Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Метгемоглобинемия нитритной породы у карпов и пути ее устранения

ВАК РФ 03.00.10, Ихтиология

Автореферат диссертации по теме "Метгемоглобинемия нитритной породы у карпов и пути ее устранения"

РГ6 од

2 7 СЕII -ИМ

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ПРУДОВОГО РЫБНОГО ХОЗЯЙСТВА (ВНИИПРХ)

На правах рукописи

РОДИНА ТАТЬЯНА ЕВГЕНЬЕВНА

УДК 597-1.0'М: 597-111» 13

: МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИЯ НИТРИТНОЙ ПРИРОДЫ У КАРПОВ И ПУТИ ЕЕ УСТРАНЕНИЯ

03.00.10 - Ихтиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 1993

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧН0-1!ССЛЗЛ0ВАТЕЛЬСЮ5Й ИНСТИТУТ ПРУДОВОГО РИБНОГО ХОЗЯЙСТВА (ВШЯПРХ)

На правах рукописи

РОДИНА ТАТЬЯНА ЕВГЕНЬЕВНА

УДК 597-1.С'й :597-111.13

МВГГЕМОГЮЕ'НЕМШ НИТР15ТН0Й ПРИРОД) У КАРПОВ И ПУТИ ЕЕ УСТРАНЕНИЯ '

03.00.10 - Ихтиохогая

АВТОРЕФЕРАТ

сертгцки на соискание ученей степени кандидата Сксаогических наук

1993

Работа выполнена в секторе физиологии питания рыб ГП НТЦ "Аквакорм" Всероссийского научно-исследовательского института прудового рыбного хозяйства (БНИИПРХ)

Научный руководитель - доктор биологических наук,

профессор ЩЕРБИНА М.А.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор КОНСТАНТИНОВ A.C., кандидат биологических наук, старший научный сотрудник ГОЛОШНА H.A.

Ведущее учреждение - АзНИИРХ

Защита диссертации состоится " 5 " октября 1993 г.

в " и " часов на заседании специализированного совета Д 117.04.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте прудового рыбного хозяйства (ВНИИПРХ) по адресу: I4I82I Московская область, Дмитровский район, пос. Рыбное, ВНИИПРХ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института прудового рыбного хозяйства

Автореферат разослан " 31 " _ р^туптд _ 1993 г.

¡Учений секретарь

¡специализированного

совета

С.П.Трямкина

ВВЕДЕНИЕ

Накопление ь воде азотсодержащих кетабояитов рыб, остатков корма и экскрементов является одним из факторов, лимитирующих производство товарной продукции в индустриальных хозяйствах. Dpo-межуточниу. продуктом их окисления являются нитрита, которые оказывает токсическое влияние на рыб (СоIt, Tehobaaogloas, 1976; Руссо, 1981), Механизм их действия изучен недостаточно, однако, известно, что одной из главных причин является свойство нитритов йнактивнрозать гемоглобин, переводя его в метгемоглобин, неспособный к переносу кислорода. При накоплении метгемоглобина в крови выие определенного уровня возникает патологическое состояние, называемое метгемоглобинемией. Вследствие нетгеноглобакемии снижается кислородная емкость крови и развивается гипоксия, что сопро-вовдается торможением обменных процессов и накоплением кедооккс-денных продуктов в тканях. Это приводит к стяетв темпа роста и нередко к гибели рыб. Известно, что летальным для рыб является уровень метгемоглобина около 70% ( Bath, Eddy, 1980).

Влияние нитритов изучалось на отдельных видах рыб, в частности, на форели С Еипзо et al., 1914), чавыче ( Saith, Silliena, 197*0, кижуче ( Реггоаа, Heade, 1977), канальном сокэ ( Тслаэао at al., 1979). Приводимые в этих работах данные даэт основание полагать, что урэгень образовали иетгеиепобаиа загасят от ряда факторов, в том числе, от концентрации нитритов в воде, зремени их воздействия, массы и физиологического состояния рыб. Что касается традиционного для насей страны объекта рыбоводства - карпа, то известны работы М.М.Еахмурзова с соавт. (1990, 1991), в которых приводятся сведения о повышении уровня метгемоглобина у кар° пов до 23% при содержанки нитритов в 'воде 0,5-0,7 мг/л. В то тс время, кам не известны данные, количественно характеризуйте зависимость образования нетгекоглобина у карпов от условий окрузаь-кой сведя и физиологического состояния' организма. Выяснение этой зависимости представляется крайне важной задачей, поскольку дает возможность определить, какое содержание нитритов в воде мелет привести к интоксикации, развитие мэтгемогяобптми»> гипоксии, ухудаенив роста рыб а кх гибели.

Е литературе пригодятся сведения о гдвиоаних способах с:ошэ-ния токсичности нитритов для рыб ( огяегоп, 1971; Сгэяйогй, lliea,. 1977; Руссо, 1981; Еахмурзов и др., 1991). Однако, для

карпа этот вопрос изучен недостаточно полно. Поэтому, цель нааей работа заключалась в исследовавди влияния различных факторов на развитие нитритной иетгемаплобинемии и разработке на этой основе относительно простого и эффективного способа восстановления кис-лородсзязываюккх свойств гемоглобина у карпов-.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие основные задачи:

- изучить влияние абиотических факторов на интенсивность образования кетгемоглобина у карпов, в частности, концентрации нитритов в воде, времени их воздействия, температуры воды;

- исследовать влияние массы и физиологического состояния карпов на развитие нитритной метгемоглобинемии;

- разработать способ устранения и предотвращения нитритной ыетгеиоглобинемии и определить оптимальные условия его применения;

- проверить эффективность разработанного способа в промышленных условиях.

Научная новизна работы заключена в комплексе сведений, характеризующих воздействие биотических и абиотических факторов на развитие нитритной метгемоглобинемии у карпов.

Установлено, что определяющее влияние на интенсивность образования метгемоглобина оказывает концентрация нитритов в воде (68%). Сила воздействия биотических факторов значительно меньше • (кассы - 8%, физиологического состояния - 2%). Температура не оказывает существенного влияния на развитие метгемоглобинемии.

Количественно охарактеризована связь между концентрацией нитритов в воде и содержанием метгемоглобина в крови рыб. Установлено, Что она имеет вид, близкий к экспоненциальной зависимости, с.наиболее резким подъемом уровня метгемоглобина в диапазоне концентраций нитритов фЗ-0,6 мг/л.

Впервые изучена динамика образования метгемоглобина в зависимости от продолжительности воздействия нитритов. Она характеризуется резким повышением содержания метгемоглобина в течение первых часов воздействия нитритов, затем следует некоторое снижение его уровня до середины-конца первых суток. На протяжении вторых и третьих суток уровень метгемоглобина вновь возрастает, а на четвертые - стабилизируется на достигнутом уровне.

