, Geneva, 1991.

420. IPCS CEC (International Programme on Chemical Safety). Environmental Health Criteria 155 Biomarkers and Risk Assessment: Concepts and Principles // WHO, Geneva, 1993.

421. Jones O.T. The regulation of superoxide production by the NADPH oxidase ' of neutrophils and other mammalian cells // Bioessays. — 1994. Vol. 16, N12.-P. 919-923.386. Jones S.A. etal. (1995).

422. P.tert-Butyl hydroperoxide-induced injury in isolated rat hepatocytes: a model for studying anti-hepatotoxic crude drugs / M.Joyeux, A.Rolland, J. Fleurentin, F.Mortier //Planta Med.- 1990. V.56. - №2. - P.171-174.388. Juckett M. et al. (1998).

423. Effects of nitric oxide on catalytic iron and heme degradation by heme oxygenase / M. Juckett, ya. Zheng, H. Yuan et al. // J. Biol. Chem. 1998. -Vol. 273, N 36. - P. 23388-23397.

424. Kaczmarek F. Badanie oleju z owocow sitybum marianum (L) Gaerth. // Herba Polorica. 1975. - V. 21. - N 2. - P. 213-215.

425. Kahkonen M.P. et al. (1999).

426. Antioxidant activity of plant extracts containing phenolic compounds / M.P. Kahkonen, A.I. Hopia, H.J. Vuorela et al. // J. Arg. And Food Chem. 1999. - Vol. 47, N 10. - P. 3954-3962.391. KalmarL. etal. (1990)

427. Silibinin (Legalon-70) enhances the motility of human neutrophilsimmobilized by formyl-tripeptide, calcium ionophore, lymphokine and by normal human serum / L.Kalmar, J.Kadar, A.Somogyi et al. // Agents Actions. 1990. - V. 29. - №3-4. - P.239-246.

428. Antihepatotoxic effects of major diterpenoid constituents of Andrographis paniculata / A.Kapil, I.B.Koul, S.K.Banerjee, B.D.Gupta // Biochem.Pharmacol. 1993. - V.46, №1. - P.182-185.

429. Karuzina I.I. et al. (1999).

430. Heme and apoprotein modification of cytochrome P450 2B4 during its oxidative inactivation in monooxygenase / I.I. Karuzina, V.G. Zgoda, G.P. Kuznetsova et al. // Free Radic Biol Med. 1999. - Vol. 26, N 5-6. - P. 620632.

431. Kativar S.K. et al. (1997).

432. Protective effects of silymarin against photocarcinogenesis in a mouse skin model / S.K. Katiyar, N.J. Korman, H. Mukhtar, R. Agarwal // J Natl Cancer Inst. 1997. - Vol. 89, N 8. - P. 556-566.

433. Khajuria A. Lipid peroxidation // Everymans Sci. 1997. - Vol. 32, N 3. - P. 109-113.

434. Khalil A., Jay-Gerin J-P., Fulop T. Age-related increased susceptibility of high-density lipoproteins (HDL) to in vitro oxidation induced by y-radiolisis of water//FEBS Lett.-1998.-Vol. 435, N2-3.-P. 153-158.

435. Kharitonov S. A. Barnes P. J. Exhaled nitric oxide: a marker of airway inflammation ? // Curr. Option. Anaestesiol. 1996. - V. 9. - P. 1368 - 1370.

436. Khayyal M. T. et al. (2001).

437. Antiulcerogenic effect of some gastrointestinally acting plant extracts and their combination / M.T. Khayyal , M.A. el Ghazaly, S.A. Kenawy et al. // Arzneimittelforschung. -2001. - Vol. 51, № 7. - P. 545 - 553.402. KihoYu. etal. (1999).

438. Basic construction of the functional in a protein. III. Information transfer in a closed circuit / Yu. Kito, C. Palmer, H. Mori et al. // Proc. Jap. Acad. B. -1999. Vol. 75, N 5. - P. 156-161.403. Kim S.M. etal. (1998).

439. The effects of oxygen radicals on the activity of nitric oxide synthase and guanylate cyclase / S.M. Kim, J.S. Byun, Y.D. Jung et al. // Exp Mol Med. -1998. Vol. 30, N 4. - P. 221-226.

440. Kimbrough R.D. et al. (1989).

441. Clinical effects of environmental chemicals. A software approach to etiological diagnosis / R.D. Kimbrough, K.R. Mahaffey, P. Grandjean, D.D. Rutstein New York, 1989.- 164 p.

442. Kimbrough R.D. Mechanisms of cell injury: implications for human health. Dahlem workshop report/Ed. B.A. Fowler.-New York, 1987.-P. 291-301.

443. Kiso J., Kato O., Hikimo H. Assay method for antihepatoxic activity using peroxide inbuced cytotoxicity in primary cultured hepatocytes // Planta med.1985.-N7. -P. 50-52.

444. Klegeris A., Korkina L.G., Greenfield S.A. Autoxidation of dopamine: a comparison of luminescent and spectrophotometric detection in basic solutions // Free Radic Biol Med. 1995. - Vol. 18, N 2. - P. 215-222.

