Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Микробиологическая диагностика и изучение некоторых вопросов морфогенеза неспецифических заболеваний легких

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Микробиологическая диагностика и изучение некоторых вопросов морфогенеза неспецифических заболеваний легких"

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ КАЗАХСКОЙ ССР

НИИ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

На правах рукописи БАЙМУРАТОВА Майраш Аушатовна

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА И ИЗУЧЕНИЕ НЕКОТОРЫХ ВОПРОСОВ МОРФОГЕНЕЗА НЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЕГКИХ

03.00.07— микробиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Алма-Ата, 1991

Работа выполнена в Научно-иоследават.ельском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Министерства здравоохранения Казахской ССР.

НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ: НАУЧНЫЕ РУКОВОДИТЕЛИ:

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ:

доктор медицинских наук, профессор И. X. Шуратов

доктор медицинских паук М. Л. Бейлбаева;

доктор медицинских наук, профессор Л. П. Царевский

доктор медицинских наук, профессор В. М. Степанов;

кандидат медицинских наук, доцент К. У. Урумбаева

Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней МЗ УкрССР

•1

Защита состоится « 1992 г. в 11 часов на засе-

т

дании Специализированного совета (Д 079.04.03) по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата медицинских наук в Алма-Атинском государственном медицинском институте по адресу: 480012, Алма-Ата, ул. Комсомольская, 88, Медицинский институт.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института. Автореферат разослан <: ( »

Ученый секретарь Специализированного совета кандидат медицинских наук, доцент

Р. Ф. СИДОРЕНКО

Светлой памяти дорогого учителя

доктора медицинских наук Лэлса Серикбаевича БАЙЖОМАРТСЗА посвящается

Актуальность проблемы. На протяжении последних десятилетий неспецифнеские заболевания легких как гричина заболеваемости, инвалидности н смертности насекания выдвинулись в мире на 3-4 место, уступив г этом отношении лишь сердечнососудистым заболеваниям, злокачественным опухолям и в некоторых странах травматизму ( Путов Н.В. с соавт., 1987; Резцо-ва Ю.В., 1988; Вишнякова JI.А,- с сгоавт., 1990; Чучалин А.Г., 1991).

Антибактериальная терапия лишь в определенной степени огладила остроту проблемы пневмоний. В наши, дни это заболевание остается достаточно частым. Летальность от неспет$и-ческих заболеваний, снизившаяся в пергод внедрения в клиническую практику антибиотиков,, в последние два десятилетия вновь проявляет тенденции к. нарастанию» С Трушине. .гайЗ»К„, 1978; Катосова Л.К. d соавт., 1983; Макеров O.A. с' соавт., 1990).

Необходимость дальнейшего изучения неспепифическнх заболеваний легких в различных аспектах диктуется высокой заболеваемость® н летальностью. Высокая заболеваемость пневмониями среди населения обусловлена увеличением тяжелых форм» склонностью к затяаяому течении пневтнпй и переходу их в хро-шнеские формы ( Катосоза Л.К. с соавт., 1987; Сахарова А.Б., 1988; Катосова Л.К. с соавт., 1990; Путов Н.В., 1991).

Сам по себе клинический диагноз из расшифровывает этиологии легочной инфекция» Известно,-чзо пневмонии в большинстве случаев имеют бактериальную прлроду, либо непосредственно с коканта развития, острого пропесса, либо осложнения. '».рп дис^фэрешкальной диагностика пневмония наряду с учетом клинических данных, все большее значение придается результатам микробиологических ксслздовашп!. Однако, пр~г°няе:.кз методы выделения мпкрофлорн и определения лекарственной чувегзитзль-

ности к антибиотикам не могут в полной мере удовлетворить практическое здравоохранение ( Сильвестров В.П. о соавг., 1982; Вишнякова Л.А. с соавт., 1981, 1986; Тшцецкий В.И., , ~Э80). Нет необходимости доказывать, что знание вида, характера и особенностей-возбудителя пневмоний может оказывать существенное влияние на тактику врача и Подходы к этиотроп-ной терапии, в связи с чем возрастает роль лабораторной диагностики современны:- несп ешйических заболеваний легких, iжа-, 4их слряную этиологглескую структуру.

В связи с отсутствием достаточно чувствительных и специфических методов бактериологической и иммунологической диагностик возникает настоятельная необходимость усовершенствовать существующие и разработать комплекс новых методов для изучения неспешфических заболеваний, легких.

Все вышеперечисленное определяло цель настоящей работы, которая заключалась в разработке новых; и усовершенствовании • известных методов лабораторной диагностики и изучении морфогенеза неспешфических заболеваний легких при экспериментальных смешанных инфекциях.

Для достижения,указанной цели были поставлены следующие задачи: " '

- Разработать и усовершенствоьать микробиологические методы ■ для характеристики бактерий, выделяемых- у больных пневмониями.

- Усовершенствовать способы получения диагностических препа-' ратов и проведения иммунологических исследовг гай для опре

деления антигенов пневмококков, золотистого стафилококка и других возбудителей неспецифических заболеваний легких.

-- Определить^ значение методов встречного икмуноэлектрофорзза 'и реакций непрямой агглютшшнии и коагглютинации для экспресс-диагностики пневмоний.

- Исследовать особенности развития экспериментальных спеяан-ных инфекций, вызванных пневмококком и микоплазма пчевмощШ у белых мышей (мí-lvo ), в ОК легшее и других органах кивот-ных и изучить, иммуко! )р|х)лбгические аспекты патогенеза не-cneiíKlíwecKiix заболевашй легких.

Научная новизна работа. Предложен коюлзко бактериологических и иммунологических мегодов исследований, позволяющих не только выделить условно-патогенные бактерии, но и подтвердить их этиологическую роль при наспепжЕическлх заболеваниях легких.

Предложены новые и усовершенствованы имещиеоя метода диагностики &герЬи?сС'из рпш^с^аг. и Каетсрй^ш /г^еггсг, основанные на использовании серологичесючс маркеров, что позволяет значительно расширить возможность изучения этиологии пневмоний и биолоии возбудителя, Показана высокая чувствительность и специфичность встречного галлу но электрофора з а для экспресс-диагностики пневмоний.

Практическая ценность работа. Обосновано применение в . лабораторной практике внутривидового, цитирования пяевмокон-ов и золотистых отаЖилококков при пм;лда биохимических и серологических тестов; Показана целесообразность приготовления диагностику ко в для серотипирования шкроргаяизмов при помощи реак-пии коагглютинаши. Этот метод обладает специфичностью, экономит диагностические сыворотки позволяет устранить перекрестные реакции о гетерологичными штаммами микроорганизмов. Антигенные эритроцитарные диагностикумы с пневмококковым капсуль-ным антигеном, могут использоваться для ретроспективной серологической диагясотики неспепифических заболеваний легких»

Высокая информативность ВИЭФ при выявлении антигенов пневмококков в мокроте и смывах в посевов с агаровых средах позволяет.рекомендовать этот метод для экспресс-диагностики гневконий. '

Основные положения выносимые на запгту. Разработан комплекс бактериологических и серологических исследований,, позволяющий не только выделять условно-патогенные бактерии, но я установить их роль в этиологии пневмоний.

