Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Молекулярно-генетические маркеры предрасположенности к гипертонической болезни населения Республики Татарстан

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Молекулярно-генетические маркеры предрасположенности к гипертонической болезни населения Республики Татарстан"

Газизова Регина Гадельшовна

МОЛЕКУЛЯРНО - ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ НАСЕЛЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ ТАТАРСТАН

03 00 04 - 03 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

иил77325

Казань - 2007

003177325

Работа выполнена на кафедре биохимии ГОУВПО «Казанский государственный университет им В И Ульянова-Ленина»

Научный руководитель- доктор биологических наук, профессор

Ишмухаметова Диляра Галимовна

Официальные оппоненты академик АН РТ, доктор медицинских наук

Зубаиров Дилявер Мирзабдуллович (профессор кафедры биохимии Казанского государственного медицинского университета, г Казань)

кандидат биологических наук Саттарова Лилия Ирековна

(врач высшей категории лаборатории иммунологии межрегионального клинико-диагностического центра, г Казань)

Ведущая организация Казанский институт биохимии и биофизики КНЦ РАН

Защита состоится «20» декабря 2007г в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 212 081 08 при Казанском государственном университете ло адресу 420008, Казань, ул Кремлевская 18, аудитория 209

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке им Н И Лобачевского Казанского государственного университета

Автореферат разослан «19» ноября 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук )/

Абрамова 3 И

Посвящается памяти моему 3 научному руководителю,

безвременно ушедшему из жизни, Аскаровой Альфии Наримановны

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Гипертоническая болезнь является главным фактором риска сердечнососудистых заболеваний и причиной высокой смертности среди лиц среднего и пожилого возраста во всем мире (Kannel, 1986, Шальнова, 2002, Kearney, 2004) Гипертония — это мультифакторное заболевание, развивающееся как нарушение процессов адаптации человека к условиям окружающей среды при наличии генетически предопределенных поломок механизмов регуляции артериального давления (Гогин, 2007) Сложность генетического анализа такого гетерогенного заболевания, каким является гипертоническая болезнь, заключается в большом количестве потенциальных генов-кандидатов, способных участвовать в формировании «генной сети» наследственной предрасположенности (Баранов, 2001, Бочков, 2002) К настоящему времени известно около 150 генов (OMIM, 2007), продукты которых могут прямо или косвенно участвовать в сложном патогенезе гипертонической болезни это, прежде всего, компоненты ренин-ангиотензиновой системы, метаболизма липидов, продукты, обеспечивающие поддержание сосудистого тонуса и структуры сосудов и многие другие Однако в случае заболеваний, относящихся к категории мультифакторных, проявление генетического полиморфизма в значительной мере зависит от ее генофонда и условий жизни каждой конкретной попутяции (Максимов, 2007) Этим и объясняется противоречивость имеющихся в литературе данных по ассоциации полиморфных ДНК-локусов потенциальных генов-кандидатов с риском развития гипертонической болезни.

В последние годы ведутся активные исследования по выявлению ассоциации полиморфных локусов генов-кандидатов с риском развития гипертонической болезни у населения Российской Федерации Генетические маркеры предрасположенности установлены для популяций Республики Башкортостан (Мустафина и др , 2001, 2004), некоторых народов Сибири

(Косянкова, 1999, Карпов, 2004), общей популяции московского региона (Чистяков, 1998, 1999, Бражник, 2003), якутов (Милосердова, 2001) и т д

В Республике Татарстан подобные исследования ранее не проводились В связи с этим, особенно актуальным представляется выявление молекулярно-генетических маркеров предрасположенности к гипертонической болезни в популяциях русских и татар РТ, на основании комплексной оценки связи показателей метаболизма липидов и уровня артериального давления с распределением полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечнососудистых заболеваний

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось выявление ассоциации полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний с риском развития гипертонической болезни у двух популяций, русских и татар Республики Татарстан

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи

1 Исследовать распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний Т174М, М235Т, А-20С гена ангиотензиногена, А2350С гена ангиотензин-превращающего фермента, е2еЗе4 гена аполипопротеина Е, НтсИП— рестрикционного полиморфизма гена липопротеинлипазы, &п192А гена параоксоназы I, еЫ084а/4Ь гена эндотелиальной синтазы окиси азота при гипертонической болезни и у здоровых лиц

2 Провести анализ ассоциации исследуемых полиморфных маркеров с уровнем артериального давления и показателями метаболизма липидов

3 Оценить связь исследуемых полиморфных маркеров с возрастом манифестации гипертонической болезни

Научная новизна

Исследована наследственная предрасположенность к гипертонической болезни по восьми полиморфным локусам генов ренин-ангиотензиновой системы (ангиотензиноген и ангиотензин-превращающий фермент), метаболизма липидов

(аполипопротеин Е, липопротеинлипаза, параоксоназа I) и эндотелиальной синтазы окиси азота у представителей двух этнических групп Республики Татарстан русских и татар

Проведен анализ ассоциации риска развития гипертонической болезни с ранее не исследованными в популяциях России полиморфными маркерами А-20С гена ангиотензиногена и А235СЮ гена ангиотензин-превращающего фермента

Маркерами предрасположенности к гипертонической болезни населения Республики Татарстан в популяции русских являются сочетания аллелей 174М-235Т-(-20С) и Т174-235Т-(-20С) полиморфных локусов Т174М, М235Т, А-20С гена ангиотензиногена, причем наличие данных аллелей способствует более раннему (до 45 лет) проявлению заболевания, в популяции татар с повышенным риском развития гипертонии ассоциирован полиморфизм е2еЗе4 гена аполипопротеина Е

Повышенный уровень содержания липидов в сыворотке крови (общего холестерина и Р-липопротеинов) при гипертонической болезни ассоциирован с полиморфными маркерами Т174М, М235Т гена ангиотензиногена, е2еЗе4 гена аполипопротеина Е, 01п192А^ гена параоксоназы I, гена липопротеинлипазы в популяции русских, е]чЮ84а/4Ь гена эндотелиальной синтазы окиси азота и Нтс! П1 - полиморфизмом у представителей этнической группы татар Практическая значимость

По результатам исследования получены данные, которые могут служить основой для формирования групп повышенного риска гипертонической болезни и разработки дифференцированных программ первичной и вторичной профилактики заболевания у конкретного человека с учетом данных генотипирования в популяциях русских и татар Республики Татарстан 1

Материалы исследования представляют интерес в области генетики популяций, биохимии и медицине и могут быть использованы в учебном процессе на биологических и медицинских факультетах

Положения, выносимые на защиту:

1 Диагностическими маркерами генетической предрасположенности к гипертонической болезни с ранней манифестацией заболевания в популяции русских является полиморфизм гена AGT, в популяции татар - полиморфизм гена АРОЕ

2 Повышенный уровень общего холестерина и Р-липопротеидов в сыворотке крови ассоциирован в популяции русских с полиморфизмом генов AGT, АРОЕ, LPL, PON, в популяции татар с полиморфизмом генов LPL, NOS3

Апробация работы

Основные результаты исследований докладывались на международной научно-практической конференции «Современная техника и технологии в медицине и биологии» (Новочеркасск, 2001), II Российской конференции молодых ученых «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2001), II Всероссийской конференции «Профилактическая кардиология» (Саратов, 2002), Российском национальном конгрессе кардиологов (Санкт-Петербург, 2002), научно-практической конференции «Пути снижения заболеваемости и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний» (Москва, 2003), 6-8 школах-конференциях молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2002-2004), Международной научной конференции «Новая геометрия природы» (Казань, 2003), IX Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2004), научно - практической конференции «Постгеномная эра в биологии и проблемы биотехнологии» (Казань, 2004), международной конференции «Human Genome Meeting HGM2005» (Kyoto, Japan, 2005), а также на ежегодных итоговых научных конференциях Казанского государственного университета в 2001-2005 гг

Публикации. Опубликовано 29 работ, из них по теме диссертации 22

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов, их обсуждения, заключения, выводов, списка

литературы и приложения Работа изложена на 170 страницах машинописного текста, содержит 37 рисунков и 38 таблиц Список использованной литературы включает 243 источника, из них 176 иностранных

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объекты исследования Материалом для исследования служили образцы ДНК 280 представителей двух этнических групп Республики Татарстан русских и татар Этническую принадлежность выясняли путем индивидуального анкетирования, учитывая данные до третьего поколения

Группа пациентов с гипертонической болезнью («ГБ+»), состоящая из 155 человек, сформирована на базе кардиологического отделения больницы скорой медицинской помощи г Казани, с учетом места рождения, национальности, пола, возраста, антропометрических данных (рост, масса тела), показателей углеводного и липидного обменов, анамнестических данных на ближайших кровных родственников Группа популяционного контроля («ГБ-») включала 125 человек, куда вошли пациенты травматологического и хирургического отделений того же стационара без признаков ГБ, сахарного диабета и других системных заболеваний (табл 1)

Табчица 1 Общая характеристика больных гипертонической болезнью («ГБ+») и лиц группы сравнения («ГБ-») в этнических группах русских и татар

Показатель (\liSD*) ГБ + ГБ-

Русские п=86 Татары п=64 Русские п=50 Татары п=75

Возраст, годы 56,8±10,17 54,4±12,8 63,8±12,66 62,6±10,66

Возраст манифестации ГБ, годы 36,8±10,8 41,0±12,0 - -

САД, мм рт ст 149,3±14,6 147,2±19,8 139,3±13,6 142,0±11,0

ДАД, мм рт ст 89,9±9,9 90,4±12,5 86,1±8,35 87,3±9,26

Общий холестерин, ммоль/л 5,11±1,0 5,22±0,91 3,99±0,43 • 4,58±0,46

Р-липопротеины, г/л 4,55±1,42 4,9±1,48 3,08±0,24 3,32±0,31

Глюкоза, ммоль 5,87±1,58 5,85±1,84 4,56±0,36 4,38±0,45

ИМТ, кг/м 2 27,8±4,82 28,65±7,68 23,2±2,61 26,0±2,8

Пол, м/ж 35/51 35/29 25/25 39/36

Наследственная отягощенность,% 62,2 % 60,3 % нет данных нет данных

Наличие ИБС, % 78,8 % 75,4 % нет данных нет данных

Методы исследования. ДНК выделяли из периферической крови стандартным методом фенол/хлороформной экстракции (Маниатис с соавт, 1984) Анализ полиморфных маркеров Т174М, А-20С гена ангиотензиногена (AGT), A2350G гена ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ), е2еЗе4 гена аполипопротеина Е (АРОЕ), HindIII-рестрикционного полиморфизма гена липопротеинлипазы (LPL), Glnl92Arg гена параоксоназы-1 (PON I) осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим рестрикционным анализом (Чистяков и др , 1999, Ishigami et al, 1997, Villard et al, 1996, Hixson et al, 1990 , Ahn et al, 1993, Humbert et al, 1993) Для оценки генетического полиморфизма маркеров М235Т гена AGT и eNOS4a/b гена эндотелиальной синтазы окиси азота (NOS3) использовали локус-специфичные олигонуклеотиды (Pavlovic et al, 1999, Wang et al, 1996) Разделение продуктов амплификации и рестрикции проводили методом электрофореза в ПААГ с последующей окраской гелей нитратом серебра (Budowle В , 1991)

Статистическая обработка полученных данных. Статистическую обработку данных проводили с помощью программного обеспечения Microsoft Excel 2000 и пакета статистических программ "SPSS-14 0" Соответствие полученных распределений частот аллелей и генотипов теоретически ожидаемым оценивали с помощью критерия %2 Для ситуаций с малыми ожидаемыми численностями использовали модификацию критерия ~/.2 с вычислением величины d

Достоверность различий частот аллелей и генотипов исследованных полиморфных маркеров оценивали с использованием точного двустороннего критерия Фишера и 95% доверительного интервала (ДИ) для генерального значения частоты, который вычисляли на основе точной формулы с использованием F-распределения (Животовский, 1991)

Силу ассоциации выражали в значениях относительного риска, рассчитанного как отношение шансов (ОШ), приводя 95% доверительный интервал для отношения шансов (95% ДИ0ш) (Bland, Altman, 2000) При ОШ=1 нет ассоциации, ОШ>1- положительная ассоциация, при ОШ<1 -

отрицательная ассоциация В качестве статистически значимых ассоциаций рассматривали те, для которых доверительный интервал не включал 1

Для сравнения таких показателей, как уровень артериального давления, общий холестерин, p-липопротеины, глюкоза, а также возраст пациента и возраст манифестации гипертонической болезни у носителей разных генотипов применяли непараметрический тест Манна-Уитни для двух независимых выборок (Акберова, 2004) Во всех процедурах статистического анализа достоверными считали различия на уровне значимости р < 0,05

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Ассоциация полиморфных маркеров с риском развития гипертонической

болезни

Гены ренин-ангиотензиновой системы Продукты генов ангиотензиногена (AGT) и ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ) являются ключевыми компонентами ренин-ангиотензиновой системы, которая контролирует уровень артериального давления Нами изучены три полиморфных маркера гена AGT, два из которых находятся в кодирующей части гена (Т174М и М235Т, 2 экзон) и один (А-20С) - в промоторной части В гене АСЕ исследован структурный полиморфизм A2350G в 17 экзоне

Согласно результатам анализа, по всем изученным полиморфным локусам генов AGT и АСЕ наблюдаемое распределение частот генотипов в обеих этнических группах соответствует теоретически ожидаемому (Х2 = 0,0062-2,00, р=0,150-0,94) Однако, по полиморфизму М235Т гена AGT в группе больных в обеих популяциях наблюдается тенденция к увеличению числа гетерозигот (у2 =3,81, Р = 0,052)

Между популяциями русских и татар в группе больных ГБ наблюдаются различия в частоте встречаемости аллелей и генотипов по полиморфным маркерам Т174М, М235Т и А-20С У русских по сравнению с татарами показано увеличение доли аллеля M (15,7% и 8,9% соответственно, Р=0,05) и генотипа ТМ (26,7% и 14,5%, Р=0,104) полиморфизма Т174М, аллеля Т (54,7%