445. Klingenberg M. Diphosphopyridine nucleotide (DPN) // Methods of Enxym. Analysis. New York. - 1963. - P. 221-226.

446. Knecht K.J., Feather M.S., Baynes J.W. Detection of 3-deoxyfructose and 3-deoxyglucosone in human urine and plasma: evidence for intermediate stagesof the Maillard reaction in vivo // Arch Biochem Biophys. 1992. - Vol. 294, N l.-P. 130-137.

447. Knight J.A. The biochemistry of aging // Adv Clin Chem. 2000. - Vol. 35. -P. 1-62.

448. Koch H.P., Bachner J., Loffler E. Silymarin: potent inhibitor of cyclic AMP phosphodiesterase // Methods Find Exp. Clin. Pharmacol. 1986. — Vol. 7, №8.-P. 409-413.

449. Koczorek M. Chronic liver diseases. The nihilism has gone // , MMW.Fortschr.Med. -2001. V.143, №51-52. - P. 14.416. Kohno H. et al. (2002).

450. Silymarin, a naturally occurring polyphenolic antioxidant flavonoid, inhibits azoxymethane-induced colon carcinogenesis in male F344 rats / H. Kohno, T. Tanaka, K. Kawabata et al. // Int J Cancer. 2002. - Vol. 10, N 5. - P. 461468.

451. Kolesnick R.N., Kroke M. Regulation of ceramide production and apoptosis // Annu. Rev. Physiol. 1998. - Vol. 60. - P. 643-665.

452. Kolopp M.-N. et al. (1991)

453. Immunotoxicologie et environment / M.-N. Kolopp, M.-C. Bene, C. Meyer-Bisch, G. Faure // Immunol. Med. 1991. -V. 8, N 3. - P. 107 - 118.

454. Kornberg A. Lactic dehydrohenase of muscle // Methods in Enxymology -1955.-V. l.-P. 441-445.

455. Kropacova K., Misurova E., Hakova H. Protective and therapeutic effect of silymarin on the development of latent liver damage // Radia Biol, radioecol. 1998. -N3. —P. 411-415.

456. Lahiri-Chatterjee M. et al. (1999).

457. A flavonoid antioxidant, silymarin, affords exceptionally high protection against tumor promotion in the SENCAR mouse skin tumorigenesis mode / M. Lahiri-Chatterjee, S.K. Katiyar R.P. Mohan, R. Agarwal // Cancer Res. -1999.- Vol. 59, N3.-P. 622-632.

458. Effect of the natural bioflavonoid antioxidant silymarin on superoxide dismutase (SOD) activity and expression in vitro / I. Lang, G.Deak, K. Nekam, G. Muzes, et al. // Biotechnol.Ther.- 1993. V.4, №3 - 4. - P.263-270.

459. Lange Y., Steck T. Four cholesterol-sensing proteins // Curr. Opinion Struct. Biol. 1998. - Vol. 8, N 4. - P. 435-439.

460. Lapis K., Jeney A., Divald A., Vajta G. Experimental studies on the effect of hepatoprotective compounds // Tokai J.Exp.Clin.Med. 1986. - V.l 1 Suppl. -P.135-145.

461. Laurinavicius V. et al. (1999).

462. Oxygen insensitive glucose biosensor based on PQQ-dependent glucose dehydrogenase / V. Laurinavicius, B. Kurtinaitiene, V. Liaksmunas et al. // Anal. Lett. 1999. - Vol. 32, N 2. - P. 299-316.

463. Lecomte J. General pharmacologic properties of silybine and silymarine in the rat//Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 1975. - Vol. 214, № 1. - P. 165 - 176.431. LeightonF. etal. (1999).

464. Age-dependent accumulation of advanced glycosylation end products in human neurons / J.J. Li, M. Surini, S. Catsicas et al. // Neurobiol Aging. -1995. Vol. 16, N 1.-P. 69-76.

465. Liang H., Fesik S.W. Three-dimensional structures of proteins involved in programmed cell death // J. Mol. Biol. 1997. - Vol. 274, N 3. - P. 291-302.434. Lin K-T. etal. (1997).

466. Reactive oxygen species participate in peroxinitrite-induced apoptosis in HL-60 cells / K-T. Lin, J-Y. Xue, F. Sun Frank, Y-K. Wong Patrick// Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1997. -Vol. 230, N 1.-P. 115-119.435. Lloyd A. etal. (1990).

467. A double-blind, placebo-controlled trial of intravenous immunoglobulin therapy in patients with chronic fatigue syndrome / A. Lloyd, I. Hickie, D.' Wakefield et al. // Ann J Med. 1990. - Vol. 89. - P. 561-568.436. LocherR. etal. (1998).

468. Inhibitory action of silibinin on low density lipoprotein oxidation / R.Locher, P.Suter, R.Weyhenmeyer, W.Vetter//Arzneimittelforschung. 1998. - V.48, №3. - P.236-239.

469. Lodovici M. et al. (2000).1.hibition of 1,2-dimethylhydrazine-induced oxidative DNA damage in rat colon mucosa by black tea complex polyphenols / M. Lodovici, C. Casalini, C. De Filippo et al. // Food Chem Toxicol. 2000. -Vol. 38, N 12. - P. 10851088.