Методы-серотипирования микроорганизмов при помощи биохимических и серологических чес-таз имеют существенное значение для изучения этиолопш яеетгавяфяческих заболеваний легких и биологии возбудителя.

Эритроштариш тгауетроаген'Ш для определения антигенов и антител пневт-толсггоа,, псссмяют установить этиологию лнзвко-ний.

- Изменения легких при пневмококковой экспериментальной инфекции, как правило, при реинфекши согласно ишуноморфо-логическим и ультраструктурнчм данным, определяются разви-

; тием инфшьтрагивно-пролиферативных диффузных процессов, как отражение иммунопатологической реакции замедленного типа с гранулематозом сопряженной с фибрилогенезом,

- Основ;* пагоморт^генеза сочетанной микоплазма-пневмококко-, вой инфекций составляют значительные шдмуновоспалителъныа . альвеолярно-сосудистые изменения легких, диффузные лимфо-цитарные, моноцитарные инфильтраты как проявление иммунопатологической реакции замедленного типа.

Апробацияматериалов диссертации. Основные положения доложены на конференции молодых ученых НИЭМЕМ { Алма-Ата,

1985), на конференции молодых ученых. Каз&Ш (Алма-Ата, .1988), У Межреспубликанской конференции аллвргологов-иммуно-'

логов Казахстана и республик Средней Азии < Алма-Ата, 1986), на конференции "Биологические свойства микоплазм, способы диагностики, профилактики и лечения шкоплазмозоа" ( Киев,

1986), 2-й Всесоюзной научно-практической конференции "Актуальные вопросы клиническое микробиологии в неинфекшонной клинике" (Барнаул, 1988; Москиа, 1988), на научном общества врачей педиатров и терапевтов ( Алма-Ата, 1987), на научно-теоретической конференций, посвященной системному анализу эпидемиологического процесса ( Алзд-Ата, 1986 У. Объединенном съезде гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов, паразитологов к инфекционистов Казахстана С Алма-Ата, 1991).

Работа апробирована на Республиканском объединенном заседании секции микробиологии, общества эпидемиологов, шкро-- 1иологов и паразитологов, кафедры микробиологии и иммуноло-гш, патологической анатомии Алма-Атинского института усовершенствования врачей ( 1ШЕШ, 1991).

Внедрения результатов рзбо-та. Изданы методические рекомендации "Лабораторная диагностика бактериальных,пневмоний", Алма-Ата, 1987. Разработанные методы внедрена в практику работы детской инфекдаок :ой большим Js 2 г. Алг.а-Ати, больницы Алма-Атинской железной дороги, 1-й детской городской больницы г. Алма-Аты, лаборатории ОСИ СШО. Методы ускоренной лябора-

торной диагностики внедрены в практических учреждениях здравоохранения, путем подготовки врачей-бактериологов н проведения сешнаров. Получено 13 актов внедрения из 7 обл. СЭС республики.

Публикации. По тема диссертации опубликовано 22 научные статьи, получены 3 удостоверения на рацпредложение, изданы методические рекомендации, информационное письмо.

Структура п объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы, который включает 71 отечественных и 79 зарубежных источников. Работа излояена на 189 стр. машинописного текста, иллюстраций: II таблиц, 6 диограмм, 27 рисунков. Работа выполнялась в соответствии с заданием ГКНТ номер государственной регистрации 01860128"37.

С О, Я 5 Р 2 Л НИВ РАБОТЫ

МА ТВ РИАЛЫ И МЕГОЛЫ

При неспепифгсеских заболеваниях легких основной задачей микробиологического исследования больных явилось выявление этиологического опыта острого.и хронического заболевания,с целью определения своевременной эгтотропной терапии.

Объектом исследований явилгюь: мокрота, бронхиальные смывы, носоглоточные мазки, сыворотка крови больных. Всего обследовано 330 больных ( дети от года до 15 лет - 138, а взрослые - 192), с клинически установленными диагнозами: острая пневмония 271 и хроническая пневмония - 59 больных. Больные обследовались дваяды - при поступления в стационар и через 10-15 дней после проведенной медикаментозной терапии. В качестве контрольной группы обследовано 40 относительно здоровых детей.

Микробиологические методы

Микробиологическому исследованию подвергали отдаляемое респираторного тракта.Забор бронхиального секрета и мокроты осуществляли общепринятыми способами. Гомогенизацию мокроты в дальнейшем осуществляли во флаконах со стеклянными бус&.ш. У детей брались носоглоточные глазки на микробиологическое посла-

дование, учитывая невозможность сбора мокроты. Бактериологическое изучение клинического матариала от больных проводили с использованием количественного метода ("Миедэобкологйчесете гетодк обследования пульмонолог .деских больных", Методические рекомендации, утвержденные МЗ СССР, 1981). '

Микроскопию клинического материала проводили дважды: I - до посева на питательную среду ( нативные мазки), П - поо-т ле выделения чисто« культуры ( окраска по Граму). В каждом лазке исследовали нр менее 10 полей зрения в разных участках препарата. Для выделения микроорганизмов использованы'следующие питательные среды: сердечный агар, сердечный бульон ( Методические рекомендации, 1981), а также 1,3% сердечный агар для культивирования микроплазма пневмонии ( Методические рекомендации, Москва, 1980); 5% кровяной; агар, шоколадный.агар и др. общеизвестные среда.

Идентификация выделенных культур

Выделение различных микроорганизмов основывалось на изучении культурных и биохимических свойств, морфологии клеток в окраске по Граму, по Бурпи. В первую очередь мы изолирован ли для отдельной идентификации 2-3 однотивные колонии всех в:-дов, Для дальнейшего изучения их пересевали на 1/8 ..{ашва, Идентификагая пневмококка основывалась наг изучгнии морфологии клеток и выявлении напсулы при окраске Бурри. Способность пневмококка лязироватьоя желчью отмечалась при проварке желчеусгойчивости 2-3 мл иоследуемой культур:! подозрительной на пневмококк. Посев микроба осуществляли в 5 m 10% желчного бульона, если после суточного содержания в термостате происходило полноа просветление среды, наступающее 'веледствии лизиса микробных тел, то исследуемую культуру -относили к пгзвмококкам. Одним из специфических"тестов является - оптохиновый тест, ооколанныл на применении бумажных дисков, содержащих 6 мхг оятохина. Нри наложении его на чашку с засеянной испытуемой культурой, при наличии ингибяппя рос- . та пневмококка не мзнеа 18 мм. Все выделенные культуры определялись на чувотаительаооти к антибиотикам с помощью использования стандартных бумажных дисков нагруженных различны;,ш

антибиотиками.

Изучение биохимической и фермента тонной: иде нтификация микроорганизмов проводили общеизвестным методом;. Посев "чисто" культуры с пвлыо определения йерглентов рг зщеплгэщих угле-водц( Справочник по микробиологическим методам' исследования. Москва, 1982).