На основании анализа литературы и собственных экспериментальных данных предложен эффективный-и простой способ устранения

и предупреждения нитритной метгемоглобинвкии. Способ основан на внесении б воду минерального комплекса, ионы которого конкурирует с нитритами за проникновение в организм раб через жабры, пре-дотвраяая образование метгемоглобина. Комплекс получил название "ТРЕС!^А-1". Определены оптимальные условия его применения в зависимости от био- л абиотических факторов. Разработанный препарат обладает широким диапазоном действующих концевтрасч?. Величина минимально действукщей концентрации зависит от содержания нитритов в воде. Восстановление кислородсвязызашах свойств гемоглобина под действием препарата происходит в течение 24-^8 часов.

Внесение препарата в воду в условиях нитритного загрязнения снигазт токсичность нитритов, предупреждал развитие ыетгемоглоби- , не ¡.«и. Одновременно происходят благоприятные для организма изменения в обмене веществ, которые выракавтея в активации липогене-Ба и синтеза белка и яовыеекий знергосбеспеченности прироста. Все ото способствует увеличения темпа роста рыб на 20-^0 % при скиже-' кя.ч затрат корка.

Показано, что препарат предотвращает накопление нитритов в орга;шЕнз рыб, что дает вевнохиость получать рыбнуа продукции более высокого качества.

. Практическая значимость. Разработан и апробирован в промышленных условиях способ предупреждения нитратней метгзкоглоб.тне'ии и зосстайовленкя кислородсвязывагсих свойств у карпа. Способ применим в индустриальных хозяйствах.

Апробация работы. Основные материалы диссертации дояйаднгаг лись и обсуждались на Втором симпозиуме по екодогической биохимии рнб (Ростов Великий, 1991), конференции "Методы исследования и использования гидросистем" (Рига, 1991), Второй Всеооизной конференции по рнбохоаяЕственной токсикологии (Саапт-Пвтербург, 1591), Еосьмой научной конференции по экологической фйзиологаи и биохаюю рыб (Петрозаводск, 1992), роллоквиужах сектора фязяоюпги питаяая риб ГП ¡ГГЦ "Аквакоги" (1920-1993).

Публикации. По т<ме дассвртырш опублнксгано 8 работ. ,

Об;, ем я структура диссертации, Хассертацкя аадохена на 154 стр. машинописного текста и состоит из .введения, 5 глав, захлаче-ння, зыводоз, приложения. Текст илявстрвровая 12 таблицами и 20 рзеунхаал. Спясок литература вмвчаот 65 работ па русском и 87 на иь.сотралких яэылчх.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

В главе представлена сводка литературных данных, посвяцен-ннх современному состоянию проблемы возникновения нитритной мет-гемоглсгбинемии у рыб. Приводятся сведения о возможных механизмах токсического действия нитритов-и образования метгемоглобина. Рассмотрено влияние биотических и абиотических факторов на развитие нитритной метгемоглобинемии у различных видов рыб. Описаны клинические признаки нитритного отравления у рыб и компенсаторные процессы, развивающиеся в их организме в ответ на нитратную . интоксикацию.

Из обзора следует, что имеющиеся в литературе данные не дают достаточно полного представления о влиянии различных факторов на развитие метгемоглобинемии у карпов. Большинство из суаествуювдх способов предупрездения нитритной метгемоглобинемии и восстановления кислородсвязывавших свойств гемоглобина недостаточно эффективны или неудобны для широкого применения.

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная часть работы, химическая и аналитическая обработка материала выполнены.в течение 1989-1993 гг. в секторе физиологии питания рыб ГП НТЦ "Аквакорм". Отдельные эксперименты проводились на рециркуляционной установке для выращивания карпов в подсобном хозяйстве "Тауроста" Литовского объединения "Азот", г.Конава.

Объектом исследования служил карп ( cyprinus carpió I. ). В опытах использовались рыбы, имевшие различное физиологическое состояние и массу. Схема исследований представлена на рис. I.

Развитие метгемоглобинемии у рыб вызывали путем добавления в воду раствора химически чистого нитрита натрия. Планировалось испытание следующих концентраций азота нитритов: О (контроль); 0,5; 1,5; 2,5 мг/л. Фактический диапазон концентраций нитритов несколько отличался от задаваемого в результате процессов аизне-деятелкности рыб и микрофлоры. Содержание нитритов в воде определяли калориметрическим методом с реактивом Грисса (Шйстерин и др., 1985). ¡

Во время исследований проводили опыты продолжительностью 48-96 часов, а такие ростовые эксперименты длительностью 14 и 41 день.

?ис. I. Схт.та и основная направления исслздоьялаи по игучеииь развития нитриа-ной метгемоглобиигмиа у карпов

Мл я прсгздекия краткосрочных опытов использовали непроточные якварчуга еухгатью 7 и СО л. Выбор объема аквариумов определялся кассой и количеством рь'й, Рогтовче эксперименты проводили па лабораторией устайэзхе о рециркуляционным зодоснаСйшгаем, - принципиальная схема которой списана А.Л.Ясжсмбег.он (19Ш). Научно-хогяй-ственние опыты выполняли на проншмекисй рециркуляционное уста--ноже подсобного хозяйства "Тауроста" ГО "Азот" Литовской Республики, г.Ёо;ига.

Перед началом <»8-96-часоз;их опутсв раб адаптировали к условиям эксперимента из менее двух недель. Опыты проводили при температуря волы ?0°С, Контроль за развитием метгемоглобкнгнии осуществляла путем определения содержания ».'зтгемоглоб«на, о'щзго и нсскис-ленного гемоглобина.

Ростов .¡я сксперяиектн проводили яра температуре•вода 25°С. fué кор"-,'.Л'д комбикормом ВБС-Рд, который задавали в когичэеггз ' • 5-7 % от их масс.'. Нжедкэвко учитывала нвсъедеинве остатки корма. Потзри комбикорма от мехагачсоксго рассеивания прл погружйнии в году определяли, по методике М.А.Ёербины и А.Ю.Киселева (1935). ¿ля контроля за ростом, один раз. в 10 дней проводил;: отлез я азге-Еиваяие всех рнб, которые была яшя?здуально поне-чекы. Е;;олоп!-••'с:: и1 ?$фект препарата "тртзсма—i" «даивали по таяп показателям как абсолютная прирост, среднесуточный прирост,нзсмокеЗ коеф-&сш»енг (Шор';¿t-a, 1983), Peaxwu крои: определяла по содержало нетгемоглсбиаа, а тохже обзвго к яескислоздого гипгдебаяа. Сб g> •¡епешях в обкеиа ^¡сиотв судили по хаклчзоксну ecwugr тела раб у

жирнокислотному составу общих липидов в начале и конце опытов.