470. Lodovici M. et al. (2001).

471. Antioxidant and radical scavenging properties in vitro of polyphenolic extracts from red wine / M. Lodovici, F. Guglielmi, C. Casalini et al. // Eur J Nutr. — 2001. Vol. 40, N2.-P. 74-77.

472. Lodovici M. et al. (2001).

473. Effect of natural phenolic acids on DNA oxidation in vitro / M. Lodovici, F. Guglielmi, M. Meoni et al. // Food Chem Toxicol. 2001. - Vol. 39, N 12. -P. 1205-1210.

474. Loffler E., Koch H. P. Influence of silymarin and some flavonoids on lipid peroxidation in human platelets // Methods Find.Exp.Clin.Pharmacol. — 1983. V.7. - №1. - P.13-18.

475. Loffler E., Koch H.P. Hemmung der lipidperoxidation in Humanthronbozyten durch Silymarin and Verwandte Stoffe // Sci. Pharm. 1983. - № 4. - P.358 -369.

476. Loranger A., Gicquaud C., Tuchweber B. Effect of silybin on phalloidin-actin interactions in vitro // Toxicol.Lett. 1982. - V.l 1, №1. - P.l 11-117.

477. Luper S. A review of plants used in the treatment of liver disease: part two // Altern. Med. Rev. 1999. - Vol. 4, № 3. - P. 88 - 178.

478. Luther M.A., Lee L.C. The role of phosphorylation in the interaction of rabbit muscle phosphofructokinase with F-actin // J Biol. Chem. 1986. — Vol. 261, N4.-P. 1753-1759.

479. Luyckx F., Scheen AJ. Drug clinics. Drug of the month. Legalon (silymarin) // Rev.Med.Liege. 1997. - V.52, №12. - P.792-796.

480. Magliulo E., Scevola D., Carosi G. P. Investigations on the actions of silybin on regenerating rat liver. Effects on Kupffer's cells // Arzneimittelforschung. 1979. - V.29. - №7. - P. 1024-1028.

481. Maneschi M., Tiberio C., Cittadini E. Metabolic impairment of the hepatocyte in pregnancy: prevention and therapy with a membrane-stabilizing drug // Clin.Ter. 1981. - V.97, №6. - P.625-630.450. Manna S.K. et al. (1999).

482. Silymarin suppresses TNF induced activition of NF - koppab, С - jun, N -termal kinase, and apoptosis / S.K. Manna, A. Mukhopadhyay, N.T. Van, B.B. Aggarwa // J. Immunol. - 1999.-Vol. 163, № 12. - P.6800 - 6809.451. Manna S.K. et al. (1999).

483. Silymarin suppresses TNF-induced activation of NF-kappa B, c-Jun N-terminal kinase, and apoptosis / S.K. Manna, A. Mukhopadhyay, N.T. Van, B.B. Aggarwal // J Immunol. 1999. - Vol. 163, N 12. - P. 6800-6809.i

484. Marnett L.J. Oxyradicals and DNA damage // Carcinogenesis. 2000. -Vol. 21,N3.-P. 361-370.

485. Martinez J., Moreno J.J. Effect of resveratrol, a natural polyphenolic compound, on reactive oxygen species and prostaglandin production // Biochem Pharmacol. 2000. - Vol. 59, N 7. - P. 865-870.

486. Mato H., Takizawa Y. Potential health risk via inhalation / ingestion exposcere to polychlorinated dibenzo-p-dioxins and dibenzofurans //Bull. Environ. / Contam. And Toxicol. 1992. - V. 49, N 1. - P. 701-707.

487. Mattammal M.B. et al. (1994).

488. Characterization of peroxidative oxidation products of dopamine by mass spectrometry / M.B. Mattammal, R. Strong, E. White 5th, F.F. Hsu // J Chromatogr В Biomed Appl. 1994. - Vol. 5, N 1. - P. 21-30.456. MaulikN. etal. (1995).

489. Oxidative stress adaptation improves postischemic ventricular recovery / N. Maulik, M. Watanabe, D.T. Engelman et al. // Mol Cell Biochem. 1995. -Vol. 144, N 1. - P. 67-74.

490. McKenzie R. et al. (1998).1.w-dose hydrocotisone for treatment of chronic fatigue syndrome / R.

491. McKenzie, A. O'Fallon, J. Dale et al. // JAMA. 1998. - Vol. 280. - P. 1061i ' '1066.

492. Meerson F.Z. et al. (1982).

493. The role of lipid peroxidation in pathogenesis of ischemic damage and the antioxidant protection of the heart / F.Z. Meerson, V.E. Kagan, Yu.P. Kozlov et al. // Basic Res Cardiol. 1982. - Vol. 77, N 5. - P. 465-485.

494. Mehrotra R., Rawat S., Kulshreshtha D. K. In vitro studies on the effect of certain natural products against hepatitis В virus // Indian J.Med.Res. 1990. - V.92. - P.133-138.4(51. MereishK.A. etal. (1991).