Иммунологические методы

ШГА проводили микроме «одом в 96 луночных платтаия для иммунологических реакций. При приготовлении эритроштнрнйя диагностикумов (ЭД) в качестве индикаторов-носителей сгистйш использовали эритроциты барана, формалинизированнне поЛЙйУга^ (1958). Приготовления антительных ЭЛ при помощи глутаровен® альдегида (ГЛА) осуществляли по методу Гориной и Оловяниксиа, амидола по методу Кузьмина с соавт. (1981).

РСК (реакпйя связывания комплемента) ставилась по общепринятому -л® году (Селиванов A.A., 1959). Исследовали парные сыворотки крови больных, полученные в первые дни заболевании? и через 10-12 дней. В качестве антигена■микопла~мы пневмонии, использовали бульонную культуру штамма осажденную путем-; центрифугирования при 18000 об/мит„ отштуи от примесей питательной среды и концентрировали" з 100 раз от первоначально-»-го объема. Четырехкратное наргюяшта' титров антител указывало на специфический инфекштаетай процесс, вызванный микоплаз-ма пневмонией. Для определение антител к вирусам ( антигенов и др.) использовали; коммерческие антигены. Постановка реак-гш осуществлялась: в: соответствии с методическими рекомендациями" (Шотаа», 1ВШ)'.-

ЛЯя'втагяилти антигенов в реакции ВИЭФ изменялись когл-MepjeenEr ((гпшашкокковыв, стафилококковые), и собственного . пряпиовзппппр мзпеопяазмзнннв сыворотки. Постановку осуцеотвля-лж?на?щ»пйзрЕР "Рёанал", модель 73 или приборе отечественного щюпзвотвггвн? ПЭЗГ-З.

РКЭД — пришил реакшш осговая на способности видоспе-пкфдческого белка золотистого стафилококка С белок А) соецл-ял.тбся-с Гс - фрагментом иммуноглобулина человеками ряда тавотных ( кролики, морские свинки и др). Лля приготовления

реагента для РКА использовали цельные сыворотки антител производства Дании и типоспецифические пневмококковые института-НИ им. Мечникова.

Моделирование ra ОК белых мышей

Для получения органных культур использовали ткани легких, пердпа, селезенки, печени, почек сосунков белых мышей. Для " заражения органных культур был применен эталонный штамм ГН микоплазмы пневмонии и суточная микробная взвесь серотипа пневмококка 4 и 19.

Интенсивность размножения пневмококка и микоплазмы пневмоние в бульонной .культуре питательной среде определяли по количеству жизнеспособных чгэти в I мл среды и выражали в колониеобразущих единицах ( КОВ) .

КОЕ/ш каждого разведения определяли по формуле: г/ - а -10"

¿ п- к .

где д - число колоний на I мл, выросших в зоне;

К - 0,01 мл размер петли;

п - показатель разведентя.

Динамику размножения пневмококка и микс 'лазмы пневмоние в .

*

оргашп : культурах оценив г: ли на I, 3, 5, 7, 10 сутки опыта. Накопление указанных агентов в эксплантатах определяли суммарно в твердой и жидкой фракциях ОК путем титрования куль-туральных проб как монопневмококковой, " шкоплаз..;енной, так и ткот инфекции на агаровой среде. В качестве контроля использовали эксплантанты тканей незараженных животных, Моделирование моно- и смешанной пневмококово-шкоплазменной инфекций на модели белых мышей -it пса

В. работе ипользовано т.25 белых беспородных ,.шшей 5 серий опытов,. Заражение животных проводили взвесью микробов пневмококка серотип 4 и микоплазмы' пневмонией штамм Fu. Мышам вводили интраназально под легшм зфирннм наркозом по 0,02 га культуры пневмококка в концентрации 4 х 1& КОЗ/мл и по 0,02 мл Ю^КОЗ/мл микроплазмы пневмонии. В течении последующих Ю дней производили высевы взвесей из органов ( печени,

селезенки, сердца) на агаровые среды.

. Моделирование экспериментальной пневмококковой инфекции на морских евин; ах

Морских свинок 2-3 недельного возраста заражали под лга-пенталовой анестезией микробной взвесью в носовые ходы 0,2мл культурой пневмококка в концентрации Ю7 КОЗ/глл. Всего использовано 65 животных. На I, 3, 5, 7, 10 сутки после заражения делали посев пневмг тонка из трахеи, легшее, и крози, а часть материала исследовали гистоморфологически. Через'20 дней 15 свиноес были подвергнуты реинфекции культурой пневмококка в дозе Ю8 КОВ/мл. Затегл также как и при воспроизведении острой пневмонии в указанные сроки исследовали животных на н?та-чие бактериемии и формирования ткгчевых изменений.

Патомореологическое исследование проведено на кафедре.-патологической анатомия ( зав. - проф. Л.П.Царевекий) Алма-Атинского института усовершенствования врачей. Ткани фиксировали в 10% нейтральном формалияеили растворе Карнуа. После заливки в парафин срезы окрашвали гематоксилином и.эозином, по Ван Гизону, гликозаминогликаны выявляли. толуадиновш.1 синим, 'гликопротеиды - ШК-реакдаей ( Пирс Э.1962).

Для электронночликроокопического.исследования, проведенного совместно с допентом Э.Н.Умбетбаевой, ткани размером ' 0,5-1,0 ш3 фиксировали в 2,Ь% растворе .глутаральдегвда на 0,1 М фосфатном буфере при рН 7,4 с последующей дофиксаш-ей в 1% осмиевой кислоте, обезвоживали и заключали в эпоксидные смолы. Ультрагонкие срезы изучали в электронном микроскопе ЭШ-ЮОЛ при ускоряющем напряжении 75 кВ.

РЕЗУЛЬТАТУ ИССЛЕДОВАНИЙ

При каядом обследован1':! исследуемые пробы ( респираторное отделяемое) предварительно до посева на питательные диф-ферешпально-диагностические среды, оценивали макроскопич-с-ки и микроскопически. Л ля растворения возмслилк слизистых комочков в бронхиальном содерглмом, в качестве растворителя использовали 2% пептониуи воду рН 7,4-7,6, иногда Лизпологк-

ческий раствор. Гнойный характер мокроты с примесят! требовал гомогенизации. В связи о этим в первых опытах, часть 34 гЗразпа были обработаны путем механической гомогенизации в' тканевом измельчителе РТ-2 в соответствии с Методическими рекомендациями, утвержденными М.° СССР (1981). Другую часть 40 образцов; обрабатывали методом гомогенизации путем встряхивания г течении п-10 минут во флаконе со стеклянными базами.

Сравнение качества гомогенизации исследуемого материала по росту микроорганизмов на элективной питательной среде показало, что последний метод значительно эффективнее. В связи с этим новые бактериологические исследования проводились с помощью этого метода.

Прежде чем производить посев клинического материала на плотные питательные среды, готовили два мазка из кавдой пробы. Один окрашивали по Граму и предварительно оценивали микрофлору. Второй мазок микроскопировали неокрашенным, с целью обнаружения мицелия грибов.