и 40,3%, Р=0,018) и генотипа ТТ (26,7% и 9,7%, Р=0,011) полиморфизма М235Т, аллеля С (24,1% и 10,3%, Р=0,0023) и генотипа АС (36,5% и 17,5%, Р=0,0159) полиморфизма А-20С По полиморфному локусу А2350С гена АСЕ различия в распределении частот аллелей и генотипов между русским и татарами носили случайный характер

Анализ ассоциации полиморфных вариантов генов АвТ и АСЕ с риском развития ГБ (табл 2) показал, что маркером повышенного риска у русских является аллель С (0111=2,5, ДИош 1,22-5,15) и генотип АС (ОШ=2,55, ДИош 1,09-5,94) полиморфизма А-20С гена АОТ, пониженного риска - аллель А (ОШ=0,39, ДИош 0,19-0,81) и генотип АА (ОНИ),34, ДИош 0,15-0,79)

Таблица 2 Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов (%) полиморфных маркеров генов АСТ и АСЕ в группах больных ГБ («ГБ+») и здоровых лиц («ГБ-») среди русских и татар__

Аллели Русские Татары

Генотипы ГБ+ ГБ- Р ОШ ГБ+ ГБ- Р ОШ

Полиморфизм Т174М гена АОТ

Т 84,30 91,67 0,092 - 91,13 87,12 0,324 -

М 15,70 8,33 - 8,87 12,88 -

ТТ 70,93 83,33 0,143 - 83,87 75,76 0,279 -

ТМ 26,74 16,67 0,206 - 14,52 22,73 0,264 -

ММ 2,33 0 0,530 - 1,61 1,52 1,000 -

Полиморфизм М235Тгена АСТ

М 45,35 56,00 0,102 - 59,68 56,7 6 0,711 -

т 54,65 44,00 - 40,32 43,24 -

мм 17,44 32,00 0,058 - 29,03 21,03 0,849 -

мт 55,81 48,00 0,476 - 61,29 59,46 0,861 -

тт 26,74 20,00 0,413 - 9,68 13,51 0,597 -

Полиморфиз м А-20С гена АСТ

А 75,88 88,78 0,010 0,39 89,68 86,76 0,566 -

С 24,12 11,22 2,51 10,32 13,24 -

АА 57,65 79,59 0,013 0,34 80,95 76,47 0,670 -

АС 36,47 18,37 0,031 2,55 17,46 20,59 0,664 -

СС 5,88 2,04 0,414 1,59 2,94 1 -

Полиморфизм А2350С гена АСЕ

А 42,68 54,17 0,152 - 35,59 42,62 0,291 -

в 57,32 47,83 - 64,41 57,38 -

ЛА 20,73 23,91 0,663 - 10,17 13,11 0,777

Ав 43,90 56,52 0,199 - 50,85 59,02 0,463 -

вв 35,37 19,57 0,07 - 38,98 27,87 0,246 -

По остальным полиморфным локусам не наблюдается значимых различий между больными ГБ и здоровыми лицами, как в популяции русских, так и у татар.

При рассмотрении сочетаний аллелей полиморфных маркеров гена АвТ у русских выявлены гаплотипы повышенного риска развития ГБ, при этом самый высокий риск наблюдается при одновременном присутствии всех трех 174М-235Т-(-20)С (С)Ш=3,20, ДИош 1,47-6,80) и двух Т174-235Т-(-20)С (0ш=2,09, ДИош 1,19-3,68) мутантных аллелей (рис. 1).

100% т-80% -

§

| 40% -

П4

20% - -ШГБ+ - й

□ ГБ- 0% ' НЛ*1 Ен>.

^\Таплотип Локус 1 2 3 4 5 6 7 8

Т174М М М м М Т Т Т Т

М235Т Т т м М м М Т Т

А-20С А с А С А С А С

ОШ - 3,20 - - 0,67 - - 2,09

Рис. 1. Распределение частот гаплотипов гена AGT в русской этнической группе среди больных ГБ («ГБ+») и лиц группы контроля («ГБ-»).

Таким образом, ассоциация полиморфизма гена AGT с гипертонической болезнью обнаружена только в популяции русских, при этом основной вклад в риск развития заболевания обусловлен наличием мутации в промоторной части гена, т.к. данная нуклеотидная замена приводит к увеличению уровня экспрессии гена и, соответственно, продукта данного гена ангиотензиногена (Ishigami et al., 1997; Zhao et al., 1999). Поэтому, обнаруженные в других популяциях ассоциации ГБ с полиморфными вариантами Т174М (Чистяков и др., 1999; Косянкова и др., 2000; Мустафина и др., 2001) и М235Т (Fornage et

al, 1995, Kunz et al, 1997) гена AGT, возможно, обусловлено влиянием именно полиморфизма А-20С, данные по которому пока отсутствуют для других популяций РФ

Отсутствие ассоциации полиморфизма A2350G гена АСЕ с риском развития ГБ показано для обеих изученных популяций Республики Татарстан, и хотя в группах больных по сравнению со здоровыми лицами наблюдается повышение частоты мутантного аллеля G (табл 2), различия не являются статистически значимыми (Р=0,152 у русских, Р=0,291 у татар) Однако показана ассоциация аллеля G данного полиморфизма с высоким уровнем ангиотензин-превращающего фермента в некоторых популяциях мира (Villard et al, 1996, Zhu et al, 2001, McKenzie et al ,2001, Mahmood et al, 2003), а также у населения г Томска в группе больных ГБ, имевших выраженное проявление гипертрофии левого желудочка (Карпов и др , 2004)

Гены метаболизма липидов Согласно данным литературы, дислипопротеинемии являются метаболическими факторами риска сердечнососудистых заболеваний, в том числе и ГБ (Климов и др , 1999, Органов и др, 2002) В связи с этим, нами исследован вклад полиморфных маркеров генов метаболизма липидов е2еЗе4 гена аполипопротеина Е (АРОЕ), Hind III-рестрикционный полиморфизм гена липопротеинлипазы (LPL), Glnl92Arg параоксоназы I (PON I) в риск развития ГБ

Также как и в случае полиморфизма генов ренин-ангиотензиновой системы, наблюдаемое распределение частот генотипов по изученным маркерам генов метаболизма липидов в обеих этнических группах соответствует теоретически ожидаемому (х2=0,009-2,16, при р=0,150-0,940, в случае полиморфизма е2еЗе4 гена АРОЕ величина G не превышала критического значения х\о5 G=2,09, %20.0J=6,458 для татар, G=0,349, "/Л 05=7,064 для русских)

По распределению частот аллелей и генотипов между популяциями русских и татар статистически значимые различия отмечены только для полиморфного маркера е2еЗе4 гена АРОЕ в группе здоровых лиц у татар

аллель еЗ и генотип еЗеЗ встречались чаще, чем у русских (для аллеля 88% и 11% соответственно, Р=0,022, для генотипа 79% и 58%, Р=0,015)

Согласно результатам сравнительного анализа полиморфных локусов генов АРОЕ, LPL, PON I в группах больных ГБ и здоровых лиц, в популяции русских показано отсутствие ассоциации данных локусов с повышенным риском развития ГБ, тогда как в популяции татар полиморфизм е2еЗе4 гена АРОЕ является маркером генетической предрасположенности к гипертонической болезни (табл 3) При этом, маркером повышенного риска является аллель е4 (ОШ=2,79, ДИош 1,20-6,48) и генотип еЗе4 (ОШ=2,58, ДИош 1,00-6,67), а пониженного риска - аллель еЗ (0111=0,48, ДИ0ш 0,24-0,93) и генотип еЗеЗ (ОШ=0,42, ДИ0Ш 0,19-0,92)

Таблица 3 Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов (%) полиморфных маркеров генов АРОЕ, LPL, PON I в группах

Аллели Русские Татары

Генотипы ГБ+ ГБ- Р ОШ ГБ+ ГБ- Р ОШ

Полиморфизм е2еЗе4 гена АРОЕ

€1 8,11 10 0,652 - 6,03 5,48 1 -

еЗ 81,08 77 0,522 - 78,45 88,36 0,041 0,48

е4 10,81 13 0,687 - 15,52 6,16 0,022 2,79

е2е2 1,35 0 1 0 1,37 1

е2еЗ 12,16 16 0,599 - 8,62 6,85 0,749 -

е2е4 1,35 4 0,564 - 3,45 1,37 0,583 -

еЗеЗ 66,22 58 0,448 - 62,07 79,45 0,032 0,42

еЗе4 17,57 22 0,644 - 24,14 10,96 0,059 2,58

е4е4 1,35 0 1 - 1,72 0 0,442 -

Hindin ДНК-почиморфизма гена LPL

Н+ 72,50 63,54 0,162 - 69,83 63,79 0,402 -

Н- 27,50 36,46 - 30,17 36,21 -

Н+Н+ 50 35,42 0,141 44,83 36,21 0,449 -

н+н- 45 56,25 0,273 - 50,00 55,17 0,710 -

н-н- 5 8,33 0,472 - 5Д7 8,62 0,716 -

Полиморфизм Glnl92Arg гена PONI

А 71,51 78 0,255 - 68,85 74,67 0,341 -

В 28,49 22 - 31,15 25,33 -

АА 51,16 60 0,373 47,54 52,00 0,730 -

AB 40,71 36 0,715 - 42,62 45,33 0,862 -

ВВ 8,14 4 0,485 - 9,84 2,67 0,139 -

В основе ассоциации полиморфного маркера е2еЗе4 гена АРОЕ с риском развития ГБ у татар может лежать как непосредственный физиологический эффект самого маркера, так и его сцепление с локусом, который действительно может участвовать в детерминации ГБ Так как полиморфизм е2еЗе4 гена АРОЕ связан с однонуклеотидными заменами, приводящими к изменению в рецептор-связывающем домене аполипопротеина Е и, соответственно, сродства к различным липидам (\Уе^гаЬег, 1994), возникающие нарушения в метаболизме липидов у татар играют важную роль в развитии гипертонической болезни Предрасполагающая роль аллеля е4 в развитии ГБ и повышении уровня липидов показана и для некоторых популяций Индии (ВЬауаш й а1, 2005), в популяции турков носители данного аллеля имели более выраженное проявление заболевания в виде гипертрофии левого желудочка, расширения левого предсердия, ретинопатии (Уйтаг й а!., 2001) Отсутствие ассоциации полиморфного маркера е2еЗе4 гена АРОЕ показано для мужчин, представителей этнической группы русских Республики Башкортостан (Мустафиной О Е, 2004) Вероятно, у русских роль данного полиморфизма в риске развития гипертонии не столь существенна по сравнению с формированием наследственной предрасположенности к другим сердечнососудистым заболеваниям, таким как атеросклероз и инфаркт миокарда (Виноградова, 2006, Мустафина и др , 2002, Воевода и др , 2006)

Исследования связи полиморфизма другого гена, вовлеченного в метаболизм липидов (липопротеинлипаза, ЬРЬ) с риском развития ГБ носят противоречивый характер (Базэ е1 а1, 2000, (Лее й а1, 2001, Вто е! а1, 2004, Ти X ег а1, 2005) В основном, данный ген рассматривается в качестве кандидатного при возникновении дислипопротеинемий Отсутствие ассоциации с наследственной предрасположенностью к ГБ, аналогично нашим исследованиям, показано и для популяции татар Республики Башкортостан, у русских данный полиморфизм ассоциировался с риском развития гипертонии только при ее сочетании с ожирением и гипертрофией левого желудочка (Мустафина, 2004)

Изучение роли полиморфизма гена параоксоназы-1 (PONI) в наследственной предрасположенности к ГБ вызвано тем обстоятельством, что пониженная каталитическая активность данного фермента приводит к усиленному перекисному окислению липидов, которые, в свою очередь, находясь во фракции ЛПНП, оказывают повреждающее действие на сосудистую стенку (Ярема и др 1991, Uzun et al, 2004) Большинство работ по оценке вклада полиморфизма Glnl92Arg гена PONI в риск развития ССЗ показали ассоциацию аллеля 192Arg (аллель А) с риском развития ИБС (Bonafe et al , 2002, Мустафина и др , 2004), ИМ (Пчелина и др , 2003), атеросклероза (Durrmgton et al, 2001) Исследования связи данного полиморфизма с риском развития именно гипертонической болезни единичны ассоциацию данного полиморфизма с гипертонией наблюдали среди русских мужчин Республики Башкортостан (Мустафина О Е, 2004), тогда ее отсутствие показано для популяции венгров (Barath et al, 2006)

Ген эндотелиальной синтазы окиси азота Под действием фермента эндотелиальной синтазы окиси азота (NOS3) из аминокислоты L-аргинина образуется мощный сосудорасширяющий фактор - окись азота (N0) Его действие связано с механизмами защиты сосудистой стенки от повреждений, которые могут образовываться в результате адгезии и агрегации тромбоцитов В данной работе исследована ассоциация полиморфизма минисателлита eNOS4a/b, находящегося в 4 интроне гена NOS3, с риском развития ГБ в популяциях Республики Татарстан

Наблюдаемое распределение частот встречаемости генотипов по полиморфизму минисателлита eNOS4a/b гена NOS3 у больных ГБ и здоровых лиц, как среди русских, так и татар, соответствовало равновесию Харди-Вайнберга (х2=0,022-0,301, при р=0,58-0,87)

Результаты сравнительного анализа распределения частот аллелей и генотипов данного полиморфизма показали отсутствие его ассоциации с повышенным риском развития ГБ в обеих изучаемых популяциях (табл 4)

Таблица 4 Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов (%) полиморфного минисателлита еИ084а/Ь гена N083 в группах больных ГБ («ГБ+») и здоровых лиц («ГБ-») среди русских и татар_

