Молекулярные механизмы обеспечения метаболической толерантности в условиях действия веществ растительного и животного происхождения

Мякишева, Юлия Валерьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярные механизмы обеспечения метаболической толерантности в условиях действия веществ растительного и животного происхождения
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Молекулярные механизмы обеспечения метаболической толерантности в условиях действия веществ растительного и животного происхождения"

На правах рукописи

МЯКИШЕВА ЮЛИЯ ВАЛЕРЬЕВНА

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ОБЕСПЕЧЕНИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ В УСЛОВИЯХ ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВ РАСТИТЕЛЬНОГО И ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

03.00.04-Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

1 4 \Ш\

Уфа 2009

003469657

Научный консультант:

Официальные оппоненты:

заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Гильмиярова Фрида Насыровна

член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Терентьев Александр Александрович

доктор медицинских наук, профессор Шараев Петр Низамиевич

доктор медицинских наук, профессор Бородулин Владимир Борисович

Ведущая организация - Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов»

Защита состоится « ^ » ' 2009 г. в

часов на заседании

диссертационного совета Д 208.006.03 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.

Автореферат разослан «

2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Мирсаева Г.Х.

В настоящее время большой интерес представляют минорные компонен ты, природные соединения растений, обладающие высокой биологической ак тивностью (Акашкина Л.В., Российская Г.И., Лякина М.Н., 1998; Никитина В.С с соавт., 2000; Павлюченко И.И. с соавт., 2003; Кси Л.П. с соавт., 2003; Petry J. Hadley S.K., 2001). К ним, в частности, относится немногочисленная нов группа природных соединений - силибин, силикристин, силидианин, дегидро силибин. Они синтезируются и накапливаются в плодах расторопши пятнистой Достаточно хорошо изучена их структура (Rodak J., Grygiewski R.J., Pol J. 1996). Это - флаволигнаны, флавоноиды, содержащие в своем составе фенил пропаноидный фрагмент кониферилового спирта. Аргументирован их гепато протекторный эффект. Выявлено антиоксидантное, иммуномодулирующее, ре паративное действие расторопши пятнистой (Гильмиярова Ф.Н. с соавт., 2001 Flora К. et al., 1999; Gupta О. et al., 2000; Middlerton E., Kandaswami C. Theoharides T.C., 2000; Rice-Evans C. et ah, 2000; Kang S.N. et al., 2001). Наличи целого ряда клинических эффектов препаратов, получаемых из расторопши служит основанием для предположения о множественном влиянии флаволиг нанов на процессы жизнеобеспечения, и это заслуживает самостоятельног изучения. Молекулярные механизмы, лежащие в основе терапевтических эф фектов не выяснены и нуждаются в достаточном экспериментальным обосно вании. Будучи экзогенными по отношению к организму человека, флаволигна ны являются ограничено чужеродными, так как по пищевым цепям поступают организм человека. В связи с этим актуальным является изучение молекулярных механизмов различных спектров действия, изучение терапевтических эф фектов, тех превращений, которые обуславливают мобилизацию эндогенных ресурсов за счет оптимизации функциональной активности ключевых метаболических превращений, не десинхронизируя последовательность количественных фермент-субстратных взаимоотношений.

Наличие неполярных фрагментов в структуре флаволигнанов определяет растворимость и экстрагируемость этанолом, дифильная молекула которого

еализует высокую химическую и биологическую активность, поступая в орга-изм извне и синтезируясь в нем (Харченко Н.К., 2000; Пауков B.C. с соавт., 001; Головко А.И. с соавт., 2002; Прокопьева В.Д., 2003; Гевондян К.А. с сот., 2004; Avdulov N. et al., 2000; Li Т., 2000; Horvath M.E., 2001; Ahmad A et

2002). Влияние на межмолекулярные процессы, выяснение органной специ-ики метаболических и параметаболических процессов под влиянием флаво-игнанов и малых молекул, установление клеточных механизмов нейротропно-

действия расширит представления об участии биологически активных со-динений растительного и животного происхождения в регуляции обмена, подержании метаболического баланса и раскроет новые возможности для мягкой оррекции метаболизма, повышения жизнеспособности, оздоровления.

Настоящее исследование выполнено в рамках Федеральных программ:

• «Изучение взаимодействия биогенных веществ растительного и животного происхождения с системами жизнеобеспечения организма с учетом ферментативных и параметаболических процессов» (№ гос. регистрации 1.20.03 08339).

• «Изучение свойств, состава, биологических эффектов, регуляторного потенциала экопротекторов нового поколения и разработка мер защиты здоровья населения и профилактики заболеваний» (№ гос. регистрации 1.20.03 08339).

Цель настоящего исследования заключается в выяснении механизма взаи-одействия минорных компонентов биологических объектов с системами труктурно-функционального обеспечения жизнедеятельности организма, ус-ановлении естественных границ метаболических колебаний и поиске веществ, осстанавлившощих физиологический уровень обмена.

Задачи:

. На различных уровнях структурной организации (клеточном, субклеточном и олекулярном) с помощью метаболического зондирования экзогенными фер-ентами и интермедиантами изучить возможные диапазоны колебаний ключе-

вых метаболических параметров, охарактеризовав потенциальную устойчивость к экстремальным воздействиям.

2. Охарактеризовать спектр биологической активности малых, молекул - этанола, оксалоацетата, пирувата, а-кетоглутарата и флаволигнанов используя про: грамму «Prediction of Activity Spectra for substances: Complex & Training» и

«Pharma Expert».

3. Визуализировать межмолекулярные взаимодействия биогенных соединений растительного и животного происхождения по физическим и морфологическим признакам, по результатам экспериментов in vivo, ex vivo, in vitro, используя методы компьютерного моделирования и математического анализа.

4. На молекулярных объектах регуляторных олигомерных ферментах - глице-ральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа и а-глицерофосфатдегидрогеназа оценить влияние силистронга и этанола на их структурно-функциональные свойства.

5. Изучить характер влияния силистронга, этанола на пейсмекерную активность дыхательного центра, процессы апоптоза клеток головного мозга экспериментальных животных, оценив нейротропное действие изучаемых биологических веществ. -

6. Исследовать возможность участия малых молекул и силистронга в процессах межбелковых взаимоотношений, определив способность воздействия их на антиген-антительное взаимодействие в модельных системах с антителами к тканевой трансглутаминазе, вирусу гепатита С в сыворотке крови и ротовой жидкости пациентов; оценив влияние на показатели клеточного состава крови лиц с различной групповой принадлежностью в системе ABO.

их включения во внеклеточные, внутриклеточные, виутримитохондриалыдае обменные процессы. Инсталлированные ферменты мргут являться молекулярным инструментом адресной коррекции нарушенного метаболизма, синдром-ной терапии при различных нозологических формах.

Впервые раскрыта роль малых молекул (этанола, оксалоацетата, пирува-та, а-кетоглугарата) в качестве посредников, регулирующих функцию макромолекул, реализующихся различными физиологическими эффектами.

Установлено, что введение экзогенных лактатдегидрогеназы и малатде-гидрогецазы, а также избытка естественного метаболита - пирувата - индуцирует изменения в фонде субстратов углеводно-липидного обмена, в катализе ферментов, функционально сопряженных с малат- и лактатдегидрогеназой.

Получены новые сведения, раскрывающие широкий спектр биологической активности флаволигнанов расгоропши. Использование программы «Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training» позволило установить зависимость между особенностями структуры силибина, силидиани-на, силикристина и характером ожидаемого действия. Так, силибин, изосили-бин, изосшщкристин в большей степени являются антиоксидантами, дегидро-силибин, сйликристин и дегидросиликристин обладают антитоксическим действием, регулируют проницаемость мембран, силидианин оказывает иммуно-супрессорный, антинеонластический и цитостатический эффект.

Результаты исследования раскрывают механизм межмолекулярного взаимодействия этого класса биологически активных веществ растительного происхождения с системами жизнеобеспечения организма. На молекулярном, клеточном и организменном уровне показана протекторная роль биофлавоноидов Silibum marianum, обеспечивающая физиологическую преемственность катабо-лических и анаболических превращений углеводного обмена. Установлено, что флаволигнаны силистронга обладают способностью влиять на активность ключевых ферментов глнколитИческого распада углеводов. Показана более значительная эффективность многокомпонентной системы силистронга по сравне-

нию с изолированными флаволигнанами, что свидетельствует о потенцирующем взаимодействии компонентов природной композиции, а также раскрывает роль сшшстронга как регулятора энергетической обеспеченности в клетке.

Выявлена способность силистронга влиять на процесс апоптоза в клетках головного мозга. Установлено, что препарат обеспечивает поддержание данного процесса на физиологическом уровне даже в условиях острой ишемии. На понтобульбоспинальных и бульбоспинальных препаратах ствола мозга впервые установлено значимое изменение ритмической активности дыхательного центра, повышение спонтанного генераторного процесса в дыхательной нейронной сети и в сети нейронов моста, контролирующих деятельность дыхательного центра, что очевидно обусловлено повышением функциональной активности нейронов мозга за счет мембранотропного и метаболического механизмов. Результаты данных исследований раскрывают возможные механизмы нейротроп-ного действия силистронга.

Впервые в экспериментах in vitro выявлена способность малых молекул и силистронга влиять на процессы антиген-антительного взаимодействия. Показано, что изучаемые соединения изменяют детекцию антител к тканевой транс-глутаминазе и вирусу гепатита С в сыворотке крови и ротовой жидкости. Установлен разнонаправленный характер изменений под действием кетокислот, этанола и силистронга показателей клеточного состава крови у лиц различной с групповой принадлежностью в системе ABO, что создает дополнительные предпосылки к оценке лабораторных данных пациента, учитывая при этом индивидуальные реакции организма на введение различных лекарственных средств, характер питания.

турно-функциопальной организации: олигомерных цитоплазматических и ми-тохондриальных ферментах, однородных клеточных популяциях, субклеточных органеллах, а также органном уровне in vivo, ex vivo, расширяют наши представления об оптимизации метаболических процессов, многообразии регуля-торных процессов, формирующихся в отногенезе. Получены новые данные, раскрывающие значимость макро- и микронутриентов, трансформирующихся по пищевым цепям. Это фундаментальный аспект решаемой проблемы.

В прикладном отношении результаты исследований могут служить алгоритмом для выяснения характера и механизмов повреждающего действия ксенобиотиков на системы жизнеообеспечения организма. Это ключ к выбору значимых, информативных объектов для тестирования широкого спектра соединений, обладающих биологической и фармакологической активностью. Результаты исследований обеспечивают объективные критерии выбора средств патогенетической коррекции нарушенного метаболизма с учетом индивидуального метаболического статуса.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Биологически активные вещества растительного и животного происхождения взаимодействуют с системами структурно-функционального жизнеобеспечения организма, вызывая изменения ключевых параметров обмена, характеризующие метаболический ответ на введение соединений эндогенной и экзогенной природы. При воздействии экзогенными дегидрогеназами, естественными интермедиатами, растительными биорегуляторами происходит интенсификация метаболизма, обусловленная суммацией эффектов эндогенного и экзогенного ферментов, повышением активности структурно и функционально сопряженных с ними других ферментных систем, обеспечивая фронтальный характер изменений.

мембранотропное, что обуславливает антигипоксическую, антитоксическую, гемопротекторную, антиканцерогенную, гепатопротекторную, антиоксидант-ную, антитоксическую активность.

3. Способность малых молекул и силистронга участвовать в процессах межбелковых взаимоотношений, в частности, воздействовать на антиген-антительное взаимодействие, что проявляется разнонаправленными изменениями показателей содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови и ротовой жидкости.

4. Группоспецифичиые особенности реакции клеток крови на действие химически и физически активных соединений являются основой индивидуального ответа. Естественные интермедиа™ - пируват, оксалоацетат, этанол, и растительные биологически активные соединения силистронга оказывают неферментативное параметаболическое воздействие на популяции клеток крови, результатом чего является изменение количественных показателей при детекции.

5. Нейропротектоная активность силистронга, реализующаяся в способности регулировать процесс апоптоза в условиях острой ишемии, поддерживая его на физиологическом уровне, стимулировать дыхательный ритмогенез.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья «Биохимия: от исследования молекулярных механизмов - до внедрения в клиническую практику и производство» (Оренбург, 2003), Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 20-летию ИПО СамГМУ «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения» (Самара, 2003), V Международном семинаре по вопросам пожилых «Самарские лекции» (Самара, 2004), V Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2004), IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век» (Далянь, 2005), на съезде Научного общества специалистов клинической лабораторной диагностики (Москва, 2005), Межрегиональной научно-практической конференции «Новая идеология

в единстве фундаментальной и клинической медицины» (Самара, 2005), VI Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2005), X Международной научной конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Бангкок-Патгайя, 2006), VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2006), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии, посвященной 20-летию Кировской государственной медицинской академии (Киров, 2007), XI Международной научной конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Амстердам-Стратсбург, 2007), IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008), журналах «Биомедицинская химия» (2006), «Клиническая лабораторная диагностика» (2007, 2008), «Новости клинической цитологии России» (2007), «Вестник РУДН» (2007, 2008), совместном заседании Самарского отделения Всероссийского биохимического общества, кафедр общей, бионеорганической и биоорганической химии и фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (Самара, 2009).

Внедрение результатов в практику. Результаты исследований используются в работе клинико-диагностической лаборатории Клиник Самарского государственного медицинского университета, в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства но здравоохранению и социальному развитию», на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Публикации. Всего опубликовано 24 работы, в том числе 1 монография, 3 патента, 7 работ — в ведущих рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной описанию материала и методов исследования, четырех глав собственных данных, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы.

Диссертация изложена на 216 страницах, иллюстрирована 29 рисунками, содержит 16 таблиц. В работе использовано 430 источников, из них 224 отечественных и 206 зарубежных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведение работы включало несколько этапов:

I. Оценка влияния экзогенных дегидрогеназ и естественных ин-термедиатов на показатели углеводно-липидного обмена в крови экспериментальных животных

II. Исследование действия силистронга и его компонентов - этанола и силимарина на активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, глицерофосфат-дегидрогеназы in vitro в тканях экспериментальных животных

III. Изучение влияния силистронга на процесс апоптоза и пейсме-керную активность нейронов головного мозга экспериментальных животных

IV. Оценка влияния малых молекул и силистронга на процессы антиген-антительного взаимодействия: определение содержания антител к тканевой трансглутаминазе и вирусу гепатита С, выявление особенностей клеточного состава в зависимости от групповой принадлежности крови по системе ABO.

V. Определение вероятности наличия и вероятности отсутствия

биологических эффектов пирувата, оксалоацетата, альфа-кетоглутарата, этанола и изомеров силибина с использованием компьютерной программы PASS С&Т, PASS 2006.

Эксперименты проведены на 84 кроликах и 129 беспородных крысах. Объектом наших исследований были: венозная кровь кроликов, гемолизат эритроцитов и гомогенат мышечной ткани крыс, тканевые препараты коры головного мозга крыс, понтобульбоспинальные и бульбоспинальные препараты новорожденных крыс, венозная кровь и ротовая жидкость клинически здоровых лиц и пациентов с хроническим гепатитом С.

В экспериментальных исследованиях были использованы: препараты лак-татдегидрогеназы и малатдегидрогеназы, полученные из скелетных мышц норки; силистронг (ФСП 42-0211-0703-01, зарегистрирован Министерством здравоохранения Российской Федерации Р № 000605/01 от 23.08.2001); силимарин (фирмы ICN, Silymarin, чда); спирт этиловый (фирмы Sigma, Ethyl alcohol (Absolute)); пируват и оксалоацетат (фирмы Sigma).

Изучение активности ферментов и содержания метаболитов в крови и тканях экспериментальных животных поводилось на спектрофотометре Lambda 20 (Perkin Elmer, Швейцария). Препараты лактатдегидрогеназы и. малатдегидрогеназы вводили в краевую вену уха кроликов в количестве 5000 Е/кг. Активность ферментов и содержание метаболитов в крови определяли через 5 и 20 минут с момента начала эксперимента. Пируват вводили внутривенно в концентрации, в 10 раз превышающей нормальное его содержание в крови. Показатели углеводно-липидного обмена исследовали до и через 60 минут после введения метаболита. Содержание лактата, пирувата, малата, оксалоацетата, а-глицерофосфата, диоксиацетонфосфата оценивалось спектрофотометрически специфическим ферментативным методом (Bergmeyer H.U. et al., 1986). Содер-

жание глюкозы исследовали глюкозооксидазным методом (Карпищенко А.И. с соавт., 1999).

Исследование активности глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, лак-татдегидрогсназы, глицерофосфатдегидрогеназы гомолизата и гомогената мышечной ткани крыс проведено с использованием спектрофотометра Lambda 20 (Perkin Elmer, Швейцария) до и после 30-минутной инкубации при температуре 25 °С с силистронгом в конечной концентрации 0,3 мМ по силимарину, с сили-марином и этанолом в конечной концентрации 0,3 мМ.

Изотопно меченые ферменты получали - лактатдегидрогеназу и малатде-гидрогеназу получали методом высокотемпературного твердофазного каталитического обмена с газообразным тритием (Zolotarev Yu.A. et al., 1991). Метод основан на изотопном обмене между газообразным тритием и твердофазной смесью, состоящей из каталитического металла платиновой группы, неорганического носителя и твердофазного органического компонента, в качестве которого были использованы лактатдегидрогеназа из мышц свиньи и малатдегидро-геназа из мышц кролика (Reanal). Характер распределения меченых тритием лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы в тканях, оценивали через 1, 24 и 48 часов после введения их в хвостовую вену крыс в дозе 7,5 Ci на кг массы животного.

Исследование влияния силистронга на процесс апоптоза проведены совместной с сотрудниками кафедры биохимии и медицинской химии Красноярской государственной медицинской академии (заведующая кафедрой доктор медицинских наук, профессор А.Б. Салмина). Крысам перитонеально вводили силистронг из расчета 100 мкл/кг массы, моделируя в последствии острую ишемию головного мозга путем окклюзии сонной артерии. Через 24, 48 часов и 7 суток с момента индукции ишемии осуществлялось взятие образцов ткани головного мозга лобной и затылочной области толщиной 3-5 мкм с последующим приготовлением тонких замороженных срезов. Для регистрации апоптоза ней-

ронов головного мозга использовался метод TUNEL (Apoptag Direct Detection kit, Immunotech, France) согласно протоколу производителя. Количество апоп-тотических клеток выражалось на 100 клеток в образце при анализе не менее 10 полей зрения (Fox G.B. at al., 1998; Dirnagl U., Iadecola C., Moskowitz M.A., 1999).

Изучение влияния силистронга и этанола на процессы дыхательного ритмогенеза проводилось на изолированных понтобульбоспинальных и буль-боспинальных препаратах мозга новорожденных крыс 0-3 суток по методике T.Suzue (1984) в модификации В.Ф. Пятина. Проведены три серии экспериментов: регистрация фоновой пейсмекерной дыхательной активности в условиях перфузии препарата искусственной цереброспинальной жидкостью, перфузии препарата раствором, содержащим 0,07 мМ этанола, перфузии препарата искусственной цереброспинальной жидкостью, содержащим силистронг в конечной концентрации 0,ЗмМ.

Изучение характера влияния малых молекул и силистронга на процессы антиген-антитслышго взаимодействия проводили в сыворотке крови и ротовой жидкости 46 клинически здоровых лиц в возрасте 19-32 лет, а также 12 пациентов с хроническим гепатитом С в стадии обострения. Определение содержания антител к тканевой трансглутаминазё, вирусу гепатита С, а также изучение показателей общего анализа крови у пациентов с различной группой крови проводилось до и после добавления в исследуемые образцы пирувата, оксапоацетата, этанола и силистронга в конечной концентрации 0,006 г/мл.

Определение содержания антител к тканевой трансглутаминазё и к вирусу гепатита С в сыворотке крови и ротовой жидкости проводили методом им-муноферментного анализа и использованием ИФА-комплекса, включающего инкубатор-шейкер ELMI Sky Line (Эстония), промыватель «Проплан» («Picón», Россия), спектрофотометр Tecan («Sunrise», Австрия). Исследование концен-

трации иммуноглобулинов осуществляли с помощью наборов реагентов для количественного определения аутоантител класса А и класса G к тканевой трансглутаминазе (ЗАО «Вектор-Бест», Россия), а также с помощью тест-системы «Рекомби-Бест-Анти ВГС» (ЗАО «Вектор-Бест», Россия).

Определение группы крови по системе ABO у обследуемых проводилось перекрестным способом и с помощью цоликлонов. В результате выявлено: 29,0% пациентов имеют 0(1), 37,7%- А(П), 22,9% - В(Ш), 10,4% - AB(IV) группу крови, что соответствует данным литературы о распределении групп крови в популяции (Гильмиярова Ф.Н. с соавт., 2007). Показатели общего анализа крови (18 параметров) определяли с помощью автоматического гематологического анализатора «Sysmex КХ - 21» (Япония) с помощью коммерческого набора реактивов фирмы «Roch-Diagnostics» (Япония).

Изучение спектров биологической активности силибина, изосилибина, 2,3-дегидросилибина, силикристина, изосиликристина, 2,3- дегидросиликри-стина, силидианина, а также этанола, пирувата, оксалоацетата, альфа-кетоглутарата в зависимости от их химической структуры проводилось с использованием компьютерной системы Prediction of Activity Spectra for Substances (PASS C&T, PASS 2006). Интерпретация полученных результатов осуществлялась с помощью программы «Pharma Expert». Данные компьютерные программы разработанной сотрудниками Лаборатории структурно-функционального конструирования лекарств НИИ Биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН профессором В.В. Поройковым, к. ф.-м. и. Д.А. Филимоновым.

Статистическая обработка результатов исследований проводились с использованием персонального компьютера с применением программ MS Office 2003, MS Excel 2000, S-Plus 2000, Statistica 7.0. Определялись следующие статистические характеристики: средняя арифметическая (М), стандартная

ошибка от средней арифметической (т), медиана (Ме). В зависимости от формы распределения совокупностей применялось два вида статистических критериев: параметрические (1 - критерий Стьюдента) и непараметрические (и — критерий Уилкоксона) (Платонов А.Е., 2000; Боровиков В., 2001; Реброва, 2002; Мидлтон М.Р., 2005).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенные эксперименты с оценкой на различных уровнях структурной организации выявили особенности взаимодействия биологически активных веществ растительного и животного происхождения с системами жизнеобеспечения организма. .