Влажность тела рыб определяли путем высушивания при Ю5°С; содержание сырого протеина - по общему азоту, установленному способом Кинга, с последующим умножением на коэффициент 6,25; жира -окстракционно-гравиметрическим методом; минеральных веществ -методом сухого озоления в муфельной печи; фосфора - по Фиске и Суббароу (Щербина, 1983). Анализы химического состава тела были выполнены при помощи сотрудников сектора физиологии питания рыб Т.Г.Столяровой и В.И.Кононовой. Нирнокислотный состав общих липидов тела рыб был определен в Институте питания АМН СССР.

При гематологических анализах применяли следующие методы: метгемоглобид определяли колориметрическим методом В.Н.Поляковой с соавт. (1989), содержание гемоглобина в лабораторных условиях устанавливали унифицированным гемиглобинцианидным методом (Кушаковс-кий, 1968), при проведении промышленных опытов использовали метод Сали (Sahli, 1894).. Количество неокисленного гемоглобина вычисляли как разницу мезкду содержанием гемоглобина и метгемоглобина. Концентрацию нитритов в плазме крови определяли колориметрическим методом с реактивом Грисса (Шестерин и др., 1985). Статистическую обработку материала проводили по общепринятым методикам (Лавин, 1968).

За- время работы было проведено 48 краткосрочных и 20 хронических опытов на 3200 рыбах, а также 2 научно-хозяйственных на S000 рыб. Выполнено 6640 определений метгемоглобина и гемоглобина на 3320 пробах крови рыб, 607 анализов плазмы крови на содержание нитритов, 205 химических определений состава тела рыб.

ГЛАВА BL 'ВЛИЯНИЕ АБИОТИЧЕСКИХ И БИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА РАЗВИТИЕ МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИИ У КАРПОВ

Глава посвящена исследованиям, проводийетмся о целью, определения зависимости меяду интенсивностью образования метгемоглобина в кроЕИ рыб и такими факторами как концентрация нитритов в воде, продолжительность их воздействия на рыб, температура воды, а также масса и физиологическое состояние карпов.

I

IL Зависимость между концентрацией нитритов в воде и уровнем иетгемоглобана в крови карпов

Для изучения влияния концентрации нитритов в воде на содержание метгемоглобина у карпов была проведена серия опытов на ры-

бах, имевших нормальное физиологическое состояние и ослабленных зимним голоданием. Результаты представлены на рас. 2.

60 50 40 30 20 10

Г Г

0,5

1,0

1,5 2,0- 2,5

3,0

Рис. 2. Влияние концентрации нитритов на уровень яотгекогло-бииа з крови карпов с хоре гик физиологаческим состоянием и ослабленных зимовкой

ЛеИ-ъ - мет гемоглобин, % от общего геиоглобзна; "-И02 - концентрация азота нитритов в воде, иг/л; ■ •■ • - карпы с хорошим физиологическим состоянием;

•--—> - карпы, ослабленные зимовкой;

£ - оиибка средней.

Получанные данные свидетельствуя? о том, что количество ичт-гикоглобана зависит от концентрации нитритов в воде. Наиболее реэ-хпо изменения обнаружены в диапазоне малых концентраций нитритов Сот 0,03 до 0,6 мг/л), прГкоторых количество иетгемоглобина не-г редко возрастало до 50* ст общего уровня гемоглсСянд. Дальнейшее позагадпе уровня нитритов еызывзло вначительчо «эньк-чй подъем концектралик кетгемоглсбина: при содеряанкя нитритов 1,0-1,5 иг/л урезень кетгеиоглсбина изменялся незначительно, при 2-3 мг/л ьоз-рлстал до 55-63 %. Математический анализ показал, что полученнва гемеяство графиков можно аппроксимировать показательной (эгопокен-цаяш1сЯ> зависимиетьв.

Известно, что жтгеыоглсииномия может бьяъ физиологической" и патологической (Кушаковакий, 1963). Для каря ш нсркадькьм предлагалось считать уровень метгеиоглобкна 2-20 % (Полякова, и др., 1989). По.нашим данным содержание мотгемоглобина у карпов в проточной вода не преЭДЕ&ет IOí. Ka атом основании можно предполагать , что пОЕааеюгз уровня нгтгекоглобина более 10% свидетельствует о развитии патологической форма иатгемоглсбинемии..

Обнаружены различия в реакции организма рыб на присутствие нитритов в воде* в зависимости от физиологического состояния. У карпов с хорбЕим" физиологический состоянием ийтенсивность образования метГекогло'бкна в крови била выше, чек у голодавд-их. Несмотря на это, уровень кзожсденного гейоглобина у обеих групп раб был примерно одинаковым, поскольку у упитанных карпов содврзаиие обвего гемоглобина изначально было более вкоким.

2. Развитие метгемоглобинемии у карпов в зависимости от продолжительности воздействия нитритов

С целью изучения динамики образования метГемоглобина в зависимости от временя воздействия нитритов были проведены onu-fu длительностью 96 ч. Сеголетков карпа разделили на 2 группы, составив-те 2 варианта опыта. В одной из вариантов концентрации нитритов в воде повысили до 1,5 мг/л. Другой, в кстороьг нитрит натрия не добавляли, служил контролем. Реакцию крови определяли через 3, 6, 12, 24, 48 и 96 ч. Результаты опытов представлена на рис. 3.

Согласно графику, динамика накопления ме?Геиоглоби'на в крови рыб была ступенчатой. Через час после повышения кокц'еК-гращш нитритов у рыб происходило некоторое увеличение содержания метггемо-глобина. Затем в течение II ч его количество опускалось до первоначального уровня. В последукщйе 60 ч' процент метгемоглобина постепенно увеличивался и, достигнув 60%, в оставшиеся 24 ч сохранялся на зтем уровне. В повторной серии экспериментов динамика развития метгемоглобинемии была аналогичной.

Одновременно происходили изменения в содержанки общего гемоглобина: в первые 6 ч оно снижалось с 71 до 57 г/л, затем в течение 4? ч постепенно увеличивалось до 74 т/л, а в последующие 48 ч вн^вь медленно снижалось, достигнув 64 г/л.

По аналогии с,теплокровными животными (Куваковский, 1968), подобную динамйку образования метгемоглобина мсяно объяснить Пос-

часа

Рис. 3. Динамика развития нетге«оглебанемяи у карпов с зависимости с~ продолжительности воздействия нитритов при их Еокизнтраиии О (контроль) и 1,5 (опит) кг/л Я8Ш> - иетгемоглобйн, % от общего гемоглобина:

--О- контроль, з - с-пнт;

нь - гемоглобин,г/л: —е— опыт,---о---контроль;

А овибка средней.