Обнаружение в препарата большого количества грамположи-гельных ланцетовидных диплококков, окруженных капсулой, позволяло предположить пневмс :окковую инфекшю.

Лля выделения основных бпнхопатогенов, нами модифицированы питательные элективные среды с дог" телепнем донорской дефибр..нириванной кровью без консерванта в соответствии с "Методическими рекомендациями Ш ССОР, 1981) и сердечный агар, приготовленный в лаборатории питательных сред ШИЭМяБ в-соответствии с Методическими рекомендациями МЗ CCJP, 1981.

. С целью определения эффективности выделения пневмококков апробирована среда ДОЮО, авторы которой являются сотруд-• киками лаборатории экспериментальной аллергологии, профессор Г.С.Оуходоева. Эта среда не только обеспечивала рост пневмококков, но и позволила использовать ее для выделения других возможных бронх"патогенов ' грамотрицательную ми.:рофлору, стафилококки, стрептококки).

Таким образом, используемые нами способы подготовки респираторного отделяемого, на этапе до высева на питательные среди, обеспечивает результативность последующего роста микробной флоры.

- и -

В дальнейшем для бактериологического исследования бпли взяты: носоглоточные мазки, мокрота, бронхиальные смывы л сыворотка крови. При исследовании крови на сирильность, путем посева на питательную среду полошиелызых результатов не обнаружено. Бактериологическое исследование респираторного отделяемого на дафференшально-диагностических средах осуществляли с помощью количественного метода, основанного на серийных разведениях изучаемых образцов, который предусматривал посев в объеме 0,1 т нечетных разведения 10" , Юла чашки с кровяным а сердеч.шм агарами.

Посев на все другие элективные среда проводили по мере выделения различи« культур с помощью дальнейшей идентификация. Количественный учет выросши колоний производили с чаязк о первичным росток микроорганизмов.

Для подавления.посторонней микрофлоры нами использован мономишш в дисках. Концентрация невкояокка в материала от больных достигала условно-диагностического уровня Ю6 микробных клеток з I мл мокрота и 10^ мнкробтхх клеток з I га бронхиальном содерзимом.

Ваделзшшо пташа пневмококка в налой работа чаще ветра-' чаллсь в £ -форме, г.оторпз балл прздетавлэкн в виде блестящих, плоских полупрозрачных колоний и с характзрным приподнятым краен, ппогда зозвылзнши ^енгром. На кровяном агаро 0 ~ формы пневмококка, имели характерную зону а-гзнолпза, округлые, плоские, ютгай консистенции, состоящие из морфологически на измгкешшх, по.форта лакцетовядних дг-плококков с ~е г:о внрзаеяпоа капсулой.

Дальнейшая цдентафпкашя била основгпа па изучении куль-туршшгах и морфологических свойств бактерий. Ес^ 153 взде-ленннх атадаа ппешзкокка <3яля чугстзатзльпн к оптохяну, и зона задзрзкп роста дос спича Г.5-30 гм, из пах 12 птпкгов только 20. кл. Изучазше ишроваяяк ГО;2 раствором

язл-т. .Частота вздзлопяя ш;зв?»ококкоз 73,9. £ 5,4'^ у дотай, раякэго возраста в дпатсстячеоком гатрз, у пзроолых пропоит ш?оеваемосга бил несколько вь-га 92,3 - 3,9,1 (Рас. I). Вадс-ле.чаыз п езучзжгл? :пга:.':л,1 из фзр-.'снгярог.злл удокит, ргмюзу,. сорбит, ппоз'лт, яултътг?. Инуляк ^эртштпрОЕаяа 54 итаг.па, и?

них у 19 ферментация бнла слабо выражена, маннят ферментировали 65 штаммов, 15 штаммов не разлагали вышеназванлые сахара. ' "•

При определении чувствительности к антибиотикам изоли-ровашшх 153 штаммов пневмококка, выявлено, что наиболее сильное бактерицидное действне на возбудитель оказывали - эритромицин, бензилпенпшллин. ген.тамицин, олеандошшн. Чувствительность варьировала от 87,5% к бензилпенишллину, до 7„2 к полшдиксину.

Та:шм образом, нами была установлена низкая чувствительность исс.едовашшх яташов к поллмикгшу, тетрациклину, нео-мнпг'пу, и метишюш,ту, что вероятно является характерным для клинических серотипов пневмококков,выделенных в г. Алма-Ате.

Анализируя данные о выделяв-гости стафилококка, следует отметить, что наиболее высокие показатели относительно других возбудителей, отмечены из бронхиальных смывов 27,0-7, случаев. Биологические свойства золотистых стафилококков, выделенных из материала от болышх НЗЯ показало, что все местные штаммы характеризовались высокой ферментативной активностью, с наибольшей частотой отмечалось продуцирование ьоаггулазы ( 96,3 i 1,2^ ). При определении этиологической роли стафилококков в возникновении 1Ш отмечено, что п.м хронических пневмониях, процент участия стафклококгоп был выше чем при острых.

Такке бактериологическим методом нами выделялась гемо-фпльчая палочка, необходимо отметить, что при'острой пневмонии показатели оказались несколько выле 2,5 - 0,9,'2, чем при хронической пневмонии 1,6 - 0,4,а. Серологическое датирование-, выявило, что более половины ( 52,о - 1,7/0 случаев относилось ■*к серовару "в", значительно ре-ке обнаруживали другие серовары. Ломикирувдп.. этиологически значим«,! агентом являлся гшзгчо-кокк ( 78,1/0, значительно рпгх> стафилококк - IO,f"j, гемо-фильная палочка- - 2,5/а, что согласуется с литературным» данными ( В.АийГ'Ы , J98I; Ванникова Л.А., 19Ы; 1982; 390; Надюков JI.il. с соавг., I9B6; Катосова Л.К. о соапт.,'IS87-) ( Рис. 2).

Анализ частоты выделения пневмококка и других бактерий

ЧАСТОТ* шдапия БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИМ МЕТОДОМ ППЕПЖЖКОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВОЗРАСТА

ira

?5

Я

лет :

78.9 83

Ïf.

ЬтИЛЬпЗ-гТД P.WWígrR-^l íry//tW,tsss:.tri i

ÍWX(#.1r.x «s*

взросла: SO S2.3

,.„ , tmlul ^ntnn ^ruiriin

IHH >41

M rtttrt " 1ГШ1Ч

—tmttH Pirran]

\тшщ S3

tW/KÇtSÂSÂl

МЮУАЯяЬЕЕЧ frrWXttííissKrr»

-ГГТТГШ-twrt

-1ЖЖ« .-! ! I'AWJ Ittttttt ■ -ЦУУХУ1 ГГШГЛ-МЛ*Al

=tnrtttl- 1 1

ÍCQPACT_ ВОЛЬНЫХ

E3. 3

S3

Ш

31-43 21-ЗЭ

15-29

VU 1-3

ЭТИОЮГИЧЕСт АГЕНТЫ, ЮТШЗШ ОТ ООЛЬШХ

ГЕСПЕЦИ^ЕСКШ • ЗАЕОЛШГССШ ЛЕШЯ

я - Г3, и /" /

V

ч

- г.?