Одной из первых задач исследования было выяснение способности экзогенных ферментов включаться во внеклеточные, внутриклеточные, внутрими-тохондриальные обменные процессы. Оценить возможность проникновения введенных извне энзимов в ткани экспериментальных животных позволила визуализация конкретного фермента в организме с использованием радиоактивной метки. Выявлено, что введенные изотопно меченые лактатдегидрогеназа и малатдегидрогеназа циркулируют в крови, проникают и накапливаются в тканях в режиме, специфичном для каждого фермента. Так, тетрамерная молекула лактатдегидрогеназы в значительной степени концентрируется в крови, превышая содержание в ней малатдегидрогеназы в 6,5 раз через 1 час после введения. Подобная тенденция сохраняется в течение всего срока эксперимента. Малатдегидрогеназа достаточно быстро покидает кровяное русло и проникает в ткани. Уже через 1 час с момента начала исследования максимальный уровень радиоактивности - 67,1% - обнаруживается в скелетных мышцах (рис. 1).

через 48 часов

через 24 часа через 1 час

0% 20% 40% 60% 80% 100%

через 48 часов через 24 часа через 1 час

0% 20% 40% 60% 80% 100%

■ Кровь В Скелетные мышцы □ Печень

Рис. I. Распределение э экзогенной лактатдегидрогеназы (А) и экзогенной ма-латдегидрогеназы (Б), меченых тритием в органах и тканях крыс после внутривенного введения в динамике

1 .

г *» ' • ЧД}

Лактагдегидрогеназа также попадает в скелетные мышцы, но в меньшем количестве - 31,2% введенного фермента через 1 час после начала эксперимента оказывается в них.-В печень проникают оба экзогенных фермента, достигая наибольшего уровня к 48 часам с начала исследования. Содержание меченой тритием малатдегидрогеназы при этом превышает радиоактивность данной ткани после введения лактатдегидрогеназы в 1,8 раза. Распределение изучаемых дегидрогеназ в селезенке и почках носит разнонаправленный характер. Содержание лактатдегидрогеназы резко увеличивается к 48 часам, напротив, малатдегидрогеназа концентрируется первоначально в этих органах, а по истечению двух суток уровень ее стремительно снижается. При анализе характера, распределения меченых тритием ферментов отмечается относительно низкое содержание дегидрогеназ в. головном мозге. Однако к концу эксперимента содержание экзогенных лактатдегидрогеназь! и малатдегидрогеназы в данной ткани резко увеличивается, что говорит об их способности проникать через ге-матоэнцефалический барьер.

Выявленные различия в характере распределения экзогенных дегидрогеназ в крови и тканях экспериментальных животных обусловлены, очевидно, различными структурно-функциональными и физико-химическими свойствами лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы, определяющими способность избирательно захватываться, взаимодействуя с рецепторами клеток и преодолевая ; мембранный барьер.

Следующим этапом нащего исследования стало выяснение роли экзогенных дегидрогеназ в регуляции внутриклеточного метаболизма, изучение влияния их на активность собственных ферментов организма. Мы изучили содержание основных показателей углеводного обмена и.метаболитов в крови кроликов после внутривенного введения им лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы. В результате проведенных экспериментов выявлено, что экзогенные ферменты не только проникают в ткани, но и вызывают определенные сдвиги в метаболических процессах организма, визуализирующиеся в показателях в перифериче-

ской крови (рис. 2). В целом, введенные извне лактатдегидрогеназа и малатде-гидрогеназа способствуют интенсификации обмена.

лактатдегидрогеназа малатдогидрогеназа

500

пактатдегадрогвназа малатдегиирогвназа

0 контроль ш пируват и пактат

в лактатдегидрогеназа П малат □ оксалоацетот а малатдегидрогеназа_

Рис. 2. Изменение активности ферментов и содержания метаболитов (%) в крови кроликов через 5 минут (А) и через 20 минут (В) после введения им экзогенных лактат- и малатдегидрогеназы (за 100% приняты значения до введения)

Интересным является способность изученных экзогенных дегидрогеназ увеличивать не только скорость реакций, катализируемых ими, что в наших экспериментах нашло отражение в увеличении активности изучаемых эндогенных ферментов. Изменения также происходят и со стороны интегральных метаболитов углеводного обмена. Так, при введении лактатдегидрогеназы в периферической крови снижается содержание лактата и пирувата на 14,2 и 20,4% соответственно (р<0,01), что вероятно, объясняется суммацией эффектов собственного и экзогенного ферментов. Концентрация малата уменьшается, оксало-ацетата - достоверно снижается к 20 минуте эксперимента. Данные сдвиги наблюдаются на фоне увеличения активности эндогенной малатдегидрогеназы.

Введение лактатдегидрогеназы вызывает также уменьшение содержания диоксиацетонфосфата, а-глицерофосфата, повышение концентрации глюкозы на 56,1% (р<0,01). Под действием экзогенной малатдегидрогеназы содержание малата снижается на 44,0%; уровень оксало ацетата сразу после введения фермента повышается на 69,7% (р<0,001), однако к концу эксперимента становится равным значению в контроле. Происходит увеличение активности эндогенной малатдегидрогеназы в 2,3 раза, лактатдегидрогеназы - в 2 раза, концентрация глюкозы возрастает в 1,5 раза.

На наш взгляд, данные изменения, вероятно, обусловлены взаимодействиями макромолекул внутри клетки, которые влекут за собой образование временных надмолекулярных комплексов, обеспечивающих более совершенные механизмы регуляции различных биохимических процессов. В целом, взаимовлияние ферментов, вероятно, обусловлено их физическими свойствами, позволяющими биомолекулам реагировать на действие различных факторов изменением структуры. Важная роль, вероятно, принадлежит также микроокружению молекулы - метаболитам, биополимерам различной степени гидрофобности и гидрофильности, малым молекулам, влияющим на пространственную конфор-мацию и каталитическую активность фермента.

Как известно, метаболиты, образующиеся в организме в результате различных биохимических процессов, являются высокоактивными соединениями. Возможно ли воздействие на метаболизм введением избытка веществ, образующихся в физиологических условиях? Изучению влияния естественных ин-термедиатов на ход одного из ключевых метаболических путей организма -гликолиза - был посвящен следующий этап нашей работы. Данная серия экспериментов проведена на кроликах, которым в ушную вену вводили пируват в концентрации в крови в 10 раз превышающую нормальное его содержание. Выявлено, что введение экзогенного пирувата вызывает многообразные изменения уровня основных метаболитов в периферической крови экспериментальных животных.

Таблица 1- Содержание различных метаболитов (мкмоль/мл) в периферической крови кроликов до и после введения пирувата

Показатели До введения ' После введения

Лактат Изменение, % 3,92±0,141 6,72910,342** +71,6

Пируват Изменение, % 0,137+0,0016 0,91210,043** +565,7

Малат Изменение, %. 1,43±0,031 1,6610,047* +16,1

Оксалоацетат Изменение, % 0,09±0,003 0,06310,009* -30,0

Диоксиацетонфосфат Изменение, % 0,14±0,014 0,33710,017** +140,7

Альфа-глицерофосфат Изменение, % 0,39±0,011 0,60610,034** +55,4

Глюкоза, ммоль/л Изменение, % 4,72±0,144 2,762Ю,094** -41,5

Глицерин Изменение, % 0,45710,023 0,61610,032* +34,8

Свободные жирные кислоты Изменение, % 0,4410,021 0,82610,052** +87,7

* р<(),01; ** р<0,001

Отмечается увеличение содержания лактата на 71,6%, малата - на 16,0%, альфа-глицерофосфата - на 55,4%, диоксиацетофосфата - в 2,4 раза (табл. 1). Кроме того, наблюдаются выраженные сдвиги со стороны показателей угле-водно-липидного обмена: концентрация глюкозы снижается практически в 2 раза, при этом резко возрастает уровень глицерина и свободных жирных кислот. С одной стороны это говорит о повышенной утилизации глюкозы тканями организма, возможно, более интенсивно по аэробному пути. С другой - введение экзогенного пирувата, вероятно, вызывает такую перестройку метаболизма, что основным источником энергии является глюкоза, а не более энергоемкие высшие жирные кислоты и глицерин.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о значительных метаболических сдвигах даже при введении одного естественного метаболита. Избыток высоко реакционноспособного пирувата вызывает изменение осмотической концентрации, проницаемости, влияет на трансмембранный перенос, что отражается на межмолекулярных взаимодействиях, каталитических и других жизненноважных процессах.

Изучив характер воздействия на обменные процессы введением веществ, образующихся в организме в физиологических условиях, извне мы попытались оценить результат влияния на ферменты суммы флаволигнанов, входящих в состав препарата силистронг. Они являются экзогенными, однако ограничено чужеродными по отношению к организму человека, так как естественно поступают по пищевым цепям. Выявлено, что в результате действия биологически активных веществ растительного происхождения, входящих в состав силис-тронга, а также его компонента этанола происходит изменение активности изучаемых ферментов. Выявлено, что под действием силистронга происходит увеличение активности всех ферментов (рис. 3). Активность лактатдегидрогнеазы повысилась с 0,32110,006 до 0,623±0,007 Е/мг (+94,1%, р<0,001), глицерофос-фагдегидрогеназы - на 86,5% (р<0,001). Наиболее выраженные изменения наблюдаются у глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы. Скорость реакции, ката-

лизируемой данным ферментом увеличивается в 2 раза (+110%, р<0,001). В результате введения в лизат эритроцитов раствора силимарина наблюдаются не столь значительные сдвиги. Так, активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы увеличилась лишь на 8,9% (р>0,05), лактатдегидрогеназы - практически не изменилась.

□ Контроль И Силистронг Ш Силимарин □ Этанол

Рис. 3. Активность глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, глицерофосфатде-гидрогеназы и лактатдегидрогеназы (Е/мг) гемолизата крыс при инкубации с силистронгом и его компонентами

Инкубация с этанолом вызвала повышение активности глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы с 0,251+0,003 до 0,44010,002 Е/мг (+75,3%, р<0,001), глицерофосфатдегидрогеназы - на 27,1% (р<0,05). Скорость заключительного этапа гликолиза увеличилась в 1,6 раза (+63,1%, р<0,01).

Аналогичные тенденции выявлены нами и в гомогенате мышечной ткани (табл. 2). Наибольшим изменениям подверглась глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа. Активность данного фермента возрастает после инкуба-

ции с силистроногм, силимарином и этанолом на 487,4, 190,4 и 346,2% соответственно (р<0,001).

Таблица 2 - Влияние флаволигнанов и этанола на активность дегидрогеназ (Е/мг) скелетных мышц экспериментальных животных

Контроль Силистронг Силимарин Этанол

глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа

Исходные значения 0,50610,049 0,49210,061 0,50910,038 0,51110,023

Инкубация с препаратами 2,89+0,24*** 1,4810,27*** 2,2810,31***

Изменение, % +487,4 +190,8 +346,2

глицерофосфатдегидрогеназа

Исходные значения 0,305+0,026 0,31110,034 0,29610,026 0,29810,022

Инкубация с препаратами 0,52110,056 0,41110,033** 0,27810,022*

Изменение, % | +67,5 +38,8 -6,7 :

лактатдсгидрогеназа

Исходные значения 2,4410,26 2,32+0,21 2,4610,28 2,3910,23

Инкубация с препаратами 3,28+0,31*** 3,0710,22** 2,69+0,29* ;

Изменение, % +41,4 +24,8 +12,6

* р>0,5; ** р<0,01; *** р<0,001

Примечательным является отсутствие влияния этанола на активность лактатдегидрогеназы и глицерофосфатдегидрогеназы мышечной ткани. Силис-тронг оказывает более выраженное действие, чем силимарин, что отражается в увеличении скорости реакций, катализируемых данными ферментами. Так, активность глицерофосфатдегидрогеназы при инкубации с силистронгом повышается в 1,7 раза (+67,5%, р<0,001), лактатдегидрогеназы - на 41,4% (р<0,001). В целом, ферменты гомогената мышечной ткани менее интенсивно реагируют

на введение еилиетронга и его компонентов. Исключение составляет глице-ральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, активность которой при инкубации с каждым исследуемым компонентом увеличивается в несколько раз (табл. 2).

Следовательно, силистронг, а также его компоненты - силимарин и этанол способны выступать регуляторами активности ферментов. Возможно, это связано со способностью флаволигнанов взаимодействовать с функциональными группами энзимов, которое может привести к конформационной перестройке биомолекулы, что неизбежно приведет к изменению электронно-конформационных отношений, определяющих каталитическую способность фермента. Интересным является тот факт, что ферменты больше всего подвержены влиянию еилиетронга, в то время как его отдельные составляющие — силимарин и этанол изменяют их активность менее значительно.

Полученные нами в ходе проведения серии экспериментов результаты свидетельствуют о возможности влияния на обменные процессы различными факторами эндогенной и экзогенной природы, раскрывают возможные молекулярные механизмы метаболического ответа организма на подобные воздействия. Особенности химического строения ферментов определяют их полифункциональность, способность реагировать на различного рода влияния, исходя из сложившейся в данный момент ситуации. Анализируя полученные данные можно отметить, что наряду со статическими факторами реакционноспособно-сти, включающими в себя распределение электронной плотности в молекуле и пространственную конфигурацию, большая роль принадлежит интермедиатам, вступающим, возможно, в параметаболические взаимодействия, создавая тем самым определенное микроокружение крупных молекул-регуляторов. В этом плане представляет интерес изучение полного спектра биологической активности малых молекул, принимающих участие в регуляции метаболизма в физиологических условиях, а также флаволигнанов, очевидно, способных оказывать влияние на процессы внутри- и межклеточного взаимодействия. Оценить возможность параметаболических взаимодействий соединения, реализующихся

различными физиологическими эффектами, можно проанализировав его структуру. Решить поставленную задачу позволила нам компьютерная система Prediction of Activity Spectra for Substances (PASS C&T) и программа интерпретации результатов «Pharma Expert», с помощью которой возможно прогнозирование биологической активности вещества в зависимости от его химического строения. Интересным для нас явилось изучение биологической активности каждого из изомеров силибина, которое, позволило выявить зависимость установленных эффектов от специфики структуры.

При анализе полученных результатов установлено, что флаволигнаны расторопши пятнистой обладают широким спектром биологических эффектов (рис. 4). Характерно преобладание различных видов активности у разных изо-форм силибина, Что вероятно, связано с особенностями структуры данных соединений. Так, силибин и изосилибин, являясь одинаковыми по химической строению, незначительно отличаясь лишь по пространственной конфигурации остатка кониферилового спирта, обладают абсолютно идентичными эффектами и числовые значения вероятностей наличия их совпадают. У этих соединений выражена антиоксидантная (Ра 0,688), фибринолитаческая (Ра 0,666), противо-герпетическая (Ра 0,655) активность, а также способность ингибировать пере-кисное окисление липидов (Ра 0,586). Дегидросилибин участвует в укреплении сосудистой стенки (Ра 0,629), является агонистом апоптоза (Ра 0,792), регулятором метаболизма нуклеотидов (Ра 0,535).

Силикристин, являясь высоко реакционноспособным соединением, проявляет высочайшую способность стабилизировать клеточные мембраны (Ра 0,952), оказывает антитоксическое и гепатопротекторное действие (Ра 0,904 и 0,816). Его изомер изосиликристин в большей степени действует как «ловушка свободных радикалов» (Ра 0,762). Силидианин обладает самым выраженным противоопухолевым эффектом (Ра 0,782). Необходимо отметить также, что ни один из изомеров силибина не обладает мутагенностью, тератогенностью, кан-церогенностью, кардиотоксичностыо.

Агонист апоптоза

Эффект укрепления сосудистой стенки

Агонист целостности клеточных мембран

Противовирусный Противоопухолевый Фибринолитический Гепаторотекторный Антигепатотоксический

Антитоксический

"Ловушка свободных радикалов"

Антиоксида нтный

I 1

Т1

0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1

I Вероятность наличия

О Вероятность отсутствия

Рис. 4. Спектр биологических эффектов силибина и его изомеров Рассмотрев зависимость биологической активности от особенностей химического строения флаволигнанов, соединений с достаточно сложной в хими-

ческом отношении структурой, мы попытались раскрыть возможные механизмы метаболических и параметаболических эффектов малых молекул. Последние, создавая определенное микроокружение, могут влиять на свойства и активность крупных молекул-регуляторов. Кроме того, интересными представляются данные о полном спектре биологической активности этанола, который является компонентом силистронга.

При анализе результатов, полученных с помощью компьютерной программы PASS 2006, у этанола высока вероятность наличия 36 биологических эффектов и 479 механизмов их реализации. Он обладает достаточно высокой способностью регулировать проницаемость клеточных мембран, выступать ци-топротектором, оказывать антитоксическое, антигипоксическое действие. Этанол способен влиять на процессы созревания клеток крови в различных ростках костного мозга, являясь стимулятором лейко- и эритропоэза, ингибировать синтез .миелобластов, реализуя в целом г-емопротекторньш эффект. Достаточно высока вероятность его действия как антагониста фибриногеновых рецепторов, что обуславливает фибринолитический эффект и кардиопротекторную активность (рис. 5).

цитопротвкторный

Рис. 5. Спектр биологической активности этанола

Этанол может выступать антагонистом медиаторов, оказывать психостимулирующий эффект. Важными являются данные о способности этанола оказывать антиканцерогенное и антимутагенное действие, возможным механизмом реализации которого служит агонизм апоптоза. Кроме того, выявлена способность этилового спирта выступать раздражителем слизистой оболочки глаз, кожного покрова, антисептиком, антидотом, известные и используемые в медицинской практике.

На наш взгляд, многообразие эффектов этанола, который, как мы видим, вопреки уже имеющимся данным, обладает рядом положительных свойств, можно связать именно с особенностями его химического строения. Как известно, этанол представляет собой относительно индифферентное в химическом плане соединение, имеющее небольшие размеры и молекулярную массу, обладающее амфифильностью, способное конкурировать с другими схожими по структуре молекулами. Очевидно, реализация параметаболических эффектов его осуществляется благодаря наличию ОН-группы. Избыток этанола, создающийся в результате экзогенного поступления при злоупотреблении алкоголем, ведет к избыточному образованию более реакционноспособного и токсичного ацетальдегида, реализующего свое негативное влияние на организм по метаболическим и параметаболическим путям. Интересным фактом является наличие у этанола по данным компьютерной программы PASS 2006 лишь одного вида токсичности (гепатотоксичность). Учитывая эндогенное образование этанола, наличие в организме систем, регулирующих его физиологическую концентрацию, можно предположить, что его положительные свойства нивелируются при поступлении большого количества экзогенного алкоголя.

Как известно, промежуточными продуктами обмена являются карбоно-вые кислоты и производные, образующиеся при катаболизме углеводов, липи-дов и аминокислот. Изучение возможных эффектов, которые они оказывают на биомолекулы, структуры и процессы организма за счет особенностей химического строения стало следующим этапом нашей работы.

Таблица 3- Механизмы действия и возможные эффекты малых молекул

по данным компьютерной программы PASS 2006

——Вещество Механизм, эффект ~~— Пируват Оксалоацетат Альфа-кетоглутарат

Ра Ра Ра

1. Механизмы действия:

регулятор метаболизма липи-дов 0,812 0,585 0,627

ингибитор нерекисного окисления липидов 0,725 0,713 0,749

антагонист медиаторов 0,699 0,696 0,626

окислитель 0,602 0,609 0,678

агонист нейротрофического фактора 0,670 0,626 0,589

антагонист апоптоза 0,655 0,649 0,631

ингибитор калекреина почек 0,532 0,531 0,513

иммуномодулятор 0,554 - 0,502

ингибитор фактора транскрипции 0,672 0,633

антагонист простагландинов Е1 и Н2 - - 0,535

вазоделятатор - - 0,523

ингибитор ХШа фактора свертывания крови - - 0,557

активация аденилатциклазы - 0,554

II. Эффекты:

цитопротектор 0,721 0,684 0,740

стимулятор лейкопоэза 0,724 0,716 0,702

стимулятор эритропоэза 0,695 0,701 0,696

противовирусный - 0,681 0,669

антигипоксический 0,650 0,644 0,659

антитоксический 0,742 0,575 0,588

гемопротекторный 0,524 0,524 0,551

психостимулирующий - - - 0,520

антимутагенный - - 0,517

Использование компьютерной программы PASS 2006 позволило выявить многообразие биологических эффектов и механизмов их реализации пирувата, оксалоацетата, альфа-кетоглутарата (табл. 3).

Приведенные данные свидетельствуют о том, что изученным производным карбоновых кислот присущи различные механизмы влияния на активность факторов, регулирующих внутри- и межклеточные взаимодействия.

Таким образом, полученные результаты раскрывают возможности влияния пирувата, оксалоацетата, альфа-кетоглутарата, этанола и силистронга на межмолекулярные процессы, участия их в регуляции обмена и поддержании метаболического баланса. Очевидно, малые молекулы и флаволигнаны способны выступать в качестве посредников, регулирующих функции макромолекул, реализующихся различными биологическими эффектами.

Уникальные свойства флаволигнанов расторопши пятнистой, а также ре-гуляторная способность естественных интермедиатов — этанола, пирувата, оксалоацетата, участие данных соединений в различных процессах, направленных на поддержание физиологического уровня обмена, позволили нам предположить возможность их влияния на один из ключевых механизмов ответной реакции организма - антиген-антительное взаимодействие.

При анализе полученных результатов выявлено, что иммуноглобулины класса G к тканевой трансглутаминазе определяются в сыворотке крови всех обследуемых. Среднее значение этого показателя составило 3,0±0,005 ЕД/мл. Данная концентрация соответствует отрицательному результату, что исключает возможность участия в исследовании лиц, страдающих целиакией. Нами выявлено, что при инкубации сыворотки крови с пируватом и оксалоацетатом отмечается снижение при детекции показателя Ig G к тканевой трансглутаминазе на 20,8% и 68,6% соответственно (р<0,01) (рис. 6).