495. Protection against microcystin LPL — induced hepatotoxicity by Silymarin: biochemistry, histopathology, and lethality / K.A. Mereish, D.L. Bunner, D.R.

496. Ragland, D.A. Creasia // Pharm. Res. 1991. - Vol. 8, № 2. - P. 273 - 211.

497. Mezey E. Metabolic effects of alcohol // Fed Proc. 1985. - Vol. 44, N 1, Pt l.-P. 134-138.

498. Miguez M. P. et al. (1994).

499. Hepatoprotective mechanism of silymarin: no evidence for involvement of cytochrome P450 2E1 / M.P.Miguez, I. Anundi, L.A. Sainz-Pardo, K.O.Lindros // Chem.Biol.Interact. 1994. - V.91. - №1. - P.51-63.

500. Milosavljevic Z. Therapy of liver diseases using Silymarin (Legalon) // Ther.Ggw. 1973. - V.l 12. - №6. - P.968.465. Mizutani К et al. (2001).

501. Protective effect of resveratrol on oxidative damage in male and female , stroke-prone spontaneously hypertensive rats /К. Mizutani, K. Ikeda, Y.

502. Kawai, Y. Yamori // Clin Exp Pharmacol Physiol. 2001. - Vol. 28, N 1-2. -P. 55-59.

503. Mizutani K. et al. (2000).

504. Phytoestrogens attenuate oxidative DNA damage in vascular smooth muscle cells from stroke-prone spontaneously hypertensive rats / K. Mizutani, K. Ikeda, T. Nishikata, Y. Yamori // J Hypertens. 2000. - Vol. 18, N 12. - P. 1833-1840.

505. Mourelle M., Franco M.T. Erythrocyte defects precede the onset of CC14-i induced liver cirrhosis. Protection by silymarin // Life Sci. 1991. V.48,11.-P. 1083-1090.

506. Mukhtar H., Agarwal R. Skin cancer chemoprevention // J.Investig.Dermatol.Symp.Proc. 1996. - V.l, №2. - P.209-214.

507. Muller К.- M., Krismann M. Asbestproblematik -Daten und Takten des Pathologen: Vortr. 14. //Atemwegs und Liengenkran Kh. 1994. -V.-20, Nl.-P. 577-585.

508. Muller K.-M., Krismann M. Asbestproblematik -Daten und Takten des

509. Pathologen: Vortr. 14. //Atemwegs und Liengenkran Kh. 1994. -V. 20, Nl.-P. 577-585.

510. Muriel P, Mourelle M. Prevention by silymarin of membrane alterations in acute CC14 liver damage // J Appl Toxicol. 1990. - Vol. 10, N 4. - P. 275279.472. Muriel P. etal. (1992).

511. Silymarin protects against paracetamol-induced lipid peroxidation and liver damage / P Muriel, T Garciapina, V Perez-Alvarez, M Mourelle // Appl Toxicol. 1992. - Vol 12, N 6. - P. 439-442.473. MuzesG. etal (1990)

512. Effect of the bioflavonoid silymarin on the in vitro activity and expression of superoxide dismutase (SOD) enzyme / G.Muzes, G.Deak, I.Lang et al. // Acta Physiol Hung.- 1991. V.78. - №1. - P.3-9.

513. Napolitano A. et al. (1995).

514. Generation of the neurotoxin 6-hydroxydopamine by peroxidase/H202 oxidation of dopamine / A. Napolitano, O. Crescenzi, A. Pezzella, G. Prota// J Med Chem. 1995. - Vol. 17, N 38. - P. 917-922.476. Nassuato G. et al. (1983)

515. Effect of silybin on biliary lipid composition in rats / G.Nassuato, 1 R.M.Jemmoto, F.Lirussi et al. // Pharm. Res. Commun. 1983. - N 4. - P. 337-346.

516. Nassuato G. et al. (1991).

517. Effect of Silibinin on biliary lipid composition. Experimental and clinical study / G. Nassuato, R.M. Iemmolo, M. Strazzabosco et al. // J Hepatol. —1991.-Vol. 12, N3.-P. 290-295.

518. Nasyrov KhM, Chepurina L.S., Kireeva R.M. The hepatoprotective and cholagogic action of glycyrrhizic acid derivatives // Eksp.Klin.Farmakol.-1995. V.58. - №6. - P.60-63.

519. Natelson B.H. et al. (1996).

520. Randomised, double-blind, controlled placebo-phase in trial of low dose -phenelzine in the chronic fatigue syndrome / B.H. Natelson, Cheu J., Pareja J. et al. // Psychopharmacology. 1996. - Vol. 124. - P. 226-230.

521. Nelson D.R. et al. (1996).

522. P450 superfamily: update on new sequences, gene mapping, accession numbers and nomenclature / D.R. Nelson, L. Koymans, T. Kamataki et al. // Pharmacogenetics. 1996.-Vol. 6,N l.-P. 1-42.

523. Nijramp F. P., Folkerts G. Nitric oxide and bronchial hyperresponsiveness // Arch. Int. Pharmacodyn. 1995,-V. 329, N l.-P. 81-96.482. Ofekletal. (1991).