'ас;

г - гт.-га'сог:

г. -

; - i'-'^zv. а'-г'."".-г - гго'у/.ггелг., и: г. ^'-Г'-

от больных в зависимости от диагноза подтвердил ведущее этиологическое значение как при острой,.так и хронической пневмониях. Частота выделения из респираторного отделяемого выявила инфомативность носоглоточных мазков. Рис. 3.

При этом удельный вес пневмококка был существенно ниже при хронической пневмонии ( 50,8 - 6,5%), чем при острой ( 84,1 - 2,2%). У больных острой пневмонией на втором месте г э этиологической знячимости был золотистый стафилококк .( 7,0 - 1,5%). Участие гемофялов, энтеообактерий ы дроясепс-добных грибов в этиологш! острых пневмоний у детей и взрослых было незначительным (2,5 - 0,9$).

У больных с хронической пневмонией довольно часто выделяли золотистый стафилококк (27,1 ± 5,7/0 и энтеробактерии ( 11,8 - А,2%).

При микробиологическом исследовании респираторного отделяемого при острых и хронических пневмониях, наиболее частое выделение пневмококков отмечалось, при исьользовании носоглоточных пазков Въ, 20, мокроты 76,2/' и наконец брокхдалзь-ных смывов 45,9$, что является эффективным и позволяет определить степень обсемененности исходного материала (Рис. 3).

Гемофильная палочка чаще ячделялась из мокрота, чем из носоглоточных мазков. Из бронхиальных смывов пневмококк удалось выделил, в 1,5-2 раза режа, чем из носоглоточных мазков к"и мокроты. Однако при исследовании бронхиальных смывов золотистый стафилококк зццеляли почти в 3-4 раза чаще, чем из мокрты и носоглоточных мазков. Энтеробактерш. 1. дрожкеподоб-» ныа г^ибы обнаруживались такае более часто в бронхиальных смывах.

• Результаты бактериологических исследований, проведенных в острый период болезни, дали возможность начать своевременную этиотроиную терапию, С целью определения эффективное ги антибактериально" терапии у 16 больных, чорез 10 -12 после интенсивной терапии, бил осуществлен повторный микробиологический контроль. Получению данные свидетельствовали оовобох-дение организма от возбудителя.

Таким образом, результаты шкробиологлчбских исслодо-вашй мокроты, носоглоточных мазков и оронхпалыпк сшпов

болышх НЗЛ свидетельствуют, что в этиологии оотрых и хронических пневмоний среди детей и взрослых в г. Алма-Ате основную роль И"рает пневмококк.

Результаты титрования пневмококка

С целью изучения таповог" состава пневмококков проведено серо титрование 153 штатов выделенных от сольных НЗЛ. Исследуемые культуры пневмококков тапирсваны следующих тестах: 'реакции двойной иммунодиффузии в геле по (1958),

встречном имлуноэлектрофореза и в реакции коагглютинации (1973). Саротипирование проводилось с помощью пневмококковых типоспецифических Датских сывороток, любезно предоставленных нам профессором Н.II.Хос тюковой ( НИИ микробиологии и эпидемиологии АМН СССР им. Гамалеи). Кроме того, наш использованы отечественные типоспецифетеские пневмококковые сыворотки, приготовленные в Институте вакпин и сывороток гол, Мечникова, которые любезно предоставлены нагл А.Я.Винником.

Анализируг результаты типирования выделенных ш та шло в пневмококков от больных неспецифическига! заболевания."! легких, отмечаете., наиболее частое выявление среди детей серо-тшов 19,8 < 35,0$; 35,С,!), а у взрослых чаще встречался серотип 19 ( 38,0$) и серотип 8 ( 23,8/*). Кроме того следует оплатить, что к доминируадимоя серотипам относятся 4 и 23. . При исследовании бронхиальных смывов доминирующимся серо-тшом оказались в 42 ,В% случаях штаммы пневмококка 19-го серо г.ш а. Серотип 8 установлен в мокроте и бронхиальных смывах в равной степени ( 27,05; 20,5$). Пневмококки 4-го серотипа выявлялись чаще из мокроты 16,6%. Серогип 23 отмечается как доминярющай как.в бронхиальных смывах ( 14,2,'), так и в мокроте ( 10,4;?).

Результаты тшшровапия пневмококковыми типоспешфччеоки-ми сIгвороткпшт з реакции ВИЭ5 показали преобл^датю следующих соротшсв: 19 (84,3%); 4 (81,2'Л; 8 (71,8;?); 23 ( 25%). Эти дашшо коррелируют с результатам! ташроваштя в рэакшп иклуцодиффузии (РисЛ ). .

Дашша расаи;Т,ровки типовой пршк^яегностя атамглов пнав-?.*.«жоккол а РКЛ показали, что'большая часть штаммов пр мадла-

частота ивдикащш серотипов пневмококков от больных ШЗПЕЩШЧЕСКИШ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ

ti

ni лг,ж//;г '»тт^Й, i /iassPrajv

/ЛГ" "1' ' ^ i ^

////!7TZ'~,í ЖГ »УигУЗйаь

у/шмттт:

t/Á.. /////////?»£ у/штитр

V/Í//W//WÍ1F vwmit/imF

г» ww///mF wmmF

W////JF

y

дети

С'ЕРОТИШ l - 19 ÎÎ - 8 Ш- 4

IV - 23

V - 23

/«жзч. J

. .-Vre A

'-H j;

w/wt/wr/wi.rks&w/mm ушмт/ш/и/гянтмм iv х'ншг/ш/м/тяят " ■ч/штштншшт *4//m//m/WMWï

wew»®' ^MW/fiLW

нГ

ВЗРОСЛЫЕ

СЕРОТНШ 1 - 8 Il - 19 Ш- 23 IV - 4

/¡mí. л

яала к типам, входящим в сяворогки 2-х пулов: В ( 3, 6, 8, 19) и А ( I, 2, 4, 5» 18). Все штаммы принадлежали к 4-м типам: 19, 3, 23, 4.

Анализ частоты выделения серотипов в зависимости от возраста гэзволил отметить, что у взрослых было преобладание пула В ( 30,5%), а у детей тшштпались пул В ( 26,9%) и А ( 23,СЙ) в равной степени. Результаты типне вания в зависимости от клинической формы показал, при острой пневмонии до-■ минировали >итаммн пневмококка, относящиеся к пулам (26,83), А С 21,9,1) и С ( 12,13), Пневмококки других пулов встречались значительно реже.

Таким образом, сопоставляя данные, полученные в результате тапирования - Датскими и отечественны;.« пневмококковыми сыворотками позволяют утвер-здать, что отечественные препараты можно использовать в практическом здравоохранении, Учнтпвая возможные региональные различия и сходства в серотиповой принадлежности пневмококков, нами проведена сравнительная характеристика титрования штамглов пневмококков А.З.Сахаровол (19Э7) и полученными на шнш данными. Установлено, что в обоих регионах при ос :рол и хронической пневмониях у детей и взрослых преобладали штамш относящиеся к типам, входящим в сыво-ротга пуле В. Одна::о штаммы , выделешше в нашем регионе, еще относились к пулу А, что на наш взгляд представляет определенный ннтерс з для клиницистов с точки зрения этнологии НЗЛ. Необходимость этого для практического зправоохранения велика, учитывая, что при пневмококковой пневмонии иммунитет типоспеци'тичен.