л с

Ш контроль ■ пируват (3 оксалоацетат □ эта иол И силистронг

Рис. 6. Содержание иммуноглобулинов класса в к тканевой трансглутаминазе в сыворотке крови (ЕД/мл) при инкубации с силистронгом и малыми молекулами

При добавлении в сыворотку крови этанола и силистронга наблюдаются противоположные изменения (рис. 6). Так, этанол увеличивает показатель определяемых антител на 12,5%. Количество % О к тканевой трансглутаминазе под действием силистронга увеличивается до 4,19±0,008 ЕД/мл, достоверно превышая значения в контроле на 39,6% (р<0,01).

Исследование концентрации иммуноглобулинов класса А к тканевой трансглутаминазе также выявило наличие их в сыворотке крови у всех обследуемых лиц. Значения в контроле были выше минимального порога определения и составили в среднем 3,63±0,007 ЕД/мл. Наиболее выраженные изменения наблюдались при инкубации сыворотки крови с оксалоацетатом (рис. 7). Значение показателя 1» Л к тканевой трансглутаминазе под действием данной кето-кислоты достоверно снизилось на 91,4% (р<0,001). Отмечается тенденция к уменьшению показателя определяемых антител под действием пирувата и этанола (-12,1% и -6,7% соответственно; р<0,05). Добавление же силистронга не вызывает каких-либо сдвигов со стороны показателя иммуноглобулинов класса А в сыворотке крови обследуемых (рис. 7).

Ш контроль ■ пируаат ЕЭ оксалоацетат □ этанол Исилистронг

Рис. 7. Показатели иммуноглобулинов класса А к тканевой трансглутаминазе в сыворотке крови (ЕД/мл) при инкубации с силистронгом и малыми молекулами

Полученные результаты свидетельствуют о возможности участия силис-тронга и малых молекул в процессах антиген-антителыюго взаимодействия. Интересным фа£стом является разнонанравленносгь изменений иод действием данных веществ. Производные карбоновых кислот — пируват и оксалоацетат -вызывают снижение показателя антител к тканевой трансглутаминазе классов А и О. Силистронг и его компонент этанол увеличивают значение показателя определяемых антител класса О и не влияют на детекцию иммуноглобулинов А, Очевидно, данная особенность обусловлена различной авидностью иммуноглобулинов и влиянием силистронга и малых молекул на скорость и прочность связывания антител с молекулами антигенов. Кроме того, высоко реак-ционноспособные молекулы пирувата, оксалоацетата, этанола и силистронга, вероятно, взаимодействуют с детерминантными группами трансглутаминазы, изменяя специфичность фермента-антигена, что, несомненно, отражается на процессах взаимодействия его с антителами.

Интересным для нас явилось изучение влияния силистронга и малых молекул на процессы антиген-антительного взаимодействия в условиях биологи-

ческой среды организма, отличающейся по своим физико-химическим свойствам от сыворотки крови. В этом плане ротовая жидкость представляет собой высокоинформативный объект исследования. Являясь структурированной системой, содержащей в своем составе мицеллы, включающие минерализующие компоненты - ионы кальция и фосфора, она существенно отличается и по биохимическому составу (Леонтьев В.К., Галиулина М.В., 1991; Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М., 1997). Прежде всего, это касается содержания общего белка: в ротовой жидкости оно достаточно низкое и составляет 0,5-4,0 г/л (Елизарова В.М., Петрович Ю.А., 1997; 2002; ГильМиярова Ф.Н. с соавт., 2006; Rantonen P.J., Meurman J.H., 2000). В сыворотке крови, напротив, уровень белков в сотни раз больше и достигает, как известно, 65-85 г/л. Однако даже при такой относительно невысокой концентрации белки ротовой жидкости выполняют значительную роль в поддержании ее мицеллярной структуры. Связываясь с коллоидными частицами, они образуют адсорбционно-сольватные слои значительной протяженности и плотности, стабилизируя частицы мицелл, препятствуя их выпадению в осадок, а также удерживают воду внутри молекулярного матрик-са, что обуславливает значительную вязкость муцина (Уайт A.C. с соавт., 1981; Фролов Ю.Г., 1989). Все это обеспечивает функционирование ротовой жидкости как структурированной системы. В ходе проведенного исследования мы не выявили наличие антител к тканевой трансглутаминазе в ротовой жидкости. Очевидно, это обусловлено достаточно низким содержанием их в сыворотке крови и невозможностью проникновения иммуноглобулинов через гематосали-варный барьер. С другой стороны изученные малые молекулы и силистронг, взаимодействуя с образующимися иммуноглобулинами, способны связываться с муцином, что затрудняет детекцию антител в ротовой жидкости.

С целью оценки влияния изучаемых соединений на процессы антиген-антительных взаимоотношений мы использовали также другую модель - взаимодействие вируса гепатита С и антител, вырабатываемых к нему. Были исследованы показатели суммарных иммуноглобулинов классов М и G в сыворотке

крови и ротовой жидкости больных данной патологией в стадии обострения. Высокий уровень виремии у пациентов обеспечил значительное количество антител к вирусу гепатита С в сыворотке крови, а также прохождение их через гематосаливарный барьер и возможность определения в ротовой жидкости.

Выявлено, что в сыворотке крови под действием изучаемых нами малых молекул и силистронга значения показателей антител имеют незначительную тенденцию к повышению (рис. 8). В ротовой жидкости, напротив, оксалоацетат и пируват вызывают достаточно выраженное снижение показателя исследуемых антител на 89,4 и 71,3% соответственно (р<0,001). Силистронг уменьшает его значение на 18,9%, этанол - на 12,9% (р<0,01).

120%!

сыворотка ротовая крови жидкость

Рис. 8. Изменение показателей антител к вирусу гепатита С (%) в сыворотке крови и ротовой жидкости под действием малых молекул и силистронга (за 100% приняты значения в контроле)

Итак, мы изучили влияние малых молекул и силистронга в модельной системе изолированный антиген - специфическое антитело. Сохранят ли изучаемые нами соединения способность влиять на белок-белковые взаимоотношения, в частности, антиген-антительные взаимодействия, в условиях существо-

вания множества антигенов, расположенных на поверхности отдельных видов клеток. В этом плане эритроцит в его естественном окружении (цельная кровь), с большим количеством встроенных в его мембрану антигенов представляет собой прекрасную модель для исследования. На поверхности этой уникальной по свойствам и функциям клетки находится около 300 различных антигенов, объединенных на сегодняшний день в 25 систем (Земсков A.M., Полякова С.Д., 1996; Песков С.А., 2000). Наиболее изученной в настоящее время является система группы крови ABO. Как известно, она представлена групповыми агглюти-ногенами - А и В и двумя соответствующими агглютининами - анти А (альфа) и анти В (бета). Различные сочетания этих антигенов и антител образуют четыре группы крови: 0(1), A(II), B(III), AB(IV). Групповую антигенную специфичность определяют терминальные сахара, располагающиеся на концах углеводородных цепей. Учитывая выявленную возможность участия силистронга, этанола и кетокислот в процессах антиген-антительного взаимодействия, мы исследовали влияние данных соединений на показатели клеточного состава крови клинически здоровых лиц с различной групповой принадлежностью в системе ABO.

При анализе полученных результатов выявлена тенденция снижения показателя количества эритроцитов в результате действия пирувата и оксалоацетата, наиболее выраженная у обследованных с АВ (IV) группой крови. Показатели пациентов, имеющие 0(1) и А(П) группу крови оказались менее подвержены действию кетокислот, у лиц с третьей группой значение регистрируемого показателя эритроцитов в ходе эксперимента не менялось. Причем оксалоацетат оказывает влияние на величину данного показателя в большей степени, чем пи-руват (-15,1% и -10,7% соответственно; р<0,05). Интересным является отсутствие изменений в показателях эритроцитов под действием силистронга и этанола у всех обследуемых. Аналогичные данные выявлены при анализе показателя содержания гемоглобина. Значение его практически не меняется под влиянием силистронга и этанола, имея склонность к уменьшению при добавлении окса-

лоацетата, наиболее выраженную у лиц с AB(IV) группой крови (-12,3%; р<0,05).

В результате исследования получены данные об изменении со стороны показателя количества лейкоцитов. Величина его снижается максимально у лиц с первой группой крови под действием пирувата на 22,5%, в наименьшей степени - при введении этанола (-18,1%; р<0,01). У обследованных с первой группой крови происходят значительные однонаправленные изменения показателей лейкоцитарной формулы: значение показателей числа лимфоцитов, средних клеток и нейтрофилов достоверно снижается под действием всех изученных соединений. Напротив, у лиц с третьей группой данные показатели повышаются. Что касается количества тромбоцитов, то в результате действия кетокислот, этанола и силистронга наблюдаются разнонаправленные изменения. В наибольшей степени величина этих показателей уменьшается у лиц с третьей группой крови (-26,3%i; р<0,01). У пациентов с четвертой группой крови данные показатели под влиянием пирувата, оксалоацетата, этанола и силистронга резко увеличиваются (+36,7%, +30,4%, +42,6%, +42,2% соответственно; р<0,01). Необходимо отметить, что при анализе действия изучаемых соединений в общей популяции обследуемых выявлены лишь тенденции изменений клеточного состава крови. Оценивая данные сдвиги с учетом групповой принадлежности крови по системе ABO, отмечаются достоверные отклонения от показателей в контроле, специфичные для пациентов с определенной группой крови на фоне отсутствия подобных у остальных обследованных. В целом, у лиц со второй группой крови под Действием малых молекул и силистронга происходят незначительные изменения показателей клеточного состава, в то время как наиболее подвержены влиянию пациенты с первой и четвертой группой крови. Изменение показателей клеточных элементов крови под действием производных карбоновых кислот, силистронга и этанола, вероятно, обусловлено, воздействием данных соединений на электрофизиологические характеристики клеток. Не исключено, что молекулы пирувата и оксалоацетата, имеющие за-

ряд, несущие сильные кислотные свойства, изменяют электростатические взаимодействия в исследуемой биологической системе, что сказывается im величине импульса, определяющей детекцию клеток крови методом кондукто-метрии. Интересным является то, что наиболее выраженные сдвиги наблюдаются под влиянием оксалоацетата — производного дикарбоновой кислоты, содержащей в своем составе две карбоксильных и карбонильную группы, более активного в плане электро-химических воздействий, чем пируват.

Выявленные нами различия в изменении показателей клеточного состава крови у лиц с различной групповой принадлежностью в системе ABO, вероятно, объясняются индивидуальной реакцией организма в ответ на действие производных карбоновых кислот, этанола и силистронга, обусловленной генетически детерминированными факторами. Полученные результаты создают дополнительные предпосылки к индивидуализации подхода при анализе лабораторных данных пациента с учетом специфического ответа организма на введение различных лекарственных средств, характера питания.

Проведенные нами исследования выявили достаточно широкий спектр биологической активности силистронга. Интересным явилось также исследование влияния препарата на тканевом и органоспецифичном уровне. С этой целью мы изучили характер его воздействия на процессы апоптоза в клетках головного мозга и пейсмекерную активность нейронов экспериментальных животных. В результате выявлены возможные механизмы нейротропного действия силистронга, позволяющие расширить спектр его применения в качестве нейропротекторного средства.

Так, при изучении уровня апоптоза нейронов в контрольной группе экспериментальных животных, выявлено, что уровень TUNEL-позитивных клеток не превышает 2%. У животных, подвергшихся острой ишемии, отмечается увеличение данного показателя в 4 раза. Процент апоптотических клеток от общего числа нарастает с 3,410,46% через 24 часа с момента начала эксперимента до 8,110,73% - к 7-м суткам после операции (табл. 4).

Таблица 4- Процент Т1ЖЕЬ-нозитивных клеток в ткани головного мозга крыс в условиях острой ишемии при введении силистроига (за 100% принято общее количество клеток в тканевом образце)

Через 24 часа Через 48 часов Через 168 часов ;

Контрольная группа 2,0+0,087 1,9±0,056 2,0±0,088

Опытная группа (без силистроига) 3,4±0,46* 6,5±0,51* 8,1±0,73*

Опытная группа (с силистронгом) 2,010,053 1,0±0,034 | 2,6+0,081

* Р<0,01

В экспериментальных группах, находящихся в условиях ишемии, но получавших силистронг, отмечается достоверно меньший уровень апоптоза. Количество Т1ЖЕЬ-позитивных клеток остается стабильным, не превышающим норму, в течение всего эксперимента.

На наш взгляд, флаволигнаны в данном случае могут служить источником протонов водорода, необходимых для нормального функционирования дыхательной цепи митохондрий и процессов энергообразования, что позволяет поддерживать апоптоз, являющийся энергозависимым процессом, на физиологическом уровне. Этанол, в свою очередь, может посредством участия в каскадных реакциях вызывать активацию каспазы-3, которая является узловым звеном механизма апоптоза (11а]Цора1 У. е!: а1.,2003; МизЮпеп Н. 1., 2008). Кроме того, компоненты силистроига способны оказывать мощное антиоксидантное, анти-гипоксическое и цитопротекторное действие, что в условиях ишемии стабилизирует ситуацию, создает благоприятный фон для протекания физиологических процессов. Подобные свойства препарата' позволяют расширить спектр его применения для предотвращения возникновения или коррекции имеющейся патологии.

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о возможности влияния силистронга на различные биохимические и физиологические процессы, в частности, в нервной клетке. Мы попытались изучить механизмы действия силистронга на активность группы нейронов, выяснить роль компонентов препарата в процессах электрофизиологического взаимодействия. Поставленная задача решена в условиях моделирования деятельности нейрональных центров in vitro. Исследована спонтанная электрическая активность с понтобуль-боспинальных и бульбоспинальных препаратов новорожденных крыс, перфу-зируемых искусственной цереброспинальной жидкостью с добавлением силистронга. и этанола. Установлено, что при введении силистронга в бульбоспи-налыюм препарате пейсмекерная активность дыхательного центра увеличивается (рис. 9). Это сопровождается одновременным уменьшением вариабельности генерации спонтанных разрядов на 35,6% (р<0,01). В отличие от бульбос-пинального препарата, перфузия понтобульбоспинапьного препарата раствором искусственной цереброспинальной жидкости, содержащим силистронг, вызывает уменьшение частоты генерации пейсмекерной дыхательной активности на 13,6%, но в то же время увеличивает амплитуду разряда и продолжительность дыхательного цикла (на 16,4% и 17,8% соответственно; р<0,01), что, вероятно, связано с активацией популяции норадренэргических нейронов моста, которые оказывают тормозное действие на дыхательный центр. Следовательно, в отношении пейсмекерной активности нейронов моста и бульбарного дыхательного центра силистронг оказывает активирующее действие с одновременным эффектом стабилизации за счет снижения коэффициента вариабельности. Возможно, в данном случае препарат выступает в качестве нейромодулятора. Силистронг, очевидно, влияет на изменения потенциала действия мембраны рецепторов, активирующих дыхательные пейсмекеры благодаря наличию мембранотропных свойств, способности регулировать проницаемость клеточных мембран.

Начало перфузии

Рис. 9. Влияние силистронга на бульварный дыхательный пейсмекер

А - стимуляция дыхательного ритмогенеза в бульбоспинальом препарате (активность С3-С4).

Б - торможение дыхательного ритмогенеза в понтобульбоспинальном препарате в результате активации нейронных структур зоны А5, локализованных в кау-дальной вентролатеральной области моста

Таким образом, изучение характера взаимоотношений веществ растительного и животного происхождения с эндогенно протекающими метаболическим процессами на различных уровнях структурной организации позволило выявить многообразие биологических эффектов изученных соединений. Полученные результаты раскрывают молекулярные механизмы регуляции обмена биологически активными веществами эндогенной и экзогенной природы, расширяют возможности применения их с целью мягкой коррекции метаболизма, повышения жизнеспособности, оздоровления.

ВЫВОДЫ

1. Выявлено, что при воздействии экзогенных дегидрогеназ происходит интенсификация метаболизма, обусловленная суммацией эффектов эндогенного и экзогенного ферментов, повышение активности структурно и функционально сопряженных с ними ферментных систем, обеспечивая фронтальный характер изменений.

2. При введении экзогенной лактатдегидрогеназы отмечается значительное увеличение активности данного фермента, снижается содержание лактата и пирувата; значительно увеличивается активность малатдегидрогеназы, происходит уменьшение уровня маната и оксалоацетата, диоксиацетонфосфата и а-глицерофосфата, повышается содержание глюкозы в крови. Введение экзогенной малатдегидрогеназы вызывает выраженное повышение активности малатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, уменьшение уровня малата, увеличение содержания глюкозы в крови.

3. Установлено, что в условиях моделируемой гиперпируватемии в крови происходит увеличение содержания лактата, малата, альфа-глицерофосфата, ди-оксиацетофосфата, свободных жирных кислот и глицерина, снижение уровня глюкозы.

4. Выявлена способность флаволигнанов и этанола изменять активность ферментов в условиях полиферментной, полисубстратной системы. Силистронг

вызывает значительные изменения скорости катализируемых глицеральде-гид-3-фосфатдегидрогеназой, глицерофосфатдегидрогеназой и лактатдегид-рогеназой реакций, его компоненты - силимарин и этанол существенно уступают по биологическим эффектам.

5. С использованием компьютерной системы PASS С&Т выявлены возможные биологические эффекты и механизмы их реализации пирувата, оксалоацета-та, этанола, силибина и его изомеров, обусловленные особенностями их химического строения. Установлена способность производных карбоновых кислот и этанола выступать рмуляторами проницаемости клеточных мембран, метаболизма липидов, цитопротекторами, стимулировать эритро- и лейкопо-эз, оказывать антигипоксическое, антитоксическое, гемопротекторное, антиканцерогенное действие.

6. В модельных системах с антителами к тканевой трансглутаминазе, вирусу гепатита С выявлена способность учаетия малых молекул - пирувата, окса-лоацетата, этанола - и силистронга в процессах межбелковых взаимоотношений, в частности, воздействие их на антиген-антительное взаимодействие, что обнаружено как в сыворотке крови, так и в ротовой жидкости.

7. Выявлено, что добавление в кровь пирувата, оксалоацетата, этанола и силистронга вызывает отчетливые сдвиги в регистрируемых показателях Клеточного состава, что, очевидно, связано с неферментативным параметаболиче-ским воздействием на популяции клеток крови, их физико-химические и конформационные параметры, результатом чего является изменение количественных показателей при детекции. Выявлены группоспецифичные особенности реакции клеток крови на действие химически и физически активных соединений, что является основой индивидуального ответа.

8. Аргументирована иейропротекторная активность силистронга, проявляющаяся в способности регулировать процесс апоптоза в условиях острой ишемии, поддерживая его на физиологическом уровне, стимулировать дыха-

тельный ритмогенез, в основе чего лежит многофакторное действие препарата.

9. Обоснована возможность включения экзогенных дегидрогеназ, естественных интермедиатов и растительных биорегуляторов во внутриклеточные обменные процессы, установлен диапазон колебаний ключевых метаболических параметров, характеризующий метаболический ответ организма на введение веществ эндогенного и экзогенного происхождения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Разработанная молекулярная модель изучения влияния ксенобиотиков биологически активных соединений, лекарственных веществ, продуктов метаболизма на процессы белок-белкового взаимодействия может быть рекомендована для оценки действия широкого спектра веществ.

2. При использовании высокотехнологичных методов лабораторного анализа необходимо учитывать возможность интерференции на результаты изменений в фонде метаболитов в крови. В частности, в условиях гиперпирува-темии и гипероксалоацетатемии при патологических процессах, возможны сдвиги показателей клеточного состава крови, связанные с изменением физико-химических параметров клеток.

3. Положительное действие силистронга на физиологические процессы, протекающие в клетках головного мозга, нормализующее влияние препарата в условиях острой ишемии, предотвращающее развитие патологической ситуации, позволяют рекомендовать его в качестве нейропротекториого средства.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гильмиярова, Ф.Н. Роль малых молекул в регуляции аетивности цитоплазма тическйх дегидрогеиаз / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, Ю.В. Мякишев; Г.М. Баишева, Ю.В. Первова, Н.В. Спиридонова [Текст] // Биомедицииска: химия. -2006. - Т. 52, вып. 6. - С. 587-594.

2. Мякишева, Ю.В. Влияние силистронга на функциональную активност пейсмекеров мозга / Ю.В. Мякишева, O.A. Кизирова, O.A. Картащова, Е.Н Глазкова, Г.М. Баишева [Текст] // Bcc-гник РУДН, 2006. - С. 356-357.

3. Гильмиярова, Ф.Н. Биологическая вариабельность аналитов при различно" групповой принадлежности крови / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, Ю.В Мякишева, A.B. Бабичев, Л.Н. Виноградова, O.A. Кизирова [Текст] // Клиначе екая лабораторная диагностика. - 2007. - № 9. - С, 44.

4. Гильмиярова, Ф.Н. Ротовая жидкость: показатели метаболизма при различ ной групповой принадлежности крови / Ф.Н. Гильмиярова, Н.В. Спиридонова Ю.В. Мякишева, Е.А. Рыскина, Э.М. Гильмияров, И.О. Павлова, Г.М. Баишев [Текст] // Клиническая лабораторная диагностика. - 2007. - № 9. - С. 60-61.

5. Гильмиярова, Ф.Н. Перспективность единства фундаментальной й клинической медицины в обеспечении эффективной работы клинико-лабораторной службы / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, O.A. Карташова, Н.И. Гергель О.Ю. Кузнецова, Ю.В. Мякишева // Клиническая лабораторная диагностика. -2005.-№10.-С. 31-3.2.

6. Мякишева, Ю.В. Малые молекулы — инструменты регуляции метаболических процессов [Текст] / Ю.В. Мякишева // Вестник РУДН, серия «Медицина». 2008. - № 7. - С. 368-372.

7. Тороповский, А.Н. Молекулярно-генетические методы в практике здравоохранения / А.Н. Тороповский, Ю.В. Мякишева, О.В. Сазонова, O.A. Кизирова, Ю.В, Первова [Текст] // Клиническая лабораторная диагностика. - 2008. - № 9.-С. 41.

8. Гильмиярова, Ф.Н. Особенности метаболического и клеточного состава крови, ассоциированные с групповой принадлежностью в системе ABO, в норме и патологии / Ф.Н. Гильмиярова, Ю.В. Мякишева, O.A. Кизирова [Текст] // Астраханский медицинский журнал. - 2008. - Т. 3, № 3. - С. 76-79.