тепенннн вклсчекиек компенсаторных неханивчов, в частности, постепенной активацией метгемоглобинредуктазпой система (Кулаковекий, 1960). Пожвмше содержания мэтгемоглос'ина через I ч после увеличения ковиекттшии нитритов может свидетельствовать о том, что кктрита быстро проникает в терэьь через яабра в ояисляят гемоглобин. ¿то схуя-т пусг.огык моментом к вслсчешв кочпексаторнах механизмов, э результате чего уровень «етгекоглобяна в точение пос-ледукетх II ч скагастся. Однако, продолжавшееся преткновение питрптов в кровь, очевидно, приводит к истощению компенсаторных возможностей организма, следствием чего является новое увеличение ух)от:=.я метгемсглобина." Спустя 72 ч после воянзеняя Еоядеитрааии нктмтоз в воде содержание иетгемоглобяна стебялязлруется.

По кей вероятности, этому способствуют развивавшиеся в ответ на нарастающую гкпоксив компенсаторные механизмы другого уровня.

3. Влияние температуры на развитие метгемоглобинемми у карпов

С цельв выяснения влияния температуры на образование метге-иоглобина в условиях изменявшихся концентраций нитритов з воде была проведена серия опытов на годовиках карпа. Схема опытов предусматривала выявление реакции рыб, находившихся а воде с содержанием нитритов в диапазоне 0-2,5 мг/л, при температурах 10°, 20° и 2б°С. Подопытных рыб адаптировали к указанным температурам в течение двух недель, затем в воду добавляли нитрит натрия и выдерживали карпов в течение трех суток. Через 72 ч отбирали пробы крови. Результаты представлены на рис. 4.

Рис. Образование метгемоглобина у карпов при различных температурах воды и концентрациях нитритов [ - ошибка средней; КеШэ - метгемоглобин, % от общего гемоглобина;

Т°С-----:_._ Ю°,- 20°,------26°-

Полученные данные дают основание полагать, что у адаптированных карпов температура воды не оказала существенного влияния на интенсивность образования метгемоглобина. В то же время, зависимость образования метгемоглобина от концентрации нитритов сохранилась вне влияния температуры.

•'(. Развитие метгемоглобиненаи у рыб разной йаяс.ч и физиологического состояния

Следующие серии опытов били проведены с цельв изучения влияния массы и физиологического состояния рыб ка интенсивность образования метгемоглобина при повышении концентрации нитритов в воде.

Опыты.проводили на группах рыб массой 17-25, 50-60 и 300 г, икевсих хороиее физиологическое состояние после летнего нагула и ослабленных зимовкой. Концентрация нитритов в воде аквариумов различных вариантов опытов колебалась в пределах 0,5-0,7; 1,1-1,6; 2,1-3,2 мг/л. Время пребывания рыб а воде с указанная концентра--цияни нитритов составило 72 ч.

Согласно рис. 5, с увеличением массы интенсивность образования иетгзмоглобина возрастает. У ослабленных рыб кассой около 20 ■к 50 г нитриты вызывали менее Еыраженнув реакцию, чал у рыб такой ге массы, но имеввих хорошее физиологическое состояние. У 300-граммовых упитанных раб инактивация гемоглобина происходила в' меньшей степени, чем у голодавших.

Расчет содержания неокисленн"Го геиоглобака позволил выявить его снижение у обеих групп рыб в 1,2-3 раза при повышении концентрации нитритов в воде. В то Ее время, не обнаружено четкой зависимости между физиологическим состоянием, кассой и содерганяем кз-окисдснного гемоглобина.

Полученные результата согласуются с данными о поЕЦЕения чувствительности к нитритам у форели (Руссо, 1981) и киггуча (регго-^ пе, Ывайа, 1977) с увеличением массы рнб.

Математическая обработка всего массива данных, представленных в главе, характеризующих влияние био- и абиотических факторов показала, что на интенсивность образования уетгемогдобина'наиболее сильное и определягкее влияние оказывает концентрация нитритов в веде (бае). Сила влияния массы рыб почти в 9 раз маньяе (7,8?), физиологическое состояние влияет очень слабо (.2%).

0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 Я-Шг,

мг/л

Рис. 5. Влияние массы на образование метгемоглобина у карпов, ослабленных зимовкой (А) и после летнего нагула (Е) Ееш> - метгемоглобин, % от общего содержания гемоглобина; Е-Е02 - концентрация азота нитритов в воде, мг/л;

касса рыб: — — •— 20 г,-----50 г,-- 300 г;

| - ошибка средней.

ГЛАЗА 17. РАЗРАБОТКА СПОСОБА УСТРАНЕНИЯ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ НИТРИТЯОИ МЕГГЕМ0Г10БИНЕМИИ У КАРПОВ

I. Разработка способа снязеняя токсичности ¡штритса для риб

После того, как з нагзх исследованиях било изучено развитие метгемоглобинешн у карпов в зависимости от их кассы, физиологического состояния и условий округсавяей среди, иы поставила задачу изыскать способ предупреядения и устранения иетгемоглобаненяи.

В настоящее время известно несколько основных путей снижения токсичности нитритов для рыб: перЕый - уменьшение концентраций нитритов а воде (усиление протока воды (Easy ct al., 1980), распадение в воду перманганата кадия и перекиси водорода (Шахмурзов и др., IS9I)); второй - создание условий, при которых а оргакизиэ ускоряется восстановление гемоглобина (например, использование аскорбиновой кислоты и нетиленового синего ( Ccrexon, 1971; Наумова, 1986)); третий - создание препятствий на пути проникновения нитритов з организм рыб путец внесения з воду исков, кешеурирув-еих с нитритами при проникновении через -абры ( perrons, rends, 1977; тсяаазо et al., 1973; Руссо, 1981 и др.). По данным Р.Руссо (1981), такое действие сказывавт ионы Br", С1~, Го|т

Р.Н.Бат и Р.Б.Эдди (Bath, Eddy, 1980) полагает, что образование метгемоглобина препятствуют катионные части'хлоридов. Однако, все эти способы дороги и инепт ряд недостатков, гатрудвягсах ах широкое применение.

На основании анализа литературных данных я собственных исследований мы сочли целесообразным пойти по пути подбора комплекса соединений, которые обладают свойством.конкурировать с иопами нитрита за проникновение в организм рыб через габры. В результате нами совместно с М.А.Щербиной и С.В.Ермаковым был создан ! препарат, получивиий название "TPECM-I". В его состав входят различные как-ро- и микроэлементы в виде неорганических солей. С цельп определения его оффективности нами был проведен ряд экспериментов на сеголетках карпа. Результаты представлены ка рис. 6.

Через 48 ч после повышения концентрации нитритов в воде до 1,5 мг/л уровень метгемоглобина в крови рыб зозрос с 12% до 62$, т.е., более чем в 5 раз. Убедившись, что у раб развилась метгемо-глобинемия, мы добавили в воду препарат "TFECMA-I" в концентрации

Ркс. 6. Изменение содержания кетгемоглобина в крови карпов при внесении в воду препарата "ТРЕСМА-1" Из4НЪ - метгемоглобин, % от обдего гемоглобина;

| - время внесения препарата; ^ - окибка средней.

20 иг/л, Исследование крови через 24 ч выявило снижение уровня ыетгемоглобина до 28?, что уже не являлось опасным для жизни рыб.

Таким образом, результаты первой серии опытов убедили нас, что разработанный препарат способствует снижению уровня метгемогло-бика в крови рыб.

2. Определение диапазона действующих концентраций препарата "ТРЕСМА-1" в зависимости от концентрации нитритов в воде

Цель дальнейших исследований состояла в определении диапазона лействущих концентрации препарата в зависимости от уровня нитритов в воде. Для этого были проведены опыты на сеголетках карпа, имевакх после летнего нагула хорошее физиологическое состояние. Препарат испытывал** на фоне содержания нитритоБ 0,516

2,5 мг/л. Испытуемые концентрации препарата составили 2-40С0 мг/л.

Установлено, что дейгтвувщая концентрация препарата зависит от содержания нитритов в воде. При уровне нитратов 0,5-0,7 мг/л восстановление кислородсвязывавсмх.сзойстэ гемоглобина наблвдалось при внесении 4-6 кг/л препарата. При повышении концентрация нитритов до 1,5 мг/л препарат начинал действовать при внесении его лэ расчета 10-12 мг/л, а при содержании нитратов 2-2,5 нг/л - 50 мг/л. 3 диапазоне концентраций 500-2500 мг/л он оказался эффективным при всех испытанных концентрациях нитритов.

Полученные данные дали основание полагать, что препарат "ТРЕСМА-1" обладает вироким диапазоном действувких концентраций.' Сравнивая его эффект с другими способами, можно сказать, что он оказывает действие в значительно меньвих концентрациях. Так, для снижения токсичности нитритов В.Я.Филатов с соавт. (1986) на основании данных Дгг.Томассо с соавт. ( Тог-га го эt а1., 1979) по канальному сому, рекомендует вносить смесь, состоящуг из равных частей хлорида кальция и хлорида натрия из расчета 1,5 г/л, М.М.Шах-мурзов с соавт. (1991) - хлорид натрия з концентрация 3 г/л. В то же время, действующие концентрации насаго препарата исчисляется з миллиграммах на литр.

3. Эффективность действия препарата в зависимости от физиологического состояния и массы карпов

С целью изучения влияния массы на снижение уровня мет гемоглобина у рыб с различным физиологическим состоянием наки были проведены опыты на группах рыб массой 17-25 г, 50-60 г и 300 г, имевших хорошее физиологическое состояние (после летнего нагула) и ослабленных зимовкой.

Опыты проводили при заведомо действувщих концентрациях препарата - 0,5; 2,5; 4,0 г/л и содержании нитритов в воде 0,5; 1,5; 2,5 мг/л. Уровень нитритов повышали на 48 ч, затем вносили "препарат "ТРЕСМА-1". Еще через 24 ч у рыб отбирали пробы кроза для определения содержания метгемоглобина и нитритов в плазке.

Полученные результаты показали;' что у рыб, имйвшах хорошее физиологическое состояние, масса не оказывала Йби'йкав на единение уровня метгемоглобина. У ослабленных зимовкой карпов массой 300 г содержание метгемоглобина оставалось е 2-3 раза более высоким, чем у рыб массой 17 и 60 г.

На восстановление кислородсЁй'за&гйщих свойств гемоглобина

под действием препарата оказывало влияние физиологическое состояние рыб. У ослабленных рыб процесс снижения, количества метгеиог-лоСинь происходил, очевидно, более медленно, поэтому его уровень оставался в 2-5 pas более высоким, чем у рыб в хороаем физиологическом состоянии.

Определение содержания нитритов б плазме крови показало, что ш'.трпты накапливается в ней в концентрациях, 'значительно превнкаг-щих их уровень в контроле (в 27-60 раз). После внесения препарата "ТРЕСКА-Iй содержание нитритов в плазме крови снизилось до уровня контроля. Это свидетельствует о возмоаности получения рыбной продукции более высокого качества, содержащей ыокьеше количества нитритов.

Такин образам, эффективность действия препарата зависит от физиологического состояния рыб: уровень метгемоглобина у ослабленных карпов снижался вкенысай степени, чем у имевших хорошее Еивиологическое состояние. Касса ко сказывала сукзствзкного влияния на скиазнае количества метгеиоглоояна под действием препарата.

4. ¿д кашка снижения уровня ыеттеиогдооина у карпов

посла внесения б воду препарата

Следухкиы втапои uassaS работы было изучение динамики снижена« количества иетгваоглобика в крон: карпов под действием препарата "ТРЕСкЛ~1". Опиты проводник на сеголетках карпа при содерза-1ш: в воде азота нитритов 1,5 мг/л. Период наблюдения составил 96 ч. В одном us ьарааитоа через 48 ч после: повшзкия концентрации нитритов был гпесен препарат hs расчета 20 кг/д. Б другом варианте препарат не вносили, ов служил контролем. Результаты приведены на рис. 7.

Согласно рисунку, после внесения препарате, снижение количества метгекоглобина в крови карпов начиналось через 6 ч к происходило постепенно. Полное Босстановлшше кнслородсвязывавкиж свойств гемоглобина кабладалось через 48 ч, однако уяе через 24 ч содержанке кзтгекоглобзка достигло уровня, неопасного для жкsни рыб.

5. Предупреждение нитратной иатгекоглобинешет у карпов

На основании полученных данных о способности препарата сникать уровень кетгзыоглобина у раб кн предположили существование реальаой хоэхозност предупреждать развитие нитрктной жеггемогло-Овявши.- С этой делью были проведена •щсспервмвнтк.'ва' сеголетка*

Рис. 7. Разйятие нитратной «^«коглобаяекаа у «арпоя

в з'одз с добавлением и без добаэлекйя препарата "ТРЕСКА-1" ——. —, без препарата;-——"——— с препаратом; ! - врекя внесения препарата "ТРЕС'-Л-1П; I - сгабка срзднзЯ.

карпа» Пврад на'алой опытов одна группа рыб з тгчехгие двух недель содержалась- н водз без добавления препарата, а две друглх - в Ьо-дэ с добайдеияем препарата в концентрациях 2.5 а 4,0 г/л. Пбвав адаптация рыб к препарату концентрация кйтритов з вода била ао£я~ йена. Реакция крови рыб показана в табл. I.

Получешшэ данные показшйв*. что повакение концентрации нитритов в воде не вызывало статистически зкачаиах различай в содэр» яании гемоглобина. Что касается йг^емоГЗобЯКа, то его содеркайяе в вариантах без препарата увелачагссь в 1,8*2,3 райа. При Е?ом аб-солЕтнсе количество неокисленноГо гбаоглобциа, способного переносить кислород к тканям, снизилось в 1,5-2 р£за» что не коглз яе отразиться на течении обменных процессов, обеспечйгас?,их рост рыб. Б вариантах с препаратом повыдгние концентрации нитритов на зыз-вадо увеличения содержания метгемоглобика и скжения Еислород'кой

Таблица I

Влияние препарата "ТРЕСМА-1" на содержанке гемоглобина к меггемоглобина у карпов при повышении концентрации нитритов в воде

Концентрация К-ЕО„ в воде г ыг/л Концентрация препарата "ТРЕСМА-1" в воде, г/л

0 ! 2.5 ! 4,0

Показатели крови

ПЬ, ! Ш>-0,,! Еа-НТЬ.! НЬ. ! НЬ-О,,! Не«П> г/л! г/л2 ! % ! г/л! г/л2 ! % ,!НЪ. !НЪ-о_, ! г/л! г/л2 Иег^Ъ,

0,06-0,1 0,3-0,9 1.4-2.0 3.0-4.1

62 60 66 66

45 30 30 22

27.4 50.3 54.7 62,6

66

64 66

65

44

44 50

33,0 31.2 36,0 23.6

72 66 65 63

57 46 44 44

21.0 30,5

33.0

30.1

Прикзчакае: ЕЪ - обдай гемоглобин, НЬ-о2 - иеокисленнкй . гемоглобин, Езгнь - иотгеиоглобин.

емкости крова. Таким образок, применение препарата дает возможность прздупрегдать вознасновзняе кетгемоглобянемии у карпов при поваленных концентрациях нитратов в воде.

глава У. влияние препарата "тресма.-Г на рост И обмен веществ карпов в умошях штатного загрязнения вода

Приведенные выхэ результаты насих исследований показали, что у риб, содерзавЕихся в воде с добавлением препарата, при повыне-гии концентрации нитритов в воде кетгеаеоглсбакемня не развивается и, следовательно, нз возникает сопровогдасцие ее нарушения обменных процессов. Поэтому., можно было предположить, что теш роста ркб б полз, оодеркаев» нитрит, при внесении препарата будет более высоким, чек без него. Для провер&н мы провели серию опытов, цель которых состояла в исследовании влияния препарата "ТРЕСМА-1" на рост, состояние систены крови и обмен веществ у карпов в условиях «¡итритного загрязнения ¿оды.

-Подошгеиих сеголетков .гсарпа выралшвали в аквариумах с рециркуляционным водоснабзенмем при-температуре воды 25°С. В период опыта концентрация кислорода в воде аквариумов не опускалась ниже 5 кг/л. Уровень нитритов в средней составлял 0,5 иг/л с колебаниями от 0.1 до 0,95 кг/л. Препарат вносили ъ воду установок из расчета 20, 50, 500 н 2503 кг/л. В одну из установок препарат кь

вносили, этот вариант служил контроле«. -Период выраящвакия составил 41 день, в каадом варианте было по 16 рыб (4 повторности с 4 рыбами в каждом аквариума).

Как можно видеть (табл. 2), во Есех вариантах с препаратом рыбы росли лучше. Однако, при содержании препарата 20 ыг/л темп роста был наиболее высоким, а кормовой коэффициент - самым низким.

Таблица 2

Влияние препарата "ТРЕСМА-1" на рост карпов в лабораторной установке с закинутым водоснабжением при нитритиом загрязнении воды

Средняя масса рыб, г Юреднесу- '.Кормовой

I точный ¡коэффициент начальная ! конечная .'поирост, ! ___ ! - . ! 3/сут ! _.

О 20.9 31.7 1,00 4,6

20 20,5 36,8 1,39 3,6

50 21,6 35,7 1.20 3,9

500 21,8 - 36,1 1,20 3,7

2500 22,0 37,4 1,26 И,1

Дальнейшее увеличение концентрации препарата не привело к видимому улучшение роста рыб или снижении кормовых коэффацаентов. Это свидетельствует о том, что при содержании нитратов 0,1-1 мг/л для предотвращения их токсического действия достаточно поддерживать концентрации препарата около 20 иг/л. Связи между дальнейкям повышением концентрации препарата в воде и интексавностьв роста рыб не обнаружено.

Определение в конце периода знрадиваная показателей арови показало, что в вариантах с препаратом содеряаСйе нэосислемного гемоглобина было на 25-3-4 % ваше, чем у карпов, содержавшихся в воде без его внесения. Это свидетельствует О лучкей обеспеченности организма кислородом, необходимым для успешного осуществления обменных процессов. Следствием этого и явился более быстрый рост рыб в вариантах о препаратом. . \ '

Внесение в воду препарата "ТРЕСМА-1" не оказало существенного влияния на химический статус карпов. Зависимости ыеяду концентрациями препарата и относительным содержанием основных групп органических а генеральных веществ не выявлено. 3 то ке время, .в вариантах с препаратом отмечена общая.тенденция к увелачекяю зарнос-ти тела раб и снижению фосфора.

Концентрация препарата, мг/л

Расчеты концентрации веязста к сяергии в единице прироста позволили установить, что интенсивность синтеза липидов у рыб с погшсениеы концентрации препарата в веде возрастала на 4-22 %. Несколько активизировался синтез белка (2-13 %), причем м&кекмаль-кое увеличение отнзчеао в вар1&нте с наибольшей концентрацией препарата. В.расчете на I г первоначальной касса у подопытных рыб накопалось на 42-60 % больсе дипидов, i:a 2S-44 % белка, на 27-36 % сукйь органических и 34-46 % цанзральких веществ. При этом обраяа-ет внималшз снижение накопления фосфора (до 38?), причина которого б настояаео гремя нам не ясна. Прирост массы бил больше на 25-54*, энергии - па 33-66 %.

В СЕЯ8К с теи, что наиболее заметное влияние препарат оказал иа лкпздвий обмен, мы исследовали яирнокислотный состав общих ли— пвдоз.тела риб. Однако, cyatíCTSomjtix и закономерных сдвигов в соотношении групп к отдельных наевдиншгх, кононенасыщенких и полане-шкавденамх харяых кислот не выявлено.* Обращает внимание только по-ЕУЕЗние уровня пальмитиновой касясти на 11-13 % в диапазоне концентраций препарата 20-500 иг/л. Тахик образок, активизация липо-гевэза хла в основной за счет усиления «орального, синтеза липидов оаа проявления патологических сдвигов.

Резюмируя результаты исследований, представленные в главе, коано сделать заклечэнде, что препарат "TPECMA-I", помимо способности предотвращать развитие кбтгекоглобкнемии, обладает свойство« окагыяагь аогозагелтог вяняше аа обмен ведеств и энергии у зар-

пое.

С цсльа врозерз* г$фаз»квноста препарата з промышленных условиях каш: был проведен, опыт из рециркуляционной установке по выра-ваваюв карпов в подсобном хозяйстве "Тауроста" Государственного обьеданэлия "Азот" ЛитояскоГ; республик. Работа была выполнена по просьбе адиакастрэдии п/х "Тауроста" по причине отсутствия роста раб в течение длительного времени.

Аиалвз технологии коралевия к гидрохимических условий позволил прэдг.олегить, что одной из главных причин торможения роста когда явиться плохая работа баофильтра и накопление в воде продук-. тон разлояоаая белка, что нз исклачало возкокности развития у карпов иетгемсглобянехга к гипоксия. Проведенные гидрохимические ис— еаедовакзя показали, что содержание нитритов в воде рабоводных емкостей било невысокий (0,3 кг/ж), однако, уровень нитратов достигал 164 кг/л,., акхаака - 4,7 мг/л. Согласно литературным данным, ■

¿Z

помимо нитритов, образование метгемоглобина у рыб могут вызывать и нитраты ( Qrabda et sa., 1974). Поэтому, ревене было проверять сффективность действия препарата "ТРЕСМА-Г* в условиях повышенных концентраций нитратов и аммиака.

К началу работы средняя масса рыб колебалась в пределах 260 г, температура воды была 24°С, содержание кислорода составляло 6.0 мг/л, рН - 5,8. Гематологический анализ подтвердил нага предположения и позволил установить у рыб четко выразеяяув метгэмоглобине-мив (табл. 3). Около половины гемоглобина (4б£) было ннактивирова-но и находилось в виде кетгеиоглобина.

Таблица 3

Изменение содержания метгемоглобина и гемоглобина в крови карпов при внесении препарата "ТРЕСМА-Г1 в воду рециркуляционной установки п/х "Тауроота"

п„,г0„„,.„™ „„„„„ !До внесения !Чэрез еттка после Показатели крови ¡Препарата !внесения препарата

Общий гемоглобин, г/л , 95 91

Неокисленный гемоглобин, г/л 51 67

Метгемоглобин, г/л 2%

% 46 26

После определения гематологических показателей э воду был добавлен препарат из расчета 20 мг/л. Судя по приведенным в табл.

3 данным, через 24 ч после внесения препарата уровень метгемогло-

бина снизился в 1,8 раза, составив 26$ от общего содержания гемо-

глобина. Количество неокислениого гемоглобина возросло в 1,3 раза, до 67 г/л. Таким образом, внесение в воду рециркуляционной уста-

новки препарата "ТРЕСМА-Г* способствовало нормализации уровня метгемоглобина и гемоглобина, и обеспечило лучине условия доставка кислорода к тканям. 1

Полученные результаты дали основание применить препарат на той же рециркуляционной установке для повызекия, эффективности вн-рааивания карпов в условиях загрязнения воды азотистым:* продуктами. Под наблюдением находилось 4 емкости, в которых выралщвали

8 тыс. годовиков карпа. Концентрация нитритов в воде колебалась в пределах 2-4 мг/л, нитратов - 65-60 иг/л, аммиаха - 1,1-2,1 мг/л. До внесения препарата содержание метгемоглобина у карпов составляло 46?. Через сутки после его внесения в воду зз расчета 30 иг/л

уровень иетгемоглобина снизился до 25% к сохранялся на этом уровне до конца опыта. -

Результата, представленные в табл. 4, свидетельствует о том, что до внесения препарата рост карпов был крайне низким. Внесение препарата снизило токсическое влияние нитритов, что привело к ускорение темпа роста карпов на 40£ при одновременном снижении затрат корма в 1,7-1,8 раза.

Таблица 4

Эффективность- применения препарата "Т'РЕСМА-1" при выращивании карпов "в рециркуляционной установке подсобного хозяйства "Тауроста" (Литва)

бассейна

ьзз внесения препарата

!При внесении препарата

Масса рыб,г

М„

Кп !

! СВ

! ¡Масса! ! ЗК !рыб,г! " "Н20 !

С®

I'

! ! Масса! !ЗК !рыб,г! ! г мру !

ОТ

1 68,0 70,5 0,33 2,2 75,4 0,75 2,8 88,2 1,74 1,1

2 64,0 72,8 1,17 1,9 60,6 1,13 1,7 95,2 1,65 0,9

3 62,0 71,4 1,28 1,8 78,0 0,9е 2,0 90,1 1,60 1,1

4 61,0 68,5 1,05 2,2 75,3 1,05 2,0 84,2 1,24 1,5 Сред-63,8 70,8 0.96 2,0 77,3 0,98 2,1 89,4 1,61 1,2

К8Э за

Примечание: И^д - аасса раб в начале

и через II, 20, 29 суток; ЗК - затраты корма; 03 - среднесуточный прирост, % от массы рыб.

Таким образом, полученные результаты показывает, что б условиях нитратного загрязнения воды при использовании препарата эффективность Еырааивания карпов кокат быть повышена.

ссновше .заводы

Изучение воздействия абиотических и биотических факторов ив.-. интенсивность образования кзтгемоглобина в крови карпов позволило установить сдедуняее:

- наиболее сильное и определявшее влияние оказывает концентрация нитритов в воде. (68?); сила воздействия биотических факторов аузееквенно кзньео: массы - 8?, физиологического состояния — ьтаядзш: температура не установлено;

связь ыевду концентраций! нитритов -в воде и уровнем «етге-

моглобина имеет характер, близкий к экспоненциальной зависимости с наиболее резким подъемом уровня метгемоглобина в диапазоне концентраций нитритов 003-0,6 мг/л Сдо 501 от об;его гекоглобниа);

- динамика развития кетгеиоглобинемии в зависимости от продолжительности воздействия нитритов характеризуется резким повышением содержания метгемоглобина в течение первых часов, затеи следует некоторое снижение его уровня до середина-конца первнх суток; на протяжении вторых и третьих суток уровень метгемоглобина вновь возрастает, а на четвертые - стабилизируется на достигнутом уровне;

- реакция рыб различной кассы на изменение содержащая нитритов в воде не одинакова. 'Сарпы массой 50-300 г болев чувствительны к токсическому влиянию нитритов, чем 20-гранковке. С повышением концентрации нитритов и массы рыб уровень метгемоглобина возрастает при ечпжении общего гемоглобина;

- влияние физиологического состояния рыб на их чувствительность к нитритам выражается в большей интенсивности образования метгемоглобина у упитанных сеголетков массой 20-50 г, чем у голодавших. В то же время, у питавшихся двухлетков (300 г) нетгемогло-бинемия развивается менее интенсивно, чем у перзгямовавзях дзухго-довиксв.

2. На основании результатов исследования и анализа литературы разработан способ предотвращения нитритной метгемоглобикемии, сущность которого состоит в добавлении в воду препарата "ТРЕСЯА-Г1. Его составные части проникают в организм рыб через яабры и вступают з конкурентные взаимоотношения с нитритами, препятствуя тем самым их реакции с гемоглобином.

3. Разработанный препарат имеет следующие свойства:

- широкий диапазон действующих концентраций (4—4000 иг/л);

- высоко эффективен в малых концентрациях;

- минимально действующая концентрация зависит от содержания нитритов в воде;

- проявляет способность не только снижать содержание метгемоглобина, но и не допускать его образование при повышении "аонцент-радии нитритов в воде;

- вызывает благоприятные для органивка изменения в обмене-веществ, которые выражаются в активации липогекеза и синтеза белка и повышении знергообеспеченности прироста, что приводит к ускорении темпа роста рыб на 20-40 % при снижении затрат корка на пря-

рост яа 9-20 $;

- способен укеньвать накопление нитритов в организме рыб при пошяения их концентрации в Воде: через 24 ч после его внесения содержание нитритов в плазме крови рыб снижается до уровня контроле.

4. Эффективность действия препарата зависит от физиологического состояния рыб: уровень метгеиоглобйна у ослабленных карпов снижается в меньшей степени, чей у имевшх хорошее физиологическое состояний.

5. Касса не оказывает сунественного влияния на снижение количества метгейоглобина под действием препарата.

6. Восстановление кислородсвяэнваваих свойств гемоглобина у карпов после внесения препарата начинается через 6 ч и происходит постепенно в течение 1-2 дней. К концу первых суток содержание натгемоглобина снижается до уровня, неопасного для кизнк рыб.

7. Испытанна препарата "ТРЕСИА-I" на промышленной установке свидетельствует, что при его использовании в условиях нитритного загрязнения воды эффективность выращивания карпов может быть повы-кена (в навих условиях рост годовиков карпа Бозрос на 4Oí при од-поареыеыиом сняжекш: затрат корна в 1,7-1,8 раза).

практические пщиозшния

На ссковашги проведенных исследований разработан эффективный в простой способ устранения и предотвраиекия нитритной метгемогдо-бянеши у карпов, судность которого состоит во внесении в воду препарата "TFECMA-I". Применение препарата в промышленных рециркуляционных установках при их загрязнении продуктами обмена, в ток числе, нитритами, предупреждает развитие метгемоглобинемии, что способствует повасенис темпа роста карпов при одновременном снижении затрат корма. Двйстзуедая концентрация препарата зависит от есде]шизш нитритов в воде. Бри уровне нитритов 0,5-0,7 кг/л для снмгеяия количества нстгемоглобина достаточно внести 4-6 мг/л препарата. При повышении концентрации ¡»итритов до 1,5 мг/л препарат действует пек егс внесекЕи.яз расчета 10-12 мг/л, а при содержали E-KOj, 2-2,5 мг/л - 50 ит/х. В диапазоне 500-4000 кг/л препарат айфагтивек при ¡всех испытанных концентрациях нитритов (0,52,5 аг/'л i-ЖСц ).

По материала« диссертации опубликованы следувпиэ работы:

1. Родина Т.Е., Коробов З.Н., Щербина М.А., Великий H.H. Динамика образования метгемоглобина в крови карпов при изменении содержания нитритов в воде // Тезисы док». Второго симп. по экологической биохимии рыб.- Ярославль, 1990,- С. 204-206.

2. Щербина М.А., Родина Т.Е. Развитие ыетгемоглобинеиии у перезимовавших карпов при нитратной интоксикации // Методе исследования и использования гидросистем / Тезисы докл. конф.- Рига. 1991.- С. 194-195.

3. Родина Т.Е., Щербина М.А. Развитие нитритной иетгекоглоби-немии у карпов в зависимости от физиологического состояния и массы // Тезисы докл. Второй Всесовзной конф. по рыбохозяйственной токсикологии.- Санкт-Петербург, 1991.-. Т. 2.- С. 120-121.

4. Щербина М.А., Родина Т.Е., Ермаков С.З. Нитритная метгемо-глобинемия у карпов, выращиваемых в индустриальных условиях и возможность ее предотвращения // Экологические аспекты и природоохранные мероприятия при использовании теплых вод с энергетических объектов / Сб. докл. конф.-. Москва, 1992,-? С. I54-I6I.

5. Щербина М.А.. Родина Т.Е. Нитритная метгемоглобинеиия у карпов и'пути ее предотвращения // Тезисы докл. Восьмой науч.конф. по экологической физиологии и биохимии рыб.- Петрозаводск, 1992.-Т. 2,- С. 172-173.

6. Родина Т.Е. Восстановление кислородсвязывающих свойств гемоглобина у карпов при нитритной интоксикации // Тезисы докл. Восьмой науч.конф. по экологической физиологии и биохимии рыб.-Петрозаводск, 1992.- Т. 2— С. 58-59.

7. Великий H.H., Коробов В.Н., Климяшин H. Я., Родина Т.Е., Шербина М.А. Система красной клетки периферической квови карпа в условиях нитритной интоксикации // Тезисы докл. Восьмой науч.конф. по экологической физиологии и биохимии руб.- Петрозаводск, 1992.Т. I,- С. 54-55.

, 8, Щербина М.А., Родина Т.Е., Ермаков C.B. Способ снижения токсичности нитритов для карпов, выращиваемых в индустриальных условиях // йнформ. пакет ВНИЭРХ, серия "Аквакультурз.".- 1992.-Вып. г.г? С. 10-12.

фсрит -€0x90/ß

тнр« юо экз. липкой« к шчатк 15.6.93г. Об^н IP п.д. " Заказ fe JT-

учаегк-«юрм«я»а пэдвграфвиШйШГХ. я. Рвбн.е. дмвтрвбскег* p-ml. '.ммхввсжсй- «б*.