Аллели Генотипы Русские Татары

ГБ+ ГБ- Р ОШ ГБ+ ГБ- Р ОШ

4а 18,6 17,3 0,870 - 11,9 11,9 1 -

4Ь 81,4 82,6 - 88,1 88,1 -

4а/а 2,3 4,1 0,621 - 0 1,6 1 -

4а/Ь 32,5 26,5 0,560 - 23,8 20,6 0,830 -

4b/b 65,1 69,4 0,700 - 76,2 77,8 1 -

Отсутствие связи данного полиморфизма с наследственной предрасположенностью к ГБ показано для популяций Северо-Западного региона и московской области (Яковлева и др, 2005, Косянкова и др, 2003, Котовская и др , 2002), у населения Японии и Австралии (Miyamoto et al, 1998, Benjafield et al, 2000) Однако в популяции русских Республики Башкортостан у мужчин показана диагностическая значимость данного полиморфизма носители гетерозиготного генотипа 4а/Ь имеют повышенный риск развития гипертонической болезни в возрасте до 40 лет (Мустафина, 2001)

Анализ связи полиморфных маркеров с клиническими и биохимическими факторами гипертонической болезни

Ассоииаиия с уровнем артериального давления Для выяснения непосредственного влияния полиморфизма изученных генов (AGT, АСЕ, АРОЕ, LPL, PONI, NOS3) на показатель систолического (САД) и диастолического (ДАД) артериального давления при гипертонической болезни, в группах больных провели оценку среднего уровня показателей САД и ДАД среди носителей разных генотипов изучаемых полиморфных маркеров Согласно полученным данным, в популяции русских средний уровень САД и ДАД был несколько выше среди носителей генотипов ТТ (Т174М), МТ (М235Т), АА (А-20С) гена AGT, АА (A2350G) гена АСЕ, еЗе4 (е2еЗе4) гена АРОЕ, Н+Н+ (Hind III-полиморфизм) гена LPL, АВ (Glnl92Arg ) гена PON I, в популяции татар повышение артериального давления было отмечено у носителей генотипов ТТ (Т174М), МТ (М235Т) гена AGT, АА (A2350G) гена

АСЕ, еЗе4 (е2еЗе4) гена АРОЕ, Н+Н+ (Hind III-полиморфизм) гена LPL Однако при попарном сравнении генотипов в непараметрическом тесте Манна-Уитни данные различия не достоверны (р>0,05) (табл 5)

Таблица 5 Значимость различий по тесту Манна-Уитни среднего уровня показателя артериального давления (САД и ДАД) среди носителей разных генотипов в этнических группах русских и татар__

Ген, Генотипы САД ДАД

полиморфизм Русские Татары Русские Татары

AGT, ТТ 0,778 0,757 0,342 0,192

Т174М ТМ + ММ

AGT, ММ

М235Т МТ 0,099* 0,535* 0,501* 0,066*

ТТ 0,425** 0,667** 1,00** 0,688**

AGT, АА 0,139 0,877 0,607 0,828

А-20С АС + СС

АСЕ, АА

A2350G AG 0,495* 0,255* 0,815* 0,342*

GG 0,814** 0,099** 0,432** 0,108**

АРОЕ, еЗеЗ

е2еЗе4 е2еЗ 0,966* 0,834* 0,809* 0,550*

еЗе4 0,146** 0,674** 0,172** 0,209**

LPL, Н+Н+ 0,092 0,431 0,413 0,26

Hind III Н+Н- + Н-Н-

PONI, АА

Glnl92Arg АВ 0,760* 0,143* 0,764* 0,526*

ВВ 0,933** 0,428** 0,346** 0,379**

NOS3 АЫЬ 0,559 0,881 0,149 0,796

eNOS4a^ 4а/Ь + 4 а/а

*- значимость различий между носителями генотипов ММ и МТ (АА и Ай, еЗеЗ и е2еЗ, АА и АВ), **- значимость различий между носителями генотипов ММ и ТТ (АА и Ой, еЗеЗ и еЗе4, А А и ВВ)

При разделении группы больных ГБ по уровню САД (<160 и >160 мм рт ст) и ДАД (<90 и >90 мм рт ст) также не было выявлено достоверных различий В популяции русских, имеющих уровень САД >160 мм ртст с частоты встречаемости генотипов ТМ полиморфизма Т174М, МТ (М235Т), АА (А-20С) гена AGT, гомозигот АА и GG полиморфизма A2350G гена АСЕ, аллеля е4 и генотипа еЗе4 полиморфизма е2еЗе4 гена АРОЕ, гомозиготного генотипа Н+Н+ гена LPL, гетерозигот АВ полиморфизма Glnl92Arg гена PONI, а также гетерозигот 4 а/b минисателлита eNOS, превышали таковые в

группе больных, имеющих показатели САД <160 мм рт ст Однако данные различия не достигали статистической значимости (Р>0,05)

В популяции татар частоты аллелей и генотипов полиморфных маркеров гена АвТ практически не различались в подгруппах больных, разделенных по уровню САД По полиморфизму А2350й было отмечено преобладание гомозиготного генотипа АА в группе больных с САД >160 мм ртст, хотя данные различия носят случайный характер (Р>0,05) Различия в распределении частоты аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов метаболизма липидов и гена N083 между двумя подгруппами больных, разделенных по уровню САС, также отсутствовали

Аналогичную ситуацию наблюдали и при анализе распределения частот аллелей и генотипов в группах больных, разделенных по уровню ДАД обнаруживаемые различия недостоверны (р>0,05)

Таким образом, полиморфизм генов АвТ, АСЕ, АРОЕ, ЬРЬ, N083 не оказывает непосредственного влияния на основное клиническое проявление ГБ - повышение уровня артериального давления в популяциях русских и татар Республики Татарстан Отсутствие связи исследованных полиморфных маркеров с повышением АД при ГБ отмечено также в работах Горбуновой (2003) при выявлении генетической предрасположенности к гипертонии у жителей г Санкт-Петербург Скорее всего, это связано с тем, что регуляция АД является многокомпонентной системой, и продукты изученных в данной работе генов не являются единственными участниками такого сложного процесса, как поддержание уровня артериального давления

Ассоциация с уровнем общего холестерина и В-липопротеинов Анализ ассоциации полиморфных маркеров изученных генов ренин-ангиотензиновой системы, метаболизма липидов и эндотелиальной МЭ-синтазы с уровнем общего холестерина (ОХЛ) и Р-липопротеинов (Р-ЛП) проведен в группах больных ГБ, разделенных на подгруппы с повышенными и нормальными показателями липидного спектра (ОХЛ <5,2 и >5,2 ммоль/л и р-ЛП <3,8 и >3,8 г/л)

Достоверные различия в распределении частот аллелей и генотипов между подгруппами больных ГБ, имеющих OXJI <5,2 и >5,2 ммоль/л, наблюдались по полиморфизму е2еЗе4 гена АРОЕ у русских и Hind III -полиморфизму гена LPL и eNOS4a/b гена NOS3 у татар (рис.2).

Полиморфизм е2еЗг4 гена АРОЕ Русские

е2 еЗ е4 е2е2 е2еЗ е2е4 еЗеЗ еЗе4 е4е4

Татары

HL

е2е2 е2еЗ е2е4 еЗеЗ еЗе4 е4е4

Hind 111- полиморфизм гена LPL Русские Татары

** * /V^' * *

Полиморфизм eNOS4a/b гена NOS3

100% £ 80% о 60% « 40% " 20% 0%

т

то «о ^ -ч*

« (О

^ t>P

Ы»'

аллели генотипы аллели генотипы

□ ОХЛ<5.2 ммоль\л Ш ОХЛ>5,2 ммоль\л

Рис. 2. Распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов АРОЕ, ЬРЬ, N083 у больных ГБ в зависимости от уровня общего холестерина в популяциях русских и татар.

В популяции русских у больных ГБ повышенный уровень OXJI (>5,2 ммоль/л) ассоциировался с генотипом еЗе4 гена АРОЕ (ОШ=5,22, ДИ0ш 1,3620,04), в популяции татар - с аллелем Н+ (0111=3,09, ДИ0ш 1,22-7,84) и генотипом Н+Н+ (0111=3,74, ДИ0Ш 1,15-12,10) гена LPL и генотипом 4а/Ь (0111=4,95, ДИош 1,06-22,93) reHaNOS3

Ассоциация полиморфных маркеров с увеличением содержания Р-липопротеинов (>3,8 г/л) при гипертонической болезни выявлена только в популяции русских При этом, повышенный уровень Р-липопротеинов в сыворотке крови наблюдается у носителей генотипов ТМ полиморфизма Т174М (0111=5,44, ДИ0Ш 1,10-26,75) и ТТ полиморфного локуса М235Т гена AGT (0111=5,44, ДИош 1,10-26,75), гомозигот Н+Н+ HindIII-рестрикционного полиморфизма гена LPL (0111=3,33, ДИ0ш 1,03-10,73) и гетерозигот АВ полиморфного маркера Glnl92Arg гена PON I (0111=7,34, ДИ0Ш 1,49-39,90) В популяции татар гомозиготы АА по нормальному аллелю А полиморфного маркера A2350G гена АСЕ и ММ полиморфного маркера М235Т гена AGT встречаются с большей частотой в подгруппе больных ГБ с нормальными показателями уровня Р-липопротеинов и, таким образом, носят протективный характер в отношении повышения содержания Р-липопротеинов при гипертонической болезни (0111=0,11, ДИ0Ш 0,01-0,75, 0111=0,20, ДИ0Ш 0,040,83, соответственно), тогда как для носителей мутантного аллеля G полиморфизма A2350G гена АСЕ показан высокий риск (ОШ=2,63, ДИош 1,026,77) увеличения содержания Р-липопротеинов в сыворотке крови при гипертонии (рис 3) Полученные данные согласуются с многочисленными данными литературы (Скобелева, 1997, Garces, 2002, Виноградова 2006, Salminen et al, 2006, Morbois-Trabut et al ,2006, Jema et al, 2006) В работах этих авторов также отмечается ассоциация полиморфизмов е2еЗе4 гена АРОЕ, HindIII-рестрикционного полиморфизма гена LPL, Glnl92Arg гена PON I с повышением уровня ОХЛ и Р-липопротеинов, вопрос об ассоциации генов AGT и АСЕ с уровнем липидов авторами не рассматривается

100% й 80% -

g 40% г 20% 0%

100%

Русские Татары

Полиморфизм Т174Мгена AGT_

Т М

Т М

Полиморфизм М235Тгена AGT

ТТ ТМ ММ

й

5 60% М 40% "" 20% 0%

100% 80%

М Т ММ МТ ТТ М Т ММ MJ ТТ ______HindIJI- полиморфизм гена LPL_________

JiiÉi

4х *

Полиморфизм Glnl92Arg гена PONI

100% в 80% о 60% У 40% J"" 20% 0%

АВ АААВВВ АВ АААВВВ

аллели генотипы аллели генотипы

□ В -ЛП<3,8 г\л ■ В -ЛП>3,8 г\л

Рис. 3. Распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов AGT, LPL, PONI в зависимости от уровня (3 - липопротеинов среди русских и татар.

Оценка связи полиморфных маркеров с возрастом манифестации гипертонической болезни

С целью выяснения возможного влияния генетического фона на возраст проявления основных клинических симптомов ГБ, нами проведен анализ

распределения частот аллелей и генотипов в группе сравнения и подгруппах больных с возрастом проявления ГБ до и после 45 лет среди русских и татар (рис. 4).

Русские Татары

Полиморфизм Т174Мгена АСТ

Т М ТТ ТМ ММ Т М ТТ ТМ мм

ПппиплгтгЬиялл №7 Ч^Т эеип АПТ

м т мм мт тг м т мм МТ ТТ

АС АА АС СС АС АА АС СС

аллели генотипы аллели генотипы

^ ГБ+ до 45 лет 0 ГБ+ после 45 лет □ ГБ-

Рис. 4. Распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров гена АСТ в зависимости от возраста манифестации заболевания (до и после 45 лет) среди русских и татар.

Согласно результатам анализа, в популяции русских с риском развития ГБ в возрасте до 45 лет ассоциируются аллель М (0ш=3,07; ДИ0ш 1,30-7,26) и генотип ТМ (0111=2,85; ДИ0Ш 1,12-7,22) полиморфизма Т174М, аллель Т полиморфного маркера М235Т гена АСТ (0111=1,81; ДИ0щ 1,04-3,17), аллель С (ОШ=3,78; ДИ0Ш 1,78-8,01) и генотип АС (0111=3,65; ДИ0Ш 1,47-9,05) полиморфного локуса А-20С гена АСТ. Таким образом, данные полиморфные

локусы являются не только маркерами предрасположенности к ГБ, но и более раннего проявления заболевания. В популяции татар генетическими маркерами повышенного риска развития ГБ в более молодом (до 45 лет) возрасте являются аллель е4 и генотип еЗе4 полиморфного маркера е2еЗе4 гена АРОЕ (ОШ=3,79, ДИош 1,55-9,22 и ОШ=3,11, ДИ0Ш 1,10-8,79 соответственно) (рис. 5).

100% g 80% о 60% § 40% г 20% 0%

Русские

1 ттЬ.

т

X г T тТХ

ей -rl-r tífí хи "SPT.iTt

е2 еЗ

е4

100% г -

s 80% ;

Р 60% f-5 40%--

? 20% 4 т_ 0%

е2е2 е2еЗ е2е4 еЗеЗ еЗе4 е4е4 Татары

е2 еЗ аллели

е4

е2е2 е2еЗ е2е4 еЗеЗ еЗе4 е4е4 генотипы

ЭГБ+ до 45 лет Ш ГБ+ после 45 лет □ ГБ-

Рис. 5. Распределение частот аллелей и генотипов полиморфизма е2еЗе4 гена АРОЕ в зависимости от возраста манифестации заболевания (до 45 лет и после 45 лет) среди русских и татар.