524. Anti-Escherichia coli adhesin activity of cranberry and blueberry juices / I. Ofek, J. Goldhar, D. Zafriri // N Engl J Med. 1991. - Vol. 324, N 22. - P. i 1599.

525. Oliveira C.P.M.S. et al. (1998)

526. Paper D.H. Natural products as angiogenesis inhibitors. // Planta Med. 1998. - Vol. 64, N 8. - P.686-695.

527. Patterson R.A., leake D.S. Human serum, cysteine and histidine inhibit the oxidation of low density lipoprotein less at acidic pH // FEBS Lett. 1998. -Vol.434, N3.-P. 317-321.

528. Pepping J. Milk thistle: Silybum marianum // Am. J. Health. Syst. Pharm. -1999.-Vol. 56, № 12.-P. 1195-1197.

529. Peters K.-P., Hees A. Formaldehyd und formaldehydharze: Ihre Bedeutung bei textilal. Ergien // Alergologie. 1997. - Bd 20, N 5. - S. 239-245.

530. Peterson P.K. et al. (1990).

531. A controlled trial of intravenous immunoglobulin G in chronic fatigue syndrome / P.K. Peterson, J. Shepard, M. Macres et al. // Ann J Med. 1990. -Vol. 89.-P. 554-560.

532. Peterson P.K. et al. (1998).

533. A preliminary placebo controlled crossower triel of fludcortisone for chronic fatigue syndrome / P.K. Peterson, A. Pheley, J. Schroeppel et al. // Arch Intern Med.- 1998.-Vol. 158.-P. 908-914.

534. Pifferi G., Pace R., Conti M. Synthesis and antihepatotoxic activity of silybin 11-O-phosphate // Farmaco. 1994. -V.49.-№1.- P.75-76.

535. Pool-Zobel B.L. et al. (1999).

536. Anthocyanins are potent antioxidants in model systems but do not reduce endogenous oxidative DNA damage in human colon cells / B.L. Pool-Zobel, A. Bub, N Schroder, G. Rechkemmer // Eur J Nutr. 1999. - Vol. 38, N 5. -P. 227-234.

537. Poroikov V.V. et al. (2000).

538. Robustness of biological activity spectrum for a substance / V.V. Poroikov, Filimonov D.A., Borodina Yu.V. et al. // J. Chem. Inf. Comput. Sci. 2000. -Vol. 40, N6.-P. 1349-1355.

539. Poroikov V.V. et al. (2001).

540. Computer-aided prediction of biological activity spectra for sobstance / V.V. ' Poroikov, Filimonov D.A., Borodina Yu.V. et al. // Computational Methods in Toxicology and Pharmacology Integrating Internet Resources, Bordeaux, 2001.-P.2.

541. Ramadan L.A. et al. (2002).

542. Radioprotective effect of silymarin against radiation induced hepatotoxicity / Ramadan L.A., Roushdy H.M., Abu Senna G.M. // Pharmacol Res. 2002. -Vol. 45, N6.-P. 447-454.

543. Ramellini G., Meldolesi J. Stabilization of isolated rat liver plasma membranes by treatment in vitro with silymarin // Arzneimittelforschung. -V.24, №5. P.806-808.499. ReidC. etal. (1999).

544. Prevention by a silymarin/phospholipid compound of ethanol — induced social , learning deficits in rats / C. Reid, J. Edwards, M. Wang et al. // Planta. Med. -1999. Vol. 65, № 5. - P. 421 - 424.'

545. Richter C., Park J.W., Ames B.N. Normal oxidative damage to mitochondrial and nuclear DNA is extensive // Proc Natl Acad Sci USA.- 1988. Vol. 85, N 17.-P. 6465-6467.501. RitthalerU. etal. (1995).

546. Expression of receptors for advanced glycation end products in peripheral occlusive vascular disease / U. Ritthaler, Y. Deng, Y. Zhang et al. // Am J Pathol. 1995. - Vol. 146, N 3. - P. 688-694.

547. Rousell M.R. Slowly reverting enzyme inactivation: a mechanism for generating long-lived damped oscillations // Theor. Biol. 1998. - Vol. 195, N 2. - P. 233-244.

548. Rowe K.S. Double-blind randomised controlled trial to efficacy of intravenous gammaglobulin for the management of chronic fatigue syndrome in adolescents // J Psychiatr Res. 1997. - Vol. 31. - P. 133-147.504. Rowe P.C. etal. (2001).

549. Fludrocortisone acetate to treat neurally mediated hypotension in chronic fatigue syndrome / P.C. Rowe, H. Calkins, K. DeBusk et al. // JAMA. 2001. -Vol. 285.-P. 52-59.

550. Rui Y.C. Advances in pharmacological studies of silymarin // Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 1991. - Vol. 86, № 2. - P. 79 - 85.506. Rui Y.C.etal. (1990)

551. Effects of silybin on production of oxygen free radical, lipoperoxide and leukotrienes in brain following ischemia and reperfusion. / Y.C.Rui, D.Z.Zhang, D.X.Sun, G.Q.Zeng // Zhongguo Yao Li Xue.Bao. 1990.-V.l 1.- №5.- P.418-421.