9. Мякишева, Ю.В. Влияние накожного применения натурсила на показатели метаболизма в ротовой жидкости / Ю.В. Мякишева, О.Ю. Кузнецова, Н.С. Лашкина [Текст] // Материалы межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья «Биохимия: от исследования молекулярных механизмов - до внедрения в клиническую практику и производство».

Оренбург.-2003.-С. 345-348.

10. Мякишева, Ю.В. Доклиническая диагностика гингивита по данным скри-нинговых исследований / Ю.В. Мякишева, И.Е. Гильмиярова, С.Е. Швайкина [Текст] // Материалы Межрегиональной научно-практической конференции,

посвященной 20-летию ИПО СамГМУ «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения». - СГМУ, Самара,- 2003.-С.151-153.

11. Мякишева, Ю.В. Оценка показателей метаболизма ротовой жидкости при накожном применении натурсила / Ю.В. Мякишева, A.B. Бабичев, И.Е. Гиль-миярова [Текст] // Материалы Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 20-летию ИПО СамГМУ «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения». - СГМУ, Самара,- 2003.-С.167-169.

12. Виноградова, J1.H. Роль ротовой жидкости в передаче возбудителей хлами-1 диоза, микоплазмоза, уреаплазмоза /Л.Н. Виноградова, H.A. Преснякова, О.В. Голомазова, И.Е. Гильмиярова, Ю.А. Косякова, Ю.В. Мякишева [Текст] // Материалы 5 Международного семинара по вопросам пожилых «Самарские лекции». - Самара, 2004. - С. 37-38.

13. Гергель, Н.И. Исследование ротовой жидкости в оценке активности воспалительного процесса / Н.И. Гергель, И.Ф. Сидорова, Ю.А. Косякова, Ю.В. Мякишева [Текст] // Материалы V научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке». - Москва, 2004. - С. 85.

14. Гильмиярова, Ф.Н. Логика межмолекулярных взаимоотношений - основа жизнедеятельности организма / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, A.B. Бабичев, Н.И. Гергель, Л.Н. Виноградова, Ю.В. Мякишева [Текст] И Материалы IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век». - Далянь, Китай. 2005.-С. 48-49.

15. Краснова, H.H. Показатели метаболизма в крови больных хроническим гепатитом С с разным уровнем виремии / H.H. Краснова, Ю.В. Мякишева, И.Ф. Сидорова, H.A. Преснякова, Л.С. Карслян [Текст] // Материалы межрегиональной научно-практической конференции биохимиков Урала. Поволжья и Западной Сибири «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины». - Самара. 2005. - С. 213-219.

16. Павлова, И.О. Информативность изучения ротовой жидкости для оценки метаболических эффектов масла расторопши / И.О. Павлова, Ю.В. Мякишева, O.A. Кизирова [Текст] // Материалы VI Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке». - Москва, 2005. - С. 370371.

17. Гильмиярова, Ф.Н. Продуктивные подходы к неинвазивной диагностике: исследования ротовой жидкости / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, И.Ф. Сидорова, Н.В. Спиридонова, Л.Н. Виноградова, Ю.В. Мякишева [Текст] // Материалы X Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век». -Бангкок-Петтаня, Тайланд. - 2006. - С. 82-92.

18. Зубова, И.А. Биологическая вариабельность показателей азотистого обмена в крови и ротовой жидкости в связи с групповой принадлежностью крови / И.А. Зубова, И.Ф. Сидорова, С.Р. Нуретдинова, Ю.В. Мякишева, O.A. Кизирова [Текст] // Материалы XI Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век». - Амстердам-Стратсбург, 2007. - С. 113-117.

19. Карслян, Л.С. Вирусоносительство гепатитами В и С: выявляемость, специфика метаболизма, связь с групповой принадлежностью крови / Л.С. Карслян,

О.Ю. Кузнецова, И.А. Зубова, И.Ф. Сидорова, Ю.В. Мякишева, O.A. Кизирова, О.В. Сазонова [Текст] // Материалы XI Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век». - Амстердам-Стратсбург, 2007. - С. 140-144.

20. Гильмиярова, Ф.Н. Гиперферментемия, индуцированная введением экзогенных дегидрогеназ: первичные и вторичные изменения в метаболизме / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, Ю.В. Мякишева, И.Ф. Сидорова, O.A. Гусякова,; Г.М. Баишева, O.A. Кизирова [Текст] // Материалы IV съезда Российского об-: щества биохимиков и молекулярных биологов. - Новосибирск, 2008. - С. 425.

21. Гиильмиярова, Ф.Н. Междисциплинарные аспекты стоматологии: дентальные периимплантиты / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, В.П. Тлустенко, Э.М. Гильмияров, Ю.А. Косякова, Ю.В. Мякишева. Е.С. Тлустенко. Монография. - Самара, 2005. - 251 с.

Патенты и изобретения:

U Гильмиярова, Ф.Н. Способ модуляции функциональной активности пейсме-керов мозга / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, В.Ф. Пятин, А.Б. Салмина. Ю.В. Мякишева, E.H. Глазкова, O.A. Кизирова. Патент № 2006107033/ 15(007615) от 06.03.2006.

2. Дукович, Е.В. Программа для анализа кристаллоскопической картины ротовой жидкости пациента / Е.В. Дукович, Ф.Н. Гильмиярова, Ю.В. Мякишева Свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ № 2007614228 от 04.10.2007.

3. Колесова, Т.А. Способ диагностики наступления ремиссии хронического холецистита / Т.А. Колесова, О.В. Сазонова, Ю.В. Мякишева, O.A. Гусякова, И.Ф. Сидорова. Заявка № 2008107165 от 26.02.2008.

МЯКИШЕВА ЮЛИЯ ВАЛЕРЬЕВНА

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Подписано в печать 16.02.2009. Отпечатано на ризографе. Формат 60x85/16 Заказ № 843. Объем 3,0 уСлов.печ.л. Уч.-изд.л. 1,7 Тираж 120 экз.

Отпечатано в типографии Клиник Самарского государственного медицинского университета но адресу: 443079, г. Самара, нр. Карла Маркса 165-6

Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Мякишева, Юлия Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Полифункциональность молекул - основа жизнедеятельности 15 организма

1.2. Биофлавоноиды — полифункциональные биологически 33 активные вещества

1.3. Роль малых молекул в регуляции метаболических процессов

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Изучение активности ферментов и содержания метаболитов в 52 крови и тканях экспериментальных животных

2.2. Исследование влияния силистронга на процесс апоптоза

2.3. Изучение влияния силистронга и этанола на процессы 55 дыхательного ритмогенеза

2.4. Изучение характера влияния малых молекул и силистронга на 56 процессы антиген-антительного взаимодействия

2.4.1 Определение антител к тканевой трансглутаминазе 57 и к вирусу гепатита С

2.4.2. Определение параметров общего анализа крови у лиц с 58 различной групповой принадлежностью

2.5. Статистическая обработка результатов исследований

ГЛАВА III. ВЗАИМОСВЯЗЬ СТРУКТУРНЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ 61 ИЗОМЕРОВ СИЛИБИНА И МАЛЫХ МОЛЕКУЛ С МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ И ПАРАМЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ

3.1. Компьютерное прогнозирование биологической активности флаволигнанов Silibum marianum

3.2. Малые молекулы, их свойства. Инструменты регуляции метаболических процессов, пути реализации

3.2.1. Компьютерное прогнозирование спектра биологической 75 активности этанола

3.2.2. Спектр биологической активности карбоновых кислот

ГЛАВА IV. КОММУНИКАТИВНАЯ РОЛЬ ОЛИГОМЕРНЫХ 89 ФЕРМЕНТОВ. ХАРАКТЕР УЧАСТИЯ В МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ПРОЦЕССАХ ЭКЗОГЕННЫХ ДЕГИДРОГЕНАЗ, МЕТАБОЛИТОВ, ЕСТЕСТВЕННЫХ МИНОРНЫХ КОМПОНЕНТОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

4.1. Характер распределения меченых тритием дегидрогеназ в тканях 89 экспериментальных животных

4.2. Метаболические сдвиги в организме экспериментальных 95 животных как результат действия экзогенных дегидрогеназ

4.3. Особенности метаболического ответа организма при введении 101 экзогенного пирувата

4.4. Влияние силистронга и его компонентов - силимарина и этанола - 104 на активность дегидрогеназ

ГЛАВА V. ХАРАКТЕРИСТИКА НЕЙРОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ 109 СИЛИСТРОНГА И ЭТАНОЛА

5.1. Влияние силистронга на уровень апоптоза клеток головного мозга 110 экспериментальных животных

5.2. Влияние силистронга и этанола на пейсмекерную активность 116 дыхательного центра экспериментальных животных

ГЛАВА VI. АНТИГЕН-АНТИТЕЛЬНОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ. 127 РОЛЬ СОЕДИНЕНИЙ РАСТИТЕЛЬНОГО И ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ В РЕГУЛЯЦИИ ПРОЦЕССА

6.1. Участие силистронга и малых молекул в процессах антиген-антительного взаимодействия

6.2. Влияние силистронга и малых молекул на показатели клеточного 135 состава в зависимости от групповой принадлежности крови ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярные механизмы обеспечения метаболической толерантности в условиях действия веществ растительного и животного происхождения"

Актуальность проблемы. В связи со снижением уровня популяцион-ного здоровья актуальным является поиск средств, использование которых будет способствовать решению, в первую очередь, валеологических задач. Потребность, пути использования, биотрансформация с учетом особенности структуры различных нутриентов - хорошо изученный процесс, реализующийся в организме во взаимодействии базовых метаболических путей. Динамическое состояние метаболических процессов, наличие многоуровневой иерархии регуляторных механизмов определяет широкий диапазон эндогенных возможностей организма как самонастраивающейся биологической системы. Это меняющееся адекватно потребностям относительное постоянство поддерживается взаимодействием со средовыми факторами, сложившимся в процессе филогенеза поступлением в организм высоко- и низкомолекулярных соединений, служащих макро- и микронутриентами, биорегуляторами, несущими информационный, энергопластический потенциал. Растения можно рассматривать как высокоорганизованные системы, способные к самообеспечению, сохранению вида, трансформированию элементарных минеральных и органических соединений в биополимеры, а также к синтезу сложных по структуре, уникальных по регуляторным свойствам алифатических и полициклических веществ (Запрометов М.Н., 1993, Ашмарин И.П., 2003; Голубев А.Г., 2003; Плотников М.Б., Тюкавкина Н.А., Плотникова Т.М., 2005; Зенков Н.К. с соавт., 2007; Скулачев В.П., 2007). Этот готовый ассортимент биологически активных соединений приобретает эссенциальный характер для животных и человека. В то же время большое значение в обеспечении жизнедеятельности организма, поддержании постоянства его внутренней среды играют естественные интермедиаты эндогенного происхождения - малые молекулы, обладающие определенными реакционными центрами и химической структурой, определяющими их свойства, позволяющими включаться в различные биохимические процессы.

В настоящее время большой интерес представляют минорные компоненты, природные соединения растений, обладающие высокой биологической активностью (Акашкина JI.B., Российская Г.И., Лякина М.Н., 1998; Никитина B.C. с соавт., 2000; Павлюченко И.И. с соавт., 2003; Кси Л.П. с соавт., 2003; Petry J., Hadley S.K., 2001). К ним, в частности, относится немногочисленная новая группа природных соединений - силибин, силикристин, сили-дианин, дегидросилибин. Они синтезируются и накапливаются в плодах рас-торопши пятнистой. Достаточно хорошо изучена их структура (Rodak J., Grygiewski R.J., Pol J., 1996). Это - флаволигнаны, флавоноиды, содержащие в своем составе фенилпропаноидный фрагмент кониферилового спирта. Аргументирован их гепатопротекторный эффект. Выявлено антиоксидантное, иммуномодулирующее, репаративное действие расторопши пятнистой (Гильмиярова Ф.Н. с соавт., 2001; Flora К. et al., 1999; Gupta О. et al., 2000; Middlerton E., Kandaswami C., Theoharides T.C., 2000; Rice-Evans C. et al., 2000; Kang S.N. et al., 2001). Наличие целого ряда клинических эффектов препаратов, получаемых из расторопши, служит основанием для предположения о множественном влиянии флаволигнанов на процессы жизнеобеспечения, и это заслуживает самостоятельного изучения. Молекулярные механизмы, лежащие в основе терапевтических эффектов не выяснены и нуждаются в достаточном экспериментальным обосновании. Будучи экзогенными по отношению к организму человека, флаволигнаны являются ограничено чужеродными, так как по пищевым цепям поступают в организм человека. В связи с этим актуальным является изучение молекулярных механизмов различных спектров действия, изучение терапевтических эффектов, тех превращений, которые обуславливают мобилизацию эндогенных ресурсов за счет оптимизации функциональной активности ключевых метаболических превращений, не десинхронизируя последовательность количественных фермент-субстратных взаимоотношений.

Наличие неполярных фрагментов в структуре флаволигнанов определяет растворимость и экстрагируемость этанолом, дифильная молекула которого реализует высокую химическую и биологическую активность, поступая в организм извне и синтезируясь в нем (Харченко Н.К., 2000; Пауков B.C. с соавт., 2001; Головко А.И. с соавт., 2002; Прокопьева В.Д., 2003; Гевондян К.А. с соавт., 2004; Avdulov N. et al., 2000; Li Т., 2000; Horvath M.E., 2001; Ahmad A et al., 2002). Влияние на межмолекулярные процессы, выяснение органной специфики метаболических и параметаболических процессов под влиянием флаволигнанов и малых молекул, установление клеточных механизмов нейротропного действия расширит представления об участии биологически активных соединений растительного и животного происхождения в регуляции обмена, поддержании метаболического баланса и раскроет новые возможности для мягкой коррекции метаболизма, повышения жизнеспособности, оздоровления.

Настоящее исследование выполнено в рамках Федеральных программ:

Цель настоящего исследования заключается в выяснении механизма взаимодействия минорных компонентов биологических объектов с системами структурно-функционального обеспечения жизнедеятельности организма, установлении естественных границ метаболических колебаний и поиске веществ, восстанавливающих физиологический уровень обмена.

Задачи:

1. На различных уровнях структурной организации (клеточном, субклеточном и молекулярном) с помощью метаболического зондирования экзогенными ферментами и интермедиантами изучить возможные диапазоны колебаний ключевых метаболических параметров, охарактеризовав потенциальную устойчивость к экстремальным воздействиям.

2. Охарактеризовать спектр биологической активности малых молекул - этанола, оксалоацетата, пирувата, а-кетоглутарата и флаволигнанов используя программу «Prediction of Activity Spectra for substances: Complex & Training» и «Pharma Expert».

4. На молекулярных объектах регуляторных олигомерных ферментах — гли-церальдегид-3-фосфатдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа и а-глицерофосфатдегидрогеназа оценить влияние силистронга и этанола на структурно-функциональные свойства.

Научная новизна. Полученные результаты можно рассматривать как фактический материал, способствующий развитию новых направлений в медико-биологических аспектах нанотехнологий. В экспериментах с введением в организм животных-реципиентов меченых тритием экзогенных дегидроге-наз, выполняющих ключевую роль в метаболизме, аргументирована возможность их включения во внеклеточные, внутриклеточные, внутримитохондри-альные обменные процессы. Инсталлированные ферменты могут являться молекулярным инструментом адресной коррекции нарушенного метаболизма, синдромной терапии при различных нозологических формах.

Впервые раскрыта роль малых молекул (этанола, оксалоацетата, пиру-вата, а-кетоглутарата) в качестве посредников, регулирующих функцию макромолекул, реализующихся различными физиологическими эффектами.

Установлено, что введение экзогенных лактатдегидрогеназы и малатде-гидрогеназы, а также избытка естественного метаболита — пирувата - индуцирует изменения в фонде субстратов углеводно-липидного обмена, в катализе ферментов, функционально сопряженных с малат- и лактатдегидрогена-зой.

Получены новые сведения, раскрывающие широкий спектр биологической активности флаволигнанов расторопши. Использование программы «Prediction of Activity Spectra for Substances: Complex & Training» позволило установить зависимость между особенностями структуры силибина, сили-дианина, силикристина и характером ожидаемого действия. Так, силибин, изосилибин, изосиликристин в большей степени являются антиоксидантами, дегидросилибин, силикристин и дегидросиликристин обладают антитоксическим действием, регулируют проницаемость мембран, силидианин оказывает иммуносупрессорный, антинеопластический и цитостатический эффект.

Результаты исследования раскрывают механизм межмолекулярного взаимодействия этого класса биологически активных веществ растительного происхождения с системами жизнеобеспечения организма. На молекулярном, клеточном и организменном уровне показана протекторная роль биофлавоноидов Silibum marianum, обеспечивающая физиологическую преемственность катаболических и анаболических превращений углеводного обмена. Установлено, что флаволигнаны силистронга обладают способностью влиять на активность ключевых ферментов гликолитического распада углеводов. Показана более значительная эффективность многокомпонентной системы силистронга по сравнению с изолированными флаволигнанами, что свидетельствует о потенцирующем взаимодействии компонентов природной композиции, а также раскрывает роль силистронга как регулятора энергетической обеспеченности в клетке.

Впервые в экспериментах in vitro выявлена способность малых молекул и силистронга влиять на процессы антиген-антительного взаимодействия. Показано, что изучаемые соединения изменяют детекцию антител к тканевой трансглутаминазе и вирусу гепатита С в сыворотке крови и ротовой жидкости. Установлен разнонаправленный характер изменений под действием кетокислот, этанола и силистронга показателей клеточного состава крови у лиц различной с групповой принадлежностью в системе АВО, что создает дополнительные предпосылки к оценке лабораторных данных пациента, учитывая при этом индивидуальные реакции организма на введение различных лекарственных средств, характер питания.

Научно-практическая значимость работы состоит в получении новой базы данных, раскрывающих механизм участия минорных алиментарных факторов в регуляции интенсивности, характера метаболических превращений по основным и альтернативным путям. Выяснение информативно-регуляторных свойств флаволигнанов Silibum marianum на объектах разного уровня структурно-функциональной организации: олигомерных цитоплазма-тических и митохондриальных ферментах, однородных клеточных популяциях, субклеточных органеллах, а также органном уровне in vivo, ex vivo, расширяют наши представления об оптимизации метаболических процессов, многообразии регуляторных процессов, формирующихся в отногенезе. Получены новые данные, раскрывающие значимость макро- и микронутриен-тов, трансформирующихся по пищевым цепям. Это фундаментальный аспект решаемой проблемы.

Основные положения, выносимые на защиту:

2. Прогнозируемое многогранное действие флаволигнанов расторопши пятнистой и малых молекул, установленное с помощью компьютерной системы PASS С&Т, ключевыми из которых являются цито- и органопротектор-ное, мембранотропное, что обуславливает антигипоксическую, антитоксическую, гемопротекторную, антиканцерогенную, гепатопротекторную, антиок-сидантную, антитоксическую активность.

4. Группоспецифичные особенности реакции клеток крови на действие химически и физически активных соединений являются основой индивидуального ответа. Естественные интермедиаты — пируват, оксалоацетат, этанол, и растительные биологически активные соединения силистронга оказывают неферментативное параметаболическое воздействие на популяции клеток крови, результатом чего является изменение количественных показателей при детекции.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья «Биохимия: от исследования молекулярных механизмов — до внедрения в клиническую практику и производство» (Оренбург, 2003), Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 20-летию ИПО СамГМУ «Актуальные вопросы последипломного образования и здравоохранения» (Самара, 2003), V Международном семинаре по вопросам пожилых «Самарские лекции» (Самара, 2004), V Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва,

2004), IX Международной научной конференции «Здоровье семьи - XXI век» (Далянь, 2005), на съезде Научного общества специалистов клинической лабораторной диагностики (Москва, 2005), Межрегиональной научно-практической конференции «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины» (Самара, 2005), VI Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва,

2005), X Международной научной конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Бангкок-Паттайя, 2006), VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2006), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии, посвященной 20-летию Кировской государственной медицинской академии (Киров, 2007), XI Международной научной конференции «Здоровье семьи - 21 век» (Амстердам-Стратсбург, 2007), IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008), журналах «Биомедицинская химия» (2006), «Клиническая лабораторная диагностика» (2007, 2008), «Новости клинической цитологии России» (2007), «Вестник РУДН» (2007, 2008), совместном заседании Самарского отделения Всероссийского биохимического общества, кафедр общей, бионеорганической и биоорганической химии и фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (Самара, 2009).

Внедрение результатов в практику. Результаты исследований используются в работе клинико-диагностической лаборатории Клиник Самарского государственного медицинского университета, в учебном процессе на кафедре фундаментальной и клинической биохимии с лабораторной диагностикой ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Публикации. Всего опубликовано 24 работы, в том числе 1 монография, 3 патента, 7 работ - в ведущих рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Мякишева, Юлия Валерьевна

выводы

2. При введении экзогенной лактатдегидрогеназы отмечается значительное увеличение активности данного фермента, снижается содержание лактата и пирувата; значительно увеличивается активность малатдегидрогеназы, происходит уменьшение уровня малата и оксалоацетата, диоксиацетонфосфата и а-глицерофосфата, повышается содержание глюкозы в крови. Введение экзогенной малатдегидрогеназы вызывает выраженное повышение активности малатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, уменьшение уровня малата, увеличение содержания глюкозы в крови.

4. Выявлена способность флаволигнанов и этанола изменять активность ферментов в условиях полиферментной, полисубстратной системы. Силистронг вызывает значительные изменения скорости катализируемых глицеральде-гид-3-фосфатдегидрогеназой, глицерофосфатдегидрогеназой и лактатдегид-рогеназой реакций, его компоненты - силимарин и этанол существенно уступают по биологическим эффектам.

5. С использованием компьютерной системы PASS С&Т выявлены возможные биологические эффекты и механизмы их реализации пирувата, оксалоацетата, этанола, силибина и его изомеров, обусловленные особенностями их химического строения. Установлена способность производных карбоновых кислот и этанола выступать регуляторами проницаемости клеточных мембран, метаболизма липидов, цитопротекторами, стимулировать эритро- и лейкопо-эз, оказывать антигипоксическое, антитоксическое, гемопротекторное, антиканцерогенное действие.