Лабораторно-клитгческая оценка ускоренных методов диагност:- а! возбудителей неспевд-«ичесгах заболеваний легких.

Для приготовления антитзлышх эритроинтарных диагности-кунов (ГЧ) использопали специфическую пневмококковую сыворотку, полученную к наиболее распространенным серотипам лиевно-коккам 8, 19. Сравнительное изучение ^'.Дективности методов сенсибилизации эритроцитов с помощью амидола п глутарсвого

альдегвда, но при этом в 2 раза меньшем расходе антигена ( 50 мкг/мл).

При изучении спеи-фл: шости антительных ЭЛ серотнпа 8, получешше при помощи амидола и глутарового альдегвда, гомологичные серотипы пневмококков были выявлены в дозах 0,00013 и 0,00028 мкг/мл соответственно. Для огенки эффективности приготовленных ЭЛ, нами исследованы сыворотки больных и бронхиальные смывы больных. Как показали полученные результаты ЭЛ в реакции прямой гемагглюишапии (ШГА) выявляли в бронхиальных смывах до 3 мкг/мл, а в сыворотке крови до I мкг/мл.

Таким образом, исследование при помощи Н1ГА дополнительно к бактериологическому методу выявляло пневмококковую этиологию нзспецифических заболеваний легких ( НЗЛ) обследованных больных.

Лля повышения чувствительности В11ЭФ с типоспециЗпческшли пневмококковыми сыворотка мл получены новые данные, использова -• нзе смывоз с посева.мокрота на элективные агаровыо среды. При этом увеличивался удельный вес выявления антигенов пневмэтрояких бактерий в 15-20 раз по сравнению с исследованием нативиого материала. В результате-, в этой же рзакшя .данной модификации метода, дополнительно выявлен антиген пневмококка в 22,9%. Антигены возбудителя чаще выявлялись в бронхиальных смывах п в сыворотке крови исследованных больных ( 14,6; 12,7/5) соответственно.

Лля индикации антигенов микоплазма пневшние и антител микоплазма пневмонис были использованы как антигенные так к антительные ЭЛ, полученные в налей лаборатории. Антигенные ЭЛ иммунорзаганш микоплазма пнезыоние выявили специфические антитела у болышх КЗЯ в титрах от 1:12800-1:25500. СпеписТич-ность полученных ЭЛ проверялась о гомологичной.антиензорот-кой приготовленной к. очищенного гликопротоядноиу кэ.\5юнзнту' микоплазма пневмония*

В ШГА rsizi бита псоледо: айн партю сызсротгс! крови больных пневмоишая, у которых из различат: блооубзтратоз методом ВИЗФ но были выявлены аи-хягека М.рп. Ангаген кдкопдазиа паевмо-шп в сыворотке кров;:, обнаружен более часто з ШГА { 37,-1 -3,2&\ чем с помочью изюяа ШЭ1' ( 12,7 - 1Л%) сосгэетегоск-

но. В то же время отмечалась большая разница при сравнении результатов исследования мокроты на наличие антигена М.рп. ( 24,2 £ 3,7 ; 9,6 £ 4,1%) соответственно. Весьма показательны результаты определения антигена М.рп. в носоглоточных мазках с помощью Н1ГА С 33,8 £ 2,7%), чем методом ВИЭФ ( 9„8 £ 2,2%), Частота индикации М.рп в бронхиальных.смывах была почти в 3 раза чаще чей в Я1ГА ( 62,2 £ 6,1,1). Следует также отметить, что антиген М.рп. обнаруживали в носоглоточных мазках, бронхиальных смывах и мокроте взятых в разьзденш 1:32, что указывало на высокие диагностические возможности антительного эритродатарного диагностикума. Эти данные свидетельствуют о том, что Н1ГА с антительным ЭЛ обладала достаточно высокой чувствительностью при внявленш шкоплазм энного антигена в клиническом материале от больных острым! и хроническими пневмониями. С помощью ангительного эритрс-и-тарного диагностикума выявляли антиген М.рп. в респираторном тракте.у взрослых почти в 2 раза чаще чем у детей ( 20,4,1; II,Ъ%).

Чувствительность РИГА' с антительными оритроштарными диагностику маг/1.: при выявления антигенов возбудителя была достоверна ( р 0,05) выше чем ВИЭФ ( в 6-10.раз). Сравнительная. эффективность Я1ГА и ВИЭФ на примере М.рп. показана на

Таким образом, показана высокая чувствительность разработанных наш антительных иммунореагентов. Несмотря на несколько низкую информативность ВИЭФ ( в 6 раз ниже Н1ГА), мы рекомендуем его для диагностики в практических лабораториях, так как он обладает достаточной чувствительностью, высоко? специфичностью, а также не требует приготовления эпитроштарных диагностику.",'.^в.

Широкая циркуля'яя возбудителей острых респираторных заболевании и пневмоний, в настоящее время обусловлено самой различной природой по мнению В.И.Васильевой (1972)5 М.С.Бай-жомартов с ооавт. (1979) ассоциированными вирусно-бактариаль-ннми отиопатогенаш.

Лля ретроспективной диагностики уточнивши заболевания используют различные мзгоды определения антитет - реакция

связывания комплемента (РСК). Наш исследовано в этой реах-. пии 515. парных сывороток с бакподтверзденным диагнозом. По-вышелный уровень антител к пневмококку наблюдался в 53$ случаев. Исследование сывороток крови больных с бактериологически подтвержденным дак гнозом пневмоний определяло антитела в диагностическом титре 1:320 у взрослых в 35,9$. У практически здоровых взрослых лиц в 28-30$ случаев определялись антитела к пневмококкам в титрах I/IQ0 - 1/200, что свидетельствовало о широкой циркуляции. Специфические антитела к М.рп. в диагностическом титре 1/80 определялись в 5-7$ случаев. П;~т обследовании детей наиболее часто отмечалась гриппозная инфекция ( 16,7$), аденовирусная (15,8$) и несколько реже парагршпозная (11,3$). У взрослых чаще выявлена аденовирусная инфекция 23,4$ и реже гриппозная Г7,0$» Таким образом, в РСК этиология респираторное вирусной инфекции была установлена в 54,9$ случаев

Моделирование экспериментальной микоплазменной и пневмококковой инфекций на лабораторных явиогннх

По результатам моделирования экспериментальной пневмококковой инфекции у морских свинок и реинфекши через 20 дней, выявлено, что после заражения штаммом пневмококка (серотпп 4), культура пневмококка выделена.из легких в титре 2хЮ5 КОЕ/мл. В течение 3-7-х оуток инфекции отмечалось сохранение пневмококка в титре 2x1o4 К0Я/мл. К IO-м суткам инфекции жизнеспособные микробы выделены в титре менее 10 К0В/мл.