552. SachinidisA. etal. (1999).

553. Evidence that lipoproteins are carriers of bioactive factors / A. Sachinidis, R. Kettenhofen, S. Seewald et al. // Arteriosclerosis, Thrombosis and Vase. Boil. 1999.-Vol. 19, N 10. — P. 2412-2421.

554. Salazar R., Brandt R., Krantz S. Expression of fructosyllysine receptors on human monocytes and monocyte-like cell lines // Biochim Biophys Acta. -1995. Vol. 266, Nl.-P. 57-63.i

555. Sailer R., Meier R., Brignoli R. The use of silymarin in the treatment of liver diseases //Drags. -2001. Vol. 61, N 14. - P. 2035-2063.

556. Sanhueza J. Changes in the xantine dehydrogenase/ xantine oxidase ratio in the rat kidney subjected to ischemia-reperfusion stress: preventive effect of some flavonoids // Ress. commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 1992. - Nov. 78, №2.-P. 211-218.

557. SchellerF.W. etal. (1991).

558. Second generation biosensors / F.W. Scheller, F. Schubert, B. Neumann et al. // Biosens Bioelectron. -1991ю Vol. 6, N 3. - P. 245-253.

559. Scheller F.W. et al. (2001).

560. Research and development in biosensors / F.W. Scheller, U. Wollenberger, A. Warsinke, F. Lisdat.// Curr Opin Biotechnol. 2001. - Vol. 12, N 1. - P. 3540.513. SchlotteV. etal. (1998).

561. Effect of uric acid and chemical analogues on oxidation of human low density lipoprotein in vitro / V. Schlotte, A. Seranian, P. Hochstein, K. Wiethmann // Free radic. Boil. And Med. 1998. - Vol. 25, N 7. - P. 8390847.

562. Schriewer H., Weinhold F. The influence of silybin from Silybum marianum (L.) Gaerth. on in vitro phosphatidyl choline biosynthesis in rat livers // Arzneimittelforschung. 1979. - Vol. 29. - P. 791 - 792.

563. Schwarts J. Lead? Blood pressure? And cardiovascular disease in men and women // Environ. Health Perspect. 1991. - V.91. - P. 71-75.

564. Sgambato A. et al. (2001).

565. Sharpe M., Archard L.C., Banatvala J.E. A report chronic fatigue syndrome: guidelines for research II. R Soc Med. - 1991. - Vol.84. - P. 118-121.

566. Siegers C.-P., Fruling A., Younes M. Influence of dithiocarb (+) catechhhin and silybine on halotane hepatotoxity in the hipocsic rat model // Acta phfrmakol. et toxicol. - 1983. - Vol. 53. - P. 125-129.522. SierensJ. etal. (2001).

567. Effect of phytoestrogen and antioxidant supplementation on oxidative DNA damage assessed using the comet assay / J. Sietens, J.A. Hartley, M.J. ' Campbell etal.//Mutat Res.-2001.-Vol. 485, N2.-P. 169-176.

568. Sies H. Strategies of antioxidant defense // Eur J Biochem. 1993. - Vol. 215, N2.-P. 213-219.524. Sighn R.P. et al. (2002).

569. Sincholle D. Etual de 1 effekt antiradicalare in vivo durun extract de graines ' de silibium marianum // Plantm med. et phytother. 1988. - 22, N 2. - P. 119123.

570. Singh S., Evans N. W. Nitric oxide, the biological mediator of the decade: fact or fiction? // Eur. Respir. J. 1997. - V. 10. - P.699 - 707.

571. Sirover M.A. New insights into an old problem: the functional diversity ofmammalian glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase // Biochem. Biophys. Acta.- 1999.-Vol. 1432.-P. 159-184.528. SkottovaN. et al. (2001)

572. Pharmacokinetic study of iodine-labeled silibinins in rat / N.Skottova, Z.Svagera, R.Vecera et al. // Pharmacol. Res. 2001. - Vol. 44, N 3. - P. 247-253.529. Smith C.D. etal. (1992).

573. Protein oxidation in aging brain / C.D. Smith, J.M. Carney, T. Tatsumo et al. // Ann N Y Acad Sci. 1992. - Vol. 21, N 663. - P. 110-119. 5l30. Sonnenbichler J. et al. (1999)

574. Stimulatory effects of silibinin and silicristin from the milk thistle Silybum marianum on kidney cells / J.Sonnenbichler, F.Scalera, I. Sonnenbichler, RWeyhenmeyer // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999. - Vol. 290, N 3. - P. 1375-1383. \

575. Sonnenbichler L., Pohl A. Unteruchumgen zur Wirkungmechanismus von Sihibun. // Hope Seylet L. Phyol. Chem. 1980. - 361, N 11. - P. 1757-17б 1.

576. Squadrio G.L., Pryor W.A. Oxidative chemistry of nitric oxide: the roles of superoxide, peroxynitrite, and carbon dioxide // Free radic. Biol. And Med.1 1998. Vol. 25, N 4-5. - P. 392-403.