6. В модельных системах с антителами к тканевой трансглутаминазе, вирусу гепатита С выявлена способность участия малых молекул — пирувата, оксалоацетата, этанола - и силистронга в процессах межбелковых взаимоотношений, в частности, воздействие их на антиген-антительное взаимодействие, что обнаружено как в сыворотке крови, так и в ротовой жидкости.

7. Выявлено, что добавление в кровь пирувата, оксалоацетата, этанола и силистронга вызывает отчетливые сдвиги в регистрируемых показателях клеточного состава, что, очевидно, связано с неферментативным параметаболиче-ским воздействием на популяции клеток крови, их физико-химические и конформационные параметры, результатом чего является изменение количественных показателей при детекции. Выявлены группоспецифичные особенности реакции клеток крови на действие химически и физически активных соединений, что является основой индивидуального ответа.

8. Аргументирована нейропротекторная активность силистронга, проявляющаяся в способности регулировать процесс апоптоза в условиях острой ишемии, поддерживая его на физиологическом уровне, стимулировать дыхательный ритмогенез, в основе чего лежит многофакторное действие препарата.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

169

Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Мякишева, Юлия Валерьевна, Уфа

1. Абелев, Г.И. Основы иммунитета. Сорос, обзор, журн. 1996. - Т.5. - С. 4-10.

2. Акимов, Д.В. Компьютерный поиск новых ингибиторов интегразы ВИЧ-1 / Д.В. Акимов, Д.А. Филимонов, Т.А. Приказчикова и др. //Биомедицинская химия. 2005. - Т. 51. № 3. - С. 335-340.

3. Алексеева, Л.Н. Участие цитохрома Р-450 в биосинтезе вторичных метаболитов // Биоорг.химия. 2008. - Т.34,№3. — С.337-343.

4. Алиева, И.Б. Центросома — полифункциональный мультибелковый клеточный комплекс / И.Б. Алиева, Р.Э. Узбеков // Биохимия. 2008. — Т. 736 вып. 6.-С. 782-803.

5. Андреев, А.Ю., Кушнарева Ю.Е., Старков А.А. Метаболизма активных форм кислорода в митохондриях / А.Ю. Андреев, Ю.Е. Кушнарева,

6. A.А. Старков // Биохимия. 2005. - Т. 70, вып. 2. - С. 246-264.

7. Арутюнова, Е.И. Антитела к неактивным конформациям глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы инактивируют апо- и холоформу фермента/ Е.И. Арутюнова, А.П. Плетень, Н.К. Наградова,

8. B.И. Муронец //Биохимия. 2006. - Т.71,№6. - С.847-855.

9. Ашмарин, И.П. Нейрохимия / И.П. Ашмарин, А.Е. Антипенко, В.В. Ашапкин и др. М.: изд-во ИБМХ РАМН, 1996. - 470 с.

10. Ашмарин, И.П. Алкогольдегидрогеназа млекопитающих — объект молекулярной медицины // Успехи биологической химии. — 2003. — Т 43.-С. 8-13.

11. Бабина, С.Е. Лактоферрин-дезоксирибонуклеаза человеческого молока

12. С.Е. Бабина, Т.Г. Канышкова, В.Н. Бунева, Г.А. Невинский // Биохимия. 2004. - Т.69, №9. - С. 1239-1250.

13. Багхи, Д. Антиангиогенные, антиоксидантные и антиканцерогенные свойства нового, богатого антоцианином препарата из экстракта ягод / Д. Багхи, К.к. Сен, М. Багхи, М. Аталай // Биохимия. 2004. — Т. 69, вып. 1.-С. 95-102.

14. Барановский, А.Г. Дезоксирибунуклеазы человека / А.Г. Барановский,

15. B.Н. Бунева, Г.А. Невинский // Биохимия. 2004. - Т.69, № 6. - С. 725742.

16. Басова, Е.В. Антимутагенные свойства экстрактов багульника болотного / Е.В. Басова, М.В. Белоусов, М.С. Юсубов и др. // Фармация. - 2004. - № 4. - С. 40-41.

17. Белизи, С. Изменение антиокислительных свойств лактоферрина из денского молока в процессе дезамидирования /С. Белизи,, И.Н. Назарова, В.Н. Прокофьев, И.А. Сорокина, Н.В. Пушкина, А.И. Лукаш //Биохимия. -2001.-Т.66,№ 5.-С. 712-717.

18. Беликов, В.В. Оценка содержания флавенол-производных в плодах Silybum marianum / В.В. Беликов // Растительные ресурсы. 1985. — Т. 21, вып. 3.-С. 350-358.

19. Белобородова, Н.В. Гомеостаз малых молекул микробного происхождения и его роль во взаимоотношениях микроорганизмов с хозяином / Н.В. Белобородова, Г.А. Осипов // Вестник РАМН. —1999. Т. 16,-№7.- С. 25-31.

20. Бельмер, С.В. Поражение поджелудочной железы при целиакии / С.В. Бельмер, Т. В. Гасилиан, Ю. Г. Мухина и др. // Болезни органов пищеварения. 2002. - С. 10-13.

21. Бережная, Н. М. Иммунологические исследования в клинике: состояние вопроса / Н. М. Бережная // Иммунология. 2006. - № 1.1. C. 18-23.

22. Берман, А.Е. Структура и сигнальные функции интегринов / А.Е.

23. Берман, Н.И. Козлова, Г.Е. Морозевич // Биохимия. — 2003. Т.68, № 12.-С. 1597-1615.

24. Битюцкая, Л.Г. Антиоксиданты при экспериментальной гипергликемии / Л.Г. Битюцкая. Автореф. дис. . канд. Мед. Наук. — Владивосток, 2005.-22с.

25. Бобров, В.М. Молекулы средней массы — показатель интоксикации при гнойно-воспалительных заболеваниях ЛОР-органов / В.М. Бобров, С.А. Шишкин // Вестн. оториноларингологии. 1999. - № 1. — С. 33-35.

26. Болдырев А.А. Na/K-АТФаза как олигомерный ансамбль / А.А. Болдырев // Биохимия. 2001. - Т. 66, вып. 8. - С. 1013-1025.

27. Боровиков, В.П. Популярное введение в программу STATISTICA / В.П. Боровиков М: КомпьютерПресс, 2001. - 267 с.

28. Борщевская, М.И. Развитие представлений о биохимии и фармакологии меланиновых пигментов / М.И. Борщевская, С.М. Васильева // Вопросы мед.химии. 1999. - № 1. - С.9-12.

29. Бочков, Н.П. Генетика человека: Наследственность и патология / Н.П. Бочков М.: медицина, 1978. - 234 с.

30. Бра, М. Митохондрии в программированной гибели клетки: различные механизмы гибели / М. Бра, Б.винан, С.А. Сузин // Биохимия. — 2005. — Т. 70, вып. 2. С. 284-293.

31. Брыксин, А.В. Роль глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы в везикулярном транспорте, протекающем в клетке между аппаратом Гольджи и эндоплазматическим ретикуллумом / А.В. Брыксин, П.П. Лактионов

32. Биохимия. 2008. - Т.73, № 6. - С.773-781.

33. Бутянян, Н.Д. Природные антиоксиданты — как гепатопротекторы / Н.Д. Бутянян, О.А. Герасимова, Т.С. Сахарова, Л.В. Яковлева // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1999. — Т. 62, № 2. -С. 64-67.

34. Венгеровский, А.И. Гепатозащитное действие силибинина приэкспериментальной интоксикации СС14 / А.И. Венгеровский, B.C. Чучалин, Е.А. Морокова и др. // Фармакология и токсикология. 1987. - № 5. - С. 67-69.

35. Венгеровский, А.И. Влияние гепатопротекторов растительного происхождения на эффекты преднизолона при экспериментальном токсическом гепатите / А.И. Венгеровский, М.Ю. Коваленко, А.Г. Арбузов и др. // Растит. Ресурсы. 1998. - № 3. - С. 91-196.

36. Воротниов, А.В. Внутриклеточная сигнализация и фосфорилирование белков при сокращении гладких мышц / А.В. Воротниов, М.А. Крымский, В.П.иринский // Биохимия. — 2002. Т. 67. вып. 12. — С. 1587-1610.

37. Гаверова, Ю.В. Исследование влияния аминокислот на глюкозо-6-фосфатдегидрогеназу и малатдегидрогеназу тутового шелкопряда / Ю.В. Гаверова, А.С. Коничев // Сборник тезисов сообщений-II съезда биохимического общества РАН. Москва, 1997. - С. 180.

38. Галактионов, В.Г. Иммунология / В.Г.Галактионов. М., 1998.-520 с.

39. Галактионов, В.Г. Механизмы иммунитета в графической форме / В.Г. Галактионов. М., 2000. - 288 с.

40. Гасанов, Г.Г. Выявление серотонин-модулируемой белковой фракции и изучение её участия в организации поведения пассивного избегания у крыс / Г.Г. Гасанов, А.А. Метхиев // Бюл. экспер. биол. и мед. — 1991. №7.- С.5-7.

41. Гевондян, К.А. Действие этанола и синтетических оксимов на содержание аминокислот группы глутамина в мозге и крови белыхкрыс / К.А. Гевондян, Г.Г. Данагулян, Д.Х. Амбарцумян и др. // Нейрохимия. 2004. - Т. 21, № 4. - С. 261-264.

42. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, С.Е. Дмитрук -Новосибирск: Наука, 1990. — 330 с.

43. Герасимов, Н.М. Молекулы средней массы у больных наружным генитальным эндометриозом / Н.М. Герасимов, JI.B. Посисеева, М.А. Гришанкова // Клиническая лабораторная диагностика. — 2003. № 12. -С. 16-19.

44. Гильмиярова, Ф.Н. Биологически активная добавка из расторопши в решении проблем оздоровления населения / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, И.Г. Кретова и др. // Лечебное питание. — 198. № 3. — С. 33-35.

45. Гильмиярова, Ф.Н. Аналитически подходы к изучению показателей метаболизма в ротовой жидкости / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, Н.И. Гергель и др. Москва: «Известия», 2006. — 312 с.

46. Гильмиярова, Ф.Н. Группы крови: биологическая вариабельность клеточного состава и метаболизма в норме и патологии / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, Н.И. Гергель и др. Москва: «Известия», 2007. - 490 с.

47. Гильмиярова, Ф.Н. Изменения в метаболизме миокарда, связанные с введением этанола / Ф.Н. Гильмиярова, В.М. Радомская, JI.H. Виноградова // Cor et vasa. -1983.-№25.-С.213-218.

48. Гильмяирова, Ф.Н. Постижение сути: экология, экопатология,натурсил / Ф.Н. Гильмяирова, В.М. Радомская- Самара, 1997. 402 с.

49. Головко, А.И. Влияние этанола на функциональное состояние ГАМКа-рецепторов / А.И. Головко, С.И. Головко, JI.B. Леонтьева, С.Ю. Зефиров // Биохимия. 2002. - Т. 67, вып. 7. - С. 869-881.

50. Голубев, А.Г. Биохимия продления жизни / А.Г. Голубев // Успехи геронтолигии. 2003.- №12. - С.57-76.

51. Голубев, А.Г. Изнанка метаболизма / А.Г. Голубев // Биохимия. — 1996. Том 61, вып. 11. - С. 2018-2039.

52. Голья, Ф. Биологическое действие 3,5-дииодтиронина (Т2)/ Ф. Голья // Биохимия. 2005. - Т.70, № 2. - С. 203-213.

53. Гомазков, О.А. Краткая медицинская энциклопедия / О.А. Гомазков // М., издательство «Советская энциклопедия», 1989. С.248-294.

54. Грибов, Л.А. Теория и методы расчета молекулярных процессов: спектры, химические превращения и молекулярная логика / Л.А. Грибов, В.И. Баранов М.: «КомКнига», 2006. - 480 с.

55. Громова, О.А. Нейрохимия макро- и микроэлементов. Новые подходы к фармакотерапии / О.А. Громова, Ф.В. Кудрин- М., 2001. 272 с.

56. Губанов, Р.А. Биохимические молекулы как объект воздействия ионов лития / Р.А. Губанов // Материалы науч.-практ. конф. «Здоровье и образование в XXI веке». - М. 2006. - С. 145.

57. Гуляева, Н.В. Неапоптические функции каспазы-3 в нервной ткани / Н.В. Гуляева // Биохимия. 2003. - Т.68, № 11. - С.1459-1470.

58. Даньшина, П.В. Ускорение гликолиза нефосфорилирующей и окисленной фосфор илирующей глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназами /П.В.Даньшина, Е.В. Шмальгаузен, Д.Ю.

59. Арутюнов, А.П.Плетень и др.// Биохимия. — 2003. Т. 68, № 5. — С. 725-733.

60. Дегтярь, В.Г., Кушлинский Н.Е. За-гидроксистероидцегидрогеназа в тканях животных и человека / В.Г. Дегтярь, Н.Е. Кушлинский // Биохимия. 2001. - Т.66, № 3. — С.321-330

61. Денисенко, О.О. Изучение взаимодействия а2-макроглобулина человека и дуоденазы сериновой протеазы с двойной специфичностью / О.О. Денисенко, Т.В. Замолодчикова, Н.А. Попыкина, Н.И.Ларионова // Биохимия. - 2006. - Т.71, № 6. - С.815-824.

62. Драгомирецкий, В.Д. Показатели местного иммунитета слизистой оболочки глотки у больных хроническим фарингитом / В.Д. Драгомирецкий, Ф.Д. Вечев, Ю.И. Бажора // Журн. Ушных,- носовых и горловых болезней. — 1989. № 6. - С. 21-23.

63. Евсюкова, Е.В. Роль метаболитов арахидоновой кислоты в механизмах аллергических реакций / Е.В. Евсюкова, Г.Б. Федосеев. // Аллергология. 2000. - № 4. - С. 6-58.

64. Елизарова, В.М. Ионизированный кальций в слюне детей при множественном кариесе / В.М. Елизарова, Ю.А.Петрович // Стоматология. 1997. - № 4. - С. 67-71.

65. Елизарова, В.М. Нарушение гомеостаза кальция при множественном кариесе зубов у детей / В.М. Елизарова, Ю.А. Петрович // Стоматология. 2002. - № 1. - С. 6-8.

66. Елисеева, Ю.Е. Ангиотензин-превращающий фермент, его физиологическая роль / Ю.Е. Елисеева // Вопр.мед.химии. — 2001.- №1.- С.25-32.

67. Епринцев, А.Т. Физико-химические характеристики малатдегидрогеназы из бактерий Rhodopseudomonas palustris штамм fSpt/А.Т.Епринцев, М.И. Фалалеева, М.А. Климова, Е.И.Компанцева// Биохимия. 2006. -Т.71, № 6. - С. 856-860.

68. Епринцев, А.Т. Малатдегидрогеназа термофильных бактерий Vulcanithermus medioatlanticus / А.Т. Епринцев, М.И. Фалалеева, Н.В.Парфенова // Биохимия. 2005. - Т.70, № 9. - С. 1245-1249.

69. Ермоленко, Д.Н. Антитела как специфические шапероны / Д.Н. Ермоленко, А.В. Жердев, Б.Б. Дзантиев // Биохимия. 2004. — Т.69, № 11.-С. 1515-1521.

70. Есакова, Т.В. Взаимодействие комплекса лактатдегидрогеназа-NAD-пируват с мембранами легкого саркоплазматического ретикулума / Т.В. Есакова, М.В. Иванов // Биохимия. — 1994. Т. 59, вып. 4. - С. 543-550.

71. Есакова, Т.В. Взаимодействие лактатдегидрогеназы и мембран саркоплазматического ретикулума / Т.В. Есакова, М.В. Иванов // Биохимия. 1992. - Т. 57, вып. 2. - С. 253-267.

72. Женг, Я. Делеция N-концевых аминокислотных остатков лактатдегидрогеназы из мышц кролика: влияние на свойства фермента/Я.Женг, Ш.Гуо, Ж.Гуо, К.Вонг//Биохимия. 2004. - Т.69,№ 4. - С.497-503.

73. Зезеров, Е.Г. Биохимические механизмы острого и хронического действия этанола на организм человека / Е.Г. Зезеров // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1998. — №2.-с. 47-55.

74. Закляков, К.К. Гематологические и гемокоагуляционные нарушения при респираторном дистресс-синдроме у больных сепсисом / К.К.

75. Закляков, Д.Г. Мустафин // Материалы научных исследований по основным направлениям ВУЗа. — Астрахань, 1997. — с. 40-44.

76. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях / М.Н. Запрометов. — Москва: «Наука», 1993. 272 с.

77. Земсков, A.M. Зависимость иммунологической реактивности от групп крови и характера микрофлоры у больных хроническим гнойным средним отитом / A.M. Земсков, С.Д. Полякова // Вестн. Оториноларингологии. 1996. - №5. - С. 35-38.

78. Зенков, Н.К. Антиоксидантные и противовоспалительные свойства новых водорастворимых серосодержащих фенольных соединений / Н.К. Зенков, Е.Б. Меныцикова, Н.В. Кандалинцева и др. // Биохимия. — 2007. Т. 72, вып. 6. - С. 790-798.

79. Зиглер, М. Транслоказа адениновых нуклеотидов переносчик, который, возможно, участвует в синтезе NAD в митохондриях / М. Зиглер // Биохимия. - 2005. - Т.70, № 2. - С.214-219.

80. Зимин, А.А. Биологические макромолекулы: структура, формы и функции / А.А. Зимин, В.Д. Лахно, Н.Н. Назипова- Ижевск, 2002. С. 35-54.

81. Зимин, Ю.В. Надмолекулярная регуляция активности некоторых оксидоредуктаз клетки в норме и патологии / Ю.В. Зимин, С.П. Сяткин, Т.Т. Березов // Вопросы медицинской химии 2001. - №3. -С.24-30.

82. Иванищев, В.В. Ферменты метаболизма малата: характеристика, регуляция активности и биологическая роль / В.В. Иванищев, Б.И. Курганов // Биохимия. 1992. - Т.57, № 5. - С.653-661.

83. Иванов, В.Т. Белки иммунной системы / В.Т. Иванов. — М., 1997. — 140 с.

84. Канышкова, Т.Г. Лактоферрин и его биологические функции / Т.Г. Канышкова, В.Н. Бунева, Г.А. Невинский //Биохимия. 2001. - Т.66,1. — С. 5-13.

85. Капелько, В.И. Креатинфосфокиназный путь транспорта энергии в мышечных клетках / В.И. Капелько // Соросовский образовательный журнал.-2000. -№11. С. 8-12.

86. Каратаева, Н.А. Полисахаридазная активность IgG антител из молока человака / Н.А. Каратаева, В.Н. Бунева, Невинский Г.А. // Биохимия. — 2006. —Т.71, № 11. С.1488-1504.

87. Карпищенко, А.И. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. / Под редакцией А.И. Карпищенко. — Санкт-Петербург: Интермедика, 1999. 656 с.

88. Каршиев, Х.К. Влияние ультрафиолетового облучения крови на уровень сорбционной способности эритроцитов и молекулы средней массы у больных с флегмонами челюстно-лицевой области / Х.К. Каршиев // Новое в стоматологии. 1998. - 3 7. - С. 75-78.

89. Кин Рен Хва. Влияние мелатонина на заживление ран и некоторые биохимические характеристики грануляционно-фиброзной ткани крыс/Кин Рен Хван, Е.Г. Ольшевский, Л.Г.Маркина, Ю.В.Абрамов и др.//Вопросы мед.химии 2000. - № 1. — 56-58.

90. Коваленко, В.Н. Новые возможности применения простагландина Е1 в ревматологии / В.Н. Коваленко, Н.М. Шуба, Г.А. Проценко // Украинский ревматологический журнал. 2001. - № 2(4). - С. 13-14.

91. Ковальчук, Л. В. Рецепторы врожденного иммунитета: подходы к количественной и функциональной оценке toll-подобных рецепторов человека / Л.В Ковальчук, М. В. Хорева, А.С. Варивода и др. // Иммунология. 2008. - № 4. - С. 223-227.

92. Ковальчук, JI.В. Система цитокинов / Л.В. Ковальчук, Л.В. Ганковская, Э.И. Рубакова М., 1999. 74 с.

93. Комов, В.П. Биохимия / В.П. Комов, В.Н. Шведова // М.:Дрофа. 2004. - с.620.

94. Кондратьева, И.А. Наглядная иммунология / И.А. Кондратьева, А.А. Киташева, М.А. Ланге, Дж. Плейфэр -М., 2000. 138 с.

95. Корольков, Д.В. Активация малых молекул кластерными комплексами / Д.В. Корольков // Соросовский образовательный журнал. — 2000. — Т. 6,№ 1.-С. 33-35.

96. Коссинский, Ю.А. Предсказание структуры комплексов белок-лиганд: от компьютерной модели к биологической функции / Ю.А. Коссинский, Т.В. Пырков, С.В. Луценко, Р.Г. Ефремов // Рос. хим. Ж. -2006. Т. L., № 2. - С. 36-44.

97. Крепкова, Л.В. Доклиническое изучение безопасности комплексных лекарственных фитопрепаратов, разработанных на основе расторопши пятнистой / Л.В. Крепкова, Т.А. Сокольская ,// Химико-фармацевтический журнал. 2007.- Т. 41, № 10. - С. 26-29.

98. Кретович, В.Л. Биохимия растений / В.Л. Кретович. М.: Высшая школа, 1986. - 503 с.

99. Кротов, С.А. Новые наборы для диагностики целиакии / С.А. Кротов, В.А. Кротова, Н.Н. Бурбик и др. // Новости "Вектор-Бест". 2007. - № 4 (46).-С. 7-10.

100. Кси, Л.-П. Ингибирующее влияние некоторых флавоноидов на активность грибной тирозиназы / Л.-П. Кси, К.-К. Чен, X. Хуан и др. // Биохимия. 2003., вып. 4. - С. 598-602.

101. Кудрин, А.В., Громова О.А. Микроэлементы в неврологии / А.В. Кудрин, О.А. Громова- М., 2006. 303 с.

102. Куравский, M.J1. Соматическая и сперматозоидная глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа: сравнительный анализ первичных структур и функциональных особенностей / M.J1. Куравский, Муронец В.И. // Биохимия. 2007. - Т.72, № 7. - С.915-922.