Результаты выявления методом ВИЭФ пневмококкового антигена в крови инфицированных животных, определяет наличие бактериемии. Кроме того, антиген определялся на 60 суTin наблюдения.

Комплексное иммуноморфллогическое и ультраструктурноз изучение позволило установить на данной модели развитие им-мунозависимых реакций ъ легких и лиглфолдной ткани. Ызкрой-ное воспаление на наами-ннх этапах характеризуется бронхосо-судистыми нарушениями с прзвалуирозшгаем процесса альтерации

клеток и дистофических изменений» В динамике эксперимента с 5-7 суток установлено формирование иммунологической реакции замедл иного типа.

В динамике реинфицирования на модели морских свинок обнару- ивалась гиперплазия клеток посткапилярных венул, расширение лимфэидных фолликул, Нормирование лимфодатарно-мо-нодатарншс периваскулярных, перибронхиальнг: инфильтратов, очаговых пролифзратов и появление единичных гранулем, сопряженных с новообразованием соединительной ткани, что характеризует морфологические проявления гигерчувствительности замедленного типа ( Серов В.В., 1975; Биркун A.A., 1980; М. Тернер-Уорвик, 1982), и способствует переходу острого воспаления в подострое.активирует ранее развитие соединительнотканных волокон ( ранний фибриллогенез).

Смешанное инфицирование OK идацирует своеобразный т,м-муноморфологичческий ответ легочной ткани, отличающийся от. реакшш на моно-шкоплазменную или пневмококковую инфекции» На фоне альтера^ивно- дистрофических изменений в ткани легкого наблюдалась активация лимфоцитов0 моноцитов, гистоцитов. Перибронхиальнг определялись лимфо-моноыитарные инфильтраты. При этом смешанная инфекчия в OK характеризовалась угнетающим действием мнкоплазмы на размножение пневмококка.

Таким образом, результаты исследования свидетельствовали, что развитее локальных воспалитель..ых изменений в легочной ткани при шкоплаэда-пяевмококковой инфекции происходит о выраженным имлуноморфологическим компонентом, характерным для реакции клеточной гшерчувствитэльности»

При микробиологическом исследовании отмечалось, что размножение превмококка в легких при моноинфегции до 7-х суток опыта.било более выра-^ннмм ( до I07 КОЗ/ш)t чем при смешанной инфекции ( Ю5 КОЕ/мл). В опытах смешанного инфицирования мншей наблюдали сходную динамику раз'шожешш пневмококка в печени, селезенке, титры были на 3 порядка-ниже ( Ю4 КОК/мл). При смешанной инфекции j белых мыщей размножение млкоплазш в легких, печени и селезенке также резко подавлялось. Таким образом, развитие при смешанной микоплаз-ма-пнэзмококковой инфекция в OIC белых г,шей сопровождалось

взаимной ингибипией размножения микоплазмы и пневмококка.

Экспериментальное моделирование смешанной микоплазма-пневмококковой инфекгга - /V , свидетельствует о наличии ультраструктурных, клеточных и органных изменений, в динамике инфяширования в виде серозно-гнойного, гнойно-деструктивного бронхита, бронхиолита, очаговой пневмонии и плеврита. Обнаружено последовательное подключение к бронхо-сосудистым реакциям альтератюно-эксудативного характера инфильтративно-продуктивных с выраженными иммуноморфологи-ческиш. признаками гммунопатологической реакции замедленного типа.

• Изучение морфологической картины микоплазменной инфек-ти у белых мышей позволило отметить, что в отличие от пневмококковой моноинфекции при микоплазменной клеточно- опосредованные иммунопатологические реакции не сопровождались развитием гранулематоза. Р целом кэ морфогенез двух инфекций во многом сходен и определяется развитием в динамике, инфекции реакции гиперчувствительности замедленного типа.

Однако.,, полученные данные при смешанной микоплазма- -пневмококковой инфекции, несколько отличается отмоноинфек-ши по выраженности алиеративно-экоудагивннх процессов. . Для минет инфекции характерна активация клеток иммунокомпе-тентной системы с развитием гуморальных и, преимущественно, клеточных иммунопатологических реакций.

Таким образом, анализируя полученные результаты, можно заключить, что при шдазт инфекции превалирует микоплазмен-ная и в динамике .процесса отмечается быстрое затухание проявлений пневмококковой инфекции, что по-видимому объясняется более, ранним формированием иммунопатологических реакций замедленного типа к микоплазмеиному антигену.

Выракав благодарность сотрудникам лаборатории бактериальны х инфекций старшим научным сотруднг. :ам О.Г.Стеценко-Андру-срвой и Г.7.Дюс калиевой за участие в выполненил диссертационной работы ее отдельных фрагментов.

ВЫВОДЫ

1. Разработан комплекс лабораторных бактериологических и иммунолс .^ических исследований, позволяющих не только выделять условно-патогенные микроорганизмы, но и установить их- р шъ при наспецифических заболеваниях легких,

2. Установлено, что основным бпонхопагогеном в этиологической отруктуре неспеоифических заболеваний легких,, являются

штаммы пневмококков серотипов 19, 8, 23, 4, входящих в пул В.

3. Получены новые данные о значении встречного иммуноэлектро-фареза для ускоренной диагностики пневмоний. Использование смывов с первичных посевов мокроты на элективные агаровые' среды позволил увеличить удельный вес выявления антигенов пневмотропных бактерий на 20-25$ по сравнению

. с исследованием нативного материала.

4. Усовершенствованы иммунологические методы диагностики путем конструирования антительных и антигенных эритроицтар-ных диагностикумов. Использование этих иммунореагентов позволяет проводить экспресс-индикацию антигенов и антител в различных ''иосубстратах и дополнительно к бактериологическим методам увеличивает расшифровку пневмоний.

5. Изучены микробиологические особенности развития моно- и сочетанной микоплазма-пневмококковой инфекций у беспородных белых мышей - иг г ¿.ve , ^¿¿¿о . Показано, что

i

. смешанная инфекция характеризуется взаимной ингибашей размножения пневмококка и микоплазм в легких, печени и ' селезенке животных, а ассоциативное взаимодействие этих возбудителей в изолированной ткани легкого мышей носит

. ингибирующий характер только для пневмококк;...

6." Комплексное иммуноморфологическов и ультраотруктурноа исследование смешанной микоплазма-пневмококковой инфекции у белых мышей выявило определенные отличия ej от проявлений моно- инфекций по выраженности.альтаративно-эксуда-тивных и пролиферативннх процессов. Смешанная инфекция характеризуется ранней активацией клеток иммунокомпетент-ной системы и формированием клеточно опосредованных иммунологических реакций.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕНШАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Этиологическая характеристика острых пневмоний у детей в г.Алма-Ате// Актуальные вопросы педиатрии/ Материалы

Ш съезда детских врачей Казахстана том 3/ Алма-Ата, 1984/ Соавт..Байжомартов Ii.С., Стеценко О .Г., Хан P.M., Путин. лева И.И., Семенова В.А., Дюскалиева Г.У.

2. Клинико-иммунологические особенности микоплазменной пневмонии//. Педиатрия/ 1985, 15 5 (Соавт. Ыаскеев K.M. Байжомарт-тов U.C., Путинпева И,И., Пульчинский Л.К., Стеценко О.Г., Белова B.C.)

3. Моделирование оотрой пневмонии пневмококком у морских свинок/ Щтериалы U объединенного съезда.микробиологов, эпидемиологов, гигиенис-ов, парпитологов, инфекционистов. Казахстана/ Чимкент, 1985, том 3 ( Соавт. Байжомартов М.С., Маскаев K.M., Хан Р.::., Шалхаров С.Ш.).

4. Этиологическая роль, серотиповая характеристика пневмококков при пневмониях у детей и взрослых в г. Алма-Ате /Там же, 1985 (Соавт. Хан. P.M.).

8, 8§роэшщемиологическое изучение вирусных и бактериальных инфекций при острой пневмонии/ Кн.j?a "Вирусы и. вирусные инфекции/ Алма-Ата, 1985 ( Соавт. Стеценко О.Г., Байжомартов 1Л.С., Хан P.M., Путинпева И.И., Лукарт В.М., Ва-литоваМ.Н. ).

6, Изучение этиологической роли и серо типовой характернотки пневмококков при острых пневмониях в г. Алма-Ате// В сборнике "Регкональные проблемы медицинской географии "Г.'атэ-

.. риалы секши мед.географни П съезда географов Казахота-г на - Алма-Ата, 1985, .Библиограф указ. ВНИИШ '.'Депонированная рукопись" (Соавт. Хан P.M., Байжомартов fci.C, ).

7, Экспресс-диагностика микоплазменной пневмонии о помощью встречного.иммуноэлектрофореэа// Лабораторное дело, 1986, J3 5 (Соавт. Семенова В.А., Стеценко О.Г. к Байжомартов M.ÇL

8, Реакция клеточной гиперчувствятельнооти на Uz.р^и^^угхге в органной культуре легкого // Тезисы докладов У Межреспубликанской конференции аллергологов Казахстана и

республик Средней Азии - Алма-Ата, 1986 (Соавт., Стецен-ко О.Г., Кашицына А.К.).

9. Моделгрование смешанной микоплазмо-пневмококковой инфекции у мышей в органной культуре их легких// В книге:"Смешанные ик^екши", Москва, 1986 (Соавт. Байжомартов М.С., Стецен-ко О.Г.).

10. Сероэпидемиологическое изучение бактериальных инфекдай в Казахстане// Тезисы доклада I съезда гигиенистов, эпидемиологов и инфекционистов Киргизии - Фрунзе, 1°86 ( Соавт. Байжомартов U.C., Стеценко О.Г., Успанова К.Т. .Семенова В.А.)

13. Этиологическая характеристика бактериальных и вирусных , пневмоний у детей и взрослых в г.Алма-Ате// Проблемы туберкулеза - 1987 - J5 4 ( Соавт» ¡Ласкеев К.;,1., Байжомао-■ ,тов 1,1.0., Стецэнко О.Г., Путиннева И.И., Усербаева С.Б.).

12. Этиологическая структура острых пневмоний у детей и взрослых// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии -

. 1987 - .'.5 7 (Соавт. Baiisoмартов М.С., Стеценко О.Г., Семенова В.А., Яискалиева Г,У., Хан P.M.).

13. Серотиповая характеристика штаммов пневмококков// Книга "Патология органов дыхания и реактивность организма -Алма-Ата, 1987 (Соавт. Байжомартов M.G,, Семенова Б.А., Путшшева И.;1., Семенова Р.Л., Усербаева С.Б.).

14. Применение встречного ишуноэлектрофореза как метода ускоренной диагностики бактериальны;, пневмоний// Сборник медицинского института - Алма-Ата, 1987 (Соавт. Семенова В,А.,

Байжомартов М.С., Усербаева С.Б.).

15. Лабораторная диагностика бактериальных пневмоний// Методические рекомзндацип - Алма-Ата, 1987 (Соавт. Байжомартов U.C., Семенова В.А., Стеценко О.Г., Л'зскалиева Г.У., Тартаковский И.Р., Радченко О.В., Небожина М.В.).

Id. Ускоренные методы иммунологической диагностики бактериальных пневмоншУ/ Тезисы доклада П Всесоюзной конференции, • в книге "Актуальные вопросы клинической микробиологии в . неинфекшонной клинике", Часть I - Барнаул - 1988 (Соавт. Байжомартов М.С., Стеценко О.Г., Дюскалиева Г.У.).

17. Этиологическая структура пневмоний по данным микробиологической и серлогической диагностики// Там ке, част П М. -

Барнаул - 1988 (Ооавт..Стеценко О.Г., Люскалиева Г.У., biy-кашева С.М., Лопытко Ф.М., Айгошнова К.А.).

18. Ускоренная лаборатория диагностика бактериальных пневмоний// Нурнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии -1988 - 15 8 ( Соавт. Байжомартов U.C., Семенова В.А., Люскалиева Г.У., Стеценко О.Г.).

19. Типированиз пневмококка в реакции коагглютинации// Лабораторное дело № 1988 - 11 9 (поавт. Костикова H.H. Сахарова A.S., Гукасян Л.А.).

20. Ускоренная иммунологическая диагностика острых.пневмоний//

сборнике:" Вопросы клинической иммунологической диагностики//. Алма-Ата, 1988 (Coî.bt. Стеценко О.Г., Мукашева С.М.,

. Лопытко Ф.М., Айгожинова К.А.). .

21. Микробиологическая и гистомореологическая характеристика экспериментальной микоплазма -пневмококковой инфекшй// Журнал микробиологии, эпидемиология и иммунологии- 1990 -. .

. Ji 3 ( Соавт. Байжомартов М.С., Царевский Л.П., Стеценко О.Г.)

22. Бактериологическое исследование при острых пневмониях у

' детей.раннего возраста// Материалы У Объединенного.съезда гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов, паразитологов и инфекционистов Казахстана - Алма-Ата - 1991, том У (Соавт. нет).

Рационализаторские предложения

I. Маскеев K.M., Рыс-Улы м.Р. Баймуратова U.A. "Способ моделирования острой пневмонии" Регистрационный чомер предложения ЛЬ 178 от 15.10.85 г.

2. Головина А.К.р Баймуратова H.A. "Усовершенствование устройства для морфометрцческого изучения гистопрепаратов"

. Регистрационный номер предложения й 360 от 14.06.88 г.

3. Бейлбаева М.Л., Баймуратова М.А. "Способ выделения и идентификации пневмококков" Регистрационный номор J5 442 ■ от 11.04.91 г.

4. Андруоева О.Г. .Баймуратова М.А..Бейлбаева M.JI."3i:cripecc-диагноотика легиокелл^зной и пнегчококковой инфекций". /Информацио.)пай листок, НИЖМИБ-Алма-Ата,-1991.