577. Srere P.A. An exception that proves the rule // Trends biochem. Sci. 1997. -Vol. 22,N l.-P. 11.

578. Stadtman E.R. Oxidation of free amino acids and amino acid residues in proteins by radiolysis and by metal-catalyzed reactions // Annu Rev Biochem. 1993. - Vol. 62. - P. 797-821.

579. Steinberg D. Patogenesis of atherosclerosis: the role of LDL oxidation // Rev. farm. E bioquim. Univ. Sao Paulo. 1998. - Vol. 34, N 1. - P. 4.

580. Susilo R., Rommelspacher H. Formation of 1 -methyl-beta-carbolines in rats1 from their possible carboxylic acid precursor // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 1988. - Vol. 337, N 5. - P. 566-571.

581. Svedsen B.S. et al. (2002).

582. Serious mushroom poisoning by Cortinarius and Amanita virosa / Svendsen B.S., Gjellestad A., Eivindson G. et al. // Tidsskr Nor Laegeforen. 2002. -Vol. 20, N8.-p. 777-780.

583. Szentmihaly K. et al. (1998).

584. Determination of 23 elements in Lady's thystle (Silybum marianum L. Gaerth) / K. Szentmihaly, A. Kery, B. Lakatos et al. // Acta. Pharm. Hung. 1998. -Vol. 68, №3.-P. 157-162.539. TagerM. etal. (2001)

585. Restoration of the cellular thiol status of peritoneal macrophades from CAPD patients by the flavonoids silibinin and silymarin / M.Tager, J.Dietzmann, U.Thiel et al. // Free Radic Res. 2001. - Vol. 34, N 2. - P. 137-151.540. TagerM. etal. (2001).

586. Restoration of the cellular thiol status of peritoneal macrophages from CAPD patients by the flavonoids silibinin and silymarin / M. Tager, J. Dietzmann, U. Thiel etal.//Free Radic Res.-2001.- Vol. 34, N2.-P. 137-151.

587. Tam N.F.Y., Wong Y.S. Spatial and temporal variantions of heavy metal contamination in sediments of mangrove swamp in Hong Kong //Mar. pollut. Bull. — 1995. — V. 31, N 4. -P.254 — 261.542. Tapiero H. et al. (2002).

588. Effects of SOD, catalase, and a novel antiarrhythmic drug, EGB 761, onreperfusion-induced arrhythmias in isolated rat hearts / A. Tosaki, M.T. Droy-Lefaix, T. Pali, D.K. Das // Free Radic Biol Med. 1993. - Vol. 14, N 4. - P. 361-370.

589. Tuffery P., Durand M., Darlu P. How possible is the detection of correlated mutations // theor. Chei. Accounts. 1999. - Vol. 101, N 1-3. - P. 9-15.

590. Turner A.P. Tech.Sight. Biochemistry. Biosensors—sense and sensitivity // Science.-2000.-Vol. 17, N5495.-P. 1315-1317.547. Tyagi A. etal. (2002).

591. Antiproliferative and apoptotic effects of silibinin in rat prostate cancer cells / A. Tyagi, N. Bhatia, M.S. Condon et al. // Prostate. 2002. - Vol. 53, 3. -P. 211-217.548. Uchidak. etal. (1998).

592. Valenzuela A. et al. (1989).

593. Selectivity of silymarin on the increase of the glutathione content in different tissues of the rat / A. Valenzuela, M. Aspillagai, S. Vial, R. Guerra // Planta Med. 1989. - Vol. 55, № 5. - P. 420 - 422.

594. Valenzuela A. etal. (1989).

595. Selectivity of silymarin on the increase of the glutathione content in different tissues of the rat / A. Valenzuela, M. Aspillaga, S. Vial, R. Guerra // Planta Med. 1989. - Vol. 55, N 5. - P. 420-422.

596. Valenzuela A., Guerra R., Videla L.A. Antioxidant properties of theflavonoids silybin and (+)-cyanidanol-3: comparison with butylated hydroxyanisole and butylated hydroxytoluene // Planta Med. 1986. - №6. -P.43 8-440.

597. Valenzuella F. et al (1987)

598. Silybin dihemicuccinate protest rat erythrocytes against phenylhydrazine induced lipid peroxydacijn and hemoolyses / F.Valenzuella, R.Guerra, A. Garrudo // Planta med. 1987. - N 5. - P. 402-405.

599. Vercoulen J., Swanink C., Zitman F. Randomised, double-blind, placebo -controlled study of fluoxetine in chronic fatigue syndrome // Lancet. 1996.-Vol. 347.-P. 858-861.

600. Vollmer-Conna U. et al. (1997).1.travenous immunoglobulin is infffective in the treatment of patients with chronic fatigue syndrome / U. Vollmer-Conna, I. Hickie, D. Hadzi-Pavlovic et al. // Am J Med. 1997. - Vol. 103. - P. 38-43.

601. Wang Q.L., Lin M., Liu G.T. Antioxidative activity of natural isorhapontigenin // Jpn J Pharmacol. 2001. - Vol. 87, N 1. - P.61 -66.