103. Курганов, Б.И. Стабильность и фолдинг белков / Б.И. Курганов // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 3. - С. 291-293.

104. Куркин, В. А. Фенилпропаноиды — перспективные природные биологически активные соединения / В.А. Куркин. — Самара. 1996. — 80 с.

105. Ландау, М.А. Молекулярные механизмы действия физиологически активных соединений / М.А. Ландау. М.: «Наука», 1981. — 262 с.

106. Левицкая, Н.Г. Регуляторные пептиды / Н.Г. Левицкая, А.А.Каменский // Природа. 2003. - №10. - С.28-39.

107. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия. — Санкт-Петербург: СпецЛит, 2004. 765 с.

108. Ленинджер, А. Основы биохимии: в 3-х томах. Т.2 / Пер. с анг. М.: Мир, 1985-368 с.

109. Леонтьев, В.К. О мицеллярном состоянии слюны / В.К. Леонтьев, М.В. Галиулина // Стоматология. 1991. - № 5. - С. 17-21.

110. Липская, Т.Ю. Физиологическая роль креатинкиназной системы: эволюция представлений / Т.Ю. Липская //Биохимия. 2001.- Т.66, № 2. - С.149-166.

111. Липская, Т.Ю. Функциональное сопряжение между нуклеозиддифосфаткиназой наружного компартмента митохондрий и окислительным фосфорилированием / Т.Ю. Липская, В.В. Воинова

112. Биохимия. 2005. - Т.70, № 12. - С.1646-1655.

113. Липская, Т.Ю. В митохондриях печени крысы вся неуклеозиддифосфаткиназа наружного компартмента локализована навнешней поверхности наружной мембраны / Т.Ю. Липская, К.Н. Плакида // Биохимия. 2003. - Т.68, №10. - С.1412-1422.

114. Литвинов, М. Малые молекулы организмов / М. Литвинов // Химия и жизнь 21 век. - С. 23-26.

115. Лопина, О.Д. Взаимодействие каталитической субъединицы Na,K-АТР-фазы с клеточными белками и другими эндогенными регуляторами / О.Д. Лопина // Биохимия. 2001. — Т. 66, вып. 10. - С. 1389-1400.

116. Лукашева, Е.В. L-лизин-а-оксидаза: физико-химические и биологические свойства / Е.В. Лукашева, Т.Т. Березов // Биохимия. — Т.67, № 10. С.1394-1402.

117. Лысикова, С.Л. Эффективность антиатерогенной диеты, содержащей флавоноиды, у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями / С.Л. Лысикова, А.В. Погожева, С.Е. Акользина и др. // Вопросы питания.,— 2003. -№3.-С. 8-11.

118. Макаров, В.Г. Изучение механизма антиоксидантного действия витаминов и флавоноидов / В.Г. Макаров, М.Н. Макарова, А.И. Селезнева // Вопросы питания. — 2005. № 1. - С. 10-13.

119. Макарова, М.Н. Антирадикальная активность флавоноидов и их комбинаций с другими антиоксидантами / М.Н. Макарова, В.Г. Макаров, И.Г. Зенкевич // Фармация. 2004. - № 2. - С. 30-32.

120. Максимов, А.Ю. Влияние флавоноидов на экологию энтеробактерий / А.Ю. Максимов, Н.Б. Ремезовская, В.А. Демаков // Экология. 2003. -№2.-С. 121-125.

121. Малинка, М. К. Увеличение способности иммуноглобулинов, инкубированных при кислых значениях рН, связывать отрицательно заряженные антигены

122. М. К. Малинка, В. М. Петриев, В. К. Подгородниченко // Иммунология. 2007. - № 1. - С. 16-19.

123. Малыгин, А.Г. Структурно-химический подход к организации материала на метаболических картах / А.Г. Малыгин // Биохимия. — 2004. Т. 69, вып. 12. - С. 1691-1699.

124. Мао, Ю. АТРазный домен белка Hsp70 обладает собственной АТР-ADP-обменной активностью / Ю. Мао, А.Денг, Н.Ку, К. By // Биохимия. 2006. - Т.71, № 11. - С. 1505-1513.

125. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский- М.: Новая волна, 2000. 539 с.

126. Медведев, А.Е. Роль моноаминооксидаз в регуляции энергетических функций митохондрий / А.Е. Медведев, В.З. Горкин // Вопросы медицинской химии. 1991. - №5. - С.2-6.

127. Мидлтон, М.Р. Анализ статистических данных с использованием Microsoft Excel для Office ХР / М.Р. Мидлтон- М., 2005. 296 с.

128. Москвитина,Т.А. Особенности синтеза моноаминоксидаз субклеточных структур в норме и при алкоголизации / Т.А. Москвитина // Биомедицинская химия. -2006.- том 52.-вып.2.-с.169-173.130. Москвитина, Т.А.

129. О нарушениях свойств моноаминооксидазы мозга при шизофрении // Вопросы медицинской химии / Т.А. Москвитина, Н.С. Камышанская,

130. B.З. Зоркин. 1986. - №1. - С.98-102.

131. Моулисова, В. И. Силибин уменьшает перекисное окисление липидов мембраны гепатоцитов крысы, индуцированное циклоспорином А / В. Моулисова, М. Србова, О. Едличкова // Биохимия. 2006. - Т. 71, вып. 10.-С. 1371-1376.

132. Мушкамбаров, Н.Н. Молекулярная биология / Н.Н. Мушкамбаров,

133. C.JI. Кузнецов. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2003.-544 с.

134. Наградова, Н.К. Исследование свойств фосфорилирующей D-глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы / Н.К. Наградова //Биохимия. 2001. - Т.66, № 10. - С.1323-1334.

135. Наградова, Н.К. Мультидоменная организация ферментов / Н.К. Наградова, В.И. Муронец // Итоги науки и техники. Биологическая химия. 1991. - Т. 38. - С. 161.

136. Налетова, И.Н. Стимулирование агрегации белковнефункционирующим шаперонином GroEL / И.Н. Налетова, Е.В. Шмальгаузен, И.Н. Шалова и др. // Биомедицинская химия. — 2006.- Т. 52, №5.-С. 518-524.

137. Невзорова, Т.А. Механизм действия ДНК-гидролизующих антител к ДНК из крови больных системной красной волчанкой /Т.А. Невзорова, В.Г. Винтер, О.А. Коновалова, М.Х. Салахов // Биохимия. 2006. -Т.71, №11. - С. 1524-1533.

138. Недосугова, JI. Антиоксидантные эффекты биофлавоноида диквертина / Л. Недосугова // Врач. 2006. - № 7. - С. 42-46.

139. Немухин, А.В. Моделирование свойств и реакций биомолекулярных систем комбинированными методами квантовой и молекулярной механики / А.В. Немухин, Б.Л. Григоренко, ЕМ. Епифановский, А.А. Московский // Рос. Хим. Журн. 2006. -Т. L, № 2. - С. 45-52.

140. Никитина, B.C. Флавоноиды листьев малины и ежевики и их антиоксидантная активность / в.С. Никитина, Г.В. Шендель, А.Я. Герчиков, Н.Б. Ефименко // Химико-фармацевтический журнал. — 2000. -Т. 34, № п.-С. 25-27.

141. Николаева, И.Г. Антиоксидантная активность нооропного средства «Полиноофит» и изучение его флавоноидного состава / И.Г. Николаева, Л.Д. Дымшеева, С.М. Николаев, Г.Г. Николаева // Химико-фармацевтический журнал. 2007. - Т. 41, № 10. - С. 22-25.

142. Новиков, В. В. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы / В. В. Новиков, А. Ю. Барышников, А. В. Караулов // Иммунология. 2007. - № 4. - С. 249-254.

143. Нужный, В.П. Вино в жизни и жизнь в вине / В.П. Нужный. Москва, 2001.-396 с.

144. Ньюсхолм, Э. Регуляция метаболизма / Э. Ньюсхолм, К. Старт //М.: Издательство «Мир». 1977. с.407.

145. Оганесян, Э.Т. Гепатозащитное действием флавоноидов вики изменчивой и вики обрубленной / Э.Т. Оганесян, Е.Г. Доркина, О.А.аедреева и др. // Фармация. 2004. - № 4. - С. 41-42.

146. Октябрьский, О.Н. Редокс-регуляция клеточных функций / О.Н. Октябрьский, Г.В. Смирнова // Биохимия. 2007. - Т. 72, В. 2. - С. 158174.

147. Островский, Ю.М. Биологический компонент в генезисе алкоголизма / Ю.М. Островский, В.Н. Сатановская, М.Н. Садовник- Минск: Наука и техника, 1986.-94 с.

148. Пальцев, М.А.Межклеточные взаимодействия / М.А. Пальцев, А.А. Иванов. М.: Медицина, 1995. - 224 с.

149. Пальцев, М.А. Межклеточные взаимодействия / М.А. Пальцев, А.А. Иванов, С.Е. Северин- М.: Медицина, 2003. 287 с.

150. Панченко, Л.Ф. Метаболизм энкефалинов при различных функциональных и патологических состояниях организма / Л.Ф. Панченко, Н.В. Митюшина, Н.В. Фирстова, М.Т. Генгин //Вопр.мед.химии. 1999. - №4. - С.311-318.

151. Пауков, B.C. Алкоголизм и алкогольная болезнь / B.C. Пауков, Н.Ю. Беляева, Т.М. Воронина // Терапевт. Архив. 2001. - № 2. - С. 65-67.

152. Песков, С.А. Биологические маркеры раннего развития пневмокониозов / С.а. Песков. Автореф. дис. .канд. мед. наук. — Новосибирск, 2000. 23 с.

153. Петров, В.И. Российская энциклопедия биологически активных добавок / В.И. Петров, А.А. Спасов- М., 2007. С. 508-757.

154. Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров // М.: Медицина. 1987. — с. 415.

155. Пивоварчик, М.В. Изменение дофаминовой, серотониновой и опиоидной нейромедиаторных систем при адаптации мозга крыс к длительному действию этанола / М.В. Пивоварчик // Укр. биохим. ж. — 2004.-Т. 76, 3 2.-С. 93-97.

156. Пинегин, Б. В. NK-клетки: свойства и функции / Б. В. Пинегин, С. В. Дамбаева

157. Иммунология. 2007. - № 2. - С. 105-114.

158. Пичугина, Л. В. Внутриклеточные цитокины: проблемы детекции и клиническое значение / Л. В. Пичугина, Б. В. Пинегин // Иммунология.- 2008. № 1.-С. 55-62.

159. Платонов, А.Е. статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов— М.: Изд-во РАМН, 2000. 52 с.

160. Плетень, А.П. Шапероны и формирование устойчивых к протеазам амилоидных структур / А.П. Плетень // Сборник материалов VI Симпозиума «Химия протеолитических ферментов». М., 2007. - С. 17.

161. Плетень, А.П. Получение антител. Индуцирующих переход ферментов в неактивное конформационное состояние / А.П. Плетень, Е.И. Арутюнова // Материалы IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов. Новосибирск, 2008. - С. 440.

162. Плиев, Т.Н. Молекулярная спектроскопия в 5-ти томах / Т.Н. Плиев. -Владикавказ: «Иристон», 2001. Т. 1. - 544 с.

163. Плотникова, М.Б. Лекарственные препараты на основе диквертина / М.Б. Плотникова, Н.А.Тюкавкина, Т.М. Плотникова- Томск: Изд-во1. Том. Ун-та, 2005. 228 с.

164. Поглазов, Б.Ф. Организация биохимических систем / Б.Ф. Поглазов // Биохимия. 1996. - Т.61, № 11. - С. 1941 -1947.

165. Попов, В.Н. Индукция пероксисомальной изоформы малатдегидрогеназы малатдегидрогеназы в печени крыс при пищевой депривации /В.Н. Попов, С.В. Волвенкин, Т.А. Косматых и др. // Биохимия. Т.66, № 5. — С.617-623.

166. Попов, Е.М. Структурно-функциональная организация природных пептидов / Е.М. Попов // Успехи химии. 1994,- Т.63, №11.- С. 10041026.

167. Порошенко, Г. Рецепт на лекарство? Предъявите «метаболический паспорт»! / Г. Порошенко // Наука и жизнь. 2007. - № 5. - С. 53-56.

168. Поспелова, M.JI. Антигипоксантное и антиоксидантное действие лекарственных растений как обоснование их применения при деструктивных заболеваниях мозга / M.JI. Поспелова, О.Д. Барнаулов // Физиология человека. 2000. - Т. 26, № 1. - С. 100-106.

169. Потапович, А.И. Сравнительное исследование антиоксидантных свойств и цитопротекторной активности флавоноидов / А.И. Потапович, В.А. Костюк // Биохимия. 2003. - Т. 68, вып. 5. - С. 632638.

170. Пятин, В.Ф. Ростральные вентромедуллярные отделы: дыхательный ритмогенез и центральная хемочувствительность дыхания / В.Ф. Пятин, B.C. Татариников, O.JI. Никитин и др. // Успехи физиологических наук. 1994. - № 4, Т. 25. - С. 33.

171. Пятин, В.Ф. Генерация дыхательного ритма / В.Ф. Пятин, O.JI. Никитин- Самара, 1998. 96 с.

172. Пятин, В.Ф. Генерация дыхательного ритма / В.Ф. Пятин, O.JI. Никитин- Самара, 2004. 126 с.

173. Раевский, К.С. Оксид азота новый физиологический мессенджер: возможная роль при патологии центральной нервной системы / К.С.

174. Раевский // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1997. - №5. — С.484-490.

175. Райгородская, Д.И. Изменение каталитических свойств митохондриальных моноаминоаксидаз при аудиогенной эпилепсии в эксперименте / Д.И. Райгородская, А.Е. Медведев, В.З. Горкин и др. // Вопросы мед. химии. 1991. - Т.37, №2. - С.46-49.

176. Реброва, О. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О. Реброва М: МедиаСфера, 2002. - 213 с.

177. Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейбл. М., 2000. - 206 с.

178. Русанов, А.И. Нанотермодинамика: химический подход // Рос. Хим. Журн. -2006. -Т. L, №2.-С. 145-151.

179. Рустамова, Р.П. Влияние некоторых флавонов на энергетический метаболизм митохондрий / Р.П. Рустамова, Г.М. Иргашева, З.А. Хушбактова и др. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. — 2006. № 2. — С. 16-20.

180. Самарин, С.Н. Белки семейства WASP — универсальные посредники между цитоскелетом и сигнальными путями клетки / С.Н. Самарин // Биохимия.-2005.-Т. 70, вып. 12.-С. 1587-1592.

181. Сеидов, К.С. Клинико-диагностическое значение простагландина Е2 при заболеваниях предстательной железы / К.С. Сеидов // Успехи современного ествествознания. — 2004. № 1. — С. 83.

182. Селевич, М.И. Биохимические эффекты солянки холмовой на некоторые метаболические показатели мозжечка крыс после введения этанола и его отмены / М.И. Селевич, В.В. Лелевич, А.Г. Винницкая и др. // Химико-фармацевт. Журнал. 2000. Т.34, №6. - С.26-28.

183. Сердюк, А.П. Влияние алкоголя на основные этапы обратного транспорта холестерина / А.П. Сердюк, В.А. Метельская, И.Н. Озерова и др. //Биохимия. 2000. - Т. 54, вып. 11.-С. 1551-1557.

184. Скачков, Ю.В. Полифункциональность науки / Ю.В. Скачков // "Вопросы философии". 1995. №11.- С.21-27.

185. Скулачев, В. П. Кислород и явления запрограммированной смерти / В. П. Скулачев // Компьютера. 2001. - №7.

186. Скулачев, В.П. Попытка биохимиков атаковать проблему старения: «Мегапроект» по проникающим ионам. Первые итоги и перспективы / В.П. Скулачев // Биохимия. Т. 72, вып. 12.-С. 1700-1714.

187. Соколов, А.В. Влияние лактоферрина на ферроксидазную активность церулоплазмина / А.В. Соколов, М.О. Пулина, Е.Т. Захарова, М.М. Шавловский, В.Б. Васильев // Биохимия. 2005. - Т.70, № 9. - С. 12311236.

188. Сокольская, Т.А. Комплексная переработка плодов расторопши пятнистой и создание на ее основе препарата «Силимар» / Т.А. Сокольская // Хим.-фарм. Журнал. 2000. - № 9. - С. 27-30.

189. Степуро, А.И. Роль тиольной формы тиамина в обмене оксида азота / А.И. Степуро, Т.П. Пилецкая, И.И. Степуро // Биохимия. 2005. - Т.70, №3.-С. 416-429.

190. Степуро, И.И. Восстановление метгемоглобина и феррицитохрома с гликозилированными аминокислотами и альбумином / И.И. Степуро,

191. Н.А. Чайковская, В.П. Водоевич, В.В. Виноградов // Биохимия. 1997. - Т. 62, вып. 9. - С. 1130-1136.

192. Титов, Л.П. «Иммунология. Терминологический словарь» / Л.П. Титов. Минск, 2002. - 510 с.

193. Тишков, В.И. Оксидаза D-аминокислот: структура, механизм действия и практическое применение / В.И. Тишков, С.В. Хороненкова

194. Биохимия. Т.70, № 1. - С.51-67.

195. Тутельян, В.А. Применение фитоэстрогенов в медицине / В.А. Тутельян, М.С. Павлючкова, А.В. Погожева, С.А. Дербенева // Вопросы питания. 2003. - № 2. - С. 48-51.

196. Тюлина, О.В. Влияние этанола на гемолитическую устойчивость эритроцитов / О.В. Тюлина, М.Дж. Хантельман, В.Д. Прокопьева и др. // Биохимия. 2000. - Том 65, № 2. - С. 218-224.

197. Уайт, А. Основы биохимии В трёх томах / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман //М.: «МИР».-1981.-Т.2.-С.577-592.

198. Ульянкина, Т.И. Зарождение иммунологии / Т.И. Ульянкина. М., 1994.-319 с.

199. Фарафонова, Т.Е. Возможные клеточные рецепторы вируса гепатита С / Т.Е. Фарафонова, Л.В. Олеина, Е.Ф. Колесанова // Биомедицинская химия. 2008. - Т. 54, вып. 2. - С. 154-166.

200. Федин, В.П. Кукурбитурил: играем в молекулы / В.П. Федин, О.А. Герасько // Природа. 2002. - №8. - С. 8-11.

201. Фильченков, А.А. Каспазы: регуляторы апоптоза и других клеточных функций / А.А. Фильченков // Биохимия. 2003.- Т.68, № 4. - С.453-466.

202. Хавинсон, В.Х. Тканеспецифическое действие пептидов в культуре тканей крыс разного возраста / В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин, Н.И. Чалисова // Рос.биомед.журнал. Т.З, №11. - С.278

203. Хаитов, P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. М., 2000. - 429 с.

204. Харченко, Е. П. Иммунное узнавание и иммунная привилегия / Е. П. Харченко // Иммунология. 2008. - № 2. - С. 118-124.

205. Харченко, Н.К. Альдегиддегидрогеназная активность и содержание дофамина в некоторых отделах мозга крыс, предпочитающих и отвергающих этанол / Н.К. Харченко // Укр. биохим. ж. — 2000. № 1. -С. 75-81.

206. Хипкинс, А.Р. Каронозин и карбонильные группы белка: возможная взаимосвязь / А.Р. Хипкинс // Биохимия. — 2000. — Т. 65. вып. 7. — с. 907-916.

207. Хомутов, А.Е. Полифункциональные свойства гепарина//Материалы конференции «Структура и функция протеолитических ферментов» / А.Е. Хомутов, М.Б. Звонков, М.Е. Пахомова Москва, 2000. — С. 128132.

208. Цаплина, Л.А. Потеря циклооксигеназной и пероксидазной активностей простагландин-Н-синтазы в процессе катализа / Л.А. Цаплина, П.В. Вржещ // Биохимия. 2007. - Т.72, № 6. - С. 774-784.

209. Чеботарева, Н.А. Биохимические молекулярного краудинга / Н.А. Чеботарева, Б.И. Курганов, Н.Б. Ливанова // Биохимия. 2004. - Т.69,№ 11. — С.1522-1536.

210. Черепкова, О.А. Фактор ингибирования миграции макрофагов:выделение из мозга быка / О.А. Черепкова, Е.М. Лютова, Б.Я. Гурвиц // Биохимия. 2006. - Т.71, №1. - С.90-96.

211. Шайтан, К.В. Динамический молекулярный дизайн био- и наноструктур / К.В. Шайтан, Е.В. Турлей, д.Н. Голик и др. // Рос. хим. ж. 2006. - Т. L, № 2. - С. 53-65.

212. Ширшев, С.В. Роль сАМР и циклооксигеназы нейтрофилов в гонадотропинзависимой регуляции пролиферативной активности Т-лимфоцитов / С.В. Ширшев, Е.М. Куклина // Биохимия. 2001. - Т.66, №9.-С. 1221-1226.

213. Ширшев, С.В. Роль репродуктивных гормонов в контроле апоптоза Т-лимфоцитов / С.В. Ширшев, Е.М. Куклина, А.А. Ярилин // Биохимия. 2003. Т.68, № 4. - С. 577-583.

214. Ширяев, Н. В. Эволюционное прошлое IgG млекопитающих в свете современных знаний о структуре и функционировании данной белковой молекулы / Н. В. Ширяев // Иммунология. 2006. - № 1. - С. 58-60.

215. Шульпекова, Е.И. Флавоноиды расторопши пятнистой в лечении заболеваний печени / Е.И. Шульпекова // Рус.мед.журн. Человек и лекарство.- 2004.-№5.- С.248-250.

216. Щуцкая. Ю.Ю. Исследование глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы из сперматозоидов человека / Ю.Ю. Щуцкая, Ю.Л. Элькина, М.Л. Куравский и др.//Биохимия. 2008. - Т.73, № 2. - 228-236.

217. Элиот, В. Биохимия и молекулярная биология / В. Эллиот, Д. Элиот // М.: МАИК «Наука/Интерпериодика». 2002. - с.444.

218. Яковлев, Г.П. Энцеклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения / Г.П. Яковлев, К.Ф. Блинова. -Санкт-Петербург: СпецЛит, 2002. — 407 с.

219. Ярилин, А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. М., 1999. - 608 с.