Анализ ассоциации с возрастом манифестации ГБ полиморфизма A2350G гена АСЕ, полиморфных маркеров генов метаболизма липидов LPL и PONI, а также полиморфного локуса eNOS4a/b гена эндотелиальной NO-синтазы показал отсутствие влияния данных полиморфизмов на более раннее проявление клинических признаков гипертонической болезни.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о сложном патогенезе гипертонической болезни, в основе которой лежит взаимодействие наследственной предрасположенности с определенными факторами риска. Влияние генетического полиморфизма на риск развития данного заболевания показано для многих популяций мира, но, в силу мультифакторности гипертонической болезни, для каждой конкретной группы населения

существует свой определенный набор молекулярно-генетических маркеров предрасположенности

В нашем исследовании показана роль гена ангиотензиногена и аполипопротеина Е в формировании риска развития гипертонической болезни у представителей двух этнических групп Республики Татарстан русских и татар

ВЫВОДЫ

1 Маркером генетической предрасположенности к гипертонической болезни в популяции татар является аллель е4 полиморфизма е2еЗе4 гена АРОЕ (ОШ=2,79), тогда как аллель еЗ и генотип еЗеЗ носят протективный характер (0111=0,48 и 0,42 соответственно)

2 В популяции русских с риском развития гипертонической болезни ассоциированы аллель С и генотип АС полиморфизма А-20С гена AGT (ОШ=2,51 и 2,55 соответственно), аллель А и генотип АА напротив снижают вероятность развития заболевания (ОШ=0,39 и 0,34)

3 В популяции русских маркерами предрасположенности к гипертонической болезни являются сочетания аллелей 174М-235Т-(-20С) и Т174-235Т-(-20С) полиморфных маркеров Т174М, М235Т, А-20С гена AGT (0111=3,2 и 2,09 соответственно), в то время как гаплотип Т174-М235-(А-20) снижает риск заболевания (ОШ=0,67)

4. В обеих исследованных популяциях показано отсутствие связи между полиморфизмом генов AGT, АСЕ, АРОЕ, LPL, PON I и повышением уровня артериального давления при гипертонической болезни

5 В популяции русских повышение уровня общего холестерина (>5,2 ммоль/л) ассоциировано с генотипом еЗе4 (е2еЗе4) гена АРОЕ (0111=5,22), Р-липопротеинов (>3,8 г/л) - с генотипами ТМ (Т174М), ТТ (М235Т) гена AGT, Н+Н+ (Hind III-полиморфизм) гена LPL, АВ (Glnl92Arg) гена PON I (0111=5,55, 5,44, 3,3 и 7,34 соответственно)

6 Повышенный уровень общего холестерина (>5,2 ммоль/л) в популяции татар ассоциирован с генотипами Н+Н+ (Hmd III-полиморфизм) гена LPL, 4а/Ь

(сКОЙ4а/Ъ) гена ТЯОБЗ (ОШ=3,74 и 4,95 соответственно), отрицательная ассоциация с повышением уровня р-липопротеинов установлена для генотипов ММ (М235Т) гена АСТ, АА (А235СЮ) гена АСЕ, что позволяет рассматривать эти генотипы в качестве протективных факторов (0111=0,20 и 0,11 соответственно)

7 Более раннее развитие гипертонической болезни (до 45 лет) в популяции татар выявлено у носителей генотипа еЗе4 (е2еЗе4) гена АРОЕ (ОШ =3,11), в популяции русских - у носителей генотипов ТМ (Т174М), АС (А-20С), аллеля Т (М235Т) гена АвТ (ОШ =2,85, 3,65 и 1,81 соответственно)

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ

1 Андреева, МГ Исследование полиморфизма гена ангиотензиногена у больных эссенциальной гипертензией / МГ Андреева, АН Аскарова, Р.Г. Мухамадиева (Газизова) // Материалы международной научно-практической конференции «Современная техника и технологии в медицине и биологии» -Новочеркасск, 2001 г - С 4

2 Андреева, М Г Изучение роли наследственности в развитии артериальной гипертензии / М Г Андреева, А Н Аскарова, Р.Г. Мухамадиева // Материалы II Российской конференции молодых ученых Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины - Москва, 2001 - С 246

3 Андреева, М Г Генетическая предрасположенность к артериальной гипертензии у жителей основных этнических групп г Казани — татар и русских / М Г Андреева, И А Латфуллин, А Н Аскарова, Р.Г. Мухамадиева // Материалы II Всероссийской конференции «Профилактическая кардиология» -Саратов, 2002 - С 104-105

4 Мухамадиева, Р.Г., Наследственные факторы в развитии первичной артериальной гипертензии / Р.Г. Мухамадиева, М Г Андреева, А Н Аскарова // IV Республиканская научно-практическая конференция молодых ученых и специалистов, Казань Тез докл / Под ред А В Ференца - Казань, 2002 - С 9

5 Андреева, МГ Влияние генотипа на выбор терапии при артериальной гипертонии / М Г Андреева, И А Латфуллин, А Н Аскарова, Р.Г. Мухамадиева // Врач -2002 - №9 - С 27-28

6 Мухамадиева, Р.Г. Изучение роли полиморфизма гена ангиотензиногена в генетической предрасположенности к гипертонической болезни// Итог науч студ конф 2001 года / Тез докл Казань Казанский государственный университет им В И Ульянова-Ленина, 2002 -С 14

7 Мухамадиева, Р.Г. Изучение роли наследственности в развитии артериальной гипертензии / Р.Г. Мухамадиева, М Г Андреева, А Н Аскарова // Биология-наука XXI века сб тез / 6-я Пущинская школа-конференция молодых ученых - Пущино, 2002 - Т 1 - С 116-117

8 Андреева, М Г Возможность генетической предрасположенности к развитию артериальной гипертонии / МГ Андреева, И А Латфуллин, Р.Г. Мухамадиева // Материалы I съезда кардиологов Приволжского и Уральского Федеральных округов Российской Федерации - Пермь, 2003 —С 17

9 Андреева, МГ Определение наследственной предрасположенности к артериальной гипертензии с целью проведения ее первичной профилактики/ М Г Андреева, И А Латфуллин, Р.Г. Мухамадиева // Научно-практическая конференция «Пути снижения заболеваемости и смертности от сердечнососудистых заболеваний» Сборник трудов - Москва, 2003 - С 8

10 Мухамадиева, Р.Г. Артериальная гипертензия и молекулярные варианты гена ангиотензиногена жителей Республики Татарстан / Р.Г. Мухамадиева, МГ Андреева, АН Аскарова // Биология-наука XXI века сб тез / 7-я Пущинская школа-конференция молодых ученых - Пущино, 2003 - Т 1 - С 34

11 Мухамадиева, Р.Г. Полиморфизм генов ренин-ангиотензиновой системы / Р.Г. Мухамадиева, М Г Андреева, А Н Аскарова // Новая Геометрия Природы сб науч тр / Международная науч конф - Казань - 2003 — ТII — С 234-241

12 Латфуллин, И А Эволюция взглядов на патогенез и терапию артериальной гипертензии с точки зрения генетической предрасположенности к

развитию заболевания / И А Латфуллин, M Г Андреева, А H Аскарова, Р.Г. Мухамадиева // Кардиоваскулярная терапия и профилактика - 2003 -Т 2 - №2 -С 28-32

13 Мухамадиева, Р.Г. Исследование полиморфизма в промоторном участке гена ангиотензиногена на связь с гипертонической болезнью / Р.Г. Мухамадиева, И Г Овод, M Г Андреева, А H Аскарова // Биология-наука XXI века сб тез / 8-я Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых - Пущино, 2004 - С 123

14 Газизова, Р.Г. Роль полиморфного маркера М235Т гена ангиотензиногена в развитии гипертонической болезни / Р.Г. Газизова, M Г Андреева, А H Аскарова // IX Всероссийская научно-практическая конференция «Молодые ученые в медицине» Тезисы докладов - Казань, 2004 -С 121

15 Газизова, Р.Г. Генетическое исследование предрасположенности к артериальной гипертензии среди жителей Республики Татарстан / Р.Г. Газизова, M Г Андреева, А H Аскарова // IX Всероссийская научно-практическая конференция «Молодые ученые в медицине» Тезисы докладов -Казань, 2004 - С 120

16 Газизова, Р.Г. Ассоциация полиморфных вариантов гена ангиотензиногена с развитием гипертонической болезни / Р.Г. Газизова, H И Акберова, А H Аскарова // Постгеномная эра в биологии и проблемы -биотехнологии Мат научно-прак конф Казань, 17-18 июня 2004 г Тр мол уч /Подред РГ Василова -М «Русская панорама», 2004 -С 43

17 Газизова, Р.Г. Ассоциации полиморфизмов генов предрасположенности к гипертонической болезни среди русских и татар Республики Татарстана / Р.Г. Газизова, И И Ибрагимова, А H Аскарова // Ученые записки Казанского государственного университета -2005 -Т 147 -№3 - С56-69

18 Ibragimova, 11 Association of angiotensmogen gene polymorphisms with the development of arterial hypertension among Tatar and Russian population /II

Ibragimova, R G Gazizova, A N Ascarova // abstracts / Human Genome Meeting HGM2005 - Kyoto (Japan), 2005 - P 76

19 Газизова, Р.Г. Связь полиморфизмов T174M и А-20С гена ангиотензиногена с гипертонической болезнью среди русских и татар Татарстана / Р.Г. Газизова, И И. Ибрагимова, А Н Аскарова // Материалы V съезда Российского общества медицинских генетиков Медицинская генетика -2005 -№4. -С 171

20 Ибрагимова, ИИ Ассоциация полиморфизма G2350A гена ангиотензин-превращающего фермента с гипертонической болезнью / ИИ. Ибрагимова, Р.Г. Газизова, АН Аскарова // Материалы V съезда Российского общества медицинских генетиков Медицинская генетика -2005 - №5 - С 193

21 Андреева, МГ О роли наследственных факторов в развитии гипертонической болезни / МГ Андреева, АН Аскарова, И А Латфуллин, Р.Г. Мухамадиева//Кардиолог -2005-№10 - С 48-50

22 Исмагилова, Р К, Полиморфизм генов-кандидатов предрасположенности к атеросклерозу / Р К Исмагилова, И И Ибрагимова, О А Кравцова, И М Камалетдинова, Р.Г. Газизова // Биосистемы организация, поведение и управление Материалы 60-й научной студенческой конференции биологического факультета Н Новгород ННГУ, 2007 - С 29-30

Подписано к печати 16 11 07 Размер бумаги 60x80 1/16 Печать на RISO Уел печ л 1,25 Заказ №278 Тираж 100

С готового орш инал - макета отпечатано в ГПП «Аэрон»

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Газизова, Регина Гадельшовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Молекулярная медицина и мультифакторные заболевания.

1.2. Генетические полиморфизмы и мутации.

1.3. Гипертоническая болезнь. Молекулярно-генетические аспекты

1.4. Полиморфизм генов-кандидатов гипертонической болезни.

1.4.1. Гены ренин-ангиотензиновой системы.

1.4.2. Гены метаболизма липидов.

1.4.3. Ген эндотелиальной синтазы окиси азота.

1.5. Генетическое тестирование и ранняя диагностика мультифакторных заболеваний.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярно-генетические маркеры предрасположенности к гипертонической болезни населения Республики Татарстан"

Актуальность проблемы

Гипертоническая болезнь является главным фактором риска сердечнососудистых заболеваний и причиной высокой смертности среди лиц среднего и пожилого возраста во всем мире (Kannel, 1986; Шальнова, 2002; Kearney, 2004). Гипертония - это мультифакторное заболевание, развивающееся как нарушение процессов адаптации человека к условиям окружающей среды при наличии генетически предопределенных поломок механизмов регуляции артериального давления (Гогин, 2006). Сложность генетического анализа такого гетерогенного заболевания, каким является гипертоническая болезнь, заключается в большом количестве потенциальных генов-кандидатов, способных участвовать в формировании «генной сети» наследственной предрасположенности (Баранов, 2001; Бочков, 2002). К настоящему времени известно около 150 генов (OMIM, 2007), продукты которых могут прямо или косвенно участвовать в сложном патогенезе гипертонической болезни: это, прежде всего, компоненты ренин-ангиотензиновой системы; метаболизма липидов; продукты, обеспечивающие поддержание сосудистого тонуса и структуры сосудов и многие другие. Однако в случае заболеваний, относящихся к категории мультифакторных, проявление генетического полиморфизма в значительной мере зависит от генофонда и условий жизни каждой конкретной популяции (Максимов, 2007). Этим и объясняется противоречивость имеющихся в литературе данных по ассоциации полиморфных ДНК-локусов потенциальных генов-кандидатов с риском развития гипертонической болезни.

В последние годы ведутся активные исследования по выявлению ассоциации полиморфных локусов генов-кандидатов с риском развития гипертонической болезни у населения Российской Федерации. Генетические маркеры предрасположенности Остановлены для популяций Республики Башкортостан (Мустафина и др., 2001, 2004), некоторых народов Сибири (Косянкова, 1999; Карпов, 2004), общей популяции московского региона (Чистяков, 1998, 1999; Бражник, 2003), якутов (Милосердова, 2001) и т.д.

В Республике Татарстан подобные исследования ранее не проводились. В связи с этим, особенно актуальным представляется выявление молекулярно-генетических маркеров предрасположенности к гипертонической болезни в популяциях русских и татар РТ, на основании комплексной оценки связи показателей метаболизма липидов и уровня артериального давления с распределением полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось выявление ассоциации полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний с риском развития гипертонической болезни у двух популяций, русских и татар Республики Татарстан.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний: Т174М, М235Т, А-20С гена ангиотензиногена, A2350G гена ангиотензин-превращающего фермента, е2еЗе4 гена аполипопротеина Е, Hindlll-рестрикционного полиморфизма гена липопротеинлипазы, Glnl92Arg гена параоксоназы I, eNOS4a/4b гена эндотелиальной синтазы окиси азота при гипертонической болезни и у здоровых лиц.

2. Провести анализ ассоциации исследуемых полиморфных маркеров с уровнем артериального давления и показателями метаболизма липидов.

3. Оценить связь исследуемых полиморфных маркеров с возрастом манифестации гипертонической болезни.

Научная новизна

Исследована наследственная предрасположенность к гипертонической болезни по восьми полиморфным локусам генов ренин-ангиотензиновой системы (ангиотензиноген и ангиотензин-превращающий фермент), метаболизма липидов (аполипопротеин Е, липопротеинлипаза, параоксоназа I) и эндотелиальной синтазы окиси азота у представителей двух этнических групп Республики Татарстан: русских и татар.

Проведен анализ ассоциации риска развития гипертонической болезни с ранее не исследованными в популяциях России полиморфными маркерами А-20С гена ангиотензиногена и A2350G гена ангиотензин-превращающего фермента.

Маркерами предрасположенности к гипертонической болезни населения Республики Татарстан в популяции русских являются сочетания аллелей 174М-235Т-(-20С) и Т174-235Т-(-20С) полиморфных локусов Т174М, М235Т, А-20С гена ангиотензиногена, причем наличие данных аллелей способствует более раннему (до 45 лет) проявлению заболевания; в популяции татар с повышенным риском развития гипертонии ассоциирован полиморфизм е2еЗе4 гена аполипопротеина Е.

Повышенный уровень содержания липидов в сыворотке крови (общего холестерина и (3-липопротеинов) при гипертонической болезни ассоциирован с полиморфными маркерами Т174М, М235Т гена ангиотензиногена, е2еЗе4 гена аполипопротеина Е, Glnl92Arg гена параоксоназы I, гена липопротеинлипазы в популяции русских; eNOS4a/4b гена эндотелиальной синтазы окиси азота и Hind III - полиморфизмом у представителей этнической группы татар.

Практическая значимость

По результатам исследования получены данные, которые могут служить основой для формирования групп повышенного риска гипертонической болезни и разработки дифференцированных программ первичной и вторичной профилактики заболевания у конкретного человека с учетом данных генотипирования в популяциях русских и татар Республики Татарстан.

Материалы исследования представляют интерес в области генетики популяций, биохимии и медицине и могут быть использованы в учебном процессе на биологических и медицинских факультетах.

Положения, выносимые на защиту:

1. Диагностическими маркерами генетической предрасположенности к гипертонической болезни с ранней манифестацией заболевания в популяции русских является полиморфизм гена AGT, в популяции татар - полиморфизм гена АРОЕ.

2. Повышенный уровень общего холестерина и (3-липопротеидов в сыворотке крови ассоциирован в популяции русских с полиморфизмом генов AGT, АРОЕ, LPL, PON, в популяции татар с полиморфизмом генов LPL, NOS3.

Апробация работы

Основные результаты исследований докладывались на международной научно-практической конференции «Современная техника и технологии в медицине и биологии» (Новочеркасск, 2001); II Российской конференции молодых ученых «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2001); II Всероссийской конференции «Профилактическая кардиология» (Саратов, 2002); Российском национальном конгрессе кардиологов (Санкт-Петербург, 2002); Конгрессе ассоциации кардиологов стран СНГ «Фундаментальные исследования и прогресс в кардиологии» (Санкт-Петербург, 2003), научно-практической конференции «Пути снижения заболеваемости и смертности от сердечнососудистых заболеваний» (Москва, 2003); II и III научных конференциях молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра Казанского государственного университета «Материалы и технологии XXI века» (Казань, 2001-2002); 6-8 школах-конференциях молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2002-2004); Международной научной конференции «Новая геометрия природы» (Казань, 2003); IX Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2004); научно - практической конференции «ПосТАГеномная эра в биологии и проблемы биотехнологии» (Казань, 2004); международной конференции «Human Genome Meeting HGM2005» (Kyoto, Japan, 2005); а также на ежегодных итоговых научных конференциях Казанского государственного университета в 2001-2005 гг.

Опубликовано 29 работ, из них по теме диссертации 22.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Газизова, Регина Гадельшовна

ВЫВОДЫ

1. Маркером генетической предрасположенности к гипертонической болезни в популяции татар является аллель е4 полиморфизма е2еЗе4 гена АРОЕ (0111=2,79), тогда как аллель еЗ и генотип еЗеЗ носят протективный характер (0111=0,48 и 0,42 соответственно).

2. В популяции русских с риском развития гипертонической болезни ассоциированы аллель С и генотип АС полиморфизма А-20С гена AGT (0111=2,51 и 2,55 соответственно), аллель А и генотип АА напротив снижают вероятность развития заболевания (0111=0,39 и 0,34).

3. В популяции русских маркерами предрасположенности к гипертонической болезни являются сочетания аллелей 174М-235Т-(-20С) и Т174-235Т-(-20С) полиморфных маркеров Т174М, М235Т, А-20С гена AGT (0111=3,2 и 2,09 соответственно), в то время как гаплотип Т174-М235-(А-20) снижает риск заболевания (ОШ=0,67).

4. В обеих исследованных популяциях показано отсутствие связи между полиморфизмом генов AGT, АСЕ, АРОЕ, LPL, PON I и повышением уровня артериального давления при гипертонической болезни.

5. В популяции русских повышение уровня общего холестерина (>5,2 \ ммоль/л) ассоциировано с генотипом еЗе4 (е2еЗе4) гена АРОЕ (0111=5,22); [3-липопротеинов (>3,8 г/л) - с генотипами ТМ (Т174М), ТТ (М235Т) гена AGT, Н+Н+ (Hind III-полиморфизм) гена LPL, АВ (Glnl92Arg) гена PON I (0111=5,55; 5,44; 3,3 и 7,34 соответственно).

6. Повышенный уровень общего холестерина (>5,2 ммоль/л) в популяции татар ассоциирован с генотипами Н+Н+ (Hind III-полиморфизм) гена LPL, 4a/b (eN0S4a/b) гена N0S3 (0111=3,74 и 4,95 соответственно); отрицательная ассоциация с повышением уровня Р-липопротеинов установлена для генотипов MM (М235Т) гена AGT, АА (A2350G) гена АСЕ, что позволяет рассматривать эти генотипы в качестве протективных факторов (0111=0,20 и 0,11 соответственно).

7. Более раннее развитие гипертонической болезни (до 45 лет) в популяции татар выявлено у носителей генотипа еЗе4 (е2еЗе4) гена АРОЕ (ОШ =3,11), в популяции русских - у носителей генотипов ТМ (Т174М), АС (А-20С), аллеля Т (М235Т) гена AGT (ОШ =2,85; 3,65 и 1,81 соответственно).

Заключение

Гипертоническая болезнь является главным фактором риска сердечнососудистых заболеваний и причиной высокой смертности среди лиц среднего и пожилого возраста во всем мире. Данное заболевание не без основания относят к мультифакторным патологиям, возникновение и развитие которых определяется совместным действием генетических и средовых факторов. Влияние генетического полиморфизма на риск развития гипертонии показано для многих популяций мира, но, в силу мультифакторности данной патологии, для каждой конкретной группы населения, вероятно, существует свой определенный набор молекулярно-генетических маркеров предрасположенности.

В данном исследовании установлены диагностические маркеры генетической предрасположенности к гипертонической болезни в двух популяциях, русских и татар, Республики Татарстан. Показана ассоциация полиморфных маркеров генов ангиотензиногена и аполипопротеина Е с риском развития гипертонии, при этом данные полиморфизмы отвечают за более ранний (до 45 лет) возраст манифестации заболевания. Кроме этого,, установлены полиморфные варианты генов метаболизма липидов (гена аполипопротеина Е, липопротеинлипазы, параоксоназы 1) и гена эндотелиальной NO-синтазы, наличие которых обусловливает повышение уровня липидов в сыворотке крови при гипертонической болезни.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Газизова, Регина Гадельшовна, Казань

1. Адаричев В.А. Характеристика линий крыс с нормотензивным и гипертензивным статусом методом геномного фингпринтинга / В.А. Адаричев, Н.П. Корохов, Я.П. Остапчук и др. // Генетика. - 1996. - Т.32, №12. - С.1669-1672.

2. Акберова Н.И. Сравнение данных. II непараметрические критерии значимости / Н.И, Акберова.- Казань.: Каз. гос. унив. им. В.И. Ульянова-Ленина, 2004. 52 с.

3. Баранов B.C. Геном человека и гены «предрасположенности». Введение в предиктивную медицину / Баранов, Е.В. Баранова, Т.Э. Иващенко, М.В. Асеев СПб.: Интермедика, 2000.-271 с.

4. Баранов B.C. Молекулярная медицина: молекулярная диагностика, превентивная медицина и генная терапия / B.C. Баранов // Молекулярная биология. 2000 а. - Т. 34, №4. - С.684-695.

5. Баранов B.C. Программа «Геном человека» как научная основа профилактической медицины / B.C. Баранов // Вестн. РАМН. 2000 б. -№10. -С.27-37.

6. Баранов B.C., Хавинсон В.Х. Определение генетической предрасположенности к некоторым мультифакторным заболеваниям. Генетический паспорт / Ред. В.Х. Хавинсона. СПб.: ИКФ «Фолиант». -2001.-48 с.

7. Бойцов С.А. Десять лет поиска генетической основы гипертонической болезни: трудности и перспективы / С.А. Бойцов // Артериальная гипертензия. -2002. -Т.8, № 5.

8. Бочков Н.П. Роль молекулярно-генетической диагностики в прогнозировании и профилактике возрастной патологии / Н.П. Бочков, Д.В. Соловьева, Д.Л.Стрекалов, В.Х Хавинсон //Клин. медицина.-2002.-№2-€.4-8.

9. Бражник В.А. Полиморфные маркеры I/D и G7831A гена фермента, превращающего ангиотензин I, и гипертрофия миокарда у больных артериальной гипертонией / В.А. Бражник, Н.М. Горашко, Л.О. Минушкина, и др. // Кардиология. 2003. - №2. - С.44-49.

10. Бубнов Ю.И. Семейная артериальная гипертония / Ю.И. Бубнов, Г.Г. Арабидзе, А.А. Павлов. // Кардиология. 1997. - №1. - С.4-7.

11. Виноградова С.В. Роль е2/еЗ/е4 полиморфизма гена аполипопротеина Е в развитии дислипопротеинемии и его влияние на эффективность гиполипидемической терапии / С.В. Виноградова // Цитология и генетика. -2006 а. Т.40, № 6. - С.59-72.

12. Виноградова С.В. Роль полиморфизма е2/еЗ/е4 гена аполипопротеина Е в развитии атеросклероза / С.В. Виноградова // Медицинская генетика. 2006 б. - №2. -С.3-10.

13. Воевода М.И. Этногенетические особенности подверженности атеросклерозу в этнических группах Сибири (на примере гена аполипопротеина Е) / М.И. Воевода, В.А. Степанов, А.Г. Ромащенко, и др. // Бюллетень СО РАМН. 2006. - №2. - С.63-72.

14. Габитов Н.И. Изучение генетических факторов развития артериальной гипертензии в различных группах населения Республики Башкортостан: автореф. дис.канд. мед. наук / Габитов Наиль Исмагилович.-Уфа.-1999- 26 с.

15. Гайцхоки B.C. Взаимоотношение генотип-фенотип как проблема молекулярной генетики наследственных болезней человека / B.C. Гайцхоки // Соросовский образовательный журнал. 1998. - №8. - С.36-41.

16. Галактионов С.Г. Ангиотензин / С.Г. Галактионов, Г.Б. Никифорович, Г.И. Чипинс, и др.- Рига: Зинатне, 1979. 219 с.

17. Геномика медицине. Научное издание / Под ред. академика РАМН В.И. Иванова и академика РАН Л. Л. Киселева. - М.: ИКЦ «Академкнига», 2005.-392 с.

18. Гинтер Е.К. Медицинская генетика / Е.К. Гинтер. М.: Медицина, 2003.-448 с.

19. Гогин Е.Е. Гипертоническая болезнь и ассоциированные болезни системы кровообращения: основы патогенеза, диагностика и выбор лечения / Е.Е. Гогин. М.: Ньюдиамед, 2006. - 254 с.

20. Горбунова В.Н. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний / В.Н. Горбунова, B.C. Баранов. СПб.: «Специальная Литература», 1997.- 287 с.

21. Данковцева Е. Полиморфизм генов факторов гемостаза у пациентов с ранним развитием ишемической болезни сердца / Е. Данковцева, Д. Затейщиков, Б. Сидоренко // Кардиология. 2006. - №2. - С.56-65.

22. Животовский Л.А. Популяционная биометрия / Л.А. Животовский. -М.: Наука, 1991.-271 с.

23. Жуковский Г.С. Артериальная гипертензия: эпидемиологическая ситуация в России и других странах / Г.С. Жуковский, В.В. Константинов, Т.А. Варламова, и др. // Русск. медицин, журнал.- 1997-Т.5, №9. С.551-558.

24. Климов А.Н. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения / А.Н. Климов, Н.Г. Никульчева.- СПб: ПитерКом, 1999.-512 с.

25. Колчанов Н.А. Генные сети / Н.А. Колчанов, Е.А. Ананько, Ф.А. Колпаков и др. // Молекулярная биология. 2000. - Т.34, №4. - С.533-544.

26. Косянкова Т.В. Взаимосвязь полиморфизма Т174М гена ангиотензиногена с клиническими проявлениями эссенциальной гипертензии / Т.В. Косянкова, К.В. Пузырев, В.А. Степанов, и др. // Бюллетень эсперим. биол. и мед. 1999. - Т. 127. - Приложение 1. -С.98-100.

27. Кошечкина Е.В. Терапивтический. архив. 1995. - №4. - С.59—61.

28. Кривенко А.А. Анализ коссегригации полиморфных ДНК маркеров с величиной артериального давления у крыс гипертензивной линии НИСАГ / А.А. Кривенко, М.Л. Филипенко // Генетика. -1999. - Т.35, № 2. - С.164-169.

29. Кушаковский М.С. Гипертоническая болезнь (эссенциальная гипертензия): причины, механизмы, клиника, лечение. / М.С. Кушаковский . -М.: СПб, 1995.-311с.

30. Маниатис Т. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Д. Сэмбрук. М.: Мир, 1984. - 480 с.

31. Меньшиков В.В. Нормальные величины для унифицированных методов в единицах СИ / В.В. Меньшиков, JT.H. Делекторская, JI.M. Борисенко, и др. // Медицина, Лабораторное дело. 1983. - №4. - С.60-64.

32. Милосердова О.В. Зависимые от возраста изменения частот аллелей и генотипов инсерционно-делеционного полиморфизма гена ангиотензин-превращающего фермента / О.В. Милосердова, П.А. Сломинский, С.А. Лимборская // Генетика. 2002. - Т.38, №1. - С. 105-107.

33. Мустафина О.Е. Полиморфизм гена ангиотензин-превращающего фермента при гипертонической болезни / О.Е. Мустафина, И.А. Туктарова, Г.Я. Камалтдинова, и др. // 5-й Российский конгресс «Человек и лекарство» Москва, 1998.-С.335.

34. Мустафина О.Е. Связь полиморфного маркера Т174М гена ангиотензиногена с эссенциальной гипертензией у русских и татар Башкортостана / О.Е. Мустафина, Т.Р. Насибуллин, Э.К. Хуснутлинова // Молекулярная биология. 2002. - Т.36, №4. - С.599-604.

35. Мустафина О.Е. Полиморфизм гена аполипопротеина Е и риск инфаркта миокарда / О.Е. Мустафина, Л.И. Шагисултанова, И.А. Туктарова, и др. // Молекулярная биология. 2002 а. - Т.36, №6. - С.978-984.

36. Мычка В.Б. Артериальная гипертония и ожирение / В.Б. Мычка, В.В. Горностаев, Н.Ю Шикина, Чазова И.Е. // Consilium medicum. 2001. Приложение. - вып 2. - С. 17-22.

37. Никитин Ю.П. Гипертрофия левого желудочка: популяционное и молекулярно-генетическое исследование / Ю.П. Никитин, С.Н. Малютин, М.М. Долгих, и др. // Кардиология. 1999. - №6. - С.27-32.

38. Оганов Р.Г. Сердечно-сосудистые заболевания в Российской Федерации во второй половине XX столетия: тенденции, возможные причины, перспективы / Р.Г. Оганов, Г.Я. Масленникова. // Кардиология. -2000. № 6. - С.4-9.

39. Оганов Р.Г. Профилактика сердечно-сосудистых заболеваний: возможности практического здравоохранения / Р.Г. Оганов. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2002. - Т. 1. - С.5-9.

40. Ослопов В.Н., Программы первичной и вторичной профилактики основных сердечно-сосудистых заболеваний в Республике Татарстан / В.Н. Ослопов // Казанский медицинский журнал 1999.-T.LXXX, №2.-С.130-134.

41. Пузырев В.П. Генетика артериальной гипертензии (современные исследовательские парадигмы) / Пузырев В.П. // Клиническая медицина. -2003. №1. - С.12-18.

42. Пузырев В.П. Состояние и перспективы геномных исследований в генетической кардиологии / В.П. Пузырев // Вестник РАМН. 2000. - №7. -С.28-33.

43. Пчелина С.Н. Структурный полиморфизм гена параоксоназы как фактор риска развития инфаркта миокарда у мужчин до 45 лет / С.Н. Пчелина, С.В. Кудинов, О.А. Беркович. и др. // Медицинский академический журнал. 2003. - Т.З, №2. - С.58-64.

44. Репин B.C. Клеточные механизмы атеросклероза. / Репин B.C. // Соросовский образовательный журнал. 1998. - №9. - С.34-38.

45. Рогаев Е.И. Генетические факторы и полигенная модель болезни Альцгеймера / Е.И. Рогаев // Генетика. 1999. - Т.35, № 11. - С.1558-1571.

46. Садыкова А.Р. Распространение факторов риска у женщин с артериальной гипертонией репродуктивного возраста г. Казани / А.Р. Садыкова, А.Р. Шамкина // Кардиолог. 2006. - №1. - С. 43-48.

47. Степанов В.А. Взаимосвязь структурных вариантов гена аполипопротеина с ишемической болезнью сердца и уровнем липидов плазмы крови / В.А. Степанов, В.П. Пузырев, С.В. Лемза и др. // Генетика. -1995.-Т.З 1,№3.-С.405-409.

48. Чистяков Д.А. Полиморфизм Т174М гена ангиотензиногена связан с гипертонической болезнью в московской популяции / Д.А. Чистяков Р.И. Туракулов, С.В. Моисеев и др. // Молекулярная биология. 1999. - Т.ЗЗ, №4. - С.592-594.

49. Чистяков Д.А. Генетические маркеры гипертонической болезни / Д.А. Чистяков, Р.И. Туракулов // Генетика. -1999 а. Т.35, №5. - С.565-573.

50. Шальнова С.А. Роль систолического и диастолического артериального давления для прогноза смертности от сердечно-сосудистых заболеваний / С.А. Шальнова, А.Д. Деев, Р.Г. Оганов // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2002. - №1. - С. 10-15.

51. Шальнова С.А. Проблемы лечения артериальной гипертонии / С.А. Шальнова // Кардиоваскул. тер. и профилактика. 2003. - Т.2, №3. - С. 17-31.

52. Ярема Н.И. Липопротеины и перекисное окисление липидов при гипертонической болезни и проведение гипотензивной терапии / Н.И. Ярема Б.И. Рудык//Терапевтический архив. 1991. -Т.8. - С. 144-146.

53. Adachi Т. Association of extracellular-superoxide dismutase phenotype with the endothelial constitutive nitric oxide synthase polymorphism / T. Adachi, X.L. Wang // FEBS Lett. 1998. - Vol.433. - P.166-168.

54. Ahn Y.I. Two DNA polymorphisms in the lipoprotein lipase gene and their associations with factors related to cardiovascular disease / Y.I. Ahn, M.I. Kamboh, R.F. Hamman et al. // J Lipid Res. 1993 - Vol.34. - P.421-428.

55. Barath A. Roles of paraoxonase and oxidative stress in adolescents with uraemic, essential or obesity-induced hypertension / A. Barath, I. Nemeth, E. Karg et al. // Kidney Blood Press Res. 2006. - Vol.29, №3. - P.144-151.

56. Baynes C. Association of high density lipoprotein cholesterol with plasma lipolytic activity and C-peptide concentration in type 2 diabetes / C. Baynes, S.G. Rains, J. Wadsworth et al. // Diabetes Res. 1991. - Vol.16, №2. - P.49-53.

57. Beckman J.S. Nitric oxide, superoxide and per-oxynitrite: the good, the bad and the ugly / J.S. Beckman, W.H. Koppenol // Am J Physiol. 1996. - Vol.271. -P. 1424-1437.

58. Benjafield A.V. Association analyses of endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in essential hypertension / A.V. Benjafield, B.J. Morris. // Am J Hypertens. 2000. - Vol.13, №9. - P.994-998.

59. Betteridge D.J. LDL heterogeneity: implications for atherogenicity in insulin resistance and NIDDM / D.J. Betteridge // Diabetologia. 1997. - Vol.40. -P.149-151.

60. Bhavani A.B. Lipid profile and apolipoprotein E polymorphism in essential hypertension / A.B. Bhavani, K.B. Sastry, N.K. Reddy et al. // Indian Heart J. -2005. Vol.57, №2. - P. 151-157.

61. Biao L.I. Lipoprotein Lipase Gene Polymorphisms and Blood Pressure Levels in the Northern Chinese Han Population / L.I. Biao, G.E. Dongliang, W. Yuelan et al. // Hypertens Res. 2004. - Vol.27. - P. 373-378.

62. Bjorck S. Deletion insertion polymorphism of the angiotensin converting enzyme gene and progression of diabetic nephropathy / S. Bjorck, G. Blohm, C. Sylven et al. // Nephrol Dial Transplant. 1997. - Vol.12. - P.67-70.

63. Bland J.M. Statistics notes. The odds ratio. / J.M. Bland, D.G. Altman. // BMJ. 2000. - Vol.27. - P. 1468.

64. Blatter Garin M.C. Paraoxonase-1 and serum concentrations of HDL-cholesterol and apoA-I / M.C. Blatter Garin, X. Moren, R.W. James // J Lipid Res. 2006. - Vol.47, №3. - P.515-520.

65. Bloem L.J. The serum angiotensinogen concentration and variants of the angiotensinogen gene in white and black children / L.J. Bloem, A.K. Manatunga, D.A.Tewksbury et al. // J. Clin Invest. 1995. - Vol.95. - P.948-953.

66. Boerwinkle E. Genetic analysis of atherosclerosis: a research paradigm for the common chronic disease / E. Boerwinkle, D.L. Ellsworth, M. Hallman et al. // Hum. Genet. 1996. - №5. - P.1405-1410.

67. Bohn M. Insertion/deletion (I/D) polymorphism at the locus for angiotensin I-converting enzyme and myocardial infarction / M. Bohn, K.E. Berge, A. Bakken et al. // Clin. Genet. 1993. - Vol.44. - P.292-297.

68. Bonafe M. Genetic analysis of Paraoxonase (PON1) locus reveals an increased frequency of Argl92 allele in centenarians / M. Bonafe, F. Marchegiani, M. Cardelli et al. // Europ. J. Hum. Genet. 2002. - Vol.10. - P.292-296.

69. Bonnardeaux A. Lack of evidence for linkage of the endothelial cell nitric oxide synthase gene to essential hypertension / A. Bonnardeaux, S. Nadaud, A. Charru et al. // Circulation. 1995. - Vol.91. - P.96-102.

70. Bosse Y. Evidence for a major quantitative trait locus on chromosome 17q21 affecting low-density lipoprotein peak particle diameter / Y. Bosse, L Perusse, JP. Despres //Circulation. -2003. -Vol.107, №18. -P.2361-2368.

71. Brand E. Detection of putative functional angiotensinogen (AGT) gene variants controlling plasma AGT levels by combined segregation-linkage analysis / E. Brand, N. Chatelain, F. Paillard et al. // Europ. J. Hum. Genet. 2002. - Vol. 10.-P.715-723.

72. Britten M. The role of endothelial function for ischemic manifestations of coronary atherosclerosis / M. Britten, V. Schuchinger // Herz. 1998. - Vol.23, № 2. -P.97-105.

73. Burke V. Family history as a predictor of blood pressure in a longitudinal study of Australian children / V. Burke, M.P. Gracey, L.J. Beilin et al. // J Hypertens. 1998. - Vol.16, №3. -P.269-276.

74. Cambien F. Deletion polymorphism in the gene for angiotensin-converting enzyme is a potent risk factor for myocardial infarction / F. Cambien, O. Poirier, L. Lecerf et al. //Nature. 1992. - Vol.359. - P.641-644.

75. Caulfield M. Linkage of the angiotensinogen gene to essential hypertension / M. Caulfield, P. Lavender, M. Farrall et al. // N. Engl. J. Med. 1994. - Vol.330. -P. 1629-1633.

76. Caulfield M. Linkage of the angiotensinogen gene locus to human essential hypertension in African Caribbeans / M. Caulfield, P. Lavender, J. Newell-Price et al. // J. Clin. Invest. 1995. - Vol.96. - P.687-692.

77. Chamberlain J.C. DNA polymorphisms at the lipoprotein lipase gene: associations in normal and hypertriglyceridaemic subjects / J.C. Chamberlain, J.A. Thorn, K. Oka et al. // Atherosclerosis. 1989. - Vol.79. - P.85-91.

78. Clee S.M. The LPL S447X SNP is associated with decreased blood pressure and plasma triglycerides, and reduced risk of coronary artery disease / S.M. Clee, 0. Loubser, J. Collins et al. // Clin Genet. -2001. Vol.60. - P.293 - 300.

79. Clifford C.P. Abstracts of the 16th Scientific Meeting of the International Society of Hypertension. / C.P. Clifford, D.R. Nunez. // Glasgow, UK, Abstract 3, 1996.-1598 p.

80. Collins F.S. Implications of the Human Genome Project for medical science / F.S. Collins, V.A. McKusick // JAMA. 2001. - Vol.285, №5.- P.540-544.

81. Cotton R.G.H., Scriver C.R. Proof of "Disease causing" mutations / R.G.H. Cotton, C.R. Scriver //Hum. Mut. 1998. - Vol.12. - P. 1-10.

82. Corvol P. Molecular genetics of human hypertension: role of angiotensinogen / P. Corvol, X. Jeunemaitre, F. Soubrier et al. // Endocrine Reviews. 1992. - Vol. 18. - P.662-677.

83. Curtiss L.K. Apolipoprotein E and atherosclerosis / L.K. Curtiss, W.A. Boisvert // Curr. Opion. Lipidol. 2000. - Vol.11. - P.243-251.

84. Davies H.G. The effect of the human serum paraoxonase polymorphism is reversed with diazoxon, soman and sarin / H.G. Davies, J.R. Rebecca, M. Keifer et al. // Nat Genet. 1996. - Vol.4. - P.334-336.

85. Davignon J. Apolipoprotein E polymorphism and atherosclerosis / J. Davignon, R. E. Gregg, С. E Sing //Arteriosclerosis. 1988. - Vol.8. - P.l-21.

86. Durrington P.N. Paraoxonaseand atherosclerosis / P.N. Durrington, B. Mackness, M.I. Mackness // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2001. - Vol.21. -P.473-480.

87. European Society of Hypertension European Society of Cardiology guidelines for the management of arterial hypertension // J Hypertens. - 2003. -Vol.21.-Р.101Ы015.

88. Evans A. E. Polymorphisms of the angiotensin-converting-enzyme gene in subjects who die from coronary heart disease / A. E. Evans, O. Poirier, F. Kee et al. // Quart. J. Med. 1994. - Vol.87. - P.211-214.

89. Fardella C. G (-6) A variant of angiotensinogen gene and aldosterone levels in hypertensives / C. Fardella, P. Zamorano, L. Mosso et al. // Hypertension. -1999.-Vol.34.-P.779-781.