602. Warren G., McKendrick M., Peet M. The role of essential fatty acids in chronic fatigue syndrome // Acta Neurol Scand. 1999. - Vol. 99. - P. 112116.

603. Wautier J.L. et al. (1996).

604. Wearden A.J. et al. (1998).

605. DNA structural integrity and base composition affect ultraviolet light-induced oxidative DNA damage / H. Wei, Q. Ca, R. Rahn et al. // Biochemistry. -- 1998.-vol. 37, N 18.-P. 6485-6490.

606. Weisburger J.H., Chung F.L. Mechanisms of chronic disease causation by nutritional factors and tobacco products and their prevention by tea polyphenols // Food Chem Toxicol. 2002. - Vol. 40, N 8. - P. 1145-1154.

607. Wellington K, Jarvis B. Silymarin: a review of its clinical properties in the management of hepatic disorders / BioDrugs. 2001. - Vol. 15, N 7. - P. 465-489.

608. Whitfield J.B. Acute reaction to alcohol // Addict. Biol. 1997. - Vol. 2, N 4. -P. 377-386.

609. Wilasrumee C. et al. (2002).1.munostimulatory effect of Silybum Marianum (milk thistle) extract / G. Wilasrusmee, S. Kittur, G. Shah et al. // Med Sci Monit. 2002. - Vol. 8, N 11.-P. 439-443.

610. Willett W.C. Diet, nutrition, and avoidable cancer // Environ Health Perspect. . 1995. - Vol. 103, N 8. - P. 165-170.566. Win W. et al. (2002).

611. Different effects of genistein and resveratrol on oxidative DNA damage in vitro / W. Win, Z. Cao, X. Peng et al. // Mutat Res. 2002. - Vol. 513, N 1 -2. i -P. 113-120.

612. Wu V.Y., Cohen M.P. Evidence for a ligand receptor system mediating the biologic effects of glycated albumin in glomerular mesangial cells // Biochem Biophys Res Commun. 1995. - Vol. 15,N2.-P. 521-528.

613. Zhu W., Zhang J.S., Young C.Y. Silymarin inhibits function of the androgen receptor by reducing nuclear localization of the receptor in the human prostate cancer cell line LNCaP // Carcinogenesis. 2001. - V.22. - №9. - P. 13991403.

614. Zhu W., Zhang J.S., Young C.Y. Silymarin inhibits of the androgen receptor by reducing nuclear localization of the receptor in the human prostate cancer cell line LNCaP // Carcinogenesis. 2001. - Vol. 22, N 9. - P. 1399-1403.573. ZiX. etal. (1998)

615. Silibinin p-reg lates ins lin-like growth factor-binding protein 3 expression and inhibits proliferation of androgen-independent prostate cancer cells /

616. X.Zi, J.Zhang, R.Agarwal, M.Pollak // Cancer Res. 2000. - Vol. 60, N 20. -P. 5617-5620.576. Zi X. et al. (2000).

617. Silibinin up-regulates insulin-like growth factor-binding protein 3 expression and inhibits proliferation of androgen-independent prostate cancer cells / X. Zi, J.Zhang, R. Agarwal, M. Pollak // Cancer Res. 2000. - Vol. 60, N 20. -P. 5617-5620.

618. The effect of silibinin on experimental cyclosporine nerphotoxicity / T.Zima, L.Kamelnikova, M.Janebova et al. // Renal Failure. 1998. - N 3. - P. 471479.581. ZimaT. etal. (1998).

619. The effect of silibinin on experimental cyclosporine nephrotoxicity / T. Zima, L. Kamenikova, M. Janebova et al. // Ren Fail. 1998. - Vol. 20, N 3. -P.471-479.

620. Zimmerman C.M., Kariapper M.S.T., Mathews L.S. Smad proteins physicallyinteract with calmodulin // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273, N 2. - P. 677680.

621. Zirm K. L. Treatment of subacute and chronic forms of hepatitis as well as of chronic degenerative liver diseases using Silymarin //

622. Wien.Med.Wochenschr. 1973. - V.123. - №19 - P.302-305.

623. Zulueta J.J. et al. (1995).

624. Release of hydrogen peroxide in response to hypoxia-reoxygenation: role of an NAD(P)H oxidase-like enzyme in endothelial cell plasma membrane / J.J. Zulueta, F.S. Yu, I.A. Hertig et al. //Am J Respir Cell Mol Biol. 1995. -Vol. 12, N l.-P. 41-49.

625. Zvenigorodskaia L. A., Speranskaia I. E. Hepatoprotective preparations in the treatment of circulatory failure // Sov.Med. 1988. - №3. - P.67-71.586. ChaiearK. etal. (1999)

626. Fatal mushroom poisoning caused by Amanita virosa in Thailand / K.Chaiear, R.Limpaiboon, C.Meechai, Y.Poovorawan // Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health. 1999. - Vol. 30, N 1. - P. 157-160.

627. Chiara L., Hannun Y.A. Sphigolopid metabolism in the regulation of bioactive molecules // Lipids. 1999. - Suppl. 34. - P. 5-11.