220. Яхно, Н.Н. Болезни нервной системы: в 2-х т. / Н.Н. Яхно, Д.Р. Штульман. М., 2003. - 509 с.

221. Abcouwer, S.F. Effect of IL-lbeta on survival and energy metabolism of R28 and RGC-5 retinal neurons / S.F. Abcouwer, S. Shanmugam, P.F. Gomez et al. // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008. - Vol. 49, N 12. - P. 5581-5592.

222. Ahmad, A. Evaluation of hepatoprotective potential of jigrine post-treatment against thioacetamide induced hepatic damage / A. Ahmad, K.K. Pillai, A.K. Najmi et al. // J. Ethnopharmacol. 2002. - Vol. 79. - # 1. - P. 35-41.

223. Ahmed, B. Hepatoprotective activity of plants belonging to the Apiaceate and the Euphorbiaceae family / B.Ahmed, T. Alam, M. Varshney, S.A. Khan // J. Ethnopharmacol. 2002. - Vol. 79, N 3. - P. 313-316.

224. Andres M.T., Viejo-Di'az M., Fierro J.F.

225. Human lactoferrin induces apoptosis-like cell death in Candida albicans: critical role of K+-channel-mediated K+ efflux.// Antimicrob Agents Chemother. 2008. - Vol. 52, N 11. - P. 4081-4088.

226. Antonsson, B. Bax oligomerization is required for channel-forming activityin liposomes and to trigger cytochrome с release from mitochondria / B. Antonsson, S. Montessuit, S. Lauper et al. // Biochem J.- 2000. — Vol. 345, Pt 2. — P. 271-278.

227. Arnold, S.Gender-specific regulation of mitochondrial fusion and fission gene transcription and viability of cortical astrocytes by steroid hormones / S. Arnold, G.W. de Araujo, C. Beyer // J Mol Endocrinol. 2008. - Vol. 41, N5.-P. 289-300.

228. Asghar, Z. Evaluation of antioxidant properties of silymarin and its potential to inhibit peroxyl radicals in vitro / Z. Asghar, Z. Masood // Рак J Pharm Sci. 2008. - Vol. 21, N 3. - P.249-254.

229. Baba, S. Plasma LDL and HDL cholesterol and oxidized LDL concentrations are altered in normo- and hypercholesterolemic humans after intake of different levels of cocoa powder/ S. Baba, M. Natsume, A. Yasuda //JNutr. -2007. Vol. 137, N6.-P. 1436-1441.

230. Bainbridge, J.L. Elucidating the mechanism of action and potential interactions of MAO-B inhibitors / J.L. Bainbridge, R.L. Page., J.M. Ruscin // Neurol Clin. 2008. - Vol. 26, N 3. - S. 85-96.

231. Barczyk, K. Serum cytochrome с indicates in vivo apoptosis and can serve as a prognostic marker during cancer therapy / K. Barczyk, M. Kreuter, J. Pryjma et al. // Int J Cancer. 2005. - Vol. 116, N 2. - P. 167-173.

232. Beldjoudi, N. Flavonoids from Dalbergia louvelii and their antiplasmodial activity / N. Beldjoudi, L. Mambu , M. Labaied et al. // J Nat Prod. 2003. -Vol. 66, N 11.-P. 1447-1450.

233. Bergmeyer, H.U. a-oxoglutarate. InA Methods of Enzymatic analysis ed. By H.U. Bergmeyer Ac. Press N.Y., 1986. P. 324-327.

234. Bhave Sanjiv, V. Ethanol sensitivity of NMD A receptor function in developing cerebellar granule neurons / V. Bhave Sanjiv, D. Snell Lawrence, B. Tabakoff, L. Hoffman // Eur. J. pharmacol. 1999. - Vol. 369, N2.-P. 247-259.

235. Bialkowska, K. Interactionof spectrin with phospholipids is inhibited by isolated erythrocyte ankyrin, a monolayer study / K. Bialkowska, I. Lesniewski, M. Nietulyc et al. // Cell. And Mol. Len. 1999. - Vol. 4, N 2. -P. 203-218.

236. Bigelow, R.L. The green tea catechins, (-)-Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) and (-)-Epicatechin-3-gallate (ECG), inhibit HGF/Met signaling in immortalized and tumorigenic breast epithelial cells / R.L. Bigelow, J.A. Cardelli

237. Oncogene.-2006.-Vol. 25, N 13.-P. 1922-1930.

238. Binette, T.M. Thrombin-thrombomodulin connects coagulation and fibrinolysis: more than an in vitro phenomenon / T.M. Binette, F.B. Taylor, G. Peer, L. Bajzar

239. Blood. 2007. - Vol. 110, N9.-P. 3168-3175.

240. Bournazou, I. Apoptotic human cells inhibit migration of granulocytes via release of lactoferrin /1. Bournazou, J.D. Pound, R. Duffin et al. // J Clin Invest. -2008. pii: 36226. doi: 10.1172/JCI36226.

241. Biichner, N. Pathophysiology of hypertension: what's new? / N. Btichner, O. Vonend, L.C. Rump // Herz. 2006. - Vol. 31, N 4. - P. 294-302.

242. Budzinski, J.W. Modulation of human cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) and P-glycoprotein (P-gp) in Caco-2 cell monolayers by selected commercial-source milk thistle and goldenseal products / J.W. Budzinski,

243. V.L. Trudeau, C.E. Drouin // Can J Physiol Pharmacol. 2007. - Vol. 85, N 9.-P. 966-978.

244. Calvo, T.R. Constituents and antiulcer effect of Alchornea glandulosa: activation of cell proliferation in gastric mucosa during the healing process / T.R. Calvo, Z.P. Lima, J.S. Silva et al. // Biol Pharm Bull. 2007. - Vol. 30, N3.-P. 451-459.

245. Cazarolli, L.H. Flavonoids: prospective drug candidates / L.H. Cazarolli, L. Zanatta, E.H. Alberton // Mini Rev Med Chem. 2008. - Vol. 8, N 1. - P. 1429-1440.

246. Chan, S.C. Three new flavonoids and antiallergic, anti-inflammatory constituents from the heartwood of Dalbergia odorifera / S.C. Chan, Y.S. Chang, J.P. Wang et al. // Planta Med. 1998. - Vol. 64, N 2. - P. 153-158.

247. Chen, F. Effects of downregulation of inhibin alpha gene expression on apoptosis and proliferation of goose granulosa cells / F. Chen, X. Chen, G. Liu et al. // J Genet Genomics. 2007. - Vol. 34, N 12. - P. 1106-1113.

248. Chen, M. Initiator caspases in apoptosis signaling pathways / M. Chen ., J. Wang // Apoptosis. 2002. - Vol. 7, N 4. - P. 313-319.

249. Chi, S.W. Solution structure and membrane interaction mode of an antimicrobial peptide gaegurin 4 / S.W. Chi, J.S. Kim, D.H. Kim et al. // Biochem Biophys Res Commun. 2007. - Vol. 352, N 3. - P. 592-597.

250. Cho, E.Y. Lysophosphatidylserine-induced functional switch of human cytochrome P450 1A2 and 2E1 from monooxygenase to phospholipase D / E.Y. Cho, C.H. Yun, H.Z. Chae et al. // Biochem Biophys Res Commun. -2008. Vol. 376, N 3. - P. 584-589.

251. Cho, Y. Structural and functional characterization of a secreted hookworm

252. Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) that interacts with the human MIF receptor CD74 / Y. Cho, B.F. Jones, J J. Vermeire et al. // J Biol Chem. 2007. - Vol. 282, N 32. - P. 23447-23456.

253. Cook, N.D. Purification and characterization of the rotenone-insensitive NADH dehydrogenase of mitochondria from Arum maculatum / N.D. Cook, R. Cammack // Eur J Biochem. 1994. - Vol. 141, N 3. - P. 573577.

254. Cooper, S.A. Renin-angiotensin-aldosterone system and oxidative stress in cardiovascular insulin resistance / S.A. Cooper, A. Whaley-Connell, J. Habibi et al. // Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2007. - Vol. 293, N 4. -P. 2009-2023.

255. Cunningham-Rundles, S. Mechanisms of nutrient modulation of the immune response / S. Cunningham-Rundles, D.F. McNeeley, A. Moon // J Allergy Clin Immunol. -2005. -N 115. -Vol. 6.-P. 1119-1128.

256. Deutsches, P. Berlin, 1978, 8 (DAB 8). 995 S.

257. Dewar, D. The pathogenesis of coeliac disease / D. Dewar, S.P. Pereira , P J.

258. Ciclitira // Int J Biochem Cell Biol. 2004. - N 36. - Vol. 1. - P. 17-24.

259. Dieterich, W. Pathomechanisms in celiac disease / W. Dieterich, B. Esslinger, D. Schuppan // Int Arch Allergy Immunol. 2003. -N 132. — Vol. 2.-P. 98-108.

260. Dirnagl, U. Pathobiology of ischaemic stroke: An integrated view / U. Dirnagl, C. Iadecola, M.A. Moskowitz // Trends Neurosci. — 1999. — V. 22. —P. 391-397.

261. El-Mahdy, M.A. Thymoquinone induces apoptosis through activation of caspase-8 and mitochondrial events in p53-null myeloblastic leukemia HL-60 cells / M.A. El-Mahdy, Q. Zhu, Q.E. Wang et al. // J Cancer. 2005. -Vol. 117, N 3. — P. 409-417.

262. El-Nabi Kamel, M.A. Effect of toluene exposure on the antioxidant status and apoptotic pathway in organs of the rat / M.A. El-Nabi Kamel, M. Shehata // Br J Biomed Sci. 2008. - Vol. 65, N 2. - P. 75-79.

263. Errchidi, S. Permanent release of noradrenaline modulates respiratory frequency in the newborn rat: an in vitro study / S. Errchidi, G. Hialaire, R Monteau // Neurosci. Lett. 1989. - Vol. 104. - P. 303-312.

264. Fawzy, G.A. Antidiabetic and antioxidant activities of major flavonoids of Cynanchum acutum L. (Asclepiadaceae) growing in Egypt / G.A. Fawzy, H.M. Abdallah, M.S. Marzouk eeet al. // Z Naturforsch C.-2008. Vol. 63,N9.-P. 658-662.

265. Flora, К. Milk thistle (Silybum marianum) for the therapy of liver disease / K. Flora, M. Hahn, H. Rosen, K. Benner // Am. J. Gastroenterol. 1999. -Vol. 93, N2.-p. 139-143.

266. Fox, G.B. Sustained sensory/motor and cognitive deficits with neuronal apoptosis following controlled cortical impact brain injury in the mouse / G.B. Fox., L. Fan, R.A. Levasseur, A.I .Faden // J. Neurotrauma— 1998. — V. 15. —P. 599-614.

267. Gaffield, W. Circular dichroism, optical rotatory dispersion and absolute configuration of flavonones, 3-hydroxyflavanones and their glycosides / W. . Gaffield // Tetrahedron. 1970. - Vol. 26, N 17. - P. 4093-4108.

268. Garcia-Segura, L.M. Role of astroglia in estrogen regulation of synaptic plasticity and brain repair / L.M. Garcia-Segura, F. Naftolin, J.B. Hutchison et al. // JNeurobiol. 1999. - Vol. 40, N 4. - P. 574-584.

269. Gazak, R. Silybin and silymarin—new and emerging applications in medicine / R. Gazak D. Walterova, V. Kren // Curr Med Chem. 2007. -Vol. 14,N3. -P. 315-338.

270. Giese, L. A. Milk thistle and the treatment of hepatitis / L. A. Giese // Gastroenterol. Nurs. 2001. - Vol. 24, N 2. - P. 95-97.

271. Goryunov, A.S. H/D isotope effects on protein hydration and interaction in solution // Gen Physiol Biophys. 2006. - Vol. 25, N 3. - P. 303-311.

272. Guimaraes, C.A. Alternative programs of cell death in developing retinaltissue / C.A. Guimaraes, M. Benchimol, G.P. Amarante-Mendes, R. Linden // J Biol Chem. 2003. - Vol. 278, N 43. - P. 41938-41946.

273. Gupta, O.P. Anti-inflammatory and antiarthritic activities of silymarin acting through inhibition of 5-lipoxygenase / O.P. Gupta, S. Sing, S. Bani et al. // Phytomedicine. 2000. - Vol. 7, N 11. - P. 21-24.

274. Hagymasi, K. Extrahepatic biliary obstruction: can sylimarin protect liver function / K. Hagymasi, I. Kocsis, A. Lugasi, J. Feher, A. Blazovics // Phytother. Res. 2002. - Vol. 16, suppl. 1. - P. 78-80.

275. Hamada, O. Respiration in vitro: I. Spontaneos activity / O. Hamada, E. Garcia-Rill, R.D. Skinner // Somatosensory and Motor Reserch. 1992. — Vol. 9.-P. 313-326.

276. Hamed, M.S. Dark chocolate effect on platelet activity, C-reactive protein and lipid profile: a pilot study /M.S. Hamed, S. Gambert, K.P. Bliden et al. // South Med J. 2008. - Vol. 101, N 12.-P. 1203-1208.

277. Harborne, J.B. The flavonoids: Advances and Research / J.B. Harborne, T.J. Mabry. London: Chapman and Hall, 1982. - 744 p.

278. Harborne, J.B. The flavonoids / J.B. Harborne, T.J. Mabry, H. Marby -London: Chapman and Hall, 1975. 1204 p.

279. Hayashi, M. Acute effect of simultaneous in the locus coeruleus in rats / M. Hayashi, T. Nakai, t. Bandoh, K. Hoshi // Eur. J. pharmacol. 2003. - Vol. 462, N 1-3.-P. 61-66.

280. Heredia, V.V. Alanine scanning mutagenesis of the testosterone binding site of rat 3 alpha-hydroxysteroid dehydrogenase demonstrates contact residues influence the rate-determining step / V.V. Heredia, W.C. Cooper, R.G.

281. Kruger et al. // Biochemistry. 2004. - Vol. 43, N 19. - P. 5832-5841.

282. Hollman, P.C. Absorption, metabolism and health effects of dietary flavonoids in man / P.C. Hollman, M.B. Katan // Biomed Pharmacother. -1997.-Vol. 81, N8.-P. 305-310.

283. Horvath, M.E. Effect of silibinin and vitamin E on restoration of cellular immune response after partial hepatoectomy / M.E. Horvath, R. Gonzalez-Cabello, A. Blazovics et al. // J. Ethnopharmacol. 2001. - Vol. 77, N 2-3. -P. 227-232.

284. Hsiao Shu-Huei. Effects of early postnatal ethanol intubation on GABAergic synaptic proteins / Hsiao Shu-Huei, R. Alan, N. Sang-Soep et al.//Dev. Brain res. 2002. - Vol. 138, N 2.-P. 177-185.

285. Ни, B. The Hsp70 chaperone system maintains high concentrations of active proteins and suppresses ATP consumption during heat shock / В. Ни , M. Tomita // Syst Synth Biol. 2007. - Vol. 1, N 1. - P. 47-58.

286. Hu, S.W. Association of cytochrome P450 1B1 gene expression in peripheral leukocytes with blood lipid levels in waste incinerator workers / S.W. Hu, P. Lin, C.C. Chen // Ann Epidemiol. 2008. - Vol. 18, N 10. - P. 784-791.

287. Huttunen, K.M. Cytochrome P450-activated prodrugs: targeted drug delivery / K.M. Huttunen, N. Mahonen, H. Raunio, J. Rautio // Curr Med Chem.-2008.-Vol. 15, N23.-P. 2346-2365.

288. Jelski, W. Alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) in the cancer diseases / W. Jelski, M. Szmitkowski // Clin Chim Acta. 2008. - Vol. 395, N 1-2. - P. 1-5.

289. Jiang, J. Ganoderma lucidum inhibits proliferation of human breast cancer cells by down-regulation of estrogen receptor and NF-kappaB signaling / J. Jiang, V. Slivova, D. Sliva // Int J Oncol. 2006. - Vol. 29, N 3. - P. 695703.

290. Joanny, P. Effect of excitatory amino acids on rat hypothalamic somatostatin secretion in vitro / P. Joanny, J. Steinberg, C. Oliver, M. Grino

291. Peptides.- 1997.-Vol. 18.N7.-P. 1039-1043.

292. Jung, H. Direct Interaction between NM23-H1 and Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) Is Critical for Alleviation of MIF-mediated Suppression of p53 Activity / H. Jung, H.A. Seong, H. Ha // J Biol Chem. -2008. Vol. 283, N 47. - P. 32669-32679.

293. Kain, K. Using yeast to understand protein folding diseases: an interview with Susan Lindquist / K. Kain // Dis Model Mech. 2008. - Vol. 1, N 1. -P. 17-19.

294. Kaindl, A.M. Erythropoietin protects the developing brain from hyperoxia-induced cell death and proteome changes / A.M. Kaindl, M. Sifringer, A. Koppelstaetter et al. // Ann Neurol. 2008. - Vol. 64, N 5. - P. 523-534.

295. Kandaswami, C. The antitumor activities of flavonoids / C. Kandaswami, L.T. Lee, P.P. Lee et al. // In Vivo. 2007. - Vol. 21, N 6. - P.l 172-1196.

296. Kang, S.N. Induction of human promyelocyte leukemia HL-GO cell differentiation into monocytes by silibinin: involvement of protein kinase С / S.N. Kang, M.N. Lee, K.M. Kim et al. // Biochem Pharmacol. 2001. -Vol. 61,N 12.-P. 1487-1495.

297. Kim, S. Regulation of oncogenic transcription factor hTAF(II)68-TEC activity by human glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) / S. Kim , J. Lee, J. Kim // Biochem J. 2007. - Vol. 404, N 2. - P. 197-206.

298. Koh, P.O. Melatonin attenuates the cerebral ischemic injury via the MEK/ERK/p90RSK/bad signaling cascade / P.O. Koh // J Vet Med Sci. -2008.-Vol. 70, N 11. P. 1219-1223.

299. Krasnorutskii, M.A. Antibodies against RNA hydrolyze RNA and DNA / M.A. Krasnorutskii, V.N. Buneva , G.A. Nevinsky // J Mol Recognit.- 2008. -Vol. 21,N5.-P. 338-347.

300. Krueger, K.C. Serotonergic transcription of human FEV reveals direct GATA factor interactions and fate of Pet-1-deficient serotonin neuron precursors / K.C. Krueger, E.S. Deneris // J Neurosci. 2008. - Vol. 28, N 48.-P. 12748-12758.

301. La Regina, G. Synthesis, structure-activity relationships and molecular modeling studies of new indole inhibitors of monoamine oxidases A and В / G. La Regina, R. Silvestri, V. Gatti et al. // Bioorg Med Chem. 2008. -Vol. 16, N 22. - P. 9729-9740.

302. Lambert, Ch.A. RGDS and DGEA-induced Ca2+.i signalling in human dermal fibroblasts / Ch.A., Lambert, P. Mineur, A. Guignandon et al. // Biochim Biophys Acta. 2005. - Vol. 1746, N 1. - P. 28-37.

303. Lasaga, M. The effect of excitatory aminoacids on GABA release from mediobasal hypothalamus of female rats / M. Lasaga, A. De Laurentiis, M. Pampillo et al. // Neurosci Lett. 1998. - Vol. 247, N 2-3. - P. 119-122.

304. Leggio, С. About the albumin structure in solution: cigar Expanded form versus heart Normal shape / C. Leggio, L. Galantini , N.V. Pavel // Phys Chem Chem Phys. 2008. - Vol. 10, N 4. - P. 6741 -6750.

305. Leiter, L.A. Of the renin-angiotensin system and reactive oxygen species Type 2 diabetes and angiotensin II inhibition / L.A. Leiter, R.Z. Lewanczuk. //Am JHypertens.-2005.-Vol. 18, N l.-P. 121-128.

306. Leong, M.K. Selection and characterization of lipase abzyme from phage displayed antibody libraries / M.K. Leong, C. Chen, K.C. Shar , D. Shiuan // Biochem Biophys Res Commun. 2007. - Vol. 361, N3.-P. 567-573.

307. Li, B. Characterization of local geometry of protein surfaces with the visibility criterion / В Li , S Turuvekere, M Agrawal // Proteins. 2008. — Vol. 71, N2.-P. 670-683.

308. Li, T. pharmacogenetics of responses to alcohol and genes that influence alcohol drinking / T. Li // J. Stud. Alcohol. 2000. - Vol. 61, N 1. - P. 512.

309. Ligeret, H. Antioxidant and mitochondrial protective effects of silibinin in , cold preservation-warm reperfusion liver injury / H. Ligeret, A. Brault, D. Vallerand et al. // J Ethnopharmacol. 2008. - Vol. 115, N 3. - P. 507-514.

310. Lima, Z.P. Brazilian Medicinal Plant Acts on Prostaglandin Level and Helicobacter pylori / Z.P. Lima, T.R. Calvo , E.F. Silva et al. // J Med Food. 2008. - Vol. 11, N 4. - P. 701-708.

311. Lin, T.Y. Human lactoferrin exerts bi-directional actions on PC 12 cell survival via ERK1/2 pathway / T.Y. Lin , S.H. Chiou, M. Chen, C.D. Kuo // Biochem Biophys Res Commun. 2005. - Vol. 337, N 1. - P. 330-336.

312. Lipchock, J.M. Monitoring molecular interactions by NMR / J.M. Lipchock, J.P.Loria // Methods Mol Biol. 2009. - Vol. 490. - P. 115-134.

313. Lluis, C. Lactate dehydrogenase binding to the mitohondrial fraction and to a mitochondrial inhibitor as a function of the isoenzymatic composition / C. Lluis//Int. J. Biochem.- 1985.-Vol. 17, N11.-P. 1219-1226.

314. Loeschcke, H.H. Central chemosensitivity and the reaction theory / H.H.1.eschcke 11 J. Physiol. 1982. - Vol. 332. - P. 1-24.

315. Lopez, M.F. Applied proteomics: mitochondrial proteins and effect on function / M.F. Lopez, S. Melov // Circ Res. 2002. - Vol. 90, N 4. - P. 380-389.

316. Lum, J.J. Growth factor regulation of autophagy and cell survival in the absence of apoptosis / J.J. Lum, D.E. Bauer, M. Kong et al. // Cell. 2005. — Vol. 120,N2.-P. 237-248.