90. Fomage M. Variation at the M235T locus of the angiotensinogen gene and essential hypertension: a population-based case-control study from Rochester, Minnesota / M.Fornage, S.T.Turner, C.F.Sing et al. // Hum Genet. 1995. -Vol.96.-P.295-300.

91. Garces, C. Influence of birth weight on the apo E genetic determinants of plasma lipid levels in children / C. Garces, M. Benavente, H. Ortega et al. // Pediat. Res. 2002. - Vol.52. - P.873-878.

92. Gharavi A.G. Ambulatory blood pressure monitoring for detecting the relation between angiotensinogen gene polymorphism and hypertension / A.G. Gharavi, M.L. Lipkowitz, J.A. Diamond et al. // Am J Hypertens. 1997. -Vol.10, №6.-P.687-691.

93. Giallard-Sanchez I. Assignment by in situ hybridization of angiotensinogen to chromosome band lq32: the same region as human renin gene / I. Giallard-Sanchez, M.G. Matteri, E. Clauser et al. // Hum Genet.-1990.-Vol.84.- P341-343.

94. Gryglewski R.J. Superoxide anion is involved in the breakdown of endothelium derived vascular relaxing factor / R.J. Gryglewski, R.M. Palmer, S. Moncada // Nature. 1986. - Vol.320. - P.446-456.

95. Guo X. Effect of lipoprotein lipase gene polymorphism on plasma lipid levels, BMI and subcutaneous fat distribution in simple obesity children / X. Guo, R. Chen, B. Mo et al. // Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi. 2000. - Vol.17, № 2. - P. 105-107.

96. Harel M. Structure and evolution of the serum paraoxonase family of detoxifying and anti-atherosclerotic enzymes / M. Harel, A. Aharoni, Harel M, L. Gaidukov et al. // Nat Struct Mol Biol. 2004. - Vol. 11. - P.412-419.

97. Hata A. Angiotensinogen as a risk factor for essential hypertension in Japan / A. Hata, C. Namikawa, M. Sasaki et al. // J. Clin Invest. 1994. - Vol.93. -P.1285-1287.

98. Hegele R.A. A polymorphism of the paraoxonase gene associated with variation in plasma lipoproteins in a genetic isolate / R.A. Hegele, J.H. Brunt, P.W. Connelly // Arterioscler Thromb Vase Biol. 1995. - Vol.15. - P.89 -95.

99. Hegele R.A. Genetic and biochemical factors associated with variation in blood pressure in a genetic isolate / R.A.Hegele, J.H.Brunt, P.W.Connelly // Hypertension. 1996. - Vol.27. -P.308-312.

100. Heizmann C. DNA polymorphism haplotypes of the human lipoprotein lipase gene: possible association with high density lipoprotein levels / C. Heizmann, T. Kirchgessner, P.O. Kwiterowich et al. // Hum Genet. 1991. -Vol.86.-P.578-584.

101. Henderson A.S. Apolipoprotein E allele e4, dementia, and cognitive decline in a population sample / A.S Henderson, S. Easteal, A.F. Jorm et al. // Lancet. -1995.-Vol.346.-P.1387-1390.

102. Herz J. Reelin, lipoprotein receptors and synaptic plasticity / J. Herz, Y. Chen. // Nat Rev Neurosci. 2006. - Vol.7, №11.- P.850-859.

103. Hibi K. Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene Polymorphism and Acute Myocardial Infarction / K. Hibi, T. Ishigami, K. Tamura, et al. // Hypertension. -1998.-Vol.32.-P.521-526.

104. Himbergen T.M. Indications that paraoxonase-1 contributes to plasma high density lipoprotein levels in familial hypercholesterolemia / T.M. Himbergen, M. Roest, J. de Graaf et al. //J Lipid Res. -2005. Vol.46, № 3. -P.445-451.

105. Hingorani A.D. A common variant of the endothelial nitric oxide synthase (glu298-asp) is a major risk factor for coronary artery disease in the UK / A.D.

106. Hingorani , C.F. Liang, J. Fatibene et al. // Circulation. 1999. - Vol.100. -P.1515-1520.

107. Hingorani A.D. Renin-angiotensin system gene polymorphisms influence blood pressure and the response to angiotensin converting enzyme inhibition / A.D. Hingorani, H. Jia, P.A. Stevens et al. // J Hypertens 1995. - Vol.13. -P. 1602-1609.

108. Hixcon J.E. Detection and characterization of new mutation in the human angiotensinogen gene (AGT) / J.E.Hixcon, P.K. Powers // Hum Genet. 1996. -Vol.96. -P.110-112.

109. Hixson J.E. Restriction isotyping of human apolipoprotein E by gene amplification and cleavage with Hhal / J.E. Hixson J// Lipid Res 1990- Vol.31. -P.545 -548.

110. Hopkins P.N. Blunted renal vascular response to angiotensin II is associated with a common variant of the angiotensinogen gene and obesity / P.N. Hopkins, R.P. Lifton, N.K. Hollenberg et al. //J Hypertens. 1996. - Vol.14. - P. 199-207.

111. Huang P.L. Hypertension in mice lacking the gene for endothelial nitric oxide synthase / P.L. Huang, Z. Huang, H. Mashimo et al. // Nature. 1995. -Vol.377.-P.239-242.

112. Humbert R. The molecular basis of the human serum paraoxonase activity polymorphism / R. Humbert, D.A. Adler, C.M. Disteche et al. // Nature Genet. -1993. -Vol.3. -P.73-76.

113. Hunt S.C. No linkage of the lipoprotein lipase locus to hypertension in Caucasians / S.C. Hunt, M.A. Province, L.D. Atwood et al. // J Hypertens. 1999. - Vol.17.-P.39-43.

114. Hyndman M.E., Parsons H.G., Verma S. et al. The T-786C mutation in endothelial nitric oxide synthase is associated with hypertension // Hypertension. -2002.-Vol. 39.-P. 919-922.

115. Ishigami T. Essential hypertension and 5' upstream core promoter region of human angiotensinogen gene / T. Ishigami, S. Umemura, K. Tamura et al. // Hypertension. 1997. - Vol.30. - P. 1325-1330.

116. Iwai N. Molecular variants of the angiotensinogen gene in a Japanese population / N. Iwai, N. Ohmichi, Y. Nakamura et al. // Hypertens Res. 1996. -Vol.17.-P.117-121.

117. Jemaa R. Apolipoprotein E polymorphism in the Tunisian population: frequency and effect on lipid parameters / R. Jemaa, M. Elasmi, C. Naouali et al. // Clin Biochem. 2006. - Vol.39, №8. - P.816-820.

118. Jessup W. Oxidized lipoproteins and nitric oxide / W. Jessup // Curr Opin Lipidol. 1996. - Vol.7. - P.274-280.

119. Jeunemaitre X. Molecular basis of human hypertension: role of angiotensinogen / X. Jeunemaitre, F. Soubrier, Y.V. Kotelevtsev et al. // Cell.-1992. -Vol.71.-P.169-180.

120. Jeunemaitre X. Molecular Genetics of Human Hypertension: Role of Angiotensinogen / X. Jeunemaitre, P. Corvol // Endocrine Reviews. 1997. -Vol.18, №5. -P.662-677.

121. Chen J. Wetmur Increased Influence of Genetic Variation on PON1 Activity in Neonates Environmental Health. / J. Chen, M, Kumar, W. Chan et al. // Perspectives. 2003. - Vol. 111, № 11. - P. 1403-1410.

122. Kannel W.B. Blood pressure as a cardiovascular risk factor: prevention and treatment / W.B.Kannel // JAMA. -1996. Vol.275. - P. 1571-1576.

123. Kannel W.B. Perspectives of systolic hypertension: the Framingham study / W.B. Kannel, T.R. Dawber, D.L. McGee // Circulation. 1986. - Vol.61. -P.l 179-1182.

124. Kato N. Angiotensinogen gene and essential hypertension in the Japanese: Extensive association study and meta-analysis on six reported studies / N. Kato, T. Sugiyama, H. Morita et al. // J. Hypertens. 1999. - Vol.17. - P.757 -763.

125. Kearney P.M. Worldwide prevalence of hypertension: a systematic review / P.M. Kearney, M. Whelton, K. Reynolds et al. // J Hypertens. 2004. - Vol.22, №1.-P. 11-19.

126. Kotti T.J. Brain cholesterol turnover required for geranylgeraniol production and learning in mice / T.J. Kotti, D.M. Ramirez, B.E. Pfeiffer et al. // Proc. Natl Acad. Sci. USA.-2006.-Vol.103.-P.3869-3874.

127. Kunz R. Association between the angiotensinogen 235T-variant and essential hypertension in whites: a systematic review and methodological appraisal / R. Kunz, R. Kreutz, J. Beige et al. // Hypertension.-1997.-Vol.30.-P. 1331-1337.

128. Leeson C.P. Glu298 Asp endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism interacts with environmental and dietary factors to influenceendothelial function / C.P. Leeson, A.D. Hingorani, M.J. Mullen et al. // Circ Res. 2002. - Vol.90. - P. 1153-1158.

129. Leiper J. Biologic significance of endogenous methylargines that inhibit nitric oxide synthase / J. Leiper, P. Vallance // Cardiovasc Res. 1999. - Vol.43. -P.542-548.

130. Leviev I. Promoter polymorphisms of human paraoxonase PON1 gene and serum paraoxonase activities and concentrations / I. Leviev, R.W. James // Arterioscler Thromb Vase Biol. -2000. Vol.20. -P.516-521.

131. Lopes H.F. Lipid metabolism alterations in normotensive subjects with positive family history of hypertension / H.F. Lopes, H.B. Silva, J.A. Soares et al. //Hypertension. 1997. - Vol.30, № 3.2. - P.629-631.

132. Luft F.C. Bad genes, good people, association, linkage, longevity and the prevention of cardiovascular disease / F.C. Luft // Clin Exp Pharmacol Physiol. -1999. Vol.26, № 7. - P.576-579.

133. Luscher T.F. Endothelium-derived vasoactive factors and regulation of vascular tone in human blood vessels / T.F. Luscher // Lung. -1990. Vol.168. -P.27-34.

134. Mackness B. Paraoxonase Status in Coronary Heart Disease. Are Activity and Concentration More Important Than Genotype / B. Mackness, G. Davies, W. Turkie et al. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.- 2001.- Vol.21. P. 1451 - 1457.

135. Mackness B. Serum paraoxonase (PON1) 55 and 192 polymorphism and paraoxonase activity and concentration in non-insuiin dependent diabetes mellitus / B. Mackness, M. Machness, S. Arrol et al. // Atherosclerosis. 1998. -Vol.139.-P.341-349.

136. Maeda Y. Diurnal blood pressure rhythm in hypertensives with parental history of stroke / Y. Maeda, U. Ikeda, H. Ebata et al. // Am J Hypertens. 1997. -Vol.10, № 5.-P.562-564.

137. Mahley R.W. Apolipoprotein E: cholesterol transport protein with expanding role in cell biology / R.W. Mahley // Science. 1988. - Vol.240. -P.622-630.

138. Mahmood S.M. Association of angiotensin converting enzyme gene polymorphisms with left ventricular hypertrophy / S.M. Mahmood, D. Saleheen, S. Siddiqui et al. // Hypertens Res. 2005. - Vol.28, №4. - P.345-349.

139. Mahmood S.M. Association of the angiotensin-converting enzyme (ACE) gene G2350A dimorphism with essential hypertension. / S.M. Mahmood, K. Saboohi, O.S. Ali et al. //J Hum Hypertens. -2003. Vol.17, №10. -P.719-723.

140. Malek A.M. Modulation by pathophysiological stimuli of the shear stress-induced up-regulation of endothelial nitric oxide synthase expression in endothelial cells / A.M. Malek, S. Izumo, S.L. Alper // Neurosurgery. 1999. - Vol.45. -P.334-344.

141. Mamotte C. Comparison of the LDL-receptor binding of VLDL and LDL from apoE4 and ароЕЗ homozygotes / C. Mamotte, D.S. Cyril, M. Sturm et al. // Am. J. Physiol. 1999. - Vol.276. -P.553-557.

142. Marre M. Relationship between angiotensin I converting enxyme gene polymorphism, plasms levels, and diabetic retinal and renal complications / M. Marre, P. Bernadet, Y. Gallois et al. // Diabetes. 1997. - Vol.47. - P.1585-1595.

143. Marsden P. A. Molecular cloning and characterization of human endothelial nitric oxide synthase / P.A. Marsden, K.T. Schappert, H.S. Chen et al. // FEBS Lett. 1992. - Vol.307. -P.287-292.

144. Matsubara M. Genetic determination of human essential hypertension / M. Matsubara // Tohoku J Exp Med. 2000. - Vol.192, № 1. - P. 19-33.

145. Mattei M.G. Angiotensin-I converting enzyme gene is on chromosome 17 / M.G. Mattei, C. Hubert, F. Alhenc-Gelas et al. // Cytogenet. Cell Genet. 1989. -Vol.51.-P.1041.

146. McKenzie C.A. Trans-ethnic fine mapping of a quantitative trait locus for circulating angiotensin I-converting enzyme (ACE) / C.A. McKenzie, G.R. Abecasis, B. Keavney et al. //Hum Mol Genet. -2001. Vol.10. - P. 1077-1084.

147. Miyahara K. Cloning and structural characterization of the human endothelial nitric-oxide-synthase gene / K. Miyahara, T. Kawamoto, K. Sase et al. // Err J Biochem. 1994. - Vol.223. - P.719-726.

148. Miyamoto Y. Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene is positiviy associated with essential hypertension / Y. Miyamoto, Y. Saito, N. Kajiyama et al // Hypertension. 1998. - Vol.32. - P.3-5.

149. Morbois-Trabut L. Apolipoprotein E genotype and plasma lipid levels in Caucasian diabetic patients / L. Morbois-Trabut, C. Chabrolle, M.A. Garrigue et al. // Diabetes Metab. 2006. - Vol.32, №3. - p.270-275.

150. Morise T. Rapid detection and prevalence of the variants of the angiotensinogen gene in patients with essential hypertension / T. Morise, Y. Takeuchi, R. Takeda // J. Intern. Med. 1995. - Vol.235. - P. 175-180.

151. Nakai K. Polymorphism of the apolipoprotein E and angiotensin I converbing enzyme genes in Japanese patients with myocardial infarction / K. Nakai, T. Fusazaki, T. Zhang et al. // Coronary Arbery Disease. 1998. - Vol.9. -P.329-334.

152. Nebert D.W. Polymorphisms in drug metabolizing enzymes: what is their clinical relevance and why do they exist / D.W. Nebert // Am. J. Hum. Genet. -1997.-Vol.60.-P.265-271.

153. Nishiuma S. Effect of the angiotensinogen gene Met235-*Thr variant on blood pressure and other cardiovascular risk factors in two Japanese populations / S. Nishiuma, K. Kario, K. Kayaba et al. //J. Hypertens.-1995.-Vol.l3.-P.717-722.

154. Niu T. Angiotensinogen gene and hypertension in Chinese / T. Niu, X. Xu, J. Rogus et al. // J. Clin Invest. 1998. - Vol. 101. - P. 188-194.

155. Oda M.N. Paraoxonase 1 overexpression in mice and its effecton high-density lipoproteins / M.N. Oda, J.K. Bielicki, T.T. Ho et al. // Biochem.Biophys. Res. Commun. 2002. - Vol.290. - P.921-927.

156. Odawara M. Paraoxonase polymorphism Glnl92-Arg is associated with coronary heart disease in Japanese noninsulin-dependent diabetes mellitus / M. Odawara, Y. Tachi, K. Yamashita // J. Clin. Endocr. Metab. 1997. - Vol.82. -P.2257-2260.

157. Paik Y.K. Nucleotide sequenceand structure of the human apolipoprotein E gene / Y.K. Paik, D.J. Chang, C.A. Reardon et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1989. -Vol.82. -P.3445-3449.

158. Parving H.H. Protection of kidney and decrease in albuminuria by captopril in insulin dependent diabetics with nephropathy / H.H. Parving, E. Hommel, U.M. Smidt // Brit Med J. 1988. - Vol.27. - P. 1086-1091.

159. Pavlovic M. Angiotensin I converting enzyme and angiotensinogen gene polymorphisms related to 24-h blood pressure in paediatric type I diabetes mellitus / M. Pavlovic, R.W. Holl, U. Haeberle et al. // Eur. J. Pediatr. 1999. - Vol.158. -P. 18-23.

160. Persu A. Modifier effect of ENOS in autosomal dominant polycystic kidney disease / A. Persu, M.S. Stoenoiu, T. Messiaen et al. // Hum Molecul Genet. -2002.-Vol.11.-P.229-241.

161. Quyyumi A.A. Endothelial fimctionin health and disease: new insights into the genesis of cardiovascular disease / A.A. Quyyumi // Am J Med. 1998. -Vol.105.-P.32-39.

162. Rao S. Endothelial nitric oxide synthase intron 4 polymorphism is a marker for coronary artery disease in African-American and Caucasian men / S. Rao, H. Austin, M.N Davidoff et al. // Ethn Dis. -2005. Vol.15, № 2. - P. 191-197.

163. Rigat B. An insertion/deletion polymorphism in the angiotensin I-converting enzyme gene accounting for half the variance of serum enzyme levels / B. Rigat, C. Hubert, F. Alhenc-Gelas et al. //J Clin Invest. 1990. - Vol.86. - P. 1343-1346.

164. Robinson, L.J. Isolation and chromosomal localization of the human endothelial nitric oxide synthase (NOS3) gene / L. J. Robinson, S. Weremowicz, C.C. Morton et al. // Genomics. 1994. - Vol.19. - P.350-357.

165. Saha N. Influence of serum paraoxonase polymorphism on serum lipids and apolipoproteins / N. Saha, A.C. Roy, S.H. Teo et al. // Clinical Genetics. 1991. -Vol.40. -P.277-282.

166. Saito T. A quantitative evaluation of the effects of sex and age on the positivity of family history of hypertension / T. Saito, I. Saito, S. Nanri et al. // J Epidemiol. 1998. - Vol.8, № 2. - P.99-105.

167. Salimi S. Endothelial nitric oxide synthase gene intron4 VNTR polymorphism in patients with coronary artery disease in Iran / S. Salimi, M. Firoozrai, I. Nourmohammadi et al. // Indian J Med Res. 2006. - Vol.124, №6. -P.683-688.

168. Salminen M. Apolipoprotein E polymorphism and changes in serum lipids during a family-based counselling intervention / M. Salminen, T. Lehtimaki, Y.M. Fan et al. // Public Health Nutr. 2006. - Vol.9, №7. - P.859-865.

169. Sandrim V.C. Influence of eNOS haplotypes on the plasma nitric oxide products concentrations in hypertensive and type 2 diabetes mellitus patients / V.C. Sandrim, R.W. Syllos, H.R. Lisboa et al. // Nitric Oxide. 2007. - Vol.16, №3. -P.348-355.

170. Sato N. Association of variants in critical core promoter element of angiotensinogen gene with increased risk of essential hypertension in Japanese / N. Sato, T. Katsuya, H. Rakugi et al. // Hypertension. 1997. - Vol.30. -P.321-325.

171. Schachter F. Genetic associations with human longevity at the APOE and ACE loci / F. Schachter, L. Faure-Delanef, F. Guenot et al. // Nature Genet. -1994. -Vol.6. -P.29-32.

172. Schmidt S. The Diabetic Nephropaty Study Group: assotiation of ACE gene polymorphism and diabetic nephropaty / S. Schmidt, N. Schone, E. Ritz. // Kidney Int. 1995. - Vol.47. - P. 1176-1181.

173. Schunkert H. Association between a deletion polymorphism of the angiotensin-converting-enzyme gene and left ventricular hypertrophy / H. Schunkert, H.W. Hense, S.R. Holmer et al. // J. New Eng. J. Med. 1994. -Vol.330.-P.1634-1638.

174. Schunkert H. Associations between circulating components of the renin-angiotensin-aldosterone system and left ventricular mass / H. Schunkert, H.W. Hense, M. Muscholl et al. // Heart. 1997. - Vol.77, № 1. - P.24-31.

175. Serrato M. A variant of human paraoxonase/arylesterase (HUMPONA) gene is a risk factor for coronary artery disease / M. Serrato, A.J. Marian // J. Clin. Invest. 1995. - Vol.96. - P.3005-3008.

176. Sethi A.A. Angiotensinogen polymorphisms and elevated blood pressure in the general population : the Copenhagen city heart study. / A.A. Sethi, B.G. Nordestgaard, B. Agerholm-Larsen et al. // Hypertension. 2001. - Vol.37. -P.875-881.

177. Shih D.M. Mice lacking serum paraoxonase are susceptible to organophosphate toxicity and atherosclerosis / D.M. Shih, L. Gu, Y.R. Xia. // Nature. 1998. - Vol.394. - P.284-287.

178. Song Y. Meta-Analysis: Apolipoprotein E Genotypes and Risk For Coronary Heart Disease / Y. Song, M.J. Stampfer, S. Liu // Ann. Int. Med. 2004. -Vol.141, №2. -P.137-147.

179. Su S.Y. Paraoxonase gene cluster variations associated with coronary heart disease in Chinese Han women / S.Y. Su, J.H. Chen, J.F. Huang et al. // Chin Med J . 2005. - Vol.20. - P. 1167-1174.

180. Suehiro T. A polymorphism upstream from the human paraoxonase (PON1) gene and its association with PON1 expression / T. Suehiro, T. Nakamura, M. Inoue et al. // Atherosclerosis. 2000. - Vol.150. - P.295-298.

181. Tanimoto K. Angiotensinogen-deficient mice with hypotension / K. Tanimoto, F. Sugiyama, Y. Goto et al. // Biol Chem. 1994. - Vol.269. -P.31334-31337.

182. Tesfamariam B. Free radicals in diabetic endothelial cell dysfunction / B. Tesfamariam //Free Radic Biol Med. 1994. - Vol.16, №3. -P.383-391.

183. Tiret L. Evidence, from combined segregation and linkage analysis, that a variant of the angiotensin I-converting enzyme (ACE) gene controls plasma ACElevels / L. Tiret, B. Rigat, S. Visvikis et al. 11 Am. J. Hum. Genet. 1992. -Vol.51. -P. 197-205.

184. Tsukada T. Evidence of association of the eNOS gene polymorphism with plasma NO metabolite levels in humans / T. Tsukada, K. Yokoyama, T. Arai et al. // Biochem Biophys Res Commun. 1998. - Vol.245. - P. 190-193.

185. Uematsu M. Regulation of endothelial cell nitric oxide synthase mRNA expression by shear stress / M. Uematsu, Y. Ohara, J.P. Navas et al. // Am J Physiol. 1995. - Vol.269. - P.1371-1378.

186. Utermann G. Genetics of the apolipoprotein E system in man / G. Utermann, U. Langenback, U. Beisiegel et al. // Am. J. Hum. Genet. 1980. - Vol.32. -P.339-347.

187. Uzun H. Oxidative stress in white coat hypertension; role of paraoxonase Journal of Human / H. Uzun, Y. Karter, S. Aydin et al. // Hypertension. 2004. -Vol.18. -P.523-528.

188. Walker W.G. Relation between blood pressure and renin, renin substrate, angiotensin II, aldosterone and urinary sodium and potassium in 574 ambulatory subjects / W.G. Walker, P.K. Whelton, H. Saito et al. // Hypertension. 1979. -Vol.1.-P.287-291.

189. Wang X.L. Genetic contribution of the endothelial constitutive nitric oxide synthase gene to plasma nitric oxide levels / X.L. Wang, M.C. Mahaney, A.S. Sim et al. // Arterioscler Thromb Vase Biol. 1997. - Vol.17. -P.3147-3153.

190. Wang Z. SNPs, protein structure and disease / Z. Wang, J. Moult // Hum. Mut. 2001. - Vol. 17. - P.263-270.

191. Ward K. Influence of insulin sympathetic nervous system activity and obersity on BP: the normative aging study / K. Ward, D. Sparrow, L. Landsberg et al. // J.Hypertens. 1996. - Vol.14, № 3. - P.301-308.

192. Weisgraber K.H. Apolipoprotein E: structure-function relationships / К. H. Weisgraber // Adv. Protein Chem. 1994. - Vol.45. - P.249-302.

193. Weisgraber K.H. Human E apoprotein heterogeneity: cysteine-arginine interchanges in the amino acid sequence of the apoE isoforms / K.H. Weisgraber, S.C. Rail, R.W. Mahley//J. Biol. Chem. 1981. - Vol.256. -P.9077-9083.

194. Williams R.R. Familial dyslipidemic hypertension: evidence from 58 Utah families for a syndrome present in approximately 12% of patients with essential hypertension / R.R. Williams, S.C. Hunt, P.N. Hopkins et al. // JAMA. 1988. -Vol.259.-P.3579-3586.

195. Wilson P. W. Apolipoprotein E alleles and Risk of Coronary Disease: a Metaanalysis / P.W. Wilson, E.J. Schaefer, M.G. Larson et al. // Arrterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1996. - Vol.16, № 10. - P.1250-1255.

196. Winkelmann BR. Genetics of coronary heart disease: current knowledge and research principles./ BR Winkelmann, J Hager, WE Kraus // Am Heart J. 2000. -Vol.140.-P.l 1-26.

197. World Health Organization-International Society of Hypertension guidelines for the management of hypertension // J Hypertens. 1999. - Vol. 17. - P. 151-183.

198. Wu D.A. Quantitative trit locus mapping of human blood pressure to a genetic region at or near the lipoprotein lipase gene locus on chromosome 8p22 / D.A. Wu, X. Bu, C.H. Warden et al. // J Clin Invest.- 1996.-Vol.97.-P.2111-2118.

199. Yang W.J. Variation near the re-gion of the lipoprotein lipase gene and hypertension or blood pressure levels in Chinese / W.J. Yang, J.F. Huang, D.L. Ge, et al. // Hypertens Res. 2003. - Vol.26. -P.453 - 458.

200. Yang G. Functional expression of the human angiotensinogen gene in transgenic mice / G. Yang, D.C. Merrill, M.W. Thompson et al. // J Biol Chem. -1994. Vol.269. - P.32497-32502.

201. Ye Q. The relationship of polymorphism of angiotensinogen and angiotensin converting enzyme with essential hypertension / Q. Ye, K. Wu, L. Xie et al. // Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi. -2000. Vol.17, №1. -P.28-31.

202. Yilmaz H. Is epsilon4 allele of apolipoprotein E associated with more severe end-organ damage in essential hypertension / H Yilmaz, T. Isbir, B. Agachan et al. // Cell Biochem Funct. 2001. - Vol. 19, № 3. - P. 191 -195.

203. Yoshimura M. A missense Glu298Asp variant in the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronaiy spasm in the Japanese / M. Yoshimura, H. Yasue, M. Nakayama et al. // Hum Genet. 1998. - Vol.103. - P.65-69.

204. Zanchetti A. The hypertensive patient with multiple risk factors: is treat ment really so difficult / A. Zanchetti // Am J Hypertens. 1997. - Vol.10. - P. 223-229.

205. Zee R.Y. Frequencies of variants of candidate genes in different age groups of hypertensives / R.Y. Zee, C.L. Bennett, A.P. Schrader, B.J.Morris // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1994. - Vol.21. - P.925-930.

206. Zhao Y.Y. Role of C/A polymorphism at -20 on the expression of human angiotensinogen gene / Y.Y. Zhao, J. Zhou, C.S. Narayanan et al. // Hypertension. 1999. - Vol.33. -P.108-115.

207. Zhu X. Linkage and association analysis of angiotensin I-converting enzyme (ACE)-gene polymorphisms with ACE concentration and blood pressure. / X. Zhu, N. Bouzekri, L. Southam et al. // Am J Hum Genet.-2001.- Vol.68.- P. 1139-1148.