317. Lund, I.K. Antibody-mediated Targeting of the Urokinase-type Plasminogen Activator Proteolytic Function Neutralizes Fibrinolysis in Vivo / I.K. Lund, A. Jogi, В R0n0 et al. // J Biol Chem. 2008. - Vol. 283, N 47. - P. 3250632515.

318. Luyx, C.Acute dyspnea in a woman with swelling of the left leg treated with low molecular weight heparine / C. Luyx, D. Vanpee, C. Douala J.B. Gillet //Am JEmergMed.-2001.-Vol. 19, N3.-P. 223-224.

319. Mallam, A.L. Exploring knotting mechanisms in protein folding / A.L. Mallam, E.R. Morris, S.E. Jackson // Proc Natl Acad Sci U S A.- 2008. -Vol. 105, N48.-P. 18740-18745.

320. Malygyn, A. Structural symmetry of the metabolic reaction network. I. Carboxylic acid metabolism /А. Malygin // J Mol Med. 2000. - Vol. 78, N 2.-P. 66-73.

321. Mangala, L.S. Tissue transglutaminase expression promotes cell attachment, invasion and survival in breast cancer cells / L.S. Mangala, J.Y. Fok , I.R. Zorrilla-Calancha et al. // Oncogene. 2007. - N 26. - Vol. 17. - P. 24592470.

322. Marciano, D.C. Genetic and structural characterization of an L201P global suppressor substitution in TEM-1 beta-lactamase / D.C. Marciano, J.M.

323. Pennington, X. Wang et al. // J Mol Biol. 2008. - Vol. 384, N 1. - P. 151164.

324. Marshall, D. Clinical overview of leukocyte adhesion and migration: where are we now? / D. Marshall, D.O. Haskard // Semin Immunol. — 2002. — N 14.-Vol. 2.-P. 133-140.

325. Martens, S. Biochemical properties of dioxygenases involved in flavonoid biosynthesis in parsley: an evolutionary aspect / S. Martens // XII International Conference on Polyphenols. — Helsiniki, 2004. P. 31-32.

326. Mason, J.M. iPEP: peptides designed and selected for interfering with protein interaction and function / J.M. Mason , K. Muller, K.M. Arndt // Biochem Soc Trans. 2008. - Vol. 36, Pt 6. - P. 1442-1447.

327. Masteikova, R. Antiradical activities of the extract of Passiflora incarnate / R. Masteikova, J. Bernatoniene, R. Bernatoniene, S. Velziene // Acta Pol Pharm. 2008. - Vol. 65, N 5. - P. 577-583.

328. Matsumura-Takeda, K. Lactoferrin inhibits platelet production from human megakaryocytes in vitro / K. Matsumura-Takeda, T. Ishida, S. Sogo et al. //• Biol Pharm Bull. 2008. - Vol. 31, N 4. - P. 569-573.

329. Mazzola, J.L. Alteration of intracellular structure and function of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase: a common phenotype of neurodegenerative disorders? / J.L. Mazzola , M.A. Sirover // Neurotoxicology. 2002. - Vol. 23, N 4-5. - P.603-609.

330. Melchionna, T. A protein silencing switch by ligand-induced proteasome-targeting intrabodies / T. Melchionna , A. Cattaneo // J Mol Biol. 2007. -Vol. 374, N3.-P. 641-654.

331. Mickey, B.J. Monoamine oxidase A genotype predicts human serotonin 1A receptor availability in vivo / B.J. Mickey, F. Ducci, C.A. Hodgkinson et al.

332. J Neurosci. 2008. - Vol. 28, N 44. - P. 11354-11359.

333. Middleton, E. The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implication for inflammation, heart disease and cancer / E. Middleton C. Kandaswami T.C. Theoharides // Pharmacol. Rev. — 2000. Vol. 52. - P. 673-751.

334. Miller, R.J. Mitochondria the Kraken wakes! / R.J. Miller // Trends Neurosci. - 1998. - Vol. 21, N 3. - P. 95-97.

335. Min, B.S. Antioxidative Flavonoids from Cleistocalyx operculatus Buds / B.S. Min, C.V. Thu, N.T. Dat et al. // Chem Pharm Bull (Tokyo). 2008. -Vol. 56, N 12.-P. 1725-1728.

336. Min, Y.D. Quercetin inhibits expression of inflammatory cytokines through attenuation of NF-kappaB and p38 МАРК in HMC-1 human mast cell line / Y.D. Min, C.H. Choi, H. Bark et al. // Inflamm Res. 2007. - Vol. 56, N 5. -P. 210-215.

337. Miselli, F. Is autophagy rather than apoptosis the regression driver in imatinib-treated gastrointestinal stromal tumors? / F. Miselli, T. Negri, A. Gronchi et al. // Transl Oncol. 2008. - Vol. 1, n 4. - P. 177-186.

338. Montenau, R. Acetylcholine and central chemosensitivity: in vitro study in the newborn rat / R. Montenau, D. Morin, G. Hilaire // Respir. Physiol. -1990.-Vol. 81.-P. 241-254.

339. Morand, E.F. Macrophage migration inhibitory factor in rheumatoid arthritis / E.F. Morand, M. Leech // PubFront Biosci. 2005. - Vol. 10. - P. 12-22.

340. Morin, D. Compared effects of serotonin on cervical and hypoglossal unspiratory activities: an in vitro study in the newborn rat / D. Morin, R. Montenau, G. Hilaire // Respir. Physiol. 1992. - Vol. 451. - P. 605-629.

341. Mosnier, L.O. Protein С inhibitor regulates the thrombin-thrombomodulin complex in the up- and down regulation of TAFI activation / L.O. Mosnier, M.G. Elisen, B.N.Bouma , J.C. Meijers // Thromb Haemost. 2001. - Vol. 86, N4.-P. 1057-1064.

342. Murakoshi, T. A pharmacological study on respiratory rhythm in the isolated brainstem-spinal cord preparation of the newborn rat / T. Murakoshi, T. Suzue, S. Tamai // Br. J. Pharmacol. — 1985. vol. 86. — P. 95-104.

343. Mussa, B.M. Activation of cholecystokinin (CCK(l)) and serotonin (5-HT(3)) receptors increases the discharge of pancreatic vagal afferents / B.M. Mussa, D.M. Sartor, A J. Verberne // Eur J Pharmacol. 2008. - Vol. 601, N1-3.-P. 198-206.

344. Nagarajan, S. Biocatalytically oligomerized epicatechin with potent and specific anti-proliferative activity for human breast cancer cells / S. Nagarajan, R. Nagarajan, S.J. Braunhut et al. // Molecules. 2008. — Vol. 13,N 11.-P. 2704-2716.

345. Namazi, M.R. A possible pivotal role for transglutaminase 2 in the pathophysiology of cutaneous amyloidosis / M.R. Namazi // Indian J Dermatol Venereol Leprol. 2008. - N 74. - Vol. 5. - P. 521-522.

346. Oh, H. Neutrophil isolation protocol / H. Oh, B. Siano, S. Diamond //J Vis Exp. 2008.-N23.-Vol. 17.-P. 745.

347. Owyang, C. New insights into neurohormonal regulation of pancreatic secretion / C. Owyang., C.D. Logsdon // Gastroenterology. 2004. — Vol. 127, n3.-P. 957-969.

348. Pahg, Hong. Влияние хронического введения алкоголя на активность ключевых гликолитических ферментов у крыс / Pahg Hong, Jun. Zhang, Mao Limei, Yang Nianhong // J. Hyg. Res. 2004. - Vol. 33, N 2. - P. 195197.

349. Paolicchi, A. Glutathione catabolism as a signaling mechanism / A. Paolicchi, S. Dominici, L. Pieri et al. // Biochem Pharmacol. 2002. - Vol. 64, N5-6.-P. 1027-1035.

350. Park, H.H. Flavonoids inhibit histamine release and expression of proinflammatory cytokines in mast cells / H.H. Park, S. Lee, H.Y. Son et al. //ArchPharmRes.-2008.-Vol. 31,N 10.-P. 1303-1311.

351. Penning, T.M. Structure-function relationships in 3alpha-hydroxysteroid dehydrogenases: a comparison of the rat and human isoforms / T.M. Penning, Y. Jin, V.V. Heredia, M. Lewis // J Steroid Biochem Mol Biol. -2003. Vol. 85, N 2-5. - P. 247-255.

352. Petry, J.J. Medicinal herbs: answers and advice, part 1 / J.J. Petry, S.K. Hadley // Hosp. Pract. (Off Ed). 2001. - Vol. 36, N 7. - P. 57-60.

353. PHskova, M. Effects of silymarin flavonolignans and synthetic silybin derivatives on estrogen and aryl hydrocarbon receptor activation / M. PHskova, J. Vondracek, V. Kren et al. //Toxicology. 2005. - Vol. 215, N 1-2.-P. 80-89.

354. Polster, B.M. Mitochondrial mechanisms of neural cell apoptosis / B.M.

355. Polster, G. Fiskum // J Neurochem. 2004. - Vol. 90, N 6. - P. 1281-1289.

356. Polyak, S.J. Inhibition of T-cell inflammatory cytokines, hepatocyte NF-kappaB signaling, and HCV infection by standardized Silymarin / S.J. Polyak, C. Morishima, M.C. Shuhart et al. // Gastroenterology. 2007. — Vol. 132, N5.-P. 1925-1936.

357. Raijgopal, Y. Differential modulation of apoptosis-associated proteins by ethanol in rat cerebral cortex and cerebellum / Y. Raijgopal, C.S. Chetty, M.C. Vemuri // Eur. J. pharmacol. 2003. - Vol. 470, N 3. - P. 117-124.

358. Raines, E.W. Thematic review series: The immune system and atherogenesis. Cytokines affecting endothelial and smooth muscle cells in vascular disease / E.W. Raines, N. Ferri // J Lipid Res. 2005. - N 46 — Vol. 6.-P. 1081-1092.

359. Rantonen, P.J. Correlations between total protein, lysozyme, immunoglobulins, amylase, and albumin in stimulated whole saliva during daytime / P.J. Rantonen, J.H. Meurman // Acta. Odontol. Scand. 2000. -Vol. 58,N4.-P. 160-165.

360. Reid, C. Prevention by a silymarin/phospholipids compound of ethanol — induced social learning deficits in rats / C. Reid, J. Edwards, M. Wang et al. // Planta. Med. 1999. - Vol. 65, N 5. - P. 421-424.

361. Rice-Evans, C. Bioavailability of flavonoids and potential bioactive forms in vivo / C. Rice-Evans, J.P.E. Spencer, H. Schroeter, A.R. Rechner // Drug Metabol. Drug Interact. 2000. - Vol. 17, N 1-4. - P. 291-310.

362. Rippin, J.D. Serious hyperkalaemia after short use of low molecular weight heparin in a diabetic patient / J.D. Rippin, H.S. Hado, N. Green, T.A. Elhadd // Clin Med. 2003. - Vol. 3, N 1. - P. 87.

363. Rose, D.M. Transglutaminase 2 limits murine peritoneal acute gout-likeinflammation by regulating macrophage clearance of apoptotic neutrophils / D.M. Rose, A.D. Sydlaske , A. Agha-Babakhani et al. // Arthritis Rheum. -2006.-N54.-Vol. 10.-P. 3363-3371.

364. Ross, J.A. Dietary flavonoids: bioavailability, metabolic effects, and safety / J.A. Ross, C.M. Kasum // Annu Rev Nutr. 2002. - Vol. 22. - P. 19-34.

365. Ryadnov, M.G. The leucine zipper as a building block for self-assembled protein fibers / M.G. Ryadnov, D. Papapostolou, D.N. Woolfson

366. Methods Mol Biol. 2008. - Vol. 474. - P. 35-51.

367. Sadek, H. Cardiogenic small molecules that enhance myocardial repair by stem cells / H. Sadek, B. Hannack, E. Choe et al. // Proc Natl Acad Sci U S A.-2008.-Vol. 105, N 16.-P. 6063-8.

368. Sakono, M. Formation of highly toxic soluble amyloid beta oligomers by the molecular chaperone prefoldin / M. Sakono, T. Zako, H. Ueda et al. // FEBS J. 2008. - Vol. 275, N 23. - P. 5982-5993.

369. Seelinger, G. Anti-carcinogenic effects of the flavonoid luteolin / G. Seelinger, I. Merfort, U. Wolfle, C.M. Schempp // Molecules. 2008. - Vol. 13, N 10.-P. 2628-2651.

370. Sen Gupta, R. Effect of ascorbic acid supplementation on testicular steroidogenesis and germ cell death in cadmium-treated male rats / R. Sen Gupta, J. Kim, C. Gomes et al. // Mol Cell Endocrinol. 2004 - Vol. 221, N 1-2.-P. 57-66.

371. Sirover, M.A. New insight into an old problem: the functional diversity of mammalian glyceraldehydes-3-phosphat degydrogenase / M.A. Sirover // BiochemJBiophys. Acta. 1999. - Vol.1432. - P. 159-184.

372. Sirover, M.A. New nuclear functions of the glycolytic protein, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, in mammalian cells / M.A.

373. Sirover // J Cell Biochem. 2005. - Vol. 95, N 1. - P.45-52.

374. Slawecki Craig, J. Effect of ethanol on brain neuropeptides in adolescent and adult rats / J. Slawecki Craig, P. Jimenez-Vasquez, A. Mathe, L. Ehlers // J. Stud. Alcogol. 2005. - Vol. 66, N 1. - P. 46-52.

375. Solari, P. Attitude towards heparine-induced thrombocytopenia / P. Solari, M. Bosch // Med Clin (Bare). 2008. - Vol. 131, N 4. - P. 153-155.

376. Song, M.S. Memantine protects rat cortical cultured neurons against beta-amyloid-induced toxicity by attenuating tau phosphorylation / M.S. Song, G. Rauw, G.B. Baker, S. Kar // Eur J Neurosci. 2008. - Vol. 28, N 10. -P. 1989-2002.

377. Spadaro, M. Lactoferrin, a major defense protein of innate immunity, is a novel maturation factor for human dendritic cells / M. Spadaro, C. Caors, P. Ceruti et al. // FASEB J. 2008. - Vol. 22, N 8. - P. 2747-2757.396. Spencer, J.P.

378. Flavonoids: modulators of brain function? / J.P. Spencer // Br J Nutr. — 2008. Vol. 99, Suppl 1. - S. 60-77.397. Spencer, J.P.

379. Food for thought: the role of dietary flavonoids in enhancing human memory, learning and neuro-cognitive performance. / J.P. Spencer // Proc Nutr Soc. 2008. - Vol. 67, N 2. - P. 238-252.

380. Steller, H. Staying alive: apoptosome feedback inhibition / H. Steller // Nat Cell Biol. 2008. - Vol. 10, N 12. - P. 1387-1388.

381. Suleiman, M.S. Mitochondria: a target for myocardial protection / M.S. Suleiman, A.P. Halestrap, E J. Griffiths // Pharmacol Ther. 2001. - Vol. 89, N 1. - P. 29-46.

382. Suzue, T. Respiratory rhythm generation in the in vitro brainstem-spinal cord preparation of the neonatal rat / T. Suzue // J. Physiol. 1984. — Vol. 354.-P. 173-183.

383. Taguchi, H. Autoantibody-catalyzed hydrolysis of amyloid beta peptide / H. Taguchi, S. Planque, Y. Nishiyama et al. // J Biol Chem. 2008. - Vol. 283,1. N8.-P. 4714-4722.

384. Takei, H. Immunohistochemical expression of apoptosis regulating proteins and sex hormone receptors in meningiomas / H. Takei, L.W. Buckleair, S.Z. Powell

385. Neuropathology. 2008. - Vol. 28, N 1. - P. 62-68.

386. Tamura, T. cDNA microarray analysis of lactoferrin expression in nonneoplastic human hepatocyte PH5CH8 cells / T. Tamura, A. Nozaki, K. Abe et al. // Biochim Biophys Acta. 2005. - Vol. 1721, N 1-3. - P. 73-80.404. Tan, Т.Н.

387. Macrophage migration inhibitory factor of the parasitic nematode Trichinella spiralis / Т.Н. Tan, S.A. Edgerton, R. Kumari et al. // Biochem J.-2001.-Vol. 357, Pt 2. — P. 373-383.

388. Tang, X. Phytoestrogens induce differential estrogen receptor beta-mediated responses in transfected MG-63 cells / X. Tang, X. Zhu, S. Liu et al. // Endocrine.-2008.

389. Tenev, T. IAPs are functionally non-equivalent and regulate effector caspases through distinct mechanisms / T. Tenev, A. Zachariou, R. Wilson et al. //Nat Cell Biol.-2005.-Vol. 7, N l.-P. 70-77.

390. Togo, F. Plasma Cytokine Fluctuations Over Time in Healthy Controls and Patients with Fibromyalgia / F. Togo , B.H. Natelson , G.H. Adler et al. // Exp Biol Med (Maywood). 2008. - N Vol. P.

391. Tong, L. Transglutaminase participates in UVB-induced cell death pathways in human corneal epithelial cells / L. Tong , Z. Chen , C.S. De Paiva et al. // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2006. -N 47. - Vol. 10. - P. 4295-4301.

392. Tsuboi, H. Paeoniflorin induces apoptosis of lymphocytes through a redox-linked mechanism / H. Tsuboi, K. Hossain, A.A. Akhand et al. // J Cell biochem.-2004.-Vol. 1, N 1.-P. 162-172.

393. Turgut, F. Antioxidant and protective effects of silymarin on ischemia and reperfusion injury in the kidney tissues of rats / F. Turgut, O. , F. Catal et al. // Int Urol Nephrol. 2008. - Vol. 40, N 2. - P. 453-460.

394. Uwai, К. Electronic effects of para-substitution on acetophenones in the reaction of rat liver 3alpha-hydroxysteroid dehydrogenase / K. Uwai, N. Konno, Y. Yasuta, M. Takeshita // Bioorg Med Chem. 2008. - Vol. 16, N 3.-P. 1084-1089.

395. Uzbekov, R. Clockwise or anticlockwise? Turning the centriole triplets in the right direction! / R. Uzbekov, C. Prigent // FEBS Lett. 2007. - Vol. 581, N7.-P. 1251-1254.

396. Van Meensel, B. Diagnostic accuracy of ten second-generation (human) tissue transglutaminase antibody assays in celiac disease / B. Van Meensel, M. Hiele , I. Hoffman et al. // Clin Chem. 2004. - N 50. - Vol. 11. - P. 2125-2135.

397. Van Meter, K.E. A monoclonal antibody that inhibits translation in Sf21 cell lysates is specific for glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase / K.E. Van Meter, M.K.Stuart // Arch Insect Biochem Physiol. 2008. - Vol. 69, N 3. — P. 107-117.

398. Walsh, I.L. Heteromerous interations among glucolytic enzymes with F-setin effects / I.L. Walsh, H.R. Knull // Biochem of biophys acta. — 1987. — Nl.-p. 83-91.

399. Wan, Y. Effects of cocoa powder and dark chocolate on LDL oxidative susceptibility and prostaglandin concentrations in humans / Y. Wan, J.A. Vinson, T.D. Etherton et al. // Am J Clin Nutr. 2001. - Vol. 74, N 5. - P. 596-602.

400. Wang, T.Y. Preliminary study of total flavonoids from Litsea coreana Levi, on experimental adjuvant-induced arthritis in rats / T.Y. Wang, J. Li , J.F. Ge et al. // Am J Chin Med. 2008. - Vol. 36, N 5. - P. 899-912.

401. Wang, Y. Interaction of methemoglobin with GDA/n-C5HllOH/waterassemblies / Y. Wang, X. Guo, R. Guo // J Colloid Interface Sci. 2008. -Vol. 317, N2.-P. 568-576.

402. Whisstock, J.C. Prediction of protein function from protein sequence and structure / J.C. Whisstock, A.M. Lesk // Q Rev Biophys. 2003. - Vol. 36, N3.-P. 307-340.

403. Williams, R.J. Flavonoids: antioxidants or signalling molecules? / R.J. Williams, J.P. Spencer, C. Rice-Evans // Free Radic Biol Med. 2004. -Vol. 36, N7.-P. 838-849.

404. Yam, A.Y. Defining the TRiC/CCT interactome links chaperonin function to stabilization of newly made proteins with complex topologies / A.Y. Yam, Y. Xia, H.T. Lin et al. // Nat Struct Mol Biol. -2008. vol. 15, N 12. -P. 1255-1262.

405. You, D. A selenium-containing single-chain abzyme with potent antioxidant activity / D. You, X. Ren, Y. Xue et al. // Eur J Biochem. 2003. - Vol. 270, N21.-p. 4326-4331.

406. Zayachkivska, O.S. Influence of plant-originated gastroproteciive and antiulcer substances on gastric mucosal repair / O.S. Zayachkivska, S.J. Konturek , D. Drozdowicz et al. // Fiziol Zh. 2004. - Vol. 50, N 6. - P. 118-127.

407. Zhang, Z. Expression of Human Lactoferrin cDNA Confers Resistance to Ralstonia solanacearum in Transgenic Tobacco Plants / Z. Zhang, D.P. Coyne, A.K. Vidaver, A. Mitra // Phytopathology. 1998. - Vol. 88, N 7. -p. 730-734.

408. Zhang, Z. Transglutaminase-1 regulates renal epithelial cell proliferation through activation of Stat-3 / Z. Zhang , J. Xing , L. Ma et al. // J Biol Chem. 2008.-N Vol. P.

409. Zolotarev, Yu.A. Patent USA N 5026909 from 06.25.1991.

410. Zucchini, S. Fgf-2 overexpression increases excitability and seizure susceptibility but decreases seizure-induced cell loss / S. Zucchini, A. Buzzi, M. Barbieri et al. // J Neurosci. 2008. - Vol. 28, N 49. - P. 13112-13124.

411. Zysk, J. Enuresis and obstipation as symptoms of internal hernia of the intersigmoid recess / J. Zysk, Kotarbinska-Stefanowska, Z. Kalicinski // Pol Przegl Radiol Med Nukl. 1968. - Vol. 32, N 3. - P. 353-367.

Информация о работе

Мякишева, Юлия Валерьевна
доктора медицинских наук
Уфа, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Молекулярные механизмы обеспечения метаболической толерантности в условиях действия веществ растительного и животного происхождения - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы